Favorilere ekle

Taksonomi, pnömokok, grip laboratuvar yöntemleri

RUSYA FEDERASYONU SAĞLIK BAKANLIĞI KAZAN DEVLET TIP ÜNİVERSİTESİ MİKROBİYOLOJİ BÖLÜMÜ

PNÖMOKOKS

Kazan 1999

UDC 576.851.21(07)

Kazan Devlet Tıp Üniversitesi Merkez Koordinasyon ve Metodoloji Konseyi kararı ile yayınlanmıştır.

Tarafından düzenlendi:

(Mikrobiyoloji Anabilim Dalı Başkanı, Tıp Bilimleri Doktoru, Profesör O.K. Pozdeev, Mikrobiyoloji Anabilim Dalı Asistanı, Ph.D., E.R. Fedorova.

İnceleyenler:

Kazan Devlet Tıp Üniversitesi Epidemiyoloji Anabilim Dalı Başkanı, Tıp Bilimleri Doktoru, Doçent M.Sh. Shafeev, Kazan Devlet Tıp Akademisi Epidemiyoloji Anabilim Dalı Başkanı, Tıp Bilimleri Doktoru, Profesör V.E. Grigoryev.

Pnömokok / O.K. Pozdeev, E. R. Fedorov-Kazan: KSMU, 1999. - 14 sn.

Metni veya bir kısmını kaynaklarınızda kopyalayarak, dağıtarak, yayınlayarak, yürürlükteki yasaya uygun olarak sorumluluğu üstlenirsiniz.

Çalışmanın münhasıran kişisel amaçlarla kullanılması için (Rusya Federasyonu "Telif Hakkı ve İlgili Haklar Hakkında" Yasasının 18. Maddesi, 26. Maddesi). Ticari çoğaltma yasaktır.

Kazan Devlet Tıp Üniversitesi, 1999

Pneumococcus (Streptococcus pneumoniae) ilk olarak Pasteur (1881) tarafından bir kuduz aşısı üzerinde çalışırken tanımlandı ve başlangıçta onu kuduza neden olan ajan olarak kabul etti. İnsanlarda pnömoni gelişiminde mikroorganizmanın etyolojik rolü Frenkel ve Weichselbaum (1884) tarafından kanıtlanmıştır. Bakteriler, insan ve hayvan organizmalarını kolonize eder ve sözde "oral" streptokok grubuna dahil edilir. Pnömoninin ana etken maddeleridir, ayrıca plörezi, menenjit, sürünen kornea ülserleri, orta kulakta cerahatli iltihaplanma, septik durumlar ve diğer hastalıklara da neden olabilirler. Burgey Bacteria Key'in (1994) IX baskısında, pnömokoklar 17. grup "Gram-pozitif koklar" içinde yer almaktadır.

Lezyonların epidemiyolojisi. Pnömokok, hastaneler dışında kayıtlı bakteriyel pnömoninin ana etkenlerinden biridir (1000 kişide 2-4 vaka); Dünyada yılda en az 500.000 pnömokokal pnömoni vakası görülmektedir (gerçek değer çok daha yüksektir). Çocuklar ve yaşlılar enfeksiyona en duyarlıdır. Enfeksiyon rezervuarı hastalar ve taşıyıcılardır (okul öncesi çocukların %20-50'si ve yetişkinlerin %20-25'i); ana bulaşma yolu temastır; salgınlar sırasında da havadan. Zirve insidansı soğuk mevsimde görülür. Vakaların büyük çoğunluğunda, klinik enfeksiyon biçimleri, vücudun direnci bozulduğunda (soğuk stresi dahil) ve diğer patolojilerin (orak hücreli anemi, Hodgkin hastalığı, HIV enfeksiyonu, miyelom, diabetes mellitus) arka planında gelişir. , splenektomi sonrası durumlar vb.) veya alkolizm ile. Varyant 1, 2 ve 3, yetişkinlerde patolojide en büyük epidemiyolojik öneme sahiptir; çocuklarda - 1, 2, 3 ve 14 seçenekleri. Azalan sırayla serovarların virülansı - 3, 1, 2, 5, 7 ve 8 seçenekleri. Beyaz fareler, pnömokoklara (enfekte olduklarında bir gün içinde septisemiden ölürler), buzağılara, kuzulara, domuz yavrularına, köpeklere ve maymunlara duyarlıdır.

Morfoloji. Pnömokoklar hareketsizdir, spor oluşturmazlar, mum alevinin dış hatlarını andıran hafif uzamış bir şekle sahiptirler. Klinik materyalden alınan yaymalarda, her biri kalın bir kapsülle çevrili çiftler halinde düzenlenirler. Kültür besiyerlerinden alınan yaymalarda kısa zincirler halinde yer alabilirler ve daha yuvarlak olabilirler. Basit ortamlarda ince bir kapsül oluştururlar; gelişimi kan, serum veya asit sıvısının verilmesiyle uyarılır. Kapsül oluşumu en çok tip III bakterilerde belirgindir. Zincirler halinde düzenlendiğinde, kapsül ortak olabilir.

kültürel özellikler. Pnömokok aerobları veya fakültatif anaeroblar; yetiştirme sırasında kapnofilik koşullar (%5-10 CO2) tercih edilir. Chemoorganogrophy ve % 0.1 glikoz ilavesiyle desteklenen kan veya serum ortamında iyi gelişir. 28-42 °C sıcaklık aralığında büyüyebilirler, optimum sıcaklık 37 °C'dir. Optimum pH -7.6-7.8. Yoğun ortam üzerinde, yaklaşık 1 mm çapında hassas yarı saydam, iyi tanımlanmış koloniler oluştururlar. Bazen merkezi bir girinti ile düz olabilirler; diğer streptokoklar gibi koloniler asla birleşmez

onların arasında. Kanlı agarda yeşilimsi gri renkte küçük yarı saydam koloniler oluştururlar. Kolonilerin ortası daha koyu, çevresi daha açık renklidir. Koloninin altında ve çevresi boyunca, yeşilimsi renksiz bir bölge şeklinde bir a-hemoliz bölgesi görülebilir (hemoglobinin methemoglobine geçişi nedeniyle). Tip III pnömokok kolonileri genellikle mukoza kıvamına sahiptir, boyutları 2 mm'ye kadardır. Net değiller, birbirleriyle birleşebilirim. Kolonilerin S- ve R-formlarını oluştururlar. S-'den R-formuna geçiş sırasında, bir kapsül sentezleme yeteneklerini kaybederler. Serum ve %0,2 glikoz içeren sıvı ortam üzerinde, homojen bir bulanıklık ve küçük bir topaklanma çökeltisi verir. Uzun süreli ekim ile tortu artar.

Sürdürülebilirlik. Pnömokoklar kararsız mikroorganizmalar grubuna aittir. Kuru balgamda iki aya kadar devam ederler. Düşük sıcaklıklarda uzun süre saklanabilir; 60 ° C sıcaklıkta 3-5 dakika içinde ölürler. %3'lük bir karbolik asit çözeltisi onları 1-2 dakikada öldürür. Optochin (1:100.000 konsantrasyonda) ve safra, bakterileri tanımlamak için kullanılan pnömokoklara zararlıdır.

Pnömokoklar, diğer mikroorganizmalardan bir dizi özellikte farklılık gösterir (Tablo 1).

Tablo 1 Pnömokokların biyokimyasal özellikleri

Test substratı	Sonuç	Test substratı	Sonuç
100°C'de büyüme

		rafinoz
%6,5 Nad ile Orta

a-hemoliz
B-hemoliz		trehaloz
		fosfataz
hippurate		β-galaktosidaz


gliserol

Gösterimler: "+" - %90 veya daha fazla suş pozitiftir; (+) - Suşların %80-89'u pozitiftir; d - suşların %21-79'u pozitiftir; (-) - Suşların %11-20'si pozitiftir; “- - Suşların %90'ı veya daha fazlası negatif.

Antijenik yapı. Pnömokoklarda birkaç tip antijen bulunmuştur: hücre duvarında bulunan bir polisakarit, 0-somatik antijen; polisakarit kapsüler K-antijenleri ve M-proteini. Polisakkarit somatik antijen, diğer streptokokların C maddesine benzer. İlişki, kolin fosfat ile ilişkili ributeikoik asitlerin kimyasal yapısının benzerliğini belirler. Kapsüler antijenler ayrıca çeşitli kombinasyonlarda tekrarlanan monosakkaritlerden oluşan bir polisakarit yapısına sahiptir: D-glikoz, D-galaktoz ve L-ramnoz. Kapsüler antijenlerin yapısına göre pnömokoklar 84 serovara ayrılır. Kapsüler antijenlerin, A ve B grubu streptokok antijenlerine karşı antiserumlarla ve ayrıca Klebsiella ve Escherichia antijenlerine karşı serumla çapraz reaksiyona girdiği unutulmamalıdır. S'den R-formuna geçiş sırasında, kapsüler antijenler kaybolur. Pnömokokal serotipleme için, Latin harfleriyle (A, B, C, D, vb.) gösterilen grup serumları ve Romen rakamlarıyla gösterilen serovariant üretilir. Aglütinasyon serumu III, serum karışımlarına dahil değildir. Ayrı olarak serbest bırakılır ve yetiştirilemez. İnsanlarda, I, II ve III serotiplerinin pnömokokları çoğunlukla izole edilir. İnsanlar için en öldürücü olanlardır, bu nedenle aglütinasyon reaksiyonu başlangıçta bu varyantlar için antiserumlar kullanılarak ayarlanır. Sonuç negatif ise, aglütinasyon reaksiyonu sera A, B, C vb. karışımı ile konur. (pozitif bir sonuç elde edilene kadar) ve ardından ayrı antiserumlarla. Serovarların daha hızlı tanımlanması için Neufeld reaksiyonu (kapsülün immün şişmesi) kullanılır. Yöntem, hafif optik mikroskopi ile kaydedilen homolog antiserum varlığında pnömokokal kapsüllerin hacmini artırma yeteneğine dayanmaktadır. Kapsüler polisakkaritler, cilt testleri kullanılarak tespit edilen, gecikmiş tipte bir aşırı duyarlılık reaksiyonunun gelişiminde kendini gösteren hassaslaştırıcı özelliklere sahiptir.

patojenite faktörleri. Ana faktör, bakterileri fagositlerin mikrobisidal potansiyelinden koruyan ve onları opsoninlerin etkisinden uzaklaştıran kapsüldür. Kapsüllenmemiş suşlar pratikte avirulenttir ve nadirdir. Anti-pnömokokal AT havuzunun çoğu AT ila Ag kapsülleridir. Kapsülün ve M-proteininin önemli bir işlevi de mukozaya adezyon sağlamaktır. Spesifik olarak C-reaktif protein ile etkileşime giren Madde-C esastır. Böyle bir tepkinin sonucu, tamamlayıcı kaskadın aktivasyonu ve enflamasyonun akut fazının aracılarının salınmasıdır; akciğer dokusunda birikmeleri, polimorfonükleer fagositlerin göçünü uyarır. Güçlü inflamatuar infiltratların oluşumuna, akciğer dokusunun homeostazının ihlali ve hepatizasyonu eşlik eder. Pnömokoklar endotoksin, a- ve b-hemolizinler (pnömolizinler), lökosidin üretirler. a-pnömolizin, 0-streptolizini nötralize edebilen ısıya duyarlı bir proteindir,

eritrojenik madde, nöraminidaz. Pnömokoklar ayrıca lezyonların patogenezine katkıda bulunan bir dizi enzimi sentezler - muramidaz, hiyalüronidaz (dokularda mikroorganizmaların yayılmasını teşvik eder), peptidaz (IgA'yı parçalar).

Lezyonların patogenezi. Pnömokokların biyotopu üst solunum yoludur. Çoğu pnömoninin patogenezi, S. pneumoniae içeren tükürüğün aspirasyonu ve bakterilerin alt solunum yollarına girişini içerir. Koruyucu boşaltma mekanizmalarının ihlali - öksürük şoku ve mukosiliyer temizleme esastır. Yetişkinlerde akciğerlerin lober lezyonları daha sık görülür, çocuklarda ve yaşlılarda peribronşiyal veya fokal lezyonlar baskındır. Güçlü inflamatuar infiltratların oluşumuna, akciğer dokusunun homeostazının ihlali ve hepatizasyonu eşlik eder. En öldürücü serovar 3 ile enfeksiyonlara akciğer parankiminde boşlukların oluşumu eşlik edebilir. Primer odaktan patojen plevral boşluğa ve perikarda nüfuz edebilir veya hematojen olarak yayılabilir ve menenjit, endokardit ve eklem lezyonlarına neden olabilir.

Klinik bulgular. Klasik pnömokokal pnömoni aniden başlar; vücut sıcaklığındaki artışa, üretken öksürüğe ve göğüs ağrısına dikkat edin. Zayıflamış bireylerde ve yaşlılarda hastalık, hafif ateş, bilinç bozukluğu ve pulmoner kalp yetmezliği belirtileri ile yavaş gelişir. Streptokokal menenjit tüm yaş gruplarında kayıtlıdır; vücut ısısında artış, boyun kaslarında sertlik, baş ağrısı, mide bulantısı ve kusma ile şiddetli bir başlangıç ile karakterize edilirler. Meningeal vasküler lezyonlara sıklıkla bilinç kaybı eşlik eder; çocuklar arasında ve yaşlılıkta ölüm oranı% 80'e ulaşabilir. Sinüzit, mastoidit, orta kulak iltihabı, endokardit ve peritonitin yanı sıra hematojen pnömokokal lezyonlar, bağışıklığı baskılanmış bireylerde (örn. HIV ile enfekte) veya splenektomili hastalarda oldukça yaygındır. Hastalıktan sonra, doğası gereği tipe özgü olan ve tipik kapsüler polisakkarite karşı antikorların ortaya çıkması nedeniyle kararsız bağışıklık gelişir.

Tedavi. Pnömokok enfeksiyonu tedavisinin temeli antibiyotiklerdir - penisilin, tetrasiklin, levomisetin, vankomisin, rifampisin, seftriakson.

Önleme. Pnömokok enfeksiyonlarının spesifik olmayan önlenmesi, hastaları ve taşıyıcıları takip eden tedavileriyle tanımlamayı amaçlar. Enfeksiyonun spesifik olarak önlenmesi için, iki yaşın üzerindeki çocuklar, risk altındaki yetişkinler ve ayrıca hastalığın patlak vermesi sırasında sağlıklı bireyler, polivalan polisakkarit aşı Pneumovex 23 ile aşılanır. İlaç 23 pnömokokal kapsül polisakkarit antijeni (1, 2, 3, 4, 5, 6B 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 1-9F, 19A, 20, 22F, 23F, 33F). antijenler

ABD'de invaziv pnömokok enfeksiyonu olan hastaların kanından izole edilen suşların %90'ında ve Rusya'da karşılaşılan suşlara karşılık gelen pnömokoklar elde edilmiştir. Bağışıklama 5-8 yıl arayla iki kez yapılır.

Aşılamadan sonra yapay, aktif, tipe özgü bağışıklık oluşturulur.

Laboratuvar teşhisi. "Altın standart", patojenin izolasyonudur. Unutulmamalıdır ki malzemenin hızlı bir şekilde incelenmesi gerekir, çünkü. bakteriler, hücre içi enzimlerin aktivitesi nedeniyle hızlı otolize eğilimlidir. Çalışma materyali balgam, plevral efüzyon ve diğer eksüdalar, beyin omurilik sıvısı, kan, burun ve boğazdan mukus, göz ülserlerinden akıntı, kulaktan akıntı, idrar, organ parçalarıdır (hastanın ölümü durumunda). . Balgam yaymalarında nötrofiller ve gram-pozitif mızrak şeklinde diplokoklar saptanırsa (görüş alanı başına en az 10) pnömokokal enfeksiyona bir sinyal yanıtı verilebilir. Aksi takdirde, patojenin izolasyonuna başvurunuz.

Çalışmanın ilk aşaması. Patolojik materyal ön bakteriyoskopiye tabi tutulur (kan hariç). Balgam steril bir Petri kabına konur, yıkanır, cerahatli mukuslu bir yumru bir öze ile yakalanır, cam bir lam üzerine sürülür, kurutulur ve Gram'a göre boyanır. Yaymada, bir kapsülle çevrili Gram pozitif mızrak şeklinde veya oval şekilli koklar bulunur (kapsül oluşumu sadece hasta ve enfekte hayvanlardan izole edilen pnömokoklarda görülür). Pnömokokal kapsüllerin tanımlanması Burri-Gins yöntemi kullanılarak gerçekleştirilebilir. Patolojik materyalin aşılanması, %5-10 kan veya serum agar ve zenginleştirme ortamı (%8-10 serum suyu) üzerinde gerçekleştirilir. Pnömokokal sepsisten şüpheleniliyorsa 5-10 ml hasta kanı 45-90 ml serum suyuna inoküle edilir. Berraksa beyin omurilik sıvısı santrifüjlenir ve tortudan birkaç damla besin ortamına aşılanır. Zenginleştirme ortamı olarak yarı sıvı serum agar kullanılır. Kültürler 24 saat 37°C'de inkübe edilir. Saf bir pnömokok kültürünü izole etmenin en iyi yöntemi, beyaz fareleri patolojik materyalle enfekte etmektir. Petri kabında steril salinle yıkanan balgam, steril bir havan içinde steril bir tokmakla veya kırık camla 1:2-1:5 oranında salin ilave edilerek öğütülür. Süspansiyon çöktürülür, 0.5-1 ml miktarındaki süpernatan beyaz farelere intraperitoneal olarak uygulanır. Materyalde pnömokok varlığında fareler 72 saat içinde ölür. Organlardan ve kandan alınan yaymalarda tipik pnömokoklar bulunur. Organlar ve kan ayrıca serum suyu üzerinde ve kan veya serum agar ile Petri tabaklarında kültürlenir.

Çalışmanın ikinci aşaması. Besin ortamlarında büyümenin doğasını inceleyin. Kanlı agarda pnömokok kolonileri küçük, yuvarlak ve pürüzsüzdür.

çevrenin yeşillenme bölgesi ile çevrili (yeşil streptokokların büyümesini çok anımsatan) kenarlar, hassas. Serum agarda koloniler hassas, yarı saydam ve saydamdır. Gram ile boyanmış yaymaların bakteriyoskopisi ile. Kapsülsüz Gram-pozitif diplokokları bulun. Bakteriyoskopiden sonra, pnömokok olduğundan şüphelenilen koloniler, slant serum veya kanlı agar veya serum suyu üzerinde alt kültürlenir. Çeşitli mikroflora ile birlikte zenginleştirme besiyerinden smearlerin mikroskopisi, çiftler veya kısa zincirler halinde düzenlenmiş gram-pozitif kokları ortaya çıkarabilir. Zenginleştirme ortamından gelen malzeme, katı besin ortamına aktarılır. Ekinler 37°C'de 24 saat inkübe edilir.

Çalışmanın üçüncü aşaması. Kanlı agar eğimli üzerinde, pnömokoklar hassas, ince, yarı saydam bir kaplama oluşturur. Peynir altı suyu suyunda pnömokoklar bulanıklığa ve hafif tortuya neden olur. Katı kültür besiyerlerinden alınan yaymalarda pnömokoklar farklı bir görünüme sahip olabilir. Bir mum alevine benzeyen sivri dış uçları olan uzun bir şekle sahip diplokokların yanı sıra, doğru oval ve yuvarlak şekle sahip hücreler vardır. Et suyu kültüründe, pnömokoklar genellikle zincirler halinde düzenlenir. Pnömokokların morfolojik ve kültürel özelliklerine dayanarak, viridescent streptokoklardan ayırt etmek zordur, bu nedenle, bunların ayırt edilmesi için bir dizi özel test önerilmiştir:

Safrada çözünürlük (deoksikolat testi);

İnülini parçalama yeteneği;

optokine duyarlılık;

Spesifik anti-pnömokokal serumlarla aglütinasyon reaksiyonu;

Glikoz, maltoz, sükroz, laktoz, manitol, sorbitol ve salisin parçalama yeteneği.

Pnömokokları diğer streptokoklardan ayıran en erişilebilir yöntemler optochin testidir (büyümelerini engeller); yeşil streptokoklardan, inülini fermente etme kabiliyetinin yanı sıra safraya duyarlılık ile ayırt edilirler.

Deoksikolat testi. Bir ön bakteriyoskopiden sonra, 5 damla steril sığır safrası içeren bir test tüpüne 10 damla izole edilmiş saf kültür (tercihen et suyu) ilave edilir. Kontrol, 5 damla tuzlu su içeren bir test tüpüne verilen bir kültürdür. 37 °C'de 30-60 dakikalık inkübasyondan sonra, kültürün tamamen parçalanması, test tüpünde safra ile berraklaşma şeklinde gözlenir, kontrol tüpünde karışım bulanık kalır. Avirulent pnömokok kültürlerinin safraya dirençli olduğu unutulmamalıdır.

Safra direnci, %10'luk safra sıvısında aşılama yoluyla da test edilebilir. Et suyu bulutlu hale gelirken test materyali ortama eklenir. 37°C'de 24 saatlik bir inkübasyonun ardından, pnömokokların varlığı, bakteriyel lizizin bir sonucu olarak sıvı besiyerinin temizlenmesiyle gösterilecektir.

%20 safra solüsyonuna batırılmış diskleri de kullanabilirsiniz. Diskler, tabakta yetiştirilen kültürün üzerine yerleştirilir ve 37°C'de 1-2 saat inkübe edilir. Pnömokok varlığında koloniler disk çevresinde 1-2 mm mesafede parçalanır.

İnülin testi. Pnömokok kültürü, inülin içeren besiyerine ekilir. Bunun için 56°C'de 30 dakika ısıtılan 100 ml sığır serumuna 200 ml steril distile su, 18 ml turnusol tentürü ve 3 gr inülin eklenir, 30 dakika akan buharla sterilize edilir. Kültürler 24 saat 37°C'de inkübe edilir. Pnömokok inülini parçalayarak besiyerinin kırmızıya dönmesine neden olur. Yeşil streptokok besiyerinin kızarmasına neden olmaz.

Optokin ile test edin. Test pnömokok kültürü, 1:100,000 veya 1:200,000 dilüsyonda optokin içeren serum sıvı besiyerine aşılanır. Pnömokok böyle bir ortamda gelişmez. 1:50.000 dilüsyonda optokin içeren %10 kanlı agar üzerine inokülasyon yoluyla optokine duyarlılığı belirlemek de mümkündür. Kontrol kanlı agar kültürüdür. Optochin içeren besiyerinde pnömokok üremez; kontrol besiyerinde pnömokok üremesi gözlenir. Besiyerinin yüzeyine aşılamadan sonra uygulanan 6 μg optochin ile emprenye edilmiş diskler kullanabilirsiniz. Pnömokoklarda, disk çevresinde en az 18 mm çapında bir büyüme inhibisyon bölgesi oluşur.

Virulans testi. Peynir altı suyu suyu üzerinde yetiştirilen günlük pnömokok kültürü, %1 steril pepton su (pH - 7.6) veya hafif alkali et suyu ile 1:10 oranında seyreltilir. Seyreltilmiş kültür, 0.5 ml'lik bir hacimde 16-20 g ağırlığındaki beyaz farelere intraperitoneal olarak uygulandı ve 72 saat gözlendi. Ölen farenin organlarından besin ortamlarına aşılamalar yapılır ve smear-iz izleri mikroskobik olarak incelenir. Son derece öldürücü kültürler, kültürün 1:10'luk bir seyreltide verilmesinden sonra farelerin ölümüne neden olan pnömokokları içerir. Avirulent kültürler farelerde ölüme neden olmaz.

Pnömokok serotiplemesi. 18 saatlik kültür, Sabin mikroaglütinasyon testinde test edilir. 4 damla pnömokok kültürü bir cam slayta uygulanır. 1 damlaya bir damla tip 1 antipnömokok serumu, 2. tip II seruma, 3. seruma - 111, 4. damlaya - bir damla normal serum ekleyin. Cam üzerindeki karışımlar bir öze ile karıştırılarak büyüteç altında veya düşük büyütmede mikroskop altında incelenir. Olumlu bir durumda ilk üç damladan birinde aglütinasyon görülür. Pnömokok tipi, ilk üç sabit tipin spesifik aglütinasyon serumları ile aglütinasyon reaksiyonunda belirlenir. Bu tür serumlarla aglütine olmayan kültürler, X-grubuna atanır. Reaksiyon aşağıdaki gibi ayarlanır. 0,5 ml'lik 18 saatlik et suyu kültürünü test tüplerine dökün. Daha sonra serum fizyolojik ile 1:5 oranında seyreltilmiş eşit hacimde serum ekleyin. Kontroller, biri test kültürü ile karıştırılmış 2 test tüpüdür.

normal tavşan serumu ve diğer - sadece test kültürü. Test tüplerinin içeriği iyice çalkalanır ve 2 saat boyunca 37 °C'lik bir termostatta tutulur, ardından reaksiyonun bir ön hesaplaması yapılır. Nihai sonuçlar, oda sıcaklığında 20 saat ek bir inkübasyondan sonra not edilir. Tüplerin içeriği tamamen berraksa ve aglütinasyon kültürü çalkalandığında kırılmayan yoğun bir film ise aglütinasyon dört artı olarak puanlanır; tüpün içeriğinin tamamen açıklığa kavuşturulması ile aglütinasyon kültürü kolayca parçalara ayrılırsa üç artı; iki artı - aydınlanma olmazsa, aglütine kültürün parçacıkları tüpün bulanık içeriğinde çıplak gözle açıkça görülebilir; bir test tüpünde bir artı aglütinasyon ile, yapıştırılmış pnömokokların ince taneli bir karışımı bulunur. Gözle görülebilen negatif bir reaksiyon ile aglütinasyon gözlenmez;

çalkalamadan sonra test tüplerinin içeriği düzgün bir bulanıklıktır.

X-grubu pnömokokların tiplendirilmesi, grup kullanılarak gerçekleştirilir.

alınan tipik aglütinasyon serumlarının bir karışımını içeren serumlar

eşit hacimlerde. Aşağıdaki grup serumları tarafından hazırlanmıştır.

eşit hacimlerde seyreltilmemiş standart teşhisin karıştırılması

Sera (Lund, I960):

A-1, II, IV, V, XVIII serovarları;

B - VI, VIII, XIX serovarları;

C - VII, XX. XXIV, XXXI, XL serovarları;

D - IX, XI, XVI, XXXVI. XXXVII serovarları;

E - X, XXI. XXXIII, XXXIX serovarları;

F-XII. 17. XXII, XXXVII, XXXII, XLI serovarları;

G - XIII, XXV. XXIX, XXXIV, XXXV, XXXVIII, XLII, XLVII serovarları;

J-XLIII. XLIV, XLV, XLVI serovarları.

Tip III aglütinasyon serumu, yeterince yüksek bir titrede elde etmenin zorluğu nedeniyle kendi başına (diğer tipik serumlarla karıştırılmadan) kullanılır. Tiplendirme iki adımda gerçekleştirilir: önce grup serumlarının yardımıyla ve ardından pozitif reaksiyon elde edilen grubun bireysel serumları ile. Pnömokokal serotipleme, öncelikle spesifik seroterapi ve seroprofilaksinin sonuçlarının epidemiyolojik çalışmaları için kullanılır.

Pnömokokların Sabin yöntemiyle mikroaglütinasyonu, anti-pnömokokal serumların hastanın balgamıyla enfekte olmuş bir farenin karın boşluğundan alınan eksüda ile karıştırılmasıyla elde edilebilir. Enfeksiyondan dört saat sonra, eksüdada pozitif Sabin aglütinasyonu veren saf bir pnömokok kültürü bulunur.

Pnömokokları saptamak ve tiplendirmek için hızlandırılmış yöntemler. 1. Neufeld yöntemi veya pnömokokal kapsül şişmesi olgusu. Hastanın yeni izole edilmiş bir balgamı üçe uygulanır.

Lameller, her birine bir damla seyreltilmemiş spesifik anti-pnömokokal serum (1, II, III tip) ve bir damla Loeffler mavisi ekleyin. Damlalar iyice karıştırılır, kenarları vazelinle bulaşan bir delik bulunan bir cam slaytla kaplanır. İki dakika sonra asılı damlalar bir daldırma sistemi ile mikroskop altında incelenir. Olumlu bir durumda, pnömokokal kapsüllerde keskin bir artış görülür. Olumsuz bir sonuçla, kapsüller neredeyse hiç sevilmez. Şişme reaksiyonu spesifiktir ve diğer kapsül bakterileri ile pozitif sonuç vermez. Sülfonamidler ve antibiyotiklerle tedavi edilen hastalardan balgam çalışması için kullanmıyorum, tk. bu durumda kapsüler pnömokok izole edilebilir.

2. Yağış yöntemi. 5-10 ml balgam yoğun bir pıhtı elde edilinceye kadar su banyosunda kaynatılır. Pıhtı öğütülür ve az miktarda salin eklenir, pnömokoklardan spesifik polisakkariti çıkarmak için tekrar birkaç dakika kaynatılır. Süspansiyon santrifüjlenir, elde edilen berrak sıvı ve çökeltme tüplerinde spesifik tipik serum ile bir halka çökeltme reaksiyonu gerçekleştirilir. Sıvılar arasındaki arayüzde bir halkanın görünümü, pozitif bir sonucu gösterir.

3. Burri'ye göre pnömokokal kapsüllerin belirlenmesi. Cam slaydın ucuna bir damla test malzemesi ve bir damla mürekkep uygulanır. Karışım karıştırılır ve bir yayma yapılır, havada ve sabitlenmeden mikroskobik olarak kurutulur. İlacın arka planı koyu dumanlı, mikrobiyal cisimler ve kapsülleri lekeli değil. Burri'ye göre yapılan müstahzar, Nikiforov'un karışımı ile sabitlenebilir, suyla yıkanabilir, Tsilya fuchsin ile boyanabilir, 1:3 oranında 3-5 dakika seyreltilebilir. Smearın koyu arka planında, içinde parlak kırmızı renkli bakteriler bulunan lekesiz kapsüller göze çarpıyor (Gins yöntemi).

kızıl M-antijenli ve eritrojenin üreten çeşitli beta-hemolitik streptokok serotiplerine neden olur (serogrup A'nın toksijenik streptokokları) - (Streptokok pyogenes). Antitoksik bağışıklığın yokluğunda, anjin varlığında kızıl ateş oluşur.

Klinik tablo

 Zehirlenme - ateş, genel halsizlik, baş ağrıları.

 Scarlatina döküntüsü - ince noktalı, cam bir spatula ile orta derecede basınç uygulayın, noktalar daha net görülebilir. Daha sert bastırıldığında, kızarıklık yerini altın sarısı bir cilt tonuna bırakır. Hastalığın 1-3. gününde ortaya çıkar ve esas olarak yanaklarda, kasıklarda, vücudun yanlarında lokalize olur. Nazolabial üçgenin derisi soluk ve döküntüsüz kalır. Döküntü genellikle 3-7 gün sürer, sonra kaybolur ve pigmentasyon bırakmaz. Ekstremite kıvrımlarındaki döküntülerin kalınlaşması ile karakterize edilir - koltuk altı, dirsek, popliteal alanlar.

 Kızıl dil - hastalığın 2-4.

 Anjina, kızıl hastalığının değişmez bir belirtisidir. Normal boğaz ağrısından daha şiddetli olabilir.

 Derinin soyulması - döküntü kaybolduktan sonra oluşur (hastalığın başlamasından 14 gün sonra): avuç içi ve ayak bölgesinde parmak uçlarından başlayarak geniş lamelli; gövdede, boyunda, kulak kepçelerinde pul pul dökülme.

Pnömokoklar, taksonomi. Özellikler. Serolojik gruplar. Diğer streptokoklardan ayırt edici özellikler. Hastalıklara neden oldu. Laboratuvar teşhis ilkeleri ve yöntemleri.

Morfoloji ve biyolojik özellikler. Pnömokoklar (Streptococcus pneumoniae), bir mum alevine benzeyen oval, hafifçe uzatılmış mızrak şeklinde eşleştirilmiş koklardır. Streptokoklara benzeyen kısa zincirlerde de bulunabilirler. Hareketsizdirler, spor oluşturmazlar ve Gram pozitiftirler.
Protein ilavesiyle ortamda büyütülürler: kan, serum, asit sıvısı ile. Kanlı agarda, pnömokok kolonileri küçüktür, çiy damlalarına benzer, iletilen ışıkta şeffaftır, merkezi çöküktür, tamamlanmamış bir hemoliz bölgesiyle çevrilidir, yeşilimsi bir renk tonu, viridescent streptokok kolonilerine benzer. Sıvı ortamlarda, bazen bir çökelti oluşturan hafif bir bulanıklık verirler. Biyokimyasal olarak oldukça aktiftirler: glikoz, laktoz, maltoz, inülin ve diğer karbonhidratları asit oluşumu ile parçalarlar, jelatini sıvılaştırmazlar, indol oluşturmazlar. İnülinin ayrılması, pnömokokları inülini parçalamayan streptokoklardan ayırmaya yardımcı olan ayırıcı bir teşhis özelliğidir. Önemli bir ayırt edici özellik, pnömokokların safrada çözünme kabiliyeti iken, streptokoklar içinde iyi korunur.

Patogenez ve klinik. Pnömokoklar, insanlarda lober pnömoniye neden olan ajanlardır. Ayrıca sürünen kornea ülserlerine, üst solunum nezlesine, menenjite, endokardite, eklem hasarına ve diğer hastalıklara neden olabilirler.

Hastalıktan sonra bağışıklık düşük gerilimli, kısa süreli, tipe özgüdür.
Mikrobiyolojik teşhis. Çalışma için materyal balgam, kan, boğaz sürüntüsü, beyin omurilik sıvısıdır. Pnömokokların hızlı bir şekilde ölmesi nedeniyle, patolojik materyalin araştırma için mümkün olan en kısa sürede laboratuvara ulaştırılması gerekir.

Meningokok. Taksonomi, özellikler. Meningokokların antijenik yapısı, sınıflandırılması. Meningokok enfeksiyonunun patogenezi, klinik belirtiler. Mikrobiyolojik tanı ilkeleri ve yöntemleri. Meningokok enfeksiyonuna neden olan ajanın ve diğer meningokokların farklılaşması. spesifik profilaksi.

N. meningitidis (meningokok).

Meningokok, meningokok enfeksiyonunun etken maddesidir - patojenin havadaki damlacık iletimi ile ciddi bir antroponoz. Ana kaynak taşıyıcılardır. Doğal rezervuar insan nazofarenksidir. Morfolojik, kültürel ve biyokimyasal özellikleri gonokoklara benzer. Farklılıklar - sadece glikozu değil aynı zamanda maltozu da fermente ederler, hemolizin üretirler. Gonococcus'tan daha büyük ve farklı bir yapıya sahip bir kapsülleri vardır.

antijenik bileşim. Dört ana antijenik sisteme sahiptirler.

1. Kapsüler gruba özgü polisakarit antijenleri. Serogrup A suşları en sık salgın salgınlara neden olur.

2. Dış zarın protein antijenleri. Bu antijenlere göre serogrup B ve C meningokoklar sınıflara ve serotiplere ayrılır.

3. Cins ve türe özgü antijenler.

4. Lipopolisakarit antijenleri (8 tip). Yüksek toksisiteye sahiptirler, pirojenik etkiye neden olurlar.

patojenite faktörleri. Yapışma faktörleri ve kolonizasyon - pili ve dış zar proteinleri. İstila etme faktörleri - hiyalüronidaz ve diğer üretilen enzimler (nöraminidaz, proteazlar, fibrinolizin). Mikroorganizmaları fagositozdan koruyan kapsüler polisakarit antijenler çok önemlidir.

dokunulmazlık dayanıklı, antimikrobiyal.

Laboratuvar teşhisi bakteriyoskopiye, kültürün izolasyonuna ve biyokimyasal tanımlamasına, serolojik tanı yöntemlerine dayalıdır. Materyalin inokülasyonu, kan, asit sıvısı ve kan serumu içeren katı ve yarı sıvı besleyici ortamlar üzerinde gerçekleştirilir.

Oksidaz pozitif kültürlerin Neisseria cinsine ait olduğu düşünülmektedir. Meningokok, glikoz ve maltozun fermantasyonu ile karakterizedir. Serogruba ait olup olmadığı aglütinasyon testi (RA) ile belirlenir.

Gonokok. Taksonomi, özellikler. Gonokokal enfeksiyonun patogenezi, bağışıklığın özellikleri. Akut ve kronik belsoğukluğu, blennore laboratuvar tanı ilkeleri ve yöntemleri. RSK Borde-Zhangu, amaç, mekanizma, tepki muhasebesi. Yenidoğanlarda blennore önlenmesi. Belsoğukluğunun önlenmesi ve tedavisi. spesifik terapi.

N.gonore (gonokok).

Gonococcus, idrar yollarında enflamatuar belirtileri olan cinsel yolla bulaşan bir hastalık olan belsoğukluğunun etken maddesidir. Kolonizasyon için substrat üretra, rektum, göz konjunktivası, farenks, serviks, fallop tüpleri ve yumurtalık epitelidir.

Diplococci, metilen mavisi ve diğer anilin boyaları, pleomorfik (polimorfizm) ile iyi boyanır. Yetiştirme ve besin ortamı koşullarına çok tuhaf. Karbonhidratlardan sadece glikoz fermente edilir.

antijenik yapıçok değişken - faz varyasyonları (antijenik determinantların kaybolması) ve antijenik varyasyonlar (antijenik determinantlardaki değişiklikler) ile karakterize edilir.

patojenite faktörleri. Ana faktörler: içti, hangi gonokokların yardımıyla idrar yolunun mukoza zarının epitel hücrelerinin yapışmasını ve kolonizasyonunu gerçekleştirir ve ve lipopolisakarit(gonokokların yok edilmesi sırasında salınan endotoksin). Gonococci, IgA'yı parçalayan bir proteaz olan IgAI'yi sentezler.

Laboratuvar teşhisi. Bakteriyoskopik tanı Gram boyama ve metilen mavisini içerir. Tipik gonokok belirtileri gram negatif boyama, fasulye şeklindeki diplokoklar, hücre içi lokalizasyondur.

Ekim özel besi ortamlarında (serumlu tavşan eti veya sığır kalbinden KDS-MPA, asit-agar, kanlı agar) yapılır.

Gaz halindeki anaerobik enfeksiyonun etken maddeleri. Taksonomi. Özellikler. Toksinlerin özellikleri. Patogenez, klinik formlar. Laboratuvar teşhis ilkeleri ve yöntemleri, spesifik önleme ve tedavi için ilaçlar.

Gazlı kangren, anaerobik bir poliklostridial (yani, çeşitli klostridia türlerinin neden olduğu) yara (travmatik) enfeksiyonudur. C.perfringens, daha az sıklıkla C.novyi ve ayrıca birbirleriyle kalıcı ilişkilerde bulunan diğer clostridia türleri, aerobik piyojenik koklar ve çürütücü anaerobik bakteriler birincil öneme sahiptir.

C.perfringens, insan ve hayvan bağırsaklarının normal bir sakinidir, toprağa dışkı ile girer. Yara enfeksiyonunun etken maddesidir - anaerobik koşullar altında patojen yaraya girdiğinde hastalığa neden olur. Oldukça invaziv ve toksijeniktir. İstilacılık, kas ve bağ dokuları üzerinde yıkıcı etkisi olan hiyalüronidaz ve diğer enzimlerin üretimi ile ilişkilidir. Ana patojenite faktörü - ekzotoksin, hemo-, nekro-, nöro-, lökotoksik ve öldürücü etkilere sahiptir. Ekzotoksinlerin antijenik özgüllüğüne göre izole edilirler. serotipler patojen. C. perfringens, gazlı kangren ile birlikte gıda zehirlenmesine neden olur (bunlar enterotoksinlerin ve nekrotoksinlerin etkisine dayanır).

Patogenezin özellikleri. Aerobların neden olduğu cerahatli hastalıkların aksine, anaerobik enfeksiyonda enflamasyon hakim değildir. nekroz, ödem, dokularda gaz oluşumu, toksinler ve doku çürüme ürünleri ile zehirlenme.

dokunulmazlık- ağırlıklı olarak antitoksik.

Laboratuvar teşhisi yara akıntısının bakteriyoskopisini, patojenin izolasyonunu ve tanımlanmasını, spesifik antitoksik antikorlarla bir nötralizasyon reaksiyonu kullanılarak biyoanalizlerde toksinin tespitini ve tanımlanmasını içerir.

Önleme ve tedavi. Gazlı gangrenin önlenmesi, yaraların zamanında ve doğru cerrahi tedavisine dayanır. Şiddetli yaralarda, ana klostridyum türlerine karşı, tıbbi amaçlar için her biri 10 bin IU - her biri 50 bin IU olan antitoksik serumlar uygulanır.

Clostridia tetanoz. Taksonomi. Özellikleri, toksinlerin özellikleri. Hastalığın patogenezi. Azalan tetanoz. Klinik. Laboratuvar teşhis ilkeleri ve yöntemleri. Bakteriyolojik araştırmanın amacı, spesifik önleme ve tedavi için hazırlıklar.

Tetanoz lezyonlarla karakterize akut bir yara enfeksiyonudur. nörotoksin kendini çizgili kasların spazmları şeklinde gösteren omurilik ve beynin motor hücreleri. İnsanlar ve çiftlik hayvanları hastalanır. Özellikle insan ve hayvan dışkısı ile kirlenmiş toprak, sürekli bir tetanoz enfeksiyonu kaynağıdır.

Patojen - C.tetani - spor oluşturan büyük bir gram pozitif basil. Sporlar uçta bulunur (bir tür baget), flagella - peritriköz nedeniyle hareketlidir. Zorunlu anaerobik. Sporlar çok dirençlidir.

antijenik özellikler. Etken ajan O- ve H- antijenlerine sahiptir.

patojenite faktörleri. Ana faktör en güçlü ekzotoksindir. İki ana fraksiyonu ayırt edilir - tetanospazmin (nörotoksin) ve tetanolisin (hemolizin). Merkezi sinir sistemindeki nörotoksin, miyonöral sinaps bölgesine nüfuz eder, sinaps bölgesinde nörondan nörona bulaşır, omurilik ve beynin motor bölgelerinde birikir, sinaptik iletimi engeller. Ölüm, solunum merkezinin felci, asfiksi (larenks, diyafram, interkostal kasların hasar görmesi) veya kalp felci nedeniyle meydana gelir.

Laboratuvar teşhisi. Mikrobiyolojik teşhis, hammaddelerin bakteriyoskopisini, patojenin izolasyonu ve tanımlanması için kültürü, tetanoz toksininin saptanmasını içerir.

Patojenin izolasyonu, çeşitli yoğun ve sıvı (Kitt-Tarozzi ortamı) ortamlar kullanılarak anaeroblar için standart şemaya göre gerçekleştirilir, tanımlama morfolojik, kültürel, biyokimyasal ve toksijenik özelliklere dayanır.

Mikrobiyolojik teşhisin en basit ve en etkili yöntemi, beyaz fareler üzerinde yapılan bir biyotahlildir. Bir grup test materyali ile enfekte edilir, ikincisi (kontrol) - numuneleri antitoksik tetanoz serumu ile karıştırdıktan sonra. Tetanoz toksini varlığında deney grubu fareler ölürken kontrol grubu canlı kalır.

Tedavi ve acil önleme. Donör tetanoz immunoglobulini (antitoksin), antitoksik serum (350 IU/kg), antibiyotikler (penisilinler, sefalosporinler) kullanılır. Aşı bağışıklığı oluşturmak için, daha çok DTP aşısının bir parçası olarak (tetanoz toksoidleri, difteri ve öldürülmüş boğmaca) tetanoz toksoidi kullanılır.

Clostridia botulinum. Taksonomi. Özellikler. Toksinlerin özellikleri, diğer gıda kaynaklı enfeksiyonların patojenlerinin ekzotoksinlerinden farkı. Laboratuvar teşhis ilkeleri ve yöntemleri. Spesifik önleme ve tedavi için ilaçlar.

Botulizm, C.botulinum ile kontamine olmuş ürünlerin kullanımıyla ilişkili ciddi bir gıda zehirlenmesidir ve merkezi sinir sisteminin spesifik bir lezyonu ile karakterizedir. Adını lat'tan almıştır. botulus - sosis.

Uyarıcı özellikleri. Büyük polimorfik gram-pozitif çubuklar, hareketli, peritrik kamçıya sahiptir. Sporlar ovaldir, terminalin altındadır (tenis raketi). Antijenik özgüllükte farklılık gösteren sekiz tip toksin oluşur ve buna göre 8 tip patojen izole edilir. En önemli özellikler arasında proteolitik özelliklerin (kazein hidrolizi, hidrojen sülfür üretimi) bulunup bulunmadığı yer alır.

Toksin nörotoksik etkiye sahiptir. Toksin vücuda gıda ile girer, ancak muhtemelen patojen vücudun dokularında çoğaldığında birikebilir. Toksin termolabildir, ancak tam inaktivasyon için 20 dakikaya kadar kaynatmak gerekir. Toksin, gastrointestinal sistemde hızla emilir, kana nüfuz eder, medulla oblongata'nın çekirdekleri ve omuriliğin ganglion hücreleri üzerinde seçici olarak etki eder. Nöroparalitik fenomenler gelişir - yutma bozuklukları, afoni, disfaji, oftalmo-plejik sendrom (şaşılık, çift görme, göz kapağı sarkması), faringeal ve laringeal kasların felci ve parezi, solunum ve kalp durması.

Laboratuvar teşhisi.İlkeler clostridia için ortaktır.

Tedavi ve önleme. Temel, antitoksik serumların (polivalan veya tip belirlendiğinde homolog) erken kullanımıdır. Önleme, gıda ürünlerinin işlenmesinde sıhhi ve hijyenik rejime dayanır. Anaerobik koşullarda saklanan ev yapımı konserve mantarlar ve diğer ürünler özellikle tehlikelidir.

11. Pseudomonas aeruginosa. Taksonomi. Özellikler. Hastalıklara neden oldu.
Nozokomiyal enfeksiyonlardaki rolü. Laboratuvar teşhis ilkeleri ve yöntemleri.

Pseudomonas cinsi P. aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa), tıbbi hastanelerde lokal ve sistemik pürülan enflamatuar süreçlerin ana nedensel ajanlarından biridir.

Patojen her yerde bulunur (su, toprak, bitkiler, hayvanlar), normalde insanlarda bulunur (çoğunlukla bağırsaklarda, ciltte ve mukoza zarlarında). Morfoloji- Gram-negatif düz veya hafif kavisli çubuk, hareketli, yaymalarda tek, çift veya kısa zincirler halinde bulunur. Mukus (kapsüler madde), özellikle daha öldürücü mukoid suşları sentezler.

kültürel özellikler. Bir aerobdur ve solunum tipine karşılık gelen bir dizi enzime sahiptir (sitokromlar, sitokrom oksidaz, dehidrazlar).Sıvı ortamlarda grimsi gümüş bir film oluşturur.Yoğun ortamlarda, yanardöner lizis olgusu sıklıkla gözlenir. pigment sentezi nedeniyle günün sonu piyosiyanin kültürün mavi-yeşil rengi belirir.

biyokimyasal özellikler. Pseudomonas aeruginosa, düşük sakkarolitik aktivite (sadece glikozu oksitler), yüksek proteolitik aktivite ve kanlı agarda bir beta-hemoliz bölgesi oluşumu ile karakterize edilir. Ekinlere hoş bir yasemin kokusu veren trimetilamini sentezler. Bakteriyosin üretimini sağlar - piyosinler.

Antijenik ve patojenik özellikler. Pseudomonas aeruginosa'nın ana antijenleri, gruba özgü somatik O-antijeni ve tipe özgü flagellar H-antijenidir. O-antijenik kompleks - hücre duvarının proteinleri ve lipitleri ile bir LPS toplamı, endotoksin özelliklerine sahiptir, patojenitenin ana faktörlerinden biridir. Pseudomonas aeruginosa'nın çok sayıda patojenite faktörü vardır - endotoksin (LPS, diğer gram negatif bakterilere benzer), bir dizi ekzotoksin - sitotoksin, ekzoenzim S, hemolizinler, ekzotoksin A (en önemlisi, difteri ekzotoksine benzer), enzimler (kollajenaz) , nöraminidaz, proteazlar).

Laboratuvar teşhisi. P.aeruginisa adını, ayrılabilir yaraların ve pansumanların mavimsi - yeşil lekelenmesinden almıştır. Ana teşhis yöntemi bakteriyolojiktir. Önemli olan piyosiyanin pigmentinin tespitidir. Tedavi ve spesifik önleme. Spesifik bir önleme yoktur. Pseudomonas aeruginosa'nın neden olduğu gıda zehirlenmesi ve bağırsak disbakteriyozunda, psödomonas fajını içeren karmaşık bir bağırsak bakteriyofajı etkilidir. Antibakteriyel ilaçlardan aminoglikozitler, sefalosporinler ve kinolonlar daha sık kullanılır.

Koşullu olarak patojenik gram-negatif bakteriler - cerahatli iltihaplanma süreçlerine neden olan maddeler (Proteus, Klebsiella, mucizevi çubuk, vb.), taksonomi. Enterobakterilerin genel özellikleri. Laboratuvar teşhis ilkeleri ve yöntemleri.

Cins Klebsiella.

Klebsiella cinsi Enterobacteriaceae familyasına aittir. Cinsin temsilcilerinin bir özelliği, bir kapsül oluşturma yeteneğidir. Ana tür K. Pneumoniae'dir. Fırsatçı lezyonlara neden olur - nozokomiyal pnömoni, idrar yolu enfeksiyonları, yenidoğanlarda ishal. Hayvanlarda mastitis, septisemi ve pnömoniye neden olan Klebsiella, insan ve hayvanların deri ve mukoz membranlarında sürekli olarak bulunur. Klebsiella - çeşitli boyutlarda düz, hareketsiz çubuklar. fakültatif anaeroblar. Oksidaz - negatif, katalaz - pozitif.

patojenite faktörleri. Bunlar bir polisakarit kapsülü (K-antijeni), endotoksin, fimbrialar, siderofor sistemi (demir iyonlarını bağlar ve dokulardaki içeriklerini azaltır), ısıya duyarlı ve ısıya dayanıklı ekzotoksinleri içerir.

Klinik bulgular. K.pneumoniae (subsp. pneumoniae), hastane bronşiti ve bronkopnömoni, lober pnömoni, idrar yolu enfeksiyonları, meninksler, eklemler, omurga, gözler lezyonlarının yanı sıra bakteriyemi ve septikopiemi ile karakterizedir. Ozaenae alt türü, özel bir kronik atrofik rinit formuna neden olur - göl.

Laboratuvar teşhisi. Ana yöntem bakteriyolojiktir. Tedavi. Klebsiella'nın özelliklerinden biri, çoklu ilaç direnci ve vücut direncinde bir azalmanın arka planına karşı lezyonların gelişmesidir. Antibiyotikler, genellikle bağışıklık sistemini uyaran ilaçlarla kombinasyon halinde, Klebsiellesis'in genelleştirilmiş ve halsiz kronik formları için kullanılır.

Cins Proteus.

Proteus cinsi Enterobacteriaceae ailesine aittir. Cins, görünüşünü değiştirebilen Poseidon Proteus'un oğlunun onuruna seçildi. Cinsin temsilcileri, yoğun besin ortamındaki büyümenin dış belirtilerini değiştirebilir ve ayrıca diğer Enterobacteria'lara kıyasla en büyük pleomorfizm (morfoloji değişkenliği) ile ayırt edilir.

Proteinler tirozini parçalar, nitratları geri kazandırır, oksidaz negatiftir, katalaz pozitiftir. Birçok omurgalı ve omurgasız hayvan türünün bağırsaklarında, toprakta, kanalizasyonda ve çürüyen organik artıklarda yaşarlar. İnsanlarda idrar yolu enfeksiyonlarına, yanık hastalarında ve ameliyat sonrası septik lezyonlara neden olabilir. Oldukça sık olarak gıda zehirlenmesine de neden olurlar. P.vulgaris ve P.mirabilis patolojide en yaygın role sahiptir.

kültürel özellikler. Protealar, geniş bir sıcaklık aralığında basit ortamlarda büyür. Optimum pH 7.2-7.4, sıcaklık +35 ila 37 santigrat derecedir. O-formundaki proteus kolonileri yuvarlak, yarı şeffaf ve dışbükeydir, H-formları sürekli büyüme sağlar. Proteaların büyümesine kokuşmuş bir koku eşlik eder. Sürü fenomeni karakteristiktir, H-formları MPA'da mavimsi-dumanlı, narin bir örtü şeklinde karakteristik bir sürünen büyüme sağlar. Taze kesilmiş MPA'nın yoğuşma neminde Shushkevich yöntemine göre ekim yapılırken, kültür yavaş yavaş agar yüzeyinde bir örtü şeklinde yükselir. Altta kalın beyaz bir tortu bulunan ortamın dağınık bulanıklığı BCH'de belirtilmiştir.

patojenite faktörleri. Bunlara hücre duvarının LPS'si, "sürü" yeteneği, fimbria, proteazlar ve üreaz, hemolizinler ve hemaglutininler dahildir.

Laboratuvar teşhisi. Ana yöntem bakteriyolojiktir. Shushkevich yöntemine göre ayırıcı tanı ortamı (Ploskirev), zenginleştirme ortamı ve MPA kullanılır. Tedavi. Protealarla (kolit) ilişkili bağırsak disbakteriyozu durumunda, proteus fajını ve onu içeren müstahzarları (intestifag, coliproteus bakteriyofajı) kullanmak mümkündür.

"Harika sopa" (Serratia marcescens), pigment mikroorganizmalarından bakteri türü. Gram negatif hareketli (peritriköz) spor içermeyen çubuklar. Değişim türüne göre - fakültatif anaerob. Agarın yüzeyinde metalik parlaklığa sahip pürüzsüz veya tanecikli koyu ve parlak kırmızı koloniler oluşturur. Toprakta, suda, yiyeceklerde yaşar. Ekmekte (yüksek nemde), sütte gelişerek onları kırmızıya boyar; bu tür ürünlerin satışına izin verilmez. Hayvanlar ve insanlar için koşullu olarak patojenik; süpürasyona neden olabilir.

13. Escherichia. Taksonomi. Escherichia coli'nin neden olduğu hastalıklar. Diyarejenik Escherichia'nın patojenik varyantları. Antijenik yapı, sınıflandırma. Mikrobiyolojik teşhisin özellikleri. Diyarejenik Escherichia'nın koşullu patojenik olandan farklılaşması.

Escherichia, belirli koşullar altında hem bağırsak (ishal) hem de bağırsak dışı (bakteriyemi, idrar yolu enfeksiyonları vb.) Lokalizasyon olmak üzere geniş bir insan hastalığına neden olabilen en yaygın aerobik bağırsak bakterileridir. Ana tür - E. coli (E. coli) - enterobakterilerin neden olduğu bulaşıcı hastalıkların en yaygın etken maddesidir. Bu patojen, özellikle su olmak üzere dışkı kontaminasyonunun bir göstergesidir.

kültürel özellikler. E. coli sıvı besiyerinde dağınık bulanıklık verir, yoğun besiyerinde S- ve R-form koloniler oluşturur. Escherichia için Endo besiyerinde, laktozu fermente eden Escherichia coli, metalik parlaklığa sahip yoğun kırmızı koloniler, fermantasyon yapmayan - daha koyu bir merkeze sahip soluk pembe veya renksiz koloniler, Ploskirev besiyerinde - sarımsı tonlu kırmızı, Levin besiyerinde - koyu metalik bir parlaklık ile mavi.

biyokimyasal özellikler. Escherichia coli çoğu durumda karbonhidratları (glikoz, laktoz, mannitol, arabinoz, galaktoz vb.) asit ve gaz oluşumu ile fermente eder, indol oluşturur, ancak hidrojen sülfür oluşturmaz ve jelatini sıvılaştırmaz.

Diyare E.coli'nin ana patojenite faktörleri.

1. Pilus, fimbrial yapılar, dış zar proteinleri ile ilişkili adezyon, kolonizasyon ve invazyon faktörleri. Plazmid genleri tarafından kodlanırlar ve alt ince bağırsağın kolonizasyonunu desteklerler.

2. Ekzotoksinler: sitotoninler (bağırsak hücreleri tarafından sıvının aşırı salgılanmasını uyarır, su-tuz metabolizmasını bozar ve ishalin gelişmesine katkıda bulunur) ve enterositotoksinler (bağırsak duvarı ve kılcal damar endoteli hücrelerine etki eder).

3. Endotoksin (lipopolisakarit).

Çeşitli patojenite faktörlerinin varlığına bağlı olarak, diyarejenik Escherichia coli beş ana tipe ayrılır: enterotoksijenik, enteroinvazif, enteropatojenik, enterohemorajik, enteroadhesif.

4. Patojenik E. coli, bakteriyosinlerin (kolisinler) üretimi ile karakterize edilir.

Enterotoksijenik E. coli koleraya benzer, yüksek moleküler ağırlıklı ısıya dayanıklı bir toksine sahiptir ve kolera benzeri ishale (küçük çocuklarda gastroenterit, gezgin ishali, vb.) neden olur.

Enteroinvaziv Escherichia coli bağırsak epitelinin hücrelerine nüfuz edebilir ve çoğalabilir. Dışkıda kan ve çok sayıda lökosit (invazif bir sürecin göstergesi) karışımı ile bol ishale neden olurlar. Klinik olarak dizanteriye benzer. Suşların Shigella ile bazı benzerlikleri vardır (hareketli değildir, laktozu fermente etmez, enteroinvaziv özellikleri yüksektir).

Enteropatojenik E.coli- çocuklarda ishalin ana etkenleri. Lezyonların merkezinde, bakterilerin mikrovilluslara zarar vererek bağırsak epiteline yapışması vardır. Sulu ishal ve şiddetli dehidratasyon ile karakterizedir.

Enterohemorajik Escherichia coli kanla karışık ishale (hemorajik kolit), hemolitik-üremik sendroma (böbrek yetmezliği ile birlikte hemolitik anemi) neden olur. Enterohemorajik Escherichia coli'nin en yaygın serotipi O157:H7'dir.

Enteroadhesive E.coli sitotoksin oluşturmaz, yeterince çalışılmamıştır.

Laboratuvar teşhisi. Ana yaklaşım, saf bir kültürün diferansiyel tanı besiyerinde izolasyonu ve antijenik özelliklerle tanımlanmasıdır. RA'yı bir dizi polivalan OK (O- ve K-antijenlerine) serumla koydular.

Patojenik streptokoklar arasında S.pneumoniae (pneumococcus) özel bir yer tutar. İnsan bulaşıcı patolojisinde çok önemli bir rol oynar. Bu tür, lober pnömoninin ana nedensel ajanlarından biridir. Tam olmaktan uzak verilere göre, dünyada her yıl özellikle çocuklarda ve yaşlılarda pnömokokların neden olduğu 500.000'den fazla pnömoni vakası görülmektedir. Akciğer iltihabına ek olarak, bu mikrop menenjit, endokardit, peritonit, orta kulak iltihabı, rinit, sinüzit, sepsis, sürünen kornea ülseri ve bir dizi başka hastalığa neden olur. Laboratuvar teşhisi için bakteriyoskopik, bakteriyolojik ve biyolojik yöntemler kullanılır. Balgam, irin, kan, beyin omurilik sıvısı, orofarinks ve nazofarenks mukusu, maksiller sinüsten akıntı, gözler ve kulakların incelenmesi için materyal. Pnömokoklar otolize duyarlı olduklarından materyali hemen laboratuvara göndermek ve çok hızlı bir şekilde analiz etmek önemlidir.

Bakteriyoskopik inceleme

Materyalin (kan hariç) bakteriyoskopik muayenesi, iki smear üretimine indirgenir. Bunlardan biri Gram ile boyandı, ikincisi - Burri-Gins tarafından, bu da kapsülü tanımlamayı mümkün kılıyor. Pnömokoklar, ortak bir kapsülle çevrili mızrak şeklinde diplokoklar şeklinde bulunur. Görüş alanında 10 veya daha fazla tipik diplokok saptanırsa, S.pneumoniae olma olasılığı yüksektir. Bununla birlikte, birincil mikroskopi, kesin bir teşhis koyma hakkını vermez, çünkü smearlar, normal mikrofloranın temsilcileri olan kapsüler patojenik olmayan diplokoklar içerebilir. Bu nedenle, klinik materyalin ekilmesi ve saf bir kültürün izole edilmesi gereklidir.

Bakteriyolojik araştırma

Sepsis durumunda hasta başucunda 100 ml serum veya şeker suyu içeren flakon içine 10 ml kan inoküle edilir, 37°C'de 18-20 saat inkübe edilir, ardından kanlı agara ekilir, saf kültür izole edilir ve belirlendi. Menenjitte beyin omurilik sıvısı santrifüjlenir ve tortu kanlı agarda kültürlenir. Üzerinde pnömokoklar yeşil bir bölge ile çevrili küçük yuvarlak koloniler şeklinde büyür, koloninin merkezinde karakteristik bir çöküntü görülür. Saprofitik mikrofloranın varlığı S.pneumoniae'nin büyümesini engellediğinden, besleyici ortam üzerine balgam veya irin ekilmesi tavsiye edilmez. Test materyalini beyaz farelerin karın boşluğuna sokmak daha iyidir. Bioassay, saf bir pnömokok kültürünü izole etmek için hızlı, güvenilir ve doğru bir yöntemdir. Beyaz fareler bu bakterilere karşı çok hassastır ve enfeksiyondan sonraki 10-12 saat içinde pnömokoklar kana ve parankimal organlara girerek sepsise neden olur. Hayvanların otopsisi sırasında kalpten veya iç organ parçalarından alınan kan kültürü, saf bir patojen kültürü izole etmenizi sağlar. Pnömokokları tanımlamak için özellikleri kullanılır. Diğer streptokok türlerinin aksine, S.pneumoniae optokin içeren bir besiyerinde gelişmez, inülin fermente edilir ve safranın etkisine karşı çok hassastır (deoksikolat testi). 1 ml et suyu kültürüne 0,5 ml safra eklenirse, safra etkisi altında pnömokokların hızlı parçalanması tespit edilebilir. Termostatta 15-20 dakika kaldıktan sonra bakteri hücrelerinin tamamen parçalanması gerçekleşir. Pnömokok serovarlarını belirlemek için (şu anda 85 tane var), cam üzerinde tipik serumlarla aglütinasyon reaksiyonu veya "kapsül şişmesi" olgusu kullanılır. Homolog serum varlığında, pnömokok kapsülü güçlü bir şekilde şişer. Daha da iyisi, serotipleme, ticari lateks aglütinasyon veya kapsüler antijenler gösteren pıhtılaşma reaktifleri ile yapılır. Streptokoklar arasında Enterococcus cinsi de önemlidir ve en önemli türleri E.faecalis, E.faecium ve E.durans'tır. Doğada oldukça yaygındırlar. Ana ekolojik nişleri insan ve hayvanların bağırsaklarıdır, ancak perine, genitoüriner organlar, orofarinks ve nazofarenks derisinin normal mikroflorasında da bulunurlar. Yaraların süpürasyonuna, bakteriyemiye, özellikle uzun süredir çalışan kateterleri olan hastalarda ürogenital sistemde hasara, gıda zehirlenmesine, bağırsak disbakteriyozuna, daha az sıklıkla endokardite neden olabilirler. Test materyalinden alınan yaymalarda enterokoklar çiftler halinde, kısa zincirler halinde veya gram pozitif kümeler halinde düzenlenir. Enterokokal enfeksiyonların bakteriyolojik teşhisi, bu bakteriler basit besiyerlerinde iyi üredikleri için herhangi bir zorluk olmadan gerçekleştirilir. Agar dif-3 onlar için seçicidir (600 ml'ye kadar %3 MPA, 400 ml %40'lık safra ekleyin). 24 saat inkübasyondan sonra üreyen koloniler 0.4-1.0 mm büyüklüğünde grimsi bir renge sahip olur. Kanlı agarda kolonilerin çevresinde eksik veya tam hemoliz oluşur. Canlı streptokoklardan farklı olarak, enterokoklar %6,5 NaCl içeren MPA'da üreyebilir ve metilen mavisi ile 37°C'de 4-6 saat sonra süte indirgenebilir. İzole kültürlerin kimliklendirilmesi morfolojik, kültürel ve biyokimyasal özelliklerine göre yapılır.

Sayfa 40 / 91

Lober pnömoninin (pnömoni) etken maddesi, ilk olarak Pasteur tarafından kuduzdan ölen bir adamın tükürüğünde keşfedilen pnömokok - Diplococcus pneumoniae'dir (1881).
Morfoloji ve tentür özellikleri. Pnömokoklar (ek parçadaki Şekil 67 ve 68), neşter gibi uzun bir şekle sahip olan eşleştirilmiş koklardır. Bu nedenle, aksi halde mızrak şeklinde diplokoklar olarak adlandırılırlar. Kısa zincirler oluşturan pnömokoklar, streptokoklara benzer hale gelir ve bu nedenle II. F. Gamaleya onlara Streptococcus lanceolatus adını verdi. Hücre boyutu 0.5X0.75 ila 1X1.5 mikron arasında değişmektedir. Sporları veya flagellaları yoktur. Pnömokokun ayırt edici bir özelliği, patolojik materyallerde (balgam, kan vb.) İyi ifade edilen bir kapsül oluşumudur. Besleyici ortamlarda yetiştirildiğinde, kapsül kaybolur. Pnömokoklar anilin boyalarını kolaylıkla algılar ve Gram'a göre pozitif boyar.
Kültürel ve biyokimyasal özellikler.

Pirinç. 68. Balgam yaymasında pnömokoklar.

Pnömokoklar aeroblar ve fakültatif anaeroblardır. Optimum sıcaklık yaklaşık 37°'dir. Hayvansal protein (kan veya serum agar, ascitagar) içeren ortamlarda büyütün.
Agar yüzeyinde 24 saat sonra streptokoka benzeyen ancak daha küçük ve daha şeffaf küçük koloniler oluşur.
Eğik agarda, bol aşılama ile, et suyunda en küçük, birleşmeyen kolonilerden oluşan çok hassas şeffaf bir kaplama elde edilir - hafif bir bulanıklık ve küçük bir pul pul çökelti.
Yeni izole edilmiş suşlar jelatin üzerinde gelişmez. Pnömokokların eski laboratuvar suşları, daha 18-22°C'de küçük beyazımsı koloniler üretebilir. Jelatin sıvılaştırılmamıştır.
Sütte iyi büyürler, asit oluşumu ile keserler.
Kanlı agarda, kolonilerin çevresinde besiyerinde yeşilimsi kahverengi lekelenme ile tamamlanmamış bir hemoliz bölgesi oluşur.

Pirinç. 67. Et suyundan saf kültürde pnömokoklar.

Pnömokok sakaroz, rafinoz ve laktozu ayrıştırır. En önemli özelliği inülinin parçalanmasıdır. Çoğu streptokok bu özelliğe sahip değildir. Virülent pnömokoklar safrada çözünür.
Pnömokokların antijenik yapısı ve serolojik tipleri. Pnömokokların sitoplazması, tüm pnömokoklarda ortak olan bir protein antijeni içerir. Bu antijen onların tür özgüllüğünü belirler. Kapsül, farklı pnömokoklarda (tipik antijenler) kimyasal bileşimlerinde farklılık gösteren spesifik polisakarit antijenleri (hapten) içerir. Bu tipik antijenlere dayanarak, tüm pnömokoklar, aglütinasyon ve çökeltme reaksiyonu kullanılarak üç ana gruba (I, II, III) ve dördüncü bir kombine gruba (X-grubu) ayrılır. X grubu 70'den fazla tip içerir.
rezistans. Yapay besleyici ortamlarda, pnömokoklar hızla ölür (4-7 gün). Protein içeren sıvı ve yarı sıvı ortamlarda bir vazelin yağı tabakası altında 3-12 ay canlı kalırlar.
Pnömokoklar kurumayı iyi tolere eder: dağınık ışıkta kuru balgamda 2 aya kadar devam ederler. 52-55 ° C'ye ısıtıldığında, 10 dakikada, 60 ° C'de ölürler - daha da hızlı. Bir karbolik asit (% 3) çözeltisinde, pnömokoklar 1-2 dakika içinde ölür.
Pnömokoklar özellikle optokine duyarlıdır. İkincisinin etkisi altında, 1: 1.000.000 konsantrasyonda ölürler.
Hayvanlar için toksin oluşumu ve patojenite. Pnömokokal zehir bir endotoksindir. Laboratuvar hayvanlarından beyaz fareler ve tavşanlar pnömokoklara karşı daha duyarlıdır. Virülan pnömokokların 24-48 saat sonra parenteral uygulanması sepsisli hayvanların ölümüne neden olur. Enjeksiyon yerinde yapılan otopside fibrinöz eksüda saptanır, dalak büyümüştür ve hiperemiktir.
İnsanlarda patogenez ve hastalıklar. Enfeksiyonun giriş kapısı genellikle farenksin mukoza zarıdır. Pnömokokların vücuda girmesi ve akciğer dokusuna nüfuz etmesi, görünüşe göre hem lenfatik ve dolaşım sistemi yoluyla hem de doğrudan bronşların dallanması yoluyla gerçekleşebilir. En yaygın hastalık, ani başlangıçlı, yüksek ateş, bazen titreme, nefes alırken yandan ağrı, baş ağrısı, bazen bilinç kaybı, deliryum, güçlü uyarılma ile karakterize krupöz pnömonidir. Gelecekte, karakteristik paslı kırmızı balgamlı bir öksürük var. Akciğerlerde, daha sık bir, daha az sıklıkla - iki veya üç lobu yakalayan bir süreç vardır.
Enfeksiyon kaynakları hasta bir kişi ve bir bakteri taşıyıcıdır. Dışarıdan enfeksiyon, hem aerojenik olarak - taşıyıcıdan damlacıklar yoluyla hem de toz enfeksiyonu yoluyla gerçekleşir. Pnömokoklar kurumuş balgamda uzun süre (yaklaşık 2 ay) kalabilir ve havaya tozla girebilir.
Sağlıklı insanları incelerken, nazofarenkste sıklıkla patojenik pnömokoklar bulunur, bu nedenle otoenfeksiyon olasılığı dışlanmaz ve hipotermi gibi vücudun direncini zayıflatan faktörler önemli bir rol oynar.
Krupöz pnömoniye ek olarak, pnömokoklar orta kulak iltihabına, meninkslere (menenjit), ayrıca burun ve sinüslerin mukoza zarına, boğaz ağrısına, sürünen kornea ülserine ve lakrimal kesenin iltihaplanmasına neden olur.
Bağışıklık. Aktarılan pnömoni bağışıklık sağlamaz. Hastalık birden fazla kez tekrarlayabilir. Bu, birçok pnömokok türünün varlığından ve geçmiş pnömoninin vücudun pnömokoklara karşı duyarlılığını artırmasından kaynaklanmaktadır.
İyileşen hastaların serumu antikorlar (aglütininler vb.) içerir.
Pnömoni krizi sırasında, kandaki antikor konsantrasyonu önemli bir titreye ulaşır ve fagositoz çarpıcı biçimde artar (I. Ya. Chistovich). Bu verilere dayanarak, pnömonide immünite, antikorların (bakteriyotropinler) önemli rol oynadığı, öncelikle fagositik olarak düşünülmelidir.
Mikrobiyolojik teşhis. Pnömokokal hastalıklarda araştırma materyalleri balgam, çeşitli lezyonlardan alınan kan ve irin, daha az sıklıkla beyin omurilik sıvısıdır.
Patolojik materyal (kan hariç) bakteriyoskopik olarak, bakteriyolojik olarak ve beyaz fareleri enfekte ederek incelenir. Kaynak materyal, özellikle balgam, genellikle bol miktarda yabancı mikroflora içerdiğinden, ikinci yönteme başvurulmalıdır; bu, materyal doğrudan besin ortamına ekildiğinde pnömokokun izole edilmesini zorlaştırır.
Balgam, irin vb. Smearlar Gram boyanır. Mikroskop altında, pozitif bir kapsülle çevrelenmiş Gram boyalı mızrak şeklinde diplokoklar bulunur.
Kültürler kanlı agar veya ascig agarda izole edilir. 37°'de 24-48 saat üremeden sonra, pnömokok varsa karakteristik koloniler ortaya çıkar. Koloniler, slant serum veya asit agar üzerine plakalanır ve izole edilen kültür, safrada çözünürlük ve inülini parçalama yeteneği açısından kontrol edilir.
Beyaz bir farenin enfeksiyonu, bir pnömokok kültürünü izole etmenin en kesin yoludur. Bir hastadan veya bir cesetten alınan materyal (balgam, irin, organ parçası vb.) steril bir bardağa konur, ardından steril bir havanda 1-2 ml steril et suyu ve 0,5 ml bu süspansiyonla öğütülür. beyaz bir fareye intraperitoneal olarak enjekte edildi. 12-48 saat içinde meydana gelen farenin ölümünden sonra kalpten kan kültürleri alınır ve hemen hemen tüm vakalarda saf bir pnömokok kültürü elde edilir.
Sepsis şüphesi varsa asitli sıvı veya serum sıvısına 10-20 ml kan inoküle edilir. Brothdan zenginleştirme yapıldıktan sonra kanlı agara aşılamalar yapılır ve izole edilen saf kültür morfolojik ve biyokimyasal özellikleri ile tanımlanır.
spesifik tedavi ve kemoterapi. Günümüzde lober pnömoni tedavisinde sülfanilamid preparatları ve antibiyotikler (penisilin, biomisin, tetrasiklin vb.) büyük başarı ile kullanılmaktadır.

Streptococcus cinsi şunları içerir: Streptococcus pyogenes (hemolitik) ve Streptococcus pneumoniae (pnömokok). Streptokoklar ilk olarak Billroth (1874), L. Pasteur (1879) tarafından keşfedilmiştir. E. Rosenbach (1884) tarafından incelenmiştir.

Streptococcus pyogenes (hemolitik)

Morfoloji. Streptokoklar, küresel bir şekle sahip olan koklardır. Her kokkusun çapı ortalama 0,6-1 μm'dir, ancak polimorfizm ile karakterize edilirler: küçük ve büyük koklar vardır, kesinlikle küresel ve ovaldir. Streptokoklar, aynı düzlemde bölünmelerinin bir sonucu olarak bir zincir halinde düzenlenmiştir. Zincir uzunlukları değişkendir. Yoğun bir besin ortamında, zincirler genellikle kısadır, sıvı olanlarda ise uzundur. Streptokoklar hareketsizdir, sporları yoktur (bkz. Şekil 4) Taze izole edilmiş kültürler bazen bir kapsül oluşturur. Ultra ince kesitlerde bir mikrokapsül görünür, altında üç katmanlı bir hücre duvarı ve üç katmanlı bir sitoplazmik zar vardır. Gram pozitif.

yetiştirme. Streptokoklar fakültatif anaeroblardır. 37 ° C sıcaklıkta ve pH 7.6-7.8'de büyütün. Yetiştirmeleri için en uygun ortam, kan veya kan serumu içeren ortamdır. Yoğun besleyici ortamlarda, streptokok kolonileri küçük, düz, bulutlu, grimsi renklidir. Kanlı agarda bazı streptokok çeşitleri hemoliz oluşturur. β-hemolitik streptokoklar açık bir hemoliz bölgesi oluşturur, a-hemolitik streptokoklar küçük yeşilimsi bir bölge oluşturur (hemoglobinin methemoglobine geçişinin sonucu). Hemoliz vermeyen streptokoklar vardır.

Et suyu şeffaf kalırken, şeker suyunda streptokoklar paryetal ve dibe yakın ince taneli tortu oluşumu ile büyür.

enzimatik özellikler. Streptokoklar sakkarolitik özelliklere sahiptir. Asit oluşturmak için glikoz, laktoz, sakaroz, manitol (her zaman değil) ve maltozu parçalarlar. Proteolitik özellikleri zayıf bir şekilde ifade edilir. Sütü pıhtılaştırırlar, jelatin sıvılaştırmaz.

toksin oluşumu. Streptokoklar bir dizi ekzotoksin oluşturur: 1) streptolizinler - kırmızı kan hücrelerini yok eder (O-streptolisin kardiyotoksik etkiye sahiptir); 2) lökosidin - lökositleri yok eder (yüksek derecede öldürücü suşlardan oluşur); 3) eritrojenik (kızıl) toksin - kızıl hastalığının klinik tablosuna neden olur - zehirlenme, vasküler reaksiyonlar, döküntü vb. Eritrojenik toksinin sentezi profaj tarafından belirlenir; 4) sitotoksinler - glomerülonefrite neden olma yeteneğine sahiptir.

Streptokokların çeşitli antijenleri vardır. Hücrenin sitoplazması, tüm streptokoklar için aynı olan, spesifik bir nükleoprotein yapısına sahip bir antijen içerir. Protein tipi antijenler, hücre duvarının yüzeyinde bulunur. Streptokokların hücre duvarında bir polisakkarit grubu antijeni bulundu.

Polisakkarit grubuna özgü antijen fraksiyonunun bileşimine göre, tüm streptokoklar, S'ye kadar büyük Latin harfleri A, B, C, D vb. İle gösterilen gruplara ayrılır. Gruplara ek olarak, streptokoklar serolojik tiplere ayrılır. , Arap rakamlarıyla gösterilir.

Grup A 70 tip içerir. Bu grup, insanlarda çeşitli hastalıklara neden olan streptokokların çoğunu içerir. Grup B, esas olarak fırsatçı insan streptokoklarını içerir. Grup C, insanlar ve hayvanlar için patojenik streptokokları içerir. Grup D, insanlar için patojenik olmayan streptokoklardan oluşur, ancak bu grup, insan ve hayvanların bağırsaklarında yaşayan enterokokları içerir. Diğer organlara girerek, iltihaplanma süreçlerine neden olurlar: kolesistit, piyelit vb. Böylece, şartlı olarak patojenik mikroplara atfedilebilirler.

İzole edilen kültürlerin serolojik gruplardan birine ait olup olmadığı, grup serumları ile bir çökeltme reaksiyonu kullanılarak belirlenir. Serolojik tipleri belirlemek için, tipe özgü serumlarla bir aglütinasyon reaksiyonu kullanılır.

Streptokoklar çevrede oldukça kararlıdır. 60 ° C sıcaklıkta 30 dakika sonra ölürler.

Kurumuş irin ve balgamda aylarca kalırlar. Dezenfektanların olağan konsantrasyonları onları 15-20 dakikada yok eder. Enterokoklar çok daha dirençlidir, dezenfektan solüsyonları onları ancak 50-60 dakika sonra öldürür.

Hayvan duyarlılığı. Sığır, at, köpek ve kuşlar patojenik streptokoklara duyarlıdır. Laboratuvar hayvanlarından tavşanlar ve beyaz fareler hassastır. Bununla birlikte, insanlar için patojenik olan streptokoklar, deney hayvanları için her zaman patojenik değildir.

enfeksiyon kaynakları. İnsanlar (hastalar ve taşıyıcılar), daha az sıklıkla hayvanlar veya enfekte ürünler.

İletim yolları. Havadaki ve havadaki toz, bazen gıda, ev-iletişim mümkündür.

Hastalıklar, farenks, nazofarenks ve vajinanın mukoza zarlarında yaşayan fırsatçı streptokokların aktivasyonu ile endojen olarak olduğu kadar eksojen enfeksiyonun bir sonucu olarak da ortaya çıkabilir. Vücudun direncindeki azalma (soğuma, açlık, fazla çalışma vb.) otoenfeksiyonlara yol açabilir.

Streptokok enfeksiyonlarının patogenezinde büyük önem taşıyan, daha önce aktarılan streptokok etiyolojisi hastalığının bir sonucu olarak ön duyarlılaştırmadır.

Kan dolaşımına nüfuz ederken, streptokoklar ciddi bir septik sürece neden olur.

İnsanlarda hastalıklar daha sıklıkla serolojik grup A'nın β-hemolitik streptokoklarına neden olur. Patojenite enzimleri üretirler: hiyalüronidaz, fibrinolizin (streptokinaz), deoksiribonükleaz, vb. Ek olarak, streptokoklarda antifagositik özelliklere sahip bir M-protein kapsülü bulunur.

Streptokoklar, klinik tablo ve patogenezde farklılık gösteren, hem püy oluşumuyla hem de süpüratif olmayan insanlarda çeşitli akut ve kronik enfeksiyonlara neden olur. Süpüratif - balgam, apseler, yara enfeksiyonları, süpüratif olmayan - üst solunum yollarının akut enfeksiyonları, erizipel, kızıl, romatizma vb.

Streptokoklar sıklıkla grip, kızamık, boğmaca ve diğer hastalıklarda sekonder enfeksiyonlara neden olur ve sıklıkla yara enfeksiyonlarını komplike hale getirir.

dokunulmazlık. Doğası gereği, bağışıklık antitoksik ve antibakteriyeldir. Enfeksiyon sonrası antimikrobiyal bağışıklık zayıftır. Bunun nedeni, streptokokların zayıf immünojenikliği ve çapraz bağışıklık vermeyen çok sayıda serovardır. Ek olarak, streptokok hastalıklarında, vücudun nüksetme eğilimini açıklayan bir alerjisi vardır.

önleme. Vücudun genel direncini güçlendiren sıhhi ve hijyenik önlemlere gelir. Spesifik profilaksi geliştirilmemiştir.

Tedavi. Antibiyotik uygulayın. Daha sıklıkla, streptokokların direnç kazanmadığı penisilin, ayrıca eritromisin ve tetrasiklin kullanılır.

Romatizmal kalp hastalığı etiyolojisinde streptokokların değeri. Romatizmal kalp hastalığının patogenezi tam olarak anlaşılamamıştır. Ancak bazı gerçekler, bu hastalığın gelişiminde streptokokların rolü lehine konuşur:

1. Romatizmal kalp hastalığı olan hastalarda farenksten B-hemolitik streptokok ekilir.

2. Romatizma genellikle vücudu hassaslaştıran boğaz ağrısı, bademcik iltihabı, farenjit geçirdikten sonra ortaya çıkar.

3. Antistreptolizin, antistreptohiyalüronidaz - streptokok enzimlerine karşı antikorlar, hastaların kan serumunda toksinler bulunur.

4. Streptokokun rolünün dolaylı teyidi, penisilin ile başarılı tedavidir.

Son zamanlarda, romatizmal kalp hastalığının kronik formlarının ortaya çıkmasında streptokokların L-formlarına önem verilmiştir.

Romatizmal kalp hastalığının alevlenmelerinin önlenmesi, streptokok hastalıklarının önlenmesine indirgenir (örneğin, ilkbahar ve sonbaharda, penisilin uygulamasının profilaktik bir seyri gerçekleştirilir). Tedavi, antibakteriyel ilaçların - penisilin kullanımına indirgenir.

Kızıl etiyolojisinde streptokokların değeri. G. N. Gabrichevsky (1902), hemolitik streptokokların kızıl hastalığına neden olan ajan olduğunu öne süren ilk kişiydi. Ancak diğer hastalıklarda izole edilen streptokoklar, kızıl hastalığına neden olan ajanlardan farklı olmadığı için bu görüş herkes tarafından paylaşılmadı. Artık kızıl hastalığına eritrojenik toksin üreten A grubu streptokokların neden olduğu tespit edilmiştir.

Hasta olanlarda bağışıklık ortaya çıkar - kalıcı, antitoksik. Gerilimi, eritrojenik toksinin intradermal enjeksiyonu olan Dick reaksiyonunu ayarlayarak belirlenir. Enjeksiyon bölgesi çevresinde hasta olmayanlarda, pozitif reaksiyon (kan serumunda antitoksin eksikliği) olarak karakterize edilen hiperemi ve ödem oluşur. Hasta olanlarda, içlerinde oluşan antitoksin eritrojenik toksini nötralize ettiği için böyle bir reaksiyon yoktur.

önleme. Tecrit, hastaneye yatış. Temaslı, zayıflamış çocuklara gama globülin verilir. Spesifik profilaksi geliştirilmemiştir.

Tedavi. Penisilin, tetrasiklin kullanın. Şiddetli vakalarda, antitoksik serum uygulanır.

Çalışmanın amacı: streptokok tespiti ve serovarının belirlenmesi.

Araştırma materyali

1. Boğazdan mukus (bademcik iltihabı, kızıl).

2. Derinin etkilenen bölgesinden kazıma (erizipel, streptoderma).

3. İrin (apse).

4. İdrar (nefrit).

5. Kan (sepsis şüphesi; endokardit).

Temel araştırma yöntemleri

1. Bakteriyolojik.

2. Mikroskobik.

Araştırma ilerlemesi

Araştırmanın ikinci günü

Kapları termostattan çıkarın ve kontrol edin. Şüpheli koloni varlığında bunların bir kısmından smear alınır, Gram'a göre boyanır ve mikroskobik olarak yapılır. Yaymada streptokoklar bulunursa, kalan koloninin bir kısmı, saf bir kültürü izole etmek için serumlu agarda ve test tüplerinde kanlı besi yerinde test tüplerine alt kültürlenir. Günün sonunda, Lensfield çöktürme reaksiyonundaki serolojik grubu belirlemek için et suyu veya agardan 5-6 saatlik bir kültür, %0.25 glikoz içeren Marten'in suyuna alt kültürlenir. Test tüpleri ve flakonlar termostata konularak ertesi güne bırakılır.

Araştırmanın üçüncü günü

Kültürler etüvden çıkarılır, agar slantında kültürün saflığı kontrol edilir, yaymalar yapılır, Gram boyanır ve mikroskopa alınır. Saf bir streptokok kültürü varlığında Hiss ortamı (laktoz, glikoz, maltoz, sukroz ve mannitol), süt, jelatin, %40 safra üzerine ekilir ve bir termostata konur.

Martin'in suyuna bak. Spesifik büyüme varlığında, serolojik grubu belirlemek için bir Lensfield çökeltme testi gerçekleştirilir.

Lensfield'e göre çökeltme reaksiyonunun ayarlanması. Martin's besiyerinde yetiştirilen günlük kültür birkaç santrifüj tüpüne dökülür, 10-15 dakika (3000 rpm) santrifüjlenir.

Süpernatan, dezenfektan solüsyonlu bir kavanoza dökülür ve çökelti, steril izotonik sodyum klorür solüsyonu içerisine dökülür ve tekrar santrifüjlenir. Tüm santrifüj tüplerinden toplanan çökeltiye 0,4 ml %0,2 hidroklorik asit ekleyin. Daha sonra tüp su banyosuna konur ve ara sıra çalkalanarak 15 dakika kaynatılır. Kaynattıktan sonra elde edilen süspansiyon tekrar santrifüjlenir. Daha sonra antijen, temiz bir tüpe dökülen ve %0.2 sodyum hidroksit çözeltisi ile pH 7.0-7.2'ye nötralize edilen süpernatant içine çıkarılır. Gösterge olarak bromotimol mavisi (%0.04 solüsyondan 0.01 ml) eklenir. Bu reaksiyonla renk saman sarısından maviye döner.

Daha sonra tavşanlara aşılanarak hazırlanan 0,5 ml antistreptokokal grup serum 5 adet presipitasyon tüpüne dökülür (bkz. Bölüm 19). Serum A 1. tüpe, serum B 2. tüpe, serum C 3. tüpe, serum D 4. tüpe, izotonik sodyum klorür solüsyonu (kontrol) 5. tüpe verilir. Bundan sonra, bir Pasteur pipeti ile elde edilen ekstrakt (antijen) dikkatlice duvar boyunca tüm test tüplerine yerleştirilir.

Homolog serumlu bir test tüpünde pozitif reaksiyon ile, ekstraktın serumla sınırında ince süt beyazı bir halka oluşur (Şekil 38).

Araştırmanın dördüncü günü

Sonuçlar kaydedilir (Tablo 25).

Şu anda, deoksiribonükleaz ve ayrıca antistreptohiyalüronidaz, antistreptolizin-O belirlenmektedir.

Kontrol soruları

1. Streptokok tespiti için ana laboratuvar araştırma yöntemleri nelerdir biliyor musunuz?

2. Lensfield çökelme reaksiyonu ne için?

3. Bu reaksiyon sırasında antijen neden şeffaf olmalıdır? Bu reaksiyonun evreleme tekniğini tanımlayın.

Öğretmenden antistreptokokal serum A, B, C, D ve izotonik sodyum klorür solüsyonu alın. Yağış reaksiyonunu ayarlayın, sonuçları öğretmene gösterin ve çizin.

Besin ortamı

kanlı agar(bkz. bölüm 7).

serum agarı(bkz. bölüm 7).

tıs medya(kuru).

Et pepton jelatini (MPG). 100 ml MPB'ye 10-15 gr ince kıyılmış jelatin ekleyin. Jelatin, bir su banyosunda (40-50 ° C sıcaklıkta) yavaşça ısıtıldığında şişmelidir. Erimiş jelatine %10 sodyum karbonat (kabartma tozu) çözeltisi eklenir ve pH 7.0'a ayarlanır. Daha sonra hemen kıvrımlı bir filtreden süzülür. Filtreleme yavaştır. İşlemi hızlandırmak için sıcak otoklavda filtrasyon yapılabilir. Filtrelenen ortam 6-8 ml'lik test tüplerine dökülür ve sterilize edilir. Sterilizasyon, arka arkaya 3 gün boyunca 100 ° C sıcaklıkta fraksiyonel olarak veya bir otoklavda aynı anda 110 ° C'de 20 dakika süreyle gerçekleştirilir. Ortamın soğutulması dikey olarak yerleştirilmiş test tüplerinde gerçekleştirilir.

Süt hazırlama. Taze süt kaynatılır, bir gün serin bir yere konur, kremadan arındırılır, tekrar kaynatılır. Bir gün bekletin ve üst katmanı çıkarın. Yağı alınmış süt, bir pamuk yünü tabakasından süzülür, ardından %10 sodyum karbonat çözeltisi ile pH 7.2'ye alkalize edilir ve 5-6 ml'lik test tüplerine dökülür.

bulyon martini. Et suyuna eşit miktarda pepton Marten (domuz midesinden hidroklorik aside maruz kalan kıyma) eklenir. Nihai karışım 10 dakika kaynatılır, %10 sodyum hidroksit çözeltisi ile pH 8.0'a alkalize edilir, 0.5 sodyum asetat eklenir, tekrar kaynatılır ve steril kaplara dökülür. %0.25 glikoz, Martin'in suyuna eklenir.

Çarşamba Kitt - Tarozzi(bkz. bölüm 34).

Streptococcus pneumoniae (pnömokok)

Pnömokoklar ilk olarak R. Koch (1871) tarafından tanımlanmıştır.

Morfoloji. Pnömokoklar, hücrelerin birbirine bakan kenarlarının düz, karşılıklı kenarlarının ise uzamış olduğu diplokoklardır, bu nedenle mum alevini andıran mızrak şeklinde bir şekle sahiptirler (bkz. Şekil 4). Pnömokokların boyutu 0,75-0,5 × 0,5-1 μm'dir, çiftler halinde düzenlenirler. Sıvı besleyici ortamlarda, genellikle streptokoklara benzeyen kısa zincirler oluştururlar. Prevmococci hareketsizdir, sporları yoktur, vücutta her iki cocci'yi çevreleyen bir kapsül oluştururlar. Kapsül, ısıya dayanıklı bir antifagin maddesi içerir (pnömokokları fagositozdan ve antikorların etkisinden korur). Yapay besleyici ortamlarda büyürken, pnömokoklar kapsüllerini kaybederler. Pnömokoklar gram pozitiftir. Gram negatif bakteriler eski kültürlerde bulunur.

yetiştirme. Pnömokoklar fakültatif anaeroblardır. 36-37 ° C sıcaklıkta ve 7.2-7.4 pH'ta büyütün. Pek çok amino asidi sentezleyemedikleri için ortam talep ediyorlar, bu nedenle yalnızca doğal protein (kan veya serum) ilavesiyle ortamlarda büyüyorlar. Serumlu agarda küçük, narin, oldukça şeffaf koloniler oluşturur. Kanlı agarda, hemoglobinin methemoglobine dönüşümünün bir sonucu olan yeşil bir bölge ile çevrili nemli yeşilimsi gri koloniler büyür. Pnömokoklar, %0.2 glikoz ilaveli et suyunda ve peynir altı suyu içeren et suyunda iyi gelişir. Sıvı ortamda büyüme, dipte dağınık bulanıklık ve tozlu tortu ile karakterize edilir.

enzimatik özellikler. Pnömokoklar oldukça belirgin bir sakkarolitik aktiviteye sahiptir. Parçalanırlar: asit oluşumu ile laktoz, glikoz, sükroz, maltoz, inülin. Mannitol fermente etmeyin. Proteolitik özellikleri zayıf bir şekilde ifade edilir: sütü pıhtılaştırırlar, jelatini sıvılaştırmazlar ve indol oluşturmazlar. Pnömokok safrada çözünür. İnülinin bölünmesi ve safrada çözünmesi, Streptococcus pneumoniae'yi Streptococcus pyogenes'ten ayıran önemli bir teşhis özelliğidir.

patojenite faktörleri. Pnömokoklar hiyalüronidaz, fibrinolizin vb. üretirler.

toksin oluşumu. Pnömokoklar endotoksin, hemolizin, lökosidin üretirler. Pnömokokların virülansı, kapsülde antifagin varlığı ile de ilişkilidir.

Antijenik yapı ve sınıflandırma. Pnömokokların sitoplazmasında, tüm grup için ortak olan bir protein antijeni ve kapsülde bir polisakarit antijeni vardır. Polisakkarit antijenine göre, tüm pnömokoklar 84 serovara ayrılır. Serovar I, II, III insanlar için en yaygın patojenlerdir.

çevresel direnç. Pnömokoklar kararsız mikroorganizmalar grubuna aittir. 60 ° C'lik bir sıcaklık onları 3-5 dakikada yok eder. Düşük sıcaklıklara ve kurumaya karşı oldukça dirençlidirler. Kurutulmuş balgamda 2 aya kadar canlı kalırlar. Besleyici bir ortamda 5-6 günden fazla kalmazlar. Bu nedenle ekim yapılırken 2-3 günde bir yeniden tohumlama yapılması gerekir. Konvansiyonel dezenfektan solüsyonları: %3 fenol, 1:1000 seyreltmede süblime, bunları birkaç dakika içinde yok eder.

Pnömokoklar, onları 1:100.000'lik bir seyreltmede öldüren optokine özellikle duyarlıdır.

Hayvan duyarlılığı. İnsanlar pnömokokların doğal konağıdır. Ancak pnömokoklar buzağılarda, kuzularda, domuz yavrularında, köpeklerde ve maymunlarda hastalığa neden olabilir. Deney hayvanlarından beyaz fareler, pnömokoklara karşı oldukça duyarlıdır.

enfeksiyon kaynakları. Hasta bir kişi ve bir bakteri taşıyıcı.

İletim yolları. Havadan, havadan olabilir.

giriş kapısı. Üst solunum yolu, gözler ve kulağın mukoza zarı.

İnsanlarda hastalıklar. Pnömokoklar, farklı lokalizasyonlarda cerahatli iltihaplı hastalıklara neden olabilir. Pnömokoklara özgü olanlar:

1) lob pnömonisi;

2) sürünen kornea ülseri;

En yaygın hastalık, akciğerin bir, daha az sıklıkla iki veya üç lobunu etkileyen krupöz pnömonidir. Hastalık akuttur, yüksek ateş, öksürük eşlik eder. Genellikle kritik bir şekilde biter.

dokunulmazlık. Hastalıktan sonra, pnömoni relapslarla karakterize olduğundan, kararsız bağışıklık kalır.

önleme. Sıhhi ve önleyici tedbirlere gelir. Spesifik profilaksi geliştirilmemiştir.

Tedavi. Antibiyotikler kullanılır - penisilin, tetrasiklin vb.

Kontrol soruları

1. Pnömokokların morfolojisi. Yetiştirme ve enzimatik özellikler.

2. Pnömokokların patojenitesini hangi faktörler belirler ve pnömokokları fagositozdan koruyan nedir?

3. Pnömokok enfeksiyonunun ana kapıları nelerdir? Pnömokokların neden olduğu hastalıklar nelerdir?

Mikrobiyolojik araştırma

Çalışmanın amacı: pnömokok tespiti.

Araştırma materyali

1. Balgam (pnömoni).

2. Farinksten mukus (bademcik iltihabı).

3. Ülserden akıntı (korneanın sürünen ülseri).

4. Kulaktan akıntı (orta kulak iltihabı).

5. İrin (apse).

6. Plevral punktat (plörezi).

7. Kan (şüpheli sepsis).

1 (Sabah balgamı almak daha iyidir (spesifik pnömoni ile balgam paslı bir renge sahiptir).)

Temel araştırma yöntemleri

1. Mikroskobik.

2. Mikrobiyolojik.

3. Biyolojik.

Araştırma ilerlemesi

biyolojik örnek. Biraz (3-5 ml balgam) steril bir besiyerinde emülsifiye edilir, bu karışımın 0.5 ml'si beyaz bir fareye intraperitoneal olarak enjekte edilir. 6-8 saat sonra fareler hastalık belirtileri gösterir. Şu anda, karın boşluğunun eksüdasında pnömokok zaten tespit edilebilir. Eksüda steril bir şırınga ile alınır. Smearlar yapılır, Gram'a göre boyanır ve mikroskopta incelenir. Saf bir kültürü izole etmek için eksüda, serumlu agar üzerine inoküle edilir. Fare ölürse veya hastalanırsa, saf bir kültürü izole etmek için kalpten serum agar üzerinde kan kültürü yapılır. Mahsuller bir termostata yerleştirilir.

Pnömokok tipini belirlemek için hızlandırılmış bir yöntem(mikroaglütinasyon reaksiyonu). Enfekte bir farenin karın boşluğundan 4 damla eksuda bir cam slayta uygulanır. Birinci damlaya tip I aglütine edici serum, ikinciye tip II serum, üçüncüye tip III ve dördüncüye izotonik sodyum klorür solüsyonu (kontrol) eklenir.

Tip I ve II serum, 1:10 oranında ve tip III serum - 1:5 oranında önceden seyreltilir. Tüm damlalar karıştırılır, kurutulur, sabitlenir ve seyreltilmiş macenta ile lekelenir. Damlalardan birinde pozitif sonuç ile mikrobiyal agregasyon (aglütinasyon) not edilir.

Araştırmanın ikinci günü

Kültürler termostattan çıkarılır, incelenir ve şüpheli kolonilerden yayma yapılır. Yaymalarda gram-pozitif mızrak şeklinde diplokokların varlığında, serumlu bir eğimli agar üzerinde 2-3 koloni izole edilerek saf bir kültür elde edilir. Mahsuller bir termostata yerleştirilir. Smearlar sıvıdan yapılır, Gram boyanır ve mikroskopta incelenir.

Araştırmanın üçüncü günü

Ekinler termostattan çıkarılır. Kültürün saflığını kontrol edin - smear, Gram boyama ve mikroskop yapın. İzole edilmiş kültürde Gram-pozitif mızrak şeklinde diplokoklar varsa, izole edilmiş kültür aşılama ile tanımlanır:

1) Hiss ortamında (laktoz, glikoz, sükroz, maltoz), ekim olağan şekilde - ortama enjeksiyonla gerçekleştirilir;

2) inülin içeren ortam üzerinde;

3) optokin içeren ortam üzerinde;

4) safra ile bir örnek koyun.

inülin testi. İncelenen kültür, inülin ve turnusol tentürü içeren bir besin ortamı üzerine ekilir ve bir termostata yerleştirilir. 18-24 saat sonra ürünler termostattan çıkarılır. Pnömokok varlığında besiyeri kırmızıya döner (streptokoklar besiyerinin kıvamını ve rengini değiştirmez).

Optokine duyarlılığın belirlenmesi. İzole edilen kültür, optochin 1:50,000 içeren %10 kanlı agar üzerine ekilir. Pnömokoklar, streptokoklardan farklı olarak, optokin içeren ortamlarda gelişmezler.

safra testi. İncelenen et suyu kültürünün 1 ml'si aglütinasyon tüplerine dökülür. Bunlardan birine bir damla tavşan safrası eklenir, ikinci test tüpü kontrol görevi görür. Her iki test tüpü de bir termostata yerleştirilmiştir. 18-24 saat sonra, bulanık bir et suyunun temizlenmesinde ifade edilen pnömokokların parçalanması meydana gelir. Kontrolde, süspansiyon bulutlu kalır.

Safra içeren bir numune, yoğun bir besin ortamı üzerine yerleştirilebilir. Bunu yapmak için, agarda yetişen bir pnömokok kolonisine bir kuru safra tanesi uygulanır ve serum plakaları - koloni çözülür - kaybolur.

Araştırmanın dördüncü günü

Sonuçlar kaydedilir (Tablo 26).

Not. için - asit oluşumu ile karbonhidratların parçalanması.

Şu anda, streptokok antikorlarını belirlemek için serolojik araştırma yöntemleri (RSK ve RIGA) yaygın olarak kullanılmaktadır. İzole edilen kültürün grubunun ve serovarının belirlenmesi, flüoresan antikorlar kullanılarak gerçekleştirilir.

Pnömokok virülansının belirlenmesi. Pneumococcus'un günlük et suyu kültürü, %1 pepton su ile 10-2'den 10-8'e seyreltilir, iki beyaz fareye her dilüsyondan 0.5 ml verilir. 10-7'lik bir seyreltmede farelerin ölümüne neden olan kültür virülan olarak değerlendirilir, 10-4-10-6'lık bir seyreltmede orta derecede virülan olarak kabul edilir. Farelerin ölümüne neden olmayan kültür avirulenttir.

Kontrol soruları

1. Saf bir pnömokok kültürünü izole etmenin hangi yöntemlerini biliyorsunuz?

2. Hangi hayvan pnömokoklara en duyarlıdır?

3. Enfekte bir farenin eksudasıyla hangi reaksiyonlar yapılır ve hangi amaçla yapılır?

4. Pnömokok, piyojenik kokların hangi temsilcilerinden ve hangi testle ayırt edilmelidir?

5. Pnömokokların virülansı nasıl belirlenir?

Egzersiz yapmak

Güne göre aşamalarını gösteren bir balgam inceleme şeması hazırlayın.

Besin ortamı

serum agarı(bkz. bölüm 7).

peynir altı suyu suyu(bkz. bölüm 7).

kanlı agar(bkz. bölüm 7).

tıs medya(kuru).

İnülin test ortamı. 200 ml damıtılmış suya 10 ml inaktif sığır serumu, 18 ml turnusol tentürü ve 3 g inülin ekleyin. Arka arkaya 3 gün boyunca 100°C'de akan buharla sterilize edin. Safra suyu (bkz. bölüm 7).

KATEGORİLER

Tarama

Ekstremitelerin ultrasonu

Ultrason türleri

karın ultrasonu

göğüs ultrasonu

POPÜLER MAKALELER

	Fiillerle olmayan olumsuzlama (kişisel biçimde, mastar biçiminde, ulaç biçiminde) ayrı yazılır: alma, değildi, bilmeden, yavaşça
	Sunum, rönesans felsefesinin ana özelliklerini rapor edin.
	kurgu tarzı
	Dünyanın çocukları Sunum biz bahçe için dünyanın çocuklarıyız
	İletişimin önündeki engeller konulu sunum, çalışma öğrenciler tarafından yapıldı, iletişim olmadan kendimizi kilitliyoruz.

2023 "kingad.ru" - insan organlarının ultrason muayenesi