Badania bakteriologiczne w czerwonce. Diagnostyka laboratoryjna czerwonki, pełzakowicy i balantidozy

Czerwonka.

Czerwonka - infekcja, charakteryzujący się ogólnym zatruciem organizmu, luźnymi stolcami i swoistą zmianą błony śluzowej jelita grubego. Jest to jedna z najczęstszych ostrych chorób jelit na świecie. Choroba znana jest od czasów starożytnych pod nazwą „krwawa biegunka”, ale jej charakter okazał się inny. W 1875 r Rosyjski naukowiec Lesh wyizolował amebę od pacjenta z krwawą biegunką Entamoeba histolytica, w ciągu następnych 15 lat ustanowiono niezależność tej choroby, która zachowała nazwę amebiaza. Czynnikami sprawczymi czerwonki właściwej jest duża grupa biologicznie podobnych bakterii zjednoczonych w rodzaju Shigelta. Patogen odkryto po raz pierwszy w 1888 roku. A. Chantemes i Vidal; w 1891 został opisany przez A.V. Grigorieva, a w 1898 roku. K. Shiga wykorzystując surowicę otrzymaną od pacjenta zidentyfikował patogen u 34 pacjentów z czerwonką, ostatecznie dowodząc etiologicznej roli tej bakterii. Jednak w kolejnych latach odkryto inne patogeny czerwonki: w 1900 roku. - S. Flexner, w 1915 r. - K. Sonne, w 1917 r. - K. Stutzer i K. Schmitz, w 1932 r. - J. Boyd, w 1934 r. - D. Duży, w 1943 r. - A. Saks.

Obecnie rodzaj Shigella obejmuje ponad 40 serotypów. Wszystkie są krótkimi nieruchomymi pałeczkami Gram-ujemnymi, które nie tworzą zarodników i kapsułek, które (dobrze rosną na zwykłych pożywki nie rosną na podłożu, którego jedynym źródłem węgla jest cytrynian; nie tworzą H2S, nie zawierają ureazy; reakcja Vogesa-Proskauera jest negatywna; glukoza i niektóre inne węglowodany są fermentowane do postaci kwasu bez gazu (z wyjątkiem niektórych biotypów) Shigella flexneri: S.manchester oraz ewcastle); z reguły nie fermentują laktozy (z wyjątkiem Shigella Sonne), adonitu, inozytolu, nie upłynniają żelatyny, zwykle nie tworzą katalazy, nie posiadają dekarboksylazy lizynowej i deaminazy fenyloalaniny. Zawartość G+C w DNA wynosi 49-53% mol. Shigella to fakultatywne beztlenowce, optymalna temperatura wzrostu to 37 ° C, nie rosną powyżej 45 ° C, optymalne pH pożywki to 6,7-7,2. Kolonie na gęstych podłożach są okrągłe, wypukłe, prześwitujące, w przypadku asocjacji tworzą się szorstkie kolonie w kształcie litery R. Wzrost na BCH w postaci jednolitego zmętnienia, szorstkie formy tworzą osad. Świeżo wyizolowane kultury Shigella Sonne J4HO tworzą kolonie dwóch typów: małe okrągłe wypukłe (faza I), duże płaskie (faza 2). Charakter kolonii zależy od obecności (faza I) lub nieobecności (faza II) plazmidu z mm 120 MD, co również determinuje zjadliwość Shigella Sonne.

U Shigelli znaleziono antygeny O o różnej specyficzności: wspólne dla rodziny enterobakterie, rodzajowe, gatunkowe, grupowe i specyficzne dla typu, a także antygeny K; Nie mają antygenów H.

Klasyfikacja uwzględnia tylko antygeny O specyficzne dla grupy i typu. Zgodnie z tymi cechami, Shigella podzielona na 4 podgrupy lub 4 gatunki i obejmuje 44 serotypy. W podgrupie A (gatunek Shigella dyzenteriae) Zawiera Shigella nie fermentujący mannitol. Gatunek obejmuje 12 serotypów (1-12). Każdy stereotyp ma swój specyficzny typ antygenu; związki antygenowe między serotypami, a także z innymi typami Shigella, są słabo wyrażane. Do podgrupy B (typ Shigella flexneri) obejmują Shigella, zwykle fermentujący mannitol. Shigella tego gatunku są ze sobą serologicznie spokrewnione: zawierają antygeny specyficzne dla typu (I-VI), według których dzielą się na serotypy (1-6) i antygeny grupowe, które występują w różnych składach w każdym serotypie i zgodnie z którymi serotypy dzielą się na podserotypy. Ponadto gatunek ten obejmuje dwa warianty antygenowe - X i Y, które nie mają typowych antygenów, różnią się zestawami antygenów grupowych. Serotyp S.flexneri 6 nie ma podserotypów, ale jest podzielony na 3 typy biochemiczne zgodnie z charakterystyką fermentacji glukozy, mannitolu i dulcytu.

Do podgrupy C (rodzaj Shlgella boydll) obejmują Shigella, zwykle fermentujący mannitol. Członkowie grupy różnią się od siebie serologicznie. Związki antygenowe w obrębie gatunku są słabo wyrażone. Gatunek obejmuje 18 serotypów (1-18), z których każdy ma swój własny antygen typu głównego.

W podgrupie D (gatunek Sonel Shlgella obejmowała Shigella, zwykle fermentująca mannitol i zdolna do powolnej (po 24 godzinach inkubacji i później) fermentacji laktozy i sacharozy. Pogląd S. sonnei obejmuje jeden serotyp, jednak kolonie fazy I i II mają swoje własne antygeny specyficzne dla typu. Zaproponowano dwie metody klasyfikacji wewnątrzgatunkowej Shigella Sonne'a:

1) podział na 14 biochemicznych typów i podtypów według ich zdolności do fermentacji maltozy, ramnozy i ksylozy;

2) podział na typy fagów według wrażliwości na zestaw odpowiednich fagów.

Te metody typowania mają głównie znaczenie epidemiologiczne. Ponadto shigella Sonne'a i shigella Flexnera są poddawane typowaniu w tym samym celu dzięki zdolności do syntezy swoistych kolicyn (kolicynogenotypowanie) oraz wrażliwości na znane kolicyny (kolicynotypowanie). Aby określić rodzaj kolicyny produkowanej przez Shigellę, J. Abbott i R. Shannon zaproponowali zestawy typowych i wskaźnikowych szczepów Shigella oraz określić wrażliwość Shigelli na znane typy kolicyny wykorzystują zestaw referencyjnych szczepów kolicynogennych P. Frederick.

opór. Shigella mają dość wysoką odporność na czynniki środowiskowe. Przeżywają na tkaninie bawełnianej i papierze do 30-36 dni, w wysuszonym kale - do 4-5 miesięcy, w glebie - do 3-4 miesięcy, w wodzie - od 0,5 do 3 miesięcy, na owocach i warzywach - do do 2 jednostek, w mleku i produktach mlecznych - do kilku tygodni; w temperaturze 60 °C umierają w ciągu 15-20 minut.

Wrażliwy na roztwory chloraminy, aktywny chlor i inne środki dezynfekujące.

czynniki chorobotwórczości. Najważniejsze właściwość biologiczna Shigella, która determinuje ich patogenność - zdolność do inwazji komórek nabłonkowych, namnażania się w nich i powodowania ich śmierci. Efekt ten można wykryć za pomocą testu rogówkowo-spojówkowego (wprowadzenie jednej pętli kultury Shigella (2-3 miliardy bakterii) pod dolną powiekę świnki morskiej powoduje rozwój surowiczo-ropnego zapalenia rogówki i spojówki), a także poprzez infekcję komórek hodowli (działanie cytotoksyczne) lub zarodków kurzych (ich śmierć) lub donosowo białych myszy (rozwój zapalenia płuc). Główne czynniki patogeniczności Shigella można podzielić na trzy grupy:

1) czynniki determinujące interakcję z nabłonkiem błony śluzowej;

2) czynniki zapewniające odporność na humoralne i komórkowe mechanizmy obronne makroorganizmu oraz zdolność Shigella do namnażania się w jego komórkach;

3) zdolność do wytwarzania toksyn i produktów toksycznych, które determinują rozwój faktycznego procesu patologicznego.

Pierwsza grupa obejmuje czynniki adhezji i kolonizacji: ich rolę odgrywają pilusy, białka błony zewnętrznej i LPS. Adhezję i kolonizację ułatwiają enzymy niszczące śluz - neuraminidaza, hialuronidaza, mucynaza. Druga grupa obejmuje czynniki inwazji, które promują przenikanie Shigella do enterocytów i ich rozmnażanie w nich oraz w makrofagach z równoczesnym przejawem działania cytotoksycznego i (lub) enterotoksycznego. Właściwości te są kontrolowane przez geny plazmidu z m.m. 140 MD (koduje syntezę białek błony zewnętrznej powodujących inwazję) oraz chromosomalnych genów Shigella: ksr A (powoduje zapalenie rogówki i spojówki), cyt (odpowiedzialny za niszczenie komórek), a także inne geny, które nie zostały jeszcze zidentyfikowane. Ochronę Shigella przed fagocytozą zapewnia powierzchniowy antygen K, antygeny 3, 4 i lipopolisacharyd. Dodatkowo lipid A endotoksyny Shigella wykazuje działanie immunosupresyjne – hamuje aktywność komórek pamięci immunologicznej.

Trzecia grupa czynników patogenności obejmuje endotoksyny i dwa typy egzotoksyn występujących w Shigella - egzotoksyny Shiga i egzotoksyny Shiga-podobne (SLT-I i SLT-II), których właściwości cytotoksyczne są najbardziej widoczne w S.dysenteriae 1. Toksyny Shiga i Shiga-podobne występujące również w innych serotypach S.dysenteriae, one też powstają S.flexneri, S.sonnei, S.boydii, ETEC i trochę salmonelli. Synteza tych toksyn jest kontrolowana przez geny toksyczne fagów konwertujących. Enterotoksyny typu LT zostały znalezione w Flexner, Sonne i Boyd Shigella. Synteza LT w nich jest kontrolowana przez geny plazmidowe. Enterotoksyna stymuluje aktywność cyklazy adenylanowej i odpowiada za rozwój biegunki. Toksyna Shiga, czyli neurotoksyna, nie reaguje z układem cyklazy adenylanowej, ale ma bezpośrednie działanie cytotoksyczne. Toksyny Shiga i Shiga-podobne (SLT-I i SLT-II) mają m.m. -70 kD i składa się z podjednostek A i B (ostatni z 5 identycznych małych podjednostek). Receptorem toksyn jest glikolipid błony komórkowej.

Zjadliwość Shigella Sonne zależy również od plazmidu z m.m. 120 MD. Kontroluje syntezę około 40 polipeptydów błony zewnętrznej, z których siedem jest związanych z wirulencją. Shigella Sonne z tym plazmidem tworzy kolonie fazy I i jest zjadliwa. Hodowle, które utraciły plazmid, tworzą kolonie fazy II i są pozbawione zjadliwości. Plazmidy z m.m. 120-140 MD znaleziono u Flexnera i Boyda Shigelli. Lipopolisacharyd Shigella jest silną endotoksyną.

Cechy epidemiologii. Jedynym źródłem infekcji są ludzie. Żadne zwierzę w naturze nie cierpi na czerwonkę. W warunkach eksperymentalnych czerwonkę można rozmnażać tylko u małp. Metoda infekcji jest fekalno-ustna. Drogi przenoszenia - woda (główna u Shigella Flexner), żywność, szczególnie ważną rolę odgrywa mleko i produkty mleczne (główna droga zakażenia Shigella Sonne) oraz kontakt-gospodarstwo, zwłaszcza dla gatunku S. dyzenteriae.

Cechą epidemiologiczną czerwonki jest zmiana składu gatunkowego patogenów, a także biotypów Sonne i serotypów Flexner w niektórych regionach. Na przykład do końca lat 30. XX wieku udział S.dysenteriae 1 stanowiły do 30-40% wszystkich przypadków czerwonki, a następnie ten serotyp zaczął występować coraz mniej i prawie zniknął. Jednak w latach 60. i 80. XX wieku S.dysenteriae ponownie pojawił się na arenie historycznej i spowodował serię epidemii, które doprowadziły do powstania trzech ognisk hiperendemicznych - w Ameryce Środkowej, Afryce Środkowej i Azji Południowej (Indie, Pakistan, Bangladesz i inne kraje). Przyczyny zmiany składu gatunkowego patogenów czerwonki są prawdopodobnie związane ze zmianą odporność stada oraz ze zmianą właściwości bakterii czerwonki. W szczególności zwrot S.dysenteriae 1 a jego szeroka dystrybucja, która powodowała powstawanie hiperendemicznych ognisk czerwonki, jest związana z pozyskiwaniem przez nią plazmidów, co powodowało oporność wielolekową i zwiększoną zjadliwość.

Cechy patogenezy i kliniki. Okres inkubacji czerwonki wynosi 2-5 dni, czasem mniej niż jeden dzień. Tworzenie ognisko zakaźne w błonie śluzowej zstępującej części jelita grubego (esicy i odbytnicy), gdzie przenika czynnik sprawczy czerwonki, jest cykliczny: adhezja, kolonizacja, wprowadzenie shigella do cytoplazmy enterocytów, ich wewnątrzkomórkowa reprodukcja, zniszczenie i odrzucenie komórek nabłonkowych, uwalnianie patogenów do światła jelita; po tym rozpoczyna się kolejny cykl - adhezja, kolonizacja itp. Intensywność cykli zależy od stężenia patogenów w warstwie ciemieniowej błony śluzowej. W wyniku powtarzających się cykli ognisko zapalne rośnie, powstałe wrzody, łączące, zwiększają ekspozycję ściana jelita, w wyniku czego w kale pojawiają się krew, śluzowo-ropne grudki, wielojądrzaste leukocyty. Cytotoksyny (SLT-I i SLT-II) powodują niszczenie komórek, enterotoksyny - biegunka, endotoksyny - ogólne zatrucie. Klinika czerwonki jest w dużej mierze zdeterminowana przez rodzaj egzotoksyn wytwarzanych w większym stopniu przez patogen, stopień jego działania alergizującego i stan odpornościowy organizm. Jednak wiele pytań dotyczących patogenezy czerwonki pozostaje niewyjaśnionych, w szczególności: cechy przebiegu czerwonki u dzieci w pierwszych dwóch latach życia, przyczyny przejścia ostrej czerwonki na przewlekłą, znaczenie uczulenia, mechanizm odporności miejscowej błony śluzowej jelit itp. Najbardziej typowy objawy kliniczne czerwonka służy jako biegunka, częste pragnienia- w ciężkich przypadkach, do 50 lub więcej razy dziennie, parcie (bolesne skurcze odbytnicy) i ogólne zatrucie. Charakter stolca zależy od stopnia uszkodzenia jelita grubego. Najpoważniejsza czerwonka jest spowodowana przez S.dysenteriae 1, najłatwiej - czerwonka Sonne'a.

Odporność poinfekcyjna. Jak wykazały obserwacje małp, po cierpieniu na czerwonkę, utrzymuje się silna i dość długotrwała odporność. Jest to spowodowane przez przeciwciała przeciwdrobnoustrojowe, antytoksyny, zwiększoną aktywność makrofagów i limfocytów T. Odgrywa znaczącą rolę odporność lokalna błona śluzowa jelit za pośrednictwem IgA. Jednak odporność ma charakter specyficzny dla typu, nie występuje silna odporność krzyżowa.

Diagnostyka laboratoryjna . Główna metoda jest bakteriologiczna. Materiał do badań to kał. Schemat izolacji patogenów: inokulacja na pożywce diagnostycznej Endo i Ploskirev (równolegle na pożywce wzbogaconej, a następnie inokulacja na pożywce Endo i Ploskirev) w celu wyizolowania izolowanych kolonii, uzyskanie czysta kultura, badanie jego właściwości biochemicznych i, z uwzględnieniem tych ostatnich, identyfikacja przy użyciu wielowartościowych i jednowartościowych diagnostycznych surowic aglutynujących. Produkowane są następujące komercyjne serum:

1. Do Shigelli, które nie fermentują mannitolu: do S.dysenteriae 1 do 2 S.dysenteriae 3-7(wielowartościowe i jednowartościowe), do S.dysenteriae 8-12(wielowartościowe i jednowartościowe).

2. Do mannitolu fermentującego Shigella:

do typowych antygenów S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

grupować antygeny S.flexneri 3, 4, 6,7,8- wielowartościowe,

na antygeny S.boydii 1-18(wielowartościowe i jednowartościowe),

na antygeny S. sonnei I faza, II faza,

na antygeny S.flexneri I-VI+ S.sonnei- wielowartościowy.

Aby wykryć antygeny we krwi (w tym jako część CEC), można użyć moczu i kału następujące metody: RPHA, RSK, reakcja koagulacji (w moczu i kale), IFM, RPHA (w surowicy krwi). Metody te są wysoce skuteczne, specyficzne i odpowiednie do wczesnej diagnozy.

Do diagnostyki serologicznej można zastosować: RPHA z odpowiednim diagnostyka erytrocytów, metoda immunofluorescencyjna (w modyfikacji pośredniej), metoda Coombsa (oznaczanie miana przeciwciał niekompletnych). Wartość diagnostyczna posiada również test alergiczny na czerwonkę (roztwór frakcji białkowych Shigella Flexner i Sonne). Reakcja jest brana pod uwagę po 24 h. Uważa się ją za pozytywną w obecności przekrwienia i nacieku o średnicy 10-20 mm.

Leczenie. Nacisk kładziony jest na przywrócenie normalnego metabolizm wodno-solny, racjonalne odżywianie, detoksykacja, racjonalna antybiotykoterapia (z uwzględnieniem wrażliwości patogenu na antybiotyki). Dobry efekt daje wczesne zastosowanie wielowartościowego bakteriofaga czerwonkowego, zwłaszcza tabletek z powłoką pektynową, która chroni faga przed działaniem solnego HCl; w jelito cienkie pektyna rozpuszcza się, fagi są uwalniane i pokazują swoje działanie. W celach profilaktycznych faga należy podawać co najmniej raz na trzy dni (okres jego przeżycia w jelicie).

Problem specyficznej profilaktyki. Do tworzenia sztuczna odporność przeciwko czerwonce stosowano różne szczepionki: od zabitych bakterii, chemiczne, alkoholowe, ale wszystkie okazały się nieskuteczne i zostały przerwane. Szczepionki przeciwko czerwonce Flexnera zostały stworzone z żywej (zmutowanej, zależnej od streptomycyny) Shigella Flexner; szczepionki rybosomalne, ale też nie znaleźli szerokie zastosowanie. Dlatego problem specyficznej profilaktyki czerwonki pozostaje nierozwiązany. Głównym sposobem walki z czerwonką jest poprawa systemu zaopatrzenia w wodę i kanalizacji, zapewnienie ścisłych reżimów sanitarno-higienicznych w przedsiębiorstwach spożywczych, zwłaszcza mleczarskich, w placówkach opieki nad dziećmi, miejscach publicznych i higienie osobistej.

Mikrobiologia cholery

WHO definiuje cholerę jako chorobę charakteryzującą się ostrą, ciężką, odwadniającą biegunką ryżowo-wodną wynikającą z zakażenia Vibrio cholerae. Ze względu na to, że charakteryzuje się wyraźną zdolnością do szerokiego rozprzestrzeniania się epidemii, ciężki przebieg i wysoka śmiertelność, cholera jest jedną z najniebezpieczniejszych infekcji.

Historyczną ojczyzną cholery są Indie, a dokładniej delta Gangesu i Brahmaputry (obecnie Indie Wschodnie i Bangladesz), gdzie istnieje od niepamiętnych czasów (epidemię cholery obserwuje się na tym obszarze od 500 lat pne). Długie istnienie endemicznego ogniska cholery tłumaczy się wieloma przyczynami. Vibrio cholerae może nie tylko długo pozostawać w wodzie, ale także rozmnażać się w niej w sprzyjających warunkach - temperatura powyżej +12 ° C, obecność substancji organicznych. Wszystkie te warunki występują w Indiach - klimacie tropikalnym (średnia roczna temperatura od +25 do +29 °С), obfitość opadów i bagien, duża gęstość populacja, zwłaszcza w delcie Gangesu, duża liczba materia organiczna w wodzie, ciągłe całoroczne zanieczyszczenie wody ścieki i kał, niski materialny standard życia i specyficzne obrzędy religijne i religijne ludności.

Czynnik sprawczy cholery Vibrio cholerae została otwarta w 1883 roku. podczas piątej pandemii R. Kocha po raz pierwszy wibracje w kale pacjentów z biegunką odkryto już w 1854 roku. F. Patsiniego.

V. cholerae należy do rodziny wibronowate, który obejmuje kilka rodzajów (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium). Rodzaj Wibrio od 1985 ponad 25 gatunków, z czego najwyższa wartość dla osoby mają V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus, dnificus oraz V.fluvialis.

Kluczowe cechy rodzaju Wibrio : krótkie, nie tworzące zarodników i kapsułek, zakrzywione lub proste pałeczki Gram-ujemne, o średnicy 0,5 µm, długości 1,5-3,0 µm, ruchome ( V. cholerae- monotrychiczne, u niektórych gatunków dwie lub więcej wici polarnej); rosną dobrze i szybko na zwykłych podłożach, chemoorganotrofach, fermentują węglowodany tworząc kwas bez gazu (glukoza jest fermentowana wzdłuż szlaku Embden-Meyerhof). Oksydazo-dodatni, tworzą indol, redukują azotany do azotynów (V. cholerae daje dodatni odczyn nitrozowo-indolowy), rozkłada żelatynę, często daje dodatni odczyn Vogesa-Proskauera (tj. powstaje acetylometylokarbinol), nie ma ureaz, nie tworzy HS. ma dekarboksylazy lizynowe i ornityny, ale nie ma argininy dihydrolazy.

Vibrio cholerae jest bardzo bezpretensjonalna dla pożywek. Rozmnaża się dobrze i szybko na 1% alkalicznej (pH 8,6-9,0) wodzie peptonowej (PV) zawierającej 0,5-1,0% NaCl, wyprzedzając wzrost innych bakterii. Aby zahamować wzrost Proteus, zaleca się dodanie tellurynu potasu 4 do 1% (PV) (końcowe rozcieńczenie 1:100 000). 1% PV jest najlepszym podłożem wzbogacającym dla V. cholerae. Podczas wzrostu, po 6-8 godzinach tworzy na powierzchni HP delikatny luźny, szarawy film, który po wstrząśnięciu łatwo ulega zniszczeniu i opada na dno w postaci płatków, HP staje się umiarkowanie mętny. Do izolacji Vibrio cholerae zaproponowano różne podłoża selektywne: agar alkaliczny, agar z żółtkiem, albuminian alkaliczny, agar alkaliczny z krwią, laktozo-sacharozę i inne. Najlepszym podłożem jest TCBS (agar tiosiarczanowo-cytrynianowo-bromotymolowo-sacharozy) i jego modyfikacje. Najczęściej jednak stosuje się alkaliczny MPA, na którym Vibrio cholerae tworzy gładkie, szklisto-przezroczyste z odcieniem niebieskawym, kolonie w kształcie krążków o lepkiej konsystencji.

Podczas wysiewu z wstrzyknięciem do kolumny żelatyny, po 2 dniach w temperaturze 22-23 ° C, wibrio powoduje upłynnienie z powierzchni w postaci bańki, następnie w kształcie lejka, a na koniec warstwa po warstwie.

W mleku wibrio szybko się mnoży, powodując krzepnięcie po 24-48 godzinach, a następnie następuje peptonizacja mleka, a po 3-4 dniach wibrio zamiera z powodu przesunięcia pH mleka na stronę kwasową.

B. Heiberg, zgodnie ze zdolnością fermentacji mannozy, sacharozy i arabinozy, podzielił wszystkie vibrios (cholera i choleropodobne) na kilka grup, których liczba wynosi obecnie 8. Vibrio cholerae należy do pierwszej grupy Heiberga.

Vibrios, podobne pod względem cech morfologicznych, kulturowych i biochemicznych do cholery, zostały nazwane i są nazywane inaczej: paracholera, cholera-like, NAG vibrios (nie aglutynujące vibrios); wibracje, które nie należą do grupy 01. Ta ostatnia nazwa najdokładniej podkreśla ich związek z wibrio cholery. Jak ustalili A. Gardner i K. Venkatraman, cholera i wibracje choleropodobne mają wspólny antygen H, ale różnią się antygenami O. Według antygenu O cholera i choleropodobne vibrios są obecnie podzielone na 139 O-serogrup, ale ich liczba jest stale uzupełniana. Vibrio cholerae należy do grupy 01. Ma wspólny antygen A i dwa antygeny specyficzne dla typu - B i C, według których rozróżnia się trzy serotypy V. cholerae- serotyp Ogawa (AB), serotyp Inaba (AC) i serotyp Gikoshima (ABC). Vibrio cholerae na etapie dysocjacji posiada antygen OR. Z tego powodu, w celu identyfikacji V. cholerae Stosuje się surowicę O, surowicę OR i specyficzne dla typu surowice Inaba i Ogawa.

czynniki chorobotwórczości V. cholerae :

1. Mobilność.

2. Chemotaksja. Dzięki tym właściwościom vibrio pokonuje warstwę śluzową i oddziałuje z komórkami nabłonka. U mutantów Che (po utracie zdolności do chemotaksji) zjadliwość gwałtownie spada. Zjadliwość u mutantów Mot (po utracie mobilności) albo całkowicie zanika, albo zmniejsza się 100-1000 razy.

3. Czynniki adhezji i kolonizacji, za pomocą których wibrio przylega do mikrokosmków i kolonizuje błonę śluzową jelita cienkiego.

4. Enzymy: mucynaza, proteazy, neuraminidaza, lecytynaza itp.

Promują adhezję i kolonizację, ponieważ niszczą substancje tworzące śluz. Neuraminidaza, oddzielając kwas sialowy od glikoprotein nabłonkowych, tworzy platformę „lądowania” dla wibracji. Ponadto zwiększa liczbę receptorów cholerogenu poprzez modyfikację tri- i disialogangliozydów do monosialogangliozydu Gm b, który służy jako receptor cholerogenu.

5. Główny czynnik chorobotwórczości V. cholerae jest egzotoksyną-cholerogenem, który determinuje patogenezę cholery. Cząsteczka cholerogenu ma m.m. 84 kD i składa się z dwóch fragmentów - A i B. Fragment A składa się z dwóch peptydów - A1 i A2 - i ma specyficzne właściwości toksyny cholery. Fragment B składa się z 5 identycznych podjednostek i spełnia dwie funkcje: 1) rozpoznaje receptor (monosialogangliozyd) enterocytu i wiąże się z nim;

2) tworzy wewnątrzbłonowy kanał hydrofobowy dla przejścia podjednostki A. Peptyd A2S1 służy do łączenia fragmentów A i B. Peptyd At pełni swoją własną toksyczną funkcję. Oddziałuje z NAD, powoduje jego hydrolizę, powstała ADP-ryboza wiąże się z podjednostką regulatorową cyklazy adenylanowej. Prowadzi to do zahamowania hydrolizy GTP. Powstały kompleks GTP + cyklaza adenylanowa powoduje hydrolizę ATP z utworzeniem cAMP. (Innym sposobem akumulacji cAMP jest supresja przez cholerogen enzymu hydrolizującego cAMP do 5-AMP).

6. Oprócz cholerogenu, Vibrio cholerae syntetyzuje i wydziela czynnik zwiększający przepuszczalność naczyń włosowatych.

7. Inne egzotoksyny zostały również znalezione w V. cholerae, w szczególności typy LT, ST i SLT.

8. Endotoksyna. Lipopolisacharyd V. cholerae ma silne właściwości endotoksyczne. Odpowiada za ogólne zatrucie organizmu i wymioty. Przeciwciała utworzone przeciwko endotoksynie mają wyraźny efekt wibriocydowy (rozpuszczają się wibratory w obecności dopełniacza) i są ważnym składnikiem odporności poinfekcyjnej i poszczepiennej.

Zdolność wibracji nienależących do grupy 01 do wywoływania sporadycznych lub grupowych chorób biegunkowych u ludzi jest związana z obecnością enterotoksyn typu LT lub ST, które stymulują układy odpowiednio cyklazy adenylanowej lub guanylowej.

Synteza cholerogenu - najważniejsza własność V. cholery. Geny kontrolujące syntezę fragmentów A i B cholerogenu są połączone w operon vctAB lub ctxB i znajdują się na chromosomie vibrio. Niektóre szczepy Vibrio cholerae mają dwa takie nie-tandemowe operony. Funkcję operonu kontrolują dwa geny regulatorowe. Gen toxR zapewnia kontrolę pozytywną, mutacje w tym genie prowadzą do 1000-krotnego zmniejszenia produkcji toksyn. Gen htx jest kontrolą negatywną, mutacje w tym genie zwiększają produkcję toksyny 3-7 razy.

Do wykrywania cholerogenu można zastosować następujące metody:

1. Testy biologiczne na królikach. Po dojelitowym podaniu cholery vibrios karmionym królikom (w wieku do 2 tygodni) rozwija się typowy zespół cholerogenny: biegunka, odwodnienie i śmierć królika. Podczas autopsji - ostry zastrzyk naczyń żołądka i cienki
jelita, czasami gromadzi się w nich klarowny płyn. Szczególnie charakterystyczne są jednak zmiany w jelicie grubym – jest ono powiększone i wypełnione całkowicie przezroczystą, słomkową cieczą z płatkami i pęcherzykami gazu. Po wstrzyknięciu V. cholerae do podwiązanego obszaru jelita cienkiego u dorosłych królików obserwuje się takie same zmiany w jelicie grubym, jak w przypadku zakażenia królików ssących.

2. Bezpośrednie wykrywanie cholerogenu metodą immunofluorescencyjną lub immunoenzymatyczną lub metodą biernej hemolizy immunologicznej (cholerogen wiąże się z Gm1 erytrocytów i ulegają one lizie po dodaniu przeciwciał antytoksycznych i dopełniacza).

3. Stymulacja komórkowej cyklazy adenylanowej w hodowlach komórkowych.

4. Wykorzystanie fragmentu chromosomu jako sondy DNA V. cholery, operoncholerogen nośnikowy.

Podczas siódmej pandemii wyizolowano szczepy V. cholerae Z różne stopnie zjadliwość: cholerogenna (wirulentna), słabo cholerogenna (niska zjadliwość) i niecholerogenna (niewirulentna). Niecholerogenne V. cholery, z reguły wykazują one aktywność hemolityczną, nie ulegają lizie przez faga 5 diagnostycznego cholery (HDF-5) i nie powodują chorób u ludzi.

Do typowania fagowego V. cholerae(włącznie z w.eltor) S. Mukherjee zaproponował odpowiednie zestawy fagów, które następnie uzupełniono w Rosji innymi fagami. Zbiór takich fagów (1-7) umożliwia rozróżnienie między V. cholerae 16 typów fagów. HDF-3 selektywnie lizuje Vibrio cholerae typ klasyczny, HDF-4 - El Tor vibrios i HDF-5 lizy tylko cholerogennych (wirulentnych) wibratorów obu typów i nie lizy niecholerogennych wibratorów.

Vibrio cholerogeny z reguły nie mają aktywności hemolitycznej, są lizowane przez HDF-5 i powodują cholerę u ludzi.

odporność patogenów cholery. Vibrio cholerae przeżywają dobrze w niskich temperaturach: pozostają żywe w lodzie do 1 miesiąca; w wodzie morskiej - do 47 dni, w wodzie rzecznej - od 3-5 dni do kilku tygodni, w przegotowanej woda mineralna utrzymują się dłużej niż 1 rok, w glebie - od 8 dni do 3 miesięcy, w świeżym kale - do 3 dni, na gotowanej żywności (ryż, makaron, mięso, zboża itp.) Przetrwają 2-5 dni, na surowym warzywa - 2 - 4 dni, na owocach - 1-2 dni, w mleku i produktach mlecznych - 5 dni; przy przechowywaniu na zimno okres przeżycia wzrasta o 1-3 dni: na pościeli zanieczyszczonej kałem utrzymują się do 2 dni, a na mokrym materiale - tydzień. Vibrio cholerae w 80 ° C umierają po 5 minutach, w 100 ° C - natychmiast; bardzo wrażliwy na kwasy; pod wpływem chloraminy i innych środków dezynfekujących umierają w ciągu 5-15 minut. Są wrażliwe na suszenie i bezpośrednie działanie. promienie słoneczne, ale są dobrze i długo przechowywane, a nawet rozmnażają się w otwartych zbiornikach i ściekach bogatych w substancje organiczne, o zasadowym pH i temperaturze powyżej 10-12°C. Bardzo wrażliwy na chlor: dawka aktywnego chloru 0,3-0,4 mg/l wody w ciągu 30 minut powoduje niezawodną dezynfekcję od cholery vibrio.

Cechy epidemiologii. Głównym źródłem infekcji jest tylko człowiek - chory na cholerę lub nosiciel wibrio, a także zanieczyszczona przez nie woda. Żadne zwierzęta w naturze nie chorują na cholerę. Metoda infekcji jest fekalno-ustna. Sposoby zakażenia: a) główne - przez wodę wykorzystywaną do picia, kąpieli i potrzeb domowych; b) kontakt z gospodarstwem domowym ic) przez żywność. Wszystkie większe epidemie i pandemie cholery miały charakter wodny. Vibrio cholerae mają takie mechanizmy adaptacyjne, które zapewniają istnienie ich populacji zarówno w ciele ludzkim, jak iw niektórych ekosystemach otwartych zbiorników wodnych. Obfita biegunka wywołana przez Vibrio cholerae prowadzi do oczyszczenia jelit przez konkurujące bakterie i przyczynia się do szerokiego rozprzestrzeniania się patogenu w środowisku, przede wszystkim w ściekach i na otwartej wodzie, gdzie są wyrzucane. Osoba z cholerą przenosi patogen na duża liczba- od 100 milionów do 1 miliarda na 1 ml kału, nośnik wibratorów uwalnia 100-100 000 wibratorów na 1 ml, dawka porażająca to około 1 milion wibratorów. Czas izolacji vibrio cholerae u zdrowych nosicieli wynosi od 7 do 42 dni, a u chorych 7-10 dni. Dłuższe wydanie jest niezwykle rzadkie.

Cechą cholery jest to, że po niej z reguły nie ma długotrwałego przewozu i nie tworzą się trwałe ogniska endemiczne. Jednak, jak już wspomniano powyżej, ze względu na zanieczyszczenie otwartych zbiorników wodnych ściekami zawierającymi duże ilości materia organiczna, detergenty i sól kuchenna, w lecie wibrio cholery w nich nie tylko przetrwa przez długi czas, ale nawet się rozmnaża.

Ogromne znaczenie epidemiologiczne ma fakt, że vibrio cholerae z grupy 01, zarówno nietoksygenne, jak i toksygenne, mogą utrzymywać się przez długi czas w różnych ekosystemy wodne w postaci nieuprawianych form. Za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy z negatywnymi badaniami bakteriologicznymi w wielu endemicznych terytoriach WNP w różnych zbiornikach wodnych znaleziono geny weterynarza form nieuprawianych. V. cholery.

W przypadku chorób cholery przeprowadzany jest kompleks środków przeciwepidemicznych, wśród których aktywny jest wiodący i decydujący terminowe wykrywanie i izolacja (hospitalizacja, leczenie) pacjentów w stanach ostrych i nietypowa forma i zdrowi nosiciele vibrio; podejmowane są środki zapobiegające możliwym sposobom rozprzestrzeniania się infekcji; szczególną uwagę zwraca się na zaopatrzenie w wodę (chlorowanie) woda pitna), zgodność z reżimem sanitarnym i higienicznym w przedsiębiorstwach spożywczych, w placówkach dla dzieci, miejscach publicznych; ścisła kontrola, w tym kontrola bakteriologiczna, prowadzona jest nad otwartymi zbiornikami wodnymi, przeprowadzana jest immunizacja populacji itp.

Cechy patogenezy i kliniki. Okres inkubacji cholery waha się od godzin bez poślizgu do 6 dni, najczęściej 2-3 dni. W świetle jelita cienkiego Vibrio cholerae ze względu na ruchliwość i chemotaksję do błony śluzowej są wysyłane do śluzu. Aby go przeniknąć, wibratorki wytwarzają szereg enzymów: neuraminidazę, mucynazę, proteazy, lecytynazę, niektóre niszczą substancje zawarte w śluzie i ułatwiają przemieszczanie się wibratorów do komórek nabłonka. Przez adhezję wibratory przyczepiają się do glikokaliksu nabłonka i, tracąc ruchliwość, zaczynają się intensywnie namnażać, kolonizując mikrokosmki jelita cienkiego, a jednocześnie wytwarzają dużą ilość egzotoksyny-cholerogenu. Cząsteczki cholesterolu wiążą się z monosialogangliozydem Gm1 i przenikają przez błonę komórkową, aktywują układ cyklazy adenylanowej, a kumulujący się cAMP powoduje nadmierne wydzielanie płynu, kationów i anionów Na+, HCO 3~, K+, SG z enterocytów, co prowadzi do biegunki cholery, organizm odwodnienia i odsalania. Istnieją trzy rodzaje przebiegu choroby:

1. gwałtowna, ciężka odwadniająca choroba biegunkowa, prowadząca do śmierci pacjenta w ciągu kilku godzin;

2. łagodniejszy lub biegunka bez odwodnienia;

3. bezobjawowy przebieg choroby (nosiciel wibracji).

W ciężkiej cholerze u pacjentów rozwija się biegunka, stolce stają się częstsze, stolce stają się coraz liczniejsze, przybierają wodnisty charakter, tracą zapach kału i wyglądają jak woda ryżowa (mętna ciecz z unoszącymi się w niej resztkami śluzu i komórkami nabłonka). Następnie wyniszczające wymioty łączą się najpierw z zawartością jelita, a następnie wymiociny przybierają postać wody ryżowej. Temperatura pacjenta spada poniżej normy, skóra staje się sina, pomarszczona i zimna - glony cholery. W wyniku odwodnienia krew gęstnieje, rozwija się sinica, głód tlenu, funkcja nerek gwałtownie cierpi, pojawiają się drgawki, pacjent traci przytomność i następuje śmierć. Śmiertelność z powodu cholery podczas siódmej pandemii wahała się od 1,5% w krajach rozwiniętych do 50% w krajach rozwijających się.

Odporność poinfekcyjna trwałe, długotrwałe, powtarzające się choroby są rzadkie. Odporność jest antytoksyczna i przeciwdrobnoustrojowa dzięki przeciwciałom (antytoksyny utrzymują się dłużej niż przeciwciała przeciwdrobnoustrojowe), komórkom pamięci immunologicznej i fagocytom.

Diagnostyka laboratoryjna. Główne i decydująca metoda Diagnoza cholery jest bakteriologiczna. Materiał do badań od pacjenta to kał i wymiociny; kał jest badany pod kątem przenoszenia wibracji; u osób zmarłych na cholerę pobiera się do badań podwiązany odcinek jelita cienkiego i pęcherzyka żółciowego; Spośród obiektów środowiska zewnętrznego najczęściej badane są wody ze zbiorników otwartych i ścieki.

Podczas przeprowadzania badania bakteriologicznego należy przestrzegać następujących trzech warunków:

1) jak najszybciej zaszczepić materiał od pacjenta (cholera vibrio utrzymuje się w kale) krótkoterminowy);

2) naczynia, w których pobierany jest materiał, nie powinny być dezynfekowane chemikaliami i nie powinny zawierać ich śladów, ponieważ Vibrio cholerae jest na nie bardzo wrażliwa;

3) wyeliminować możliwość skażenia i zakażenia innych.

W przypadkach, w których występują V. cholerae a nie grupy 01, muszą być typowane przy użyciu odpowiednich surowic aglutynujących z innych grup serologicznych. Wypis od pacjenta z biegunką (w tym choleropodobną) V. cholerae grupa non-01 wymaga takich samych środków przeciwepidemicznych jak w przypadku izolacji V. cholerae 01-grupy. W razie potrzeby jedną z metod określa się zdolność do syntezy cholerogenu lub obecność genów cholerogenu w izolowanych vibrio cholerae przy użyciu sondy DNA.

Diagnostyka serologiczna cholery ma charakter pomocniczy. W tym celu można zastosować reakcję aglutynacji, ale lepiej jest określić miano przeciwciał wibrobójczych lub antytoksyn (przeciwciała przeciwko cholerogenowi określa się metodą immunoenzymatyczną lub immunofluorescencyjną).

Leczenie chorzy na cholerę powinni przede wszystkim polegać na nawodnieniu i przywróceniu prawidłowego metabolizmu wodno-solnego. W tym celu zaleca się stosowanie roztworów soli np. o składzie: NaCl - 3,5; NaHCO3 - 2,5; KS1 - 1,5 i glukoza - 20,0 g na 1 litr wody. Takie patogenetycznie uzasadnione leczenie w połączeniu z racjonalną antybiotykoterapią może zmniejszyć śmiertelność w cholerze do 1% lub mniej.

specyficzna profilaktyka. Aby stworzyć sztuczną odporność, zaproponowano różne szczepionki, w tym te z zabitych szczepów Inaba i Ogawa; toksoid cholerogenowy do podania podskórnego i dojelitowa chemiczna szczepionka biwalentna, sos

DIAGNOSTYKA LABORATORYJNA DYZENTERIA, AMEBIAZY I BALANTHYDIZY

W nowoczesnych warunkach, w niektórych przypadkach lub przy niewielkich ogniskowych ogniskach chorób jelit, które często występują z niejasnymi objawami, laboratoryjne metody badawcze mają ogromne znaczenie praktyczne.

Badania prowadzone w celach diagnostycznych powinny być prowadzone przy ścisłym przestrzeganiu ustalonych zaleceń i jak najwcześniej.

Kolekcja stołek do badań wkłada się je do czystych naczyń (wazonów nocnych, basenów) nie zawierających pozostałości środków dezynfekujących, materiał do badań pobiera się z błony śluzowej odbytu tamponami podczas sigmoidoskopii.

W celu bakteriologicznego potwierdzenia diagnozy lepiej jest pobrać kał od pacjentów z czerwonką przed leczeniem antybiotykami i sulfonamidami oraz określić bakterionośnik - po leczeniu tymi lekami.

Wysiew na szalki Petriego należy wykonać natychmiast po pobraniu materiału.

Przede wszystkim przeprowadza się badanie makroskopowe kału, podczas gdy mogą one wykryć: resztki jedzenia - kawałki mięsa, resztki tłuszczu, pokarm roślinny i zanieczyszczenia patologiczne - śluz o lepkiej konsystencji w postaci grudek (nieprzezroczysty w czerwonce i przezroczysty w amebiazie); krew niezmieniona w czerwonce i zmiana wrzodziejąca dolna część okrężnicy o innej etiologii i zmienionym kolorze („galaretka malinowa”) z amebozą, balantidozą; ropa jest wykrywana w ciężkich, przewlekłych postaciach czerwonki.

Badanie mikroskopowe kału służy do wykrywania elementów komórkowych krwi, ameb, balantidiów i ich cyst. Preparat natywny przygotowuje się w następujący sposób: na szkiełko nanosi się grudkę kału, a obok niego kroplę izotonicznego roztworu chlorku sodu, miesza się i przykrywa szkiełkiem nakrywkowym. Do barwienia pierwotniaków stosuje się roztwór Lugola.

Aby odróżnić elementy komórkowe krwi, preparaty traktuje się barwnikiem Romanovsky-Giemsa lub azure-eozyną. W czerwonce preparat przygotowany ze śluzu zawiera wiele granulocytów obojętnochłonnych (ponad 90% wszystkich elementów komórkowych), pojedyncze granulocyty eozynofilowe (eozynofile) oraz inna ilość erytrocyty; w przypadku amebiazy jest niewiele elementów komórkowych, główną ich masą są zmienione komórki z jądrem piknotycznym i wąskim obrzeżem protoplazmy. Znajdź granulocyty eozynofilowe i kryształy Charcot-Leiden.

Formy tkankowe ameby (Entamoeba histolytica) w preparacie niewybarwionym są bezbarwne, ruchliwe (przy pomocy pseudopodia), osiągają 50-60 mikronów w stanie wydłużonym, często występują w endoplazmie z erytrocytami i na obwodzie - jądro. Obecność erytrocytów w komórce umożliwia odróżnienie Entamoeba histolutica od form niepatogennych (E. hartmani, E. coli.).

Półprzezroczysta forma ameby jest mniejsza (do 20 mikronów), nieaktywna i nie zawiera erytrocytów. Nawet mniejsze cysty (10-12 mikronów), Okrągły kształt, nieruchomy; we wczesnych stadiach rozwoju zawierają 2 jądra, a dojrzałe - 4. W preparatach barwionych płynem Lugola jądra ameby i ich cysty są jasnobrązowe (ryc. 6).

Balantidia(Balantidium coli) - duże orzęski, czasami osiągające długość 200 mikronów i 50-70 mikronów średnicy, ruchome, ze względu na obecność rzęsek, mają otwory gębowe (peristom) i odbyt (cytopygus). W endoplazmie widoczne są duże (makrojądra) i małe (mikrojądra), wakuole, przechwycone erytrocyty. Cysty Balantidia są nieruchome, zaokrąglone, o średnicy 50-60 μm, mają dwukonturową błonę, wewnątrz zawierają makrojądra i wakuole (ryc. 7).

Badanie bakteriologiczne kału w czerwonce prątkowej najlepiej wykonać krótko po wypróżnieniu, podczas gdy należy pobrać materiał (śluz i ropa) z ostatnich porcji kału. Materiał testowy zaszczepia się ezą na szalkach Petriego z pożywką elektywną (Ploskirev, Ploskirev + lewomycetyna, Levin) i umieszcza w termostacie na 18-24 godziny w temperaturze +37 ° C. Następnego dnia podejrzany (bezbarwny) kolonie hoduje się na pożywce Ressela i umieszcza probówki w termostacie na jeden dzień w temperaturze +370 C. Trzeciego dnia po otrzymaniu czystej hodowli przygotowuje się rozmazy do mikroskopii i badania ruchliwości (shigella są nieruchome) . Umieścili reakcję aglutynacji na szkle z surowicami specyficznymi dla typu, najpierw z surowicami przeciwko typom dominującym na danym obszarze, a następnie rozmieszczani i wysiewani w „różnorodnym” rzędzie, aby określić właściwości biochemiczne wybrana kultura.

Czynniki sprawcze czerwonki nie fermentują laktozy i sacharozy (z wyjątkiem Sonne), rozkładają glukozę (do kwasu), nie tworzą siarkowodoru.

Ostateczna odpowiedź w badaniu bakteriologicznym jest udzielana piątego dnia. Czasami izoluje się nietypowe szczepy patogenu, kultury, które utraciły zdolność aglutynacji i mają inne cechy. W takich przypadkach studia trwają dłużej.

Istnieją również przyspieszone metody bakteriologiczne – ponowne wysiewanie podejrzanych kolonii z szalek Petriego po 18-20 godzinach od rozpoczęcia badania do 2 probówek z podłożem Ressela (agar skośny z 1% laktozą i 0,1% glukozą – w jednej i 1% sacharozie i 0,1% mannitol - w innym). Po 4 godzinach może już pojawić się wzrost kolonii, z których przygotowuje się rozmazy, barwi według Grama, bada ruchliwość i ustala przybliżoną reakcję aglutynacji z surowicami przeciwko najczęstszym patogenom w okolicy. Tak więc już drugiego dnia możesz udzielić wstępnej odpowiedzi. Ostateczną odpowiedź podaje się trzeciego dnia po uwzględnieniu wyników siewu w „różnobarwnym” rzędzie i szczegółowej reakcji aglutynacji.

Inokulacja patogenów czerwonki nie zawsze jest taka sama, zależy od wielu czynników – sposobu pobierania materiału do badań, jakości podłoża i innych przyczyn, z których jednym jest liczba patogenów na jednostkę objętości kału. Udowodniono, że czynniki wywołujące czerwonkę wysiewa się w przypadkach, gdy w jednym gramie kału znajduje się co najmniej setki milionów ciał drobnoustrojów. W rzadkie przypadki możliwe jest wyizolowanie z krwi czynnika sprawczego czerwonki.

W obecności mikroskopu luminescencyjnego, swoistych surowic z fluorochromami, studentom pokazano metodę bezpośredniej fluorescencji przeciwciał.

Możliwe jest również wytworzenie reakcji aglutynacji z surowicą krwi pacjenta i diagnostyką, jednak miana przeciwciał u pacjentów z czerwonką są niskie, a ponadto często występują zjawiska paraaglutynacji, co utrudnia uzyskanie wiarygodne wyniki. Bardziej czuła jest reakcja hemaglutynacji pośredniej (IHA) ze standardową diagnostyką erytrocytów. metoda pomocnicza badanie to śródskórny test alergiczny z czerwonką według D. A. Tsuverkalova, który bierze się pod uwagę po 24 godzinach w zależności od wielkości utworzonej grudki.

Instrukcja metodyczna dla uczniów na lekcję praktyczną nr 28.

Temat lekcji:

Cel: Badanie metod diagnostyki mikrobiologicznej, terapii etiotropowej i profilaktyki szigellozy.

Moduł 2 . Mikrobiologia specjalna, kliniczna i ekologiczna.

Temat 5: Metody diagnostyki mikrobiologicznej czerwonki.

Trafność tematu:Shigelloza jest wszechobecna i stanowi poważny problem w krajach o niskim poziomie kultury sanitarnej i wysokiej częstości występowania niedożywienia i złego odżywiania. W krajach rozwijających się rozprzestrzenianiu się infekcji sprzyjają złe warunki sanitarne, zła higiena osobista, przeludnienie i duży odsetek dzieci w populacji. Na Ukrainie ogniska szygelozy częściej występują w grupach zamkniętych na tle niski poziom urządzenia sanitarne i higieniczne np. w żłobkach i przedszkolach, na łodziach turystycznych, w klinikach psychiatrycznych czy schroniskach dla osób niepełnosprawnych. Shigella była przyczyną biegunki podróżnych i turystów.

Za przyczynę chorób grupowych można uznać używanie produktów spożywczych skażonych zaniedbaniami pracowników handlowych będących nosicielami Shigelli. Występują epidemie związane z używaniem wody pitnej, a pływanie w zanieczyszczonych zbiornikach również prowadziło do infekcji. Jednak drogi przenoszenia pokarmu i wody wydają się odgrywać mniejszą rolę w rozprzestrzenianiu się szigellozy w porównaniu z cholerą i durem brzusznym, które zwykle wymagają duże dawki patogeny. W krajach rozwijających się, gdzie choroba rozprzestrzenia się głównie między ludźmi, nosiciele mogą być ważnym rezerwuarem czynnika zakaźnego. U pacjentów, którzy nie przyjmowali leków przeciwbakteryjnych, wydalanie shigella z kałem zwykle trwa 14 tygodni, ale w niewielkim odsetku przypadków trwa znacznie dłużej.

Shigelloza to ostra infekcja bakteryjna jelita wywołana przez jeden z czterech rodzajów Shigella. Spektrum postaci klinicznych infekcji waha się od łagodnej, wodnistej biegunki do ciężkiej czerwonki charakteryzującej się skurczami brzucha, parciem, gorączką i objawami ogólnego zatrucia.

Etiologia.

Rodzaj Shigella (nazwany na cześć K. Shigi, który w 1898 r. szczegółowo zbadał i opisał wyizolowany czynnik sprawczy bakteryjnej czerwonki przez A.V. Grigorieva) z rodziny Enterobacteriaceae składa się z grupy blisko spokrewnionych gatunków bakterii, które mają następujące właściwości:

I. Morfologiczny: Shigella - małe patyczki z zaokrąglonymi końcami. Różnią się od innych przedstawicieli rodziny Enterobacteriaceae brakiem wici (nieruchliwe), nie mają zarodników i kapsułek i są Gram-ujemne.

II. Kulturalny: Shigella to tlenowce lub beztlenowce fakultatywne; optymalne warunki uprawy temperatura 37°C, pH 7,2-7,4. Rosną na prostych pożywkach (MPA, MPB) w postaci małych, błyszczących, półprzezroczystych, szarawych, okrągłych kolonii wielkości 1,52 mm. S Formularz. Wyjątkiem są Shigella Sonne'a, które często dysocjują, tworząc duże, płaskie, mętne kolonie o postrzępionych krawędziach. R formy (kolonie wyglądają jak „liść winogron”). W pożywkach płynnych Shigella daje równomierne zmętnienie, R tworzy osad. Płynną pożywką wzbogacającą jest bulion z seleninem.

III. Enzymatyczny: główne cechy biochemiczne niezbędne do identyfikacji Shigella w izolacji czystej kultury są następujące:

brak tworzenia się gazu podczas fermentacji glukozy;
brak produkcji siarkowodoru;
brak fermentacji laktozy w ciągu 48 godzin.

W sumie te cztery gatunki są dalej podzielone na około 40 serotypów. Zgodnie z charakterystyką głównych antygenów somatycznych (O) i właściwościami biochemicznymi wyróżnia się następujące cztery gatunki lub grupy: S. dysenteriae (grupa A obejmuje: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri (grupa B), S. boydii (grupa C) i S. sonnei (grupa D).

W odniesieniu do mannitolu wszystkie shigella dzieli się na mannitol rozszczepiony (Flexner, Boyd, Sonne shigella) i nierozszczepiony (Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs shigella).

IV. Czynniki chorobotwórcze:

Inwazja plazmidówzapewnia zdolność Shigella do wywoływania inwazji, a następnie rozprzestrzeniania się i rozmnażania międzykomórkowego w nabłonku błony śluzowej okrężnicy;
tworzenie toksyn: Shigella ma endotoksynę lipopolisacharydową, która jest chemicznie i biochemicznie podobna do endotoksyn innych członków rodziny Enterobacteriaceae. Ponadto S. dysenteriae typu I (bacillus Shiga) wytwarza egzotoksynę. Od czasu odkrycia tego ostatniego ustalono, że ma aktywność enterotoksyny i może powodować wydzielanie jelitowe, a także wywierać działanie cytotoksyczne na komórki nabłonka jelitowego; renderuje efekt neurotoksyczny obserwowane u dzieci z Shigellozą. Toksyna Shiga, dostając się do krwi, wraz z uszkodzeniem śródbłonka podśluzówkowego, wpływa również na kłębuszki nerkowe, w wyniku czego oprócz krwawej biegunki rozwija się zespół hemolityczno-mocznicowy wraz z rozwojem niewydolności nerek.

V. Struktura antygenowa:Wszystkie Shigella mają somatyczny antygen O, w zależności od struktury, z którego dzielą się na serotypy.

VI. Opór: Temperatura 100 0 C zabija Shigellę natychmiast. Shigella są odporne na niskie temperatury w woda rzeczna są przechowywane do 3 miesięcy, na warzywach i owocach - do 15 miesięcy.W sprzyjających warunkach Shigella może rozmnażać się w produktach spożywczych (sałatki, winegret, gotowane mięso, mięso mielone, gotowane ryby, mleko i przetwory mleczne, kompoty i galaretki), zwłaszcza sonne shigella.

Epidemiologia.

1. Źródło infekcji:Osoba cierpiąca na ostre i przewlekłe formy Shigellozy; bakterionośnik.

2. Sposoby transmisji:

Jedzenie (głównie dla S. sonnei)
Wodne (głównie dla S. flexneri)
Kontakt z gospodarstwem domowym (głównie dla S. dysenteriae)

3. Brama wjazdowainfekcja służy przewód pokarmowy.

Patogeneza i zmiany patologiczne.

Po spożyciu Shigella skolonizuje górne dywizje jelita cienkiego i tam namnażają się, prawdopodobnie powodując zwiększone wydzielanie wczesny etap infekcje. Shigella następnie przenika przez komórki M do błony podśluzowej, gdzie są otoczone przez makrofagi. Prowadzi to do śmierci części pałeczki Shigella, co skutkuje uwolnieniem mediatorów stanu zapalnego, które inicjują stan zapalny w błonie podśluzowej. Apoptoza fagocytów pozwala innej części Shigella przetrwać i wniknąć do komórek nabłonka błony śluzowej poprzez membrana piwnicy. Wewnątrz enterocytów Shigella rozmnaża się i rozprzestrzenia się międzykomórkowo, co powoduje rozwój erozji. Kiedy shigella umiera, uwalniane są toksyny shiga i podobne do shiga, których działanie prowadzi do zatrucia. Klęsce błony śluzowej towarzyszy obrzęk, martwica i krwotok, co powoduje pojawienie się krwi w kale. Dodatkowo toksyna wpływa na centralny układ nerwowy, co prowadzi do zaburzeń troficznych.

Objawy kliniczne.

Spektrum objawów klinicznych szigellozy jest bardzo szerokie od łagodnej biegunki do ciężkiej czerwonki ze skurczowymi bólami brzucha, parciem, gorączką i ogólnym zatruciem.

Okres inkubacjiwaha się od kilku godzin do 7 dni, najczęściej jest to 2-3 dni.Początkowo pacjenci mają wodnisty stolec, gorączka (do 41 ° C), rozproszony ból brzucha, nudności i wymioty. Wraz z tym pacjenci skarżą się na bóle mięśni, dreszcze, bóle pleców i ból głowy. W nadchodzących dniach od początku choroby pojawiają się oznaki czerwonki - naprężenie, częste, skąpe, krwawo-śluzowe stolce. Temperatura ciała stopniowo spada, ból może być zlokalizowany w dolnych kwadrantach brzucha. Nasilenie biegunki osiąga maksimum pod koniec pierwszego tygodnia choroby. Czerwonka z krwawymi stolcami jest bardziej powszechna i pojawia się wcześniej w chorobie wywołanej przez: S. dysenteriae typ I niż w innych postaciach Shigellozy.

Dla Shigellozy Sonne charakterystyczny jest łagodniejszy przebieg choroby (wariant żołądkowo-jelitowy lub żołądkowo-jelitowy). Okres gorączkowy jest krótszy, skutki zatrucia krótkotrwałe, a zmiany destrukcyjne w błonie śluzowej jelit nie są typowe.

Shigelloza FlexnerZasadniczo charakterystyczne są dwa warianty przebiegu klinicznego - zapalenie żołądka i jelit i zapalenie okrężnicy.

Powikłania pozajelitowe w przebiegu szigellozyrzadki:

Powikłaniem Shigellozy może być rozwój dysbakteriozy jelitowej.
Wraz z bólami głowy mogą wystąpić objawy zapalenia opon mózgowych i napadów drgawkowych.
Przypadki neuropatii obwodowej opisano w zakażeniu S. dysenteriae typu I, a przypadki zespołu Guillain-Barré (zapalenie wielonerwowe) odnotowano podczas wybuchu zapalenia żołądka i jelit wywołanego przez S. boydii.
Z wyjątkiem dzieci cierpiących na dystrofię, krwiopochodne rozprzestrzenianie się patogenu jest stosunkowo rzadkie, opisano również przypadki ropni Shigelosis i zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych.
W przypadku szigellozy możliwy jest rozwój zespołu Reitera z zapaleniem stawów, jałowym zapaleniem spojówek i zapaleniem cewki moczowej, które zwykle występuje po 1-4 tygodniach od wystąpienia biegunki u pacjentów.
U dzieci Shigellozie towarzyszy zespół hemolityczno-mocznicowy, często związany z reakcjami podobnymi do białaczki, ciężkim zapaleniem okrężnicy i krążącą endotoksyną, ale bakteriemia zwykle nie jest wykrywana.
Bardzo rzadko ropne zapalenie rogówki i spojówki jest spowodowane przez shigella, który dostał się do oczu w wyniku samozakażenia zakażonymi palcami.
Wstrząs hipowolemiczny i DIC.
Zapalenie otrzewnej, zgorzel jelitowa, krwawienie z jelit.

Odporność: Ludzie mają naturalną odporność na shigellozę. Później przeszła choroba odporność nie jest stabilna, a po shigellozie Sonne jest praktycznie nieobecny. W przypadku choroby wywołanej przez Shigellę Grigoriev Shigi rozwija się bardziej stabilna odporność antytoksyczna. Główną rolę w ochronie przed infekcją pełni sekrecja IgA , zapobiegający adhezji i zależnej od przeciwciał cytotoksycznej aktywności śródnabłonkowych limfocytów, które wraz z sekrecją IgA zabić Shigellę.

Diagnostyka i badania laboratoryjne.

Cel badania: wykrywanie i identyfikacja Shigella do diagnozy; wykrywanie nosicieli bakterii; wykrywanie shigella w żywności.

Materiał badawczy: ekskrementy, materiał przekrojowy, artykuły spożywcze.

Metody diagnostyczne:mikrobiologiczne (bakteriologiczne, mikroskopowe (luminescencyjne); serologiczne; biologiczne; test alergiczny.

Postęp badań:

1 dzień studiów:Hodowle należy wykonywać ze świeżo wydalonego kału lub przy użyciu wymazów z odbytu (rurka odbytnicza); w przypadku braku odpowiednich warunków materiał należy umieścić w środowisku transportowym. W tym celu należy użyć agaru dojelitowego (pożywka MacConkeya lub Shigella-Salmonella), umiarkowanie selektywnego agaru ksylozo-lizyno-deoksycholanowego, KLD) i pożywki (pożywka seleninowa). Jeżeli czas między pobraniem a zaszczepieniem przekracza 2 godziny, należy zastosować roztwory konserwujące: 20% bulion z żółcią, kombinowana pożywka Kauffmanna.

Odchody w mieszaninie glicerynowej są emulgowane, kroplę emulsji nanosi się na podłoże i wciera szpatułką. Podłoża różnicujące dla Shigella to Ploskirev, Endo i EMS (agar z błękitem metylenowym). Pożywka Ploskireva (skład pożywki obejmuje: MPA, laktozę, sole kwasy żółciowe i wskaźnik jasnozielony) jest również elektywnym medium dla Shigelli, ponieważ hamuje wzrost Escherichia coli.
Równolegle do siewu bezpośredniego zebrany materiał wysiane na pożywce wzbogacającej - bulion z seleninem.
Wszystkie uprawy są umieszczane w termostacie.

Dzień 2 badania:

Kubki zdejmuje się z termostatu, podejrzane kolonie przesiewa się na pożywce Ressela (pożywka zawierająca: agar-agar, wskaźnik Andrede, 1% laktoza, 0,1% glukoza) i mannitol. Wysiew odbywa się poprzez głaskanie na pochyłej powierzchni i wstrzykiwanie do kolumny agarowej. Zaszczepioną pożywkę Ressela umieszcza się w termostacie na 18-24 godziny (równocześnie przeprowadza się ponowne wysiewanie z pożywki z selenitem na różnicowe pożywki diagnostyczne).
Zrób rozmazy (barwienie Grama), mikroskop.
Przygotuj preparaty „wiszące” lub „zmiażdżone” krople.
Stwierdzenie wskazującego na RZS z poliwalentnymi surowicami diagnostycznymi przeciwko Shigellozie.
Wysiew podejrzanych kolonii na skos agarowy.

Dzień 3 badania:

Mikroskopia materiału skosu agarowego.
Hodowle, które nie fermentowały laktozy na pożywce Ressela poddaje się dalszym badaniom: wykonuje się rozmazy (barwienie Grama), sprawdza się czystość hodowli. W obecności pałeczek Gram-ujemnych inokulację przeprowadza się na pożywce Hissa, bulionie z papierkami wskaźnikowymi (do wykrywania indolu i siarkowodoru) i mleku lakmusowym.
Zaszczepione pożywki umieszcza się w termostacie na 18-24 godziny.

Dzień 4 badania:

Rozliczanie krótkiej „serii zróżnicowanej”.
Kultury podejrzane o właściwości enzymatyczne i kulturowe wobec Shigella są poddawane identyfikacji serologicznej. Stwierdzenie RZS na szkle (typowe i grupowe surowice diagnostyczne). Konfigurowanie wdrożonego RA.

Jak metody przyspieszone używany do Shigellozymikroskopia fluorescencyjna oraz próbka biologiczna(wprowadzenie zjadliwych szczepów Shigella do worka spojówkowego (pod dolną powieką) u świnek morskich zapalenie spojówek rozwija się pod koniec pierwszego dnia).

Test alergiczny Zuverkalovśródskórny test alergiczny z czerwonką (wprowadzenie 0,1 ml czerwonki w dodatniej reakcji przedramienia w przypadku nacieku i przekrwienia). Diagnostyka alergologiczna jest obecnie praktycznie nie stosowana. Test Tsurvekalova nie różni się swoistością, pozytywne reakcje są rejestrowane nie tylko w przypadku shigelozy, ale także salmonellozy, escherichiozy, jersiniozy i innych ostrych infekcji jelitowych, a czasem u osób zdrowych.

Leczenie i profilaktyka.Bakteriofagi stosuje się w leczeniu i profilaktyce zgodnie ze wskazaniami epidemiologicznymi. podawanie doustne, antybiotyki po określeniu antybiogramu; w przypadku dysbakteriozy preparaty probiotyczne do korekcji mikroflory. Aby uzupełnić utratę płynów i elektrolitów - wprowadzenie do środka roztworu glukozowo-elektrolitowego.

Specjalne cele:

Interpretować biologiczne właściwości patogenów szigellozy.

Zapoznaj się z klasyfikacją Shigella.

Naucz się interpretować patogenetyczne wzorce procesu zakaźnego wywołanego przez Shigellę.

Określenie metod diagnostyki mikrobiologicznej, terapii etiotropowej i profilaktyki szigellozy.

Być w stanie:

Zaszczepić materiał testowy na pożywce.
- Przygotuj rozmazy i plamę Grama.
- Przeprowadzić mikroskopię preparatów za pomocą mikroskopu immersyjnego.
- Analizuj cechy morfologiczne, kulturowe i enzymatyczne Shigella.

Pytania teoretyczne:

1. Charakterystyka patogenów szigellozy. właściwości biologiczne.

2. Klasyfikacja Shigella. Podstawowe zasady.

3. Epidemiologia, patogeneza i cechy kliniczne shigeloza.

4. Diagnostyka laboratoryjna.

5. Zasady leczenia i zapobiegania shigellozie.

Zadania praktyczne wykonywane na zajęciach:

1. Mikroskopia preparatów demonstracyjnych z czystych kultur patogenów Shigelosis.

2. Praca nad bakteriologiczną diagnostyką szigellozy: badanie kultur kałowych na pożywce Ploskireva.

3. Podhodowla podejrzanych kolonii na pożywce Ressela i na BCH w celu określenia tworzenia indolu i H 2 S .

4. Szkicowanie preparatów pokazowych i schemat diagnostyki mikrobiologicznej shigelosis w protokole lekcji.

5. Rejestracja protokołu.

Literatura:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Mikrobiologia medyczna, immunologia i wirusologia / Podręcznik dla uniwersytetów medycznych, Petersburg "Literatura specjalna", 1998. - 592p.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Microbiology / Textbook.-2 wyd., poprawione. I dodatkowo - M.: Medycyna, 1983, -512s.

3. Pyatkin KD Krivoshein Yu.S. Mikrobiologia z wirusologią i immunologią.- Kijów: W szkole i szcza, 1992. - 431s.

4. Mikrobiologia medyczna / Pod redakcją V.I. Pokrowskiego.-M.: GEOTAR-MED, 2001.-768s.

5. Przewodnik po szkolenie praktyczne w mikrobiologii, immunologii i wirusologii. Wyd. POSEŁ. Żykow. M. „Medycyna”. 1977. 288 s.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiologia. / Wyd. F.K. Czerkieski. M.: Medycyna, 1986. 512 s.

7. Notatki z wykładów.

Dodatkowa literatura:

1. Makijarow K.A. Mikrobiologia, wirusologia i immunologia. Ałma-Ata, „Kazachstan”, 1974. 372 s.

2. Titow M.V. Choroba zakaźna. - K., 1995. 321s.

3. Shuvalova E.P. choroba zakaźna. - M.: Medycyna, 1990. - 559 s.

4. BME, tom 1, 2, 7.

5. Pawłowicz S.A. Mikrobiologia medyczna na wykresach: Proc. zasiłek medyczny w towarzyszu. Mn.: Wysz. szkoła, 1986. 255 s.

Krótki wytyczne do pracy w sesji praktycznej.

Na początku lekcji sprawdzany jest poziom przygotowania uczniów do lekcji.

Niezależna praca polega na badaniu klasyfikacji Shigella, analizie schematu patogenetycznego i objawy kliniczne shigeloza. Badanie metod diagnostyki laboratoryjnej szigellozy. Studenci dokonują wysiewu biomateriału na pożywki. Następnie przygotowuje się mikropreparaty, barwi się je według Grama, wykonuje się mikroskopię, szkicuje mikropreparaty i podaje niezbędne wyjaśnienia. W skład samodzielnej pracy wchodzi również mikroskopia preparatów demonstracyjnych i ich szkicowanie w protokole lekcji.

Pod koniec lekcji przeprowadzana jest kontrola testowa i analiza końcowych wyników samodzielnej pracy każdego ucznia.

Mapa technologiczna lekcji praktycznej.

p/n	Gradacja	Czas w minutach	Sposoby uczenia się	Ekwipunek	Lokalizacja
	Sprawdzanie i korygowanie początkowego poziomu przygotowania do lekcji		Zadania testowe linia bazowa	Tabele, atlas	pokój do nauki
	Niezależna praca		Wykres struktury logicznej	Mikroskop zanurzeniowy, barwniki, szkiełka podstawowe, ezy bakteriologiczne, pożywki, pożywka Ploskireva, pożywka Ressela, „różnobarwna seria Hissa”
	Sprawdzenie siebie i korekta opanowania materiału		Ukierunkowane zadania edukacyjne
	Kontrola testu		Testy
	Analiza wyników pracy

Ukierunkowane zadania edukacyjne:

Kał pobrano od dziecka z ostrymi infekcjami jelitowymi (pobieranie kału przeprowadzono za pomocą rurki doodbytniczej) zawierającej śluz i ropę. Jaką ekspresową metodę diagnostyczną należy zastosować?

A. ELISA.

b. RAFA.

C. RZS.

D. RSK.

MI. OSR.

Czynnik sprawczy czerwonki został wyizolowany od chorego dziecka z ostrą infekcją jelitową. Jaki rodzaj cechy morfologiczne charakterystyczne dla patogenu?

A . Gram-ujemna nieruchoma pałeczka.

B . Gram-dodatni pręt ruchomy.

C . Tworzy kapsułkę na pożywce.

D . Tworzy zarodniki w środowisku zewnętrznym.

mi . Paciorkowce Gram-dodatnie.

3. Pacjent, który zachorował trzy dni temu i skarży się na gorączkę 38°C, częste bóle brzucha płynny stolec, obecność krwi w stolcu, lekarz zdiagnozowany klinicznie Czerwonka bakteryjna. Jaką metodę diagnostyki mikrobiologicznej zastosować w tym przypadku i jaki materiał należy pobrać od pacjenta, aby potwierdzić diagnozę?

A. kalibracja bakterioskopowa

B. kalibracja bakteriologiczna.

C. Krew bakterioskopowa.

D. Mocz bakteriologiczny.

E. Krew serologiczna.

4. Shigella Sonne została wyizolowana z kału pacjenta. Co musi być zrobione dodatkowe badania określić źródło infekcji?

A . Przeprowadzić typowanie fagowe wyizolowanej czystej kultury.

B . Określ antybiogram.

C . Skonfiguruj reakcję strącania.

D . Skonfiguruj reakcję wiązania dopełniacza.

mi . Przygotuj reakcję neutralizacji.

5. W grupie turystów (27 osób), którzy pili wodę z jeziora, po dwóch dniach objawy pojawiły się u 7 osób ostra biegunka. Jaki materiał do ustalenia etiologii ta choroba należy wysłać do laboratorium?

A. Woda, kał pacjentów.

B. Woda, krew chorych.

C. Produkty spożywcze.

D. Mocz.

E. Flegma.

6. Istotną wadą mikroskopowej metody diagnostycznej ostrych infekcji jelitowych jest jej niedostateczna zawartość informacyjna ze względu na morfologiczną tożsamość bakterii z rodziny Enterobacteriaceae . Co sprawia, że ta metoda jest bardziej informacyjna?

A . Test radioimmunologiczny.

B . Reakcja Coombsa.

C . Związany test immunosorpcyjny.

D . reakcja opsonizacji.

mi . Reakcja immunofluorescencyjna.

7. 29-letni pacjent trafił do szpitala z napadami wymiotów, biegunki i parcia. Kał z kawałkami śluzu i domieszką krwi. Badanie bakteriologiczne bakterii z kolonii na pożywce Ploskireva ujawniło nieruchome, Gram-ujemne pałeczki, które nie fermentują laktozy. Wymień czynnik sprawczy procesu zakaźnego.

A. Shigella flexneri.

b. Eltor wibrio.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

MI. Salmonella enteritidis.

8. Do laboratorium mikrobiologicznego dostarczono sałatę, co do której podejrzewa się, że jest przyczyną ostrej choroby infekcja jelitowa. Jakie pożywki są używane do pierwotnego zaszczepienia?

A . Agar z solą żółtkową, MPB.

b. MPA, MPB.

C . Rosół z selenitu, Endo, Ploskireva.

D . Rosół z wątroby, pożywka Roux.

mi . Agar z krwią, agar alkaliczny.

9. W badaniach mikrobiologicznych mięsa mielonego wyizolowano bakterie należące do rodzaju Shigella. Badanie jakie właściwości drobnoustrojów doprowadziło do takiego wniosku?

A . Kulturalny, nalewkowy.

B . Antygenowe, kulturowe.

C . Sacharolityczny, proteolityczny.

D . Antygenowy, immunogenny.

mi . Morfologiczny, antygenowy.

10. Kiedy badanie mikroskopowe wymiocin pobranych od pacjenta z objawami ostrej infekcji jelitowej, znaleziono nieruchome patyki. W jakim rozmazie lub preparacie można badać ruchliwość bakterii?

A . W rozmazie barwionym metodą Grama.

B . W rozmazie barwionym według Tsil - Nelsen.

C . W przygotowaniu „gruba kropla”.

D . W rozmazie poplamionym Neisserem.

mi . W przygotowaniu „zmiażdżona kropla”.

Algorytm Praca laboratoryjna:

1. Badanie właściwości biologicznych Shigella.

2. Zapoznanie się z klasyfikacją Shigella.

3. Analiza schematu patogenetycznych i klinicznych objawów shigelozy.

4. Badanie metod diagnostyki laboratoryjnej szigellozy.

5. Poznanie podstawowych zasad terapii i profilaktyki szigellozy.

Przygotowanie preparatów utrwalonych z hodowli bakteryjnej.
Kolorowanie mikropreparaty przez Grama.
Mikroskopia mikropreparatów Z za pomocą mikroskopu immersyjnego, ich analizę i szkicowanie w protokole lekcji.
Mi chromoskopia i analiza preparatów demonstracyjnych z czystych kultur Shigella.
Szkicowanie preparatów demonstracyjnych i schemat diagnostyki laboratoryjnej Shigellozy w protokole.
Sformułowanie protokołu.

Czerwonka - jest to bolesna infekcja, której towarzyszy biegunka z wypływem krwi, ropy i śluzu, bóle brzucha oraz objawy ogólnego zatrucia, występujące przy dominującej zmianie okrężnicy, spowodowane różne rodzaje uprzejmy Shigella(bakterie czerwonki).

czynniki sprawcze czerwonki należy do działu Gracilicutes, rodzina Enterobacteriaceae, uprzejmy Shigella.
Czerwonka , nazywa Shigella dysenteriae, jest cięższa niż choroby wywoływane przez inne Shigella, ponieważ oprócz endotoksyny wywołującej zapalenie jelit, ten typ bakterii wytwarza silną egzotoksynę, która działa jak neurotoksyna

czerwonka bakteryjna , lub Shigelloza, jest chorobą zakaźną wywoływaną przez bakterie z rodzaju Shigella,

Czerwonka.Morfologia i właściwości barwne.
Shigella - Gram-ujemne pałeczki o zaokrąglonych końcach, długości 2-3 mikronów, grubości 0,5-7 mikronów, nie tworzą zarodników, nie mają wici, są nieruchome. W wielu szczepach znajdują się kosmki typu ogólnego i pilusy narządów płciowych. Niektóre Shigella mają mikrokapsułkę.

Czerwonka. Uprawa.
Pałeczki czerwonkowe to fakultatywne beztlenowce. Są mało wymagające dla pożywek, dobrze rosną w temperaturze 37 ° C i pH 7,2-7,4. Na gęstych podłożach tworzą małe przezroczyste kolonie, na podłożach płynnych - rozproszone zmętnienie. Bulion z selenitem jest najczęściej używany jako pożywka wzbogacająca do uprawy Shigella.

Czerwonka.aktywność enzymatyczna.
Shigella ma mniejszą aktywność enzymatyczną niż inne enterobakterie. Fermentują węglowodany tworząc kwas. Ważną cechą pozwalającą na odróżnienie Shigelli jest ich związek z mannitolem: S. dysenteriae nie fermentuje mannitolu, przedstawiciele grup B, C, D są mannitolo-dodatni. Najbardziej aktywne biochemicznie są S. sonnei, które powoli (w ciągu 2 dni) mogą fermentować laktozę. Na podstawie związku S. sonnei z ramnozą, ksylozą i maltozą wyróżnia się 7 jej biochemicznych wariantów.

Czerwonka.Struktura antygenowa.
Shigella ma antygen O, jego heterogeniczność pozwala na rozróżnienie serotypów i subserowarów w obrębie grup; u niektórych członków rodzaju znajduje się antygen K.

Czerwonka.czynniki chorobotwórczości.
Wszystkie prątki czerwonki tworzą endotoksynę, która ma działanie enterotropowe, neurotropowe, pirogenne. Ponadto S. dysenteriae - Shigella Grigoriev-Shiga - wydzielają egzotoksynę, która ma działanie enterotoksyczne, neurotoksyczne, cytotoksyczne i nefrotoksyczne na organizm, co odpowiednio zaburza metabolizm wody z solą i aktywność ośrodkowego układu nerwowego, prowadzi do śmierci komórek nabłonkowych jelita grubego, uszkodzenie kanalików nerkowych.

Z powstawaniem egzotoksyny wiąże się cięższy przebieg czerwonki wywołanej przez ten patogen. Egzotoksyna może być również wydzielana przez inne rodzaje Shigella. Odkryto czynnik przepuszczalności RF, w wyniku którego zaatakowane zostają naczynia krwionośne. Czynniki chorobotwórcze obejmują również białko inwazyjne, ułatwiając ich penetrację do komórek nabłonka, a także do pilusów i białek błony zewnętrznej odpowiedzialnych za adhezję oraz mikrokapsułki.

Czerwonka.opór.
Shigella mają niską odporność na działanie różne czynniki. S. sonnei mają większą odporność, co w przypadku woda z kranu utrzymują się do 2,5 miesiąca, w wodzie otwartych zbiorników przetrwają do 1,5 miesiąca. S. sonnei może nie tylko przetrwać przez długi czas, ale także rozmnażać się w produktach, zwłaszcza nabiałowych.

Czerwonka.Epidemiologia.
Czerwonka jest infekcją antroponotyczną: jej źródłem są chorzy i nosiciele. Mechanizm przenoszenia infekcji jest fekalno-oralny. Drogi transmisji mogą być różne - przy czerwonce Sonne'a przeważa droga pokarmowa, przy czerwonce Flexnera - woda, dla czerwonki Grigoriewa-Shigi charakterystyczna jest droga kontaktowo-domowa.

Czerwonka znaleźć w wielu krajach świata. W ostatnie lata nastąpił gwałtowny wzrost zachorowalności na tę infekcję. Chorują ludzie w każdym wieku, ale najbardziej podatne na czerwonkę są dzieci w wieku od 1 do 3 lat. Liczba pacjentów wzrasta w okresie lipiec-wrzesień. Różne rodzaje Shigella są nierównomiernie rozmieszczone w niektórych regionach.

Czerwonka.Patogeneza.
Shigella dostaje się do przewodu pokarmowego przez usta i dociera do jelita grubego. Posiadając tropizm do nabłonka, patogeny przyczepiają się do komórek za pomocą pilusów i białek błony zewnętrznej. Dzięki czynnikowi inwazyjnemu wnikają do wnętrza komórek, tam namnażają się, w wyniku czego komórki umierają.

W ścianie jelita tworzą się owrzodzenia, w miejscu których powstają blizny. Endotoksyna uwalniana podczas niszczenia bakterii powoduje ogólne zatrucie, zwiększoną perystaltykę jelit i biegunkę. Krew z powstałych wrzodów dostaje się do stolca. W wyniku działania egzotoksyny obserwuje się wyraźniejsze naruszenie metabolizmu wody i soli, aktywność ośrodkowego układu nerwowego i uszkodzenie nerek.

Czerwonka.obraz kliniczny.
Okres inkubacji trwa od 1 do 5 dni. Choroba zaczyna się ostro wraz ze wzrostem temperatury ciała do 38-39 ° C, pojawia się ból brzucha, biegunka. W kale znajduje się domieszka krwi, śluz. Najcięższa jest czerwonka Grigoriewa-Shigi.

Czerwonka.Odporność.
Po chorobie odporność jest specyficzna dla gatunku i wariantu. Jest krótkotrwały i niestabilny. Często choroba staje się przewlekła. Powtarzające się choroby notowano nawet w ciągu jednego sezonu.

Czerwonka.laboratorium diagnostyka.
Materiałem do badań jest kał pacjenta. Podstawą diagnozy jest metoda bakteriologiczna, która pozwala zidentyfikować patogen, określić jego wrażliwość na antybiotyki, przeprowadzić identyfikację wewnątrzgatunkową (określić wariant biochemiczny, serotyp lub kolicynogen). Przy przedłużonym przebiegu czerwonki może być stosowany jako środek pomocniczy metoda serologiczna, polegający na formułowaniu RA, RNHA (zwiększając miano przeciwciał przy wielokrotnym formułowaniu reakcji można potwierdzić diagnozę).

Czerwonka.Leczenie.
Pacjenci z ciężkimi postaciami czerwonki Grigorieva-Shish i Flexnera są leczeni antybiotykami szeroki zasięg działania z obowiązkowym uwzględnieniem antybiogramu, ponieważ wśród Shigella często występują formy nie tylko oporne na antybiotyki, ale także antybiotykozależne. W łagodnych postaciach czerwonki nie stosuje się antybiotyków, ponieważ ich stosowanie prowadzi do dysbakteriozy, która się pogarsza proces patologiczny, oraz zakłócenie procesów rekonwalescencji w błonie śluzowej okrężnicy.

Czerwonka.Zapobieganie.
Jedynym lekiem, który można stosować w ogniskach infekcji w celach profilaktycznych, jest bakteriofag czerwonkowy. Główną rolę odgrywa profilaktyka niespecyficzna.

Profilaktyka niespecyficzna zapewnia prawidłowe sanitarno-higieniczne uporządkowanie życia ludzi, dostarczając im wysokiej jakości wody i pożywienia.

W środowisku pacjenta należy podjąć środki zapobiegające rozprzestrzenianiu się patogenu.

Mikrobiologia czerwonki

Czerwonka to choroba zakaźna charakteryzująca się ogólnym zatruciem organizmu, biegunką i swoistym uszkodzeniem błony śluzowej jelita grubego. Jest to jedna z najczęstszych ostrych chorób jelit na świecie. Choroba znana jest od czasów starożytnych pod nazwą „krwawa biegunka”, ale jej charakter okazał się inny. W 1875 r. rosyjski naukowiec F. A. Lesh wyizolował amebę od pacjenta z krwawą biegunką Entamoeba histolytica, w ciągu następnych 15 lat ustanowiono niezależność tej choroby, dla której zachowano nazwę amebiaza.

Czynnikami sprawczymi czerwonki właściwej jest duża grupa biologicznie podobnych bakterii zjednoczonych w rodzaju Shigella. Patogen został po raz pierwszy odkryty w 1888 roku przez A. Chantemesa i F. Vidala; w 1891 r. opisał ją A. V. Grigoriev, a w 1898 r. K. Shiga, wykorzystując surowicę, którą otrzymał od pacjenta, zidentyfikował patogen u 34 pacjentów z czerwonką, ostatecznie dowodząc etiologicznej roli tej bakterii. Jednak w kolejnych latach odkryto także inne czynniki sprawcze czerwonki: w 1900 r. – S. Flexner, w 1915 r. – K. Sonne, w 1917 r. – K. Stutzer i K. Schmitz, w 1932 r. – J. Boyd , w 1934 r. D. Large, w 1943 r. A. Sachs. Obecnie rodzaj Shigella obejmuje ponad 40 serotypów. Wszystkie są krótkimi, nieruchomymi pałeczkami Gram-ujemnymi, które nie tworzą zarodników i kapsułek, które dobrze rosną na zwykłych pożywkach, nie rosną na pożywce głodowej z cytrynianem lub malonianem jako jedynym źródłem węgla; nie tworzą H 2 S, nie zawierają ureazy; reakcja Vogesa-Proskauera jest negatywna; glukoza i niektóre inne węglowodany są fermentowane do postaci kwasu bez gazu (z wyjątkiem niektórych biotypów) Shigella flexneri: S. Manchester oraz S. newcastle); z reguły nie fermentują laktozy (z wyjątkiem Shigella Sonne), adonitu, salicyny i inozytolu, nie upłynniają żelatyny, zwykle nie tworzą katalazy, nie posiadają dekarboksylazy lizynowej i deaminazy fenyloalaniny. Zawartość G + C w DNA wynosi 49 - 53% mol. Shigella to fakultatywne beztlenowce, temperatura optymalna dla wzrostu to 37 °C, nie rosną w temperaturach powyżej 45 °C, optymalne pH podłoża wynosi 6,7 - 7,2. Kolonie na gęstych podłożach są okrągłe, wypukłe, półprzezroczyste, w przypadku dysocjacji tworzą się szorstkie kolonie w kształcie litery R. Wzrost na BCH w postaci jednolitego zmętnienia, szorstkie formy tworzą osad. Świeżo wyizolowane kultury Sonne Shigella zwykle tworzą kolonie dwóch typów: małe okrągłe wypukłe (faza I), duże płaskie (faza II). Charakter kolonii zależy od obecności (faza I) lub nieobecności (faza II) plazmidu z m. m. 120 MD, co również determinuje zjadliwość Shigella Sonne.

Międzynarodowa klasyfikacja Shigella jest budowana z uwzględnieniem ich cech biochemicznych (mannitol niefermentujący, mannitol fermentujący, Shigella wolno fermentująca laktozę) oraz cechy struktury antygenowej (Tabela 37).

U Shigelli znaleziono antygeny O o różnej specyficzności: wspólne dla rodziny Enterobacteriaceae, rodzajowe, gatunkowe, grupowe i specyficzne dla typu, a także antygeny K; Nie mają antygenów H.

Tabela 37

Klasyfikacja bakterii z rodzaju Shigella

Klasyfikacja uwzględnia tylko antygeny O specyficzne dla grupy i typu. Zgodnie z tymi cechami, Shigella podzielona na 4 podgrupy lub 4 gatunki i obejmuje 44 serotypy. W podgrupie A (gatunek Shigella dysenteriae) obejmuje shigella, która nie fermentuje mannitolu. Gatunek obejmuje 12 serotypów (1-12). Każdy serotyp ma swój własny specyficzny typ antygenu; związki antygenowe między serotypami, a także z innymi typami Shigella, są słabo wyrażane. Do podgrupy B (typ Shigella flexneri) obejmują Shigella, zwykle fermentujący mannitol. Shigella tego gatunku są ze sobą serologicznie spokrewnione: zawierają antygeny specyficzne dla typu (I - VI), według których dzielą się na serotypy (1 - 6) i antygeny grupowe, które występują w różnych składach w każdym serotypie i zgodnie z którymi serotypy dzielą się na podserotypy. Ponadto gatunek ten obejmuje dwa warianty antygenowe, X i Y, które nie mają typowych antygenów, różnią się zestawami antygenów grupowych. Serotyp S. flexneri 6 nie ma podserotypów, ale jest podzielony na 3 typy biochemiczne zgodnie z charakterystyką fermentacji glukozy, mannitolu i dulcytu (tab. 38).

Tabela 38

Biotypy S. flexneri 6

Notatka. K - fermentacja z wytworzeniem samego kwasu; KG - fermentacja z tworzeniem kwasu i gazu; (-) - brak fermentacji.

Antygen lipopolisacharydowy O we wszystkich Shigella Flexner zawiera antygen grupowy 3, 4 jako główną strukturę pierwotną, jego synteza jest kontrolowana przez gen chromosomalny zlokalizowany w pobliżu his-locus. Antygeny specyficzne dla typu I, II, IV, V oraz antygeny grupowe 6, 7, 8 są wynikiem modyfikacji antygenów 3, 4 (glikozylacji lub acetylacji) i są określane przez geny odpowiednich profagów konwertujących, miejsca integracji który znajduje się w regionie lac-pro chromosomu Shigella.

Pojawił się na terenie kraju w latach 80-tych. XX wiek i szeroko stosowany nowy podserotyp S. flexneri 4(IV:7, 8) różni się od podserotypów 4a (IV:3, 4) i 4b (IV:3, 4, 6), powstały z wariantu S. flexneri Y(IV:3, 4) z powodu lizogenizacji przez konwertujące profagi IV i 7, 8.

Do podgrupy C (rodzaj Shigella boydii) obejmują Shigella, zwykle fermentujący mannitol. Członkowie grupy różnią się od siebie serologicznie. Związki antygenowe w obrębie gatunku są słabo wyrażone. Gatunek obejmuje 18 serotypów (1 - 18), z których każdy ma swój własny antygen typu głównego.

W podgrupie D (gatunek Shigella sonnei) obejmuje Shigella, które zwykle fermentują mannitol i są zdolne do powolnego (po 24 h inkubacji i później) fermentacji laktozy i sacharozy. Pogląd S. sonnei obejmuje jeden serotyp, jednak kolonie fazy I i II mają swoje własne antygeny specyficzne dla typu. Zaproponowano dwie metody klasyfikacji wewnątrzgatunkowej Shigella Sonne'a:

1) podział na 14 biochemicznych typów i podtypów według ich zdolności do fermentacji maltozy, ramnozy i ksylozy; 2) podział na typy fagów według wrażliwości na zestaw odpowiednich fagów.

Te metody typowania mają głównie znaczenie epidemiologiczne. Ponadto shigella Sonne'a i shigella Flexnera są poddawane typowaniu w tym samym celu dzięki zdolności do syntezy swoistych kolicyn (kolicynogenotypowanie) oraz wrażliwości na znane kolicyny (kolicynotypowanie). Aby określić rodzaj kolicyn wytwarzanych przez Shigellę, J. Abbott i R. Shannon zaproponowali zestawy typowych i wskaźnikowych szczepów shigella, a także w celu określenia wrażliwości shigella na znane typy kolicyny, zestaw referencyjnych szczepów kolicynogennych autorstwa P. Fredericka jest używany.

opór. Shigella mają dość wysoką odporność na czynniki środowiskowe. Przeżywają na tkaninie bawełnianej i papierze do 30-36 dni, w wysuszonym kale - do 4-5 miesięcy, w glebie - do 3-4 miesięcy, w wodzie - od 0,5 do 3 miesięcy, na owocach i warzywach - do 2 tygodni, w mleku i produktach mlecznych - do kilku tygodni; w temperaturze 60 ° C umierają w 15 - 20 minut. Wrażliwy na roztwory chloraminy, aktywny chlor i inne środki dezynfekujące.

czynniki chorobotwórczości. Najważniejszą biologiczną właściwością Shigella, która determinuje ich chorobotwórczość, jest zdolność do inwazji komórek nabłonkowych, namnażania się w nich i powodowania ich śmierci. Efekt ten można wykryć za pomocą testu rogówkowo-spojówkowego (wprowadzenie jednej pętli kultury Shigella (2–3 miliardy bakterii) pod dolną powiekę świnki morskiej powoduje rozwój surowiczego ropnego zapalenia rogówki i spojówki), a także poprzez infekcję komórek hodowli (działanie cytotoksyczne) lub zarodków kurzych (ich śmierć) lub donosowo u białych myszy (rozwój zapalenia płuc). Główne czynniki patogeniczności Shigella można podzielić na trzy grupy:

1) czynniki determinujące interakcję z nabłonkiem błony śluzowej;

2) czynniki zapewniające odporność na humoralne i komórkowe mechanizmy obronne makroorganizmu oraz zdolność Shigella do namnażania się w jego komórkach;

3) zdolność do wytwarzania toksyn i produktów toksycznych, które determinują rozwój faktycznego procesu patologicznego.

Pierwsza grupa obejmuje czynniki adhezji i kolonizacji: ich rolę odgrywają pilusy, białka błony zewnętrznej i LPS. Enzymy niszczące śluz, takie jak neuraminidaza, hialuronidaza i mucynaza, sprzyjają adhezji i kolonizacji. Druga grupa obejmuje czynniki inwazji, które promują przenikanie Shigella do enterocytów i ich rozmnażanie w nich oraz w makrofagach z równoczesnym przejawem działania cytotoksycznego i (lub) enterotoksycznego. Te właściwości są kontrolowane przez geny plazmidu z m. m. 140 MD (koduje syntezę białek błony zewnętrznej powodujących inwazję) oraz geny chromosomalne Shigella: kcp A (powoduje zapalenie rogówki i spojówki), cyt (odpowiedzialny za niszczenie komórek), jak również inne geny, jeszcze nie zidentyfikowane. Ochronę Shigella przed fagocytozą zapewnia powierzchniowy antygen K, antygeny 3, 4 i lipopolisacharyd. Ponadto lipid A endotoksyny Shigella ma działanie immunosupresyjne: hamuje aktywność komórek pamięci immunologicznej.

Trzecia grupa czynników patogenności obejmuje endotoksyny i dwa typy egzotoksyn występujących w Shigella - egzotoksyny Shiga i egzotoksyny Shiga-podobne (SLT-I i SLT-II), których właściwości cytotoksyczne są najbardziej widoczne w S. dyzenteriae 1. Toksyny Shiga i Shiga-podobne występujące również w innych serotypach S. dysenteriae, one też są formowane S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC i trochę salmonelli. Synteza tych toksyn jest kontrolowana przez geny toksyczne fagów konwertujących. Enterotoksyny typu LT zostały znalezione w Flexner, Sonne i Boyd Shigella. Synteza LT w nich jest kontrolowana przez geny plazmidowe. Enterotoksyna stymuluje aktywność cyklazy adenylanowej i odpowiada za rozwój biegunki. Toksyna Shiga, czyli neurotoksyna, nie reaguje z układem cyklazy adenylanowej, ale ma bezpośrednie działanie cytotoksyczne. Toksyny Shiga i Shiga-podobne (SLT-I i SLT-II) mają MW 70 kD i składają się z podjednostek A i B (ostatnia z 5 identycznych małych podjednostek). Receptorem toksyn jest glikolipid błony komórkowej.

Zjadliwość Shigella Sonne zależy również od plazmidu z m.m.120 MD. Kontroluje syntezę około 40 polipeptydów błony zewnętrznej, z których siedem jest związanych z wirulencją. Shigella Sonne z tym plazmidem tworzy kolonie fazy I i jest zjadliwa. Hodowle, które utraciły plazmid, tworzą kolonie fazy II i są pozbawione zjadliwości. Plazmidy o mm 120 - 140 MD znaleziono w Shigelli Flexner i Boyd. Lipopolisacharyd Shigella jest silną endotoksyną.

Cechą epidemiologiczną czerwonki jest zmiana składu gatunkowego patogenów, a także biotypów Sonne i serotypów Flexner w niektórych regionach. Na przykład do końca lat 30. XX wieku XX wiek dzielić się S. dyzenteriae 1 stanowiły do 30-40% wszystkich przypadków czerwonki, a następnie ten serotyp zaczął występować coraz mniej i prawie zniknął. Jednak w latach 60. - 80. XX wieku. S. dysenteriae ponownie pojawił się na arenie historycznej i spowodował serię epidemii, które doprowadziły do powstania trzech ognisk hiperendemicznych - w Ameryce Środkowej, Afryce Środkowej i Azji Południowej (Indie, Pakistan, Bangladesz i inne kraje). Przyczyny zmiany składu gatunkowego patogenów czerwonki są prawdopodobnie związane ze zmianą odporności zbiorowej oraz ze zmianą właściwości bakterii czerwonki. W szczególności zwrot S. dyzenteriae 1 a jego szeroka dystrybucja, która powodowała powstawanie hiperendemicznych ognisk czerwonki, jest związana z pozyskiwaniem przez nią plazmidów, co powodowało oporność wielolekową i zwiększoną zjadliwość.

Cechy patogenezy i kliniki. Okres inkubacji czerwonki wynosi 2-5 dni, czasem mniej niż jeden dzień. Powstawanie ogniska zakaźnego w błonie śluzowej zstępującej części jelita grubego (esicy i odbytnicy), w którym przenika czynnik sprawczy czerwonki, jest cykliczne: adhezja, kolonizacja, wprowadzenie Shigella do cytoplazmy enterocytów, ich rozmnażanie wewnątrzkomórkowe, niszczenie i odrzucanie komórek nabłonkowych, uwalnianie patogenów do światła jelita; po tym rozpoczyna się kolejny cykl - adhezja, kolonizacja itp. Intensywność cykli zależy od stężenia patogenów w warstwie ciemieniowej błony śluzowej. W wyniku powtarzających się cykli rośnie ognisko zapalne, powstałe wrzody, łączące, zwiększają ekspozycję ściany jelita, w wyniku czego w kale pojawiają się krew, śluzowo-ropne grudki i wielojądrzaste leukocyty. Cytotoksyny (SLT-I i SLT-II) powodują niszczenie komórek, enterotoksyny - biegunka, endotoksyny - ogólne zatrucie. Klinika czerwonki w dużej mierze zależy od tego, jaki rodzaj egzotoksyn jest w większym stopniu wytwarzany przez patogen, stopień jego działania alergizującego i stan odporności organizmu. Jednak wiele kwestii patogenezy czerwonki pozostaje niewyjaśnionych, w szczególności: przebieg czerwonki u dzieci w pierwszych dwóch latach życia, przyczyny przejścia ostrej czerwonki w przewlekłą, znaczenie uczulenia, mechanizm odporności miejscowej błony śluzowej jelita itp. Najbardziej typowymi objawami klinicznymi czerwonki są biegunka, częste parcie: w ciężkich przypadkach do 50 lub więcej razy dziennie, parcie (bolesne skurcze odbytnicy) i ogólne zatrucie. Charakter stolca zależy od stopnia uszkodzenia jelita grubego. Najpoważniejsza czerwonka jest spowodowana przez S. dyzenteriae 1, najłatwiej - czerwonka Sonne'a.

Odporność poinfekcyjna. Jak wykazały obserwacje małp, po cierpieniu na czerwonkę, utrzymuje się silna i dość długotrwała odporność. Jest to spowodowane przez przeciwciała przeciwdrobnoustrojowe, antytoksyny, zwiększoną aktywność makrofagów i limfocytów T. Istotną rolę odgrywa miejscowa odporność błony śluzowej jelita, w której pośredniczą IgAs. Jednak odporność ma charakter specyficzny dla typu, nie występuje silna odporność krzyżowa.

Diagnostyka laboratoryjna. Główna metoda jest bakteriologiczna. Materiał do badań to kał. Schemat izolacji patogenów: inokulacja na pożywkach diagnostycznych Endo i Ploskirev (równolegle na pożywce wzbogaconej, a następnie inokulacja na pożywce Endo i Ploskirev) w celu wyizolowania izolowanych kolonii, uzyskanie czystej kultury, zbadanie jej właściwości biochemicznych oraz z uwzględnieniem drugi, identyfikacja przy użyciu poliwalentnych i monowalentnych surowic diagnostycznych aglutynujących. Produkowane są następujące komercyjne serum.

1. Shigella, która nie fermentuje mannitolu:

do S. dyzenteriae 1 oraz 2

do S. dysenteriae 3–7(wielowartościowe i jednowartościowe),

do S. dysenteriae 8 – 12(wielowartościowe i jednowartościowe).

2. Do mannitolu fermentującego Shigella:

do typowych antygenów S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

grupować antygeny S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8- wielowartościowe,

na antygeny S.boydii 1–18(wielowartościowe i jednowartościowe), na antygeny S. sonnei I faza, II faza,

na antygeny S. flexneri I–VI+ S. sonnei- wielowartościowy.

W celu szybkiej identyfikacji Shigella zalecana jest następująca metoda: podejrzaną kolonię (laktosonogicznie ujemną na podłożu Endo) przeszczepia się na podłoże TSI (eng. żelazo z potrójnym cukrem) - agar trzycukrowy (glukoza, laktoza, sacharoza) z żelazem w celu określenia produkcji H 2 S; lub na pożywce zawierającej glukozę, laktozę, sacharozę, żelazo i mocznik. Każdy organizm, który rozkłada mocznik po 4 do 6 godzinach inkubacji, najprawdopodobniej należy do rodzaju odmieniec i mogą być wykluczone. Można wykluczyć mikroorganizm wytwarzający H 2 S lub posiadający ureazę lub wytwarzający kwas w stawie (fermentuje laktozę lub sacharozę), chociaż szczepy wytwarzające H 2 S należy zbadać jako możliwych członków rodzaju Salmonella. We wszystkich innych przypadkach kultura wyhodowana na tych podłożach powinna zostać zbadana i, jeśli fermentuje glukozę (zmiana koloru kolumny), wyizolowana w czysta forma. Jednocześnie można to zbadać w teście aglutynacji na szkle z odpowiednią antysurowicą do rodzaju Shigella. W razie potrzeby przeprowadza się inne testy biochemiczne w celu sprawdzenia przynależności do rodzaju Shigella i mobilność na studia.

Do wykrywania antygenów we krwi (w tym w ramach CEC), moczu i kale można zastosować następujące metody: RPHA, RSK, reakcja koagulacji (w moczu i kale), IFM, RAGA (w surowicy krwi). Metody te są wysoce skuteczne, specyficzne i odpowiednie do wczesnej diagnozy.

Do diagnostyki serologicznej można zastosować: RPGA z odpowiednią diagnostyką erytrocytów, metodę immunofluorescencyjną (w modyfikacji pośredniej), metodę Coombsa (oznaczenie miana niekompletnych przeciwciał). Wartość diagnostyczną ma również test alergiczny z czerwonką (roztwór frakcji białkowych Shigella Flexner i Sonne). Reakcja jest brana pod uwagę po 24 h. Uważa się ją za pozytywną w obecności przekrwienia i nacieku o średnicy 10-20 mm.

Leczenie. Główną uwagę przywiązuje się do przywrócenia prawidłowego metabolizmu wody i soli, racjonalnego odżywiania, detoksykacji, racjonalnej antybiotykoterapii (biorąc pod uwagę wrażliwość patogenu na antybiotyki). Dobry efekt uzyskuje się przez wczesne zastosowanie wielowartościowego bakteriofaga czerwonkowego, zwłaszcza tabletek z otoczką pektynową, która chroni faga przed działaniem HCl soku żołądkowego; w jelicie cienkim pektyny rozpuszczają się, fagi są uwalniane i wykazują swoje działanie. W celach profilaktycznych faga należy podawać co najmniej raz na trzy dni (okres jego przeżycia w jelicie).

Problem specyficznej profilaktyki. Aby stworzyć sztuczną odporność na czerwonkę, stosowano różne szczepionki: od zabitych bakterii, chemiczne, alkoholowe, ale wszystkie okazały się nieskuteczne i zostały przerwane. Szczepionki przeciwko czerwonce Flexnera zostały stworzone z żywej (zmutowanej, zależnej od streptomycyny) Shigella Flexner; szczepionki rybosomalne, ale również nie były szeroko stosowane. Dlatego problem specyficznej profilaktyki czerwonki pozostaje nierozwiązany. Głównym sposobem walki z czerwonką jest poprawa systemu zaopatrzenia w wodę i kanalizacji, zapewnienie ścisłych reżimów sanitarno-higienicznych w przedsiębiorstwach spożywczych, zwłaszcza mleczarskich, w placówkach opieki nad dziećmi, miejscach publicznych i higienie osobistej.

KATEGORIE

USG klatki piersiowej

POPULARNE ARTYKUŁY

	Dziesięć znaków miłości mężczyzny do kobiety - Zachowanie kochanka
	Cztery etapy życia i śmierci w Ajurwedzie
	Najbardziej romantyczne i kochające znaki zodiaku
	Jak zrozumieć, że kobieta cię nie kocha (znaczniki, że czas poszukać nowej)?
	„Biały Szum” i negocjacje ze światem umarłych

2022 „kingad.ru” - badanie ultrasonograficzne narządów ludzkich

Badania bakteriologiczne w czerwonce. Diagnostyka laboratoryjna czerwonki, pełzakowicy i balantidozy

Gradacja

Ekwipunek