Fajların kullanımı. Bakteriyofajlar: uygulamanın modern yönleri, gelecek için beklentiler

Faj preparatları, bulaşıcı hastalıkların tedavisi ve önlenmesi için olduğu kadar teşhiste de kullanılır - mikroorganizmaların tanımlanmasında faj duyarlılığını ve faj tiplemesini belirlemek için. Fajların etkisi, katı özgüllüklerine dayanır. Fajların terapötik ve profilaktik etkisi, fajın kendisinin litik aktivitesi ve ayrıca fagolizatlardaki tahrip olmuş mikrobiyal hücrelerin bileşenlerinin (antijenler) özellikle tekrarlı kullanım durumunda bağışıklık kazandırma özelliği ile belirlenir. Faj preparatları elde edilirken, kanıtlanmış üretim faj suşları ve buna bağlı olarak tipik mikroorganizma kültürleri kullanılır. Reprodüksiyonun logaritmik fazında olan sıvı bir besin ortamındaki bir bakteri kültürü, bir faj ana süspansiyonu ile enfekte edilir.

Fajla parçalanan kültür (genellikle ertesi gün) bakteri filtrelerinden süzülür ve faj içeren süzüntüye koruyucu olarak bir kinosol çözeltisi eklenir.
Tamamlanmış ürün faj temiz sıvı sarımsı renk. Daha uzun saklama için bazı fajlar kuru formda (tabletlerde) mevcuttur. Tedavi ve önlemede bağırsak enfeksiyonları midenin asidik içeriği fajları yok ettiğinden, fajlar bir sodyum bikarbonat çözeltisi ile aynı anda kullanılır. Faj vücutta uzun süre kalmaz (5-7 gün), bu nedenle tekrar tekrar uygulanması önerilir.

Sovyetler Birliği'nde üretilen aşağıdaki ilaçlar hastalıkların tedavisi ve önlenmesi için kullanılır: tifo, salmopeloz, dizanteri, kolifaj, stafilokokal faj ve streptokok. Şu anda, fajlar, antibiyotiklerle kombinasyon halinde tedavi ve önleme için kullanılmaktadır. Bu uygulama daha fazlasını sağlar etkili eylem Antibiyotiğe dirençli bakteriler için.

Tanısal bakteriyofajlar, bir hastadan veya enfekte çevresel nesnelerden izole edilen bakterileri tanımlamak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Bakteriyofajların yardımıyla, yüksek özgüllüklerinden dolayı bakteri türlerini ve daha büyük bir doğrulukla ayrı ayrı izole edilmiş bakteri türlerini belirlemek mümkündür. Salmonella, Vibrio ve stafilokok cinsi bakterilerin faj teşhisi ve faj tiplemesi geliştirilmiştir. Faj tiplemesi, enfeksiyon kaynağını belirlemeye, epidemiyolojik ilişkileri incelemeye ve sporadik ve salgın hastalık vakalarını ayırt etmeye yardımcı olur.
Faj teşhisi ve faj tiplendirmesi, izole edilmiş bir mikroorganizmanın karşılık gelen tür veya tip fajlarla birlikte yetiştirilmesi ilkesine dayanır. olumlu sonuççalışılan kültürün tür fajıyla ve daha sonra tipik fajlardan biriyle iyi belirgin bir lizizinin varlığı düşünülür.

Bakteriyofajlar özellikleriyle bilinir. benzersiz özellik bakterileri seçici olarak enfekte eder: her bir bakteriyofaj türü yalnızca belirli bir tür bakteridir ve diğerlerine karşı nötrdür. Tıp, patojenik bir hücreye nüfuz ederek onu içeriden yok eden, ancak bir bütün olarak vücudun mikroflorasını rahatsız etmeyen bu "bakteri yiyicilerin" beş binden fazla türünü bilir.

Çalışma prensibi

Bakteriyofaj preparatlarının etki prensibi, fajlar yüzeysel olarak verildiğinde veya uygulandığında, yapısını içeriden ihlal ederek zararlı bir bakteri arayıp içine nüfuz etmeleridir.

Bakterinin içindeki fajların çoğaltılması, tamamen yok olmasına yol açar. 15 ila 45 dakika arasında süren bu işlem sonucunda yaklaşık 70 ila 200 yeni faj parçacığı oluşur.

Kullanıldığında fajların avantajı, enfeksiyon var olduğu sürece çoğalmaya ve hücrelere girmeye devam etmeleridir.

Türler ve habitat

çok rağmen küçük boy faj parçacıkları (0,2 milimikron'a kadar), yapıları daha fazla karmaşık yapı diğer grupların virüslerinden daha fazla. Bakteriyofajların gen bilgisi, faj başının içinde bulunan DNA'da bulunur. Bakteriyofajlar farklı bir morfolojik yapıya sahiptir.

Çeşitli şekillerde bakteriyofajlar

AT doğal çevre bakteriyofajlar, bakteri hücresi olan hemen hemen her yerde bulunur.

Tıpta, faj preparatlarının, üzerinde hareket ettikleri patojenik bakterilerin adına göre fajlar da dahil olmak üzere gruplara bölünmesi vardır:

• streptokok;
• stafilokok;
• dizanteri;
• hisse;
• psödomonadik;
• klebsieleus;
• protein;
• ve diğerleri.

Pratik uygulama ve amaç

Bakteriyofajların kullanımı sadece etkili yöntem birçok bulaşıcı hastalıklar bakteriyel patojenlerin neden olduğu, ancak aynı zamanda güvenilir önleyici yöntemleri ifade eder.

Bakteriyofajlı terapötik ve profilaktik ilaçlar, aşağıdakilerin tedavisinde etkili bir şekilde kullanılır:

• hemolitik Escherichia coli, stafilokok, streptokok, enterokok, Pseudomonas aeruginosa, Proteus, vb.'nin neden olduğu hastalıklar;
• çocuklarda ve yetişkinlerde disbakteriyoz;
• KBB hastalıkları;
• önleme bakteriyel komplikasyonlar grip ve akut solunum yolu enfeksiyonları ile;
• piyoderma deri, böcek ve hayvan ısırıkları, yara enfeksiyonları;
• ağız boşluğu ve periodontal dokuların pürülan iltihaplı hastalıkları;
• genitoüriner sistemin bakteriyel hastalıkları.

Faj preparatları en çok şu durumlarda etkilidir: önleyici kullanım ve erken teşhis bu hastalığın etken maddesi.

Çeşitli ilaçlar ve özellikleri

Bakteriyofajlar içeren terapötik ve profilaktik müstahzarlar, çözeltiler ve jeller şeklinde mevcuttur. Bu tür ilaçları eczanelerde veya güvenilir çevrimiçi mağazalarda bulabilirsiniz http://vitabio.ru/. Aşağıda bazılarının örnekleri ve açıklamaları bulunmaktadır.

Bakteriyofajlı jeller: Otofag, Fagodent, Fagoderm, Fagogin

fagogin- bakteriyofajlı, jel şeklinde üretilen bir ilaç, samimi hijyen. İlacın bir parçası olarak, her biri belirli bir mikrop türüyle mücadele etmeyi amaçlayan yaklaşık 40 çeşit bakteriyofaj vardır. Fagogin etkilidir antibakteriyel madde Genital enfeksiyonların önlenmesi ve tedavisi için topikal.
otofag- üst solunum yollarının otitis, larenjit, bademcik iltihabı, rinit ve diğer bulaşıcı hastalıklarının önlenmesi ve tedavisi için jel. otofag etkili çare influenza ve akut solunum yolu enfeksiyonlarında bakteriyel komplikasyonların önlenmesi için. Otofag ayrıca şu şekilde kullanılır: antiseptik cerrahi müdahaleler sırasında.
ibne- ağız boşluğunun hijyen ve antibakteriyel tedavisi için canlı bakteriyofajlar içeren en son gelişme. Bir dağıtıcı ile bir jel şeklinde üretilen ilaç, nötralize edebilmektedir. patojenik flora ve ocak inflamatuar süreç. Fagodent, oral mukoza ve diş etlerinin cerahatli iltihaplı süreçlerinin tedavisinde kullanılır, geri döner taze nefes ve ağız boşluğunun mikroflorasını geri yükler.
Fagoderm- derinin yüzeysel ve derin katmanlarının hastalıklarının ve hasarlarının önlenmesi ve tedavisi için bir ilaç. doğal hazırlık Fagoderm zararlı bakterilerle etkili bir şekilde baş eder ve kapsamlı sağlık iyileştirme cilt örtüleri. Çeşitli ile kullanıma uygun yaş grupları doğal bileşenlerin içeriği nedeniyle.

Bakteriyofajlar neden antibiyotiklerden daha iyidir?

Mikropların kasıtlı olarak yok edilmesi, fajlara, bakterilerle birlikte tüm faydalı mikroflorayı yok eden antibiyotiklere göre yadsınamaz bir avantaj sağlar. Bu tür bir tedavi tüm sistemin bozulmasına yol açar. gastrointestinal sistem bakteriyofajların tedavisinde hariç tutulan , dysbacteriosis ve diğer hastalıklar.
Bakteriyofajların diğer faydaları:

• antibiyotiklere karşı güçlü bağışıklığa sahip bakterileri yok edebilir;
• yan efektleri olmayan;
• tüm ilaçlarla uyumlu;
• bağımlılık yapmaz;
• profilaktik olarak kullanılır;
• vücudun bağışıklığını azaltmayın;
• tüm yaş grupları tarafından kullanıma uygundur.

Bakteriyofajlı preparatların kontrendikasyonu olmamasına rağmen, faj içeren preparatların etkili olmadığı durumlar vardır, daha sonra hastalığın tedavisi geleneksel yöntemlerle devam eder.

Bilim adamlarına ve uzmanlara göre, faj tedavisi, daha önce tıbbın güçsüz olduğu birçok bulaşıcı hastalığa karşı mücadelede büyük bir devrim niteliğinde keşif. Olmak doğal ilaçlar enfeksiyonlarla savaşmak için bakteriyofajlar ideal olarak insan vücudu zarar vermeden.

Patojenik mikropların antibiyotiklere karşı artan direnci nedeniyle ve alternatif yöntemler bulaşıcı hastalıklar için tedaviler giderek daha fazla popülerlik kazanıyor, bakteriyofaj araştırmaları sadece ivme kazanacak ve bu da birçok hastalık üzerinde yeni keşiflere ve zaferlere yol açacaktır.

Bakteriyofajlar, seçici olarak mikroplara saldırmak ve zarar vermek. Hücre içinde çoğalarak bakterileri yok ederler. Bu durumda patojenik mikroflora yok edilir ve faydalı mikroflora korunur.

Bu virüslerin kullanımı, bulaşıcı hastalıkların tedavisi için yüzyılın başlarında önerildi. Ancak, antibiyotiklerin ortaya çıkmasından sonra dünyanın birçok ülkesinde onlara olan ilgi kayboldu. Bugün, bu virüslere olan ilgi geri dönüyor.

Temas halinde

Yapısal özellikler ve habitat

Bakteriyofajlar nelerdir? Bu, bakteri hücrelerinden 100 kat daha küçük olan büyük bir virüs grubudur. Çoklu büyütme altındaki fajların yapısı çeşitlilik gösterir.

bakteriyofajlar nelerdir

Türlerine bağlı olarak mikrop türlerini ve amaçlarını düşünün.

Nükleik asit tipi (DNA veya RNA) ve ayrıca genomun şekli ve yapısında farklılık gösteren on dokuz virüs ailesi vardır.

Tıpta bakteriyofajlar sınıflandırılmış patojenik bakteriler üzerindeki etki hızına göre:

1. ılıman bakteriyofajlar patojenik mikroorganizmaları yavaş ve kısmen yok ederek geri dönüşü olmayan değişiklikler yeni nesil mikroplara geçti. Bu sözde lizojenik etkidir.
2. Virülent Virüs Molekülleri, bir kez mikrop hücrelerinde, aktif ve hızlı bir şekilde çoğalır. Neredeyse anında bakterinin ölümüne yol açarlar (litik etki).
3. Orta derecede mikrobiyal türler alternatif tedavi olarak kullanılır Bakteriyel enfeksiyonlar. Belirli avantajları vardır:
4. Uygun şekil. İlaç için yapılır Oral alım solüsyon veya tablet olarak.

Antibiyotiklerin aksine bakteriyofajlarda yan etkiler neden olma olasılıkları daha düşüktür alerjik reaksiyon, ikincil olumsuz etkileri yoktur.

Mikrobiyal direnç yoktur. Bakterilerin virüslere adapte olması daha zordur ve ne zaman karmaşık etki neredeyse imkansız.

Ama dezavantajları da var :

• terapi süresi daha uzundur;
• doğru ilaç grubunu seçmede bazı zorluklar;
• Bir bakterinin genomu bir mikroptan diğerine aktarılır.

Tıpta, açıklanan virüslerin özgüllüğü dikkate alınarak, bu mikropların birkaç çeşidini içeren karmaşık ve çok değerlikli bakteriyofajları kullanmayı tercih ederler.

Bakteriyofajların listesi ve açıklaması:

1. Dizfak, polivalan dizanteri. Shigella Flexner ve Sonne'nin ölümüne neden olur.
2. tifo patojenleri öldürür Tifo, Salmonella.
3. Klebsiella çok değerlikli. Temsil etmek karmaşık araç, Klebsiella pnömonisi, ozen, rinoskleroma yok ediyor.
4. Klebsiella pnömonisi, Klebsifag- ürogenital, solunumla mücadelede mükemmel bir yardımcı, sindirim sistemleri, cerrahi enfeksiyonlar, genelleştirilmiş septik patolojiler.
5. Koliproteofaj, koliproteoid. Proteus ve Escherichia coli tarafından tetiklenen piyelonefrit, sistit, kolit ve diğer hastalıkların tedavisi için tasarlanmıştır.
6. Kolifagus, eğer. Cilt enfeksiyonlarının tedavisinde etkilidir ve iç organlar, enteropatojenik Escherichia coli E. Coli tarafından provoke edilir.
7. proteofaj, proteus, patojen olan spesifik proteik mikroplar vulgaris ve mirabilis üzerinde zararlı bir etkiye sahiptir. pürülan iltihap bağırsak patolojileri.
8. streptokok streptofaj, herhangi bir pürülan enfeksiyondan izole edilen stafilokokları hızla nötralize eder.
9. Pseudomonas aeruginosa. Pseudomonas aeruginosa'yı provoke eden iltihaplanmanın tedavisi için önerilir. Pseudomonas aeruginosa bakterisini parçalar.
10. Karmaşık piyobakteriyofaj. Streptokok, enterokok, stafilokok, pseudomanus aeruginosis, Escherichia coli, Klebsiella oxytoca ve pnömoni fagolizatlarının bir karışımıdır.
11. sektafagu,çok uçan piyobakteriyofaj Escherichia coli üzerinde zararlı bir etkisi vardır.
12. Yoğun. Karmaşık hazırlık, Shigilla, Salmonella, Enerococcus, Staphylococcus, Pseudomnis Proteus ve Aerunina'yı parçalayarak.

Muayene ve enfeksiyon tespitinden sonra sadece bir doktor ilaç yazmalıdır. Özel bir çalışma olmadan fajlara duyarlılığı belirlemek mümkün olmadığından bağımsız kullanımları etkisiz olabilir.

Tedavi rejimi her müşteri için ayrı ayrı geliştirilmiştir. Çoğu zaman terapi için ilaca başvururlar. bağırsak disbakteriyozu. Tedavinin seyri yaklaşık beş gün olabilir, ancak bazı durumlarda - 15 güne kadar. Daha fazla verimlilik için kursları 2-3 kez tekrarlayın.

Stafilokok enfeksiyonu için bir tedavi kursu örneği:

• altı aya kadar bir çocuk - 5 ml;
• altı aydan bir yıla kadar - 10 ml;
• bir ila üç yaş arası bir çocuk - 15 ml;
• 3 yıldan 8-20 ml'ye kadar;
• sekiz yaşından sonra çocuk - 30 ml;
• bebeklere lavman şeklinde ağızdan burun damlası ile faj verilir.

Bakteriyofajlar bakterilerin içinde çoğalarak onları öldürür. İlaçlar tedavi sırasında tüketilip sayıları azalırken faj sayısı tam tersine artabilir.

Faj yemeğinin ortadan kalkmasıyla - zararlı bakteri, fajların kendileri kaybolur.

Bakteriyofaj preparatları, çocuklarda hastalıkların tedavisinde kullanılır:

• kulak enfeksiyonları;
• İdrar yolu enfeksiyonları;
• solunum yolu enfeksiyonları;
• cerrahi enfeksiyonlar;
• gastrointestinal sistem enfeksiyonları;
• göz enfeksiyonları vb.

Bakteriyofajları büyütmek için bakteriyofajlı materyal, belirli bir bakteri kültürü ile tohumlanmış bir besin ortamına uygulanır. Vurdukları yerlerde, boş bir nokta olan tahrip olmuş bir bakteri bölgesi oluşur. Bu materyal bakteriyolojik bir iğne ile alınır. Genç bakteri kültürü içeren bir süspansiyona aktarılır. Bu eylemler, elde edilen bakteriyofajın saf olması için 10 defaya kadar gerçekleştirilir.

Bakteriyofajlara dayanarak, fitiller, aerosoller, tabletler, çözeltiler ve diğer formlar şeklinde müstahzarlar üretilir. İlaçların adı, amaçlananlarla savaşmak için bir grup bakteri kullanır.

Antibiyotiklerle karşılaştırma

Antibiyotiklerin aksine, her türlü bakteriyofaj preparatı insan vücudunu olumsuz etkilemez.

Her tür, mikroorganizmaları seçici olarak etkiler, bu nedenle sadece mikrofloraya zarar vermezler, aynı zamanda disbakteriyoz tedavisinde de kullanılırlar. Bununla birlikte, bu ilaçlar birkaç nedenden dolayı antibiyotiklerden çok daha az kullanılır:

1. Bakteriyofajlar kana nüfuz etmezler. Sadece ilacı maruz kalma bölgesine kolayca ulaştırmak mümkünse kullanılırlar. Örneğin, gargara yapın, doğrudan yaraya uygulayın, bağırsak enfeksiyonu ile için.
2. Bakteriyofajların kullanımı için tanıdan emin olmak önemlidir. istisna kombine müstahzarlarçeşitli patojenlere karşı bakteriyofajlarla. Bu ilaçların etkinliği daha azdır ve fiyatı daha fazladır.

Pratik kullanım fajlar. Bakteriyofajlar, bakterilerin intraspesifik tanımlaması, yani fagovarın (faj tipi) belirlenmesi sırasında enfeksiyonların laboratuvar tanısında kullanılır. Bunun için kullanılan yöntem faj yazarak, fajların etkisinin katı özgüllüğüne dayanarak: çeşitli teşhis tipine özgü fajların damlaları, patojenin saf kültürünün bir "çimiyle" ekilen yoğun bir besin ortamına sahip bir kaba uygulanır. Bir bakterinin faj fajı, onun parçalanmasına neden olan faj tipine göre belirlenir (steril bir nokta, "plak" veya "negatif koloni", faj oluşumu). Faj tipleme tekniği, enfeksiyonun kaynağını ve yayılma yollarını (epidemiyolojik işaretleme) belirlemek için kullanılır. Farklı hastalardan aynı fagovar bakterilerinin izolasyonu, enfeksiyonlarının ortak bir kaynağını gösterir.

Fajlar ayrıca tedavi ve önleme için kullanılır. bir dizi bakteriyel enfeksiyon. Tifo, salmonella, dizanteri, psödomonas, stafilokok, streptokok fajları ve kombine preparatlar (koliproteik, piyobakteriyofajlar, vb.) üretirler. Bakteriyofajlar, endikasyonlara göre sıvı, tablet formları, fitiller veya aerosoller şeklinde oral, parenteral veya topikal olarak reçete edilir.

Bakteriyofajlar yaygın olarak kullanılmaktadır. genetik mühendisliği ve biyoteknoloji rekombinant DNA elde etmek için vektörler olarak.

Escherichiosis'in etken maddeleri. Taksonomi ve özellikleri. Normal ve patolojik koşullarda Escherichia coli'nin rolü. Mikrobiyolojik teşhis enteral escherichiosis. Tedavi ve korunma ilkeleri.

escherichyosis- bulaşıcı hastalıklar etken maddesi Escherichia coli olan.

Enteral (bağırsak) ve parenteral escherichiosis vardır. Enteral escherichiosis, gastrointestinal sistemin baskın bir lezyonu ile karakterize akut enfeksiyöz bir hastalıktır. Salgınlar şeklinde ortaya çıkarlar, nedensel ajanlar, E. coli'nin ishale neden olan suşlarıdır. Parenteral escherichiosis - fırsatçı E. coli suşlarının neden olduğu hastalıklar - temsilciler normal mikroflora kalın bağırsak. Bu hastalıklar ile herhangi bir organa zarar vermek mümkündür.

taksonomik konum. Etken ajan - Escherichia coli - Gracilicutes bölümüne ait Enterobacteriaceae familyası Escherichia cinsinin ana temsilcisidir.

Morfolojik ve tentürsel özellikler. E. coli yuvarlak uçlu küçük Gram negatif çubuklardır. Yaymalarda rastgele düzenlenirler, spor oluşturmazlar, peritrik. Bazı suşlar mikrokapsüllüdür, pili.

kültürel varlıklar. Escherichia coli - isteğe bağlı anaerob, optim. adımlamak. büyüme için - 37C. E.coli Besleyici ortamlara ihtiyaç duymaz ve basit ortamlarda iyi büyür, sıvı ortamda dağınık bulanıklık verir ve katı ortamda koloniler oluşturur. Escherichiosis teşhisi için laktozlu ayırıcı tanı ortamları kullanılır - Endo, Levin.

enzimatik aktivite. E.coliçok çeşitli enzimlere sahiptir. Çoğu damga E.coli laktozu fermente etme yeteneğidir.

antijenik yapı. E. coli'nin somatik bir özelliği vardır. Ö-, kamçılı H ve yüzey K-antijenleri. O-antijen 170'den fazla varyanta sahiptir, K-antijen - 100'den fazla, H-antijen - 50'den fazla. O-antijenin yapısı serogruba ait olduğunu belirler. Suşlar E. koli kalıtsal bir antijen setine (antijenik formül) sahip olanlara denir. serolojik varyantlar (serovarlar).

Antijenik, toksijenik, özelliklerine göre iki biyolojik varyantlar E.coli:

1) fırsatçı E. coli;

2) "kesinlikle" patojenik, ishal yapıcı.

patojenite faktörleri. Enterotropik, nörotropik ve pirojenik etkileri olan endotoksin oluşturur. İshalli Escherichia, önemli hasara neden olan bir ekzotoksin üretir su-tuz metabolizması. Ek olarak, bazı suşlarda ve ayrıca dizanteriye neden olan ajanlarda, bakterilerin hücrelere nüfuz etmesini destekleyen istilacı bir faktör bulunur. İshale neden olan Escherichia'nın patojenitesi, nefrotoksik etkide kanama oluşumundadır. Tüm suşların patojenite faktörlerine E.coli yapışmayı destekleyen pili ve dış zar proteinlerinin yanı sıra fagositozu önleyen bir mikrokapsül içerir.

direnç. E.coli harekete karşı daha yüksek bir dirence sahiptir Çeşitli faktörler dış ortam; dezenfektanlara karşı hassastır, kaynatıldığında çabuk ölür.

rolE.coli. E. coli, kalın bağırsağın normal mikroflorasının bir temsilcisidir. Patojenik bağırsak bakterilerinin, paslandırıcı bakterilerin ve cinsin mantarlarının bir antagonistidir. kandida. Ayrıca, grubun vitaminlerinin sentezinde yer alır. OLMAK ve İLE, lifi kısmen parçalar.

Kalın bağırsakta yaşayan ve şartlı olarak patojenik olan suşlar, gastrointestinal sistemin ötesine geçebilir ve bağışıklığın azalması ve bunların birikmesi ile çeşitli spesifik olmayan piyoinflamatuar hastalıklara (sistit, kolesistit) neden olabilir - parenteral escherichiosis.

Epidemiyoloji. Enteral escherichiosis'in kaynağı hasta insanlardır. Enfeksiyon mekanizması - fekal-oral, bulaşma yolları - beslenme, evle iletişim kurun.

Patogenez. Ağız boşluğu İçeri girer ince bağırsak, pili ve dış zar proteinleri yardımıyla epitel hücrelerinde adsorbe edilir. Bakteriler çoğalır, ölür, bağırsak hareketliliğini artıran endotoksin salgılar, ishale, ateşe ve diğer genel zehirlenme semptomlarına neden olur. Eksotoksin tahsis eder - şiddetli ishal, kusma ve su-tuz metabolizmasının önemli bir ihlali.

Klinik. Kuluçka süresi 4 gündür. Hastalık ateş, karın ağrısı, ishal, kusma ile akut olarak başlar. Uyku ve iştahta bozukluklar var, baş ağrısı. saat hemorajik form dışkıda kan bulunur.

bağışıklık. Sonrasında geçmiş hastalık bağışıklık kırılgan ve kısa ömürlüdür.

Mikrobiyolojik teşhis . Ana yöntem - bakteriyolojik. Görünümü tanımlayın saf kültür(gram-negatif çubuklar, oksidaz-negatif, glikoz ve laktozu asit ve gaza fermente eden, indol oluşturan, hidrojen sülfür oluşturmayan) ve fırsatçı E. coli'yi ishalden ayırt etmeyi mümkün kılan bir serogruba ait. Epidemiyolojik önemi olan tür içi tanımlama, tanısal adsorbe edilmiş bağışıklık serumları kullanılarak serovarın belirlenmesinden oluşur.

83. Bağışıklık sisteminin yapısı ve işlevleri.

İlk kez bakteriyofajların virüs olduğu varsayımı yapıldı. D. Errel. Gelecekte, mantar virüsleri vb. Keşfedildi, onlara faj demeye başladılar.

Faj morfolojisi.

Boyutlar - 20 - 200nm. Çoğu faj, iribaş şeklindedir. En karmaşık fajlar, nükleik asit içeren çokyüzlü bir kafa, bir boyun ve işlemlerden oluşur. İşlemin sonunda, filamentler ve ondan uzanan dişlerle birlikte bazal plaka bulunur. Bu iplikler ve dişler, fajın bakteri kabuğuna bağlanmasına hizmet eder. Sürecin uzak kısmındaki en karmaşık şekilde organize olmuş fajlar bir enzim içerir - lizozim. Bu enzim, faj NK'nin sitoplazmaya nüfuz etmesi üzerine bakteri zarının çözünmesine katkıda bulunur. Birçok fajda süreç, bazı fajlarda kasılabilen bir kılıfla çevrilidir.

5 morfolojik grup vardır

1. Uzun süreçli ve büzülen kılıflı bakteriyofajlar
2. Uzun bir süreci olan ancak kasılma kılıfı olmayan fajlar
3. Kısa kuyruklu fajlar
4. Proses analogu olan fajlar
5. ipliksi fajlar

Kimyasal bileşim.

Fajlar nükleik asit ve proteinlerden oluşur. Çoğu, bir halka içinde kapalı 2 iplikli DNA içerir. Bazı fajlar, tek bir DNA veya RNA zinciri içerir.

Faj kabuğu - kapsit, sıralı protein alt birimlerinden oluşur - kapsomerler.

Sürecin uzak kısmındaki en karmaşık şekilde organize olmuş fajlar bir enzim içerir - lizozim. Bu enzim, faj NK'nin sitoplazmaya nüfuz etmesi üzerine bakteri zarının çözünmesine katkıda bulunur.

Fajlar donmayı, 70'e kadar ısınmayı ve iyi kurumayı tolere eder. Asitlere, UV'ye ve kaynamaya karşı hassastır. Fajlar, belirli hücre reseptörleri ile etkileşime girerek kesin olarak tanımlanmış bakterileri enfekte eder.

Etkileşimin özelliğine göre -

Polifajlar - birkaç ilgili bakteri türüyle etkileşime girer

Monofajlar - tür fajları - bir tür bakteri ile etkileşime girer

Faj yazın - bir tür içindeki bakteri türevleriyle etkileşime geçin.

Tipik fajların eylemine göre, türler ayrılabilir: faj sırası. Fajların bakterilerle etkileşimi şu şekilde ilerleyebilir: üretken, üretken ve bütünleştirici tip.

üretken tip- faj soyu oluşur ve hücre parçalanır

üretken bir- hücre varlığını sürdürür, etkileşim süreci ilk aşamada kesintiye uğrar

bütünleştirici tip- faj genomu bakteri kromozomuna entegre olur ve onunla birlikte bulunur.

Etkileşimin türüne bağlı olarak, öldürücü ve ılıman fajlar.

öldürücü bakterilerle verimli bir şekilde etkileşime girer. Başlangıçta faj, spesifik reseptörlerin etkileşimi nedeniyle bakteri zarında emilir. Viral nükleik asidin bakteri sitoplazmasına penetrasyonu veya penetrasyonu vardır. Lizozim etkisi altında bakterinin kabuğunda küçük bir delik oluşur, fajın kabuğu küçültülür ve NA enjekte edilir. Bakterinin dışındaki fajın kabuğu. Sonraki, erken proteinlerin sentezidir. Faj yapısal proteinlerinin sentezini, faj nükleik asidinin replikasyonunu ve bakteri kromozomlarının aktivitesinin baskılanmasını sağlarlar.

Bunu sentez takip eder. Yapısal bileşenler fajlar ve nükleik asit replikasyonu. Bu elementlerden yeni nesil faj parçacıkları birleştirilir. Düzeneğe morfogenez denir, yeni parçacıklar, bir bakteride 10-100'ü oluşturulabilir. Bakterinin daha fazla parçalanması ve yeni nesil fajların dış ortama salınması.

ılıman bakteriyofajlarüretken veya bütünleştirici olarak etkileşime girer. Üretim döngüsü aynı şekilde gider. Bütünleştirici etkileşim ile, ılıman bir fajın DNA'sı sitoplazmaya girdikten sonra belirli bir bölgede kromozoma entegre olur ve hücre bölünmesi sırasında bakteri DNA'sı ile eş zamanlı olarak çoğalır ve bu yapılar yavru hücrelere aktarılır. Böyle yerleşik faj DNA'sı - profaj ve bir profaj içeren bir bakteriye lizojenik denir ve fenomene denir lizojeni.

Kendiliğinden veya bir dizinin etkisi altında dış faktörler kromozomdan bir profaj kesilebilir, yani. özgür bir duruma geçmek, yeni nesil bakteri cisimlerinin oluşumuna yol açacak olan öldürücü bir fajın özelliklerini sergilemek - profaj indüksiyonu.

Bakteriyel lizogenez, faj (lizojenik) dönüşümünün temelini oluşturur. Bu, aynı türün lizojenik olmayan bakterileri ile karşılaştırıldığında, lizojenik bakterilerdeki özelliklerde veya özelliklerde bir değişiklik olarak anlaşılır. Değişebilir farklı özellikler- morfolojik, antijenik, vb.

Ilıman fajlar kusurlu olabilir - faj soyunu oluşturamaz canlı ve indüksiyonda.

Virion - NK ve bir protein kabuğundan oluşan eksiksiz bir viral parçacık

Fajların pratik uygulaması -

1. Tanılamada uygulama. Bir dizi bakteri türü ile ilgili olarak, bir bakteri kültürünü tanımlama kriterlerinden biri olarak, faj lizabilite reaksiyonunda monofajlar kullanılır, bakterilerin spesifik olmayan farklılaşması için faj tiplemesi için tipik fajlar kullanılır. Epidemiyolojik amaçlarla, enfeksiyonun kaynağını ve ortadan kaldırmanın yollarını belirlemek için yürütülür.
2. Bir dizi bakteriyel enfeksiyonun tedavisi ve önlenmesi için - karın tipi, stafilokok ve streptokok enfeksiyonları (asite dayanıklı kaplamalı tabletler)
3. Ilıman bakteriyofajlar, genetik mühendisliğinde, genetik materyali canlı bir hücreye sokabilen bir vektör olarak kullanılır.

Bakterilerin genetiği

Bakteri genomu, kendi kendini kopyalayabilen genetik unsurlardan oluşur - replikonlar. Replikonlar bakteri kromozomları ve plazmitlerdir. Bakteri kromozomu, kapalı bir halkada proteinlerle ilişkili olmayan ve haploid bir dizi gen taşıyan bir nükleoid oluşturur.

Plazmitler ayrıca DNA molekülünün kapalı bir halkasıdır, ancak kromozomdan çok daha küçüktür. Bakterilerin sitoplazmasında plazmitlerin varlığı gerekli değildir, ancak bir avantaj sağlarlar. çevre. Büyük plazmitler kromozomla birlikte indirgenir ve hücredeki sayıları azdır. Ve küçük plazmitlerin sayısı birkaç on'a ulaşabilir. Bazı plazmitler, belirli bir bölgede bakteri kromozomuna geri dönüşümlü olarak entegre olabilir ve tek bir replikon olarak işlev görebilir. Bu tür plazmitlere bütünleştirici denir. Bazı plazmitler, doğrudan temas - konjugatif plazmitler yoluyla bir bakteriden diğerine aktarılabilir. Genetik materyalin transferi için konjugatif bir köprü oluşturan F haplarının oluşumundan sorumlu genleri içerirler.

Başlıca plazmit türleri şunlardır:

F - bütünleştirici birleşik plazmit. Cinsiyet faktörü, konjugasyon sırasında bakterilerin donör olma yeteneğini belirler.

R - plazmitler. dayanıklı. yok eden faktörlerin sentezini belirleyen genleri içerir. antibakteriyel ilaçlar. Bu tür plazmitlere sahip bakteriler birçok ilaca duyarlı değildir. Bu nedenle ilaca dirençli bir faktör oluşur.

Plazmid toksini - patojenitenin belirleyici faktörleri -

Ent - plazmit - enterotoksinlerin üretimi için geni içerir.

Hly - eritrositleri yok edin.

mobil genetik elementler Bunlar ekler içerir - ekleme elemanları. Genel olarak kabul edilen isim Is'tir. Bunlar hem replikon içinde hem de aralarında hareket edebilen DNA bölümleridir. Sadece kendi hareketleri için gerekli olan genleri içerirler.

transpozonlar- Is ile aynı özelliklere sahip daha büyük yapılar, ancak ek olarak sentezi belirleyen yapısal genler içerirler. biyolojik maddelerörneğin toksinler. Transposable genetik elementler, bir bakteri popülasyonunda gen inaktivasyonuna, genetik materyalde hasara, replikon füzyonuna ve gen proliferasyonuna neden olabilir.

Bakterilerde değişkenlik.

Tüm değişkenlik türleri 2 gruba ayrılır - kalıtsal olmayan (fenotipik, modifikasyon) ve kalıtsal (genotipik).

Değişiklikler- özelliklerde veya özelliklerde fenotipik kalıtsal olmayan değişiklikler. Değişiklikler genotipi etkilemez ve bu nedenle kalıtsal değildir. Bazı belirli çevresel koşullardaki bir değişikliğe uyarlanabilir tepkilerdir. Kural olarak, faktörün sona ermesinden sonra ilk nesilde kaybolurlar.

genotipik değişkenlik organizmanın genotipini etkiler ve bu nedenle torunlara iletilebilir. Genotipik değişkenlik, mutasyonlar ve rekombinasyonlar olarak ikiye ayrılır.

mutasyonlar- organizmanın özelliklerinde veya özelliklerinde kalıcı, kalıtsal değişiklikler. Mutasyonların temeli, bir DNA molekülündeki nükleotid dizisindeki kalitatif veya kantitatif bir değişikliktir. Mutasyonlar hemen hemen her özelliği değiştirebilir.

Köken olarak, mutasyonlar kendiliğinden ve indüklenir.

Spontan Mutasyonlar organizmanın varlığının doğal koşullarında meydana gelir ve indekslenmiş mutajenik faktörün yönlendirilmiş etkisinin bir sonucu olarak ortaya çıkar. Bakterilerde DNA'nın birincil yapısındaki değişikliklerin doğasına göre gen veya nokta mutasyonları ve kromozomal aberasyonlar ayırt edilir.

gen mutasyonları tek bir gen içinde meydana gelir ve minimal olarak bir nükleotidi yakalar. Bu tip mutasyon, bir nükleotidin diğeriyle yer değiştirmesinden, bir nükleotidin kaybolmasından veya fazladan bir nükleotidin eklenmesinden kaynaklanabilir.

kromozomal- birkaç kromozomu etkileyebilir.

Bir kromozom segmentinin silinmesi - bir kromozom segmentinin kaybı, bir çoğaltma - bir kromozom segmentinin iki katına çıkması olabilir. Bir kromozom segmentinin 180 derecelik dönüşü bir ters çevirmedir.

Herhangi bir mutasyon, belirli bir mutajenik faktörün etkisi altında meydana gelir. Doğaları gereği mutajenler fiziksel, kimyasal ve biyolojiktir. iyonlaştırıcı radyasyon, röntgen, UV ışınları. Kimyasal mutajenlere - azotlu bazların analogları, nitröz asidin kendisi ve hatta bazı ilaçlar, sitostatikler. Biyolojik - bazı virüsler ve transfazonlar

rekombinasyon- kromozom parçalarının değişimi

Transdüksiyon - bir bakteriyofaj tarafından genetik materyalin transferi

Genetik materyalin onarımı - mutasyonlardan kaynaklanan hasarın restorasyonu.

Birkaç çeşit tazminat vardır

1. Fotoreaktivasyon - bu işlem, görünür ışığın varlığında aktive olan özel bir enzim tarafından sağlanır. Bu enzim DNA zinciri boyunca hareket eder ve hasarı onarır. UV etkisi altında oluşan thymerleri birleştirir. Karanlık onarımın sonuçları daha önemlidir. Işığa bağlı değildir ve birkaç enzim tarafından sağlanır - önce nükleazlar DNA zincirinin hasarlı bölümünü keser, ardından DNA polimeraz kalan tamamlayıcı zincirin matrisi üzerinde bir yamayı sentezler ve ligazlar yamayı hasarlı alana diker .

Tazminatlar tabidir gen mutasyonları, kromozomlar genellikle

1. Bakterilerde genetik rekombinasyon. Her iki orijinal bireyin genlerini içeren bir yavru genomun oluşumu ile bir donör bakteriden bir alıcı bakteriye genetik materyalin penetrasyonu ile karakterize edilir.

Vericinin bir DNA parçasının alıcıya dahil edilmesi, çaprazlama yoluyla gerçekleşir.

Üç tür iletim -

1. dönüşüm- izole edilmiş bir donör DNA parçasının transfer edildiği süreç. Alıcının yeterliliğine ve donör DNA'sının durumuna bağlıdır. yeterlilik- DNA'yı emme yeteneği. Varlığına bağlı hücre zarı Belirli proteinlerin alıcısı ve bakteri üremesinin belirli periyotları sırasında oluşur. Donör DNA'sı çift sarmallı olmalı ve çok büyük olmamalıdır. Verici DNA bakteri zarına nüfuz eder, zincirlerden biri yok edilir, diğeri alıcının DNA'sına entegre olur.
2. transdüksiyon- bakteriyofajların yardımıyla gerçekleştirilir. Genel transdüksiyon ve spesifik transdüksiyon.

Genel - virülent faktörlerin katılımı ile oluşur. Partikül fajlarının montajı sırasında, faj başı yanlışlıkla faj DNA'sını değil, bakteri kromozomunun bir parçasını içerebilir. Bu tür fajlar kusurlu fajlardır.

özel- ılımlı fajlar tarafından gerçekleştirilir. Keserken, kesin olarak sınır boyunca gerçekleştirilir, belirli genler arasına sokulur ve aktarılır.

1. birleşme- donörün bakterisinden alıcıya doğrudan temas ile genetik materyalin transferi. Gerekli kondisyon- donör hücrede kongatif bir plazmidin varlığı. Pili nedeniyle konjugasyon sırasında, genetik materyalin donörden hastaya aktarıldığı bir konjugasyon köprüsü oluşur.

Gen teşhisi

İncelenen materyaldeki bir mikroorganizmanın genomunu veya fragmanını tanımlamak için bir dizi yöntem. NC hibridizasyon yöntemi, önerilen ilk yöntemdir. Tamamlayıcılık ilkesine dayanmaktadır. Bu yöntem, moleküler problar kullanılarak genetik materyalde patojenin markör DNA fragmanlarının varlığının tespit edilmesini mümkün kılar. Moleküler problar, bir markör bölgesine tamamlayıcı olan kısa DNA iplikleridir. Proba bir etiket eklenir - florokrom, radyoaktif izotop, enzim. Test materyali, mikroorganizmaların yok edilmesine, DNA'nın serbest bırakılmasına ve tek iplikli parçalara bölünmesine izin veren özel bir işleme tabi tutulur. Bundan sonra malzeme sabitlenir. Ardından etiket etkinliği algılanır. Bu yöntem çok hassas değildir. Patojeni sadece yeterince büyük bir sayı ile tanımlamak mümkündür. 10 ila 4 mikroorganizma. Teknik olarak oldukça karmaşıktır ve Büyük bir sayı sondalar. yaygın pratikte bulamadı. Dizayn edildi yeni yöntem - polimeraz zincirleme tepki- PCR.

Bu yöntem, DNA ve viral RNA'nın replikasyon, yani. kendini çoğaltmak için. Hastanın özü, tekrarlanan kopyalamadır - belirli bir mikroorganizma için bir işaretleyici olan bir DNA parçasının in vitro amplifikasyonu. İşlem yeterli düzeyde gerçekleştiğinden yüksek sıcaklıklar 70-90'da yöntem, termofilik bakterilerden termostabil DNA polimerazın izolasyonundan sonra mümkün hale geldi. Amplifikasyon mekanizması, DNA zincirlerinin kopyalanmasının herhangi bir noktada başlamaması, ancak oluşturulması için sözde primerlerin kullanıldığı belirli başlangıç ​​bloklarında başlaması şeklindedir. Primerler, istenen DNA'nın kopyalanan fragmanının uç sekanslarına tamamlayıcı olan polinükleotit sekanslardır ve primerler sadece amplifikasyonu başlatmakla kalmaz, aynı zamanda sınırlandırır. Şimdi PCR için birkaç seçenek var, 3 aşama karakteristiktir -

1. DNA denatürasyonu (1 iplik parçasına ayrılma)
2. Primer eki.
3. DNA zincirlerinin 2 zincire ücretsiz olarak uzatılması

Bu döngü 1.5-2 dakika sürer. Sonuç olarak, DNA moleküllerinin sayısı 20-40 kat ikiye katlanır. Sonuç, kopyaların 10 üzeri 8. kuvvetidir. Amplifikasyondan sonra elektroforez yapılır ve şeritler halinde izole edilir. Amplifikatör adı verilen özel bir cihazda gerçekleştirilir.

PCR'nin Avantajları

1. Saf kültürü izole etmeden, test materyalinde patojenin varlığının doğrudan göstergelerini verir.
2. Büyük ölçüde yüksek hassasiyet. Teorik olarak, 1. bulabilirsiniz.
3. Araştırma materyali, numune alındıktan hemen sonra dezenfekte edilebilir.
4. %100 özgüllük
5. Sonuç alma hızı. Komple Analiz- 4-5 saat. Ekspres yöntemi.

Etken maddeleri ekilmeyen veya yetiştirilmesi zor organizmalar olan bulaşıcı hastalıkların teşhisi için yaygın olarak kullanılır. Klamidya, mikoplazmalar, birçok virüs - hepatit, herpes. belirlemek için bir test sistemi geliştirilmiştir. şarbon, tüberküloz.

Kısıtlama analizi- DNA molekülleri enzimler tarafından parçalanır belirli diziler nükleoidler ve fragmanlar, bileşimlerine göre analiz edilir. Bu şekilde benzersiz siteler bulabilirsiniz.

Biyoteknoloji ve genetik mühendisliği

Biyoteknoloji, canlı organizmaların hayati süreçlerinin incelenmesine dayanan, bu biyolojik süreçleri ve biyolojik nesnelerin kendilerini, insanlar için gerekli ürünlerin endüstriyel üretimi için, kendilerini göstermeyen biyolojik etkilerin yeniden üretilmesi için kullanan bir bilimdir. doğal olmayan koşullarda. Olarak biyolojik nesneler en yaygın olarak kullanılanlar tek hücreli mikroorganizmaların yanı sıra hücreler, hayvanlar ve bitkilerdir. Hücreler çok hızlı çoğalır, bu da Kısa bir zamanüreticinin biyokütlesini artırmak. Şu anda, proteinler, antibiyotikler gibi karmaşık maddelerin biyosentezi, diğer hammadde türlerinden daha ekonomik ve teknolojik olarak daha erişilebilir.

Biyoteknoloji, hücrelerin kendilerini hedef ürünün bir kaynağı olarak ve ayrıca hücre tarafından sentezlenen büyük moleküller, enzimler, toksinler, antikorlar ve birincil ve ikincil metabolitler - amino asitler, vitaminler, hormonlar olarak kullanır. Mikrobiyal ve hücresel sentez ürünleri elde etme teknolojisi, birkaç tipik aşamaya indirgenmiştir - üretken bir karargahın seçimi veya oluşturulması. Optimum seçimi büyüme ortamı, yetiştirme. Hedef ürünün izolasyonu, saflaştırılması, standardizasyonu, dozaj formu. Genetik mühendisliği, bir kişi için gerekli olan bir hedef ürünün oluşturulmasına indirgenmiştir. Elde edilen hedef gen bir vektör ile kaynaştırılır ve vektör bir plazmit olabilir ve alıcının hücresine eklenebilir. Alıcı - bakteri - koli, maya. Rekombinantlar tarafından sentezlenen hedef ürünler izole edilir, saflaştırılır ve pratikte kullanılır.

İnsülin ilk icat edildi insan interferonu. Eritropoietin, büyüme hormonu, monoklonal antikorlar. Hepatit B aşısı.