Схема бак обстеження дизентерію. Лабораторна діагностика дизентерії (літературний огляд)

Дизентерія – важка кишкова інфекція, що характеризується гострим початком. Мікробіологічна діагностикадизентерії полягає у виділенні збудника з фекальних мас хворого шляхом посіву у спеціальному поживному середовищі. Захворювання потрібно диференціювати від інших кишкових хвороб та отруєнь. Рання діагностика та вчасне розпочате лікування допоможе уникнути ускладнень.

Важливість своєчасної діагностики

Розпізнати дизентерію на практиці не так просто тому, що існують інфекційні та неінфекційні хвороби зі схожими клінічними проявами. Характерна особливість збудників дизентерії (шигел) – здатність змінювати резистентність до антибактеріальних препаратів. Діагностоване захворювання не вчасно призведе до зараження великої кількостілюдей. Неправильне застосування антибіотиків - причина появи у бактерії стійкості, що призводить до масових заражень та епідемій з летальними наслідками. Джерело зараження - хворі та носії бактерій, що виділяють патогенні мікроорганізми з фекальними масами. Інкубаційний періоддизентерії – 2-3 дні.

Клінічні симптоми хвороби

• Раптова лихоманка із температурою тіла 40 градусів і вище.
• Діарея більше 10 разів на день.
• Поява у випорожненнях крові, слизу, поодиноких випадкахгною.
• Порушення апетиту до повної відсутності.
• Нудота та блювання.
• Різи в животі та правому підребер'ї.
• Біль у прямій кишці.
• Зневоднення.
• Сухий язик з білим нальотом.
• Аритмія.
• Зниження артеріального тиску.
• Розлади свідомості.

Діагностичні процедури

Діагноз дизентерії лікар ставить лише після проведених досліджень.

Діагностика захворювання включає загальноприйняті та спеціальні методи, що встановлюють не тільки остаточний діагноз, а й оцінюють рівень порушень роботи органів травлення. При дизентерії постановка діагнозу відбувається на підставі епідеміологічної картини захворювання, клінічних симптомівта проведених досліджень. Головна лабораторна діагностика – аналіз калу на мікробіологію, що висіює до 80% збудників.Серологічний метод проводять не раніше 5-го дня захворювання, такий тип дослідження доповнює, але не замінює мікробіологічного аналізу. Інші методи:

• Копрологічне дослідження - простий і доступний клінічний метод, що виявляє слиз, прожилки крові, еритроцити, нейтрофіли (до 50-ти в полі зору) та змінені клітини епітелію.
• Ректороманоскопія – дозволяє спостерігати за процесом одужання. Чи не застосовується у дітей.
• Метод алергопроби - допоміжний метод, заснований на взятті шкірної алергічної проби з дизентеріном (метод Цуверкалова)

Загальний аналіз крові

Клітини імунітету знищують збудників дизентерії ще в кишечнику, а тяжкі випадки захворювання виникають при впровадженні бактерій у лімфовузли, з подальшим потраплянням у кровотік. Аналіз крові при дизентерії оцінює стан хворого та дозволяє вчасно реагувати на можливі ускладнення. Підвищення швидкості осідання еритроцитів – лабораторний показник, що характеризує ступінь запалення. Також дизентерія викликає підвищення концентрації паличкоядерних нейтрофілів та моноцитів.

Як здавати кал на копрограму?

Щоб підтвердити захворювання проводять дослідження калу. Копрограма - розгорнуте лабораторне дослідження, що оцінює роботу шлунково-кишкового тракту, швидкість та ефективність травлення та роботу кишечника. Лабораторні методи дослідження випорожнень виявляють фізичні та Хімічні властивостікалу, склад, присутність чужорідних організмів та включень. Вимоги до збору калу:

• Матеріал береться після природного акту дефекації.
• Збір проводять у спеціальний контейнер.
• Заборонено брати на дослідження калу на дизентерію біологічний матеріал, отриманий у результаті клізми.
• Перед дослідженням заборонено використовувати препарати заліза, ставити ректальні свічки, приймати проносне та вживати алкогольні напої.

Мікробіологічна діагностика

Бак посів на дизентерію точно визначає вид збудника.

Бактеріологічна діагностика - збір фекальних мас і наступний посів калу в особливе живильне середовище. Поява колоній патогенних бактерій (шигел) після посіву підтверджує передбачуваний діагноз. Бактеріологічний аналізна дизентерію з точністю визначає збудника, його вид, підвид та сприйнятливість до антибактеріальних засобів, що дозволяє правильно вибрати препарат для лікування.

Досліджуваний матеріал - кал з сторонніми домішками, отриманий природним шляхомабо спеціальною трубкою для ректороманоскопії. Діти беруть мазок спеціальним тампоном (мазок на ВД чи мазок на кишкову групу). Встановлюють чутливість до препаратів шляхом приміщення колоній шигел разом з різними антибіотиками. Якщо поблизу таблетки з антибіотиком продовжується життєдіяльність мікроорганізмів, то для лікування препарат не використовується, якщо мікроорганізми гинуть – призначають лікування таким антибіотиком.

Серологічні дослідження на дизентерію

При негативних чи сумнівних результатах бактеріологічного дослідження застосовується серологічний метод. У калових масаххворого виявляють бактеріальний антиген, а плазмі - специфічні антитіла. Встановити титр антитіл, можна застосовуючи спосіб РИГА, коли - РПГА чи РА. Завис денної колонії шегел використовують як антигени. Мінус методу - достовірні результатиодержують лише через 5 днів після початку захворювання, коли концентрація антитіл досягає потрібного рівня.

Ректороманоскопія

Через те, що збудник дизентерії вражає товсту кишку, ректороманоскопія - значний метод діагностики, але не визначальний. Діагностика полягає у введенні в анальний отвір ректоскопа, обладнаного приладом, що подає повітря. Роздуваючись, кишкова порожнина стає доступною для дослідження. Такий спосіб допомагає оцінити рівень пошкодження кишкового епітелію. При дизентерії стінки кишечника гіперемовані внаслідок розширення судин. На деяких відрізках утворюються ерозії та крововиливи. Проведення ректороманоскопії не вимагає підготовки, але процедура не проводиться, якщо є анальні тріщини або патології анального отвору.

Методичні вказівки для студентів до практичного заняття №28.

Тема заняття:

Ціль: Вивчення методів мікробіологічної діагностики, етіотропної терапії та профілактики шигельозів.

Модуль 2 . Спеціальна, клінічна та екологічна мікробіологія.

Тема 5: Методи мікробіологічної діагностики дизентерії.

Актуальність теми:Шигельози поширені повсюдно і представляють серйозну проблемуу країнах з низьким санітарним культурним рівнем та великою частотою випадків недостатнього та неякісного харчування. У країнах, що розвиваються, поширенню інфекції сприяють низький санітарний рівень, недотримання правил особистої гігієни, перенаселеність і велика частка дітей серед населення. В Україні спалахи шигельозу найчастіше зустрічаються у закритих колективах на тлі низького рівня санітарії та гігієни, наприклад, у дитячих яслах та садах, на туристичних судах, у психіатричних клініках чи притулках для інвалідів. Шигелли були причиною діареї мандрівників та туристів.

Причиною групових захворювань можна розглядати вживання харчових продуктів, забруднених за недбалістю торгових працівників, які є носіями шигел. Трапляються спалахи, пов'язані з вживанням питної води, до зараження приводило також плавання в забруднених водоймах. Водночас харчовий та водний шляхи передачі відіграють, мабуть, меншу роль у поширенні шигельозів у порівнянні з холерою та черевним тифом, при яких для зараження людини зазвичай потрібні великі дози збудників. У країнах, де поширення хвороби відбувається переважно від людини людині, носії можуть бути важливим резервуаром збудника інфекції. У хворих, які не приймали антибактеріальних препаратів, виділення шигел з фекаліями зазвичай триває протягом 14 тижнів, проте в невеликій частині випадків триває значно довше.

Шигельоз - гостра бактеріальна інфекція кишечника, що викликається одним із чотирьох видів шигел. Спектр клінічних форм інфекції включає і легку, рідку діарею, і важку дизентерію, для якої характерні переймоподібні болі в ділянці живота, тенезми, лихоманка та ознаки загальної інтоксикації.

Етіологія.

Рід Shigella (отримав назву на ім'я К. Шига, який у 1898 р. детально вивчив та описав виділений збудник бактеріальної дизентерії А.В. Григор'євим) сімейства Enterobacteriaceae складається з групи тісно пов'язаних видів бактерій, що мають наступні властивості:

І. Морфологічні: шигели - невеликі паличкиіз закругленими кінцями. Відрізняються від інших представників сімейства Enterobacteriaceae відсутністю джгутиків (нерухомі), не мають суперечок та капсул, грамнегативні.

ІІ. Культуральні: шигели - це аероби або факультативні анаероби; оптимальні умовикультивування температура 37°С, рН 7,27,4. Зростають на простих живильних середовищах (МПА, МПБ) у вигляді невеликих, блискучих, напівпрозорих, сіруватих, круглих колоній, розміром 1,5?2 мм S Формі. Винятком є ​​шигели Зонне, які часто дисоціюють, утворюючи великі, плоскі, каламутні, з порізаними краями колонії. R Форми (колонії мають вигляд “виноградного листа”). У рідких живильних середовищах шигели дають рівномірне помутніння, R Форми утворюють осад. Рідким середовищем збагачення є селенітовий бульйон.

ІІІ. Ферментативні: основними біохімічними ознаками, необхідними для ідентифікації шигел при виділенні чистої культури є:

1. відсутність газоутворення при ферментації глюкози;
2. відсутність продукції сірководню;
3. відсутність ферментації лактози протягом 48 годин.

Загалом чотири види поділяються далі приблизно на 40 серотипів. За характеристиками основних соматичних (О) антигенів та біохімічних властивостей виділяють наступні чотири види або групи: S. dysenteriae (група A включає: Григор'єва-Шігі, Штутцера-Шмітца, Лардж-Сакса), S. flexneri (група В), S. boydii (група С) та S. sonnei (група D).

По відношенню до маніту всі шигели діляться на маніт, що розщеплюють (шигели Флекснера, Бойда, Зонне) і не розщеплюють (шигели Григор'єва-Шігі, Штутцера-Шмітца, Лардж-Сакса).

ІV. Чинники патогенності:

1. Плазміда інвазії |забезпечує здатність шигел викликати інвазію з подальшим міжклітинним поширенням і розмноженням в епітелії слизової оболонки товстого кишечника;
2. Токсиноутворення: Шигели мають ліпополісахаридний ендотоксин, який за хімічними та біохімічними властивостями подібний до ендотоксинів інших представників сімейства Enterobacteriaceae. Крім того, S. dysenteriae тип I (паличка Шига) виробляє екзотоксин. З моменту відкриття останнього було встановлено, що він має активність ентеротоксину і може викликати кишкову секрецію, так само як і чинити цитотоксичну дію, спрямовану проти клітин кишкового епітелію; має нейротоксичну дію, яка відзначається у дітей, хворих на шигельоз. Шига-токсин, потрапляючи в кров, поряд з ураженням підслизової ендотелію вражає також гломерули нирки, внаслідок чого крім кривавого проносу розвивається гемолітичний уремічний синдром з розвитком ниркової недостатності.

V. Антигенна структура:всі шигели мають соматичний О-антиген, залежно від будови якого відбувається їх підрозділ на серовари.

VІ. Резистентність:Температура 100 0 З вбиває шигелли миттєво. До низьких температур шигели стійкі в річковій водівони зберігаються до 3-х місяців, на овочах та фруктах - до 15 місяців.За сприятливих умов шигели здатні до розмноження в харчових продуктах(салатах, вінегретах, вареному м'ясі, фарші, вареній рибі, молоці та молочних продуктах, компотах та киселях), особливо шигели Зонне.

Епідеміологія.

1. Джерело інфекції:Людина, яка хворіє на гостру і хронічну форму шигельозу; бактеріоносій.

2. Шляхи передачі:

• Харчовий (переважно для S. sonnei)
• Водяний (переважно для S. flexneri)
• Контактно-побутовий (переважно для S. dysenteriae)

3. Вхідними воротами інфекції служить шлунково-кишковий тракт.

Патогенез та патологічні зміни.

Після заковтування шигели колонізують верхні відділи тонкої кишкиі розмножуються там, можливо, викликаючи підвищену секрецію на ранній стадіїінфекції. Потім шигел пенетрують через М-клітини в підслизову, де поглинаються макрофагами. Це призводить до загибелі частини шигел, наслідком чого є виділення медіаторів запалення, які і ініціюють запалення підслизової. Апоптоз фагоцитів дозволяє іншій частині шигел зберегтися і проникнути в епітеліальні клітини слизової оболонки через базальну мембрану. Усередині ентероцитів відбувається розмноження шигел і їхнє міжклітинне поширення, наслідком чого є розвиток ерозій. При загибелі шигел відбувається виділення шига та шигаподібних токсинів, дія яких призводить до інтоксикації. Поразка слизової оболонки супроводжується набряклістю, некрозами та геморагією, що зумовлює появу крові у випорожненнях. Крім того, токсин впливає на ЦНС, що призводить до трофічних розладів.

Клінічні прояви.

Спектр клінічних проявів шигельозів дуже широкий від легкої діареї до важкої дизентерії зі спазмовими болями в області живота, тенезмами, лихоманкою та загальною інтоксикацією.

Інкубаційний періодколивається від кількох годин до 7 діб, найчастіше становить 2-3 дні.Спочатку у хворих відзначаються водянистий стілець, лихоманка (до 41 ° С), розлиті болі в області живота, нудота та блювання. Поряд з цим хворі скаржаться на міалгії, озноби, біль у попереку та головний біль. Найближчими днями від початку захворювання з'являються ознаки дизентерії - тенезми, частий, мізерний, кров'яно-слизовий стілець. Температура тіла поступово знижується, болі можуть локалізуватися в нижніх квадрантахживота. Інтенсивність діареї досягає максимуму приблизно до кінця 1-го тижня хвороби. Дизентерія з кров'янистим випорожненням зустрічається частіше і з'являється раніше при захворюванні, викликаному S. dysenteriae тип I, ніж за інших формах шигельозів.

Для шигельозу Зонне характерно легше перебіг хвороби (гастроентеричний або гастроентероколітичний варіант). Гарячковий період менш тривалий, явища інтоксикації короткочасні, а деструктивні зміни слизової оболонки кишечника не характерні.

Шигельозу Флекснерав основному властиві два варіанти клінічного перебігу - гастроентероколітичний та колітичний.

Позакишкові ускладнення при шигельозахзустрічаються рідко:

1. Ускладненням шигельозів може бути розвиток кишкового дисбактеріозу.
2. Поряд із головними болями можуть відзначатись ознаки менінгіту та судомні напади.
3. При інфекції, спричиненій S. dysenteriae тип I, описані випадки периферичної нейропатії, а під час спалаху гастроентериту, спричиненого S. boydii, траплялися випадки синдрому Гійєна-Барре (поліневрит).
4. За винятком дітей, які страждають на дистрофію, гематогенна дисемінація збудника зустрічається відносно рідко, описані також випадки шигельозних абсцесів і менінгітів.
5. При шигельозі можливий розвиток синдрому Рейтера з артритом, стерильним кон'юнктивітом і уретритом, зазвичай це зустрічається через 1-4 тижні від початку діареї у хворих.
6. У дітей шигельози супроводжуються гемолітико-уремічним синдромом, часто у поєднанні з лейкозоподібними реакціями, важким колітом та циркуляцією ендотоксину, проте при цьому зазвичай бактеріємію не виявляють.
7. Дуже рідко зустрічається гнійний кератокон'юнктивіт, викликаний шигелами, що потрапили у вічі внаслідок самозараження забрудненими пальцями.
8. Гіповолемічний шок та ДВС-синдром.
9. Перитоніт, гангрена кишки, кишкова кровотеча.

Імунітет: У людини є природна резистентність до шигельної інфекції. Після перенесеного захворюванняімунітет не стійкий, а після шигельозу Зонне практично відсутній. При захворюванні, викликаному шигелами Григор'єва Шиги виробляється більш стійкий антитоксичний імунітет. У захисті від інфекції основна роль належить секреторним IgA , що запобігає адгезії, та цитотоксичній антитілозалежній активності інтраепітеліальних лімфоцитів, які разом з секреторними IgA знищують шигели.

Діагностика та лабораторні дослідження.

Мета дослідження: виявлення та ідентифікація шигел для встановлення діагнозу; виявлення бактеріоносіїв; виявлення шигел у харчових продуктах.

Матеріал для дослідження: випорожнення, секційний матеріал, харчові продукти.

Методи діагностики:мікробіологічний (бактеріологічний, мікроскопічний (люмінісцентна); серологічний; біологічний; алергопроба.

Хід дослідження:

1 день дослідження:Посіви слід робити із свіжовиділених фекалій або з використанням ректальних тампонів (ректальною трубкою); за відсутності відповідних умов матеріал необхідно помістити у середу для транспортування. Для цього слід використовувати кишковий агар (середовище Мак-Конки або Шигелла-Сальмонелла), помірно селективний агар ксилоза-лізин-дезоксихолат, КЛД) та поживний бульйон (селенітовий бульйон). Якщо час між парканом і посівом перевищує 2год, слід скористатися консервуючими розчинами: 20% жовчний бульйон, комбінована середовище Кауффманна.

• Випорожнення в гліцеринової суміші емульгують, краплю емульсії наносять на середовище і втирають шпателем її. Диференціальними середовищами для шигел є середовища Плоскірєва, Ендо та ЕМС (агар з еозинметиленовим синім). Середовище Плоскірєва (до складу середовища входять: МПА, лактоза, солі жовчних кислот та індикатор діамантовий зелений) одночасно є і елективним середовищем для шигел, т.к. пригнічує ріст кишкової палички.
• Паралельно з прямим посівом зібраний матеріал засівають на середу збагачення селенітовий бульйон.
• Усі посіви ставлять у термостат.

2 день дослідження:

• Чашки виймають із термостату, підозрілі колонії відсівають на середовище Ресселя (поживне середовище до складу якого входять: агар-агар, індикатор Андреде, 1% лактози, 0,1% глюкози) та маніт. Посів роблять штрихами по скошеній поверхні і уколом в агаровий стовпчик. Засіяне середовище Ресселя поміщають у термостат на 18-24ч (паралельно роблять пересів із селенітового середовища на диференціально-діагностичні середовища).
• Роблять мазки (забарвлення за Грамом), мікроскопують.
• Готують препарати "висяча" або "розчавлена" крапля.
• Постановка орієнтовної РА з полівалентними діагностичними сироватками шигельозними.
• Посів підозрілих колоній на скошений агар.

3 день дослідження:

• Мікроскопія матеріалу зі скошеного агару.
• Культури, що не ферментували лактозу на середовищі Ресселя, піддають подальшому вивченню: роблять мазки (забарвлення за Грамом), перевірка чистоти культури. За наявності грамнегативних паличок виробляють посів на середовищі Гісса, бульйон з індикаторними папірцями (для виявлення індолу та сірководню) та на лакмусове молоко.
• Засіяні середовища ставлять термостат на 18-24ч.

4 день дослідження:

• Облік короткого «строкатого ряду».
• Культури, підозрілі за своїми ферментативним і культуральним властивостям щодо шигел, піддають серологічної ідентифікації. Постановка РА на склі (типові та групові діагностичні сироватки). Постановка розгорнутої РА.

Як прискорені методи при шигельозах застосовуютьлюмінісцентну мікроскопіюі біологічну пробу(Введення вірулентних штамів шигел у кон'юктивальний мішок (під нижню повіку) морським свинкам - до кінця 1-ї доби розвивається кон'юктивіт).

Алергічна проба Цуверкаловавнутрішньошкірна алергічна проба з дизентеріном (введення 0,1 мл дизентерину в область передпліччя позитивна реакція у разі утворення інфільтрату та гіперемії). Алергологічну діагностику в даний час практично не застосовують. Проба Цурвекалова не відрізняється специфічністю, позитивні реакції реєструють не тільки при шигельозі, але і при сальмонельозі, ешеріхіозі, ієрсиніозах та ін ОКИ, а іноді і у здорових осіб.

Лікування та профілактика.Для лікування та для профілактики за епідеміологічними показаннями використовується бактеріофаг орального застосування, антибіотики після визначення антибіотикограми; у разі виникнення дисбактеріозу препарати пробіотиків для корекції мікрофлори. Для поповнення втрат рідин та електролітів - введення всередину глюкозо-електролітного розчину.

Конкретні цілі:

Інтерпретувати біологічні властивості збудників шигельозів.

Ознайомитись із класифікацією шигел.

Навчитися трактувати патогенетичні закономірності інфекційного процесу, спричиненого шигелами.

Визначити методи мікробіологічної діагностики, етіотропної терапії та профілактики шигельозів.

Вміти:

• Здійснити посів на живильні середовища досліджуваного матеріалу.
  • Приготувати мазки та пофарбувати за Грамом.
  • Провести мікроскопію препаратів за допомогою іммерсійного мікроскопа.
  • Аналізувати морфологічні, культуральні, ферментативні ознаки шигел.

Теоретичні питання:

1. Характеристика збудників шигельозів. Біологічні характеристики.

2. Класифікація шигел. Принципи, покладені основою.

3. Епідеміологія, патогенез та клінічні особливостішигельозів.

4. Лабораторна діагностика.

5. Принципи лікування та профілактики шигельозів.

Практичні завдання, які виконуються на занятті:

1. Мікроскопія демонстраційних препаратів із чистих культур збудників шигельозів.

2. Робота з бактеріологічної діагностики шигельозів: вивчення посівів фекалій на середовищі Плоскірєва.

3. Пересівання підозрілих колоній на середовище Ресселя та на МПБ для визначення індолоутворення та Н 2 S .

4. Замальовка демонстраційних препаратів та схеми мікробіологічної діагностики шигельозів у протокол заняття.

5.Оформлення протоколу.

Література:

1. Коротяєв А.І., Бабичев С.А., Медична мікробіологія, імунологія та вірусологія / Підручник для медичних ВНЗ, Санкт-Петербург «Спеціальна література», 1998. – 592с.

2. Тімаков В.Д., ЛевашевВ.С., Борисов Л.Б. Мікробіологія / Підручник. - 2-ге вид., перераб. І доп.-М.: Медицина, 1983-512с.

3. П'яткін К.Д. Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імунологією.- Київ: Вища школа, 1992. - 431с.

4. Медична мікробіологія/За редакцією В.І. Покровського.-М: ГЕОТАР-МЕД, 2001.-768с.

5. Посібник до практичним заняттямз мікробіології, імунології та вірусології. За ред. М.П. Зикова. М. "Медицина". 1977. 288 с.

6. Черкес Ф.К., Богоявленська Л.Б., Бельскан Н.А. Мікробіологія. / За ред. Ф.К. Черкес. М.: Медицина, 1986. 512 с.

7. Конспект лекції.

Додаткова література:

1. Макіяров К.А. Мікробіологія, вірусологія та імунологія. Алма-Ата, «Казахстан», 1974. 372 с.

2. Тітов М.В. Інфекційні хвороби. - К., 1995. 321с.

3. Шувалова Є.П. Інфекційні захворювання. - М.: Медицина, 1990. – 559 с.

4. БМЕ, Т. 1, 2, 7.

5. Павлович С.А. Медична мікробіологія у графах: Навч. посібник для мед. ін-тов. Мн.: Виш. шк., 1986. 255 с.

Короткі методичні вказівкидля роботи на практичному занятті.

На початку заняття проводиться перевірка рівня підготовки студентів до заняття.

Самостійна робота складається з вивчення класифікації шигел, розбору схеми патогенетичних та клінічних ознак шигельозів. Вивчення методів лабораторної діагностики шигельозів. Студенти здійснюють посів біоматеріалу на живильні середовища. Потім готують мікропрепарати, фарбують їх за Грамом, проводять мікроскопію, замальовують мікропрепарати і дають необхідні пояснення. До складу самостійної роботи входить також мікроскопія демонстраційних препаратів та їх замальовка до протоколу заняття.

Наприкінці заняття проводиться тестовий контроль та аналіз підсумкових результатів самостійної роботи кожного студента.

Технологічна мапа проведення практичного заняття.

п/п	Етапи	Час у хв	Способи навчання	Устаткування	Місце проведення
	Перевірка та корекція вихідного рівня підготовки до заняття		Тестові завдання вихідного рівня	Таблиці, атлас	Навчальна кімната
	Самостійна робота		Граф логічної структури	Іммерсійний мікроскоп, барвники, предметні стекла, бактеріологічні петлі, живильні середовища, середовище Плоскірєва, середовище Ресселя, «строкатий ряд Гісса»
	Самостійна перевірката корекція освоєння матеріалу		Цільові навчальні завдання
	Тестовий контроль		Тести
	Аналіз результатів роботи

Цільові навчальні завдання:

1. Від хворого ГКІ дитину отримали фекалії (збір випорожнень проводили ректальною трубкою), що містять слиз, гній. Який метод експрес-діагностики слід застосувати?

A. ІФА.

B. РІФ.

C. РА.

D. РЗК.

E. РІА.

1. Від хворої дитини з гострою кишковою інфекцією виділено збудник дизентерії. Які морфологічні ознаки притаманні збудника?

A . Грамнегативна нерухома паличка.

B . Грампозитивна рухлива паличка.

C . Утворює капсулу на живильному середовищі.

D . Утворює суперечки у зовнішньому середовищі.

E . Грампозитивні стрептобацили.

3. У пацієнта, який захворів три дні тому і скаржиться на температуру 38°С, біль у животі, частий рідкий стілець, присутність крові в калі лікар клінічно діагностував бактеріальну дизентерію Який метод мікробіологічної діагностики доцільно застосувати у разі і який матеріал треба взяти від хворого на підтвердження діагнозу?

А. Бактеріоскопічний кал.

В. Бактеріологічний кал.

С. Бактеріоскопічний кров.

D. Бактеріологічний сечу.

Е. Серологічний кров.

4.З фекалій хворого виділено шигели Зонне. Які необхідні додаткові дослідження для встановлення джерела інфекції?

A . Провести фаготипування виділеної чистої культури.

B . Визначити антибіотикограму.

C . Поставити реакцію преципітації.

D . Поставити реакцію зв'язування комплементу.

E . Поставити реакцію нейтралізації.

5.Серед групи туристів (27 осіб), які використовували для пиття воду з озера, через два дні у 7 осіб з'явилися симптоми гострої діареї. Який матеріал для встановлення етіології даного захворювання потрібно направити до баклабораторії?

А. Воду, випорожнення хворих.

В. Воду, кров хворих.

С. Харчові продукти.

D. Сечу.

Е. Мокроту.

6. Істотний недолік мікроскопічного методу діагностики при гострих кишкових інфекціях - його недостатня інформативність у зв'язку з морфологічною ідентичністю бактерій сімейства Enterobacteriaceae . Що дозволяє підвищити інформативність цього?

A . Радіоімунний аналіз.

B . реакція Кумбса.

C . Імуноферментний аналіз.

D . Реакція опсонізації.

E . Реакція імунофлюоресценції.

7. Хворий 29 років госпіталізований із нападами блювоти, діареєю, тенезмами. Кал зі шматочками слизу та домішкою крові. При бактеріологічному дослідженні бактерій з колоній на середовищі Плоскірєва виявлено нерухомі, грамнегативні палички, що не ферментують лактозу. Назвіть збудника інфекційного процесу.

A. Shigella flexneri.

B. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. У мікробіологічну лабораторію доставлений салат, який, ймовірно, є причиною гострої кишкової інфекції. На які живильні середовища виробляється первинний посів?

A . Жовтково-сольовий агар, МПБ.

B. МПА, МПБ.

C . Селенітовий бульйон, Ендо, Плоскірєва.

D . Печінковий бульйон, середа Ру.

E . Кров'яний агар, лужний агар.

9. При мікробіологічному дослідженні м'ясного фаршувиділено бактерії, що належать до роду шигел. Вивчення яких властивостей мікробів дозволило дійти такого висновку?

A . Культуральних, тінкторіальних.

B . Антигенних, культуральних.

C . Сахаролітичних, протеолітичних.

D . Антигенні, імуногенні.

E . Морфологічні, антигенні.

10. При мікроскопічному дослідженні блювотних мас, взятих від хворого із симптомами гострої кишкової інфекції, було виявлено нерухомі палички. У якому мазку чи препараті могла бути вивчена рухливість бактерій?

A . У мазку, пофарбованому за Грамом.

B . У мазку, пофарбованому по Цилю – Нельсену.

C . У препараті "товста крапля".

D . У мазку, пофарбованому Нейссером.

E . У препараті "розчавлена ​​крапля".

Алгоритм лабораторної роботи :

1. Вивчення біологічних властивостей шигел.

2. Ознайомлення із класифікацією шигел.

3. Розбір схеми патогенетичних та клінічних проявів шигельозів.

4. Вивчення методів лабораторної діагностики шигельозів.

5. Вивчення основних принципів терапії та профілактики шигельозів.

1. Приготування фіксованих препаратів із бактеріальної культури.
2. Фарбування мікропрепаратівза Грамом.
3. Мікроскопія мікропрепаратівз допомогою імерсійного мікроскопа, їх аналіз та замальовка до протоколу заняття.
4. Ми кроскопія та аналіз демонстраційних препаратів із чистих культур шигел.
5. Замальовування демонстраційних препаратів та схеми лабораторної діагностики шигельозів у протокол.
6. Оформлення протоколу.

Класифікація шигел, їх властивості. Патогенез шигельозів.

Бактеріальна дизентерія, або шигельоз, – інфекційне захворювання, що викликається бактеріями роду Shigella, що протікає з переважним ураженням товстої кишки. Назва роду пов'язана з К.Шиги, який відкрив одного із збудників

дизентерії.

Таксономія та класифікація. Збудники дизентерії відносяться до відділу Gracilicutes, сімейства Enterobacteriaceae, роду Shigella.

Морфологія та тинкторіальні властивості. Шигелли - грамнегативні палички із закругленими кінцями, довжиною 2-3 мкм, товщиною 0,5-7 мкм (див. рис. 10.1); не утворюють суперечки, не мають джгутиків, нерухомі. У багатьох штамів виявляють ворсинки загального типу та статеві пили. Деякі шигели мають мікрокапсулу.

Культивування.Дизентерійні палички – факультативні анаероби. Вони невибагливі до живильних середовищ, добре ростуть при температурі 37 ° С та рН середовища 7,2-7,4. На щільних середовищах утворюють дрібні прозорі колонії, в рідких середовищах -

дифузне помутніння. Як середовище збагачення для культивування шигел найчастіше використовують селенітовий бульйон.

Ферментативна активність. Шигели мають меншу ферментативну активність, ніж інші ентеробактерії. Вуглеводи вони зброджують із утворенням кислоти. Важливою ознакою, що дозволяє диференціювати шигели, є їхнє ставлення до маніту: S. dysenteriae не ферментують маніт, представники груп В, С, D манітпозитивні. Найбільш біохімічно активні S. sonnei, які повільно (протягом 2 діб) можуть зброджувати лактозу. На підставі ставлення S. sonnei до рамнози, ксилози та мальтози розрізняють 7 біохімічних варіантів її.

Антигенна структура. Шигели мають О-антиген, його неоднорідність дозволяє виділяти всередині груп серовари та підсеровари; у деяких представників роду виявляють К-антиген.

Чинники патогенності. Всі дизентерійні палички утворюють ендотоксин, що чинить ентеротропну, нейротропну, пірогенну дію. Крім того, S. dysenteriae (серовар I) - шигели Григор'єва-Шиги - виділяють екзотоксин, що надає ентеротоксичну, нейротоксичну, цитотоксичну та нефротоксичну дію на організм, що відповідно порушує водно-сольовий обмін і діяльність ЦНС, призводить до загибелі епітеліальних клітин товстої ураження ниркових канальців. З утворенням екзотоксин пов'язано більше важкий перебігдизентерії, викликаної цим збудником. Екзотоксин можуть виділяти інші види шигел. Виявлено фактор проникності RF, внаслідок дії якого уражаються кровоносні судини. До факторів патогенності відносяться також інвазивний білок, що сприяє їх проникненню всередину епітеліальних клітин, а також пили та білки зовнішньої мембрани, відповідальні за адгезію, та мікрокапсула.

Резистентність. Шигели мають невисоку стійкість до дії різних факторів. Найбільшу резистентність мають S. sonnei, які у водопровідній воді зберігаються до 2"/2 міс, у воді відкритих водойм виживають до V/2 міс. S. sonnei можуть не тільки досить довго зберігатися, але і розмножуватися в продуктах, особливо молочних.

Епідеміологія. Дизентерія – антропонозна інфекція: джерелом є хворі люди та носії. Механізм передачі інфекцій – фекально-оральний. Шляхи передачі можуть бути різні – при дизентерії Зонне переважає харчовий шлях, при дизентерії Флекснера – водний, для дизентерії Григор'єва-Шиги характерний контактно-побутовий шлях. Дизентерія зустрічається у багатьох країнах світу. В останні

роки спостерігається різкий підйом захворюваності на цю інфекцію. Хворіють люди різного віку, але найбільш схильні до дизентерії діти від 1 року до 3 років. Кількість хворих збільшується у липні – вересні. Різні види шигел по окремих

регіонам поширені нерівномірно

Патогенез. Шигели через рот потрапляють у шлунково-кишковий тракт та досягають товстої кишки. Маючи тропізм до її епітелію, за допомогою пилок і білків зовнішньої мембрани збудники прикріплюються до клітин. Завдяки інвазивному фактору вони проникають усередину клітин, розмножуються там, у результаті клітини гинуть. У стінці кишечника утворюються виразки, дома яких потім формуються рубці. Ендотоксин, що звільняється при руйнуванні бактерій, викликає загальну інтоксикацію, посилення перистальтики кишечника, пронос. Кров із виразок, що утворилися, потрапляє у випорожнення. Внаслідок дії екзотоксину спостерігається більш виражене порушення водно-сольового обміну, діяльності ЦНС, ураження нирок.

Клінічна картина.Інкубаційний період триває від 1 до 5 днів. Захворювання починається гостро з підвищення температури тіла до 38-39 ° С, з'являються біль у животі, пронос. У стільці виявляють домішку крові, слиз. Найважче протікає дизентерія Григор'єва-Шигі.

Імунітет. Після перенесеного захворювання імунітет як видо-, а й вариантоспецифичен. Він нетривалий і неміцний. Нерідко захворювання перетворюється на хронічну форму.

Мікробіологічна діагностикаЯк досліджуваний матеріал беруть випорожнення хворого. Основою діагностики є бактеріологічний метод, що дозволяє ідентифікувати збудника, визначити його чутливість до

антибіотикам, провести внутрішньовидову ідентифікацію (визначити біохімічний варіант, сірковар або коліциногеновар). При затяжному перебігу дизентерії можна використовувати як допоміжний серологічний метод, що полягає у постановці РА, РНГА (за наростанням титру антитіл при повторній постановці реакції можна підтвердити діагноз).

Лікування.Хворих на важкі форми дизентерії Григор'єва-Шиги та Флекснера лікують антибіотиками широкого спектру дії з обов'язковим урахуванням антибіотикограми, так як серед шигел нерідко зустрічаються не тільки антибіотикоустой-

чіві, але й антибіотикозалежні форми. При легких формах дизентерії антибіотики не використовують, оскільки їхнє застосування призводить до дисбактеріозу, що ускладнює патологічний процес, та порушення відновлювальних процесів у слизовій оболонці товстої кишки

Профілактика. Єдиний препарат, який може бути використаний в осередках інфекції з профілактичною метою, – дизентерійний бактеріофаг. Основну роль відіграє неспецифічна профілактика.

11. Єрсинії – збудники чуми. Властивості. Патогенез, імунітет, лабораторна діагностика, епідеміологія, профілактика, лікування. Роль вітчизняних учених у вивченні чуми.

Таксономія: Y.pestisвикликає чуму; відділ Gracilicutes, сімейство Enterobacteriaceae, рід Yersinia. Збудник – Yersinia pestis.

Морфологічні властивості:грамнегативні палички, овоїдної форми, фарбуються біполярно. Рухливі, мають капсулу, суперечку не утворюють.

Культуральні характеристики.

Факультативні анаероби. Температурний оптимум +25С. Добре культивуються на простих живильних середовищах. Ферментують більшість вуглеводів без утворення газу. Психофіли - здатні змінювати свій метаболізм залежно від температури та розмножуватися при низьких температурах. Вірулентні штами утворюють шорсткі (R) колонії, перехідні (RS) і сіруваті слизові гладкі авірулентні (S) форми.

Два типи колоній - молоді та зрілі. Молода жінка з нерівними краями. Зрілі колонії великі, з бурим зернистим центром та нерівними краями. На скошеному агарі черга дві доби при +28 С утворюють сірувато - білий наліт, що вростає в середу, на бульйоні - ніжну поверхневу плівку та бавовняний осад.

Біохімічні властивості:фенментативна активність висока: ферментація до кислоти ксилозу, синтез плазмокоагулази, фібринолізину, гемолізину, лецитиназу, сірководень. Рамнозу, сечовину не ферментує.

Антигенна структура.

Група білково - полісахаридних та ліпополісахаридних антигенів: термостабільний соматичний О-антиген та термолабільний капсульний V,W антигени. З W-антигеном пов'язують вірулентність бактерій. Продукує фактори патогенності: фібринолізин, плазмокоагулазу, ендотоксин, екзотоксин, капсулу, V, W антигени.

Резистентність:чутливий до антибіотиків (особливо стрептоміцин), нестійкий до навколишнього середовища за високої температури.

Патогенні властивості.

Має патогенний потенціал, пригнічує функції фагоцитарної системи, пригнічує окисний вибух у фагоцитах і безперешкодно у них розмножується. Чинники патогенності контролюються плазмідами трьох класів. У патогенезі виділяють три основні стадії – лімфогенного занесення, бактеремії, генералізованої септицемії. Мають адгезини та інвазини, низькомолекулярні протеїни (інгібують бактерицидні фактори), ентеротоксин. Частина факторів контролюється плазмідами вірулентності.

Клінічні особливості:Інкубаційний період – кілька годин до 8 діб. Розрізняють локальні – шкірно-бубонна, бубонна; зовнішньо-дисеміновані – первинно-легенева, вторинно-легенева та кишкова; генералізована - первинно-септична, вторинно-септична форми чуми. Регіональна лімфоаденопатія, ентероколіти, реактивні артрити, спондиліт, лихоманка.

Епідеміологія:Чума - класичний природновогнищевий зооноз диких тварин. Основні носії в природі – бабаки, ховрахи, у міських умовах – щури. У передачі збудника – блохи тварин, здатні заражати людину.

Імунітет:клітинно-гуморальний, обмежений за тривалістю та напруженістю.

Мікробіологічна діагностика:

Бактеріоскопічне дослідження. З досліджуваного матеріалу готують мазки, забарвлюють Грамом і водним розчином метиленового синього. Бактерії чуми є грамнегативними паличками овоїдної форми. Бактеріологічне дослідження.Досліджуваний матеріал засівають на чашки з живильним агаром. Посіви інкубують при 25°С. Первинне вивчення посівів виробляють через 10год. До цього терміну з'являються колонії, утворені вірулентними R-формами. Мало- та авірулентні бактерії формують S-форми колоній. Ідентифікацію чистої культури проводять за морфологією бактеріальних клітин, характером росту, антигенними та біохімічними властивостями, чутливості до специфічного фагу та біопроби.

На бульйоні бактерії утворюють плівку; ферментують багато цукру до кислоти, індолу не утворюють, желатин не розріджують. Містять груповий термостабільний соматичний антиген та специфічний термолабільний капсульний антиген.

Біопробу.Проводиться виділення чистої культури з матеріалу, забрудненого сторонньої мікрофлорою. Найбільш чутливими лабораторними тваринами є морські свинки, яким вводять матеріал підшкірно. Внутрішньочеревно матеріал вводять у тому випадку, якщо він не забруднений іншими бактеріями. Після загибелі тварин відзначають патологічні зміни органів та проводять бактеріологічне дослідження

Експрес-методи лабораторної діагностики:

2. РПГА – для виявлення антигенів бактерій у матеріалі за допомогою стандартної протичумної сироватки, антитіла якої навантажені на еритроцити.

Лікування:антибіотики - стрептоміцин, препарати тетрациклінового ряду.

Профілактика:специфічна профілактика – жива ослаблена чумна вакцина EV. Є суха вакцина для перорального застосування. Для оцінки імунітету до чуми (природного постінфекційного та вакцинального) може застосовуватися внутрішньошкірна алергічна проба з пестином.

Чумний бактеріофаг- При ідентифікації Y.pestis.

Чумна суха вакцинависушена жива культура Y.pestis вакцинного штаму EV, використовується для профілактики чуми.

Мікробіологія дизентерії

Дизентерія – інфекційне захворювання, що характеризується загальною інтоксикацією організму, проносом та своєрідним ураженням слизової оболонки товстого кишечника. Вона є одним із найчастіших гострих кишкових захворювань у світі. Захворювання відоме з давніх-давен під назвою «кривавого проносу», проте природа його виявилася різною. У 1875 р. російський вчений Ф. А. Леш виділив від хворого на кривавий пронос амебу Entamoeba histolyticaУ наступні 15 років була встановлена ​​самостійність цієї хвороби, за якою збереглася назва амебіазу.

Збудниками власне дизентерії є велика група біологічно подібних бактерій, об'єднаних у рід Shigella. Вперше збудник було виявлено у 1888 р. А. Шантемесом та Ф. Відалем; в 1891 р. він був описаний А. В. Григор'євим, а в 1898 р. К. Шига за допомогою отриманої ним від хворого сироватки ідентифікував збудника у 34 хворих на дизентерію, остаточно довівши етіологічну роль цієї бактерії. Однак у наступні роки були виявлені й інші збудники дизентерії: у 1900 р. – С. Флекснером, у 1915 р. – К. Зонне, у 1917 р. – К. Штуцером та К. Шмітцем, у 1932 р. – Дж. Бойдом , 1934 р. – Д. Ларджем, 1943 р. – А. Саксом. Нині рід Shigellaвключає понад 40 серотипів. Всі вони являють собою короткі нерухомі грамнегативні палички, що не утворюють спор і капсул, які добре ростуть на звичайних поживних середовищах, не ростуть на голодному середовищі з цитратом або малонатом як єдине джерело вуглецю; не утворюють H2S, не мають уреази; реакція Фогеса - Проскауера негативна; глюкозу та деякі інші вуглеводи ферментують з утворенням кислоти без газу (крім деяких біотипів) Shigella flexneri: S. manchesterі S. Newcastle); як правило, не ферментують лактозу (за винятком шигел Зонне), адоніт, саліцин та інозит, не розріджують желатин, зазвичай утворюють каталазу, не мають лізиндекарбоксилази та фенілаланіндезаміназ. Зміст Г+Ц у ДНК становить 49 – 53 мол %. Шигелли - факультативні анаероби, температурний оптимум для зростання 37 ° C, при температурі вище 45 ° C не зростають, оптимальна рН середовища 6,7 - 7,2. Колонії на щільних середовищах – круглі, опуклі, напівпрозорі, у разі дисоціації утворюються шорсткі колонії R-форми. Зростання на МПБ як рівномірного помутніння, шорсткі форми утворюють осад. Свіжовиділені культури шигел Зонне зазвичай утворюють колонії двох типів: дрібні круглі опуклі (I фаза), великі плоскі (II фаза). Характер колонії залежить від наявності (І фаза) або відсутності (ІІ фаза) плазміди з м. м. 120 МД, яка визначає також вірулентність шигел Зонне.

Міжнародна класифікаціяшигел побудована з урахуванням їх біохімічних ознак (маніт-неферментуючі, маніт-ферментуючі, шигели, що повільно ферментують лактозу) і особливостей антигенної структури (табл. 37).

У шигел виявлені різні за специфічністю О-антигени: загальні для сімейства Enterobacteriaceae, родові, видові, групові та типоспецифічні, а також К-антигени; Н-антигенів вони не мають.

Таблиця 37

Класифікація бактерій роду Shigella

У класифікації враховуються лише групові та типоспецифічні О-антигени. Відповідно до цих ознак рід Shigellaпідрозділяється на 4 підгрупи, або 4 види, і включає 44 серотипи. У підгрупу А (вид Shigella dysenteriae) включені шигели, що не ферментують маніту. Вид включає 12 серотипів (1 – 12). Кожен серотип має свій особливий типовий антиген; Антигенні зв'язки між серотипами, а також з іншими видами шигел виражені слабко. До підгрупи В (вид Shigella flexneri) відносяться шигели, зазвичай ферментують маніт. Шигелли цього виду серологічно споріднені один одному: вони містять типоспецифічні антигени (I - VI), за якими поділяються на серотипи (1 - 6), і групові антигени, які виявляються в різних складах кожного серотипу і за якими серотипи поділяються на підсеротипи. Крім того, цей вид включає два антигенні варіанти - X і Y, у яких немає типових антигенів, вони різняться за наборами групових антигенів. Серотип S. flexneri 6не має підсеротипів, але його поділяють на 3 біохімічні типи за особливостями ферментації глюкози, маніту та дульциту (табл. 38).

Таблиця 38

Біотипи S. flexneri 6

Примітка. К – ферментація із заснуванням лише кислоти; КГ - ферментація з утворенням кислоти та газу; (–) – ферментація відсутня.

Ліпополісахаридний антиген Про у всіх шигел Флекснера містить груповий антиген 3, 4 як головну первинну структуру, його синтез контролюється хромосомним геном, локалізованим біля his-локусу. Типоспецифічні антигени I, II, IV, V та групові антигени 6, 7, 8 є результатом модифікації антигенів 3, 4 (глікозилювання або ацетилювання) та визначаються генами відповідних конвертуючих профагів, місце інтеграції яких розташовується в районі lac – pro хромосоми шигел.

Той, хто з'явився на території країни в 80-х роках. ХХ ст. і новий підсеротип, що набув широкого поширення S. flexneri 4(IV:7, 8) відрізняється від підсеротипу 4a (IV:3, 4) і 4b (IV:3, 4, 6), що виник з варіанта S. flexneri Y(IV:3, 4) внаслідок лізогенізації його конвертуючими профагами IV та 7, 8.

До підгрупи С (вид Shigella boydii) відносяться шигели, зазвичай ферментують маніт. Члени групи серологічно відрізняються одна від одної. Антигенні зв'язки усередині виду виражені слабо. Вид включає 18 серотипів (1 – 18), кожен із яких має свій головний типовий антиген.

У підгрупу D (вид Shigella sonnei) включені шигели, які зазвичай ферментують маніт і здатні повільно (через 24 год інкубації і пізніше) ферментувати лактозу і сахарозу. Вид S. sonneiвключає один серотип, однак колонії I і II фаз мають свої типоспецифічні антигени. Для внутрішньовидової класифікації шигел Зонне запропоновано два методи:

1) розподіл їх на 14 біохімічних типів та підтипів по здатності ферментувати мальтозу, рамнозу та ксилозу; 2) розподіл на фаготипи за чутливістю до набору відповідних фагів.

Ці методи типування мають головним чином епідеміологічне значення. Крім того, шигели Зонне та шигели Флекснера з цією ж метою піддають типуванню за здатністю синтезувати специфічні коліцини (коліциногенотипування) та за чутливістю до відомих коліцинів (коліцинотипування). Для визначення типу продукованих шигелами коліцинів Дж. Абботом і Р. Шеноном запропоновані набори типових та індикаторних штамів шигел, а для визначення чутливості шигел до відомих типів коліцинів використовують набір еталонних коліциногенних штамів П. Фредеріка.

резистентність.Шигели мають досить високу стійкість до факторів зовнішнього середовища. Вони виживають на бавовняній тканині та на папері до 30 – 36 днів, у висохлих випорожненнях – до 4 – 5 міс., у ґрунті – до 3 – 4 міс., у воді – від 0,5 до 3 міс., на фруктах та овочах – до 2 тижнів, у молоці та молочних продуктах – до кількох тижнів; при температурі 60 ° C гинуть через 15-20 хв. Чутливі до розчинів хлораміну, активного хлору та інших дезінфектантів.

Чинники патогенності.Найважливіша біологічна властивість шигел, що зумовлює їхню патогенність, – здатність впроваджуватися в епітеліальні клітини, розмножуватися в них і викликати їхню загибель. Цей ефект може бути виявлений за допомогою кератокон'юнктивальної проби (введення під нижню повіку морської свинки однієї петлі культури шигел (2 – 3 млрд бактерій) викликає розвиток серозногнійного кератокон'юнктивіту), а також шляхом зараження культур клітин (цитотоксична дія) або курячих ембріонових ( , або інтраназально-білих мишей (розвиток пневмонії). Основні фактори патогенності шигел можна розбити на три групи:

1) фактори, що визначають взаємодію з епітелієм слизової оболонки;

2) фактори, що забезпечують стійкість до гуморальних та клітинних механізмів захисту макроорганізму та здатність шигел розмножуватися в його клітинах;

3) здатність продукувати токсини та токсичні продукти, які зумовлюють розвиток власне патологічного процесу.

Перша група включає фактори адгезії і колонізації: їх роль виконують пили, білки зовнішньої мембрани і ЛПС. Адгезії та колонізації сприяють ферменти, що руйнують слиз, - нейрамінідазу, гіалуронідазу, муциназу. Друга група включає фактори інвазії, які сприяють проникненню шигел у ентероцити та їх розмноженню в них та у макрофагах з одночасним проявом цитотоксичного та (або) ентеротоксичного ефекту. Ці властивості контролюються генами плазміди з м. м. 140 МД (вона кодує синтез білків зовнішньої мембрани, що зумовлюють інвазію) і хромосомними генами шигел: kcp A (зумовлює кератокон'юнктивіт), cyt (відповідає за руйнування клітин), а також ідентифікованими. Захист шигел від фагоцитозу забезпечується поверхневим К-антигеном, антигенами 3, 4 та ліпополісахаридом. Крім того, ліпід А ендотоксину шигел має імуносупресивну дію: пригнічує активність клітин імунної пам'яті.

До третьої групи факторів патогенності відносяться ендотоксин і виявлені у шигел два типи екзотоксинів - екзотоксин Шига і шигаподібні (SLT-I і SLT-II), цитотоксичні властивості яких найбільш сильно виражені у S. dysenteriae 1. Шига- та шигаподібні токсини виявлені і в інших серотипів. S. dysenteriae, їх утворюють також S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EНEC та деякі сальмонели. Синтез цих токсинів контролюється tox-генами конвертуючих фагів. Ентеротоксини типу LT виявлені у шигел Флекснера, Зонне та Бойда. Синтез LT у них контролюється плазмідними генами. Ентеротоксин стимулює активність аденілатциклази та відповідає за розвиток діареї. Токсин Шига, або нейротоксин, не реагує з аденілатциклазною системою, а чинить пряму цитотоксичну дію. Токсини Шига та шигаподібні (SLT-I та SLT-II) мають м. м. 70 кД і складаються з субодиниць А та В (останні з 5 однакових малих субодиниць). Рецептором для токсинів є гліколіпід мембрани клітини.

Вірулентність шигел Зонне залежить також від плазміди з м. м. 120 МД. Вона контролює синтез близько 40 поліпептидів зовнішньої мембрани, сім із них пов'язані з вірулентністю. Шигелли Зонне, що мають цю плазміду, утворюють колонії I фази і мають вірулентність. Культури, що втратили плазміду, утворюють колонії II фази та позбавлені вірулентності. Плазміди з м. м. 120 - 140 МД виявлені у шигел Флекснера та Бойда. Ліпополісахарид шигел є сильним ендотоксином.

Особливості епідеміології.Джерелом інфекції є лише людина. Жодні тварини в природі на дизентерію не хворіють. У експериментальних умовах дизентерію вдається відтворити лише мавп. Спосіб зараження - фекально-оральний. Шляхи передачі – водний (переважний для шигел Флекснера), харчовий, особливо важлива роль належить молоку та молочним продуктам (переважний шлях зараження для шигел Зонне), та контактно-побутовий, особливо для виду S. dysenteriae.

Особливістю епідеміології дизентерії є зміна видового складу збудників, а також біотипів Зонне та серотипів Флекснера у певних регіонах. Наприклад, до кінця 30-х років. XX ст. на долю S. dysenteriae 1доводилося до 30 - 40% всіх випадків захворювань на дизентерію, а потім цей серотип став зустрічатися все рідше і рідше і майже зник. Однак у 1960 – 1980-ті роки. S. dysenteriaeзнову з'явилася на історичній арені та викликала серію епідемій, які призвели до формування трьох гіперендемічних вогнищ її – у Центральній Америці, Центральній Африці та Південній Азії (Індія, Пакистан, Бангладеш та інші країни). Причини зміни видового складу збудників дизентерії, ймовірно, пов'язані зі зміною колективного імунітету та зміною властивостей дизентерійних бактерій. Зокрема, повернення S. dysenteriae 1і широке поширення її, що спричинило формування гіперендемічних вогнищ дизентерії, пов'язують з придбанням нею плазмід, що зумовили множину лікарську стійкістьта підвищену вірулентність.

Особливості патогенезу та клініки.Інкубаційний період при дизентерії 2-5 днів, іноді менше доби. Формування інфекційного вогнищау слизовій оболонці низхідного відділу товстого кишечника (сигмоподібна та пряма кишка), куди проникає збудник дизентерії, носить циклічний характер: адгезія, колонізація, впровадження шигел у цитоплазму ентероцитів, їх внутрішньоклітинне розмноження, руйнування та відторгнення; Після цього починається черговий цикл – адгезія, колонізація тощо. буд. Інтенсивність циклів залежить від концентрації збудників у пристіночному шарі слизової оболонки. В результаті циклів, що повторюються, запальне вогнище розростається, виразки, що утворюються, з'єднуючись, збільшують оголеність кишкової стінки, внаслідок чого у випорожненнях з'являються кров, слизово-гнійні грудочки, поліморфноядерні лейкоцити. Цитотоксини (SLT-I та SLT-II) зумовлюють руйнування клітин, ентеротоксин – діарею, ендотоксини – загальну інтоксикацію. Клініка дизентерії багато в чому визначається тим, який тип екзотоксинів більшою мірою продукується збудником, ступенем його алергійного впливу та імунним статусом організму. Однак багато питань патогенезу дизентерії залишаються ще не з'ясованими, зокрема: особливості перебігу дизентерії у дітей перших двох років життя, причини переходу гострої дизентерії в хронічну, значення сенсибілізації, механізм місцевого імунітету слизової оболонки кишечника та ін. Найбільш типовими клінічними проявами дизентерії служать пронос, часті позиви: у тяжких випадках до 50 і більше разів на добу, тенезми (болючі спазми прямої кишки) та загальна інтоксикація. Характер випорожнення визначається ступенем ураження товстого кишечника. Найбільш важко протікає дизентерія, спричинена S. dysenteriae 1, Найлегше - дизентерія Зонне.

Постінфекційний імунітет.Як показали спостереження над мавпами, після перенесеної дизентерії залишається міцний і тривалий імунітет. Він обумовлений антимікробними антитілами, антитоксинами, підвищенням активності макрофагів та Т-лімфоцитами. Значну роль відіграє місцевий імунітет слизової оболонки кишечника, який опосередковується IgAs. Проте імунітет носить типоспецифічний характер, міцного перехресного імунітету немає.

Лабораторна діагностика.Основний метод – бактеріологічний. Матеріалом для дослідження є випорожнення. Схема виділення збудника: посів на диференціально-діагностичні середовища Ендо та Плоскірєва (паралельно на середу збагачення з наступним посівом на середовища Ендо, Плоскірєва) для виділення ізольованих колоній, отримання чистої культури, вивчення її біохімічних властивостей та, з урахуванням останніх, ідентифікація і моновалентних діагностичних аглютинуючих сироваток Випускають такі комерційні сироватки.

1. До шигелів, що не ферментують маніт:

до S. dysenteriae 1і 2

до S. dysenteriae 3 – 7(полівалентні та моновалентні),

до S. dysenteriae 8 – 12(Полівалентні та моновалентні).

2. До шигелів, що ферментують маніт:

до типових антигенів S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

до групових антигенів S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8- Полівалентна,

до антигенів S. boydii 1 – 18(полівалентна та моновалентна), до антигенів S. sonneiІ фази, ІІ фази,

до антигенів S. flexneri I - VI + S. sonnei- Полівалентна.

Для швидкої ідентифікації шигел рекомендується наступний метод: підозрілі колонії (лактозонегативна на середовищі Ендо) пересівають на середовище TSI (англ. triple sugar iron) – трицукровий агар (глюкоза, лактоза, сахароза) із залізом визначення продукції H 2 S; або на середовище, що містить глюкозу, лактозу, сахарозу, залізо та сечовину. Будь-який організм, який розщеплює сечовину через 4 – 6 год інкубування, найімовірніше, належить до роду Proteusі може бути виключено. Мікроорганізм, що утворює H 2 S або має уреазу, або утворює кислоту на косячці (ферментує лактозу або сахарозу), може бути виключений, хоча штами, що утворюють H 2 S, повинні бути досліджені як можливі члени роду Salmonella. У всіх інших випадках культура, що виросла на цих середовищах, має бути досліджена і, якщо ферментує глюкозу (зміна кольору стовпчика), виділено у чистому вигляді. Одночасно вона може бути досліджена у реакції аглютинації на склі з відповідними антисироватками до роду Shigella. При необхідності проводять інші біохімічні тести, які перевіряють приналежність до роду. Shigella, а також вивчають рухливість.

Для виявлення антигенів у крові (у тому числі у складі ЦВК), сечі та випорожненнях можуть бути використані наступні методи: РПГА, РСК, реакція коаглютинації (у сечі та випорожненнях), ІФМ, РАГА (у сироватці крові). Ці методи є високоефективними, специфічними та придатними для ранньої діагностики.

Для серологічної діагностики можуть бути використані: РПГА з відповідними еритроцитарними діагностикумами, імунофлуоресцентний метод (непряма модифікація), метод Кумбса (визначення титру неповних антитіл). Діагностичне значення має також алергічна проба з дизентеріном (розчин білкових фракцій шигел Флекснера та Зонне). Реакцію враховують через 24 год. Вона вважається позитивною за наявності гіперемії та інфільтрату діаметром 10 – 20 мм.

Лікування.Основна увага приділяється відновленню нормального водно-сольового обміну, раціонального харчування, дезінтоксикації, раціональної антибіотикотерапії (з урахуванням чутливості збудника до антибіотиків). Хороший ефект дає раннє застосування полівалентного дизентерійного бактеріофага, особливо таблетованого з пектиновим покриттям, яке оберігає фаг від дії шлункового соку; у тонкому кишечнику пектин розчиняється, фаги звільняються і виявляють свою дію. З профілактичною метою фаг слід давати не рідше ніж один раз на три дні (термін його виживання в кишечнику).

Проблема специфічної профілактики.Для створення штучного імунітету проти дизентерії були використані різні вакцини: із убитих бактерій, хімічні, спиртова, але всі вони виявилися малоефективними та зняті з виробництва. Створено вакцини проти дизентерії Флекснера із живих (мутантних, стрептоміцинзалежних) шигел Флекснера; рибосомальні вакцини, але вони також не знайшли широкого застосування. Тому проблема специфічної профілактики дизентерії залишається невирішеною. Основний шлях боротьби з дизентерією полягає у покращенні системи водопостачання та каналізації, забезпеченні суворих санітарно-гігієнічних режимів на підприємствах харчової, особливо молочної промисловості, у дитячих установах, місцях громадського користування та у дотриманні особистої гігієни.

УДК 616.935-074(047)

А.М.Садикова

Казахський Національний Медичний Університет

ім.С.Д. Асфендіярова, Алмати

Кафедра інфекційних та тропічних хвороб

Надійна діагностика дизентерії є одним із актуальних завдань нагляду за ОКІ. Точний діагноз бактеріальної дизентерії має важливе значеннядля правильного та своєчасного лікуванняхворого та для здійснення необхідних протиепідемічних заходів. Наведені в огляді дані показують, що з урахуванням поширення дизентерії, недостатньої чутливості та пізньої появипозитивних результатів багатьох діагностичних методів доцільно розвивати діагностичний потенціал для виявлення цієї інфекції.

Ключові слова: діагностика, дизентерія, метод антиген-зв'язуючих лімфоцитів.

Розпізнавання шигельозної інфекції у клінічній практиці зустрічає значні труднощі, зумовлені об'єктивними факторами, до яких належать клінічний патоморфоз дизентерії, збільшення числа атипових формзахворювання, існування значного числа захворювань інфекційної та неінфекційної природи, які мають подібні до дизентерії клінічні прояви. Під діагнозом «клінічної дизентерії» у половині випадків ховаються нерозпізнані захворювання іншої етіології.

Найбільші труднощі постають перед лікарем під час первинного огляду хворого до отримання результатів параклінічних методів діагностики. Розпізнавання дизентерії важко також за наявності супутніх захворюваньшлунково-кишковий тракт.

З часу початку застосування етіологічної лабораторної діагностики дизентерії було запропоновано та випробувано чимало методів. Існує багато класифікацій методів етіологічної діагностики інфекцій. Методологічно найбільш обґрунтовано класифікацію, запропоновану Б.В. Каральником. Щодо діагностики дизентерії принципи методологічно обґрунтованої класифікації використані Б.В. Каральником, Н.М. Нуркіна, Б.К. Єркінбекової..

З лабораторних методів діагностики дизентерії відомі бактеріологічні (виділення та ідентифікація збудника) та імунологічні. Останні включають імунологічні методи in vivo (алергологічна проба Цуверкалова) і in vitro. Імунологічні методи in vitro мають перед пробою Цуверкалова одну безперечну перевагу – вони пов'язані з введенням у організм сторонніх антигенів.

Більшість дослідників до теперішнього часу вважає, що бактеріологічне дослідження включає в себе виділення чистій культурізбудника захворювання з його подальшою ідентифікацією за морфологічними, біохімічними та антигенними ознаками, є найбільш надійним методом діагностики шигельозної інфекції. Частота виділення шигел із випорожнень хворих із клінічним діагнозом «гостра дизентерія», за даними різних авторів, коливається в межах: від 30,8% до 84,7% і навіть 91,1%. Такий значний діапазон у різних авторів залежить не тільки від об'єктивних факторів, що впливають на ефективність бактеріологічного дослідження, а й від ґрунтовності постановки (або виключення) діагнозу «дизентерія клінічна». На ефективність бактеріологічного дослідження впливають такі об'єктивні фактори, як особливості перебігу захворювання, спосіб забору та доставки матеріалу до лабораторії, якість поживних середовищ, кваліфікація персоналу, терміни звернення хворого до медпрацівників, застосування антимікробних препаратівдо взяття матеріалу для дослідження. Кількісне мікробіологічне дослідженнявипорожнень при гострій дизентерії показує, що при будь-яких клінічних формах інфекції найбільш масивне виділення збудників відбувається в перші дні захворювання, а починаючи з 6-го і особливо з 10-го дня хвороби концентрація шигел в калі значно знижується. Т.А. Авдєєвої встановлено, що мінімальний вміст шигел і різке переважання непатогенних мікроорганізмів у калі практично виключають можливість бактеріологічного виявлення дизентерійних бактерій.

Відомо, що бактеріологічне підтвердження шигельозної інфекції найчастіше вдається при обстеженні хворих саме в перші дні захворювання - копрокультура збудника в переважній більшості випадків вперше виділяється при першому дослідженні. Позитивні результати бактеріологічного дослідження відзначаються лише у перші 3 дні захворювання у 45 – 49% хворих, у перші 7 днів – у 75%. Тіллет та Томас також вважають термін обстеження хворих важливим фактором, що визначає ефективність бактеріологічного методу діагностики дизентерії. За даними Т.А. Авдєєвої, у перші дні захворювання найбільш інтенсивне виділення збудника спостерігається при дизентерії Зонне, менш інтенсивне – при дизентерії Флекснер та найменше – при дизентерії Флекснер VI; у пізні терміни хвороби найбільше тривало зберігається висока концентрація при дизентерії Флекснера, менш тривало – шигел Зонне і найменш тривало – шигел Флекснер VI.

Таким чином, хоча бактеріологічне дослідження випорожнень є найбільш надійним методом діагностики шигельної інфекції, суттєвими недоліками є перелічені вище обмеження його ефективності. Важливо також зазначити обмеження ранньої діагностики бактеріологічним методом, у якому тривалість аналізу становить 3-4 дня. У зв'язку з цими обставинами великого практичного значення набуває використання інших методів лабораторної діагностики. Інший мікробіологічний метод діагностики дизентерії також ґрунтується на виявленні живих шигел. Це реакція наростання титру фага (РНФ), що ґрунтується на здатності специфічних фагів розмножуватися виключно в присутності гомологічних живих мікроорганізмів. Наростання титру індикаторного фага свідчить про наявність у середовищі відповідних мікробів. Випробування діагностичної цінності РНФ під час шигельозної інфекції проводили Б.І. Хаїмзон, Т.С. Вількомирська. РНФ має досить високу чутливість. Зіставлення мінімальних концентраціїшигел у випорожненнях, що уловлюються бактеріологічним методом (12,5 тис. бактерій в 1 мл) та РНФ (3,0 - 6,2 тис), свідчить про перевагу РНФ.

Оскільки частота позитивних результатів РНФ знаходиться у прямій залежності від ступеня обсіменіння випорожнень, застосування методу також дає найбільший ефект у перші дні захворювання та за більш важких форм інфекційного процесу. Однак більш висока чутливість методу зумовлює його особливі переваги перед бактеріологічним дослідженням у пізні терміни хвороби, а також при обстеженні хворих з легкою, малосимптомною та субклінічною формами інфекції, при низькій концентрації збудника у випорожненнях. РНФ також застосовують при обстеженні хворих, які приймали антибактеріальні засоби, оскільки останні різко зменшують частоту позитивних результатів бактеріологічного методу дослідження, але значно меншою мірою впливають на ефективність РНФ. Чутливість РНФ не є абсолютною через існування штамів фагорезистентних шигел: частка фагорезистентних штамів може коливатися в дуже широких межах - від 1% до 34,5%.

Великою перевагою РНФ є її висока специфічність. При обстеженні здорових людей, а також хворих на інфекційні захворювання іншої етології позитивні результати реакції спостерігали лише в 1,5% випадків. РНФ є цінним додатковим методом діагностики шигельної інфекції. Але сьогодні цей метод застосовують рідко через його технічну складність. Інші методи є імунологічними. З їхньою допомогою реєструють специфічний щодо збудника імунну відповідь чи визначають імунологічними методами антигени збудника.

У зв'язку із вираженістю процесів специфічної інфекційної алергії при шигельозній інфекції спочатку використовували алергологічні методи діагностики, до якої належить внутрішньошкірна алергічна проба з дизентеріном (ВПД). Препарат «дизентерин», що є позбавлений токсичних речовин специфічний алерген шигел, був отриманий Д.А. Цуверкаловим та вперше застосований у клінічних умовах при постановці внутрішньошкірної проби Л.К. Коровицьким 1954 р. За даними Є.В. Голюсової та М.З. Трохименка, за наявності попередніх гострої дизентерії або супутніх їй алергічних хвороб зі шкірними проявами (екзема, кропив'янка та ін). позитивні результати ВПД спостерігаються значно частіше (паралергія). Аналіз результатів ВПД в різні періодигостра дизентерія показує, що специфічна алергія виникає вже в перші дні захворювання, досягає максимальної вираженості до 7 – 15-го дня і надалі поступово згасає. Позитивні результати реакції отримали під час обстеження здорових людей віком від 16 до 60 років у 15 – 20% випадків та у віці від 3 до 7 років – у 12,5% випадків. Ще більш часто неспецифічні позитивні результати ВПД спостерігали у хворих із шлунково-кишковими захворюваннями – у 20 – 36% випадків. Введення алергену супроводжувалося розвитком місцевої реакції у 35,5 – 43,0% хворих на сальмонельоз, у 74 – 87% хворих на коли-0124-ентероколіт. Серйозним доказом проти широкого застосування ВПД у клінічній практиці стала її алергійна дія на організм. Враховуючи вищевикладене, можна сказати, що цей метод мало специфічний. Проба Цуверкалова не має і видоспецифічності. Позитивні результати реакції були однаково часті в різних етіологічних формах дизентерії.

Крім ВПД застосовували й інші діагностичні реакції, з тим чи іншим ступенем обґрунтованості, що розглядалися як алергічні, наприклад, реакцію алергенлейкоцитолізу (АЛЦ), суть якої полягала в специфічному пошкодженні або повному руйнуванні активно або пасивно сенсибілізованих нейтрофілів при контакті з відповідним. Але цю реакцію не можна зарахувати до методів ранньої діагностики, оскільки максимальна частота позитивних результатів відзначалася на 6-9 день захворювання і становила 69%. Була запропонована також реакція алергенлейкергії (АЛЕ). Вона ґрунтується на здатності лейкоцитів сенсибілізованого організму до агломерації при впливі гомологічного алергену (дизентерин). У зв'язку з недоведеністю точних механізмів подібних тестів, недостатньої відповідності їх результатів етіології захворювання, ці методи після недовгого періоду їх застосування в СРСР надалі не набули поширення.

Виявлення антигенів шигел в організмі в діагностичному відношенні рівнозначне виділенню збудника. Основними перевагами методів виявлення антигенів перед бактеріологічним дослідженням, що виправдовують їх клінічне застосування, є можливість виявлення не тільки життєздатних мікроорганізмів, але також загиблих і навіть зруйнованих, що набуває особливе значенняпід час обстеження хворих під час чи невдовзі після проведення курсу антибактеріальної терапії.

Одним із найкращих методів експрес – діагностики дизентерії було імунофлюоресцентне дослідження калу (метод Кунса). Сутність методу полягає у виявленні шигел шляхом обробки досліджуваного матеріалу сироваткою, що містить специфічні антитіла, мічені флюорохромами. З'єднання мічених антитіл з гомологічними антигенами супроводжується специфічним світінням комплексів, що виявляються у люмінесцентному мікроскопі. На практиці застосовують два основних варіанти методу Кунса: прямий, при якому використовують сироватку, що містить мічені антитіла проти антигенів шигел, і непрямий (двоетапний) з використанням на першому етапі не міченої флуорохромом сироватки (або глобулінової фракції антишигельної сироватки). На другому етапі застосовують мічену флуорохромом сироватку проти глобулінів застосованої на першому етапі антишигельної сироватки. Порівняльне дослідження діагностичної цінності двох варіантів імунофлюоресцентного методу не виявило великих відмінностей у їх специфічності та чутливості. У клінічній практиці застосування цього методу найбільш ефективно при обстеженні хворих на ранні термінизахворювання, а також при більш тяжких формах інфекції. Істотним недоліком методу імунофлюоресценції є його недостатня специфічність. Найважливішою причиноюНедостатньою специфічністю реакції імунофлюоресценції є антигенна спорідненість ентеробактерії різних пологів. Тому цей метод розглядають як орієнтовний при розпізнаванні шигельної інфекції.

Для виявлення антигенів шигельозів без мікроскопії використовують різні реакції. Ці методи дозволяють виявити антигени збудника у випорожненнях у 76,5 – 96,0% хворих на бактеріологічно підтверджену дизентерію, що свідчить про досить високу їх чутливість. Найбільш доцільно використовувати зазначені методи саме у пізні терміни хвороби. Специфічність цих методів діагностики більшість авторів оцінюють досить високо. Проте Ф.М. Іванов, застосовував виявлення шигельозних антигенів у випорожненнях РСК, отримав позитивні результати при обстеженні здорових покупців, безліч хворих на кишкові інфекції інший етіології в 13,6 % випадків . На думку автора, використання методу є більш доцільним для виявлення специфічних антигенів у сечі, оскільки частота неспецифічних позитивних реакцій в останньому випадку є значно меншою. Використання різних методів дослідження дозволяє виявити антигени шигел у сечі у переважної більшості хворих на бактеріологічно підтверджену дизентерію. Динаміка виведення антигенів з сечею має деякі особливості - виявлення антигенних речовин у ряді випадків можливе вже з перших днів захворювання, але з найбільшою частотою і сталістю воно вдається на 10 - 15-й день і навіть у пізніші терміни. За даними Б.А. Годованого та співавт, частка позитивних результатів виявлення шигельозних антигенів у сечі (РСК) після 10-го дня захворювання становить 77% (відповідний показник для бактеріологічного дослідження калу – 47%). У зв'язку з цією обставиною дослідження сечі на присутність антигенів збудника має при дизентерії значення цінного додаткового методу, насамперед з метою пізньої та ретроспективної діагностики.

За даними Н.М. Нуркіної, якщо античний імунореагент отриманий з поліклональних сироваток, можливі позитивні результати індикації за наявності в пробі споріднених антигенів. Наприклад, з еритроцитарним діагностикумом із високоактивної сироватки проти S.flexneri VI виявляється і антиген S.flexneri I-V, оскільки шигели обох підвидів мають загальний видовий антиген. Антигени шигел вдається визначати в період хвороби як у сироватці крові, так і у виділеннях.

Лі Вон Хо з співавт. показано, що частота виявлення антигенів шигел і їх концентрація в крові і сечі вищі в пір'яні дні захворювання і що концентрація антигенів, що виявляються, вище при середньотяжкому перебігу захворювання, ніж при легкому .

С.М. Омірбаєвої запропоновано спосіб індикації антигену шигел, заснований на використанні формалінізованих еритроцитів як сорбент для антигенів з досліджуваного екстракту фекалій з подальшою аглютинацією їх імунними сироватками. Оцінка специфічності цього методу, на нашу думку, потребує додаткових досліджень, оскільки в екстрактах фекалій містяться в значних кількостяхантигени інших бактерій не є збудником даного кишкового захворювання.

Ряд дослідників пропонують імуно-ферментний аналіз як метод експрес-діагностики гострої дизентерії, який на думку багатьох авторів вважається високочутливим та високоспецифічним. При цьому найбільш високий рівеньантигену виявляється у 1-4 дні захворювання. Незважаючи на очевидні переваги ІФА, до яких відноситься висока чутливість, можливість суворого кількісного інструментального обліку, простота постановки реакції, широке застосування цього методу обмежується через необхідність спеціального обладнання.

Для посилення чутливості та специфічності різних серологічних методів виявлення антигенів рекомендується використовувати моноклональні антитіла, фрагменти імуноглобулінів, синтетичні антитіла, фарбування ЛПС сріблом та інші технологічні вдосконалення.

Виявити антиген інфекційного агента часто не вдається навіть за використання високочутливих реакцій виявлення АГ збудника в біологічних субстратах організму, оскільки значна частина антигенних субстанцій, очевидно, перебуває у біопробі як імунних комплексів в організмі. При обстеженні хворих з бактеріологічно підтвердженою гострою дизентерією позитивні результати визначення антигену РСК відзначали, за деякими даними, лише в 18% випадків.

Т.В. Ременєва та співавт. пропонують для дезінтеграції комплексів антитіл з частинками збудника застосовувати вплив ультразвуку, а потім РСК на холоді визначати антиген збудника. Метод застосовувався для діагностики дизентерії, як матеріал дослідження використовували проби сечі хворих з гострими кишковими інфекціями.

Застосування реакції преципітації для виявлення антигену при гострій дизентерії не виправдане через її низьку чутливість і специфічність. Ми вважаємо, що специфічність будь-яких методів індикації антигенів шигел можна істотно збільшити при використанні моноклональних антитіл до шигел.

Реакція коаглютинації також одна із методів експрес-діагностики шигельозів, як і антигенів збудників низки інших інфекцій. При шигельоз антигени збудників можна визначити з перших днів захворювання протягом усього гострого періоду, а також протягом 1 - 2 тижнів після припинення бактеріовиділення. Переваги реакції коаглютинації – простота виготовлення діагностикумів, постановка реакції, економічність, швидкість, чутливість, висока специфічність.

При проведенні діагностики визначення антигенів шигел з самого початку захворювання найбільш ефективно, за даними багатьох авторів, досліджувати фекалії хворих. З розвитком захворювання можливість виявлення антигенів шигел у сечі та слині знижується, хоча у фекаліях вони виявляються практично з тією ж частотою, що і на початку захворювання. Необхідно враховувати, що у перші 3 – 4 дні захворювання фекалії антигеном дещо ефективніше досліджувати в РПГА. У середині захворювання однаково ефективні РПГА та РНАт, а починаючи з 7-го дня більш ефективною у пошуках антигену шигел є РНАт. Ці особливості зумовлені поступовою деструкцією клітин шигел та їх антигенів у кишечнику хворого протягом захворювання. Антигени шигел, що виділяються з сечею, мають відносно менші розміри, ніж антигени у фекаліях. Тому сечу доцільно дослідити у РНАт. У сечі жінок, на відміну сечі чоловіків, через ймовірного фекального забруднення антигени шигел однаково часто виявляються з допомогою РПГА і РНАт.

Хоча антиген значно частіше (94,5 – 100%) виявляється у тих пробах фекалій, у тому числі вдається виділити шигеллы, ніж у тих пробах, у тому числі шигеллы не виділено (61,8 – 75,8%), при паралельному бактеріологічному і серологическом (На антиген) дослідженні проб фекалій від хворих на дизентерію в цілому шигели виділені тільки з 28,2 - 40,0% проб, а антиген виявлений в 65,9 - 91,5% проб. Важливо наголосити, що видова специфічність виявленого антигену завжди відповідає специфічності сироваткових антитіл, титр яких максимально наростає в динаміці. При орієнтації на умовний діагностичний титр антитіл іноді можуть спостерігатися розбіжності у специфічності таких антитіл та виявленого антигену. Така розбіжність обумовлена ​​недостатньою діагностичною надійністю одноразового визначення активності сироваткових антитіл. В цьому випадку етіологічний діагнозмає бути поставлений за специфічністю виявленого антигену.

Метод ПЛР із завданням прямого виявлення ознак збудника близький до методів індикації антигенів. Він дозволяє визначати ДНК збудника та заснований на принципі природної реплікації ДНК, що включає розплетення подвійної спіралі ДНК, розбіжність ниток ДНК та комплементарне доповнення обох. Реплікація ДНК може початися не в будь-якій точці, а лише у певних стартових блоках – коротких двониткових ділянках. Суть методу полягає в тому, що, маркувавши такими блоками специфічна тільки для даного виду (але не для інших видів) ділянку ДНК, можна багаторазово відтворити (ампліфікувати) саме цю ділянку. Тест-системи, засновані на принципі ампліфікації ДНК, у більшості випадків дозволяють виявляти патогенні для людини бактерії та віруси навіть у випадках, коли іншими способами їх виявлення не вдається. Специфічність ПЛР тест-систем (при правильному виборі таксонспецифічних праймерів, виключення хибнопозитивних результатів та відсутності в біопробах інгібіторів ампліфікації) у принципі дозволяє уникнути проблем, пов'язаних з перехресно-реагуючими антигенами, забезпечуючи тим самим дуже високу специфічність. Визначення можна проводити безпосередньо у клінічному матеріалі, що містить живий патоген. Але, незважаючи на те, що чутливість ПЛР може досягати математично можливої ​​межі (детекція 1 копії ДНК-матриці), метод у практиці діагностики шигельозів не застосовують через відносну дорожнечу.

У широкій клінічній практиці найбільшого поширення серед серологічних методів дослідження набули методи, засновані на визначенні рівня та динаміки сироваткових антитіл до передбачуваного збудника захворювання.

Деякі автори визначали антитіла до шигелів у копрофільтратах. Копроантитіла з'являються значно більш ранні терміни, ніж сироваткові антитіла. Активність антитіл досягає максимуму на 9 – 12 день, а до 20 – 25 дня вони зазвичай не виявляються. R. Laplane et al., припускають, що це пов'язано з руйнуванням антитіл у кишечнику під дією протеолітичних ферментів. У здорових копроантитіла не вдається виявити.

W. Barksdale et al, Т.М. Ніколаєва із співавт. повідомляють про підвищення ефективності розшифрування діагнозу та виявлення реконвалесцентів шляхом одночасного визначення сироваткових та копроантитіл.

Виявлення аглютинінів у діагностичних титрах вдається при бактеріологічно підтвердженій дизентерії лише у 23,3% хворих. Обмежена чутливість РА проявляється і в недостатньо високих титрах аглютинінів, що виявляються з її допомогою. Є дані, що свідчать про неоднакову чутливість РА при різних етіологічних формах шигельної інфекції. За даними А.А. Ключарьова, антитіла в титрі 1: 200 і вище виявляються за допомогою РА лише у 8,3% хворих на дизентерію Флекснера і ще рідше — при дизентерії Зонне. Позитивні результати реакції не тільки частіше, а й у вищих титрах спостерігаються при дизентерії Флекснера I-V і Флекснер VI, ніж при дизентерії Зонне. Позитивні результати РА з'являються з кінця першого тижня захворювання і найчастіше реєструються другого-третього тижня. На перші 10 днів захворювання припадає 396% всіх позитивних результатів реакції. За даними А.Ф. Подлевського та ін., аглютиніни в діагностичних титрах виявляються на першому тижні захворювання у 19% хворих, другого тижня - у 25% і на третьому - у 33% хворих.

Частота позитивних результатів РА і висота титрів антитіл, що виявляються з її допомогою, знаходяться в прямій залежності від тяжкості перебігу шигельної інфекції. За даними В.П. Зубарєвої, застосування антибактеріальної терапії не зменшує частоти позитивних результатів РА, проте при призначенні антибіотиків у перші 3 дні захворювання аглютиніни виявляються у нижчих титрах.

РА має обмежену специфічність. При обстеженні здорових людей позитивні результати РА отримано у 12,7% випадків, у 11,3% випадків спостерігаються групові реакції. У зв'язку з антигенною спорідненістю бактерій Флекснера I-V і Флекснер VI перехресні реакції особливо часто спостерігаються при відповідних етіологічних формах шигельної інфекції.

РА з появою досконаліших методів серодиагностики шигельозної інфекції поступово втратило своє значення. Діагностична цінність реакції аглютинації («дизентерійна реакція Відаля») (РА) при дизентерії оцінюється різними дослідниками неоднозначно, проте результати робіт більшості авторів свідчать про обмежену чутливість та специфічність цього методу.

Найчастіше з метою визначення антитіл використовують реакцію непрямої (пасивної) гемагглютинації (РПГА). Детальні дослідження діагностичної цінності реакції пасивної гемагглютинації (РПГА) при шигельозній інфекції виконані О.В. Луллу, Л. М. Шмутер, Т. В. Влохом та низкою інших дослідників. Їх результати дозволяють зробити висновок, що РПГА є одним з найбільш ефективних способів серологічної діагностики дизентерії, хоча і не позбавленим деяких загальних недоліків, властивих методам цієї групи.

Порівняльне дослідження чутливості при дизентерії РПГА та реакції аглютинації показує велику перевагу першого методу. За даними А.В. частіше ніж у титрі (1:160 при постановці реакції аглютинації). При бактеріологічно підтвердженій гострій дизентерії позитивна реакція РПГА у діагностичних титрах відзначається при обстеженні 53-80% хворих.

Гемаглютинини виявляються з кінця першого тижня захворювання, частота виявлення і титр антитіл наростають, досягаючи максимуму до кінця другого і третього тижня, після чого поступово відбувається зниження їх титру.

Є чітка залежність частоти позитивних результатів РПГА та титрів гемагглютинінів від тяжкості та характеру перебігу шигельної інфекції. Відповідні дослідження показали, що при стертій та субклінічній формах інфекції позитивні результати РПГА отримували рідше, ніж при гострій клінічно вираженій дизентерії (відповідно 52,9 та 65,0%), при цьому в титрах 1:200 – 1:400 реагувало лише 4, 2% сироваток (при клінічно вираженій формі - 31,2%), а при затяжній та хронічній формах позитивні результати РПГА відзначені у 40,8% хворих, у тому числі в титрі 1:200 - лише у 2,0%. Є також повідомлення про різну чутливість РПГА при окремих етіологічних формах шигельозної інфекції. За даними Л.М. Шмутер, найвищі титри гемагглютинінів спостерігаються при дизентерії Зонне і достовірно нижчі — при дизентерії Флекснер І-V та Флекснер VI. Антибактеріальне лікування, розпочате в ранні терміни захворювання, за рахунок зменшення тривалості та інтенсивності антигенного подразнення може обумовлювати появу в сироватці крові гемагглютинінів у нижчих титрах.

Подібно до реакції аглютинації, РПГА не завжди дає можливість точно розпізнати етіологічну форму шигельозної інфекції, що пов'язано з можливістю групових реакцій. Перехресні реакції спостерігаються в основному при дизентерії виду Флекснер між дизентерією Флекснер I-V і Флекснер VI. Гуморальна імунна відповідь у багатьох хворих виражена слабо. Не виключається також можливість перехресної аглютинації за рахунок загальних антигенів. Однак до переваг цього методу відносяться простота постановки реакції, можливість швидкого отримання результатів та порівняно висока діагностична ефективність. Істотним недоліком даного методує те, що діагноз можна встановити не раніше 5-го дня захворювання, максимальні діагностичні титри антитіл можна визначити до 3 тижня хвороби, тому метод можна віднести до «ретроспективним».

З метою діагностики дизентерії запропоновано визначати також рівень специфічних циркулюючих імунних комплексів, представлених О-антигеном S.sonnei, сполученого зі специфічним антитілом, за допомогою непрямого «сендвіч-варіанту» імуноферментного аналізу з огляду на його високу чутливість та специфічність. Проте метод рекомендується використовувати тільки их діб захворювання.

У хворих на дизентерію з самого початку захворювання виявляються специфічне посилення бактеріофіксуючої активності крові за рахунок антигензв'язувальної активності еритроцитів. У перші 5 діб ГКІ визначення антигензв'язувальної активності еритроцитів дозволяє встановити етіологію захворювання у 85-90% випадків. Механізм цього феномену вивчений недостатньо. Можна вважати, що його основою є зв'язування еритроцитами за рахунок їх С3-рецепторів (у приматів, включаючи людину) або Fc-рецепторів (у інших ссавців) імунного комплексу антиген-антитіло.

Серед порівняно нових методів реєстрації специфічної імунної відповіді на клітинному рівні привертає увагу визначення антигензв'язуючих лімфоцитів (АСЛ), що реагують із певним, таксономічно значущим антигеном. Виявлення АСЛ здійснюють різними методами - парної аглютинації лімфоцитів антигеном, імунофлюоресценції, РІА, адсорбції лімфоцитів на антигенсодержащих колонках, адгезії мононуклеарних клітин на скляних капілярах, реакції непрямого розеткоутворення (РНРО). Слід зазначити, що такі високочутливі методи реєстрації АСЛ, як ІФА та РІА, адсорбція лімфоцитів на антигенсодержащих колонках технічно відносно складні і не завжди доступні для широкого застосування. Роботами ряду авторів показана висока чутливість і специфічність РНРО виявлення АСЛ при різних захворюваннях. Поруч дослідників виявлено тісний взаємозв'язок між вмістом АСЛ у крові хворих з різною патологією та формою, тяжкістю та періодом захворювання, переходом його у затяжну або хронічні форми.

Деякі автори вважають, що за визначенням рівня АСЛ в динаміці захворювання можна судити про ефективність терапії, що проводиться. Більшість авторів вважає, що якщо вона успішна, кількість АСЛ падає, а якщо ефективність лікування недостатня, реєструється підвищення або стабілізація цього показника. Повідомляють, що за допомогою визначення АСЛ можна кількісно оцінити сенсибілізацію до тканинних, бактеріальних антигенів, а також до антибіотиків, що має важливе значення. діагностичне значення. Метод АСЛ обмежено використовували для діагностики дизентерії.

Можливість раннього виявленняАСЛ, вже в перші дні після зараження, дуже важлива для ранньої постановки діагнозу та проведення своєчасного лікування, що необхідно для клініциста.

Таким чином, наведені в огляді дані показують, що з урахуванням поширення дизентерії, недостатньої чутливості та пізньої появи позитивних результатів багатьох діагностичних методів доцільно розвивати діагностичний потенціал виявлення цієї інфекції. Отримані при багатьох інфекційних захворюваннях дані про високу ефективність методу АСЛ, ранню появу його позитивного результату визначають перспективу вивчення та застосування цього методу при шигельозах.

Список літератури

1 Ющук Н.Д., Бродов Л.Є. Диференціальна діагностика та лікування гострих кишкових інфекцій// Ріс. ж. гастроентерол., гепатол., Колопроктол. - 2000. - 10, № 5. - С. 13 - 16. - Рус. - ISSN 1382-4376. - RU.

2 Шувалова Є.П., Змушко О.І. Синдромна діагностика інфекційних захворювань. // Підручник. - С-П.: Пітер, 2001. - С. 138-141.

3 Каральник Б.В., Амірєєв С.А., Сиздиков М.С. Принципи та можливості методів лабораторної діагностики та інтерпретація їх результатів у роботі епідеміолога // Метод. рекоменд. – Алмати. - 1997. - 21 с.

4 Каральник Б.В. Серологічна діагностика бактеріальних кишечних інфекцій. //Метод. рекомендації. - Алмати, 1973. - 3-20 с.

5 5. Нуркіна Н.М. Порівняльна ефективність методів серологічної діагностики дизентерії за допомогою сенсибілізованих еритроцитів: Автореф. дис. канд. - Алмати, 1984. - 22 с.

6 Каральник Б.В., Нуркіна Н.М. Комплексна серологічна діагностика дизентерії. //Метод. рекомендації. - Алмати, 1983. - 24 с.

7 Єркінбекова Б.К. Метод індикації антигенів шигел у санітарно-епідеміологічних дослідженнях при дизентерії: Автореф. дис. …канд.мед.наук. - Алмати, 1995. - 18 с.

8 Нікітін В.М., Георгіца Ф.І., Плугар С.В. та ін. Прискорені методидіагностики інфекційних хвороб // Кишинів. - 1987. - 106 с.

9 Неверов В.А. Стратегія та тактика діагностики та лікування гострих кишкових інфекцій. / / СПб. - 1996. - 12 с.

10 Воробйов А.А. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія. // М.- 2004.- С. 7-8.

11 Іванов К.С., Іванов А.І. Діагностика гострих діарейних інфекцій // Клин. мед. - 1992. - № 7-8 - С. 64-69.

12 Ciudin L., Pencu E., Mihai, I. та ін. Serological identification of Shigella flex neri strains by coagglutination reaction // Roum. Arch. Micro biol.Immunol. -1995 / - Vol / 54 (4). - P. 295 - 311.

13 Lindberg AA, Cam PD, Chan N. et al. Shigellosis in Vietnam: сероепід міологічних досліджень з використанням ліпополісакхаріда антигенів в enzym immu noassays // Rev. Infect. Dis. - 1991. - Vol. 13, Suppl 4. - P.231 - 237.

14 Sloper S. Shigella. // In: Enterobacteriaceae-infection. Leipzig.- 1968.- Р. 375-441.

15 Jacobs J., Rudensky B., Dresner J. et al. Comparison of four laboratory tests for diagnosis of Clostridium difficile-associated diarrhea // Eur. J. Clin.Microbiol. Infect.Dis. - 1996. - Vol. 15(7). - P. 561-566.

16 Ключарьов А.А., Полешко Д.В., Вершеня М.І. Клініко-епідеміологічні особливості перебігу дизентерії останніми роками. // Охорона здоров'я Білорусії. - 1973. - № 11. - С. 54-56.

17 Гусарська І.Л. Особливості клінічного перебігу дизентерії Зонне на сучасному етапі та деякі питання її профілактики. // У кн.: Проблеми інфекційних хвороб. – Вологда. - 1970. -С. 23-27.

18 Шитов І.А., Тринітацька М.І. Тривалість бактеріовиділення хворих на гостру дизентерію. // У кн.: Кишкові інфекції. - ч. 2. - Л. 1972. - С. 161-163.

19 Авдєєва Т.А. Кількісне мікробіологічне дослідження придизентерії (підсумки розробки та застосування методу для вивчення клініко-мікробіологічних та епідеміологічних закономірностей дизентерії). Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. д-ра мед. наук. Л., 1964, 28 с.

20 Tillet H., Thomas M. Культура дій у diagnosis sonne dysentery: статистичний метод для визначення true isolation rate. //Internat. J.Epidemiol.- 1974.- vol.3.- Р. 177-181.

21 Хаімзон Б.І. Реакція наростання титру фага у діагностиці гострої дизентерії у дорослих. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед.наук. Воронеж, 1965, 16 с.

22 Вількомирська Т.С. Матеріали з вивчення чутливості таспецифічності реакції наростання титру фага (РНФ) при діагностицідизентерії. // У кн.: Питання імунології інфекційних та алергічних захворювань. Уфа.- 1970.- С. 48-49.

23 Іванов Ф.М. Порівняльна цінність методів посіву, наростання титрафагу та виявлення антигенних речовин на різних етапах дизентерійного процесу. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед.наук. Оренбург, 1963, 10 с.

24 Вількомирська Т.С. Про клініко-епідеміологічне значення реакції наростання титру фага (РНФ) при діагностиці дизентерії в умовах м. Уфи. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед. наук. Уфа, 1971, 24 с.

25 Мазурін Н.Д., Розіна-Іцкіна Ц.С. Реакція наростання титру фага при діагностиці дизентерії. // ЖМЕІ.- 1963. - №1.- С. 113-116.

26 Голюсова Є.В., Трохименко М.З. Про значення проби Цуверкалова при діагностиці гострої дизентерії в дітей віком. // Кишкові інфекції (Київ). – 1972. – вип. 5. - С. 97-99.

27 Фрадкін В.А., Лодінова Л.М. Застосування алергенів для діагностики хронічних кишкових інфекцій. // У кн.: Бактеріоносійство і хронічні форми інфекційних хвороб. - Ч. 2. - М.-1975. - С. 213-215.

28 Лукашевич К.К. Алергічний методдіагностики дизентерії. // У кн.: Деякі питання клініки та алергії в інфекційній патології. Куйбишев. - 1970. - С. 41-43.

29 Чечельницький В.М. Значення реакції Цуверкалова в діагностиці гострої дизентерії. // У кн.: Імунологія та кишкові інфекції.Воронеж.- 1970.- С. 110-114.

30 Богданов І.Л. Алергія в патогенезі, клініці та терапії інфекційних хвороб. // М.- 1974.- 245 з.

31 Горчакова Г.А. Дизентерин (препарат для внутрішньошкірної проби при діагностиці дизентерії). Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. д-ра. мед.наук. Одеса, 1969, 19 с.

32 Любицька Н.А., Поляк А.І. Імунодіагностика дизентерії у дітей // VI Всесоюз. конф. по клініч. біохімії, морфології та імунол.інфекц. бол.: Тези доп. - Рига, 1983. - С. 106-107.

33 Фурман А.А. Порівняльне вивченнядеяких прискорених методів лабораторної діагностики дизентерії та коліентериту. Автореф. дис. Насоїск. вчений. степ. кан. мед. наук. Київ, 1970, 19 с.

34 Михайлов І.Ф., Перс І.Ф. Виявлення антигенних зв'язків між бактеріями кишкової групиметодом флюоресціюючих антитіл. ЖМЕІ, 1975 №5, С. 97-103.

35 Шмутер Л.М. Реакції непрямої гемагглютинації та нейтралізації антитіл у діагностиці дизентерії. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ.кан. мед. наук. Харків, 1968, 19 с.

36 Євдокимова Т.В., Подлевський А.Ф., Яфаєв Р.Х. Клініко-лабораторні паралелі при гострій дизентерії у дорослих. - ЖМЕІ, 1974 №6, С. 82-85.

37 Могильов В.Є. Пасивна гемаглютинація при дизентерії. Автореф.дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед. наук. Куйбишев, 1968, 20 с.

38 Рибакова Н.А. Використання реакції гальмування пасивної гемаглютинації для діагностики дизентерії Зонне за умов практичної лабораторії. - Лаб. справа, 1975 №3, С. 168-170.

39 Іванов Ф.М. Порівняльна цінність методів посіву, наростання титрафагу та виявлення антигенних речовин на різних етапах дизентерійного процесу. Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед. наук. Оренбург, 1963, 10 с.

40 Годований Б.А., Літинський Ю.І., Бодісько В.П. та ін Кількісне визначення антигену шигел Зонне в сечі хворих і бактеріоносіїв. - Лаб. справа, 1974 №6, С. 360-363.

41 Кашкін Г.С. Вивчення динаміки мікробних антигенів у крові та сечоводів при гострій дизентерії. - У кн.: Проблеми інфекційних хвороб. Вологда, 1970, С. 47-50.

42 Нуркіна Н.М. Порівняльна ефективність методів серологічної діагностики дизентерії за допомогою сенсибілізованих еритроцитів: Автореф. дис. канд. - Алмати, 1984. - 22 с.

43 Лі Ван Хо., Рубцов І.В., Трегуб А.В., Ремнєва Т.В. Порівняльна діагностична цінність деяких методів виявлення дизентерійних антигенів у субстратах організму хворого. // Ж. мікробіол. - 1989. - № 1. - С. 57-61.

45 Сакаль Н.М. Застосування та оцінка ефективності імуноферментного аналізу в ранній діагностиці та прогнозуванні перебігу дизентерії Зонне: Автореф. дис. … канд. мед. наук. - СПб., 1993. - 21 с.

46 Рубцов І.В., Піменова Г.М., Кулакова В.М. До статистичної оцінки клініко-лабораторних даних ІФА // Матеріали ювілейної науково-практ. конференції, присв. 80-річчю освіти кафедри інфекційних хвороб ММА ім. І.М.Сєченова (22-23 травня 2003 р.). - М: ММА ім. І.М.Сєченова. – 2003. – С. 152-153.

47 Downes F.P., Green J.K. та ін. Розвиток і випробування enzim-linkedimmunosorbent assay для визначення Shiga – як токсину I і Shiga – як токсину II // J. Clin. Microbiol. - 1989. - V. 27, №6. - P. 1292-1297.

48 Барбанс П.С., Пантюхіна О.М. Методика отримання та контролю флюоресцентних Fав – фрагментів антитіл проти білків сироватки людей, які перенесли черевний тиф // Ж. мікробіол., Епідеміол. та імунобіол. - 1984. - №2. - С. 102-105.

49 Використання синтетичних антигенів для diagnosis infektions diseases //Techn.ser/WHO. - 1989. - №784. - P. 1-74.

50 Ekwall E., Norberg T., Swensons S.B. та ін. specific identification of salmonella serogroup E antigen O3 за допомогою імуноfluorescence і coagglutination with antiserum elicited 1 by synthetic trisaccharide – bovine serum albuminglycoconjugate // J. Clin.Microb. - 1994. - 19, №5. - P. 699-702.

51 Lee Kuo-Ka, Ellis A.E. Швидкий і чутливий сівер-ліпополісакхаріда протіканнявикористання фази системи в простий horizontal polyacrylamide gel electrophoresis //Electrophoresis. - 1989. - V. 10, №10. - P. 729-731.

52 Темпієва Т.В., Юдицька Н.М., Літинський Ю.І., Чи Вам Хо. Ультразвукова дезінтеграція імунних комплексів для виявлення антигенівшигел у сечі хворих на дизентерію // Лаб. справа. - 1988. - №9. - С. 64-66.

53 Чайка Н.А. Вивчення кишкових інфекцій та їх збудників за допомогою сучасних імунологічних методів // Гострі кишкові інфекції. - Л.: Ленінгр. НДІ епід. та мікро. - 1987. - Вип. ІІ. - С.3-8.

54 Хазенсон Л.Б., Чайка Н.А. Імунологічні основи діагностики та епідеміологічного аналізу кишкових інфекцій. - М.: Медицина. -1987. - 112 с.

55 Кашкін Г.С. Вивчення динаміки мікробних антигенів у крові та сечі дітей при гострій дизентерії. // У кн.: Проблеми інфекційних хвороб. – Вологда. - 1970. - С. 47-50.

56 Годований Б.А., Літинський Ю.І., Бодісько В.П. Кількісне визначення антигену шигел Зонне в сечі хворих та бактеріоносіїв. // Лаб. справа. - 1970. - № 6. - С. 360-363.

57 Рибакова Н.А., Рибаков Д.А. Застосування РНГА та РНАт при епідеміологічному розслідуванні захворювань дизентерійної етіології. -Праці Ленінградського НДІ епідеміол. та мікробіол. імені Пастера -Т. 56. - Л., 1981. - С. 58-61.

58 Васильєва А.В. Порівняльна оцінка різних методів серологічної діагностики дизентерії Зонне. //Кишкові інфекції. - 1972. - Вип. № 5. - С. 129-132.

59 Дубініна І.Г., Щербо С.М., Макаров В.Б. Методи полімеразної ланцюгової реакції у лабораторній практиці. //Клінічна лабораторна діагностика. - 1997, №7. - С. 4 - 6.

60 Туркадзе К.А., Подколзін Т.А., Кокорєва Л.М. та ін Порівняльна ефективність використання ПЛР та бактеріологічного методу в діагностиці сальмонельозу та шигельозу // Матеріали ювілейної науково-практ. конференції, присв. 80-річчю освіти кафедри інфекційних хвороб ММА ім. І.М.Сєченова (22-23 травня 2003 р.). - М: ММА ім. І.М.Сєченова. – 2003. – С. 172-173.

61 Ахтамов М.А., Ахмедов А.А. Порівняльне вивчення ефективності деяких серологічних реакційу лабораторній діагностиці гострої дизентерії // Мед. журнал Узбекистану. - 1984. -№1. - С. 29-31.

62 Борисов В.А. До порівняльної оцінки деяких серологічних методів діагностики дизентерії. - Лаб. справа, 1972 №9, С. 564-566.

63 Laplane R., Be, gue P., Omanga V. Anticorps seriques et copro-anticorps dansles infections bacteriennes digestives de l, enfant. // Bull. Acad. nat. med. - 1975. - Vol. 159. - № 7. - P. 596-600.

64 Barksdale W., Ghoda A. Agglutinating antibodies in serum and faeses.// J. Immunol. - 1951. - Vol. 66. - P. 395 - 401.

65 Ніколаєва Т.А., Кукайн Е.М., Хазенсон Л.Б. Імунохімічна природа копро- та сироваткових антитіл у хворих на дизентерію Зонне та інші ОКЗ. - Тез. доп. до наук.- практ. конф., присв. 50-річчю ЛенінгрНДІЕМ ім. Пастер. Л., 1973, с. 53-54.

66 Луллу А.В. Застосування реакції непрямої гемаглютинації для діагностики та вивчення імунології гострої дизентерії. // Автореф. дис. на соїск. вчений. степ. кан. мед. наук. - Тарту. - 1963. - 10 с.

67 Ключарьов А.А. Матеріали до вивчення дизентерії у Білорусії. Полешко Д.В., Вершеня М.І. Клініко-епідеміологічні особливості течії дизентерії за останні роки. // Автореф. дис. на соїск. учений степ. д-ра. мед. наук. - Каунас. - 1970. - 32 с.

68 Подлевський А.Ф., Целінська Н.М., Журавльова Л.В., Бучель Н.Є. Реакція непрямої гемаглютинації при дизентерії у хворих різного віку. // У кн.: Питання епідеміології та профілактики кишкових іприродно-осередкових інфекцій. Л., 1971, С. 93-99.

69 Зайтленок М.А., Єрьоміна А.М., Суботіна Ю.Л. Серологічні дослідження при гострих кишкових інфекціях, не підтверджених бактеріологічно // Імунологія та імунопатологія. - Воронеж, 1983. - С. 35-37.

70 Борисов В.А., Орлик Н.С., Кирилюк М.А. Імунна відповідь у хворих на дизентерію з тривалим виділенням шигел. // Всесоюз. конф. поклінічної біохімії, морфології та імунології інфекційних хвороб. Тез. доп. - Рига. - 1977. - С. 377-378.

71 Чилінгарян А.В. Результати паралельного застосування легеневої моделі, реакції непрямої гемаглютинації та реакції аглютинації для виявлення протидизентерійних антитіл у крові здорових. // У кн.: Гострі кишкові інфекції. Дизентерія, ешеріхіози, сальмонельози. - Л. - 1970. - С. 93-101.

72 Patton C.M., Gangorosa E.J., Weissman J.B. та ін. Diagnostie value of inderect hemaglutination in seroepidemiology of Shigella infections. // J. of Clin. Microb. - 1976. - Vol. - 23. - P. 143-148.

73 Martinez J. Epidemiological study bacterial dysentery. // Bol. ofic. sanit.panamer. - 1973. - Vol. 75. - P. 213-224.

74 Мусабаєв І.К., Абубакірова Ф.З. Бактеріальна дизентерія. - Таш -Кент - 1973. - 258 с.

75 Дулатова М.В., Головачова С.М., Савицька О.В. Принцип РПГА в експрес-діагностиці інфекцій та імунітету. // У кн.: Препарати для експрес діагностики. - Л., 1981. - С. 31-42.

76 Сафонова Н.В. Застосування реакції непрямої гемаглютинації в осередках гострої кишкової інфекції виявлення інфікованих і пошуках джерел. - Л., 1974. - 11с.

77 Солодовников Ю.П., Калашнікова Г.К., Суботіна Ю.Л., Бобкін С.В.Реакція непрямої гемаглютинації у вивченні антитіл у здорових, хворих і перехворіли на дизентерію Зонне. - ЖМЕІ, 1971, № 1. - С.13-18.

78 Провоторов В.Я. До питання лікування хворих дизентерією. – У кн.: Позалікарняна допомога інфекційним хворим та питання лікування інфекційних хворих. Саратов, 1973. - С. 153-155.

79 Каральник Б.В. Методологія та тактика імунодіагностики інфекційної патології. - У кн.: Питання клінічної імунології та імунологічної діагностики. Алма-Ата, 1988. - 10 с.

80 Каплін В.І., Клевцова Г.А., Корюхіна І.П. та ін Специфічна реакція крові в початковий періоддизентерійної та сальмонельозної інфекції та нові можливості ранньої специфічної діагностики гострих кишкових інфекцій // VI Всесоюз. конф. по клініч. біохімії,морфології та імунол. інфекцій. бол.: Тези доп. - Рига, 1983. - С.76-77.

81 Савілов Є.Д., Астаф'єв В.А., Мамонтова Л.М., Володін Ю.Ф.Епідеміологічні особливості дизентерії в Східного Сибіру. //Новосибірськ "Наука", 1994. - С.42-43.

82 Іванов К.С., Іванов А.І. Діагностика гострих діарейних інфекцій // Клин. мед. - 1992. - № 7-8 - С. 64-69.

83 Каральник Б.В. Еритроцити, їх рецептори та імунітет. //Усп.совр.биол., М. – 1992. – т.112, №1. - С.52-61.

84 Гаріб Ф.Ю., Залялієва М.В. Методи вивчення субпопуляції лімфоцитів у людини за різних патологічних станів // Метод.рекомендації. - Ташкент, 1989. - 17с.

85 Bahrg. Модабер F.Z. //J. Immunol.Meth. - 1980. - V. 38, №3-4. - P. 203-216.

86 Тяготін Ю.А. // Питання обстеження та лікування хворих із захворюваннями системи крові. - Л., 1975. - С. 21-25.

87 Новіков Д.К., Новікова В.І. Клітинні методи імунодіагностики. // Мінськ, 1979. - 222 с.

88 Смирнов Б.М., Торопова Н.І., Мохова Г.А. та ін // Матеріали Всесоюзної наукової конференції «Проблеми мед.біотехнології». Жов. 1988. - Л., 1990. - С. 114-116.

89 Славко Є.А., Дерябін П.М., Каральник Б.В. Визначення антигензв'язуючих лімфоцитів як метод ранньої діагностики сальмонельозу і дизентерії // Охорона здоров'я Казахстану.-Алмати.- 1999. - №5-6.-С.43-45.

90 Каральник Б.В., Кожагельдієва А.А., Карабеков А.Ж., Денисова Т.Г., Раїпов О.Р. Контроль ефективності лікування ієрсиніозу, спричиненого Yersinia enterocolitica // Медицина. - Алмати. - 2004. - №4. - С.51-53.

91 Каральник Б.В., Денисова Т.Г., Плазун А.А. та ін. Антигензв'язуючі лімфоцити туберкулінової специфічності у кроликів, заражених M. bovis, у динаміці лікування туберкульозу // Проблеми туберкульозу та хвороби легень. -М.-2006. - №5.-С.48-53.

92 Каральник Б.В., Карабеков А.Ж., Денисова Т.Г., Кожагельдієва А.А., Жунусова Г.Б. Диференціальна діагностика бруцельозу та кишковогоієрсініозу, викликаного Yersinia enterocolitica серовара О9 // Медицина.-Алмати.-2004.- №3.- С.155-157.

93 Каральник Б.В., Денисова Т.Г., Жунусова Г.Б., Федосов С.А., ЖанкінА.А., Оспанов К.С., Мізанбаєва С.У. Ефективність різних реакцій визначення антитіл і тесту антигензв'язуючих лімфоцитів у діагностиці бруцельозу у людей. // Мед.імунологія. - С.-П. - 2006. - Т 8. - №4. - С. 567 - 572.

94 Каральник Б.В., Денисова Т.Г., Грушіна Т.А., Тугамбаєв Т.І. Аналіз імунної відповіді морських свинок, інфікованих Brucella melitensis // Ж. мікробіол.- М.-2002.- №1.- С.54-56

95 Каральник Б.В., Березін В.Є., Денисова Т.Г., Дерябін П.М., Славко О.О. та ін Динаміка вмісту лімфоцитів з рецепторами до вірусу Sendai при імунізації вірусом та імуностимулюючим комплексом з йогоглікопротеїдів // Извест. Мін.науки та вищої освітиРК. Сер.біол. та мед.-Алмати.-1999.- №3.- С.50-51.

96 Гаріб Ф.Ю., Гурарій Н.І., Алієв Ш.Р. Характеристика антигензв'язуючих лімфоцитів при хронічному гепатиті у дітей // Імунологія-1988. - №5. С. 91-93.

97 Finlay B.B., Falkow S.A. A comparison of microbial strategies of Salmonella,Shigella and Jersinia species // Bacterial – Host cell interaction, Alban R.Liss. Inc. - 1988. - P. 227-243.

98 Каральник Б.В., Денисова Т.Г., Кешилева З.Б., Пшенична Л.А. та ін. Антигензв'язуючі лімфоцити та антитіла в діагностиці сифілісу //Інфекції, що передаються статевим шляхом. - М. - 1999. - №5. - С. 34 -36.

99 Саканова Л.М., Каральник Б.В., Укбаєва Т.Д. та ін. Імунореагенти для виявлення антигензв'язуючих лімфоцитів та їх апробація при діагностиці менінгококової інфекції// Гігієна, епідеміологія та імунобіологія. - Алмати. -2002. - №1-2.-С.69-72.

100 Славко Є.А., Дерябін П.М., Каральник Б.В., Карабеков О.Ж. Про специфічність антигензв'язуючих лімфоцитів, що виявляються у хворих на гострі запальні захворювання шлунково-кишкового тракту. // Гігієна, епідеміологія та імунобіологія. – Алмати. - 1999. - №2. - С. 102 - 105.

А.М.Садикова

Дизентеріяни лабораторли діагностикаси

Тү йін:Жедел ішек інфекціяларин бақылауда, дизентеріяниҮ нақти діагностікаси ең өзу мәселесі більш табилади. Бактеріальди дизентеріяни дұрис қойиллан діагнози науқасқа уақытинда ем жүргізуге жҙне епідемія қарси шараларди өткізу үшін маңізди. Огляди көрсетілген мәліметтер, дизентеріянике таралуин негіздей отирип, сезімталдиғиниң жеткиліксіздігі және көп деген діагностикалиқ әдістердің оң нәтижені қтауда діагностикақ потенціали мақсатти үрде дамиту керек екенін көрсетеді.

Тү йінді зө здер:діагностика, дизентерія, антигенбайланістіруши әдіс.

A.M.Садикова

Laboratory diagnostics of dysentery

Resume:Досвідчена diagnosis diarrhoe є одним з найбільш важливих питань, щоб контролювати дію intestinal infection. Exact diagnosis bacteriosis diarrhoe має vitae meaning for correct and accurate treatment of patient and to necessary antiepidemic measures aswell. Члени людей ведуть в повітрі, беручи до уваги дисциплінарну диверсію, показують ласку sensibility і останній випадок позитивних результатів багатьох diagnostických методів. Це є важливим, аби розвинути diagnostic potential to desine the infection.

Keywords: diagnostics, dysentery, antigen binding lymphocytes метод.