Aplicación de bacteriófagos en medicina. Bacteriófagos y su aplicación práctica. Bacteriófagos.
Las preparaciones de fagos se utilizan para el tratamiento y la prevención de enfermedades infecciosas, así como en el diagnóstico, para determinar la sensibilidad y la tipificación de los fagos en la identificación de microorganismos. La acción de los fagos se basa en su estricta especificidad. El efecto terapéutico y profiláctico de los fagos está determinado por la actividad lítica del propio fago, así como por la propiedad inmunizante de los componentes (antígenos) de las células microbianas destruidas que se encuentran en los fagolizados, especialmente en el caso de uso repetido. Al obtener preparaciones de fagos, se utilizan cepas de fagos de producción probada y, en consecuencia, cultivos típicos de microorganismos. Un cultivo bacteriano en un medio nutritivo líquido, que se encuentra en la fase logarítmica de reproducción, se infecta con una suspensión uterina del fago.
El cultivo lisado por fagos (generalmente al día siguiente) se filtra a través de filtros bacterianos y se agrega una solución de quinosol al filtrado que contiene el fago como conservante.
Droga lista El fago es un líquido transparente. color amarillento. Para un almacenamiento más prolongado, algunos fagos están disponibles en forma seca (en tabletas). En tratamiento y prevención. infecciones intestinales Los fagos se utilizan simultáneamente con una solución de bicarbonato de sodio, ya que el contenido ácido del estómago destruye el fago. El fago no persiste en el organismo por mucho tiempo (5-7 días), por lo que se recomienda reutilizarlo.
Producido en la Unión Soviética los siguientes medicamentos, utilizado para el tratamiento y prevención de enfermedades: tifoidea, salmonella, disentería, colifagos, fagos estafilocócicos y estreptocócicos. Actualmente, los fagos se utilizan para el tratamiento y la prevención en combinación con antibióticos. Esta aplicación tiene más acción efectiva para formas de bacterias resistentes a los antibióticos.
Los bacteriófagos de diagnóstico se utilizan ampliamente para identificar bacterias aisladas de un paciente o de objetos ambientales infectados. Con la ayuda de los bacteriófagos, debido a su alta especificidad, es posible determinar los tipos de bacterias y, con mayor precisión, los tipos individuales de bacterias aisladas. Actualmente, se han desarrollado el diagnóstico de fagos y la tipificación de bacterias del género Salmonella, Vibrio y estafilococos. La tipificación de fagos ayuda a establecer la fuente de infección, estudiar las relaciones epidemiológicas y distinguir los casos esporádicos de enfermedades de los epidémicos.
El diagnóstico de fagos y la tipificación de fagos se basan en el principio de cocultivo de un microorganismo aislado con la especie o tipo de fago correspondiente. Resultado positivo Se considera que existe una lisis bien definida del cultivo en estudio con el fago de la especie, y luego con uno de los fagos típicos.
Bacteriófagos, aplicación en medicina.
Bacteriófagos. Aplicación en la práctica médica.
Los bacteriófagos son virus bacterianos capaces de penetrar específicamente en las células bacterianas, reproducirlas y provocar su lisis.
Se encuentran dondequiera que existan bacterias: en el suelo, el agua, tracto intestinal persona. Todos son inherentes al fago. características biológicas, que son característicos de los virus.
Morfología de los fagos:
Los fagos varían en forma: filamentosos, esféricos, cúbicos, fagos con cabeza y cola (se parecen a un espermatozoide).
Por tamaño: pequeño, mediano y grande.
Las estructuras más complejas son los fagos grandes, que constan de una cabeza y una cola. La cabeza tiene forma de icosaedro. La cabeza se conecta al proceso mediante un collar y un paraguas. En el interior del proceso hay una varilla cilíndrica hueca que se comunica con la cabeza; en el exterior, el proceso tiene una vaina proteica capaz de contraerse; el proceso de la cola termina en una placa basal hexagonal con espinas cortas, desde donde se extienden estructuras de fibrillas en forma de hilo. . La placa y las espinas contienen lisozima. El proceso tiene 6 vellosidades, que aseguran una fuerte unión del fago a la célula bacteriana. Puede haber fagos con una vaina no contráctil, fagos con procesos cortos, fagos con un proceso análogo y fagos sin proceso.
Resistencia a los fagos: los fagos toleran temperaturas de 50-60°C. Pueden resistir la congelación y morir a una temperatura de 70°C. No se ven afectados por venenos como el cianuro, el fluoruro, el cloroformo y el fenol. Los fagos se conservan bien en ampollas selladas, pero pueden destruirse mediante ebullición, exposición a ácidos o irradiación ultravioleta.
El mecanismo de interacción de los fagos con una célula microbiana:
Según sus interacciones, se distinguen fagos virulentos y templados.
Fagos virulentos: penetran en la célula bacteriana, se reproducen y provocan la lisis de las bacterias.
Los fagos con un proceso y una vaina contráctil tienen varias características:
Estos fagos se adsorben en la superficie de la célula bacteriana mediante fibrillas de proceso en presencia de receptores apropiados. Luego se activa la enzima ATPasa, lo que conduce a la contracción de la vaina del proceso caudado y a la introducción de una varilla hueca en la célula. Una enzima, la lisozima, participa en el proceso de perforación de las paredes celulares.
El ADN del fago pasa a través del eje hueco del apéndice y se inyecta en la célula. La cápside y la apófisis permanecen en la superficie celular. Luego, la proteína del fago y el ácido nucleico se reproducen dentro de la célula. Siguiente etapa Consiste en el ensamblaje y formación de partículas de fagos maduros. La etapa final: lisis celular y liberación de partículas de fagos maduros. La lisis puede tener lugar tanto desde el interior: la pared celular se rompe y los fagos maduros salen al interior. ambiente externo y desde el exterior, los fagos hacen muchos agujeros en la pared celular a través de los cuales sale el contenido de la célula; con tal lisis, el fago no se multiplica.
Los fagos moderados no lisan todas las células de la población, entran en simbiosis con algunas células, como resultado de lo cual el ADN del fago se integra en el cromosoma de la célula. En este caso, el genoma del fago se llama profago.
El profago pasa a formar parte del cromosoma de la célula y, durante su reproducción, se replica de forma sincrónica con el genoma de la célula, sin provocar su lisis y se transmite a la descendencia.
El fenómeno de simbiosis de una célula microbiana con un profago se llama lisogenia.
Y el cultivo de bacterias que contiene profago es lisogénico, este nombre refleja la capacidad del profago de forma espontánea o bajo la influencia de factores. ambiente Pasa al citoplasma y se comporta como un fago virulento que lisa las bacterias. Al pasar a una forma virulenta, un fago templado puede capturar parte del cromosoma de una célula bacteriana y, tras la lisis, transferirlo a otra.
Los fagos se dividen según su espectro de acción:
1. Polivalente: lisa bacterias relacionadas (el fago de salmonella lisa solo salmonella).
2.Especies (monófagos): lisan bacterias de una sola especie.
3. Específico de tipo: lisa selectivamente variantes individuales de bacterias dentro de una especie (patógeno Staphylococcus - 33 conjuntos).
Uso práctico:
Las preparaciones de fagos se utilizan para el tratamiento y prevención de infecciones y su diagnóstico. La acción de los fagos se basa en su estricta especificidad; para obtener la preparación de fagos se utilizan cepas industriales y los correspondientes cultivos bacterianos.
Formas de liberación: líquida, seca, tabletas, aerosoles, supositorios. Se introducen en el organismo por vía parenteral, enteral y local. Utilizado con fines terapéuticos y profilácticos en varias enfermedades(disentería, cólera, diversas enfermedades inflamatorias purulentas).
Diagnóstico de fagos: el principio de diagnóstico se basa en el cocultivo de cultivos de prueba con fagos conocidos y desconocidos; el resultado se considera positivo si hay lisis de la célula bacteriana. La lisis se puede observar en líquidos y sólidos. medios nutritivos. En medios nutritivos líquidos, aparece una aclaración de la suspensión bacteriana, y en medios densos, se forman áreas de falta de crecimiento.
Tipificación de fagos: determinación de la variante tipo de una especie utilizando un conjunto de fagos tipo. Se producen fagos tifoideos, fagos para diagnosticar el cólera, fagos de salmonella y fagos de disentería. La fagotipificación es necesaria al realizar análisis epidemiológicos de la enfermedad y para establecer el origen y las vías de transmisión. Al detectar el fago, se juzga el contenido de los microorganismos correspondientes.
Debido a su efecto destructivo (lítico) sobre las bacterias, los fagos se pueden utilizar con fines terapéuticos y profilácticos para diversas enfermedades (disentería, cólera, diversas enfermedades inflamatorias purulentas, etc.). Se utilizan conjuntos de fagos estándar, incluidos los internacionales, para la tipificación por fagos de patógenos de varias enfermedades (cólera, fiebre tifoidea, salmonelosis, difteria, estafilococos y otras enfermedades). Los bacteriófagos también se utilizan en Ingeniería genética Como vectores que transfieren secciones de ADN, también es posible la transferencia natural de genes entre bacterias a través de determinados fagos (transducción). Como regla general, a estos pacientes se les recetan antibióticos. Pero debido al hecho de que las bacterias en constante mutación se vuelven resistentes a los antibióticos, su eficacia es limitada. últimos años debilitado. La atención de los investigadores fue atraída por los bacteriófagos, virus que devoran bacterias. A diferencia de los antibióticos, que destruyen tanto los dañinos como los microflora saludable organismo, los bacteriófagos son selectivos, solo afectan bacteria patogénica. ¿Cómo actúan los bacteriófagos en el cuerpo? Penetran sólo en determinadas células e interactúan con su ADN, creando un efecto lisogénico o lítico. Al influir en los microbios de tipo lítico, los bacteriófagos los destruyen, lo que les permite multiplicarse rápidamente. El tipo lisogénico representa la penetración del genoma del fago en el genoma bacteriano, su síntesis y una mayor transición de una generación a otra. La información sobre los bacteriófagos apareció hace más de un siglo cuando se utilizaban para tratar estafilococos. Actualmente, se utilizan ampliamente para la prevención y el tratamiento de infecciones intestinales, estafilocócicas, estreptocócicas, tifoideas y muchas otras. Medicina moderna Se buscan métodos que no utilicen bacteriófagos vivos, sino enzimas que afecten a las bacterias patógenas mediante lisis. Su uso puede ser en forma de spray nasal u oral, pasta de dientes, alimentos, aditivos alimentarios. La eficacia del uso de bacteriófagos consiste en la ausencia de contraindicaciones y complicaciones, compatibilidad con otros fármacos, influencia activa para microbios resistentes a los antibióticos. Debido a estas propiedades, los bacteriófagos se evalúan como futuros fármacos para pelea exitosa con infecciones.
Las ventajas más importantes de la terapia con fagos son alta sensibilidad microflora patógena al bacteriófago, la posibilidad de utilizar inicialmente pequeñas dosis del bacteriófago, compatibilidad con todo tipo de terapia antibacteriana tradicional, ausencia de contraindicaciones para la profilaxis con fagos y la terapia con fagos. Se ha establecido que en la naturaleza no existen microorganismos absolutamente resistentes al bacteriófago. Es importante que la reproducción del bacteriófago sólo sea posible en presencia de bacterias sensibles a él. Después de la muerte de la última célula microbiana en el foco de una lesión infecciosa, detiene su trabajo activo y se elimina del cuerpo sin dejar rastro.
Debido a la disminución observada acción terapéutica antibióticos, las preparaciones de bacteriófagos se utilizan en Práctica clinica como alternativa a los antibióticos y en combinación con estos últimos. Las preparaciones de bacteriófagos no son inferiores en efectividad a los medicamentos antibacterianos, estimulan factores locales de acción específica y inmunidad no específica y no causan reacciones adversas tóxicas o alérgicas. Los bacteriófagos se prescriben por vía oral y también se utilizan para irrigar heridas, para su introducción en cavidades drenadas: cavidades abdominales, pleurales, sinusales, oído medio, abscesos, heridas, útero, vejiga. Cuando se administran por vía oral y en aerosol, así como cuando se aplican a la superficie de las membranas mucosas, los bacteriófagos penetran en la sangre y la linfa y se excretan a través de los riñones, desinfectando el tracto urinario.
Actualmente, ha habido un renovado interés por la terapia con fagos en cirugía, urología, oftalmología y traumatología.
Las preparaciones terapéuticas y profilácticas de bacteriófagos están compuestas de bacteriófagos policlonales virulentos con un amplio espectro de acción, activos contra bacterias resistentes a los antibióticos. Se producen en forma líquida, en tabletas resistentes a los ácidos, en forma de supositorios, ungüentos y linimentos.
Las preparaciones de bacteriófagos son un filtrado estéril de fagolizados bacterianos; se prescriben por vía oral, localmente para irrigación de heridas y membranas mucosas, introducción en las cavidades del útero, vejiga, oído, senos paranasales, así como en las cavidades drenadas: abdominal, pleural y en las cavidades con abscesos después de la eliminación del exudado.
Los bacteriófagos pueden penetrar rápidamente en la sangre y la linfa y se excretan a través de los riñones en la orina. Como muestran nuestros estudios, después de tomar 30 ml de bacteriófago, las partículas de fagos se detectan en la orina dentro de 2 horas y su concentración máxima en la orina se alcanza entre 6 y 8 horas después de la administración.
La actividad de los bacteriófagos terapéuticos y profilácticos contra patógenos de enfermedades purulentas, sépticas y enterales es bastante alta: del 72% al 90%, incluso contra cepas de origen hospitalario, caracterizadas por una resistencia múltiple a los antibióticos. La correspondencia de las preparaciones de bacteriófagos con la estructura atiológica moderna de los patógenos se logra mediante su constante adaptación a las cepas circulantes debido a la renovación de las razas de fagos y la producción de sellos bacterianos. Esta característica distingue a los fagos de otros. antimicrobianos- antibióticos, eubióticos o vacunas, cuando las cepas de producción o las cepas productoras, o la sustancia sintetizada, no estén sujetas a modificación alguna. Esta plasticidad de las preparaciones de bacteriófagos asegura la continuación de la resistencia primaria a los fagos de los patógenos.
Ventajas de los medicamentos bacteriófagos.
Las ventajas de los fármacos bacteriófagos incluyen una especificidad de acción estrecha que, a diferencia de los antibióticos, no inhibe la microflora normal. Se ha demostrado el efecto estimulante del bacteriófago estafilocócico sobre las bifidobacterias: componente esencial microbiocenosis intestinal. Uso de bacteriófagos para el tratamiento. enfermedades infecciosas Estimula factores de inmunidad específica e inespecífica, lo que es especialmente eficaz para el tratamiento de enfermedades crónicas. enfermedades inflamatorias en el contexto de condiciones inmunosupresoras, transporte bacteriano.
Trabajo experimental y de largo plazo. observaciones clínicas Se ha demostrado la imposibilidad de transferir plásmidos de resistencia a los antibióticos y toxigenicidad mediante fármacos terapéuticos y profilácticos de bacteriófagos, porque son complejos policlonales de bacteriófagos virulentos.
En Rusia, los países de la CEI, Polonia, Francia y España, los bacteriófagos se utilizan ampliamente en medicina y veterinaria. Acumulado gran experiencia uso de bacteriófagos en el tratamiento de infecciones intestinales: alta eficacia clínica de la terapia con fagos para enfermedades agudas y disentería crónica, salmonelosis, acompañada de higienización de los transportistas. La alta eficacia epidemiológica del uso preventivo de los bacteriófagos de la disentería, la fiebre tifoidea y la salmonella ha sido demostrada en experimentos epidemiológicos controlados realizados en instituciones preescolares y empresas industriales, se estableció una disminución en la tasa de incidencia de 3 a 6 veces. El uso de bacteriófagos ha mostrado buenos resultados en el tratamiento de enfermedades causadas por bacterias oportunistas, disbiosis, lesiones purulentas piel, órganos otorrinolaringológicos, sistema musculoesquelético, sistema genitourinario, sistemas circulatorio y respiratorio, incluso en recién nacidos y niños del primer año de vida.
Una condición importante que garantiza la eficacia del tratamiento con preparaciones de fagos es una cierta sensibilidad a los fagos del patógeno.
Es evidente la larga experiencia de la terapia con fagos en el Instituto de Investigaciones de Urología; Como resultado de la adaptación de los bacteriófagos comerciales a las cepas hospitalarias que circulan en la clínica urológica de NPO "Biophage", la sensibilidad a los fagos de las cepas aumentó en un 15% y se situó al nivel o superior a la sensibilidad a los antibióticos extraños más modernos. En el fondo uso a largo plazo bacteriófagos en el hospital entre cepas hospitalarias no se observó desarrollo de resistencia a los fagos, mientras que la resistencia a los antibióticos disminuyó. La eficacia clínica de la terapia con fagos se observó en el 92% de los casos, superando a menudo los resultados de la terapia con antibióticos. La ausencia de contraindicaciones y complicaciones al usar preparaciones de bacteriófagos, la posibilidad de su uso en combinación con otros. medicamentos, incluso con antibióticos, actividad contra cepas resistentes a los antibióticos y adaptación de los bacteriófagos a patógenos modernos- todo esto nos permite evaluar las preparaciones de bacteriófagos como un medio altamente eficaz y prometedor para el tratamiento de emergencia de infecciones purulentas-sépticas y enterales. Sin embargo, los fagos, estos "ordenanzas naturales", pueden usarse no solo para el tratamiento, sino también para la prevención de enfermedades infecciosas. Se pueden recetar a mujeres embarazadas, madres lactantes y niños de cualquier edad, incluidos los bebés prematuros. La condición principal para su uso exitoso es probar la sensibilidad del cultivo aislado al fago correspondiente. Se observó un patrón sorprendente: a diferencia de los antibióticos, la sensibilidad de las cepas clínicas de microorganismos a los bacteriófagos es estable y tiende a aumentar, lo que puede explicarse por el enriquecimiento. drogas medicinales nuevas razas de fagos. Además de las aplicaciones médicas, los bacteriófagos se utilizan ampliamente en medicina veterinaria; El bacteriófago estafilocócico es especialmente eficaz en el tratamiento de la mastitis en vacas. Las preparaciones de bacteriófagos se prescriben por vía oral para enfermedades. órganos internos o localmente, directamente a la lesión. El efecto del fago aparece entre 2 y 4 horas después de su administración (lo cual es especialmente importante en condiciones de cuidados intensivos). Los bacteriófagos penetran en la sangre, la linfa y se excretan a través de los riñones, desinfectando el tracto urinario.
Así, los bacteriófagos utilizan:
En medicina veterinaria para:
prevención y tratamiento enfermedades bacterianas pájaros y animales;
tratamiento de enfermedades inflamatorias purulentas de las membranas mucosas de los ojos y la cavidad bucal;
prevención de complicaciones inflamatorias purulentas en quemaduras, heridas, intervenciones quirúrgicas;
En ingeniería genética:
para transducción - transmisión natural genes entre bacterias;
como vectores que transfieren secciones de ADN;
utilizando fagos, es posible diseñar cambios específicos en el genoma del ADN del huésped;
En la industria alimentaria:
los productos cárnicos y avícolas listos para el consumo ya se están procesando en masa con agentes que contienen fagos;
los bacteriófagos se utilizan en la producción de productos alimenticios a partir de carne, aves, queso, productos vegetales, etc.;
CM. ZAKHARENKO, Ph.D., Profesor asociado, Militar academia medica a ellos. CM. Kírov, San Petersburgo
Los bacteriófagos son microorganismos únicos a partir de los cuales se ha creado un grupo de fármacos terapéuticos y profilácticos con propiedades y características especiales. Sus acciones subyacentes son naturales. mecanismos fisiológicos Las interacciones entre fagos y bacterias permiten predecir la diversidad infinita tanto de los propios bacteriófagos como de formas posibles sus aplicaciones. A medida que se expandan las colecciones de bacteriófagos, sin duda aparecerán nuevos patógenos objetivo y se ampliará la gama de enfermedades para las cuales los fagos pueden usarse tanto como monoterapia como parte de regímenes de tratamiento complejos.
Si, usa piobacteriófago polivalente El sextafago en el tratamiento de la necrosis pancreática infectada (Academia Médica Estatal de Perm que lleva el nombre del académico E.A. Wagner) hizo posible restaurar más rápidamente los parámetros básicos de la homeostasis y la función de órganos y sistemas en los pacientes. También hubo una reducción significativa en el número complicaciones postoperatorias Y fallecidos: en el grupo de pacientes que recibieron terapia estándar la mortalidad fue del 100%, mientras que en el grupo que recibió BF fue del 16,6%.
Debido a la inocuidad y reactogenicidad de los fármacos BF, su uso en práctica pediátrica, incluso en recién nacidos. Interesante la experiencia de la escuela infantil regional de Nizhny Novgorod hospital clínico, donde durante el período de complicaciones de la situación epidemiológica, junto con las medidas antiepidémicas habituales, se utilizaron tanto BF - Intesti-bacteriophage como BF Pseucfomonas aeruginosa. Se demostró una disminución de 11 veces en la incidencia de infección nosocomial de etiología por Pseudomonas. alta eficiencia aplicación de BF. Se pueden recetar medicamentos BF para el tratamiento de disbiosis y trastornos. sistema digestivo y para prevenir la colonización de las membranas mucosas del tracto gastrointestinal por bacterias oportunistas. Las preparaciones BF multicomponentes son ideales para el alivio inmediato de los primeros signos de malestar gastrointestinal.
Hasta la fecha, la empresa ha planeado linea enteraáreas prioritarias para el desarrollo y producción de bacteriófagos terapéuticos y profilácticos, que se correlacionan con las nuevas tendencias globales emergentes. Se están creando e introduciendo nuevos medicamentos: se han desarrollado BF contra serraciones y enterobacterias, se está trabajando para crear un fármaco fago contra Helicobacter pylori.
Sólo un fabricante de estos medicamentos es NPO Microgen, según el informe del subdirector del departamento de ciencia y desarrollo innovador Alla Lobastova produce más de 2 millones de paquetes al año. Desafortunadamente, las ideas de muchos médicos sobre los bacteriófagos están lejos de ser objetivas. No mucha gente sabe que los bacteriófagos activos contra el mismo patógeno pueden pertenecer a diferentes familias, tener diferentes ciclos de vida, etc. Por ejemplo, los bacteriófagos P. aeruginosa pertenecen a las familias Myoviridae, Podoviridae, Siphoviridae y tienen una función lítica. ciclo vital o moderado. Diferentes cepas del mismo patógeno pueden tener diferentes sensibilidades a los bacteriófagos. La mayoría de los especialistas saben (han oído, alguien lo usó) sobre la existencia de líquido y tableta. forma de dosificación Fármacos terapéuticos y profilácticos de bacteriófagos. Sin embargo, su gama es mucho más amplia, lo que puede considerarse una ventaja absoluta, especialmente en combinación con una variedad de vías de administración (administración oral, administración en enemas, aplicaciones, irrigación de heridas y mucosas, administración en las cavidades de las heridas, etc.). ). A ventajas obvias Los bacteriófagos se clasifican tradicionalmente en efecto específico a una población bastante limitada de bacterias, una existencia limitada en el tiempo (hasta que la población objetivo de microorganismos desaparezca), la ausencia de tales efectos secundarios tan tóxico y reacciones alérgicas, reacciones disbióticas, etc. Estos medicamentos se pueden utilizar en una variedad de grupos de edad y durante el embarazo. Los bacteriófagos en sí no son alérgenos importantes. Los casos de intolerancia a los fármacos bacteriófagos se asocian principalmente con una reacción a los componentes del medio nutritivo. Todos los principales fabricantes de este grupo de medicamentos se esfuerzan por lograr la máxima calidad de los componentes utilizados, lo que reduce la probabilidad de que se produzcan tales reacciones. En el contexto de una creciente resistencia a los antibióticos, algunos autores proponen considerar a los bacteriófagos como la mejor alternativa a los antibióticos. Los fármacos terapéuticos y profilácticos de bacteriófagos son un cóctel de combinaciones especialmente seleccionadas (un complejo de policlonales altamente virulentos virus bacterianos, especialmente seleccionado contra los grupos más comunes de patógenos infecciones bacterianas) basado en las colecciones de fagos del fabricante. Sucursales de FSUE NPO Microgen en Ufa, Perm y Nizhny Novgorod – centros modernos producción de tales drogas. Posibilidad de crear personalizado microorganismos patógenos Los fármacos terapéuticos y profilácticos de los bacteriófagos son otra ventaja importante de este grupo de fármacos. La creciente resistencia de las bacterias a los fármacos antimicrobianos y la frecuente polietiología de las enfermedades infecciosas modernas requieren una terapia antibiótica combinada (dos, tres y, a veces, más fármacos antimicrobianos). Para la selección esquema efectivo La terapia con antibióticos, además de la sensibilidad real de las bacterias al medicamento, es necesario tener en cuenta lo suficiente. Número grande factores. La fagoterapia también tiene ciertas ventajas a este respecto. Por un lado, el uso de una combinación de bacteriófagos no va acompañado de su interacción entre sí y no conduce a cambios en los patrones de su uso. Dentro del conjunto existente de bacteriófagos terapéuticos, existen varias combinaciones bien probadas: bacteriófago coliproteico, piobacteriófago polivalente y bacteriófago intestinal. Por otra parte, las bacterias no tienen mecanismos comunes resistencia a antibióticos y fagos, por lo que se pueden utilizar tanto cuando el patógeno es resistente a uno de los fármacos como en una combinación de “antibiótico + bacteriófago”. Esta combinación es especialmente eficaz para destruir biopelículas microbianas. El experimento demuestra de manera convincente que uso combinado Los antagonistas del hierro y los bacteriófagos pueden alterar la formación de biopelículas. Klebsiella pneumoniae. Al mismo tiempo, se produce una disminución significativa en el tamaño de la población microbiana y una disminución en el número de células "jóvenes". Uno mas característica importante La acción de los bacteriófagos es un fenómeno como la inducción de la apoptosis. Algunas cepas de E. coli tienen genes que provocan la muerte celular después de la introducción del bacteriófago T4. Así, en respuesta a la expresión de genes tardíos del fago T4, el gen lit (codifica una proteasa que destruye el factor de elongación EF-Tu, necesario para la síntesis de proteínas), bloquea la síntesis de todas las proteínas celulares. El gen prrC codifica una nucleasa que escinde el ARNt de lisina. La nucleasa es activada por el gen stp producto del fago T4. En las células infectadas con el fago T4, los genes rex (pertenecientes al genoma del fago y expresados en células lisogénicas) provocan la formación de canales iónicos, lo que provoca la pérdida de iones vitales por parte de las células y, posteriormente, la muerte. El propio fago T4 puede prevenir la muerte celular cerrando los canales con sus proteínas, productos de los genes rII. Si las bacterias desarrollan resistencia a un antibiótico, es necesario buscar nuevas opciones para modificar la molécula activa o sustancias fundamentalmente nuevas. Lamentablemente, el ritmo de introducción de nuevos antibióticos se ha ralentizado significativamente en los últimos años. La situación con los bacteriófagos es fundamentalmente diferente. Las colecciones de los grandes fabricantes incluyen docenas de cepas de bacteriófagos ya preparadas y se reponen constantemente con nuevos fagos activos. Gracias al seguimiento continuo de la sensibilidad de los patógenos aislados a los bacteriófagos, los fabricantes ajustan las composiciones de fagos suministradas a las regiones. Gracias a los bacteriófagos adaptados, es posible eliminar los brotes de infecciones nosocomiales provocadas por cepas resistentes a los antibióticos. 
En oralmente Los bacteriófagos llegan rápidamente a los sitios de infección: cuando los pacientes con enfermedades inflamatorias purulentas los toman por vía oral, en una hora los fagos ingresan a la sangre, después de 1 a 1,5 horas se detectan en el exudado broncopulmonar y en la superficie de las quemaduras, después de 2 horas. - de la orina y también del líquido cefalorraquídeo de pacientes con lesiones cerebrales traumáticas.
Así, los bacteriófagos son microorganismos únicos, a partir de los cuales se ha creado un grupo de fármacos terapéuticos y profilácticos con propiedades y características especiales. Los mecanismos fisiológicos naturales subyacentes de interacción entre fagos y bacterias permiten predecir una variedad infinita tanto de los propios bacteriófagos como de las posibles formas de su uso. A medida que se expandan las colecciones de bacteriófagos, sin duda aparecerán nuevos patógenos objetivo y se ampliará la gama de enfermedades para las cuales los fagos pueden usarse tanto como monoterapia como parte de regímenes de tratamiento complejos. Una visión moderna del destino futuro de la terapia con fagos debería basarse tanto en la alta especificidad de su acción como en la necesidad de cumplir estrictamente con todas las reglas de la terapia con fagos. Es erróneo contrastar los bacteriófagos con cualquier medio de terapia etiotrópica.
Aplicación práctica de los fagos. Los bacteriófagos se utilizan en el diagnóstico de laboratorio de infecciones para la identificación intraespecífica de bacterias, es decir, la determinación del fagovar (fagotipo). Para ello, se utiliza el método de tipificación de fagos, basado en la estricta especificidad de la acción de los fagos: se aplican gotas de varios fagos de tipos específicos de diagnóstico a una placa con un medio nutritivo denso sembrado con un "césped" de un cultivo puro. del patógeno. El fago de una bacteria está determinado por el tipo de fago que provocó su lisis (formación de una mancha estéril, “placa”, o “colonia negativa”, fago). La técnica de fagotipificación se utiliza para identificar el origen y las rutas de propagación de la infección (marcado epidemiológico). El aislamiento de bacterias del mismo fagovar de diferentes pacientes indica una fuente común de infección.
Los fagos también se utilizan para tratar y prevenir una serie de infecciones bacterianas. Producen fagos tifoideos, salmonella, disentería, pseudomonas, estafilococos, estreptococos y drogas combinadas(coliproteos, piobacteriófagos, etc.). Los bacteriófagos se prescriben según indicaciones por vía oral, parenteral o tópica en forma de líquido, tabletas, supositorios o aerosoles.
Los bacteriófagos se utilizan ampliamente en ingeniería genética y biotecnología como vectores para producir ADN recombinante.
Las preparaciones de bacteriófagos utilizadas en la práctica son un filtrado de un caldo de cultivo de los microbios correspondientes lisados por el fago, que contiene partículas de fagos vivos, así como antígenos bacterianos disueltos liberados de las células bacterianas durante su lisis. La preparación resultante, un bacteriófago líquido, debería tener un aspecto completamente líquido claro color amarillo mayor o menor intensidad.
Para su uso con fines terapéuticos y profilácticos, los fagos se pueden producir en forma de tabletas con un recubrimiento resistente a los ácidos. Los fagos secos granulados son más estables durante el almacenamiento y cómodos de usar. Una tableta de bacteriófago seco corresponde a 20-25 ml de preparación líquida. La vida útil de las preparaciones secas y líquidas es de 1 año. Bacteriófago líquido debe almacenarse a una temperatura de + 2 +10 C, seco, no superior a +1 ° C, pero se puede almacenar en el refrigerador a temperaturas negativas.
El bacteriófago por vía oral permanece en el cuerpo durante 5 a 7 días. Como regla general, la ingesta de un bacteriófago no va acompañada de reacciones ni complicaciones. No existen contraindicaciones de uso. Se utilizan en forma de irrigaciones, enjuagues, lociones, tampones, inyecciones y también se administran en las cavidades: abdominal, pleural, articular y vejiga, dependiendo de la ubicación del patógeno.
Los fagos de diagnóstico se producen tanto en forma líquida como seca en ampollas y antes de comenzar a trabajar, el bacteriófago seco se diluye. Si el título, tr, está indicado en las ampollas, la DRT (dosis de título de trabajo) se utiliza en la reacción de fagolización (método Otto) para identificar bacterias; si se indica el tipo de fago, entonces para la tipificación de fagos, para determinar la fuente. de infección.
El efecto de un bacteriófago en un cultivo microbiano en medio líquido y en medio sólido.
Método Otto (gota que gotea)
Siembre espesamente el césped del cultivo en estudio. De 5 a 10 minutos después de la siembra, se aplica un fago de diagnóstico líquido a la superficie seca del medio nutritivo. El plato se inclina ligeramente para que una gota de fago se extienda sobre la superficie del agar. La taza se coloca en un termostato durante 18-24 horas. Los resultados se calculan según ausencia total crecimiento del cultivo en el sitio donde se aplica la gota de fago.
Experimento en medio nutritivo líquido.
El cultivo en estudio se inocula en dos tubos de ensayo con medio líquido. Se añade un bacteriófago de diagnóstico con un asa a un tubo de ensayo (“O”). Después de 18-20 horas, en un tubo de ensayo donde no se agregó el bacteriófago ("K"), se observa una fuerte turbidez del caldo: el cultivo inoculado ha crecido. El caldo del tubo de ensayo al que se añadió el bacteriófago permaneció transparente debido a la lisis del cultivo bajo su influencia.
Tipificación de fagos de bacterias
Según el espectro de acción, se distinguen los siguientes bacteriófagos: especies de bacterias polivalentes relacionadas con la lisis; bacterias monovalentes lisadoras cierto tipo; tipos individuales típicos de lisis (variantes) de bacterias.
Por ejemplo, una cepa de estafilococo patógeno puede ser lisada por varios tipos de fagos, por lo que todos los fagos (24) y cepas típicos estafilococos patógenos combinados en 4 grupos.
El método de tipificación de fagos tiene gran importancia para la investigación epidemiológica, ya que nos permite identificar el origen y las rutas de propagación de patógenos. Para ello, se determina el fagovar aislado de material patológico. cultura pura en medios nutritivos sólidos utilizando fagos de diagnóstico estándar.
El fagovar de un cultivo de microorganismos está determinado por el fago típico que provocó su lisis. El aislamiento de bacterias del mismo fagovar de diferentes sujetos indica la fuente de infección.
