Shema pregleda rezervoara za dizenteriju. Laboratorijska dijagnostika dizenterije (pregled literature)

Dizenterija je teška crijevna infekcija koju karakterizira akutni početak. Mikrobiološka dijagnostika dizenterije uključuje izolaciju uzročnika iz fecesa bolesnika inokulacijom u poseban hranjivi medij. Bolest je potrebno razlikovati od drugih crijevnih bolesti i otrovanja. Rana dijagnoza i pravodobno liječenje pomoći će u izbjegavanju komplikacija.

Važnost pravovremene dijagnoze

Prepoznavanje dizenterije u praksi nije tako lako jer postoje zarazne i nezarazne bolesti sa sličnim kliničkim manifestacijama. Karakteristična značajka uzročnika dizenterije (Shigella) je sposobnost promjene otpornosti na antibakterijske lijekove. Pogrešno dijagnosticirana bolest dovest će do infekcije veliki broj od ljudi. Nepravilna uporaba antibiotika uzrok je otpornosti bakterija, što dovodi do masovnih infekcija i epidemija smrtni slučajevi. Izvor infekcije su bolesnici i kliconoše koji fekalijama izlučuju patogene mikroorganizme. Trajanje inkubacije dizenterija - 2-3 dana.

Klinički simptomi bolesti

• Iznenadna groznica s tjelesnom temperaturom od 40 stupnjeva ili više.
• Proljev više od 10 puta dnevno.
• Pojava krvi, sluzi u stolici, u rijetkim slučajevima gnoj.
• Gubitak apetita do potpune odsutnosti.
• Mučnina i povračanje.
• Rezanje u abdomenu i desnom hipohondriju.
• Bol u rektumu.
• Dehidracija.
• Suhi jezik s bijelom prevlakom.
• Aritmija.
• Smanjen krvni tlak.
• Poremećaji svijesti.

Dijagnostički postupci

Liječnik postavlja dijagnozu dizenterije tek nakon provođenja studija.

Dijagnostika bolesti uključuje općeprihvaćene i posebne metode koje utvrđuju ne samo konačna dijagnoza, ali i procjena stupnja disfunkcije probavnih organa. Kod dizenterije dijagnoza se postavlja na temelju epidemiološke slike bolesti, klinički simptomi i provedeno istraživanje. Glavna laboratorijska dijagnostika je mikrobiološka analiza stolice kojom se identificira do 80% uzročnika. Serološka metoda provodi se ne prije 5. dana bolesti, ova vrsta studije nadopunjuje, ali ne zamjenjuje mikrobiološku analizu. Ostale metode:

• Koprološki pregled je jednostavna i pristupačna klinička metoda kojom se otkrivaju sluz, krvne mrlje, crvene krvne stanice, neutrofili (do 50 u vidnom polju) i promijenjene epitelne stanice.
• Sigmoidoskopija - omogućuje vam praćenje procesa ozdravljenja. Nije za upotrebu kod djece.
• Metoda ispitivanja alergije - pomoćna metoda, na temelju uzimanja kožnog alergijskog testa s dizenterinom (metoda Tsuverkalov).

Opća analiza krvi

Imunološke stanice uništavaju uzročnike dizenterije u crijevima, a teški slučajevi bolesti nastaju kada bakterije napadnu limfne čvorove i zatim uđu u krvotok. Test krvi za dizenteriju procjenjuje stanje pacijenta i omogućuje pravovremeni odgovor moguće komplikacije. Povećanje sedimentacije eritrocita je laboratorijski pokazatelj koji karakterizira stupanj upale. Dizenterija također uzrokuje povećanje koncentracije trakastih neutrofila i monocita.

Kako donirati izmet za koprogram?

Za potvrdu bolesti provodi se analiza stolice. Koprogram je detaljna laboratorijska studija kojom se ocjenjuje funkcioniranje gastrointestinalnog trakta, brzina i učinkovitost probave te rad crijeva. Laboratorijskim metodama pretrage stolice otkriva se fizikalna i Kemijska svojstva izmet, sastav, prisutnost stranih organizama i inkluzija. Zahtjevi za prikupljanje stolice:

• Materijal se uzima nakon prirodnog čina defekacije.
• Sakupljanje se vrši u posebnom spremniku.
• Zabranjeno je uzimanje biološkog materijala dobivenog klistiranjem za ispitivanje stolice na dizenteriju.
• Prije studije zabranjeno je koristiti preparate željeza, koristiti rektalne čepiće, uzimati laksative ili piti alkoholna pića.

Mikrobiološka dijagnostika

Kultura na dizenteriju točno određuje vrstu patogena.

Bakteriološka dijagnostika - prikupljanje fekalnih tvari i naknadno sijanje izmeta u poseban hranjivi medij. Pojava kolonija patogenih bakterija (Shigella) nakon kulture potvrđuje sumnju na dijagnozu. Bakteriološka analiza za dizenteriju, točno određuje patogen, njegovu vrstu, podvrstu i osjetljivost na antibakterijska sredstva, što vam omogućuje da odaberete pravi lijek za liječenje.

Materijal koji se proučava je izmet s dobivenim stranim nečistoćama prirodno ili posebna cijev za sigmoidoskopiju. Djeci se uzima bris posebnim brisom (VD bris ili bris crijeva). Osjetljivost na lijekove utvrđuje se stavljanjem kolonija Shigella zajedno s raznim antibioticima. Ako se vitalna aktivnost mikroorganizama nastavi u blizini tablete s antibiotikom, tada se lijek ne koristi za liječenje, ako mikroorganizmi umru, propisano je liječenje takvim antibiotikom.

Serološki testovi na dizenteriju

U slučaju negativnih ili upitnih rezultata bakteriološke pretrage, koristi se serološka metoda. U stolica U bolesnika se otkriva bakterijski antigen, au plazmi se otkrivaju specifična protutijela. Titar protutijela može se odrediti metodom RIGA, ponekad metodom RPGA ili RA. Kao antigeni koristi se suspenzija dnevne kolonije Shegella. Nedostatak metode - pouzdane rezultate primiti samo 5 dana od početka bolesti, kada koncentracija antitijela dosegne željenu razinu.

Sigmoidoskopija

S obzirom na to da uzročnik dizenterije zahvaća debelo crijevo, sigmoidoskopija je značajna dijagnostička metoda, ali ne i odlučujuća. Dijagnostika se sastoji od umetanja rektoskopa u anus, opremljenog uređajem koji dovodi zrak. Oticanjem crijevna šupljina postaje dostupna pregledu. Ova metoda pomaže u procjeni stupnja oštećenja crijevnog epitela. S dizenterijom, stijenke crijeva postaju hiperemične kao rezultat vazodilatacije. U nekim dijelovima dolazi do erozije i krvarenja. Sigmoidoskopija ne zahtijeva pripremu, ali se postupak ne provodi ako su prisutne analne fisure ili patologije anusa.

Upute studentima za praktičnu nastavu br.28.

Tema lekcije:

Cilj: Proučavanje metoda mikrobiološke dijagnostike, etiotropne terapije i prevencije šigeloza.

Modul 2 . Specijalna, klinička mikrobiologija i mikrobiologija okoliša.

Tema 5: Metode mikrobiološke dijagnostike dizenterije.

Relevantnost teme:Šigeloza je sveprisutna i predstavlja ozbiljan problem u zemljama s niskom sanitarnom kulturnom razinom i visokom učestalošću nedovoljne i nekvalitetne prehrane. U zemljama u razvoju širenju infekcije pogoduju loši sanitarni uvjeti, loša osobna higijena, prenapučenost i veliki udio djece među stanovništvom. U Ukrajini su izbijanja šigeloze češća u zatvorenim zajednicama s niskom razinom sanitarnih uvjeta i higijene, na primjer, u jaslicama i vrtićima, na turističkim brodovima, u psihijatrijskim klinikama ili skloništima za osobe s invaliditetom. Shigella je uzrok proljeva kod putnika i turista.

Uzrok skupnih bolesti može se smatrati konzumacija prehrambenih proizvoda zaraženih nepažnjom trgovačkih radnika koji su nositelji Shigella. Postoje epidemije povezane s konzumacijom pitke vode; kupanje u zagađenim vodenim tijelima također je dovelo do infekcije. Međutim, čini se da putevi prijenosa putem hrane i vode igraju manju ulogu u širenju šigeloze u usporedbi s kolerom i trbušnim tifusom, koji obično zahtijevaju velike doze patogena da zaraze ljude. U zemljama u razvoju, gdje se bolest pretežno širi s osobe na osobu, kliconoše mogu biti važan rezervoar uzročnika infekcije. U bolesnika koji nisu uzimali antibakterijske lijekove, izlučivanje Shigella fecesom obično traje 1x4 tjedna, ali u malom broju slučajeva traje znatno dulje.

Šigeloza je akutna bakterijska infekcija crijeva uzrokovana jednom od četiri vrste Shigella. Spektar kliničkih oblika infekcije uključuje blagi, vodenasti proljev i tešku dizenteriju koju karakteriziraju grčeviti bolovi u trbuhu, tenezmi, vrućica i znakovi opće intoksikacije.

Etiologija.

Rod Shigella (nazvan po K. Shigi, koji je 1898. godine proučavao i detaljno opisao izoliranog uzročnika bakterijske dizenterije A.V. Grigorieva) iz obitelji Enterobacteriaceae sastoji se od skupine blisko povezanih vrsta bakterija sa sljedećim svojstvima:

ja Morfološki: Shigella - male štapiće sa zaobljenim krajevima. Razlikuju se od ostalih predstavnika obitelji Enterobacteriaceae po tome što nemaju bičeve (nepokretne), nemaju spore ili kapsule i gram-negativne su.

II. Kulturni: Shigella su aerobi ili fakultativni anaerobi; optimalni uvjeti temperatura uzgoja 37°C, pH 7.27.4. Rastu na jednostavnim hranjivim podlogama (MPA, MPB) u obliku malih, sjajnih, prozirnih, sivkastih, okruglih kolonija, veličine 1,5 x 2 mm. S oblik. Izuzetak je Shigella Sonne, koja se često odvaja, stvarajući velike, ravne, mutne kolonije s neravnim rubovima R oblika (kolonije imaju izgled “lista grožđa”). U tekućim hranjivim podlogama Shigella proizvodi jednoliku mutnoću, R oblici tvore talog. Tekući medij za obogaćivanje je selenitni bujon.

III. Enzimski: glavne biokemijske karakteristike potrebne za identifikaciju Shigelle pri izolaciji čiste kulture su sljedeće:

1. odsutnost stvaranja plina tijekom fermentacije glukoze;
2. nedostatak proizvodnje sumporovodika;
3. nema fermentacije laktoze 48 sati.

Sve u svemu, četiri vrste su dalje podijeljene u približno 40 serotipova. Prema karakteristikama glavnih somatskih (O) antigena i biokemijskim svojstvima razlikuju se sljedeće četiri vrste ili skupine: S. dysenteriae (skupina A, uključuje: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri (skupina B), S. boydii (skupina C) i S. sonnei (skupina D).

U odnosu na manitol sve se šigele dijele na cijepajuće (Shigella Flexner, Boyd, Sonne) i necijepajuće (Shigella Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs) manitol.

IV. Faktori patogenosti:

1. Invazijski plazmidosigurava sposobnost Shigelle da izazove invaziju s naknadnim međustaničnim širenjem i razmnožavanjem u epitelu sluznice debelog crijeva;
2. Stvaranje toksina: Shigella ima lipopolisaharidni endotoksin, koji je kemijski i biokemijski sličan endotoksinima drugih članova obitelji Enterobacteriaceae. Osim toga, S. dysenteriae tip I (Shiga bacillus) proizvodi egzotoksin. Od otkrića potonjeg, utvrđeno je da ima enterotoksinsku aktivnost i može izazvati crijevnu sekreciju, kao i citotoksični učinak usmjeren protiv crijevnih epitelnih stanica; ima neurotoksični učinak, koji se opaža kod djece sa šigelozom. Shiga toksin, ulazeći u krv, uz oštećenje submukoznog endotela, utječe i na glomerule bubrega, zbog čega se, uz krvavi proljev, razvija hemolitički uremijski sindrom s razvojem zatajenja bubrega.

V. Antigenska struktura:Sve šigele imaju somatski O-antigen, ovisno o čijoj strukturi se dijele na serovare.

VI. Otpornost: Temperatura 100 0 C odmah ubija Shigellu. Shigella je otporna na niske temperature u riječna voda traju do 3 mjeseca, na povrću i voću - do 15 mjeseci.Pod povoljnim uvjetima, Shigella se može razmnožavati u prehrambeni proizvodi(salate, vinaigrettes, kuhano meso, mljeveno meso, kuhana riba, mlijeko i mliječni proizvodi, kompoti i žele), posebno Shigella Sonne.

Epidemiologija.

1. Izvor zaraze:Osoba koja pati od akutnog i kroničnog oblika šigeloze; nosač bakterija.

2. Putevi prijenosa:

• Razred za hranu (uglavnom za S. sonnei)
• Vodeni (uglavnom za S. flexneri)
• Kontakt kućanstvo (uglavnom za S. dysenteriae)

3. Ulazna kapija infekcije su uzrokovane gastrointestinalnim traktom.

Patogeneza i patološke promjene.

Nakon gutanja, Shigella kolonizira gornje dijelove tanko crijevo i tamo se razmnožavaju, moguće uzrokujući pojačano izlučivanje ranoj fazi infekcije. Shigella zatim prodire kroz M stanice u submukozu, gdje je apsorbiraju makrofagi. To dovodi do smrti nekih šigela, što rezultira oslobađanjem upalnih medijatora, koji iniciraju upalu u submukozi. Apoptoza fagocita omogućuje drugom dijelu Shigella da preživi i prodre u epitelne stanice sluznice kroz bazalnu membranu. Šigele se razmnožavaju i šire međustanično unutar enterocita, što dovodi do razvoja erozija. Kada Shigella ugine, oslobađaju se Shiga i toksini slični Shigi, čije djelovanje dovodi do intoksikacije. Oštećenje sluznice praćeno je otokom, nekrozom i krvarenjem, što uzrokuje pojavu krvi u stolici. Osim toga, toksin utječe na središnji živčani sustav, što dovodi do trofičkih poremećaja.

Kliničke manifestacije.

Raspon kliničkih manifestacija šigele je vrlo širok, od blagog proljeva do teške dizenterije s grčevitim bolovima u trbuhu, tenezmima, vrućicom i općom intoksikacijom.

Trajanje inkubacijekreće se od nekoliko sati do 7 dana, najčešće 2-3 dana.U početku pacijenti doživljavaju vodenastu stolicu, groznica (do 41°C), difuzna bol u trbuhu, mučnina i povraćanje. Uz to, pacijenti se žale na mialgiju, zimicu, bol u donjem dijelu leđa i glavobolju. Narednih dana od početka bolesti javljaju se znaci dizenterije: tenezmi, česte, oskudne, krvavo-sluzave stolice. Tjelesna temperatura postupno opada, bol se može lokalizirati u donji kvadranti trbuh. Intenzitet proljeva dostiže maksimum krajem 1. tjedna bolesti. Dizenterija s krvavim stolicama je češća i pojavljuje se ranije u bolesti uzrokovanoj S. dysenteriae tipa I nego u drugim oblicima šigeloza.

Za šigelozu Sonne Karakterističan je blaži tijek bolesti (gastroenterična ili gastroenterokolitička varijanta). Febrilno razdoblje je kraće, simptomi intoksikacije kratkotrajni, a destruktivne promjene na sluznici crijeva nisu tipične.

Flexnerova šigelozaU osnovi su karakteristične dvije varijante kliničkog tijeka - gastroenterokolitička i kolitička.

Ekstraintestinalne komplikacije kod šigelozerijetko:

1. Komplikacija šigeloze može biti razvoj crijevne disbioze.
2. Uz glavobolje mogu se pojaviti znakovi meningitisa i napadaji.
3. Periferna neuropatija prijavljena je kod infekcija S. dysenteriae tip I, a Guillain-Barréov sindrom (polineuritis) je prijavljen tijekom izbijanja gastroenteritisa S. boydii.
4. S izuzetkom distrofične djece, hematogena diseminacija uzročnika je relativno rijetka, a opisani su i slučajevi šigeloznih apscesa i meningitisa.
5. Kod šigeloze moguć je razvoj Reiterova sindroma s artritisom, sterilnim konjunktivitisom i uretritisom, što se obično događa 1-4 tjedna nakon pojave proljeva u bolesnika.
6. U djece je šigeloza popraćena hemolitičko-uremičkim sindromom, često u kombinaciji s reakcijama sličnim leukemiji, teškim kolitisom i cirkulacijom endotoksina, ali se obično ne otkrije bakterijemija.
7. Vrlo rijetko, gnojni keratokonjunktivitis uzrokuje Shigella, koja je ušla u oči kao rezultat samoinfekcije kontaminiranim prstima.
8. Hipovolemijski šok i sindrom diseminirane intravaskularne koagulacije.
9. Peritonitis, intestinalna gangrena, intestinalno krvarenje.

Imunitet: Ljudi imaju prirodnu otpornost na infekciju šigelom. Nakon prošle bolesti imunitet nije stabilan, a nakon shigellosis Sonne praktički nema. U slučaju bolesti uzrokovane Shigella Grigoriev Shiga, razvija se stabilniji antitoksični imunitet. U zaštiti od infekcije glavnu ulogu ima sekretor IgA , sprječavanje adhezije i aktivnost intraepitelnih limfocita ovisnu o citotoksičnim antitijelima, koji zajedno sa sekretornim IgA uništiti Shigella.

Dijagnostika i laboratorijske pretrage.

Svrha studije: detekcija i identifikacija Shigella za dijagnozu; identifikacija nositelja bakterija; otkrivanje Shigella u prehrambenim proizvodima.

Materijal za istraživanje: izmet, sekcijski materijal, prehrambeni proizvodi.

Dijagnostičke metode:mikrobiološki (bakteriološki, mikroskopski (luminiscentni); serološki; biološki; alergotest.

Napredak studije:

1 dan učenja:Kulture treba napraviti iz svježe izlučenog izmeta ili korištenjem rektalnih briseva (rektalna cijev); Ako prikladni uvjeti nisu dostupni, materijal se mora staviti u transportno okruženje. Da biste to učinili, upotrijebite intestinalni agar (MacConkey ili Shigella-Salmonella medij), umjereno selektivni agar ksiloza-lizin deoksikolat, KLD) i hranjivi bujon (selenitni bujon). Ako je vrijeme između sakupljanja i inokulacije dulje od 2 sata, treba koristiti otopine konzervansa: 20% žučni bujon, kombinirani Kauffmannov medij.

• Izmet u glicerinskoj smjesi se emulgira, kap emulzije se nanese na medij i utrlja spatulom. Diferencijalni mediji za Shigella su Ploskirev, Endo i EMS (eozin metilensko plavo agar). Ploskirevljev medij (medij sadrži: MPA, laktozu, žučne soli i indikator briljantno zeleno) također je selektivan medij za Shigella, jer inhibira rast Escherichie coli.
• Paralelno s izravnom sjetvom, sakupljeni materijal se inokulira na podlogu za obogaćivanje - selenitni bujon.
• Svi usjevi se stavljaju u termostat.

2. dan studije:

• Posude se skidaju s termostata, sumnjive kolonije izdvajaju na Resselovu podlogu (hranjiva podloga koja sadrži: agar-agar, Andrede indikator, 1% laktozu, 0,1% glukozu) i manitol. Inokulacija se provodi potezima po zakošenoj površini i ubrizgavanjem u stupac agara. Inokulirana Resselova podloga stavlja se u termostat na 18-24 sata (istodobno se vrši presađivanje iz podloge za selenit u podloge za diferencijalnu dijagnostiku).
• Izrađuju se razmazi (bojenje po Gramu) i pregledavaju pod mikroskopom.
• Pripravci se pripremaju kao "viseća" ili "zgnječena" kapljica.
• Uspostava probnog RA s polivalentnim dijagnostičkim serumom za šigelu.
• Sijanje sumnjivih kolonija na kosi agar.

3. dan studije:

• Mikroskopiranje materijala s kosih agara.
• Kulture koje nisu fermentirale laktozu na Resselovom mediju podvrgavaju se daljnjem proučavanju: rade se razmazi (bojenje po Gramu), provjerava se čistoća kulture. U prisutnosti gram-negativnih štapića, inokulacija se provodi na Hissovom mediju, bujonu s indikatorskim papirima (za otkrivanje indola i sumporovodika) i lakmusovom mlijeku.
• Inokulirani medij se stavlja u termostat na 18-24 sata.

4. dan studije:

• Obračun kratkog "šarolikog niza".
• Kulture sumnjive po svojim enzimskim i kulturalnim svojstvima u odnosu na Shigella podvrgavaju se serološkoj identifikaciji. Iskaz RA na staklu (tipični i grupni dijagnostički serumi). Postavljanje raspoređenog RA.

Kao ubrzane metode za šigelozu koriste sefluorescentna mikroskopija I biološki uzorak(unošenje virulentnih sojeva Shigella u konjunktivalnu vrećicu (ispod donjeg kapka) zamorčića; konjunktivitis se razvija do kraja 1. dana).

Tsuverkalov test alergijeintradermalni alergijski test s dizenterinom (injekcija 0,1 ml dizenterina u podlakticu pozitivna reakcija u slučaju infiltracije i hiperemije). Alergijska dijagnostika trenutno se praktički ne koristi. Tsurvekalovljev test nije specifičan, pozitivne reakcije se bilježe ne samo za šigelozu, već i za salmonelozu, escherichiosis, yersiniosis itd. OKI, a ponekad i kod zdravih osoba.

Liječenje i prevencija.Za liječenje i prevenciju prema epidemiološkim indikacijama koristi se bakteriofag oralna primjena, antibiotici nakon određivanja antibiograma; u slučaju disbakterioze probiotički pripravci za ispravljanje mikroflore. Da biste nadoknadili gubitak tekućine i elektrolita, dajte otopinu glukoze i elektrolita unutra.

Specifični ciljevi:

Protumačiti biološka svojstva uzročnika šigeloza.

Upoznajte se s klasifikacijom Shigella.

Naučiti interpretirati patogenetske obrasce infektivnog procesa uzrokovanog šigelama.

Odrediti metode mikrobiološke dijagnostike, etiotropne terapije i prevencije šigeloza.

Biti u mogućnosti:

• Inokulirajte ispitni materijal na hranjive podloge.
  • Pripremite razmaze i obojite po Gramu.
  • Provedite mikroskopiranje preparata pomoću uronjenog mikroskopa.
  • Analizirati morfološke, kulturalne i enzimske karakteristike Shigella.

Teorijska pitanja:

1. Obilježja uzročnika šigeloza. Biološka svojstva.

2. Klasifikacija Shigella. Načela na kojima se temelji.

3. Epidemiologija, patogeneza i kliničke značajkeŠigeloza

4. Laboratorijska dijagnostika.

5. Načela liječenja i prevencije šigeloza.

Praktični zadaci koji se izvode u nastavi:

1. Mikroskopiranje oglednih preparata iz čistih kultura uzročnika šigeloza.

2. Rad na bakteriološkoj dijagnozi šigeloze: proučavanje fekalnih kultura na Ploskirevovoj podlozi.

3. Subkultura sumnjivih kolonija na Resselovom mediju i MPB za određivanje stvaranja indola i H 2 S.

4. Skiciranje pokaznih pripravaka i mikrobiološke dijagnostičke sheme šigeloza u protokol nastave.

5. Sastavljanje protokola.

Književnost:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Medicinska mikrobiologija, imunologija i virologija / Udžbenik za medicinska sveučilišta, St. Petersburg “Specijalna literatura”, 1998. - 592 str.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiologija / Udžbenik.-2. izdanje, dopunjeno. I dodatno - M.: Medicina, 1983, - 512 str.

3. Pjatkina K.D. Krivoshein Yu.S. Mikrobiologija s virologijom i imunologijom.- Kijev: V i scha škola, 1992. - 431 str.

4. Medicinska mikrobiologija / Uredio V.I. Pokrovski.-M.:GEOTAR-MED, 2001.-768p.

5. Vodič za praktična nastava u mikrobiologiji, imunologiji i virologiji. ur. M.P. Zykova. M. "Medicina". 1977. 288 str.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiologija. /Ed. F.K. Čerkez. M.: Medicina, 1986. 512 str.

7. Bilješke s predavanja.

Dodatna literatura:

1. Makijarov K.A. Mikrobiologija, virusologija i imunologija. Alma-Ata, “Kazahstan”, 1974. 372 str.

2. Titov M.V. Zarazne bolesti. - K., 1995. 321 str.

3. Shuvalova E.P. Zarazne bolesti. - M.: Medicina, 1990. - 559 str.

4. BME, T. 1, 2, 7.

5. Pavlovich S.A. Medicinska mikrobiologija u grafikonima: Udžbenik. dodatak za liječnički Inst. Mn.: Viši. škola, 1986. 255 str.

Kratak smjernice za rad na praktičnoj nastavi.

Na početku sata provjerava se stupanj pripremljenosti učenika za sat.

Samostalni rad sastoji se od proučavanja klasifikacije šigela, analize sheme patogenetske i kliničke slike šigeloza. Proučavanje metoda laboratorijske dijagnostike šigeloza. Učenici cijepe biomaterijal na hranjive podloge. Potom se pripremaju mikroplodice, boje po Gramu, mikroskopiraju, skiciraju stakalce i daju potrebna objašnjenja. Samostalni rad također uključuje mikroskopiranje demonstracijskih preparata i njihovo skiciranje u protokol nastave.

Na kraju sata provodi se probna kontrola i analiza konačnih rezultata samostalnog rada svakog studenta.

Tehnološka karta za izvođenje praktične nastave.

p/p	Faze	Vrijeme u minutama	Načini učenja	Oprema	Mjesto
	Provjera i ispravljanje početne razine pripreme za nastavu		Ispitni predmeti početne razine	Tablice, atlas	Radna soba
	Samostalni rad		Graf logičke strukture	Imerzijski mikroskop, boje, stakalce, bakteriološke petlje, hranjive podloge, Ploskirevljev medij, Resselov medij, “Hissova šarena serija”
	Samoprovjera i korekcija savladanosti gradiva		Zadaci ciljanog učenja
	Test kontrola		Testovi
	Analiza rezultata rada

Ciljani zadaci obuke:

1. Feces koji je sadržavao sluz i gnoj dobiven je od djeteta s ACI (prikupljanje stolice obavljeno je pomoću rektalne sonde). Koju ekspresnu dijagnostičku metodu treba koristiti?

A. ELISA.

B. GREBEN.

C. RA.

D. RSK.

E. RIA.

1. Uzročnik dizenterije izoliran je iz bolesnog djeteta s akutnom crijevnom infekcijom. Koje su morfološke značajke karakteristične za uzročnika?

A . Gram-negativni nepomični štapić.

B . Gram-pozitivni pokretni štapić.

C . Formira kapsulu na hranjivoj podlozi.

D . U vanjskom okruženju stvara spore.

E . Gram-pozitivni streptobacili.

3. Bolesnik koji je obolio prije tri dana i tuži se na temperaturu 38°C, bolove u trbuhu, česte rijetka stolica, prisutnost krvi u stolici, liječnik je klinički dijagnosticirao bakterijsku dizenteriju. Koju mikrobiološku dijagnostičku metodu je uputno primijeniti u ovom slučaju i koji materijal uzeti od bolesnika za potvrdu dijagnoze?

A. Bakterioskopski kal.

B. Bakteriološka kal.

C. Bakterioskopska krv.

D. Bakteriološki urin.

E. Serološka krv.

4. Shigella Sonne je izolirana iz fecesa pacijenta. Koja dodatna istraživanja je potrebno učiniti kako bi se utvrdio izvor infekcije?

A . Provedite fagotipizaciju izolirane čiste kulture.

B . Odrediti antibiogram.

C . Postavite reakciju taloženja.

D . Provedite reakciju fiksacije komplementa.

E . Postavite reakciju neutralizacije.

5. Među skupinom turista (27 osoba) koji su za piće koristili vodu iz jezera, nakon dva dana 7 osoba razvilo je simptome akutne dijareje. Koji materijal treba poslati u bakteriološki laboratorij za utvrđivanje etiologije ove bolesti?

A. Voda, izmet pacijenata.

B. Voda, krv pacijenata.

C. Prehrambeni proizvodi.

D. piškim.

E. Ispljuvak.

6. Značajan nedostatak mikroskopske dijagnostičke metode za akutne crijevne infekcije je nedostatak informacija zbog morfološkog identiteta bakterija iz obitelji Enterobacteriaceae . Što ovu metodu čini informativnijom?

A . Radioimunotest.

B . Coombsova reakcija.

C . Vezani imunosorbentni test.

D . Reakcija opsonizacije.

E . Reakcija imunofluorescencije.

7. Bolesnik star 29 godina primljen je u bolnicu s napadima povraćanja, proljeva i tenezma. Izmet s komadićima sluzi i malo krvi. Bakteriološka studija bakterija iz kolonija na Ploskirevovoj podlozi otkrila je nepokretne, gram-negativne štapiće koji ne fermentiraju laktozu. Navedite uzročnika zaraznog procesa.

A. Shigella flexneri.

B. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. Zelena salata, za koju se vjeruje da je uzročnik akutne crijevne infekcije, dopremljena je u mikrobiološki laboratorij. Koje se hranjive podloge koriste za primarnu sjetvu?

A . Žumanjčani solni agar, MPB.

B. MPA, MPB.

C . Selenit bujon, Endo, Ploskireva.

D . Juha od jetre, Roux medium.

E . Krvni agar, alkalni agar.

9. Tijekom mikrobiološke pretrage mljeveno meso izolirane su bakterije iz roda Shigella. Proučavanje kojih je svojstava mikroba dovelo do ovog zaključka?

A . Kulturno, tinktorijalno.

B . Antigeni, kulturni.

C . Saharolitik, proteolitik.

D . Antigeni, imunogeni.

E . Morfološki, antigenski.

10. Mikroskopskim pregledom bljuvotine bolesnika sa simptomima akutne crijevne infekcije pronađene su nepokretne štapiće. U kojem bi se razmazu ili preparatu mogla proučavati pokretljivost bakterija?

A . U razmazu obojenom po Gramu.

B . U razmazu obojenom po Ziehl-Neelsenu.

C . Pripravak sadrži “gustu kap”.

D . U razmazu obojenom po Neisseru.

E . Pripravak sadrži “zgnječenu kap”.

Algoritam laboratorijski rad :

1. Proučavanje bioloških svojstava Shigella.

2. Upoznavanje s klasifikacijom Shigella.

3. Analiza sheme patogenetskih i kliničkih manifestacija šigeloza.

4. Proučavanje metoda laboratorijske dijagnostike šigeloza.

5. Proučavanje osnovnih principa terapije i prevencije šigeloza.

1. Izrada fiksiranih preparata iz bakterijske kulture.
2. Bojanje mikroslike prema Gramu.
3. Mikroskopiranje mikrostakalca S pomoću uronjenog mikroskopa, njihovu analizu i bilježenje u protokol nastave.
4. Mi kroskopija i analiza demonstracijskih preparata iz čistih kultura Shigella.
5. Crtanje pokaznih pripravaka i dijagrama laboratorijske dijagnostike šigeloza u protokol.
6. Sastavljanje protokola.

Klasifikacija Shigella, njihova svojstva. Patogeneza šigeloza.

Bakterijska dizenterija ili šigeloza je zarazna bolest koju uzrokuju bakterije iz roda Shigella, a prvenstveno zahvaća debelo crijevo. Ime roda povezano je s K. Shigi, koji je otkrio jedan od patogena

dizenterija.

Taksonomija i klasifikacija. Uzročnici dizenterije pripadaju odjelu Gracilicutes, obitelji Enterobacteriaceae, rodu Shigella.

Morfologija i tinktorijalna svojstva. Shigella su gram-negativne štapiće sa zaobljenim krajevima, duge 2-3 µm, debljine 0,5-7 µm (vidi sliku 10.1); ne stvaraju spore, nemaju bičeve i nepokretne su. Mnogi sojevi imaju zajednički tip resica i spolnih pila. Neke šigele imaju mikrokapsulu.

Uzgoj. Bacili dizenterije su fakultativni anaerobi. Nezahtjevne su prema hranjivim podlogama i dobro rastu na temperaturi od 37 °C i pH 7,2-7,4. Na gustim medijima stvaraju male prozirne kolonije, u tekućim medijima -

difuzno zamućenje. Selenitni bujon se najčešće koristi kao medij za obogaćivanje za uzgoj Shigella.

Aktivnost enzima. Shigella ima manju enzimsku aktivnost od ostalih enterobakterija. Oni fermentiraju ugljikohidrate u kiselinu. Važna značajka koja omogućuje razlikovanje Shigella je njihov odnos prema manitolu: S. dysenteriae ne fermentira manitol, predstavnici skupina B, C, D su manitol-pozitivni. Biokemijski najaktivniji su S. sonnei, koji mogu polagano (unutar 2 dana) fermentirati laktozu. Na temelju odnosa S. sonnei prema ramnozi, ksilozi i maltozi razlikuje se 7 biokemijskih varijanti.

Antigenska struktura. Shigella ima O-antigen, njegova heterogenost omogućuje razlikovanje serovara i subserovara unutar skupina; Neki članovi roda pokazuju K-antigen.

Faktori patogenosti. Svi bacili dizenterije stvaraju endotoksin koji ima enterotropni, neurotropni i pirogeni učinak. Osim toga, S. dysenteriae (serovar I) - Shigella Grigoriev-Shiga - izlučuje egzotoksin koji ima enterotoksično, neurotoksično, citotoksično i nefrotoksično djelovanje na tijelo, što u skladu s tim remeti metabolizam vode i soli i aktivnost središnjeg živčanog sustava, dovodi do smrti epitelnih stanica debelog crijeva, oštećenja bubrežnih tubula. Stvaranje egzotoksina povezano je s više teški tok dizenterije uzrokovane ovim uzročnikom. Druge vrste Shigella također mogu proizvesti egzotoksin. Otkriven je RF faktor propusnosti koji uzrokuje oštećenje krvnih žila. Čimbenici patogenosti također uključuju invazivni protein koji potiče njihov prodor u epitelne stanice, kao i proteine ​​pili i vanjske membrane odgovorne za adheziju, te mikrokapsulu.

Otpornost. Shigella ima nisku otpornost na razni faktori. Otporniji je S. sonnei, koji u vodi iz slavine preživi do 2"/2 mjeseca; u vodi iz otvorenih rezervoara preživi do 5/2 mjeseci. S. sonnei ne samo da može preživjeti dosta dugo, nego i razmnožavaju se u proizvodima, posebno mliječnim proizvodima.

Epidemiologija. Dizenterija je antroponozna infekcija: izvor su bolesni ljudi i kliconoše. Mehanizam prijenosa infekcije je fekalno-oralni. Putevi prijenosa mogu biti različiti - kod Sonneove dizenterije prevladava put hrane, kod Flexnerove dizenterije - voda, za dizenteriju Grigoriev-Shiga tipičan je put kontakt-kućanstva. Dizenterija se javlja u mnogim zemljama svijeta. U posljednje vrijeme

Tijekom godina došlo je do naglog porasta učestalosti ove infekcije. Oboljevaju ljudi svih dobnih skupina, no dizenteriji su najosjetljivija djeca od 1 do 3 godine. Broj oboljelih raste u srpnju - rujnu. Različite vrste Shigella po pojedinim

regije su neravnomjerno raspoređene.

Patogeneza. Shigella ulazi u gastrointestinalni trakt kroz usta i dolazi do debelog crijeva. Posjedujući tropizam za svoj epitel, patogeni se pričvršćuju na stanice uz pomoć pila i proteina vanjske membrane. Zahvaljujući invazivnom faktoru, oni prodiru unutar stanica, tamo se razmnožavaju, uslijed čega stanice umiru. Na stijenci crijeva stvaraju se ulceracije, na čijem se mjestu potom stvaraju ožiljci. Endotoksin, koji se oslobađa kada se bakterije unište, uzrokuje opću intoksikaciju, povećanu pokretljivost crijeva i proljev. Krv iz nastalih čireva završava u stolici. Kao posljedica djelovanja egzotoksina dolazi do izraženijeg poremećaja metabolizma vode i soli, aktivnosti središnjeg živčanog sustava i oštećenja bubrega.

Klinička slika. Period inkubacije traje od 1 do 5 dana. Bolest počinje akutno povećanjem tjelesne temperature na 38-39 ° C, pojavljuju se bolovi u trbuhu i proljev. U stolici ima primjesa krvi i sluzi. Grigoriev-Shiga dizenterija je najteža.

Imunitet. Nakon bolesti, imunitet nije specifičan samo za vrstu, već i za varijantu. Kratkotrajna je i krhka. Često bolest postaje kronična.

Mikrobiološka dijagnostika. Kao materijal za proučavanje uzima se feces pacijenta. Temelj dijagnoze je bakteriološka metoda koja omogućuje identifikaciju uzročnika i određivanje njegove osjetljivosti na

antibiotici, provesti intraspecifičnu identifikaciju (odrediti biokemijsku varijantu, serovar ili kolicinogenovar). U slučaju dugotrajne dizenterije može se koristiti kao pomoćna serološka metoda koja se sastoji od dijagnosticiranja RA, RNGA (povećanjem titra protutijela kod ponavljanja reakcije može se potvrditi dijagnoza).

Liječenje. Bolesnici s teškim oblicima Grigoriev-Shiga i Flexner dizenterije liječe se antibioticima širokog spektra uz obvezno uzimanje u obzir antibiograma, jer Shigella često uključuje ne samo antibiotike otporne

aktivni, ali i oblici ovisni o antibioticima. Za blage oblike dizenterije antibiotici se ne koriste, jer njihova uporaba dovodi do disbakterioze, što pogoršava bolest. patološki proces, te poremećaj regenerativnih procesa u sluznici debelog crijeva.

Prevencija. Jedini lijek koji se može koristiti u žarištima infekcije u profilaktičke svrhe je bakteriofag dizenterije. Glavnu ulogu ima nespecifična prevencija.

11. Jersinije su uzročnici kuge. Svojstva. Patogeneza, imunitet, laboratorijska dijagnostika, epidemiologija, prevencija, liječenje. Uloga domaćih znanstvenika u proučavanju kuge.

Taksonomija: Y. pestis uzrokuje kugu; odjel Gracilicutes, obitelj Enterobacteriaceae, rod Yersinia. Uzročnik je Yersinia pestis.

Morfološka svojstva: Gram-negativne štapiće, ovoidnog oblika, obojene bipolarno. Pokretni, imaju kapsulu, ne stvaraju spore.

Kulturna dobra.

Fakultativni anaerobi. Temperaturni optimum +25C. Dobro rastu na jednostavnim hranjivim medijima. Većina ugljikohidrata fermentira bez stvaranja plinova. Psihofili - sposobni su mijenjati svoj metabolizam ovisno o temperaturi i razmnožavati se na niske temperature. Virulentni sojevi stvaraju hrapave (R) kolonije, prijelazne (RS) i sivkasto sluzave glatke avirulentne (S) oblike.

Dvije vrste kolonija - mlade i zrele. Mladi s nazubljenim rubovima. Zrele kolonije su velike, sa smeđim granularnim središtem i nazubljenim rubovima. Na kosom agaru nakon dva dana na +28 C stvaraju sivkasto- bijeli premaz, urastajući u medij, na juhi se nalazi osjetljiv površinski film i sediment poput pamuka.

Biokemijska svojstva: Visoka fenomenalna aktivnost: fermentacija do kisele ksiloze, sinteza plazmakoagulaze, fibrinolizina, hemolizina, lecitinaze, hidrogen sulfida. Ramnoza i urea ne fermentiraju.

Antigenska struktura.

Skupina proteinsko-polisaharidnih i lipopolisaharidnih antigena: termostabilni somatski O-antigen i termolabilni kapsularni V, W antigeni. Virulencija bakterija povezana je s W antigenom. Proizvodi faktore patogenosti: fibrinolizin, plazmakoagulazu, endotoksin, egzotoksin, kapsulu, V, W antigene.

Otpornost: osjetljiv na antibiotike (osobito streptomicin), nestabilan na okoliš pri visokim temperaturama.

Patogena svojstva.

Ima patogeni potencijal, potiskuje funkcije fagocitnog sustava, potiskuje oksidativni nalet u fagocitima i u njima se nesmetano razmnožava. Čimbenike patogenosti kontroliraju tri klase plazmida. U patogenezi postoje tri glavne faze - limfogeno uvođenje, bakterijemija, generalizirana septikemija. Imaju adhezine i invazine, proteine ​​niske molekularne mase (inhibiraju baktericidne faktore) i enterotoksin. Neke čimbenike kontroliraju virulentni plazmidi.

Kliničke značajke: Razdoblje inkubacije je od nekoliko sati do 8 dana. Postoje lokalni - kožno-bubonski, bubonski; eksterno diseminirana - primarna plućna, sekundarna plućna i crijevna; generalizirani – primarni septički, sekundarni septički oblici kuge. Regionalna limfadenopatija, enterokolitis, reaktivni artritis, spondilitis, groznica.

Epidemiologija: Kuga je klasična prirodna žarišna zoonoza divljih životinja. Glavni prijenosnici u prirodi su svisci i gofovi, au urbanim sredinama - štakori. Uzročnik se prenosi putem životinjskih buha koje mogu zaraziti ljude.

Imunitet: stanično-humoralni, ograničenog trajanja i intenziteta.

Mikrobiološka dijagnostika:

Bakterioskopski pregled. Brisevi se pripremaju od ispitivanog materijala, obojenog Gramom i vodenom otopinom metilenskog modrila. Bakterije kuge su gram-negativne štapići jajolikog oblika Bakteriološka istraživanja. Ispitni materijal se inokulira na ploče s hranjivim agarom. Usjevi se inkubiraju na 25°C. Prvo ispitivanje usjeva provodi se nakon 10 sati. Do tog vremena pojavljuju se kolonije koje su formirane od virulentnih R-formi. Nisko- i avirulentne bakterije formiraju kolonije S-forme. Identifikacija čiste kulture provodi se morfologijom bakterijskih stanica, obrascima rasta, antigenskim i biokemijskim svojstvima, osjetljivošću na određeni fag i biološkim testom.

Bakterije stvaraju film na bujonu; Mnogi šećeri se fermentiraju do kiseline, indol se ne stvara, a želatina se ne pretvara u tekućinu. Sadrže grupni termostabilni somatski antigen i specifični termolabilni kapsularni antigen.

Biotest. Provodi se kako bi se izolirala čista kultura iz materijala kontaminiranog stranom mikroflorom. Najosjetljivije laboratorijske životinje su zamorci, kojima se materijal ubrizgava supkutano. Materijal se daje intraperitonealno ako nije kontaminiran drugim bakterijama. Nakon uginuća životinja uočavaju se patološke promjene na organima i provodi bakteriološka pretraga

Ekspresne laboratorijske dijagnostičke metode:

2.RPGA - za otkrivanje bakterijskih antigena u materijalu pomoću standardnog seruma protiv kuge, čija su antitijela napunjena crvenim krvnim stanicama.

Liječenje: antibiotici – streptomicin, tetraciklinski lijekovi.

Prevencija: specifična prevencija - živo atenuirano cjepivo protiv kuge EV. Postoji suho cjepivo u obliku tableta za oralnu primjenu. Za procjenu imuniteta na kugu (prirodnu postinfektivnu i cjepivu) može se koristiti intradermalni alergijski test s pestinom.

Bakteriofag kuge– kod identifikacije Y.pestis.

Suho cjepivo protiv kuge – sušena živa kultura Y. pestis cjepnog soja EV, koja se koristi za prevenciju kuge.

Mikrobiologija dizenterije

Dizenterija je zarazna bolest koju karakterizira opća intoksikacija tijela, proljev i osebujna lezija sluznice debelog crijeva. Jedna je od najčešćih akutnih crijevnih bolesti u svijetu. Bolest je poznata od davnina pod nazivom "krvavi proljev", ali se pokazalo da je njena priroda drugačija. Godine 1875. ruski znanstvenik F.A. Lesh izolirao je amebu iz pacijenta s krvavim proljevom Entamoeba histolytica, u idućih 15 godina utvrđuje se samostalnost ove bolesti za koju se zadržao naziv amebijaza.

Uzročnici prave dizenterije su velika skupina biološki sličnih bakterija, udruženih u rod šigela. Uzročnik su prvi put otkrili 1888. A. Chantemes i F. Vidal; 1891. opisao ju je A. V. Grigoriev, a 1898. K. Shiga, koristeći serum dobiven od pacijenta, identificirao je uzročnika kod 34 bolesnika s dizenterijom, čime je konačno dokazana etiološka uloga ove bakterije. Međutim, u narednim godinama otkriveni su drugi uzročnici dizenterije: 1900. - S. Flexner, 1915. - K. Sonne, 1917. - K. Stutzer i K. Schmitz, 1932. - J. Boyd , 1934. - D. Large, 1943. - A. Sax. Trenutno rod šigela uključuje više od 40 serotipova. Sve su to kratke, nepomične gram-negativne štapiće koje ne tvore spore ili kapsule, dobro rastu na uobičajenim hranjivim podlogama i ne rastu na izgladnjelim podlogama s citratom ili malonatom kao jedinim izvorom ugljika; ne stvaraju H 2 S, nemaju ureazu; Voges–Proskauerova reakcija je negativna; glukoza i neki drugi ugljikohidrati fermentiraju u kiselinu bez plina (osim za neke biotipove Shigella flexneri: S. Manchester I S. Newcastle); U pravilu ne fermentiraju laktozu (osim Shigella Sonne), adonitol, salicin i inozitol, ne ukapljuju želatinu, obično stvaraju katalazu i nemaju lizin dekarboksilazu i fenilalanin deaminazu. Sadržaj G + C u DNA je 49 – 53 mol%. Šigele su fakultativni anaerobi, optimalna temperatura za rast je 37 °C, ne rastu na temperaturama iznad 45 °C, optimalni pH okoliša je 6,7 - 7,2. Kolonije na gustom mediju su okrugle, konveksne, prozirne, u slučaju disocijacije nastaju kolonije grubog R-forma. Rast na MPB u obliku jednolike mutnoće, hrapavi oblici formiraju sediment. Svježe izolirane kulture Shigella Sonne obično formiraju kolonije dva tipa: male okrugle konveksne (faza I), velike ravne (faza II). Priroda kolonije ovisi o prisutnosti (faza I) ili odsutnosti (faza II) plazmida molekulske mase 120 MD, koji također određuje virulentnost Shigella Sonne.

Međunarodna klasifikacija Shigella je izgrađena uzimajući u obzir njihove biokemijske karakteristike (šigele koje ne fermentiraju manitol, fermentiraju manitol, šigele koje sporo fermentiraju laktozu) i značajke antigene strukture (tablica 37).

Kod Shigella su nađeni O-antigeni različite specifičnosti: zajednički za obitelj Enterobacteriaceae generički, specifični za vrstu, grupu i tip, kao i K-antigeni; Nemaju N-antigene.

Tablica 37

Klasifikacija roda bakterija šigela

Klasifikacija uzima u obzir samo O-antigene specifične za skupinu i tip. U skladu s tim karakteristikama rod šigela je podijeljen u 4 podskupine, odnosno 4 vrste, a uključuje 44 serotipa. U podskupini A (tip Shigella dysenteriae) uključuje Shigella, koja ne fermentira manitol. Vrsta uključuje 12 serotipova (1 – 12). Svaki serotip ima svoj specifični tip antigena; antigene veze između serotipova, kao i s drugim vrstama Shigella, slabo su izražene. U podskupinu B (tip Shigella flexneri) uključuju Shigella, koja obično fermentira manitol. Šigele ove vrste međusobno su serološki srodne: sadrže tip-specifične antigene (I – VI), po kojima se dijele na serotipove (1 – 6), i grupne antigene, koji se u svakom serotipu i kojim se serotipovi dijele na podserotipove. Osim toga, ova vrsta uključuje dvije antigene varijante - X i Y, koje nemaju tipične antigene, razlikuju se u skupovima antigena skupine. Serotip S. flexneri 6 nema subserotipova, ali se prema karakteristikama fermentacije glukoze, manitola i dulcitola dijeli na 3 biokemijska tipa (tablica 38).

Tablica 38

Biotipovi S. flexneri 6

Bilješka. K – vrenje uz stvaranje samo kiseline; CG – vrenje uz stvaranje kiseline i plina; (–) – nema fermentacije.

Lipopolisaharidni antigen O kod svih Shigella Flexner sadrži antigen skupine 3, 4 kao glavnu primarnu strukturu, njegovu sintezu kontrolira kromosomski gen lokaliziran blizu his-lokusa. Tipski specifični antigeni I, II, IV, V i antigeni skupine 6, 7, 8 rezultat su modifikacije antigena 3, 4 (glikozilacija ili acetilacija) i određeni su genima odgovarajućih konvertirajućih profaga, mjestom integracije od kojih se nalazi u lac - pro regiji kromosoma Shigella.

Pojavio se u zemlji 80-ih godina. XX. stoljeća i novi podserotip koji je postao široko rasprostranjen S. flexneri 4(IV:7, 8) razlikuje se od podserotipa 4a (IV:3, 4) i 4b (IV:3, 4, 6), nastao je iz varijante S. flexneri Y(IV:3, 4) zbog lizogenizacije njegovim konvertirajućim profagima IV i 7, 8.

U podskupinu C (tip Shigella boydii) uključuju Shigella, koja obično fermentira manitol. Članovi skupine se serološki razlikuju jedni od drugih. Antigene veze unutar vrste su slabo izražene. Vrsta uključuje 18 serotipova (1 – 18), od kojih svaki ima svoj glavni tip antigena.

U podskupini D (tip Shigella sonnei) uključuje Shigella, koje obično fermentiraju manitol i sposobne su polako (nakon 24 sata inkubacije i kasnije) fermentirati laktozu i saharozu. Pogled S. sonnei uključuje jedan serotip, ali kolonije faza I i II imaju svoje antigene specifične za tip. Za intraspecifičnu klasifikaciju Shigella Sonne predložene su dvije metode:

1) podijeliti ih u 14 biokemijskih tipova i podtipova prema njihovoj sposobnosti fermentacije maltoze, ramnoze i ksiloze; 2) podjela na tipove faga prema osjetljivosti na skup odgovarajućih faga.

Ove metode tipizacije imaju uglavnom epidemiološki značaj. Osim toga, Shigella Sonne i Shigella Flexner tipiziraju se za istu svrhu na temelju njihove sposobnosti sintetiziranja specifičnih kolicina (kolicinogenotipizacija) i osjetljivosti na poznate kolicine (kolicinotipizacija). Za određivanje vrste kolicina koje proizvodi Shigella, J. Abbott i R. Chenon predložili su skupove standardnih i indikatorskih sojeva Shigella, a za određivanje osjetljivosti Shigella na poznate vrste kolicina, skup standardnih kolicinogenih sojeva P. Fredericka. koristi se.

Otpornost. Shigella ima prilično visoku otpornost na čimbenike okoliša. Na pamučnoj tkanini i papiru preživljavaju do 30-36 dana, u osušenom izmetu do 4-5 mjeseci, u tlu do 3-4 mjeseca, u vodi od 0,5 do 3 mjeseca, na voću i povrću. – do 2 tjedna, u mlijeku i mliječnim proizvodima – do nekoliko tjedana; na temperaturi od 60 °C ugibaju za 15 – 20 minuta. Osjetljivo na otopine kloramina, aktivni klor i druga sredstva za dezinfekciju.

Faktori patogenosti. Najvažnije biološko svojstvo šigela, koje određuje njihovu patogenost, jest sposobnost invazije epitelnih stanica, razmnožavanja u njima i uzrokovanja njihove smrti. Taj se učinak može otkriti pomoću keratokonjunktivalnog testa (unošenje jedne petlje kulture Shigella (2-3 milijarde bakterija) ispod donjeg kapka zamorca uzrokuje razvoj serozno-gnojnog keratokonjunktivitisa), kao i inficiranjem staničnih kultura ( citotoksični učinak) ili pilećih embrija (njihova smrt) ili intranazalno u bijelih miševa (razvoj upale pluća). Glavni faktori patogenosti Shigella mogu se podijeliti u tri skupine:

1) čimbenici koji određuju interakciju s epitelom sluznice;

2) čimbenici koji osiguravaju otpornost na humoralne i stanične obrambene mehanizme makroorganizma i sposobnost razmnožavanja Shigella u svojim stanicama;

3) sposobnost stvaranja toksina i toksičnih proizvoda koji određuju razvoj samog patološkog procesa.

U prvu skupinu spadaju čimbenici adhezije i kolonizacije: njihovu ulogu igraju pili, proteini vanjske membrane i LPS. Adheziju i kolonizaciju pospješuju enzimi koji uništavaju sluz - neuraminidaza, hijaluronidaza, mucinaza. Druga skupina uključuje čimbenike invazije koji potiču prodiranje Shigella u enterocite i njihovu reprodukciju u njima iu makrofagima uz istodobnu manifestaciju citotoksičnog i (ili) enterotoksičnog učinka. Ova svojstva kontroliraju geni plazmida molekularne težine 140 MD (kodira sintezu proteina vanjske membrane koji uzrokuju invaziju) i kromosomski geni Shigella: kcp A (uzrokuje keratokonjunktivitis), cyt (odgovoran za uništavanje stanica ), kao i drugi geni koji još nisu identificirani. Zaštitu Shigella od fagocitoze osigurava površinski K-antigen, antigeni 3, 4 i lipopolisaharid. Osim toga, lipid A endotoksina Shigella ima imunosupresivni učinak: potiskuje aktivnost stanica imunološke memorije.

Treća skupina čimbenika patogenosti uključuje endotoksin i dvije vrste egzotoksina koje nalazimo u Shigella - Shiga i Shigi slični egzotoksini (SLT-I i SLT-II), čija su citotoksična svojstva najizraženija kod S. dysenteriae 1. Shiga i shiga-slični toksini također su pronađeni u drugim serotipovima S. dysenteriae, također se formiraju S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC i nešto salmonele. Sintezu ovih toksina kontroliraju tox geni konvertirajućih faga. Enterotoksini tipa LT nalaze se u Shigella Flexner, Sonne i Boyd. Njihovu LT sintezu kontroliraju plazmidni geni. Enterotoksin stimulira aktivnost adenilat ciklaze i odgovoran je za razvoj proljeva. Shiga toksin ili neurotoksin ne reagira sa sustavom adenilat ciklaze, ali ima izravan citotoksični učinak. Shiga i toksini slični Shigi (SLT-I i SLT-II) imaju molekularnu težinu od 70 kDa i sastoje se od podjedinica A i B (zadnja od 5 identičnih malih podjedinica). Receptor za toksine je glikolipid stanične membrane.

Virulencija Shigella Sonne također ovisi o plazmidu molekulske mase 120 MD. On kontrolira sintezu oko 40 polipeptida vanjske membrane, od kojih je sedam povezano s virulencijom. Shigella Sonne, s ovim plazmidom, formira kolonije faze I i virulentne su. Kulture koje su izgubile plazmid formiraju kolonije faze II i nemaju virulentnost. Plazmidi s molekularnom težinom od 120-140 MD pronađeni su u Shigella Flexner i Boyd. Shigella lipopolisaharid je jak endotoksin.

Značajke epidemiologije. Izvor zaraze je samo čovjek. Nijedna životinja u prirodi ne boluje od dizenterije. U eksperimentalnim uvjetima, dizenterija se može reproducirati samo kod majmuna. Način infekcije je fekalno-oralni. Putevi prijenosa: voda (prevladava za Shigella Flexner), hrana, osobito mlijeko i mliječni proizvodi (prevladava put zaraze za Shigella Sonne) i kontakt u kućanstvu, posebno za vrstu S. dysenteriae.

Značajka epidemiologije dizenterije je promjena u sastavu vrsta patogena, kao i biotipova Sonne i Flexner serotipova u određenim regijama. Na primjer, do kraja 30-ih. XX. stoljeća na dionicu S. dysenteriae 1činio do 30-40% svih slučajeva dizenterije, a zatim se ovaj serotip počeo javljati sve rjeđe i gotovo nestao. Međutim, 1960-ih - 1980-ih. S. dysenteriae ponovno pojavio na povijesnoj areni i izazvao niz epidemija koje su dovele do formiranja tri njegova hiperendemična žarišta – u Srednjoj Americi, Srednjoj Africi i Južnoj Aziji (Indija, Pakistan, Bangladeš i druge zemlje). Razlozi promjene vrstnog sastava uzročnika dizenterije vjerojatno su povezani s promjenama kolektivne imunosti i promjenama svojstava bakterija dizenterije. Konkretno, povratak S. dysenteriae 1 i njegova raširena distribucija, koja je uzrokovala stvaranje hiperendemičnih žarišta dizenterije, povezana je s njegovim nakupljanjem plazmida koji su uzrokovali višestruke otpornost na lijekove i povećana virulentnost.

Značajke patogeneze i klinike. Razdoblje inkubacije za dizenteriju je 2-5 dana, ponekad manje od jednog dana. Formiranje infektivni fokus u sluznici silaznog dijela debelog crijeva (sigma i rektum), gdje prodire uzročnik dizenterije, cikličkog je karaktera: adhezija, kolonizacija, unošenje šigela u citoplazmu enterocita, njihovo intracelularno razmnožavanje, razaranje i odbacivanje. epitelnih stanica, otpuštanje patogena u lumen crijeva; nakon toga počinje sljedeći ciklus - adhezija, kolonizacija itd. Intenzitet ciklusa ovisi o koncentraciji uzročnika u parijetalnom sloju sluznice. Kao rezultat ponovljenih ciklusa, žarište upale raste, nastali čirevi, povezujući se, povećavaju izloženost crijevna stijenka, zbog čega se u stolici pojavljuju krv, mukopurulentne nakupine i polimorfonuklearni leukociti. Citotoksini (SLT-I i SLT-II) uzrokuju razaranje stanica, enterotoksini – proljev, endotoksini – opću intoksikaciju. Klinička slika dizenterije uvelike je određena vrstom egzotoksina koju uzročnik u većoj mjeri proizvodi, stupnjem njegovog alergenskog učinka i imunološkim stanjem tijela. Međutim, mnoga pitanja patogeneze dizenterije ostaju nejasna, posebice: značajke tijeka dizenterije u djece prve dvije godine života, razlozi prijelaza akutne dizenterije u kroničnu, značaj senzibilizacije, mehanizam lokalne imunosti crijevne sluznice itd. Najtipičnije kliničke manifestacije dizenterije su proljev, učestali nagon: u teškim slučajevima do 50 i više puta dnevno, tenezmi (bolni grčevi rektuma) i opća intoksikacija. Priroda stolice određena je stupnjem oštećenja debelog crijeva. Najtežu dizenteriju uzrokuje S. dysenteriae 1, najlakše - Sonne dizenterija.

Postinfektivni imunitet. Kao što su promatranja majmuna pokazala, nakon preboljele dizenterije ostaje jak i prilično dugotrajan imunitet. Uzrokuju ga antimikrobna protutijela, antitoksini, povećana aktivnost makrofaga i T-limfocita. Značajnu ulogu ima lokalna imunost crijevne sluznice, posredovana IgA. Međutim, imunitet je specifičan za tip; ne dolazi do snažnog unakrsnog imuniteta.

Laboratorijska dijagnostika. Glavna metoda je bakteriološka. Materijal za istraživanje je izmet. Shema izolacije patogena: inokulacija na diferencijalne dijagnostičke medije Endo i Ploskirev (paralelno na medij za obogaćivanje nakon čega slijedi inokulacija na Endo i Ploskirev medije) za izolaciju izoliranih kolonija, dobivanje čiste kulture, proučavanje njezinih biokemijskih svojstava i, uzimajući u obzir potonje, identifikacija pomoću polivalentnih i monovalentnih dijagnostičkih aglutinirajućih seruma. Proizvode se sljedeći komercijalni serumi.

1. Shigella, koja ne fermentira manitol:

Do S. dysenteriae 1 I 2

Do S. dysenteriae 3 – 7(polivalentni i monovalentni),

Do S. dysenteriae 8 – 12(polivalentni i monovalentni).

2. Manitolu koji fermentira Shigella:

na tipične antigene S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

grupirati antigene S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8– polivalentan,

na antigene S. boydii 1 – 18(polivalentne i monovalentne), na antigene S. sonnei I faza, II faza,

na antigene S. flexneri I–VI+ S. sonnei– polivalentan.

Za brzu identifikaciju Shigelle preporučuje se sljedeća metoda: sumnjiva kolonija (negativna na laktozu na Endo mediju) se subkulturira na TSI mediju (engleski. trostruki šećer željezo) – agar s tri šećera (glukoza, laktoza, saharoza) sa željezom za određivanje proizvodnje H2S; ili na medij koji sadrži glukozu, laktozu, saharozu, željezo i ureu. Svaki organizam koji razgrađuje ureu nakon 4 do 6 sati inkubacije najvjerojatnije je član roda Proteus a može se isključiti. Mikroorganizam koji proizvodi H2S ili ima ureazu ili spoj koji stvara kiselinu (fermentes laktoza ili saharoza) može se isključiti, iako se sojevi koji proizvode H2S trebaju istražiti kao mogući članovi roda Salmonela. U svim drugim slučajevima treba ispitati kulturu uzgojenu na tim podlogama i, ako fermentira glukozu (promjena boje kolone), izolirati je u čistom obliku. Istodobno se može proučavati u reakciji aglutinacije na staklu s odgovarajućim antiserumima za rod šigela. Ako je potrebno, provode se i drugi biokemijski testovi za provjeru pripadnosti rodu. šigela, a također i mobilnost studija.

Za otkrivanje antigena u krvi (uključujući kao dio CEC-a), urinu i izmetu mogu se koristiti sljedeće metode: RPGA, RSK, reakcija koaglutinacije (u urinu i izmetu), IFM, RAGA (u krvnom serumu). Ove su metode vrlo učinkovite, specifične i pogodne za ranu dijagnostiku.

Za serološku dijagnostiku mogu se koristiti: RPHA s pripadajućom dijagnostikom eritrocita, imunofluorescencijska metoda (indirektna modifikacija), Coombsova metoda (određivanje titra nepotpunih protutijela). Dijagnostičku vrijednost ima i alergotest s dizenterinom (otopina proteinskih frakcija Shigella Flexner i Sonne). Reakcija se uzima u obzir nakon 24 sata, smatra se pozitivnom u prisutnosti hiperemije i infiltrata promjera 10-20 mm.

Liječenje. Glavna pozornost posvećena je uspostavljanju normalnog metabolizma vode i soli, racionalnoj prehrani, detoksikaciji, racionalnoj antibiotskoj terapiji (uzimajući u obzir osjetljivost patogena na antibiotike). Dobar učinak postiže se ranom primjenom polivalentnog dizenterijskog bakteriofaga, osobito tableta s pektinskom ovojnicom, koja štiti fag od djelovanja želučanog soka HCl; U tankom crijevu pektin se otapa, fagi se oslobađaju i ostvaruju svoj učinak. U preventivne svrhe, fag treba dati najmanje jednom svaka tri dana (razdoblje njegovog preživljavanja u crijevima).

Problem specifične prevencije. Za stvaranje umjetne imunosti protiv dizenterije korištena su razna cjepiva: od ubijenih bakterija, kemijska, alkoholna, no sva su se pokazala neučinkovitima i ukinuta su. Cjepiva protiv Flexnerove dizenterije stvorena su od žive (mutirane, ovisne o streptomicinu) Shigelle Flexner; ribosomska cjepiva, ali ni ona nisu našla široku primjenu. Stoga ostaje neriješen problem specifične prevencije dizenterije. Glavni način borbe protiv dizenterije je poboljšanje vodoopskrbnog i kanalizacijskog sustava, osiguranje strogih sanitarnih i higijenskih režima u prehrambenim poduzećima, posebno u mliječnoj industriji, u dječjim ustanovama, na javnim mjestima iu održavanju osobne higijene.

UDK 616.935-074(047)

prije podneSadykova

Kazahstansko nacionalno medicinsko sveučilište

nazvan po S.D. Asfendijarov, Almati

Odjel za zarazne i tropske bolesti

Pouzdana dijagnoza dizenterije jedan je od hitnih zadataka nadzora AEI. Točna dijagnoza bakterijske dizenterije ima važno za ispravan i pravodobno liječenje bolesnika i provoditi potrebne protuepidemijske mjere. Podaci prikazani u pregledu pokazuju da, s obzirom na raširenu prevalenciju dizenterije, nedostatak osjetljivosti i kasno pojavljivanje S obzirom na pozitivne rezultate mnogih dijagnostičkih metoda, preporučljivo je razvijati dijagnostički potencijal za otkrivanje ove infekcije.

Ključne riječi: dijagnoza, dizenterija, metoda antigen-vezujućih limfocita.

Prepoznavanje infekcije shigellama u kliničkoj praksi nailazi na značajne poteškoće zbog objektivnih čimbenika koji uključuju kliničku patomorfozu dizenterije, porast broja atipične forme bolesti, postojanje značajnog broja bolesti zarazne i nezarazne prirode koje imaju kliničke manifestacije slične dizenteriji. U polovici slučajeva dijagnoza "kliničke dizenterije" skriva neprepoznate bolesti druge etiologije.

Najveće poteškoće susreću liječnika tijekom inicijalnog pregleda bolesnika prije dobivanja rezultata parakliničkih dijagnostičkih metoda. Prepoznavanje dizenterije također je teško u prisutnosti popratne bolesti gastrointestinalni trakt.

Od početka primjene etiološke laboratorijske dijagnostike dizenterije predloženo je i ispitano dosta metoda. Postoje mnoge klasifikacije metoda za etiološku dijagnostiku infekcija. Metodološki je najopravdanija klasifikacija koju je predložio B.V. Kažnjavač. U odnosu na dijagnozu dizenterije, principe metodološki utemeljene klasifikacije koristio je B.V. Karalnik, N.M. Nurkina, B.K. Erkinbekova..

Laboratorijske metode za dijagnosticiranje dizenterije uključuju bakteriološke (izolacija i identifikacija uzročnika) i imunološke. Potonji uključuju imunološke metode in vivo (Tsuverkalov test alergije) i in vitro. Imunološke metode in vitro imaju jednu nedvojbenu prednost u odnosu na Tsuverkalov test - nisu povezane s uvođenjem stranih antigena u tijelo.

Većina istraživača još uvijek smatra da bakteriološka istraživanja uključuju izolaciju čista kultura uzročnik bolesti uz njegovu kasniju identifikaciju morfološkim, biokemijskim i antigenskim karakteristikama najpouzdanija je metoda za dijagnosticiranje infekcije šigelozama. Učestalost izolacije Shigella iz fecesa bolesnika s kliničkom dijagnozom "akutne dizenterije", prema različitim autorima, kreće se od 30,8% do 84,7%, pa čak i 91,1%. Takav značajan raspon među različitim autorima ne ovisi samo o objektivnim čimbenicima koji utječu na učinkovitost bakteriološkog istraživanja, već io temeljitosti dijagnoze (ili isključenja) "kliničke dizenterije". Na učinkovitost bakterioloških istraživanja utječu takvi objektivni faktori, kao značajke tijeka bolesti, način prikupljanja i dostave materijala u laboratorij, kvaliteta medija kulture, kvalifikacije osoblja, vrijeme kontakta pacijenta sa zdravstvenim radnicima, korištenje antimikrobna sredstva prije uzimanja materijala za istraživanje. Kvantitativno mikrobiološki pregled izlučevine u akutnoj dizenteriji pokazuje da se u bilo kojem kliničkom obliku infekcije najmasovnije oslobađanje uzročnika događa u prvim danima bolesti, a počevši od 6., a osobito od 10. dana bolesti, koncentracija Shigella u fecesu opada. značajno. T.A. Avdeeva je otkrila da nizak sadržaj Shigella i oštra prevlast nepatogenih mikroorganizama u izmetu praktički isključuju mogućnost bakteriološkog otkrivanja bakterija dizenterije.

Poznato je da je bakteriološka potvrda infekcije šigelama najčešće moguća pregledom bolesnika upravo u prvim danima bolesti – koprokultura uzročnika se u velikoj većini slučajeva prvo izolira pri prvom pregledu. Pozitivni rezultati bakteriološkog pregleda uočeni su samo u prva 3 dana bolesti u 45-49% pacijenata, u prvih 7 dana - u 75%. Tillett i Thomas također smatraju razdoblje pregleda bolesnika važnim čimbenikom koji određuje učinkovitost bakteriološke metode za dijagnosticiranje dizenterije. Prema T.A. Avdeeva, u prvim danima bolesti najintenzivnije oslobađanje uzročnika opaža se kod dizenterije po Sonneu, manje intenzivno kod dizenterije po Flexneru i najmanje kod dizenterije po Flexneru VI; u kasnijim stadijima bolesti visoka koncentracija najdulje se zadržava kod Flexnerove dizenterije, kraće - Shigella Sonne, a najkraće - Shigella Flexner VI.

Dakle, iako je bakteriološki pregled stolice najpouzdanija metoda za dijagnosticiranje infekcije šigelom, značajni nedostaci su gore navedena ograničenja njegove učinkovitosti. Također je važno istaknuti ograničenja rane dijagnoze bakteriološkom metodom, u kojoj je trajanje analize 3-4 dana. U vezi s tim okolnostima, korištenje drugih laboratorijskih dijagnostičkih metoda od velike je praktične važnosti. Druga mikrobiološka metoda za dijagnosticiranje dizenterije također se temelji na detekciji živih šigela. Ovo je reakcija povećanja titra faga (PTR), koja se temelji na sposobnosti specifičnih faga da se razmnožavaju isključivo u prisutnosti homolognih živih mikroorganizama. Povećanje titra indikatorskog faga ukazuje na prisutnost odgovarajućih mikroba u okolišu. Ispitivanje dijagnostičke vrijednosti RSF-a za infekciju šigelama proveo je B.I. Khaimzon, T.S. Vilkomirskaja. RSF ima prilično visoku osjetljivost. Usporedba minimalne koncentracije Shigella u izmetu, uhvaćena bakteriološkom metodom (12,5 tisuća bakterija u 1 ml) i RSF (3,0 - 6,2 tisuće), ukazuje na superiornost RSF-a.

Budući da je učestalost pozitivnih rezultata RNF izravno ovisna o stupnju kontaminacije fecesa, primjena metode također daje najveći učinak u prvim danima bolesti iu težim oblicima infektivnog procesa. Međutim, veća osjetljivost metode određuje njezine posebne prednosti u odnosu na bakteriološki pregled u kasnim fazama bolesti, kao i kod pregleda bolesnika s blagim, asimptomatskim i subkliničkim oblicima infekcije, s niskom koncentracijom uzročnika u fecesu. RSF se također koristi pri pregledu pacijenata koji su uzimali antibakterijske lijekove, budući da potonji oštro smanjuju učestalost pozitivnih rezultata bakteriološke metode istraživanja, ali imaju mnogo manji učinak na učinkovitost RSF-a. Osjetljivost RSF-a nije apsolutna zbog postojanja sojeva Shigella otpornih na fage: udio sojeva otpornih na fage može jako varirati - od 1% do 34,5%.

Velika prednost RSF-a je njegova visoka specifičnost. Tijekom pregleda zdravih ljudi, kao i pacijenata sa zaraznim bolestima druge etiologije, pozitivni rezultati reakcije uočeni su samo u 1,5% slučajeva. RSF je vrijedna dodatna metoda za dijagnosticiranje infekcije šigelom. Ali danas se ova metoda rijetko koristi zbog svoje tehničke složenosti. Ostale metode su imunološke. Uz njihovu pomoć, bilježi se imunološki odgovor specifičan za patogen ili se imunološkim metodama određuju antigeni patogena.

Zbog težine specifičnih infektivno alergijskih procesa tijekom infekcije šigelozama, u početku su se koristile alergološke dijagnostičke metode koje su uključivale intradermalni alergotest dizenterinom (IDT). Lijek "dizenterin", koji je specifičan alergen Shigella bez toksičnih tvari, dobio je D.A. Tsuverkalov i prvi put ga je upotrijebio u kliničkom okruženju prilikom izvođenja intradermalnog testa L.K. Korovitsky 1954. Prema E.V. Golyusova i M.Z. Trokhimenko, u prisutnosti prethodne akutne dizenterije ili pratećih alergijskih bolesti s kožnim manifestacijama (ekcem, urtikarija, itd.). mnogo češće se opažaju pozitivni rezultati VPD (paraalergija). Analiza VPD rezultata u različita razdoblja akutne dizenterije pokazuje da se specifična alergija javlja već u prvim danima bolesti, dostiže maksimalnu težinu do 7. – 15. dana i zatim postupno jenjava. Pozitivni rezultati reakcije dobiveni su pri pregledu zdravih ljudi u dobi od 16 do 60 godina u 15-20% slučajeva i kod osoba u dobi od 3 do 7 godina - u 12,5% slučajeva. Još češće su nespecifični pozitivni rezultati VPD-a uočeni u bolesnika s gastrointestinalnim bolestima - u 20–36% slučajeva. Uvođenje alergena popraćeno je razvojem lokalne reakcije u 35,5 - 43,0% bolesnika sa salmonelozom, u 74 - 87% bolesnika s coli-0124-enterokolitisom. Ozbiljan argument protiv široke uporabe VPD-a u kliničkoj praksi bio je njegov alergeni učinak na tijelo. S obzirom na navedeno, možemo reći da ova metoda nije previše specifična. Tsuverkalovljev test također nije specifičan za vrstu. Pozitivni rezultati reakcije bili su jednako česti kod različitih etioloških oblika dizenterije.

Osim VPD-a, korištene su i druge dijagnostičke reakcije, s različitim stupnjevima valjanosti, smatrane alergijskim, na primjer, reakcija alergenske leukocitolize (ALC), čija je bit specifično oštećenje ili potpuno uništenje aktivno ili pasivno senzibiliziranih neutrofila na kontakt s odgovarajućim antigenom. Ali ova se reakcija ne može pripisati ranim dijagnostičkim metodama, budući da je najveća učestalost pozitivnih rezultata uočena 6-9 dana bolesti i iznosila je 69%. Predložena je i alergenska leukemijska reakcija (ALE). Temelji se na sposobnosti leukocita senzibiliziranog organizma da se aglomeriraju kada su izloženi homolognom alergenu (dizenterinu). Zbog nedostatka dokaza o točnim mehanizmima takvih testova i nedovoljne korespondencije njihovih rezultata s etiologijom bolesti, ove metode, nakon kratkog razdoblja njihove uporabe u SSSR-u, kasnije nisu postale široko rasprostranjene.

Detekcija antigena Shigella u tijelu dijagnostički je ekvivalentna izolaciji uzročnika. Glavne prednosti metoda detekcije antigena u odnosu na bakteriološka istraživanja koja ih opravdavaju klinička primjena, je sposobnost identificiranja ne samo živih mikroorganizama, već i mrtvih, pa čak i uništenih, koja se stječe posebno značenje prilikom pregleda pacijenata tijekom ili neposredno nakon tijeka antibakterijske terapije.

Jedna od najboljih metoda ekspresne dijagnostike dizenterije bila je imunofluorescentna pretraga stolice (Coonsova metoda). Suština metode je otkrivanje Shigella tretiranjem ispitivanog materijala serumom koji sadrži specifična antitijela obilježena fluorokromima. Kombinacija obilježenih protutijela s homolognim antigenima popraćena je specifičnim sjajem kompleksa, detektiranih u fluorescentnom mikroskopu. U praksi se koriste dvije glavne varijante Koonsove metode: izravna, u kojoj se koristi serum koji sadrži obilježena protutijela protiv antigena Shigella, i neizravna (dvostupanjska), u kojoj se koristi serum koji nije obilježen fluorokromom (ili globulinska frakcija antigena). Shigella serum) u prvoj fazi. U drugoj fazi koristi se serum obilježen fluorokromom protiv globulina anti-Shigella seruma korištenog u prvoj fazi. Usporedna studija dijagnostičke vrijednosti dviju varijanti imunofluorescentne metode nije otkrila velike razlike u njihovoj specifičnosti i osjetljivosti. U kliničkoj praksi uporaba ove metode najučinkovitija je pri pregledu pacijenata u rani datumi bolesti, kao i kod težih oblika infekcija. Značajan nedostatak metode imunofluorescencije je njezina nespecifičnost. Najvažniji razlog Nedovoljna specifičnost reakcije imunofluorescencije je antigenski afinitet Enterobacteriaceae različitih rodova. Stoga se ova metoda smatra vodičem za prepoznavanje infekcije šigelom.

Za otkrivanje antigena Shigella bez mikroskopa koriste se različite reakcije. Ove metode omogućuju otkrivanje antigena patogena u izmetu 76,5 - 96,0% bolesnika s bakteriološki potvrđenom dizenterijom, što ukazuje na njihovu prilično visoku osjetljivost. Najpoželjnije je koristiti ove metode upravo u kasnijim fazama bolesti. Većina autora visoko cijeni specifičnost ovih dijagnostičkih metoda. Međutim, F.M. Ivanov, koji je koristio RSC za otkrivanje antigena shigella u fecesu, dobio je pozitivne rezultate pri pregledu zdravih ljudi i bolesnika s crijevnim infekcijama druge etiologije u 13,6% slučajeva. Prema autoru, uporaba metode je prikladnija za identifikaciju specifičnih antigena u urinu, budući da je učestalost nespecifičnih pozitivnih reakcija u potonjem slučaju znatno manja. Korištenje različitih metoda istraživanja omogućuje otkrivanje antigena Shigella u urinu velike većine bolesnika s bakteriološki potvrđenom dizenterijom. Dinamika izlučivanja antigena u urinu ima neke osobitosti - otkrivanje antigenskih tvari u nekim slučajevima moguće je već od prvih dana bolesti, ali s najvećom učestalošću i dosljednošću moguće je 10. - 15. dan, pa čak i kasnije. Prema B.A. Godovanny i sur., udio pozitivnih rezultata za otkrivanje antigena shigella u urinu (SAC) nakon 10. dana bolesti je 77% (odgovarajuća brojka za bakteriološki pregled stolice je 47%). U vezi s tom okolnošću, ispitivanje urina na prisutnost antigena uzročnika je vrijedna dodatna metoda za dizenteriju, prvenstveno u svrhu kasne i retrospektivne dijagnoze.

Prema N.M. Nurkina, ako je imunoreagens s antitijelima dobiven iz poliklonskih seruma, mogući su pozitivni rezultati indikacije ako su srodni antigeni prisutni u uzorku. Na primjer, s eritrocitnim dijagnostikumom iz visoko aktivnog seruma protiv S.flexneri VI, također se otkriva antigen S.flexneri I-V, budući da Shigella obje podvrste imaju zajednički antigen vrste. Antigeni Shigella mogu se odrediti tijekom razdoblja bolesti kako u krvnom serumu tako iu sekretima.

Lee Won Ho i sur. Pokazalo se da je učestalost otkrivanja antigena Shigella i njihova koncentracija u krvi i urinu veća u ranim danima bolesti te da je koncentracija dokazanih antigena veća u srednje teškim slučajevima bolesti nego u lakšim slučajevima.

CM. Omirbayeva je predložila metodu indikacije Shigella antigena, koja se temelji na upotrebi formaliziranih eritrocita kao sorbenta za antigene iz fekalnog ekstrakta koji se proučava, nakon čega slijedi aglutinacija s imunološkim serumima. Procjena specifičnosti ove metode, po našem mišljenju, zahtijeva dodatna istraživanja, budući da fekalni ekstrakti sadrže značajne količine antigeni drugih bakterija koje nisu uzročnici ove crijevne bolesti.

Niz istraživača predlaže imunoenzimski test kao metodu brze dijagnoze akutne dizenterije, koja se prema mnogim autorima smatra visoko osjetljivom i visoko specifičnom. Istovremeno, najviše visoka razina antigen se otkriva 1-4 dana bolesti. Unatoč očitim prednostima ELISA-e, koje uključuju visoku osjetljivost, mogućnost strogog instrumentalnog kvantitativnog računovodstva i jednostavnost postavljanja reakcije, široka uporaba ove metode ograničena je zbog potrebe za posebnom opremom.

Za povećanje osjetljivosti i specifičnosti različitih seroloških metoda za dokazivanje antigena preporučuje se uporaba monoklonskih protutijela, fragmenata imunoglobulina, sintetskih protutijela, bojanje LPS srebrom i druga tehnološka poboljšanja.

Često nije moguće detektirati antigen infektivnog agensa čak ni pri visokoosjetljivim reakcijama za otkrivanje antigena patogena u biološkim supstratima tijela, budući da se značajan dio antigenskih tvari očito nalazi u biouzorku u obliku imunoloških kompleksa. u tijelu. Pri ispitivanju bolesnika s bakteriološki potvrđenom akutnom dizenterijom, pozitivni rezultati određivanja antigena pomoću RSC zabilježeni su, prema nekim podacima, samo u 18% slučajeva.

TELEVIZOR. Remneva i sur. Oni predlažu korištenje ultrazvuka za dezintegraciju kompleksa antitijela s česticama patogena, a zatim određivanje antigena patogena u RSC na hladnoći. Metoda je korištena za dijagnosticiranje dizenterije, a kao materijal za istraživanje korišteni su uzorci urina bolesnika s akutnim crijevnim infekcijama.

Primjena precipitacijske reakcije za dokazivanje antigena u akutnoj dizenteriji nije opravdana zbog niske osjetljivosti i specifičnosti. Vjerujemo da se specifičnost bilo koje metode za indikaciju antigena Shigella može značajno povećati korištenjem monoklonskih protutijela na Shigella.

Reakcija koaglutinacije također je jedna od metoda brze dijagnoze šigeloza, kao i antigena uzročnika niza drugih infekcija. U slučaju šigeloze, antigeni patogena mogu se odrediti od prvih dana bolesti tijekom cijelog akutnog razdoblja, kao i unutar 1 - 2 tjedna nakon prestanka izlučivanja bakterija. Prednosti reakcije koaglutinacije su jednostavnost izrade dijagnostike, postavljanje reakcije, ekonomičnost, brzina, osjetljivost i visoka specifičnost.

Kod provođenja dijagnostike za određivanje antigena Shigella od samog početka bolesti, prema mnogim autorima, najučinkovitije je pregledati feces bolesnika. Kako bolest napreduje, sposobnost otkrivanja antigena Shigella u urinu i slini se smanjuje, iako se u fecesu nalaze gotovo jednakom učestalošću kao na početku bolesti. Mora se uzeti u obzir da je u prva 3-4 dana bolesti nešto učinkovitije testirati feces na antigen u RPGA. U sredini bolesti jednako su učinkoviti RPHA i RNAb, a od 7. dana RNAb je učinkovitiji u traženju antigena Shigella. Ove značajke su posljedica postupnog uništavanja stanica Shigella i njihovih antigena u crijevima pacijenta tijekom bolesti. Antigeni šigele izlučeni urinom relativno su manje veličine od antigena u fecesu. Stoga je preporučljivo ispitati urin na RNAt. U urinu žena, za razliku od urina muškaraca, zbog vjerojatne fekalne kontaminacije antigeni Shigella se podjednako često otkrivaju pomoću RPHA i RNAb.

Iako se antigen mnogo češće detektira (94,5 - 100%) u onim uzorcima izmeta iz kojih se Shigella može izolirati nego u onim uzorcima iz kojih Shigella nije izolirana (61,8 - 75,8%), uz paralelne bakteriološke i serološke (na antigen) u proučavanju uzoraka izmeta bolesnika s dizenterijom općenito je šigela izolirana samo u 28,2 - 40,0% uzoraka, a antigen je otkriven u 65,9 - 91,5% uzoraka. Važno je naglasiti da specifičnost vrste detektiranog antigena uvijek odgovara specifičnosti serumskih protutijela, čiji titar dinamički raste što je više moguće. Kada se fokusirate na uvjetni dijagnostički titar protutijela, ponekad se mogu uočiti razlike u specifičnosti takvih protutijela i otkrivenog antigena. Ovo odstupanje nastaje zbog nedovoljne dijagnostičke pouzdanosti jednog određivanja aktivnosti antitijela u serumu. U ovom slučaju etiološka dijagnoza mora se temeljiti na specifičnosti otkrivenog antigena.

Metoda PCR za zadatak izravne identifikacije znakova patogena bliska je metodama indikacije antigena. Omogućuje određivanje DNK patogena i temelji se na principu prirodne replikacije DNK, uključujući odmotavanje dvostruke spirale DNK, divergenciju DNK niti i komplementarno dodavanje oboje. Replikacija DNA ne može započeti u bilo kojem trenutku, već samo u određenim početnim blokovima – kratkim dvolančanim dijelovima. Suština metode je da je, označavajući takvim blokovima dio DNK specifičan samo za određenu vrstu (ali ne i za druge vrste), moguće višestruko reproducirati (amplificirati) taj određeni dio. Testni sustavi koji se temelje na principu amplifikacije DNA u većini slučajeva omogućuju otkrivanje bakterija i virusa koji su patogeni za ljude, čak iu slučajevima kada se njihovo otkrivanje ne može otkriti drugim metodama. Specifičnost PCR testnih sustava (s pravilnim odabirom početnica specifičnih za takson, isključenjem lažno pozitivnih rezultata i odsutnošću inhibitora amplifikacije u biološkim testovima) u načelu omogućuje izbjegavanje problema povezanih s antigenima koji reagiraju unakrsno, čime se osigurava vrlo visoka specifičnost. Određivanje se može provesti izravno na kliničkom materijalu koji sadrži živi patogen. No, unatoč činjenici da osjetljivost PCR-a može doseći matematički moguću granicu (otkrivanje 1 kopije DNK uzorka), metoda se ne koristi u praksi dijagnosticiranja šigeloze zbog relativno visoke cijene.

U širokoj kliničkoj praksi među serološkim metodama istraživanja najzastupljenije su one koje se temelje na određivanju razine i dinamike serumskih protutijela na sumnjivog uzročnika bolesti.

Neki autori su određivali antitijela na Shigella u koprofiltratima. Koproantitijela se pojavljuju mnogo ranije od serumskih antitijela. Aktivnost protutijela doseže maksimum 9-12 dana, a do 20-25 dana obično se ne otkrivaju. R. Laplane i dr. sugeriraju da je to posljedica razaranja antitijela u crijevima pod djelovanjem proteolitičkih enzima. Koproantitijela se ne mogu otkriti u zdravih ljudi.

W. Barksdale et al, T.N. Nikolaeva i sur. izvješćuju o povećanju učinkovitosti dešifriranja dijagnoze i identifikacije rekonvalescenata kroz istovremeno određivanje seruma i koproantitijela.

Detekcija aglutinina u dijagnostičkim titrima moguća je s bakteriološki potvrđenom dizenterijom samo u 23,3% bolesnika. Ograničena osjetljivost RA također se očituje u nedovoljno visokim titrima aglutinina detektiranih uz njegovu pomoć. Postoje dokazi koji ukazuju na nejednaku osjetljivost RA u različitim etiološkim oblicima infekcije šigelozama. Prema A.A. Klyuchareva, antitijela u titru od 1: 200 i više otkrivaju se pomoću RA samo u 8,3% bolesnika s Flexnerovom dizenterijom i još rjeđe u Sonneovoj dizenteriji. Pozitivni rezultati reakcije ne samo da su češći, nego i u višim titrima uočeni kod Flexner I-V i Flexner VI dizenterije nego kod Sonne dizenterije. Pozitivni rezultati RA pojavljuju se od kraja prvog tjedna bolesti i najčešće se bilježe u drugom ili trećem tjednu. Prvih 10 dana bolesti čini 39,6% svih pozitivnih reakcija. Prema A.F. Podlevsky i sur., aglutinini u dijagnostičkim titrima otkrivaju se u prvom tjednu bolesti u 19% bolesnika, u drugom tjednu - u 25% iu trećem - u 33% bolesnika.

Učestalost pozitivnih rezultata RA i razina titra protutijela otkrivenih uz njegovu pomoć izravno ovise o težini infekcije shigella. Prema V.P. Zubareva, primjena antibakterijske terapije ne smanjuje učestalost pozitivnih rezultata RA, međutim, kada se antibiotici propisuju u prva 3 dana bolesti, aglutinini se otkrivaju u nižim titrima.

RA ima ograničenu specifičnost. Pri ispitivanju zdravih ljudi pozitivni rezultati RA dobiveni su u 12,7% slučajeva, a grupne reakcije uočene su u 11,3% slučajeva. Zbog antigenske srodnosti bakterija Flexner I-V i Flexner VI posebno se često uočavaju križne reakcije kod odgovarajućih etioloških oblika infekcije šigelama.

Pojavom naprednijih metoda za serodijagnostiku infekcije šigelama, RA je postupno gubio na važnosti. Dijagnostičku vrijednost reakcije aglutinacije ("dizenterična Vidalova reakcija") (RA) za dizenteriju različiti istraživači procjenjuju dvosmisleno, međutim, rezultati rada većine autora ukazuju na ograničenu osjetljivost i specifičnost ove metode.

Najčešće se za određivanje protutijela koristi neizravna (pasivna) reakcija hemaglutinacije (IPHA). Detaljna istraživanja dijagnostičke vrijednosti reakcije pasivne hemaglutinacije (RPHA) za infekciju šigelama provela je A.V. Lullu, L.M. Shmuter, T.V. Vlokh i brojni drugi istraživači. Njihovi rezultati omogućuju nam da zaključimo da je RPGA jedna od najučinkovitijih metoda za serološku dijagnostiku dizenterije, iako nije bez nekih zajedničkih nedostataka svojstvenih metodama ove skupine.

Usporedna studija osjetljivosti kod dizenterije RPGA i reakcije aglutinacije pokazuje veliku superiornost prve metode. Prema A.V. Lullu, prosječni titri RPHA u ovoj bolesti premašuju prosječne titre RA 15 puta (na vrhuncu bolesti 19-21 puta), antitijela u visokim razinama (1:320 - RPHA) otkrivaju se kada koristi 4,5 puta češće nego u titru (1:160 pri izvođenju reakcije aglutinacije). Uz bakteriološki potvrđenu akutnu dizenteriju, pozitivna RPHA reakcija u dijagnostičkim titrima zabilježena je pri pregledu 53-80% pacijenata.

Hemaglutinini se otkrivaju od kraja prvog tjedna bolesti, učestalost otkrivanja i titar protutijela rastu, dostižući maksimum krajem drugog i trećeg tjedna, nakon čega njihov titar postupno opada.

Postoji jasna ovisnost učestalosti pozitivnih rezultata RPGA i titra hemaglutinina o težini i prirodi tijeka infekcije shigella. Relevantne studije su pokazale da su kod izbrisanih i subkliničkih oblika infekcije pozitivni rezultati RPGA dobiveni rjeđe nego kod akutne klinički značajne dizenterije (52,9 odnosno 65,0%), dok su samo 4 odgovorila u titrima od 1:200 - 1:400. 2% seruma (s klinički izraženim oblikom - 31,2%) i s produljenim i kroničnim oblicima, pozitivni rezultati RPGA zabilježeni su u 40,8% pacijenata, uključujući u titru od 1: 200 - samo 2,0%. Također postoje izvještaji o različitoj osjetljivosti RPHA u pojedinim etiološkim oblicima infekcije šigelozama. Prema riječima L.M. Schmuter, najviši titri hemaglutinina uočeni su kod Sonneove dizenterije, a značajno niži kod Flexner I-V i Flexner VI dizenterije. Antibakterijsko liječenje započeto u ranoj fazi bolesti, smanjenjem trajanja i intenziteta antigenske iritacije, može uzrokovati pojavu hemaglutinina u krvnom serumu u nižim titrima.

Kao i reakcija aglutinacije, RPGA ne omogućuje uvijek točno prepoznavanje etiološkog oblika infekcije šigelama, što je povezano s mogućnošću grupnih reakcija. Križne reakcije opažene su uglavnom kod Flexner tipa dizenterije - između Flexner I-V i Flexner VI dizenterije. Humoralni imunološki odgovor u mnogih bolesnika je slab. Ne može se isključiti mogućnost križne aglutinacije zbog zajedničkih antigena. Međutim, prednosti ove metode uključuju jednostavnost reakcije, mogućnost brzog dobivanja rezultata i relativno visoku dijagnostičku učinkovitost. Značajan nedostatak ovu metodu je da se dijagnoza ne može postaviti prije 5. dana bolesti, maksimalni dijagnostički titri protutijela mogu se odrediti do 3. tjedna bolesti, pa se metoda može klasificirati kao "retrospektivna".

U svrhu dijagnosticiranja dizenterije, također se predlaže određivanje razine specifičnih cirkulirajućih imunoloških kompleksa predstavljenih O-antigenom S. sonnei, u kombinaciji sa specifičnim protutijelom, korištenjem neizravne "sendvič verzije" enzimski vezanog imunosorbensa zbog svoje visoke osjetljivosti i specifičnosti, ali se metoda preporuča koristiti samo od 5. do 8. dana bolesti.

U bolesnika s dizenterijom, od samog početka bolesti, otkriva se specifično povećanje bakteriofiksacijske aktivnosti krvi zbog antigen-vezne aktivnosti eritrocita. U prvih 5 dana ACI određivanje antigen-vezne aktivnosti eritrocita omogućuje utvrđivanje etiologije bolesti u 85-90% slučajeva. Mehanizam ovog fenomena nije dobro shvaćen. Može se pretpostaviti da je njegova osnova vezanje imunološkog kompleksa antigen-antitijelo na eritrocite preko njihovih C3b receptora (kod primata, uključujući ljude) ili Fcγ receptora (kod drugih sisavaca).

Među relativno novim metodama bilježenja specifičnog imunološkog odgovora na staničnoj razini pažnju privlači određivanje antigen-vezujućih limfocita (ABL) koji reagiraju sa specifičnim, taksonomski značajnim antigenom. Detekcija ASL provodi se različitim metodama - uparenom aglutinacijom limfocita s antigenom, imunofluorescencijom, RIA, adsorpcijom limfocita na stupcima koji sadrže antigen, adhezijom mononuklearnih stanica na staklenim kapilarama, neizravnom reakcijom stvaranja rozete (IRRO). Treba napomenuti da su tako visoko osjetljive metode za snimanje ASL-a, kao što su ELISA i RIA, adsorpcija limfocita na stupcima koji sadrže antigen, tehnički relativno složene i nisu uvijek dostupne za široku upotrebu. Radovi brojnih autora pokazali su visoku osjetljivost i specifičnost RNRO za otkrivanje ASL u različitim bolestima. Brojni su istraživači identificirali blisku vezu između sadržaja ASL u krvi pacijenata s različitim patologijama i oblika, težine i razdoblja bolesti, njezinog prijelaza u dugotrajno ili kronični oblik.

Neki autori vjeruju da se određivanjem razine ASL-a u dinamici bolesti može suditi o učinkovitosti terapije. Većina autora smatra da ako je uspješno, količina ASL pada, a ako je učinkovitost liječenja nedovoljna, bilježi se porast ili stabilizacija ovog pokazatelja. Navedeno je da je korištenjem određivanja ASL-a moguće kvantificirati senzibilizaciju na tkivne i bakterijske antigene, kao i na antibiotike, što je važno dijagnostička vrijednost. ASL metoda se u ograničenoj mjeri koristila za dijagnozu dizenterije.

Prilika rano otkrivanje ASL je već u prvim danima nakon infekcije vrlo važan za ranu dijagnozu i pravodobno liječenje koje je kliničaru nužno.

Dakle, podaci prikazani u pregledu pokazuju da je, s obzirom na široku prevalenciju dizenterije, nedostatak osjetljivosti i kasnu pojavu pozitivnih rezultata mnogih dijagnostičkih metoda, uputno razviti dijagnostički potencijal za otkrivanje ove infekcije. Podaci dobiveni u mnogim zaraznim bolestima o visokoj učinkovitosti ASL metode i ranoj pojavi njenog pozitivnog rezultata određuju izglede za proučavanje i korištenje ove metode za šigelozu.

Bibliografija

1 Yushchuk N.D., Brodov L.E. Diferencijalna dijagnoza i liječenje akutnih crijevnih infekcija // Ros. i. gastroenterol., hepatol., koloproktol. – 2000. – 10, br. 5. – P. 13 – 16. – Rus. – ISSN 1382-4376. – RU.

2 Šuvalova E.P., Zmuško E.I. Sindromska dijagnostika zaraznih bolesti. // Udžbenik. – S-P.: Peter, 2001. – P. 138-141.

3 Karalnik B.V., Amireev S.A., Syzdykov M.S. Principi i mogućnosti laboratorijskih dijagnostičkih metoda i tumačenje njihovih rezultata u radu epidemiologa // Metoda. preporučiti - Almaty. – 1997. – 21 str.

4 Karalnik B.V. Serološka dijagnostika bakterijskih crijevnih infekcija. // Metoda. preporuke. – Almaty, 1973. – 3-20 str.

5 5. Nurkina N.M. Komparativna učinkovitost metoda serološke dijagnostike dizenterije pomoću senzibiliziranih eritrocita: Sažetak disertacije. dis. dr.sc. – Almaty, 1984. – 22 str.

6 Karalnik B.V., Nurkina N.M. Kompleksna serološka dijagnostika dizenterije. // Metoda. preporuke. – Almaty, 1983. – 24 str.

7 Erkinbekova B.K. Metoda indikacije antigena Shigella u sanitarnim i epidemiološkim studijama za dizenteriju: autorski sažetak. diss. ...kandidat medicinskih znanosti. – Almaty, 1995. – 18 str.

8 Nikitin V.M., Georgitsa F.I., Plugaru S.V. i tako dalje. Brže metode dijagnoza zaraznih bolesti. // Chisinau. - 1987. - 106 str.

9 Neverov V.A. Strategija i taktika dijagnostike i liječenja akutnih crijevnih infekcija. // St. Petersburg - 1996. – 12 str.

10 Vorobjev A.A. Medicinska mikrobiologija, virusologija i imunologija. // M.- 2004.- pp. 7-8.

11 Ivanov K.S., Ivanov A.I. Dijagnostika akutnih dijarealnih infekcija // Klin. med. – 1992. – br. 7-8 – str. 64-69.

12 Ciudin L., Pencu E., Mihai, I. et al. Serološka identifikacija sojeva Shigella flex neri reakcijom koaglutinacije // Roum. Arh. Microbiol. Immunol. –1995/ – Vol/ 54(4). — Str. 295 — 311.

13 Lindberg A.A., Cam P.D., Chan N. et al. Šigeloza u Vijetnamu: miološka ispitivanja seroepida s upotrebom lipopolisaharidnih antigena u enzimskim imunološkim testovima // Rev. Zaraziti. Dis – 1991. – Vol. 13, Suppl 4. - P.231 - 237.

14 Sloper S. Shigella. // U: Enterobacteriaceae-infekcija. Leipzig.- 1968.- R. 375–441.

15 Jacobs J., Rudensky B., Dresner J. et al. Usporedba četiri laboratorijska testa za dijagnozu proljeva izazvanog Clostridium difficile // Eur. J. Clin Microbiol. Infect.Dis. – 1996. – God. 15(7). – Str. 561-566.

16 Klyucharev A.A., Poleshko D.V., Vershenya M.I. Kliničke i epidemiološke značajke tijeka dizenterije posljednjih godina. // Zdravstvena zaštita Bjelorusije. – 1973. – br. 11.- str. 54-56.

17 Gusarskaya I.L. Značajke kliničkog tijeka dizenterije Sonne u sadašnjoj fazi i neka pitanja njegove prevencije. // U knjizi: Problemi zaraznih bolesti. - Vologda. - 1970. -S. 23-27 (prikaz, ostalo).

18 Shitov I.A., Trinitatskaya M.I. Trajanje izlučivanja bakterija u bolesnika s akutnom dizenterijom. // U knjizi: Crijevne infekcije - 2. dio - L. 1972. - P. 161-163.

19 Avdeeva T.A. Kvantitativno mikrobiološko ispitivanje dizenterije (rezultati razvoja i primjene metode proučavanja kliničkih, mikrobioloških i epidemioloških obrazaca dizenterije). Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao znanstvenik korak. dr. med. Sci. L., 1964., 28 str.

20 Tillet H., Thomas M. Kultura fecesa u dijagnozi Sonne dizenterije: statistička metoda za procjenu prave stope izolacije. // Internat. J.Epidemiol.- 1974.- sv.3.- R. 177-181.

21 Khaimzon B.I. Reakcija povećanja titra faga u dijagnozi akutne dizenterije u odraslih. Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao znanstvenik korak. limenka. medicinske znanosti Voronjež, 1965., 16 str.

22 Vilkomirskaya T.S. Materijali o proučavanju osjetljivosti i specifičnosti reakcije povećanja titra faga (RFT) u dijagnozi dizenterije. // U knjizi: Problemi imunologije zaraznih i alergijskih bolesti. Ufa.- 1970.- str. 48-49.

23 Ivanov F.M. Usporedna vrijednost metoda inokulacije, rasta titrafaga i dokazivanja antigenskih tvari u različitim stadijima procesa dizenterije. Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao znanstvenik korak. limenka. medicinske znanosti Orenburg, 1963, 10 str.

24 Vilkomirskaya T.S. O kliničkom i epidemiološkom značaju reakcije povećanja titra faga (RFT) u dijagnozi dizenterije u uvjetima Ufe. Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao znanstvenik korak. limenka. med. Sci. Ufa, 1971, 24 str.

25 Mazurin N.D., Rozina-Itskina Ts.S. Reakcija porasta titra faga u dijagnozi dizenterije. // JMEI - 1963. - Broj 1. - Str. 113-116.

26 Golyusova E.V., Trokhimenko M.Z. O značaju Tsuverkalovljevog testa u dijagnostici akutne dizenterije u djece. // Intestinalne infekcije (Kijev).- 1972. - br. 5. - str. 97-99.

27 Fradkin V.A., Lodinova L.M. Primjena alergena u dijagnostici kroničnih crijevnih infekcija. // U knjizi: Bakterionosstvo i kronični oblici zaraznih bolesti. - Dio 2.- M.-1975.- P. 213-215.

28 Lukashevich K.K. Alergijska metoda dijagnoza dizenterije. // U knjizi: Neka klinička pitanja i alergije u infektivnoj patologiji.Kuibyshev.- 1970. - pp.41-43.

29 Chechelnitsky V.M. Značenje Tsuverkalovljeve reakcije u dijagnostici akutne dizenterije. // U knjizi: Imunologija i crijevne infekcije Voronjež - 1970. - P. 110-114.

30 Bogdanov I.L. Alergija u patogenezi, kliničkoj slici i terapiji zaraznih bolesti. // M. - 1974. - 245 str.

31 Gorchakova G.A. Dizenterin (lijek za intradermalno testiranje za dijagnozu dizenterije). Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao znanstvenik korak. Dr. medicinske znanosti Odesa, 1969., 19 str.

32 Lyubitskaya N.A., Polyak A.I. Imunodijagnostika dizenterije u djece //VI All-Union. konf. prema kliničkim biokemija, morfologija i imunološke infekcije. bol.: Sažeci izvješća. – Riga, 1983. – P. 106-107.

33 Furman A.A. Komparativna studija neke ubrzane metode laboratorijske dijagnostike dizenterije i kolienteritisa. Autorski sažetak. dis. Nasoisk. znanstvenik korak. limenka. med. Sci. Kijev, 1970, 19 str.

34 Mikhailov I.F., Pers I.F. Identifikacija antigenskih veza između bakterija crijevna skupina metoda fluorescentnih antitijela. JMEI, 1975, broj 5, str. 97-103.

35 Šmuter L.M. Reakcije neizravne hemaglutinacije i neutralizacije protutijela u dijagnostici dizenterije. Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao znanstvenik korak kanal med. Sci. Harkov, 1968., 19 str.

36 Evdokimova T.V., Podlevsky A.F., Yafaev R.Kh. Kliničke i laboratorijske paralele u akutnoj dizenteriji u odraslih. – JMEI, 1974, broj 6, str. 82-85.

37 Mogilev V.E. Pasivna hemaglutinacija kod dizenterije. Sažetak disertacije. za prijavu za posao znanstvenik korak. limenka. med. Sci. Kujbišev, 1968., 20 str.

38 Rybakova N.A. Primjena reakcije inhibicije pasivne hemaglutinacije za dijagnozu Sonneove dizenterije u praktičnom laboratoriju. - Laboratorij. poslovanje, 1975, br. 3, str. 168-170.

39 Ivanov F.M. Usporedna vrijednost metoda inokulacije, rasta titrafaga i dokazivanja antigenskih tvari u različitim stadijima procesa dizenterije. Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao znanstvenik korak. limenka. med. Sci. Orenburg, 1963, 10 str.

40 Godovanny B.A., Litinsky Yu.I., Bodisko V.P. i dr. Kvantitativno određivanje antigena Shigella Sonne u urinu bolesnika i bakterijonosaca. - Laboratorij. poslovanje, 1974, br. 6, str. 360-363.

41 Kaškin G.S. Proučavanje dinamike mikrobnih antigena u krvi i urinu u akutnoj dizenteriji. – U knjizi: Problemi zaraznih bolesti. Vologda, 1970, str. 47-50.

42 Nurkina N.M. Komparativna učinkovitost metoda serološke dijagnostike dizenterije pomoću senzibiliziranih eritrocita: Sažetak disertacije. dis. dr.sc. – Almaty, 1984. – 22 str.

43 Lee Van Ho., Rubtsov I.V., Tregub A.V., Remneva T.V. Usporedna dijagnostička vrijednost nekih metoda za identifikaciju antigena dizenterije u supstratima tijela bolesnika. // Zh.microbiol. – 1989. – br. 1. – str. 57-61.

45 Sakal N.N. Primjena i procjena učinkovitosti enzimskog imunološkog testa u ranoj dijagnozi i prognozi tijeka dizenterije Sonne: Sažetak disertacije. diss. ...kand. med. Sci. – St. Petersburg, 1993. – 21 str.

46 Rubtsov I.V., Pimenova G.N., Kulakova V.N. O statističkoj procjeni kliničkih i laboratorijskih podataka ELISA // Materijali obljetničkog znanstveno-praktičnog rada. konferencije, posvećene 80. godišnjica formiranja Odeljenja za infektivne bolesti VMA im. I. M. Sechenov (22.-23. svibnja 2003.). - M.: VMA im. I. M. Sechenov. - 2003. - Str. 152-153.

47 Downes F.P., Green J.K. et al. Razvoj i procjena imunoenzimskog testa za detekciju Shiga – sličnog toksina I i Shiga – sličnog toksina II // J. Clin. Microbiol. – 1989. – V. 27, br. 6. – Str. 1292-1297.

48 Barbans P.S., Pantyukhina A.N. Metode za dobivanje i praćenje fluorescentnih Fab - fragmenata antitijela protiv serumskih proteina ljudi koji su imali trbušni tifus // Journal of microbiol., epidemiol. i imunobiol. – 1984. – br.2. – str 102-105.

49 Upotreba sintetskih antigena za dijagnostiku zaraznih bolesti //Techn.ser/WHO. – 1989. – br. 784. – Str. 1-74.

50 Ekwall E., Norberg T., Swensons S.B. et al. specifična identifikacija antigena O3 serogrupe E salmonele imunofluorescencijom i koaglutinacijom s antiserumom identificiranim 1 pomoću sintetskog trisaharida – albuminglikokonjugata goveđeg seruma // J. Clin.Microb. – 1994. – 19, br.5. – Str. 699-702.

51 Lee Kuo-Ka, Ellis A.E. Brzo i osjetljivo bojenje srebro-lipopolisaharidom korištenjem Phast sustava u brzoj horizontalnoj elektroforezi u poliakrilamidnom gelu //Electrophoresis. – 1989. – V. 10, br. 10. – Str. 729-731.

52 Tempieva T.V., Yuditskaya N.M., Litinsky Yu.I., Lee Vam Ho. Ultrazvučna dezintegracija imunoloških kompleksa za detekciju antigena Shigella u urinu bolesnika s dizenterijom // Lab. slučaj. – 1988. – br.9. – str. 64-66.

53 Chaika N.A. Proučavanje crijevnih infekcija i njihovih uzročnika suvremenim imunološkim metodama // Akutne crijevne infekcije. – L.: Leningr. Istraživački institut za epidemiologiju i mikro. – 1987. – br. II. – Str.3-8.

54 Khazenson L.B., Chaika N.A. Imunološke osnove dijagnostike i epidemiološke analize crijevnih infekcija. – M.: Medicina. –1987. – 112 s.

55 Kaškin G.S. Proučavanje dinamike mikrobnih antigena u krvi i urinu djece s akutnom dizenterijom. // U knjizi: Problemi zaraznih bolesti. - Vologda. – 1970.- Str. 47-50.

56 Godovanny B.A., Litinsky Yu.I., Bodisko V.P. Kvantitativno određivanje antigena Shigella Sonne u mokraći bolesnika i kliconoša. // Lab. slučaj. – 1970. – br. 6. – str. 360-363.

57 Rybakova N.A., Rybakov D.A. Primjena RNGA i RNAt u epidemiološkom ispitivanju bolesti dizenterične etiologije. – Zbornik Lenjingradskog istraživačkog instituta za epidemiologiju. i mikrobiol. nazvan po Pasteuru. -T. 56. – L., 1981. – P. 58-61.

58 Vasiljeva A.V. Usporedna procjena različitih metoda serološke dijagnostike dizenterije Sonne. // Crijevne infekcije. – 1972. – Br. broj 5. – str. 129-132.

59 Dubinina I.G., Shcherbo S.N., Makarov V.B. Metode lančane reakcije polimerazom u laboratorijskoj praksi. // Klinička laboratorijska dijagnostika. – 1997., br.7. – Str. 4 – 6.

60 Turkadze K.A., Podkolzin T.A., Kokoreva L.N. i dr. Komparativna učinkovitost korištenja PCR i bakteriološke metode u dijagnostici salmoneloze i šigeloze // Materijali obljetničkog znanstvenog i praktičnog rada. konferencije, posvećene 80. godišnjica formiranja Odeljenja za infektivne bolesti VMA im. I. M. Sechenov (22.-23. svibnja 2003.). - M.: VMA im. I. M. Sechenov. - 2003. - Str. 172-173.

61 Akhtamov M.A., Akhmedov A.A. Usporedna studija djelotvornosti nekih serološke reakcije u laboratorijskoj dijagnostici akutne dizenterije // Med. časopis Uzbekistana. – 1984. -№1. – str. 29-31.

62 Borisov V.A. Prema usporednoj procjeni nekih seroloških metoda za dijagnosticiranje dizenterije. - Laboratorij. poslovanje, 1972, br. 9, str. 564-566.

63 Laplane R., Be, gue P., Omanga V. Anticorps seriques et copro-anticorps dansles infections bacteriennes digestives de l, infant. // Bik. Akad. nat. med. – 1975. – God. 159. - Broj 7. - Str. 596-600.

64 Barksdale W., Ghoda A. Aglutinirajuća protutijela u serumu i fezama.// J. Immunol. – 1951. – God. 66. – Str. 395 – 401.

65 Nikolaeva T.A., Kukain E.M., Khazenson L.B. Imunokemijska priroda kopro- i serumskih protutijela u bolesnika sa Sonneovom dizenterijom i drugim akutnim bolestima. - Tez. izvješće Na znanstveno-praktične konf., posvećen 50. obljetnica LenjingradNIIEM nazvana po. Pasteur. L., 1973, str. 53-54 (prikaz, ostalo).

66 Lullu A.V. Primjena reakcije neizravne hemaglutinacije za dijagnostiku i proučavanje imunologije akutne dizenterije. // Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao znanstvenik korak. limenka. med. Sci. - Tartu. - 1963. - 10 str.

67 Klyucharev A.A. Materijali za proučavanje dizenterije u Bjelorusiji. Poleshko D.V., Vershenya M.I. Kliničke i epidemiološke značajke tijeka dizenterije posljednjih godina. // Autorski sažetak. dis. za prijavu za posao akademska titula Dr. med. Sci. - Kaunas. - 1970. - 32 str.

68 Podlevsky A.F., Tselinskaya N.M., Zhuravleva L.V., Buchel N.E. Reakcija neizravne hemaglutinacije u dizenteriji u bolesnika različite dobi. // U knjizi: Problemi epidemiologije i prevencije crijevnih i prirodnožarišnih infekcija. L., 1971., str. 93-99.

69 Zaitlenok M.A., Eremina A.M., Subbotina Yu.L. Serološke studije akutnih crijevnih infekcija nisu bakteriološki potvrđene // Imunologija i imunopatologija. – Voronjež, 1983. – P. 35-37.

70 Borisov V.A., Orlik N.S., Kirilyuk M.A. Imunološki odgovor u bolesnika s dizenterijom s produljenim izlučivanjem Shigella. // All-Union. konf. klinička biokemija, morfologija i imunologija zaraznih bolesti. Sažetak. izvješće - Riga - 1977. - P. 377-378.

71 Chilingaryan A.V. Rezultati paralelne primjene plućnog modela, reakcije neizravne hemaglutinacije i reakcije aglutinacije za dokazivanje antidizenterijskih protutijela u krvi zdravih ljudi. // U knjizi: Akutne crijevne infekcije. Dizenterija, escherichiosis, salmoneloza. – L. – 1970. – Str. 93-101.

72 Patton C.M., Gangorosa E.J., Weissman J.B. et al. Dijagnostička vrijednost inderektne hemaglutinacije u seroepidemiologiji infekcija šigelama. // J. of Clin. Microb. – 1976. – God. – 23. – Str. 143-148.

73 Martinez J. Epidemiološka studija bakterijske dizenterije. // Bol. ofic. sanit.panamer. – 1973. – God. 75. – Str. 213-224.

74 Musabaev I.K., Abubakirova F.Z. Bakterijska dizenterija. – Tash-kent – ​​​​1973. – 258 str.

75 Dulatova M.V., Golovacheva S.N., Savitskaya O.V. Princip RPGA u ekspresnoj dijagnostici infekcija i imuniteta. // U knjizi: Pripreme za ekspresnu dijagnostiku. – L., 1981. – Str. 31-42.

76 Safonova N.V. Korištenje neizravne reakcije hemaglutinacije u žarištima akutne crijevne infekcije za prepoznavanje zaraženih osoba i traženje izvora. – L., 1974. – 11 str.

77 Solodovnikov Yu.P., Kalashnikova G.K., Subbotina Yu.L., Bobkin S.V. Reakcija neizravne hemaglutinacije u proučavanju antitijela kod zdravih, bolesnih i oporavljenih od dizenterije Sonne. – JMEI, 1971, br. 1. – Str.13-18.

78 Provotorov V.Ya. O pitanju liječenja bolesnika s dizenterijom. – U knjizi: Patronažna skrb za zarazne bolesnike i problematika liječenja zaraznih bolesnika. Saratov, 1973. – S. 153-155.

79 Karalnik B.V. Metodologija i taktika imunodijagnostike zarazne patologije. – U knjizi: Problemi kliničke imunologije i imunološke dijagnostike. Alma-Ata, 1988. – 10 str.

80 Kaplin V.I., Klevtsova G.A., Koryukhina I.P. itd. Specifična krvna reakcija u početno razdoblje infekcije dizenterijom i salmonelom i nove mogućnosti rane specifične dijagnoze akutnih crijevnih infekcija // VI All-Union. konf. prema kliničkim biokemije, morfologije i imunol. zarazna bol.: Sažeci izvješća. – Riga, 1983. – P.76-77.

81 Savilov E.D., Astafiev V.A., Mamontova L.M., Volodin Yu.F. Epidemiološke značajke dizenterije u Istočni Sibir. //Novosibirsk “Science”, 1994. – P.42-43.

82 Ivanov K.S., Ivanov A.I. Dijagnostika akutnih dijarealnih infekcija // Klin. med. – 1992. – br. 7-8 – str. 64-69.

83 Karalnik B.V. Crvena krvna zrnca, njihovi receptori i imunitet. //Usp.modern biol., M. – 1992. – vol. 112, br.1. – Str.52-61.

84 Garib F.Yu., Zalyalieva M.V. Metode proučavanja subpopulacije limfocita kod ljudi u različitim patološkim stanjima // Metodološke preporuke. – Taškent, 1989. – 17 str.

85 Bahrg. Modabber F.Z. // J. Immunol. Meth. – 1980. – V. 38, br. 3-4. – Str. 203-216.

86 Tyagotin Yu.A. // Pitanja pregleda i liječenja bolesnika s bolestima krvnog sustava. – L., 1975. – S. 21-25.

87 Novikov D.K., Novikova V.I. Stanične metode imunodijagnostike. // Minsk, 1979. – 222 str.

88 Smirnov B.N., Toropova N.I., Mokhova G.A. i drugi // Materijali Svesavezne znanstvene konferencije "Problemi medicinske biotehnologije". lis. 1988. – L., 1990. – P. 114-116.

89 Slavko E.A., Deryabin P.N., Karalnik B.V. Određivanje limfocita koji vežu antigene kao metoda rane dijagnoze salmoneloze i dizenterije // Healthcare of Kazakhstan.- Almaty.- 1999.- No 5-6.- P. 43-45.

90 Karalnik B.V., Kozhageldieva A.A., Karabekov A.Zh., Denisova T.G., Raipov O.R. Praćenje učinkovitosti liječenja jersinioza uzrokovanih Yersinia enterocolitica // Medicina. - Almaty - 2004. - Broj 4. - S.51-53.

91 Karalnik B.V., Denisova T.G., Plazun A.A. i dr. Antigen-vezujući limfociti tuberkulinske specifičnosti u kunića inficiranih s M. bovis u dinamici liječenja tuberkuloze // Problemi tuberkuloze i plućnih bolesti. -M.-2006.- Broj 5.-P.48-53.

92 Karalnik B.V., Karabekov A.Zh., Denisova T.G., Kozhageldieva A.A., Zhunusova G.B. Diferencijalna dijagnoza bruceloze i intestinalne jersinioze uzrokovane Yersinia enterocolitica serovar O9 // Medicina. - Almaty. - 2004. - Broj 3. - P. 155-157.

93 Karalnik B.V., Denisova T.G., Zhunusova G.B., Fedosov S.A., Zhankin A.A., Ospanov K.S., Mizanbaeva S.U. Učinkovitost različitih testova na antitijela i testa antigen-vezujućih limfocita u dijagnostici bruceloze u ljudi. // Medicinska imunologija. – S.-P. - 2006. - svezak 8. - br. — Str. 567 — 572.

94 Karalnik B.V., Denisova T.G., Grushina T.A., Tugambaev T.I. Analiza imunološkog odgovora zamoraca zaraženih Brucella melitensis // Journal of microbiol.- M.-2002.- No. 1.- P.54-56

95 Karalnik B.V., Berezin V.E., Denisova T.G., Deryabin P.N., Slavko E.A. i dr. Dinamika sadržaja limfocita s receptorima za virus Sendai tijekom imunizacije virusom i imunostimulirajućim kompleksom njegovih glikoproteina // Izvest. Ministarstvo znanosti i više obrazovanje RK. Ser.biol. i medicinski - Almaty.- 1999. - Broj 3. - P. 50-51.

96 Garib F.Yu., Gurariy N.I., Aliev Sh.R. Obilježja antigen-vezujućih limfocita kod kroničnog hepatitisa u djece // Imunologija - 1988. - Br. 5. str. 91-93.

97 Finlay B.B., Falkow S.A. Usporedba mikrobnih strategija vrsta Salmonella, Shigella i Jersinia // Interakcija bakterija – stanica domaćin, Alban R. Liss. Inc. – 1988. – Str. 227-243.

98 Karalnik B.V., Denisova T.G., Keshileva Z.B., Pshenichnaya L.A. i dr. Limfociti koji vežu antigene i antitijela u dijagnozi sifilisa // Spolno prenosive infekcije. – M. – 1999. – br.5. — Str. 34–36.

99 Sakanova L.M., Karalnik B.V., Ukbaeva T.D. i dr. Imunoreagensi za identifikaciju antigen-vezujućih limfocita i njihovo ispitivanje u dijagnostici meningokokna infekcija// Higijena, epidemiologija i imunobiologija - Almaty. -2002.- Broj 1-2.-P.69-72.

100 Slavko E.A., Deryabin P.N., Karalnik B.V., Karabekov A.Zh. O specifičnosti antigen-vezujućih limfocita otkrivenih u bolesnika s akutnim upalnim bolestima gastrointestinalnog trakta. // Higijena, epidemiologija i imunobiologija. - Almaty. - 1999. - br. 2. — Str. 102 — 105.

prije podneSadykova

Laboratorijska dijagnostika dizenterije

Tү jin: Zhedel íshek infekcijelaryn baqylauda, ​​​​dizenterija nakty dijagnostika eң өzu məseLesi mљselí vílíp sayladi. Bakterije dizenterija durys koyylgan dijagnoze znanost uaqytynda jedemo zhurgizuge zhane epidemija karsy sharalardy Otkízu ushín manyzdy. Pregled korsetilgen malimetter, dizenterija ken taraluyn nezhey otyrup, sesimtaldygynyn zhetkílíksízdígí zhane kop degen diagnosticalyk adísterdín on natizhesín íң cache anuқtaluyna balynysty, ose su zaražene anқtauda diagnosticalyk potencijal maxatty t үrde damytu kerek ekenín korsetedí.

Tү sө zder: dijagnoza, dizenterija, antigenbaylanystyrushy adis.

prije podneSadycova

Laboratorijska dijagnostika dizenterije

Životopis: Pouzdana dijagnoza proljeva jedno je od najvažnijih pitanja za kontrolu točne crijevne infekcije. Točna dijagnoza bakterioznog proljeva ima životopisni značaj za pravilno i točno liječenje bolesnika, kao i za poduzimanje potrebnih protuepidemijskih mjera. Članovi navedeni u anketi, s obzirom na raširenost proljeva, pokazuju neosjetljivost i kasnu pojavu pozitivnih rezultata mnogih dijagnostičkih metoda. Bitno je ciljno razviti dijagnostički potencijal za određivanje infekcije.

Ključne riječi: dijagnostika, dizenterija, metoda antigen-vezujućih limfocita.