Bakteriologický výskum pri úplavici. Laboratórna diagnostika dyzentérie, amébiázy a balantidiózy

Dyzentéria.

úplavica - infekcia, charakterizované všeobecnou intoxikáciou tela, riedkou stolicou a zvláštnou léziou sliznice hrubého čreva. Ide o jedno z najčastejších akútnych črevných ochorení na svete. Choroba je známa už od staroveku pod názvom "krvavá hnačka", ale jej povaha sa ukázala byť iná. V roku 1875 Ruský vedec Lesh izoloval amébu od pacienta s krvavou hnačkou Entamoeba histolytica, v nasledujúcich 15 rokoch sa ustálila samostatnosť tohto ochorenia, ktoré si zachovalo názov amébóza. Pôvodcami vlastnej dyzentérie je veľká skupina biologicky podobných baktérií združených v rode Shigelta. Patogén bol prvýkrát objavený v roku 1888. A. Chantemes a Vidal; v roku 1891 opísal ho A.V. Grigoriev a v roku 1898. K. Shiga pomocou séra získaného od pacienta identifikoval patogén u 34 pacientov s dyzentériou, čím sa napokon dokázala etiologická úloha tejto baktérie. V nasledujúcich rokoch však boli objavené ďalšie patogény úplavice: v roku 1900. - S. Flexner, v roku 1915. - K. Sonne, v roku 1917. - K. Stutzer a K. Schmitz, v roku 1932. - J. Boyd, v roku 1934 - D. Large, v roku 1943 - A. Saksová.

V súčasnosti rod Shigella zahŕňa viac ako 40 sérotypov. Všetko sú to krátke nepohyblivé gramnegatívne tyčinky, ktoré netvoria spóry a tobolky, ktoré (dobre rastú na bežných živné médiá nerastú na médiu s citrátom ako jediným zdrojom uhlíka; netvoria H2S, nemajú ureázu; Voges-Proskauerova reakcia je negatívna; glukóza a niektoré ďalšie uhľohydráty sa fermentujú za vzniku kyseliny bez plynu (okrem niektorých biotypov Shigella flexneri: S.manchester A Ewcastle); spravidla nefermentujú laktózu (s výnimkou Shigella Sonne), adonit, inozitol, neskvapalňujú želatínu, zvyčajne tvoria katalázu, nemajú lyzíndekarboxylázu a fenylalaníndeaminázu. Obsah G+C v DNA je 49-53 mol%. Shigella sú fakultatívne anaeróby, optimálna teplota pre rast je 37 °C, nerastú nad 45 °C, optimálne pH média je 6,7-7,2. Kolónie na hustých médiách sú okrúhle, konvexné, priesvitné, v prípade asociácie sa vytvárajú hrubé kolónie v tvare R. Rast na BCH vo forme rovnomerného zákalu, drsné formy tvoria zrazeninu. Čerstvo izolované kultúry Shigella Sonne J4HO tvoria kolónie dvoch typov: malé okrúhle konvexné (I fáza), veľké ploché (Fáza 2). Povaha kolónie závisí od prítomnosti (fáza I) alebo neprítomnosti (fáza II) plazmidu s mm 120 MD, čo tiež určuje virulenciu Shigella Sonne.

V Shigella sa našli O-antigény rôznej špecificity: spoločné pre túto rodinu enterobaktérie, generické, druhovo, skupinovo a typovo špecifické, ako aj K-antigény; Nemajú H antigény.

Klasifikácia berie do úvahy iba skupinovo a typovo špecifické O-antigény. Podľa týchto vlastností je Shigellaďalej rozdelené do 4 podskupín alebo 4 druhov a zahŕňa 44 sérotypov. V podskupine A (druh Shigella dysenteriae) Shigella nefermentujúci manitol sú zahrnuté. Druh zahŕňa 12 sérotypov (1-12). Každý stereotyp má svoj vlastný špecifický typ antigénu; antigénne vzťahy medzi sérotypmi, ako aj s inými typmi šigel, sú slabo exprimované. Do podskupiny B (typ Shigella flexneri) zahŕňajú shigellu, zvyčajne fermentujúci manitol. Shigella tohto druhu sú si navzájom sérologicky príbuzné: obsahujú typovo špecifické antigény (I-VI), podľa ktorých sa delia na sérotypy (1-6), a skupinové antigény, ktoré sa v každom sérotype nachádzajú v rôznom zložení. a podľa ktorej sa sérotypy delia na subsérotypy. Okrem toho tento druh zahŕňa dva antigénne varianty - X a Y, ktoré nemajú typické antigény, líšia sa súbormi skupinových antigénov. sérotyp S.flexneri 6 nemá subsérotypy, ale delí sa na 3 biochemické typy podľa charakteristík fermentácie glukózy, manitolu a dulcitu.

Do podskupiny C (druh Shlgella boydll) zahŕňajú shigellu, zvyčajne fermentujúci manitol. Členovia skupiny sú od seba sérologicky odlišní. Antigénne vzťahy v rámci druhu sú slabo vyjadrené. Tento druh zahŕňa 18 sérotypov (1-18), z ktorých každý má svoj vlastný hlavný typ antigénu.

V podskupine D (druh Shlgella sonnel zahŕňala Shigella, zvyčajne fermentujúci manitol a schopná pomaly (po 24 hodinách inkubácie a neskôr) fermentovať laktózu a sacharózu. vyhliadka S. sonnei Zahŕňa jeden sérotyp, avšak kolónie fázy I a II majú svoje vlastné typovo špecifické antigény. Na vnútrodruhovú klasifikáciu Sonnovej Shigelly boli navrhnuté dve metódy:

1) ich rozdelenie na 14 biochemických typov a podtypov podľa ich schopnosti fermentovať maltózu, ramnózu a xylózu;

2) rozdelenie na typy fágov podľa citlivosti na súbor zodpovedajúcich fágov.

Tieto typizačné metódy majú hlavne epidemiologický význam. Okrem toho, Sonneova shigella a Flexnerova shigella sú podrobené typizácii na rovnaký účel vďaka schopnosti syntetizovať špecifické kolicíny (kolicinogenotypizácia) a citlivosti na známe kolicíny (kolicinotypizácia). Na určenie typu kolicínov produkovaných Shigellou navrhli J. Abbott a R. Shannon súbory typických a indikátorových kmeňov Shigella a na stanovenie citlivosti Shigella na známe typy kolicíny používajú súbor referenčných kolicinogénnych kmeňov P. Frederick.

odpor. Shigella má pomerne vysokú odolnosť voči environmentálnym faktorom. Prežijú na bavlnenej tkanine a papieri až 30-36 dní, v sušených výkaloch - až 4-5 mesiacov, v pôde - až 3-4 mesiace, vo vode - od 0,5 do 3 mesiacov, na ovocí a zelenine - až do 2 jednotiek, v mlieku a mliečnych výrobkoch - až niekoľko týždňov; pri 60 °C odumierajú za 15-20 minút.

Citlivý na roztoky chlóramínu, aktívny chlór a iné dezinfekčné prostriedky.

faktory patogénnosti. Najdôležitejšie biologická vlastnosť Shigella, ktorá určuje ich patogenitu – schopnosť napádať epitelové bunky, množiť sa v nich a spôsobiť ich smrť. Tento účinok je možné zistiť pomocou keratokonjunktiválneho testu (vloženie jednej slučky kultúry Shigella (2-3 miliardy baktérií) pod spodné viečko morčaťa spôsobí rozvoj serózno-hnisavej keratokonjunktivitídy), ako aj infekciou buniek kultúry (cytotoxický účinok), alebo kuracie embryá (ich smrť), alebo intranazálne biele myši (vývoj pneumónie). Hlavné faktory patogenity shigelly možno rozdeliť do troch skupín:

1) faktory, ktoré určujú interakciu s epitelom sliznice;

2) faktory, ktoré poskytujú odolnosť voči humorálnym a bunkovým obranným mechanizmom makroorganizmu a schopnosť Shigella množiť sa v jeho bunkách;

3) schopnosť produkovať toxíny a toxické produkty, ktoré určujú vývoj skutočného patologického procesu.

Prvá skupina zahŕňa adhézne a kolonizačné faktory: ich úlohu zohrávajú pili, proteíny vonkajšej membrány a LPS. Adhéziu a kolonizáciu uľahčujú enzýmy, ktoré ničia hlien – neuraminidáza, hyaluronidáza, mucináza. Do druhej skupiny patria invázne faktory, ktoré podporujú penetráciu Shigella do enterocytov a ich reprodukciu v nich a v makrofágoch so súčasným prejavom cytotoxického a (alebo) enterotoxického účinku. Tieto vlastnosti sú riadené génmi plazmidu s m.m. 140 MD (kóduje syntézu proteínov vonkajšej membrány, ktoré spôsobujú inváziu) a chromozomálne gény Shigella: ksr A (spôsobuje keratokonjunktivitídu), cyt (zodpovedný za deštrukciu buniek), ako aj ďalšie gény, ktoré ešte neboli identifikované. Ochranu Shigella pred fagocytózou zabezpečuje povrchový K-antigén, antigény 3, 4 a lipopolysacharid. Shigella endotoxín lipid A má navyše imunosupresívny účinok – potláča aktivitu imunitných pamäťových buniek.

Tretia skupina faktorov patogenity zahŕňa endotoxín a dva typy exotoxínov vyskytujúcich sa v Shigelle – Shiga exotoxíny a Shiga-like exotoxíny (SLT-I a SLT-II), ktorých cytotoxické vlastnosti sú najvýraznejšie v S.dysenteriae 1. Shiga- a Shiga podobné toxíny nachádzajúce sa aj v iných sérotypoch S.dysenteriae, tiež sa tvoria S.flexneri, S.sonnei, S.boydii, ETEC a niektoré salmonely. Syntéza týchto toxínov je riadená toxovými génmi konvertujúcich fágov. Enterotoxíny typu LT sa našli u Flexnera, Sonneho a Boyda Shigella. Syntéza LT v nich je riadená plazmidovými génmi. Enterotoxín stimuluje aktivitu adenylátcyklázy a je zodpovedný za rozvoj hnačky. Shiga toxín alebo neurotoxín nereaguje s adenylátcyklázovým systémom, ale má priamy cytotoxický účinok. Shiga a Shiga podobné toxíny (SLT-I a SLT-II) majú m.m. -70 kD a pozostávajú z podjednotiek A a B (posledná z 5 rovnakých malých podjednotiek). Receptorom pre toxíny je glykolipid bunkovej membrány.

Virulencia Shigella Sonne závisí aj od plazmidu s m.m. 120 MD. Riadi syntézu asi 40 vonkajších membránových polypeptidov, z ktorých sedem je spojených s virulenciou. Shigella Sonne s týmto plazmidom tvoria kolónie fázy I a sú virulentné. Kultúry, ktoré stratili plazmid, tvoria kolónie fázy II a nemajú virulenciu. Plazmidy s m.m. 120-140 MD sa našli u Flexnera a Boyda Shigella. Lipopolysacharid Shigella je silný endotoxín.

Charakteristiky epidemiológie. Jediným zdrojom nákazy sú ľudia. Žiadne zviera v prírode netrpí úplavicou. V experimentálnych podmienkach sa dyzentéria môže reprodukovať iba u opíc. Spôsob infekcie je fekálno-orálny. Spôsoby prenosu - voda (prevláda u Shigella Flexner), potrava, obzvlášť dôležitú úlohu zohráva mlieko a mliečne výrobky (prevládajúca cesta infekcie u Shigella Sonne), a kontaktná domácnosť, najmä u druhu S. dysenteriae.

Charakteristickým znakom epidemiológie dyzentérie je zmena v druhovom zložení patogénov, ako aj biotypov Sonne a sérotypov Flexner v určitých regiónoch. Napríklad, až do konca 30. rokov XX storočia, podiel S.dysenteriae 1 tvoril až 30-40% všetkých prípadov dyzentérie a potom sa tento sérotyp začal vyskytovať čoraz menej a takmer vymizol. Avšak v 60. a 80. rokoch 20. storočia S.dysenteriae sa znovu objavila na historickej scéne a spôsobila sériu epidémií, ktoré viedli k vytvoreniu troch jej hyperendemických ohnísk - v Strednej Amerike, Strednej Afrike a Južnej Ázii (India, Pakistan, Bangladéš a ďalšie krajiny). Príčiny zmeny v druhovom zložení patogénov dyzentérie sú pravdepodobne spojené so zmenou stádová imunita a so zmenou vlastností baktérií dyzentérie. Najmä návratnosť S.dysenteriae 1 a jeho široká distribúcia, ktorá spôsobila tvorbu hyperendemických ložísk dyzentérie, je spojená s jej získavaním plazmidov, čo spôsobilo multirezistenciu a zvýšenú virulenciu.

Charakteristiky patogenézy a kliniky. Inkubačná doba dyzentérie je 2-5 dní, niekedy menej ako jeden deň. Tvorenie infekčné zameranie v sliznici zostupnej časti hrubého čreva (esovina a konečník), kam preniká pôvodca dyzentérie, je cyklický: adhézia, kolonizácia, zavedenie shigelly do cytoplazmy enterocytov, ich intracelulárna reprodukcia, deštrukcia a odmietnutie epitelových buniek, uvoľňovanie patogénov do črevného lúmenu; potom začína ďalší cyklus - adhézia, kolonizácia atď. Intenzita cyklov závisí od koncentrácie patogénov v parietálnej vrstve sliznice. V dôsledku opakovaných cyklov zápalové zameranie rastie, výsledné vredy, spájajúce, zvyšujú expozíciu črevnej steny, v dôsledku čoho sa v stolici objavuje krv, mukopurulentné hrudky, polymorfonukleárne leukocyty. Cytotoxíny (SLT-I a SLT-II) spôsobujú deštrukciu buniek, enterotoxín - hnačka, endotoxíny - celková intoxikácia. Klinika dyzentérie je do značnej miery daná tým, aký typ exotoxínov patogén vo väčšej miere produkuje, mierou jeho alergénneho účinku a imunitný stav organizmu. Mnohé otázky patogenézy dyzentérie však zostávajú nevysvetlené, najmä: znaky priebehu dyzentérie u detí prvých dvoch rokov života, dôvody prechodu akútnej dyzentérie na chronickú, význam senzibilizácie, mechanizmus lokálnej imunity črevnej sliznice a pod klinické prejavyúplavica slúži ako hnačka, časté nutkania- v závažných prípadoch až 50 a viackrát denne tenesmy (bolestivé kŕče konečníka) a celková intoxikácia. Charakter stolice je určený stupňom poškodenia hrubého čreva. Najťažšia dyzentéria je spôsobená S.dysenteriae 1, najľahšie - Sonneho úplavica.

Postinfekčná imunita. Ako ukázali pozorovania na opiciach, po prekonaní úplavice zostáva silná a pomerne dlhodobá imunita. Spôsobujú ho antimikrobiálne protilátky, antitoxíny, zvýšená aktivita makrofágov a T-lymfocytov. Hrá významnú úlohu lokálna imunitačrevnú sliznicu sprostredkovanú IgAs. Imunita je však typovo špecifická, silná skrížená imunita sa nevyskytuje.

Laboratórna diagnostika . Hlavná metóda je bakteriologická. Materiálom na štúdium sú výkaly. Schéma izolácie patogénu: očkovanie na diferenciálne diagnostické médiá Endo a Ploskirev (paralelne na obohacovacie médium, po ktorom nasleduje očkovanie na médiá Endo a Ploskirev) na izoláciu izolovaných kolónií, získanie čistá kultúraŠtúdium jeho biochemických vlastností a s prihliadnutím na tieto vlastnosti identifikácia pomocou polyvalentných a monovalentných diagnostických aglutinačných sér. Vyrábajú sa tieto komerčné séra:

1. Shigella, ktoré nefermentujú manitol: do S.dysenteriae 1 až 2 S.dysenteriae 3-7(polyvalentný a monovalentný), do S.dysenteriae 8-12(polyvalentné a monovalentné).

2. Na shigella fermentujúci manitol:

na typické antigény S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

na zoskupenie antigénov S.flexneri 3, 4, 6,7,8- polyvalentný,

na antigény S.boydii 1-18(polyvalentné a monovalentné),

na antigény S. sonnei I fáza, II fáza,

na antigény S.flexneri I-VI+ S.sonnei- polyvalentný.

Na detekciu antigénov v krvi (aj ako súčasť CEC) možno použiť moč a výkaly nasledujúce metódy: RPHA, RSK, koagulačná reakcia (v moči a stolici), IFM, RPHA (v krvnom sére). Tieto metódy sú vysoko účinné, špecifické a vhodné na včasnú diagnostiku.

Na sérologickú diagnostiku možno použiť: RPHA s príslušnými diagnostika erytrocytov, imunofluorescenčná metóda (v nepriamej modifikácii), Coombsova metóda (stanovenie titra neúplných protilátok). Diagnostická hodnota má tiež alergický test na úplavicu (roztok proteínových frakcií Shigella Flexner a Sonne). Reakcia sa berie do úvahy po 24 hodinách.Považuje sa za pozitívnu v prítomnosti hyperémie a infiltrácie s priemerom 10-20 mm.

Liečba. Dôraz je kladený na obnovenie normálneho stavu metabolizmus voda-soľ, racionálna výživa, detoxikácia, racionálna antibiotická terapia (berúc do úvahy citlivosť patogénu na antibiotiká). dobrý efekt poskytuje skoré použitie polyvalentného dysenterického bakteriofága, najmä tabliet s pektínovým povlakom, ktorý chráni fág pred pôsobením žalúdočnej HCl; V tenké črevo pektín sa rozpúšťa, fágy sa uvoľňujú a prejavujú svoju činnosť. Na profylaktické účely by sa mal fág podávať aspoň raz za tri dni (obdobie jeho prežívania v čreve).

Problém špecifickej prevencie. Na tvorenie umelá imunita proti dyzentérii sa používali rôzne vakcíny: z usmrtených baktérií, chemikálie, alkohol, ale všetky sa ukázali ako neúčinné a boli prerušené. Vakcíny proti Flexnerovej úplavici boli vytvorené zo živej (mutantnej, na streptomycíne závislej) Shigelly Flexnerovej; ribozomálne vakcíny, ale tiež nenašli široké uplatnenie. Preto problém špecifickej prevencie dyzentérie zostáva nevyriešený. Hlavným spôsobom boja proti úplavici je zlepšenie vodovodného a kanalizačného systému, zabezpečenie prísnych hygienických a hygienických režimov v potravinárskych podnikoch, najmä v mliekarenskom priemysle, v zariadeniach starostlivosti o deti, na verejných miestach a pri osobnej hygiene.

Mikrobiológia cholery

WHO definuje choleru ako ochorenie charakterizované akútnou, závažnou, dehydratujúcou hnačkou z ryžovej vody, ktorá je výsledkom infekcie Vibrio cholerae. Vzhľadom na to, že sa vyznačuje výraznou schopnosťou širokého epidémie, ťažký priebeh a vysoká úmrtnosť, cholera je jednou z najnebezpečnejších infekcií.

Historickou vlasťou cholery je India, presnejšie delta riek Ganga a Brahmaputra (dnes Východná India a Bangladéš), kde sa vyskytuje od nepamäti (epidémie cholery v tejto oblasti sú pozorované od r. 500 rokov pred naším letopočtom). Dlhú existenciu endemického ohniska cholery tu vysvetľuje mnoho dôvodov. Vibrio cholerae môže nielen dlho zotrvávať vo vode, ale sa v nej aj množiť za priaznivých podmienok – teploty nad +12°C, prítomnosť organických látok. Všetky tieto podmienky sú prítomné v Indii - tropické podnebie (priemerná ročná teplota od +25 do +29 °С), množstvo zrážok a močiare, vysoká hustota obyvateľstvo, najmä v delte Gangy, veľké množstvo organické látky vo vode, nepretržité celoročné znečistenie vody odpadových vôd a fekálie, nízka materiálna životná úroveň a svojrázne náboženské a náboženské obrady obyvateľstva.

Pôvodca cholery Vibrio cholerae bola otvorená v roku 1883. počas piatej pandémie R. Kocha však bolo vibrio vo výkaloch pacientov s hnačkou po prvýkrát objavené už v roku 1854. F. Patsini.

V. cholerae patrí do rodiny vibrionaceae, ktorý zahŕňa niekoľko rodov (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium). Rod Vibrio od roku 1985 viac ako 25 druhov, z toho najvyššia hodnota pre človeka má V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus, dnificus A V.fluvialis.

Kľúčové vlastnosti rodu Vibrio : krátke, netvoriace spóry a tobolky, zakrivené alebo rovné gramnegatívne tyčinky, s priemerom 0,5 µm, 1,5-3,0 µm dlhé, pohyblivé ( V. cholerae- monotrichný, u niektorých druhov dva alebo viac polárnych bičíkov); rastú dobre a rýchlo na bežných médiách, chemoorganotrofy, fermentujú sacharidy za tvorby kyseliny bez plynu (glukóza je fermentovaná pozdĺž Embden-Meyerhofovej dráhy). Pozitívna oxidáza, tvorí indol, redukuje dusičnany na dusitany (V.cholerae dáva pozitívnu nitrózoindolovú reakciu), rozkladá želatínu, často dáva pozitívnu Voges-Proskauerovu reakciu (t.j. tvorí acetylmetylkarbinol), nemá ureázy, netvorí H S. má lyzín a ornitín dekarboxylázy, ale nemá arginín dihydrolázy.

Vibrio cholerae je veľmi nenáročný na živné médiá. Dobre a rýchlo sa množí na 1% alkalickej (pH 8,6-9,0) peptónovej vode (PV) s obsahom 0,5-1,0% NaCl, čím predbieha rast iných baktérií. Na potlačenie rastu Proteusu sa odporúča pridať telurit draselný 4 až 1 % (PV) (konečné riedenie 1:100 000). 1 % PV je najlepšie obohacovacie médium pre V. cholerae. Počas rastu po 6-8 hodinách vytvára na povrchu HP jemný voľný sivastý film, ktorý sa pri zatrasení ľahko zničí a padá na dno vo forme vločiek, HP sa stredne zakalí. Na izoláciu Vibrio cholerae boli navrhnuté rôzne selektívne médiá: alkalický agar, agar so žĺtkovou soľou, alkalický albuminát, alkalický agar s krvou, laktóza-sacharóza a iné médiá. Najlepšie médium je TCBS (tiosulfát citrát-brómthymol sacharózový agar) a jeho modifikácie. Najčastejšie sa však používa alkalická MPA, na ktorej Vibrio cholerae vytvára hladké, sklovité priehľadné s modrastým nádychom, diskovité kolónie viskóznej konzistencie.

Pri výseve injekciou do stĺpca želatíny po 2 dňoch pri 22-23 °C vibrio spôsobí skvapalnenie z povrchu vo forme bubliny, potom lievikovitého a nakoniec po vrstvách.

V mlieku sa vibrio rýchlo množí, po 24-48 hodinách spôsobí zrážanie a následne peptonizácia mlieka a po 3-4 dňoch vibrio odumiera v dôsledku posunu pH mlieka na kyslú stranu.

B. Heiberg podľa schopnosti fermentovať manózu, sacharózu a arabinózu rozdelil všetky vibriá (choleru a choleru podobné) do množstva skupín, ktorých počet je dnes 8. Vibrio cholerae patrí do prvej skupiny Heibergovej.

Vibriá, podobné morfologickými, kultúrnymi a biochemickými charakteristikami ako cholera, sa nazývali a nazývajú rôzne: paracholera, cholere podobné, NAG vibriá (neaglutinačné vibriá); vibriá, ktoré nepatria do skupiny 01. Posledné meno najpresnejšie zdôrazňuje ich vzťah k cholere vibrio. Ako zistili A. Gardner a K. Venkatraman, cholera a vibriá podobné cholere majú spoločný H-antigén, ale líšia sa O-antigénmi. Podľa O-antigénu sa cholera a vibriá podobné cholere v súčasnosti delia na 139 O-séroskupín, ale ich počet sa neustále dopĺňa. Vibrio cholerae patrí do skupiny 01. Má spoločný A-antigén a dva typovo špecifické antigény - B a C, podľa ktorých sa rozlišujú tri sérotypy V. cholerae- sérotyp Ogawa (AB), sérotyp Inaba (AC) a sérotyp Gikoshima (ABC). Vibrio cholerae v štádiu disociácie má antigén OR. Z tohto dôvodu s cieľom identifikovať V. cholerae Používajú sa O-sérum, OR-sérum a typovo špecifické séra Inaba a Ogawa.

faktory patogénnosti V. cholerae :

1. Mobilita.

2. Chemotaxia. Pomocou týchto vlastností vibrio prekonáva slizničnú vrstvu a interaguje s epiteliálnymi bunkami. U mutantov Che (po strate schopnosti chemotaxie) virulencia prudko klesá. Virulencia u mutantov Mot (ktoré stratili pohyblivosť) buď úplne zmizne, alebo sa zníži 100-1000-krát.

3. Faktory adhézie a kolonizácie, pomocou ktorých vibrio priľne k mikroklkom a kolonizuje sliznicu tenkého čreva.

4. Enzýmy: mucináza, proteázy, neuraminidáza, lecitináza atď.

Podporujú priľnavosť a kolonizáciu, pretože ničia látky, ktoré tvoria hlien. Neuraminidáza, odštiepujúca kyselinu sialovú z epitelových glykoproteínov, vytvára „pristávaciu“ platformu pre vibriá. Okrem toho zvyšuje počet cholerogénových receptorov modifikáciou tri- a disialogangliozidov na monosialogangliozid Gm b, ktorý slúži ako cholerogénový receptor.

5. Hlavný faktor patogenity V. cholerae je exotoxín-cholerogén, ktorý určuje patogenézu cholery. Molekula cholerogénu má m.m. 84 kD a pozostáva z dvoch fragmentov - A a B. Fragment A pozostáva z dvoch peptidov - A1 a A2 - a má špecifickú vlastnosť toxínu cholery. Fragment B pozostáva z 5 rovnakých podjednotiek a plní dve funkcie: 1) rozpoznáva receptor (monosialogangliozid) enterocytu a viaže sa naň;

2) tvorí intramembránový hydrofóbny kanál na prechod podjednotky A. Peptid A2Sl slúži na spojenie fragmentov A a B. Peptid At vykonáva svoju vlastnú toxickú funkciu. Interaguje s NAD, spôsobuje jeho hydrolýzu, výsledná ADP-ribóza sa viaže na regulačnú podjednotku adenylátcyklázy. To vedie k inhibícii hydrolýzy GTP. Výsledný komplex GTP + adenylátcykláza spôsobuje hydrolýzu ATP s tvorbou cAMP. (Ďalším spôsobom akumulácie cAMP je supresia enzýmu, ktorý hydrolyzuje cAMP na 5-AMP, cholerogénom).

6. Okrem cholerogénu Vibrio cholerae syntetizuje a vylučuje faktor, ktorý zvyšuje priepustnosť kapilár.

7. Vo V. cholerae sa našli aj iné exotoxíny, najmä typy LT, ST a SLT.

8. Endotoxín. Lipopolysacharid V. cholerae má silné endotoxické vlastnosti. Je zodpovedný za všeobecnú intoxikáciu tela a zvracanie. Protilátky vytvorené proti endotoxínu majú výrazný vibriocídny účinok (rozpúšťajú vibriá v prítomnosti komplementu) a sú dôležitou zložkou poinfekčnej a postvakcinačnej imunity.

Schopnosť vibriónov nepatriacich do skupiny 01 spôsobovať sporadické alebo skupinové hnačkové ochorenia u ľudí je spojená s prítomnosťou enterotoxínov typu LT alebo ST, ktoré stimulujú buď adenylát- alebo guanylátcyklázové systémy, resp.

Syntéza cholerogénu - najdôležitejšia vlastnosť V. cholerae. Gény, ktoré riadia syntézu A- a B-fragmentov cholerogénu, sú spojené do operónu vctAB alebo ctxB, nachádzajú sa na vibrio chromozóme. Niektoré kmene Vibrio cholerae majú dva takéto netandemové operóny. Funkciu operónu riadia dva regulačné gény. Gén toxR poskytuje pozitívnu kontrolu; mutácie v tomto géne vedú k 1000-násobnému zníženiu produkcie toxínov. Gén htx je negatívna kontrola, mutácie v tomto géne zvyšujú produkciu toxínov 3-7 krát.

Na detekciu cholerogénu možno použiť nasledujúce metódy:

1. Biologické testy na králikoch. Pri intraintestinálnom podaní cholera vibrios dojčiacim králikom (vo veku nie viac ako 2 týždne) sa u nich rozvinie typický cholerogénny syndróm: hnačka, dehydratácia a smrť králika. Pri pitve - ostrá injekcia ciev žalúdka a tenké
črevá, niekedy sa v ňom hromadí číra tekutina. Charakteristické sú ale najmä zmeny v hrubom čreve – je zväčšené a plné úplne priehľadnej, slamovo sfarbenej tekutiny s vločkami a bublinkami plynu. Keď sa V. cholerae vstrekne do podviazanej oblasti tenkého čreva u dospelých králikov, zaznamenajú sa rovnaké zmeny v hrubom čreve ako v prípade infekcie dojčiacich králikov.

2. Priama detekcia cholerogénu imunofluorescenčnými alebo enzýmovými imunoanalytickými metódami alebo pasívnou imunitnou hemolytickou reakciou (cholerogén sa viaže na Gm1 erytrocytov a po pridaní antitoxických protilátok a komplementu dochádza k ich lýze).

3. Stimulácia bunkovej adenylátcyklázy v bunkových kultúrach.

4. Použitie fragmentu chromozómu ako DNA sondy V. cholerae, nosný operoncholerogén.

Počas siedmej pandémie boli kmene izolované V. cholerae s rôzneho stupňa virulencia: cholerogénna (virulentná), mierne cholerogénna (nízka virulencia) a necholegénna (nevirulentná). Necholerogénny V. cholerae, spravidla majú hemolytickú aktivitu, nie sú lyzované cholerovým diagnostickým fágom 5 (HDF-5) a nespôsobujú ľudské ochorenia.

Na fágovú typizáciu V. cholerae(počítajúc do toho V.eltor) S. Mukherjee navrhol zodpovedajúce sady fágov, ktoré boli potom v Rusku doplnené ďalšími fágmi. Súbor takýchto fágov (1-7) umožňuje rozlíšiť medzi V. cholerae 16 typov fágov. HDF-3 selektívne lyzuje Vibrio cholerae klasický typ, HDF-4 - El Tor vibriá a HDF-5 lyzuje iba cholerogénne (virulentné) vibriá oboch typov a nelýzuje necholegénne vibriá.

Vibrio cholerogény spravidla nemajú hemolytickú aktivitu, sú lyzované HDF-5 a spôsobujú choleru u ľudí.

odolnosť voči patogénom cholery. Vibrio cholerae dobre prežívajú pri nízkych teplotách: zostávajú životaschopné v ľade až 1 mesiac; v morskej vode - do 47 dní, v riečnej vode - od 3-5 dní do niekoľkých týždňov, vo varenej minerálka pretrvávajú viac ako 1 rok, v pôde - od 8 dní do 3 mesiacov, v čerstvých výkaloch - do 3 dní, na varených potravinách (ryža, rezance, mäso, cereálie atď.) prežijú 2-5 dní, na surovom zelenina - 2- 4 dni, na ovocí - 1-2 dni, v mlieku a mliečnych výrobkoch - 5 dní; pri skladovaní v chlade sa doba prežitia zvyšuje o 1-3 dni: na bielizni kontaminovanej výkalmi vydržia až 2 dni a na mokrom materiáli - týždeň. Vibrio cholerae pri 80 ° C zomrie po 5 minútach, pri 100 ° C - okamžite; vysoko citlivý na kyseliny; pod vplyvom chloramínu a iných dezinfekčných prostriedkov zomrieť za 5-15 minút. Sú citlivé na vysychanie a priame pôsobenie. slnečné lúče, ale sú dobre a dlho konzervované a dokonca sa množia v otvorených nádržiach a odpadových vodách bohatých na organické látky, ktoré majú alkalické pH a teplotu nad 10-12 ° C. Vysoko citlivý na chlór: dávka aktívneho chlóru 0,3-0,4 mg/l vody za 30 minút spôsobí spoľahlivú dezinfekciu od cholery vibrio.

Charakteristiky epidemiológie. Hlavným zdrojom nákazy je len človek – chorý na choleru alebo nosič vibria, ako aj nimi kontaminovaná voda. Žiadne zviera v prírode neochorie na choleru. Spôsob infekcie je fekálno-orálny. Spôsoby infekcie: a) hlavné - prostredníctvom vody používanej na pitie, kúpanie a domáce potreby; b) kontakt-domácnosť ac) prostredníctvom potravín. Všetky veľké epidémie a pandémie cholery mali vodný charakter. Vibrio cholerae majú také adaptačné mechanizmy, ktoré zabezpečujú existenciu ich populácií v ľudskom tele aj v určitých ekosystémoch otvorených vodných plôch. Silná hnačka spôsobená Vibrio cholerae vedie k prečisteniu čriev od konkurenčných baktérií a prispieva k širokému šíreniu patogénu v prostredí, predovšetkým v odpadových vodách a vo voľnej vode, kam sa ukladajú. Osoba s cholerou vylučuje patogén do obrovské číslo- od 100 miliónov do 1 miliardy na 1 ml výkalov, vibrionosič uvoľní 100-100 000 vibrácií na 1 ml, infekčná dávka je asi 1 milión vibrácií. Trvanie izolácie vibrio cholerae u zdravých nosičov je od 7 do 42 dní a 7-10 dní u chorých. Dlhšie uvoľnenie je extrémne zriedkavé.

Charakteristickým znakom cholery je, že po nej spravidla nedochádza k dlhodobému prenosu a nevytvárajú sa pretrvávajúce endemické ohniská. Avšak, ako už bolo uvedené vyššie, v dôsledku znečistenia otvorených vodných útvarov odpadovými vodami obsahujúcimi veľké množstvo organickej hmoty, čistiace prostriedky a stolová soľ, v lete v nich cholera vibrio nielen dlho prežíva, ale dokonca sa rozmnožuje.

Veľký epidemiologický význam má skutočnosť, že vibrio cholerae skupiny 01, netoxické aj toxigénne, môžu dlhodobo pretrvávať v rôznych vodné ekosystémy v podobe nepestovaných foriem. Pomocou polymerázovej reťazovej reakcie s negatívnymi bakteriologickými štúdiami na mnohých endemických územiach SNŠ v rôznych vodných útvaroch sa našli veterinárne gény nekultivovaných foriem. V. cholerae.

Pri cholerových ochoreniach sa vykonáva komplex protiepidemických opatrení, z ktorých vedúca a rozhodujúca je aktívna včasné odhalenie a izolácia (hospitalizácia, liečba) pacientov v akútnych a atypická forma a zdravé nosiče vibrácií; prijímajú sa opatrenia na zabránenie možným spôsobom šírenia infekcie; osobitná pozornosť sa venuje zásobovaniu vodou (chlórovanie pitná voda), dodržiavanie sanitárneho a hygienického režimu v potravinárskych podnikoch, v detských zariadeniach, na verejných miestach; nad otvorenými vodnými plochami sa vykonáva prísna kontrola vrátane bakteriologickej kontroly, vykonáva sa imunizácia obyvateľstva atď.

Charakteristiky patogenézy a kliniky. Inkubačná doba cholery sa pohybuje od bezšmykových hodín do 6 dní, najčastejšie 2-3 dni. Keď sa Vibrio cholerae dostane do lúmenu tenkého čreva, vďaka pohyblivosti a chemotaxii na sliznicu sa dostane do hlienu. Na preniknutie do neho vytvárajú vibriá množstvo enzýmov: neuraminidázu, mucinázu, proteázy, lecitinázu, niektoré ničia látky obsiahnuté v hliene a uľahčujú pohyb vibriónov k bunkám epitelu. Adhéziou sa vibriá prichytia ku glykokalyxe epitelu a stratia pohyblivosť, začnú sa intenzívne množiť, kolonizujú mikroklky tenkého čreva a zároveň produkujú veľké množstvo exotoxínu-cholerogénu. Molekuly cholerogénu sa viažu na monosialogangliozid Gm1 a prenikajú cez bunkovú membránu, aktivujú systém adenylátcyklázy a hromadiaci sa cAMP spôsobuje hypersekréciu tekutiny, katiónov a aniónov Na +, HCO 3 ~, K +, SG z enterocytov, čo vedie k cholerovej hnačke, dehydratácia a odsoľovanie organizmu. Existujú tri typy priebehu ochorenia:

1. prudké, ťažké dehydratačné hnačkové ochorenie, ktoré vedie k smrti pacienta v priebehu niekoľkých hodín;

2. menej závažné alebo hnačka bez dehydratácie;

3. asymptomatický priebeh ochorenia (vibrionosič).

Pri ťažkej cholere sa u pacientov objaví hnačka, stolica je častejšia, stolica je čoraz hojnejšia, nadobúda vodnatý charakter, stráca fekálny zápach a vyzerá ako ryžová voda (zakalená tekutina, v ktorej plávajú zvyšky hlienu a bunky epitelu). Potom sa pripojí vysiľujúce zvracanie, najskôr s obsahom čreva a následne zvratky majú podobu ryžovej vody. Teplota pacienta klesne pod normu, koža sa stáva cyanotickou, vráskavá a studená - cholera algid. V dôsledku dehydratácie dochádza k zahusteniu krvi, vzniku cyanózy, hladovanie kyslíkom, funkcia obličiek prudko trpí, objavujú sa kŕče, pacient stráca vedomie a nastáva smrť. Úmrtnosť na choleru počas siedmej pandémie sa pohybovala od 1,5 % v rozvinutých krajinách do 50 % v rozvojových krajinách.

Postinfekčná imunita trvalé, dlhodobé, opakované ochorenia sú zriedkavé. Imunita je antitoxická a antimikrobiálna vďaka protilátkam (antitoxíny pretrvávajú dlhšie ako antimikrobiálne protilátky), bunkám imunitnej pamäte a fagocytom.

Laboratórna diagnostika. Hlavné a rozhodujúca metóda Diagnóza cholery je bakteriologická. Materiálom na výskum od pacienta sú výkaly a zvratky; výkaly sa vyšetrujú na vibrionosnosť; u osôb, ktoré zomreli na choleru, sa na výskum odoberie podviazaný segment tenkého čreva a žlčníka; Z objektov vonkajšieho prostredia sa najčastejšie skúmajú vody z otvorených nádrží a odpadové vody.

Pri vykonávaní bakteriologickej štúdie sa musia dodržiavať tieto tri podmienky:

1) čo najskôr naočkovať materiál od pacienta (cholera vibrio pretrváva vo výkaloch krátkodobý);

2) riad, v ktorom sa materiál odoberá, by sa nemal dezinfikovať chemikáliami a nemal by obsahovať ich stopy, pretože Vibrio cholerae je na ne veľmi citlivý;

3) eliminovať možnosť kontaminácie a infekcie iných.

V prípadoch, keď existujú V. cholerae nie 01-skupiny, musia byť typizované pomocou vhodných aglutinačných sér z iných séroskupín. Prepustenie od pacienta s hnačkou (vrátane podobnej cholere) V. cholerae non-01-group vyžaduje rovnaké protiepidemické opatrenia ako v prípade izolácie V. cholerae 01-skupiny. V prípade potreby sa jednou z metód zisťuje schopnosť syntetizovať cholerogén alebo prítomnosť cholerogénnych génov v izolovaných vibrio cholerae pomocou DNA sondy.

Sérologická diagnostika cholery má pomocný charakter. Na tento účel sa dá použiť aglutinačná reakcia, lepšie je však stanoviť titer vibriocídnych protilátok alebo antitoxínov (protilátky proti cholerogu sa stanovujú enzýmovou imunoanalýzou alebo imunofluorescenčnými metódami).

Liečba pacientov s cholerou by mala spočívať predovšetkým v rehydratácii a obnovení normálneho metabolizmu voda-soľ. Na tento účel sa odporúča použiť soľné roztoky, napríklad s nasledujúcim zložením: NaCl - 3,5; NaHC03 - 2,5; KS1 - 1,5 a glukóza - 20,0 g na 1 liter vody. Takáto patogeneticky podložená liečba v kombinácii s racionálnou antibiotickou terapiou môže znížiť mortalitu na choleru na 1 % alebo menej.

špecifická profylaxia. Na vytvorenie umelej imunity boli navrhnuté rôzne vakcíny, vrátane vakcín z usmrtených kmeňov Inaba a Ogawa; cholerogénny toxoid na subkutánne použitie a enterálna chemická bivalentná vakcína, sos

LABORATÓRNA DIAGNOSTIKA DYZENTÉRIE, AMEBIÁZY A BALANTYDIÁZY

V moderných podmienkach, v niektorých prípadoch alebo pri malých ohniskových ohniskách črevných ochorení, ktoré sa často vyskytujú s nejasnými príznakmi, majú laboratórne metódy výskumu veľký praktický význam.

Výskum vykonávaný na diagnostické účely by sa mal vykonávať s prísnym dodržiavaním stanovených odporúčaní a čo najskôr.

Zbierka stolica na výskum sa vkladajú do čistého riadu (nočné vázy, podložné misy), ktorý neobsahuje zvyšky dezinfekčných prostriedkov, materiál na výskum sa odoberá zo sliznice konečníka tampónmi pri sigmoidoskopii.

Na bakteriologické potvrdenie diagnózy je lepšie odobrať výkaly od pacientov s úplavicou pred liečbou antibiotikami a sulfónamidmi a určiť bakterionosiča - po liečbe týmito liekmi.

Výsev na Petriho misky je potrebné vykonať ihneď po odbere materiálu.

V prvom rade sa robí makroskopické vyšetrenie výkalov, pričom dokážu odhaliť: zvyšky potravín - kúsky mäsa, zvyšky tuku, rastlinná potrava a patologické nečistoty - hlien viskóznej konzistencie vo forme hrudiek (nepriehľadný pri úplavici a transparentný pri amébióze); krv nezmenená pri úplavici a ulcerózna lézia spodná časť hrubého čreva inej etiológie a zmenená farba („malinové želé“) s amébiózou, balantidiázou; hnis sa zistí pri ťažkých protrahovaných formách dyzentérie.

Mikroskopické vyšetrenie výkalov sa používa na detekciu bunkových elementov krvi, améb, balantidií a ich cýst. Natívny prípravok sa pripraví nasledovne: na podložné sklíčko sa nanesie hrudka stolice a vedľa nej kvapka izotonického roztoku chloridu sodného, premieša sa a prikryje sa krycím sklíčkom. Na farbenie prvokov sa používa Lugolov roztok.

Na rozlíšenie bunkových prvkov krvi sa prípravky ošetria lazúrou Romanovsky-Giemsa alebo azúrovým eozínom. Pri dyzentérii obsahuje prípravok pripravený z hlienu veľa neutrofilných granulocytov (viac ako 90 % všetkých bunkových elementov), jednotlivé eozinofilné granulocyty (eozinofily) a rôzne množstvo erytrocyty; s amebiázou je málo bunkových elementov, ich hlavnou hmotou sú zmenené bunky s pyknotickým jadrom a úzkym okrajom protoplazmy. Nájdite eozinofilné granulocyty a Charcot-Leidenove kryštály.

Tkanivové formy améby (Entamoeba histolytica) v nefarbenom preparáte sú bezfarebné, pohyblivé (pomocou pseudopódií), dosahujú 50-60 mikrónov v predĺženom stave, často sa nachádzajú v endoplazme s erytrocytmi a na periférii - tzv. jadro. Prítomnosť erytrocytov v bunke umožňuje odlíšiť Entamoeba histolutica od nepatogénnych foriem (E. hartmani, E. coli.).

Priesvitná forma améby je menšia (do 20 mikrónov), neaktívna a neobsahuje erytrocyty. Ešte menšie cysty (10-12 mikrónov), okrúhly tvar, nehybný; v raných štádiách vývoja obsahujú 2 jadrá a zrelé - 4. V prípravkoch farbených Lugolovým roztokom sú jadrá améb a ich cysty svetlohnedé (obr. 6).

Balantidia(Balantidium coli) - veľké nálevníky, niekedy dosahujúce dĺžku 200 mikrónov a 50-70 mikrónov v priemere, pohyblivé v dôsledku prítomnosti riasiniek, majú otvory v ústach (peristome) a konečníku (cytopygus). V endoplazme sú viditeľné veľké (makronukleá) a malé (mikronukleá) jadrá, vakuoly, zachytené erytrocyty. Cysty balantidií sú nepohyblivé, zaoblené, s priemerom 50–60 μm, majú dvojobrysovú membránu, vo vnútri obsahujú makronukleá a vakuoly (obr. 7).

Bakteriologické vyšetrenie výkalov pri bacilárnej dyzentérii je najlepšie vykonať krátko po defekácii, pričom je potrebné odobrať materiál (hlien a hnis) z posledných porcií výkalov. Skúšobný materiál sa naočkuje slučkou na Petriho misky s elektívnymi médiami (Ploskirev, Ploskirev + levomycetin, Levin) a umiestni sa do termostatu na 18-24 hodín pri teplote +37 ° C. Na druhý deň je podozrivý (bezfarebný) kolónie sa subkultivujú na Resselovom médiu a skúmavky sa umiestnia na jeden deň do termostatu pri teplote +370 C. Na tretí deň po získaní čistej kultúry sa pripravia nátery na mikroskopiu a štúdium pohyblivosti (shigelly sú nepohyblivé) . Aglutinačnú reakciu umiestnili na sklo s typovo špecifickými sérami, najprv so sérami proti typom prevládajúcim v danej oblasti, a potom rozmiestnili a naočkovali do „pestrofarebného“ radu, aby sa určilo biochemické vlastnosti vybranej kultúry.

Pôvodcovia dyzentérie nefermentujú laktózu a sacharózu (okrem Sonne), nerozkladajú glukózu (na kyselinu), netvoria sírovodík.

Konečná odpoveď v bakteriologickom vyšetrení je daná na 5. deň. Niekedy sa izolujú atypické kmene patogénu, kultúry, ktoré stratili aglutinovateľnosť a s inými znakmi. V takýchto prípadoch štúdie pokračujú dlhšie.

Existujú aj zrýchlené bakteriologické metódy - preočkovanie podozrivých kolónií z Petriho misiek po 18-20 hodinách od začiatku štúdie do 2 skúmaviek s Resselovým médiom (šikmý agar s 1% laktózy a 0,1% glukózy - v jednej a 1% sacharózy a 0,1 % manitol - v inom). Po 4 hodinách sa už môže objaviť rast kolónií, z ktorých sa pripravujú nátery, farbia sa podľa Grama, študuje sa pohyblivosť a nastavuje sa približná aglutinačná reakcia so sérami proti najbežnejším patogénom v danej oblasti. Takže už na druhý deň môžete dať predbežnú odpoveď. Konečná odpoveď je daná na tretí deň po zohľadnení výsledkov sejby na „pestrofarebnom“ riadku a podrobnej aglutinačnej reakcii.

Inokulácia patogénov dyzentérie nie je vždy rovnaká, závisí od mnohých faktorov - spôsobu odberu materiálu na výskum, kvality médií a iných dôvodov, z ktorých jedným je počet patogénov na jednotku objemu výkalov. Je dokázané, že pôvodcovia dyzentérie sa vysievajú v tých prípadoch, keď sú v jednom grame výkalov minimálne stovky miliónov mikrobiálnych teliesok. IN zriedkavé prípady z krvi je možné izolovať pôvodcu dyzentérie.

V prítomnosti luminiscenčného mikroskopu, špecifických sér s fluorochrómmi je študentom ukázaná metóda priamej fluorescencie protilátok.

Je tiež možné vyvolať aglutináciu s krvným sérom a diagnostickými liekmi pacienta, avšak titre protilátok u pacientov s dyzentériou sú nízke a navyše sa často vyskytujú javy paraaglutinácie, čo sťažuje získanie spoľahlivé výsledky. Citlivejšia je reakcia nepriamej hemaglutinácie (IHA) so štandardnými erytrocytovými diagnostikami. pomocná metóda výskum je intradermálny alergický test s úplavicou podľa D. A. Tsuverkalova, ktorý sa berie do úvahy po 24 hodinách podľa veľkosti vytvorenej papule.

Metodické pokyny pre žiakov na praktickú hodinu č.28.

Téma lekcie:

Cieľ: Štúdium metód mikrobiologickej diagnostiky, etiotropnej terapie a prevencie šigelózy.

Modul 2 . Špeciálna, klinická a ekologická mikrobiológia.

Téma 5: Metódy mikrobiologickej diagnostiky dyzentérie.

Relevantnosť témy:Šigelóza je všadeprítomná a predstavuje vážny problém v krajinách s nízkou sanitárnou kultúrnou úrovňou a vysokým výskytom podvýživy a zlej výživy. V rozvojových krajinách napomáha šíreniu infekcie zlá hygiena, zlá osobná hygiena, preľudnenosť a veľký podiel detí v populácii. Na Ukrajine sú ohniská šigelózy častejšie v uzavretých skupinách na pozadí nízky level sanitácia a hygiena napríklad v jasliach a škôlkach, na turistických lodiach, v psychiatrických ambulanciách či útulkoch pre zdravotne postihnutých. Shigella bola príčinou hnačky cestovateľov a turistov.

Za príčinu skupinových chorôb možno považovať používanie potravinových výrobkov kontaminovaných nedbalosťou pracovníkov obchodu, ktorí sú nosičmi šigelly. Vyskytujú sa ohniská spojené s používaním pitnej vody a k infekcii viedlo aj kúpanie v znečistených nádržiach. Zdá sa však, že potravné a vodné cesty prenosu zohrávajú menšiu úlohu pri šírení šigelózy v porovnaní s cholerou a brušným týfusom, ktoré si zvyčajne vyžadujú veľké dávky patogény. V rozvojových krajinách, kde sa choroba šíri prevažne z človeka na človeka, môžu byť nosiči dôležitým rezervoárom infekčného agens. U pacientov, ktorí neužívali antibakteriálne lieky, vylučovanie šigely stolicou zvyčajne trvá 14 týždňov, ale v malej časti prípadov trvá oveľa dlhšie.

Shigellóza je akútna bakteriálna infekcia čreva spôsobená jedným zo štyroch typov Shigella. Spektrum klinických foriem infekcie siaha od miernej vodnatej hnačky až po ťažkú dyzentériu charakterizovanú kŕčmi v bruchu, tenezmami, horúčkou a príznakmi celkovej intoxikácie.

Etiológia.

Rod Shigella (pomenovaný podľa K. Shiga, ktorý v roku 1898 podrobne študoval a opísal izolovaného pôvodcu bakteriálnej dyzentérie od A. V. Grigorieva) z čeľade Enterobacteriaceae pozostáva zo skupiny blízko príbuzných bakteriálnych druhov, ktoré majú nasledujúce vlastnosti:

ja Morfologické: shigella - malé tyčinky so zaoblenými koncami. Od ostatných zástupcov čeľade Enterobacteriaceae sa líšia absenciou bičíkov (nepohyblivé), nemajú spóry a tobolky a sú gramnegatívne.

II. Kultúrne: shigella sú aeróby alebo fakultatívne anaeróby; optimálne podmienky kultivácie teplota 37°C, pH 7,2-7,4. Rastú na jednoduchých živných pôdach (MPA, MPB) vo forme malých, lesklých, priesvitných, sivastých, okrúhlych kolónií o veľkosti 1,52 mm. S formulár. Výnimkou je Sonne's Shigella, ktorá sa často oddeľuje a vytvára veľké, ploché, zakalené kolónie so zubatými okrajmi. R formy (kolónie vyzerajú ako „hroznový list“). V tekutých živných médiách poskytuje Shigella jednotný zákal, R formy tvoria zrazeninu. Obohacovacím kvapalným médiom je seleničitanový bujón.

III. Enzymatické: hlavné biochemické znaky potrebné na identifikáciu šigel v izolácii čistej kultúry sú tieto:

nedostatok tvorby plynu počas fermentácie glukózy;
žiadna produkcia sírovodíka;
nedochádza k fermentácii laktózy do 48 hodín.

Celkovo sa tieto štyri druhy ďalej delia na približne 40 sérotypov. Podľa charakteristík hlavných somatických (O) antigénov a biochemických vlastností sa rozlišujú tieto štyri druhy alebo skupiny: S. dysenteriae (skupina A, zahŕňa: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri (skupina B), S. boydii (skupina C) a S. sonnei (skupina D).

Vo vzťahu k manitolu sa všetky shigelly delia na štiepiaci (Flexner, Boyd, Sonne shigella) a neštiepiaci sa (Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs shigella) manitol.

IV. Patogénne faktory:

Invázia plazmiduposkytuje schopnosť shigelly spôsobiť inváziu s následným medzibunkovým šírením a reprodukciou v epiteli sliznice hrubého čreva;
tvorba toxínov: Shigella majú lipopolysacharidový endotoxín, ktorý je chemicky a biochemicky podobný endotoxínom iných členov čeľade Enterobacteriaceae. Okrem toho S. dysenteriae typu I (Shigov bacil) produkuje exotoxín. Od objavu posledne menovaného sa zistilo, že má enterotoxínovú aktivitu a môže spôsobiť črevnú sekréciu, ako aj cytotoxický účinok proti bunkám črevného epitelu; vykresľuje neurotoxický účinok pozorované u detí so šigelózou. Shiga toxín, ktorý sa dostáva do krvi, spolu s poškodením submukózneho endotelu ovplyvňuje aj glomeruly obličiek, v dôsledku čoho sa okrem krvavej hnačky rozvinie hemolyticko-uremický syndróm s rozvojom zlyhania obličiek.

V. Antigénna štruktúra:Všetky Shigelly majú somatický O-antigén, v závislosti od štruktúry ktorého sa delia na sérovary.

VI. Odolnosť: Teplota 100 0 C okamžite zabije shigellu. Shigella sú odolné voči nízkym teplotám v riečna voda skladujú sa do 3 mesiacov, na zelenine a ovocí - do 15 mesiacov.Za priaznivých podmienok sú shigelly schopné rozmnožovania v potravinárskych výrobkoch (šaláty, vinaigretty, varené mäso, mleté mäso, varené ryby, mlieko a mliečne výrobky, kompóty a želé), najmä sonne shigella.

Epidemiológia.

1. Zdroj infekcie:Osoba trpiaca akútnou a chronickou formou šigelózy; bakterionosič.

2. Spôsoby prenosu:

Jedlo (hlavne pre S. sonnei)
Vodné (hlavne pre S. flexneri)
Kontaktná domácnosť (hlavne pre S. dysenteriae)

3. Vstupná bránainfekcia slúži gastrointestinálny trakt.

Patogenéza a patologické zmeny.

Po požití Shigella kolonizuje horné divízie tenké črevo a tam sa množia, čo môže spôsobiť zvýšenú sekréciu na skoré štádium infekcií. Shigella potom prenikajú cez M bunky do submukózy, kde sú pohltené makrofágmi. To vedie k odumretiu časti šigel, čo vedie k uvoľneniu zápalových mediátorov, ktoré iniciujú zápal v submukóze. Apoptóza fagocytov umožňuje ďalšej časti Shigella prežiť a preniknúť do epitelových buniek sliznice cez bazálnej membrány. Vo vnútri enterocytov sa shigella rozmnožuje a medzibunkovo sa šíri, čo vedie k rozvoju erózie. Keď shigella zomrie, uvoľňujú sa toxíny shiga a shiga podobné toxíny, ktorých pôsobenie vedie k intoxikácii. Porážka sliznice je sprevádzaná opuchom, nekrózou a krvácaním, čo spôsobuje výskyt krvi v stolici. Okrem toho toxín ovplyvňuje centrálny nervový systém, čo vedie k trofickým poruchám.

Klinické prejavy.

Spektrum klinických prejavov šigelózy je veľmi široké od miernej hnačky až po ťažkú dyzentériu s kŕčovitými bolesťami brucha, tenezmami, horúčkou a celkovou intoxikáciou.

Inkubačná dobasa pohybuje od niekoľkých hodín do 7 dní, najčastejšie sú to 2-3 dni.Spočiatku majú pacienti vodnatá stolica, horúčka (do 41 °C), difúzna bolesť brucha, nevoľnosť a vracanie. Spolu s tým sa pacienti sťažujú na myalgiu, zimnicu, bolesti chrbta a bolesť hlavy. V najbližších dňoch od začiatku ochorenia sa objavujú príznaky úplavice - tenezmy, časté, riedke, krvavo-hlienovité stolice. Telesná teplota postupne klesá, bolesť môže byť lokalizovaná v dolných kvadrantoch brucha. Intenzita hnačky dosahuje maximum okolo konca 1. týždňa choroby. Dyzentéria s krvavou stolicou je bežnejšia a objavuje sa skôr pri chorobe spôsobenej o S. dysenteriae typu I ako pri iných formách šigelózy.

Pre Shigellosis Sonne charakteristický je miernejší priebeh ochorenia (gastroenterický alebo gastroenterokolický variant). Horúčkové obdobie je kratšie, účinky intoxikácie sú krátkodobé, deštruktívne zmeny na sliznici čreva nie sú typické.

Shigellosis FlexnerV zásade sú charakteristické dva varianty klinického priebehu - gastroenterokolitída a kolitída.

Extraintestinálne komplikácie pri shigelózezriedkavé:

Komplikáciou šigelózy môže byť vývoj črevnej dysbakteriózy.
Spolu s bolesťami hlavy môžu byť príznaky meningitídy a konvulzívnych záchvatov.
Boli opísané prípady periférnej neuropatie pri infekcii S. dysenteriae typu I a prípady Guillain-Barrého syndrómu (polyneuritída) boli hlásené počas prepuknutia gastroenteritídy S. boydii.
S výnimkou detí trpiacich dystrofiou je hematogénne šírenie patogénu pomerne zriedkavé, popísané sú aj prípady abscesov šigelózy a meningitídy.
Pri šigelóze je možný rozvoj Reiterovho syndrómu s artritídou, sterilnou konjunktivitídou a uretritídou, zvyčajne sa to u pacientov vyskytuje po 1-4 týždňoch od začiatku hnačky.
U detí je shigelóza sprevádzaná hemolyticko-uremickým syndrómom, často spojeným s reakciami podobnými leukémii, ťažkou kolitídou a cirkulujúcim endotoxínom, ale bakteriémia sa zvyčajne nezistí.
Veľmi zriedkavo je hnisavá keratokonjunktivitída spôsobená šigelou, ktorá sa dostala do očí v dôsledku samoinfekcie kontaminovanými prstami.
Hypovolemický šok a DIC.
Peritonitída, črevná gangréna, črevné krvácanie.

Imunita: Ľudia majú prirodzenú odolnosť voči šigelóze. Po minulé ochorenie imunita nie je stabilná a po šigelóze Sonne prakticky chýba. S chorobou spôsobenou Shigellou Grigoriev Shigi sa vyvíja stabilnejšia antitoxická imunita. Hlavná úloha pri ochrane pred infekciou patrí sekrécii IgA zabraňujúca adhézii a cytotoxickej protilátkovo závislej aktivite intraepitelových lymfocytov, ktoré spolu so sekrečnými IgA zabiť shigella.

Diagnostika a laboratórne výskumy.

Účel štúdie: detekcia a identifikácia šigel na diagnostiku; detekcia nosičov baktérií; detekcia shigelly v potravinách.

Výskumný materiál: exkrementy, prierezový materiál, potraviny.

Diagnostické metódy:mikrobiologické (bakteriologické, mikroskopické (luminiscenčné); sérologické; biologické; alergický test.

Priebeh výskumu:

1 deň štúdia:Kultúry by sa mali robiť z čerstvo vylúčených výkalov alebo pomocou rektálnych tampónov (rektálna trubica); pri absencii vhodných podmienok musí byť materiál umiestnený v transportnom prostredí. Na tento účel by sa mal použiť enterický agar (médium MacConkey alebo Shigella-Salmonella), stredne selektívny xylóza-lyzín-deoxycholátový agar, KLD) a živný bujón (selenitový bujón). Ak čas medzi odberom a inokuláciou presiahne 2 hodiny, potom by sa mali použiť konzervačné roztoky: 20 % žlčový bujón, kombinované Kauffmannovo médium.

Exkrementy v glycerínovej zmesi sa emulgujú, kvapka emulzie sa nanesie na médium a rozotrie sa špachtľou. Diferenciálne médiá pre Shigella sú Ploskirev, Endo a EMS médiá (eozínmetylénová modrá agar). Ploskirevovo médium (zloženie média zahŕňa: MPA, laktózu, soli žlčové kyseliny a indikátor brilantná zelená) je tiež voliteľné médium pre Shigella, pretože inhibuje rast Escherichia coli.
Súbežne s priamym výsevom zozbieraný materiál naočkované na obohacovacie médium - seleničitanový bujón.
Všetky plodiny sú umiestnené v termostate.

2. deň štúdie:

Poháriky sa vyberú z termostatu, podozrivé kolónie sa skrínujú na Resselovom médiu (živné médium, ktoré obsahuje: agar-agar, Andredeov indikátor, 1 % laktózy, 0,1 % glukózy) a manitol. Výsev sa robí ťahmi na šikmú plochu a nástrekom do agarového stĺpca. Naočkované Resselovo médium sa umiestni do termostatu na 18 až 24 hodín (súbežne sa uskutoční preočkovanie zo seleničitanového média do diferenciálneho diagnostického média).
Urobte šmuhy (Gramovo farbenie), mikroskop.
Pripravte prípravky "visiace" alebo "drvené" kvapky.
Vyhlásenie o indikatívnej RA s polyvalentnými diagnostickými sérami na shigelózu.
Výsev podozrivých kolónií na šikmý agar.

3. deň štúdie:

Mikroskopia agarového šikmého materiálu.
Kultúry, ktoré nefermentovali laktózu na Resselovom médiu, sa podrobia ďalšiemu štúdiu: urobia sa nátery (Gramovo farbenie), skontroluje sa čistota kultúry. V prítomnosti gramnegatívnych tyčiniek sa naočkuje Hissovo médium, bujón s indikátorovými papierikmi (na detekciu indolu a sírovodíka) a lakmusové mlieko.
Naočkované médiá sa umiestnia do termostatu na 18-24 hodín.

Štvrtý deň štúdie:

Účtovanie krátkej „pestrej série“.
Kultúry podozrivé z hľadiska ich enzymatických a kultúrnych vlastností proti Shigella sa podrobia sérologickej identifikácii. Stanovenie RA na skle (typické a skupinové diagnostické séra). Nastavenie nasadeného RA.

Ako zrýchlené metódy používa sa na šigelózufluorescenčná mikroskopia A biologická vzorka(zavlečenie virulentných kmeňov Shigella do spojovkového vaku (pod dolným viečkom) morčiat zápal spojiviek sa vyvinie do konca 1. dňa).

Alergický test Zuverkalovintradermálny alergický test s dyzentériou (zavedenie 0,1 ml dyzentérie do predlaktia pozitívna reakcia v prípade infiltrácie a hyperémie). Alergologická diagnostika sa v súčasnosti prakticky nepoužíva. Tsurvekalov test sa nelíši v špecifickosti, pozitívne reakcie sú zaznamenané nielen pri šigelóze, ale aj pri salmonelóze, escherichióze, yersinióze a iných akútnych črevných infekciách a niekedy aj u zdravých jedincov.

Liečba a prevencia.Bakteriofág sa používa na liečbu a prevenciu podľa epidemiologických indikácií. orálne podávanie, antibiotiká po stanovení antibiogramu; v prípade dysbakteriózy prípravky probiotík na korekciu mikroflóry. Na doplnenie straty tekutín a elektrolytov - zavedenie roztoku glukózy-elektrolytu dovnútra.

Konkrétne ciele:

Interpretujte biologické vlastnosti patogénov šigelózy.

Zoznámte sa s klasifikáciou Shigella.

Naučte sa interpretovať patogenetické vzorce infekčného procesu spôsobeného shigellou.

Stanoviť metódy mikrobiologickej diagnostiky, etiotropnej terapie a prevencie šigelózy.

Byť schopný:

Testovaný materiál naočkujte na živné médiá.
- Pripravte si nátery a Gramovo farbenie.
- Vykonajte mikroskopiu prípravkov pomocou ponorného mikroskopu.
- Analyzujte morfologické, kultúrne a enzymatické vlastnosti Shigella.

Teoretické otázky:

1. Charakteristika patogénov šigelózy. biologické vlastnosti.

2. Klasifikácia šigelly. Základné princípy.

3. Epidemiológia, patogenéza a klinické príznakyšigelóza.

4. Laboratórna diagnostika.

5. Zásady liečby a prevencie šigelózy.

Praktické úlohy, ktoré sa vykonávajú v triede:

1. Mikroskopia demonštračných preparátov z čistých kultúr patogénov šigelózy.

2. Práca na bakteriologickej diagnostike šigelózy: štúdium fekálnych kultúr na Ploskirevovom médiu.

3. Subkultivácia podozrivých kolónií na Resselovom médiu a na BCH na stanovenie tvorby indolu a H 2 S .

4. Náčrt demonštračných prípravkov a schémy mikrobiologickej diagnostiky šigelózy v protokole vyučovacej hodiny.

5. Registrácia protokolu.

Literatúra:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Lekárska mikrobiológia, imunológia a virológia / Učebnica pre lekárske univerzity, Petrohrad "Špeciálna literatúra", 1998. - 592s.

2. Timakov V.D., Levašev V.S., Borisov L.B. Mikrobiológia / Učebnica. - 2. vyd., prepracované. A ďalšie - M .: Medicína, 1983, -512s.

3. Pyatkin K.D. Krivoshein Yu.S. Mikrobiológia s virológiou a imunológiou.- Kyjev: In and shcha school, 1992. - 431s.

4. Lekárska mikrobiológia / Edited by V.I. Pokrovského.-M.: GEOTAR-MED, 2001.-768s.

5. Sprievodca praktický tréning v mikrobiológii, imunológii a virológii. Ed. M.P. Zykov. M. "Medicína". 1977. 288 s.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiológia. / Ed. F.K. Čerkesský. M.: Medicína, 1986. 512 s.

7. Poznámky k prednáške.

Doplnková literatúra:

1. Makiyarov K.A. Mikrobiológia, virológia a imunológia. Alma-Ata, "Kazachstan", 1974. 372 s.

2. Titov M.V. Infekčné choroby. - K., 1995. 321s.

3. Šuvalová E.P. infekčné choroby. - M.: Medicína, 1990. - 559 s.

4. BME, zväzok 1, 2, 7.

5. Pavlovič S.A. Lekárska mikrobiológia v grafoch: Proc. príspevok na zdravotnú súdruh. Mn.: Vyš. škola, 1986. 255 s.

Stručný usmernenia pracovať na praktickej časti.

Na začiatku vyučovacej hodiny sa kontroluje úroveň prípravy žiakov na vyučovaciu hodinu.

Samostatná práca pozostáva zo štúdia klasifikácie shigella, analýzy schémy patogenetických a klinické príznakyšigelóza. Štúdium metód laboratórnej diagnostiky šigelózy. Žiaci realizujú výsev biomateriálu na živné pôdy. Potom sa pripravia mikropreparáty, zafarbia sa podľa Grama, vykoná sa mikroskopia, načrtnú sa mikropreparáty a podajú sa potrebné vysvetlenia. Súčasťou samostatnej práce je aj mikroskopovanie ukážkových príprav a ich zakreslenie do protokolu vyučovacej hodiny.

Na konci hodiny je vykonaná kontrola testu a rozbor konečných výsledkov samostatnej práce každého študenta.

Technologická mapa praktickej hodiny.

p/p	Etapy	Čas v minútach	Spôsoby učenia	Vybavenie	Poloha
	Kontrola a oprava počiatočnej úrovne prípravy na vyučovaciu hodinu		Testovacie úlohy základná línia	Tabuľky, atlas	študovňa
	Samostatná práca		Graf logickej štruktúry	Ponorný mikroskop, farbivá, podložné sklíčka, bakteriologické slučky, živné pôdy, Ploskirevovo médium, Resselovo médium, "pestrý Hissov rad"
	Samokontrola a korekcia zvládnutia látky		Cielené učebné úlohy
	Kontrola testu		Testy
	Analýza výsledkov práce

Cielené vzdelávacie úlohy:

Výkaly boli získané od dieťaťa s akútnymi črevnými infekciami (odber výkalov bol vykonaný rektálnou sondou) obsahujúcimi hlien a hnis. Akú expresnú diagnostickú metódu použiť?

A. ELISA.

b. REEF.

C. RA.

D. RSK.

E. RIA.

Pôvodca dyzentérie bol izolovaný z chorého dieťaťa s akútnou črevnou infekciou. Ktoré morfologické znaky charakteristika patogénu?

A . Gramnegatívna nepohyblivá tyčinka.

B . Gram-pozitívna pohyblivá tyč.

C . Vytvára kapsulu na živnom médiu.

D . Vo vonkajšom prostredí tvorí spóry.

E . Gram-pozitívne streptobacily.

3. Pacient, ktorý pred tromi dňami ochorel a sťažuje sa na teplotu 38 °C, bolesti brucha, časté tekutá stolica, prítomnosť krvi v stolici, lekár klinicky diagnostikoval bacilárna dyzentéria. Akú metódu mikrobiologickej diagnostiky v tomto prípade použiť a aký materiál odobrať pacientovi na potvrdenie diagnózy?

A. Bakterioskopický kal.

B. Bakteriologické kal.

C. Bakterioskopická krv.

D. Bakteriologický moč.

E. Sérologická krv.

4. Shigella Sonne bola izolovaná z pacientových výkalov. Čo je potrebné urobiť dodatočný výskum určiť zdroj nákazy?

A . Vykonajte fágovú typizáciu izolovanej čistej kultúry.

B . Stanovte antibiogram.

C . Nastavte zrážaciu reakciu.

D . Nastavte reakciu fixácie komplementu.

E . Nastavte neutralizačnú reakciu.

5. V skupine turistov (27 ľudí), ktorí pili vodu z jazera, sa po dvoch dňoch u 7 ľudí objavili príznaky akútna hnačka. Aký materiál na stanovenie etiológie túto chorobu treba poslať do laboratória?

A. Voda, výkaly pacientov.

B. Voda, krv chorých.

C. Potravinárske výrobky.

D. Moč.

E. Flegm.

6. Významnou nevýhodou mikroskopickej diagnostickej metódy akútnych črevných infekcií je jej nedostatočný informačný obsah spôsobený morfologickou identitou baktérií rodu Enterobacteriaceae . Čo robí túto metódu informatívnejšou?

A . Rádioimunoanalýza.

B . Coombsova reakcia.

C . Prepojený imunosorbentový test.

D . opsonizačná reakcia.

E . Imunofluorescenčná reakcia.

7. 29-ročný pacient bol hospitalizovaný so záchvatmi vracania, hnačky a tenesmy. Výkaly s kúskami hlienu a prímesou krvi. Bakteriologické vyšetrenie baktérií z kolónií na Ploskirevovom médiu odhalilo nepohyblivé, gramnegatívne tyčinky, ktoré nefermentujú laktózu. Vymenujte pôvodcu infekčného procesu.

A. Shigella flexneri.

b. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. Do mikrobiologického laboratória bol doručený hlávkový šalát, ktorý je podozrením na akút črevná infekcia. Aké živné médiá sa používajú na primárne očkovanie?

A . Žĺtkovo-soľný agar, MPB.

b. MPA, MPB.

C . Selenitový vývar, Endo, Ploskireva.

D . Pečeňový vývar, Roux medium.

E . Krvný agar, alkalický agar.

9. Pri mikrobiologickej štúdii mletého mäsa boli izolované baktérie patriace do rodu Shigella. Štúdium akých vlastností mikróbov viedlo k takémuto záveru?

A . Kultúrny, farbistý.

B . Antigénne, kultúrne.

C . Sacharolytický, proteolytický.

D . Antigénne, imunogénne.

E . Morfologické, antigénne.

10. Kedy mikroskopické vyšetrenie zvratky odobraté od pacienta s príznakmi akútnej črevnej infekcie boli nájdené nehybné tyčinky. V akom nátere alebo prípravku by sa dala študovať pohyblivosť baktérií?

A . V nátere zafarbenom Gramom.

B . V nátere zafarbenom podľa Tsil - Nelsen.

C . V príprave "hustá kvapka".

D . V nátere zafarbenom Neisserom.

E . V príprave "drvená kvapka".

Algoritmus laboratórne práce:

1. Štúdium biologických vlastností Shigella.

2. Oboznámenie sa s klasifikáciou šigel.

3. Analýza schémy patogenetických a klinických prejavov šigelózy.

4. Štúdium metód laboratórnej diagnostiky šigelózy.

5. Štúdium základných princípov terapie a prevencie šigelózy.

Príprava fixovaných preparátov z bakteriálnej kultúry.
Farbenie mikroprípravky od Gram.
Mikroskopia mikropreparátov s pomocou ponorného mikroskopu, ich rozbor a zakreslenie do protokolu z vyučovacej hodiny.
Mi chromoskopia a analýza demonštračných preparátov z čistých kultúr Shigella.
Náčrt demonštračných preparátov a schéma laboratórnej diagnostiky šigelózy v protokole.
Formulácia protokolu.

Dyzentéria - ide o bolestivú infekciu, sprevádzanú hnačkou s uvoľňovaním krvi, hnisu a hlienu, bolesťami brucha a príznakmi celkovej intoxikácie, vyskytujúcimi sa pri prevládajúcej lézii hrubého čreva, je spôsobená odlišné typy milý Shigella(baktérie úplavice).

pôvodcovia dyzentérie patria do oddelenia Gracilicutes, rodina Enterobacteriaceae, milý Shigella.
Dyzentéria , volal Shigella dysenteriae, je závažnejšia ako choroby spôsobené inými Shigellami, pretože okrem endotoxínu, ktorý spôsobuje črevný zápal, tento typ baktérie produkuje silný exotoxín, ktorý pôsobí ako neurotoxín

Bakteriálna úplavica alebo shigelóza, je infekčné ochorenie spôsobené baktériami rodu Shigella,

Dyzentéria.Morfológia a farbiace vlastnosti.
Shigella - gramnegatívne tyčinky so zaoblenými koncami, 2-3 mikróny dlhé, 0,5-7 mikrónov hrubé, netvoria spóry, nemajú bičíky, sú nepohyblivé. V mnohých kmeňoch sa nachádzajú klky všeobecného typu a genitálne pili. Niektoré Shigella majú mikrokapsulu.

Dyzentéria. Kultivácia.
Dysentery sticks sú fakultatívne anaeróby. Sú nenáročné na živné pôdy, dobre rastú pri teplote 37°C a pH 7,2-7,4. Na hustých médiách tvoria malé priehľadné kolónie, v tekutých médiách - difúzny zákal. Selenitový bujón sa najčastejšie používa ako obohacovacie médium na kultiváciu Shigella.

Dyzentéria.enzymatickú aktivitu.
Shigella majú menšiu enzymatickú aktivitu ako iné enterobaktérie. Fermentujú sacharidy za vzniku kys. Dôležitým znakom, ktorý umožňuje odlíšiť Shigelly, je ich vzťah k manitolu: S. dysenteriae nefermentuje manitol, zástupcovia skupín B, C, D sú na manitol pozitívni. Biochemicky najaktívnejšie sú S. sonnei, ktoré pomaly (do 2 dní) dokážu fermentovať laktózu. Na základe vzťahu S. sonnei k ramnóze, xylóze a maltóze sa rozlišuje 7 jej biochemických variantov.

Dyzentéria.Antigénna štruktúra.
Shigella majú O-antigén, ich heterogenita umožňuje rozlíšiť sérovary a subserovary v rámci skupín; u niektorých členov rodu sa nachádza K-antigén.

Dyzentéria.faktory patogénnosti.
Všetky dysenterické bacily tvoria endotoxín, ktorý má enterotropný, neurotropný, pyrogénny účinok. Okrem toho S. dysenteriae - Shigella Grigoriev-Shiga - vylučuje exotoxín, ktorý má enterotoxický, neurotoxický, cytotoxický a nefrotoxický účinok na telo, čo následne narúša metabolizmus voda-soľ a činnosť centrálneho nervového systému, vedie k smrti epitelových buniek hrubého čreva.črevá, poškodenie obličkových tubulov.

S tvorbou exotoxínu sa spája závažnejší priebeh dyzentérie spôsobenej týmto patogénom. Exotoxín môžu vylučovať aj iné typy Shigella. Bol objavený faktor RF permeability, v dôsledku čoho sú postihnuté krvné cievy. Patria sem aj patogénne faktory invazívny proteín, čo uľahčuje ich penetráciu do epiteliálnych buniek, ako aj do pili a proteínov vonkajšej membrány zodpovedných za adhéziu a mikrokapsuly.

Dyzentéria.odpor.
Shigella majú nízku odolnosť voči pôsobeniu rôznych faktorov. Väčšiu odolnosť majú S. sonnei, ktoré v voda z vodovodu pretrvávajú do 2,5 mesiaca, vo vode otvorených nádrží prežijú do 1,5 mesiaca. S. sonnei dokáže nielen dlhodobo prežívať, ale aj množiť sa vo výrobkoch, najmä mliečnych.

Dyzentéria.Epidemiológia.
Dyzentéria je antroponotická infekcia: zdrojom sú chorí ľudia a nosiči. Mechanizmus prenosu infekcií je fekálno-orálny. Cesty prenosu môžu byť rôzne – pri Sonneho dyzentérii prevláda potravná cesta, pri Flexnerovej – voda, pre Grigoriev-Šigovu dyzentériu je charakteristická cesta kontakt – domácnosť.

Dyzentéria nachádza v mnohých krajinách sveta. IN posledné roky došlo k prudkému nárastu výskytu tejto infekcie. Ľudia všetkých vekových skupín ochorejú, ale deti vo veku od 1 do 3 rokov sú najviac náchylné na úplavicu. V júli až septembri pribúda chorých. Rôzne druhy Shigella sú v určitých regiónoch rozmiestnené nerovnomerne.

Dyzentéria.Patogenéza.
Shigella vstupuje do gastrointestinálneho traktu cez ústa a dosahuje hrubé črevo. Vďaka tropizmu pre svoj epitel sa patogény pripájajú k bunkám pomocou pili a proteínov vonkajšej membrány. Vďaka invazívnemu faktoru prenikajú do vnútra buniek, tam sa množia, v dôsledku čoho bunky odumierajú.

V črevnej stene sa tvoria ulcerácie, na mieste ktorých sa potom tvoria jazvy. Endotoxín, uvoľnený pri ničení baktérií, spôsobuje celkovú intoxikáciu, zvýšenú črevnú motilitu a hnačku. Krv z vytvorených vredov vstupuje do stolice. V dôsledku pôsobenia exotoxínu sa pozoruje výraznejšie narušenie metabolizmu voda-soľ, činnosť centrálneho nervového systému a poškodenie obličiek.

Dyzentéria.klinický obraz.
Inkubačná doba trvá od 1 do 5 dní. Choroba začína akútne zvýšením telesnej teploty na 38-39 ° C, objavujú sa bolesti brucha, hnačka. V stolici sa nachádza prímes krvi, hlienu. Grigoriev-Shiga dyzentéria je najťažšia.

Dyzentéria.Imunita.
Po ochorení je imunita druhovo a variantne špecifická. Má krátke trvanie a je nestabilný. Často sa choroba stáva chronickou. Opakované ochorenia boli zaznamenané aj v rámci jednej sezóny.

Dyzentéria.laboratórium diagnostika.
Ako testovací materiál sa berú pacientove výkaly. Základom diagnostiky je bakteriologická metóda, ktorá umožňuje identifikovať patogén, určiť jeho citlivosť na antibiotiká, vykonať intrašpecifickú identifikáciu (určiť biochemický variant, sérovar alebo kolicinogenovar). Pri dlhotrvajúcom priebehu úplavice sa môže použiť ako pomocná látka sérologická metóda, spočívajúci vo formulácii RA, RNHA (zvyšovaním titra protilátok pri opakovanej formulácii reakcie možno potvrdiť diagnózu).

Dyzentéria.Liečba.
Pacienti s ťažkými formami Grigorieva-Shishovej a Flexnerovej dyzentérie sú liečení antibiotikami široký rozsah akcie s povinným zohľadnením antibiogramu, pretože medzi shigellami sú často nielen rezistentné na antibiotiká, ale aj formy závislé od antibiotika. Pri miernych formách dyzentérie sa antibiotiká nepoužívajú, pretože ich použitie vedie k dysbakterióze, ktorá sa zhoršuje patologický proces, a narušenie procesov obnovy v sliznici hrubého čreva.

Dyzentéria.Prevencia.
Jediným liekom, ktorý možno použiť v ohniskách infekcie na profylaktické účely, je dyzenteriálny bakteriofág. Hlavnú úlohu zohráva nešpecifická profylaxia.

Nešpecifická prevencia zabezpečuje správne sanitárne a hygienické zabezpečenie života ľudí, zásobovanie kvalitnou vodou a potravinami.

V prostredí pacienta sa musia prijať opatrenia na zabránenie šírenia patogénu.

Mikrobiológia úplavice

Dyzentéria je infekčné ochorenie charakterizované všeobecnou intoxikáciou tela, hnačkou a zvláštnou léziou sliznice hrubého čreva. Ide o jedno z najčastejších akútnych črevných ochorení na svete. Choroba je známa už od staroveku pod názvom "krvavá hnačka", ale jej povaha sa ukázala byť iná. V roku 1875 ruský vedec F. A. Lesh izoloval amébu od pacienta s krvavou hnačkou Entamoeba histolytica, v nasledujúcich 15 rokoch sa ustálila samostatnosť tohto ochorenia, pre ktoré sa zachoval názov amébóza.

Pôvodcami vlastnej dyzentérie je veľká skupina biologicky podobných baktérií združených v rode Shigella. Patogén prvýkrát objavili v roku 1888 A. Chantemes a F. Vidal; v roku 1891 ju opísal A. V. Grigoriev a v roku 1898 K. Shiga pomocou séra, ktoré dostal od pacienta, identifikoval patogén u 34 pacientov s úplavicou, čím napokon dokázal etiologickú úlohu tejto baktérie. V nasledujúcich rokoch však boli objavení aj ďalší pôvodcovia dyzentérie: v roku 1900 - S. Flexner, v roku 1915 - K. Sonne, v roku 1917 - K. Stutzer a K. Schmitz, v roku 1932 - J. Boyd , v roku 1934 - D. Large, v roku 1943 - A. Sachs. V súčasnosti rod Shigella zahŕňa viac ako 40 sérotypov. Všetko sú to krátke nepohyblivé gramnegatívne tyčinky, ktoré netvoria spóry a kapsuly, ktoré dobre rastú na bežných živných médiách, nerastú na hladovom médiu s citrátom alebo malonátom ako jediným zdrojom uhlíka; netvoria H 2 S, nemajú ureázu; Voges-Proskauerova reakcia je negatívna; glukóza a niektoré ďalšie uhľohydráty sa fermentujú za vzniku kyseliny bez plynu (okrem niektorých biotypov Shigella flexneri: S. manchester A S. newcastle); spravidla nefermentujú laktózu (s výnimkou Shigella Sonne), adonit, salicín a inozitol, neskvapalňujú želatínu, zvyčajne tvoria katalázu, nemajú lyzíndekarboxylázu a fenylalaníndeaminázu. Obsah G + C v DNA je 49 - 53 mol%. Shigella sú fakultatívne anaeróby, teplotné optimum pre rast je 37 °C, nerastú pri teplotách nad 45 °C, optimálne pH média je 6,7 - 7,2. Kolónie na hustých médiách sú okrúhle, konvexné, priesvitné, v prípade disociácie sa vytvárajú hrubé kolónie v tvare R. Rast na BCH vo forme rovnomerného zákalu, drsné formy tvoria zrazeninu. Čerstvo izolované kultúry Sonne Shigella zvyčajne tvoria kolónie dvoch typov: malé okrúhle konvexné (I fáza), veľké ploché (II fáza). Povaha kolónie závisí od prítomnosti (fáza I) alebo neprítomnosti (fáza II) plazmidu s m. m. 120 MD, čo tiež určuje virulenciu Shigella Sonne.

Medzinárodná klasifikácia Shigella je zostavená s prihliadnutím na ich biochemické vlastnosti (manitol-nefermentujúca, manitol-fermentujúca, pomaly laktózovo-fermentujúca Shigella) a vlastnosti antigénnej štruktúry (tabuľka 37).

V Shigella sa našli O-antigény rôznej špecificity: spoločné pre túto rodinu Enterobacteriaceae generické, druhovo, skupinovo a typovo špecifické, ako aj K-antigény; Nemajú H antigény.

Tabuľka 37

Klasifikácia baktérií rodu Shigella

Klasifikácia berie do úvahy iba skupinovo a typovo špecifické O-antigény. Podľa týchto vlastností je Shigellaďalej rozdelené do 4 podskupín alebo 4 druhov a zahŕňa 44 sérotypov. V podskupine A (druh Shigella dysenteriae) zahŕňa shigelly, ktoré nefermentujú manitol. Druh zahŕňa 12 sérotypov (1 - 12). Každý sérotyp má svoj vlastný špecifický typ antigénu; antigénne vzťahy medzi sérotypmi, ako aj s inými typmi šigel, sú slabo exprimované. Do podskupiny B (typ Shigella flexneri) patrí Shigella, zvyčajne fermentujúci manitol. Shigella tohto druhu sú si navzájom sérologicky príbuzné: obsahujú typovo špecifické antigény (I - VI), podľa ktorých sa delia na sérotypy (1 - 6), a skupinové antigény, ktoré sa v každom sérotype nachádzajú v rôznom zložení. a podľa ktorej sa sérotypy delia na subsérotypy. Okrem toho tento druh zahŕňa dva antigénne varianty X a Y, ktoré nemajú typické antigény, líšia sa súbormi skupinových antigénov. sérotyp S. flexneri 6 nemá subsérotypy, ale delí sa na 3 biochemické typy podľa charakteristík fermentácie glukózy, manitolu a dulcitu (tabuľka 38).

Tabuľka 38

Biotypy S. flexneri 6

Poznámka. K - fermentácia s tvorbou iba kyseliny; KG - fermentácia s tvorbou kyseliny a plynu; (-) - bez fermentácie.

Lipopolysacharidový antigén O vo všetkých Shigella Flexner obsahuje ako hlavnú primárnu štruktúru skupinový antigén 3, 4, jeho syntéza je riadená chromozomálnym génom lokalizovaným v blízkosti his-lokusu. Typovo špecifické antigény I, II, IV, V a skupinové antigény 6, 7, 8 sú výsledkom modifikácie antigénov 3, 4 (glykozylácia alebo acetylácia) a sú určené génmi zodpovedajúcich konvertujúcich profágov, integračným miestom ktorý sa nachádza v lac-pro oblasti chromozómu Shigella.

Objavil sa na území krajiny v 80. rokoch. 20. storočie a široko používaný nový subsérotyp S. flexneri 4(IV:7, 8) sa líši od subsérotypu 4a (IV:3, 4) a 4b (IV:3, 4, 6), vznikol z variantu S. flexneri Y(IV: 3, 4) v dôsledku lyzogenizácie jeho konvertujúcimi profágmi IV a 7, 8.

Do podskupiny C (druh Shigella boydii) patrí Shigella, zvyčajne fermentujúci manitol. Členovia skupiny sú od seba sérologicky odlišní. Antigénne vzťahy v rámci druhu sú slabo vyjadrené. Tento druh zahŕňa 18 sérotypov (1 - 18), z ktorých každý má svoj vlastný hlavný typ antigénu.

V podskupine D (druh Shigella sonnei) zahŕňa Shigella, ktorá zvyčajne fermentuje manitol a je schopná pomaly (po 24 hodinách inkubácie a neskôr) fermentovať laktózu a sacharózu. vyhliadka S. sonnei Zahŕňa jeden sérotyp, avšak kolónie fázy I a II majú svoje vlastné typovo špecifické antigény. Na vnútrodruhovú klasifikáciu Sonnovej Shigelly boli navrhnuté dve metódy:

1) ich rozdelenie na 14 biochemických typov a podtypov podľa ich schopnosti fermentovať maltózu, ramnózu a xylózu; 2) rozdelenie na typy fágov podľa citlivosti na súbor zodpovedajúcich fágov.

Tieto typizačné metódy majú hlavne epidemiologický význam. Okrem toho, Sonneova shigella a Flexnerova shigella sú podrobené typizácii na rovnaký účel vďaka schopnosti syntetizovať špecifické kolicíny (kolicinogenotypizácia) a citlivosti na známe kolicíny (kolicinotypizácia). Na určenie typu kolicínov produkovaných shigellami J. Abbott a R. Shannon navrhli súbory typických a indikátorových kmeňov shigel a na stanovenie citlivosti shigella na známe typy kolicínov súbor referenčných kolicinogénnych kmeňov od P. Fredericka. sa používa.

odpor. Shigella má pomerne vysokú odolnosť voči environmentálnym faktorom. Prežijú na bavlnenej tkanine a na papieri až 30-36 dní, v sušených výkaloch - až 4-5 mesiacov, v pôde - až 3-4 mesiace, vo vode - od 0,5 do 3 mesiacov, na ovocí a zelenine - do 2 týždňov, v mlieku a mliečnych výrobkoch - až niekoľko týždňov; pri teplote 60 °C odumierajú za 15 - 20 minút. Citlivý na roztoky chlóramínu, aktívny chlór a iné dezinfekčné prostriedky.

faktory patogénnosti. Najdôležitejšou biologickou vlastnosťou Shigella, ktorá určuje ich patogenitu, je schopnosť napádať epitelové bunky, množiť sa v nich a spôsobiť ich smrť. Tento účinok možno zistiť pomocou keratokonjunktiválneho testu (zavedenie jednej slučky kultúry Shigella (2–3 miliardy baktérií) pod spodné viečko morčiatka spôsobí rozvoj seróznej purulentnej keratokonjunktivitídy, ako aj infekciou buniek. kultúry (cytotoxický účinok) alebo kuracích embryí (ich smrť), alebo intranazálne u bielych myší (vývoj pneumónie). Hlavné faktory patogenity shigelly možno rozdeliť do troch skupín:

1) faktory, ktoré určujú interakciu s epitelom sliznice;

2) faktory, ktoré poskytujú odolnosť voči humorálnym a bunkovým obranným mechanizmom makroorganizmu a schopnosť Shigella množiť sa v jeho bunkách;

3) schopnosť produkovať toxíny a toxické produkty, ktoré určujú vývoj skutočného patologického procesu.

Prvá skupina zahŕňa adhézne a kolonizačné faktory: ich úlohu zohrávajú pili, proteíny vonkajšej membrány a LPS. Enzýmy ničiace hlien, ako je neuraminidáza, hyaluronidáza a mucináza, podporujú adhéziu a kolonizáciu. Do druhej skupiny patria invázne faktory, ktoré podporujú penetráciu Shigella do enterocytov a ich reprodukciu v nich a v makrofágoch so súčasným prejavom cytotoxického a (alebo) enterotoxického účinku. Tieto vlastnosti sú riadené génmi plazmidu s m. m. 140 MD (kóduje syntézu proteínov vonkajšej membrány, ktoré spôsobujú inváziu) a chromozomálnymi génmi Shigella: kcp A (spôsobuje keratokonjunktivitídu), cyt (zodpovedný za deštrukciu buniek), ako aj iné zatiaľ neidentifikované gény. Ochranu Shigella pred fagocytózou zabezpečuje povrchový K-antigén, antigény 3, 4 a lipopolysacharid. Okrem toho má Shigella endotoxín lipid A imunosupresívny účinok: potláča aktivitu imunitných pamäťových buniek.

Tretia skupina faktorov patogenity zahŕňa endotoxín a dva typy exotoxínov vyskytujúcich sa v Shigelle – Shiga exotoxíny a Shiga-like exotoxíny (SLT-I a SLT-II), ktorých cytotoxické vlastnosti sú najvýraznejšie v S. dysenteriae 1. Shiga- a Shiga podobné toxíny nachádzajúce sa aj v iných sérotypoch S. dysenteriae, tiež sa tvoria S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC a niektoré salmonely. Syntéza týchto toxínov je riadená toxovými génmi konvertujúcich fágov. Enterotoxíny typu LT sa našli u Flexnera, Sonneho a Boyda Shigella. Syntéza LT v nich je riadená plazmidovými génmi. Enterotoxín stimuluje aktivitu adenylátcyklázy a je zodpovedný za rozvoj hnačky. Shiga toxín alebo neurotoxín nereaguje s adenylátcyklázovým systémom, ale má priamy cytotoxický účinok. Shiga a Shiga podobné toxíny (SLT-I a SLT-II) majú molekulovú hmotnosť 70 kD a pozostávajú z podjednotiek A a B (posledná z 5 rovnakých malých podjednotiek). Receptorom pre toxíny je glykolipid bunkovej membrány.

Virulencia Shigella Sonne tiež závisí od plazmidu s m. m. 120 MD. Riadi syntézu asi 40 vonkajších membránových polypeptidov, z ktorých sedem je spojených s virulenciou. Shigella Sonne s týmto plazmidom tvoria kolónie fázy I a sú virulentné. Kultúry, ktoré stratili plazmid, tvoria kolónie fázy II a nemajú virulenciu. Plazmidy s MM 120 - 140 MD sa našli u Shigelly Flexnerovej a Boyda. Lipopolysacharid Shigella je silný endotoxín.

Charakteristickým znakom epidemiológie dyzentérie je zmena v druhovom zložení patogénov, ako aj biotypov Sonne a sérotypov Flexner v určitých regiónoch. Napríklad do konca 30. rokov 20. storočia 20. storočie zdielať S. dysenteriae 1 tvoril až 30 - 40 % všetkých prípadov dyzentérie a potom sa tento sérotyp začal vyskytovať čoraz menej a takmer vymizol. Avšak v 60. – 80. rokoch 20. storočia. S. dysenteriae sa znovu objavila na historickej scéne a spôsobila sériu epidémií, ktoré viedli k vytvoreniu troch jej hyperendemických ohnísk - v Strednej Amerike, Strednej Afrike a Južnej Ázii (India, Pakistan, Bangladéš a ďalšie krajiny). Príčiny zmeny v druhovom zložení patogénov dyzentérie sú pravdepodobne spojené so zmenou kolektívnej imunity a so zmenou vlastností baktérií dyzentérie. Najmä návratnosť S. dysenteriae 1 a jeho široká distribúcia, ktorá spôsobila tvorbu hyperendemických ložísk dyzentérie, je spojená s jej získavaním plazmidov, čo spôsobilo multirezistenciu a zvýšenú virulenciu.

Charakteristiky patogenézy a kliniky. Inkubačná doba dyzentérie je 2-5 dní, niekedy menej ako jeden deň. Tvorba infekčného ložiska v sliznici zostupnej časti hrubého čreva (esovitej a rekta), kam preniká pôvodca dyzentérie, je cyklická: adhézia, kolonizácia, zavedenie Shigelly do cytoplazmy enterocytov, ich intracelulárna reprodukcia, deštrukcia a odmietnutie epiteliálnych buniek, uvoľňovanie patogénov do lumen čriev; potom začína ďalší cyklus - adhézia, kolonizácia atď. Intenzita cyklov závisí od koncentrácie patogénov v parietálnej vrstve sliznice. V dôsledku opakovaných cyklov narastá zápalové ohnisko, vznikajúce vredy, spájajúce sa, zvyšujú obnaženie črevnej steny, v dôsledku čoho sa vo výkaloch objavuje krv, mukopurulentné hrčky a polymorfonukleárne leukocyty. Cytotoxíny (SLT-I a SLT-II) spôsobujú deštrukciu buniek, enterotoxín - hnačka, endotoxíny - celková intoxikácia. Klinika dyzentérie je do značnej miery daná tým, aký typ exotoxínov patogén vo väčšej miere produkuje, mierou jeho alergénneho účinku a imunitným stavom organizmu. Mnohé otázky patogenézy dyzentérie však zostávajú nevysvetlené, najmä: priebeh dyzentérie u detí prvých dvoch rokov života, dôvody prechodu akútnej dyzentérie na chronickú, význam senzibilizácie, mechanizmus lokálnej imunity črevnej sliznice a pod. Najtypickejšími klinickými prejavmi dyzentérie sú hnačky, časté nutkania: v ťažkých prípadoch až 50 a viackrát denne, tenesmy (bolestivé kŕče konečníka) a celková intoxikácia. Charakter stolice je určený stupňom poškodenia hrubého čreva. Najťažšia dyzentéria je spôsobená S. dysenteriae 1, najľahšie - Sonneho úplavica.

Postinfekčná imunita. Ako ukázali pozorovania na opiciach, po prekonaní úplavice zostáva silná a pomerne dlhodobá imunita. Spôsobujú ho antimikrobiálne protilátky, antitoxíny, zvýšená aktivita makrofágov a T-lymfocytov. Významnú úlohu zohráva lokálna imunita črevnej sliznice, sprostredkovaná IgAs. Imunita je však typovo špecifická, silná skrížená imunita sa nevyskytuje.

Laboratórna diagnostika. Hlavná metóda je bakteriologická. Materiálom na štúdium sú výkaly. Schéma izolácie patogénov: očkovanie na diferenciálne diagnostické médiá Endo a Ploskirev (paralelne na obohacovacie médium, po ktorom nasleduje očkovanie na médium Endo a Ploskirev) na izoláciu izolovaných kolónií, získanie čistej kultúry, štúdium jej biochemických vlastností a zohľadnenie identifikácia pomocou polyvalentných a monovalentných diagnostických aglutinačných sér. Vyrábajú sa nasledujúce komerčné séra.

1. Shigella, ktoré nefermentujú manitol:

Komu S. dysenteriae 1 A 2

Komu S. dysenteriae 3.–7(polyvalentné a monovalentné),

Komu S. dysenteriae 8 – 12(polyvalentné a monovalentné).

2. Na shigella fermentujúci manitol:

na typické antigény S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

na zoskupenie antigénov S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8- polyvalentný,

na antigény S.boydii 1.–18(polyvalentné a monovalentné), na antigény S. sonnei I fáza, II fáza,

na antigény S. flexneri I–VI+ S. sonnei- polyvalentný.

Na rýchlu identifikáciu Shigelly sa odporúča nasledujúca metóda: podozrivá kolónia (laktosonegatívna na médiu Endo) sa subkultivuje na médiu TSI (eng. trojitý cukor železo) - trojcukrový agar (glukóza, laktóza, sacharóza) so železom na stanovenie produkcie H 2 S; alebo na médiu obsahujúcom glukózu, laktózu, sacharózu, železo a močovinu. Každý organizmus, ktorý rozkladá močovinu po 4 až 6 hodinách inkubácie, s najväčšou pravdepodobnosťou patrí do rodu Proteus a môžu byť vylúčené. Mikroorganizmus produkujúci H2S alebo majúci ureázu alebo produkujúci kyselinu v kĺbe (fermentuje laktózu alebo sacharózu) možno vylúčiť, hoci kmene produkujúce H2S by sa mali skúmať ako možní členovia rodu Salmonella. Vo všetkých ostatných prípadoch by sa kultúra pestovaná na týchto médiách mala preskúmať a ak fermentuje glukózu (zmena farby stĺpca), izolovať v čistej forme. Zároveň sa dá skúmať aglutinačným testom na skle s príslušným antisérom rodu Shigella. V prípade potreby sa vykonajú ďalšie biochemické testy na kontrolu príslušnosti k rodu Shigella a študijnú mobilitu.

Na detekciu antigénov v krvi (aj ako súčasť CEC), moči a stolici možno použiť nasledujúce metódy: RPHA, RSK, koagulačná reakcia (v moči a stolici), IFM, RAGA (v krvnom sére). Tieto metódy sú vysoko účinné, špecifické a vhodné na včasnú diagnostiku.

Na sérologickú diagnostiku možno použiť: RPGA s príslušnými erytrocytovými diagnostikami, imunofluorescenčnú metódu (v nepriamej modifikácii), Coombsovu metódu (stanovenie titra neúplných protilátok). Diagnostický význam má aj alergický test s úplavicou (roztok proteínových frakcií Shigelly Flexner a Sonne). Reakcia sa berie do úvahy po 24 hodinách.Považuje sa za pozitívnu v prítomnosti hyperémie a infiltrácie s priemerom 10-20 mm.

Liečba. Hlavná pozornosť je venovaná obnove normálneho metabolizmu voda-soľ, racionálnej výžive, detoxikácii, racionálnej antibiotickej terapii (s prihliadnutím na citlivosť patogénu na antibiotiká). Dobrý účinok sa dosiahne skorým použitím polyvalentného dyzenterického bakteriofága, najmä tabliet s pektínovým povlakom, ktorý chráni fág pred pôsobením HCl žalúdočnej šťavy; v tenkom čreve sa pektín rozpúšťa, fágy sa uvoľňujú a prejavujú svoju činnosť. Na profylaktické účely by sa mal fág podávať aspoň raz za tri dni (obdobie jeho prežívania v čreve).

Problém špecifickej prevencie. Na vytvorenie umelej imunity proti úplavici boli použité rôzne vakcíny: z usmrtených baktérií, chemikálie, alkohol, ale všetky sa ukázali ako neúčinné a boli prerušené. Vakcíny proti Flexnerovej úplavici boli vytvorené zo živej (mutantnej, na streptomycíne závislej) Shigelly Flexnerovej; ribozomálne vakcíny, ale tiež neboli široko používané. Preto problém špecifickej prevencie dyzentérie zostáva nevyriešený. Hlavným spôsobom boja proti úplavici je zlepšenie vodovodného a kanalizačného systému, zabezpečenie prísnych hygienických a hygienických režimov v potravinárskych podnikoch, najmä v mliekarenskom priemysle, v zariadeniach starostlivosti o deti, na verejných miestach a pri osobnej hygiene.

KATEGÓRIE

POPULÁRNE ČLÁNKY

	Negácia nie so slovesami (v osobnom tvare, v infinitíve, v tvare gerundia) sa píše samostatne: nebrať, nebol, nevedieť, pomaly
	Prezentácia, správa o hlavných črtách filozofie renesancie
	Štýl beletrie
	Deti zeme Prezentácia Sme deti zeme pre záhradu
	Prezentácia na tému bariéry v komunikácii, prácu vykonali žiaci Bez komunikácie sa zomkneme do seba.

2023 "kingad.ru" - ultrazvukové vyšetrenie ľudských orgánov

Bakteriologický výskum pri úplavici. Laboratórna diagnostika dyzentérie, amébiázy a balantidiózy

Etapy

Vybavenie