A bakteriofágok alkalmazása az orvostudományban. Bakteriofágok és gyakorlati alkalmazásuk bakteriofágok
A fágkészítményeket fertőző betegségek kezelésére, megelőzésére, valamint diagnosztikában - a mikroorganizmusok azonosításában a fágérzékenység és fágtipizálás meghatározására használják. A fágok működése szigorú specifikusságukon alapul. A fágok terápiás és profilaktikus hatását magának a fágnak a lítikus aktivitása, valamint a fagolizátumokban lévő elpusztult mikrobasejtek komponenseinek (antigének) immunizáló tulajdonsága határozza meg, különösen ismételt felhasználás esetén. A fágkészítmények előállítása során a fágok bevált termelő törzseit és ennek megfelelően tipikus mikroorganizmus-tenyészeteket használnak. A szaporodás logaritmikus fázisában lévő, folyékony tápközegben lévő baktériumtenyészetet fág anyaszuszpenzióval fertőzik meg.
A fággal lizált tenyészetet (általában másnap) baktériumszűrőn átszűrjük, és a fágot tartalmazó szűrlethez tartósítószerként kinozololdatot adunk.
Késztermék A fág tiszta folyadék sárgás színű. A hosszabb tárolás érdekében néhány fág száraz formában (tablettában) kapható. A kezelésben és a megelőzésben bélfertőzések A fágokat nátrium-hidrogén-karbonát oldattal egyidejűleg használják, mivel a gyomor savas tartalma elpusztítja a fágot. A fág nem marad sokáig a szervezetben (5-7 napig), ezért ajánlott újra alkalmazni.
a Szovjetunióban gyártották a következő gyógyszereket betegségek kezelésére és megelőzésére használják: tífusz, szalmopelózis, vérhas, coliphage, staphylococcus fág és streptococcus. Jelenleg a fágokat antibiotikumokkal kombinálva kezelésre és megelőzésre használják. Ez az alkalmazás többet nyújt hatékony fellépés antibiotikum-rezisztens baktériumok számára.
A diagnosztikai bakteriofágokat széles körben használják a betegekből vagy fertőzött környezeti tárgyakból izolált baktériumok azonosítására. A bakteriofágok segítségével nagy specificitásuk miatt lehetőség nyílik a baktériumok típusainak, illetve nagyobb pontossággal az izolált baktériumok egyedi típusainak meghatározására. A Salmonella, Vibrio és Staphylococcusok nemzetségébe tartozó baktériumok fágdiagnosztikáját és fágtipizálását fejlesztették ki. A fágtipizálás segít feltárni a fertőzés forrását, tanulmányozni az epidemiológiai összefüggéseket, megkülönböztetni a sporadikus és járványos betegségeket.
A fágdiagnosztika és a fágtipizálás az izolált mikroorganizmusok és a megfelelő fajok vagy típusú fágok együttes tenyésztésének elvén alapul. pozitív eredmény figyelembe vesszük a vizsgált tenyészet jól kifejezett lízisét a fajfággal, majd az egyik tipikus fággal.
Bakteriofágok, alkalmazás az orvostudományban.
Bakteriofágok. Alkalmazása az orvosi gyakorlatban.
A bakteriofágok olyan bakteriális vírusok, amelyek specifikusan képesek behatolni a baktériumsejtekbe, szaporodni és lízist okozni.
Mindenütt megtalálhatók, ahol baktériumok léteznek - talajban, vízben, béltraktus személy. Mindegyik a fág velejárója biológiai jellemzők amelyek a vírusokra jellemzőek.
Fág morfológia:
A fágok alakja különbözik - fonalas, gömb alakú, köbös, fejjel és farokkal rendelkező fágok (a spermiumokra emlékeztető).
A méretek kicsik, közepesek és nagyok.
A fejből és farokból álló nagy fágok a legösszetettebbek. A fej ikozaéder alakú. A fej egy gallér és egy esernyő segítségével kapcsolódik a folyamathoz. A folyamaton belül egy üreges hengeres rúd található, amely a fejjel kommunikál, kívülről a folyamat összehúzódásra képes fehérjehüvellyel rendelkezik, a kaudális folyamat egy hatszögletű, rövid tüskékkel ellátott alaplemezben végződik, amelyből fonalas rostszerkezetek nyúlnak ki. A lemez és a tüskék lizozimot tartalmaznak. A függelékben 6 boholy található, amelyek a fág szoros rögzítését biztosítják a baktériumsejthez. Lehetnek fágok nem zsugorodó burkolattal, fágok rövid folyamatokkal, fágok folyamatanalóggal és fágok folyamat nélkül.
Fágellenállás: A fágok 50-60°C-os hőmérsékletet tűrik. Fagyásnak ellenáll, 70 °C-on elpusztul. Nem hatnak rájuk olyan mérgek, mint a cianid, fluor, valamint a kloroform és a fenol. A fágok jól megőrződnek lezárt ampullákban, de forralással, savakkal és UV-besugárzással elpusztíthatók.
A fágok és a mikrobiális sejt kölcsönhatásának mechanizmusa:
A kölcsönhatás szerint virulens és mérsékelt égövi fágokat különböztetünk meg.
Virulens fágok – bejutnak a baktériumsejtbe, szaporodnak és a baktériumok lízisét okozzák.
A folyamattal és összehúzódó burkolattal rendelkező fágok számára számos funkció létezik:
Ezek a fágok a folyamat fibrillumai segítségével adszorbeálódnak a baktériumsejt felszínén a megfelelő receptorok jelenlétében. Ezután az ATP-áz enzim aktiválódik, ami a caudatus folyamat hüvelyének összehúzódásához és egy üreges rúd bejutásához vezet a sejtbe. Egy enzim, a lizozim, részt vesz a sejtfalak átszúrásának folyamatában.
A fág DNS áthalad a kinövés üreges szárán, és befecskendezik a sejtbe. A kapszid és a folyamat a sejtfelszínen marad. Ezután a fágfehérje és a nukleinsav szaporodik a sejten belül. Következő szintérett fágrészecskék összeállításából és képződéséből áll. Utolsó szakasz: sejtlízis és az érett fágrészecskék felszabadulása belőle. A lízis belülről is megtörténhet - a sejtfal felszakad, és érett fágok szabadulnak fel külső környezetés kívülről - a fágok sok lyukat képeznek a sejtfalon, amelyeken keresztül a sejt tartalma kiáramlik; ilyen lízissel a fág nem szaporodik.
Mérsékelt fágok - ne lizálják a populáció összes sejtjét, egyes sejtekkel szimbiózisba lépnek, aminek eredményeként a fág DNS beépül a sejtkromoszómába. Ebben az esetben a fág genomját profágnak nevezik.
A profág a sejtkromoszóma részévé válik, és szaporodása során szinkronban replikálódik a sejt genommal anélkül, hogy lízist okozna, és továbbadódik az utódoknak.
A mikrobiális sejt és a profág szimbiózisának jelenségét lizogénnek nevezzük.
És a profágot tartalmazó baktériumok tenyészete lizogén, ez a név tükrözi a profág azon képességét, hogy spontán vagy tényezők hatására környezet beköltöznek a citoplazmába, és úgy viselkednek, mint egy virulens fág lizáló baktérium. Virulens formába való áttéréskor egy mérsékelt égövi fág képes befogni egy baktériumsejt kromoszómájának egy részét, és líziskor átkerülhet egy másikba.
A hatás spektruma szerint a fágokat a következőkre osztják:
1. Polivalens - lízissel rokon baktériumok (a Salmonella fág csak a Salmonellát lizálja).
2. Fajok (monofágok) - csak egy faj lizáló baktériumai.
3. Típusspecifikus - a baktériumok fajon belüli egyedi változatainak szelektív lizálása (Staphylococcus aureus kórokozó - 33 készlet).
Gyakorlati használat:
A fágkészítmények a fertőzések kezelésére, megelőzésére és diagnosztizálására szolgálnak. A fágok hatása szigorú specifitásukon alapul, termelő törzseket és megfelelő baktériumtenyészeteket használnak a fágkészítmény előállításához.
Felszabadulási formák: folyékony, száraz, tabletták, aeroszolok, kúpok formájában. Parenterálisan, enterálisan és lokálisan kerül a szervezetbe. Terápiás és profilaktikus célokra használják különféle betegségek(dizentéria, kolera, különféle gennyes-gyulladásos betegségek).
Fágdiagnosztika: a diagnosztika elve a teszttenyészetek együttes tenyésztése ismert és ismeretlen fágokkal, bakteriális sejt lízis jelenlétében pozitív eredménynek számít. A lízis folyékony és szilárd felületen is megfigyelhető tápközeg. Folyékony táptalajokon a baktériumszuszpenzió kitisztulása jelenik meg, a sűrűeken pedig növekedési hiányos területek képződnek.
Fágtipizálás: egy faj típusváltozatának meghatározása típusfágkészlet segítségével. Tífusz fágok, koleradiagnosztikai fágok, szalmonella fágok és dysentericus fágok termelődnek. A fágtipizálás szükséges a betegség epidemiológiai elemzése során, valamint a fertőzés forrásának és útvonalának megállapításához. Egy fág kimutatásával a megfelelő mikroorganizmusok tartalmát ítéljük meg.
A baktériumokat pusztító (lítikus) hatásuk miatt a fágok terápiás és profilaktikus célokra alkalmazhatók különféle betegségekben (dizentéria, kolera, különféle pyoinflammatorikus betegségek stb.). Szabványos fágkészleteket, beleértve a nemzetközieket is, számos betegség (kolera, tífusz szalmonellózis, diftéria, staphylococcus és egyéb betegségek). Bakteriofágokat is használnak génmanipuláció mint DNS-szegmenseket átvivő vektorok, a baktériumok közötti természetes gének bizonyos fágok segítségével (transzdukció) is lehetségesek. Általában az ilyen betegeknek antibiotikumokat írnak fel. De annak a ténynek köszönhetően, hogy a folyamatosan mutáló baktériumok rezisztenciát szereznek az antibiotikumokkal szemben, hatékonyságuk csökken utóbbi évek legyengült. A kutatók figyelmét a bakteriofágok – a baktériumokat felfaló vírusok – keltették fel. Ellentétben az antibiotikumokkal, amelyek elpusztítják mind a káros ill egészséges mikroflóra szervezet, a bakteriofágok szelektívek, csak patogén baktériumok. Hogyan működnek a bakteriofágok a szervezetben? Csak bizonyos sejtekbe hatolnak be, és kölcsönhatásba lépnek a DNS-ükkel, lizogén vagy litikus hatást hozva létre. A lítikus típusú mikrobákra hatva a bakteriofágok elpusztítják azokat, ami lehetővé teszi számukra a gyors szaporodást. A lizogén típus a fág genomjának behatolása a bakteriális genomba, szintézise és további átmenet egyik generációról a másikra. A bakteriofágokról szóló információk több mint egy évszázaddal ezelőtt jelentek meg, amikor a Staphylococcus aureus kezelésére használták őket. Jelenleg széles körben használják bél-, staphylococcus-, streptococcus-, tífusz- és sok más fertőzés megelőzésére és kezelésére. modern orvosság olyan módszereket keres, amelyek nem élő bakteriofágokat használnak, hanem olyan enzimeket, amelyek lízis útján hatnak a patogén baktériumokra. Alkalmazásuk lehet orr- vagy szájspray, fogkrém, élelmiszer, élelmiszer-adalékok. A bakteriofágok használatának hatékonysága az ellenjavallatok és szövődmények hiányában, más gyógyszerekkel való kompatibilitásban rejlik, aktív befolyás antibiotikum-rezisztens mikrobák számára. Ezeknek a tulajdonságoknak köszönhetően a bakteriofágokat a jövő gyógyszereiként értékelik sikeres küzdelem fertőzésekkel.
A fágterápia legfontosabb előnyei a nagy érzékenység patogén mikroflóra a bakteriofághoz, a bakteriofág kis dózisainak kezdeti használatának lehetősége, a hagyományos antibiotikum-terápia minden típusával való kompatibilitás, a fágprofilaxis és a fágterápia ellenjavallatának hiánya. Megállapítást nyert, hogy a természetben nincsenek olyan mikroorganizmusok, amelyek abszolút rezisztensek a bakteriofágokkal szemben. Fontos, hogy a bakteriofágok szaporodása csak az arra érzékeny baktériumok jelenlétében lehetséges. A fertőző elváltozás fókuszában lévő utolsó mikrobasejt elpusztulása után leállítja azt erőteljes tevékenységés teljesen kiürül a szervezetből.
A megfigyelt csökkenés miatt terápiás hatás bakteriofágok antibiotikus készítményeit használják klinikai gyakorlat az antibiotikumok alternatívájaként és az utóbbiakkal kombinálva. A bakteriofág készítmények hatékonyságukat tekintve nem rosszabbak az antibakteriális készítményeknél, stimulálják a specifikus és a helyi tényezőket. nem specifikus immunitásés nem okoznak mellékhatású toxikus és allergiás reakciókat. A bakteriofágokat szájon át adják be, és sebek öblítésére, kiürített üregekbe - hasi, mellhártya, orrmelléküreg, középfül, tályogok, sebek, méh, hólyag - történő injekciózásra is használják. Orális és aeroszolos alkalmazás esetén, valamint a nyálkahártyák felületére alkalmazva a bakteriofágok behatolnak a vérbe és a nyirokba, és a vesén keresztül ürülnek ki, fertőtlenítve a húgyutakat.
Jelenleg a sebészet, az urológia, a szemészet és a traumatológia területén újult meg az érdeklődés a fágterápia iránt.
A bakteriofágok terápiás és profilaktikus készítményei poliklonális, virulens, széles hatású bakteriofágokból állnak, amelyek az antibiotikumokkal szemben rezisztens baktériumok ellen is aktívak. Folyékony formában, saválló bevonattal ellátott tablettákban, kúpok, kenőcsök, linimentek formájában készülnek.
A bakteriofág készítmények a bakteriális fagolizátumok steril szűrlete, szájon át, helyileg sebek és nyálkahártyák öblítésére, a méh üregébe, hólyagba, fülbe történő bejuttatásra, orrmelléküregek, valamint a kiürített üregekben - hasi, pleurális, valamint a váladék eltávolítása után a tályogok üregében is.
A bakteriofágok gyorsan behatolnak a vérbe és a nyirokba, és a vesén keresztül a vizelettel ürülnek ki. Vizsgálataink szerint 30 ml bakteriofág lenyelése után 2 óra elteltével a vizeletben fágrészecskék találhatók, maximális koncentrációjuk a vizeletben a lenyelés után 6-8 órával érhető el.
A terápiás és profilaktikus bakteriofágok aktivitása a gennyes-szeptikus és enterális betegségek kórokozói ellen meglehetősen magas - 72% és 90% között van, beleértve a kórházi eredetű törzseket is, amelyeket többszörös antibiotikum-rezisztencia jellemez. A bakteriofág készítmények megfelelőségét a kórokozók korszerű atiológiai szerkezetével úgy érik el, hogy a fágfajok megújulása és a bakteriális bélyegek termelődése miatt folyamatosan alkalmazkodnak a keringő törzsekhez. Ez a tulajdonság megkülönbözteti a fágokat a többitől antimikrobiális szerek- antibiotikumok, eubiotikumok vagy vakcinák, ahol a termelő törzsek vagy termelő törzsek, illetve a szintetizált anyag semmilyen módosításnak nincs kitéve. A bakteriofág készítmények ilyen plaszticitása biztosítja a kórokozók elsődleges fág rezisztenciájának fennmaradását.
A bakteriofág készítmények előnyei
A bakteriofág készítmények előnyei közé tartozik a szűk specifikus hatás, amely az antibiotikumokkal ellentétben nem gátolja a normál mikroflórát. A staphylococcus bakteriofág bifidobaktériumokra kifejtett serkentő hatása bizonyított - lényeges komponens bél mikrobiocenózis. Bakteriofágok alkalmazása kezelésre fertőző betegségek serkenti a specifikus és nem specifikus immunitás tényezőit, ami különösen hatékony a krónikus betegségek kezelésében gyulladásos betegségek immunszuppresszív állapotok hátterében, bakteriohordozó.
Kísérleti munka és hosszú klinikai megfigyelések bebizonyosodott, hogy a bakteriofágok terápiás és profilaktikus készítményeivel az antibiotikum-rezisztencia és toxigenitás plazmidjai nem továbbíthatók, mivel ezek virulens bakteriofágok poliklonális komplexei.
Oroszországban, a FÁK-országokban, Lengyelországban, Franciaországban, Spanyolországban a bakteriofágokat széles körben használják az orvostudományban és az állatgyógyászatban. Felgyülemlett nagyszerű tapasztalat bakteriofágok alkalmazása bélfertőzések kezelésében: a fágterápia magas klinikai hatékonysága akut és krónikus vérhas, szalmonellózis, a hordozók higiéniájával együtt. A vérhas, tífusz és szalmonella bakteriofágok profilaktikus alkalmazásának magas epidemiológiai hatékonysága bizonyított. ipari vállalkozások, az előfordulási arány 3-6-szoros csökkenését állapították meg. A bakteriofágok alkalmazása jó eredményeket mutatott az opportunista baktériumok által okozott betegségek, dysbacteriosis, gennyes elváltozások bőr, fül-orr-gégészet - szervek, mozgásszervi rendszer, urogenitális rendszer, a keringési és légzőszervek rendszerei, beleértve az újszülötteket és az első életévben élő gyermekeket is.
A fágkészítményekkel történő kezelés hatékonyságát biztosító fontos feltétel a kórokozó bizonyos fágérzékenysége.
Az Urológiai Kutatóintézetben szerzett fágterápia hosszú távú tapasztalata egyértelmű; Az NPO Biofag urológiai klinikáján keringő kórházi törzsekhez a kereskedelmi forgalomban kapható bakteriofágok adaptációja eredményeként a törzsek fágérzékenysége 15%-kal nőtt, és a legmodernebb külföldi antibiotikumokkal szembeni érzékenységi szintet vagy azt meghaladó volt. A háttérben hosszú távú használat bakteriofágok a kórházban között kórházi törzsek fág rezisztencia kialakulása nem volt megfigyelhető, míg az antibiotikumokkal szembeni rezisztencia csökkent. A fágterápia klinikai hatékonyságát az esetek 92%-ában figyelték meg, gyakran meghaladva az antibiotikum terápia eredményeit. Ellenjavallatok és szövődmények hiánya a bakteriofág készítmények használatánál, más gyógyszerekkel kombinált alkalmazásuk lehetősége gyógyszerek, beleértve az antibiotikumokat is, az antibiotikum-rezisztens törzsek elleni aktivitás és a bakteriofágok adaptációja modern kórokozók- mindez lehetővé teszi a bakteriofág készítmények értékelését, mint a gennyes-szeptikus és enterális fertőzések sürgősségi kezelésének rendkívül hatékony és ígéretes eszközét. A fágok, ezek a "természetes rendek" azonban nemcsak kezelésre, hanem fertőző betegségek megelőzésére is használhatók. Felírhatók terhes nőknek, szoptató anyáknak és bármilyen korú gyermeknek, beleértve a koraszülötteket is. Sikeres alkalmazásuk fő feltétele az izolált tenyészet megfelelő fágra való érzékenységének vizsgálata. Elképesztő mintát figyeltek meg: az antibiotikumokkal ellentétben a mikroorganizmusok klinikai törzseinek bakteriofágokkal szembeni érzékenysége stabil és növekszik, ami a dúsítással magyarázható. gyógyászati készítmények a fágok új fajai. Az orvosi alkalmazások mellett a bakteriofágokat széles körben használják az állatgyógyászatban is; különösen hatékony staphylococcus bakteriofág tehenek tőgygyulladásának kezelésében. Betegségek esetén a bakteriofág készítményeket szájon át írják fel belső szervek vagy lokálisan, közvetlenül a lézión. A fág hatása már a bevezetése után 2-4 órával megnyilvánul (ami különösen fontos az intenzív terápiában). A bakteriofágok behatolnak a vérbe, a nyirokba és a vesén keresztül ürülnek ki, fertőtlenítve a húgyutakat.
Így a bakteriofágok a következőket használják:
Az állatgyógyászatban:
megelőzés és kezelés bakteriális betegségek madarak és állatok;
a szem nyálkahártyájának, szájüregének gennyes-gyulladásos betegségeinek kezelése;
égési sérülések, sebek, sebészeti beavatkozások gennyes-gyulladásos szövődményeinek megelőzése;
A géntechnológiában:
transzdukcióhoz - természetes átvitel baktériumok közötti gének;
mint vektorok, amelyek átviszik a DNS szakaszait;
fágok használatával lehetőség van a gazda DNS genomjában irányított változások létrehozására;
Az élelmiszeriparban:
a tömeges fágtartalmú szerek már fogyasztásra kész hús- és baromfitermékeket dolgoznak fel;
a bakteriofágokat élelmiszeripari termékek előállításához használják húsból, baromfihúsból, sajtokból, növényi termékekből stb.;
CM. ZAKHARENKO, az orvostudományok kandidátusa, egyetemi docens, Katonai orvosi akadémiaőket. CM. Kirov, Szentpétervár
A bakteriofágok egyedülálló mikroorganizmusok, amelyek alapján a terápiás és profilaktikus készítmények speciális csoportját hozták létre tulajdonságaikat és jellemzőit tekintve. Mögöttes tetteik természetesek élettani mechanizmusok a fágok és a baktériumok közötti kölcsönhatások lehetővé teszik maguknak a bakteriofágoknak és a baktériumok végtelen sokféleségének előrejelzését. lehetséges módjai alkalmazásaik. A bakteriofág kollekciók bővülésével kétségtelenül új célkórokozók jelennek meg, és bővül azoknak a betegségeknek a köre, amelyekben a fágok monoterápiaként és komplex kezelési rendek részeként egyaránt alkalmazhatók.
Igen, használd polivalens piobakteriofág A fertőzött hasnyálmirigy-nekrózis kezelésében alkalmazott szextafág (E. A. Wagner akadémikusról elnevezett Perm Állami Orvosi Akadémia) lehetővé tette a homeosztázis fő paramétereinek, valamint a betegek szerveinek és rendszereinek funkcióinak gyors helyreállítását. A számban is jelentős csökkenés következett be posztoperatív szövődményekés halálozások: a standard terápiával kezelt betegek csoportjában a mortalitás 100%, míg a BF-el kezelt csoportban - 16,6%.
A BP-készítmények ártalmatlansága és reaktogenitása miatt felhasználhatók gyermekorvosi gyakorlat, beleértve az újszülötteket is. A Nyizsnyij Novgorod Regionális Gyermekosztály tapasztalatai klinikai kórház, ahol a járványügyi helyzet szövődményes időszakában a szokásos járványellenes intézkedések mellett BP - Intesti-bacteriophage és BP Pseucfomonas aeruginosa került alkalmazásra. A Pseudomonas aeruginosa etiológiájú nozokomiális fertőzések előfordulásának 11-szeres csökkenése mutatkozott magas hatásfok BF alkalmazások. A BF-készítmények diszbakteriózis és rendellenességek kezelésére egyaránt felírhatók emésztőrendszer valamint a gyomor-bél traktus nyálkahártyájának opportunista baktériumok általi megtelepedésének megakadályozására. A BF többkomponensű készítményei ideálisak a gyomor-bélrendszeri zavarok első jeleinek azonnali enyhítésére.
A cég a mai napig tervezi egész sor a terápiás és profilaktikus bakteriofágok fejlesztésének és előállításának kiemelt területei, amelyek korrelálnak az újonnan megjelenő globális trendekkel. Új készítményeket készítenek és vezetnek be: kifejlesztették a fogazat és enterobaktériumok elleni BF-et, folyamatban van a Helicobacter pylori elleni fágkészítmény létrehozása.
Ezeknek a gyógyszereknek egyetlen gyártója az NPO Microgen – derül ki a tudományos osztályvezető-helyettes beszámolójából. innovatív fejlesztés Alla Lobastova, évente több mint 2 millió csomagot gyárt. Sajnos sok orvos elképzelése a bakteriofágokról messze nem objektív. Kevesen tudják, hogy egyazon kórokozó ellen aktív bakteriofágok különböző családokba tartozhatnak, eltérő életciklusúak stb. A P. aeruginosa bakteriofágok például a Myoviridae, Podoviridae, Siphoviridae családokba tartoznak. életciklus vagy mérsékelten. Ugyanazon kórokozó különböző törzsei eltérően érzékenyek a bakteriofágokra. A legtöbb szakértő tud (hallott, valaki használt) a folyadék és a tabletta létezéséről dózisforma bakteriofágok terápiás és profilaktikus készítményei. A hatókörük azonban jóval szélesebb, ami feltétlen előnyöknek tudható be, különösen sokféle beadási móddal kombinálva (szájon át történő beadás, beöntés, alkalmazás, sebek és nyálkahártyák öblítése, sebüregekbe való bejuttatás stb.). Nak nek nyilvánvaló előnyök hagyományosan bakteriofágokra hivatkoznak konkrét hatás meglehetősen korlátozott baktériumpopuláción, korlátozott ideig fennálló (amíg a mikroorganizmusok célpopulációja el nem tűnik), ilyen mellékhatások mint mérgező és allergiás reakciók, dysbiotikus reakciók stb. Ezek a gyógyszerek különféle esetekben alkalmazhatók korcsoportokés terhesség alatt. Maguk a bakteriofágok nem jelentős allergének. A bakteriofág készítményekkel szembeni intolerancia esetei többnyire a tápközeg összetevőire adott reakcióhoz kapcsolódnak. Ennek a gyógyszercsoportnak minden nagyobb gyártója a felhasznált komponensek maximális minőségére törekszik, ami csökkenti az ilyen reakciók valószínűségét. A növekvő antibiotikum-rezisztencia összefüggésében egyes szerzők azt javasolják, hogy a bakteriofágokat tekintsék az antibiotikumok legjobb alternatívájának. A bakteriofágok terápiás és profilaktikus készítményei speciálisan kiválasztott kombinációk koktéljai (nagyon virulens poliklonális komplexek bakteriális vírusok, kifejezetten a leggyakoribb kórokozócsoportok ellen válogatva bakteriális fertőzések) a gyártó fággyűjteményei alapján. A Szövetségi Állami Egységes Vállalat NPO Microgen fiókjai Ufában, Permben és Nyizsnyij Novgorod – modern központok ilyen gyógyszerek előállítása. Személyre szabott létrehozás képessége patogén mikroorganizmusok A bakteriofágok terápiás és profilaktikus készítményei a másik nagy előnye ennek a készítménycsoportnak. Az antimikrobiális gyógyszerekkel szembeni bakteriális rezisztencia növekedése és a modern fertőző betegségek gyakran előforduló polietiológiája kombinált antibiotikum terápiát igényel (két, három és esetenként több antimikrobiális gyógyszer). Kiválasztáshoz hatékony rendszer antibiotikum-terápia esetén a baktériumoknak a gyógyszerrel szembeni tényleges érzékenységén túl figyelembe kell venni nagy szám tényezőket. A fágterápiának ebből a szempontból is vannak bizonyos előnyei. Egyrészt a bakteriofágok kombinációjának alkalmazása nem jár együtt egymással való kölcsönhatásukkal, és nem vezet változáshoz az alkalmazási sémákban. A terápiás bakteriofágok meglévő készletén belül számos jól bevált kombináció létezik - coliproteus bakteriofág, polivalens piobakteriofág, intesti-bakteriofág. Másrészt a baktériumok nem közös mechanizmusok antibiotikumokkal és fágokkal szembeni rezisztencia, ezért mind akkor használhatók, ha a kórokozó rezisztens az egyik gyógyszerrel szemben, mind az "antibiotikum + bakteriofág" kombinációjában. Ez a kombináció különösen hatékony a mikrobiális biofilmek elpusztítására. A kísérlet meggyőzően mutatja azt kombinált alkalmazás vas-antagonisták és bakteriofágok megzavarhatják a biofilmek képződését Klebsiella pneumoniae. Ugyanakkor mind a mikrobiális populációk számának jelentős csökkenése, mind a "fiatal" sejtek számának csökkenése figyelhető meg. Még egy fontos jellemzője A bakteriofágok hatása olyan jelenség, mint az apoptózis indukciója. Egyes E. coli törzsek olyan génekkel rendelkeznek, amelyek a T4 bakteriofág bejuttatása után sejthalált okoznak. Így a T4 fág késői génjeinek expressziójára válaszul a lit gén (olyan proteázt kódol, amely elpusztítja a fehérjeszintézishez szükséges EF-Tu elongációs faktort) blokkolja az összes sejtfehérje szintézisét. A prrC gén egy nukleázt kódol, amely a lizin tRNS-t hasítja. A nukleázt a T4 fág stp gén terméke aktiválja. A T4 fággal fertőzött sejtekben a rex gének (amelyek a fág genomjához tartoznak és lizogén sejtekben expresszálódnak) ioncsatornák képződését okozzák, ami a sejtek létfontosságú ionjainak elvesztéséhez, majd halálához vezet. Maga a T4 fág képes megakadályozni a sejtpusztulást azáltal, hogy fehérjéivel, az rII gének termékeivel lezárja a csatornákat. Az antibiotikumokkal szembeni bakteriális rezisztencia kialakulása esetén új lehetőségeket kell keresni az aktív molekula vagy alapvetően új anyagok módosítására. Sajnos az elmúlt években az új antibiotikumok bevezetésének üteme jelentősen lelassult. A bakteriofágok helyzete alapvetően más. A nagy gyártók kollekciói több tucat kész bakteriofág törzset tartalmaznak, és folyamatosan új aktív fágokkal bővülnek. Az izolált kórokozók bakteriofágokkal szembeni érzékenységének folyamatos ellenőrzésének köszönhetően a gyártók módosítják a régiókba szállított fágösszetételeket. Az adaptált bakteriofágoknak köszönhetően kiküszöbölhető az antibiotikum-rezisztens törzsek által okozott nozokomiális fertőzések kitörése. 
Nál nél szájon át történő bevitel A bakteriofágok gyorsan elérik a fertőzés lokalizációjának gócát: gennyes-gyulladásos betegek szájon át történő bevétele esetén a fágok egy óra múlva a véráramba kerülnek, 1-1,5 óra múlva a bronchopulmonalis váladékból és az égési sebek felszínéről, 2 óra múlva kimutathatók. óra - vizeletből, valamint traumás agysérülésben szenvedő betegek cerebrospinális folyadékából.
A bakteriofágok tehát egyedülálló mikroorganizmusok, amelyek alapján a terápiás és profilaktikus készítmények speciális csoportját hozták létre tulajdonságaik és jellemzőik tekintetében. A fágok és baktériumok közötti kölcsönhatás természetes fiziológiai mechanizmusai, amelyek működésük hátterében állnak, lehetővé teszik mindkét bakteriofág végtelen sokféleségének előrejelzését, valamint felhasználásuk lehetséges módjait. A bakteriofág kollekciók bővülésével kétségtelenül új célkórokozók jelennek meg, és bővül azoknak a betegségeknek a köre, amelyekben a fágok monoterápiaként és komplex kezelési rendek részeként egyaránt alkalmazhatók. A fágterápia jövőbeli sorsának modern felfogásának mind a hatásuk magas specifikusságán, mind a fágterápia összes szabályának szigorú betartásán kell alapulnia. A bakteriofágok szembeállítása az etiotróp terápia bármely eszközével téves.
Fágok gyakorlati alkalmazása. A bakteriofágokat a fertőzések laboratóriumi diagnosztikájában alkalmazzák a baktériumok intraspecifikus azonosítása során, azaz a fagovár (fág típus) meghatározása során. Ehhez a fágtipizálási módszert alkalmazzák, amely a fágok hatásának szigorú specifikusságán alapul: különböző diagnosztikai típus-specifikus fágok cseppjeit csészébe csepegtetik sűrű tápközeggel, amelyet tiszta kultúra "gyepével" oltottak be. a kórokozótól. A baktérium fág fágját a lízist okozó fág típusa határozza meg (steril folt, "plakk" vagy "negatív telep", fág kialakulása). A fágtipizálási technikát a fertőzés forrásának és terjedési módjainak azonosítására használják (epidemiológiai jelölés). Az azonos fagovarba tartozó baktériumok különböző betegekből történő izolálása fertőzésük közös forrását jelzi.
A fágokat számos bakteriális fertőzés kezelésére és megelőzésére is használják. Tífusz, szalmonella, vérhas, pseudomonas, staphylococcus, streptococcus fágokat, ill. kombinált készítmények(koliprotein, piobakteriofágok stb.). A bakteriofágokat a javallatok szerint orálisan, parenterálisan vagy helyileg írják fel folyadék, tabletta, kúp vagy aeroszol formájában.
A bakteriofágokat széles körben használják a génsebészetben és a biotechnológiában rekombináns DNS kinyerésére szolgáló vektorként.
A gyakorlatban használt bakteriofág készítmények a megfelelő mikrobák fág által lizált húsleves tenyészetének szűrletei, amelyek élő fágrészecskéket, valamint azok lízise során a baktériumsejtekből felszabaduló, oldott bakteriális antigéneket tartalmaznak. A kapott készítmény - egy folyékony bakteriofág kell kinéznie egy teljesen tiszta folyadék sárga szín kisebb vagy nagyobb intenzitású.
Terápiás és profilaktikus célokra a fágok saválló bevonattal ellátott tabletták formájában állíthatók elő. A tablettázott száraz fág stabilabb a tárolás során és kényelmesebb a használata. Egy tabletta száraz bakteriofág 20-25 ml folyékony készítménynek felel meg. A száraz és folyékony készítmény eltarthatósága 1 év. Folyékony bakteriofág+ 2 +10 C hőmérsékleten, szárazon - +1 C-nál nem magasabb hőmérsékleten kell tárolni, de hűtőszekrényben és negatív hőmérsékleten is tárolható.
A szájon át bevett bakteriofág 5-7 napig marad a szervezetben. A bakteriofág bevételét általában nem kíséri semmilyen reakció vagy szövődmény. A felvételnek nincs ellenjavallata. Használják öblítések, öblítések, testápolók, tamponok, injekciók formájában, valamint befecskendezik az üregekbe - hasi, pleurális, ízületi és hólyag, a kórokozó helyétől függően.
A diagnosztikai fágokat folyékony és száraz formában is előállítják ampullákban.A munka megkezdése előtt a száraz bakteriofágot felhígítják. Ha a titer, tr, DRT (working titer dose) fel van tüntetve az ampullákon, akkor a fág lizability tesztben (Otto módszer) a baktériumok azonosítására, ha a fág típus feltüntetésre kerül, akkor a fág tipizálásnál - a forrás meghatározására. fertőzéstől.
A bakteriofág hatása mikrobiális tenyészetre folyékony közegben és sűrű táptalajban
Ottó módszere (hulló csepp)
Készítsen sűrű vetési pázsitot a vizsgált növényből. A vetés után 5-10 perccel folyékony diagnosztikai fágot juttatunk a táptalaj szárított felületére. Az edényt kissé megdöntjük, hogy a fágcsepp szétterüljön az agar felületén. A csészét termosztátba helyezzük 18-24 órára. Az eredményt elszámolják teljes hiánya tenyészet növekedése a fágcseppek alkalmazásának helyén.
Kísérletezzen folyékony tápközegen
A vizsgált tenyészetet folyékony tápközeggel két kémcsőbe kell vetni. A diagnosztikai bakteriofágot hurok formájában egy kémcsőbe ("O") adják. 18-20 óra elteltével egy olyan kémcsőben, ahol nem adták hozzá a bakteriofágot ("K"), a leves erős homályosodása figyelhető meg - a beoltott kultúra nőtt. A kémcsőben lévő leves, ahová a bakteriofágot adtuk, átlátszó maradt a hatása alatt lévő tenyészet lízise miatt.
A baktériumok fágtipizálása
A hatásspektrum szerint a következő bakteriofágokat különböztetjük meg: polivalens, lizáló rokon típusú baktériumok; monovalens, lizáló baktériumok egy bizonyos fajta; tipikus, lizáló egyes baktériumtípusok (variánsok).
Például a patogén staphylococcus egy törzsét többféle fág lizálhatja, így az összes tipikus fág (24) és törzs patogén staphylococcusok 4 csoportba csoportosítva.
A fágtipizálási módszer rendelkezik nagyon fontos epidemiológiai kutatásra, mivel lehetővé teszi a kórokozók forrásának és terjedési módjainak azonosítását. Ebből a célból meghatározzák a kóros anyagból izolált fagovárt. tiszta kultúra sűrű táptalajokon tipikus diagnosztikai fágok segítségével.
A mikroorganizmus tenyészet fagovarját a lízist okozó fág típusa határozza meg, az azonos fagovarba tartozó baktériumok különböző alanyokból történő izolálása jelzi a fertőzés forrását.
