Η χρήση βακτηριοφάγων στην ιατρική. Βακτηριοφάγοι και η πρακτική τους εφαρμογή Βακτηριοφάγοι
Τα παρασκευάσματα φάγων χρησιμοποιούνται για τη θεραπεία και την πρόληψη μολυσματικών ασθενειών, καθώς και στη διάγνωση - για τον προσδιορισμό της ευαισθησίας σε φάγους και του τύπου φάγου για την αναγνώριση μικροοργανισμών. Η δράση των φάγων βασίζεται στην αυστηρή ειδικότητά τους. Το θεραπευτικό και προφυλακτικό αποτέλεσμα των φάγων καθορίζεται από τη λυτική δραστηριότητα του ίδιου του φάγου, καθώς και από την ανοσοποιητική ιδιότητα των συστατικών (αντιγόνων) κατεστραμμένων μικροβιακών κυττάρων σε προϊόντα φαγόλυσης, ειδικά στην περίπτωση επαναλαμβανόμενης χρήσης. Κατά τη λήψη παρασκευασμάτων φάγων, χρησιμοποιούνται αποδεδειγμένα στελέχη φάγων και, κατά συνέπεια, τυπικές καλλιέργειες μικροοργανισμών. Μια βακτηριακή καλλιέργεια σε ένα υγρό θρεπτικό μέσο, το οποίο βρίσκεται στη λογαριθμική φάση της αναπαραγωγής, μολύνεται με ένα μητρικό εναιώρημα φάγου.
Η καλλιέργεια που έχει λυθεί με φάγο (συνήθως την επόμενη ημέρα) διηθείται μέσω βακτηριακών φίλτρων και προστίθεται διάλυμα κινοσόλης ως συντηρητικό στο διήθημα που περιέχει φάγο.
Ολοκληρωμένο προϊόνο φάγος είναι ένα διαυγές υγρό κιτρινωπό χρώμα. Για μεγαλύτερη αποθήκευση, ορισμένοι φάγοι είναι διαθέσιμοι σε ξηρή μορφή (σε δισκία). Στη θεραπεία και την πρόληψη εντερικές λοιμώξειςΟι φάγοι χρησιμοποιούνται ταυτόχρονα με διάλυμα διττανθρακικού νατρίου, καθώς το όξινο περιεχόμενο του στομάχου καταστρέφει τον φάγο. Ο φάγος δεν παραμένει στο σώμα για πολύ (5-7 ημέρες), γι' αυτό συνιστάται η επανεφαρμογή.
που παράγεται στη Σοβιετική Ένωση τα ακόλουθα φάρμακαχρησιμοποιείται για τη θεραπεία και την πρόληψη ασθενειών: τύφο, σαλμοπέλωση, δυσεντερία, κολιφάγος, σταφυλοκοκκικός φάγος και στρεπτόκοκκος. Επί του παρόντος, οι φάγοι χρησιμοποιούνται για θεραπεία και πρόληψη σε συνδυασμό με αντιβιοτικά. Αυτή η εφαρμογή παρέχει περισσότερα αποτελεσματική δράσηγια ανθεκτικά στα αντιβιοτικά βακτήρια.
Οι διαγνωστικοί βακτηριοφάγοι χρησιμοποιούνται ευρέως για την αναγνώριση βακτηρίων που απομονώνονται από έναν ασθενή ή από μολυσμένα περιβαλλοντικά αντικείμενα. Με τη βοήθεια των βακτηριοφάγων, λόγω της υψηλής ειδικότητάς τους, είναι δυνατός ο προσδιορισμός των τύπων βακτηρίων και, με μεγαλύτερη ακρίβεια, των επιμέρους τύπων απομονωμένων βακτηρίων. Η διάγνωση φάγων και ο τύπος φάγου των βακτηρίων του γένους Salmonella, Vibrio και σταφυλόκοκκων έχουν αναπτυχθεί. Ο τύπος φάγου βοηθά στον προσδιορισμό της πηγής μόλυνσης, στη μελέτη των επιδημιολογικών σχέσεων και στη διάκριση μεταξύ σποραδικών και επιδημικών περιπτώσεων ασθενειών.
Η διάγνωση φάγων και ο τύπος φάγου βασίζονται στην αρχή της κοινής καλλιέργειας ενός απομονωμένου μικροοργανισμού με τα αντίστοιχα είδη ή τύπους φάγους. θετικό αποτέλεσμαεξετάζεται η παρουσία μιας καλά έντονης λύσης της μελετημένης καλλιέργειας με τον φάγο του είδους και στη συνέχεια με έναν από τους τυπικούς φάγους.
Βακτηριοφάγοι, εφαρμογή στην ιατρική.
Βακτηριοφάγοι. Εφαρμογή στην ιατρική πράξη.
Οι βακτηριοφάγοι είναι βακτηριακοί ιοί ικανοί να διεισδύσουν ειδικά στα βακτηριακά κύτταρα, να τα αναπαράγουν και να προκαλέσουν λύση.
Βρίσκονται όπου υπάρχουν βακτήρια - στο έδαφος, στο νερό, εντερικό σωλήναπρόσωπο. Όλα είναι εγγενή στον φάγο βιολογικά χαρακτηριστικάπου είναι χαρακτηριστικά των ιών.
Μορφολογία φάγων:
Οι φάγοι διαφέρουν ως προς το σχήμα - νηματώδεις, σφαιρικοί, κυβικοί, φάγοι που έχουν κεφάλι και ουρά (θυμίζει σπερματοζωάριο).
Τα μεγέθη είναι μικρά, μεσαία και μεγάλα.
Οι μεγάλοι φάγοι, που αποτελούνται από ένα κεφάλι και μια ουρά, είναι πιο πολύπλοκοι. Το κεφάλι έχει σχήμα εικοσάεδρου. Το κεφάλι συνδέεται με τη διαδικασία με τη βοήθεια ενός γιακά και μιας ομπρέλας. Μέσα στη διαδικασία υπάρχει μια κούφια κυλινδρική ράβδος που επικοινωνεί με την κεφαλή, από έξω η διαδικασία έχει ένα πρωτεϊνικό περίβλημα ικανό να συστέλλεται, η ουραία απόφυση καταλήγει σε μια εξαγωνική βασική πλάκα με κοντές ακίδες, από την οποία εκτείνονται δομές νηματώδους ινιδίου. Η πλάκα και οι αιχμές περιέχουν λυσοζύμη. Η σκωληκοειδής απόφυση έχει 6 λάχνες, οι οποίες παρέχουν στενή προσκόλληση του φάγου στο βακτηριακό κύτταρο. Μπορεί να υπάρχουν φάγοι με μη συρρικνούμενο περίβλημα, φάγοι με σύντομες διεργασίες, φάγοι με ανάλογο διεργασίας και φάγοι χωρίς διεργασία.
Αντοχή σε φάγους: Οι φάγοι ανέχονται θερμοκρασίες 50-60°C. Αντέχουν στην κατάψυξη, χάνονται σε θερμοκρασία 70 ° C. Δεν επηρεάζονται από δηλητήρια όπως το κυάνιο, το φθόριο, καθώς και το χλωροφόρμιο και η φαινόλη. Οι φάγοι διατηρούνται καλά σε σφραγισμένες αμπούλες, αλλά μπορούν να καταστραφούν με βρασμό, τη δράση των οξέων και την υπεριώδη ακτινοβολία.
Ο μηχανισμός αλληλεπίδρασης των φάγων με ένα μικροβιακό κύτταρο:
Σύμφωνα με την αλληλεπίδραση, διακρίνονται οι λοιμογόνοι και οι εύκρατοι φάγοι.
Μολυσματικοί φάγοι - εισέρχονται στο βακτηριακό κύτταρο, αναπαράγονται και προκαλούν λύση των βακτηρίων.
Υπάρχουν πολλά χαρακτηριστικά για φάγους με διεργασία και συσταλτικό περίβλημα:
Αυτοί οι φάγοι απορροφώνται στην επιφάνεια του βακτηριακού κυττάρου με τη βοήθεια ινιδίων της διαδικασίας παρουσία των αντίστοιχων υποδοχέων. Στη συνέχεια ενεργοποιείται το ένζυμο ATP-ase, το οποίο οδηγεί σε συστολή του περιβλήματος της κερκοφόρου διαδικασίας και στην εισαγωγή μιας κοίλης ράβδου στο κύτταρο. Ένα ένζυμο, η λυσοζύμη, εμπλέκεται στη διαδικασία διάτρησης των κυτταρικών τοιχωμάτων.
Το DNA του φάγου περνά μέσα από το κοίλο στέλεχος του εκβλαστήματος και εγχέεται στο κύτταρο. Το καψίδιο και η διεργασία παραμένουν στην επιφάνεια του κυττάρου. Στη συνέχεια, η πρωτεΐνη φάγου και το νουκλεϊκό οξύ αναπαράγονται μέσα στο κύτταρο. Επόμενο στάδιοσυνίσταται στη συναρμολόγηση και σχηματισμό ώριμων σωματιδίων φάγου. Τελικό στάδιο: κυτταρική λύση και απελευθέρωση σωματιδίων ώριμων φάγων από αυτό. Η λύση μπορεί να λάβει χώρα τόσο από το εσωτερικό - υπάρχει ρήξη του κυτταρικού τοιχώματος και απελευθέρωση ώριμων φάγων σε εξωτερικό περιβάλλονκαι από έξω - οι φάγοι κάνουν πολλές τρύπες στο κυτταρικό τοίχωμα μέσω των οποίων ρέει το περιεχόμενο του κυττάρου· με τέτοια λύση, ο φάγος δεν πολλαπλασιάζεται.
Εύκρατοι φάγοι - μην λύουν όλα τα κύτταρα του πληθυσμού, εισέρχονται σε συμβίωση με ορισμένα από τα κύτταρα, με αποτέλεσμα το DNA του φάγου να ενσωματώνεται στο κυτταρικό χρωμόσωμα. Σε αυτή την περίπτωση, το γονιδίωμα του φάγου ονομάζεται προφάγος.
Ο προφάγος γίνεται μέρος του κυτταρικού χρωμοσώματος και κατά την αναπαραγωγή του αντιγράφεται ταυτόχρονα με το γονιδίωμα του κυττάρου χωρίς να προκαλεί τη λύση του και μεταδίδεται στους απογόνους.
Το φαινόμενο της συμβίωσης ενός μικροβιακού κυττάρου με έναν προφάγο ονομάζεται λυσογένεση.
Και η καλλιέργεια βακτηρίων που περιέχουν προφάγο είναι λυσογόνος, αυτό το όνομα αντικατοπτρίζει την ικανότητα του προφάγου να αυθόρμητα ή υπό την επίδραση παραγόντων περιβάλλονκινούνται στο κυτταρόπλασμα και συμπεριφέρονται σαν λοιμογόνοι φάγοι που λύουν βακτήρια. Κατά τη μετάβαση σε μια μολυσματική μορφή, ένας εύκρατος φάγος μπορεί να συλλάβει ένα μέρος του χρωμοσώματος ενός βακτηριακού κυττάρου και, κατά τη λύση, να μεταφερθεί σε άλλο.
Σύμφωνα με το φάσμα δράσης, οι φάγοι χωρίζονται σε:
1. Πολυσθενή βακτήρια που σχετίζονται με τη λύση (Ο φάγος της Salmonella λύει μόνο τη Salmonella).
2. Είδη (μονοφάγοι) - λύουν βακτήρια μόνο ενός είδους.
3. Ειδικά για τον τύπο - λύστε επιλεκτικά μεμονωμένες παραλλαγές βακτηρίων σε ένα είδος (παθογόνος Staphylococcus aureus - 33 σετ).
Πρακτική χρήση:
Τα σκευάσματα φάγων χρησιμοποιούνται για τη θεραπεία και την πρόληψη των λοιμώξεων και τη διάγνωσή τους. Η δράση των φάγων βασίζεται στην αυστηρή ειδικότητά τους· στελέχη παραγωγής και αντίστοιχες βακτηριακές καλλιέργειες χρησιμοποιούνται για τη λήψη ενός παρασκευάσματος φάγου.
Μορφές απελευθέρωσης: υγρό, ξηρό, με τη μορφή δισκίων, αερολυμάτων, υπόθετων. Εισάγεται στον οργανισμό παρεντερικά, εντερικά και τοπικά. Χρησιμοποιείται για θεραπευτικούς και προφυλακτικούς σκοπούς διάφορες ασθένειες(δυσεντερία, χολέρα, διάφορα πυώδη-φλεγμονώδη νοσήματα).
Διαγνωστικά φάγων: η αρχή της διάγνωσης βασίζεται στην από κοινού καλλιέργεια δοκιμαστικών καλλιεργειών με γνωστούς και άγνωστους φάγους, θετικό αποτέλεσμα θεωρείται παρουσία λύσης βακτηριακών κυττάρων. Η λύση μπορεί να παρατηρηθεί σε υγρό και στερεό θρεπτικά μέσα. Σε υγρά θρεπτικά μέσα, εμφανίζεται διαύγαση του βακτηριακού εναιωρήματος και σε πυκνά, σχηματίζονται περιοχές έλλειψης ανάπτυξης.
Τυποποίηση φάγου: προσδιορισμός της παραλλαγής τύπου ενός είδους χρησιμοποιώντας ένα σύνολο τύπων φάγων. Παράγονται τυφοειδής φάγοι, φάγοι διάγνωσης χολέρας, φάγοι σαλμονέλας και δυσεντερικοί φάγοι. Ο τύπος φάγου είναι απαραίτητος κατά τη διεξαγωγή επιδημιολογικής ανάλυσης της νόσου και προκειμένου να καθοριστεί η πηγή και οι οδοί μετάδοσης. Με την ανίχνευση ενός φάγου κρίνεται η περιεκτικότητα των αντίστοιχων μικροοργανισμών.
Λόγω της καταστροφικής (λυτικής) επίδρασής τους στα βακτήρια, οι φάγοι μπορούν να χρησιμοποιηθούν για θεραπευτικούς και προφυλακτικούς σκοπούς σε διάφορες ασθένειες (δυσεντερία, χολέρα, διάφορες πυοφλεγμονώδεις ασθένειες κ.λπ.). Σύνολα τυπικών φάγων, συμπεριλαμβανομένων των διεθνών, χρησιμοποιούνται για τον τύπο φάγου παθογόνων ενός αριθμού ασθενειών (χολέρα, τυφοειδής πυρετός, σαλμονέλωση, διφθερίτιδα, σταφυλοκοκκικές και άλλες ασθένειες). Οι βακτηριοφάγοι χρησιμοποιούνται επίσης σε γενετική μηχανικήΩς φορείς που μεταφέρουν τμήματα DNA, είναι επίσης δυνατή η φυσική μεταφορά γονιδίων μεταξύ βακτηρίων μέσω ορισμένων φάγων (μετααγωγή). Κατά κανόνα, σε τέτοιους ασθενείς συνταγογραφούνται αντιβιοτικά. Αλλά λόγω του γεγονότος ότι τα συνεχώς μεταλλαγμένα βακτήρια αποκτούν αντοχή στα αντιβιοτικά, η αποτελεσματικότητά τους είναι τα τελευταία χρόνιαεξασθενημένος. Την προσοχή των ερευνητών τράβηξαν οι βακτηριοφάγοι - ιοί που καταβροχθίζουν τα βακτήρια. Σε αντίθεση με τα αντιβιοτικά, τα οποία καταστρέφουν τόσο τα επιβλαβή όσο και υγιής μικροχλωρίδαοργανισμός, οι βακτηριοφάγοι είναι επιλεκτικοί, μόνο παθογόνα βακτήρια. Πώς λειτουργούν οι βακτηριοφάγοι στο σώμα; Διαπερνούν μόνο ορισμένα κύτταρα και αλληλεπιδρούν με το DNA τους, δημιουργώντας ένα λυσογονικό ή λυτικό αποτέλεσμα. Δρώντας σε μικρόβια λυτικού τύπου, οι βακτηριοφάγοι τα καταστρέφουν, γεγονός που τους επιτρέπει να πολλαπλασιάζονται γρήγορα. Ο λυσογόνος τύπος είναι η διείσδυση του γονιδιώματος του φάγου στο βακτηριακό γονιδίωμα, η σύνθεσή τους και η περαιτέρω μετάβαση από τη μια γενιά στην άλλη. Οι πληροφορίες για τους βακτηριοφάγους εμφανίστηκαν πριν από περισσότερο από έναν αιώνα, όταν χρησιμοποιήθηκαν για τη θεραπεία του σταφυλόκοκκου χρυσίζονα. Επί του παρόντος, χρησιμοποιούνται ευρέως για την πρόληψη και τη θεραπεία εντερικών, σταφυλοκοκκικών, στρεπτόκοκκων, τυφοειδών και πολλών άλλων λοιμώξεων. σύγχρονη ιατρικήαναζητά μεθόδους που δεν χρησιμοποιούν ζωντανούς βακτηριοφάγους, αλλά ένζυμα που δρουν στα παθογόνα βακτήρια κάνοντας λύση. Η εφαρμογή τους μπορεί να είναι με τη μορφή ρινικού ή στοματικού σπρέι, οδοντόκρεμας, τροφίμων, πρόσθετα τροφίμων. Η αποτελεσματικότητα της χρήσης βακτηριοφάγων συνίσταται στην απουσία αντενδείξεων και επιπλοκών, συμβατότητα με άλλα φάρμακα, ενεργητική επιρροήγια ανθεκτικά στα αντιβιοτικά μικρόβια. Λόγω αυτών των ιδιοτήτων, οι βακτηριοφάγοι αξιολογούνται ως τα φάρμακα του μέλλοντος για επιτυχημένος αγώναςμε λοιμώξεις.
Τα σημαντικότερα πλεονεκτήματα της φαγοθεραπείας είναι υψηλή ευαισθησίαπαθογόνος μικροχλωρίδα σε βακτηριοφάγους, δυνατότητα αρχικής χρήσης μικρών δόσεων βακτηριοφάγου, συμβατότητα με όλους τους τύπους παραδοσιακής θεραπείας με αντιβιοτικά, απουσία αντενδείξεων για προφύλαξη από φάγους και θεραπεία φάγου. Έχει διαπιστωθεί ότι στη φύση δεν υπάρχουν μικροοργανισμοί που να είναι απολύτως ανθεκτικοί στους βακτηριοφάγους. Είναι σημαντικό η αναπαραγωγή του βακτηριοφάγου να είναι δυνατή μόνο με την παρουσία βακτηρίων ευαίσθητων σε αυτόν. Μετά το θάνατο του τελευταίου μικροβιακού κυττάρου στο επίκεντρο μιας μολυσματικής βλάβης, το σταματά έντονη δραστηριότητακαι αποβάλλεται πλήρως από τον οργανισμό.
Λόγω της παρατηρούμενης μείωσης θεραπευτικό αποτέλεσμαχρησιμοποιούνται αντιβιοτικά σκευάσματα βακτηριοφάγων κλινική εξάσκησηως εναλλακτική λύση στα αντιβιοτικά και σε συνδυασμό με τα τελευταία. Τα σκευάσματα βακτηριοφάγου δεν είναι κατώτερα από τα αντιβακτηριακά σκευάσματα ως προς την αποτελεσματικότητα, διεγείρουν τοπικούς παράγοντες ειδικών και μη ειδική ανοσίακαι δεν προκαλούν πλευρικές τοξικές και αλλεργικές αντιδράσεις. Οι βακτηριοφάγοι χορηγούνται από το στόμα και χρησιμοποιούνται επίσης για άρδευση τραυμάτων, για ένεση σε αποστραγγισμένες κοιλότητες - κοιλιακή, υπεζωκοτική, κόλπων, μέσο αυτί, αποστήματα, πληγές, μήτρα, ουροδόχο κύστη. Με εφαρμογή από το στόμα και αεροζόλ, καθώς και όταν εφαρμόζονται στην επιφάνεια των βλεννογόνων, οι βακτηριοφάγοι διεισδύουν στο αίμα και τη λέμφο και απεκκρίνονται μέσω των νεφρών, απολυμαίνοντας το ουροποιητικό σύστημα.
Επί του παρόντος, το ενδιαφέρον για τη θεραπεία με φάγο έχει ανανεωθεί στη χειρουργική, την ουρολογία, την οφθαλμολογία και την τραυματολογία.
Τα θεραπευτικά και προφυλακτικά σκευάσματα βακτηριοφάγων αποτελούνται από πολυκλωνικούς λοιμογόνους βακτηριοφάγους με ευρύ φάσμα δράσης, οι οποίοι είναι επίσης ενεργοί έναντι βακτηρίων ανθεκτικών στα αντιβιοτικά. Παράγονται σε υγρή μορφή, σε δισκία με επίστρωση ανθεκτική στα οξέα, σε μορφή υπόθετων, αλοιφών, λιπαντικών.
Τα παρασκευάσματα βακτηριοφάγων είναι ένα στείρο διήθημα βακτηριακών φαγολυμάτων, χορηγούνται από το στόμα, τοπικά για άρδευση πληγών και βλεννογόνων, εισαγωγή στην κοιλότητα της μήτρας, της ουροδόχου κύστης, του αυτιού, κόλπα παραρρινίων, καθώς και σε αποστραγγιζόμενες κοιλότητες - κοιλιακή, υπεζωκοτική, καθώς και στην κοιλότητα των αποστημάτων μετά την αφαίρεση του εξιδρώματος.
Οι βακτηριοφάγοι είναι σε θέση να διεισδύσουν γρήγορα στο αίμα και τη λέμφο και απεκκρίνονται μέσω των νεφρών με τα ούρα. Όπως φαίνεται στις μελέτες μας, μετά από κατάποση 30 ml βακτηριοφάγου, σωματίδια φάγου βρίσκονται στα ούρα μετά από 2 ώρες και η μέγιστη συγκέντρωσή τους στα ούρα επιτυγχάνεται 6-8 ώρες μετά την κατάποση.
Η δράση των θεραπευτικών και προφυλακτικών βακτηριοφάγων έναντι των παθογόνων πυωδών-σηπτικών και εντερικών ασθενειών είναι αρκετά υψηλή - από 72% έως 90%, συμπεριλαμβανομένων των στελεχών νοσοκομειακής προέλευσης, που χαρακτηρίζονται από πολλαπλή αντίσταση στα αντιβιοτικά. Η συμμόρφωση των σκευασμάτων βακτηριοφάγων με τη σύγχρονη αθιολογική δομή των παθογόνων επιτυγχάνεται με τη συνεχή προσαρμογή τους στα κυκλοφορούντα στελέχη λόγω της ανανέωσης των φυλών φάγων και της παραγωγής βακτηριακών σφραγίδων. Αυτό το χαρακτηριστικό διακρίνει τους φάγους από άλλους αντιμικροβιακά- αντιβιοτικά, ευβιοτικά ή εμβόλια, όπου τα στελέχη παραγωγής ή τα στελέχη παραγωγών ή η συνθετική ουσία δεν υπόκεινται σε καμία τροποποίηση. Αυτή η πλαστικότητα των σκευασμάτων βακτηριοφάγων εξασφαλίζει τη συνέχιση της πρωτογενούς αντίστασης στους φάγους των παθογόνων.
Οφέλη από σκευάσματα βακτηριοφάγου
Τα πλεονεκτήματα των σκευασμάτων βακτηριοφάγου περιλαμβάνουν μια στενή ειδικότητα δράσης, η οποία, σε αντίθεση με τα αντιβιοτικά, δεν προκαλεί αναστολή της φυσιολογικής μικροχλωρίδας. Η διεγερτική δράση του σταφυλοκοκκικού βακτηριοφάγου στα bifidobacteria έχει αποδειχθεί - βασικό συστατικόεντερική μικροβιοκένωση. Χρήση βακτηριοφάγων για θεραπεία μεταδοτικές ασθένειεςδιεγείρει παράγοντες ειδικής και μη ειδικής ανοσίας, η οποία είναι ιδιαίτερα αποτελεσματική για τη θεραπεία της χρόνιας φλεγμονώδεις ασθένειεςστο φόντο των ανοσοκατασταλτικών καταστάσεων, βακτηριοφορέα.
Πειραματική εργασία και μακρά κλινικές παρατηρήσειςέχει αποδειχθεί η αδυναμία μετάδοσης πλασμιδίων ανθεκτικότητας στα αντιβιοτικά και τοξικότητας από θεραπευτικά και προφυλακτικά σκευάσματα βακτηριοφάγων, επειδή είναι πολυκλωνικά σύμπλοκα λοιμωδών βακτηριοφάγων.
Στη Ρωσία, τις χώρες της ΚΑΚ, την Πολωνία, τη Γαλλία, την Ισπανία, οι βακτηριοφάγοι χρησιμοποιούνται ευρέως στην ιατρική και την κτηνιατρική. Συσσωρευμένος μεγάλη εμπειρίαη χρήση βακτηριοφάγων στη θεραπεία εντερικών λοιμώξεων: υψηλή κλινική αποτελεσματικότητα της θεραπείας με φάγο για οξείες και χρόνια δυσεντερία, σαλμονέλωση, συνοδευόμενη από υγιεινή των φορέων. Η υψηλή επιδημιολογική αποτελεσματικότητα της προφυλακτικής χρήσης βακτηριοφάγων δυσεντερίας, τύφου και σαλμονέλας έχει αποδειχθεί Σε ελεγχόμενα επιδημιολογικά πειράματα που πραγματοποιήθηκαν σε προσχολικά ιδρύματα και σε βιομηχανικές επιχειρήσεις, διαπιστώθηκε μείωση του ποσοστού επίπτωσης κατά 3-6 φορές. Η χρήση βακτηριοφάγων έχει δείξει καλά αποτελέσματα στη θεραπεία ασθενειών που προκαλούνται από ευκαιριακά βακτήρια, δυσβακτηρίωσης, πυώδεις βλάβεςδέρμα, ΩΡΛ - όργανα, μυοσκελετικό σύστημα, ουρογεννητικό σύστημα, συστήματα των κυκλοφορικών και αναπνευστικών οργάνων, συμπεριλαμβανομένων των νεογνών και των παιδιών του πρώτου έτους της ζωής.
Μια σημαντική προϋπόθεση που εξασφαλίζει την αποτελεσματικότητα της θεραπείας με παρασκευάσματα φάγου είναι μια ορισμένη ευαισθησία σε φάγους του παθογόνου.
Η μακρά εμπειρία της θεραπείας με φάγο στο Ερευνητικό Ινστιτούτο Ουρολογίας είναι ξεκάθαρη. Ως αποτέλεσμα της προσαρμογής των βακτηριοφάγων του εμπορίου στα νοσοκομειακά στελέχη που κυκλοφορούν στην ουρολογική κλινική του NPO Biofag, η ευαισθησία σε φάγους των στελεχών αυξήθηκε κατά 15% και ήταν στο ή πάνω από το επίπεδο ευαισθησίας στα πιο σύγχρονα ξένα αντιβιοτικά. Στο βάθος μακροχρόνια χρήσηβακτηριοφάγους στο νοσοκομείο μεταξύ νοσοκομειακά στελέχηδεν παρατηρήθηκε σχηματισμός αντοχής σε φάγους, ενώ η αντίσταση στα αντιβιοτικά μειώθηκε. Η κλινική αποτελεσματικότητα της θεραπείας με φάγο παρατηρήθηκε στο 92% των περιπτώσεων, υπερβαίνοντας συχνά τα αποτελέσματα της αντιβιοτικής θεραπείας. Απουσία αντενδείξεων και επιπλοκών στη χρήση σκευασμάτων βακτηριοφάγου, δυνατότητα χρήσης τους σε συνδυασμό με άλλα φάρμακα, συμπεριλαμβανομένων των αντιβιοτικών, της δράσης έναντι στελεχών ανθεκτικών στα αντιβιοτικά και της προσαρμογής των βακτηριοφάγων σε σύγχρονα παθογόνα- όλα αυτά καθιστούν δυνατή την αξιολόγηση των σκευασμάτων βακτηριοφάγου ως ένα εξαιρετικά αποτελεσματικό και πολλά υποσχόμενο μέσο επείγουσας θεραπείας πυωδών-σηπτικών και εντερικών λοιμώξεων. Ωστόσο, οι φάγοι, αυτοί οι «φυσικοί οργανισμοί», μπορούν να χρησιμοποιηθούν όχι μόνο για θεραπεία, αλλά και για την πρόληψη μολυσματικών ασθενειών. Μπορούν να συνταγογραφηθούν σε έγκυες γυναίκες, θηλάζουσες μητέρες και παιδιά οποιασδήποτε ηλικίας, συμπεριλαμβανομένων των πρόωρων μωρών. Βασική προϋπόθεση για την επιτυχή εφαρμογή τους είναι ο έλεγχος της απομονωμένης καλλιέργειας για ευαισθησία στον αντίστοιχο φάγο. Σημειώθηκε ένα εκπληκτικό μοτίβο: σε αντίθεση με τα αντιβιοτικά, η ευαισθησία των κλινικών στελεχών μικροοργανισμών στους βακτηριοφάγους είναι σταθερή και τείνει να αυξάνεται, γεγονός που μπορεί να εξηγηθεί από τον εμπλουτισμό ιατρικά σκευάσματανέες φυλές φάγων. Εκτός από τις ιατρικές εφαρμογές, οι βακτηριοφάγοι χρησιμοποιούνται ευρέως στην κτηνιατρική. ιδιαίτερα αποτελεσματικός σταφυλοκοκκικός βακτηριοφάγος στη θεραπεία της μαστίτιδας στις αγελάδες. Τα παρασκευάσματα βακτηριοφάγου συνταγογραφούνται από το στόμα για ασθένειες εσωτερικά όργαναή τοπικά, απευθείας πάνω στη βλάβη. Η δράση του φάγου εκδηλώνεται ήδη 2-4 ώρες μετά την εισαγωγή του (πράγμα ιδιαίτερα σημαντικό στην εντατική θεραπεία). Οι βακτηριοφάγοι διεισδύουν στο αίμα, τη λέμφο και απεκκρίνονται μέσω των νεφρών, απολυμαίνοντας το ουροποιητικό σύστημα.
Έτσι, οι βακτηριοφάγοι χρησιμοποιούν:
Στην κτηνιατρική για:
πρόληψη και θεραπεία βακτηριακές ασθένειεςπτηνά και ζώα·
θεραπεία πυωδών-φλεγμονωδών ασθενειών των βλεννογόνων των ματιών, της στοματικής κοιλότητας.
πρόληψη πυωδών-φλεγμονωδών επιπλοκών σε εγκαύματα, πληγές, χειρουργικές επεμβάσεις.
Στη γενετική μηχανική:
για μεταγωγή - φυσική μετάδοσηγονίδια μεταξύ βακτηρίων?
ως φορείς που μεταφέρουν τμήματα του DNA.
Χρησιμοποιώντας φάγους, είναι δυνατό να κατασκευαστούν κατευθυνόμενες αλλαγές στο γονιδίωμα του DNA του ξενιστή.
Στη βιομηχανία τροφίμων:
Μαζικής κλίμακας παράγοντες που περιέχουν φάγους επεξεργάζονται ήδη έτοιμα προς κατανάλωση προϊόντα κρέατος και πουλερικών.
Οι βακτηριοφάγοι χρησιμοποιούνται στην παραγωγή τροφίμων από κρέας, πουλερικά, τυριά, φυτικά προϊόντα κ.λπ.
ΕΚ. ZAKHARENKO, Υποψήφιος Ιατρικών Επιστημών, Αναπληρωτής Καθηγητής, Στρατός Ιατρική Ακαδημίατους. ΕΚ. Kirov, Αγία Πετρούπολη
Οι βακτηριοφάγοι είναι μοναδικοί μικροοργανισμοί, με βάση τους οποίους έχει δημιουργηθεί μια ειδική ομάδα θεραπευτικών και προφυλακτικών σκευασμάτων ως προς τις ιδιότητες και τα χαρακτηριστικά τους. Οι υποκείμενες ενέργειές τους είναι φυσικές φυσιολογικούς μηχανισμούςοι αλληλεπιδράσεις μεταξύ φάγων και βακτηρίων καθιστούν δυνατή την πρόβλεψη της άπειρης ποικιλομορφίας και των ίδιων των βακτηριοφάγων και πιθανούς τρόπουςτις εφαρμογές τους. Καθώς οι συλλογές βακτηριοφάγων επεκτείνονται, αναμφίβολα θα εμφανιστούν νέα παθογόνα στόχοι και θα διευρυνθεί το φάσμα των ασθενειών στις οποίες οι φάγοι μπορούν να χρησιμοποιηθούν τόσο ως μονοθεραπεία όσο και ως μέρος σύνθετων θεραπευτικών σχημάτων.
Ναι, χρησιμοποιήστε πολυσθενής πυοβακτηριοφάγοςΤο σεξταφάγο στη θεραπεία της μολυσμένης παγκρεατικής νέκρωσης (Περμ Κρατική Ιατρική Ακαδημία που πήρε το όνομά του από τον Ακαδημαϊκό E.A. Wagner) κατέστησε δυνατή την ταχεία αποκατάσταση των κύριων παραμέτρων της ομοιόστασης και των λειτουργιών οργάνων και συστημάτων στους ασθενείς. Σημαντική μείωση σημειώθηκε και στον αριθμό μετεγχειρητικές επιπλοκέςΚαι θάνατοι: στην ομάδα των ασθενών που υποβλήθηκαν σε θεραπεία με τυπική θεραπεία, η θνησιμότητα ήταν 100%, ενώ στον θίασο που έλαβαν θεραπεία με BF - 16,6%.
Λόγω της αβλαβούς και της αντιδραστικότητας των παρασκευασμάτων BP, είναι δυνατή η χρήση τους σε παιδιατρική πρακτική, συμπεριλαμβανομένων των νεογνών. Η εμπειρία του Περιφερειακού Παιδικού Νίζνι Νόβγκοροντ κλινικό νοσοκομείο, όπου κατά την περίοδο επιπλοκής της επιδημιολογικής κατάστασης, μαζί με τα συνήθη αντιεπιδημικά μέτρα, χρησιμοποιήθηκαν BP - Intesti-bacteriophage και BP Pseucfomonas aeruginosa. Μια 11-πλάσια μείωση στη συχνότητα της νοσοκομειακής λοίμωξης αιτιολογίας Pseudomonas aeruginosa έδειξε υψηλής απόδοσηςΕφαρμογές BF. Τα παρασκευάσματα BF μπορούν να συνταγογραφηθούν τόσο για τη θεραπεία της δυσβακτηρίωσης όσο και για τις διαταραχές πεπτικό σύστημακαι να αποτρέψει τον αποικισμό των βλεννογόνων του γαστρεντερικού σωλήνα από ευκαιριακά βακτήρια. Τα πολυσυστατικά σκευάσματα BF είναι ιδανικά για άμεση ανακούφιση από τα πρώτα σημάδια γαστρεντερικών διαταραχών.
Μέχρι σήμερα, η εταιρεία σχεδιάζει ολόκληρη γραμμήτομείς προτεραιότητας για την ανάπτυξη και παραγωγή θεραπευτικών και προφυλακτικών βακτηριοφάγων, οι οποίοι συσχετίζονται με τις πρόσφατα αναδυόμενες παγκόσμιες τάσεις. Δημιουργούνται και εισάγονται νέα σκευάσματα: Αναπτύχθηκαν BF κατά των οδοντώσεων και των εντεροβακτηρίων, βρίσκονται σε εξέλιξη εργασίες για τη δημιουργία ενός σκευάσματος φάγου κατά του ελικοβακτηριδίου του πυλωρού.
Μόνο ένας κατασκευαστής αυτών των φαρμάκων είναι η NPO Microgen, σύμφωνα με την έκθεση του αναπληρωτή επικεφαλής του τμήματος επιστήμης και καινοτόμος ανάπτυξηΗ Alla Lobastova παράγει περισσότερα από 2 εκατομμύρια πακέτα ετησίως. Δυστυχώς, οι ιδέες πολλών γιατρών για τους βακτηριοφάγους απέχουν πολύ από το να είναι αντικειμενικές. Δεν γνωρίζουν πολλοί ότι οι βακτηριοφάγοι που δραστηριοποιούνται κατά του ίδιου παθογόνου μπορούν να ανήκουν σε διαφορετικές οικογένειες, να έχουν διαφορετικούς κύκλους ζωής κ.λπ. Για παράδειγμα, οι βακτηριοφάγοι P. aeruginosa ανήκουν στις οικογένειες Myoviridae, Podoviridae, Siphoviridae, κύκλος ζωήςή μέτρια. Διαφορετικά στελέχη του ίδιου παθογόνου μπορεί να έχουν διαφορετική ευαισθησία στους βακτηριοφάγους. Οι περισσότεροι ειδικοί γνωρίζουν (άκουσαν, κάποιος χρησιμοποίησε) για την ύπαρξη υγρού και δισκίου φόρμα δοσολογίαςθεραπευτικά και προφυλακτικά σκευάσματα βακτηριοφάγων. Ωστόσο, το εύρος τους είναι πολύ ευρύτερο, γεγονός που μπορεί να αποδοθεί σε άνευ όρων πλεονεκτήματα, ειδικά σε συνδυασμό με ποικίλους τρόπους χορήγησης (από του στόματος χορήγηση, κλύσματα, εφαρμογές, άρδευση τραυμάτων και βλεννογόνων, εισαγωγή στις κοιλότητες του τραύματος κ.λπ.). ΠΡΟΣ ΤΗΝ προφανή οφέληβακτηριοφάγοι αναφέρονται παραδοσιακά συγκεκριμένο αντίκτυποσε έναν μάλλον περιορισμένο πληθυσμό βακτηρίων, περιορισμένη χρονικά ύπαρξη (μέχρι να εξαφανιστεί ο πληθυσμός στόχος των μικροοργανισμών), η απουσία τέτοιων παρενέργειεςως τοξικό και αλλεργικές αντιδράσεις, δυσβιοτικές αντιδράσεις κ.λπ. Αυτά τα φάρμακα μπορούν να χρησιμοποιηθούν σε μια ποικιλία από ηλικιακές ομάδεςκαι κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης. Οι ίδιοι οι βακτηριοφάγοι δεν είναι σημαντικά αλλεργιογόνα. Οι περιπτώσεις δυσανεξίας σε παρασκευάσματα βακτηριοφάγου συνδέονται κυρίως με αντίδραση στα συστατικά του θρεπτικού μέσου. Όλοι οι μεγάλοι κατασκευαστές αυτής της ομάδας φαρμάκων προσπαθούν για τη μέγιστη ποιότητα των συστατικών που χρησιμοποιούνται, γεγονός που μειώνει την πιθανότητα τέτοιων αντιδράσεων. Στο πλαίσιο της αυξανόμενης αντοχής στα αντιβιοτικά, ορισμένοι συγγραφείς προτείνουν την εξέταση των βακτηριοφάγων ως την καλύτερη εναλλακτική λύση στα αντιβιοτικά. Τα θεραπευτικά και προφυλακτικά σκευάσματα βακτηριοφάγων είναι ένα κοκτέιλ από ειδικά επιλεγμένους συνδυασμούς (ένα σύμπλεγμα πολυκλωνικών εξαιρετικά μολυσματικών βακτηριακούς ιούς, ειδικά επιλεγμένο έναντι των πιο κοινών ομάδων παθογόνων βακτηριακές λοιμώξεις) με βάση τις συλλογές φάγων του κατασκευαστή. Υποκαταστήματα της Federal State Unitary Enterprise NPO Microgen στην Ufa, Perm και Νίζνι Νόβγκοροντ – σύγχρονα κέντραπαραγωγή τέτοιων φαρμάκων. Δυνατότητα δημιουργίας προσαρμοσμένων παθογόνους μικροοργανισμούςΤα θεραπευτικά και προφυλακτικά παρασκευάσματα βακτηριοφάγων είναι ένα άλλο σημαντικό πλεονέκτημα αυτής της ομάδας παρασκευασμάτων. Η ανάπτυξη της βακτηριακής αντοχής στα αντιμικροβιακά φάρμακα και η συχνά εμφανιζόμενη πολυαιτιολογία των σύγχρονων λοιμωδών νοσημάτων απαιτούν συνδυασμένη αντιβιοτική θεραπεία (δύο, τρία και μερικές φορές περισσότερα αντιμικροβιακά φάρμακα). Για επιλογή αποτελεσματικό σύστημαθεραπεία με αντιβιοτικά, εκτός από την πραγματική ευαισθησία των βακτηρίων στο φάρμακο, είναι απαραίτητο να ληφθούν υπόψη αρκετά μεγάλος αριθμόςπαράγοντες. Η θεραπεία με φάγο έχει επίσης ορισμένα πλεονεκτήματα από αυτή την άποψη. Από τη μία πλευρά, η χρήση ενός συνδυασμού βακτηριοφάγων δεν συνοδεύεται από την αλληλεπίδρασή τους μεταξύ τους και δεν οδηγεί σε αλλαγή των σχημάτων εφαρμογής τους. Μέσα στο υπάρχον σύνολο θεραπευτικών βακτηριοφάγων, υπάρχει ένας αριθμός καλά αποδεδειγμένων συνδυασμών - βακτηριοφάγος coliproteus, πυοβακτηριοφάγος πολυσθενής, εντερικός-βακτηριοφάγος. Από την άλλη, τα βακτήρια δεν το κάνουν κοινούς μηχανισμούςαντοχή στα αντιβιοτικά και τους φάγους, επομένως, μπορούν να χρησιμοποιηθούν τόσο όταν το παθογόνο είναι ανθεκτικό σε ένα από τα φάρμακα όσο και σε συνδυασμό "αντιβιοτικό + βακτηριοφάγος". Αυτός ο συνδυασμός είναι ιδιαίτερα αποτελεσματικός για την καταστροφή μικροβιακών βιοφίλμ. Το πείραμα το δείχνει πειστικά συνδυασμένη εφαρμογήανταγωνιστές σιδήρου και βακτηριοφάγοι μπορεί να διαταράξουν το σχηματισμό βιοφίλμ Klebsiella pneumoniae. Παράλληλα, σημειώνεται τόσο σημαντική μείωση του αριθμού των μικροβιακών πληθυσμών όσο και μείωση του αριθμού των «νεαρών» κυττάρων. Ενα ακόμα σημαντικό χαρακτηριστικόΗ δράση των βακτηριοφάγων είναι ένα φαινόμενο όπως η πρόκληση απόπτωσης. Ορισμένα στελέχη του E. coli έχουν γονίδια που προκαλούν κυτταρικό θάνατο μετά την εισαγωγή του βακτηριοφάγου Τ4 σε αυτό. Έτσι, ως απόκριση στην έκφραση των όψιμων γονιδίων του φάγου Τ4, το γονίδιο φωτός (κωδικοποιεί μια πρωτεάση που καταστρέφει τον παράγοντα επιμήκυνσης EF-Tu που είναι απαραίτητος για τη σύνθεση πρωτεϊνών) μπλοκάρει τη σύνθεση όλων των κυτταρικών πρωτεϊνών. Το γονίδιο prrC κωδικοποιεί μια νουκλεάση που διασπά το tRNA της λυσίνης. Η νουκλεάση ενεργοποιείται από το προϊόν του γονιδίου stp του φάγου Τ4. Σε κύτταρα μολυσμένα με φάγο Τ4, τα γονίδια rex (που ανήκουν στο γονιδίωμα του φάγου και εκφράζονται σε λυσογόνα κύτταρα) προκαλούν το σχηματισμό διαύλων ιόντων, οδηγώντας σε απώλεια ζωτικών ιόντων από τα κύτταρα και, στη συνέχεια, σε θάνατο. Ο ίδιος ο φάγος Τ4 μπορεί να αποτρέψει τον κυτταρικό θάνατο κλείνοντας τα κανάλια με τις πρωτεΐνες του, προϊόντα των γονιδίων rII. Στην περίπτωση του σχηματισμού βακτηριακής αντοχής σε ένα αντιβιοτικό, πρέπει να αναζητηθούν νέες επιλογές για την τροποποίηση του ενεργού μορίου ή θεμελιωδώς νέων ουσιών. Δυστυχώς, τα τελευταία χρόνια, ο ρυθμός εισαγωγής νέων αντιβιοτικών έχει επιβραδυνθεί σημαντικά. Η κατάσταση με τους βακτηριοφάγους είναι ριζικά διαφορετική. Οι συλλογές μεγάλων κατασκευαστών περιλαμβάνουν δεκάδες έτοιμα στελέχη βακτηριοφάγων και αναπληρώνονται συνεχώς με νέους ενεργούς φάγους. Χάρη στη συνεχή παρακολούθηση της ευαισθησίας των απομονωμένων παθογόνων σε βακτηριοφάγους, οι κατασκευαστές προσαρμόζουν τις συνθέσεις φάγων που παρέχονται στις περιοχές. Χάρη στους προσαρμοσμένους βακτηριοφάγους, είναι δυνατό να εξαλειφθούν τα κρούσματα νοσοκομειακών λοιμώξεων που προκαλούνται από ανθεκτικά στα αντιβιοτικά στελέχη. 
Στο λήψη από το στόμαΟι βακτηριοφάγοι φτάνουν γρήγορα στις εστίες εντοπισμού λοίμωξης: όταν λαμβάνονται από το στόμα από ασθενείς με πυώδεις-φλεγμονώδεις ασθένειες, μετά από μία ώρα, οι φάγοι εισέρχονται στην κυκλοφορία του αίματος, μετά από 1-1,5 ώρες ανιχνεύονται από βρογχοπνευμονικό εξίδρωμα και από την επιφάνεια των εγκαυμάτων, μετά από 2 ώρες - από τα ούρα, καθώς και από το εγκεφαλονωτιαίο υγρό ασθενών με τραυματική εγκεφαλική βλάβη.
Έτσι, οι βακτηριοφάγοι είναι μοναδικοί μικροοργανισμοί, με βάση τους οποίους έχει δημιουργηθεί μια ειδική ομάδα θεραπευτικών και προφυλακτικών σκευασμάτων ως προς τις ιδιότητες και τα χαρακτηριστικά τους. Οι φυσικοί φυσιολογικοί μηχανισμοί αλληλεπίδρασης μεταξύ φάγων και βακτηρίων στους οποίους βασίζεται η δράση τους καθιστούν δυνατή την πρόβλεψη μιας άπειρης ποικιλίας των ίδιων των βακτηριοφάγων και των πιθανών τρόπων χρήσης τους. Καθώς οι συλλογές βακτηριοφάγων επεκτείνονται, αναμφίβολα θα εμφανιστούν νέα παθογόνα στόχοι και θα διευρυνθεί το φάσμα των ασθενειών στις οποίες οι φάγοι μπορούν να χρησιμοποιηθούν τόσο ως μονοθεραπεία όσο και ως μέρος σύνθετων θεραπευτικών σχημάτων. Μια σύγχρονη άποψη για τη μελλοντική μοίρα της φαγοθεραπείας θα πρέπει να βασίζεται τόσο στην υψηλή ειδικότητα της δράσης τους όσο και στην ανάγκη αυστηρής τήρησης όλων των κανόνων της θεραπείας με φάγο. Η αντίθεση βακτηριοφάγων με οποιοδήποτε μέσο ετιοτροπικής θεραπείας είναι εσφαλμένη.
Πρακτική εφαρμογή φάγων. Οι βακτηριοφάγοι χρησιμοποιούνται στην εργαστηριακή διάγνωση λοιμώξεων κατά την ενδοειδική ταυτοποίηση των βακτηρίων, δηλαδή τον προσδιορισμό του φαγοφάγου (τύπος φάγου). Για να γίνει αυτό, χρησιμοποιείται η μέθοδος τυποποίησης φάγου, με βάση την αυστηρή εξειδίκευση της δράσης των φάγων: σταγόνες από διάφορους διαγνωστικούς τύπους φάγους εφαρμόζονται σε ένα κύπελλο με ένα πυκνό θρεπτικό μέσο σπαρμένο με ένα "γκαζόν" καθαρής καλλιέργειας. του παθογόνου. Ο φάγος φάγου ενός βακτηρίου καθορίζεται από τον τύπο του φάγου που προκάλεσε τη λύση του (ο σχηματισμός μιας στείρας κηλίδας, "πλάκας" ή "αρνητικής αποικίας", φάγος). Η τεχνική του τύπου φάγου χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό της πηγής και των τρόπων εξάπλωσης της λοίμωξης (επιδημιολογική σήμανση). Η απομόνωση βακτηρίων του ίδιου fagovar από διαφορετικούς ασθενείς υποδεικνύει μια κοινή πηγή μόλυνσης τους.
Οι φάγοι χρησιμοποιούνται επίσης για τη θεραπεία και την πρόληψη ορισμένων βακτηριακών λοιμώξεων. Παράγουν τύφο, σαλμονέλα, δυσεντερία, ψευδομονάδες, σταφυλοκοκκικούς, στρεπτοκοκκικούς φάγους και συνδυασμένα παρασκευάσματα(κολιπρωτεϊκά, πυοβακτηριοφάγοι κ.λπ.). Οι βακτηριοφάγοι συνταγογραφούνται σύμφωνα με ενδείξεις από το στόμα, παρεντερικά ή τοπικά με τη μορφή υγρών, μορφών δισκίων, υπόθετων ή αερολυμάτων.
Οι βακτηριοφάγοι χρησιμοποιούνται ευρέως στη γενετική μηχανική και τη βιοτεχνολογία ως φορείς για τη λήψη ανασυνδυασμένου DNA.
Τα παρασκευάσματα βακτηριοφάγων που χρησιμοποιούνται στην πράξη είναι ένα διήθημα μιας καλλιέργειας ζωμού των αντίστοιχων μικροβίων που λύθηκαν από έναν φάγο, που περιέχει ζωντανά σωματίδια φάγου, καθώς και διαλυμένα βακτηριακά αντιγόνα που απελευθερώνονται από βακτηριακά κύτταρα κατά τη λύση τους. Το παρασκεύασμα που προκύπτει - ένας υγρός βακτηριοφάγος πρέπει να μοιάζει με εντελώς καθαρό υγρό κίτρινο χρώμαμεγαλύτερη ή μικρότερη ένταση.
Για θεραπευτικούς και προφυλακτικούς σκοπούς, οι φάγοι μπορούν να παραχθούν με τη μορφή δισκίων με επίστρωση ανθεκτική στα οξέα. Ο ξηρός φάγος σε ταμπλέτες είναι πιο σταθερός κατά την αποθήκευση και βολικός στη χρήση. Ένα δισκίο ξηρού βακτηριοφάγου αντιστοιχεί σε 20-25 ml υγρού παρασκευάσματος. Η διάρκεια ζωής του ξηρού και υγρού παρασκευάσματος είναι 1 έτος. Υγρός βακτηριοφάγοςπρέπει να φυλάσσεται σε θερμοκρασία + 2 +10 C, στεγνό - όχι υψηλότερο από +1 ° C, αλλά μπορεί να φυλαχθεί σε ψυγείο και σε αρνητική θερμοκρασία.
Ο βακτηριοφάγος που λαμβάνεται από το στόμα παραμένει στο σώμα για 5-7 ημέρες. Κατά κανόνα, η λήψη βακτηριοφάγου δεν συνοδεύεται από αντιδράσεις ή επιπλοκές. Δεν υπάρχουν αντενδείξεις για εισαγωγή. Χρησιμοποιούνται με τη μορφή αρδεύσεων, ξεβγάλματα, λοσιόν, ταμπόν, ενέσεις και επίσης ενίονται στις κοιλότητες - κοιλιακή, υπεζωκοτική, αρθρική και Κύστη, ανάλογα με τη θέση του παθογόνου.
Οι διαγνωστικοί φάγοι παράγονται τόσο σε υγρή όσο και σε ξηρή μορφή σε αμπούλες.Πριν από την έναρξη της εργασίας, ο ξηρός βακτηριοφάγος αραιώνεται. Εάν ο τίτλος, tr, DRT (δόση τίτλου εργασίας) υποδεικνύεται στις αμπούλες, χρησιμοποιείται στη δοκιμή ικανότητας συρρίκνωσης φάγου (μέθοδος Otto) για τον εντοπισμό βακτηρίων, εάν υποδεικνύεται ο τύπος φάγου, στη συνέχεια για τον τύπο φάγου - για τον προσδιορισμό της πηγής της μόλυνσης.
Η δράση ενός βακτηριοφάγου σε μικροβιακή καλλιέργεια σε υγρό μέσο και σε πυκνό μέσο
Μέθοδος Otto (Πτώση σταγόνας)
Δημιουργήστε ένα πυκνό γκαζόν σποράς της υπό μελέτη καλλιέργειας. 5-10 λεπτά μετά τη σπορά, ένας υγρός διαγνωστικός φάγος εφαρμόζεται στην αποξηραμένη επιφάνεια του θρεπτικού μέσου. Το πιάτο γέρνει ελαφρά έτσι ώστε η σταγόνα του φάγου να εξαπλωθεί στην επιφάνεια του άγαρ. Το κύπελλο τοποθετείται σε θερμοστάτη για 18-24 ώρες. Το αποτέλεσμα υπολογίζεται ολική απουσίαανάπτυξη καλλιέργειας στη θέση εφαρμογής σταγονιδίων φάγου.
Πειραματιστείτε σε ένα υγρό θρεπτικό μέσο
Κάντε σπορά της μελετημένης καλλιέργειας σε δύο δοκιμαστικούς σωλήνες με υγρό μέσο. Ένας διαγνωστικός βακτηριοφάγος προστίθεται σε βρόχο σε έναν δοκιμαστικό σωλήνα ("O"). Μετά από 18-20 ώρες σε δοκιμαστικό σωλήνα όπου δεν προστέθηκε ο βακτηριοφάγος ("K"), παρατηρείται ισχυρή θόλωση του ζωμού - η καλλιέργεια σποράς έχει αναπτυχθεί. Ο ζωμός στον δοκιμαστικό σωλήνα, όπου προστέθηκε ο βακτηριοφάγος, παρέμεινε διαφανής λόγω της λύσης της καλλιέργειας υπό την επιρροή του.
Τυποποίηση φάγων βακτηρίων
Σύμφωνα με το φάσμα δράσης, διακρίνονται οι ακόλουθοι βακτηριοφάγοι: πολυσθενείς τύποι βακτηρίων που σχετίζονται με τη λύση. μονοσθενή βακτήρια λύσης ένα ορισμένο είδος; τυπική λύση μεμονωμένων τύπων (παραλλαγών) βακτηρίων.
Για παράδειγμα, ένα στέλεχος παθογόνου σταφυλόκοκκου μπορεί να λυθεί από διάφορους τύπους φάγων, επομένως όλοι οι τυπικοί φάγοι (24) και τα στελέχη παθογόνοι σταφυλόκοκκοιομαδοποιούνται σε 4 ομάδες.
Η μέθοδος τυποποίησης φάγου έχει μεγάλης σημασίαςγια επιδημιολογική έρευνα, καθώς επιτρέπει τον εντοπισμό της πηγής και των τρόπων εξάπλωσης των παθογόνων. Για το σκοπό αυτό, προσδιορίζεται η φαγόβαρη που απομονώνεται από το παθολογικό υλικό. καθαρό πολιτισμόσε πυκνά θρεπτικά μέσα χρησιμοποιώντας τυπικούς διαγνωστικούς φάγους.
Το fagovar της καλλιέργειας μικροοργανισμών καθορίζεται από τον τύπο του φάγου που προκάλεσε τη λύση του.Η απομόνωση βακτηρίων του ίδιου fagovar από διαφορετικά άτομα υποδεικνύει την πηγή μόλυνσης.
