Cepas hospitalarias de microorganismos. Cepa hospitalaria del patógeno.

– diversas enfermedades infecciosas contraídas en un centro médico. Dependiendo del grado de propagación, se pueden distinguir formas generalizadas (bacteriemia, septicemia, septicopemia, shock bacteriano) y localizadas (con daños en la piel y tejido subcutáneo, sistema respiratorio, cardiovascular, urogenital, huesos y articulaciones, sistema nervioso central, etc. .) se distinguen. . La identificación de patógenos de infecciones nosocomiales se lleva a cabo mediante métodos de diagnóstico de laboratorio (microscópicos, microbiológicos, serológicos, biológicos moleculares). En el tratamiento de infecciones nosocomiales se utilizan antibióticos, antisépticos, inmunoestimulantes, fisioterapia, hemocorrección extracorpórea, etc.

información general

Las infecciones nosocomiales (hospitalarias, nosocomiales) son enfermedades infecciosas de diversas etiologías que surgieron en un paciente o empleado médico en relación con su estadía en una institución médica. Una infección se considera nosocomial si se desarrolla no antes de las 48 horas posteriores al ingreso del paciente al hospital. La prevalencia de infecciones nosocomiales (IAAS) en instituciones médicas de diversos perfiles es del 5 al 12%. La mayor parte de las infecciones nosocomiales se produce en hospitales obstétricos y quirúrgicos (unidades de cuidados intensivos, cirugía abdominal, traumatología, traumatología por quemaduras, urología, ginecología, otorrinolaringología, odontología, oncología, etc.). Las infecciones nosocomiales representan un importante problema médico y social, ya que agravan el curso de la enfermedad subyacente, aumentan 1,5 veces la duración del tratamiento y 5 veces el número de muertes.

Etiología y epidemiología de las infecciones nosocomiales.

Los principales agentes causantes de las infecciones nosocomiales (85% del total) son los microorganismos oportunistas: cocos grampositivos (epidérmicos y Staphylococcus aureus, estreptococos betahemolíticos, neumococos, enterococos) y bacterias gramnegativas en forma de bastoncillos (Klebsiella, Escherichia, Enterobacter, Proteus, Pseudomonas, etc.). Además, en la etiología de las infecciones nosocomiales, es importante el papel específico de los patógenos virales del herpes simple, la infección por adenovirus, la influenza, la parainfluenza, la citomegalia, la hepatitis viral, la infección respiratoria sincitial, así como los rinovirus, rotavirus, enterovirus, etc. Las infecciones nosocomiales también pueden ser causadas por hongos patógenos y condicionalmente patógenos (levaduras, mohos, radiata). Una característica de las cepas intrahospitalarias de microorganismos oportunistas es su alta variabilidad, resistencia a los medicamentos y resistencia a factores ambientales (radiación ultravioleta, desinfectantes, etc.).

Las fuentes de infecciones nosocomiales en la mayoría de los casos son pacientes o personal médico portadores de bacterias o pacientes con formas de patología borradas y manifiestas. Las investigaciones muestran que el papel de terceros (en particular, los visitantes del hospital) en la propagación de infecciones nosocomiales es pequeño. La transmisión de diversas formas de infección hospitalaria se realiza a través de gotitas en el aire, mecanismos fecal-orales, de contacto y transmisibles. Además, la vía parenteral de transmisión de infecciones nosocomiales es posible durante diversos procedimientos médicos invasivos: muestras de sangre, inyecciones, vacunas, manipulaciones instrumentales, operaciones, ventilación mecánica, hemodiálisis, etc. Así, en una institución médica es posible infectarse. con hepatitis, enfermedades inflamatorias purulentas, sífilis, infección por VIH. Se conocen casos de brotes nosocomiales de legionelosis en los que los pacientes tomaban duchas medicinales y baños de hidromasaje.

Los factores involucrados en la propagación de una infección nosocomial pueden incluir artículos y muebles para el cuidado, instrumentos y equipos médicos, soluciones para terapia de infusión, monos y manos del personal médico, productos médicos reutilizables (sondas, catéteres, endoscopios), agua potable, ropa de cama y suturas contaminados. y material de vendaje y muchos otros. etc.

La importancia de ciertos tipos de infecciones nosocomiales depende en gran medida del perfil de la institución médica. Así, en los departamentos de quemados predomina la infección por Pseudomonas aeruginosa, que se transmite principalmente a través de los elementos asistenciales y las manos del personal, siendo el principal foco de infección nosocomial los propios pacientes. En los centros de atención de maternidad, el principal problema es la infección estafilocócica, transmitida por el personal médico portador de Staphylococcus aureus. En los departamentos de urología dominan las infecciones causadas por la flora gramnegativa: intestinal, Pseudomonas aeruginosa, etc. En los hospitales pediátricos, el problema de la propagación de infecciones infantiles (varicela, paperas, rubéola, sarampión) es de particular importancia. La aparición y propagación de infecciones nosocomiales se ve facilitada por la violación del régimen sanitario y epidemiológico de los centros de atención de salud (incumplimiento de las normas de higiene personal, asepsia y antisépticos, régimen de desinfección y esterilización, identificación y aislamiento inoportunos de las personas que son focos de infección, etc.).

El grupo de riesgo más susceptible al desarrollo de infecciones nosocomiales incluye a los recién nacidos (especialmente los prematuros) y los niños pequeños; pacientes ancianos y frágiles; personas que padecen enfermedades crónicas (diabetes mellitus, enfermedades de la sangre, insuficiencia renal), inmunodeficiencia, oncología. La susceptibilidad de una persona a las infecciones adquiridas en el hospital aumenta con la presencia de heridas abiertas, drenajes abdominales, catéteres intravasculares y urinarios, traqueotomía y otros dispositivos invasivos. La incidencia y gravedad de las infecciones nosocomiales están influenciadas por la estancia prolongada del paciente en el hospital, la terapia con antibióticos a largo plazo y la terapia inmunosupresora.

Clasificación de infecciones nosocomiales.

Según la duración de su curso, las infecciones nosocomiales se dividen en agudas, subagudas y crónicas; según la gravedad de las manifestaciones clínicas, en formas leves, moderadas y graves. Dependiendo del grado de prevalencia del proceso infeccioso, se distinguen las formas generalizadas y localizadas de infección nosocomial. Las infecciones generalizadas están representadas por bacteriemia, septicemia y shock bacteriano. A su vez, entre las formas localizadas se encuentran:

  • Infecciones de la piel, membranas mucosas y tejido subcutáneo, incluidas heridas postoperatorias, por quemaduras y traumáticas. En particular, estos incluyen onfalitis, abscesos y flemones, pioderma, erisipela, mastitis, paraproctitis, infecciones fúngicas de la piel, etc.
  • Infecciones de la cavidad bucal (estomatitis) y órganos otorrinolaringológicos (amigdalitis, faringitis, laringitis, epiglotitis, rinitis, sinusitis, otitis media, mastoiditis).
  • infecciones del sistema broncopulmonar (bronquitis, neumonía, pleuresía, absceso pulmonar, gangrena pulmonar, empiema pleural, mediastinitis)
  • infecciones del sistema digestivo (gastritis, enteritis, colitis, hepatitis viral)
  • infecciones oculares (blefaritis, conjuntivitis, queratitis)
  • infecciones del tracto urogenital (bacteriuria, uretritis, cistitis, pielonefritis, endometritis, anexitis)
  • Infecciones del sistema musculoesquelético (bursitis, artritis, osteomielitis).
  • Infecciones del corazón y de los vasos sanguíneos (pericarditis, miocarditis, endocarditis, tromboflebitis).
  • Infecciones del SNC (absceso cerebral, meningitis, mielitis, etc.).

En la estructura de las infecciones nosocomiales, las enfermedades sépticas purulentas representan el 75-80%, las infecciones intestinales, el 8-12%, las infecciones por contacto con la sangre, el 6-7%. Otras enfermedades infecciosas (infecciones por rotavirus, difteria, tuberculosis, micosis, etc.) representan alrededor del 5-6%.

Diagnóstico de infecciones nosocomiales.

Los criterios para pensar en el desarrollo de una infección nosocomial son: la aparición de signos clínicos de la enfermedad no antes de las 48 horas posteriores al ingreso en el hospital; conexión con intervención invasiva; Establecer la fuente de infección y el factor de transmisión. El juicio final sobre la naturaleza del proceso infeccioso se obtiene después de identificar la cepa del patógeno mediante métodos de diagnóstico de laboratorio.

Para excluir o confirmar la bacteriemia, se realizan hemocultivos bacteriológicos para determinar la esterilidad, preferiblemente al menos 2-3 veces. En las formas localizadas de infección nosocomial, el aislamiento microbiológico del patógeno se puede realizar a partir de otros entornos biológicos y, por lo tanto, se recomienda el cultivo de orina, heces, esputo, secreción de heridas, material de la faringe, hisopo de la conjuntiva y del tracto genital. realizado para la microflora. Además del método cultural para identificar patógenos de infecciones nosocomiales, se utilizan microscopía, pruebas serológicas (RSC, RA, ELISA, RIA), métodos virológicos y de biología molecular (PCR).

Tratamiento de infecciones nosocomiales.

Las dificultades en el tratamiento de las infecciones nosocomiales se deben a su desarrollo en un organismo debilitado, en el contexto de la patología subyacente, así como a la resistencia de las cepas hospitalarias a la farmacoterapia tradicional. Los pacientes con procesos infecciosos diagnosticados están sujetos a aislamiento; El departamento se somete a una exhaustiva desinfección continua y final. La elección del fármaco antimicrobiano se basa en las características del antibiograma: para las infecciones nosocomiales causadas por la flora grampositiva, la vancomicina es la más eficaz; Microorganismos gramnegativos: carbapenémicos, cefalosporinas de cuarta generación, aminoglucósidos. Es posible el uso adicional de bacteriófagos específicos, inmunoestimulantes, interferón, masa de leucocitos y terapia con vitaminas.

Si es necesario, se realiza irradiación sanguínea percutánea (ILBI, UVB), hemocorrección extracorpórea (hemosorción, linfosorción). La terapia sintomática se lleva a cabo teniendo en cuenta la forma clínica de la infección nosocomial con la participación de especialistas del perfil correspondiente: cirujanos, traumatólogos, neumólogos, urólogos, ginecólogos, etc.

Prevención de infecciones nosocomiales.

Las principales medidas para prevenir las infecciones nosocomiales se reducen al cumplimiento de los requisitos sanitarios, higiénicos y antiepidémicos. En primer lugar, se trata del régimen de desinfección de locales y artículos de cuidado, el uso de antisépticos modernos y altamente efectivos, un tratamiento previo a la esterilización y esterilización de instrumentos de alta calidad, y el estricto cumplimiento de las reglas de asepsia y antisépticos.

El personal médico debe observar medidas de protección personal al realizar procedimientos invasivos: trabajar con guantes de goma, gafas y mascarilla; Manipule los instrumentos médicos con cuidado. La vacunación del personal sanitario contra la hepatitis B, la rubéola, la gripe, la difteria, el tétanos y otras infecciones es de gran importancia en la prevención de infecciones nosocomiales. Todos los empleados de los centros de salud están sujetos a exámenes periódicos programados en el dispensario destinados a identificar el transporte de patógenos. Prevenir la aparición y propagación de infecciones nosocomiales será posible reduciendo la duración de la hospitalización de los pacientes, la terapia antibiótica racional, la validez de los procedimientos diagnósticos y terapéuticos invasivos y el control epidemiológico en los centros de salud.

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A pesar de la búsqueda e implementación de nuevos métodos para combatir los microbios hospitalarios, las infecciones nosocomiales son un tema de investigación actual debido al cambio constante en las propiedades de la microflora. El estudio sanitario y bacteriológico reveló cepas hospitalarias: Proteus spp., Staphylococcus aureus, Acinetobacter spp., Streptococcus spp., Klebsiella pneumoniae, Enterobacter y mohos. Dado que las cepas encontradas con mayor frecuencia fueron cepas de Staphylococcus aureus, se investigaron las características de Staphylococcus aureus. Las cepas aisladas de Staphylococcus aureus tenían un alto potencial de persistencia, resistencia múltiple a los antibióticos y algunos desinfectantes, lo que permitió que la microflora patógena permaneciera en el medio ambiente durante mucho tiempo y resistiera las fuerzas protectoras del macroorganismo. El alto potencial de persistencia de las cepas estafilocócicas aisladas es un factor de riesgo para los pacientes que conduce al desarrollo de enfermedades inflamatorias purulentas prolongadas.

infecciones nosocomiales

Estafilococo aureus

factores de persistencia

Resistencia antibiótica

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A pesar de la búsqueda e implementación de nuevos métodos para combatir los microbios hospitalarios, el problema de las infecciones nosocomiales sigue siendo uno de los más graves en las condiciones modernas y adquiere una importancia médica y social cada vez mayor. La relevancia del problema de las infecciones nosocomiales se debe a la aparición de las denominadas cepas de estafilococos, salmonella, Pseudomonas aeruginosa y otros patógenos adquiridas en el hospital (generalmente multirresistentes a los antibióticos y la quimioterapia). Se propagan fácilmente entre los niños y las personas debilitadas, especialmente los ancianos, los pacientes con reactividad inmunológica reducida, que constituyen el llamado grupo de riesgo.

La incidencia de infecciones hospitalarias oscila entre el 5 y el 20% del número total de pacientes hospitalizados en instituciones médicas. Según los resultados de varios estudios, la tasa de mortalidad en el grupo de pacientes hospitalizados que contrajeron infecciones nosocomiales es de 8 a 10 veces mayor que la de los pacientes hospitalizados sin infecciones nosocomiales. Los patógenos de las infecciones hospitalarias se caracterizan por un alto potencial persistente y una resistencia de rápido desarrollo a los desinfectantes y antibióticos, lo que permite que la microflora patógena permanezca en el medio ambiente durante mucho tiempo y resista las defensas del macroorganismo.

Las infecciones nosocomiales son causadas principalmente por origen bacteriano. Los patógenos virales, fúngicos y los protozoos son mucho menos comunes. Una característica de las infecciones nosocomiales es que pueden ser causadas no solo por patógenos obligados (por ejemplo, M. tuberculosis), sino también por patógenos oportunistas con una patogenicidad relativamente baja (S. maltophilia, Acinetobacter spp., Aeromonas spp., etc.). especialmente en pacientes con inmunodeficiencias. A pesar de la menor virulencia de los microorganismos oportunistas en comparación con los patógenos “clásicos” de las infecciones nosocomiales (S. aureus, P. aeruginosa, E. coli, Klebsiella spp.), su importancia etiológica ha aumentado significativamente en los últimos años.

Los principales agentes causantes de infecciones bacterianas son estafilococos, neumococos, enterobacterias gramnegativas, pseudomonas y representantes de anaerobios estrictos. El papel dominante lo desempeñan los estafilococos (hasta el 60% de todos los casos de infecciones nosocomiales), bacterias gramnegativas, virus respiratorios y hongos del género Candida. Las cepas bacterianas aisladas de pacientes con infecciones nosocomiales tienden a ser más virulentas y tener quimiorresistencia múltiple.

En este sentido, el propósito de este estudio fue identificar las características principales de las cepas nosocomiales de Staphylococcus aureus de las infecciones nosocomiales, incluido el potencial de persistencia, la resistencia a los antibióticos y la sensibilidad de las cepas hospitalarias a los desinfectantes.

La definición cualitativa más general que caracteriza la capacidad de un microorganismo para interactuar con un macroorganismo susceptible con el desarrollo de un proceso infeccioso es patogenicidad. El concepto de “virulencia” se utiliza tradicionalmente como una medida cuantitativa de patogenicidad, que refleja la intensidad del efecto alterador de la infección en el organismo huésped. En la clínica, los criterios para la virulencia de los microorganismos son la gravedad de los procesos infecciosos y la intensidad de los síntomas y síndromes individuales, que depende del conjunto de toxinas, enzimas, propiedades adhesivas e invasivas de las bacterias. Otro lado de la patogenicidad de los microorganismos es la capacidad no solo de iniciar el desarrollo de un proceso infeccioso, sino también de mantenerlo durante un período de tiempo relativamente largo (persistencia).

Materiales y métodos de investigación.

Se realizó un estudio bacteriológico de la contaminación microbiana de objetos ambientales de acuerdo con las recomendaciones metodológicas del régimen sanitario y epidemiológico. El muestreo de las superficies de varios objetos se llevó a cabo mediante el método del hisopo. Las cepas se identificaron teniendo en cuenta sus características morfológicas y culturales. Se han estudiado las actividades antilisozima, anticomplementaria y catalasa como factores de persistencia. La sensibilidad a los antibióticos se estudió mediante el método de difusión en disco. La sensibilidad de las cepas aisladas a una solución de anolito al 0,01% se estudió añadiendo una dilución adecuada a un cultivo bacteriano líquido. El procesamiento estadístico se llevó a cabo utilizando métodos estándar.

Resultados de la investigación y discusión.

Al estudiar los hisopos en una institución médica, se aislaron cepas de Staphylococcus aureus en el 35% de los casos, cepas de Klebsiella pneumoniae en el 17% de las muestras, Proteus vulgaris y Proteus mirabilis en el 10%, Enterobacter y Acinetobacter en el 2-5%. Dado que las cepas encontradas con mayor frecuencia fueron cepas de Staphylococcus aureus, se investigaron las características de Staphylococcus aureus.

Se estudiaron las actividades antilisozima (ALA), antiinterferón (AIA) y anticomplementaria (ACA) como factores de persistencia como posibles formas de contrarrestar el mecanismo de fagocitosis independiente del oxígeno y la actividad de la enzima bacteriana antioxidante catalasa. El 67% (20 cultivos) de las 30 cepas estudiadas presentaron actividad antilisozima. El 44% (13 cultivos) tenía AIA, el 34% (10 cultivos) de las cepas de S. aureus que estudiamos tenían AKA.

Se sabe que los principales factores bactericidas secretados por los fagocitos son el peróxido de hidrógeno y los productos de su descomposición por radicales libres, como el hipocloruro y el radical hidroxilo. Los estafilococos se adaptan para sobrevivir en ambientes con concentraciones elevadas de peróxido de hidrógeno induciendo genes de respuesta temprana al daño oxidativo. Los productos proteicos de estos genes son, entre otros, la enzima catalasa, que descompone el peróxido de hidrógeno en productos neutros: agua y oxígeno molecular, y la enzima superóxido dismutasa, que descompone el radical anión superóxido en oxígeno molecular. La actividad catalasa se detectó en el 80% de las cepas; al evaluar cuantitativamente la actividad catalasa de las bacterias, se encontró que la mayoría de las cepas (55%) tenían una actividad enzimática alta (4,0-5,1 unidades/20 millones).

El 35-42% de las cepas de S. aureus tenían resistencia múltiple, aunque mostraban sensibilidad a las cefalosporinas (ceftriaxona, cefotaxima, cefuroxima). Para estudiar la sensibilidad a los desinfectantes utilizados en instituciones médicas, se llevaron a cabo una serie de experimentos para determinar la sensibilidad de S. aureus a una solución de anolito. Se encontró que las cepas aisladas mostraron resistencia en más del 60% de los casos a una solución de anolito al 0,01%.

Así, al estudiar las principales características de las infecciones nosocomiales, incluida la persistencia, la resistencia a los antibióticos y la sensibilidad de las cepas hospitalarias a los desinfectantes, se pueden sacar las siguientes conclusiones:

1. Al seleccionar más desinfectantes en los hospitales, es necesario tener en cuenta que las cepas aisladas mostraron resistencia a la solución de anolito al 0,01% utilizada en las instituciones médicas modernas para la desinfección. Es posible que sea necesario usar esta solución desinfectante en una concentración más alta o reemplazarla con otra solución.

2. El alto potencial de persistencia de las cepas estafilocócicas aisladas es un factor de riesgo para los pacientes que conduce al desarrollo de enfermedades inflamatorias purulentas prolongadas. Por lo tanto, el estudio de las propiedades patogenéticamente significativas de los microorganismos destinados a inactivar los efectores de la inmunidad antiinfecciosa y, por lo tanto, interrumpir el proceso de eliminación del patógeno de la fuente de la inflamación, puede convertirse en un enfoque alternativo para predecir la duración de las enfermedades inflamatorias purulentas y hace Es posible utilizar oportunamente medicamentos inmunocorrectores.

Revisores:

Borukaeva I.Kh., Doctora en Ciencias Médicas, Profesora del Departamento de Fisiología Normal y Patológica de KBSU, Universidad Estatal Kabardino-Balkarian que lleva su nombre. SM. Berbekova", Nálchik;

Khasaeva F.M., Doctora en Ciencias Biológicas, Profesora del Departamento de Experiencia Veterinaria y Sanitaria de la Universidad Agraria Estatal de Kabardino-Balkarian que lleva su nombre. V.M. Kokova", Nálchik.

El trabajo fue recibido por el editor el 30 de octubre de 2014.

Enlace bibliográfico

Kharaeva Z.F., Balakhova B.O., Belimgotova R.R., Mustafaev I.M., Tugusheva D.S., Chochueva N.A., Shekikhacheva F.Yu. CARACTERÍSTICAS DE LAS CEPAS HOSPITALARIAS DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS // Investigación Fundamental. – 2014. – N° 11-6. – págs. 1316-1318;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=35722 (fecha de acceso: 13/12/2019). Llamamos su atención sobre las revistas publicadas por la editorial "Academia de Ciencias Naturales".



Titulares de la patente RU 2404254:

La invención se refiere a la identificación de cepas hospitalarias de microorganismos en instituciones médicas y la implementación de medidas antiepidémicas adecuadas en ellas. El método consiste en determinar las características genotípicas de virulencia de las cepas en estudio y compararlas con las características genotípicas de virulencia de cepas aisladas en una institución médica de pacientes y objetos circundantes. Las cepas se clasifican como cepas hospitalarias si las características genotípicas de virulencia de las cepas en estudio corresponden a las características genotípicas de virulencia de al menos una de las cepas aisladas en una institución médica de pacientes y objetos circundantes. El uso del método simplifica la identificación de cepas hospitalarias y reduce el tiempo para identificarlas. 1 mesa

La invención se refiere al campo de la medicina, concretamente a la epidemiología, y puede utilizarse para detectar la circulación de cepas hospitalarias y para llevar a cabo medidas antiepidémicas en instituciones médicas.

La relevancia del problema de las infecciones nosocomiales está determinada por su amplia distribución en instituciones médicas de diversos perfiles y el importante daño que estas enfermedades causan a la salud pública.

Para identificar la circulación de cepas hospitalarias en la práctica microbiológica se utilizan métodos de marcado epidemiológico, cuya esencia es identificar cultivos aislados por género y especie, y luego se realiza una identificación intraespecífica para establecer biovar, serovar, ecovar, resistencia. a sustancias antibacterianas y genotipo. Los métodos propuestos requieren importantes costos de material y mucho tiempo para la investigación de laboratorio.

Existe un método conocido para identificar cepas hospitalarias determinando la sensibilidad de las cepas a los antibióticos, compilando antibiogramas y comparando antibiogramas de cultivos bacterianos aislados de pacientes y del medio ambiente.

La desventaja del método propuesto es la falta de especificidad debido a la prevalencia generalizada de resistencia a los antibióticos, incluso en cepas de patógenos no hospitalarios, así como la dificultad de interpretar los resultados debido al alto grado de heterogeneidad de la población hospitalaria de el patógeno en términos de resistencia a los antibióticos.

Existe un método conocido para identificar cepas hospitalarias, que incluye determinar los biorritmos de bacterias aisladas de pacientes y comparar los biorritmos resultantes con los biorritmos de cepas no hospitalarias de referencia de un tipo determinado de bacteria. Los biorritmos se analizan según el período de actividad reproductiva bacteriana, frecuencia del ritmo, mesor, amplitud de la actividad reproductiva bacteriana y acrofase. Si los biorritmos de la cepa bacteriana aislada no coinciden con los biorritmos de la cepa no hospitalaria de referencia, la cepa aislada se clasifica como de adquisición hospitalaria.

Las desventajas de este método incluyen la dificultad de interpretar los resultados y la baja especificidad debido a la importante diversidad de genotipos hospitalarios y no hospitalarios con diferentes biorritmos. Además, al implementar este método, se requiere el trabajo de un microbiólogo las 24 horas, tomando mediciones después de 8, 12 y 24 horas desde el inicio de la investigación.

Como prototipo basado en la esencia técnica más cercana, hemos elegido un método para diagnosticar una cepa hospitalaria de Pseudomonas aeruginosa aeruginosa, que incluye determinar la sensibilidad de la cepa a los antibióticos, su fagotipo y serotipo, resistencia a desinfectantes, perfil plasmídico, coeficiente de adhesión. a las células epiteliales, la cepa PSEUDOMONAS AERUGIOSA se diagnostica como hospitalizada en ausencia de sensibilidad a nueve o más antibióticos, el mismo fagoserotipo, resistencia a cinco desinfectantes, un perfil plasmídico similar y un coeficiente de adhesión de 15±0,2 o más.

Las desventajas del método adoptado como prototipo incluyen el hecho de que el método requiere mucha mano de obra y tiempo, ya que requiere la determinación de muchas características de las cepas en estudio; se necesitan de 10 a 15 días para obtener el resultado final de el estudio. La implementación del método también requiere importantes costes de material.

El resultado técnico de la invención es simplificar el método de identificación de cepas hospitalarias y reducir el tiempo que lleva.

Este resultado técnico se logra determinando las características genotípicas de virulencia de las cepas en estudio y comparándolas con las características genotípicas de virulencia de cepas aisladas en una institución médica de pacientes y objetos circundantes. Las cepas se clasifican como cepas hospitalarias si las características genotípicas de la virulencia de las cepas en estudio corresponden a las características genotípicas de la virulencia de al menos una de las cepas aisladas en una institución médica de los pacientes y los objetos circundantes.

El método propuesto se lleva a cabo de la siguiente manera.

Se lleva a cabo la identificación de especies del cultivo aislado, se aísla el ADN y se determina la presencia de secuencias de nucleótidos correspondientes a las regiones genéticas de los factores de patogenicidad más típicos de los aislados clínicamente significativos de una especie determinada mediante la reacción en cadena de la polimerasa o cualquier otro método rápido.

A partir de la presencia de determinados genes, se determinan las características genotípicas de virulencia o patovares de las cepas estudiadas y se comparan con las características genotípicas de virulencia o patovares de cepas aisladas en una institución médica de pacientes y objetos circundantes y que tienen una supuesta conexión epidemiológica con las cepas en estudio. Una cepa se clasifica como hospitalaria si las características genotípicas de la virulencia de las cepas en estudio corresponden a las características genotípicas de la virulencia de al menos una de las cepas aisladas de pacientes y objetos circundantes en una institución médica.

Las características esenciales distintivas del método propuesto son:

Determinación de las características genotípicas de virulencia de las cepas estudiadas y su comparación con las características genotípicas de virulencia de cepas aisladas en una institución médica de pacientes y objetos circundantes;

Clasificación de una cepa como hospitalaria si las características genotípicas de virulencia de las cepas estudiadas corresponden a las características genotípicas de virulencia de al menos una de las cepas aisladas de pacientes y objetos circundantes en una institución médica.

Relación causa-efecto entre los rasgos esenciales distintivos y el resultado obtenido.

La elección de estas características genotípicas como principales características distintivas de la invención reivindicada se basa en la posición teórica fundamentada por los autores de que la virulencia es la característica principal de la cepa hospitalaria. Por ejemplo, se observó un aumento en el nivel de virulencia durante la formación de una cepa hospitalaria de Pseudomonas aeruginosa en un hospital urológico, Serratia marcesens en la unidad de cuidados intensivos neonatales. Sin embargo, otras características biológicas de las cepas hospitalarias, como la resistencia a los antibióticos, son secundarias. En particular, se ha demostrado que la resistencia múltiple a los fármacos antibacterianos puede ser igualmente característica de cepas de enterococos tanto hospitalarias como no hospitalarias. Así, desde nuestro punto de vista, los métodos de identificación de cepas hospitalarias basados ​​​​en la determinación de antibiogramas no son suficientemente específicos y requieren una confirmación obligatoria mediante otros métodos de tipificación intraespecíficos. Al mismo tiempo, se sabe que las poblaciones hospitalarias de patógenos de infecciones nosocomiales se diferencian de las poblaciones no hospitalarias en que contienen una mayor cantidad de genes de factores de patogenicidad que provocan una mayor virulencia. En este caso, los cultivos epidemiológicamente relacionados tendrán el mismo conjunto de factores de patogenicidad, que representan una cepa. Esta circunstancia permite utilizar la presencia de genes para factores de patogenicidad (al menos uno, ya que las cepas que no los tienen no tienen importancia clínica y epidémica) y su combinación (es decir, características genotípicas de virulencia) como característica distintiva de un cepa hospitalaria, siempre que otras cepas aisladas en una institución médica tengan características genotípicas similares, es decir, hay evidencia de su conexión epidemiológica.

Así, el uso de nuestro método propuesto nos permite identificar rápidamente las principales propiedades inherentes de una cepa hospitalaria (virulencia y los determinantes genéticos que la determinan) e identificar la cepa hospitalaria en función de la presencia de estas propiedades.

El conjunto de características esenciales distintivas es nuevo y permite, a diferencia del prototipo, simplificar el método de identificación de cepas hospitalarias y reducir el tiempo de su implementación.

Ejemplos de uso del método.

Durante la observación epidemiológica en un hospital ginecológico se determinaron las características genéticas de las cepas de Enterococcus spp. según el método reivindicado utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para 5 genes de virulencia: gelE, sprE, fsrB, esp y asal. Para aislar el ADN, se cultivaron cepas de enterococos en caldo de triptosa de soja (BioMerieux), después de lo cual se aisló el ADN mediante PCR expresa.

La PCR se llevó a cabo comenzando con la incubación preliminar de las muestras a 94°C durante 2 minutos, y luego durante 30 ciclos en las siguientes condiciones: desnaturalización (94°C) - 30 segundos, hibridación (47°C-65°C, dependiendo de Composición G-C de cebadores) - 60 segundos, síntesis (72°C) - 60 segundos, síntesis final 10 min a 72°C. Para la amplificación se utilizaron los cebadores que figuran en la tabla. El experimento se realizó en un instrumento de MJ Research.

Los resultados de la PCR se evaluaron después de electroforesis en gel de agarosa al 1% bajo luz ultravioleta.

Durante la observación epidemiológica en el hospital ginecológico se reveló que E. faecium No. 429 fue aislado de la paciente L., quien ingresó el 9 de julio de 2005 con diagnóstico de metroendometritis (historia clínica No. 25230), el día cinco. día de su estancia en el departamento. Con base en la determinación de los genes de virulencia, esta cepa se clasificó como genotipo 2 (presencia del gen esp en ausencia de los genes gelE, sprE, fsrB, asal). El mismo día se aisló este patógeno del genotipo correspondiente a partir de lavados de guantes (cepa 138 vs). Un examen epidemiológico reveló que el 11 de julio de 2005, durante el examen de la paciente L., se aisló de la bóveda vaginal posterior y del canal cervical la cepa No. 421, similar en características genotípicas a las cepas anteriores.

En este caso, el factor de transmisión podrían haber sido unos guantes considerados estériles, sacados para su examen de una bolsa común ya abierta.

Así, los cultivos nº 421, 429 y 138 a. C. tenían las mismas características genotípicas, el gen del factor de patogenicidad especialmente, y tenían una conexión epidemiológica obvia; Con base en las características anteriores, se clasificaron como cepa hospitalaria.

En el Departamento de Osteología Purulenta se llevó a cabo la vigilancia epidemiológica de las infecciones nosocomiales causadas por cepas de Staphylococcus aureus resistentes a la meticilina (MRSA). En octubre de 2008 se identificó SAMR con genotipo 1 (presencia del gen sea, en ausencia de los genes seb, sec, pvl, tst) en cuatro pacientes hospitalizados. Debido a que se asumió la propagación epidémica de la cepa hospitalaria de MRSA en el hospital, se decidió realizar un examen bacteriológico del entorno hospitalario para identificar los factores de transmisión de esta cepa. Como resultado de este examen, se aislaron 4 cultivos de estafilococos: 139 VS (del lavado del mango del tocador), 140 VS (del lavado del mango del grifo del vestidor), 148 VS ( de manos de la enfermera A.N.), 1a (de apósito aéreo). Estos cultivos se clasificaron según el método inventivo como cepa hospitalaria. La determinación de los genes de virulencia (enterotoxinas A, B, C, gen del shock tóxico y gen de la toxina Panton-Vallentyne) se realizó según el método de M. Mehrortra y Lina G.

Como resultado de los estudios, los cultivos 139 vs. y 140 vs. fueron asignados al genotipo 1 (presencia del gen sea, en ausencia de los genes seb, sec, pvl, tst), el cultivo 148 vs. fue asignado al genotipo 2 (presencia de genes mar, seb, en ausencia de los genes sec, pvl, tst), y al estudiar el cultivo 1a, resultó que no contiene los genes de los factores de patogenicidad en estudio. Así, al comparar las características genéticas de los cultivos estudiados con las características genéticas de cepas previamente detectadas en el hospital, los cultivos 139 vs. y 140 vs. se clasificaron como cepa hospitalaria, mientras que los cultivos 148 vs. y 1a no se clasificaron como hospitalarios. presiones.

El método inventivo se probó en la organización de la vigilancia epidemiológica de infecciones nosocomiales en hospitales de San Petersburgo (departamento de ginecología del hospital Mariinskaya, departamento de osteología purulenta del hospital Pedro el Grande, hospital del centro de la ciudad para la prevención del SIDA y enfermedades infecciosas ). Se estudiaron un total de 105 cepas de enterococos y 61 cepas de Staphylococcus aureus. En los dos primeros hospitales, las pruebas del método propuesto permitieron identificar la formación de cepas hospitalarias de enterococos y Staphylococcus aureus. Debido a que el método tradicionalmente utilizado para clasificar los cultivos como cepa hospitalaria, basado en la determinación del antibiograma, tiene una especificidad insuficiente, se utilizó el método de marcado epidemiológico para verificar la exactitud de la clasificación de los cultivos estudiados como cepa hospitalaria. Para determinar si los cultivos aislados pertenecen a una cepa (tipo clonal), se utilizó una combinación de varios métodos de tipificación intraespecíficos, independientes entre sí (fagotipo y antibiograma para enterococos, tipificación mediante electroforesis de ADN de campo pulsado, secuencias spatip y antibiograma para estafilococos), y se utilizó vigilancia para comprobar que la cepa causaba casos hospitalarios asociados. El uso de una combinación de métodos de tipificación intraespecíficos en comparación con datos epidemiológicos permite una identificación confiable de la cepa hospitalaria. Se probaron un total de 38 cultivos microbianos utilizando el método propuesto y el método de comparación. En todos los casos, el uso de esta técnica metodológica permitió confirmar la corrección de clasificar los cultivos estudiados como cepa hospitalaria.

Así, el método propuesto permite identificar cepas hospitalarias.

A diferencia del método elegido como prototipo, el método inventivo para identificar cepas hospitalarias puede reducir significativamente el tiempo empleado en identificar una cepa hospitalaria.

Según nuestras observaciones, el tiempo necesario para identificar 5 genes de factores de patogenicidad en 10 cepas bacterianas oscila entre 7 y 12 horas (desde el momento de obtener un cultivo puro del microorganismo), por lo que el proceso de clasificación de la cepa estudiada como la cepa hospitalaria no supera los dos días hábiles, a diferencia de los 10 a 15 días que se tardan cuando se identifica una cepa hospitalaria utilizando el método elegido como prototipo.

Para realizar este método, a diferencia del prototipo, no se requiere personal médico altamente calificado, lo que requiere el dominio de complejas técnicas genéticas moleculares (aislamiento y restricción de plásmidos) y microbiológicas (determinación de la adhesión de un microorganismo al epitelio). Además, el proceso de identificación de genes mediante el método PCR, a diferencia de las características determinadas por el método elegido como prototipo, puede automatizarse parcial o totalmente mediante robótica, lo que reduce significativamente el tiempo y los costes laborales.

Las características del método propuesto también incluyen la facilidad de interpretación de los resultados, ya que la clasificación del cultivo estudiado como cepa hospitalaria se realiza sobre la base de un solo criterio: la correspondencia de las características genotípicas de la virulencia de la cepa estudiada. con las características genotípicas de la virulencia de al menos una de las cepas aisladas de pacientes y objetos circundantes en instituciones de tratamiento y profilaxis.

Así, el método inventivo permite simplificar la identificación de cepas hospitalarias y reducir el tiempo del método.

Literatura

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Genes y cebadores Secuencia de nucleótidos 5′-3′ Tamaño esperado del producto de amplificación n.p.
gelE gelE 1 ACCCCGTATCATTGGTTT 419
gelE 2 ACGCATTGCTTTTTCCATC
especialmente especialmente 1 TTGCTAATGCCTAGTCCACGACC 933
especialmente 2 GCGTCAACACTTGCATTGCCGAA
sprE primavera 1 GCGTCAATCGGAAGAATCAT 233
primavera 2 CGGGGAAAAAGCTACATCAA
fsrb fsr 1 TTTATTGGTATGCGCCACAA 316
fsr 2 TCATCAGACCTTGGATGACG
asal asa 1 CCAGCCAACTATGGCGGAATC 529
asa 2 CCTGTCGCAAAGATCGACTGTA

Un método para identificar cepas hospitalarias, incluida la determinación del genotipo de la cepa, caracterizado porque las características genotípicas de virulencia de las cepas estudiadas se determinan y se comparan con las características genotípicas de virulencia de las cepas aisladas en una institución médica, de pacientes y objetos circundantes, las cepas se clasifican como cepas hospitalarias si las características genotípicas corresponden a la virulencia de las cepas estudiadas; características genotípicas de la virulencia de al menos una de las cepas aisladas en una institución médica, de pacientes y objetos circundantes.

Formación de tensiones hospitalarias. El término cepa microbiana hospitalaria se utiliza ampliamente en la literatura, pero no existe una comprensión común de este concepto. Algunos creen que una cepa hospitalaria es aquella que se aísla de los pacientes, independientemente de sus propiedades.

En la mayoría de los casos, por cepas hospitalarias se entienden cultivos que se aíslan de pacientes en un hospital y se caracterizan por una resistencia pronunciada a una cierta cantidad de antibióticos, es decir, según este entendimiento, una cepa hospitalaria es el resultado de la acción selectiva de los antibióticos. Es precisamente esta comprensión la que se incluye en la primera definición de cepas hospitalarias disponible en la literatura, dada por V.D. Belyakov y coautores.

Las cepas bacterianas aisladas de pacientes con infecciones nosocomiales suelen ser más virulentas y tienen quimiorresistencia múltiple. El uso generalizado de antibióticos con fines terapéuticos y profilácticos suprime sólo parcialmente el crecimiento de bacterias resistentes y conduce a la selección de cepas resistentes. Se forma un círculo vicioso: las infecciones nosocomiales emergentes requieren el uso de antibióticos altamente activos, que a su vez contribuyen a la aparición de microorganismos más resistentes. Un factor igualmente importante debe considerarse el desarrollo de disbiosis que se produce durante la terapia con antibióticos y conduce a la colonización de órganos y tejidos por microorganismos oportunistas Tab. 1. Factores que predisponen al desarrollo de infecciones.

Los factores externos son específicos de cualquier hospital Microflora del paciente Procedimientos médicos invasivos realizados en el hospital Personal médico Equipos e instrumentos Piel Cateterismo a largo plazo de venas y vejiga Transporte permanente de microorganismos patógenos Productos alimenticios Tracto gastrointestinal Intubación Transporte temporal de microorganismos patógenos Aire Sistema genitourinario Violación quirúrgica de la integridad de las barreras anatómicas Empleados enfermos o infectados Medicamentos y remedios Vías respiratorias EndoscopiaTabla 2. Los principales agentes causantes de las infecciones nosocomiales Bacterias Virus Protozoos Hongos Estafilococos y VHB, VHC, VHD Pneumocystis Candida Estreptococos VIH Aspirgillus Pseudomonas aeruginosa Virus de la influenza y otras infecciones virales respiratorias agudas Cryptosporidium Etorobacteria Virus del sarampión Escherichia Virus de la rubéola Salmonella Virus de las paperas IgellaYersiniaRotavirusMystery CambilobacteriaEnterobacteriaLegionellaVherpes virus Clostridium Citomegalovirus Anaeróbico no formador de esporas bacteriasMycoplasmaChlomydiaMycobacteriaBordetellaTabla 3. Principales fuentes de infecciones hospitalarias FuentePapel de la fuente en la propagaciónPacientesEl papel principal de la fuente en la propagación varía según las diferentes formas nosológicas y en los diferentes hospitalesPortadoresEs de gran importancia en la propagación de infecciones estafilocócicas, hepatitis B, C y D, salmonelosis, shigelosis, etc. Trabajadores médicosMás a menudo, los portadores asintomáticos de cepas predominantemente hospitalarias desempeñan un papel importante en la propagación de patógenos de infecciones respiratorias, neumocitosis, neumonía, bronquitis y ARVI. La frecuencia de transporte puede llegar a 50. Las personas involucradas en el cuidado de los pacientes no son de gran importancia, pueden ser portadores de estreptococos, estafilococos, enterobacterias y cambilobacterias, patógenos de enfermedades de transmisión sexual, rotavirus, citomegalovirus y otros herpetovirus, patógenos. de hepatitis y difteria, pneumocystis. Visitantes que visitan a pacientes El papel es muy limitado, puedo ser portador de estafilococos, enterobacterias o padecer infecciones virales respiratorias agudas. Tabla 4. Transmisión de infección hacia y desde el personal del hospital Enfermedades Modo de transmisión Del paciente al personal médico Del personal médico al paciente SIDA Varicela herpes zóster diseminado Alto Alto Herpes zóster localizado Bajo Bajo Conjuntivitis viral Alto Alto Infección por citomegalovirus Bajo - Hepatitis AN Bajo Raro Hepatitis B Bajo RaroHepatitis ni A ni BBajo-Herpes simpleBajoRaramente InfluenzaModeradoModeradoSarampiónAltoAltoInfección meningocócicaRaro-PaperasModeradoModeradoTos ferinaModerado ModeradoVirus respiratorio sincicialModeradoModeradoRotavirusModeradoModeradoRubéolaModeradoModeradoSalmonellaShigellaBajoBajoSarnaBajoBajoS. aureus-Rara vezEstreptococos, grupo A-Rara vezSífilisBajo-TuberculosisDe menor a mayorDe menor a mayor 3 Objetos, materiales y métodos de investigación Los objetos de investigación durante el control bacteriológico son - aire - diversos objetos ambientales - instrumentos quirúrgicos - jeringas, agujas - uso de múltiples sistemas de transfusión de sangre de sondas, catéteres, bujías, guantes de goma y otros productos fabricados con compuestos de caucho y plástico - material de sutura quirúrgica preparado para su uso - las manos de los cirujanos y la piel del campo quirúrgico. El estudio de las condiciones sanitarias e higiénicas incluye la determinación de la temperatura del aire en los ambientes principales de las salas del hospital, salas de tratamiento, vestidores, quirófanos y otros locales mediante termómetros de mercurio y alcohol, la humedad relativa se mide mediante un psicrómetro Assmann, la velocidad del aire con cateterómetro de bola, iluminación con luxímetro Yu-16. Las mediciones se llevan a cabo utilizando métodos generalmente aceptados de acuerdo con los documentos reglamentarios modernos.

El concepto de control microbiológico de un hospital incluye el examen bacteriológico de los objetos ambientales para detectar la presencia de microorganismos patógenos que pueden causar infecciones nosocomiales.

El control bacteriológico planificado se basa en la determinación de la contaminación microbiana general y la identificación de microorganismos sanitarios indicativos: estafilococos, bacterias Escherichia coli, etc. Al realizar estudios bacteriológicos, se debe tener en cuenta el conjunto de locales en los que se realiza el muestreo y la lista de elementos ambientales. sujetos a examen se determinan de conformidad con la orden Ministerio de Salud de la URSS 720 del 31 de julio de 1978 3.1

Fin del trabajo -

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Investigación microbiológica sanitaria y seguimiento de infecciones nosocomiales en instituciones médicas.

Uniéndose a la enfermedad principal, V. y. empeora el curso y el pronóstico de la enfermedad. Problemas de V. y. han adquirido gran relevancia en relación con la aparición de tales.. Se propagan fácilmente entre los niños y los debilitados, especialmente los ancianos, los pacientes con enfermedades inmunológicas reducidas..

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La tensión hospitalaria: una realidad desconocida

N.I. Briko1 ( [correo electrónico protegido]), E.B. Brusina2, 3 ( [correo electrónico protegido]), L.P. Zueva4, O.V. Kovalishena5, L.A. Ryapis1, V.L. Stasenko6, I.V. Feldblyum7, V.V. shkarin5

1GBOU VPO "Primera Universidad Médica Estatal de Moscú que lleva su nombre. A ELLOS. Sechenov" del Ministerio de Salud de Rusia

2GBOU VPO "Academia Médica Estatal de Kemerovo" del Ministerio de Salud de Rusia

3FGBU "Instituto de Investigación de Problemas Complejos de Enfermedades Cardiovasculares" de la Rama Siberiana de la Academia Rusa de Ciencias Médicas, Kemerovo 4GBOU HPE "Universidad Médica del Noroeste que lleva su nombre. I.I. Mechnikov" del Ministerio de Salud de Rusia, San Petersburgo

5GBOU VPO "Academia Médica Estatal de Nizhny Novgorod" del Ministerio de Salud de Rusia

6 Institución Educativa Presupuestaria del Estado de Educación Profesional Superior “Academia Médica Estatal de Omsk” del Ministerio de Salud de Rusia 7 Institución Educativa Presupuestaria del Estado de Educación Profesional Superior “Academia Médica Estatal de Perm que lleva el nombre. académico. E.A. Wagner" del Ministerio de Salud de Rusia

El artículo analiza ideas modernas sobre la tensión hospitalaria y aspectos controvertidos de este problema. Se proporciona una definición estándar de cepa hospitalaria (clon). La tensión hospitalaria se determina en función de un conjunto de criterios necesarios y adicionales. El conjunto de criterios necesarios incluye: 1) identidad y homogeneidad de las características del patógeno aislado según las características fenotípicas y genotípicas de la población de microorganismos; 2) circulación de este patógeno entre los pacientes. Los criterios adicionales que son significativamente más comunes entre los clones (cepas) hospitalarios pueden incluir la presencia de genes o factores de virulencia, resistencia a los antibióticos, resistencia a desinfectantes y antisépticos, resistencia en el entorno externo, mayor adhesividad y otras características variables. Palabras clave: infecciones asociadas a la atención sanitaria, tensión hospitalaria, definición estándar.

Tensión hospitalaria: realidad misteriosa

N.I. Briko1 ( [correo electrónico protegido]), E.B. Brusina2,3 ( [correo electrónico protegido]), L.P. Zueva4, O.V. Kovalishena5, L.A. Ryapis1, V.L. Stasenko6, I.V. Fel"dblum7, V.V. Shkarin5

1I.M. Sechenov Primera Universidad Médica Estatal de Moscú, Institución Educativa de Formación Profesional Superior con Presupuesto Estatal Ministerio de Salud de la Federación de Rusia

2 Academia Médica Estatal de Kemerovo, Institución Educativa de Formación Profesional Superior Presupuestaria del Estado Ministerio de Salud de la Federación de Rusia

3Instituto de Investigación sobre Cuestiones Complejas de Enfermedades Cardiovasculares dependiente de la Rama Siberiana de la Academia Rusa de Ciencias Médicas, Kemerovo

4La Universidad Médica Estatal del Noroeste lleva el nombre de I.I. Mechnikov, Institución Educativa de Formación Profesional Superior Presupuestaria del Estado Ministerio de Salud de la Federación Rusa, St. Petersburgo

5Academia Médica Estatal de Nizhny Novgorod, Institución Educativa de Formación Profesional Superior Presupuestaria Estatal Ministerio de Salud de la Federación Rusa

6 Academia Médica Estatal de Omsk, Institución Educativa de Formación Profesional Superior Presupuestaria del Estado del Ministerio de Salud de la Federación de Rusia

7Academia Médica Estatal de Perm que lleva el nombre de E.A. Wagner, Institución Educativa del Presupuesto Estatal del Ministerio de Formación Profesional Superior

de Salud de la Federación Rusa

El artículo analiza la comprensión moderna de la tensión hospitalaria y los aspectos controvertidos del problema. Se proporciona una definición estándar de cepa hospitalaria (clon). La tensión hospitalaria está determinada en razon de un complejo de criterios necesarios y adicionales. El conjunto de criterios necesarios incluye lo siguiente: 1) la identidad de las características del agente etiológico aislado con las propiedades de la población del microorganismo homogénea en términos de feno y genotipo; 2) la presencia de circulación de este agente etiológico entre los pacientes. Los criterios adicionales, que de manera confiable ocurren con mayor frecuencia entre las cepas hospitalarias (clones), pueden incluir la presencia de genes o factores de virulencia, resistencia a los antibióticos, resistencia a los desinfectantes y antisépticos, resistencia en el medio ambiente, mayor adherencia y otras propiedades variables.

Palabras clave: infecciones asociadas a la atención sanitaria, tensión hospitalaria, definición estándar.

Una de las cuestiones más confusas en la epidemiología de las infecciones asociadas a la atención sanitaria (IAAS) es el concepto de cepa hospitalaria, los patrones de su formación y detección.

Este artículo es de naturaleza problemática y debe ser considerado en el marco del desarrollo de lo dispuesto en el “Concepto Nacional para la Prevención de Infecciones Asociadas a la Prestación de Atención Médica”, y tiene como objetivo plantear temas controvertidos, así como presentar para discusión la quintaesencia de las ideas modernas sobre la tensión hospitalaria. Es importante aclarar que todas las discusiones a continuación se relacionan principalmente con las bacterias.

La proporción de infecciones causadas por cepas hospitalarias en la estructura general de las IRAS alcanza el 60%. Es este tipo de desarrollo del proceso epidémico el que conduce a los brotes y se caracteriza por una alta morbilidad, infecciones graves y una alta mortalidad.

Al mismo tiempo, un análisis de los estudios de la última década indica una falta de una posición consensuada entre los especialistas sobre las infecciones causadas por cepas hospitalarias y una amplia gama de diferencias de ideas sobre la esencia de este fenómeno. La complejidad de este problema también se ve confirmada por el hecho de que hasta ahora no existe una definición única del concepto de “tensión hospitalaria”, y este término en sí no es exacto. Además del término "cepa hospitalaria", también se utilizan ampliamente términos como "variante", "ecovar", "clon" en combinación con las definiciones "hospital", "nosocomial", "hospital".

El punto de partida para comprender la gama de cuestiones descritas es la terminología. Si se sigue la definición, entonces por "cepa" (cepa inglesa, Stamm alemán - "tribu", "género") se entiende como "un cultivo puro de microorganismos de una especie determinada, aislado de una fuente específica (el cuerpo de un animal o persona enferma, suelo, agua, etc..p.) y que tengan propiedades fisiológicas y bioquímicas especiales”. El concepto de "cepa" se relaciona en mayor medida con la práctica de laboratorio y denota un conjunto de individuos de un determinado tipo de microorganismo, cuyo origen común no ha sido establecido, agrupados principalmente por características fenotípicas.

El término “variante hospitalaria del patógeno” también es inexacto, ya que la palabra “variante” refleja el estado de variabilidad de los microorganismos y, por tanto, no implica la finalización del proceso de formación del patógeno con características fijas.

El término “ecovar” se define como “una variante de una especie, incluido un microorganismo, adaptada para habitar un determinado ecosistema, por ejemplo, una especie huésped o un entorno hospitalario. A menudo difiere en una serie de características.

de poblaciones que viven en otros ecosistemas". Este término, al igual que el término "variante", no da una idea de la esencia biológica de las nuevas propiedades del microorganismo y no refleja las características típicas adquiridas por el patógeno en un entorno hospitalario. Debería aplicarse en mayor medida cuando se consideran los ecosistemas naturales, a pesar de la opinión de que el entorno hospitalario puede definirse como un caso especial de ecosistema artificial.

Desde un punto de vista epidemiológico, es más lógico considerar los agentes etiológicos que provocan las IRAS como un determinado conjunto de microorganismos que se han adaptado a las condiciones hospitalarias, cuya composición juzgamos a partir de aislados (cepas) individuales. En este caso, la definición de “clon hospitalario” es más precisa en la etapa actual. En la terminología de la genética de poblaciones, "clon" (clon griego - "rama", "descendencia") es "un grupo de células genéticamente idénticas o casi idénticas que en el pasado reciente descendieron de un ancestro común y no experimentaron recombinación cromosómica". "

Sin embargo, la frase “clon hospitalario” sólo puede utilizarse si se ha demostrado el origen único de las cepas incluidas en ella. Hay que tener en cuenta que en las condiciones de un ecosistema hospitalario artificial durante la morbilidad epidémica, incluso de personas enfermas, se aíslan cepas que difieren en características biológicas moleculares. Como regla general, se identifica un clon dominante y varios clones menores, y los aislados incluidos en ellos, según el método de tipificación, reciben una designación de identificación (tipo emm, tipo de secuencia, etc.).

Además de los aspectos terminológicos, también es importante la cuestión de distinguir los microorganismos hospitalarios de los no hospitalarios, ya que el hecho mismo de aislar un patógeno de un paciente hospitalizado aún no es una base para clasificar este patógeno como adquirido en el hospital. Finalmente, es importante saber qué propiedades (o qué combinación de ellas) son inherentes a las cepas hospitalarias, lo que permitiría distinguir con seguridad estas últimas de las culturas no hospitalarias.

Los estudios de años anteriores indican que, por regla general, las características típicas de un clon hospitalario (cepa) incluyen resistencia a los medicamentos antimicrobianos (antibióticos, desinfectantes, antisépticos, etc.), mayor virulencia, resistencia en el ambiente externo, capacidad de circular por mucho tiempo en condiciones hospitalarias, mayor colonización y propiedades adhesivas, actividad competitiva y uniformidad genética.

En una de las muchas definiciones, la frase "cepa hospitalaria" significa "un microorganismo aislado de un paciente o de un trabajador médico en un hospital (paciente ambulatorio), caracterizado por una pronunciada

resistencia a muchos antibióticos y desinfectantes." Sin embargo, no pueden considerarse cepas hospitalarias todas las cepas que tengan estas propiedades aisladas en una organización médica.

Sin embargo, lo más frecuente es que la resistencia a los antibióticos sea el criterio para que una cepa pertenezca a una cepa hospitalaria. Es necesario distinguir entre la resistencia a los antibióticos de una determinada cepa de un microorganismo y la prevalencia de la resistencia a los antibióticos entre los microorganismos de un determinado tipo en una organización médica, calculada como la relación entre el número de cultivos resistentes y el número total de cultivos estudiados. cultivos de un tipo de microorganismo, reducidos a un determinado coeficiente (100, 1000, etc.). Numerosos estudios durante un período de 70 años han demostrado que la prevalencia de resistencia a los antibióticos es mayor entre los microorganismos aislados en una organización médica en comparación con los patógenos adquiridos en la comunidad. Se estudiaron los factores causantes de este patrón, se demostró la mayor prevalencia de resistencia a los antibióticos en la microflora de las unidades de cuidados intensivos y las características de la distribución territorial y los cambios dinámicos en el tiempo y el espacio de la resistencia a medicamentos individuales y en ciertos tipos de microorganismos. por ejemplo, se identificaron estafilococos resistentes a meticilina (MRSA), estafilococos y enterococos resistentes a vancomicina (VRS, VRE), etc.

Sin embargo, no siempre se detectan marcadores de resistencia a los antibióticos en las cepas hospitalarias. Se han descrito numerosas situaciones epidémicas asociadas a la prestación de atención médica provocadas por cepas sensibles a los antibióticos. Así, de 32 brotes causados ​​por S. aureus, 12 fueron causados ​​por cepas multirresistentes, 11 fueron resistentes a uno o dos antibióticos y 9 fueron sensibles a todos los medicamentos utilizados habitualmente para las pruebas.

A la hora de determinar si diferentes cepas de un microorganismo pertenecen a la categoría de cepa hospitalaria, los investigadores están mucho más interesados ​​en la identidad del antibiograma (tipo de resistencia, perfil de resistencia) de diferentes cultivos que en la presencia de multirresistencia. Sin embargo, conviene recordar la variabilidad de este rasgo.

Para resumir el debate sobre la resistencia a los antibióticos, cabe señalar que, aunque la resistencia a los antibióticos, incluida la resistencia a los poliantibióticos, está más extendida entre las bacterias que circulan en el entorno hospitalario, no es una característica obligatoria del clon (cepa) del hospital y no puede utilizarse. como criterio principal para su determinación.

Una situación similar surge con respecto a la resistencia de los microorganismos a los desinfectantes y antisépticos. Estos agentes antimicrobianos

Los agentes, ampliamente utilizados en organizaciones médicas, también son un factor selectivo importante para la microflora. Varios estudios han demostrado que la presencia de resistencia a los desinfectantes en un clon (cepa) de un microorganismo tiene consecuencias en forma de circulación preferencial y un papel etiológico en la morbilidad epidémica. Es en los casos de morbilidad colectiva y de problemas epidémicos prolongados cuando se observa una mayor prevalencia de bacterias resistentes a los desinfectantes utilizados. Al mismo tiempo, en estos mismos estudios y en varios otros, se demostró que la resistencia a los desinfectantes y antisépticos no es una condición necesaria para su aparición y propagación epidémica; además, esta característica (propiedad) no puede considerarse obligatoria. marcador independiente de una cepa hospitalaria, ya que tiene una heterogeneidad pronunciada.

Otra característica importante de los microorganismos aislados en condiciones hospitalarias es su virulencia. Se han dedicado un gran número de estudios a este problema. Obras de L.P. Zueva y sus colegas demostraron de manera convincente que las cepas hospitalarias que conducen al desarrollo de situaciones epidémicas tienen ciertos genes de virulencia. De los 11 brotes estudiados por los autores, 10 fueron causados ​​por patógenos que tienen genes de virulencia. Pero la virulencia como signo de un clon (cepa) hospitalario tampoco es una característica suficiente. La formación de un clon hospitalario se basa en la adaptación a las condiciones del entorno hospitalario. Durante el proceso de adaptación, el patógeno coloniza gradualmente a los pacientes y al personal, contamina los objetos ambientales y persiste en ellos durante mucho tiempo, pero puede manifestarse durante un tiempo determinado principalmente como transporte. En el caso de que un microorganismo hospitalario adquiera determinados genes de virulencia, el proceso epidémico se manifiesta en formas manifiestas de infección de curso grave y elevada morbilidad. La determinación de genes o factores de virulencia durante el proceso de seguimiento es extremadamente importante para predecir la próxima situación epidémica y la implementación oportuna de medidas antiepidémicas.

Uno de los criterios epidemiológicos más importantes para una cepa hospitalaria es que pertenezca a una población de microorganismos circulantes de composición homogénea. Pero la identidad genética fenotípica o molecular no siempre indica la formación de un clon hospitalario. Por ejemplo, en caso de un brote de infección como resultado del uso de un medicamento contaminado fuera de una organización médica (en producción)

Es probable que se aíslen cepas genéticamente homogéneas de los pacientes. En este caso, la identidad genética de las cepas sólo indica una fuente exógena común o un factor de transmisión del agente infeccioso.

La formación de un clon hospitalario (cepa), por regla general, es el resultado de la adaptación de un determinado microorganismo a condiciones hospitalarias específicas, durante las cuales adquiere propiedades que aumentan significativamente sus ventajas competitivas en la lucha por nichos de hábitat y fuentes de alimento. La naturaleza de las propiedades adquiridas está determinada por las interacciones intermicrobianas, las características de la población de pacientes, el personal médico, un conjunto de medidas preventivas y antiepidémicas y puede variar significativamente. En las organizaciones médicas se crean condiciones que promueven la selección de los patógenos más adaptados a un entorno específico, lo que en última instancia conduce a la homogeneización intraespecífica del patógeno y su distribución clonal.

Es por eso que lo importante no son estas o aquellas características o su combinación, sino el grado de homogeneidad de la población de microorganismos, que se expresa mediante el coeficiente de diversidad (1 - la relación entre el número de microorganismos de una especie determinada (tipo de resistencia) al número total de especies (tipos de resistencia) de microorganismos). Se ha establecido que un coeficiente de diversidad (diversidad de especies, tipos de resistencia, etc.) inferior a 0,4 indica una cepa hospitalaria formada.

Sin embargo, a pesar de que la adaptación y selección de los microorganismos más adaptados al medio ambiente es la forma predominante de formar un clon hospitalario, existen otros mecanismos. Por ejemplo, un microorganismo puede adquirir instantáneamente una ventaja competitiva debido a una deleción cromosómica y, en un período de tiempo muy corto, colonizar componentes de una comunidad hospitalaria, provocando un brote de infección. La posibilidad de tal desarrollo de eventos debe tenerse en cuenta al investigar la situación epidémica. Pero incluso con este mecanismo, habrá una disminución en la diversidad de la microflora.

En general, observamos que el entorno hospitalario es un sistema ecológico artificial complejo, dinámico, “pulsante”, que requiere una evaluación continua y adecuada de su estado. La determinación de si un patógeno pertenece a la categoría hospitalaria sólo puede basarse en los resultados del seguimiento de la microflora circulante durante el diagnóstico epidemiológico.

Parámetros de información óptimos que reflejan el estado de la población microbiana del entorno hospitalario y permiten una intervención proactiva (antes de la aparición de casos de enfermedad) en el proceso epidémico:

La presencia de un tipo dominante de microorganismo, expresada por una mayor frecuencia de aislamiento y una mayor gravedad específica en la estructura de la población microbiana; coeficiente de diversidad de especies de microorganismos;

Coeficiente de diversidad de tipos de resistencia (serotipos, biovares, plasmidovares, etc.) de una especie de microorganismo;

El coeficiente de diversidad de genotipos (determinado sobre la base de métodos biológicos moleculares (genéticos) de tipificación intraespecífica de microorganismos (tipo emm, tipo restricto, tipo de secuencia, etc.).

La base para la intervención en el curso del proceso epidémico es una tendencia estable hacia una disminución de las especies y la diversidad intraespecífica (fenotípica, genética) de los microorganismos que circulan en las condiciones hospitalarias. Cabe señalar especialmente que el hecho mismo de aislar microorganismos del entorno hospitalario y del personal médico no es un indicador de una verdadera situación epidémica. Los más importantes son los cultivos aislados de pacientes.

Hay que tener en cuenta que el fenómeno que estamos considerando se relaciona con el nivel poblacional. Cuando hablamos de un clon (cepa) hospitalario, en realidad nos referimos a una población circulante de un patógeno de mayor o menor tamaño. A partir de una cepa (aislada), es imposible determinar si pertenece a la categoría hospitalaria.

Se sabe que la gama de microorganismos que circulan en el ambiente hospitalario es muy diversa. Sin embargo, sólo algunas de sus especies son capaces de formar clones hospitalarios y provocar el desarrollo de una situación epidémica. Así, de 1263 cepas aisladas en 21 departamentos de hospitales multidisciplinarios durante el examen de 657 pacientes y 16 empleados, así como durante el estudio de 563 objetos ambientales, sólo el 36,3% de las cepas “participaron” en la formación de morbilidad. Según observaciones y análisis a largo plazo (más de 20 años) de 112 situaciones epidémicas documentadas, se encontró que existe riesgo de formación de un clon (cepa) hospitalario para un determinado grupo de patógenos: Salmonella typhimurium, S. infantis. , S. virchow, S. haifa, Shigella flexneri 2a, Staphylococcus aureus, S. epidermidis, Enterococcus faecalis, E. faecium, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Enterobacter spp., Acinetobacter spp. y varios otros. Y aunque, por supuesto, esta lista de patógenos se puede ampliar, la gama de microorganismos capaces de formar clones hospitalarios probablemente sea limitada.

También existen diferencias en la tasa de formación de clones hospitalarios. Por ejemplo, hay evidencia de que el período de formación de hospitales

el primer clon de S. aureus duró en promedio 93 días, la duración de la circulación alcanzó los ocho meses y se limitó sólo cuando el hospital estuvo completamente libre de pacientes. P. aeruginosa se distinguió por la rápida formación de clones hospitalarios (período promedio: 28 días), la circulación de una cepa relacionada en el hospital por hasta 265 días y una alta tasa de colonización. Características similares para K. pneumoniae fueron 67 y 35 días. Se sabe que la tasa de formación de clones hospitalarios (cepas) depende de: el tipo de patógeno; duración de la estancia de los pacientes en el hospital; presencia de resistencia a ciertos antibióticos; la intensidad de los procesos de selección, determinada por el número de pacientes con procesos purulentos; el grado de homogeneidad de los pacientes según la naturaleza de la patología subyacente; tipo de hospital; intensidad del intercambio de microflora entre pacientes.

Por tanto, cada una de las características consideradas no es un marcador necesario y suficiente de que las cepas se adquieren en el hospital.

En cuanto a los criterios para determinar un clon (cepa) hospitalario de un agente infeccioso, el consenso actual es el siguiente:

Ninguno de los criterios puede aceptarse como el único suficiente para determinar el clon hospitalario (cepa).

La determinación de una cepa hospitalaria y su diferenciación de otras cepas sólo es posible sobre la base de un conjunto de criterios, una parte de los cuales es necesaria y la otra adicional.

El conjunto de criterios necesarios incluye:

Homogeneidad fenotípica y genotípica de la población de patógenos. Sólo la identidad de las características del patógeno aislado por fenotipo y genotipo.

Las características clínicas de la población permiten clasificarla como caso hospitalario; la presencia de circulación de este patógeno entre los pacientes.

Los criterios adicionales que son mucho más comunes entre los clones (cepas) hospitalarios pueden incluir la presencia de genes o factores de virulencia, resistencia a los antibióticos, resistencia a desinfectantes y antisépticos, resistencia en el entorno externo, mayor adhesividad, etc. Los criterios adicionales son variables en sus manifestaciones. y puede estar ausente, presente solo o en complejo, lo que está determinado por las características de adaptación del microorganismo a las condiciones del ecosistema hospitalario artificial.

La definición estándar de cepa hospitalaria en esta etapa del desarrollo de la ciencia médica podría verse así:

Una población de clones hospitalarios (cepas) es un conjunto de individuos de un determinado tipo de microorganismos, homogéneos en características feno y genotípicas, formados en un ecosistema hospitalario y adaptados a las condiciones del entorno hospitalario.

La cepa hospitalaria es un cultivo puro de un microorganismo, aislado de pacientes, personal médico o del entorno externo, que posee características fenotípicas y genotípicas idénticas a las de la población identificada de microorganismos hospitalarios.

Por supuesto, a medida que se acumulan datos científicos, se conocen los mecanismos de formación de clones hospitalarios y su potencial epidémico, los factores que determinan el ritmo de su formación, las condiciones necesarias y suficientes para su circulación, así como el algoritmo para su identificación, prevención y anti. -Se aclararán las medidas epidémicas. w

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CONFERENCIA

Reunión de trabajo del grupo de expertos en prevención de vacunas

En la reunión también se presentaron los resultados de la vacunación de cohortes de niños de 12 a 24 meses con la vacuna tetravalente MMRV (sarampión, rubéola, paperas y varicela), que comenzó después de la introducción de la vacuna contra la varicela en el Calendario Nacional de Vacunación Preventiva de Alemania ( 2005), lo que condujo a una disminución de la morbilidad, complicaciones, hospitalización y mortalidad en otros grupos de edad debido a la formación de inmunidad colectiva. Además, gracias a la vacuna combinada, el número de visitas al médico para vacunarse ha disminuido y, como resultado, se han reducido los costes médicos, sociales y económicos.

Según los expertos, la cuestión de la inmunización de las mujeres embarazadas y los recién nacidos sigue siendo relevante: se observa que hoy en día no hay suficientes datos clínicos para comprender mejor los riesgos/beneficios de la vacunación de estos grupos de población. Se requiere investigación clínica continua en esta área (tanto independiente como respaldada por fabricantes de medicamentos inmunobiológicos).

En el proceso de discusión sobre la efectividad de la prevención de la infección neumocócica con vacunas, se presentaron datos obtenidos en Finlandia, Kenia, Brasil y Canadá. Se presta mucha atención a la correspondencia de la composición de la vacuna con el panorama serológico, la eficacia inmunológica de las vacunas neumocócicas conjugadas polivalentes, así como el mecanismo de formación de inmunidad cruzada contra los serotipos neumocócicos no incluidos en el fármaco. Señalan importancia de iniciar vacunación temprana (en los primeros 6 meses de vida), aportan datos

Otro tema interesante discutido en la reunión fue la prevención de la infección meningocócica, teniendo en cuenta el cambio en los grupos serológicos del patógeno durante los brotes y la justificación del uso de un fármaco con el máximo número de serogrupos meningocócicos. Se destacan las ventajas y desventajas de las vacunas meningocócicas conjugadas en comparación con las vacunas existentes (polisacáridas), la duración e intensidad de la inmunidad, la seguridad y eficacia cuando se combinan con otras vacunas, en particular las utilizadas por los viajeros (contra la fiebre amarilla). Así, se señaló que la vacunación contra la infección meningocócica de los niños a la edad de 9 meses con la introducción de una dosis de refuerzo a los 12 meses (formación de protección temprana) está incluida en el Calendario Nacional de Vacunación Preventiva de Arabia Saudita. Los expertos confían en que esta estrategia traerá beneficios adicionales, especialmente en el contexto de los eventos masivos anuales del Hajj.

Todos los participantes expresaron la opinión general de que un foro de este tipo permite a los expertos intercambiar opiniones y resultados de la implementación de nuevos programas y discutir posibles estrategias adoptadas en diferentes países que podrían conducir a mejores programas de vacunas en general.

La información fue preparada por el Prof. EP

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