Diagrama unui screening de rezervor pentru dizenterie. Diagnosticul de laborator al dizenteriei (revizuire a literaturii)

Dizenteria este o infecție intestinală severă, caracterizată printr-un debut acut. Diagnosticul microbiologic dizenteria constă în izolarea agentului patogen de masele fecale ale pacientului prin însămânțare într-un mediu nutritiv special. Boala trebuie diferențiată de alte boli intestinale și otrăviri. Diagnosticul precoce și tratamentul în timp util vor ajuta la evitarea complicațiilor.

Importanța diagnosticării în timp util

Recunoașterea dizenteriei în practică nu este atât de ușoară deoarece există boli infecțioase și neinfecțioase cu manifestări clinice similare. O trăsătură caracteristică a agenților cauzali ai dizenteriei (shigella) este capacitatea de a modifica rezistența la medicamentele antibacteriene. O boală diagnosticată prematur va duce la infecție un numar mare al oamenilor. Folosirea greșită a antibioticelor este motivul apariției rezistenței bacteriilor, care duce la infecții în masă și epidemii cu decese. Sursa de infecție sunt pacienții și purtătorii de bacterii care excretă microorganisme patogene cu materii fecale. Perioadă incubație dizenterie - 2-3 zile.

Simptomele clinice ale bolii

• Febră bruscă cu o temperatură a corpului de 40 de grade sau mai mult.
• Diaree de mai mult de 10 ori pe zi.
• Apariția în scaun a sângelui, mucusului, în cazuri rare puroi.
• Pierderea poftei de mâncare până la absența completă.
• Greață și vărsături.
• Tăiere în abdomen și hipocondrul drept.
• Durere în rect.
• Deshidratare.
• Limbă uscată cu strat alb.
• Aritmie.
• Scăderea tensiunii arteriale.
• Tulburări ale conștiinței.

Proceduri de diagnosticare

Medicul pune diagnosticul de dizenterie numai după cercetările efectuate.

Diagnosticul bolii include metode general acceptate și speciale care stabilesc nu numai diagnostic final, dar și aprecierea nivelului de tulburări ale organelor digestive. În cazul dizenteriei, diagnosticul se face pe baza tabloului epidemiologic al bolii, simptome cliniceși a efectuat cercetări. Principalul diagnostic de laborator este analiza fecalelor pentru microbiologie, semănând până la 80% din agenți patogeni. Metoda serologică se efectuează nu mai devreme de a 5-a zi a bolii, acest tip de studiu completează, dar nu înlocuiește analiza microbiologică. Alte metode:

• Examenul coprologic este o metodă clinică simplă și accesibilă, care detectează mucusul, dungile de sânge, eritrocitele, neutrofilele (până la 50 pe câmp vizual) și celulele epiteliale alterate.
• Sigmoidoscopia - vă permite să monitorizați procesul de vindecare. Nu se aplică copiilor.
• Metoda de testare a alergiilor - metoda ajutorului, bazat pe efectuarea unui test cutanat alergic cu dizenterie (metoda lui Tsuverkalov).

Analize generale de sânge

Celulele imunitare distrug agenții patogeni de dizenterie chiar și în intestine, iar cazurile severe de boală apar atunci când bacteriile intră în ganglionii limfatici, urmate de intrarea în sânge. Un test de sânge pentru dizenterie evaluează starea pacientului și vă permite să răspundeți la timp posibile complicații. O creștere a vitezei de sedimentare a eritrocitelor este un indicator de laborator care caracterizează gradul de inflamație. De asemenea, dizenteria determină o creștere a concentrației de neutrofile și monocite înjunghiate.

Cum să donezi fecale pentru un coprogram?

Pentru a confirma boala, se efectuează un test de scaun. Coprogram - un studiu detaliat de laborator care evaluează activitatea tractului gastrointestinal, viteza și eficiența digestiei și funcția intestinală. Metodele de laborator pentru examinarea fecalelor relevă fizice și Proprietăți chimice fecale, compoziție, prezența organismelor străine și incluziuni. Cerințe pentru colectarea scaunului:

• Materialul este luat după actul natural de defecare.
• Colectarea se face într-un recipient special.
• Este interzisă luarea de material biologic obținut în urma unei clisme pentru examinarea fecalelor pentru dizenterie.
• Înainte de studiu, este interzisă utilizarea preparatelor de fier, punerea supozitoarelor rectale, laxativele și băuturile alcoolice.

Diagnosticul microbiologic

Semănatul în rezervor pentru dizenterie determină cu exactitate tipul de agent patogen.

Diagnosticare bacteriologică - colectarea materiilor fecale și însămânțarea ulterioară a fecalelor într-un mediu nutritiv special. Apariția coloniilor de bacterii patogene (shigella) după însămânțare confirmă diagnosticul propus. Analiza bacteriologică pentru dizenteria determină cu exactitate agentul patogen, tipul său, subspecia și susceptibilitatea la agenți antibacterieni, ceea ce vă permite să alegeți medicamentul potrivit pentru tratament.

Materialul investigat - fecale cu impurități străine obținute natural sau un tub special pentru sigmoidoscopie. La copii, se ia un tampon cu un tampon special (un tampon pentru VD sau un tampon pentru grupul intestinal). Stabiliți sensibilitatea la medicamente prin plasarea coloniilor de Shigella împreună cu diferite antibiotice. Dacă activitatea vitală a microorganismelor continuă în apropierea tabletei cu antibiotice, atunci medicamentul nu este utilizat pentru tratament, dacă microorganismele mor, este prescris tratamentul cu un astfel de antibiotic.

Teste serologice pentru dizenterie

În cazul rezultatelor negative sau îndoielnice ale examenului bacteriologic, se utilizează o metodă serologică. ÎN scaun pacientul este detectat de un antigen bacterian, iar în plasmă - anticorpi specifici. Pentru a stabili titrul de anticorpi, puteți utiliza metoda RIGA, uneori - RPHA sau RA. O suspensie dintr-o colonie zilnică de shegella este utilizată ca antigene. Minus metoda - rezultate de încredere se primesc la numai 5 zile de la debutul bolii, când concentrația de anticorpi atinge nivelul dorit.

Sigmoidoscopie

Datorită faptului că agentul cauzal al dizenteriei afectează intestinul gros, sigmoidoscopia este o metodă de diagnosticare semnificativă, dar nu una determinantă. Diagnosticul constă în introducerea în anus a unui rectoscop echipat cu un dispozitiv de alimentare cu aer. Umflarea, cavitatea intestinală devine disponibilă pentru cercetare. Această metodă ajută la evaluarea gradului de deteriorare a epiteliului intestinal. În cazul dizenteriei, pereții intestinali sunt hiperemici ca urmare a vasodilatației. Pe unele segmente se formează eroziuni și hemoragii. Sigmoidoscopia nu necesită pregătire, dar procedura nu se efectuează dacă există fisuri anale sau patologii ale anusului.

Instrucțiuni metodologice pentru elevi pentru lecția practică nr.28.

Tema lecției:

Ţintă: Studiul metodelor de diagnostic microbiologic, terapie etiotropă și prevenirea shigelozei.

Modulul 2 . Microbiologie specială, clinică și ecologică.

Subiectul 5: Metode de diagnostic microbiologic al dizenteriei.

Relevanța subiectului:Shigeloza este omniprezentă și este problema serioasaîn ţările cu un nivel cultural sanitar scăzut şi o incidenţă mare a malnutriţiei şi alimentaţiei deficitare. În țările în curs de dezvoltare, răspândirea infecției este favorizată de igiena precară, igiena personală precară, supraaglomerare și o proporție mare de copii în populație. În Ucraina, focarele de shigeloză sunt mai frecvente în comunitățile închise cu salubritate și igienă precară, precum creșe și grădinițe, bărci turistice, clinici psihiatrice sau adăposturi pentru persoane cu dizabilități. Shigella a fost cauza diareei călătorilor și turiștilor.

Cauza bolilor de grup poate fi considerată utilizarea produselor alimentare contaminate de neglijența lucrătorilor din comerț care sunt purtători de shigella. Există focare asociate cu utilizarea apei potabile, iar înotul în rezervoare poluate a dus, de asemenea, la infecție. Cu toate acestea, căile alimentare și de apă de transmitere par să joace un rol mai mic în răspândirea shigelozei în comparație cu holera și febra tifoidă, în care sunt de obicei necesare doze mari de agenți patogeni pentru a infecta o persoană. În țările în curs de dezvoltare, unde răspândirea bolii este predominant de la persoană la persoană, purtătorii pot fi un rezervor important al agentului infecțios. La pacienții care nu au luat medicamente antibacteriene, eliminarea Shigella în fecale durează de obicei 14 săptămâni, dar într-o proporție mică de cazuri durează mult mai mult.

Shigeloza este o infecție bacteriană acută a intestinului cauzată de unul dintre cele patru tipuri de Shigella. Spectrul formelor clinice de infecție variază de la diaree ușoară, apoasă, până la dizenterie severă, caracterizată prin crampe abdominale, tenesmus, febră și semne de intoxicație generală.

Etiologie.

Genul Shigella (numit după K. Shiga, care în 1898 a studiat în detaliu și a descris agentul cauzal izolat al dizenteriei bacteriene de către A.V. Grigoriev) din familia Enterobacteriaceae este format dintr-un grup de specii bacteriene strâns înrudite, cu următoarele proprietăți:

eu. Morfologic: shigella - bastoane mici cu capete rotunjite. Ele diferă de alți reprezentanți ai familiei Enterobacteriaceae prin absența flagelilor (nemotile), nu au spori și capsule și sunt gram-negative.

II. Cultural: shigella sunt aerobe sau anaerobe facultative; conditii optime temperatura de cultivare 37°C, pH 7,2-7,4. Ele cresc pe medii nutritive simple (MPA, MPB) sub formă de colonii mici, strălucitoare, translucide, cenușii, rotunde, cu dimensiunea de 1,52 mm. S formă. Excepție este Shigella Sonne, care adesea se disociază, formând colonii mari, plate, tulburi, cu margini zimțate. R forme (coloniile arată ca o „frunză de strugure”). În mediile nutritive lichide, Shigella oferă o turbiditate uniformă, R formele formează un precipitat. Mediul lichid de îmbogățire este bulionul selenit.

III. Enzimatic: principalele caracteristici biochimice necesare pentru identificarea shigella în izolarea unei culturi pure sunt următoarele:

1. lipsa formării gazelor în timpul fermentației glucozei;
2. nu produce hidrogen sulfurat;
3. fără fermentare a lactozei în 48 de ore.

În total, cele patru specii sunt subdivizate în aproximativ 40 de serotipuri. După caracteristicile principalelor antigene somatice (O) și proprietățile biochimice, se disting următoarele patru specii sau grupuri: S. dysenteriae (grupa A, include: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri (grupa B), S. boydii (Grupa C) și S. sonnei (Grupa D).

În ceea ce privește manitol, toate shigella sunt împărțite în manitol de scindare (Flexner, Boyd, Sonne shigella) și nedivizare (Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs shigella).

IV. Factori patogeni:

1. Invazia plasmideloroferă capacitatea shigella de a provoca invazie cu răspândire intercelulară și reproducere ulterioară în epiteliul mucoasei colonului;
2. formarea de toxine: Shigella are endotoxină lipopolizaharidă, care este similară din punct de vedere chimic și biochimic cu endotoxinele altor membri ai familiei Enterobacteriaceae. În plus, S. dysenteriae tip I (bacilul lui Shiga) produce o exotoxină. De la descoperirea acestuia din urmă, s-a stabilit că are activitate de enterotoxină și poate provoca secreție intestinală, precum și efect citotoxic asupra celulelor epiteliale intestinale; are un efect neurotoxic, care se observă la copiii cu shigeloză. Toxina Shiga, care pătrunde în sânge, împreună cu deteriorarea endoteliului submucos, afectează și glomerulii rinichilor, drept urmare, pe lângă diareea sângeroasă, sindromul hemolitic uremic se dezvoltă odată cu dezvoltarea insuficienței renale.

V. Structura antigenică:Toate Shigella au un O-antigen somatic, în funcție de structura căreia sunt împărțite în serovare.

VI. Rezistenţă: Temperatura 100 0 C ucide Shigella instantaneu. Shigella este rezistentă la temperaturi scăzute în apa râului se păstrează până la 3 luni, pe legume și fructe - până la 15 luni.În condiții favorabile, Shigella se poate reproduce în Produse alimentare(salate, vinegrete, carne fiartă, carne tocată, pește fiert, lapte și produse lactate, compoturi și jeleu), în special Shigella Sonne.

Epidemiologie.

1. Sursa de infectare:O persoană care suferă de forme acute și cronice de shigeloză; bacteriopurtător.

2. Modalitati de transmitere:

• Mâncare (în principal pentru S. sonnei)
• Acvatic (în principal pentru S. flexneri)
• Contactați gospodăria (în principal pentru S. dysenteriae)

3. poartă de intrare infecția deservește tractul gastrointestinal.

Patogeneza si modificări patologice.

După ingerare, Shigella colonizează regiunile superioare intestinul subtireși se înmulțesc acolo, provocând posibil secreție crescută pe stadiu timpuriu infectii. Shigella pătrunde apoi prin celulele M în submucoasă, unde sunt înghițite de macrofage. Acest lucru duce la moartea unora dintre shigella, ducând la eliberarea de mediatori inflamatori, care inițiază inflamația în submucoasa. Apoptoza fagocitelor permite unei alte părți a Shigella să supraviețuiască și să pătrundă în celulele epiteliale ale mucoasei prin membrana bazală. În interiorul enterocitelor, shigella se reproduc și se răspândește intercelular, rezultând în dezvoltarea eroziunilor. Când shigella moare, shiga și toxine asemănătoare shiga sunt eliberate, a căror acțiune duce la intoxicație. Înfrângerea membranei mucoase este însoțită de umflături, necroză și hemoragie, care provoacă apariția sângelui în scaun. În plus, toxina afectează sistemul nervos central, ceea ce duce la tulburări trofice.

Manifestari clinice.

Spectrul de manifestări clinice ale shigelozei este foarte larg de la diaree ușoară până la dizenterie severă cu crampe, dureri abdominale, tenesmus, febră și intoxicație generală.

Perioadă incubațievariază de la câteva ore până la 7 zile, cel mai adesea este de 2-3 zile.Inițial, pacienții au scaun apos, febră (până la 41 ° C), durere difuză în abdomen, greață și vărsături. Pe lângă aceasta, pacienții se plâng de mialgie, frisoane, dureri de spate și cefalee. În zilele următoare de la debutul bolii apar semne de dizenterie - tenesme, scaune frecvente, rare, sângeroase-mucoase. Temperatura corpului scade treptat, durerea poate fi localizată în cadranele inferioare burtă. Intensitatea diareei atinge un maxim în jurul sfârșitului primei săptămâni de boală. Dizenteria cu scaune cu sânge este mai frecventă și apare mai devreme în boala cauzată de S. dysenteriae tip I decât în ​​alte forme de shigeloză.

Pentru Shigellosis Sonne este caracteristică o evoluție mai blândă a bolii (varianta gastroenterică sau gastroenterocolitică). Perioada febrilă este mai scurtă, efectele intoxicației sunt de scurtă durată, iar modificările distructive ale mucoasei intestinale nu sunt tipice.

Shigellosis FlexnerPractic, sunt caracteristice două variante ale cursului clinic - gastroenterocolitic și colita.

Complicații extraintestinale în shigelozărar:

1. O complicație a shigelozei poate fi dezvoltarea disbacteriozei intestinale.
2. Alături de durerile de cap, pot apărea semne de meningită și convulsii.
3. Cazuri de neuropatie periferică au fost descrise în infecția cu S. dysenteriae tip I, iar cazuri de sindrom Guillain-Barré (polinevrite) au fost raportate în timpul unui focar de gastroenterită cu S. boydii.
4. Cu excepția copiilor care suferă de distrofie, diseminarea hematogenă a agentului patogen este relativ rară și au fost descrise și cazuri de abcese de shigeloză și meningită.
5. Cu shigeloza, este posibilă dezvoltarea sindromului Reiter cu artrită, conjunctivită sterilă și uretrita, aceasta apare de obicei după 1-4 săptămâni de la debutul diareei la pacienți.
6. La copii, shigeloza este însoțită de un sindrom hemolitic uremic, adesea asociat cu reacții asemănătoare leucemiei, colită severă și endotoxină circulantă, dar bacteriemia nu este de obicei detectată.
7. Foarte rar, keratoconjunctivita purulentă este cauzată de shigella care a intrat în ochi ca urmare a autoinfectării cu degetele contaminate.
8. Șoc hipovolemic și DIC.
9. Peritonita, cangrena intestinala, sangerari intestinale.

Imunitate: Oamenii au o rezistență naturală la shigeloză. După boală trecută imunitatea nu este stabilă, iar după shigeloză Sonne este practic absent. Cu o boală cauzată de Shigella Grigoriev Shigi, se dezvoltă o imunitate antitoxică mai stabilă. Rolul principal în protecția împotriva infecțiilor îi revine secretorului IgA , prevenirea aderenței și a activității dependente de anticorpi citotoxici a limfocitelor intraepiteliale, care, împreună cu secretorii IgA ucide Shigella.

Diagnosticare și cercetări de laborator.

Scopul studiului: detectarea și identificarea shigella pentru diagnostic; detectarea purtătorilor de bacterii; detectarea Shigella în alimente.

Material de cercetare: excremente, material secţional, alimente.

Metode de diagnostic:microbiologic (bacteriologic, microscopic (luminiscent); serologic; biologic; test de alergie.

Progresul cercetării:

1 zi de studiu:Culturile trebuie făcute din fecale proaspăt excretate sau folosind tampoane rectale (tub rectal); in lipsa conditiilor adecvate, materialul trebuie plasat intr-un mediu de transport. Pentru aceasta, ar trebui să se folosească agar enteric (mediu MacConkey sau Shigella-Salmonella), agar xiloză-lizină-deoxicolat moderat selectiv, KLD) și bulion nutritiv (bulion selenit). Dacă timpul dintre colectare și inoculare depășește 2 ore, atunci trebuie utilizate soluții de conservare: bulion de bilă 20%, mediu Kauffmann combinat.

• Excrementele din amestecul de glicerină sunt emulsionate, o picătură de emulsie se aplică pe mediu și se freacă cu o spatulă. Mediile diferențiale pentru Shigella sunt mediile Ploskirev, Endo și EMS (agar albastru eosinmetilen). Mediul lui Ploskirev (compoziția mediului include: MPA, lactoză, săruri biliare și indicatorul verde strălucitor) este, de asemenea, un mediu electiv pentru shigella, deoarece. inhibă creșterea Escherichia coli.
• În paralel cu însămânțarea directă, materialul colectat se seamănă pe mediul de îmbogățire - bulion selenit.
• Toate culturile sunt plasate într-un termostat.

Ziua 2 a studiului:

• Cupele sunt îndepărtate de pe termostat, coloniile suspecte sunt testate pe mediu Ressel (mediu nutritiv care include: agar-agar, indicator Andrede, 1% lactoză, 0,1% glucoză) și manitol. Semănatul se face prin mișcări pe o suprafață înclinată și o injecție într-o coloană de agar. Mediul Ressel inoculat se pune într-un termostat timp de 18-24 ore (în paralel se face reînsămânțarea din mediul selenit în mediul de diagnostic diferențial).
• Faceți frotiuri (colorație Gram), microscop.
• Pregătiți preparatele „atârnate” sau „zdrobite” picătură.
• Declarație de RA indicativ cu ser de diagnostic polivalent de shigeloză.
• Semănatul de colonii suspecte pe agar agar.

Ziua 3 a studiului:

• Microscopia materialului înclinat de agar.
• Culturile care nu au fermentat lactoza pe mediu Ressel sunt supuse unui studiu suplimentar: se fac frotiuri (colorație Gram), se verifică puritatea culturii. În prezența bastonașelor gram-negative, inocularea se efectuează pe medii Hiss, bulion cu hârtie indicatoare (pentru a detecta indol și hidrogen sulfurat) și lapte de turnesol.
• Mediile inoculate sunt plasate într-un termostat timp de 18-24 ore.

Ziua 4 a studiului:

• Reprezentând o scurtă „serie pestriță”.
• Culturile suspecte pentru proprietățile lor enzimatice și culturale împotriva Shigella sunt supuse identificării serologice. Declarație de RA pe sticlă (seruri de diagnostic tipice și de grup). Configurarea RA desfășurată.

Ca metode accelerate pentru shigeloză, aplicațimicroscopie cu fluorescențăȘi proba biologica(introducerea tulpinilor virulente de Shigella în sacul conjunctival (sub pleoapa inferioară) al cobaiului se dezvoltă conjunctivita la sfârșitul primei zile).

Test alergic Zuverkalovtest alergic intradermic cu dizenterie (introducerea a 0,1 ml dizenterie in antebrat reactie pozitiva in caz de infiltratie si hiperemie). Diagnosticul alergologic nu este practic utilizat în prezent. Testul lui Tsurvekalov nu diferă în specificitate, reacțiile pozitive sunt înregistrate nu numai în shigeloză, ci și în salmoneloză, escherichioză, yersinioză și alte infecții intestinale acute și, uneori, la indivizi sănătoși.

Tratament și prevenire.Bacteriofagul este utilizat pentru tratament și prevenire conform indicațiilor epidemiologice. administrare orală, antibiotice după determinarea antibiogramei; în cazul disbacteriozei preparate de probiotice pentru corectarea microflorei. Pentru a reumple pierderea de fluide și electroliți - introducerea unei soluții de glucoză-electroliți în interior.

Obiective specifice:

Interpretați proprietățile biologice ale agenților patogeni ai shigelozei.

Familiarizați-vă cu clasificarea Shigella.

Învață să interpretezi tiparele patogenetice ale procesului infecțios cauzat de shigella.

Pentru a determina metodele de diagnostic microbiologic, terapia etiotropă și prevenirea shigelozei.

A fi capabil să:

• Inoculați materialul de testat pe medii nutritive.
  • Pregătiți frotiuri și colorație Gram.
  • Efectuați microscopia preparatelor folosind un microscop cu imersie.
  • Analizați caracteristicile morfologice, culturale, enzimatice ale Shigella.

Întrebări teoretice:

1. Caracteristicile agenților patogeni ai shigelozei. proprietăți biologice.

2. Clasificarea shigella. Principiile care stau la baza.

3. Epidemiologie, patogeneză și caracteristici clinice shigeloza.

4. Diagnosticare de laborator.

5. Principii de tratament și prevenire a shigelozei.

Sarcini practice care se execută în clasă:

1. Microscopia preparatelor demonstrative din culturi pure de agenți patogeni de shigeloză.

2. Lucrări privind diagnosticul bacteriologic al shigelozei: studiul culturilor fecale pe mediul lui Ploskirev.

3. Subcultura coloniilor suspecte pe mediul Ressel și pe BCH pentru a determina formarea de indol și H 2 S .

4. Schițarea preparatelor demonstrative și schema diagnosticului microbiologic al shigelozei în protocolul lecției.

5. Înregistrarea protocolului.

Literatură:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Microbiologie medicală, imunologie și virologie / Manual pentru universități medicale, Sankt Petersburg „Literatura specială”, 1998. - 592p.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Microbiologie / Manual.-ed. a II-a, revăzută. Și suplimentar - M .: Medicină, 1983, -512s.

3. Pyatkin K.D. Krivoshein Yu.S. Microbiologie cu virologie și imunologie.- Kiev: În școala și școala, 1992. - 431s.

4. Microbiologie medicală / Editat de V.I. Pokrovsky.-M.: GEOTAR-MED, 2001.-768s.

5. Ghid pentru instruire practicăîn microbiologie, imunologie și virologie. Ed. M.P. Zykov. M. „Medicina”. 1977. 288 p.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Microbiologie. / Ed. F.K. Cerchez. M.: Medicină, 1986. 512 p.

7. Note de curs.

Literatură suplimentară:

1. Makiyarov K.A. Microbiologie, virologie și imunologie. Alma-Ata, „Kazahstan”, 1974. 372 p.

2. Titov M.V. Boli infecțioase. - K., 1995. 321s.

3. Shuvalova E.P. boli infecțioase. - M.: Medicină, 1990. - 559 p.

4. BME, Vol. 1, 2, 7.

5. Pavlovich S.A. Microbiologie medicală în grafice: Proc. indemnizatie medicala în-tovarăș. Mn.: Vysh. şcoală, 1986. 255 p.

Scurt instrucțiuni să lucreze în sesiunea practică.

La începutul lecției se verifică nivelul de pregătire a elevilor pentru lecție.

Munca independentă constă în studierea clasificării Shigella, analizarea schemei semnelor patogenetice și clinice ale shigellozei. Studiul metodelor de diagnosticare de laborator a shigelozei. Elevii efectuează însămânțarea biomaterialului pe medii nutritive. Apoi se prepară micropreparate, se colorează după Gram, se efectuează microscopia, se schițează micropreparatele și se dau explicațiile necesare. Alcătuirea lucrării independente include și microscopia preparatelor demonstrative și schițarea acestora în protocolul lecției.

La sfârșitul lecției se efectuează un test de control și o analiză a rezultatelor finale ale muncii independente ale fiecărui elev.

Harta tehnologică a lecției practice.

p/n	Etape	Timp în minute	Modalitati de invatare	Echipamente	Locație
	Verificarea și corectarea nivelului inițial de pregătire pentru lecție		Testarea sarcinilor de nivel inițial	Tabele, atlas	cameră de studiu
	Muncă independentă		Graficul de structură logică	Microscop cu imersiune, coloranți, lame de sticlă, bucle bacteriologice, medii nutritive, mediu Ploskirev, mediu Ressel, „serie Hiss pestriță”
	Verificare personalăși corectarea stăpânirii materialului		Sarcini de învățare direcționate
	Controlul de testare		Teste
	Analiza rezultatelor muncii

Sarcini de învățare vizate:

1. Fecalele au fost obținute de la un copil cu infecții intestinale acute (colectarea fecalelor a fost efectuată cu un tub rectal) care conținea mucus și puroi. Ce metodă de diagnosticare expresă ar trebui utilizată?

A. ELISA.

b. RECIF.

C. RA.

D. RSK.

E. RIA.

1. Agentul cauzal al dizenteriei a fost izolat de la un copil bolnav cu infecție intestinală acută. Ce caracteristici morfologice sunt caracteristice agentului patogen?

A . Tija Gram-negativă imobilă.

B . Tijă mobilă Gram-pozitivă.

C . Formează o capsulă pe un mediu nutritiv.

D . Formează spori în mediul extern.

E . Streptobacili Gram pozitivi.

3. Un pacient care s-a îmbolnăvit în urmă cu trei zile și se plânge de o temperatură de 38 ° C, dureri abdominale, frecvente scaun lichid, prezența sângelui în scaun, medicul a diagnosticat clinic dizenterie bacteriană. Ce metodă de diagnostic microbiologic ar trebui utilizată în acest caz și ce material trebuie luat de la pacient pentru a confirma diagnosticul?

A. Cal. bacterioscopic.

B. Cal. bacteriologic.

C. Sânge bacterioscopic.

D. Urina bacteriologică.

E. Sânge serologic.

4. Shigella Sonne a fost izolata din fecalele pacientului. Ce cercetări suplimentare sunt necesare pentru a stabili sursa infecției?

A . Se efectuează tiparea fagică a culturii pure izolate.

B . Determinați antibiograma.

C . Configurați reacția de precipitare.

D . Configurați reacția de fixare a complementului.

E . Stabiliți o reacție de neutralizare.

5. Din grupul de turiști (27 de persoane) care obișnuia să bea apă din lac, după două zile, 7 persoane au dezvoltat simptome de diaree acută. Ce material trebuie trimis la laboratorul bacteriologic pentru a stabili etiologia acestei boli?

A. Apa, fecalele pacienților.

B. Apa, sângele bolnavilor.

C. Produse alimentare.

D. Urină.

E. Flegmă.

6. Un dezavantaj semnificativ al metodei de diagnostic microscopic pentru infecțiile intestinale acute este conținutul său insuficient de informații din cauza identității morfologice a bacteriilor din familie. Enterobacteriaceae . Ce face această metodă mai informativă?

A . Radioimunotest.

B . Reacția Coombs.

C . Test imunosorbant legat.

D . reacție de opsonizare.

E . Reacția de imunofluorescență.

7. Un pacient de 29 de ani a fost internat cu accese de vărsături, diaree și tenesmus. Fecale cu bucăți de mucus și un amestec de sânge. Examenul bacteriologic al bacteriilor din coloniile pe mediul lui Ploskirev a evidențiat bastonașe imobile, gram-negative, care nu fermentează lactoza. Numiți agentul cauzal al procesului infecțios.

A. Shigella flexneri.

b. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. La laboratorul de microbiologie a fost livrată o salată verde, care este probabil cauza unei infecții intestinale acute. Ce mediu nutritiv se utilizează pentru inocularea primară?

A . Agar gălbenuș-sare, MPB.

b. MPA, MPB.

C . Bulion de selenită, Endo, Ploskireva.

D . Bulion de ficat, Roux Wednesday.

E . Agar sânge, agar alcalin.

9. La cercetări microbiologice carne tocată bacterii izolate aparținând genului Shigella. Studiul ce proprietăți ale microbilor a condus la o astfel de concluzie?

A . Cultural, tinctorial.

B . Antigenic, cultural.

C . Zaharolitic, proteolitic.

D . Antigenic, imunogen.

E . Morfologic, antigenic.

10. Examinarea microscopică a vărsăturilor prelevate de la un pacient cu simptome de infecție intestinală acută a evidențiat tije imobile. În ce frotiu sau preparat ar putea fi studiată motilitatea bacteriană?

A . Într-un frotiu colorat cu Gram.

B . Într-un frotiu pătat conform Tsil - Nelsen.

C . În preparat „picătură groasă”.

D . Într-un frotiu pătat de Neisser.

E . În preparat „picătură zdrobită”.

Algoritm munca de laborator :

1. Studiul proprietăților biologice ale Shigella.

2. Cunoașterea clasificării shigella.

3. Analiza schemei manifestărilor patogenetice și clinice ale shigelozei.

4. Studiul metodelor de diagnosticare de laborator a shigelozei.

5. Studierea principiilor de bază ale terapiei și prevenirii shigelozei.

1. Prepararea preparatelor fixe din cultura bacteriană.
2. Colorare micropreparate de Gram.
3. Microscopia micropreparatelor Cu folosind un microscop cu imersie, analiza și schițarea lor în protocolul lecției.
4. Mi cromoscopia și analiza preparatelor demonstrative din culturi pure de Shigella.
5. Schițarea preparatelor demonstrative și schema de diagnosticare de laborator a shigelozei în protocol.
6. Formularea protocolului.

Clasificarea shigella, proprietățile lor. Patogenia shigelozei.

Dizenteria bacteriană, sau shigeloza, este o boală infecțioasă cauzată de bacterii din genul Shigella, care apare cu o leziune predominantă a colonului. Numele genului este asociat cu K. Shigi, care a descoperit unul dintre agenții patogeni

dizenterie.

Taxonomie și clasificare. Agenții cauzali ai dizenteriei aparțin departamentului Gracilicutes, familiei Enterobacteriaceae, genului Shigella.

Morfologie și proprietăți tinctoriale. Shigella - tije gram-negative cu capete rotunjite, lungi de 2-3 microni, grosime de 0,5-7 microni (vezi Fig. 10.1); nu formează spori, nu au flageli, sunt imobili. În multe tulpini se găsesc vilozități de tip general și pili genitali. Unele Shigella au o microcapsulă.

Cultivare. Bastoanele de dizenterie sunt anaerobe facultative. Sunt nepretențioși față de mediile nutritive, cresc bine la o temperatură de 37 ° C și un pH de 7,2-7,4. Pe medii dense formează mici colonii transparente, în medii lichide -

ceață difuză. Bulionul selenit este cel mai adesea folosit ca mediu de îmbogățire pentru cultivarea Shigella.

Activitate enzimatică. Shigella are o activitate enzimatică mai mică decât alte enterobacterii. Fermentează carbohidrații cu formarea de acid. O caracteristică importantă care face posibilă diferențierea Shigella este relația lor cu manitol: S. dysenteriae nu fermentează manitolul, reprezentanții grupelor B, C, D sunt manitol-pozitivi. Cele mai active biochimic sunt S. sonnei, care încet (în decurs de 2 zile) poate fermenta lactoza. Pe baza relației dintre S. sonnei și ramnoză, xiloză și maltoză, se disting 7 variante biochimice ale acestuia.

Structura antigenică. Shigella are antigen O, eterogenitatea sa permite distincția serovariilor și subserovarurilor în cadrul grupurilor; la unii membri ai genului se găsește antigenul K.

factori de patogenitate. Toți bacilii dizenterici formează endotoxină, care are un efect enterotrop, neurotrop, pirogen. În plus, S. dysenteriae (serovar I) - Shigella Grigoriev-Shigi - secretă o exotoxină care are un efect enterotoxic, neurotoxic, citotoxic și nefrotoxic asupra organismului, care perturbă în consecință metabolismul apă-sare și activitatea sistemului nervos central, duce la moartea celulelor epiteliale ale colonului, afectarea tubilor renali. Mai mult decât curs sever dizenterie cauzată de acest agent patogen. Alte tipuri de Shigella pot secreta exotoxina. A fost descoperit factorul de permeabilitate RF, în urma căruia sunt afectate vasele de sânge. Factorii de patogenitate includ, de asemenea, o proteină invazivă care facilitează pătrunderea lor în celulele epiteliale, precum și pili și proteine ​​​​membranare exterioare responsabile de aderență și o microcapsule.

rezistenţă. Shigella are o rezistență scăzută la acțiune diverși factori. S. sonnei sunt mai rezistente, care persistă în apa de la robinet până la 2 "/2 luni, în apa rezervoarelor deschise supraviețuiesc până la V / 2 luni. S. sonnei poate persista nu numai mult timp, ci și se inmultesc in produse, in special produse lactate.

Epidemiologie. Dizenteria este o infecție antroponotică: sursa sunt bolnavii și purtătorii. Mecanismul de transmitere a infecțiilor este fecal-oral. Căile de transmitere pot fi diferite - cu dizenteria Sonne predomină calea alimentară, cu dizenteria Flexner - apă, pentru dizenteria Grigoriev-Shiga este caracteristică calea contact-gospodărie. Dizenteria apare în multe țări ale lumii. Recent

ani, a existat o creștere bruscă a incidenței acestei infecții. Oamenii de toate vârstele se îmbolnăvesc, dar copiii de la 1 la 3 ani sunt cei mai susceptibili la dizenterie. Numărul de pacienți crește în iulie - septembrie. Diferite tipuri de shigella în funcție de individ

regiunile sunt distribuite inegal.

Patogeneza. Shigella intră în tractul gastrointestinal prin gură și ajunge în intestinul gros. Posedând tropism pentru epiteliul său, agenții patogeni se atașează la celule cu ajutorul piliului și proteinelor membranei exterioare. Datorită factorului invaziv, ele pătrund în interiorul celulelor, se înmulțesc acolo, drept urmare celulele mor. În peretele intestinal se formează ulcerații, în locul cărora se formează apoi cicatrici. Endotoxina, eliberată în timpul distrugerii bacteriilor, provoacă intoxicație generală, motilitate intestinală crescută și diaree. Sângele din ulcerele formate intră în scaun. Ca urmare a acțiunii exotoxinei, se observă o încălcare mai pronunțată a metabolismului apă-sare, a activității sistemului nervos central și a leziunilor renale.

tablou clinic. Perioada de incubație durează de la 1 la 5 zile. Boala începe acut cu o creștere a temperaturii corpului la 38-39 ° C, apar dureri abdominale, diaree. Un amestec de sânge, mucus se găsește în scaun. Cea mai gravă dizenterie este Grigoriev-Shiga.

Imunitate. După o boală, imunitatea este nu numai specifică speciei, ci și specifică variantei. Este de scurtă durată și este instabilă. Adesea boala devine cronică.

Diagnosticul microbiologic. Scaunul pacientului este luat ca material de testare. Baza diagnosticului este metoda bacteriologică, care permite identificarea agentului patogen, determinarea sensibilității acestuia la

antibiotice, efectuează identificarea intraspecifică (determină varianta biochimică, serovar sau colicinogenovar). Cu un curs prelungit de dizenterie, poate fi folosit ca metodă serologică auxiliară, care constă în stadializarea RA, RNHA (prin creșterea titrului de anticorpi în timpul reacției repetate, diagnosticul poate fi confirmat).

Tratament. Pacienții cu forme severe de dizenterie Grigoriev-Shiga și Flexner sunt tratați cu antibiotice cu spectru larg, cu luarea în considerare obligatorie a antibiogramei, deoarece printre Shigella există adesea nu numai rezistente la antibiotice.

chivy, dar și forme dependente de antibiotice. În formele ușoare de dizenterie, antibioticele nu sunt utilizate, deoarece utilizarea lor duce la disbacterioză, ceea ce îngreunează. proces patologic, și întreruperea proceselor de recuperare în membrana mucoasă a colonului.

Prevenirea. Singurul medicament care poate fi utilizat în focarele de infecție în scop profilactic este bacteriofagul dizenter. Rolul principal îl joacă profilaxia nespecifică.

11. Yersinia - agenții cauzatori ai ciumei. Proprietăți. Patogenie, imunitate, diagnostic de laborator, epidemiologie, prevenire, tratament. Rolul oamenilor de știință domestici în studiul ciumei.

Taxonomie: Y.pestis provoacă ciuma; departamentul Gracilicutes, familia Enterobacteriaceae, genul Yersinia. Agentul cauzal este Yersinia pestis.

Proprietăți morfologice: Bacete gram-negative, ovoide, colorează bipolar. Sunt mobili, au capsulă, nu formează spori.

proprietăți culturale.

anaerobi facultativi. Temperatura optimă + 25ºC. Bine cultivat pe medii nutritive simple. Majoritatea carbohidraților sunt fermentați fără formarea de gaze. Psihofili – capabili să-și modifice metabolismul în funcție de temperatură și să se înmulțească la temperaturi scăzute. Tulpinile virulente formează colonii aspre (R), forme de tranziție (RS) și forme avirulente (S) netede și lipicioase gri.

Două tipuri de colonii - tinere și mature. Juvenile cu margini neuniforme. Coloniile mature sunt mari, cu un centru granular maro și margini zimțate. Pe agar oblic, o tură de două zile la +28 C formează o culoare cenușie - acoperire albă, crescând în mediu, pe bulion - un film de suprafață delicat și un precipitat bumbac.

Proprietăți biochimice: activitate enzimatică ridicată: fermentație la xiloză acidă, sinteza plasmacoagulazei, fibrinolizinei, hemolizinei, lecitinazei, hidrogen sulfurat. Ramnoza, ureea nu fermentează.

Structura antigenică.

Un grup de antigene proteice - polizaharide și lipopolizaharide: antigen O somatic termostabil și antigene capsulare V, W termolabile. Virulența bacteriilor este asociată cu antigenul W. Produce factori de patogenitate: fibrinolizină, plasmacoagulază, endotoxină, exotoxină, capsulă, antigene V, W.

Rezistenţă: sensibil la antibiotice (în special streptomicina), instabil la mediu la temperaturi ridicate.

proprietăți patogene.

Posedă potențial patogen, suprimă funcții sistemul fagocitar, suprimă explozia oxidativă în fagocite și se înmulțește liber în ele. Factorii de patogenitate sunt controlați de trei clase de plasmide. În patogeneză, există trei etape principale - deriva limfogenă, bacteriemie, septicemia generalizată. Au adezine și invazine, proteine ​​cu greutate moleculară mică (inhibă factorii bactericidi), enterotoxină. Unii factori sunt controlați de plasmidele de virulență.

Caracteristici clinice: Perioada de incubație este de câteva ore până la 8 zile. Distinge local - piele-bubonic, bubonic; diseminat extern - pulmonar primar, pulmonar secundar și intestinal; generalizate - septice primare, forme septice secundare ale ciumei. Limfadenopatie regională, enterocolită, artrită reactivă, spondilită, febră.

Epidemiologie: Ciuma este o zoonoză focală naturală clasică a animalelor sălbatice. Principalii purtători în natură sunt marmotele, veverițele de pământ, în condiții urbane - șobolanii. În transmiterea agentului patogen - puricii animalelor care pot infecta oamenii.

Imunitate: celular-umoral, limitat ca durată și intensitate.

Diagnosticul microbiologic:

Examen bacterioscopic. Frotiurile sunt preparate din materialul de testat, colorat cu Gram și o soluție apoasă de albastru de metilen. Bacteriile ciumei sunt baghete gram-negative, de formă ovoidă. cercetare bacteriologică. Materialul de testat a fost inoculat pe plăci de agar nutritiv. Culturile sunt incubate la 25°C. Studiul primar al culturilor se efectuează după 10 ore. În acest moment, apar colonii care sunt formate din forme R virulente. Bacteriile scăzute și avirulente formează colonii în formă de S. Identificarea unei culturi pure se realizează în funcție de morfologia celulelor bacteriene, natura creșterii, proprietățile antigenice și biochimice, sensibilitatea la un fag specific și biotestul.

Bacteriile formează o peliculă pe bulion; fermentează multe zaharuri până la acid, nu formează indol, nu lichefiază gelatina. Conțin un antigen somatic termostabil de grup și un antigen capsular termolabil specific.

Biotest. Se efectuează pentru a izola o cultură pură dintr-un material contaminat cu microfloră străină. Cele mai sensibile animale de laborator sunt cobaii, cărora li se injectează materialul subcutanat. Intraperitoneal, materialul este injectat dacă nu este contaminat cu alte bacterii. După moartea animalelor, se observă modificări patologice ale organelor și se efectuează un examen bacteriologic.

Metode exprese de diagnostic de laborator:

2.RPGA - pentru detectarea antigenelor bacteriene din material folosind ser anti-ciumă standard, ai cărui anticorpi sunt încărcați pe eritrocite.

Tratament: antibiotice - streptomicina, tetracicline.

Prevenire: profilaxie specifică - vaccin viu atenuat EV ciuma. Un vaccin comprimat uscat este disponibil pentru administrare orală. Pentru a evalua imunitatea la ciumă (post-infecție naturală și vaccin), poate fi utilizat un test de alergie intradermică cu pestin.

Bacteriofag ciuma– la identificarea Y.pestis.

Vaccin uscat împotriva ciumei - cultura vie uscată a tulpinii de vaccin Y. pestis EV, utilizată pentru prevenirea ciumei.

Microbiologia dizenteriei

Dizenteria este o boală infecțioasă caracterizată prin intoxicație generală a corpului, diaree și o leziune particulară a membranei mucoase a intestinului gros. Este una dintre cele mai frecvente boli intestinale acute din lume. Boala este cunoscută din cele mai vechi timpuri sub numele de „diaree cu sânge”, dar natura ei s-a dovedit a fi diferită. În 1875, omul de știință rus F. A. Lesh a izolat o amibă de la un pacient cu diaree cu sânge. Entamoeba histolytica, în următorii 15 ani s-a stabilit independența acestei boli, pentru care s-a păstrat denumirea de amebiază.

Agenții cauzali ai dizenteriei propriu-zise sunt un grup mare de bacterii similare din punct de vedere biologic unite în gen Shigella. Agentul patogen a fost descoperit pentru prima dată în 1888 de A. Chantemes și F. Vidal; în 1891, a fost descris de A. V. Grigoriev, iar în 1898, K. Shiga, folosind serul primit de la un pacient, a identificat agentul patogen la 34 de bolnavi cu dizenterie, dovedind în final rolul etiologic al acestei bacterii. Totuși, în anii următori, au fost descoperiți și alți agenți cauzali ai dizenteriei: în 1900 - de S. Flexner, în 1915 - de K. Sonne, în 1917 - de K. Stutzer și K. Schmitz, în 1932 - de J. Boyd , în 1934 - de D. Large, în 1943 - de A. Sachs. În prezent genul Shigella include mai mult de 40 de serotipuri. Toate sunt baghete gram-negative scurte imobile care nu formează spori și capsule, care cresc bine pe medii nutritive obișnuite, nu cresc pe un mediu de foame cu citrat sau malonat ca unică sursă de carbon; nu formează H2S, nu au urează; reacția Voges-Proskauer este negativă; glucoza și alți carbohidrați sunt fermentați pentru a forma acid fără gaz (cu excepția unor biotipuri Shigella flexneri: S. manchesterȘi S. newcastle); de regulă, nu fermentează lactoza (cu excepția Shigella Sonne), adonitul, salicină și inozitol, nu lichefiază gelatina, de obicei formează catalază, nu au lizin decarboxilază și fenilalanin deaminază. Conținutul de G + C în ADN este de 49 - 53 % mol. Shigella sunt anaerobi facultativi, temperatura optimă pentru creștere este de 37 °C, nu cresc la temperaturi peste 45 °C, pH-ul optim al mediului este de 6,7 - 7,2. Coloniile pe medii dense sunt rotunde, convexe, translucide; în cazul disocierii, se formează colonii aspre în formă de R. Creșterea pe BCH sub formă de turbiditate uniformă, formele aspre formează un precipitat. Culturile proaspăt izolate de Sonne Shigella formează de obicei colonii de două tipuri: mici, rotunde, convexe (faza I), plate mari (faza II). Natura coloniei depinde de prezența (faza I) sau absența (faza II) a unei plasmide cu m. m. 120 MD, ceea ce determină și virulența Shigella Sonne.

Clasificarea internațională Shigella este construită ținând cont de caracteristicile biochimice ale acestora (manitol-nefermentant, manitol-fermentant, Shigella cu fermentație lentă a lactozei) și caracteristicile structurii antigenice (Tabelul 37).

La Shigella s-au găsit antigeni O cu specificitate diferită: comune pentru familie Enterobacteriaceae, generic, specific de specie, grup și tip, precum și antigenele K; Nu au antigene H.

Tabelul 37

Clasificarea bacteriilor din gen Shigella

Clasificarea ia în considerare doar antigenele O-specifice de grup și tip. Conform acestor caracteristici, Shigella subdivizat în 4 subgrupe sau 4 specii și include 44 de serotipuri. În subgrupa A (specii Shigella dysenteriae) include shigella care nu fermentează manitolul. Specia include 12 serotipuri (1 - 12). Fiecare serotip are propriul său antigen de tip specific; relațiile antigenice dintre serotipuri, precum și cu alte tipuri de shigella, sunt slab exprimate. La subgrupa B (tip Shigella flexneri) includ Shigella, de obicei manitol care fermentează. Shigella acestei specii sunt înrudite serologic între ele: conțin antigene specifice tipului (I - VI), conform cărora sunt împărțite în serotipuri (1 - 6) și antigene de grup, care se găsesc în compoziții diferite în fiecare serotip. şi conform cărora serotipurile sunt împărţite în subserotipuri. În plus, această specie include două variante antigenice, X și Y, care nu au antigene tipice; ele diferă în seturi de antigene de grup. Serotip S. flexneri 6 nu are subserotipuri, dar este împărțit în 3 tipuri biochimice în funcție de caracteristicile fermentației glucozei, manitolului și dulcitului (Tabelul 38).

Tabelul 38

Biotipuri S. flexneri 6

Notă. K - fermentație cu formare numai de acid; KG - fermentație cu formare de acid și gaz; (-) - fără fermentație.

Antigenul lipopolizaharidic O din toate Shigella Flexner conține antigenul de grup 3, 4 ca structură primară principală, sinteza sa este controlată de o genă cromozomială localizată în apropierea locului his. Antigenele specifice de tip I, II, IV, V și antigenele de grup 6, 7, 8 sunt rezultatul modificării antigenelor 3, 4 (glicozilare sau acetilare) și sunt determinate de genele profagelor de conversie corespunzătoare, locul de integrare al care se află în regiunea lac-pro a cromozomului Shigella.

A apărut pe teritoriul țării în anii 80. Secolului 20 și un nou subserotip utilizat pe scară largă S. flexneri 4(IV:7, 8) diferă de subserotipul 4a (IV:3, 4) și 4b (IV:3, 4, 6), a apărut din varianta S. flexneri Y(IV:3, 4) din cauza lizogenizării prin profagile sale de conversie IV și 7, 8.

La subgrupa C (tip Shigella boydii) includ Shigella, de obicei manitol care fermentează. Membrii grupului sunt diferiți serologic unul de celălalt. Relațiile antigenice din cadrul speciei sunt slab exprimate. Specia include 18 serotipuri (1 - 18), fiecare dintre ele având propriul său antigen de tip principal.

În subgrupa D (specii Shigella sonnei) include Shigella, care fermentează de obicei manitolul și sunt capabile să fermenteze lent (după 24 de ore de incubație și mai târziu) lactoza și zaharoza. Vedere S. sonnei include un serotip, totuși, coloniile de faze I și II au propriile lor antigene specifice tipului. Au fost propuse două metode pentru clasificarea intraspecifică a Shigella lui Sonne:

1) împărțirea lor în 14 tipuri și subtipuri biochimice în funcție de capacitatea lor de a fermenta maltoză, ramnoză și xiloză; 2) împărțirea în tipuri de fagi în funcție de sensibilitatea la un set de fagi corespunzători.

Aceste metode de tipizare au în principal semnificație epidemiologică. În plus, shigella Sonne și shigella Flexner sunt supuse tipării în același scop prin capacitatea de a sintetiza colicine specifice (colicinogenotyping) și prin sensibilitatea la colicine cunoscute (colicinotyping). Pentru a determina tipul de colicine produse de shigella, J. Abbott și R. Shannon au propus seturi de tulpini tipice și indicator de shigella și pentru a determina sensibilitatea shigella la tipuri cunoscute de colicine, un set de tulpini colicinogene de referință de P. Frederick este folosit.

rezistenţă. Shigella are o rezistență destul de mare la factorii de mediu. Aceștia supraviețuiesc pe țesătură de bumbac și pe hârtie până la 30-36 de zile, în fecale uscate - până la 4-5 luni, în sol - până la 3-4 luni, în apă - de la 0,5 până la 3 luni, pe fructe și legume - până la 2 săptămâni, în lapte și produse lactate - până la câteva săptămâni; la o temperatură de 60 ° C mor în 15 - 20 de minute. Sensibil la soluții de cloramină, clor activ și alți dezinfectanți.

factori de patogenitate. Cea mai importantă proprietate biologică a Shigella, care le determină patogenitatea, este capacitatea de a invada celulele epiteliale, de a se multiplica în ele și de a provoca moartea acestora. Acest efect poate fi detectat utilizând un test keratoconjunctival (introducerea unei bucle a unei culturi Shigella (2-3 miliarde de bacterii) sub pleoapa inferioară a cobaiului determină dezvoltarea unei keratoconjunctivite purulente seroase), precum și prin infecția celulelor. culturi (efect citotoxic) sau embrioni de pui (moartea lor) sau intranazal la șoareci albi (dezvoltarea pneumoniei). Principalii factori de patogenitate ai Shigella pot fi împărțiți în trei grupuri:

1) factori care determină interacțiunea cu epiteliul mucoasei;

2) factori care asigură rezistență la mecanismele umorale și celulare de apărare ale macroorganismului și capacitatea Shigella de a se multiplica în celulele sale;

3) capacitatea de a produce toxine și produse toxice care determină desfășurarea procesului patologic propriu-zis.

Primul grup include factori de adeziune și colonizare: rolul lor este jucat de pili, proteinele membranei exterioare și LPS. Enzimele care distrug mucusul, cum ar fi neuraminidaza, hialuronidaza și mucinaza, promovează aderența și colonizarea. Al doilea grup include factori de invazie care favorizează pătrunderea Shigella în enterocite și reproducerea lor în ele și în macrofage cu manifestarea simultană a unui efect citotoxic și (sau) enterotoxic. Aceste proprietăți sunt controlate de genele plasmidei cu m. m. 140 MD (codifică sinteza proteinelor membranei exterioare care provoacă invazia) și genele cromozomiale Shigella: kcp A (provoacă keratoconjunctivită), cyt (responsabilă de distrugerea celulelor), precum și alte gene, neidentificate încă. Protecția Shigella de fagocitoză este asigurată de antigenul K de suprafață, antigenele 3, 4 și lipopolizaharide. În plus, lipida A de Shigella endotoxina are un efect imunosupresor: suprimă activitatea celulelor memoriei imune.

Al treilea grup de factori de patogenitate include endotoxina și două tipuri de exotoxine găsite în Shigella - exotoxine Shiga și exotoxine asemănătoare Shiga (SLT-I și SLT-II), ale căror proprietăți citotoxice sunt cele mai pronunțate în S. dysenteriae 1. Toxine de tip Shiga și Shiga se găsesc și în alte serotipuri S. dysenteriae, se formează și ele S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC și niște salmonele. Sinteza acestor toxine este controlată de genele toxice ale fagilor convertitori. Enterotoxine de tip LT au fost găsite la Flexner, Sonne și Boyd Shigella. Sinteza LT în ele este controlată de gene plasmide. Enterotoxina stimulează activitatea adenilat-ciclazei și este responsabilă pentru dezvoltarea diareei. Toxina Shiga, sau neurotoxina, nu reacționează cu sistemul adenil-ciclazei, dar are un efect citotoxic direct. Toxinele Shiga și Shiga-like (SLT-I și SLT-II) au un MW de 70 kD și constau din subunități A și B (ultima dintre cele 5 subunități mici identice). Receptorul pentru toxine este glicolipidul membranei celulare.

Virulența Shigella Sonne depinde și de plasmida cu m. m. 120 MD. Controlează sinteza a aproximativ 40 de polipeptide ale membranei exterioare, dintre care șapte sunt asociate cu virulență. Shigella Sonne cu această plasmidă formează colonii de fază I și sunt virulente. Culturile care au pierdut plasmida formează colonii de fază II și sunt lipsite de virulență. Plasmide cu m.m. 120 - 140 MD au fost găsite la Shigella Flexner și Boyd. Lipopolizaharida Shigella este o endotoxină puternică.

Caracteristicile epidemiologiei. Singura sursă de infecție sunt oamenii. Niciun animal din natură nu suferă de dizenterie. În condiții experimentale, dizenteria poate fi reprodusă numai la maimuțe. Metoda de infectare este fecal-oral. Modalitati de transmitere - apa (predominanta pentru Shigella Flexner), hrana, cu rol deosebit de important revine laptelui si produselor lactate (calea predominanta de infectie pentru Shigella Sonne), si contact-gospodar, in special pentru specie. S. dysenteriae.

O caracteristică a epidemiologiei dizenteriei este modificarea compoziției speciilor a agenților patogeni, precum și a biotipurilor Sonne și a serotipurilor Flexner în anumite regiuni. De exemplu, până la sfârșitul anilor 1930 Secolului 20 a împărtăși S. dysenteriae 1 a reprezentat până la 30 - 40% din toate cazurile de dizenterie, iar apoi acest serotip a început să apară din ce în ce mai puțin și aproape a dispărut. Cu toate acestea, în anii 1960 - 1980. S. dysenteriae a reapărut pe arena istorică și a provocat o serie de epidemii care au dus la formarea a trei focare hiperendemice ale acesteia - în America Centrală, Africa Centrală și Asia de Sud (India, Pakistan, Bangladesh și alte țări). Motivele pentru modificarea compoziției speciilor a agenților patogeni de dizenterie sunt probabil asociate cu o modificare a imunității colective și cu o modificare a proprietăților bacteriilor de dizenterie. În special, întoarcerea S. dysenteriae 1 iar distribuția sa largă, care a provocat formarea de focare hiperendemice de dizenterie, este asociată cu achiziționarea de plasmide de către aceasta, care a provocat multiple rezistenta la medicamenteși virulență crescută.

Caracteristicile patogenezei și clinicii. Perioada de incubație pentru dizenterie este de 2-5 zile, uneori mai puțin de o zi. Formare focus infectiosîn membrana mucoasă a părții descendente a intestinului gros (sigmoid și rect), unde pătrunde agentul cauzal al dizenteriei, este ciclică: aderența, colonizarea, introducerea shigella în citoplasma enterocitelor, reproducerea lor intracelulară, distrugerea și respingerea. a celulelor epiteliale, eliberarea agenților patogeni în lumenul intestinal; după aceasta începe următorul ciclu - aderență, colonizare etc. Intensitatea ciclurilor depinde de concentrația agenților patogeni din stratul parietal al membranei mucoase. Ca urmare a ciclurilor repetate, focarul inflamator crește, ulcerele rezultate, conectându-se, cresc expunerea peretele intestinal, în urma cărora în scaun apar sânge, bulgări mucopurulenți, leucocite polimorfonucleare. Citotoxinele (SLT-I și SLT-II) provoacă distrugerea celulelor, enterotoxina - diaree, endotoxine - intoxicație generală. Clinica de dizenterie este determinată în mare măsură de ce tip de exotoxine este produsă într-o măsură mai mare de agentul patogen, de gradul efectului său alergenic și de starea imunitară a organismului. Cu toate acestea, multe probleme ale patogenezei dizenteriei rămân neexplicate, în special: cursul dizenteriei la copiii primilor doi ani de viață, motivele tranziției dizenteriei acute la cronice, semnificația sensibilizării, mecanismul imunității locale. ale mucoasei intestinale etc. Cele mai tipice manifestări clinice ale dizenteriei sunt diareea, impulsurile frecvente: în cazuri severe de până la 50 sau mai multe ori pe zi, tenesmul (spasme dureroase ale rectului) și intoxicația generală. Natura scaunului este determinată de gradul de deteriorare a intestinului gros. Cea mai severă dizenterie este cauzată de S. dysenteriae 1, cel mai ușor - dizenteria lui Sonne.

Imunitatea postinfecțioasă. După cum au arătat observațiile asupra maimuțelor, după ce au suferit dizenterie, rămâne o imunitate puternică și destul de lungă. Este cauzată de anticorpi antimicrobieni, antitoxine, activitate crescută a macrofagelor și limfocitelor T. Un rol semnificativ îl joacă imunitatea locală a mucoasei intestinale, mediată de IgA. Cu toate acestea, imunitatea este specifică tipului în natură, nu are loc o imunitate încrucișată puternică.

Diagnosticul de laborator. Metoda principală este bacteriologică. Materialul pentru studiu este fecalele. Schema de izolare a agentului patogen: inoculare pe mediile de diagnostic diferenţial Endo şi Ploskirev (în paralel pe mediul de îmbogăţire, urmată de inoculare pe mediile Endo şi Ploskirev) pentru izolarea coloniilor izolate, obţinerea unei culturi pure, studierea proprietăţilor biochimice a acesteia şi, ţinând cont acesta din urmă, identificarea folosind seruri aglutinante de diagnostic polivalente și monovalente. Sunt produse următoarele seruri comerciale.

1. Shigella care nu fermentează manitolul:

La S. dysenteriae 1Și 2

La S. dysenteriae 3–7(polivalent și monovalent),

La S. dysenteriae 8 – 12(polivalent și monovalent).

2. Pentru manitol care fermenta shigella:

la antigeni tipici S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

pentru a grupa antigenele S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8- polivalent,

la antigeni S.boydii 1–18(polivalent și monovalent), la antigeni S. sonnei faza I, faza a II-a,

la antigeni S. flexneri I–VI+ S. sonnei- polivalent.

Pentru identificarea rapidă a Shigella, se recomandă următoarea metodă: o colonie suspectă (lactosonnegativă pe mediu Endo) este subcultivată pe mediu TSI (ing. fier de zahăr triplu) - agar cu trei zaharuri (glucoza, lactoza, zaharoza) cu fier pentru determinarea productiei de H 2 S; sau pe un mediu care conține glucoză, lactoză, zaharoză, fier și uree. Orice organism care descompune ureea după 4 până la 6 ore de incubație este cel mai probabil să aparțină genului Proteusși poate fi exclus. Un microorganism care produce H2S sau care are ureaza sau produce acid la nivelul articulației (fermentează lactoza sau zaharoza) poate fi exclus, deși tulpinile producătoare de H2S ar trebui investigate ca posibili membri ai genului. Salmonella. În toate celelalte cazuri, cultura crescută pe aceste medii trebuie examinată și, dacă fermentează glucoza (schimbarea culorii barei), izolată în formă pură. Totodată, poate fi investigat în testul de aglutinare pe sticlă cu antiserurile adecvate genului Shigella. Dacă este necesar, se efectuează alte teste biochimice pentru a verifica apartenența la gen Shigellași mobilitatea studiilor.

Următoarele metode pot fi utilizate pentru a detecta antigenele din sânge (inclusiv ca parte a CEC), urină și fecale: RPHA, RSK, reacție de coaglutinare (în urină și fecale), IFM, RAGA (în serul sanguin). Aceste metode sunt extrem de eficiente, specifice și potrivite pentru diagnosticul precoce.

Pentru diagnosticul serologic se pot utiliza: RPGA cu diagnosticul eritrocitar corespunzător, metoda imunofluorescentă (în modificare indirectă), metoda Coombs (determinarea titrului de anticorpi incompleti). Un test alergic cu dizenterie (o soluție de fracții proteice din Shigella Flexner și Sonne) are, de asemenea, valoare diagnostică. Reacția se ia în considerare după 24 de ore.Se consideră pozitivă în prezența hiperemiei și a infiltrațiilor cu diametrul de 10-20 mm.

Tratament. Atenția principală se acordă restabilirii metabolismului normal apă-sare, alimentație rațională, detoxifiere, terapie rațională cu antibiotice (ținând cont de sensibilitatea agentului patogen la antibiotice). Un efect bun se obține prin utilizarea timpurie a unui bacteriofag dizenteric polivalent, în special tablete cu înveliș pectinic, care protejează fagul de acțiunea HCl al sucului gastric; în intestinul subțire, pectina se dizolvă, fagii sunt eliberați și își arată acțiunea. În scopuri profilactice, fagul trebuie administrat cel puțin o dată la trei zile (perioada de supraviețuire a acestuia în intestin).

Problema prevenirii specifice. Pentru a crea imunitate artificială împotriva dizenteriei, s-au folosit diferite vaccinuri: din bacterii ucise, substanțe chimice, alcool, dar toate s-au dovedit a fi ineficiente și au fost întrerupte. Vaccinurile împotriva dizenteriei Flexner au fost create din Shigella Flexner viu (mutant, dependent de streptomicina); vaccinuri ribozomale, dar nici acestea nu au fost utilizate pe scară largă. Prin urmare, problema prevenirii specifice a dizenteriei rămâne nerezolvată. Principala modalitate de combatere a dizenteriei este îmbunătățirea sistemului de alimentare cu apă și canalizare, asigurarea unor regimuri sanitare și igienice stricte în întreprinderile alimentare, în special în industria lactatelor, în instituțiile de îngrijire a copiilor, locurile publice și în igiena personală.

UDC 616.935-074(047)

A.M.Sadykova

Universitatea Națională de Medicină din Kazahstan

numit după S.D. Asfendiyarov, Almaty

Departamentul de Boli Infecțioase și Tropicale

Diagnosticul de încredere al dizenteriei este una dintre sarcinile urgente ale supravegherii AEI. Un diagnostic precis al dizenteriei bacilare este importanţă pentru dreapta si tratament în timp util pacient şi pentru implementarea măsurilor antiepidemice necesare. Datele prezentate în revizuire arată că, având în vedere prevalența pe scară largă a dizenteriei, lipsa de sensibilitate și apariție târzie rezultate pozitive ale multor metode de diagnostic, este recomandabil să se dezvolte potențialul de diagnostic al detectării acestei infecții.

Cuvinte cheie: diagnostic, dizenterie, metoda limfocitelor de legare a antigenului.

Recunoașterea infecției cu shigeloză în practica clinică întâmpină dificultăți semnificative din cauza factorilor obiectivi, care includ patomorfismul clinic al dizenteriei, o creștere a numărului forme atipice boli, existența unui număr semnificativ de boli de natură infecțioasă și neinfecțioasă, având manifestări clinice asemănătoare dizenteriei. Sub diagnosticul de „dizenterie clinică” în jumătate din cazuri se ascund boli nerecunoscute de altă etiologie.

Cele mai mari dificultăți apar în fața medicului în timpul examinării inițiale a pacientului înainte de obținerea rezultatelor metodelor de diagnostic paraclinic. Recunoașterea dizenteriei este, de asemenea, dificilă în prezența boli concomitente tract gastrointestinal.

De la începutul utilizării diagnosticului etiologic de laborator al dizenteriei, au fost propuse și testate destul de multe metode. Există multe clasificări ale metodelor de diagnostic etiologic al infecțiilor. Metodologic, clasificarea propusă de B.V. Pedeapsă. În ceea ce privește diagnosticul dizenteriei, principiile clasificării metodologice solide au fost folosite de B.V. Karalnik, N.M. Nurkina, B.K. Erkinbekova..

Dintre metodele de laborator pentru diagnosticarea dizenteriei sunt cunoscute, bacteriologice (izolarea și identificarea agentului patogen) și imunologice. Acestea din urmă includ metode imunologice in vivo (testul alergologic Zuverkalov) și in vitro. Metodele imunologice in vitro au un avantaj incontestabil față de testul Zuverkalov - nu sunt asociate cu introducerea de antigene străine în organism.

Majoritatea cercetătorilor încă cred că cercetarea bacteriologică, care include izolarea în cultura pura agentul cauzal al bolii, cu identificarea sa ulterioară prin caracteristicile morfologice, biochimice și antigenice, este cea mai fiabilă metodă de diagnosticare a infecției cu shigeloză. Frecvența izolării Shigella din fecalele pacienților cu diagnostic clinic de „dizenterie acută”, conform diferiților autori, variază de la 30,8% la 84,7% și chiar 91,1%. O astfel de gamă semnificativă pentru diferiți autori depinde nu numai de factorii obiectivi care afectează eficacitatea examinării bacteriologice, ci și de minuțiozitatea diagnosticului (sau excluderii) „dizenteriei clinice”. Eficacitatea cercetării bacteriologice este influențată de acestea factori obiectivi, ca caracteristici ale evoluției bolii, metoda de prelevare a probelor și livrarea materialului la laborator, calitatea mediilor nutritive, calificarea personalului, momentul contactului pacientului cu personalul medical, utilizarea antimicrobieneînainte de a lua material pentru cercetare. cantitativ cercetare microbiologică fecalele în dizenteria acută arată că în orice formă clinică de infecție, cea mai masivă eliberare de agenți patogeni are loc în primele zile ale bolii, iar începând cu a 6-a și, mai ales din a 10-a zi a bolii, concentrația de shigella în fecalele sunt reduse semnificativ. T.A. Avdeeva a constatat că conținutul scăzut de shigella și predominanța accentuată a microorganismelor nepatogene în fecale exclud practic posibilitatea detectării bacteriologice a bacteriilor de dizenterie.

Se știe că confirmarea bacteriologică a infecției cu shigeloză are cel mai adesea succes la examinarea pacienților în primele zile ale bolii - coprocultura agentului patogen în marea majoritate a cazurilor este mai întâi izolată în timpul primului studiu. Rezultatele pozitive ale examenului bacteriologic se notează numai în primele 3 zile ale bolii la 45 - 49% dintre pacienți, în primele 7 zile - la 75%. Tillet și Thomas consideră, de asemenea, momentul examinării pacienților ca un factor important în determinarea eficacității metodei bacteriologice de diagnosticare a dizenteriei. Potrivit lui T.A. Avdeeva, în primele zile de boală, cea mai intensă eliberare a agentului patogen se observă cu dizenteria Sonne, mai puțin intensă cu dizenteria Flexner și cea mai puțină cu dizenteria Flexner VI; în stadiile ulterioare ale bolii, cea mai mare concentrație se menține cel mai mult timp în dizenteria Flexner, mai puțin lungă - Shigella Sonne și cea mai puțin lungă - Shigella Flexner VI.

Astfel, deși examinarea bacteriologică a fecalelor este cea mai fiabilă metodă de diagnosticare a infecției cu shigeloză, limitările eficacității acesteia enumerate mai sus sunt dezavantaje semnificative. De asemenea, este important de subliniat limitările diagnosticului precoce prin metoda bacteriologică, în care durata analizei este de 3-4 zile. În legătură cu aceste circumstanțe, utilizarea altor metode de diagnosticare de laborator are o importanță practică deosebită. O altă metodă microbiologică de diagnosticare a dizenteriei se bazează și pe detectarea Shigella vii. Aceasta este o reacție de creștere a titrului fagului (RNF) bazată pe capacitatea fagilor specifici de a se multiplica exclusiv în prezența microorganismelor vii omoloage. O creștere a titrului de fag indicator indică prezența microbilor corespunzători în mediu. Valoarea diagnostică a RNF în infecția cu shigeloză a fost testată de B.I. Khaimzon, T.S. Vilkomirskaya. RNF are o sensibilitate destul de mare. Cartografiere concentrație minimă Shigella în scaune capturate prin metoda bacteriologică (12,5 mii bacterii în 1 ml) și RNF (3,0 - 6,2 mii) indică superioritatea RNF.

Deoarece frecvența rezultatelor pozitive RNF depinde direct de gradul de contaminare a fecalelor, utilizarea metodei dă și cel mai mare efect în primele zile ale bolii și în formele mai severe ale procesului infecțios. Cu toate acestea, sensibilitatea mai mare a metodei determină avantaje deosebite asupra examinării bacteriologice în stadiile târzii ale bolii, precum și în examinarea pacienților cu forme ușoare, asimptomatice și subclinice de infecție, cu o concentrație scăzută a agentului patogen în scaun. RNF este, de asemenea, utilizat în examinarea pacienților care iau agenți antibacterieni, deoarece aceștia din urmă reduc drastic frecvența rezultatelor pozitive ale metodei bacteriologice de cercetare, dar într-o măsură mult mai mică afectează eficacitatea RNF. Sensibilitatea RNF nu este absolută din cauza existenței unor tulpini de shigella rezistente la fagi: proporția tulpinilor rezistente la fagi poate varia într-un interval foarte larg - de la 1% la 34,5%.

Marele avantaj al RNF este specificitatea sa ridicată. La examinarea persoanelor sănătoase, precum și a pacienților cu boli infecțioase de altă etiologie, rezultatele reacțiilor pozitive au fost observate doar în 1,5% din cazuri. RNF este o metodă suplimentară valoroasă pentru diagnosticarea infecției cu shigeloză. Dar astăzi această metodă este rar folosită din cauza complexității sale tehnice. Alte metode sunt imunologice. Cu ajutorul lor, se înregistrează un răspuns imun specific față de agentul patogen sau se determină antigenele agentului patogen prin metode imunologice.

Datorită severității proceselor de alergie infecțioasă specifică în infecția cu shigeloză, au fost utilizate mai întâi metode de diagnostic alergologic, care includ un test alergic intradermic cu dizenterie (VPD). Medicamentul „dizenterie”, care este un alergen specific Shigella, lipsit de substanțe toxice, a fost obținut de D.A. Tsuverkalov și a fost utilizat pentru prima dată în condiții clinice la înființarea unui test intradermic de către L.K. Korovitsky în 1954. Potrivit lui E.V. Goliusova și M.Z. Trokhimenko, în prezența dizenteriei acute anterioare sau a bolilor alergice asociate cu manifestări ale pielii (eczeme, urticarie etc.). rezultatele pozitive ale VPD sunt observate mult mai des (paraalergie). Analiza rezultatelor VPD în perioade diferite dizenteria acută arată că o alergie specifică apare deja în primele zile ale bolii, atinge severitatea maximă în a 7-a - a 15-a zi și apoi dispare treptat. Rezultate pozitive de reacție au fost obținute la examinarea persoanelor sănătoase cu vârsta cuprinsă între 16 și 60 de ani în 15 - 20% din cazuri și cu vârsta cuprinsă între 3 și 7 ani - în 12,5% din cazuri. Chiar mai des, rezultate pozitive nespecifice ale VPD au fost observate la pacienții cu boli gastrointestinale - în 20 - 36% din cazuri. Introducerea alergenului a fost însoțită de dezvoltarea unei reacții locale la 35,5 - 43,0% dintre pacienții cu salmoneloză, la 74 - 87% dintre pacienții cu coli-0124-enterocolită. Un argument serios împotriva utilizării pe scară largă a VPD în practica clinică a fost efectul său alergenic asupra organismului. Având în vedere cele de mai sus, putem spune că această metodă nu este foarte specifică. Testul lui Tsuverkalov nu este, de asemenea, specific speciei. Rezultatele reacțiilor pozitive au fost la fel de frecvente în diferite forme etiologice de dizenterie.

Pe lângă VPD, s-au folosit și alte reacții de diagnosticare, cu diferite grade de validitate, considerate alergice, de exemplu, reacția de leucocitoliză alergenă (ALC), a cărei esență a fost deteriorarea specifică sau distrugerea completă a neutrofilelor sensibilizate activ sau pasiv. la contactul cu AG corespunzător. Dar această reacție nu poate fi atribuită metodelor de diagnostic precoce, deoarece frecvența maximă a rezultatelor pozitive a fost observată în ziua 6-9 a bolii și s-a ridicat la 69%. De asemenea, a fost propusă o reacție de leukergie alergenă (ALE). Se bazează pe capacitatea leucocitelor unui organism sensibilizat de a se aglomera atunci când sunt expuse la un alergen omolog (dizenterie). Având în vedere lipsa de evidență a mecanismelor exacte ale unor astfel de teste, corespondența insuficientă a rezultatelor lor cu etiologia bolii, aceste metode, după o scurtă perioadă de utilizare în URSS, nu s-au răspândit ulterior.

Detectarea antigenelor Shigella în organism este echivalentă din punct de vedere diagnostic cu izolarea agentului patogen. Principalele avantaje ale metodelor de detectare a antigenelor față de examenul bacteriologic, justificându-le aplicare clinică, este posibilitatea de a detecta nu numai microorganismele viabile, ci și cele moarte și chiar distruse, care dobândește sens special la examinarea pacienților în timpul sau la scurt timp după un curs de terapie cu antibiotice.

Una dintre cele mai bune metode de diagnosticare rapidă a dizenteriei a fost studiul imunofluorescent al fecalelor (metoda Koons). Esența metodei constă în detectarea Shigella prin tratarea materialului de testat cu ser care conține anticorpi specifici marcați cu fluorocromi. Combinația de anticorpi marcați cu antigeni omologi este însoțită de o strălucire specifică a complexelor detectate la un microscop fluorescent. În practică, se folosesc două variante principale ale metodei Koons: directă, în care se utilizează ser care conține anticorpi marcați împotriva antigenelor Shigella și indirectă (în două etape) folosind, în prima etapă, ser nemarcat cu fluorocrom (sau fracțiune de globulină). de ser anti-shigella). În a doua etapă, serul marcat cu fluorocrom este utilizat împotriva globulinelor din serul anti-shigeloză utilizat în prima etapă. Un studiu comparativ al valorii diagnostice a două variante ale metodei imunofluorescente nu a evidențiat diferențe mari în specificitatea și sensibilitatea lor. În practica clinică, utilizarea acestei metode este cea mai eficientă atunci când se examinează pacienții în întâlniri timpurii boli, precum și în formele mai severe de infecție. Un dezavantaj semnificativ al metodei de imunofluorescență este lipsa ei de specificitate. Cel mai important motiv specificitatea insuficientă a reacției de imunofluorescență este relația antigenică a enterobacteriilor de diferite genuri. Prin urmare, această metodă este considerată ca fiind indicativă în recunoașterea infecției cu shigeloză.

Diverse reacții sunt utilizate pentru a detecta antigenele Shigella fără microscopie. Aceste metode fac posibilă detectarea antigenelor patogeni în fecale la 76,5 - 96,0% dintre pacienții cu dizenterie confirmată bacteriologic, ceea ce indică sensibilitatea lor destul de ridicată. Cel mai indicat este să folosiți aceste metode în stadiile târzii ale bolii. Specificitatea acestor metode de diagnostic este foarte apreciată de majoritatea autorilor. Cu toate acestea, F.M. Ivanov, care a folosit RSK pentru a detecta antigenele de shigeloză în fecale, a primit rezultate pozitive la examinarea persoanelor sănătoase și a pacienților cu infecții intestinale de alte etiologii în 13,6% din cazuri. Potrivit autorului, utilizarea metodei este mai adecvată pentru detectarea antigenelor specifice în urină, deoarece frecvența reacțiilor pozitive nespecifice în ultimul caz este mult mai mică. Utilizarea diferitelor metode de cercetare face posibilă detectarea antigenelor Shigella în urină a marii majorități a pacienților cu dizenterie confirmată bacteriologic. Dinamica excreției antigenelor în urină are unele caracteristici - detectarea substanțelor antigenice în unele cazuri este posibilă deja din primele zile ale bolii, dar cu cea mai mare frecvență și constanță reușește în ziua 10-15 și chiar la o dată ulterioară. Potrivit lui B.A. Godovanny și colab., proporția rezultatelor pozitive ale antigenelor Shigella urinare (RSK) după a 10-a zi de boală este de 77% (cifra corespunzătoare pentru examinarea bacteriologică a fecalelor este de 47%). În legătură cu această împrejurare, studiul urinei pentru prezența antigenelor patogeni are valoarea unei metode suplimentare valoroase în dizenterie, în primul rând în scopul diagnosticării tardive și retrospective.

Potrivit lui N.M. Nurkina, dacă imunoreactivul anticorp este obținut din seruri policlonale, sunt posibile rezultate pozitive în cazul în care antigenele înrudite sunt prezenți în probă. De exemplu, cu un diagnostic de eritrocite dintr-un ser foarte activ împotriva S.flexneri VI, este detectat și antigenul S.flexneri I-V, deoarece Shigella ambelor subspecii au un antigen de specie comun. Antigenii Shigella pot fi determinați în timpul perioadei de boală atât în ​​serul sanguin cât și în secreții.

Lee Won Ho și colab. s-a demonstrat că frecvența de depistare a antigenelor Shigella și concentrația acestora în sânge și urină sunt mai mari în primele zile de boală și că concentrația antigenelor detectate este mai mare în boala moderată decât în ​​boala uşoară.

CM. Omirbayeva a propus o metodă de indicare a antigenului Shigella, bazată pe utilizarea eritrocitelor formalizate ca absorbant pentru antigenele din extractul fecal studiat, urmată de aglutinarea acestora cu ser imun. Evaluarea specificului acestei metode, în opinia noastră, necesită cercetări suplimentare, deoarece extractele fecale conțin cantități semnificative antigenii altor bacterii care nu sunt agentul cauzal al acestei boli intestinale.

O serie de cercetători propun imunotestul enzimatic ca metodă de diagnosticare rapidă a dizenteriei acute, care, potrivit multor autori, este considerată extrem de sensibilă și foarte specifică. În același timp, cel mai mult nivel inalt antigenul se găsește în 1-4 zile de boală. În ciuda avantajelor evidente ale ELISA, care includ sensibilitatea ridicată, posibilitatea unei contabilități cantitative instrumentale stricte și simplitatea instalării reacției, utilizarea pe scară largă a acestei metode este limitată din cauza necesității de echipamente speciale.

Anticorpii monoclonali, fragmentele de imunoglobuline, anticorpii sintetici, colorarea cu argint LPS și alte progrese tehnologice sunt recomandate pentru a spori sensibilitatea și specificitatea diferitelor metode de detectare a antigenului serologic.

Adesea, nu este posibil să se detecteze antigenul unui agent infecțios chiar și atunci când se utilizează reacții extrem de sensibile pentru a detecta AG al agentului patogen în substraturile biologice ale corpului, deoarece o parte semnificativă a substanțelor antigenice, aparent, se află în biotestul în forma complexelor imune din organism. La examinarea pacienților cu dizenterie acută confirmată bacteriologic, au fost observate rezultate pozitive ale determinării antigenului prin CSC, conform unor rapoarte, doar în 18% din cazuri.

TELEVIZOR. Remneva și colab. propune utilizarea ultrasunetelor pentru a dezintegra complexele de anticorpi cu particule patogene și apoi determina antigenul patogen în CSC la rece. Metoda a fost folosită pentru diagnosticarea dizenteriei; ca material de cercetare au fost folosite probe de urină de la pacienți cu infecții intestinale acute.

Utilizarea reacției de precipitare pentru detectarea antigenului în dizenteria acută nu este justificată din cauza sensibilității și specificității sale scăzute. Credem că specificitatea oricărei metode de indicare a antigenelor Shigella poate fi crescută semnificativ prin utilizarea anticorpilor monoclonali împotriva Shigella.

Reacția de coaglutinare este, de asemenea, una dintre metodele de diagnosticare rapidă a shigelozei, precum și antigenele agenților patogeni ai unui număr de alte infecții. Cu shigeloza, antigenele agenților patogeni pot fi determinați din primele zile ale bolii pe tot parcursul perioadei acute, precum și în decurs de 1-2 săptămâni după încetarea excreției bacteriene. Avantajele reacției de coaglutinare sunt ușurința realizării diagnosticului, stabilirea reacției, economie, viteză, sensibilitate și specificitate ridicată.

Când se efectuează diagnostice prin determinarea antigenelor Shigella încă de la începutul bolii, este cel mai eficient, potrivit multor autori, să se examineze fecalele pacienților. Odată cu dezvoltarea bolii, posibilitatea de a detecta antigenele Shigella în urină și salivă scade, deși aceștia se găsesc în fecale cu aproape aceeași frecvență ca la începutul bolii. Trebuie avut în vedere că în primele 3-4 zile ale bolii, fecalele pentru antigen sunt examinate ceva mai eficient în RPHA. În mijlocul bolii, RPHA și ARNb sunt la fel de eficiente, iar începând din a 7-a zi, ARNb este mai eficient în căutarea antigenului Shigella. Aceste caracteristici se datorează distrugerii treptate a celulelor Shigella și a antigenelor acestora din intestinele pacientului în cursul bolii. Antigenele Shigella excretate în urină sunt relativ mai mici decât antigenele din fecale. Prin urmare, este recomandabil să se examineze urina în RNAt. În urina femeilor, spre deosebire de urina bărbaților, din cauza probabilei contaminări fecale, antigenii Shigella sunt la fel de des detectați folosind TPHA și ARNb.

Deși antigenul este semnificativ mai des (94,5 - 100%) detectat în acele probe de fecale din care este posibilă izolarea Shigella decât în ​​acele probe din care Shigella nu este izolată (61,8 - 75,8%), cu paralele bacteriologice și serologice ( pentru antigen) în studiul probelor fecale de la pacienții cu dizenterie în general, shigella a fost izolată doar din 28,2 - 40,0% din probe, iar antigenul a fost găsit în 65,9 - 91,5% din probe. Este important de subliniat faptul că specificitatea de specie a antigenului detectat corespunde întotdeauna cu specificitatea anticorpilor serici, al căror titrul crește la maxim în dinamică. Când se concentrează pe un titru de anticorpi de diagnostic condiționat, uneori pot fi observate discrepanțe în specificitatea unor astfel de anticorpi și a antigenului detectat. Această discrepanță se datorează fiabilității diagnostice insuficiente a unei singure determinări a activității anticorpilor serici. În acest caz diagnostic etiologic trebuie setat în funcție de specificitatea antigenului detectat.

Metoda PCR pentru sarcina de detectare directă a semnelor agentului patogen este apropiată de metodele de indicare a antigenelor. Vă permite să determinați ADN-ul agentului patogen și se bazează pe principiul replicării naturale a ADN-ului, inclusiv derularea dublei helix ADN, divergența catenelor de ADN și adăugarea complementară a ambelor. Replicarea ADN-ului poate să nu înceapă în niciun moment, ci doar în anumite blocuri de pornire - secțiuni scurte dublu catenare. Esența metodei constă în faptul că prin marcarea cu astfel de blocuri un segment de ADN specific doar pentru o anumită specie (dar nu și pentru alte specii), este posibilă reproducerea (amplificarea) în mod repetat a acestei anumite regiuni. Sistemele de testare bazate pe principiul amplificării ADN-ului, în majoritatea cazurilor, fac posibilă detectarea bacteriilor și virușilor patogeni pentru oameni, chiar și în cazurile în care nu pot fi detectate prin alte metode. Specificitatea sistemelor de testare PCR (cu alegerea corectă a primerilor specifici taxonului, excluderea rezultatelor fals pozitive și absența inhibitorilor de amplificare în biotestele) evită, în principiu, problemele asociate cu antigenele cu reacție încrucișată, oferind astfel o specificitate foarte mare. Determinarea poate fi efectuată direct în material clinic care conține un agent patogen viu. Dar, în ciuda faptului că sensibilitatea PCR poate atinge o limită posibilă din punct de vedere matematic (detecția a 1 copie a șablonului ADN), metoda nu este utilizată în practica de diagnosticare a shigelozei din cauza costului său relativ ridicat.

În practica clinică largă, cele mai utilizate în rândul metodelor de cercetare serologică sunt metodele bazate pe determinarea nivelului și dinamicii anticorpilor serici la presupusul agent cauzator al bolii.

Unii autori au determinat anticorpi la Shigella în coprofiltrați. Coproanticorpii apar mult mai devreme decât anticorpii serici. Activitatea anticorpilor atinge un maxim la 9-12 zile, iar la 20-25 de zile nu sunt de obicei detectați. R. Laplane și colaboratorii sugerează că acest lucru se datorează distrugerii anticorpilor din intestin sub acțiunea enzimelor proteolitice. Coproanticorpii nu pot fi detectați la oamenii sănătoși.

W. Barksdale şi colab., T.H. Nikolaev și colab. raportează o creștere a eficienței de descifrare a diagnosticului și depistare a convalescenților prin determinarea simultană a serului și a coproanticorpilor.

Detectarea aglutininelor în titrurile diagnostice este posibilă cu dizenterie confirmată bacteriologic doar la 23,3% dintre pacienți. Sensibilitatea limitată a RA se manifestă și prin titruri insuficient de mari de aglutinine detectate cu ajutorul acesteia. Există dovezi ale sensibilității inegale a RA în diferite forme etiologice de infecție cu shigeloză. Potrivit lui A.A. Klyucharev, anticorpii cu un titru de 1:200 și peste sunt detectați folosind RA numai la 8,3% dintre pacienții cu dizenterie Flexner și chiar mai rar cu dizenterie Sonne. Rezultatele pozitive ale reacției sunt nu numai mai des, dar și la titruri mai mari se observă cu dizenteria Flexner I-V și Flexner VI decât cu dizenteria Sonne. Rezultatele pozitive ale PR apar de la sfarsitul primei saptamani de boala si se inregistreaza cel mai adesea in a doua sau a treia saptamana. Primele 10 zile de boală reprezintă 39,6% din toate rezultatele reacțiilor pozitive. Potrivit lui A.F. Podlevsky și colab., aglutininele în titrurile diagnostice sunt detectate în prima săptămână a bolii la 19% dintre pacienți, în a doua săptămână - la 25% și în a treia - la 33% dintre pacienți.

Frecvența rezultatelor pozitive ale RA și înălțimea titrurilor de anticorpi detectate cu ajutorul acestuia depind direct de severitatea cursului infecției cu shigeloză. Potrivit lui V.P. Zubareva, utilizarea terapiei cu antibiotice nu reduce frecvența rezultatelor pozitive ale RA, cu toate acestea, atunci când antibioticele sunt prescrise în primele 3 zile ale bolii, aglutininele sunt detectate la titruri mai mici.

RA are specificitate limitată. La examinarea persoanelor sănătoase s-au obținut rezultate pozitive ale PR în 12,7% din cazuri, în 11,3% din cazuri s-au observat reacții de grup. Datorită relației antigenice dintre bacteriile Flexner I-V și Flexner VI, reacțiile încrucișate sunt observate în special în formele etiologice corespunzătoare de infecție cu shigeloză.

Odată cu apariția unor metode mai avansate de serodiagnostic al infecției cu shigeloză, RA și-a pierdut treptat semnificația. Valoarea diagnostică a reacției de aglutinare („reacția de dizenterie a lui Vidal”) (RA) în dizenterie este estimată de diverși cercetători în mod ambiguu, cu toate acestea, rezultatele muncii majorității autorilor indică o sensibilitate și specificitate limitate a acestei metode.

Cel mai adesea, pentru determinarea anticorpilor, se folosește o reacție indirectă (pasivă) de hemaglutinare (RPHA). Studii detaliate ale valorii diagnostice a reacției de hemaglutinare pasivă (RPHA) în infecția cu shigeloză au fost efectuate de A.V. Lullu, L. M. Schmuter, T. V. Vlohom și o serie de alți cercetători. Rezultatele lor ne permit să concluzionam că RPHA este una dintre cele mai eficiente metode pentru diagnosticul serologic al dizenteriei, deși nu este lipsită de unele dezavantaje comune inerente metodelor acestui grup.

Un studiu comparativ al sensibilității în RPHA de dizenterie și reacția de aglutinare arată o mare superioritate a primei metode. Potrivit lui A. V. Lullu, titrurile medii de RPHA în această boală depășesc titrurile medii de RA de 15 ori (la apogeul bolii de 19-21 de ori), anticorpii în nivel ridicat (1:320 - RPHA) sunt detectați atunci când se utilizează De 4,5 ori mai des decât în ​​titru (1:160 la stabilirea reacției de aglutinare). Cu dizenterie acută confirmată bacteriologic, o reacție pozitivă a RPHA în titrurile de diagnostic este observată în timpul examinării a 53-80% dintre pacienți.

Hemaglutininele sunt detectate de la sfârșitul primei săptămâni de boală, frecvența de detecție și titrul de anticorpi cresc, atingând un maxim până la sfârșitul săptămânii a doua și a treia, după care titrul acestora scade treptat.

Există o dependență clară a frecvenței rezultatelor pozitive ale titrurilor de RPHA și hemaglutinină de severitatea și natura cursului infecției cu shigeloză. Studiile relevante au arătat că, în cazul formelor șterse și subclinice de infecție, rezultatele pozitive ale RPHA au fost obținute mai rar decât în ​​cazul dizenteriei acute pronunțate clinic (52,9 și, respectiv, 65,0%), în timp ce la titruri de 1:200 - 1:400, doar 4 au răspuns, 2% din seruri (cu o formă pronunțată clinic - 31,2%), iar cu forme prelungite și cronice, rezultate pozitive ale RPHA au fost observate la 40,8% dintre pacienți, inclusiv doar 2,0% la un titru de 1:200. Există, de asemenea, rapoarte de sensibilitate diferită a RPHA în anumite forme etiologice de infecție cu shigeloză. Potrivit lui L.M. Schmuter, cele mai mari titruri de hemaglutinină sunt observate în dizenteria Sonne și titruri semnificativ mai mici în dizenteria Flexner I-V și Flexner VI. Tratamentul antibacterian început în stadiile incipiente ale bolii, datorită scăderii duratei și intensității iritației antigenice, poate determina apariția hemaglutininelor în serul sanguin la titruri mai mici.

Ca și reacția de aglutinare, RPGA nu face întotdeauna posibilă recunoașterea cu acuratețe a formei etiologice a infecției cu shigeloză, care este asociată cu posibilitatea reacțiilor de grup. Reacțiile încrucișate se observă în principal în dizenteria Flexner - între dizenteria Flexner I-V și Flexner VI. Răspunsul imun umoral la mulți pacienți este slab exprimat. De asemenea, nu este exclusă posibilitatea de aglutinare încrucișată din cauza antigenelor comune. Cu toate acestea, avantajele acestei metode includ simplitatea stabilirii reacției, capacitatea de a obține rapid rezultate și o eficiență de diagnosticare relativ ridicată. Un dezavantaj semnificativ aceasta metoda este că diagnosticul poate fi stabilit nu mai devreme de ziua a 5-a de boală, titrurile de anticorpi diagnostice maxime pot fi determinate până în a 3-a săptămână de boală, astfel încât metoda poate fi clasificată ca „retrospectivă”.

Pentru diagnosticarea dizenteriei se mai propune determinarea nivelului complexelor imune circulante specifice reprezentate de antigenul O S.sonnei, conectat la un anticorp specific, folosind o „versiune sandwich” indirecta a imunotestului enzimatic datorita sensibilitatii sale ridicate. si specificitate.Cu toate acestea, metoda se recomanda a fi folosita numai cu 5 zile de boala.

La pacienții cu dizenterie, încă de la începutul bolii, se constată o creștere specifică a activității de bacteriofixare a sângelui datorită activității de legare a antigenului a eritrocitelor. În primele 5 zile ale AII, determinarea activității de legare a antigenului a eritrocitelor face posibilă stabilirea etiologiei bolii în 85-90% din cazuri. Mecanismul acestui fenomen nu este bine înțeles. Se poate presupune că baza sa este legarea de către eritrocite datorită receptorilor lor C3v (la primate, inclusiv oameni) sau receptorilor Fcy (la alte mamifere) a complexului imun antigen-anticorp.

Printre metodele relativ noi de înregistrare a unui răspuns imun specific la nivel celular, se atrage atenția asupra determinării limfocitelor de legare la antigen (ASL) care reacționează cu un antigen specific, semnificativ din punct de vedere taxonomic. Detectarea ASL se realizează prin diferite metode - aglutinarea pereche a limfocitelor cu un antigen, imunofluorescența, RIA, adsorbția limfocitelor pe coloane care conțin antigen, aderența celulelor mononucleare pe capilarele de sticlă, reacția indirectă de rozetă (RNRO). Trebuie remarcat faptul că astfel de metode extrem de sensibile de înregistrare ASL precum ELISA și RIA, adsorbția limfocitelor pe coloane care conțin antigen sunt relativ complexe din punct de vedere tehnic și nu întotdeauna disponibile pentru o aplicare largă. Lucrările unui număr de autori au arătat sensibilitatea și specificitatea ridicată a PHPR pentru detectarea ASL în diferite boli. O serie de cercetători au dezvăluit o relație strânsă între conținutul ASL din sângele pacienților cu diverse patologii și forme, severitatea și perioada bolii, tranziția acesteia la o perioadă prelungită sau prelungită. forma cronica.

Unii autori consideră că, determinând nivelul ASL în dinamica bolii, se poate judeca eficacitatea terapiei. Majoritatea autorilor consideră că dacă are succes, numărul de ASL scade, iar dacă eficacitatea tratamentului este insuficientă, se înregistrează o creștere sau o stabilizare a acestui indicator. S-a raportat că ASL poate fi utilizat pentru a cuantifica sensibilizarea la țesuturi, antigene bacteriene și antibiotice, ceea ce este important. valoare de diagnostic. Metoda ASL a fost folosită într-o măsură limitată pentru diagnosticarea dizenteriei.

Oportunitate depistare precoce ASL, deja în primele zile după infecție, este foarte importantă pentru diagnosticul precoce și tratamentul în timp util, care este necesar pentru clinician.

Astfel, datele prezentate în revizuire arată că, având în vedere prevalența pe scară largă a dizenteriei, sensibilitatea insuficientă și apariția târzie a rezultatelor pozitive ale multor metode de diagnostic, este recomandabil să se dezvolte potențialul de diagnostic pentru depistarea acestei infecții. Datele obținute în multe boli infecțioase privind eficiența ridicată a metodei ASL, apariția timpurie a rezultatului său pozitiv, determină perspectiva studierii și aplicării acestei metode în shigeloză.

Bibliografie

1 Yushchuk N.D., Brodov L.E. Diagnosticul diferential si tratamentul infectiilor intestinale acute// Ros. și. gastroenterol., hepatol., coloproctol. - 2000. - 10, Nr. 5. - P. 13 - 16. - Rus. – ISSN 1382-4376. – RU.

2 Shuvalova E.P., Zmushko E.I. Diagnosticul sindromic al bolilor infecțioase. // Manual. - Sankt Petersburg: Peter, 2001. - S. 138-141.

3 Karalnik B.V., Amireev S.A., Syzdykov M.S. Principii și posibilități ale metodelor de diagnostic de laborator și interpretarea rezultatelor acestora în munca unui epidemiolog // Metodă. recomandat - Almaty. - 1997. - 21 p.

4 Karalnik B.V. Diagnosticul serologic al infecțiilor bacteriene intestinale. // Metoda. recomandări. - Almaty, 1973. - 3-20 p.

5 5. Nurkina N.M. Eficacitatea comparativă a metodelor de diagnostic serologic al dizenteriei cu ajutorul eritrocitelor sensibilizate: Rezumat al tezei. dis. cand. - Almaty, 1984. - 22 p.

6 Karalnik B.V., Nurkina N.M. Diagnosticul serologic complex al dizenteriei. // Metoda. recomandări. - Almaty, 1983. - 24 p.

7 Erkinbekova B.K. Metoda de indicare a antigenelor Shigella în studii sanitare și epidemiologice în dizenterie: Rezumat al tezei. insulta. ...candidat la științe medicale. - Almaty, 1995. - 18 p.

8 Nikitin V.M., Georgita F.I., Plugaru S.V. si etc. Metode accelerate diagnosticul bolilor infectioase. // Chișinău. - 1987. - 106 p.

9 Neverov V.A. Strategia și tactica de diagnostic și tratament al infecțiilor intestinale acute. // Sankt Petersburg - 1996. - 12 p.

10 Vorobyov A.A. Microbiologie medicală, virologie și imunologie. // M.- 2004.- S. 7-8.

11 Ivanov K.S., Ivanov A.I. Diagnosticul infecțiilor diareice acute // Klin. Miere. - 1992. - Nr. 7-8 - S. 64-69.

12 Ciudin L., Pencu E., Mihai, I. et al. Identificarea serologică a tulpinilor de Shigella flex neri prin reacția de coaglutinare // Roum. Arc. Microbiol.Immunol. -1995/ - Vol/ 54(4). - P. 295 - 311.

13 Lindberg A.A., Cam P.D., Chan N. et al. Shigeloza în Vietnam: studii miologice seroepidelor cu utilizarea antigenelor lipopolizaharide în teste imunoenzimelor // Rev. Infecta. Dis. - 1991. - Vol. 13, Suppl 4. - P.231 - 237.

14 Sloper S. Shigella. // În: Infecția cu Enterobacteriaceae. Leipzig.- 1968.- P. 375-441.

15 Jacobs J., Rudensky B., Dresner J. et al. Comparația a patru teste de laborator pentru diagnosticul diareei asociate cu Clostridium difficile // Eur. J. Clin. Microbiol. Infectează.Dis. - 1996. - Vol. 15(7). - P. 561-566.

16 Klyucharev A.A., Poleshko D.V., Vershenya M.I. Caracteristicile clinice și epidemiologice ale cursului dizenteriei în ultimii ani. // Asistența medicală din Belarus. - 1973. - Nr. 11. - P. 54-56.

17 Gusarskaya I.L. Caracteristicile cursului clinic al dizenteriei Sonne în stadiul actual și unele aspecte ale prevenirii acesteia. // În cartea: Probleme ale bolilor infecţioase. - Vologda. - 1970. -S. 23-27.

18 Shitov I.A., Trinitatskaya M.I. Durata bacterioexcreției la pacienții cu dizenterie acută. // În cartea: Infecţii intestinale.- Partea 2.- L. 1972.- S. 161-163.

19 Avdeeva T.A. Studiul microbiologic cantitativ al dizenteriei (rezultatele dezvoltării și aplicării metodei de studiere a modelelor clinice, microbiologice și epidemiologice ale dizenteriei). Abstract dis. pentru competitie om de stiinta Etapa. Dr. med. Științe. L., 1964, 28 p.

20 Tillet H., Thomas M. Cultura fecalelor în diagnosticul dizenteriei Sonne: o metodă statistică pentru estimarea ratei reale de izolare. // Îmbarcare. J. Epidemiol.- 1974.- vol. 3.- R. 177-181.

21 Khaimzon B.I. Reacția de creștere a titrului fagilor în diagnosticul dizenteriei acute la adulți. Abstract dis. pentru competitie om de stiinta Etapa. poate sa. Stiinte Medicale Voronej, 1965, 16 p.

22 Vilkomirskaya T.S. Materiale privind studiul sensibilității și specificității reacției de creștere a titrului fagilor (RNF) în diagnosticul dizenteriei. // În cartea: Probleme de imunologie a bolilor infecțioase și alergice. Ufa.- 1970.- S. 48-49.

23 Ivanov F.M. Valoarea comparativă a metodelor de însămânțare, de creștere a titrafagului și de detectare a substanțelor antigenice în diferite stadii ale procesului dizenteric. Abstract dis. pentru competitie om de stiinta Etapa. poate sa. Stiinte Medicale Orenburg, 1963, 10 p.

24 Vilkomirskaya T.S. Despre semnificația clinică și epidemiologică a reacției de creștere a titrului fagilor (RNF) în diagnosticul dizenteriei în Ufa. Abstract dis. pentru competitie om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Științe. Ufa, 1971, 24 p.

25 Mazurin N.D., Rozina-Itskina Ts.S. Reacția de creștere a titrului fagilor în diagnosticul dizenteriei. // JMPEI.- 1963. - Nr. 1.- P. 113-116.

26 Golyusova E.V., Trokhimenko M.Z. Despre semnificația testului Tsuverkalov în diagnosticul dizenteriei acute la copii. // Infecţii intestinale (Kiev).- 1972. - emisiune. 5. - S. 97-99.

27 Fradkin V.A., Lodinova L.M. Utilizarea alergenilor pentru diagnosticul infecțiilor intestinale cronice. // În cartea: Bacteriopurtător și forme cronice de boli infecțioase. - partea 2. - M.-1975.- S. 213-215.

28 Lukașevici K.K. Metoda alergică diagnosticul de dizenterie. // În cartea: Câteva probleme ale clinicii și alergii în patologia infecțioasă.Kuibyshev. - 1970. - P. 41-43.

29 Cechelnitsky V.M. Valoarea reacției Tsuverkalov în diagnosticul dizenteriei acute. // În cartea: Imunologie și infecții intestinale.Voronej.- 1970.- P. 110-114.

30 Bogdanov I.L. Alergia în patogeneza, clinica și terapia bolilor infecțioase. // M.- 1974.- 245 p.

31 Gorchakova G.A. Disenterin (un medicament pentru testarea intradermică în diagnosticul dizenteriei). Abstract dis. pentru competitie om de stiinta Etapa. dr. Stiinte Medicale Odesa, 1969, 19 p.

32 Lubitskaya N.A., Polyak A.I. Imunodiagnostic al dizenteriei la copii // VI All-Union. conf. conform clinicii biochimie, morfologie și imunol.infekts. Bol.: Rezumate ale rapoartelor. - Riga, 1983. - S. 106-107.

33 Furman A.A. Studiu comparativ unele metode accelerate de diagnostic de laborator al dizenteriei si colienteritei. Abstract dis. Pompa om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Științe. Kiev, 1970, 19 p.

34 Mihailov I.F., Pers I.F. Identificarea relațiilor antigenice dintre bacterii grupa intestinală metoda anticorpilor fluorescenți. ZHMEI, 1975, nr. 5, S. 97-103.

35 Shmuter L.M. Reacții de hemaglutinare indirectă și neutralizare a anticorpilor în diagnosticul dizenteriei. Abstract dis. pentru competitie om de stiinta canal pas Miere. Științe. Harkov, 1968, 19 p.

36 Evdokimova T.V., Podlevsky A.F., Yafaev R.Kh. Paralele clinice și de laborator în dizenteria acută la adulți. - JMPEI, 1974, Nr. 6, S. 82-85.

37 Mogilev V.E. Hemaglutinarea pasivă în dizenterie. Rezumat al tezei pentru competitie om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Științe. Kuibyshev, 1968, 20 p.

38 Rybakova N.A. Utilizarea reacției de inhibare a hemaglutinării pasive pentru diagnosticul dizenteriei Sonne într-un laborator practic. – Laboratorul. cazul, 1975, nr. 3, p. 168-170.

39 Ivanov F.M. Valoarea comparativă a metodelor de însămânțare, de creștere a titrafagului și de detectare a substanțelor antigenice în diferite stadii ale procesului dizenteric. Abstract dis. pentru competitie om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Științe. Orenburg, 1963, 10 p.

40 Godovanny B.A., Litinsky Yu.I., Bodisko V.P. Determinarea cantitativă a antigenului Shigella Sonne în urina pacienților și purtătorilor. – Laboratorul. cazul, 1974, nr. 6, p. 360-363.

41 Kashkin G.S. Studiul dinamicii antigenelor microbiene din sânge și tractul urinar în dizenteria acută. - În cartea: Probleme ale bolilor infecţioase. Vologda, 1970, p. 47-50.

42 Nurkina N.M. Eficacitatea comparativă a metodelor de diagnostic serologic al dizenteriei cu ajutorul eritrocitelor sensibilizate: Rezumat al tezei. dis. cand. - Almaty, 1984. - 22 p.

43 Li Van Ho., Rubtsov I.V., Tregub A.V., Remneva T.V. Valoarea diagnostică comparativă a unor metode de depistare a antigenelor dizenterice în substraturile corpului pacientului. // J. microbiol. - 1989. - Nr. 1. - S. 57-61.

45 Sakal N.N. Aplicarea și evaluarea eficacității imunotestului enzimatic în diagnosticul precoce și prognosticul cursului dizenteriei Sonne: Rezumat al tezei. insulta. … cand. Miere. Științe. - Sankt Petersburg, 1993. - 21 p.

46 Rubtsov I.V., Pimenova G.N., Kulakova V.N. La evaluarea statistică a datelor clinice și de laborator ale ELISA // Lucrările aniversare științifice și practice. conferințe, dedicate Aniversarea a 80 de ani de la formarea Departamentului de Boli Infecțioase MMA numită după. I.M.Sechenov (22-23 mai 2003). - M.: MMA im. I.M. Secenov. - 2003. - S. 152-153.

47 Downes F.P., Green J.K. et al. Dezvoltarea și evaluarea testului imunosorbent legat de enzime pentru detectarea Shiga – precum toxina I și Shiga – liketoxina II // J. Clin. microbiol. - 1989. - V. 27, nr. 6. - P. 1292-1297.

48 Barbans P.S., Pantyukhina A.N. Metodă de obținere și monitorizare Fav fluorescent - fragmente de anticorpi împotriva proteinelor serice ale persoanelor care au avut febră tifoidă // J. microbiol., epidemiol. și imunobiol. - 1984. - Nr. 2. - S. 102-105.

49 Utilizarea antigenelor sintetice pentru diagnosticul bolilor infecțioase //Techn.ser/WHO. - 1989. - Nr. 784. - P. 1-74.

50 Ekwall E., Norberg T., Swensons S.B. et al. identificarea specifică a antigenului salmonella serogrup E O3 prin imunofluorescență și coaglutinare cu antiser produs 1 de un trizaharid sintetic – ser bovin albuminglycoconjugate // J. Clin.Microb. - 1994. - 19, nr. 5. – P. 699-702.

51 Lee Kuo-Ka, Ellis A.E. Colorare rapidă și sensibilă cu argint-lipopolisaharidă utilizând Phast System în electroforeză orizontală rapidă pe gel de poliacrilamidă //Electroforeză. - 1989. - V. 10, nr. 10. - P. 729-731.

52 Tempieva T.V., Yuditskaya N.M., Litinsky Yu.I., Lee Wam Ho. Dezintegrarea cu ultrasunete a complexelor imune pentru detectarea antigenelor Shigella în urina pacienților cu dizenterie // Lab. caz. - 1988. - Nr. 9. - S. 64-66.

53 Chaika N.A. Studiul infecțiilor intestinale și al agenților patogeni ai acestora folosind metode imunologice moderne // Infecții intestinale acute. - L.: Leningrad. institutul de cercetare epid. si microfon. - 1987. - emisiune. II. - P.3-8.

54 Khazenson L.B., Chaika N.A. Baza imunologică pentru diagnosticul și analiza epidemiologică a infecțiilor intestinale. – M.: Medicină. –1987. - 112 p.

55 Kashkin G.S. Studiul dinamicii antigenelor microbiene din sângele și urina copiilor cu dizenterie acută. // În cartea: Probleme ale bolilor infecţioase. - Vologda. – 1970.- S. 47-50.

56 Godovannyy B.A., Litinsky Yu.I., Bodisko V.P. Determinarea cantitativă a antigenului Shigella Sonne în urina pacienților și purtătorilor de bacterii. // Laborator. caz. - 1970. - Nr 6. - S. 360-363.

57 Rybakova N.A., Rybakov D.A. Utilizarea RNGA și RNAt în investigarea epidemiologică a bolilor de etiologie dizenterie. – Proceedings of the Leningrad Research Institute of Epidemiol. și microbiol. numele lui Pasteur. -T. 56. - L., 1981. - S. 58-61.

58 Vasilyeva A.V. Evaluarea comparativă a diferitelor metode de diagnostic serologic al dizenteriei Sonne. // Infecții intestinale. - 1972. - Emisiune. Nr. 5. - S. 129-132.

59 Dubinina I.G., Shcherbo S.N., Makarov V.B. Metode de reacție în lanț a polimerazei în practica de laborator. // Diagnosticare clinică de laborator. - 1997, nr. 7. - P. 4 - 6.

60 Turkadze K.A., Podkolzin T.A., Kokoreva L.N. Eficiența comparativă a utilizării PCR și a metodei bacteriologice în diagnosticul salmonelozei și shigelozei // Lucrările aniversare științifice și practice. conferințe, dedicate Aniversarea a 80 de ani de la formarea Departamentului de Boli Infecțioase MMA numită după. I.M.Sechenov (22-23 mai 2003). - M.: MMA im. I.M. Secenov. - 2003. - S. 172-173.

61 Akhtamov M.A., Akhmedov A.A. Studiu comparativ al eficacității unora reacții serologiceîn diagnosticul de laborator al dizenteriei acute // Med. Jurnalul Uzbekistanului. - 1984. -№1. - S. 29-31.

62 Borisov V.A. La o evaluare comparativă a unor metode serologice de diagnosticare a dizenteriei. – Laboratorul. cazul, 1972, nr. 9, p. 564-566.

63 Laplane R., Be, gue P., Omanga V. Anticorps seriques et copro-anticorps dansles infections bacteriennes digestives de l, enfant. // Taur. Acad. nat. med. - 1975. - Vol. 159. - Nr. 7. - P. 596-600.

64 Barksdale W., Ghoda A. Agglutinating anticorpi in serum and faeses.// J. Immunol. - 1951. - Vol. 66. – P. 395 – 401.

65 Nikolaeva T.A., Kukain E.M., Khazenson L.B. Natura imunochimică a anticorpilor copro și serici la pacienții cu dizenterie Sonne și alte ICD. - Tez. raport La științific-practic. conf., dedicat 50 de ani de la LeningrNIIEM le. Pasteur. L., 1973, p. 53-54.

66 Lullu A.V. Aplicarea reacției de hemaglutinare indirectă pentru diagnosticul și studiul imunologiei dizenteriei acute. // Rezumat. dis. pentru competitie om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Științe. - Tartu. - 1963. - 10 p.

67 Klyucharev A.A. Materiale pentru studiul dizenteriei în Belarus. Poleshko D.V., Vershenya M.I. Caracteristicile clinice și epidemiologice ale cursului dizenteriei în ultimii ani. // Rezumat. dis. pentru competitie pasul academic. dr. Miere. Științe. - Kaunas. - 1970. - 32 p.

68 Podlevsky A.F., Tselinskaya N.M., Zhuravleva L.V., Buchel N.E. Reacția de hemaglutinare indirectă în dizenterie la pacienți de diferite vârste. // În carte: Probleme de epidemiologie și prevenire a infecțiilor focale intestinale și naturale. L., 1971, S. 93-99.

69 Zaitlenok M.A., Eremina A.M., Subbotina Yu.L. Studii serologice în infecțiile intestinale acute neconfirmate bacteriologic // Imunologie și imunopatologie. - Voronej, 1983. - S. 35-37.

70 Borisov V.A., Orlik N.S., Kirilyuk M.A. Răspunsul imun la pacienții cu dizenterie cu eliminare prelungită a shigella. // Toată Unirea. conf. privind biochimia clinică, morfologia și imunologia bolilor infecțioase. Tez. raport - Riga. - 1977. - S. 377-378.

71 Chilingaryan A.V. Rezultatele aplicării paralele a modelului pulmonar, a testului de hemaglutinare indirectă și a testului de aglutinare pentru depistarea anticorpilor antidizenterici în sângele persoanelor sănătoase. // În cartea: Infecții intestinale acute. Dizenterie, escherichioză, salmoneloză. - L. - 1970. - S. 93-101.

72 Patton C.M., Gangorosa E.J., Weissman J.B. et al. Valoarea diagnosticului de hemaglutinare inderectă în seroepidemiologia infecțiilor cu Shigella. // J.ofClin. Microb. - 1976. - Vol. - 23. - P. 143-148.

73 Martinez J. Studiu epidemiologic al dizenteriei bacteriene. // Bol. ofic. sanitaţie panamer. - 1973. - Vol. 75. - P. 213-224.

74 Musabaev I.K., Abubakirova F.Z. Dizenteria bacteriană. - Tașkent - 1973. - 258 p.

75 Dulatova M.V., Golovacheva S.N., Savitskaya O.V. Principiul RPGA în diagnosticarea expresă a infecțiilor și imunității. // În carte: Pregătiri pentru diagnosticare expresă. - L., 1981. - S. 31-42.

76 Safonova N.V. Aplicarea reacției de hemaglutinare indirectă în focarele de infecție intestinală acută pentru identificarea persoanelor infectate și căutarea surselor. - L., 1974. - 11s.

77 Solodovnikov Yu.P., Kalashnikova GK, Subbotina Yu.L., Bobkin SV Reacția de hemaglutinare indirectă în studiul anticorpilor în dizenteria Sonne sănătoasă, bolnavă și recuperată. - ZHMEI, 1971, Nr. 1. - P.13-18.

78 Provotorov V.Ya. La problema tratamentului pacienților cu dizenterie. - În carte: Îngrijirea comunitară pentru pacienții infecțioși și problemele de tratament al pacienților infecțioși. Saratov, 1973. - S. 153-155.

79 Karalnik B.V. Metodologia și tactica imunodiagnosticului patologiei infecțioase. - În cartea: Probleme de imunologie clinică și diagnosticare imunologică. Alma-Ata, 1988. - 10 p.

80 Kaplin V.I., Klevtsova G.A., Koryukhina I.P. etc.Reacţia specifică a sângelui în perioada initiala dizenterie și infecții cu salmonella și noi oportunități pentru diagnosticul specific precoce al infecțiilor intestinale acute // VI All-Union. conf. conform clinicii biochimie, morfologie și imunol. infectioase Bol.: Rezumate ale rapoartelor. – Riga, 1983. – P.76-77.

81 Savilov E.D., Astafiev V.A., Mamontova L.M., Volodin Yu.F. Caracteristici epidemiologice ale dizenteriei în Siberia de Est. //Novosibirsk „Nauka”, 1994. - P.42-43.

82 Ivanov K.S., Ivanov A.I. Diagnosticul infecțiilor diareice acute //Klin. Miere. - 1992. - Nr. 7-8 - S. 64-69.

83 Karalnik B.V. Eritrocitele, receptorii lor și imunitatea. // Succesul biol. moderne, M. - 1992. - v. 112, Nr. 1. - P.52-61.

84 Garib F.Yu., Zalyalieva M.V. Metode de studiu a subpopulaţiei de limfocite la om în diverse condiţii patologice // Metodă.recomandări. - Tașkent, 1989. - 17p.

85 Bahrg. Modabber F.Z. // J. Immunol.Meth. - 1980. - V. 38, Nr. 3-4. - P. 203-216.

86 Tyagotin Yu.A. // Probleme de examinare și tratare a pacienților cu boli ale sistemului sanguin. - L., 1975. - S. 21-25.

87 Novikov D.K., Novikova V.I. Metode celulare de imunodiagnostic. // Minsk, 1979. - 222 p.

88 Smirnov B.N., Toropova N.I., Mokhova G.A. și altele // Proceedings of the All-Union Scientific Conference „Problems of Medical Biotechnology”. oct. 1988. - L., 1990. - S. 114-116.

89 Slavko E.A., Deryabin P.N., Karalnik B.V. Determinarea limfocitelor care leagă antigenul ca metodă de diagnosticare precoce a salmonelozei și dizenteriei // Healthcare of Kazakhstan.-Almaty.- 1999. - Nr. 5-6.-C.43-45.

90 Karalnik B.V., Kozhageldieva A.A., Karabekov A.Zh., Denisova T.G., Raipov O.R. Monitorizarea eficacității tratamentului yersiniozei cauzate de Yersinia enterocolitica // Medicină. - Almaty.- 2004. - Nr. 4. - P. 51-53.

91 Karalnik B.V., Denisova T.G., Plazun A.A. Limfocite de legare de antigen cu specificitate tuberculină la iepuri infectați cu M. bovis în dinamica tratamentului tuberculozei // Probleme de tuberculoză și boli pulmonare. -M.-2006.- Nr 5.-S.48-53.

92 Karalnik B.V., Karabekov A.Zh., Denisova T.G., Kozhageldieva A.A., Zhunusova G.B. Diagnosticul diferenţial al brucelozei şi yersiniozei intestinale cauzate de Yersinia enterocolitica serovar O9 // Medicină.-Almaty.-2004.- Nr. 3.- P.155-157.

93 Karalnik B.V., Denisova T.G., Zhunusova G.B., Fedosov S.A., Zhankin A.A., Ospanov K.S., Mizanbayeva S.U. Eficacitatea diferitelor teste de anticorpi și a testului limfocitelor de legare a antigenului în diagnosticul brucelozei la om. // Imunologie medicală. – S.-P. - 2006. - Vol. 8. - Nr. 4. - S. 567 - 572.

94 Karalnik B.V., Denisova T.G., Grushina T.A., Tugambaev T.I. Analiza răspunsului imun al cobaiilor infectați cu Brucella melitensis // Zh.

95 Karalnik B.V., Berezin V.E., Denisova T.G., Deryabin P.N., Slavko E.A. Dinamica conținutului de limfocite cu receptori pentru virusul Sendai în timpul imunizării cu un virus și un complex imunostimulator al glicoproteinelor sale // Izvest. Min.stiinta si educatie inalta RK. Ser.biol. si medical-Almaty.-1999.- Nr 3.- P.50-51.

96 Garib F.Yu., Gurariy N.I., Aliev Sh.R. Caracteristicile limfocitelor care leagă antigenul în hepatita cronică la copii // Imunologie - 1988. - Nr. 5. pp. 91-93.

97 Finlay B.B., Falkow S.A. O comparație a strategiilor microbiene ale speciilor Salmonella, Shigella și Jersinia // Interacțiunea bacteriană – celulă gazdă, Alban R. Liss. Inc. - 1988. - P. 227-243.

98 Karalnik B.V., Denisova T.G., Keshileva Z.B., Pshenichnaya L.A. et al. Limfocite şi anticorpi care leagă antigenul în diagnosticul sifilisului // Infecţii cu transmitere sexuală. - M. - 1999. - Nr. 5. — p. 34–36.

99 Sakanova L.M., Karalnik B.V., Ukbaeva T.D. et al. Imunoreactivi pentru detectarea limfocitelor care leagă antigenul și aprobarea lor în diagnosticare infecție meningococică// Igienă, epidemiologie și imunobiologie - Almaty. -2002.- Nr 1-2.-S.69-72.

100 Slavko E.A., Deryabin P.N., Karalnik B.V., Karabekov A.Zh. Cu privire la specificitatea limfocitelor de legare a antigenului detectate la pacienții cu boli inflamatorii acute ale tractului gastrointestinal. // Igienă, epidemiologie și imunobiologie. - Almaty. - 1999. - Nr. 2. - S. 102 - 105.

A.M.Sadykova

Diagnosticul de laborator de dizenterie

Tү yin: Zhedel іshek infectiaryn bakylauda, ​​​​dizenterie naқty diagnostics în özu maselesi bolyp tabylady. Dұrys қoyylғan dizenteric bacterian diagnosticează nauқaska vaқytynda em zhүrgіzuge zhane epidemica қarsy sharalardy өtkіzu үshіn manyzdy. Обзордағы көрсетілген мәліметтер, дизентерияның кең таралуын негіздей отырып, сезімталдығының жеткіліксіздігі және көп деген диагностикалық әдістердің оң нәтижесінің кеш анықталуына байланысты, осы инфекцияны анықтауда диагностикалық потенциалды мақсатты түрде дамыту керек екенін көрсетеді.

Tү cerbi dinө zder: diagnostic, dizenterie, antigenbaylanystyrushy adis.

A.M.Sadycova

Diagnosticul de laborator al dizenteriei

Rezumat: Diagnosticul de încredere al diareei este una dintre cele mai importante probleme pentru controlul infecției intestinale acute. Diagnosticul exact al diareei bacterioze are sens vitae pentru tratamentul corect și precis al pacientului și pentru a lua măsurile antiepidemice necesare. Membrii menționați în sondaj, luând în considerare diareea răspândită, arată lipsa de sensibilitate și apariția tardivă a rezultatelor pozitive ale multor metode de diagnostic. Este esențial să se dezvolte potențialul de diagnostic pentru a proiecta infecția.

Cuvinte cheie: diagnostic, dizenterie, metoda limfocitelor cu legare de antigen.