Do celów praktycznych można wykorzystać fagi. Zastosowanie bakteriofagów w medycynie i nie tylko

Osiągnięcia współczesnej medycyny i farmacji są ogromne, ale patogeny również stale się poprawiają i przystosowują do działania tych leków, które były dla nich zabójcze kilka lat temu. Tam, gdzie antybiotyki są bezsilne, bakteriofagi pomogą w walce z patogennymi mikroorganizmami.

Czym są bakteriofagi

Dosłownie przetłumaczone ze starożytnej greki bakteriofagi są pożeraczami bakterii. Ten biologiczny termin odnosi się do wirusów, które selektywnie infekują komórki bakteryjne.

Bakteriofagi są obecne wszędzie tam, gdzie żyją bakterie, więc ich siedliskiem może być powietrze, woda, gleba, ludzkie ciało, żywność, odzież.

Cechy strukturalne bakteriofaga: taki wirus nie ma struktura komórkowa, na wierzchu znajduje się tylko materiał genetyczny pokryty płaszczem białkowym. Dlatego do rozmnażania muszą szukać odpowiednich mikroorganizmów komórkowych.

Fag rozpoczyna swoją destrukcyjną aktywność wobec bakterii poprzez wstrzyknięcie do jej organizmu własnej informacji genetycznej, a następnie przystępuje do aktywnej reprodukcji. Kiedy komórka bakteryjna zostaje zniszczona, przez jej fragmenty pojawia się od 100 do 200 nowych bakteriofagów, które natychmiast zaczynają atakować pobliskie bakterie.

Rodzaje

Najbardziej znane bakteriofagi:

• czerwonkowy;
• gronkowce;
• paciorkowce;
• potas;
• pseudomonadyczny;
• Pseudomonas aeruginosa.

Zalety

Niektórzy naukowcy twierdzą, że stosowanie leków opartych na bakteriofagach wkrótce będzie konkurować ze stosowaniem antybiotyków w leczeniu różnych chorób.

Podstawą tego śmiałego założenia są następujące zalety korzystania z fagów:

• brak uzależnienia i przeciwwskazań do stosowania leku;
• brak działania hamującego na układ odpornościowy;
• selektywne działanie (korzystna flora bakteryjna pozostaje nienaruszona);
• harmonijne połączenie z innymi metodami leczenia, w tym terapią antybiotykami (zgodnie z wynikami badań fagi wzmacniają nawet ich działanie);
• wyraźny efekt w leczeniu ociężałych bolesne warunki spowodowane przez czynniki bakteryjne niewrażliwe na antybiotyki.

Dzięki temu bakteriofag może być z powodzeniem stosowany u dzieci, osób starszych, kobiet w ciąży, osłabionych pacjentów.

Wskazania

Wskazaniami do włączenia bakteriofagów do schematu leczenia są następujące infekcje:

• chirurgiczne (ropień, zbrodnia, paraproctitis, zapalenie kości i szpiku, czyraki, oparzenia, ropowica, karbunkle, rany ropne);
• układu moczowo-płciowego (zapalenie pęcherza moczowego, odmiedniczkowe zapalenie nerek, zapalenie jelita grubego, zapalenie cewki moczowej, zapalenie błony śluzowej macicy, zapalenie jajowodów);
• jelitowe (zapalenie pęcherzyka żółciowego, zapalenie żołądka i jelit, dysbakterioza jelitowa);
• zatrucie krwi;
• choroby narządów ENT (zapalenie migdałków, zapalenie zatok, zapalenie ucha środkowego);
• choroby drogi oddechowe i płuc (zapalenie tchawicy, zapalenie opłucnej, zapalenie krtani, zapalenie oskrzeli, zapalenie płuc).

Metody aplikacji

Sposób, w jaki należy zastosować bakteriofaga, zależy bezpośrednio od charakteru i lokalizacji ogniska zapalnego. W różne sytuacje Odpowiednie byłyby następujące zastosowania:

• ustnie ( produkt leczniczy przyjmowane doustnie)
• doodbytniczo (bakteriofag lewatywy);
• lokalnie (w postaci prania, balsamów, nawadniania, wkraplania, płukania, wprowadzania turund nasączonych lekiem).

Bakteriofag działa skuteczniej, jeśli leczenie łączy różne metody aplikacji. Są pewne wskazania kliniczne, zgodnie z którym bakteriofaga przyjmuje się doustnie w tabletkach, oraz lokalna akcja sprawia, że ​​bakteriofag staje się płynny w postaci balsamu.

Na popularności zyskują leki na bazie bakteriofagów w postaci roztworów, aerozoli, tabletek, czopków i żeli. Formularze apteczne preparaty zawierają szczegółowe instrukcje dotyczące przyjmowania bakteriofaga.

Przeciwwskazania

Większość osób z pewnym stopniem nieufności rozważa możliwość leczenia bakteriofagami, chociaż skuteczność i co najważniejsze bezpieczeństwo takiej terapii zostało już udowodnione.

jedyny możliwe przeciwwskazanie może nadwrażliwość na bakteriofagi, chociaż przypadki Reakcja alergiczna na bakteriofagach nie są typowe.

Preparaty bakteriofagowe

Przemysł farmaceutyczny oferuje wiele leków, których zasada działania opiera się na przeciwbakteryjnej orientacji bakteriofagów.

• Jelita-bakteriofag (Intestifag)

  

  Płynny immunobiologiczny preparat przeciwdrobnoustrojowy. Hamuje aktywność drobnoustrojów, chorobotwórczy przewód pokarmowy(czerwonka bakteryjna, dur brzuszny, zapalenie jelit, paratyfus, dysbakterioza, salmonelloza). Jest stosowany wewnętrznie i jako lewatywa. Przeciwwskazania: nadwrażliwość na lek. Skutki uboczne: u noworodków w pierwszych 2 dniach przyjmowania możliwe są wysypki skórne i niedomykalność.

• Piobakteriofag wielowartościowy (Sextafag)

  

  Pomyślnie radzę sobie z choroby ropno-septyczne noworodki i niemowlęta, choroby ropno-zapalne górnych dróg oddechowych, infekcje jelitowe. Służy do leczenia ran świeżo zakażonych. Nie ma przeciwwskazań i skutków ubocznych.

• Bakteriofag Klebsiella pneumonia (Klebsifag)

  

  Wpływa na bakterie wywołujące zapalenie płuc, ozen, rhinoscleromas. Pomaga również w uogólnionych stanach septycznych, zapobiegając skażeniu. szczepy szpitalne Klebsiella. Nie ma skutków ubocznych. Przeciwwskazania: nadwrażliwość na składniki.

• Bakteriofag Salmonelli

  

  Niszczy komórki Salmonelli i mikroorganizmy podobne do nich w strukturze antygenowej. Nadaje się do leczenia salmonellozy u dzieci i dorosłych. Nie ma przeciwwskazań i skutków ubocznych.

• Bakteriofag Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa)

  

  Używany do leczenia kontuzji różne ciała Pseudomonas aeruginosa. Skutki uboczne niezidentyfikowany. Przeciwwskazanie - nadwrażliwość na lek.

• Bakteriofag paciorkowcowy (Streptophage)

  

  Zabija bakterie paciorkowcowe, co sprawia, że ​​preparaty na jej bazie są niezbędne w leczeniu zapalenia migdałków, migdałków, zatok, panaritium, ropiejących ran i wielu innych dolegliwości. W leczeniu zapalenia zatok zaleca się zakopanie tego bakteriofaga w nosie. Nie ma skutków ubocznych. Przeciwwskazania: nadwrażliwość na lek.

• bakteriofag coli

  

  Ma specyficzny działanie antybakteryjne skierowane wyłącznie przeciwko chorobotwórczym szczepom Escherichia coli. Jest przepisywany na uszkodzenia przewodu żołądkowo-jelitowego, ropienie ran, posocznicę noworodków, zapalenie spojówek, infekcje układu moczowo-płciowego. Przeciwwskazania: nadwrażliwość na lek. Nie zidentyfikowano żadnych skutków ubocznych.

• Bakteriofag Klebsiella wielowartościowy

  

  Skuteczny w leczeniu zapalenia otrzewnej, zapalenia opłucnej, chorób ropno-zapalnych w ginekologii. Stosuje się go również w leczeniu zapalenia jamy ustnej, paradontozy i zapalenia zatok. Nie ma skutków ubocznych. Przeciwwskazanie - nadwrażliwość na składniki leku.

• bakteriofag Coliproteus

  

  W forma płynna na żądanie zapobiegania i leczenia zapalenia jelita grubego, zapalenia jelit. W postaci tabletek częściej stosowany jest w zaawansowanych postaciach odmiedniczkowego zapalenia nerek i zapalenia pęcherza moczowego, procesy zapalne w narządach miednicy. Przeciwwskazania: uczulenie na którykolwiek ze składników leku. Nie ma skutków ubocznych.

• Bakteriofag czerwonkowy

  

  Służy do leczenia i profilaktyki czerwonki. Skutki uboczne nie zostały zidentyfikowane. Przeciwwskazania: nadwrażliwość na składniki i postać leku w tabletkach - wiek pacjenta poniżej 1 roku, okres ciąży i laktacji.

Nie przesadzaj z niebezpieczeństwem wirusów, które tworzą podobne leki i analogi bakteriofagów. Są tylko śmiertelne dla bakterii chorobotwórczych. Jeśli lekarz uzna za właściwe włączenie bakteriofagów do schematu leczenia, należy zaufać i dostroić się do szybkiego powrotu do zdrowia.

Stosowanie bakteriofagów odbywa się wyłącznie zgodnie z przeznaczeniem i pod nadzorem lekarza prowadzącego.

Bakteriofagi gi lub fagi (z innego greckiego φᾰγω „pożeram”) to wirusy, które selektywnie infekują komórki bakteryjne. Najczęściej bakteriofagi namnażają się wewnątrz bakterii i powodują ich lizę. Z reguły bakteriofag składa się z otoczki białkowej i materiału genetycznego jednoniciowego lub dwuniciowego kwasu nukleinowego (DNA lub rzadziej RNA). Całkowita liczba bakteriofagów w przyrodzie jest w przybliżeniu równa całkowitej liczbie bakterii (1030 - 1032 cząstek). W cyklu aktywnie uczestniczą bakteriofagi substancje chemiczne i energii, mają wyraźny wpływ na ewolucję drobnoustrojów i bakterii. Struktura typowego miowirusa bakteriofagowego.

Struktura bakteriofagów 1 - głowa, 2 - ogon, 3 - kwas nukleinowy, 4 - kapsyd, 5 - "kołnierz", 6 - osłonka białkowa ogona, 7 - włókno ogona, 8 - kolce, 9 - płytka podstawna

Bakteriofagi różnią się struktura chemiczna, rodzaj kwasu nukleinowego, morfologia i charakter interakcji z bakteriami. Na wymiar wirusy bakteryjne setki i tysiące razy mniejsze niż komórki drobnoustrojów. Typowa cząsteczka faga (wirion) składa się z głowy i ogona. Długość ogona jest zwykle 2-4 razy większa od średnicy głowy. Głowica zawiera materiał genetyczny - jednoniciowy lub dwuniciowy RNA lub DNA z enzymem transkryptazy w stanie nieaktywnym, otoczony otoczką białkową lub lipoproteinową - kapsyd, który zachowuje genom poza komórką. Kwas nukleinowy i kapsyd razem tworzą nukleokapsyd. Bakteriofagi mogą mieć ikozaedryczny kapsyd złożony z wielu kopii jednego lub dwóch specyficznych białek. Zazwyczaj rogi są zbudowane z pentamerów białka, a podpora z każdej strony składa się z heksamerów tego samego lub podobnego białka. Ponadto fagi mogą mieć kształt kulisty, cytrynowy lub pleomorficzny. Ogon, czyli proces, to rurka białkowa - kontynuacja białkowej powłoki głowy, u podstawy ogona znajduje się ATP-aza, która regeneruje energię do wstrzyknięcia materiału genetycznego. Istnieją również bakteriofagi z krótkim procesem, bez procesu i nitkowate.

Systematyka bakteriofagów Duża liczba izolowanych i przebadanych bakteriofagów determinuje potrzebę ich systematyzacji. Odbywa się to przez Międzynarodowy Komitet Taksonomii Wirusów (ICTV). Obecnie, według Klasyfikacja międzynarodowa i nomenklatury wirusów bakteriofagi są podzielone w zależności od rodzaju kwasu nukleinowego i morfologii. Na ten moment rozróżnij dziewiętnaście rodzin. Spośród nich tylko dwie zawierają RNA i tylko pięć rodzin jest otoczonych. Spośród rodzin wirusów zawierających DNA tylko dwie rodziny mają genomy jednoniciowe. W dziewięciu rodzinach zawierających DNA genom jest reprezentowany przez kolisty DNA, podczas gdy w pozostałych dziewięciu jest liniowy. Dziewięć rodzin jest specyficznych tylko dla bakterii, pozostałe dziewięć jest specyficznych dla archeonów, a (Tectiviridae) infekuje zarówno bakterie, jak i archeony.

Oddziaływanie bakteriofaga z komórkami bakteryjnymi Zgodnie z naturą oddziaływania bakteriofaga z komórką bakteryjną rozróżnia się fagi wirulentne i umiarkowane. Zjadliwe fagi mogą zwiększyć swoją liczbę jedynie w cyklu litycznym. Proces interakcji zjadliwego bakteriofaga z komórką składa się z kilku etapów: adsorpcji bakteriofaga na komórce, wnikania do komórki, biosyntezy składników faga i ich składania oraz wyjścia bakteriofagów z komórki. Początkowo bakteriofagi przyczepiają się do specyficznych dla faga receptorów na powierzchni komórki bakteryjnej. Ogon faga, za pomocą enzymów znajdujących się na jego końcu (głównie lizozymu), lokalnie rozpuszcza błonę komórkową, kurczy się, a DNA zawarte w głowie jest wstrzykiwane do komórki, podczas gdy otoczka białkowa bakteriofaga pozostaje na zewnątrz . Wstrzyknięty DNA powoduje całkowitą restrukturyzację metabolizmu komórki: zatrzymuje się synteza bakteryjnego DNA, RNA i białek. DNA bakteriofaga zaczyna być transkrybowany za pomocą własnego enzymu transkryptazy, który po wejściu do komórki bakteryjnej ulega aktywacji. Zsyntetyzowany najpierw wcześnie, a potem późno i. RNA wnikające do rybosomów komórki gospodarza, gdzie syntetyzowane są wczesne (polimerazy DNA, nukleazy) i późne (białka kapsydu i ogona, lizozym, enzymy ATP-azy i transkryptazy) bakteriofagowe. Replikacja DNA bakteriofaga zachodzi zgodnie z mechanizmem semikonserwatywnym i odbywa się przy udziale własnych polimeraz DNA. Po syntezie białek późnych i zakończeniu replikacji DNA następuje proces końcowy - dojrzewanie cząstek faga lub połączenie DNA faga z białkiem otoczki i powstanie dojrzałych cząstek zakaźnych faga.

Koło życia Umiarkowane i zjadliwe bakteriofagi na początkowych etapach interakcji z komórką bakteryjną mają ten sam cykl. Adsorpcja bakteriofagów na specyficznych dla faga receptorach komórkowych. Wstrzyknięcie fagowego kwasu nukleinowego do komórki gospodarza. Współreplikacja fagowych i bakteryjnych kwasów nukleinowych. Podział komórek. Ponadto bakteriofag może rozwijać się według dwóch modeli: lizogennego lub litycznego. Umiarkowane bakteriofagi po podziale znajdują się w stanie profazy (szlaku lizogennego).Zjadliwe bakteriofagi rozwijają się zgodnie z modelem politycznym: Kwas nukleinowy faga kieruje syntezą enzymów faga, wykorzystując do tego aparat syntezy białek bakterii. Fag w taki czy inny sposób inaktywuje DNA i RNA gospodarza, a enzymy faga całkowicie je rozszczepiają; Fagowe RNA „podbija” komórkową maszynerię syntezy białek. Kwas nukleinowy faga replikuje i kieruje syntezą nowych białek otoczki. Nowe cząstki faga powstają w wyniku spontanicznego samoorganizacji otoczki białkowej (kapsydu) wokół kwasu nukleinowego faga; pod kontrolą fagowego RNA syntetyzuje się lizozym. Liza komórkowa: komórka pęka pod wpływem lizozymu; uwalnianych jest około 200-1000 nowych fagów; fagi infekują inne bakterie.

Zastosowanie w medycynie Jednym z obszarów zastosowania bakteriofagów jest: antybiotykoterapia alternatywa dla przyjmowania antybiotyków. Na przykład stosuje się bakteriofagi: paciorkowce, gronkowce, klebsiella, czerwonkę i irygację, pyobakteriofagi, coli, proteus i coliproteus i inne. 13 zarejestrowanych i zgłoszonych w Rosji preparaty medyczne na podstawie fagów. Są obecnie stosowane w leczeniu infekcje bakteryjne które nie są wrażliwe na tradycyjne leczenie antybiotyki, zwłaszcza w Gruzji. Zwykle stosowanie bakteriofagów jest skuteczniejsze niż antybiotyki, gdzie są błony biologiczne pokryte polisacharydami, przez które zwykle nie przenikają antybiotyki. Obecnie na Zachodzie nie zatwierdzono terapeutycznego stosowania bakteriofagów, chociaż fagi są wykorzystywane do zabijania bakterii powodujących zatrucia pokarmowe, takich jak listeria. W wieloletnim doświadczeniu w ilości duże miasto oraz wieś udowodniono niezwykle wysoką skuteczność terapeutyczną i profilaktyczną bakteriofaga czerwonkowego (P.M. Lerner, 2010). W Rosji lecznicze preparaty fagowe wytwarzano od dawna, fagi leczono jeszcze przed antybiotykami. W ostatnie lata fagi były szeroko stosowane po powodziach w Krymsku i Chabarowsku do zapobiegania czerwonce.

W biologii bakteriofagi są używane w Inżynieria genetyczna jako wektory przenoszące segmenty DNA możliwy jest również naturalny transfer genów między bakteriami za pomocą określonych fagów (transdukcja). Wektory fagowe są zwykle tworzone na bazie bakteriofaga λ o umiarkowanej temperaturze, zawierającego dwuniciową liniową cząsteczkę DNA. w lewo i prawe ramiona Fagi posiadają wszystkie geny niezbędne do cyklu litycznego (replikacja, reprodukcja). Środkowa cześć genom bakteriofaga λ (zawiera geny kontrolujące lizogenię, czyli jego integrację z DNA komórki bakteryjnej) nie jest niezbędny do jego rozmnażania i liczy około 25 tysięcy par zasad. Ta część może być zastąpiona obcym fragmentem DNA. Takie zmodyfikowane fagi przechodzą przez cykl lityczny, ale lizogenia nie zachodzi. Wektory oparte na bakteriofagach λ są używane do klonowania fragmentów DNA eukariotycznego (tj. większych genów) o wielkości do 23 kb. Ponadto fagi bez wstawek mają mniej niż 38 kpz. lub przeciwnie, ze zbyt dużymi wstawkami - ponad 52 kb. nie rozwijają się i nie infekują bakterii. Ponieważ rozmnażanie bakteriofagów jest możliwe tylko w żywych komórkach, bakteriofagi można wykorzystać do określenia żywotności bakterii. Ten kierunek ma wielkie perspektywy, ponieważ jednym z głównych zagadnień w różnych procesach biotechnologicznych jest określenie żywotności stosowanych kultur. Wykorzystując metodę analizy elektrooptycznej zawiesin komórkowych wykazano, że możliwe jest badanie etapów interakcji między komórką fag-drobnoustrój

A także w weterynarii do: profilaktyki i leczenia chorób bakteryjnych ptaków i zwierząt; leczenie ropnych chorób zapalnych błon śluzowych oczu, jamy ustnej; zapobieganie powikłaniom ropno-zapalnym w oparzeniach, ranach, interwencjach chirurgicznych; w inżynierii genetycznej: do transdukcji - naturalna transmisja geny między bakteriami; jako wektory przenoszące fragmenty DNA; przy użyciu fagów możliwe jest konstruowanie ukierunkowanych zmian w genomie DNA gospodarza; w Przemysł spożywczy: w dużych ilościach środki zawierające fagi już przetwarzają gotowe do spożycia produkty mięsne i drobiowe; bakteriofagi wykorzystywane są w produkcji artykułów spożywczych z mięsa, drobiu, serów, produktów roślinnych itp.;

w rolnictwo: rozpylanie preparatów fagowych w celu ochrony roślin i upraw przed próchnicą i chorobami bakteryjnymi; ochrona inwentarza żywego i drobiu przed infekcjami i chorobami bakteryjnymi; dla Bezpieczeństwo środowiska: antybakteryjna obróbka nasion i roślin; sprzątanie pomieszczeń zakładów przetwórstwa spożywczego; sanityzacja przestrzeni roboczej i sprzętu; profilaktyka pomieszczeń szpitalnych; prowadzenie działań środowiskowych

Tak więc dzisiaj bakteriofagi są bardzo popularne w życiu ludzi i zwierząt. Planowane przedsięwzięcia cała linia obszary priorytetowe dla rozwoju i produkcji bakteriofagów terapeutycznych i profilaktycznych, które korelują z nowo pojawiającymi się światowymi trendami. Powstają i wprowadzane są nowe leki do leczenia wielu chorób. Bakteriolodzy, wirusolodzy, biochemicy, genetycy, biofizycy, biolodzy molekularni, onkolodzy eksperymentalni, specjaliści inżynierii genetycznej i biotechnologii zajmują się badaniem i wykorzystaniem bakteriofagów.

bakteriofagi w praktyka medyczna stosowane w diagnostyce, leczeniu i profilaktyce choroba zakaźna.

A. W diagnostyce bakteriofag stosuje się w realizacji kulturowej metody badawczej w celu określenia rodzaju izolowanego czysta kultura, także za jego pisanie. Opisana poniżej metoda wykorzystania bakteriofaga do wskazania obecności określonego rodzaju bakterii w materiale patologicznym bez izolowania go w czystej kulturze nie stała się powszechna.

1. Reakcja wzrostu miana faga opiera się na zdolności określonego bakteriofaga do replikacji tylko w komórkach bakteryjnych „własnego” gatunku. Odbywa się to zgodnie z następującą zasadą. Do materiału patologicznego dodaje się pewną ilość określonego bakteriofaga, inkubuje się go w termostacie, a następnie ponownie określa się ilość faga. Jeśli wzrosła, oznacza to, że bakteriofag „znalazł” komórki swojego „własnego” gatunku do replikacji, a zatem bakterie pożądanego gatunku są obecne w materiale patologicznym.

2. W procesie identyfikacji czystej kultury wykorzystuje się gatunki i typy bakteriofagów.
a. Do wskazania fagów stosuje się bakteriofagi gatunków. Wyizolowaną czystą kulturę wysiewa się trawnikiem na płytkę agarową i upuszcza na nią kroplę gatunku bakteriofaga. Jeśli kultura należy do pożądanego gatunku, w miejscu zastosowania kropli nie będzie wzrostu, w przeciwnym razie w miejscu zastosowania kropli będzie obserwowany fag. wzrost bakterii. Czasami, po nałożeniu bakteriofaga, szalka Petriego z agarem jest przechylana, pozwalając kropli spłynąć w dół obrzeża szalki (dlatego metoda ta nazywana jest „kroplą kroplową”).

b. Do typowania fagów stosuje się typowe bakteriofagi. Zasada metody jest następująca.
1. Typowany szczep wysiewa się trawnikiem na agarze płytkowym.
2. Następnie krople typowych bakteriofagów są zrzucane na wysianą powierzchnię (każdy w swoim własnym kwadracie, wcześniej zaznaczonym, na przykład szklanym wykresem na dnie szalki Petriego).
3. Szalka do inokulacji jest inkubowana w termostacie.
4. Doświadczenie uwzględnia się rejestrując „sterylne plamy” lub „blaszki” – miejsca braku wzrostu w miejscu podania kropli bakteriofaga, na które jest wrażliwy ta opcja bakteria.
5. Fagovar (fagotyp) jest określany przez wymienienie typowych fagów, które lizują ten wariant.
B. Stosowanie bakteriofagów (zwykle gatunków) do leczenia określa się jako terapię fagową. W celu leczenia bakteriofagi są stosowane miejscowo (w postaci irygacji dotkniętej powierzchni, wstrzyknięcia do lokalnego ogniska proces patologiczny itp.), ponieważ ich podawanie pozajelitowe prowadzi do rozwoju odpowiedzi immunologicznej na obce białko faga. Jeśli terapeutyczny bakteriofag jest stosowany doustnie (w leczeniu infekcje jelitowe), najlepiej zastosować tabletkową postać leku, pokrytą kwasoodporną otoczką, która rozpuszcza się w zasadowym środowisku jelita - bakteriofagi są bardzo wrażliwe na niskie pH i szybko ulegają inaktywacji w kwaśnym środowisku żołądka .
C. Profilaktyka fagowa – zastosowanie bakteriofaga (również z reguły gatunku) w celu zapobiegania rozwojowi infekcji bakteryjnej. Obecnie używany do zapobiegania nagłym wypadkom dur brzuszny i czerwonka (pod prewencja w sytuacjach awaryjnych rozumie się jako zestaw środków zapobiegających rozwojowi choroby po wystąpieniu zakażenia, tj. wejście patogenu do ciała pacjenta).

Po raz pierwszy przyjęto założenie, że bakteriofagi są wirusami. D. Errela. W przyszłości odkryto wirusy grzybów itp., Zaczęto je nazywać fagami.

Morfologia fagów.

Rozmiary - 20 - 200 nm. Większość fagów ma kształt kijanki. Najbardziej złożone fagi składają się z wielościennej głowy zawierającej kwas nukleinowy, szyi i wyrostków. Na końcu procesu znajduje się płytka podstawna z wystającymi z niej włóknami i zębami. Te nici i zęby służą do przyłączenia faga do powłoki bakteryjnej. Najbardziej złożone fagi w dystalnej części procesu zawierają enzym - lizozym. Enzym ten przyczynia się do rozpuszczania błony bakteryjnej po wniknięciu faga NK do cytoplazmy. W przypadku wielu fagów proces ten jest otoczony otoczką, która u niektórych fagów może się kurczyć.

Istnieje 5 grup morfologicznych

1. Bakteriofagi o długim wyrostku i osłonce kurczącej
2. Fagi z długim wyrostkiem, ale bez osłonki kurczliwej
3. Fagi z krótkim ogonem
4. Fagi z analogiem procesowym
5. Fagi nitkowate

Skład chemiczny.

Fagi składają się z kwasu nukleinowego i białek. Większość z nich zawiera dwuniciowy DNA zamknięty w pierścieniu. Niektóre fagi zawierają pojedynczą nić DNA lub RNA.

Powłoka faga - kapsyd, składa się z uporządkowanych podjednostek białkowych - kapsomerów.

Najbardziej złożone fagi w dystalnej części procesu zawierają enzym - lizozym. Enzym ten przyczynia się do rozpuszczania błony bakteryjnej po wniknięciu faga NK do cytoplazmy.

Fagi dobrze znoszą zamrażanie, podgrzewanie do 70 i suszenie. Wrażliwy na kwasy, promieniowanie UV i gotowanie. Fagi infekują ściśle określone bakterie poprzez interakcję z określonymi receptorami komórkowymi.

Zgodnie ze specyfiką interakcji -

Polifagi — wchodzące w interakcje z kilkoma pokrewnymi gatunkami bakterii

Monofagi – gatunkowe fagi – oddziałują z jednym rodzajem bakterii

Typ fagi - oddziałują z poszczególnymi wariantami bakterii w obrębie gatunku.

Ze względu na działanie typowych fagów gatunki można podzielić na: rząd fagów. Interakcja fagów z bakteriami może przebiegać przez typ produkcyjny, aprodukcyjny i integracyjny.

typ produkcyjny- powstaje potomstwo faga, a komórka ulega lizie

Z produktywnym- komórka nadal istnieje, proces interakcji zostaje przerwany na początkowym etapie

Typ integracyjny- genom faga integruje się z chromosomem bakteryjnym i współistnieje z nim.

W zależności od rodzaju interakcji istnieją wirulentne i umiarkowane fagi.

Zjadliwy współdziałają z bakteriami w sposób produktywny. Na początku fag jest wchłaniany na błonie bakteryjnej dzięki oddziaływaniu specyficznych receptorów. Następuje penetracja lub przenikanie wirusowego kwasu nukleinowego do cytoplazmy bakterii. Pod działaniem lizozymu w powłoce bakterii powstaje mały otwór, powłoka faga ulega zmniejszeniu i wstrzykuje się NK. Powłoka faga poza bakterią. Dalej jest synteza wczesnych białek. Zapewniają syntezę białek strukturalnych faga, replikację kwasu nukleinowego faga i represję aktywności chromosomów bakteryjnych.

Po tym następuje synteza Elementy konstrukcyjne fagi i replikacja kwasów nukleinowych. Z tych pierwiastków powstaje nowa generacja cząstek fagowych. Zespół nazywa się morfogenezą, czyli nowymi cząstkami, z których w jednej bakterii może powstać 10-100. Dalsza liza bakterii i uwolnienie nowej generacji fagów do środowiska zewnętrznego.

umiarkowane bakteriofagi współdziałać produktywnie lub integracyjnie. Cykl produkcyjny przebiega w ten sam sposób. Przy oddziaływaniu integracyjnym DNA faga umiarkowanego po wejściu do cytoplazmy jest integrowane z chromosomem na określonym obszarze, a podczas podziału komórkowego replikuje się synchronicznie z DNA bakterii, a struktury te są przenoszone do komórek potomnych. Taki wbudowany fagowy DNA - przepowiadać, a bakteria zawierająca profaga nazywana jest lizogenną, a zjawisko nazywa się lizogenia.

Spontanicznie lub pod wpływem szeregu czynników zewnętrznych profag może zostać wycięty z chromosomu, tj. przechodzą w stan wolny, wykazują właściwości zjadliwego faga, co doprowadzi do powstania nowej generacji ciał bakteryjnych - indukcja profagu.

Lizogeneza bakteryjna leży u podstaw konwersji fagowej (lizogennej). Jest to rozumiane jako zmiana cech lub właściwości bakterii lizogennych w porównaniu z bakteriami nielizogennymi tego samego gatunku. Może zmienić różne właściwości- morfologiczne, antygenowe itp.

Fagi o umiarkowanym nasileniu mogą być wadliwe - nie mogą tworzyć potomstwa fagów, które nie są w żywy i indukcji.

Virion - kompletna cząsteczka wirusa, składająca się z NK i otoczki białkowej

Praktyczne zastosowanie fagów -

1. Zastosowanie w diagnostyce. W odniesieniu do wielu gatunków bakterii, w reakcji podatności na lizowalność fagów stosuje się monofagi, jako jedno z kryteriów identyfikacji kultury bakteryjnej, typowe fagi stosuje się do typowania fagów, do wewnątrzspecyficznego różnicowania bakterii. Prowadzone w celach epidemiologicznych, w celu ustalenia źródła infekcji i sposobów eliminacji
2. Do leczenia i zapobiegania wielu infekcjom bakteryjnym - typ brzucha, zakażenia gronkowcowe i paciorkowcowe (tabletki z powłoką kwasoodporną)
3. Bakteriofagi umiarkowane są wykorzystywane w inżynierii genetycznej jako wektor zdolny do wprowadzenia materiału genetycznego do żywej komórki.

Genetyka bakterii

Genom bakteryjny składa się z elementów genetycznych zdolnych do samoreplikacji - repliki. Replikony to bakteryjne chromosomy i plazmidy. Chromosom bakteryjny tworzy nukleoid, który nie jest związany z białkami w zamkniętym pierścieniu i zawiera haploidalny zestaw genów.

Plazmidy są również zamkniętym pierścieniem cząsteczki DNA, ale znacznie mniejszym od chromosomu. Obecność plazmidów w cytoplazmie bakterii nie jest konieczna, ale dają przewagę w środowisko. Duże plazmidy są redukowane wraz z chromosomem, a ich liczba w komórce jest niewielka. A liczba małych plazmidów może sięgać kilkudziesięciu. Niektóre plazmidy są zdolne do odwracalnej integracji z chromosomem bakteryjnym w określonym regionie i działają jako pojedynczy replikon. Takie plazmidy nazywane są integracyjnymi. Niektóre plazmidy mogą być przenoszone z jednej bakterii do drugiej przez bezpośredni kontakt - plazmidy koniugacyjne. Zawierają geny odpowiedzialne za tworzenie F-pigułek, które tworzą sprzężony most do transferu materiału genetycznego.

Główne typy plazmidów to

F - integracyjny plazmid kongatywny. Czynnik płci określa zdolność bakterii do bycia dawcami podczas koniugacji

R - plazmidy. Odporny. Zawiera geny, które determinują syntezę czynników niszczących leki przeciwbakteryjne. Bakterie posiadające takie plazmidy nie są wrażliwe na wiele leków. Dlatego powstaje czynnik lekooporny.

Toksyna plazmidowa - czynniki determinujące patogenność -

Ent - plazmid - zawiera gen do produkcji enterotoksyn.

Hly - zniszcz erytrocyt.

ruchome elementy genetyczne. Należą do nich wkładki - elementy wstawiane. Ogólnie przyjęte oznaczenie to Iz. Są to odcinki DNA, które mogą poruszać się zarówno w replikonie, jak i między nimi. Zawierają tylko geny niezbędne do ich własnego ruchu.

transpozony- większe struktury, które mają takie same właściwości jak Is, ale dodatkowo zawierają geny strukturalne decydujące o syntezie substancje biologiczne takie jak toksyny. Transpozycyjne elementy genetyczne mogą powodować inaktywację genów, uszkodzenie materiału genetycznego, fuzję replikonu i proliferację genów w populacji bakterii.

zmienność bakterii.

Wszystkie typy zmienności są podzielone na 2 grupy - niedziedziczną (fenotypową, modyfikacyjną) i dziedziczną (genotypową).

Modyfikacje- fenotypowe niedziedziczne zmiany cech lub właściwości. Modyfikacje nie wpływają na genotyp i dlatego nie są dziedziczone. Są to adaptacyjne reakcje na zmianę w określonych warunkach. otoczenie zewnętrzne. Z reguły są tracone w pierwszym pokoleniu, po wygaśnięciu czynnika.

Zmienność genotypowa wpływa na genotyp organizmu, a zatem może być przenoszony na potomstwo. Zmienność genotypowa dzieli się na mutacje i rekombinacje.

Mutacje- trwałe, dziedziczne zmiany cech lub właściwości organizmu. Podstawą mutacji jest jakościowa lub ilościowa zmiana sekwencji nukleotydów w cząsteczce DNA. Mutacje mogą zmienić prawie każdą właściwość.

Ze względu na pochodzenie mutacje są spontaniczne i indukowane.

Spontaniczne mutacje występuje w naturalnych warunkach istnienia organizmu i indeksowany powstają w wyniku ukierunkowanego działania czynnika mutagennego. W zależności od charakteru zmian w pierwotnej strukturze DNA bakterii rozróżnia się mutacje genowe lub punktowe oraz aberracje chromosomowe.

Mutacje genów występują w obrębie jednego genu i minimalnie wychwytują jeden nukleotyd. Ten rodzaj mutacji może wynikać z zamiany jednego nukleotydu na inny, utraty nukleotydu lub wstawienia dodatkowego.

Chromosomalny- może wpływać na kilka chromosomów.

Może wystąpić delecja - utrata segmentu chromosomu, duplikacja - podwojenie segmentu chromosomu. Obrót segmentu chromosomu o 180 stopni to inwersja.

Każda mutacja zachodzi pod wpływem pewnego czynnika mutagennego. Z natury mutageny są fizyczne, chemiczne i biologiczne. promieniowanie jonizujące, promienie rentgenowskie, Promienie UV. Do mutagenów chemicznych - analogów zasad azotowych, samego kwasu azotowego, a nawet niektórych leki, cytostatyki. Do biologicznego - niektóre wirusy i transfazony

Rekombinacja- wymiana części chromosomów

Transdukcja – transfer materiału genetycznego przez bakteriofaga

Naprawa materiału genetycznego - przywrócenie uszkodzeń powstałych w wyniku mutacji.

Istnieje kilka rodzajów zadośćuczynienia

1. Fotoreaktywacja – proces ten zapewnia specjalny enzym, który aktywuje się w obecności światła widzialnego. Enzym ten porusza się wzdłuż łańcucha DNA i naprawia uszkodzenia. Łączy tymery, które powstają pod wpływem UV. Skutki zadośćuczynienia na ciemno są bardziej znaczące. Nie zależy od światła i jest dostarczana przez kilka enzymów – najpierw nukleazy wycinają uszkodzony odcinek łańcucha DNA, następnie polimeraza DNA syntetyzuje łatę na macierzy pozostałego łańcucha komplementarnego, a ligazy wszywają łatę w uszkodzony obszar .

Odszkodowania podlegają mutacje genów, podczas gdy chromosomy zwykle nie

1. Rekombinacja genetyczna u bakterii. Charakteryzuje się penetracją materiału genetycznego z bakterii dawcy do bakterii biorcy z wytworzeniem genomu potomnego zawierającego geny obu pierwotnych osobników.

Włączenie fragmentu DNA dawcy do biorcy następuje przez skrzyżowanie

Trzy rodzaje transmisji -

1. Transformacja- proces, w którym przenoszony jest fragment wyizolowanego DNA dawcy. Zależy od kompetencji biorcy i stanu DNA dawcy. Kompetencja- zdolność do wchłaniania DNA. Zależy od obecności określonych białek w błonie komórkowej biorcy i powstaje w określonych okresach wzrostu bakterii. DNA dawcy musi być dwuniciowe i niezbyt duże. DNA dawcy przenika przez błonę bakteryjną, jeden z łańcuchów ulega zniszczeniu, drugi zostaje zintegrowany z DNA biorcy.
2. transdukcja- przeprowadzane za pomocą bakteriofagów. Transdukcja ogólna i transdukcja specyficzna.

Ogólny - występuje przy udziale czynników zjadliwych. Podczas składania fagów cząsteczkowych główka faga może omyłkowo zawierać nie fagowy DNA, ale fragment bakteryjnego chromosomu. Takie fagi są fagami wadliwymi.

konkretny- odbywa się przez umiarkowane fagi. Podczas wycinania wycinanie odbywa się ściśle wzdłuż granicy, są one wstawiane między określone geny i przenoszą je.

1. koniugacja- przeniesienie materiału genetycznego z bakterii dawcy do biorcy, w przypadku ich bezpośredniego kontaktu. Warunek konieczny- obecność kongatywnego plazmidu w komórce dawcy. Podczas koniugacji z powodu pilusów powstaje mostek koniugacyjny, przez który materiał genetyczny jest przenoszony od dawcy do pacjenta.

Diagnostyka genów

Zestaw metod identyfikacji genomu mikroorganizmu lub jego fragmentu w badanym materiale. Jako pierwszy zaproponowano metodę hybrydyzacji NC. Oparte na zasadzie komplementarności. Metoda ta umożliwia wykrycie obecności markerowych fragmentów DNA patogenu w materiale genetycznym za pomocą sond molekularnych. Sondy molekularne to krótkie nici DNA, które są komplementarne do miejsca markerowego. Do sondy wprowadzana jest etykieta - fluorochrom, izotop promieniotwórczy, enzym. Materiał testowy poddawany jest specjalnej obróbce, która pozwala na zniszczenie mikroorganizmów, uwolnienie DNA i podzielenie go na jednoniciowe fragmenty. Następnie materiał jest naprawiony. Następnie wykrywana jest aktywność etykiety. Ta metoda nie jest bardzo wrażliwa. Możliwe jest zidentyfikowanie patogenu tylko przy wystarczająco dużej jego liczbie. 10 do 4 mikroorganizmów. Jest to dość skomplikowane technicznie i wymaga duża liczba sondy. rozpowszechniony w praktyce nie znalazł. Był zaprojektowany nowa metoda - polimeraza reakcja łańcuchowa- PCR.

Metoda ta opiera się na zdolności DNA i wirusowego RNA do replikacji, tj. do samoreprodukcji. Istotą pacjenta jest wielokrotne kopiowanie - amplifikacja in vitro fragmentu DNA, który jest markerem dla danego drobnoustroju. Ponieważ proces odbywa się w wystarczającym wysokie temperatury 70-90 metoda stała się możliwa po wyizolowaniu termostabilnej polimerazy DNA z bakterii termofilnych. Mechanizm amplifikacji jest taki, że kopiowanie łańcuchów DNA nie rozpoczyna się w żadnym momencie, a jedynie w określonych blokach startowych, do tworzenia których wykorzystuje się tzw. startery. Startery to sekwencje polinukleotydowe, które są komplementarne do sekwencji końcowych skopiowanego fragmentu pożądanego DNA, a startery nie tylko inicjują amplifikację, ale także ograniczają. Teraz istnieje kilka opcji PCR, charakterystyczne są 3 etapy -

1. Denaturacja DNA (podział na 1 fragmenty nici)
2. Mocowanie podkładu.
3. Bezpłatne rozszerzenie nici DNA do 2 nici

Ten cykl trwa 1,5-2 minuty. W rezultacie liczba cząsteczek DNA podwaja się 20-40 razy. Wynik to 10 do 8 potęgi kopii. Po amplifikacji wykonuje się elektroforezę i izoluje w postaci pasków. Odbywa się to w specjalnym urządzeniu zwanym wzmacniaczem.

Zalety PCR

1. Daje bezpośrednie wskazanie obecności patogenu w badanym materiale, bez izolowania czystej kultury.
2. Wysoko wysoka czułość. Teoretycznie można znaleźć 1st.
3. Materiał do badań można natychmiast zdezynfekować po pobraniu próbki.
4. 100% specyficzność
5. Szybkie rezultaty. Pełna analiza- 4-5 godzin. Metoda ekspresowa.

Jest szeroko stosowany w diagnostyce chorób zakaźnych, których przyczyną są organizmy nieuprawiane lub trudne w uprawie. Chlamydia, mykoplazmy, wiele wirusów - zapalenie wątroby, opryszczka. Opracowano system testowy w celu określenia: wąglik, gruźlica.

Analiza ograniczeń- za pomocą enzymów cząsteczka DNA jest dzielona według określonych sekwencji nukleoidów, a fragmenty są analizowane według ich składu. W ten sposób możesz znaleźć unikalne witryny.

Biotechnologia i inżynieria genetyczna

Biotechnologia to nauka, która w oparciu o badanie procesów życiowych żywych organizmów wykorzystuje te bioprocesy, a także same obiekty biologiczne, do przemysłowej produkcji produktów niezbędnych dla ludzi, do reprodukcji bioefektów, które nie przejawiają się w nienaturalne warunki. Jak obiekty biologiczne najczęściej używane są mikroorganizmy jednokomórkowe, a także komórki, zwierzęta i rośliny. Komórki bardzo szybko się rozmnażają, co pozwala na Krótki czas zwiększyć biomasę producenta. Obecnie biosynteza substancji złożonych, takich jak białka, antybiotyki, jest bardziej ekonomiczna i technologicznie bardziej dostępna niż inne rodzaje surowców.

Biotechnologia wykorzystuje same komórki jako źródło produktu docelowego, a także duże cząsteczki syntetyzowane przez komórkę, enzymy, toksyny, przeciwciała oraz metabolity pierwotne i wtórne – aminokwasy, witaminy, hormony. Technologia otrzymywania produktów syntezy mikrobiologicznej i komórkowej sprowadza się do kilku typowych etapów - wyboru lub stworzenia siedziby produkcyjnej. Dobór optymalnej pożywki, uprawa. Izolacja produktu docelowego, jego oczyszczanie, standaryzacja, postać dawkowania. Inżynieria genetyczna sprowadza się do stworzenia docelowego produktu niezbędnego człowiekowi. Powstały gen docelowy jest łączony z wektorem, a wektor może być plazmidem i wstawiany do komórki biorcy. Odbiorca - bakterie - Escherichia coli, drożdże. Docelowe produkty syntetyzowane przez rekombinanty są izolowane, oczyszczane i stosowane w praktyce.

Jako pierwsze stworzono insulinę i ludzki interferon. Erytropoetyna, hormon wzrostu, przeciwciała monoklonalne. Szczepionka przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B.

Praktyczne zastosowanie fagów. Bakteriofagi są wykorzystywane w diagnostyce laboratoryjnej infekcji podczas wewnątrzgatunkowej identyfikacji bakterii, czyli oznaczania fagowaru (typu faga). W tym celu stosuje się metodę fagotypowanie, w oparciu o ścisłą specyfikę działania fagów: krople różnych fagów specyficznych dla typu diagnostycznego nakłada się na kubek z gęstą pożywką zasianą „trawnikiem” czystej kultury patogenu. Fag bakterii jest określany przez typ faga, który spowodował jego lizę (tworzenie sterylnej plamki, „płytki nazębnej” lub „kolonie ujemnej”, fag). Technika fagotypowania służy do identyfikacji źródła i sposobów rozprzestrzeniania się infekcji (znakowanie epidemiologiczne). Izolacja bakterii tego samego fagovaru od różnych pacjentów wskazuje na wspólne źródło ich infekcji.

Fagi są również wykorzystywane w leczeniu i profilaktyce szereg infekcji bakteryjnych. Wytwarzają dur brzuszny, salmonellę, czerwonkę, pseudomonas, fagi gronkowcowe, paciorkowcowe i preparaty złożone (coliproteic, pyobakteriofagi itp.). Bakteriofagi są przepisywane według wskazań doustnie, pozajelitowo lub miejscowo w postaci płynu, tabletek, czopków lub aerozoli.

Bakteriofagi są szeroko stosowane w inżynierii genetycznej i biotechnologii. jako wektory do otrzymywania rekombinowanego DNA.

Czynniki sprawcze Escherichiosis. Taksonomia i charakterystyka. Rola Escherichia coli w stanach normalnych i patologicznych. Diagnostyka mikrobiologiczna escherichiozy jelitowej. Zasady leczenia i profilaktyki.

Escherichioza- choroba zakaźna, którego czynnikiem sprawczym jest Escherichia coli.

Istnieją escherichioza jelitowa (jelitowa) i pozajelitowa. Escherichioza jelitowa jest ostrą chorobą zakaźną charakteryzującą się dominującym uszkodzeniem przewodu pokarmowego. Występują w postaci ognisk, przyczyną są biegunkowe szczepy E. coli. Escherichiosis pozajelitowe - choroby wywoływane przez oportunistyczne szczepy E. coli - przedstawiciele normalnej mikroflory okrężnicy. W przypadku tych chorób możliwe jest uszkodzenie dowolnych narządów.

stanowisko taksonomiczne. Czynnik sprawczy - Escherichia coli - jest głównym przedstawicielem rodzaju Escherichia, rodziny Enterobacteriaceae, należącej do działu Gracilicutes.

Właściwości morfologiczne i barwne. E. coli to małe pałeczki Gram-ujemne o zaokrąglonych końcach. W rozmazach są ułożone losowo, nie tworzą zarodników, peritrichous. Niektóre szczepy są mikrokapsułkowane, pili.

dobra kulturowe. Escherichia coli - beztlenowce fakultatywne, optym. tempo. na wzrost - 37C. E coli nie wymagając pożywki i dobrze rośnie na prostych podłożach, dając rozproszone zmętnienie na płynie i tworząc kolonie na gęstych podłożach. Do diagnozy escherichiozy stosuje się zróżnicowane media diagnostyczne z laktozą - Endo, Levina.

aktywność enzymatyczna. E coli posiada szeroką gamę różnych enzymów. Bardzo piętno E coli jest jego zdolność do fermentacji laktozy.

Struktura antygenowa. E. coli ma chorobę somatyczną O-, wiciowce H i powierzchniowe antygeny K. Antygen O ma ponad 170 wariantów, antygen K - ponad 100, antygen H - ponad 50. Struktura antygenu O determinuje przynależność do grupy serologicznej. Szczepy E coli posiadające nieodłączny zestaw antygenów (formuła antygenowa) nazywane są warianty serologiczne (serowary).

Według właściwości antygenowych, toksycznych, dwa warianty biologiczne E coli:

1) warunkowo patogenny coli;

2) „z pewnością” chorobotwórczy, biegunkowy.

czynniki chorobotwórczości. Tworzy endotoksynę o działaniu enterotropowym, neurotropowym i pirogennym. Biegunkowe Escherichia wytwarzają egzotoksynę, która powoduje znaczne zakłócenie metabolizmu wody i soli. Ponadto w niektórych szczepach, a także czynnikach wywołujących czerwonkę, znajduje się czynnik inwazyjny, który sprzyja przenikaniu bakterii do komórek. Patogeniczność biegunki Escherichia polega na występowaniu krwotoku, działaniu nefrotoksycznym. Do czynników patogenności wszystkich szczepów E coli zawierają pilusy i białka błony zewnętrznej, które promują adhezję, a także mikrokapsułkę, która zapobiega fagocytozie.

opór. E coli ma wyższą odporność na działanie różne czynniki otoczenie zewnętrzne; jest wrażliwy na środki dezynfekujące, szybko ginie po ugotowaniu.

RolaE coli. E. coli jest przedstawicielem prawidłowej mikroflory jelita grubego. Jest antagonistą patogennych bakterii jelitowych, bakterii gnilnych i grzybów z rodzaju Candida. Ponadto bierze udział w syntezie witamin z grupy BYĆ oraz DO, częściowo rozkłada włókno.

Szczepy, które żyją w jelicie grubym i są warunkowo chorobotwórcze, mogą przedostać się poza przewód pokarmowy i wraz ze spadkiem odporności i ich nagromadzeniem mogą powodować różne niespecyficzne choroby ropno-zapalne (zapalenie pęcherza, zapalenie pęcherzyka żółciowego) - escherichioza pozajelitowa.

Epidemiologia.Źródłem escherichiozy jelitowej są chorzy ludzie. Mechanizm zakażenia – fekalno-oralny, drogi przenoszenia - pożywienie, kontakt z gospodarstwem domowym.

Patogeneza. Jama ustna Dostaje się do jelito cienkie, jest adsorbowany w komórkach nabłonka za pomocą pilusów i białek błony zewnętrznej. Bakterie namnażają się, giną, uwalniając endotoksynę, która zwiększa ruchliwość jelit, powoduje biegunkę, gorączkę i inne objawy ogólnego zatrucia. Przydziela egzotoksynę - ciężką biegunkę, wymioty i znaczne naruszenie metabolizmu wody i soli.

Klinika. Okres inkubacji wynosi 4 dni. Choroba zaczyna się ostro, z gorączką, bólem brzucha, biegunką, wymiotami. Obserwuje się zaburzenia snu i apetyt, ból głowy. W postaci krwotocznej krew znajduje się w kale.

Odporność. Później przeszła choroba odporność jest delikatna i krótkotrwała.

Diagnostyka mikrobiologiczna . Główna metoda - bakteriologiczny. Określa się rodzaj czystej kultury (gram-ujemne pałeczki, oksydazoujemna, fermentująca glukoza i laktoza do kwasu i gazu, tworząca indol, nie tworząca siarkowodoru) i należąca do grupy serologicznej, co umożliwia rozróżnienie oportunistycznej E. coli od biegunkowych. Identyfikacja wewnątrzgatunkowa, mająca znaczenie epidemiologiczne, polega na oznaczaniu serowaru przy użyciu diagnostycznych zaadsorbowanych surowic immunologicznych.

83. Budowa i funkcje układu odpornościowego.