Schema de examinare a rezervorului pentru dizenterie. Diagnosticul de laborator al dizenteriei (revizuire a literaturii)

Dizenteria este o infecție intestinală severă, caracterizată printr-un debut acut. Diagnosticul microbiologic dizenteria presupune izolarea agentului patogen din fecalele pacientului prin inocularea acestuia într-un mediu nutritiv special. Boala trebuie diferențiată de alte boli intestinale și otrăviri. Diagnosticul precoce și tratamentul în timp util vor ajuta la evitarea complicațiilor.

Importanța diagnosticării în timp util

Recunoașterea dizenteriei în practică nu este atât de ușoară deoarece există boli infecțioase și neinfecțioase cu manifestări clinice similare. O trăsătură caracteristică a agenților patogeni de dizenterie (Shigella) este capacitatea de a modifica rezistența la medicamentele antibacteriene. Boala prost diagnosticată va duce la infecție un numar mare al oamenilor. Utilizarea necorespunzătoare a antibioticelor este cauza rezistenței bacteriene, care duce la infecții în masă și epidemii cu decese. Sursa de infecție sunt pacienții și purtătorii de bacterii care secretă microorganisme patogene cu materii fecale. Perioadă incubație dizenterie - 2-3 zile.

Simptomele clinice ale bolii

• Febră bruscă cu o temperatură a corpului de 40 de grade sau mai mare.
• Diaree de mai mult de 10 ori pe zi.
• Apariția sângelui, mucusului în scaun, în cazuri rare puroi.
• Pierderea poftei de mâncare până la absența completă.
• Greață și vărsături.
• Tăiere în abdomen și hipocondrul drept.
• Durere în rect.
• Deshidratare.
• Limba uscată cu un strat alb.
• Aritmie.
• Reducerea tensiunii arteriale.
• Tulburări ale conștiinței.

Proceduri de diagnosticare

Un medic pune un diagnostic de dizenterie numai după efectuarea unor studii.

Diagnosticul bolii include metode general acceptate și speciale care stabilesc nu numai diagnostic final, dar și aprecierea nivelului de disfuncție a organelor digestive. În cazul dizenteriei, diagnosticul se face pe baza tabloului epidemiologic al bolii, simptome cliniceși cercetările efectuate. Principalul diagnostic de laborator este analiza microbiologică a scaunului, care identifică până la 80% dintre agenții patogeni. Metoda serologică se efectuează nu mai devreme de a 5-a zi a bolii; acest tip de studiu completează, dar nu înlocuiește, analiza microbiologică. Alte metode:

• Examenul coprologic este o metodă clinică simplă și accesibilă, care detectează mucusul, dungile de sânge, globulele roșii, neutrofilele (până la 50 în câmpul vizual) și celulele epiteliale alterate.
• Sigmoidoscopia - vă permite să monitorizați procesul de vindecare. A nu se utiliza la copii.
• Metoda de testare a alergiilor - metoda ajutorului, bazat pe efectuarea unui test de alergie cutanată cu dizenterină (metoda Tsuverkalov).

Analize generale de sânge

Celulele imune distrug agenții patogeni de dizenterie din intestine, iar cazurile severe de boală apar atunci când bacteriile invadează ganglionii limfatici și apoi intră în sânge. Un test de sânge pentru dizenterie evaluează starea pacientului și permite răspunsul în timp util posibile complicații. O creștere a vitezei de sedimentare a eritrocitelor este un indicator de laborator care caracterizează gradul de inflamație. Dizenteria determină, de asemenea, o creștere a concentrației de neutrofile și monocite de bandă.

Cum să donezi fecale pentru coprogram?

Pentru a confirma boala, se efectuează un test de scaun. Un coprogram este un studiu detaliat de laborator care evaluează funcționarea tractului gastrointestinal, viteza și eficiența digestiei și funcția intestinală. Metodele de laborator pentru examinarea scaunului relevă fizice și Proprietăți chimice fecale, compoziție, prezența organismelor străine și incluziuni. Cerințe pentru colectarea scaunului:

• Materialul este luat după actul natural de defecare.
• Colectarea se face într-un recipient special.
• Este interzis să luați material biologic obținut în urma unei clisme pentru a testa scaunul pentru dizenterie.
• Înainte de studiu, este interzis să folosiți suplimente de fier, să utilizați supozitoare rectale, să luați laxative sau să beți băuturi alcoolice.

Diagnosticul microbiologic

O cultură în rezervor pentru dizenterie determină cu exactitate tipul de agent patogen.

Diagnosticare bacteriologică - colectarea materiilor fecale și însămânțarea ulterioară a fecalelor într-un mediu nutritiv special. Apariția coloniilor de bacterii patogene (Shigella) după cultură confirmă diagnosticul suspectat. Analiza bacteriologică pentru dizenterie, determină cu exactitate agentul patogen, tipul său, subspecia și susceptibilitatea la agenți antibacterieni, ceea ce vă permite să alegeți medicamentul potrivit pentru tratament.

Materialul studiat este fecale cu impurități străine obținute natural sau un tub special pentru sigmoidoscopie. Un frotiu este luat de la copii cu un tampon special ( frotiu VD sau frotiu intestinal). Sensibilitatea la medicamente se stabilește prin plasarea coloniilor de Shigella împreună cu diferite antibiotice. Dacă activitatea vitală a microorganismelor continuă lângă tableta cu un antibiotic, atunci medicamentul nu este utilizat pentru tratament; dacă microorganismele mor, este prescris tratamentul cu un astfel de antibiotic.

Teste serologice pentru dizenterie

În cazul rezultatelor negative sau discutabile ale examenului bacteriologic, se utilizează metoda serologică. ÎN scaun Un antigen bacterian este detectat la pacient, iar anticorpii specifici sunt detectați în plasmă. Titrul de anticorpi poate fi determinat folosind metoda RIGA, uneori folosind metoda RPGA sau RA. O suspensie a unei colonii de Shegella în timpul zilei este utilizată ca antigene. Dezavantajul metodei - rezultate de încredere se primesc la numai 5 zile de la debutul bolii, când concentrația de anticorpi atinge nivelul dorit.

Sigmoidoscopie

Datorită faptului că agentul cauzal al dizenteriei afectează intestinul gros, sigmoidoscopia este o metodă de diagnosticare semnificativă, dar nu decisivă. Diagnosticul constă în introducerea unui rectoscop în anus, echipat cu un dispozitiv care furnizează aer. Prin umflare, cavitatea intestinală devine accesibilă pentru examinare. Această metodă ajută la evaluarea gradului de deteriorare a epiteliului intestinal. Cu dizenterie, pereții intestinali devin hiperemici ca urmare a vasodilatației. În unele secțiuni apar eroziunea și hemoragia. Sigmoidoscopia nu necesită pregătire, dar procedura nu se efectuează dacă sunt prezente fisuri anale sau patologii ale anusului.

Orientări pentru studenți pentru lecția practică nr. 28.

Tema lecției:

Ţintă: Studierea metodelor de diagnostic microbiologic, terapie etiotropă și prevenirea shigelozei.

Modulul 2 . Microbiologie specială, clinică și de mediu.

Subiectul 5: Metode de diagnostic microbiologic al dizenteriei.

Relevanța subiectului:Shigeloza este omniprezentă și reprezintă problema serioasaîn țările cu un nivel cultural sanitar scăzut și o incidență ridicată a alimentației insuficiente și de proastă calitate. În țările în curs de dezvoltare, răspândirea infecției este facilitată de igiena precară, igiena personală precară, supraaglomerare și o proporție mare de copii în rândul populației. În Ucraina, focarele de shigeloză sunt mai frecvente în comunitățile închise cu niveluri scăzute de salubritate și igienă, de exemplu, în creșe și grădinițe, pe navele turistice, în clinicile psihiatrice sau adăposturile pentru persoane cu dizabilități. Shigella a fost cauza diareei la călători și la turiști.

Cauza bolilor de grup poate fi considerată consumul de produse alimentare contaminate din cauza neglijenței lucrătorilor de vânzări care sunt purtători de Shigella. Există focare asociate cu consumul de apă potabilă; înotul în corpurile de apă contaminate a dus, de asemenea, la infecție. Cu toate acestea, căile de transmitere prin alimente și apă par să joace un rol mai mic în răspândirea shigelozei în comparație cu holera și febra tifoidă, care necesită de obicei doze mari de agenți patogeni pentru a infecta oamenii. În țările în curs de dezvoltare, unde răspândirea bolii este predominant de la persoană la persoană, purtătorii pot fi un rezervor important al agentului infecțios. La pacienții care nu au luat medicamente antibacteriene, excreția Shigella în fecale continuă de obicei timp de 1×4 săptămâni, dar într-o proporție mică de cazuri continuă semnificativ mai mult.

Shigeloza este o infecție bacteriană acută a intestinelor cauzată de unul dintre cele patru tipuri de Shigella. Spectrul formelor clinice de infecție include diaree ușoară, apoasă și dizenterie severă, care se caracterizează prin dureri de crampe în abdomen, tenesmus, febră și semne de intoxicație generală.

Etiologie.

Genul Shigella (numit după K. Shiga, care în 1898 a studiat și descris în detaliu agentul cauzal izolat al dizenteriei bacteriene de către A.V. Grigoriev) din familia Enterobacteriaceae este format dintr-un grup de specii strâns înrudite de bacterii cu următoarele proprietăți:

eu. Morfologic: Shigella - bastoane mici cu capete rotunjite. Ele diferă de alți reprezentanți ai familiei Enterobacteriaceae prin absența flagelilor (imobili), nu au spori sau capsule și sunt gram-negative.

II. Cultural: Shigella sunt aerobe sau anaerobe facultative; conditii optime temperatura de cultivare 37°C, pH 7,27,4. Ele cresc pe medii nutritive simple (MPA, MPB) sub formă de colonii mici, strălucitoare, translucide, cenușii, rotunde, de 1,5 x 2 mm. S formă. Excepție este Shigella Sonne, care adesea se disociază, formând colonii mari, plate, tulburi, cu margini zimțate. R forme (coloniile au aspectul unei „frunze de strugure”). În mediile nutritive lichide, Shigella produce turbiditate uniformă, R formele formează un precipitat. Mediul lichid de îmbogățire este bulionul selenit.

III. Enzimatic: principalele caracteristici biochimice necesare pentru identificarea Shigella la izolarea unei culturi pure sunt următoarele:

1. absența formării gazelor în timpul fermentației glucozei;
2. lipsa producției de hidrogen sulfurat;
3. fără fermentare a lactozei timp de 48 de ore.

În total, cele patru specii sunt împărțite în continuare în aproximativ 40 de serotipuri. După caracteristicile principalelor antigene somatice (O) și proprietățile biochimice, se disting următoarele patru specii sau grupuri: S. dysenteriae (grupa A, include: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri (grupa B), S. boydii (grupa C) și S. sonnei (grupa D).

În ceea ce privește manitolul, toate Shigella sunt împărțite în manitol de scindare (Shigella Flexner, Boyd, Sonne) și manitol nedivizabil (Shigella Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs).

IV. Factori de patogenitate:

1. Plasmidă de invazieoferă capacitatea Shigella de a provoca invazie cu răspândire intercelulară ulterioară și reproducere în epiteliul mucoasei colonului;
2. Formarea toxinelor: Shigella are o endotoxină lipopolizaharidă, care este similară din punct de vedere chimic și biochimic cu endotoxinele altor membri ai familiei Enterobacteriaceae. În plus, S. dysenteriae tip I (bacilul Shiga) produce o exotoxină. De la descoperirea acestuia din urmă, s-a constatat că are activitate de enterotoxină și poate provoca secreție intestinală, precum și are un efect citotoxic îndreptat împotriva celulelor epiteliale intestinale; are un efect neurotoxic, care se observă la copiii cu shigeloză. Toxina Shiga, care intră în sânge, împreună cu deteriorarea endoteliului submucos, afectează și glomerulii rinichiului, drept urmare, pe lângă diareea cu sânge, sindromul hemolitic uremic se dezvoltă odată cu dezvoltarea insuficienței renale.

V. Structura antigenică:Toate Shigella au un O-antigen somatic, în funcție de structura căreia sunt împărțite în serovare.

VI. Rezistenţă: Temperatura 100 0 C o ucide pe Shigella instantaneu. Shigella este rezistentă la temperaturi scăzute în apa râului durează până la 3 luni, pe legume și fructe - până la 15 luni.În condiții favorabile, Shigella este capabilă să se reproducă în Produse alimentare(salate, vinegrete, carne fiartă, carne tocată, pește fiert, lapte și produse lactate, compoturi și jeleu), în special Shigella Sonne.

Epidemiologie.

1. Sursa de infectare:O persoană care suferă de forme acute și cronice de shigeloză; purtător de bacterii.

2. Căi de transmisie:

• De calitate alimentară (în principal pentru S. sonnei)
• Acvatic (în principal pentru S. flexneri)
• Contactați gospodăria (în principal pentru S. dysenteriae)

3. Poartă de intrare infectiile sunt cauzate de tractul gastrointestinal.

Patogeneza si modificări patologice.

După ingerare, Shigella colonizează părțile superioare ale intestinul subtireși se înmulțesc acolo, provocând posibil secreție crescută pe stadiu timpuriu infectii. Shigella pătrunde apoi prin celulele M în submucoasă, unde este absorbită de macrofage. Acest lucru duce la moartea unor Shigella, ducând la eliberarea de mediatori inflamatori, care inițiază inflamația în submucoasa. Apoptoza fagocitelor permite celeilalte părți a Shigella să supraviețuiască și să pătrundă în celulele epiteliale ale mucoasei prin membrana bazală. Shigella se înmulțește și se răspândește intercelular în interiorul enterocitelor, ducând la dezvoltarea eroziunilor. Când Shigella moare, sunt eliberate toxine Shiga și Shiga, a căror acțiune duce la intoxicație. Deteriorarea membranei mucoase este însoțită de umflături, necroză și hemoragie, care provoacă apariția sângelui în scaun. În plus, toxina afectează sistemul nervos central, ceea ce duce la tulburări trofice.

Manifestari clinice.

Gama de manifestări clinice ale shigelozei este foarte largă, de la diaree ușoară până la dizenterie severă cu dureri de crampe în abdomen, tenesmus, febră și intoxicație generală.

Perioadă incubațievariază de la câteva ore până la 7 zile, cel mai adesea 2-3 zile.Inițial, pacienții experimentează scaun apos, febră (până la 41°C), dureri abdominale difuze, greață și vărsături. Pe lângă aceasta, pacienții se plâng de mialgie, frisoane, dureri de spate și cefalee. În zilele următoare de la debutul bolii apar semne de dizenterie: tenesme, scaune frecvente, rare, sângero-mucoase. Temperatura corpului scade treptat, durerea poate fi localizată în cadranele inferioare burtă. Intensitatea diareei atinge maximul în jurul sfârșitului primei săptămâni de boală. Dizenteria cu scaune cu sânge este mai frecventă și apare mai devreme în boala cauzată de S. dysenteriae tip I decât în ​​alte forme de shigeloză.

Pentru shigeloza Sonne Este caracteristică o evoluție mai blândă a bolii (varianta gastroenterică sau gastroenterocolitică). Perioada febrilă este mai scurtă, simptomele intoxicației sunt de scurtă durată, iar modificările distructive ale mucoasei intestinale nu sunt tipice.

Shigeloza lui FlexnerPractic, sunt caracteristice două variante ale cursului clinic - gastroenterocolitic și colitic.

Complicații extraintestinale în shigelozărar:

1. O complicație a shigelozei poate fi dezvoltarea disbiozei intestinale.
2. Odată cu durerile de cap, pot apărea semne de meningită și convulsii.
3. Neuropatia periferică a fost raportată în infecțiile cu S. dysenteriae de tip I, iar sindromul Guillain-Barré (polinevrita) a fost raportat în timpul unui focar de gastroenterită cu S. boydii.
4. Cu excepția copiilor care suferă de distrofie, diseminarea hematogenă a agentului patogen este relativ rară; au fost descrise și cazuri de abcese de shigeloză și meningită.
5. În cazul shigelozei, este posibilă dezvoltarea sindromului Reiter cu artrită, conjunctivită sterilă și uretrită; aceasta apare de obicei la 1-4 săptămâni după debutul diareei la pacienți.
6. La copii, shigeloza este însoțită de sindrom hemolitic-uremic, adesea în combinație cu reacții asemănătoare leucemiei, colită severă și circulație a endotoxinelor, dar bacteriemia nu este de obicei detectată.
7. Destul de rar, keratoconjunctivita purulentă este cauzată de Shigella, care a intrat în ochi ca urmare a autoinfectării cu degetele contaminate.
8. Șoc hipovolemic și sindrom de coagulare intravasculară diseminată.
9. Peritonită, cangrenă intestinală, sângerare intestinală.

Imunitate: Oamenii au rezistență naturală la infecția cu Shigella. După boală trecută imunitatea nu este stabilă, iar după shigeloză Sonne este practic absent. În cazul unei boli cauzate de Shigella Grigoriev Shiga, se dezvoltă o imunitate antitoxică mai stabilă. În protecția împotriva infecțiilor, rolul principal îi revine secretorului IgA , prevenirea aderenței și a activității dependente de anticorpi citotoxici a limfocitelor intraepiteliale, care, împreună cu secretorii IgA distruge Shigella.

Diagnostice si teste de laborator.

Scopul studiului: detectarea și identificarea Shigella pentru diagnostic; identificarea purtătorilor de bacterii; detectarea Shigella în produsele alimentare.

Material pentru cercetare: fecale, material secţional, produse alimentare.

Metode de diagnostic:microbiologic (bacteriologic, microscopic (luminiscent); serologic; biologic; test de alergie.

Progresul studiului:

1 zi de studiu:Culturile trebuie făcute din fecale proaspăt excretate sau folosind tampoane rectale (tub rectal); Dacă nu sunt disponibile condiții adecvate, materialul trebuie plasat într-un mediu de transport. Pentru a face acest lucru, utilizați agar intestinal (mediu MacConkey sau Shigella-Salmonella), agar dezoxicolat cu xiloză-lizină moderat selectiv, KLD) și bulion nutritiv (bulion selenit). Dacă timpul dintre colectare și inoculare depășește 2 ore, atunci trebuie utilizate soluții de conservare: bulion de bilă 20%, mediu Kauffmann combinat.

• Fecalele din amestecul de glicerină sunt emulsionate, o picătură de emulsie se aplică pe mediu și se freacă cu o spatulă. Mediile diferențiale pentru Shigella sunt Ploskirev, Endo și EMS (agar eozină cu albastru de metilen). Mediul lui Ploskirev (mediul include: MPA, lactoză, săruri biliare și indicatorul verde strălucitor) este, de asemenea, un mediu selectiv pentru Shigella, deoarece inhibă creșterea Escherichia coli.
• În paralel cu însămânțarea directă, materialul colectat se inoculează pe un mediu de îmbogățire - bulion selenit.
• Toate culturile sunt plasate într-un termostat.

Ziua 2 a studiului:

• Vasele sunt îndepărtate de pe termostat, coloniile suspecte sunt eliminate pe mediul Ressel (mediu nutritiv care include: agar-agar, indicator Andrede, 1% lactoză, 0,1% glucoză) și manitol. Inocularea se efectuează cu lovituri pe o suprafață teșită și o injecție într-o coloană de agar. Mediul Ressel inoculat se pune într-un termostat timp de 18-24 ore (în același timp, reînsămânțarea din mediul selenit se face în medii de diagnostic diferenţial).
• Se fac frotiuri (colorație Gram) și se examinează la microscop.
• Preparatele sunt pregătite ca o picătură „atârnată” sau „zdrobită”.
• Stabilirea RA tentativă cu seruri de Shigella diagnostic polivalente.
• Semănatul de colonii suspecte pe agar-agar.

Ziua 3 a studiului:

• Microscopia materialului din agar slants.
• Culturile care nu au fermentat lactoza pe mediu Ressel sunt supuse unui studiu suplimentar: se fac frotiuri (colorație Gram), și se verifică puritatea culturii. În prezența bastonașelor gram-negative, inocularea se efectuează pe medii Hiss, bulion cu hârtii indicator (pentru a detecta indol și hidrogen sulfurat) și lapte de turnesol.
• Mediile inoculate sunt plasate într-un termostat timp de 18-24 ore.

Ziua 4 a studiului:

• Luarea în considerare a unui scurt „rând pestriț”.
• Culturile suspecte pentru proprietățile lor enzimatice și culturale în raport cu Shigella sunt supuse identificării serologice. Declarație de RA pe sticlă (seruri de diagnostic tipice și de grup). Configurarea unui RA desfășurat.

Ca metode accelerate pentru shigeloză, acestea sunt utilizatemicroscopie cu fluorescențăȘi proba biologica(introducerea tulpinilor virulente de Shigella în sacul conjunctival (sub pleoapa inferioară) al cobaii; conjunctivita se dezvoltă până la sfârșitul primei zile).

Testul de alergie Tsuverkalovtest de alergie intradermică cu dizenterină (injectarea a 0,1 ml dizenterină în antebraț reacție pozitivă în caz de infiltrație și hiperemie). Diagnosticarea alergiilor practic nu este utilizată în prezent. Testul lui Tsurvekalov nu este specific, reacțiile pozitive sunt înregistrate nu numai pentru shigeloză, ci și pentru salmoneloză, escherichioză, yersinioză etc. OKI și uneori la indivizi sănătoși.

Tratament și prevenire.Pentru tratament și prevenire conform indicațiilor epidemiologice se utilizează bacteriofag administrare orală, antibiotice după determinarea antibiogramei; în cazul disbacteriozei preparate probiotice pentru corectarea microflorei. Pentru a reface pierderea de lichide și electroliți, administrați în interior o soluție de glucoză-electroliți.

Obiective specifice:

Interpretați proprietățile biologice ale agenților patogeni de shigeloză.

Familiarizați-vă cu clasificarea Shigella.

Învață să interpretezi tiparele patogenetice ale procesului infecțios cauzat de Shigella.

Determinarea metodelor de diagnostic microbiologic, terapie etiotropă și prevenirea shigelozei.

A fi capabil să:

• Inoculați materialul de testat pe medii nutritive.
  • Pregătiți frotiuri și colorație Gram.
  • Efectuați microscopia preparatelor folosind un microscop cu imersie.
  • Analizați caracteristicile morfologice, culturale, enzimatice ale Shigella.

Întrebări teoretice:

1. Caracteristicile agenților patogeni de shigeloză. Proprietăți biologice.

2. Clasificarea Shigella. Principiile care stau la baza acestuia.

3. Epidemiologie, patogeneză și caracteristici clinice Shigeloza

4. Diagnosticare de laborator.

5. Principii de tratament și prevenire a shigelozei.

Sarcini practice care se execută în clasă:

1. Microscopia preparatelor demonstrative din culturi pure de agenți patogeni de shigeloză.

2. Lucrări privind diagnosticul bacteriologic al shigelozei: studiul culturilor fecale pe mediul lui Ploskirev.

3. Subcultura coloniilor suspecte pe mediul Ressel și MPB pentru a determina formarea de indol și H 2 S.

4. Schițarea preparatelor demonstrative și a diagramelor de diagnostic microbiologic ale shigelozei în protocolul lecției.

5. Întocmirea protocolului.

Literatură:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Microbiologie medicală, imunologie și virologie / Manual pentru universități medicale, Sankt Petersburg „Literatura specială”, 1998. - 592 p.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Microbiologie / Manual.-ed. a II-a, revăzută. Și suplimentar - M.: Medicină, 1983, - 512 p.

3. Pyatkin K.D. Krivoshein Yu.S. Microbiologie cu virologie și imunologie.- Kiev: Şcoala V i scha, 1992. - 431 p.

4. Microbiologie medicală / Editat de V.I. Pokrovsky.-M.:GEOTAR-MED, 2001.-768p.

5. Ghid pentru orele practiceîn microbiologie, imunologie și virologie. Ed. M.P. Zykova. M. „Medicina”. 1977. 288 p.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Microbiologie. /Ed. F.K. Cerchez. M.: Medicină, 1986. 512 p.

7. Note de curs.

Literatură suplimentară:

1. Makiyarov K.A. Microbiologie, virologie și imunologie. Alma-Ata, „Kazahstan”, 1974. 372 p.

2. Titov M.V. Boli infectioase. - K., 1995. 321 p.

3. Shuvalova E.P. Boli infecțioase. - M.: Medicină, 1990. - 559 p.

4. BME, T. 1, 2, 7.

5. Pavlovich S.A. Microbiologie medicală în grafice: Manual. indemnizatie medicala Inst. Mn.: Mai sus. şcoală, 1986. 255 p.

Scurt instrucțiuni să lucreze la o lecție practică.

La începutul lecției se verifică nivelul de pregătire al elevilor pentru lecție.

Munca independentă constă în studierea clasificării Shigella, analizarea schemei semnelor patogenetice și clinice ale shigellozei. Studiul metodelor de diagnostic de laborator al shigelozei. Elevii inoculează biomaterial pe medii nutritive. Apoi se prepară microlamele, se colorează cu Gram, se efectuează microscopia, se schițează microlamele și se dau explicațiile necesare. Munca independentă include, de asemenea, microscopia preparatelor demonstrative și schițarea acestora în protocolul de lecție.

La sfârșitul lecției, se efectuează un test de control și o analiză a rezultatelor finale ale muncii independente ale fiecărui elev.

Harta tehnologica pentru desfasurarea unei lectii practice.

p/p	Etape	Timp în minute	Modalitati de invatare	Echipamente	Locație
	Verificarea și corectarea nivelului inițial de pregătire pentru lecție		Elemente de testare la nivel inițial	Tabele, atlas	Cameră de studiu
	Muncă independentă		Graficul structurii logice	Microscop de imersie, coloranți, lame de sticlă, bucle bacteriologice, medii nutritive, mediu Ploskirev, mediu Ressel, „Seria pestriță Hiss”
	Verificare personală si corectarea maiestriei materiale		Sarcini de învățare direcționate
	Controlul de testare		Teste
	Analiza rezultatelor muncii

Sarcini de formare vizate:

1. Fecalele care conțin mucus și puroi au fost obținute de la un copil cu ACI (recoltarea scaunului a fost efectuată folosind un tub rectal). Ce metodă de diagnosticare expresă ar trebui utilizată?

A. ELISA.

B. RECIF.

C. RA.

D. RSK.

E. RIA.

1. Agentul cauzal al dizenteriei a fost izolat de la un copil bolnav cu o infecție intestinală acută. Ce caracteristici morfologice sunt caracteristice agentului patogen?

A . Tija Gram-negativă imobilă.

B . Tija mobilă Gram-pozitivă.

C . Formează o capsulă pe un mediu nutritiv.

D . Formează spori în mediul extern.

E . Streptobacili Gram pozitivi.

3. Un pacient care s-a îmbolnăvit în urmă cu trei zile și se plânge de o temperatură de 38°C, dureri abdominale, frecvente scaun liber, prezența sângelui în scaun, medicul a diagnosticat clinic dizenterie bacteriană. Ce metodă de diagnostic microbiologic este recomandabil să folosiți în acest caz și ce material trebuie luat de la pacient pentru a confirma diagnosticul?

A. Cal. bacterioscopic.

B. Cal. bacteriologic.

C. Sânge bacterioscopic.

D. Urina bacteriologică.

E. Sânge serologic.

4. Shigella Sonne a fost izolată din fecalele pacientului. Ce cercetări suplimentare trebuie făcute pentru a determina sursa infecției?

A . Se efectuează tiparea fagică a culturii pure izolate.

B . Determinați antibiograma.

C . Stabiliți o reacție de precipitare.

D . Efectuați o reacție de fixare a complementului.

E . Stabiliți o reacție de neutralizare.

5. Dintre un grup de turiști (27 de persoane) care au folosit apa din lac pentru băut, după două zile, 7 persoane au dezvoltat simptome de diaree acută. Ce material trebuie trimis la laboratorul bacteriologic pentru a stabili etiologia acestei boli?

A. Apa, fecalele pacienților.

B. Apa, sângele pacienţilor.

C. Produse alimentare.

D. fac pipi.

E. Sputa.

6. Un dezavantaj semnificativ al metodei de diagnostic microscopic pentru infecțiile intestinale acute este lipsa conținutului de informații din cauza identității morfologice a bacteriilor din familie. Enterobacteriaceae . Ce face această metodă mai informativă?

A . Radioimunotest.

B . Reacția Coombs.

C . Test imunosorbant legat.

D . Reacție de opsonizare.

E . Reacția de imunofluorescență.

7. Un pacient de 29 de ani a fost internat cu atacuri de vărsături, diaree și tenesmus. Fecale cu bucăți de mucus și puțin sânge. Un studiu bacteriologic al bacteriilor din colonii pe mediul lui Ploskirev a relevat bastonașe imobile, gram-negative, care nu fermentează lactoza. Numiți agentul cauzal al procesului infecțios.

A. Shigella flexneri.

B. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. Salata verde, despre care se crede că este cauza unei infecții intestinale acute, a fost livrată la laboratorul de microbiologie. Ce medii nutritive sunt folosite pentru însămânțarea primară?

A . Agar cu sare de gălbenuș, MPB.

B. MPA, MPB.

C . Bulion de selenită, Endo, Ploskireva.

D . Bulion de ficat, mediu Roux.

E . Agar sânge, agar alcalin.

9. În timpul examenului microbiologic carne tocată au fost izolate bacterii aparținând genului Shigella. Studiul ce proprietăți ale microbilor a condus la această concluzie?

A . Cultural, tinctorial.

B . Antigenic, cultural.

C . Zaharolitic, proteolitic.

D . Antigenic, imunogen.

E . Morfologic, antigenic.

10. La o examinare microscopică a vărsăturilor prelevate de la un pacient cu simptome de infecție intestinală acută, s-au găsit tije imobile. În ce frotiu sau preparat ar putea fi studiată mobilitatea bacteriilor?

A . Într-un frotiu colorat cu Gram.

B . Într-un frotiu pătat după Ziehl-Neelsen.

C . Preparatul conține o „picătură groasă”.

D . Într-un frotiu pătat după Neisser.

E . Preparatul conține o „picătură zdrobită”.

Algoritm munca de laborator :

1. Studiul proprietăților biologice ale Shigella.

2. Familiarizarea cu clasificarea Shigella.

3. Analiza schemei manifestărilor patogenetice și clinice ale shigelozei.

4. Studiul metodelor de diagnostic de laborator al shigelozei.

5. Studiul principiilor de bază ale terapiei și prevenirii shigelozei.

1. Prepararea preparatelor fixe din cultura bacteriană.
2. Colorare microlame după Gram.
3. Microscopia microlamelor Cu folosind un microscop cu imersie, analiza și înregistrarea acestora în protocolul de lecție.
4. Mi croscopia și analiza preparatelor demonstrative din culturi pure de Shigella.
5. Desenarea preparatelor demonstrative și a diagramelor de diagnostic de laborator ale shigelozei în protocol.
6. Întocmirea protocolului.

Clasificarea Shigella, proprietățile lor. Patogenia shigelozei.

Dizenteria bacteriană, sau shigeloza, este o boală infecțioasă cauzată de bacterii din genul Shigella, care afectează în primul rând colonul. Numele genului este asociat cu K. Shigi, care a descoperit unul dintre agenții patogeni

dizenterie.

Taxonomie și clasificare. Agenții cauzali ai dizenteriei aparțin departamentului Gracilicutes, familia Enterobacteriaceae, genul Shigella.

Morfologie și proprietăți tinctoriale. Shigella sunt baghete gram-negative cu capete rotunjite, 2-3 µm lungime, 0,5-7 µm grosime (vezi Fig. 10.1); nu formează spori, nu au flageli și sunt imobili. Multe tulpini au vilozități de tip comun și pilule sexuale. Unele Shigella au o microcapsulă.

Cultivare. Bacilii dizenteriei sunt anaerobi facultativi. Sunt nepretențioși față de mediile nutritive și cresc bine la o temperatură de 37 °C și un pH de 7,2-7,4. Pe medii dense formează mici colonii transparente, în medii lichide -

opacificare difuză. Bulionul selenit este cel mai adesea folosit ca mediu de îmbogățire pentru cultivarea Shigella.

Activitatea enzimatică. Shigella are o activitate enzimatică mai mică decât alte enterobacterii. Fermentează carbohidrații pentru a forma acid. O caracteristică importantă care face posibilă diferențierea Shigella este relația lor cu manitol: S. dysenteriae nu fermentează manitolul, reprezentanții grupelor B, C, D sunt manitol-pozitivi. Cele mai active din punct de vedere biochimic sunt S. sonnei, care poate fermenta lent (în decurs de 2 zile) lactoza. Pe baza relației dintre S. sonnei și ramnoză, xiloză și maltoză, se disting 7 variante biochimice.

Structura antigenică. Shigella are un O-antigen, eterogenitatea sa face posibilă distingerea serovarilor și subserovarurilor în cadrul grupurilor; Unii membri ai genului prezintă antigen K.

Factori de patogenitate. Toți bacilii de dizenterie formează endotoxina, care are un efect enterotrop, neurotrop și pirogen. În plus, S. dysenteriae (serovar I) - Shigella Grigoriev-Shiga - secretă o exotoxină care are un efect enterotoxic, neurotoxic, citotoxic și nefrotoxic asupra organismului, care perturbă în consecință metabolismul apă-sare și activitatea sistemului nervos central, duce la moartea celulelor epiteliale ale colonului, afectarea tubilor renali. Formarea de exotoxine este asociată cu mai multe curs sever dizenterie cauzată de acest agent patogen. Alte specii de Shigella pot produce, de asemenea, exotoxină. A fost descoperit factorul de permeabilitate RF, care provoacă leziuni ale vaselor de sânge. Factorii de patogenitate includ, de asemenea, o proteină invazivă care promovează pătrunderea lor în celulele epiteliale, precum și pili și proteinele membranei exterioare responsabile de aderență și o microcapsule.

Rezistenţă. Shigella are rezistență scăzută la diverși factori. S. sonnei este mai rezistent, care supraviețuiește în apa de la robinet până la 2"/2 luni; în apa din rezervoare deschise supraviețuiește până la 5/2 luni. S. sonnei poate supraviețui nu numai destul de mult timp, ci și se inmultesc in produse, in special produse lactate.

Epidemiologie. Dizenteria este o infecție antroponotică: sursa sunt bolnavii și purtătorii. Mecanismul de transmitere a infecțiilor este fecal-oral. Căile de transmitere pot fi diferite - cu dizenteria Sonne predomină calea alimentară, cu dizenteria Flexner - apă, pentru dizenteria Grigoriev-Shiga calea contact-gospodărie este tipică. Dizenteria apare în multe țări din întreaga lume. Recent

De-a lungul anilor, a existat o creștere bruscă a incidenței acestei infecții. Oamenii de toate vârstele sunt afectați, dar copiii cu vârsta cuprinsă între 1 și 3 ani sunt cei mai susceptibili la dizenterie. Numărul de pacienți crește în iulie - septembrie. Diferite tipuri de Shigella în funcție de individ

regiunile sunt distribuite inegal.

Patogeneza. Shigella intră în tractul gastrointestinal prin gură și ajunge în colon. Posedând tropism pentru epiteliul său, agenții patogeni se atașează la celule cu ajutorul piliului și proteinelor membranei exterioare. Datorită factorului invaziv, ele pătrund în interiorul celulelor, se înmulțesc acolo, drept urmare celulele mor. În peretele intestinal se formează ulcerații, în locul cărora apoi se formează cicatrici. Endotoxina, eliberată atunci când bacteriile sunt distruse, provoacă intoxicație generală, motilitate intestinală crescută și diaree. Sângele din ulcerele rezultate ajunge în scaun. Ca urmare a acțiunii exotoxinei, se observă o tulburare mai pronunțată a metabolismului apă-sare, a activității sistemului nervos central și a afectarii rinichilor.

Tabloul clinic. Perioada de incubație durează de la 1 la 5 zile. Boala începe acut cu o creștere a temperaturii corpului la 38-39 ° C, apar dureri abdominale și diaree. Există un amestec de sânge și mucus în scaun. Dizenteria Grigoriev-Shiga este cea mai gravă.

Imunitate. După o boală, imunitatea este nu numai specifică speciei, ci și specifică variantei. Este de scurtă durată și fragilă. Adesea boala devine cronică.

Diagnosticul microbiologic. Fecalele pacientului sunt luate ca material de studiat. Baza diagnosticului este metoda bacteriologică, care face posibilă identificarea agentului patogen și determinarea sensibilității acestuia la

antibiotice, efectuați identificarea intraspecifică (determinați varianta biochimică, serovar sau colicinogenovar). În cazul dizenteriei prelungite, poate fi folosită ca metodă serologică auxiliară, care constă în diagnosticarea RA, RNGA (prin creșterea titrului de anticorpi la repetarea reacției, diagnosticul poate fi confirmat).

Tratament. Pacienții cu forme severe de dizenterie Grigoriev-Shiga și Flexner sunt tratați cu antibiotice cu spectru larg, cu luarea în considerare obligatorie a antibiogramei, deoarece Shigella include adesea nu numai rezistente la antibiotice.

forme active, dar şi dependente de antibiotice. Pentru formele ușoare de dizenterie, antibioticele nu sunt utilizate, deoarece utilizarea lor duce la disbacterioză, ceea ce agravează boala. proces patologic, și întreruperea proceselor de regenerare în membrana mucoasă a colonului.

Prevenirea. Singurul medicament care poate fi utilizat în focarele de infecție în scop profilactic este bacteriofagul de dizenterie. Prevenirea nespecifică joacă rolul principal.

11. Yersinia sunt agenții cauzatori ai ciumei. Proprietăți. Patogenie, imunitate, diagnostic de laborator, epidemiologie, prevenire, tratament. Rolul oamenilor de știință domestici în studiul ciumei.

Taxonomie: Y. pestis provoacă ciuma; departamentul Gracilicutes, familia Enterobacteriaceae, genul Yersinia. Agentul cauzal este Yersinia pestis.

Proprietăți morfologice: Baghete gram-negative, de formă ovoidă, colorează bipolar. Mobil, au o capsulă, nu formează spori.

Proprietăți culturale.

Anaerobi facultativi. Temperatura optima +25C. Ele cresc bine pe medii nutritive simple. Majoritatea carbohidraților sunt fermentați fără a produce gaz. Psihofilii – sunt capabili să-și modifice metabolismul în funcție de temperatură și să se reproducă la temperaturi scăzute. Tulpinile virulente formează colonii aspre (R), forme de tranziție (RS) și mucoase cenușie netede avirulente (S).

Două tipuri de colonii - tinere și mature. Tânăr cu margini zimțate. Coloniile mature sunt mari, cu un centru granular maro și margini zimțate. Pe agar înclinat, după două zile la +28 C formează o culoare cenușie- acoperire albă, crescând în mediu, pe bulion există o peliculă de suprafață delicată și un sediment asemănător bumbacului.

Proprietăți biochimice: Activitate fenomenală ridicată: fermentație la xiloză acidă, sinteza plasmacoagulazei, fibrinolizinei, hemolizinei, lecitinazei, hidrogen sulfurat. Ramnoza și ureea nu fermentează.

Structura antigenică.

Un grup de antigene protein-polizaharide și lipopolizaharide: antigen O somatic termostabil și antigene capsulare V, W termolabile. Virulența bacteriilor este asociată cu antigenul W. Produce factori de patogenitate: fibrinolizina, plasmacoagulaza, endotoxina, exotoxina, capsula, antigenele V, W.

Rezistenţă: sensibil la antibiotice (în special streptomicina), instabil la mediu la temperaturi ridicate.

Proprietăți patogene.

Are potențial patogen, suprimă funcții sistemul fagocitar, suprimă izbucnirea oxidativă în fagocite și se înmulțește nestingherit în ele. Factorii de patogenitate sunt controlați de trei clase de plasmide. În patogeneză, există trei etape principale - introducere limfogenă, bacteriemie, septicemie generalizată. Au adezine și invazine, proteine ​​cu greutate moleculară mică (inhibă factorii bactericidi) și enterotoxină. Unii factori sunt controlați de plasmidele de virulență.

Caracteristici clinice: Perioada de incubație este de la câteva ore până la 8 zile. Sunt locale – cutanat-bubonice, bubonice; diseminat extern - pulmonar primar, pulmonar secundar și intestinal; generalizate – septice primare, forme septice secundare ale ciumei. Limfadenopatie regională, enterocolită, artrită reactivă, spondilită, febră.

Epidemiologie: Ciuma este o zoonoză focală naturală clasică a animalelor sălbatice. Principalii purtători în natură sunt marmotele și gopher, iar în mediile urbane - șobolanii. Agentul patogen este transmis de puricii de animale care pot infecta oamenii.

Imunitate: celular-umoral, limitat ca durată și intensitate.

Diagnosticul microbiologic:

Examen bacterioscopic. Frotiurile sunt preparate din materialul de testat, colorate cu Gram și o soluție apoasă de albastru de metilen. Bacteriile ciumei sunt baghete gram-negative, de formă ovoidă Cercetări bacteriologice. Materialul de testat este inoculat pe plăci de agar nutritiv. Culturile sunt incubate la 25C. Examinarea inițială a culturilor se efectuează după 10 ore. În acest moment, apar colonii care sunt formate din forme R virulente. Bacteriile slabe și avirulente formează colonii în formă S. Identificarea unei culturi pure se realizează prin morfologia celulelor bacteriene, modele de creștere, proprietăți antigenice și biochimice, sensibilitate la un fag specific și biotest.

Bacteriile formează o peliculă pe bulion; Multe zaharuri sunt fermentate până la acid, indolul nu se formează și gelatina nu este lichefiată. Conțin un antigen somatic termostabil de grup și un antigen capsular termolabil specific.

Biotest. Se efectuează pentru a izola o cultură pură din material contaminat cu microfloră străină. Cele mai sensibile animale de laborator sunt cobaii, cărora li se injectează materialul subcutanat. Materialul se administrează intraperitoneal dacă nu este contaminat cu alte bacterii. După moartea animalelor, se observă modificări patologice ale organelor și se efectuează un examen bacteriologic

Metode expres de diagnostic de laborator:

2.RPGA - pentru a detecta antigenele bacteriene din material folosind ser anti-ciumă standard, ai cărui anticorpi sunt încărcați pe globulele roșii.

Tratament: antibiotice – streptomicina, tetracicline.

Prevenire: prevenire specifică - vaccin viu atenuat împotriva ciumei EV. Există un vaccin comprimat uscat pentru uz oral. Pentru a evalua imunitatea la ciumă (postinfecțioasă naturală și vaccin), se poate folosi un test de alergie intradermică cu pestină.

Bacteriofag ciuma– la identificarea Y.pestis.

Vaccin împotriva ciumei uscate - cultura vie uscată a tulpinii de vaccin Y. pestis EV, utilizată pentru prevenirea ciumei.

Microbiologia dizenteriei

Dizenteria este o boală infecțioasă caracterizată prin intoxicație generală a corpului, diaree și o leziune particulară a membranei mucoase a intestinului gros. Este una dintre cele mai frecvente boli intestinale acute din lume. Boala a fost cunoscută din cele mai vechi timpuri sub numele de „diaree cu sânge”, dar natura ei s-a dovedit a fi diferită. În 1875, omul de știință rus F.A. Lesh a izolat o amibă de la un pacient cu diaree cu sânge. Entamoeba histolytica, în următorii 15 ani s-a stabilit independența acestei boli, pentru care s-a păstrat denumirea de amebiază.

Agenții cauzali ai dizenteriei propriu-zise sunt un grup mare de bacterii similare biologic, unite în gen Shigella. Agentul patogen a fost descoperit pentru prima dată în 1888 de A. Chantemes și F. Vidal; în 1891 a fost descrisă de A.V.Grigoriev, iar în 1898 K. Shiga, folosind serul obţinut de la un pacient, a identificat agentul patogen la 34 de pacienţi cu dizenterie, dovedind în final rolul etiologic al acestei bacterii. Cu toate acestea, în anii următori, au fost descoperiți și alți agenți cauzali ai dizenteriei: în 1900 - de S. Flexner, în 1915 - de K. Sonne, în 1917 - de K. Stutzer și K. Schmitz, în 1932 - de J. Boyd, în 1934 - D. Mare, în 1943 - A. Sax. În prezent genul Shigella include mai mult de 40 de serotipuri. Toate acestea sunt baghete gram-negative scurte, nemotile, care nu formează spori sau capsule, care cresc bine pe medii nutritive obișnuite și nu cresc pe medii de foame cu citrat sau malonat ca unică sursă de carbon; nu formează H2S, nu au urează; reacția Voges–Proskauer este negativă; glucoza și alți carbohidrați sunt fermentați pentru a forma acid fără gaz (cu excepția unor biotipuri Shigella flexneri: S. manchesterȘi S. newcastle); De regulă, nu fermentează lactoza (cu excepția Shigella Sonne), adonitol, salicină și inozitol, nu lichefiază gelatina, de obicei formează catalază și nu au lizin decarboxilază și fenilalanin deaminază. Conținutul de G + C în ADN este de 49 – 53 mol%. Shigella sunt anaerobi facultativi, temperatura optimă pentru creștere este de 37 °C, nu cresc la temperaturi peste 45 °C, pH-ul optim al mediului este de 6,7 - 7,2. Coloniile pe medii dense sunt rotunde, convexe, translucide; în caz de disociere, se formează colonii rugoase în formă de R. Creșterea pe MPB sub formă de turbiditate uniformă, formele aspre formează un sediment. Culturile proaspăt izolate de Shigella Sonne formează de obicei colonii de două tipuri: mici, rotunde, convexe (faza I), plate mari (faza II). Natura coloniei depinde de prezența (faza I) sau absența (faza II) a unei plasmide cu o greutate moleculară de 120 MD, ceea ce determină și virulența Shigella Sonne.

Clasificarea internațională Shigella este construită ținând cont de caracteristicile biochimice ale acestora (manitol-nefermentant, manitol-fermentant, Shigella cu fermentație lentă a lactozei) și caracteristicile structurii antigenice (Tabelul 37).

La Shigella s-au găsit antigene O cu specificitate diferită: comune familiei Enterobacteriaceae, generic, specific de specie, grup și tip, precum și antigenele K; Nu au N-antigene.

Tabelul 37

Clasificarea genului de bacterii Shigella

Clasificarea ia în considerare doar antigenele O-specifice de grup și tip. În conformitate cu aceste caracteristici, genul Shigella este împărțit în 4 subgrupe sau 4 specii și include 44 de serotipuri. În subgrupa A (tip Shigella dysenteriae) a inclus Shigella, care nu fermentează manitolul. Specia cuprinde 12 serotipuri (1 – 12). Fiecare serotip are propriul său antigen de tip specific; legăturile antigenice între serotipuri, precum și cu alte specii de Shigella, sunt slab exprimate. La subgrupa B (tip Shigella flexneri) includ Shigella, care fermentează de obicei manitolul. Shigella acestei specii sunt înrudite serologic între ele: conțin antigene specifice tipului (I – VI), prin care sunt împărțite în serotipuri (1 – 6) și antigene de grup, care se găsesc în compoziții diferite în fiecare serotip și prin care serotipurile se împart în subserotipuri. În plus, această specie include două variante antigenice - X și Y, care nu au antigene tipice; ele diferă în seturi de antigene de grup. Serotip S. flexneri 6 nu are subserotipuri, dar este împărțit în 3 tipuri biochimice în funcție de caracteristicile fermentației glucozei, manitolului și dulcitolului (Tabelul 38).

Tabelul 38

Biotipuri S. flexneri 6

Notă. K – fermentație cu formare numai de acid; CG – fermentație cu formare de acid și gaz; (–) – fără fermentație.

Antigenul lipopolizaharidic O din toate Shigella Flexner conține antigenul de grup 3, 4 ca principală structură primară, sinteza sa este controlată de o genă cromozomială localizată în apropierea locului his. Antigenele specifice de tip I, II, IV, V și antigenele de grup 6, 7, 8 sunt rezultatul modificării antigenelor 3, 4 (glicozilare sau acetilare) și sunt determinate de genele profagelor de conversie corespunzătoare, locul de integrare. dintre care se află în regiunea lac - pro a cromozomului Shigella.

A apărut în țară în anii 80. secolul XX și un nou subserotip care a devenit larg răspândit S. flexneri 4(IV:7, 8) diferă de subserotipul 4a (IV:3, 4) și 4b (IV:3, 4, 6), a apărut dintr-o variantă S. flexneri Y(IV:3, 4) din cauza lizogenizării prin profagile sale de conversie IV și 7, 8.

La subgrupa C (tip Shigella boydii) includ Shigella, care fermentează de obicei manitolul. Membrii grupului sunt diferiți serologic unul de celălalt. Conexiunile antigenice din cadrul speciei sunt slab exprimate. Specia include 18 serotipuri (1 – 18), fiecare dintre ele având propriul său antigen de tip principal.

În subgrupa D (tip Shigella sonnei) au inclus Shigella, care fermentează de obicei manitolul și sunt capabile să fermenteze lent (după 24 de ore de incubație și mai târziu) lactoza și zaharoza. Vedere S. sonnei include un serotip, dar coloniile de faze I și II au propriile lor antigene specifice tipului. Pentru clasificarea intraspecifică a Shigella Sonne au fost propuse două metode:

1) împărțirea lor în 14 tipuri și subtipuri biochimice în funcție de capacitatea lor de a fermenta maltoză, ramnoză și xiloză; 2) împărțirea în tipuri de fagi în funcție de sensibilitatea la un set de fagi corespunzători.

Aceste metode de tipare au în principal semnificație epidemiologică. În plus, Shigella Sonne și Shigella Flexner sunt tipărite în același scop pe baza capacității lor de a sintetiza colicine specifice (colicinogenotyping) și sensibilitatea la colicine cunoscute (colicinotyping). Pentru a determina tipul de colicine produse de Shigella, J. Abbott și R. Chenon au propus seturi de tulpini standard și indicator de Shigella și pentru a determina sensibilitatea Shigella la tipuri cunoscute de colicine, un set de tulpini colicinogene standard de P. Frederick. este folosit.

Rezistenţă. Shigella are o rezistență destul de mare la factorii de mediu. Aceștia supraviețuiesc pe țesături de bumbac și hârtie până la 30 - 36 de zile, în fecale uscate - până la 4 - 5 luni, în sol - până la 3 - 4 luni, în apă - de la 0,5 la 3 luni, pe fructe și în legume – până la 2 săptămâni, în lapte și produse lactate – până la câteva săptămâni; la o temperatură de 60 °C mor în 15 – 20 de minute. Sensibil la soluții de cloramină, clor activ și alți dezinfectanți.

Factori de patogenitate. Cea mai importantă proprietate biologică a Shigella, care le determină patogenitatea, este capacitatea de a invada celulele epiteliale, de a se multiplica în ele și de a provoca moartea acestora. Acest efect poate fi detectat utilizând un test keratoconjunctival (introducerea unei bucle a unei culturi Shigella (2-3 miliarde de bacterii) sub pleoapa inferioară a cobaiului determină dezvoltarea keratoconjunctivitei seros-purulente), precum și prin infectarea culturilor celulare ( efect citotoxic) sau embrioni de pui (moartea lor) sau intranazal la șoarecii albi (dezvoltarea pneumoniei). Principalii factori de patogenitate ai Shigella pot fi împărțiți în trei grupuri:

1) factori care determină interacțiunea cu epiteliul membranei mucoase;

2) factori care asigură rezistența la mecanismele umorale și celulare de apărare ale macroorganismului și capacitatea Shigella de a se reproduce în celulele sale;

3) capacitatea de a produce toxine și produse toxice care determină dezvoltarea procesului patologic în sine.

Prima grupă include factori de adeziune și colonizare: rolul lor este jucat de pili, proteinele membranei exterioare și LPS. Adeziunea si colonizarea sunt favorizate de enzimele care distrug mucusul - neuraminidaza, hialuronidaza, mucinaza. Al doilea grup include factori de invazie care favorizează pătrunderea Shigella în enterocite și reproducerea lor în ele și în macrofage cu manifestarea simultană a unui efect citotoxic și (sau) enterotoxic. Aceste proprietăți sunt controlate de genele unei plasmide cu o greutate moleculară de 140 MD (codifică sinteza proteinelor membranei exterioare care provoacă invazia) și genele cromozomiale ale Shigella: kcp A (provoacă keratoconjunctivită), cyt (responsabilă de distrugerea celulelor). ), precum și alte gene neidentificate încă. Protecția Shigella de fagocitoză este asigurată de antigenul K de suprafață, antigenele 3, 4 și lipopolizaharide. În plus, lipida A a endotoxinei Shigella are un efect imunosupresor: suprimă activitatea celulelor memoriei imune.

Al treilea grup de factori de patogenitate include endotoxina și două tipuri de exotoxine găsite în Shigella - Shiga și exotoxine asemănătoare Shiga (SLT-I și SLT-II), ale căror proprietăți citotoxice sunt cele mai pronunțate în S. dysenteriae 1. Shiga și toxine asemănătoare Shiga au fost găsite și în alte serotipuri S. dysenteriae, se formează și ele S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC și ceva salmonella. Sinteza acestor toxine este controlată de genele toxice ale fagilor convertitori. Enterotoxinele de tip LT se găsesc în Shigella Flexner, Sonne și Boyd. Sinteza lor LT este controlată de genele plasmide. Enterotoxina stimulează activitatea adenilat-ciclazei și este responsabilă pentru dezvoltarea diareei. Toxina Shiga, sau neurotoxina, nu reacționează cu sistemul de adenil-ciclază, dar are un efect citotoxic direct. Toxinele Shiga și Shiga-like (SLT-I și SLT-II) au o greutate moleculară de 70 kDa și constau din subunități A și B (cea din urmă dintre 5 subunități mici identice). Receptorul pentru toxine este un glicolipid al membranei celulare.

Virulența Shigella Sonne depinde și de o plasmidă cu o greutate moleculară de 120 MD. Controlează sinteza a aproximativ 40 de polipeptide ale membranei exterioare, șapte dintre ele fiind asociate cu virulență. Shigella Sonne, având această plasmidă, formează colonii de fază I și sunt virulente. Culturile care au pierdut plasmida formează colonii de fază II și sunt lipsite de virulență. Plasmide cu o greutate moleculară de 120–140 MD au fost găsite la Shigella Flexner și Boyd. Lipopolizaharida Shigella este o endotoxină puternică.

Caracteristicile epidemiologiei. Sursa de infecție este doar oamenii. Niciun animal din natură nu suferă de dizenterie. În condiții experimentale, dizenteria poate fi reprodusă numai la maimuțe. Metoda de infectare este fecal-oral. Căi de transmitere: apă (predominanta pentru Shigella Flexner), alimente, în special lapte și produse lactate (calea predominantă de infecție pentru Shigella Sonne) și contact cu gospodăria, în special pentru specie S. dysenteriae.

O caracteristică a epidemiologiei dizenteriei este o modificare a compoziției speciilor a agenților patogeni, precum și a biotipurilor Sonne și a serotipurilor Flexner în anumite regiuni. De exemplu, până la sfârșitul anilor 30. secolul XX la o cotă S. dysenteriae 1 a reprezentat până la 30–40% din toate cazurile de dizenterie, iar apoi acest serotip a început să apară din ce în ce mai rar și aproape a dispărut. Cu toate acestea, în anii 1960 - 1980. S. dysenteriae a reapărut pe arena istorică și a provocat o serie de epidemii care au dus la formarea a trei focare hiperendemice ale acesteia - în America Centrală, Africa Centrală și Asia de Sud (India, Pakistan, Bangladesh și alte țări). Motivele modificării compoziției speciilor agenților patogeni de dizenterie sunt probabil asociate cu modificări ale imunității colective și modificări ale proprietăților bacteriilor de dizenterie. În special, întoarcerea S. dysenteriae 1 iar distribuția sa pe scară largă, care a determinat formarea de focare hiperendemice de dizenterie, este asociată cu achiziționarea de plasmide care au cauzat multiple rezistenta la medicamenteși virulență crescută.

Caracteristicile patogenezei și clinicii. Perioada de incubație pentru dizenterie este de 2-5 zile, uneori mai puțin de o zi. Formare focus infectiosîn membrana mucoasă a părții descendente a intestinului gros (sigmoid și rect), unde pătrunde agentul patogen de dizenterie, este de natură ciclică: aderența, colonizarea, introducerea Shigella în citoplasma enterocitelor, reproducerea lor intracelulară, distrugerea și respingerea. a celulelor epiteliale, eliberarea agenților patogeni în lumenul intestinal; după aceasta, începe următorul ciclu - aderență, colonizare etc. Intensitatea ciclurilor depinde de concentrația agenților patogeni din stratul parietal al membranei mucoase. Ca urmare a ciclurilor repetate, focarul inflamator crește, ulcerele rezultate, conectându-se, cresc expunerea peretele intestinal, în urma cărora în scaun apar sânge, bulgări mucopurulenți și leucocite polimorfonucleare. Citotoxinele (SLT-I și SLT-II) provoacă distrugerea celulelor, enterotoxina – diaree, endotoxine – intoxicație generală. Tabloul clinic al dizenteriei este determinat în mare măsură de ce tip de exotoxină este produsă într-o măsură mai mare de agentul patogen, de gradul efectului său alergenic și de starea imunitară a organismului. Cu toate acestea, multe întrebări privind patogeneza dizenteriei rămân neclare, în special: caracteristicile cursului dizenteriei la copiii primilor doi ani de viață, motivele tranziției dizenteriei acute la cronice, semnificația sensibilizării, mecanismul. a imunității locale a mucoasei intestinale etc. Cele mai tipice manifestări clinice ale dizenteriei sunt diareea, impulsul frecvent: în cazuri severe, de până la 50 sau mai multe ori pe zi, tenesmul (spasme dureroase ale rectului) și intoxicația generală. Natura scaunului este determinată de gradul de deteriorare a intestinului gros. Cea mai severă dizenterie este cauzată de S. dysenteriae 1, cel mai ușor - dizenteria Sonne.

Imunitatea post-infecțioasă. După cum au arătat observațiile maimuțelor, după ce suferă de dizenterie, rămâne imunitatea puternică și destul de de lungă durată. Este cauzată de anticorpi antimicrobieni, antitoxine, activitate crescută a macrofagelor și limfocitelor T. Imunitatea locală a mucoasei intestinale, mediată de IgAs, joacă un rol semnificativ. Cu toate acestea, imunitatea este specifică tipului; nu are loc o imunitate încrucișată puternică.

Diagnosticul de laborator. Metoda principală este bacteriologică. Materialul pentru cercetare este fecalele. Schema de izolare a agentilor patogeni: inoculare pe medii de diagnostic diferential Endo si Ploskirev (in paralel pe mediu de imbogatire urmata de inoculare pe medii Endo si Ploskirev) pentru izolarea coloniilor izolate, obtinerea unei culturi pure, studierea proprietatilor biochimice a acesteia si, tinand cont de acestea din urma, identificarea folosind seruri aglutinante de diagnostic polivalente și monovalente. Sunt produse următoarele seruri comerciale.

1. La Shigella, care nu fermentează manitolul:

La S. dysenteriae 1Și 2

La S. dysenteriae 3 – 7(polivalent și monovalent),

La S. dysenteriae 8 – 12(polivalent și monovalent).

2. Pentru manitol care fermenta Shigella:

la antigeni tipici S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

pentru a grupa antigenele S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8- polivalent,

la antigeni S. boydii 1 – 18(polivalent și monovalent), la antigeni S. sonnei faza I, faza a II-a,

la antigeni S. flexneri I–VI+ S. sonnei– polivalent.

Pentru a identifica rapid Shigella, se recomandă următoarea metodă: o colonie suspectă (lactoză negativă pe mediu Endo) este subcultivată pe mediu TSI (engleză. fier de zahăr triplu) – agar cu trei zaharuri (glucoza, lactoza, zaharoza) cu fier pentru determinarea productiei de H2S; sau într-un mediu care conține glucoză, lactoză, zaharoză, fier și uree. Orice organism care descompune ureea după 4 până la 6 ore de incubație este cel mai probabil un membru al genului Proteusși poate fi exclus. Un microorganism care produce H2S sau are o articulație formatoare de urază sau acid (fermente lactoză sau zaharoză) poate fi exclus, deși tulpinile producătoare de H2S ar trebui investigate ca posibili membri ai genului. Salmonella. În toate celelalte cazuri, cultura crescută pe aceste medii trebuie examinată și, dacă fermentează glucoza (schimbarea culorii coloanei), izolată în forma sa pură. În același timp, poate fi studiat într-o reacție de aglutinare a sticlei cu antiseruri adecvate genului Shigella. Dacă este necesar, se efectuează alte teste biochimice pentru a verifica apartenența la gen. Shigellași, de asemenea, studiază mobilitatea.

Pentru a detecta antigenele din sânge (inclusiv ca parte a CEC), urină și fecale, pot fi utilizate următoarele metode: RPGA, RSK, reacție de coaglutinare (în urină și fecale), IFM, RAGA (în serul sanguin). Aceste metode sunt extrem de eficiente, specifice și potrivite pentru diagnosticul precoce.

Pentru diagnosticul serologic se pot utiliza: RPHA cu diagnosticarea eritrocitară corespunzătoare, metoda imunofluorescenței (modificare indirectă), metoda Coombs (determinarea titrului anticorpilor incompleti). Un test de alergie cu dizenterină (o soluție de fracții proteice din Shigella Flexner și Sonne) are, de asemenea, valoare diagnostică. Reacția se ia în considerare după 24 de ore.Se consideră pozitivă în prezența hiperemiei și se infiltrează cu diametrul de 10–20 mm.

Tratament. Atenția principală se acordă restabilirii metabolismului apă-sare normal, alimentație rațională, detoxifiere, terapie rațională cu antibiotice (ținând cont de sensibilitatea agentului patogen la antibiotice). Un efect bun este obținut prin utilizarea timpurie a unui bacteriofag polivalent de dizenterie, în special tablete cu un strat de pectină, care protejează fagul de acțiunea sucului gastric HCl; În intestinul subțire, pectina se dizolvă, fagii sunt eliberați și își exercită efectul. În scopuri preventive, fagul trebuie administrat cel puțin o dată la trei zile (perioada de supraviețuire a acestuia în intestin).

Problema prevenirii specifice. Pentru a crea imunitate artificială împotriva dizenteriei, s-au folosit diferite vaccinuri: din bacterii ucise, substanțe chimice, alcool, dar toate s-au dovedit a fi ineficiente și au fost întrerupte. Vaccinurile împotriva dizenteriei Flexner au fost create din Shigella Flexner viu (mutant, dependent de streptomicina); vaccinuri ribozomale, dar nici ele nu au găsit o utilizare pe scară largă. Prin urmare, problema prevenirii specifice a dizenteriei rămâne nerezolvată. Principala modalitate de combatere a dizenteriei este îmbunătățirea sistemului de alimentare cu apă și canalizare, asigurarea unor regimuri sanitare și igienice stricte în întreprinderile alimentare, în special în industria lactatelor, în instituțiile de îngrijire a copilului, locurile publice și în menținerea igienei personale.

UDC 616.935-074(047)

A.M.Sadykova

Universitatea Națională de Medicină din Kazahstan

numit după S.D. Asfendiyarov, Almaty

Departamentul de Boli Infecțioase și Tropicale

Diagnosticul de încredere al dizenteriei este una dintre sarcinile urgente ale supravegherii AEI. Un diagnostic precis al dizenteriei bacteriene are important pentru corectă şi tratament în timp util pacient și să implementeze măsurile antiepidemice necesare. Datele prezentate în revizuire arată că, având în vedere prevalența pe scară largă a dizenteriei, lipsa de sensibilitate și apariție târzie Având în vedere rezultatele pozitive ale multor metode de diagnosticare, este recomandabil să se dezvolte potențialul de diagnostic pentru detectarea acestei infecții.

Cuvinte cheie: diagnostic, dizenterie, metoda limfocitelor de legare a antigenului.

Recunoașterea infecției cu Shigella în practica clinică întâmpină dificultăți semnificative din cauza factorilor obiectivi, care includ patomorfoza clinică a dizenteriei, o creștere a numărului forme atipice boli, existența unui număr semnificativ de boli de natură infecțioasă și neinfecțioasă care au manifestări clinice asemănătoare dizenteriei. În jumătate din cazuri, diagnosticul de „dizenterie clinică” ascunde boli nerecunoscute de altă etiologie.

Cele mai mari dificultăți se confruntă cu medicul în timpul examinării inițiale a pacientului înainte de a primi rezultatele metodelor de diagnostic paraclinic. Recunoașterea dizenteriei este, de asemenea, dificilă în prezență boli concomitente tract gastrointestinal.

De la începutul utilizării diagnosticului etiologic de laborator al dizenteriei, au fost propuse și testate destul de multe metode. Există multe clasificări ale metodelor de diagnostic etiologic al infecțiilor. Metodologic, clasificarea propusă de B.V. este cea mai justificată. Pedepsitor. În ceea ce privește diagnosticul dizenteriei, principiile clasificării bazate pe metodologie au fost utilizate de către B.V. Karalnik, N.M. Nurkina, B.K. Erkinbekova..

Metodele de laborator pentru diagnosticarea dizenteriei includ bacteriologice (izolarea și identificarea agentului patogen) și imunologice. Acestea din urmă includ metode imunologice in vivo (testul de alergie Tsuverkalov) și in vitro. Metodele imunologice in vitro au un avantaj incontestabil față de testul Tsuverkalov - nu sunt asociate cu introducerea de antigene străine în organism.

Majoritatea cercetătorilor încă mai cred că cercetarea bacteriologică include izolarea cultură pură agentul cauzal al bolii cu identificarea sa ulterioară prin caracteristicile morfologice, biochimice și antigenice este cea mai fiabilă metodă de diagnosticare a infecției cu shigeloză. Frecvența izolării Shigella din fecalele pacienților cu diagnostic clinic de „dizenterie acută”, conform diverșilor autori, variază de la 30,8% la 84,7% și chiar 91,1%. O astfel de gamă semnificativă între diferiți autori depinde nu numai de factorii obiectivi care influențează eficacitatea cercetării bacteriologice, ci și de minuțiozitatea diagnosticului (sau excluderii) „dizenteriei clinice”. Eficacitatea cercetării bacteriologice este influențată de acestea factori obiectivi, ca caracteristici ale evoluției bolii, metoda de colectare și livrare a materialului în laborator, calitatea mediilor de cultură, calificarea personalului, momentul contactului pacientului cu personalul medical, utilizarea antimicrobieneînainte de a lua material pentru cercetare. Cantitativ examen microbiologic excrementele din dizenteria acută arată că, în orice formă clinică de infecție, cea mai masivă eliberare de agenți patogeni are loc în primele zile ale bolii, iar începând cu a 6-a și, mai ales din a 10-a zi de boală, concentrația Shigella în fecale. scade semnificativ. T.A. Avdeeva a constatat că conținutul scăzut de Shigella și predominanța accentuată a microorganismelor nepatogene în fecale exclud practic posibilitatea detectării bacteriologice a bacteriilor de dizenterie.

Se știe că confirmarea bacteriologică a infecției cu Shigella este cel mai adesea posibilă atunci când se examinează pacienții tocmai în primele zile ale bolii - coprocultura agentului patogen în marea majoritate a cazurilor este mai întâi izolată în timpul primei examinări. Rezultatele pozitive ale examenului bacteriologic se observă numai în primele 3 zile ale bolii la 45–49% dintre pacienți, în primele 7 zile – la 75%. Tillett și Thomas consideră, de asemenea, perioada de examinare a pacienților ca fiind un factor important care determină eficacitatea metodei bacteriologice de diagnosticare a dizenteriei. Potrivit lui T.A. Avdeeva, în primele zile de boală, cea mai intensă eliberare a agentului patogen se observă în dizenteria Sonne, mai puțin intensă în dizenteria Flexner și cea mai puțină în dizenteria Flexner VI; în stadiile ulterioare ale bolii, o concentrație mare persistă cel mai îndelungat timp în dizenteria Flexner, pentru o perioadă mai scurtă de timp - Shigella Sonne, și pentru cel mai puțin timp - Shigella Flexner VI.

Astfel, deși examinarea bacteriologică a scaunului este cea mai fiabilă metodă de diagnosticare a infecției cu shigeloză, dezavantajele semnificative sunt limitările eficacității sale enumerate mai sus. De asemenea, este important de subliniat limitările diagnosticului precoce prin metoda bacteriologică, în care durata analizei este de 3-4 zile. În legătură cu aceste circumstanțe, utilizarea altor metode de diagnostic de laborator are o importanță practică deosebită. O altă metodă microbiologică de diagnosticare a dizenteriei se bazează și pe detectarea Shigella vie. Aceasta este o reacție de creștere a titrului fagilor (PTR), bazată pe capacitatea fagilor specifici de a se multiplica exclusiv în prezența microorganismelor vii omoloage. O creștere a titrului fagului indicator indică prezența microbilor corespunzători în mediu. Testarea valorii diagnostice a RSF pentru infecția cu Shigella a fost efectuată de B.I. Khaimzon, T.S. Vilkomirskaya. RSF are o sensibilitate destul de mare. Comparaţie concentratii minime Shigella în fecale, capturată prin metoda bacteriologică (12,5 mii bacterii în 1 ml) și RSF (3,0 - 6,2 mii), indică superioritatea RSF.

Deoarece frecvența rezultatelor pozitive RNF depinde direct de gradul de contaminare a fecalelor, utilizarea metodei dă, de asemenea, cel mai mare efect în primele zile ale bolii și în formele mai severe ale procesului infecțios. Cu toate acestea, sensibilitatea mai mare a metodei determină avantajele sale deosebite față de examenul bacteriologic în stadiile târzii ale bolii, precum și la examinarea pacienților cu forme ușoare, asimptomatice și subclinice de infecție, cu o concentrație scăzută a agentului patogen în fecale. RSF este, de asemenea, utilizat atunci când se examinează pacienții care au luat medicamente antibacteriene, deoarece acestea din urmă reduc drastic frecvența rezultatelor pozitive ale metodei de cercetare bacteriologică, dar au un efect mult mai mic asupra eficacității RSF. Sensibilitatea RSF nu este absolută din cauza existenței tulpinilor de Shigella rezistente la fagi: proporția tulpinilor rezistente la fagi poate varia foarte mult - de la 1% la 34,5%.

Marele avantaj al RSF este specificitatea sa ridicată. În timpul examinărilor persoanelor sănătoase, precum și a pacienților cu boli infecțioase de alte etiologii, rezultatele reacțiilor pozitive au fost observate doar în 1,5% din cazuri. RSF este o metodă suplimentară valoroasă pentru diagnosticarea infecției cu Shigella. Dar astăzi această metodă este rar folosită din cauza complexității sale tehnice. Alte metode sunt imunologice. Cu ajutorul lor, se înregistrează un răspuns imun specific patogenului sau se determină antigenele patogenului folosind metode imunologice.

Datorită severității proceselor alergice infecțioase specifice în timpul infecției cu shigeloză, au fost utilizate inițial metode de diagnostic alergologic, care au inclus testul intradermic de alergie cu dizenterină (IDT). Medicamentul „disenterin”, care este un alergen specific Shigella, lipsit de substanțe toxice, a fost obținut de D.A. Tsuverkalov și a fost folosit pentru prima dată într-un cadru clinic la efectuarea unui test intradermic de către L.K. Korovitsky în 1954. Potrivit lui E.V. Goliusova și M.Z. Trokhimenko, în prezența dizenteriei acute anterioare sau a bolilor alergice însoțitoare cu manifestări ale pielii (eczeme, urticarie etc.). rezultatele pozitive ale VPD sunt observate mult mai des (paraalergie). Analiza rezultatelor VPD în perioade diferite dizenteria acută arată că o alergie specifică apare deja în primele zile ale bolii, atinge severitatea maximă în a 7-a – a 15-a zi și apoi dispare treptat. Rezultate pozitive de reacție au fost obținute la examinarea persoanelor sănătoase cu vârsta cuprinsă între 16 și 60 de ani în 15-20% din cazuri și la persoane cu vârsta între 3 și 7 ani – în 12,5% din cazuri. Chiar mai des, rezultate pozitive nespecifice ale VPD au fost observate la pacienții cu boli gastrointestinale - în 20-36% din cazuri. Introducerea alergenului a fost însoțită de dezvoltarea unei reacții locale la 35,5 - 43,0% dintre pacienții cu salmoneloză, la 74 - 87% dintre pacienții cu coli-0124-enterocolită. Un argument serios împotriva utilizării pe scară largă a VPD în practica clinică a fost efectul său alergenic asupra organismului. Având în vedere cele de mai sus, putem spune că această metodă nu este foarte specifică. Nici testul lui Tsuverkalov nu este specific pentru specie. Rezultatele reacțiilor pozitive au fost la fel de frecvente în diferite forme etiologice de dizenterie.

Pe lângă VPD, s-au folosit și alte reacții de diagnosticare, cu diferite grade de validitate, considerate alergice, de exemplu, reacția de leucocitoliză alergenică (ALC), a cărei esență a fost deteriorarea specifică sau distrugerea completă a neutrofilelor sensibilizate activ sau pasiv la contactul cu antigenul corespunzător. Dar această reacție nu poate fi atribuită metodelor de diagnosticare timpurie, deoarece frecvența maximă a rezultatelor pozitive a fost observată în zilele 6-9 ale bolii și s-a ridicat la 69%. De asemenea, a fost propusă reacția alergenă leucemie (ALE). Se bazează pe capacitatea leucocitelor unui organism sensibilizat de a se aglomera atunci când sunt expuse la un alergen omolog (disenterin). Din cauza lipsei de dovezi a mecanismelor exacte ale unor astfel de teste și a corespondenței insuficiente a rezultatelor lor cu etiologia bolii, aceste metode, după o scurtă perioadă de utilizare în URSS, nu s-au răspândit ulterior.

Detectarea antigenelor Shigella în organism este echivalentă din punct de vedere diagnostic cu izolarea agentului patogen. Principalele avantaje ale metodelor de detectare a antigenelor față de cercetările bacteriologice care le justifică aplicare clinică, este capacitatea de a identifica nu numai microorganismele viabile, ci și cele moarte și chiar distruse, care dobândește sens special la examinarea pacienților în timpul sau la scurt timp după un curs de terapie antibacteriană.

Una dintre cele mai bune metode de diagnosticare expresă a dizenteriei a fost examinarea prin imunofluorescență a scaunului (metoda Coons). Esența metodei este de a detecta Shigella prin tratarea materialului de testat cu ser care conține anticorpi specifici marcați cu fluorocromi. Combinația de anticorpi marcați cu antigeni omologi este însoțită de o strălucire specifică a complexelor, detectată la un microscop fluorescent. În practică, sunt utilizate două variante principale ale metodei Koons: directă, în care se utilizează ser care conține anticorpi marcați împotriva antigenelor Shigella și indirectă (în două etape), folosind ser nemarcat cu fluorocrom (sau fracțiunea globulină a anti- ser Shigella) în prima etapă. În a doua etapă, un ser marcat cu fluorocrom este utilizat împotriva globulinelor serului anti-Shigella utilizat în prima etapă. Un studiu comparativ al valorii diagnostice a două variante ale metodei imunofluorescente nu a evidențiat diferențe mari în specificitatea și sensibilitatea lor. În practica clinică, utilizarea acestei metode este cea mai eficientă atunci când se examinează pacienții în întâlniri timpurii boală, precum și în formele mai severe de infecție. Un dezavantaj semnificativ al metodei de imunofluorescență este lipsa ei de specificitate. Cel mai important motiv Specificitatea insuficientă a reacției de imunofluorescență este afinitatea antigenică a Enterobacteriaceae de diferite genuri. Prin urmare, această metodă este considerată un ghid pentru recunoașterea infecției cu Shigella.

Diverse reacții sunt utilizate pentru a detecta antigenele Shigella fără microscopie. Aceste metode fac posibilă detectarea antigenelor patogeni în fecalele a 76,5 - 96,0% dintre pacienții cu dizenterie confirmată bacteriologic, ceea ce indică o sensibilitate destul de ridicată. Cel mai indicat este să folosiți aceste metode tocmai în etapele ulterioare ale bolii. Majoritatea autorilor apreciază specificitatea acestor metode de diagnostic destul de ridicat. Cu toate acestea, F.M. Ivanov, care a folosit RSC pentru a detecta antigenele Shigella în fecale, a obținut rezultate pozitive la examinarea persoanelor sănătoase și a pacienților cu infecții intestinale de alte etiologii în 13,6% din cazuri. Potrivit autorului, utilizarea metodei este mai adecvată pentru identificarea antigenelor specifice în urină, deoarece frecvența reacțiilor pozitive nespecifice în ultimul caz este mult mai mică. Utilizarea diferitelor metode de cercetare face posibilă detectarea antigenelor Shigella în urină a marii majorități a pacienților cu dizenterie confirmată bacteriologic. Dinamica excreției antigenelor în urină are unele particularități - detectarea substanțelor antigenice în unele cazuri este posibilă deja din primele zile ale bolii, dar cu cea mai mare frecvență și consistență este posibilă în a 10-a - a 15-a zi și chiar mai tarziu. Potrivit lui B.A. Godovanny și colab., proporția rezultatelor pozitive pentru detectarea antigenelor Shigella în urină (SAC) după a 10-a zi a bolii este de 77% (cifra corespunzătoare pentru examinarea bacteriologică a scaunului este de 47%). În legătură cu această circumstanță, testarea urinei pentru prezența antigenelor patogeni este o metodă suplimentară valoroasă pentru dizenterie, în primul rând în scopul diagnosticării tardive și retrospective.

Potrivit lui N.M. Nurkina, dacă imunoreactivul anticorp este obținut din seruri policlonale, sunt posibile rezultate pozitive în cazul în care antigenele înrudite sunt prezenți în probă. De exemplu, cu un diagnostic eritrocitar din ser foarte activ împotriva S.flexneri VI, este detectat și antigenul S.flexneri I-V, deoarece Shigella ambelor subspecii are un antigen de specie comun. Antigenii Shigella pot fi determinați în timpul perioadei de boală atât în ​​serul sanguin cât și în secreții.

Lee Won Ho și colab. S-a demonstrat că frecvența de depistare a antigenelor Shigella și concentrația acestora în sânge și urină sunt mai mari în primele zile ale bolii și că concentrația antigenelor detectate este mai mare în cazurile moderate de boală decât în ​​cele ușoare.

CM. Omirbayeva a propus o metodă de indicare a antigenului Shigella, bazată pe utilizarea eritrocitelor formalinizate ca absorbant pentru antigenele din extractul fecal studiat, urmată de aglutinarea cu ser imun. Evaluarea specificității acestei metode, în opinia noastră, necesită cercetări suplimentare, deoarece extractele fecale conțin cantități semnificative antigenii altor bacterii care nu sunt agentul cauzal al acestei boli intestinale.

O serie de cercetători propun imunotestul enzimatic ca metodă de diagnosticare rapidă a dizenteriei acute, care, conform multor autori, este considerată extrem de sensibilă și foarte specifică. În același timp, cel mai mult nivel inalt antigenul este detectat în zilele 1-4 ale bolii. În ciuda avantajelor evidente ale ELISA, care includ sensibilitatea ridicată, posibilitatea unei contabilități cantitative instrumentale stricte și ușurința instalării reacției, utilizarea pe scară largă a acestei metode este limitată din cauza necesității de echipamente speciale.

Pentru a spori sensibilitatea și specificitatea diferitelor metode serologice pentru detectarea antigenelor, se recomandă utilizarea de anticorpi monoclonali, fragmente de imunoglobuline, anticorpi sintetici, colorare cu argint LPS și alte îmbunătățiri tehnologice.

Adesea, nu este posibil să se detecteze antigenul unui agent infecțios chiar și atunci când se utilizează reacții foarte sensibile pentru a detecta antigenele patogene în substraturile biologice ale corpului, deoarece o parte semnificativă a substanțelor antigenice se găsește aparent în bioproba sub formă de complexe imune. in corp. La examinarea pacienților cu dizenterie acută confirmată bacteriologic, au fost observate rezultate pozitive ale determinării antigenului prin RSC, conform unor date, doar în 18% din cazuri.

TELEVIZOR. Remneva și colab. Ei propun să utilizeze ultrasunetele pentru a dezintegra complexele de anticorpi cu particulele patogene și apoi determina antigenul patogen din RSC la rece. Metoda a fost folosită pentru diagnosticarea dizenteriei; ca material de cercetare au fost folosite probe de urină de la pacienți cu infecții intestinale acute.

Utilizarea reacției de precipitare pentru a detecta antigenul în dizenteria acută nu este justificată din cauza sensibilității și specificității sale scăzute. Credem că specificitatea oricăror metode de indicare a antigenelor Shigella poate fi crescută semnificativ prin utilizarea anticorpilor monoclonali împotriva Shigella.

Reacția de coaglutinare este, de asemenea, una dintre metodele de diagnosticare rapidă a shigelozei, precum și antigenele agenților patogeni ai unui număr de alte infecții. În caz de shigeloză, antigenii patogeni pot fi determinați din primele zile ale bolii pe toată perioada acută, precum și în decurs de 1 - 2 săptămâni de la încetarea excreției bacteriene. Avantajele reacției de coaglutinare sunt ușurința realizării truselor de diagnostic, stabilirea reacției, rentabilitatea, viteza, sensibilitatea și specificitatea ridicată.

Când se efectuează diagnostice pentru a determina antigenele Shigella încă de la începutul bolii, este cel mai eficient, potrivit multor autori, să se examineze fecalele pacienților. Pe măsură ce boala progresează, capacitatea de a detecta antigenele Shigella în urină și salivă scade, deși aceștia se găsesc în fecale cu aproape aceeași frecvență ca la debutul bolii. Trebuie luat în considerare faptul că în primele 3-4 zile ale bolii, este oarecum mai eficient să se testeze fecalele pentru antigen în RPGA. În mijlocul bolii, RPHA și ARNb sunt la fel de eficiente, iar începând din a 7-a zi, ARNb este mai eficient în căutarea antigenului Shigella. Aceste caracteristici se datorează distrugerii treptate a celulelor Shigella și a antigenelor acestora din intestinele pacientului în cursul bolii. Antigenele Shigella excretate în urină au dimensiuni relativ mai mici decât antigenele din fecale. Prin urmare, este recomandabil să se examineze urina în RNAt. În urina femeilor, spre deosebire de urina bărbaților, din cauza probabilei contaminări fecale, antigenele Shigella sunt la fel de des detectate folosind RPHA și ARNb.

Deși antigenul este detectat mult mai des (94,5 - 100%) în acele probe de fecale din care Shigella poate fi izolată decât în ​​acele probe din care Shigella nu este izolată (61,8 - 75,8%), cu paralele bacteriologice și serologice (pentru antigen) în studiul probelor de fecale de la pacienții cu dizenterie, în general, shigella a fost izolată doar din 28,2 - 40,0% din probe, iar antigenul a fost detectat în 65,9 - 91,5% din probe. Este important de subliniat faptul că specificitatea de specie a antigenului detectat corespunde întotdeauna cu specificitatea anticorpilor serici, al căror titrul crește cât mai mult posibil în dinamică. Când se concentrează asupra unui titru de diagnostic condiționat al anticorpilor, uneori pot fi observate discrepanțe în specificitatea unor astfel de anticorpi și a antigenului detectat. Această discrepanță se datorează fiabilității diagnostice insuficiente a unei singure determinări a activității anticorpilor serici. În acest caz diagnosticul etiologic trebuie să se bazeze pe specificitatea antigenului detectat.

Metoda PCR pentru sarcina de a identifica direct semnele unui agent patogen este apropiată de metodele de indicare a antigenelor. Permite determinarea ADN-ului agentului patogen și se bazează pe principiul replicării naturale a ADN-ului, inclusiv derularea dublei helix ADN, divergența catenelor de ADN și adăugarea complementară a ambelor. Replicarea ADN-ului nu poate începe în niciun moment, ci numai în anumite blocuri de pornire - secțiuni scurte dublu catenare. Esența metodei este că prin marcarea cu astfel de blocuri o secțiune de ADN specifică doar pentru o anumită specie (dar nu și pentru alte specii), este posibil să se reproducă (amplifica) această secțiune particulară de mai multe ori. Sistemele de testare bazate pe principiul amplificării ADN-ului, în majoritatea cazurilor, fac posibilă detectarea bacteriilor și virușilor patogeni pentru oameni, chiar și în cazurile în care detectarea lor nu poate fi detectată prin alte metode. Specificitatea sistemelor de testare PCR (cu alegerea corectă a primerilor specifici taxonului, excluderea rezultatelor fals pozitive și absența inhibitorilor de amplificare în biotestele) permite, în principiu, evitarea problemelor asociate cu antigenele cu reacție încrucișată, asigurând astfel specificitate ridicată. Determinarea poate fi efectuată direct pe material clinic care conține un agent patogen viu. Dar, în ciuda faptului că sensibilitatea PCR poate atinge o limită posibilă din punct de vedere matematic (detecția a 1 copie a șablonului ADN), metoda nu este utilizată în practica de diagnosticare a shigelozei din cauza costului său relativ ridicat.

În practica clinică răspândită, cele mai răspândite dintre metodele de cercetare serologică sunt cele bazate pe determinarea nivelului și dinamicii anticorpilor serici la agentul cauzal suspectat al bolii.

Unii autori au determinat anticorpi la Shigella în coprofiltrați. Coproanticorpii apar mult mai devreme decât anticorpii serici. Activitatea anticorpilor atinge un maxim în zilele 9-12, iar în zilele 20-25, de obicei, nu sunt detectați. R. Laplane și colaboratorii sugerează că acest lucru se datorează distrugerii anticorpilor din intestin sub acțiunea enzimelor proteolitice. Coproanticorpii nu pot fi detectați la oamenii sănătoși.

W. Barksdale şi colab., T.N. Nikolaeva și colab. raportează o creștere a eficienței descifrării diagnosticului și identificării convalescenților prin determinarea simultană a serului și a coproanticorpilor.

Detectarea aglutininelor în titrurile diagnostice este posibilă cu dizenterie confirmată bacteriologic doar la 23,3% dintre pacienți. Sensibilitatea limitată a RA se manifestă și prin titruri insuficient de mari de aglutinine detectate cu ajutorul acesteia. Există dovezi care indică o sensibilitate inegală a RA în diferite forme etiologice de infecție cu shigeloză. Potrivit lui A.A. Klyuchareva, anticorpii cu un titru de 1: 200 și mai mare sunt detectați folosind RA numai la 8,3% dintre pacienții cu dizenterie Flexner și chiar mai rar în dizenteria Sonne. Rezultatele reacțiilor pozitive sunt nu numai mai des, ci și în titruri mai mari observate cu dizenteria Flexner I-V și Flexner VI decât cu dizenteria Sonne. Rezultatele pozitive ale RA apar de la sfârșitul primei săptămâni de boală și sunt cel mai adesea înregistrate în a doua sau a treia săptămână. Primele 10 zile ale bolii reprezintă 39,6% din toate rezultatele reacțiilor pozitive. Potrivit lui A.F. Podlevsky și colab., aglutininele în titrurile diagnostice sunt detectate în prima săptămână a bolii la 19% dintre pacienți, în a doua săptămână - la 25% și în a treia - la 33% dintre pacienți.

Frecvența rezultatelor pozitive ale RA și nivelul titrurilor de anticorpi detectate cu ajutorul acestuia depind direct de severitatea infecției cu Shigella. Potrivit lui V.P. Zubareva, utilizarea terapiei antibacteriene nu reduce frecvența rezultatelor pozitive ale RA, cu toate acestea, atunci când antibioticele sunt prescrise în primele 3 zile ale bolii, aglutininele sunt detectate în titruri mai mici.

RA are specificitate limitată. La examinarea persoanelor sănătoase, au fost obținute rezultate pozitive pentru RA în 12,7% din cazuri, iar reacții de grup au fost observate în 11,3% din cazuri. Datorită înrudirii antigenice a bacteriilor Flexner I-V și Flexner VI, reacțiile încrucișate sunt observate în special în formele etiologice corespunzătoare de infecție cu Shigella.

Odată cu apariția unor metode mai avansate pentru serodiagnosticul infecției cu Shigella, RA și-a pierdut treptat importanța. Valoarea diagnostică a reacției de aglutinare („reacția Vidal dizenterică”) (RA) pentru dizenterie este evaluată în mod ambiguu de către diverși cercetători, cu toate acestea, rezultatele muncii majorității autorilor indică sensibilitatea și specificitatea limitate a acestei metode.

Cel mai adesea, reacția de hemaglutinare indirectă (pasivă) (IPHA) este utilizată pentru determinarea anticorpilor. Studii detaliate ale valorii diagnostice a reacției de hemaglutinare pasivă (RPHA) pentru infecția cu Shigella au fost efectuate de A.V. Lullu, L.M. Shmuter, T.V. Vlokh și o serie de alți cercetători. Rezultatele lor ne permit să concluzionam că RPGA este una dintre cele mai eficiente metode pentru diagnosticul serologic al dizenteriei, deși nu este lipsită de unele dezavantaje comune inerente metodelor acestui grup.

Un studiu comparativ al sensibilității în RPGA de dizenterie și reacția de aglutinare arată marea superioritate a primei metode. Potrivit lui A.V. Lullu, titrurile medii de RPHA în această boală depășesc titrurile medii de RA de 15 ori (la apogeul bolii de 19-21 de ori), anticorpii în niveluri ridicate (1:320 - RPHA) sunt detectați atunci când folosit de 4,5 ori mai des decât în ​​titru (1:160 la efectuarea unei reacții de aglutinare). Cu dizenterie acută confirmată bacteriologic, se observă o reacție pozitivă RPHA în titrurile de diagnostic la examinarea a 53-80% dintre pacienți.

Hemaglutininele sunt detectate de la sfarsitul primei saptamani de boala, frecventa depistarii si titrul de anticorpi cresc, ajungand la un maxim la sfarsitul celei de-a doua si a treia saptamani, dupa care titrul acestora scade treptat.

Există o dependență clară a frecvenței rezultatelor pozitive RPGA și a titrurilor de hemaglutinină de severitatea și natura cursului infecției cu Shigella. Studiile relevante au arătat că, în cazul formelor șterse și subclinice de infecție, rezultatele pozitive ale RPGA au fost obținute mai rar decât cu dizenteria acută semnificativă clinic (52,9 și, respectiv, 65,0%), în timp ce doar 4 au răspuns în titruri de 1:200 - 1:400. 2% din seruri (cu o formă pronunțată clinic - 31,2%) și cu forme prelungite și cronice s-au observat rezultate pozitive ale RPGA la 40,8% dintre pacienți, inclusiv la un titru de 1:200 - doar 2,0%. Există, de asemenea, rapoarte de sensibilitate diferită a RPHA în anumite forme etiologice de infecție cu shigeloză. Potrivit lui L.M. Schmuter, cele mai mari titruri de hemaglutinină sunt observate în dizenteria Sonne și semnificativ mai scăzute în dizenteria Flexner I-V și Flexner VI. Tratamentul antibacterian început în stadiile incipiente ale bolii, prin reducerea duratei și intensității iritației antigenice, poate determina apariția hemaglutininelor în serul sanguin la titruri mai mici.

La fel ca reacția de aglutinare, RPGA nu face întotdeauna posibilă recunoașterea cu acuratețe a formei etiologice a infecției cu Shigella, care este asociată cu posibilitatea reacțiilor de grup. Reacțiile încrucișate se observă în principal cu dizenteria de tip Flexner - între dizenteria Flexner I-V și Flexner VI. Răspunsul imun umoral la mulți pacienți este slab. Nu poate fi exclusă posibilitatea de aglutinare încrucișată din cauza antigenelor comune. Cu toate acestea, avantajele acestei metode includ simplitatea reacției, capacitatea de a obține rapid rezultate și eficiența de diagnosticare relativ ridicată. Dezavantaj semnificativ aceasta metoda este că diagnosticul poate fi stabilit nu mai devreme de a 5-a zi a bolii, titrurile maxime de anticorpi de diagnostic pot fi determinate până în a 3-a săptămână de boală, astfel încât metoda poate fi clasificată ca „retrospectivă”.

În scopul diagnosticării dizenteriei, se propune, de asemenea, să se determine nivelul complexelor imune circulante specifice reprezentate de antigenul O al S. sonnei, combinat cu un anticorp specific, folosind o „versiune sandwich” indirectă a unui imunosorbent legat de enzime. testul datorita sensibilitatii si specificitatii sale ridicate.Cu toate acestea, metoda se recomanda a fi folosita numai in ziua 5-8 de boala.

La pacienții cu dizenterie, încă de la începutul bolii, se detectează o creștere specifică a activității de bacteriofixare a sângelui datorită activității de legare a antigenului a eritrocitelor. În primele 5 zile de ACI, determinarea activității de legare a antigenului a eritrocitelor face posibilă stabilirea etiologiei bolii în 85-90% din cazuri. Mecanismul acestui fenomen nu este bine înțeles. Se poate presupune că baza sa este legarea complexului imun antigen-anticorp de către eritrocite prin receptorii lor C3b (la primate, inclusiv la oameni) sau receptorii Fcy (la alte mamifere).

Printre metodele relativ noi de înregistrare a unui răspuns imun specific la nivel celular, atrage atenția determinarea limfocitelor care leagă antigenul (ABL) care reacționează cu un antigen specific, semnificativ din punct de vedere taxonomic. Detectarea ASL se realizează prin diferite metode - aglutinarea pereche a limfocitelor cu antigen, imunofluorescență, RIA, adsorbția limfocitelor pe coloane care conțin antigen, aderența celulelor mononucleare pe capilarele de sticlă, reacția indirectă de formare a rozetei (IRRO). Trebuie remarcat faptul că astfel de metode extrem de sensibile pentru înregistrarea ASL, cum ar fi ELISA și RIA, adsorbția limfocitelor pe coloane care conțin antigen, sunt relativ complexe din punct de vedere tehnic și nu sunt întotdeauna disponibile pentru utilizare pe scară largă. Lucrările unui număr de autori au arătat sensibilitatea și specificitatea ridicată a RNRO pentru detectarea ASL în diferite boli. O serie de cercetători au identificat o relație strânsă între conținutul ASL din sângele pacienților cu diverse patologii și forma, severitatea și perioada bolii, tranziția acesteia la prelungit sau forma cronica.

Unii autori consideră că, determinând nivelul ASL în dinamica bolii, se poate judeca eficacitatea terapiei. Majoritatea autorilor consideră că dacă are succes, cantitatea de ASL scade, iar dacă eficacitatea tratamentului este insuficientă, se înregistrează o creștere sau o stabilizare a acestui indicator. Se raportează că, folosind determinarea ASL, este posibilă cuantificarea sensibilizării la antigenele tisulare și bacteriene, precum și la antibiotice, ceea ce este important. valoare de diagnostic. Metoda ASL a fost folosită într-o măsură limitată pentru diagnosticul dizenteriei.

Oportunitate depistare precoce ASL, deja în primele zile după infecție, este foarte importantă pentru diagnosticul precoce și tratamentul în timp util, care este necesar pentru clinician.

Astfel, datele prezentate în revizuire arată că, având în vedere prevalența pe scară largă a dizenteriei, lipsa de sensibilitate și apariția târziu a rezultatelor pozitive ale multor metode de diagnostic, este recomandabil să se dezvolte potențialul diagnostic pentru depistarea acestei infecții. Datele obținute în multe boli infecțioase despre eficiența ridicată a metodei ASL și apariția timpurie a rezultatului său pozitiv determină perspectivele studierii și utilizării acestei metode pentru shigeloză.

Bibliografie

1 Yushchuk N.D., Brodov L.E. Diagnosticul și tratamentul diferențial al infecțiilor intestinale acute // Ros. și. gastroenterol., hepatol., coloproctol. – 2000. – 10, Nr. 5. – P. 13 – 16. – Rus. – ISSN 1382-4376. – RU.

2 Shuvalova E.P., Zmushko E.I. Diagnosticul sindromic al bolilor infecțioase. // Manual. – S-P.: Peter, 2001. – P. 138-141.

3 Karalnik B.V., Amireev S.A., Syzdykov M.S. Principiile și capacitățile metodelor de diagnostic de laborator și interpretarea rezultatelor acestora în munca unui epidemiolog // Metodă. recom. - Almaty. – 1997. – 21 p.

4 Karalnik B.V. Diagnosticul serologic al infecțiilor bacteriene intestinale. // Metoda. recomandări. – Almaty, 1973. – 3-20 p.

5 5. Nurkina N.M. Eficacitatea comparativă a metodelor de diagnostic serologic al dizenteriei cu ajutorul eritrocitelor sensibilizate: Rezumat al tezei. dis. Ph.D. – Almaty, 1984. – 22 p.

6 Karalnik B.V., Nurkina N.M. Diagnosticul serologic complex al dizenteriei. // Metoda. recomandări. – Almaty, 1983. – 24 p.

7 Erkinbekova B.K. Metoda de indicare a antigenelor Shigella în studii sanitare și epidemiologice pentru dizenterie: rezumatul autorului. insulta. ...candidat la științe medicale. – Almaty, 1995. – 18 p.

8 Nikitin V.M., Georgitsa F.I., Plugaru S.V. si etc. Metode mai rapide diagnosticul bolilor infectioase. // Chișinău. - 1987. - 106 p.

9 Neverov V.A. Strategie și tactici pentru diagnosticul și tratamentul infecțiilor intestinale acute. // Sankt Petersburg - 1996. – 12 p.

10 Vorobiev A.A. Microbiologie medicală, virologie și imunologie. // M.- 2004.- p. 7-8.

11 Ivanov K.S., Ivanov A.I. Diagnosticul infecțiilor diareice acute // Klin. Miere. – 1992. – Nr. 7-8 – P. 64-69.

12 Ciudin L., Pencu E., Mihai, I. et al. Identificarea serologică a tulpinilor de Shigella flex neri prin reacția de coaglutinare // Roum. Arc. Microbiol.Immunol. –1995/ — Vol/ 54(4). — p. 295 — 311.

13 Lindberg A.A., Cam P.D., Chan N. et al. Shigeloza în Vietnam: studii miologice seroepidelor cu utilizarea antigenelor lipopolizaharide în testele imunoenzimelor // Rev. Infecta. Dis. – 1991. – Vol. 13, Suppl 4. - P.231 - 237.

14 Sloper S. Shigella. // În: Enterobacteriaceae-infectie. Leipzig.- 1968.- R. 375–441.

15 Jacobs J., Rudensky B., Dresner J. et al. Comparația a patru teste de laborator pentru diagnosticul diareei asociate cu Clostridium difficile // Eur. J. Clin. Microbiol. Infectează.Dis. – 1996. – Vol. 15(7). – P. 561-566.

16 Klyucharev A.A., Poleshko D.V., Vershenya M.I. Caracteristicile clinice și epidemiologice ale cursului dizenteriei în ultimii ani. // Asistența medicală din Belarus. – 1973. – Nr. 11.- P. 54-56.

17 Gusarskaya I.L. Caracteristicile cursului clinic al dizenteriei Sonne în stadiul actual și unele aspecte ale prevenirii acesteia. // În cartea: Probleme ale bolilor infecţioase. - Vologda. - 1970. -S. 23-27.

18 Shitov I.A., Trinitatskaya M.I. Durata excreției bacteriene la pacienții cu dizenterie acută. // În cartea: Infecţii intestinale.- Partea 2. - L. 1972. - P. 161-163.

19 Avdeeva T.A. Studiul microbiologic cantitativ al dizenteriei (rezultatele dezvoltării și aplicării unei metode de studiere a modelelor clinice, microbiologice și epidemiologice ale dizenteriei). Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare om de stiinta Etapa. Dr. med. Sci. L., 1964, 28 p.

20 Tillet H., Thomas M. Cultura fecalelor în diagnosticul dizenteriei Sonne: o metodă statistică pentru estimarea ratei reale de izolare. // Internat. J.Epidemiol.- 1974.- vol.3.- R. 177-181.

21 Khaimzon B.I. Reacția creșterii titrului de fagi în diagnosticul dizenteriei acute la adulți. Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare om de stiinta Etapa. poate sa. Stiinte Medicale Voronej, 1965, 16 p.

22 Vilkomirskaya T.S. Materiale privind studiul sensibilității și specificității reacției de creștere a titrului fagilor (RFT) în diagnosticul dizenteriei. // În cartea: Probleme de imunologie a bolilor infecțioase și alergice. Ufa.- 1970.- p. 48-49.

23 Ivanov F.M. Valoarea comparativă a metodelor de inoculare, de creștere a titrafagilor și de detectare a substanțelor antigenice în diferite stadii ale procesului de dizenterie. Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare om de stiinta Etapa. poate sa. Stiinte Medicale Orenburg, 1963, 10 p.

24 Vilkomirskaya T.S. Cu privire la semnificația clinică și epidemiologică a reacției de creștere a titrului fagilor (RFT) în diagnosticul dizenteriei în condițiile Ufa. Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Sci. Ufa, 1971, 24 p.

25 Mazurin N.D., Rozina-Itskina Ts.S. Reacția creșterii titrului de fagi în diagnosticul dizenteriei. // JMEI.- 1963. - Nr. 1. - P. 113-116.

26 Golyusova E.V., Trokhimenko M.Z. Despre semnificația testului Tsuverkalov în diagnosticul dizenteriei acute la copii. // Infecţii intestinale (Kiev).- 1972. - emisiune. 5. - p. 97-99.

27 Fradkin V.A., Lodinova L.M. Utilizarea alergenilor pentru diagnosticul infecțiilor intestinale cronice. // În carte: Transportul bacterian și formele cronice ale bolilor infecțioase. - Partea 2.- M.-1975.- P. 213-215.

28 Lukaşevici K.K. Metoda alergică diagnosticul de dizenterie. // În cartea: Some clinical issues and allergies in infectious pathology.Kuibyshev.- 1970.- pp. 41-43.

29 Cechelnitsky V.M. Semnificația reacției Tsuverkalov în diagnosticul dizenteriei acute. // În cartea: Imunologie și infecții intestinale.Voronej.- 1970.- P. 110-114.

30 Bogdanov I.L. Alergia în patogeneză, tablou clinic și terapia bolilor infecțioase. // M. - 1974. - 245 p.

31 Gorchakova G.A. Disenterin (un medicament pentru testarea intradermică pentru diagnosticul dizenteriei). Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare om de stiinta Etapa. Dr. Stiinte Medicale Odesa, 1969, 19 p.

32 Lyubitskaya N.A., Polyak A.I. Imunodiagnostic al dizenteriei la copii //VI All-Union. conf. conform clinicii biochimie, morfologie și infecții imunologice. bol.: Rezumate ale rapoartelor. – Riga, 1983. – P. 106-107.

33 Furman A.A. Studiu comparativ unele metode accelerate pentru diagnosticul de laborator al dizenteriei și colienteritei. Rezumatul autorului. dis. Nasoisk. om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Sci. Kiev, 1970, 19 p.

34 Mihailov I.F., Pers I.F. Identificarea legăturilor antigenice dintre bacterii grupa intestinală metoda anticorpilor fluorescenți. JMEI, 1975, nr. 5, p. 97-103.

35 Shmuter L.M. Reacții de hemaglutinare indirectă și neutralizare a anticorpilor în diagnosticul dizenteriei. Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare om de stiinta canal pas Miere. Sci. Harkov, 1968, 19 p.

36 Evdokimova T.V., Podlevsky A.F., Yafaev R.Kh. Paralele clinice și de laborator în dizenteria acută la adulți. – JMEI, 1974, nr. 6, p. 82-85.

37 Mogilev V.E. Hemaglutinarea pasivă în dizenterie. Rezumat al tezei. pentru cererea de angajare om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Sci. Kuibyshev, 1968, 20 p.

38 Rybakova N.A. Utilizarea reacției de inhibare a hemaglutinării pasive pentru diagnosticul dizenteriei Sonne într-un laborator practic. - Laboratorul. afaceri, 1975, nr. 3, p. 168-170.

39 Ivanov F.M. Valoarea comparativă a metodelor de inoculare, de creștere a titrafagilor și de detectare a substanțelor antigenice în diferite stadii ale procesului de dizenterie. Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Sci. Orenburg, 1963, 10 p.

40 Godovanny B.A., Litinsky Yu.I., Bodisko V.P. şi altele.Determinarea cantitativă a antigenului Shigella Sonne în urina pacienţilor şi purtătorilor de bacterii. - Laboratorul. afaceri, 1974, nr. 6, p. 360-363.

41 Kashkin G.S. Studiul dinamicii antigenelor microbiene din sânge și urină în dizenteria acută. – În cartea: Probleme ale bolilor infecțioase. Vologda, 1970, p. 47-50.

42 Nurkina N.M. Eficacitatea comparativă a metodelor de diagnostic serologic al dizenteriei cu ajutorul eritrocitelor sensibilizate: Rezumat al tezei. dis. Ph.D. – Almaty, 1984. – 22 p.

43 Lee Van Ho., Rubtsov I.V., Tregub A.V., Remneva T.V. Valoarea diagnostică comparativă a unor metode de identificare a antigenelor de dizenterie în substraturile corpului pacientului. // Zh.microbiol. – 1989. – Nr 1. – P. 57-61.

45 Sakal N.N. Aplicarea și evaluarea eficacității imunotestului enzimatic în diagnosticul precoce și prognosticul cursului dizenteriei Sonne: Rezumat al tezei. insulta. ...cad. Miere. Sci. – Sankt Petersburg, 1993. – 21 p.

46 Rubtsov I.V., Pimenova G.N., Kulakova V.N. Despre evaluarea statistică a datelor clinice și de laborator ale ELISA // Materiale ale lucrării științifice-practice aniversare. conferințe, dedicate 80 de ani de la formarea Departamentului de Boli Infecțioase al MMA, numit după. I.M.Sechenov (22-23 mai 2003). - M.: MMA im. I.M. Secenov. - 2003. - P. 152-153.

47 Downes F.P., Green J.K. et al. Dezvoltarea și evaluarea testului imunosorbent legat de enzime pentru detectarea Shiga - ca toxina I și Shiga - ca toxina II // J. Clin. Microbiol. – 1989. – V. 27, nr 6. – P. 1292-1297.

48 Barbans P.S., Pantyukhina A.N. Metode de obținere și monitorizare Fab fluorescent - fragmente de anticorpi împotriva proteinelor serice ale persoanelor care au avut febră tifoidă // Journal of microbiol., epidemiol. și imunobiol. – 1984. – Nr. 2. – p. 102-105.

49 Utilizarea antigenelor sintetice pentru diagnosticul bolilor infecţioase //Techn.ser/WHO. – 1989. – Nr. 784. – P. 1-74.

50 Ekwall E., Norberg T., Swensons S.B. et al. identificarea specifică a antigenului O3 al salmonelei serogrup E prin imunofluorescență și coaglutinare cu antiser identificat 1 printr-o trizaharidă sintetică – ser bovin albuminglycoconjugate // J. Clin.Microb. – 1994. – 19, nr 5. – P. 699-702.

51 Lee Kuo-Ka, Ellis A.E. Colorare rapidă și sensibilă cu argint-lipopolisaharidă utilizând Phast System în electroforeză orizontală rapidă pe gel de poliacrilamidă //Electroforeză. – 1989. – V. 10, nr. 10. – P. 729-731.

52 Tempieva T.V., Yuditskaya N.M., Litinsky Yu.I., Lee Vam Ho. Dezintegrarea cu ultrasunete a complexelor imune pentru detectarea antigenelor Shigella în urina pacienților cu dizenterie // Lab. caz. – 1988. – Nr. 9. – pp. 64-66.

53 Chaika N.A. Studiul infecțiilor intestinale și al agenților patogeni ai acestora folosind metode imunologice moderne // Infecții intestinale acute. – L.: Leningr. Institutul de Cercetare de Epidemiologie și micro. – 1987. – emisiune. II. – P.3-8.

54 Khazenson L.B., Chaika N.A. Baza imunologică pentru diagnosticul și analiza epidemiologică a infecțiilor intestinale. – M.: Medicină. –1987. – 112 s.

55 Kashkin G.S. Studiul dinamicii antigenelor microbiene din sângele și urina copiilor cu dizenterie acută. // În cartea: Probleme ale bolilor infecţioase. - Vologda. – 1970.- P. 47-50.

56 Godovanny B.A., Litinsky Yu.I., Bodisko V.P. Determinarea cantitativă a antigenului Shigella Sonne în urina pacienților și purtătorilor de bacterii. // Laborator. caz. – 1970. – Nr. 6. – P. 360-363.

57 Rybakova N.A., Rybakov D.A. Utilizarea RNGA și RNAt în investigația epidemiologică a bolilor de etiologie dizenterică. – Proceedings of the Leningrad Research Institute of Epidemiology. și microbiol. numit după Pasteur. -T. 56. – L., 1981. – P. 58-61.

58 Vasilyeva A.V. Evaluarea comparativă a diferitelor metode de diagnostic serologic al dizenteriei Sonne. // Infecții intestinale. – 1972. – Numărul. Nr. 5. – p. 129-132.

59 Dubinina I.G., Shcherbo S.N., Makarov V.B. Metode de reacție în lanț a polimerazei în practica de laborator. // Diagnosticare clinică de laborator. – 1997, nr. 7. – pag. 4 – 6.

60 Turkadze K.A., Podkolzin T.A., Kokoreva L.N. şi altele.Eficacitatea comparativă a utilizării PCR şi a metodei bacteriologice în diagnosticul salmonelozei şi shigelozei // Materiale ale lucrării ştiinţifice şi practice aniversare. conferințe, dedicate 80 de ani de la formarea Departamentului de Boli Infecțioase al MMA, numit după. I.M.Sechenov (22-23 mai 2003). - M.: MMA im. I.M. Secenov. - 2003. - P. 172-173.

61 Akhtamov M.A., Akhmedov A.A. Studiu comparativ al eficacității unora reacții serologiceîn diagnosticul de laborator al dizenteriei acute // Med. revista din Uzbekistan. – 1984. -№1. – pp. 29-31.

62 Borisov V.A. Spre o evaluare comparativă a unor metode serologice de diagnosticare a dizenteriei. - Laboratorul. afaceri, 1972, nr. 9, p. 564-566.

63 Laplane R., Be, gue P., Omanga V. Anticorps seriques et copro-anticorps dansles infections bacteriennes digestives de l, enfant. // Taur. Acad. nat. med. – 1975. – Vol. 159. - Nr. 7. - P. 596-600.

64 Barksdale W., Ghoda A. Agglutinating anticorpi in serum and faeses.// J. Immunol. – 1951. – Vol. 66. – P. 395 – 401.

65 Nikolaeva T.A., Kukain E.M., Khazenson L.B. Natura imunochimică a anticorpilor copro- și serici la pacienții cu dizenterie Sonne și alte boli acute. - Tez. raport La științific-practic conf., dedicat 50 de ani de la LeningradNIIEM numit după. Pasteur. L., 1973, p. 53-54.

66 Lullu A.V. Aplicarea reacției indirecte de hemaglutinare pentru diagnosticul și studiul imunologiei dizenteriei acute. // Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare om de stiinta Etapa. poate sa. Miere. Sci. - Tartu. - 1963. - 10 p.

67 Klyucharev A.A. Materiale pentru studiul dizenteriei în Belarus. Poleshko D.V., Vershenya M.I. Caracteristicile clinice și epidemiologice ale cursului dizenteriei în ultimii ani. // Rezumatul autorului. dis. pentru cererea de angajare grad academic Dr. Miere. Sci. - Kaunas. - 1970. - 32 p.

68 Podlevsky A.F., Tselinskaya N.M., Zhuravleva L.V., Buchel N.E. Reacție de hemaglutinare indirectă în dizenterie la pacienți de diferite vârste. // În carte: Probleme de epidemiologie și prevenire a infecțiilor focale intestinale și naturale. L., 1971, p. 93-99.

69 Zaitlenok M.A., Eremina A.M., Subbotina Yu.L. Studii serologice în infecțiile intestinale acute neconfirmate bacteriologic // Imunologie și imunopatologie. – Voronej, 1983. – P. 35-37.

70 Borisov V.A., Orlik N.S., Kirilyuk M.A. Răspunsul imun la pacienții cu dizenterie cu excreție prelungită a Shigella. // Toată Unirea. conf. biochimia clinică, morfologia și imunologia bolilor infecțioase. Abstract. raport - Riga. - 1977. - P. 377-378.

71 Chilingaryan A.V. Rezultatele aplicării paralele a modelului pulmonar, reacție indirectă de hemaglutinare și reacție de aglutinare pentru depistarea anticorpilor anti-dizenterie în sângele persoanelor sănătoase. // În cartea: Infecții intestinale acute. Dizenterie, escherichioză, salmoneloză. – L. – 1970. – P. 93-101.

72 Patton C.M., Gangorosa E.J., Weissman J.B. et al. Valoarea diagnosticului de hemaglutinare inderectă în seroepidemiologia infecțiilor cu Shigella. // J. din Clin. Microb. – 1976. – Vol. – 23. – P. 143-148.

73 Martinez J. Studiu epidemiologic al dizenteriei bacteriene. // Bol. ofic. sanit.panamer. – 1973. – Vol. 75. – P. 213-224.

74 Musabaev I.K., Abubakirova F.Z. Dizenteria bacteriană. – Tash-kent – ​​​​1973. – 258 p.

75 Dulatova M.V., Golovacheva S.N., Savitskaya O.V. Principiul RPGA în diagnosticul expres al infecțiilor și imunității. // În carte: Pregătiri pentru diagnosticare expresă. – L., 1981. – P. 31-42.

76 Safonova N.V. Utilizarea reacției indirecte de hemaglutinare în focarele de infecție intestinală acută pentru identificarea persoanelor infectate și căutarea surselor. – L., 1974. – 11 p.

77 Solodovnikov Yu.P., Kalashnikova G.K., Subbotina Yu.L., Bobkin S.V. Reacție de hemaglutinare indirectă în studiul anticorpilor în dizenteria Sonne sănătoasă, bolnavă și recuperată. – JMEI, 1971, Nr 1. – P.13-18.

78 Provotorov V.Ya. Pe problema tratării pacienților cu dizenterie. – În carte: Îngrijirea comunitară pentru pacienții infecțioși și problemele de tratament al pacienților infecțioși. Saratov, 1973. – P. 153-155.

79 Karalnik B.V. Metodologia și tactica imunodiagnosticului patologiei infecțioase. – În cartea: Probleme de imunologie clinică și diagnosticare imunologică. Alma-Ata, 1988. – 10 p.

80 Kaplin V.I., Klevtsova G.A., Koryukhina I.P. etc.Reacţia specifică a sângelui în perioada initiala dizenterie și infecții cu salmonella și noi posibilități pentru diagnosticul specific precoce al infecțiilor intestinale acute // VI All-Union. conf. conform clinicii biochimie, morfologie și imunol. infectioase bol.: Rezumate ale rapoartelor. – Riga, 1983. – P.76-77.

81 Savilov E.D., Astafiev V.A., Mamontova L.M., Volodin Yu.F. Caracteristici epidemiologice ale dizenteriei în Siberia de Est. //Novosibirsk „Știință”, 1994. – P.42-43.

82 Ivanov K.S., Ivanov A.I. Diagnosticul infecțiilor diareice acute // Klin. Miere. – 1992. – Nr. 7-8 – P. 64-69.

83 Karalnik B.V. Celulele roșii, receptorii lor și imunitatea. //Usp.modern biol., M. – 1992. – vol. 112, Nr. 1. – P.52-61.

84 Garib F.Yu., Zalyalieva M.V. Metode de studiere a subpopulaţiei de limfocite la om în diverse condiţii patologice // Recomandări metodologice. – Tașkent, 1989. – 17 p.

85 Bahrg. Modabber F.Z. // J. Immunol.Meth. – 1980. – V. 38, Nr. 3-4. – P. 203-216.

86 Tyagotin Yu.A. // Probleme de examinare și tratare a pacienților cu boli ale sistemului sanguin. – L., 1975. – P. 21-25.

87 Novikov D.K., Novikova V.I. Metode celulare de imunodiagnostic. // Minsk, 1979. – 222 p.

88 Smirnov B.N., Toropova N.I., Mokhova G.A. și altele // Materiale ale Conferinței științifice a întregii uniuni „Probleme ale biotehnologiei medicale”. oct. 1988. – L., 1990. – P. 114-116.

89 Slavko E.A., Deryabin P.N., Karalnik B.V. Determinarea limfocitelor de legare a antigenului ca metodă de diagnosticare precoce a salmonelozei și dizenteriei // Asistența medicală din Kazahstan - Almaty - 1999. - Nr. 5-6. - P. 43-45.

90 Karalnik B.V., Kozhageldieva A.A., Karabekov A.Zh., Denisova T.G., Raipov O.R. Monitorizarea eficacității tratamentului yersiniozei cauzate de Yersinia enterocolitica // Medicină. - Almaty.- 2004. - Nr 4. - P.51-53.

91 Karalnik B.V., Denisova T.G., Plazun A.A. si altele.Limfocite de legare de antigen cu specificitate tuberculina la iepuri infectati cu M. bovis in dinamica tratamentului tuberculozei // Probleme de tuberculoza si boli pulmonare. -M.-2006.- Nr 5.-P.48-53.

92 Karalnik B.V., Karabekov A.Zh., Denisova T.G., Kozhageldieva A.A., Zhunusova G.B. Diagnosticul diferențial al brucelozei și yersiniozei intestinale cauzate de Yersinia enterocolitica serovar O9 // Medicină.- Almaty.- 2004. - Nr. 3. - P. 155-157.

93 Karalnik B.V., Denisova T.G., Zhunusova G.B., Fedosov S.A., Zhankin A.A., Ospanov K.S., Mizanbaeva S.U. Eficacitatea diferitelor teste de anticorpi și a testului limfocitelor de legare a antigenului în diagnosticul brucelozei la om. // Imunologie medicală. – S.-P. - 2006. - volumul 8. - Nr. 4. — p. 567 — 572.

94 Karalnik B.V., Denisova T.G., Grushina T.A., Tugambaev T.I. Analiza răspunsului imun al cobaii infectați cu Brucella melitensis // Journal of microbiol.- M.-2002.- Nr. 1.- P.54-56

95 Karalnik B.V., Berezin V.E., Denisova T.G., Deryabin P.N., Slavko E.A. şi altele.Dinamica conţinutului de limfocite cu receptori pentru virusul Sendai în timpul imunizării cu virusul şi un complex imunostimulator al glicoproteinelor sale // Izvest. Ministerul Științei și educatie inalta RK. Ser.biol. şi medical - Almaty.- 1999. - Nr. 3. - P. 50-51.

96 Garib F.Yu., Gurariy N.I., Aliev Sh.R. Caracteristicile limfocitelor care leagă antigenul în hepatita cronică la copii // Imunologie - 1988. - Nr. 5. pp. 91-93.

97 Finlay B.B., Falkow S.A. O comparație a strategiilor microbiene ale speciilor Salmonella, Shigella și Jersinia // Interacțiunea bacteriană – celulă gazdă, Alban R. Liss. Inc. – 1988. – P. 227-243.

98 Karalnik B.V., Denisova T.G., Keshileva Z.B., Pshenichnaya L.A. si altele.Limfocite si anticorpi care leaga antigen in diagnosticul sifilisului // Infectii cu transmitere sexuala. – M. – 1999. – Nr. 5. — P. 34–36.

99 Sakanova L.M., Karalnik B.V., Ukbaeva T.D. și altele.Imunoreactivi pentru identificarea limfocitelor care leagă antigenul și testarea acestora în diagnosticare infecție meningococică// Igienă, epidemiologie și imunobiologie - Almaty. -2002.- Nr 1-2.-P.69-72.

100 Slavko E.A., Deryabin P.N., Karalnik B.V., Karabekov A.Zh. Cu privire la specificitatea limfocitelor de legare a antigenului detectate la pacienții cu boli inflamatorii acute ale tractului gastrointestinal. // Igienă, epidemiologie și imunobiologie. - Almaty. - 1999. - Nr. 2. — p. 102 — 105.

A.M.Sadykova

Diagnosticarea laboratoarelor de dizenterie

Tү yin: Zhedel іshek infectislaryn baqylauda, ​​​​dizenterie nakty diagnostics ең өзу мәсеLeсі мљселі віліп сайлади. Dizenteria bacteriană durys koyylgan diagnosticează știința uaqytynda mâncăm zhurgizuge zhane epidemie karsy sharalardy Otkіzu ushіn manyzdy. Revizuirea corsetilgen malimeter, dizenterie ken taraluyn nezhey otyrup, sesimtaldygynyn zhetkіlіksіzdіgі zhane kop degen diagnosticalyk adіsterdіn on natizhesіn ің cache anyуқталутына басылына басылына босына k potenţialitate maxatty tүrde damytu kerek ekenіn korsetedі.

Tү cuө zder: diagnostic, dizenterie, antigenbaylanystyrushy adis.

A.M.Sadycova

Diagnosticul de laborator al dizenteriei

Relua: Diagnosticul de încredere al diareei este una dintre cele mai importante probleme pentru controlul exact al infecției intestinale. Diagnosticul exact al diareei bacterioze are sens vitae pentru tratamentul corect și precis al pacientului și pentru a lua măsurile antiepidemice necesare. Membrii menționați în sondaj, luând în considerare diareea larg răspândită, arată lipsa de sensibilitate și apariția tardivă a rezultatelor pozitive ale multor metode de diagnostic. Este esențial să se dezvolte potențialul de diagnostic pentru a defini infecția.

Cuvinte cheie: diagnostic, dizenterie, metoda limfocitelor cu legare de antigen.