Diagnosticum vi vi eritrociti antigjenik. Diagnosticum salmonella eritrocitare o
Certifikata e regjistrimit nr RZN 2016/3905 datë 04.04.2016
Qëllimi
Kompleti i reagentëve "Diagnosticum eritrocite salmonella Vi-antigjen për RPHA" (ED-Vi) është menduar për zbulimin e antitrupave ndaj antigjenit Vi të agjentit shkaktar të etheve tifoide në serumet e gjakut të njeriut nga reagimi i hemaglutinimit pasiv (RPHA). ).
Karakteristikat e kompletit
Parimi i funksionimit
Në prani të antitrupave ndaj agjentit shkaktar të etheve tifoide, vërehet hemaglutinimi i eritrociteve të pulës të sensibilizuar me antigjenin Vi, gjë që çon në formimin e një "ombrelle" eritrocitesh të vendosura në fund të puseve në formë U të pllakës. . Në mungesë të antitrupave ndaj agjentit shkaktar të etheve tifoide, qelizat e kuqe të gjakut të vendosura formojnë një "pikë".
Vendosni përmbajtjen
| Emri i reagentit | Përshkrim | Sasia në komplet |
|---|---|---|
| Diagnosticum eritrociti salmonella Vi-antigjen, i thatë 6% (EDS) | Eritrocitet e pulës të formalizuara të sensibilizuara me antigjenin S. typhi Vi. Masa e thatë higroskopike me ngjyrë kafe. Pas tretjes, suspensioni ka ngjyrë të kuqe-kafe. | 1 fl., nga 0.6 ml |
| Serumi diagnostikues i salmonelës i adsorbuar, receptor Vi, i thatë (i holluar 1:20, (K+)) | Serum lepuri Salmonella e adsorbuar, receptor Vi, i holluar 1:20. Masa poroze e thatë higroskopike me ngjyrë të bardhë. Pas tretjes, është një lëng transparent i verdhë ose i pangjyrë. | 1 fl., nga 0.3 ml |
| Diluenti i mostrës së testimit (RSD) | Lëng transparent me ngjyrë blu-vjollcë. | 1 fl., 10 ml |
| Zgjidhje tampon fosfati (PBS) | Lëng transparent pa ngjyrë. | 1 fl., 10 ml |
| Tableta polimere një përdorimshe për reaksione imunologjike | Tableta polimere një përdorimshe për reaksione imunologjike e bërë nga polistireni transparent pa ngjyrë. | 1 PC. |
Karakteristikat diagnostike
Diagnosticum duhet të aglutinohet në RPHA me serumin e salmonelës diagnostike të absorbuar, receptorin Vi, të thatë (hollimi 1:20), në titrin e treguar në etiketën e serumit. Niveli i kushtëzuar i karakteristikave diagnostike të serumit të gjakut nga njerëz të shëndetshëm duhet të konsiderohet një hollim i serumit jo më i lartë se 1:20. Koha e analizës është 3040 minuta. Kompleti është krijuar për të testuar 42 serume gjaku në opsionin e shqyrtimit ose 10 serume gjaku në opsionin e titrimit.
Masat paraprake
Kompleti është menduar vetëm për përdorim diagnostik in vitro. Substancat e përfshira në komplet janë të çaktivizuara dhe të sigurta. Kur punoni me kompletin, duhet të respektoni SP 1.3.2322-08 dhe SanPiN 2.1.7.2790-10.
Pajisje dhe materiale shtesë
Pajisjet, materialet, zgjidhjet:
- Dispenzues me pipetë 1-kanalësh me volum dozimi të ndryshueshëm 5 - 40 µl; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl dhe 1000 - 5000 µl;
- Shpërndarës me pipetë me 8 ose 12 kanale me vëllime dozimi të ndryshueshme prej 5 - 40 µl dhe 40 - 200 µl;
- ujë i distiluar (GOST 6709-72).
Mostrat e analizuara
Mostrat e serumit të gjakut në studim ruhen në një temperaturë prej 2 deri në 8 °C për jo më shumë se 3 ditë nga momenti i marrjes së gjakut. Hirra mund të ruhet e ngrirë në një temperaturë jo më të madhe se minus 18 °C për jo më shumë se 1 vit. Para përdorimit, mostrat shkrihen në një temperaturë prej 16 deri në 25 °C dhe përzihen duke tundur. Ri-ngrirja nuk lejohet. Mostrat me rritje bakteriale dhe hemolizë nuk duhet të përdoren. Para kryerjes së reaksionit, serumet e provës nxehen në 56 °C për 30 minuta.
Kryerja e analizave
Përgatitja e serumit të kontrollit diagnostikues (K+)
Përgatitni një tretësirë pune të serumit të Salmonellës diagnostike të adsorbuar, receptorit Vi, të thatë (hollimi 1:20) nga 0,3 ml (K+). Për ta bërë këtë, shtoni 0,3 ml tretësirë tampon fosfati (PBS) në përmbajtjen e shishes me K+. Sasia e mbetur e serumit mund të ndahet dhe të ruhet e ngrirë në një temperaturë që nuk kalon minus 18 ° C për jo më shumë se 6 muaj.
Përgatitja e Salmonella eritrociteve Diagnosticum (SED)
Për të përgatitur një hollim pune të suspensionit Salmonella erythrocyte diagnosticum, 0,6 ml ujë të distiluar i shtohet përmbajtjes së shishes me SED të thatë 6% dhe lihet të hidratohet për 2 orë në një temperaturë prej 16 deri në 25 °C. Më pas tretësirës i shtohen 2,4 ml tretësirë tampon fosfati (PBS). Tretësira e punës ruhet në një temperaturë prej 2 deri në 8 °C jo më shumë se 1 muaj. Ngrirja nuk lejohet.
Deklarata e RPGA gjatë ekzaminimit të serumeve të gjakut
Serumet e gjakut për studimet depistuese hollohen në pusetat e tabletës si më poshtë:
- Hollimet paraprake prej 1:20 përgatiten në pusetat e para të pllakës, duke shtuar fillimisht 190 μl tretësirë RIP në to, më pas 10 μl serum testues. Çdo serum shtohet me një majë të veçantë dhe pipet me kujdes (ngjyra e tretësirës në puset pas shtimit të serumeve duhet të ndryshojë nga blu-vjollcë në jeshile);
- hollimet e skanimit prej 1:40 përgatiten në pusetat e dyta duke shtuar fillimisht 25 μl tretësirë PBS në to, dhe më pas 25 μl serum të holluar paraprakisht dhe duke vënë me kujdes pipetën.
Sa herë që kryhet RPGA, është e nevojshme të kryhet një përcaktim kontrolli i titrit K+. Për ta bërë këtë, shtoni 50 μl zgjidhje PBS në 8 puse në një rresht të gjatë. Më pas në pusin e parë shtoni 50 μl tretësirë pune K+ (1:20), pipet me kujdes dhe kaloj 50 μl në puset e ardhshme, duke përftuar hollime 2-fish nga 1:40 deri në 1:5120. 50 μl tretësirë PBS shtohen në 4 puse të tjera për të monitoruar EDS për mungesën e hemaglutinimit spontan.
25 μl SED shtohen në të gjitha pusetat e pllakës me hollimet skanuese të serumeve të testimit (përveç atyre të para që përmbajnë RIP) dhe kontrolleve. Përziejeni suspensionin SED në një shishe ose banjë përpara përdorimit! Tableta tundet mirë dhe lihet në një temperaturë prej 16 deri në 25 ° C për 30 - 40 minuta derisa eritrocitet në kontroll të qetësohen plotësisht.
Deklarata e RPGA gjatë titrimit të serumeve të gjakut të testuar
Titrimi i serumeve të provës dhe tretësirës së punës K+ kryhet në rreshta të shkurtër të pllakës. Një rresht tjetër i shkurtër përdoret për të monitoruar mungesën e hemaglutinimit spontan të EDS.
180 μl tretësirë RIP i shtohen puseve të para të rreshtave të shkurtër për titrimin e serumit të testimit. Shtoni 50 μl tretësirë PBS në të gjitha puset e tjera.
20 μl serum testues shtohen në puset me tretësirën RIP (përftohet një hollim 1:10). Secili serum shtohet me majën e tij dhe pipet me kujdes (ngjyra e tretësirës në puse duhet të ndryshojë nga blu-vjollcë në jeshile). Më pas, 50 μl transferohen nga puset e para në puset e radhës, duke përftuar hollime të dyfishta nga 1:20 deri në 1:1280. Në fund të titrimit, tretësirat në vëllim 50 μl hiqen nga pusetat e fundit.
Sa herë që kryhet RPGA, është e nevojshme të kryhet një përcaktim kontrolli i titrit K+. Për ta bërë këtë, shtoni 50 μl zgjidhje PBS në 8 puse në një rresht të gjatë. Më pas në pusin e parë shtoni 50 μl tretësirë pune K+ (1:20), pipet me kujdes dhe kaloj 50 μl në puset e ardhshme, duke përftuar hollime 2-fish nga 1:40 deri në 1:5120.
Për të kontrolluar diagnostifikimin për mungesën e hemaglutinimit spontan, në të gjitha puset e një rreshti të shkurtër shtohen 50 μl tretësirë PBS.
25 μl SED shtohen në të gjitha puset (përveç puseve të para të çdo rreshti për serumet e testimit që përmbajnë RIP). Përziejeni suspensionin SED në një shishe ose banjë përpara përdorimit! Tableta tundet mirë dhe lihet në një temperaturë prej 16 deri në 25 ° C për 30 - 40 minuta derisa eritrocitet në kontroll të qetësohen plotësisht.
Kontabiliteti dhe interpretimi i rezultateve
Llogaritja e rezultateve gjatë ekzaminimit të serumit të gjakut
Rezultatet merren parasysh në një shkallë konvencionale prej katër kryqëzimesh. Titri i serumit konsiderohet të jetë hollimi i tij, i cili jep hemaglutinim me të paktën 3 (+++) kryqe.
- ++++ (4+) - eritrocitet e aglutinuara formojnë një "ombrellë" të përmbysur në fund të vrimës, skajet e saj bien;
- +++ (3+) - eritrocitet e aglutinuara formojnë një "ombrellë" të përmbysur në fund të vrimës, skajet e saj janë të lëmuara;
- ++ (2+) - së bashku me eritrocitet e aglutinuara, në fund të pusit ka një sediment në formën e një "unaze" të vogël të eritrociteve jo të aglutinuara;
- + (1+) - shumica e qelizave të kuqe të gjakut nuk aglutinohen dhe vendosen në formën e një "unaze" të vogël;
- (-) - qelizat e kuqe të gjakut jo të aglutinuara formojnë një "pikë" në fund të pusit.
Rezultat pozitiv konsiderohet të jetë hemaglutinimi i eritrociteve të ngarkuara me antigjen Vi me të paktën 3 kryqëzime (+++).
Kontrolli i cilësisë së diagnostifikimit sigurohet nga 4 puse të rreshtit të kontrollit, në të cilat janë shtuar vetëm zgjidhje PBS dhe SED. Nuk duhet të ketë hemaglutinim spontan në këto puse - reagimi është negativ (-). Përndryshe, studimi duhet të përsëritet. Nëse hemaglutinimi shfaqet pas ri-stadifikimit, ilaçi nuk përdoret.
Serumet me rezultat negativ duhet konsideruar se nuk përmbajnë antitrupa ndaj antigjenit Vi me një titër diagnostik 1:40 ose më të ulët.
Serumet që japin rezultat pozitiv në një hollim 1:40 duhet të ritestohen me titrim të serumit për të vendosur titrin e tij.
Llogaritja e rezultateve kur titrohet serumi i gjakut
Titri i serumit konsiderohet të jetë hollimi i tij, i cili jep hemaglutinim të paktën 3 (+++) kryqe.
Kontrolli i cilësisë së diagnostifikimit sigurohet nga puset e rreshtit për kontrollin e EDS. Nuk duhet të ketë hemaglutinim spontan në këto puse - reagimi është negativ (-). Përndryshe, studimi duhet të përsëritet. Nëse hemaglutinimi shfaqet pas ri-stadifikimit, ilaçi nuk përdoret.
Kompleti i reagentit të antigjenit Diagnosticum Salmonella VI është menduar për zbulimin në serumin e gjakut të njeriut të antitrupave specifikë ndaj antigjenit Salmonella typhus VI në një reaksion hemaglutinimi pasiv (RPHA).
KARAKTERISTIKAT E SET
2.1. Parimi i metodës.
Parimi aktiv i antigjenit Diagnosticum Salmonella VI është antigjeni Vi i fiksuar në sipërfaqen e qelizave të kuqe të gjakut. Kur ndërveprohet me serumet që përmbajnë antitrupa ndaj antigjenit Vi, vërehet fenomeni i aglutinimit të eritrociteve.
2.2. VENDOSI PËRMBAJTJEN
| Reagentët | sasi |
| Diagnosticum eritrociti salmonella Vi-antigjenik- është një suspension 1% i eritrociteve të deleve të formalizuara dhe të sensibilizuara Salmonella Typhoid me antigjen B në një tretësirë tampon fosfati (pH 7.2 + 0.2; përqendrimi 0.06 mol/l). Pezullim homogjen i ngjyrës kafe pa thekon; pas vendosjes, formohen 2 shtresa: një sediment i dendur kafe i eritrociteve dhe një lëng supernatant transparent me ngjyrë të verdhë. | 1 shishe - 3 ml |
| Serum diagnostikues i salmonelës i receptorit B të absorbuar të thatë - masë homogjene nga e bardha me nuancë kafe në bezhë | 1 shishe - 0,1 ml |
| 1% suspension i eritrociteve të deleve të formalizuara dhe të pasensibilizuara- suspension homogjen me ngjyrë kafe pa thekon; pas vendosjes, formohen 2 shtresa: një sediment i dendur kafe i eritrociteve dhe një lëng supernatant transparent me ngjyrë të verdhë. | 1 shishe - |
| Zgjidhje për hollimin e serumit dhe stadifikimin e RPGA - 0,9% zgjidhje klorur natriumi - lëng transparent pa ngjyrë, pH nga 6,5 në 7,5 | 2 shishe - 8 ml secila |
| Pllakë me fund të rrumbullakët me përdorim të vetëm për reaksione imunologjike - përbëhet nga 8 rreshta, secila prej të cilave përfshin 12 vrima me një fund transparent, të pangjyrë, të rrumbullakët | 1 PC |
KARAKTERISTIKAT ANALITIKE DHE DIAGNOSTIKE.
3.1. Diagnosticum duhet të aglutinohet në RPHA me serumin diagnostik të Salmonellës të përthithur nga receptori B i thatë në një hollim jo më pak se 1:160.
Niveli i kushtëzuar i karakteristikave diagnostike të serumit të gjakut nga njerëz të shëndetshëm duhet të konsiderohet një hollim i serumit jo më i lartë se 1:20.
3.2. Koha e analizës: 2 orë.
3.3. Kompleti përmban 8 përkufizime.
MASAT PARANDALUESE
Kur punoni me kompletin, duhet të respektoni "Rregullat e projektimit, masat paraprake të sigurisë, higjienën industriale, regjimin anti-epidemik dhe higjienën personale kur punoni në laboratorë (departamente, departamente) të institucioneve sanitare dhe epidemiologjike të Ministrisë së Shëndetësisë së BRSS ( M., 1981).
Serumet e analizuara, si dhe reagentët në kontakt me to, duhet të konsiderohen si potencialisht të infektuar, të aftë për ruajtjen ose transmetimin afatgjatë të HIV-it, virusit të hepatitit ose ndonjë agjenti tjetër shkaktar të infeksionit viral - ato duhet të trajtohen me kujdes:
- punoni me doreza gome;
- gjatë vendosjes me pipet është e nevojshme të përdoren dispenzues automatikë;
- pas përfundimit të punës, trajtoni serumet e analizuara dhe reagentët dhe instrumentet në kontakt me to me një tretësirë dezinfektuese
- Fshini pajisjet me alkool etilik 70% para dhe pas përdorimit.
Serumet e analizuara duhet të çaktivizohen në një temperaturë prej 56 0 C për 30 minuta.
Serumi diagnostikues i Salmonellës i përthithur nga receptori B, i përfshirë në komplet, është i thatë dhe i çaktivizuar.
Rezultatet e analizës objektive garantohen nëse plotësohen kushtet e mëposhtme:
- Të gjithë reagentët e kompletit duhet të ruhen në temperatura nga 2 deri në 8 0 C;
- mos përdorni reagentë të skaduar;
- mos përdorni reagentët e kompletit nëse nuk ka shenjë të përshtatshme në paketimin e tyre;
- Për të kryer RPHA, përdorni reagentë të përfshirë vetëm në këtë komplet.
2.diagnosticum
4.nga mikrobet e shkatërruara (izolimi i një Agi specifik)
Diagnostikimi i eritrociteve HBs
2.diagnosticum
4. suspension i deleve ajrore të trajtuara me taninë dhe të precipituar a\g HBs
5. për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut
Diagnosticum gp120
2.diagnosticum
4.veç një\g psh. HIV
5. për zbulimin e një HIV
Diagnostikimi i eritrociteve tetanoz
2.diagnosticum
4. suspension i er.ram, i trajtuar me taninë dhe a\g tetanoz
5. për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut (për tetanozin
Antigjeni kardiolipin për mikroprecipitim
2.diagnosticum
4.Nxjerrja e fraksioneve lipidike nga zemra e një demi të shëndetshëm
5. për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut
Antigjeni treponemal tejzanor
2.diagnosticum
4. të vrarë ex. sifilizit
5. për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut
Diagnostikimi i tularemisë korpuskulare
2.diagnosticum
4.nga grimcat individuale patogjene
5. për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut
Diagnoza e dizenterisë
2.diagnosticum
4. pezullimi nga kafshët e vrara
5.për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut të pacientit
Diagnostikimi i eritrociteve nga Shigella Sonne
2.diagnosticum
4.pezullimi i er.ramit, i trajtuar me tonin
5. për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut
Diagnosticum nga Salmonella typhimurium
2.diagnosticum
4. të vrarë ex. salmonelën
5. për të zbuluar antitrupa specifikë në serumin e gjakut
Serumet
Serum kuajsh antigangrenoz 5000 IU
2.serum
4.nga serumi i gjakut te kuajve hiperimmia me anatoksine e gangrenes gazore ngacmuese
6. parenteralisht, pas testit me globulinë 1:100
Imunoglobulina normale njerëzore
2.serum
4.nga serumi i gjakut të dhuruesve
5. kalojë forma-e. specifike blerë artet imm
6.parenteral
Serum precipitues i antraksit
2.serum
4. nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara a\g exc.sib. ulcerat
6. Reaksioni i reshjeve (RP)
Lloji i serumit botulinum – A 400 IU
2.serum
5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit
6. Reaksioni i neutralizimit (RN)
Globulina kundër antraksit
2.serum
4. nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuar dhe/ose përjashtuar antraksin
5. kalojë forma-e. specifike blerë artet imm
6.parenteral
Serum hemolitik
2.serum
4.nga serumi i kafshëve të hiperimunizuara me eritrocite të kafshëve të një lloji tjetër
5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit
Serum aglutinues Ogawa kolera
2.serum
4.nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara
5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit
Serum lumineshent i tularemisë
2.serum
4.nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara a\g përjasht.tular.
5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit
Imunoglobulina kundër encefalitit të lindur nga rriqrat
2.serum
4.nga serumi i gjakut të dhuruesve
5. kalojë forma-e. specifike blerë artet imm
6.parenteral
Serum diagnostikues ESNO
2.serum
4.nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara me viruse ESNO
5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit
Imunoglobulina njerëzore kundër hepatitit B
2.serum
4. Nga serumi i gjakut i një dhuruesi të vaksinuar kundër hepatitit B
5. kalojë forma-e. specifike blerë artet imm
6.parenteral
Serum antiglobulin i etiketuar me peroksidazë
2.serum
4.nga serumi i gjakut i kafshëve të hiperimunizuara
5. për të zbuluar një antigjen specifik në materialin e testimit (HIV)
Imunoglobulina kundër tërbimit
2.serum
4.nga serumi i gjakut të dhuruesve
5. kalojë forma-e. specifike blerë artet imm
Certifikata e regjistrimit nr RZN 2016/3905 datë 04.04.2016
Qëllimi
Kompleti i reagentëve "Diagnosticum eritrocite salmonella Vi-antigjen për RPHA" (ED-Vi) është menduar për zbulimin e antitrupave ndaj antigjenit Vi të agjentit shkaktar të etheve tifoide në serumet e gjakut të njeriut nga reagimi i hemaglutinimit pasiv (RPHA). ).
Karakteristikat e kompletit
Parimi i funksionimit
Në prani të antitrupave ndaj agjentit shkaktar të etheve tifoide, vërehet hemaglutinimi i eritrociteve të pulës të sensibilizuar me antigjenin Vi, gjë që çon në formimin e një "ombrelle" eritrocitesh të vendosura në fund të puseve në formë U të pllakës. . Në mungesë të antitrupave ndaj agjentit shkaktar të etheve tifoide, qelizat e kuqe të gjakut të vendosura formojnë një "pikë".
Vendosni përmbajtjen
| Emri i reagentit | Përshkrim | Sasia në komplet |
|---|---|---|
| Diagnosticum eritrociti salmonella Vi-antigjen, i thatë 6% (EDS) | Eritrocitet e pulës të formalizuara të sensibilizuara me antigjenin S. typhi Vi. Masa e thatë higroskopike me ngjyrë kafe. Pas tretjes, suspensioni ka ngjyrë të kuqe-kafe. | 1 fl., nga 0.6 ml |
| Serumi diagnostikues i salmonelës i adsorbuar, receptor Vi, i thatë (i holluar 1:20, (K+)) | Serum lepuri Salmonella e adsorbuar, receptor Vi, i holluar 1:20. Masa poroze e thatë higroskopike me ngjyrë të bardhë. Pas tretjes, është një lëng transparent i verdhë ose i pangjyrë. | 1 fl., nga 0.3 ml |
| Diluenti i mostrës së testimit (RSD) | Lëng transparent me ngjyrë blu-vjollcë. | 1 fl., 10 ml |
| Zgjidhje tampon fosfati (PBS) | Lëng transparent pa ngjyrë. | 1 fl., 10 ml |
| Tableta polimere një përdorimshe për reaksione imunologjike | Tableta polimere një përdorimshe për reaksione imunologjike e bërë nga polistireni transparent pa ngjyrë. | 1 PC. |
Karakteristikat diagnostike
Diagnosticum duhet të aglutinohet në RPHA me serumin e salmonelës diagnostike të absorbuar, receptorin Vi, të thatë (hollimi 1:20), në titrin e treguar në etiketën e serumit. Niveli i kushtëzuar i karakteristikave diagnostike të serumit të gjakut nga njerëz të shëndetshëm duhet të konsiderohet një hollim i serumit jo më i lartë se 1:20. Koha e analizës është 3040 minuta. Kompleti është krijuar për të testuar 42 serume gjaku në opsionin e shqyrtimit ose 10 serume gjaku në opsionin e titrimit.
Masat paraprake
Kompleti është menduar vetëm për përdorim diagnostik in vitro. Substancat e përfshira në komplet janë të çaktivizuara dhe të sigurta. Kur punoni me kompletin, duhet të respektoni SP 1.3.2322-08 dhe SanPiN 2.1.7.2790-10.
Pajisje dhe materiale shtesë
Pajisjet, materialet, zgjidhjet:
- Dispenzues me pipetë 1-kanalësh me volum dozimi të ndryshueshëm 5 - 40 µl; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl dhe 1000 - 5000 µl;
- Shpërndarës me pipetë me 8 ose 12 kanale me vëllime dozimi të ndryshueshme prej 5 - 40 µl dhe 40 - 200 µl;
- ujë i distiluar (GOST 6709-72).
Mostrat e analizuara
Mostrat e serumit të gjakut në studim ruhen në një temperaturë prej 2 deri në 8 °C për jo më shumë se 3 ditë nga momenti i marrjes së gjakut. Hirra mund të ruhet e ngrirë në një temperaturë jo më të madhe se minus 18 °C për jo më shumë se 1 vit. Para përdorimit, mostrat shkrihen në një temperaturë prej 16 deri në 25 °C dhe përzihen duke tundur. Ri-ngrirja nuk lejohet. Mostrat me rritje bakteriale dhe hemolizë nuk duhet të përdoren. Para kryerjes së reaksionit, serumet e provës nxehen në 56 °C për 30 minuta.
Kryerja e analizave
Përgatitja e serumit të kontrollit diagnostikues (K+)
Përgatitni një tretësirë pune të serumit të Salmonellës diagnostike të adsorbuar, receptorit Vi, të thatë (hollimi 1:20) nga 0,3 ml (K+). Për ta bërë këtë, shtoni 0,3 ml tretësirë tampon fosfati (PBS) në përmbajtjen e shishes me K+. Sasia e mbetur e serumit mund të ndahet dhe të ruhet e ngrirë në një temperaturë që nuk kalon minus 18 ° C për jo më shumë se 6 muaj.
Përgatitja e Salmonella eritrociteve Diagnosticum (SED)
Për të përgatitur një hollim pune të suspensionit Salmonella erythrocyte diagnosticum, 0,6 ml ujë të distiluar i shtohet përmbajtjes së shishes me SED të thatë 6% dhe lihet të hidratohet për 2 orë në një temperaturë prej 16 deri në 25 °C. Më pas tretësirës i shtohen 2,4 ml tretësirë tampon fosfati (PBS). Tretësira e punës ruhet në një temperaturë prej 2 deri në 8 °C jo më shumë se 1 muaj. Ngrirja nuk lejohet.
Deklarata e RPGA gjatë ekzaminimit të serumeve të gjakut
Serumet e gjakut për studimet depistuese hollohen në pusetat e tabletës si më poshtë:
- Hollimet paraprake prej 1:20 përgatiten në pusetat e para të pllakës, duke shtuar fillimisht 190 μl tretësirë RIP në to, më pas 10 μl serum testues. Çdo serum shtohet me një majë të veçantë dhe pipet me kujdes (ngjyra e tretësirës në puset pas shtimit të serumeve duhet të ndryshojë nga blu-vjollcë në jeshile);
- hollimet e skanimit prej 1:40 përgatiten në pusetat e dyta duke shtuar fillimisht 25 μl tretësirë PBS në to, dhe më pas 25 μl serum të holluar paraprakisht dhe duke vënë me kujdes pipetën.
Sa herë që kryhet RPGA, është e nevojshme të kryhet një përcaktim kontrolli i titrit K+. Për ta bërë këtë, shtoni 50 μl zgjidhje PBS në 8 puse në një rresht të gjatë. Më pas në pusin e parë shtoni 50 μl tretësirë pune K+ (1:20), pipet me kujdes dhe kaloj 50 μl në puset e ardhshme, duke përftuar hollime 2-fish nga 1:40 deri në 1:5120. 50 μl tretësirë PBS shtohen në 4 puse të tjera për të monitoruar EDS për mungesën e hemaglutinimit spontan.
25 μl SED shtohen në të gjitha pusetat e pllakës me hollimet skanuese të serumeve të testimit (përveç atyre të para që përmbajnë RIP) dhe kontrolleve. Përziejeni suspensionin SED në një shishe ose banjë përpara përdorimit! Tableta tundet mirë dhe lihet në një temperaturë prej 16 deri në 25 ° C për 30 - 40 minuta derisa eritrocitet në kontroll të qetësohen plotësisht.
Deklarata e RPGA gjatë titrimit të serumeve të gjakut të testuar
Titrimi i serumeve të provës dhe tretësirës së punës K+ kryhet në rreshta të shkurtër të pllakës. Një rresht tjetër i shkurtër përdoret për të monitoruar mungesën e hemaglutinimit spontan të EDS.
180 μl tretësirë RIP i shtohen puseve të para të rreshtave të shkurtër për titrimin e serumit të testimit. Shtoni 50 μl tretësirë PBS në të gjitha puset e tjera.
20 μl serum testues shtohen në puset me tretësirën RIP (përftohet një hollim 1:10). Secili serum shtohet me majën e tij dhe pipet me kujdes (ngjyra e tretësirës në puse duhet të ndryshojë nga blu-vjollcë në jeshile). Më pas, 50 μl transferohen nga puset e para në puset e radhës, duke përftuar hollime të dyfishta nga 1:20 deri në 1:1280. Në fund të titrimit, tretësirat në vëllim 50 μl hiqen nga pusetat e fundit.
Sa herë që kryhet RPGA, është e nevojshme të kryhet një përcaktim kontrolli i titrit K+. Për ta bërë këtë, shtoni 50 μl zgjidhje PBS në 8 puse në një rresht të gjatë. Më pas në pusin e parë shtoni 50 μl tretësirë pune K+ (1:20), pipet me kujdes dhe kaloj 50 μl në puset e ardhshme, duke përftuar hollime 2-fish nga 1:40 deri në 1:5120.
Për të kontrolluar diagnostifikimin për mungesën e hemaglutinimit spontan, në të gjitha puset e një rreshti të shkurtër shtohen 50 μl tretësirë PBS.
25 μl SED shtohen në të gjitha puset (përveç puseve të para të çdo rreshti për serumet e testimit që përmbajnë RIP). Përziejeni suspensionin SED në një shishe ose banjë përpara përdorimit! Tableta tundet mirë dhe lihet në një temperaturë prej 16 deri në 25 ° C për 30 - 40 minuta derisa eritrocitet në kontroll të qetësohen plotësisht.
Kontabiliteti dhe interpretimi i rezultateve
Llogaritja e rezultateve gjatë ekzaminimit të serumit të gjakut
Rezultatet merren parasysh në një shkallë konvencionale prej katër kryqëzimesh. Titri i serumit konsiderohet të jetë hollimi i tij, i cili jep hemaglutinim me të paktën 3 (+++) kryqe.
- ++++ (4+) - eritrocitet e aglutinuara formojnë një "ombrellë" të përmbysur në fund të vrimës, skajet e saj bien;
- +++ (3+) - eritrocitet e aglutinuara formojnë një "ombrellë" të përmbysur në fund të vrimës, skajet e saj janë të lëmuara;
- ++ (2+) - së bashku me eritrocitet e aglutinuara, në fund të pusit ka një sediment në formën e një "unaze" të vogël të eritrociteve jo të aglutinuara;
- + (1+) - shumica e qelizave të kuqe të gjakut nuk aglutinohen dhe vendosen në formën e një "unaze" të vogël;
- (-) - qelizat e kuqe të gjakut jo të aglutinuara formojnë një "pikë" në fund të pusit.
Rezultat pozitiv konsiderohet të jetë hemaglutinimi i eritrociteve të ngarkuara me antigjen Vi me të paktën 3 kryqëzime (+++).
Kontrolli i cilësisë së diagnostifikimit sigurohet nga 4 puse të rreshtit të kontrollit, në të cilat janë shtuar vetëm zgjidhje PBS dhe SED. Nuk duhet të ketë hemaglutinim spontan në këto puse - reagimi është negativ (-). Përndryshe, studimi duhet të përsëritet. Nëse hemaglutinimi shfaqet pas ri-stadifikimit, ilaçi nuk përdoret.
Serumet me rezultat negativ duhet konsideruar se nuk përmbajnë antitrupa ndaj antigjenit Vi me një titër diagnostik 1:40 ose më të ulët.
Serumet që japin rezultat pozitiv në një hollim 1:40 duhet të ritestohen me titrim të serumit për të vendosur titrin e tij.
Llogaritja e rezultateve kur titrohet serumi i gjakut
Titri i serumit konsiderohet të jetë hollimi i tij, i cili jep hemaglutinim të paktën 3 (+++) kryqe.
Kontrolli i cilësisë së diagnostifikimit sigurohet nga puset e rreshtit për kontrollin e EDS. Nuk duhet të ketë hemaglutinim spontan në këto puse - reagimi është negativ (-). Përndryshe, studimi duhet të përsëritet. Nëse hemaglutinimi shfaqet pas ri-stadifikimit, ilaçi nuk përdoret.
Kompleti i reagentit të antigjenit Diagnosticum Salmonella VI është menduar për zbulimin në serumin e gjakut të njeriut të antitrupave specifikë ndaj antigjenit Salmonella typhus VI në një reaksion hemaglutinimi pasiv (RPHA).
KARAKTERISTIKAT E SET
2.1. Parimi i metodës.
Parimi aktiv i antigjenit Diagnosticum Salmonella VI është antigjeni Vi i fiksuar në sipërfaqen e qelizave të kuqe të gjakut. Kur ndërveprohet me serumet që përmbajnë antitrupa ndaj antigjenit Vi, vërehet fenomeni i aglutinimit të eritrociteve.
2.2. VENDOSI PËRMBAJTJEN
| Reagentët | sasi |
| Diagnosticum eritrociti salmonella Vi-antigjenik- është një suspension 1% i eritrociteve të deleve të formalizuara dhe të sensibilizuara Salmonella Typhoid me antigjen B në një tretësirë tampon fosfati (pH 7.2 + 0.2; përqendrimi 0.06 mol/l). Pezullim homogjen i ngjyrës kafe pa thekon; pas vendosjes, formohen 2 shtresa: një sediment i dendur kafe i eritrociteve dhe një lëng supernatant transparent me ngjyrë të verdhë. | 1 shishe - 6 ml |
| Serum diagnostikues i salmonelës i receptorit B të absorbuar të thatë - masë homogjene nga e bardha me nuancë kafe në bezhë | 1 shishe - 0,1 ml |
| 1% suspension i eritrociteve të deleve të formalizuara dhe të pasensibilizuara- suspension homogjen me ngjyrë kafe pa thekon; pas vendosjes, formohen 2 shtresa: një sediment i dendur kafe i eritrociteve dhe një lëng supernatant transparent me ngjyrë të verdhë. | 1 shishe - |
| Zgjidhje për hollimin e serumit dhe stadifikimin e RPGA - 0,9% zgjidhje klorur natriumi - lëng transparent pa ngjyrë, pH nga 6,5 në 7,5 | 2 shishe - 8 ml secila |
| Pllakë me fund të rrumbullakët me përdorim të vetëm për reaksione imunologjike - përbëhet nga 8 rreshta, secila prej të cilave përfshin 12 vrima me një fund transparent, të pangjyrë, të rrumbullakët | 1 PC |
KARAKTERISTIKAT ANALITIKE DHE DIAGNOSTIKE.
3.1. Diagnosticum duhet të aglutinohet në RPHA me serumin diagnostik të Salmonellës të përthithur nga receptori B i thatë në një hollim jo më pak se 1:160.
Niveli i kushtëzuar i karakteristikave diagnostike të serumit të gjakut nga njerëz të shëndetshëm duhet të konsiderohet një hollim i serumit jo më i lartë se 1:20.
3.2. Koha e analizës: 2 orë.
3.3. Kompleti përmban 8 përkufizime.
MASAT PARANDALUESE
Kur punoni me kompletin, duhet të respektoni "Rregullat e projektimit, masat paraprake të sigurisë, higjienën industriale, regjimin anti-epidemik dhe higjienën personale kur punoni në laboratorë (departamente, departamente) të institucioneve sanitare dhe epidemiologjike të Ministrisë së Shëndetësisë së BRSS ( M., 1981).
Serumet e analizuara, si dhe reagentët në kontakt me to, duhet të konsiderohen si potencialisht të infektuar, të aftë për ruajtjen ose transmetimin afatgjatë të HIV-it, virusit të hepatitit ose ndonjë agjenti tjetër shkaktar të infeksionit viral - ato duhet të trajtohen me kujdes:
- punoni me doreza gome;
- gjatë vendosjes me pipet është e nevojshme të përdoren dispenzues automatikë;
- pas përfundimit të punës, trajtoni serumet e analizuara dhe reagentët dhe instrumentet në kontakt me to me një tretësirë dezinfektuese
- Fshini pajisjet me alkool etilik 70% para dhe pas përdorimit.
Serumet e analizuara duhet të çaktivizohen në një temperaturë prej 56 0 C për 30 minuta.
Serumi diagnostikues i Salmonellës i përthithur nga receptori B, i përfshirë në komplet, është i thatë dhe i çaktivizuar.
Rezultatet e analizës objektive garantohen nëse plotësohen kushtet e mëposhtme:
- Të gjithë reagentët e kompletit duhet të ruhen në temperatura nga 2 deri në 8 0 C;
- mos përdorni reagentë të skaduar;
- mos përdorni reagentët e kompletit nëse nuk ka shenjë të përshtatshme në paketimin e tyre;
- Për të kryer RPHA, përdorni reagentë të përfshirë vetëm në këtë komplet.
Vi-Diagnosticum
Diagnosticum Vi
Vi-Antigjenik
