Hulumtimi bakteriologjik në dizenteri. Diagnoza laboratorike e dizenterisë, amebiazës dhe balantidiazës

Dizenteria.

Dizenteri - infeksioni, e karakterizuar nga intoksikimi i përgjithshëm i trupit, jashtëqitja e lirshme dhe një lezion i veçantë i mukozës së zorrës së trashë. Është një nga sëmundjet më të shpeshta akute të zorrëve në botë. Sëmundja njihet që në lashtësi me emrin "diarre e përgjakshme", por natyra e saj doli të ishte e ndryshme. Në 1875 Shkencëtari rus Lesh izoloi një amebë nga një pacient me diarre të përgjakshme Entamoeba histolytica, në 15 vitet e ardhshme u vendos pavarësia e kësaj sëmundjeje, e cila ruajti emrin amebiazë. Agjentët shkaktarë të dizenterisë janë një grup i madh bakteresh biologjikisht të ngjashme të bashkuara në gjini Shigelta. Patogjeni u zbulua për herë të parë në 1888. A. Chantemes dhe Vidal; në 1891 ajo u përshkrua nga A.V. Grigoriev, dhe në 1898. K. Shiga, duke përdorur serumin e marrë nga pacienti, identifikoi patogjenin në 34 pacientë me dizenteri, duke vërtetuar përfundimisht rolin etiologjik të këtij bakteri. Sidoqoftë, në vitet pasuese, u zbuluan patogjenë të tjerë të dizenterisë: në 1900. - S. Flexner, më 1915. - K. Sonne, më 1917. - K. Stutzer dhe K. Schmitz, më 1932. - J. Boyd, më 1934 - D. Large, më 1943 - A. Saks.

Aktualisht gjinia Shigella përfshin më shumë se 40 serotipe. Të gjithë janë shufra gram-negative të palëvizshme të shkurtra që nuk formojnë spore dhe kapsula, të cilat (rriten mirë në të zakonshëm media ushqyese, mos rriteni në një mjedis me citrat si burimin e vetëm të karbonit; nuk formojnë H2S, nuk kanë ureazë; reagimi Voges-Proskauer është negativ; glukoza dhe disa karbohidrate të tjera fermentohen për të formuar acid pa gaz (përveç disa biotipeve Shigella flexneri: S.manchester dhe ewcastle); si rregull, mos fermentoni laktozë (me përjashtim të Shigella Sonne), adonit, inositol, nuk lëngëzoni xhelatinë, zakonisht formoni katalazë, nuk kanë lizin dekarboksilazë dhe fenilalaninë deaminazë. Përmbajtja e G+C në ADN është 49-53 mol%. Shigella janë anaerobe fakultative, temperatura optimale për rritje është 37 ° C, ato nuk rriten mbi 45 ° C, pH optimale e mediumit është 6.7-7.2. Kolonitë në media të dendura janë të rrumbullakëta, konvekse, të tejdukshme; në rastin e bashkimit, formohen koloni të përafërta në formë R. Rritja në BCH në formën e një turbulli të njëtrajtshme, format e përafërta formojnë një precipitat. Kulturat e freskëta të izoluara të Shigella Sonne J4HO formojnë koloni të dy llojeve: të vogla të rrumbullakëta konveks (faza I), të mëdha të sheshta (Faza 2). Natyra e kolonisë varet nga prania (faza I) ose mungesa (faza II) e plazmidit me mm 120 MD, e cila përcakton edhe virulencën e Shigella Sonne.

Në Shigella u gjetën O-antigjene me specifika të ndryshme: të zakonshme për familjen enterobacteriaceae, gjenerik, specie, grup dhe tip specifik, si dhe K-antigjene; Ata nuk kanë antigjene H.

Klasifikimi merr parasysh vetëm O-antigjenet e grupit dhe tipit specifik. Sipas këtyre veçorive, Shigella ndahet në 4 nëngrupe, ose 4 lloje, dhe përfshin 44 serotipe. Në nëngrupin A (specie Shigella dysenteriae) Shigella nuk fermenton manitol janë të përfshira. Lloji përfshin 12 serotipe (1-12). Çdo stereotip ka antigjenin e vet të tipit specifik; Marrëdhëniet antigjenike midis serotipeve, si dhe me llojet e tjera të shigellave, janë të shprehura dobët. Për nëngrupin B (lloji Shigella flexneri) përfshijnë shigella, zakonisht manitol fermentues. Shigelat e kësaj specie janë të lidhura serologjikisht me njëra-tjetrën: përmbajnë antigjene tip-specifike (I-VI), sipas të cilave ato ndahen në serotipe (1-6), dhe antigjene grupore, të cilat gjenden në përbërje të ndryshme në secilin serotip. dhe sipas të cilit serotipet ndahen në nënserotipe. Përveç kësaj, kjo specie përfshin dy variante antigjenike - X dhe Y, të cilat nuk kanë antigjene tipike, ato ndryshojnë në grupe të antigjeneve të grupit. Serotip S.flexneri 6 nuk ka nënserotipe, por ndahet në 3 lloje biokimike sipas karakteristikave të fermentimit të glukozës, manitolit dhe dulcitit.

Për nëngrupin C (lloj Shlgella boydll) përfshijnë shigella, zakonisht manitol fermentues. Anëtarët e grupit janë serologjikisht të dallueshëm nga njëri-tjetri. Marrëdhëniet antigjenike brenda specieve janë të shprehura dobët. Lloji përfshin 18 serotipe (1-18), secila prej të cilave ka antigjenin e vet të tipit kryesor.

Në nëngrupin D (specie Shlgella sonnel përfshinte Shigella, zakonisht fermentues i manitolit dhe i aftë për të fermentuar ngadalë (pas 24 orësh inkubimi e më vonë) laktozën dhe saharozën. Pamje S. sonnei përfshin një serotip, megjithatë, kolonitë e fazave I dhe II kanë antigjenet e tyre tip-specifik. Dy metoda janë propozuar për klasifikimin intraspecifik të Sonne's Shigella:

1) ndarja e tyre në 14 lloje dhe nëntipe biokimike sipas aftësisë së tyre për të fermentuar maltozën, ramnozën dhe ksilozën;

2) ndarja në lloje fagësh sipas ndjeshmërisë ndaj një grupi fagësh përkatës.

Këto metoda tipizimi janë kryesisht të një rëndësie epidemiologjike. Përveç kësaj, shigella e Sonne dhe shigella e Flexner i nënshtrohen tipizimit për të njëjtin qëllim nga aftësia për të sintetizuar kolicina specifike (kolicinogjenotipizimi) dhe nga ndjeshmëria ndaj kolicinave të njohura (kolicinotyping). Për të përcaktuar llojin e kolicinave të prodhuara nga Shigella, J. Abbott dhe R. Shannon propozuan grupe të shtameve tipike dhe treguese të Shigella-s dhe për të përcaktuar ndjeshmërinë e Shigella-s ndaj lloje të njohura kolicinat përdorin një grup shtamesh referuese kolicinogjene P. Frederick.

rezistencës. Shigella kanë një rezistencë mjaft të lartë ndaj faktorëve mjedisorë. Ata mbijetojnë në pëlhurë pambuku dhe letër deri në 30-36 ditë, në feces të tharë - deri në 4-5 muaj, në tokë - deri në 3-4 muaj, në ujë - nga 0,5 në 3 muaj, në fruta dhe perime - lart në 2 njësi, në qumësht dhe produkte qumështi - deri në disa javë; në 60 °C ata vdesin në 15-20 minuta.

I ndjeshëm ndaj solucioneve të kloraminës, klorit aktiv dhe dezinfektuesve të tjerë.

faktorët e patogjenitetit. Më e rëndësishmja veti biologjike Shigella, e cila përcakton patogjenitetin e tyre - aftësinë për të pushtuar qelizat epiteliale, të shumohen në to dhe të shkaktojnë vdekjen e tyre. Ky efekt mund të zbulohet duke përdorur një test keratokonjuktival (futja e një laku të një kulture Shigella (2-3 miliardë baktere) nën qepallën e poshtme të një derri gini shkakton zhvillimin e keratokonjuktivitit seroz-purulent), si dhe nga infeksioni i qelizave kulturat (efekti citotoksik), ose embrionet e pulës (vdekja e tyre), ose minjtë e bardhë intranazalisht (zhvillimi i pneumonisë). Faktorët kryesorë të patogjenitetit të shigellës mund të ndahen në tre grupe:

1) faktorët që përcaktojnë ndërveprimin me epitelin e mukozës;

2) faktorët që sigurojnë rezistencë ndaj mekanizmave mbrojtës humoral dhe qelizor të makroorganizmit dhe aftësisë së Shigellës për t'u shumuar në qelizat e saj;

3) aftësia për të prodhuar toksina dhe produkte toksike që përcaktojnë zhvillimin e procesit aktual patologjik.

Grupi i parë përfshin faktorët e ngjitjes dhe kolonizimit: roli i tyre luhet nga pili, proteinat e membranës së jashtme dhe LPS. Ngjitja dhe kolonizimi lehtësohen nga enzimat që shkatërrojnë mukozën - neuraminidaza, hialuronidaza, mucinaza. Grupi i dytë përfshin faktorët e pushtimit që nxisin depërtimin e Shigella në enterocite dhe riprodhimin e tyre në to dhe në makrofagë me shfaqjen e njëkohshme të një efekti citotoksik dhe (ose) enterotoksik. Këto veti kontrollohen nga gjenet e plazmidit me m.m. 140 MD (ajo kodon sintezën e proteinave të membranës së jashtme që shkaktojnë pushtim) dhe gjeneve kromozomale Shigella: ksr A (shkakton keratokonjuktivit), cyt (përgjegjës për shkatërrimin e qelizave), si dhe gjenet e tjera që ende nuk janë identifikuar. Mbrojtja e Shigellës nga fagocitoza sigurohet nga K-antigjeni sipërfaqësor, antigjenet 3, 4 dhe lipopolisakaridi. Përveç kësaj, lipidi A endotoksina Shigella ka një efekt imunosupresiv - ai shtyp aktivitetin e qelizave të kujtesës imune.

Grupi i tretë i faktorëve të patogjenitetit përfshin endotoksinën dhe dy lloje ekzotoksinash që gjenden në Shigella - ekzotoksina Shiga dhe ekzotoksina të ngjashme me Shiga (SLT-I dhe SLT-II), vetitë citotoksike të të cilave janë më të theksuara në. S.dysenteriae 1. Toksinat e ngjashme me Shiga dhe Shiga gjenden gjithashtu në serotipe të tjera S.dysenteriae, formohen edhe ato S.flexneri, S.sonnei, S.boydii, ETEC dhe disa salmonela. Sinteza e këtyre toksinave kontrollohet nga gjenet toksike të fagëve konvertues. Enterotoksinat e tipit LT janë gjetur në Flexner, Sonne dhe Boyd Shigella. Sinteza e LT në to kontrollohet nga gjenet plazmidike. Enterotoksina stimulon aktivitetin e adenilate ciklazës dhe është përgjegjëse për zhvillimin e diarresë. Shiga toksina, ose neurotoksina, nuk reagon me sistemin adenilate ciklazë, por ka një efekt të drejtpërdrejtë citotoksik. Shiga dhe toksinat e ngjashme me Shiga (SLT-I dhe SLT-II) kanë m.m. -70 kD dhe përbëhet nga njësitë A dhe B (e fundit prej 5 nënnjësive të vogla identike). Receptori për toksinat është glikolipidi i membranës qelizore.

Virulenca e Shigella Sonne varet edhe nga plazmidi me m.m. 120 MD. Ai kontrollon sintezën e rreth 40 polipeptideve të membranës së jashtme, shtatë prej të cilave shoqërohen me virulencë. Shigella Sonne me këtë plazmid formon koloni të fazës I dhe është virulente. Kulturat që kanë humbur plazmidën formojnë koloni të fazës II dhe nuk kanë virulencë. Plazmida me m.m. 120-140 MD u gjetën në Flexner dhe Boyd Shigella. Lipopolisakaridi i shigellës është një endotoksinë e fuqishme.

Karakteristikat e epidemiologjisë. Burimi i vetëm i infeksionit janë njerëzit. Asnjë kafshë në natyrë nuk vuan nga dizenteria. Në kushte eksperimentale, dizenteria mund të riprodhohet vetëm te majmunët. Metoda e infeksionit është fekalo-orale. Mënyrat e transmetimit - uji (mbizotërues për Shigella Flexner), ushqimi, rol veçanërisht të rëndësishëm i takon qumështit dhe produkteve të qumështit (rruga mbizotëruese e infeksionit për Shigella Sonne), dhe kontakti-familjari, veçanërisht për speciet. S. dysenteriae.

Një tipar i epidemiologjisë së dizenterisë është ndryshimi në përbërjen e specieve të patogjenëve, si dhe në biotipet Sonne dhe serotipet Flexner në rajone të caktuara. Për shembull, deri në fund të viteve '30 të shekullit XX, pjesa S.dysenteriae 1 përbënte deri në 30-40% të të gjitha rasteve të dizenterisë, dhe më pas ky serotip filloi të shfaqej gjithnjë e më pak dhe pothuajse u zhduk. Megjithatë, në vitet 1960 dhe 1980 S.dysenteriae u rishfaq në arenën historike dhe shkaktoi një sërë epidemish që çuan në formimin e tre vatrave hiperendemike të tij - në Amerikën Qendrore, Afrikën Qendrore dhe Azinë Jugore (Indi, Pakistan, Bangladesh dhe vende të tjera). Arsyet për ndryshimin e përbërjes së specieve të patogjenëve të dizenterisë janë ndoshta të lidhura me një ndryshim imuniteti i tufës dhe me ndryshimin e vetive të baktereve të dizenterisë. Në veçanti, kthimi S.dysenteriae 1 dhe shpërndarja e gjerë e saj, e cila shkaktoi formimin e vatrave hiperendemike të dizenterisë, shoqërohet me përvetësimin e plazmideve prej saj, gjë që shkaktoi rezistencë ndaj shumë ilaçeve dhe rritje të virulencës.

Karakteristikat e patogjenezës dhe klinikës. Periudha e inkubacionit për dizenteri është 2-5 ditë, ndonjëherë më pak se një ditë. Formimi fokus infektiv në membranën mukoze të pjesës zbritëse të zorrës së trashë (sigmoid dhe rektum), ku depërton agjenti shkaktar i dizenterisë, është ciklik: ngjitja, kolonizimi, futja e shigelës në citoplazmën e enterociteve, riprodhimi ndërqelizor, shkatërrimi dhe riprodhimi i tyre. e qelizave epiteliale, lëshimi i patogjenëve në lumenin e zorrëve; pas kësaj, fillon cikli tjetër - ngjitja, kolonizimi, etj. Intensiteti i cikleve varet nga përqendrimi i patogjenëve në shtresën parietale të mukozës. Si rezultat i cikleve të përsëritura, fokusi inflamator rritet, ulcerat që rezultojnë, lidhen, rrisin ekspozimin muri i zorrëve, si pasojë e së cilës në jashtëqitje shfaqen gjak, gunga mukopurulente, leukocite polimorfonukleare. Citotoksinat (SLT-I dhe SLT-II) shkaktojnë shkatërrim të qelizave, enterotoksina - diarre, endotoksina - dehje e përgjithshme. Klinika e dizenterisë përcaktohet kryesisht nga lloji i ekzotoksinave që prodhohet në një masë më të madhe nga patogjeni, shkalla e efektit të tij alergjik dhe statusi imunitar organizëm. Megjithatë, shumë pyetje të patogjenezës së dizenterisë mbeten të pashpjegueshme, në veçanti: tiparet e rrjedhës së dizenterisë tek fëmijët e dy viteve të para të jetës, arsyet e kalimit të dizenterisë akute në kronike, rëndësia e sensibilizimit, mekanizmi të imunitetit lokal të mukozës së zorrëve etj.Më tipiket manifestimet klinike dizenteria shërben si diarre, nxitjet e shpeshta- në raste të rënda, deri në 50 ose më shumë herë në ditë, tenesmus (spazma të dhimbshme të rektumit) dhe dehje të përgjithshme. Natyra e jashtëqitjes përcaktohet nga shkalla e dëmtimit të zorrës së trashë. Dizenteria më e rëndë shkaktohet nga S.dysenteriae 1, më e lehtë - Dizenteria e Sonne.

Imuniteti pas infektimit. Siç kanë treguar vëzhgimet mbi majmunët, pas vuajtjes së dizenterisë, mbetet një imunitet i fortë dhe mjaft afatgjatë. Shkaktohet nga antitrupat antimikrobikë, antitoksinat, rritja e aktivitetit të makrofagëve dhe limfociteve T. Luan një rol të rëndësishëm imuniteti lokal mukoza e zorrëve e ndërmjetësuar nga IgAs. Megjithatë, imuniteti është tip-specifik në natyrë, imunitet i fortë ndër-imun nuk ndodh.

Diagnostifikimi laboratorik . Metoda kryesore është bakteriologjike. Materiali për studim është feces. Skema e izolimit të patogjenit: inokulimi në mediat diagnostike diferenciale Endo dhe Ploskirev (paralelisht në mjedisin pasurues, i ndjekur nga inokulimi në median Endo dhe Ploskirev) për të izoluar kolonitë e izoluara, duke marrë kulturë e pastër, studimi i vetive biokimike të tij dhe, duke marrë parasysh këtë të fundit, identifikimi duke përdorur serumet aglutinuese diagnostikuese polivalente dhe monovalente. Prodhohen serumet e mëposhtme komerciale:

1. Tek Shigella që nuk fermentojnë manitol: të S.dysenteriae 1 deri në 2 S.dysenteriae 3-7(polivalente dhe njëvalente), të S.dysenteriae 8-12(polivalente dhe njëvalente).

2. Për manitol fermentues shigella:

ndaj antigjeneve tipike S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

për të grupuar antigjenet S.flexneri 3, 4, 6,7,8- polivalente,

ndaj antigjeneve S.boydii 1-18(polivalente dhe njëvalente),

ndaj antigjeneve S. sonnei Faza I, faza II,

ndaj antigjeneve S.flexneri I-VI+ S.sonnei- polivalente.

Për të zbuluar antigjenet në gjak (përfshirë si pjesë të CEC), mund të përdoren urina dhe feces. metodat e mëposhtme: RPHA, RSK, reaksioni i koaglutinimit (në urinë dhe feces), IFM, RPHA (në serumin e gjakut). Këto metoda janë shumë efektive, specifike dhe të përshtatshme për diagnostikimin e hershëm.

Për diagnozën serologjike mund të përdoren: RPHA me të përshtatshme diagnostifikimi i eritrociteve, metoda imunofluoreshente (në modifikim indirekt), metoda Coombs (përcaktimi i titrit të antitrupave jo të plotë). Vlera diagnostike gjithashtu ka një test alergjik me dizenteri (një zgjidhje e fraksioneve proteinike të Shigella Flexner dhe Sonne). Reaksioni merret parasysh pas 24 orësh.Cilësohet pozitiv në prani të hiperemisë dhe infiltrimit me diametër 10-20 mm.

Mjekimi. Fokusi është në rivendosjen e normalitetit metabolizmi ujë-kripë, të ushqyerit racional, detoksifikimi, terapi racionale me antibiotikë (duke marrë parasysh ndjeshmërinë e patogjenit ndaj antibiotikëve). efekt i mirë jep përdorimin e hershëm të një bakteriofagu dizenterik polivalent, veçanërisht tableta me një shtresë pektine, e cila mbron fagun nga veprimi i HCl gastrike; në zorra e holle pektina tretet, faget lirohen dhe tregojnë veprimin e tyre. Për qëllime profilaktike, fagu duhet të jepet të paktën një herë në tre ditë (periudha e mbijetesës së tij në zorrë).

Problemi i parandalimit specifik. Për krijimin imuniteti artificial kundër dizenterisë u përdorën vaksina të ndryshme: nga bakteret e vrarë, kimike, alkool, por të gjitha rezultuan të paefektshme dhe u ndërprenë. Vaksinat kundër dizenterisë Flexner janë krijuar nga Shigella Flexner e gjallë (mutante, e varur nga streptomicina); vaksinat ribozomale, por ata gjithashtu nuk gjetën aplikim të gjerë. Prandaj, problemi i parandalimit specifik të dizenterisë mbetet i pazgjidhur. Mënyra kryesore për të luftuar dizenterinë është përmirësimi i sistemit të furnizimit me ujë dhe kanalizimeve, sigurimi i regjimeve të rrepta sanitare dhe higjienike në ndërmarrjet ushqimore, veçanërisht në industrinë e qumështit, në mjediset e kujdesit për fëmijët, në vendet publike dhe në higjienën personale.

Mikrobiologjia e kolerës

OBSH e përkufizon kolerën si një sëmundje të karakterizuar nga diarre akute, e rëndë, dehidratuese me ujë oriz, si rezultat i infeksionit me Vibrio cholerae. Për faktin se karakterizohet nga një aftësi e theksuar për përhapje të gjerë epidemike, kurs i rëndë dhe vdekshmëria e lartë, kolera është një nga infeksionet më të rrezikshme.

Atdheu historik i kolerës është India, më saktë delta e lumenjve Ganges dhe Brahmaputra (tani India Lindore dhe Bangladeshi), ku ka ekzistuar që nga kohra të lashta (epidemitë e kolerës në këtë zonë janë vërejtur që nga koha. 500 vjet para Krishtit). Ekzistenca e gjatë e fokusit endemik të kolerës këtu shpjegohet me shumë arsye. Vibrio cholerae jo vetëm që mund të qëndrojë në ujë për një kohë të gjatë, por edhe të shumohet në të në kushte të favorshme - temperatura mbi +12 ° C, prania e substancave organike. Të gjitha këto kushte janë të pranishme në Indi - një klimë tropikale (temperatura mesatare vjetore nga +25 deri në +29 °С), bollëk reshjesh dhe kënetash, densitet i lartë popullsia, veçanërisht në deltën e Ganges, nje numer i madh i lëndë organike në ujë, ndotje e vazhdueshme e ujit gjatë gjithë vitit ujërat e zeza dhe feçet, standardi i ulët material i jetesës dhe ritet e veçanta fetare e fetare të popullsisë.

Agjenti shkaktar i kolerës Vibrio cholerae u hap në 1883. gjatë pandemisë së pestë nga R. Koch, megjithatë, për herë të parë, vibrio në feçet e pacientëve me diarre u zbulua në vitin 1854. F. Patsini.

V. kolerae i përket familjes vibrionaceae, që përfshin disa gjini (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium). Gjinia Vibrio që nga viti 1985 më shumë se 25 lloje, nga të cilat vlerën më të lartë për një person kanë V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus, dnificus dhe V.fluvialis.

Karakteristikat kryesore të gjinisë Vibrio : të shkurtër, që nuk formojnë spore dhe kapsula, shufra gram-negative të lakuara ose të drejta, me diametër 0,5 µm, të gjatë 1,5-3,0 µm, të lëvizshme ( V. kolerae- monotrike, në disa lloje dy ose më shumë flagjela polare); ato rriten mirë dhe shpejt në mjediset e zakonshme, kemoorganotrofet, fermentojnë karbohidratet me formimin e acidit pa gaz (glukoza fermentohet përgjatë rrugës Embden-Meyerhof). Oksidazë-pozitive, formojnë indol, reduktojnë nitratet në nitrite (V. kolerae jep një reaksion pozitiv nitrozo-indol), zbërthen xhelatinën, shpesh japin një reaksion pozitiv Voges-Proskauer (d.m.th., formojnë acetilmetilkarbinol), nuk kanë ureaza, nuk formojnë H S. kanë dekarboksilaza lizine dhe ornitinë, por nuk kanë argininë. dihidrolaza.

Vibrio cholerae është shumë modeste ndaj lëndëve ushqyese. Shumëzohet mirë dhe shpejt në ujë pepton 1% alkaline (pH 8.6-9.0) (PV) që përmban 0.5-1.0% NaCl, duke tejkaluar rritjen e baktereve të tjera. Për të shtypur rritjen e Proteus, rekomandohet të shtoni telurit kaliumi 4 deri në 1% (PV) (hollimi përfundimtar 1:100,000). 1% PV është mjeti më i mirë pasurues për V. cholerae. Gjatë rritjes, pas 6-8 orësh, ajo formon një shtresë delikate të lirshme gri në sipërfaqen e HP-së, e cila, kur tundet, shkatërrohet lehtësisht dhe bie në fund në formën e thekoneve, HP bëhet mesatarisht i turbullt. Për të izoluar Vibrio cholerae, janë propozuar media të ndryshme selektive: agar alkaline, agar i verdhë-kripë, albuminat alkaline, agar alkaline me gjak, laktozë-saharozë dhe lëndë të tjera. Mjeti më i mirë është TCBS (thiosulfate citrate-bromothymol sucrose agar) dhe modifikimet e tij. Sidoqoftë, MPA alkaline përdoret më shpesh, mbi të cilën Vibrio cholerae formon koloni të lëmuara, transparente në qelq, me një nuancë kaltërosh, në formë disku me konsistencë viskoze.

Kur mbillet me një injeksion në një kolonë xhelatine, pas 2 ditësh në 22-23 ° C, vibrio shkakton lëngëzimin nga sipërfaqja në formën e një flluske, pastaj në formë hinke dhe, së fundi, shtresë pas shtrese.

Në qumësht vibrioja shumohet me shpejtësi, duke shkaktuar mpiksje pas 24-48 orësh dhe më pas ndodh peptonizimi i qumështit dhe pas 3-4 ditësh vibrioja vdes për shkak të zhvendosjes së pH të qumështit në anën acide.

B. Heiberg, sipas aftësisë për të fermentuar manozën, saharozën dhe arabinozën, i shpërndau të gjitha vibriot (kolera dhe të ngjashme me kolerën) në një numër grupesh, numri i të cilave tani është 8. Vibrio cholerae i përket grupit të parë të Heibergut.

Vibriot, të ngjashme për nga karakteristikat morfologjike, kulturore dhe biokimike me kolerën, janë quajtur dhe quhen ndryshe: vibrio parakolera, kolera, NAG (vibrio jo aglutinuese); vibrione që nuk i përkasin grupit 01. Emri i fundit thekson më saktë marrëdhënien e tyre me vibrion e kolerës. Siç u vërtetua nga A. Gardner dhe K. Venkatraman, kolera dhe vibriot e ngjashme me kolerën kanë një antigjen H të përbashkët, por ndryshojnë në O-antigjene. Sipas O-antigjenit, kolera dhe vibriot e ngjashme me kolerën ndahen aktualisht në 139 serogrupe O, por numri i tyre rimbushet vazhdimisht. Vibrio cholerae i përket grupit 01. Ka një antigjen A të përbashkët dhe dy antigjene tip-specifik - B dhe C, sipas të cilëve dallohen tre serotipe. V. kolerae- Serotipi Ogawa (AB), serotipi Inaba (AC) dhe serotipi Gikoshima (ABC). Vibrio cholerae në fazën e disociimit ka një antigjen OR. Për këtë arsye, për të identifikuar V. kolerae Përdoren serum O, serum OR dhe serum Inaba dhe Ogawa të tipit specifik.

faktorët e patogjenitetit V. kolerae :

1. Lëvizshmëria.

2. Kemotaksia. Me ndihmën e këtyre vetive, vibrio kapërcen shtresën mukoze dhe ndërvepron me qelizat epiteliale. Në mutantët Che" (duke humbur aftësinë për kemotaksë), virulenca zvogëlohet ndjeshëm. Virulenca në mutantët Mot" (duke humbur lëvizshmërinë) ose zhduket plotësisht ose zvogëlohet me 100-1000 herë.

3. Faktorët e ngjitjes dhe kolonizimit, me ndihmën e të cilëve vibrioja ngjitet në mikrovilet dhe kolonizon membranën mukoze të zorrës së hollë.

4. Enzimat: mucinaza, proteazat, neuraminidaza, lecitinaza etj.

Ato nxisin ngjitjen dhe kolonizimin, pasi shkatërrojnë substancat që përbëjnë mukusin. Neuraminidaza, duke ndarë acidin sialik nga glikoproteinat epiteliale, krijon një platformë "uljeje" për vibriot. Përveç kësaj, rrit numrin e receptorëve të kolerogjenit duke modifikuar tri- dhe disialogangliozidet në monosialogangliozid Gm b, i cili shërben si receptor kolerogjen.

5. Faktori kryesor i patogjenitetit V. koleraeështë një ekzotoksin-kolerogjen, i cili përcakton patogjenezën e kolerës. Molekula e kolerogjenit ka m.m. 84 kD dhe përbëhet nga dy fragmente - A dhe B. Fragmenti A përbëhet nga dy peptide - A1 dhe A2 - dhe ka vetinë specifike të toksinës së kolerës. Fragmenti B përbëhet nga 5 nënnjësi identike dhe kryen dy funksione: 1) njeh receptorin (monosialoganglioside) të enterocitit dhe lidhet me të;

2) formon një kanal hidrofobik intramembranor për kalimin e nënnjësisë A. Peptidi A 2 Sl shërben për lidhjen e fragmenteve A dhe B. Peptidi A t kryen funksionin e vet toksik. Ai ndërvepron me NAD, shkakton hidrolizën e tij, ADP-riboza që rezulton lidhet me nënnjësinë rregullatore të adenilat ciklazës. Kjo çon në frenimin e hidrolizës GTP. Kompleksi që rezulton GTP + adenilate ciklaza shkakton hidrolizën e ATP me formimin e cAMP. (Një mënyrë tjetër e akumulimit të cAMP është shtypja nga kolerogjeni i enzimës që hidrolizon cAMP në 5-AMP).

6. Përveç kolerogjenit, Vibrio cholerae sintetizon dhe sekreton një faktor që rrit përshkueshmërinë e kapilarëve.

7. Në V. cholerae janë gjetur edhe ekzotoksina të tjera, në veçanti, llojet LT, ST dhe SLT.

8. Endotoksina. Lipopolisakaridi V. kolerae ka një veti të fortë endotoksike. Ai është përgjegjës për dehjen e përgjithshme të trupit dhe të vjellat. Antitrupat e formuar kundër endotoksinës kanë një efekt të theksuar vibriocid (shpërndajnë vibrion në prani të komplementit) dhe janë një komponent i rëndësishëm i imunitetit pas infeksionit dhe pas vaksinimit.

Aftësia e vibriove që nuk i përkasin grupit 01 për të shkaktuar sëmundje diarreike sporadike ose grupore te njerëzit shoqërohet me praninë e enterotoksinave të tipit LT ose ST, të cilat stimulojnë përkatësisht sistemet adenilate- ose guanilate-ciklase.

Sinteza e kolerogjenit - pasuria më e rëndësishme V. kolerae. Gjenet që kontrollojnë sintezën e fragmenteve A dhe B të kolerogjenit kombinohen në operonin vctAB ose ctxB; ato janë të vendosura në kromozomin vibrio. Disa shtame të Vibrio cholerae kanë dy operone të tillë jo-tandem. Funksioni i operonit kontrollohet nga dy gjene rregullatore. Gjeni toxR siguron një kontroll pozitiv; mutacionet në këtë gjen çojnë në një ulje 1000-fish të prodhimit të toksinave. Gjeni htx është një kontroll negativ; mutacionet në këtë gjen rrisin prodhimin e toksinave me 3-7 herë.

Metodat e mëposhtme mund të përdoren për të zbuluar kolerogjenin:

1. Testet biologjike te lepujt. Me administrimin intra-intestinal të vibrios së kolerës tek lepujt thithës (të moshës jo më shumë se 2 javë), ata zhvillojnë një sindromë tipike kolerogjenike: diarre, dehidrim dhe vdekje të lepurit. Në autopsi - një injeksion i mprehtë i enëve të stomakut dhe i hollë
zorrët, ndonjëherë në të grumbullohet një lëng i pastër. Por ndryshimet në zorrën e trashë janë veçanërisht karakteristike - ajo është e zmadhuar dhe plot me një lëng krejtësisht transparent, me ngjyrë kashte, me thekon dhe flluska gazi. Kur V. cholerae injektohet në zonën e lidhur të zorrës së hollë te lepujt e rritur, vërehen të njëjtat ndryshime në zorrën e trashë si në rastin e infeksionit të lepujve thithës.

2. Zbulimi i drejtpërdrejtë i kolerogjenit duke përdorur metoda imunofluoreshente ose enzimatike ose reaksion të hemolizës imune pasive (kolerogjeni lidhet me Gm1 të eritrociteve dhe ato lizohen kur shtohen antitrupa antitoksikë dhe komplement).

3. Stimulimi i adenilate ciklazës qelizore në kulturat qelizore.

4. Përdorimi i një fragmenti kromozomi si sondë ADN-je V. cholerae, operonkolerogjen mbartës.

Gjatë pandemisë së shtatë, shtamet u izoluan V. kolerae Me shkallë të ndryshme virulenca: kolerogjenike (virulente), pak kolerogjenike (virulencë e ulët) dhe jo kolerogjenike (jo virulente). Jo kolerogjenike V. cholerae, si rregull kanë aktivitet hemolitik, nuk lizohen nga fagu 5 diagnostikues i kolerës (HDF-5) dhe nuk shkaktojnë sëmundje tek njerëzit.

Për tipizimin e fagut V. kolerae(duke përfshirë V.eltor) S. Mukherjee propozoi grupe përkatëse fagësh, të cilët më pas u plotësuan në Rusi me fagë të tjerë. Grupi i fagëve të tillë (1-7) bën të mundur dallimin midis V. kolerae 16 lloje fagësh. HDF-3 lizon në mënyrë selektive Vibrio cholerae tip klasik, HDF-4 - El Tor vibrios, dhe HDF-5 lizon vetëm vibrione kolerogjene (virulente) të të dy llojeve dhe nuk lizon vibrione jo kolerogjene.

Kolerogjenët Vibrio, si rregull, nuk kanë aktivitet hemolitik, lizohen nga HDF-5 dhe shkaktojnë kolerën tek njerëzit.

rezistenca e patogjenëve të kolerës. Vibrio cholerae mbijetojnë mirë në temperatura të ulëta: ato mbeten të qëndrueshme në akull deri në 1 muaj; në ujin e detit - deri në 47 ditë, në ujin e lumit - nga 3-5 ditë në disa javë, në të zier ujë mineral vazhdojnë për më shumë se 1 vit, në tokë - nga 8 ditë në 3 muaj, në feces të freskët - deri në 3 ditë, në ushqime të ziera (oriz, petë, mish, drithëra, etj.) mbijetojnë 2-5 ditë, në të papërpunuara perime - 2-4 ditë, në fruta - 1-2 ditë, në qumësht dhe produkte qumështi - 5 ditë; kur ruhet në të ftohtë, periudha e mbijetesës rritet me 1-3 ditë: në liri të kontaminuar me feces, ato zgjasin deri në 2 ditë, dhe në material të lagësht - një javë. Vibrio cholerae në 80 ° C vdes pas 5 minutash, në 100 ° C - menjëherë; shumë i ndjeshëm ndaj acideve; nën ndikimin e kloraminës dhe dezinfektuesve të tjerë vdesin në 5-15 minuta. Ata janë të ndjeshëm ndaj tharjes dhe veprimit të drejtpërdrejtë. rrezet e diellit, por ato ruhen mirë dhe gjatë dhe madje shumohen në rezervuarë të hapur dhe ujëra të zeza të pasura me substanca organike, që kanë një pH alkalik dhe një temperaturë mbi 10-12 ° C. Shumë e ndjeshme ndaj klorit: një dozë e klorit aktiv 0,3-0,4 mg/l ujë në 30 minuta shkakton dezinfektim të besueshëm nga vibrioja e kolerës.

Karakteristikat e epidemiologjisë. Burimi kryesor i infeksionit është vetëm një person - një pacient me kolera ose një bartës i vibrios, si dhe uji i kontaminuar prej tyre. Asnjë kafshë në natyrë nuk sëmuret nga kolera. Metoda e infeksionit është fekalo-orale. Mënyrat e infektimit: a) kryesore - përmes ujit që përdoret për pije, larje dhe nevoja shtëpiake; b) kontakt-familje dhe c) nëpërmjet ushqimit. Të gjitha epidemitë dhe pandemitë kryesore të kolerës ishin të natyrës ujore. Vibrio cholerae kanë mekanizma të tillë adaptues që sigurojnë ekzistencën e popullatave të tyre si në trupin e njeriut ashtu edhe në ekosistemet e caktuara të trupave ujorë të hapur. Diarreja e bollshme e shkaktuar nga Vibrio cholerae çon në pastrimin e zorrëve nga bakteret konkurruese dhe kontribuon në përhapjen e gjerë të patogjenit në mjedis, kryesisht në ujërat e zeza dhe në ujërat e hapura, ku ato derdhen. Një person me kolerë derdh patogjenin në numër i madh- nga 100 milion në 1 miliard për 1 ml feces, bartësi i vibrios lëshon 100-100,000 vibrio për 1 ml, doza infektuese është rreth 1 milion vibrio. Kohëzgjatja e izolimit të vibrio cholerae në transportuesit e shëndetshëm është nga 7 deri në 42 ditë, dhe 7-10 ditë në ata që kanë qenë të sëmurë. Një lëshim më i gjatë është jashtëzakonisht i rrallë.

Një tipar i kolerës është se pas saj, si rregull, nuk ka transport afatgjatë dhe nuk formohen vatra endemike të vazhdueshme. Megjithatë, siç u përmend më lart, për shkak të ndotjes së trupave ujorë të hapur me ujëra të zeza që përmbajnë sasi të mëdha të çështje organike, detergjentë dhe kripë tryezë, në verë vibrioja e kolerës në to jo vetëm që mbijeton për një kohë të gjatë, por edhe shumohet.

Me rëndësi të madhe epidemiologjike është fakti që kolera vibrio e grupit 01, jotoksigjene dhe toksigjene, mund të vazhdojnë për një kohë të gjatë në të ndryshme ekosistemet ujore në formën e formave të pakultivuara. Me ndihmën e një reaksioni zinxhir polimerazë me studime negative bakteriologjike në një numër territoresh endemike të CIS në trupa të ndryshëm ujorë, u gjetën gjenet veterinare të formave të pakultivuara. V. kolerae.

Në rast të sëmundjeve të kolerës, kryhet një kompleks masash anti-epidemike, ndër të cilat është aktive kryesore dhe vendimtare. zbulimi në kohë dhe izolimi (spitalizimi, trajtimi) i pacientëve në akute dhe formë atipike dhe bartës të shëndetshëm vibrio; po merren masa për të parandaluar mënyrat e mundshme të përhapjes së infeksionit; vëmendje e veçantë i kushtohet furnizimit me ujë (klorin ujë i pijshëm), respektimi i regjimit sanitar dhe higjienik në ndërmarrjet ushqimore, në institucionet e fëmijëve, në vendet publike; Mbi trupat ujorë të hapur kryhet kontroll i rreptë, përfshirë kontrollin bakteriologjik, kryhet imunizimi i popullatës, etj.

Karakteristikat e patogjenezës dhe klinikës. Periudha e inkubacionit për kolerën varion nga orët që nuk rrëshqasin deri në 6 ditë, më së shpeshti 2-3 ditë. Pasi në lumenin e zorrës së hollë, Vibrio cholerae për shkak të lëvizshmërisë dhe kemotaksisë në membranën mukoze dërgohen në mukozë. Për të depërtuar në të, vibriot prodhojnë një sërë enzimash: neuraminidazë, mucinazë, proteaza, lecithinase, disa shkatërrojnë substancat që përmbahen në mukus dhe lehtësojnë lëvizjen e vibrios në qelizat epiteliale. Nga ngjitja, vibriot ngjiten në glikokaliksin e epitelit dhe, duke humbur lëvizshmërinë, fillojnë të shumohen intensivisht, duke kolonizuar mikrovilet e zorrëve të vogla dhe në të njëjtën kohë prodhojnë një sasi të madhe ekzotoksine-kolerogjen. Molekulat e kolerogjenit lidhen me monosialogangliozidin Gm1 dhe depërtojnë në membranën qelizore, aktivizojnë sistemin adenilate ciklazë dhe cAMP-ja e akumuluar shkakton hipersekretim të lëngjeve, kationeve dhe anioneve Na + , HCO 3 ~, K + , SG nga enterocitet, gjë që çon në diarrheler, organizmi i dehidrimit dhe shkripëzimit. Ekzistojnë tre lloje të rrjedhës së sëmundjes:

1. sëmundje diarreike e dhunshme, e rëndë dehidratuese, që çon në vdekjen e pacientit në pak orë;

2. më pak e rëndë, ose diarre pa dehidrim;

3. ecuria asimptomatike e sëmundjes (bartës vibrio).

Në kolerën e rëndë, pacientët zhvillojnë diarre, jashtëqitjet bëhen më të shpeshta, jashtëqitjet bëhen gjithnjë e më të bollshme, marrin karakter të holluar me ujë, humbasin erën fekale dhe duken si uji i orizit (lëng i turbullt me mbetje mukusi që notojnë në të dhe qeliza epiteliale). Pastaj të vjellat dobësuese bashkohen, fillimisht me përmbajtjen e zorrëve, dhe më pas të vjellat marrin formën e ujit të orizit. Temperatura e pacientit bie nën normale, lëkura bëhet cianotike, e rrudhur dhe e ftohtë - kolera algide. Si rezultat i dehidrimit, gjaku trashet, zhvillohet cianoza, uria nga oksigjeni, funksioni i veshkave vuan ndjeshëm, shfaqen konvulsione, pacienti humbet vetëdijen dhe ndodh vdekja. Vdekshmëria nga kolera gjatë pandemisë së shtatë varionte nga 1.5% në vendet e zhvilluara në 50% në vendet në zhvillim.

Imuniteti pas infektimit sëmundjet e qëndrueshme, afatgjatë dhe të përsëritura janë të rralla. Imuniteti është antitoksik dhe antimikrobik, për shkak të antitrupave (antitoksinat qëndrojnë më gjatë se antitrupat antimikrobikë), qelizave të kujtesës imune dhe fagociteve.

Diagnostifikimi laboratorik. Kryesor dhe metodë vendimtare Diagnoza e kolerës është bakteriologjike. Materiali për hulumtim nga pacienti është feces dhe të vjella; feçet ekzaminohen për mbajtjen e vibrios; në personat që kanë vdekur nga kolera, një segment i lidhur i zorrëve të vogla dhe fshikëzës së tëmthit merret për hulumtim; Nga objektet e mjedisit të jashtëm, më së shpeshti ekzaminohen uji nga rezervuarët e hapur dhe ujërat e zeza.

Gjatë kryerjes së një studimi bakteriologjik, duhet të respektohen tre kushtet e mëposhtme:

1) sa më shpejt që të jetë e mundur të inokulohet materiali nga pacienti (vibrioja e kolerës vazhdon në feces afatshkurtër);

2) enët në të cilat merret materiali nuk duhet të dezinfektohen me kimikate dhe nuk duhet të përmbajnë gjurmë të tyre, pasi Vibrio cholerae është shumë e ndjeshme ndaj tyre;

3) eliminoni mundësinë e kontaminimit dhe infeksionit të të tjerëve.

Në rastet kur ka V. kolerae jo grupet 01, ato duhet të shtypen duke përdorur serumet e duhura aglutinuese nga serogrupet e tjera. Shkarkimi nga një pacient me diarre (duke përfshirë kolerën) V. kolerae jo-01-grupi kërkon të njëjtat masa anti-epidemike si në rastin e izolimit V. kolerae 01-grupe. Nëse është e nevojshme, aftësia për të sintetizuar kolerogjenin ose prania e gjeneve të kolerogjenit në vibrio kolera të izoluara duke përdorur një sondë të ADN-së përcaktohet me një nga metodat.

Diagnoza serologjike e kolerës është e një natyre ndihmëse. Për këtë qëllim, mund të përdoret një reaksion aglutinimi, por është më mirë të përcaktohet titri i antitrupave vibriocide ose antitoksinave (antitrupat ndaj kolerogjenit përcaktohen me anë të imuno-analizimit enzimë ose metodave të imunofluoreshencës).

Mjekimi pacientët me kolerë duhet të konsistojnë kryesisht në rihidratimin dhe rivendosjen e metabolizmit normal të kripës së ujit. Për këtë qëllim, rekomandohet përdorimi i solucioneve të kripura, për shembull, të përbërjes së mëposhtme: NaCl - 3.5; NaHCO 3 - 2,5; KS1 - 1,5 dhe glukozë - 20,0 g për 1 litër ujë. Një trajtim i tillë i vërtetuar patogjenetikisht në kombinim me terapi racionale me antibiotikë mund të zvogëlojë vdekshmërinë në kolerë në 1% ose më pak.

profilaksë specifike. Për të krijuar imunitet artificial, janë propozuar vaksina të ndryshme, duke përfshirë ato nga shtamet e vrarë të Inaba dhe Ogawa; toksoid kolerogjen për përdorim nënlëkuror dhe vaksinë bivalente kimike enterale, sos

DIAGNOZA LABORATORIKE E DIZENTERISE, AMEBIAZE DHE BALANTIDIAZE

Në kushtet moderne, në disa raste ose me shpërthime të vogla fokale të sëmundjeve të zorrëve, të cilat shpesh ndodhin me simptoma të paqarta, metodat e hulumtimit laboratorik kanë një rëndësi të madhe praktike.

Hulumtimi i kryer për qëllime diagnostikuese duhet të kryhet me respektim të rreptë të rekomandimeve të vendosura dhe sa më shpejt që të jetë e mundur.

Mbledhja stol për kërkime, ato futen në enë të pastra (vazo nate, tabaka) që nuk përmbajnë mbetje dezinfektuesish; materiali për hulumtim merret nga mukoza e rektumit me tampona gjatë sigmoidoskopisë.

Për konfirmimin bakterologjik të diagnozës, është më mirë të merren feçe nga pacientët me dizenteri përpara trajtimit me antibiotikë dhe sulfonamide, dhe të përcaktohet bartësi i baktereve - pas trajtimit me këto barna.

Mbjellja në enët Petri duhet të bëhet menjëherë pas marrjes së materialit.

Para së gjithash, bëhet një ekzaminim makroskopik i feces, ndërsa ato mund të zbulojnë: mbetje ushqimore - copa mishi, mbetje yndyre, ushqim bimor dhe papastërtitë patologjike - mukus me konsistencë viskoze në formën e gunga (jo transparente në dizenteri dhe transparente në amebiazë); gjaku i pandryshuar në dizenteri dhe lezion ulceroz pjesa e poshtme e zorrës së trashë me një etiologji të ndryshme dhe një ngjyrë e ndryshuar ("pelte me mjedër") me amebiazë, balantidiasis; qelbja zbulohet në format e rënda të zgjatura të dizenterisë.

Ekzaminimi mikroskopik i feçeve përdoret për zbulimin e elementeve qelizore të gjakut, amebave, balantidisë dhe kisteve të tyre. Përgatitja amtare përgatitet si më poshtë: një grumbull feçesh aplikohet në një rrëshqitje qelqi dhe një pikë solucioni izotonik i klorurit të natriumit pranë tij, i përzier dhe i mbuluar me një mbulesë. Për ngjyrosjen e protozoarëve përdoret tretësira e Lugolit.

Për të diferencuar elementet qelizore të gjakut, preparatet trajtohen me njollë Romanovsky-Giemsa ose azure-eozinë. Në dizenteri, një preparat i përgatitur nga mukusi përmban shumë granulocite neutrofile (mbi 90% të të gjithë elementëve qelizor), granulocite të vetme eozinofile (eozinofile) dhe sasi të ndryshme eritrocitet; me amebiazë, ka pak elementë qelizorë, masa kryesore e tyre është qeliza të ndryshuara me një bërthamë piknotike dhe një buzë të ngushtë protoplazme. Gjeni granulocitet eozinofile dhe kristalet Charcot-Leiden.

Format indore të amebës (Entamoeba histolytica) në një preparat të pangjyrë janë të pangjyrë, të lëvizshme (me ndihmën e pseudopodeve), arrijnë 50-60 mikron në gjendje të zgjatur, ato shpesh gjenden në endoplazmë me eritrocite dhe në periferi - bërthama. Prania e eritrociteve në qelizë bën të mundur dallimin e Entamoeba histolutica nga format jopatogjene (E. hartmani, E. coli.).

Forma e tejdukshme e amebës është më e vogël (deri në 20 mikron), joaktive dhe nuk përmban eritrocite. Kistet edhe më të vogla (10-12 mikron), forme e rrumbullaket, i palëvizshëm; në fazat e hershme të zhvillimit përmbajnë 2 bërthama, kurse ato të pjekura - 4. Në preparatet e lyera me tretësirë të Lugolit, bërthamat e amebës dhe cistat e tyre kanë ngjyrë kafe të çelur (Fig. 6).

Balantidia(Balantidium coli) - ciliate të mëdhenj, ndonjëherë duke arritur një gjatësi prej 200 mikron dhe 50-70 mikronë në diametër, të lëvizshëm, për shkak të pranisë së qerpikëve, kanë hapje të gojës (peristome) dhe anusit (citopigus). Në endoplazmë janë të dukshme bërthama të mëdha (makronukleos) dhe të vogla (mikronukleos), vakuola, eritrocite të kapura. Kistet Balantidia janë të palëvizshme, të rrumbullakosura, me diametër 50-60 μm, kanë një membranë me dy konture, brenda përmbajnë makronukleos dhe vakuola (Fig. 7).

Ekzaminimi bakteriologjik i feçeve në dizenteri bacilare bëhet më së miri menjëherë pas defekimit, ndërkohë që ju duhet të merrni material (mukus dhe qelb) nga pjesët e fundit të feçeve. Materiali i provës inokulohet me një lak në enët Petri me media zgjedhore (Ploskirev, Ploskirev + levomycetin, Levin) dhe vendoset në një termostat për 18-24 orë në një temperaturë prej +37 ° C. Të nesërmen, e dyshimtë (pa ngjyrë) kolonitë nënkulturohen në mjedisin Ressel dhe vendosen epruvetat në një termostat për një ditë në temperaturë +370 C. Në ditën e tretë, pasi të kenë marrë një kulturë të pastër, përgatiten njolla për mikroskopi dhe studimin e lëvizshmërisë (shigella janë të palëvizshme) . Ata vendosën reaksionin e aglutinimit në gotën me serume të tipit specifik, fillimisht me serum kundër llojeve që mbizotërojnë në zonë, dhe më pas vendosen dhe mbollën në një rresht "të larmishëm" për të përcaktuar vetitë biokimike kulturën e zgjedhur.

Agjentët shkaktarë të dizenterisë nuk fermentojnë laktozën dhe saharozën (përveç Sonne), dekompozojnë glukozën (në acid), nuk formojnë sulfid hidrogjeni.

Përgjigja përfundimtare në ekzaminimin bakteriologjik jepet në ditën e 5-të. Ndonjëherë izolohen shtamet atipike të patogjenit, kulturat që kanë humbur aglutinueshmërinë dhe me veçori të tjera. Në raste të tilla, studimet vazhdojnë për periudha më të gjata.

Ekzistojnë gjithashtu metoda bakteriologjike të përshpejtuara - rimbjellja e kolonive të dyshimta nga enët Petri pas 18-20 orësh nga fillimi i studimit në 2 epruveta me medium Ressel (agar i pjerrët me 1% laktozë dhe 0,1% glukozë - në një dhe 1% saharozë dhe 0,1 % manitol - në një tjetër). Pas 4 orësh, tashmë mund të shfaqet rritja e kolonive, nga të cilat përgatiten strishat, ngjyrosen sipas Gramit, studiohet lëvizshmëria dhe vendoset një reaksion i përafërt aglutinimi me serum kundër patogjenëve më të zakonshëm në zonë. Kështu, tashmë në ditën e dytë mund të jepni një përgjigje paraprake. Përgjigja përfundimtare jepet në ditën e tretë pas marrjes parasysh të rezultateve të mbjelljes në rreshtin "të larmishëm" dhe një reagimi të detajuar të aglutinimit.

Inokulimi i patogjenëve të dizenterisë nuk është gjithmonë i njëjtë, varet nga shumë faktorë - mënyra e marrjes së materialit për hulumtim, cilësia e mediave dhe arsye të tjera, njëra prej të cilave është numri i patogjenëve për njësi vëllimi të feces. Është vërtetuar se agjentët shkaktarë të dizenterisë mbillen në ato raste kur në një gram feces ka të paktën qindra miliona trupa mikrobikë. AT raste të rrallaështë e mundur të izolohet shkaktari i dizenterisë nga gjaku.

Në prani të një mikroskopi lumineshent, serumeve specifike me fluorokrome, nxënësve u tregohet metoda e fluoreshencës direkte të antitrupave.

Është gjithashtu e mundur të prodhohet një reaksion aglutinimi me serumin e gjakut dhe me diagnozën e pacientit, megjithatë, titrat e antitrupave në pacientët me dizenteri janë të ulëta dhe, përveç kësaj, shpesh hasen fenomene paraaglutinimi, gjë që e bën të vështirë marrjen e tij. rezultate të besueshme. Më i ndjeshëm është reagimi i hemaglutinimit indirekt (IHA) me diagnostifikimet standarde të eritrociteve. metodë ndihmëse Hulumtimi është një test alergjik intradermal me dizenteri sipas D. A. Tsuverkalov, i cili merret parasysh pas 24 orësh sipas madhësisë së papulës së formuar.

Udhëzime metodologjike për nxënësit për mësimin praktik nr.28.

Tema e mësimit:

Synimi: Studimi i metodave të diagnostikimit mikrobiologjik, terapisë etiotropike dhe parandalimit të shigelozës.

Moduli 2 . Mikrobiologji e veçantë, klinike dhe ekologjike.

Tema 5: Metodat e diagnostikimit mikrobiologjik të dizenterisë.

Rëndësia e temës:Shigelloza është e pranishme kudo dhe përbën një problem serioz në vendet me nivel të ulët kulturor sanitar dhe me një incidencë të lartë të kequshqyerjes dhe të ushqyerjes së dobët. Në vendet në zhvillim, përhapja e infeksionit favorizohet nga higjiena e dobët, higjiena e dobët personale, mbipopullimi dhe një pjesë e madhe e fëmijëve në popullatë. Në Ukrainë, shpërthimet e shigelozës janë më të zakonshme në grupe të mbyllura në sfondin e nivel i ulët higjiena dhe higjiena, për shembull, në çerdhe dhe kopshte, në anije turistike, në klinika psikiatrike ose strehimore për personat me aftësi të kufizuara. Shigella ka qenë shkaku i diarresë së udhëtarëve dhe turistëve.

Shkaktar i sëmundjeve në grup mund të konsiderohet përdorimi i produkteve ushqimore të kontaminuara nga neglizhenca e punëtorëve të tregtisë që janë bartës të shigellës. Ka shpërthime të lidhura me përdorimin e ujit të pijshëm dhe noti në rezervuarë të ndotur gjithashtu çoi në infeksion. Megjithatë, rrugët e transmetimit të ushqimit dhe ujit duket se luajnë një rol më të vogël në përhapjen e shigelozës në krahasim me kolerën dhe ethet tifoide, të cilat zakonisht kërkojnë doza të mëdha patogjene. Në vendet në zhvillim, ku përhapja e sëmundjes është kryesisht nga personi në person, transportuesit mund të jenë një rezervuar i rëndësishëm i agjentit infektiv. Në pacientët që nuk kanë marrë barna antibakteriale, derdhja e shigellës në feçe zakonisht zgjat 14 javë, por në një pjesë të vogël të rasteve zgjat shumë më gjatë.

Shigelloza është një infeksion akut bakterial i zorrëve i shkaktuar nga një nga katër llojet e Shigellës. Spektri i formave klinike të infeksionit varion nga diarreja e lehtë, me ujë deri te dizenteria e rëndë e karakterizuar nga ngërçe barku, tenesmus, ethe dhe shenja të intoksikimit të përgjithshëm.

Etiologjia.

Gjinia Shigella (e quajtur sipas K. Shiga, i cili në 1898 studioi në detaje dhe përshkroi agjentin shkaktar të izoluar të dizenterisë bakteriale nga A.V. Grigoriev) i familjes Enterobacteriaceae përbëhet nga një grup speciesh bakteriale të lidhura ngushtë që kanë vetitë e mëposhtme:

I. Morfologjike: shigella - shkopinj të vegjël me skajet e rrumbullakosura. Ato ndryshojnë nga përfaqësuesit e tjerë të familjes Enterobacteriaceae në mungesë të flagjelave (jo lëvizëse), nuk kanë spore dhe kapsula dhe janë gram-negative.

II. Kulturore: Shigella janë aerobe ose anaerobe fakultative; kushtet optimale të kultivimit temperatura 37°C, pH 7,2-7,4. Ata rriten në mjedise të thjeshta ushqyese (MPA, MPB) në formën e kolonive të vogla, me shkëlqim, të tejdukshme, gri, të rrumbullakëta, me madhësi 1,52 mm. S formë. Përjashtim bën Shigella e Sonne, e cila shpesh shkëputet, duke formuar koloni të mëdha, të sheshta, të vrenjtura dhe me tehe të dhëmbëzuara. R forma (kolonitë duken si një "gjethe rrushi"). Në mjediset ushqyese të lëngëta, Shigella japin një turbullirë uniforme, R formon një precipitat. Mjeti i lëngshëm pasurues është lëngu i selenitit.

III. Enzimatike: Karakteristikat kryesore biokimike të nevojshme për identifikimin e shigellës në izolimin e një kulture të pastër janë si më poshtë:

mungesa e formimit të gazit gjatë fermentimit të glukozës;
mungesa e prodhimit të sulfurit të hidrogjenit;
nuk ka fermentim të laktozës brenda 48 orëve.

Në total, të katër speciet ndahen më tej në rreth 40 serotipe. Sipas karakteristikave të antigjeneve kryesore somatike (O) dhe vetive biokimike, dallohen katër llojet ose grupet e mëposhtme: S. dysenteriae (grupi A, përfshin: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri. (grupi B), S. boydii (Grupi C) dhe S. sonnei (Grupi D).

Në lidhje me manitol, të gjitha shigella ndahen në manitol ndarës (Flexner, Boyd, Sonne shigella) dhe jo-ndarëse (Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Shigella Large-Sachs).

IV. Faktorët patogjenë:

Pushtimi plazmidsiguron aftësinë e shigelës për të shkaktuar pushtim me përhapjen dhe riprodhimin e mëvonshëm ndërqelizor në epitelin e mukozës së zorrës së trashë;
formimi i toksinave: Shigella ka lipopolisakaride endotoksine, e cila kimikisht dhe biokimikisht është e ngjashme me endotoksinat e anëtarëve të tjerë të familjes Enterobacteriaceae. Përveç kësaj, S. dysenteriae tip I (bacil i Shigës) prodhon një ekzotoksinë. Që nga zbulimi i kësaj të fundit, është vërtetuar se ka aktivitet enterotoksin dhe mund të shkaktojë sekretim intestinal, si dhe të ketë efekt citotoksik ndaj qelizave epiteliale të zorrëve; paraqet efekt neurotoksik vërehet te fëmijët me shigelozë. Shiga toksina, duke hyrë në gjak, së bashku me dëmtimin e endotelit submukozal, prek edhe glomerulet e veshkave, si rezultat i së cilës, përveç diarresë së përgjakshme, zhvillohet sindroma hemolitike uremike me zhvillimin e dështimit të veshkave.

V. Struktura antigjenike:Të gjitha Shigella kanë një O-antigjen somatik, në varësi të strukturës së të cilit ato ndahen në serovare.

VI. Rezistenca: Temperatura 100 0 C vret shigella në çast. Shigella janë rezistente ndaj temperaturave të ulëta në uji i lumit ato ruhen deri në 3 muaj, në perime dhe fruta - deri në 15 muaj.Në kushte të favorshme, shigella janë të afta të riprodhohen në produktet ushqimore (sallata, vinegrette, mish i zier, mish i grirë, peshk i zier, qumësht dhe produkte qumështi, komposto dhe pelte), veçanërisht sonne shigella.

Epidemiologjia.

1. Burimi i infeksionit:Një person që vuan nga forma akute dhe kronike të shigelozës; bakteriobartës.

2. Mënyrat e transmetimit:

Ushqimi (kryesisht për S. sonnei)
Ujore (kryesisht për S. flexneri)
Familja e kontaktit (kryesisht për S. dysenteriae)

3. Porta e hyrjesinfeksioni shërben traktit gastrointestinal.

Patogjeneza dhe ndryshimet patologjike.

Pasi gëlltitet, Shigella kolonizohet ndarjet e sipërme zorrë e hollë dhe shumohen atje, duke shkaktuar ndoshta rritje të sekretimit në faza fillestare infeksionet. Shigella më pas depërton përmes qelizave M në submukozën, ku ato përfshihen nga makrofagët. Kjo çon në vdekjen e disa prej shigellave, duke rezultuar në lirimin e ndërmjetësve inflamatorë, të cilët iniciojnë inflamacionin në submukozën. Apoptoza e fagociteve lejon një pjesë tjetër të Shigellës të mbijetojë dhe të depërtojë në qelizat epiteliale të mukozës përmes membrana bazale. Brenda enterociteve, shigella riprodhohet dhe përhapet ndërqelizore, duke rezultuar në zhvillimin e erozioneve. Kur shigella vdes, shiga dhe toksina të ngjashme me shigën lirohen, veprimi i të cilave çon në dehje. Dëmtimi i mukozës shoqërohet me ënjtje, nekrozë dhe hemorragji, gjë që shkakton shfaqjen e gjakut në jashtëqitje. Përveç kësaj, toksina ndikon në sistemin nervor qendror, gjë që çon në çrregullime trofike.

Manifestimet klinike.

Spektri i manifestimeve klinike të shigelozës është shumë i gjerë nga diarreja e lehtë deri te dizenteria e rëndë me dhimbje barku ngërçe, tenesmus, ethe dhe intoksikim të përgjithshëm.

Periudhë inkubacionivarion nga disa orë deri në 7 ditë, më së shpeshti është 2-3 ditë.Fillimisht pacientët kanë jashtëqitje me ujë, ethe (deri në 41°C), dhimbje difuze në bark, nauze dhe të vjella. Së bashku me këtë, pacientët ankohen për mialgji, të dridhura, dhimbje shpine dhe dhimbje koke. Në ditët në vijim nga fillimi i sëmundjes, shfaqen shenja të dizenterisë - tenesmus, jashtëqitje të shpeshta, të pakta, me mukozë të përgjakshme. Temperatura e trupit gradualisht zvogëlohet, dhimbja mund të lokalizohet në kuadratet e poshtme të barkut. Intensiteti i diarresë arrin maksimum rreth fundit të javës së parë të sëmundjes. Dizenteria me jashtëqitje të përgjakshme është më e zakonshme dhe shfaqet më herët në sëmundjen e shkaktuar nga S. dysenteriae tipi I sesa në format e tjera të shigelozës.

Për Shigelloza Sonne karakteristik është ecuria më e lehtë e sëmundjes (varianti gastroenterik ose gastroenterokolitik). Periudha e etheve është më e shkurtër, efektet e dehjes janë afatshkurtra dhe ndryshimet shkatërruese në mukozën e zorrëve nuk janë tipike.

Shigelloza FlexnerNë thelb, dy variante të rrjedhës klinike janë karakteristike - gastroenterokolitike dhe koliti.

Komplikimet ekstraintestinale në shigelozëi rrallë:

Një ndërlikim i shigelozës mund të jetë zhvillimi i dysbakteriozës së zorrëve.
Së bashku me dhimbjet e kokës, mund të ketë shenja të meningjitit dhe krizave konvulsive.
Rastet e neuropatisë periferike janë përshkruar në infeksionin S. dysenteriae të tipit I dhe raste të sindromës Guillain-Barré (polineuriti) janë raportuar gjatë një shpërthimi të gastroenteritit S. boydii.
Me përjashtim të fëmijëve që vuajnë nga distrofia, përhapja hematogjene e patogjenit është relativisht e rrallë dhe janë përshkruar edhe raste të absceseve shigelozë dhe meningjitit.
Me shigelozë, zhvillimi i sindromës Reiter me artrit, konjuktivit steril dhe uretrit është i mundur, kjo zakonisht ndodh pas 1-4 javësh nga fillimi i diarresë tek pacientët.
Tek fëmijët, shigeloza shoqërohet nga një sindromë uremike hemolitike, e shoqëruar shpesh me reaksione të ngjashme me leuçeminë, kolit të rëndë dhe endotoksina qarkulluese, por bakteremia zakonisht nuk zbulohet.
Shumë rrallë, keratokonjuktiviti purulent shkaktohet nga shigella që ka hyrë në sy si pasojë e vetë-infeksionit me gishta të kontaminuar.
Shoku hipovolemik dhe DIC.
Peritonit, gangrenë intestinale, gjakderdhje intestinale.

Imuniteti: Njerëzit kanë një rezistencë të natyrshme ndaj shigelozës. Pas sëmundje e kaluar imuniteti nuk është i qëndrueshëm, dhe pas shigelozës Sonne praktikisht mungon. Me një sëmundje të shkaktuar nga Shigella Grigoriev Shigi, zhvillohet një imunitet më i qëndrueshëm antitoksik. Roli kryesor në mbrojtjen nga infeksioni i takon sekretorit IgA , duke parandaluar ngjitjen dhe aktivitetin e varur nga antitrupat citotoksikë të limfociteve intraepiteliale, të cilat, së bashku me sekretoren IgA vrasin shigella.

Diagnostifikimi dhe hulumtimet laboratorike.

Qëllimi i studimit: zbulimi dhe identifikimi i shigellës për diagnozë; zbulimi i bartësve të baktereve; zbulimi i shigellës në ushqime.

Materiali kërkimor: jashtëqitje, material seksional, ushqime.

Metodat diagnostikuese:mikrobiologjik (bakteriologjik, mikroskopik (lumineshent); serologjik; biologjik; test alergjik.

Përparimi i kërkimit:

1 ditë studimi:Kulturat duhet të bëhen nga feçet e sapoekskretuara ose duke përdorur tamponë rektale (tub rektal); në mungesë të kushteve të përshtatshme, materiali duhet të vendoset në një mjedis transporti. Për këtë duhet të përdoret agar enterik (medium MacConkey ose Shigella-Salmonella), agar ksilozë-lizin-deoksikolat mesatarisht selektiv, KLD) dhe supë me lëndë ushqyese (supë selenite). Nëse koha ndërmjet grumbullimit dhe inokulimit i kalon 2 orë, atëherë duhet të përdoren solucione konservante: supë biliare 20%, medium i kombinuar Kauffmann.

Ekskrecionet në përzierjen e glicerinës emulsohen, një pikë emulsioni aplikohet në medium dhe fërkohet me një shpatull. Mjetet diferenciale për Shigella janë media Ploskirev, Endo dhe EMS (agar eozinmetilen blu). Mediumi Ploskirev (përbërja e mediumit përfshin: MPA, laktozë, kripëra acidet biliare dhe treguesi i gjelbër brilant) është gjithashtu një medium zgjedhor për Shigella, sepse pengon rritjen e Escherichia coli.
Paralelisht me mbjelljen e drejtpërdrejtë materiale të mbledhura mbjellë në mjedisin pasurues - lëngun e selenitit.
Të gjitha të korrat vendosen në një termostat.

Dita 2 e studimit:

Kupat hiqen nga termostati, kolonitë e dyshimta ekzaminohen në mediumin e Ressel-it (medium ushqyes që përfshin: agar-agar, tregues Andrede, 1% laktozë, 0.1% glukozë) dhe manitol. Mbjellja bëhet me goditje në një sipërfaqe të pjerrët dhe me injeksion në një kolonë agar. Mjeti Ressel i inokuluar vendoset në termostat për 18-24 orë (paralelisht bëhet rimbjellja nga mediumi selenit në mediumet diagnostike diferenciale).
Bëni njollat (njolla Gram), mikroskop.
Përgatitni përgatitjet "varur" ose "grimcuar" rënie.
Deklarata e RA indikative me serume polivalente diagnostike shigeloze.
Mbjellja e kolonive të dyshimta në pjerrësi të agarit.

Dita e tretë e studimit:

Mikroskopi i materialit të pjerrët agar.
Kulturat që nuk fermentuan laktozën në mediumin e Ressel-it i nënshtrohen studimit të mëtejshëm: bëhen njolla (njolla me Gram), kontrollohet pastërtia e kulturës. Në prani të shufrave gram-negative, inokulimi kryhet në media Hiss, supë me letra treguese (për të zbuluar indolin dhe sulfurin e hidrogjenit) dhe qumështin e lakmusit.
Mjetet e inokuluara vendosen në një termostat për 18-24 orë.

Dita 4 e studimit:

Kontabiliteti për një "seri të larmishme" të shkurtër.
Kulturat e dyshimta për vetitë e tyre enzimatike dhe kulturore kundër Shigellës i nënshtrohen identifikimit serologjik. Deklarata e RA në xhami (serumet diagnostike tipike dhe grupore). Vendosja e RA të vendosur.

Si metoda të përshpejtuara përdoret për shigelozëmikroskopi fluoreshence dhe kampion biologjik(futja e shtameve virulente të Shigella në qeskën konjuktivale (nën qepallën e poshtme) të konjuktivitit të derrave të gini zhvillohet në fund të ditës së parë).

Testi alergjik ZuverkalovTesti alergjik intradermal me dizenteri (futja e 0.1 ml dizenterie në parakrah reaksion pozitiv në rast infiltrimi dhe hiperemije). Diagnostifikimi alergjik aktualisht praktikisht nuk përdoret. Testi i Tsurvekalov nuk ndryshon në specifikë, reaksione pozitive regjistrohen jo vetëm në shigelozë, por edhe në salmonelozë, escherichiozë, yersiniozë dhe infeksione të tjera akute të zorrëve, dhe nganjëherë në individë të shëndetshëm.

Trajtimi dhe parandalimi.Bakteriofagu përdoret për trajtim dhe parandalim sipas indikacioneve epidemiologjike. administrimi oral, antibiotikët pas përcaktimit të antibiogramit; në rast të dysbakteriozës preparate të probiotikëve për korrigjimin e mikroflorës. Për të rimbushur humbjen e lëngjeve dhe elektroliteve - futja e një zgjidhjeje glukozë-elektroliti brenda.

Qëllimet specifike:

Interpretoni vetitë biologjike të patogjenëve të shigelozës.

Njihuni me klasifikimin e Shigella.

Mësoni të interpretoni modelet patogjenetike të procesit infektiv të shkaktuar nga shigella.

Për të përcaktuar metodat e diagnostikimit mikrobiologjik, terapinë etiotropike dhe parandalimin e shigelozës.

Te jesh i afte te:

Inokuloni materialin e provës në mjedise ushqyese.
- Përgatitni njollat dhe njollën Gram.
- Kryeni mikroskopinë e preparateve duke përdorur një mikroskop zhytjeje.
- Analizoni veçoritë morfologjike, kulturore, enzimatike të Shigellës.

Pyetje teorike:

1. Karakteristikat e patogjenëve të shigelozës. vetitë biologjike.

2. Klasifikimi i shigellave. Parimet themelore.

3. Epidemiologjia, patogjeneza dhe karakteristikat klinike shigeloza.

4. Diagnostifikimi laboratorik.

5. Parimet e trajtimit dhe parandalimit të shigelozës.

Detyrat praktike që kryhen në klasë:

1. Mikroskopi i preparateve demonstruese nga kulturat e pastra të patogjenëve të shigelozës.

2. Puna në diagnozën bakteriologjike të shigelozës: studimi i kulturave fekale në mjedisin e Ploskirev.

3. Subkultura e kolonive të dyshimta në mjedisin e Ressel dhe në BCH për të përcaktuar formimin e indolit dhe H 2 S.

4. Skicimi i preparateve demonstruese dhe skema e diagnostikimit mikrobiologjik të shigelozës në protokollin e mësimit.

5. Regjistrimi i protokollit.

Literatura:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Mikrobiologjia mjekësore, imunologjia dhe virologjia / Tekst mësimor për universitetet mjekësore, Shën Petersburg "Literaturë speciale", 1998. - 592f.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiologji / Teksti mësimor.-2nd ed., rishikuar. Dhe shtesë - M .: Mjekësi, 1983, -512s.

3. Pyatkin K.D. Krivoshein Yu.S. Mikrobiologjia me virologji dhe imunologji.- Kiev: Shkolla In dhe Shcha, 1992. - 431s.

4. Mikrobiologjia mjekësore / Redaktuar nga V.I. Pokrovsky.-M.: GEOTAR-MED, 2001.-768s.

5. Udhëzues për trajnim praktik në mikrobiologji, imunologji dhe virologji. Ed. M.P. Zykov. M. "Mjekësi". 1977. 288 f.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiologjia. / Ed. F.K. çerkez. M.: Mjekësi, 1986. 512 f.

7. Shënime leksioni.

Literaturë shtesë:

1. Makiyarov K.A. Mikrobiologjia, virologjia dhe imunologjia. Alma-Ata, "Kazakistani", 1974. 372 f.

2. Titov M.V. Sëmundjet infektive. - K., 1995. 321s.

3. Shuvalova E.P. sëmundjet infektive. - M.: Mjekësi, 1990. - 559 f.

4. BME, Vëll. 1, 2, 7.

5. Pavlovich S.A. Mikrobiologjia mjekësore në grafikë: Proc. kompensim për mjekësi në shok. Mn.: Vysh. shkolla, 1986. 255 f.

E shkurtër udhëzime për të punuar në seancën praktike.

Në fillim të orës së mësimit kontrollohet niveli i përgatitjes së nxënësve për mësimin.

Puna e pavarur konsiston në studimin e klasifikimit të shigellave, duke analizuar skemën e patogjenetike dhe shenjat klinike shigeloza. Studimi i metodave të diagnostikimit laboratorik të shigelozës. Nxënësit kryejnë mbjelljen e biomaterialit në mjedise ushqyese. Më pas përgatiten mikropreparatet, ngjyrosen sipas Gramit, bëhet mikroskopi, skicohen mikropërgatitjet dhe jepen shpjegimet e nevojshme. Përbërja e punës së pavarur përfshin edhe mikroskopinë e përgatitjeve demonstruese dhe skicimin e tyre në protokollin e mësimit.

Në fund të orës së mësimit kryhet një kontroll testi dhe analiza e rezultateve përfundimtare të punës së pavarur të secilit student.

Harta teknologjike e orës praktike.

p/n	Fazat	Koha në minuta	Mënyrat e të mësuarit	Pajisjet	Vendndodhja
	Kontrollimi dhe korrigjimi i nivelit fillestar të përgatitjes për mësimin		Detyrat e testimit bazë	Tavolina, atlas	dhomë studimi
	Punë e pavarur		Grafiku i Strukturës Logjike	Mikroskop zhytës, ngjyra, rrëshqitje qelqi, sythe bakteriologjike, medium ushqyes, medium i Ploskirev, medium i Ressel, "seri e larmishme Hiss"
	Vetëkontroll dhe korrigjimi i përvetësimit të materialit		Detyrat e synuara mësimore
	Kontrolli i testit		Testet
	Analiza e rezultateve të punës

Detyrat e synuara mësimore:

Feçet u morën nga një fëmijë me infeksione akute të zorrëve (mbledhja e feçeve u krye me një tub rektal) që përmbante mukus dhe qelb. Cila metodë diagnostike ekspres duhet të përdoret?

A. ELISA.

b. REEF.

C. RA.

D. RSK.

E. RIA.

Agjenti shkaktar i dizenterisë u izolua nga një fëmijë i sëmurë me infeksion akut të zorrëve. Çfarë lloj veçoritë morfologjike karakteristikë e patogjenit?

A . Shufra gram-negative jo lëvizëse.

B . Shufra e lëvizshme gram-pozitive.

C . Formon një kapsulë në një medium ushqyes.

D . Formon spore në mjedisin e jashtëm.

E . Streptobacilet gram-pozitive.

3. Një pacient që u sëmur tre ditë më parë dhe ankohet për temperaturë 38°C, dhimbje barku, të shpeshta. jashtëqitje të lëngshme, prania e gjakut në jashtëqitje, mjeku konstatoi klinikisht dizenteri bacilare. Cila metodë e diagnostikimit mikrobiologjik duhet përdorur në këtë rast dhe çfarë materiali duhet marrë nga pacienti për të konfirmuar diagnozën?

A. Bakterioskopike kal.

B. Kalorja bakteriologjike.

C. Gjaku bakterioskopik.

D. Urina bakteriologjike.

E. Gjaku serologjik.

4. Shigella Sonne u izolua nga feçet e pacientit. Çfarë duhet bërë kërkime shtesë për të përcaktuar burimin e infeksionit?

A . Kryeni tipizimin e fagut të kulturës së pastër të izoluar.

B . Përcaktoni antibiogramin.

C . Vendosni reaksionin e reshjeve.

D . Vendosni reaksionin e fiksimit të komplementit.

E . Vendosni një reagim neutralizimi.

5. Në grupin e turistëve (27 persona) që pinin ujë nga liqeni, pas dy ditësh, 7 persona shfaqën simptoma. diarre akute. Çfarë materiali për të përcaktuar etiologjinë kjo sëmundje duhet të dërgohet në laborator?

A. Uji, feçet e pacientëve.

B. Uji, gjaku i të sëmurëve.

C. Produktet ushqimore.

D. Urina.

E. Gëlbazë.

6. Një pengesë e rëndësishme e metodës mikroskopike diagnostikuese për infeksionet akute të zorrëve është përmbajtja e pamjaftueshme e informacionit për shkak të identitetit morfologjik të baktereve të familjes. Enterobakteret . Çfarë e bën këtë metodë më informuese?

A . Radioimmunoassay.

B . Reagimi i Coombs.

C . Analiza imunosorbente e lidhur.

D . reaksion opsonizimi.

E . Reagimi i imunofluoreshencës.

7. Një pacient 29-vjeçar u shtrua në spital me periudha të vjella, diarre dhe tenesmus. Feces me copa mukusi dhe një përzierje gjaku. Ekzaminimi bakteriologjik i baktereve nga kolonitë në mjedisin e Ploskirev zbuloi shufra të palëvizshme, gram-negative që nuk fermentojnë laktozën. Emërtoni agjentin shkaktar të procesit infektiv.

A. Shigella flexneri.

b. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. Në laboratorin mikrobiologjik është dorëzuar një marule, e cila dyshohet të jetë shkaku i një akut. infeksioni i zorrëve. Cilat lëndë ushqyese përdoren për inokulimin parësor?

A . Agar i verdhë-kripë, MPB.

b. MPA, MPB.

C . Supë Selenite, Endo, Ploskireva.

D . Supë e mëlçisë, Roux Wednesday.

E . Agar gjaku, agar alkalik.

9. Në studimin mikrobiologjik të mishit të grirë, u izoluan bakteret që i përkasin gjinisë Shigella. Studimi i çfarë vetive të mikrobeve çoi në një përfundim të tillë?

A . Kulturore, tintoriale.

B . Antigjenik, kulturor.

C . Sakarolitik, proteolitik.

D . Antigjenik, imunogjen.

E . Morfologjike, antigjenike.

10. Kur ekzaminim mikroskopik u gjetën të vjella të marra nga një pacient me simptoma të infeksionit akut të zorrëve, shkopinj të palëvizshëm. Në çfarë analize ose preparati mund të studiohet lëvizshmëria bakteriale?

A . Në një njollë me gram.

B . Në një njollë të njollosur sipas Tsil - Nelsen.

C . Në përgatitjen "pika e trashë".

D . Në një njollë të njollosur me Neisser.

E . Në përgatitjen "pika e grimcuar".

Algoritmi punë laboratorike:

1. Studimi i vetive biologjike të Shigellës.

2. Njohja me klasifikimin e shigellave.

3. Analiza e skemës së manifestimeve patogjenetike dhe klinike të shigelozës.

4. Studimi i metodave të diagnostikimit laboratorik të shigelozës.

5. Studimi i parimeve bazë të terapisë dhe parandalimit të shigelozës.

Përgatitja e preparateve fikse nga kultura bakteriale.
Ngjyrosje mikropreparate nga Gram.
Mikroskopi i mikropreparateve Me duke përdorur një mikroskop zhytjeje, analiza dhe skicimi i tyre në protokollin e orës së mësimit.
Mi kromoskopia dhe analiza e preparateve demonstruese nga kulturat e pastra të Shigellës.
Skicimi i preparateve demonstruese dhe skema e diagnostikimit laboratorik të shigelozës në protokoll.
Formulimi i protokollit.

Dizenteria - ky është një infeksion i dhimbshëm, i shoqëruar me diarre me lëshim gjaku, qelb dhe mukus, dhimbje barku dhe simptoma të dehjes së përgjithshme, që ndodh me një lezion mbizotërues të zorrës së trashë, shkaktohet nga tipe te ndryshme lloj Shigella(bakteret e dizenterisë).

Agjentët shkaktarë të dizenterisë i përkasin departamentit Gracilikute, familje Enterobakteret, i sjellshëm Shigella.
Dizenteria , thirri Shigella dysenteriae, është më e rëndë se sëmundjet e shkaktuara nga Shigella të tjera, sepse përveç endotoksinës që shkakton inflamacionin e zorrëve, ky lloj bakteri prodhon një ekzotoksinë të fortë që vepron si neurotoksinë.

Dizenteri bakteriale , ose shigeloza, është një sëmundje infektive e shkaktuar nga bakteret e gjinisë Shigella,

Dizenteria.Morfologjia dhe vetitë tintoriale.
Shigella - shufra gram-negative me skaje të rrumbullakosura, të gjata 2-3 mikron, të trasha 0,5-7 mikron, nuk formojnë spore, nuk kanë flagjela, janë të palëvizshme. Në shumë shtame gjenden villi të një tipi të përgjithshëm dhe pili gjenital. Disa Shigella kanë një mikrokapsulë.

Dizenteria. Kultivimi.
Shkopinjtë e dizenterisë janë anaerobe fakultative. Ata janë të pakërkueshëm për mediat ushqyese, rriten mirë në një temperaturë prej 37 ° C dhe një pH prej 7.2-7.4. Në media të dendura ato formojnë koloni të vogla transparente, në media të lëngshme - turbullirë difuze. Lëngu i selenitit përdoret më shpesh si një mjet pasurues për kultivimin e Shigellës.

Dizenteria.aktiviteti enzimatik.
Shigella kanë më pak aktivitet enzimatik se enterobakteret e tjera. Ata fermentojnë karbohidratet me formimin e acidit. Një tipar i rëndësishëm që bën të mundur diferencimin e Shigella është marrëdhënia e tyre me manitol: S. dysenteriae nuk fermenton manitol, përfaqësuesit e grupeve B, C, D janë manitol-pozitiv. Më aktivët biokimikisht janë S. sonnei, i cili ngadalë (brenda 2 ditësh) mund të fermentojë laktozën. Në bazë të marrëdhënies së S. sonnei me ramnozën, ksilozën dhe maltozën, dallohen 7 variante biokimike të saj.

Dizenteria.Struktura antigjenike.
Shigella ka O-antigjen, heterogjeniteti i saj lejon që serovaret dhe nënserovarët të dallohen brenda grupeve; në disa anëtarë të gjinisë, gjendet K-antigjeni.

Dizenteria.faktorët e patogjenitetit.
Të gjithë bacilet dizenterike formojnë endotoksinën, e cila ka një efekt enterotropik, neurotropik, pirogjenik. Përveç kësaj, S. dysenteriae - Shigella Grigoriev-Shiga - sekretojnë një ekzotoksinë që ka një efekt enterotoksik, neurotoksik, citotoksik dhe nefrotoksik në trup, i cili në përputhje me rrethanat prish metabolizmin e kripës së ujit dhe aktivitetin e sistemit nervor qendror, çon në vdekje. te qelizave epiteliale te zorres se trashe.zorreve demtime te tubulave renale.

Me formimin e ekzotoksinës, shoqërohet një ecuri më e rëndë e dizenterisë e shkaktuar nga ky patogjen. Ekzotoksina gjithashtu mund të sekretohet nga lloje të tjera të Shigella. Është zbuluar faktori i përshkueshmërisë RF, si rezultat i të cilit preken enët e gjakut. Faktorët patogjenë përfshijnë gjithashtu proteina invazive, duke lehtësuar depërtimin e tyre në qelizat epiteliale, si dhe proteinat e pilit dhe membranës së jashtme përgjegjëse për ngjitjen dhe një mikrokapsulë.

Dizenteria.rezistencës.
Shigella kanë një rezistencë të ulët ndaj veprimit faktorë të ndryshëm. S. sonnei kanë rezistencë më të madhe, e cila në ujë rubineti vazhdojnë deri në 2.5 muaj, në ujin e rezervuarëve të hapur mbijetojnë deri në 1.5 muaj. S. sonnei jo vetëm që mund të mbijetojë për një kohë të gjatë, por edhe të shumohet në produkte, veçanërisht në produktet e qumështit.

Dizenteria.Epidemiologjia.
Dizenteria është një infeksion antroponoz: burimi janë njerëzit e sëmurë dhe transportuesit. Mekanizmi i transmetimit të infeksioneve është fekalo-oral. Rrugët e transmetimit mund të jenë të ndryshme - me dizenterinë e Sonne mbizotëron rruga e ushqimit, me dizenterinë e Flexner - uji, për dizenterinë Grigoriev-Shiga është karakteristike rruga kontakt-familje.

Dizenteria gjendet në shumë vende të botës. AT vitet e fundit ka pasur një rritje të mprehtë të incidencës së këtij infeksioni. Njerëzit e të gjitha moshave sëmuren, por fëmijët nga 1 deri në 3 vjeç janë më të ndjeshëm ndaj dizenterisë. Rritet numri i të sëmurëve në muajt korrik-shtator. Llojet e ndryshme të Shigella janë të shpërndara në mënyrë të pabarabartë në rajone të caktuara.

Dizenteria.Patogjeneza.
Shigella hyn në traktin gastrointestinal përmes gojës dhe arrin në zorrën e trashë. Duke pasur tropizëm për epitelin e tij, patogjenët ngjiten në qeliza me ndihmën e pilit dhe proteinave të membranës së jashtme. Falë faktorit invaziv, ato depërtojnë brenda qelizave, shumohen atje, si pasojë qelizat vdesin.

Ulceracionet formohen në murin e zorrëve, në vend të të cilave formohen më pas plagët. Endotoksina, e çliruar gjatë shkatërrimit të baktereve, shkakton intoksikim të përgjithshëm, rritje të lëvizshmërisë së zorrëve dhe diarre. Gjaku nga ulcerat e formuara hyn në jashtëqitje. Si rezultat i veprimit të ekzotoksinës, vërehet një shkelje më e theksuar e metabolizmit të kripës së ujit, aktivitetit të sistemit nervor qendror dhe dëmtimit të veshkave.

Dizenteria.foto klinike.
Periudha e inkubacionit zgjat nga 1 deri në 5 ditë. Sëmundja fillon në mënyrë akute me një rritje të temperaturës së trupit në 38-39 ° C, shfaqen dhimbje barku, diarre. Një përzierje gjaku, mukusi gjendet në jashtëqitje. Dizenteria Grigoriev-Shiga është më e rënda.

Dizenteria.Imuniteti.
Pas një sëmundjeje, imuniteti është specifik për speciet dhe variantet specifike. Është jetëshkurtër dhe e paqëndrueshme. Shpesh sëmundja bëhet kronike. Sëmundjet e përsëritura janë vërejtur edhe brenda një sezoni.

Dizenteria.laboratori diagnostifikimit.
Feçet e pacientit merren si material testues. Baza e diagnozës është metoda bakteriologjike, e cila lejon identifikimin e patogjenit, përcaktimin e ndjeshmërisë së tij ndaj antibiotikëve, kryerjen e identifikimit intraspecifik (përcaktoni variantin biokimik, serovarin ose kolicinogjenovarin). Me një kurs të zgjatur të dizenterisë, mund të përdoret si një ndihmës metoda serologjike, që konsiston në formulimin e RA, RNHA (duke rritur titrin e antitrupave me formulim të përsëritur të reaksionit, diagnoza mund të konfirmohet).

Dizenteria.Mjekimi.
Pacientët me forma të rënda të dizenterisë Grigorieva-Shish dhe Flexner trajtohen me antibiotikë një gamë të gjerë veprime me marrjen në konsideratë të detyrueshme të antibiogramit, pasi midis shigellave shpesh ka forma jo vetëm rezistente ndaj antibiotikëve, por edhe të varura nga antibiotikët. Në format e lehta të dizenterisë, antibiotikët nuk përdoren, pasi përdorimi i tyre çon në disbakteriozë, e cila përkeqëson. procesi patologjik, dhe ndërprerje të proceseve të rikuperimit në membranën mukoze të zorrës së trashë.

Dizenteria.Parandalimi.
I vetmi medikament që mund të përdoret në vatrat e infeksionit për qëllime profilaktike është bakteriofagu dizenterik. Rolin kryesor e luan profilaksia jospecifike.

Parandalimi jospecifik parashikon rregullimin e duhur sanitar dhe higjienik të jetës së njerëzve, duke i furnizuar ata me ujë dhe ushqim të cilësisë së lartë.

Në mjedisin e pacientit duhet të merren masa për të parandaluar përhapjen e patogjenit.

Mikrobiologjia e dizenterisë

Dizenteria është një sëmundje infektive e karakterizuar nga dehja e përgjithshme e trupit, diarreja dhe një lezion i veçantë i mukozës së zorrës së trashë. Është një nga sëmundjet më të shpeshta akute të zorrëve në botë. Sëmundja njihet që në lashtësi me emrin "diarre e përgjakshme", por natyra e saj doli të ishte e ndryshme. Në 1875, shkencëtari rus F. A. Lesh izoloi një amebë nga një pacient me diarre të përgjakshme. Entamoeba histolytica, në 15 vitet e ardhshme u vendos pavarësia e kësaj sëmundjeje, për të cilën u ruajt emri amebiazë.

Agjentët shkaktarë të dizenterisë janë një grup i madh bakteresh biologjikisht të ngjashme të bashkuara në gjini Shigella. Patogjeni u zbulua për herë të parë në 1888 nga A. Chantemes dhe F. Vidal; në 1891 u përshkrua nga A. V. Grigoriev dhe në 1898 K. Shiga, duke përdorur serumin që mori nga një pacient, identifikoi patogjenin në 34 pacientë me dizenteri, duke vërtetuar përfundimisht rolin etiologjik të këtij bakteri. Megjithatë, në vitet pasuese, u zbuluan edhe agjentë të tjerë shkaktarë të dizenterisë: në 1900 - nga S. Flexner, në 1915 - nga K. Sonne, në 1917 - nga K. Stutzer dhe K. Schmitz, në 1932 - nga J. Boyd. , më 1934 - nga D. Large, në 1943 - nga A. Sachs. Aktualisht gjinia Shigella përfshin më shumë se 40 serotipe. Ato janë të gjitha shufra të shkurtra gram-negative të palëvizshme që nuk formojnë spore dhe kapsula, të cilat rriten mirë në mjedise të zakonshme ushqyese, nuk rriten në një mjedis urie me citrate ose malonate si burimin e vetëm të karbonit; nuk formojnë H 2 S, nuk kanë ureazë; reagimi Voges-Proskauer është negativ; glukoza dhe disa karbohidrate të tjera fermentohen për të formuar acid pa gaz (përveç disa biotipeve Shigella flexneri: S. Manchester dhe S. Newcastle); si rregull, mos fermentoni laktozën (me përjashtim të Shigella Sonne), adonitin, salicinën dhe inositolin, nuk e lëngëzoni xhelatinë, zakonisht formoni katalazë, nuk kanë lizin dekarboksilazë dhe fenilalaninë deaminazë. Përmbajtja e G + C në ADN është 49 - 53 mol%. Shigelat janë anaerobe fakultative, temperatura optimale për rritje është 37 °C, ato nuk rriten në temperatura mbi 45 °C, pH optimale e mjedisit është 6.7 - 7.2. Kolonitë në media të dendura janë të rrumbullakëta, konvekse, të tejdukshme; në rastin e disociimit, formohen koloni të përafërt në formë R. Rritja në BCH në formën e një turbulli të njëtrajtshme, format e përafërta formojnë një precipitat. Kulturat e sapoizoluara të Sonne Shigella zakonisht formojnë koloni të dy llojeve: të vogla të rrumbullakëta konveks (faza I), të mëdha të sheshta (faza II). Natyra e kolonisë varet nga prania (faza I) ose mungesa (faza II) e një plazmidi me m.m.120 MD, i cili gjithashtu përcakton virulencën e Shigella Sonne.

Klasifikimi ndërkombëtar i Shigellës është ndërtuar duke marrë parasysh karakteristikat e tyre biokimike (manitol-jofermentuese, manitol-fermentuese, laktozë-fermentuese ngadalë Shigella) dhe veçoritë e strukturës antigjenike (Tabela 37).

Në Shigella u gjetën O-antigjene me specifika të ndryshme: të zakonshme për familjen Enterobakteret, gjenerik, specie, grupi dhe tipi specifik, si dhe antigjenet K; Ata nuk kanë antigjene H.

Tabela 37

Klasifikimi i baktereve të gjinisë Shigella

Klasifikimi merr parasysh vetëm O-antigjenet e grupit dhe tipit specifik. Sipas këtyre veçorive, Shigella ndahet në 4 nëngrupe, ose 4 lloje, dhe përfshin 44 serotipe. Në nëngrupin A (specie Shigella dysenteriae) përfshin shigella që nuk fermentojnë manitol. Lloji përfshin 12 serotipe (1 - 12). Çdo serotip ka antigjenin e vet të tipit specifik; Marrëdhëniet antigjenike midis serotipeve, si dhe me llojet e tjera të shigellave, janë të shprehura dobët. Për nëngrupin B (lloji Shigella flexneri) përfshijnë Shigella, zakonisht manitol fermentues. Shigellat e kësaj specie janë të lidhura serologjikisht me njëra-tjetrën: ato përmbajnë antigjene tip specifike (I - VI), sipas të cilave ato ndahen në serotipe (1 - 6), dhe antigjene grupore, të cilat gjenden në përbërje të ndryshme në secilin serotip. dhe sipas të cilit serotipet ndahen në nënserotipe. Përveç kësaj, kjo specie përfshin dy variante antigjenike, X dhe Y, të cilët nuk kanë antigjene tipike; ato ndryshojnë në grupe të antigjeneve të grupit. Serotip S. flexneri 6 nuk ka nënserotipe, por ndahet në 3 lloje biokimike sipas karakteristikave të fermentimit të glukozës, manitolit dhe dulcitit (Tabela 38).

Tabela 38

Biotipet S. flexneri 6

Shënim. K - fermentimi me formimin e vetëm acidit; KG - fermentimi me formimin e acidit dhe gazit; (-) - nuk ka fermentim.

Antigjeni lipopolisakarid O në të gjithë Shigella Flexner përmban antigjenin e grupit 3, 4 si strukturë kryesore primare, sinteza e tij kontrollohet nga një gjen kromozomik i lokalizuar pranë his-lokusit. Antigjenet tip-specifik I, II, IV, V dhe antigjenet e grupit 6, 7, 8 janë rezultat i modifikimit të antigjeneve 3, 4 (glikozilimi ose acetilimi) dhe përcaktohen nga gjenet e profagëve përkatës konvertues, vendi i integrimit të i cili ndodhet në rajonin lac-pro të kromozomit Shigella.

U shfaq në territorin e vendit në vitet '80. Shekulli 20 dhe një nënserotip i ri i përdorur gjerësisht S. flexneri 4(IV:7, 8) ndryshon nga nënserotipi 4a (IV:3, 4) dhe 4b (IV:3, 4, 6), i lindur nga varianti S. flexneri Y(IV: 3, 4) për shkak të lizogjenizimit nga profaget e tij konvertues IV dhe 7, 8.

Për nëngrupin C (lloj Shigella boydii) përfshijnë Shigella, zakonisht manitol fermentues. Anëtarët e grupit janë serologjikisht të dallueshëm nga njëri-tjetri. Marrëdhëniet antigjenike brenda specieve janë të shprehura dobët. Lloji përfshin 18 serotipe (1 - 18), secila prej të cilave ka antigjenin e vet të tipit kryesor.

Në nëngrupin D (specie Shigella sonnei) përfshin Shigella, e cila zakonisht fermenton manitolin dhe është në gjendje të fermentojë ngadalë (pas 24 orësh inkubimi e më vonë) laktozën dhe saharozën. Pamje S. sonnei përfshin një serotip, megjithatë, kolonitë e fazave I dhe II kanë antigjenet e tyre tip-specifik. Dy metoda janë propozuar për klasifikimin intraspecifik të Sonne's Shigella:

1) ndarja e tyre në 14 lloje dhe nëntipe biokimike sipas aftësisë së tyre për të fermentuar maltozën, ramnozën dhe ksilozën; 2) ndarja në lloje fagësh sipas ndjeshmërisë ndaj një grupi fagësh përkatës.

Këto metoda tipizimi janë kryesisht të një rëndësie epidemiologjike. Përveç kësaj, shigella e Sonne dhe shigella e Flexner i nënshtrohen tipizimit për të njëjtin qëllim nga aftësia për të sintetizuar kolicina specifike (kolicinogjenotipizimi) dhe nga ndjeshmëria ndaj kolicinave të njohura (kolicinotyping). Për të përcaktuar llojin e kolicinave të prodhuara nga shigella, J. Abbott dhe R. Shannon propozuan grupe të shtameve tipike dhe treguese të shigellës, dhe për të përcaktuar ndjeshmërinë e shigellës ndaj llojeve të njohura të kolicinave, një grup shtamesh kolicinogjene referuese nga P. Frederick përdoret.

rezistencës. Shigella kanë një rezistencë mjaft të lartë ndaj faktorëve mjedisorë. Ata mbijetojnë në pëlhurë pambuku dhe në letër deri në 30-36 ditë, në feces të tharë - deri në 4-5 muaj, në tokë - deri në 3-4 muaj, në ujë - nga 0,5 në 3 muaj, në fruta dhe perime - deri në 2 javë, në qumësht dhe produkte qumështi - deri në disa javë; në një temperaturë prej 60 ° C ata vdesin në 15 - 20 minuta. I ndjeshëm ndaj solucioneve të kloraminës, klorit aktiv dhe dezinfektuesve të tjerë.

faktorët e patogjenitetit. Vetia më e rëndësishme biologjike e Shigellës, e cila përcakton patogjenitetin e tyre, është aftësia për të pushtuar qelizat epiteliale, për t'u shumuar në to dhe për të shkaktuar vdekjen e tyre. Ky efekt mund të zbulohet duke përdorur një test keratokonjuktival (futja e një laku të një kulture Shigella (2-3 miliardë baktere) nën qepallën e poshtme të një derri gini shkakton zhvillimin e keratokonjuktivitit purulent seroz), si dhe nga infeksioni i qelizave kulturat (efekti citotoksik) ose embrionet e pulës (vdekja e tyre), ose intranazalisht te minjtë e bardhë (zhvillimi i pneumonisë). Faktorët kryesorë të patogjenitetit të shigellës mund të ndahen në tre grupe:

1) faktorët që përcaktojnë ndërveprimin me epitelin e mukozës;

2) faktorët që sigurojnë rezistencë ndaj mekanizmave mbrojtës humoral dhe qelizor të makroorganizmit dhe aftësisë së Shigellës për t'u shumuar në qelizat e saj;

3) aftësia për të prodhuar toksina dhe produkte toksike që përcaktojnë zhvillimin e procesit aktual patologjik.

Grupi i parë përfshin faktorët e ngjitjes dhe kolonizimit: roli i tyre luhet nga pili, proteinat e membranës së jashtme dhe LPS. Enzimat që shkatërrojnë mukozën si neuraminidaza, hialuronidaza dhe mucinaza nxisin ngjitjen dhe kolonizimin. Grupi i dytë përfshin faktorët e pushtimit që nxisin depërtimin e Shigella në enterocite dhe riprodhimin e tyre në to dhe në makrofagë me shfaqjen e njëkohshme të një efekti citotoksik dhe (ose) enterotoksik. Këto veti kontrollohen nga gjenet e plazmidit me m. m. 140 MD (ajo kodon sintezën e proteinave të membranës së jashtme që shkaktojnë pushtimin) dhe gjenet kromozomale Shigella: kcp A (shkakton keratokonjuktivit), cyt (përgjegjës për shkatërrimin e qelizave), si dhe gjene të tjera, ende të paidentifikuara. Mbrojtja e Shigellës nga fagocitoza sigurohet nga K-antigjeni sipërfaqësor, antigjenet 3, 4 dhe lipopolisakaridi. Përveç kësaj, lipidi A endotoksina Shigella ka një efekt imunosupresiv: ai shtyp aktivitetin e qelizave të kujtesës imune.

Grupi i tretë i faktorëve të patogjenitetit përfshin endotoksinën dhe dy lloje ekzotoksinash që gjenden në Shigella - ekzotoksina Shiga dhe ekzotoksina të ngjashme me Shiga (SLT-I dhe SLT-II), vetitë citotoksike të të cilave janë më të theksuara në. S. dysenteriae 1. Toksinat e ngjashme me Shiga dhe Shiga gjenden gjithashtu në serotipe të tjera S. dysenteriae, formohen edhe ato S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC dhe disa salmonela. Sinteza e këtyre toksinave kontrollohet nga gjenet toksike të fagëve konvertues. Enterotoksinat e tipit LT janë gjetur në Flexner, Sonne dhe Boyd Shigella. Sinteza e LT në to kontrollohet nga gjenet plazmidike. Enterotoksina stimulon aktivitetin e adenilate ciklazës dhe është përgjegjëse për zhvillimin e diarresë. Shiga toksina, ose neurotoksina, nuk reagon me sistemin adenilate ciklazë, por ka një efekt të drejtpërdrejtë citotoksik. Toksinat Shiga dhe Shiga-si (SLT-I dhe SLT-II) kanë një MW prej 70 kD dhe përbëhen nga nënnjësi A dhe B (e fundit prej 5 nënnjësive të vogla identike). Receptori për toksinat është glikolipidi i membranës qelizore.

Virulenca e Shigella Sonne varet edhe nga plazmidi me m.m 120 MD. Ai kontrollon sintezën e rreth 40 polipeptideve të membranës së jashtme, shtatë prej të cilave shoqërohen me virulencë. Shigella Sonne me këtë plazmid formon koloni të fazës I dhe është virulente. Kulturat që kanë humbur plazmidën formojnë koloni të fazës II dhe nuk kanë virulencë. Plazmida me m.m 120 - 140 MD u gjetën në Shigella Flexner dhe Boyd. Lipopolisakaridi i shigellës është një endotoksinë e fuqishme.

Një tipar i epidemiologjisë së dizenterisë është ndryshimi në përbërjen e specieve të patogjenëve, si dhe në biotipet Sonne dhe serotipet Flexner në rajone të caktuara. Për shembull, deri në fund të viteve 1930 Shekulli 20 për të ndarë S. dysenteriae 1 përbënte deri në 30 - 40% të të gjitha rasteve të dizenterisë, dhe më pas ky serotip filloi të shfaqej gjithnjë e më pak dhe pothuajse u zhduk. Sidoqoftë, në vitet 1960 - 1980. S. dysenteriae u rishfaq në arenën historike dhe shkaktoi një sërë epidemish që çuan në formimin e tre vatrave hiperendemike të tij - në Amerikën Qendrore, Afrikën Qendrore dhe Azinë Jugore (Indi, Pakistan, Bangladesh dhe vende të tjera). Arsyet për ndryshimin e përbërjes së specieve të patogjenëve të dizenterisë lidhen ndoshta me një ndryshim në imunitetin kolektiv dhe me një ndryshim në vetitë e baktereve të dizenterisë. Në veçanti, kthimi S. dysenteriae 1 dhe shpërndarja e gjerë e saj, e cila shkaktoi formimin e vatrave hiperendemike të dizenterisë, shoqërohet me përvetësimin e plazmideve prej saj, gjë që shkaktoi rezistencë ndaj shumë ilaçeve dhe rritje të virulencës.

Karakteristikat e patogjenezës dhe klinikës. Periudha e inkubacionit për dizenteri është 2-5 ditë, ndonjëherë më pak se një ditë. Formimi i një fokusi infektiv në membranën mukoze të pjesës zbritëse të zorrës së trashë (sigmoid dhe rektum), ku depërton agjenti shkaktar i dizenterisë, është ciklik: ngjitja, kolonizimi, futja e Shigellës në citoplazmën e enterociteve, riprodhimi ndërqelizor, shkatërrimi dhe refuzimi i qelizave epiteliale, lëshimi i patogjenëve në zorrët e lumenit; pas kësaj, fillon cikli tjetër - ngjitja, kolonizimi, etj. Intensiteti i cikleve varet nga përqendrimi i patogjenëve në shtresën parietale të mukozës. Si rezultat i cikleve të përsëritura, fokusi inflamator rritet, ulcerat që rezultojnë, duke u lidhur, rrisin ekspozimin e murit të zorrëve, si rezultat i të cilave gjaku, gunga mukopurulente dhe leukocitet polimorfonukleare shfaqen në feces. Citotoksinat (SLT-I dhe SLT-II) shkaktojnë shkatërrim të qelizave, enterotoksina - diarre, endotoksina - dehje e përgjithshme. Klinika e dizenterisë përcaktohet kryesisht nga lloji i ekzotoksinave që prodhohet në një masë më të madhe nga patogjeni, shkalla e efektit të tij alergjik dhe statusi imunitar i trupit. Megjithatë, shumë çështje të patogjenezës së dizenterisë mbeten të pashpjegueshme, në veçanti: ecuria e dizenterisë tek fëmijët e dy viteve të para të jetës, arsyet e kalimit të dizenterisë akute në kronike, rëndësia e sensibilizimit, mekanizmi i imunitetit lokal. të mukozës së zorrëve etj. Manifestimet klinike më tipike të dizenterisë janë diarreja, nxitjet e shpeshta: në raste të rënda deri në 50 e më shumë herë në ditë, tenesmus (spazma të dhimbshme të rektumit) dhe intoksikim i përgjithshëm. Natyra e jashtëqitjes përcaktohet nga shkalla e dëmtimit të zorrës së trashë. Dizenteria më e rëndë shkaktohet nga S. dysenteriae 1, më e lehtë - Dizenteria e Sonne.

Imuniteti postinfektiv. Siç kanë treguar vëzhgimet mbi majmunët, pas vuajtjes së dizenterisë, mbetet një imunitet i fortë dhe mjaft afatgjatë. Shkaktohet nga antitrupat antimikrobikë, antitoksinat, rritja e aktivitetit të makrofagëve dhe limfociteve T. Një rol të rëndësishëm luan imuniteti lokal i mukozës së zorrëve, i ndërmjetësuar nga IgA. Megjithatë, imuniteti është tip-specifik në natyrë, imunitet i fortë ndër-imun nuk ndodh.

Diagnostifikimi laboratorik. Metoda kryesore është bakteriologjike. Materiali për studim është feces. Skema e izolimit të patogjenit: inokulimi në mediat diagnostike diferenciale Endo dhe Ploskirev (paralelisht në mjedisin pasurues, i ndjekur nga inokulimi në median Endo dhe Ploskirev) për të izoluar kolonitë e izoluara, duke marrë një kulturë të pastër, duke studiuar vetitë e tij biokimike dhe duke marrë parasysh kjo e fundit, identifikimi duke përdorur serume diagnostikuese aglutinuese polivalente dhe monovalente. Prodhohen serumet e mëposhtme komerciale.

1. Shigella që nuk fermenton manitol:

te S. dysenteriae 1 dhe 2

te S. dysenteriae 3-7(polivalente dhe njëvalente),

te S. dysenteriae 8 – 12(polivalente dhe njëvalente).

2. Për manitol fermentues shigella:

ndaj antigjeneve tipike S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

për të grupuar antigjenet S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8- polivalente,

ndaj antigjeneve S.boydii 1–18(polivalente dhe monovalente), ndaj antigjeneve S. sonnei Faza I, faza II,

ndaj antigjeneve S. flexneri I–VI+ S. sonnei- polivalente.

Për identifikimin e shpejtë të Shigellës, rekomandohet metoda e mëposhtme: një koloni e dyshimtë (laktosonegative në mjedisin Endo) nënkulturohet në mjedis TSI (eng. hekur me sheqer të trefishtë) - agar me tre sheqer (glukozë, laktozë, saharozë) me hekur për të përcaktuar prodhimin e H 2 S; ose në një mjedis që përmban glukozë, laktozë, saharozë, hekur dhe ure. Çdo organizëm që zbërthen ure pas 4 deri në 6 orë inkubacion ka më shumë gjasa t'i përkasë gjinisë Proteus dhe mund të përjashtohet. Një mikroorganizëm që prodhon H2S ose ka ureazë ose që prodhon acid në nyje (fermenton laktozën ose saharozën) mund të përjashtohet, megjithëse shtamet që prodhojnë H2S duhet të hetohen si anëtarë të mundshëm të gjinisë Salmonela. Në të gjitha rastet e tjera, kultura e rritur në këto mjedise duhet të ekzaminohet dhe, nëse fermenton glukozën (ndryshimi i ngjyrës së kolonës), të izolohet në formë e pastër. Në të njëjtën kohë, mund të hulumtohet në testin e aglutinimit në xhami me antisera të përshtatshme për gjininë. Shigella. Nëse është e nevojshme, kryhen teste të tjera biokimike për të kontrolluar përkatësinë në gjini Shigella dhe lëvizshmërinë e studimit.

Metodat e mëposhtme mund të përdoren për të zbuluar antigjenet në gjak (përfshirë si pjesë të CEC), urinë dhe feces: RPHA, RSK, reagimi i koaglutinimit (në urinë dhe feces), IFM, RAGA (në serumin e gjakut). Këto metoda janë shumë efektive, specifike dhe të përshtatshme për diagnostikimin e hershëm.

Për diagnozën serologjike mund të përdoren: RPGA me diagnozën përkatëse të eritrociteve, metoda imunofluoreshente (në modifikim indirekt), metoda Coombs (përcaktimi i titrit të antitrupave jo të plotë). Një test alergjik me dizenteri (një zgjidhje e fraksioneve proteinike të Shigella Flexner dhe Sonne) është gjithashtu me vlerë diagnostike. Reaksioni merret parasysh pas 24 orësh.Cilësohet pozitiv në prani të hiperemisë dhe infiltrimit me diametër 10-20 mm.

Mjekimi. Vëmendja kryesore i kushtohet rivendosjes së metabolizmit normal të kripës së ujit, ushqimit racional, detoksifikimit, terapisë racionale me antibiotikë (duke marrë parasysh ndjeshmërinë e patogjenit ndaj antibiotikëve). Një efekt i mirë arrihet nga përdorimi i hershëm i një bakteriofagu dizenterik polivalent, veçanërisht tabletave me një shtresë pektine, e cila mbron fagun nga veprimi i HCl të lëngut gastrik; në zorrën e hollë, pektina shpërndahet, fagët lirohen dhe tregojnë veprimin e tyre. Për qëllime profilaktike, fagu duhet të jepet të paktën një herë në tre ditë (periudha e mbijetesës së tij në zorrë).

Problemi i parandalimit specifik. Për të krijuar imunitet artificial kundër dizenterisë, u përdorën vaksina të ndryshme: nga bakteret e vrarë, kimike, alkool, por të gjitha rezultuan të paefektshme dhe u ndërprenë. Vaksinat kundër dizenterisë Flexner janë krijuar nga Shigella Flexner e gjallë (mutante, e varur nga streptomicina); vaksinat ribozomale, por ato gjithashtu nuk janë përdorur gjerësisht. Prandaj, problemi i parandalimit specifik të dizenterisë mbetet i pazgjidhur. Mënyra kryesore për të luftuar dizenterinë është përmirësimi i sistemit të furnizimit me ujë dhe kanalizimeve, sigurimi i regjimeve të rrepta sanitare dhe higjienike në ndërmarrjet ushqimore, veçanërisht në industrinë e qumështit, në mjediset e kujdesit për fëmijët, në vendet publike dhe në higjienën personale.

KATEGORITË

Shqyrtimi

Ekografia e ekstremiteteve

Llojet e ultrazërit

ekografia e barkut

ekografia e gjoksit

ARTIKUJ POPULLOR

	Si të silleni me një vajzë
	Antivirale për fëmijë dhe të rritur
	Pse dua të ha shumë, nuk kam dëshirë të ha për disa ditë
	"shenjë e butë pas ndajfoljeve që fërshëllejnë në fund"
	Format normative të mënyrës urdhërore Foljet e mënyrës urdhërore kanë formën

2022 "kingad.ru" - ekzaminimi me ultratinguj i organeve të njeriut

Hulumtimi bakteriologjik në dizenteri. Diagnoza laboratorike e dizenterisë, amebiazës dhe balantidiazës

Fazat

Pajisjet