चिकित्सा में बैक्टीरियोफेज का उपयोग किस प्रयोजन के लिए किया जाता है? बैक्टीरियोफेज क्या हैं और इनका उपयोग किस लिए किया जाता है?

सेमी। ज़खरेंको, पीएच.डी., एसोसिएट प्रोफेसर, सैन्य चिकित्सा अकादमीउन्हें। सेमी। किरोव, सेंट पीटर्सबर्ग

बैक्टीरियोफेज अद्वितीय सूक्ष्मजीव हैं जिनके आधार पर विशेष गुणों और विशेषताओं के साथ चिकित्सीय और रोगनिरोधी दवाओं का एक समूह बनाया गया है। उनके अंतर्निहित कार्य स्वाभाविक हैं शारीरिक तंत्रफ़ेज और बैक्टीरिया के बीच परस्पर क्रिया से बैक्टीरियोफेज और दोनों की अनंत विविधता की भविष्यवाणी करना संभव हो जाता है संभावित तरीकेउनके अनुप्रयोग. जैसे-जैसे बैक्टीरियोफेज के संग्रह का विस्तार होता है, नए लक्ष्य रोगजनक निस्संदेह सामने आएंगे, और उन रोगों की सीमा का विस्तार होगा जिनके लिए फेज का उपयोग मोनोथेरेपी और जटिल उपचार आहार दोनों के रूप में किया जा सकता है।

इस प्रकार, संक्रमित अग्नाशय परिगलन (पर्म स्टेट मेडिकल अकादमी का नाम शिक्षाविद ई.ए. वैगनर के नाम पर) के उपचार में पॉलीवैलेंट पायोबैक्टीरियोफेज सेक्स्टाफेज के उपयोग ने रोगियों में होमोस्टैसिस और अंगों और प्रणालियों के कार्य के बुनियादी मापदंडों को अधिक तेज़ी से बहाल करना संभव बना दिया। संख्या में भी उल्लेखनीय कमी आई पश्चात की जटिलताएँऔर मौतें: मानक चिकित्सा प्राप्त करने वाले रोगियों के समूह में मृत्यु दर 100% थी, जबकि बीएफ प्राप्त करने वाले समूह में यह 16.6% थी।

बीएफ दवाओं की हानिरहितता और प्रतिक्रियाजन्यता के कारण, उनका उपयोग बाल चिकित्सा अभ्यास, नवजात शिशुओं सहित। निज़नी नोवगोरोड क्षेत्रीय बच्चों के स्कूल का अनुभव दिलचस्प है नैदानिक ​​अस्पताल, जहां महामारी विज्ञान की स्थिति की जटिलताओं की अवधि के दौरान, सामान्य महामारी विरोधी उपायों के साथ, बीएफ - इंटेस्टी-बैक्टीरियोफेज और बीएफ स्यूकफोमोनस एरुगिनोसा दोनों का उपयोग किया गया था। स्यूडोमोनस एटियोलॉजी के नोसोकोमियल संक्रमण की घटनाओं में 11 गुना की कमी देखी गई उच्च दक्षताबीएफ का आवेदन. डिस्बिओसिस और विकारों के उपचार के लिए बीएफ दवाएं निर्धारित की जा सकती हैं पाचन तंत्र, और श्लेष्म झिल्ली के उपनिवेशण को रोकने के लिए जठरांत्र पथअवसरवादी बैक्टीरिया. मल्टीकंपोनेंट बीएफ तैयारियां गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल संकट के पहले लक्षणों से तत्काल राहत के लिए आदर्श हैं।

आज तक, उद्यम ने योजना बनाई है पूरी लाइनचिकित्सीय और रोगनिरोधी बैक्टीरियोफेज के विकास और उत्पादन के लिए प्राथमिकता वाले क्षेत्र, जो नए उभरते वैश्विक रुझानों से संबंधित हैं। नई दवाएं बनाई और पेश की जा रही हैं: बीएफ को सेरेशंस और एंटरोबैक्टीरिया के खिलाफ विकसित किया गया है, हेलिकोबैक्टर पाइलोरी के खिलाफ फेज दवा बनाने पर काम चल रहा है।

विज्ञान विभाग के उप प्रमुख की रिपोर्ट के अनुसार, इन दवाओं का केवल एक निर्माता एनपीओ माइक्रोजेन है अभिनव विकासअल्ला लोबस्तोवा, सालाना 2 मिलियन से अधिक पैकेज तैयार करती है। दुर्भाग्य से, बैक्टीरियोफेज के बारे में कई डॉक्टरों के विचार उद्देश्य से बहुत दूर हैं। बहुत से लोग नहीं जानते कि एक ही रोगज़नक़ के खिलाफ सक्रिय बैक्टीरियोफेज अलग-अलग परिवारों से संबंधित हो सकते हैं, उनके अलग-अलग जीवन चक्र हो सकते हैं, आदि। उदाहरण के लिए, बैक्टीरियोफेज पी. एरुगिनोसा मायोविरिडे, पोडोविरिडे, सिफोविरिडे परिवारों से संबंधित हैं, और उनमें लाइटिक होता है। जीवन चक्रया मध्यम. एक ही रोगज़नक़ के विभिन्न उपभेदों में बैक्टीरियोफेज के प्रति अलग-अलग संवेदनशीलता हो सकती है। अधिकांश विशेषज्ञ तरल और टैबलेट के अस्तित्व के बारे में जानते हैं (सुना है, किसी ने इसका इस्तेमाल किया है)। दवाई लेने का तरीकाबैक्टीरियोफेज की चिकित्सीय और रोगनिरोधी दवाएं। हालाँकि, उनकी सीमा काफी व्यापक है, जिसे एक पूर्ण लाभ माना जा सकता है, विशेष रूप से प्रशासन के विभिन्न मार्गों (मौखिक प्रशासन, एनीमा, अनुप्रयोग, घावों और श्लेष्म झिल्ली की सिंचाई, घाव गुहाओं में प्रशासन, आदि) के संयोजन में। को स्पष्ट लाभबैक्टीरियोफेज को पारंपरिक रूप से बैक्टीरिया की काफी सीमित आबादी पर एक विशिष्ट प्रभाव, एक समय-सीमित अस्तित्व (सूक्ष्मजीवों की लक्षित आबादी गायब होने तक), विषाक्त और एलर्जी प्रतिक्रियाओं, डिस्बिओटिक प्रतिक्रियाओं आदि जैसे दुष्प्रभावों की अनुपस्थिति के लिए जिम्मेदार ठहराया जाता है। विभिन्न प्रकार से उपयोग किया जा सकता है आयु के अनुसार समूहऔर गर्भावस्था के दौरान. बैक्टीरियोफेज स्वयं महत्वपूर्ण एलर्जी कारक नहीं हैं। बैक्टीरियोफेज दवाओं के प्रति असहिष्णुता के मामले ज्यादातर घटकों की प्रतिक्रिया से जुड़े होते हैं पोषक माध्यम. दवाओं के इस समूह के सभी प्रमुख निर्माता उपयोग किए गए घटकों की अधिकतम गुणवत्ता के लिए प्रयास करते हैं, जिससे ऐसी प्रतिक्रियाओं की संभावना कम हो जाती है। बढ़ते एंटीबायोटिक प्रतिरोध के संदर्भ में, कुछ लेखक बैक्टीरियोफेज को एंटीबायोटिक दवाओं का सबसे अच्छा विकल्प मानने का प्रस्ताव करते हैं। बैक्टीरियोफेज की चिकित्सीय और रोगनिरोधी दवाएं विशेष रूप से चयनित संयोजनों (पॉलीक्लोनल अत्यधिक विषैले का एक जटिल) का एक कॉकटेल हैं जीवाणु विषाणु, निर्माता के फ़ेज़ संग्रह के आधार पर विशेष रूप से जीवाणु संक्रमण के रोगजनकों के सबसे आम समूहों के खिलाफ चुना गया)। ऊफ़ा, पर्म और निज़नी नोवगोरोड में एफएसयूई एनपीओ माइक्रोजेन की शाखाएँ - आधुनिक केंद्रऐसी दवाओं का उत्पादन. विशिष्ट रोगजनक सूक्ष्मजीवों के लिए अनुकूलित चिकित्सीय और रोगनिरोधी बैक्टीरियोफेज दवाएं बनाने की संभावना दवाओं के इस समूह का एक और प्रमुख लाभ है। रोगाणुरोधी दवाओं के प्रति जीवाणु प्रतिरोध की वृद्धि और आधुनिक की लगातार पॉलीएटियोलॉजी संक्रामक रोगसंयोजन एंटीबायोटिक चिकित्सा (दो, तीन, और कभी-कभी अधिक) की आवश्यकता होती है रोगाणुरोधी). चयन के लिए प्रभावी योजनाएंटीबायोटिक थेरेपी, दवा के प्रति बैक्टीरिया की वास्तविक संवेदनशीलता के अलावा, पर्याप्त को ध्यान में रखना आवश्यक है बड़ी संख्याकारक. इस संबंध में फेज थेरेपी के भी कुछ फायदे हैं। एक ओर, बैक्टीरियोफेज के संयोजन का उपयोग एक दूसरे के साथ उनकी बातचीत के साथ नहीं होता है और उनके उपयोग के पैटर्न में बदलाव नहीं लाता है। चिकित्सीय बैक्टीरियोफेज के मौजूदा सेट के भीतर, कई अच्छी तरह से सिद्ध संयोजन हैं - कोलिप्रोटियन बैक्टीरियोफेज, पॉलीवलेंट पायोबैक्टीरियोफेज, इंटेस्टी-बैक्टीरियोफेज। दूसरी ओर, बैक्टीरिया नहीं होते सामान्य तंत्रएंटीबायोटिक दवाओं और फेज के प्रति प्रतिरोध; इसलिए, उनका उपयोग तब किया जा सकता है जब रोगज़नक़ किसी एक दवा के प्रति प्रतिरोधी हो, और "एंटीबायोटिक + बैक्टीरियोफेज" के संयोजन में। यह संयोजन माइक्रोबियल बायोफिल्म को नष्ट करने के लिए विशेष रूप से प्रभावी है। प्रयोग यह स्पष्ट रूप से दर्शाता है संयुक्त उपयोगलौह प्रतिपक्षी और बैक्टीरियोफेज बायोफिल्म के निर्माण को बाधित कर सकते हैं क्लेबसिएला निमोनिया. इसी समय, माइक्रोबियल आबादी के आकार में उल्लेखनीय कमी और "युवा" कोशिकाओं की संख्या में कमी दोनों देखी गई है। और एक महत्वपूर्ण विशेषताबैक्टीरियोफेज की क्रिया एपोप्टोसिस के प्रेरण जैसी एक घटना है। ई. कोली के कुछ उपभेदों में ऐसे जीन होते हैं जो कोशिका में बैक्टीरियोफेज टी4 के प्रवेश के बाद कोशिका मृत्यु का कारण बनते हैं। इस प्रकार, फेज टी4 के देर से जीन की अभिव्यक्ति के जवाब में, लिट जीन (एक प्रोटीज को एनकोड करता है जो प्रोटीन संश्लेषण के लिए आवश्यक बढ़ाव कारक ईएफ-टू को नष्ट कर देता है), सभी सेलुलर प्रोटीन के संश्लेषण को अवरुद्ध करता है। पीआरआरसी जीन एक न्यूक्लीज को एनकोड करता है जो लाइसिन टीआरएनए को तोड़ता है। न्यूक्लियस फेज टी4 के एसटीपी जीन उत्पाद द्वारा सक्रिय होता है। टी4 फेज से संक्रमित कोशिकाओं में, रेक्स जीन (फेज जीनोम से संबंधित और लाइसोजेनिक कोशिकाओं में व्यक्त) आयन चैनलों के निर्माण का कारण बनते हैं, जिससे कोशिकाओं द्वारा महत्वपूर्ण आयनों की हानि होती है और बाद में मृत्यु हो जाती है। T4 फ़ेज़ स्वयं अपने प्रोटीन, rII जीन के उत्पादों, के साथ चैनलों को बंद करके कोशिका मृत्यु को रोक सकता है। यदि बैक्टीरिया किसी एंटीबायोटिक के प्रति प्रतिरोध विकसित कर लेता है, तो सक्रिय अणु या मौलिक रूप से नए पदार्थों को संशोधित करने के लिए नए विकल्पों की तलाश करना आवश्यक है। दुर्भाग्य से, के लिए पिछले साल कानई एंटीबायोटिक दवाओं के आने की गति काफी धीमी हो गई है। बैक्टीरियोफेज के साथ स्थिति मौलिक रूप से भिन्न है। बड़े निर्माताओं के संग्रह में बैक्टीरियोफेज के दर्जनों तैयार उपभेद शामिल हैं और लगातार नए सक्रिय फेज के साथ भर दिए जाते हैं। बैक्टीरियोफेज के प्रति पृथक रोगज़नक़ों की संवेदनशीलता की चल रही निगरानी के लिए धन्यवाद, निर्माता क्षेत्रों को आपूर्ति की गई फ़ेज़ रचनाओं को समायोजित करते हैं। अनुकूलित बैक्टीरियोफेज के लिए धन्यवाद, एंटीबायोटिक-प्रतिरोधी उपभेदों के कारण होने वाले नोसोकोमियल संक्रमण के प्रकोप को खत्म करना संभव है।

पर मौखिक रूप सेबैक्टीरियोफेज जल्दी से संक्रमण के स्थानों पर पहुंच जाते हैं: जब प्युलुलेंट-इंफ्लेमेटरी रोगों वाले रोगियों द्वारा मौखिक रूप से लिया जाता है, तो एक घंटे के भीतर फेज रक्त में प्रवेश कर जाते हैं, 1-1.5 घंटे के बाद उन्हें ब्रोंकोपुलमोनरी एक्सयूडेट से और जले हुए घावों की सतह से, 2 घंटे के बाद पता लगाया जाता है। - मूत्र से, और दर्दनाक मस्तिष्क की चोटों वाले रोगियों के मस्तिष्कमेरु द्रव से भी।

इस प्रकार, बैक्टीरियोफेज अद्वितीय सूक्ष्मजीव हैं, जिनके आधार पर विशेष गुणों और विशेषताओं के साथ चिकित्सीय और रोगनिरोधी दवाओं का एक समूह बनाया गया है। फ़ेज़ और बैक्टीरिया के बीच परस्पर क्रिया के अंतर्निहित प्राकृतिक शारीरिक तंत्र स्वयं बैक्टीरियोफेज दोनों की अनंत विविधता और उनके उपयोग के संभावित तरीकों की भविष्यवाणी करना संभव बनाते हैं। जैसे-जैसे बैक्टीरियोफेज के संग्रह का विस्तार होता है, नए लक्ष्य रोगजनक निस्संदेह सामने आएंगे, और उन रोगों की सीमा का विस्तार होगा जिनके लिए फेज का उपयोग मोनोथेरेपी और जटिल उपचार आहार दोनों के रूप में किया जा सकता है। फ़ेज़ थेरेपी के भविष्य के भाग्य का एक आधुनिक दृष्टिकोण उनकी कार्रवाई की उच्च विशिष्टता और फ़ेज़ थेरेपी के सभी नियमों का सख्ती से पालन करने की आवश्यकता पर आधारित होना चाहिए। एटियोट्रोपिक थेरेपी के किसी भी साधन के साथ बैक्टीरियोफेज की तुलना करना गलत है।

एंटीबायोटिक्स को पृष्ठभूमि में धकेलते हुए, यह डॉक्टरों के बीच अधिक से अधिक प्रशंसक प्राप्त कर रहा है। एक समय, एंटीबायोटिक दवाओं के आगमन ने डॉक्टरों के उपचार के बारे में सोचने के तरीके को पूरी तरह से बदल दिया। पहले निराश रोगी ठीक होने लगे, उपचार एल्गोरिदम बेहद सरल हो गए, मृत्यु दर में तेजी से गिरावट आई... चमत्कार! जादू ठीक करता है! लेकिन उत्साहपूर्ण रवैया ज्यादा देर तक नहीं टिक सका. बहुत सारी समस्याएँ उत्पन्न होने लगीं।

दुश्मन का दुश्मन, मेरा दोस्त है

अब एंटीबायोटिक चिकित्सा के "फिसलन" मुद्दे सभी को ज्ञात हैं। एंटीबायोटिक दवाओं की कार्रवाई के साथ है:

आंतों और श्लेष्म झिल्ली के आवश्यक, "उपयोगी" माइक्रोफ्लोरा का विनाश;

बैक्टीरिया के प्रतिरोधी नए उपभेदों की सक्रिय वृद्धि;

दवाओं की प्रणालीगत क्रिया के कारण दुष्प्रभावों की घटना।

इस संबंध में, जीवाणु संक्रमण के उपचार के लिए मौलिक रूप से भिन्न दवाओं की खोज अत्यावश्यक हो गई है। और फिर बैक्टीरियोफेज सामने आए।

बैक्टीरियोफेज ऐसे वायरस होते हैं जो बैक्टीरिया कोशिकाओं को चुनिंदा रूप से संक्रमित करते हैं। वायरस स्वयं को जीवाणु की कोशिका भित्ति से जोड़ लेता है और अपनी आनुवंशिक सामग्री को कोशिका में प्रविष्ट कर देता है। परिणामस्वरूप, नए वायरस का संश्लेषण शुरू होता है, और फिर जीवाणु कोशिका का क्षरण होता है और 200-1000 नए फ़ेज़ निकलते हैं जो अन्य जीवाणुओं को संक्रमित करते हैं। जब रोगजनक तनाव के सभी बैक्टीरिया नष्ट हो जाते हैं, तो बैक्टीरियोफेज बिना किसी निशान के शरीर से समाप्त हो जाते हैं। कई बैक्टीरियोफेज अत्यधिक विशिष्ट होते हैं, और वायरस का प्रत्येक प्रकार केवल एक निश्चित प्रकार के बैक्टीरिया को संक्रमित करता है, शरीर के अन्य सूक्ष्मजीवों और कोशिकाओं को किसी भी तरह से प्रभावित किए बिना। इससे दुष्प्रभावों में उल्लेखनीय कमी आती है।

इस प्रकार, निस्संदेह लाभ के लिए बैक्टीरियोफेज का उपयोगजिम्मेदार ठहराया जा सकता:

उच्च सुरक्षा प्रोफ़ाइल, नवजात शिशुओं से लेकर बहुत बूढ़े तक, किसी भी उम्र के रोगियों में उनके उपयोग की अनुमति;

बैक्टीरिया के प्रतिरोधी उपभेदों के उद्भव के जोखिम को कम करना;

एंटीबायोटिक्स सहित किसी भी अन्य दवाओं के साथ उनके संयोजन की संभावना।

संभवतः बैक्टीरियोफेज के उपयोग को सीमित करने वाली एकमात्र चीज उनकी चयनात्मकता है, जिसके कारण उपचार से पहले रोगज़नक़ की प्रकृति और इसकी संवेदनशीलता को स्पष्ट करना आवश्यक है विभिन्न प्रकार केबैक्टीरियोफेज ऐसा विश्लेषण हर जगह नहीं किया जाता और न ही लिया जाता है कुछ समय, लेकिन निदान प्रणालियों में सुधार से हमें उम्मीद है कि यह समस्या जल्द ही हल हो सकती है।

सिद्धांत से व्यवहार तक

अस्तित्व अलग - अलग प्रकारबैक्टीरियोफेज: मोनोफेज, जिसका उद्देश्य केवल एक प्रकार के बैक्टीरिया को नष्ट करना है, और पॉलीफेज, एक साथ कई प्रजातियों पर कार्य करते हैं रोगजनक जीवाणु. चूंकि सर्जरी और स्त्री रोग से लेकर नियोनेटोलॉजी और ईएनटी प्रैक्टिस तक चिकित्सा के लगभग सभी क्षेत्रों में बैक्टीरियोफेज की अत्यधिक मांग है, इसलिए इसमें बैक्टीरियोफेज जारी करने की योजना बनाई गई है। विभिन्न रूप. इनका उपयोग एनीमा, अनुप्रयोग, सिंचाई के रूप में मौखिक प्रशासन के लिए किया जाता है, घावों, योनि, गर्भाशय, नाक, साइनस की गुहाओं में परिचय के लिए, साथ ही सूखा गुहाओं में परिचय के लिए - पेट, फुफ्फुस, मूत्राशय, गुर्दे क्षोणी. पाठ्यक्रम की अवधि नैदानिक ​​संकेतों पर निर्भर करती है और 7-20 दिन हो सकती है। सुरक्षित, प्रभावी और विश्वसनीय बैक्टीरियोफेज वास्तव में वह हथियार हैं जो रोगजनक बैक्टीरिया के खिलाफ लड़ाई में बहुत आवश्यक हैं।

सिर्फ दवा नहीं

आणविक जीव विज्ञान और जैव प्रौद्योगिकी में प्रगति ने न केवल उपचार के लिए, बल्कि अन्य उद्देश्यों के लिए भी बैक्टीरियोफेज का उपयोग करना संभव बना दिया है। उदाहरण के लिए, संयुक्त राज्य अमेरिका में, बैक्टीरियोफेज का उपयोग एक सुरक्षित परिरक्षक के रूप में किया जाता है खाद्य उत्पाद. जब खाद्य पदार्थों में जोड़ा जाता है, तो बैक्टीरियोफेज अवांछित बैक्टीरिया के प्रसार को रोकता है।

रोचक तथ्य

बैक्टीरियोफेज की खोज 1894 में हुई, जब ब्रिटिश बैक्टीरियोलॉजिस्ट अर्नेस्ट हैंकिन ने देखा कि भारतीय नदियों गंगा और जमुना में महत्वपूर्ण मात्रा में पानी था। जीवाणुरोधी गतिविधिजो उबलने के बाद पूरी तरह से गायब हो जाता है। उन्होंने सुझाव दिया कि पानी में कुछ ऐसा पदार्थ था जो बैक्टीरिया को मारता था। इन वायरस को "बैक्टीरियोफेज" ("बैक्टीरिया खाने वाला") नाम 1917 में फ्रांसीसी वैज्ञानिक फेलिक्स डी'हेरेले से मिला, जिन्होंने "एक अदृश्य सूक्ष्म जीव जो पेचिश बेसिलस को संक्रमित करता है" की खोज की थी। इस "अदृश्यता" की प्रकृति का स्पष्टीकरण इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के आगमन के बाद ही संभव हो सका।

उपलब्धियों आधुनिक दवाईऔर फार्मास्यूटिकल्स बहुत अच्छे हैं, लेकिन रोगज़नक़ों में भी लगातार सुधार हो रहा है और वे उन दवाओं के प्रभाव को अपना रहे हैं जो कुछ साल पहले उनके लिए घातक थीं। जहां एंटीबायोटिक्स शक्तिहीन हैं, बैक्टीरियोफेज रोगजनक सूक्ष्मजीवों से लड़ने में मदद करेंगे।

बैक्टीरियोफेज क्या हैं

प्राचीन ग्रीक से शाब्दिक रूप से अनुवादित, बैक्टीरियोफेज बैक्टीरिया खाने वाले होते हैं। यह जैविक शब्द उन वायरस को संदर्भित करता है जो बैक्टीरिया कोशिकाओं को चुनिंदा रूप से संक्रमित करते हैं।

बैक्टीरिया जहां भी रहते हैं वहां बैक्टीरियोफेज मौजूद होते हैं, इसलिए उनका निवास स्थान हवा, पानी, मिट्टी, मानव शरीर, भोजन और कपड़े हो सकते हैं।

बैक्टीरियोफेज की संरचनात्मक विशेषताएं: इस वायरस में नहीं है सेलुलर संरचना, शीर्ष पर प्रोटीन आवरण से ढका हुआ केवल आनुवंशिक पदार्थ होता है। इसलिए, उन्हें प्रजनन के लिए उपयुक्त सेलुलर सूक्ष्मजीवों की तलाश करनी होगी।

फ़ेज़ जीवाणु के लिए अपनी आनुवंशिक जानकारी को उसके शरीर में इंजेक्ट करके अपनी विनाशकारी गतिविधि शुरू करता है, और फिर सक्रिय प्रजनन शुरू करता है। जब एक जीवाणु कोशिका नष्ट हो जाती है, तो उसके टुकड़ों के माध्यम से 100 से 200 तक नए बैक्टीरियोफेज निकलते हैं, जो तुरंत आस-पास के जीवाणुओं को संक्रमित करना शुरू कर देते हैं।

प्रकार

सबसे प्रसिद्ध बैक्टीरियोफेज:

• पेचिश;
• स्टेफिलोकोकल;
• स्ट्रेप्टोकोकल;
• पोटैशियम;
• स्यूडोमोनस;
• स्यूडोमोनास एरुगिनोसा।

लाभ

कुछ वैज्ञानिकों का तर्क है कि जल्द ही बैक्टीरियोफेज पर आधारित दवाओं का उपयोग विभिन्न प्रकार की बीमारियों के इलाज में एंटीबायोटिक दवाओं के उपयोग से प्रतिस्पर्धा करेगा।

इस साहसिक धारणा का आधार फ़ेज़ के उपयोग के निम्नलिखित लाभों द्वारा प्रदान किया गया है:

• दवा के उपयोग के लिए लत और मतभेद की अनुपस्थिति;
• प्रतिरक्षा प्रणाली पर कोई निरोधात्मक प्रभाव नहीं;
• चयनात्मक क्रिया (लाभकारी जीवाणु वनस्पति बरकरार रहती है);
• उपचार के अन्य तरीकों के साथ सामंजस्यपूर्ण संयोजन, जिसमें एंटीबायोटिक चिकित्सा भी शामिल है (शोध के परिणामों के अनुसार, फ़ेज़ उनके प्रभाव को भी बढ़ाते हैं);
• सुस्ती के उपचार में एक स्पष्ट प्रभाव दर्दनाक स्थितियाँजीवाणु एजेंटों के कारण होता है जो एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति असंवेदनशील होते हैं।

इससे बच्चों, बुजुर्गों, गर्भवती महिलाओं और दुर्बल रोगियों के लिए बैक्टीरियोफेज का सफलतापूर्वक उपयोग किया जा सकता है।

संकेत

उपचार आहार में बैक्टीरियोफेज को शामिल करने के संकेत निम्नलिखित संक्रमण हैं:

• सर्जिकल (फोड़ा, पैनारिटियम, पैराप्रोक्टाइटिस, ऑस्टियोमाइलाइटिस, फोड़े, जलन, कफ, कार्बुनकल, प्यूरुलेंट घाव);
• मूत्रजननांगी (सिस्टिटिस, पायलोनेफ्राइटिस, कोल्पाइटिस, मूत्रमार्गशोथ, एंडोमेट्रैटिस, सल्पिंगोफोराइटिस);
• एंटरल (कोलेसीस्टाइटिस, गैस्ट्रोएंटेरोकोलाइटिस, आंतों की डिस्बिओसिस);
• रक्त - विषाक्तता;
• ईएनटी अंगों के रोग (टॉन्सिलिटिस, साइनसाइटिस, ओटिटिस मीडिया);
• रोग श्वसन तंत्रऔर फेफड़े (ट्रेकाइटिस, फुफ्फुस, लैरींगाइटिस, ब्रोंकाइटिस, निमोनिया)।

आवेदन के तरीके

जिस विधि से बैक्टीरियोफेज का सीधे उपयोग किया जाना चाहिए वह सूजन के स्रोत की प्रकृति और स्थान पर निर्भर करता है। में अलग-अलग स्थितियाँआवेदन की निम्नलिखित विधियाँ उपयुक्त होंगी:

• मौखिक रूप से (दवा मुंह से ली जाती है);
• मलाशय (बैक्टीरियोफेज एनीमा);
• स्थानीय रूप से (धोने, लोशन, सिंचाई, टपकाने, कुल्ला करने, दवा में भिगोए हुए अरंडी के प्रशासन के रूप में)।

यदि उपचार संयुक्त हो तो बैक्टीरियोफेज अधिक प्रभावी ढंग से कार्य करता है विभिन्न तरीकेअनुप्रयोग। निश्चित हैं नैदानिक ​​संकेत, जिसके अनुसार बैक्टीरियोफेज को गोलियों में मौखिक रूप से लिया जाता है, और स्थानीय कार्रवाईलोशन के रूप में तरल बैक्टीरियोफेज प्रदान करता है।

समाधान, एरोसोल, टैबलेट, सपोसिटरी और जैल के रूप में उत्पादित बैक्टीरियोफेज पर आधारित तैयारी लोकप्रियता प्राप्त कर रही है। फार्मेसी प्रपत्रदवाओं की आपूर्ति की गई विस्तृत निर्देशबैक्टीरियोफेज कैसे लें.

मतभेद

कुछ हद तक अविश्वास वाले अधिकांश लोग बैक्टीरियोफेज के साथ उपचार की संभावना पर विचार करते हैं, हालांकि ऐसी चिकित्सा की प्रभावशीलता और, सबसे महत्वपूर्ण बात, सुरक्षा पहले ही साबित हो चुकी है।

एकमात्र संभव विरोधाभासशायद संवेदनशीलता में वृद्धिबैक्टीरियोफेज के लिए, हालांकि मामले एलर्जी की प्रतिक्रियाबैक्टीरियोफेज विशिष्ट नहीं हैं।

बैक्टीरियोफेज तैयारी

फार्मास्युटिकल उद्योग कई दवाएं पेश करता है जिनकी कार्रवाई का सिद्धांत बैक्टीरियोफेज की रोगाणुरोधी गतिविधि पर आधारित है।

• इंटेस्टी-बैक्टीरियोफेज (इंटेस्टीफेज)

  

  तरल इम्यूनोबायोलॉजिकल दवारोगाणुरोधी. यह सूक्ष्मजीवों की गतिविधि को रोकता है, बीमारियाँ पैदा कर रहा हैजठरांत्र पथ ( दण्डाणुज पेचिश, टाइफाइड बुखार, एंटरोकोलाइटिस, पैराटाइफाइड बुखार, डिस्बैक्टीरियोसिस, साल्मोनेलोसिस)। इसका उपयोग आंतरिक रूप से और एनीमा के रूप में किया जाता है। मतभेद: दवा के प्रति अतिसंवेदनशीलता। दुष्प्रभाव: नवजात शिशुओं में, उपयोग के पहले 2 दिनों में त्वचा पर चकत्ते और उल्टी संभव है।

• पायोबैक्टीरियोफेज पॉलीवलेंट (सेक्स्टाफेज)

  

  नवजात शिशुओं और शिशुओं के प्युलुलेंट-सेप्टिक रोगों, ईएनटी अंगों की प्युलुलेंट-भड़काऊ बीमारियों और आंत्र संक्रमण से सफलतापूर्वक मुकाबला करता है। नए संक्रमित घावों का इलाज करने के लिए उपयोग किया जाता है। कोई मतभेद या दुष्प्रभाव नहीं हैं।

• बैक्टीरियोफेज क्लेबसिएला निमोनिया (क्लेब्सिफ़ैग)

  

  यह उन बैक्टीरिया को प्रभावित करता है जो निमोनिया, ओज़ेना और राइनोस्क्लेरोमा का कारण बनते हैं। संदूषण को रोकने के लिए, सामान्यीकृत सेप्टिक स्थितियों में भी मदद करता है नोसोकोमियल उपभेदक्लेबसिएला कोई दुष्प्रभाव नहीं हैं. अंतर्विरोध: घटकों के प्रति अतिसंवेदनशीलता।

• साल्मोनेला बैक्टीरियोफेज

  

  एंटीजेनिक संरचना में समान साल्मोनेला कोशिकाओं और सूक्ष्मजीवों को नष्ट कर देता है। बच्चों और वयस्कों में साल्मोनेलोसिस के उपचार के लिए उपयुक्त। कोई मतभेद या दुष्प्रभाव नहीं हैं।

• स्यूडोमोनास एरुगिनोसा बैक्टीरियोफेज (स्यूडोमोनास एरुगिनोसा)

  

  घावों के उपचार के लिए उपयोग किया जाता है विभिन्न अंगस्यूडोमोनास एरुगिनोसा। दुष्प्रभावपहचाना नहीं गया। अंतर्विरोध: दवा के प्रति अतिसंवेदनशीलता।

• बैक्टीरियोफेज स्ट्रेप्टोकोकल (स्ट्रेप्टोफेज)

  

  स्ट्रेप्टोकोकल बैक्टीरिया को मारता है, जो गले में खराश, टॉन्सिलिटिस, साइनसाइटिस, पैनारिटियम, सड़ने वाले घावों और कई अन्य बीमारियों के उपचार में इस पर आधारित दवाओं को अपरिहार्य बनाता है। साइनसाइटिस के इलाज के लिए इस बैक्टीरियोफेज को नाक में डालने की सलाह दी जाती है। कोई दुष्प्रभाव नहीं हैं. अंतर्विरोध: दवा के प्रति अतिसंवेदनशीलता।

• बैक्टीरियोफेज कोलाई

  

  इसमें एक विशिष्ट जीवाणुरोधी प्रभाव होता है जो विशेष रूप से रोगजनक उपभेदों के खिलाफ निर्देशित होता है कोलाई. जठरांत्र संबंधी मार्ग के घावों, घावों का दबना, नवजात शिशुओं के सेप्सिस, नेत्रश्लेष्मलाशोथ, मूत्रजननांगी संक्रमण के लिए निर्धारित। अंतर्विरोध: दवा के प्रति अतिसंवेदनशीलता। किसी भी दुष्प्रभाव की पहचान नहीं की गई।

• बैक्टीरियोफेज क्लेबसिएला पॉलीवैलेंट

  

  स्त्री रोग में पेरिटोनिटिस, फुफ्फुस, प्युलुलेंट-सूजन संबंधी रोगों के उपचार में प्रभावी। इसका उपयोग स्टामाटाइटिस, पेरियोडोंटाइटिस और साइनस की सूजन के उपचार में भी किया जाता है। कोई दुष्प्रभाव नहीं हैं. विरोधाभास: दवा के घटकों के प्रति अतिसंवेदनशीलता।

• कोलिप्रोटियस बैक्टीरियोफेज

  

  में तरल रूपकोल्पाइटिस और एंटरोकोलाइटिस की रोकथाम और उपचार की मांग में। टैबलेट के रूप में, इसका उपयोग अक्सर पायलोनेफ्राइटिस और सिस्टिटिस के उन्नत रूपों के लिए किया जाता है, सूजन प्रक्रियाएँपैल्विक अंगों में. विरोधाभास: दवा के किसी भी घटक से एलर्जी। कोई दुष्प्रभाव नहीं हैं.

• पेचिश बैक्टीरियोफेज

  

  पेचिश के उपचार और रोकथाम के लिए उपयोग किया जाता है। किसी भी दुष्प्रभाव की पहचान नहीं की गई। मतभेद: घटकों के प्रति अतिसंवेदनशीलता, और दवा के टैबलेट रूप के लिए - रोगी की आयु 1 वर्ष से कम है, गर्भावस्था और स्तनपान।

इसमें शामिल वायरस के खतरे को बढ़ा-चढ़ाकर न बताएं समान औषधियाँऔर बैक्टीरियोफेज एनालॉग्स। वे केवल बैक्टीरिया के लिए घातक हैं, बीमारियाँ पैदा कर रहा है. यदि डॉक्टर उपचार में बैक्टीरियोफेज को शामिल करना उचित समझता है, तो आपको भरोसा करना चाहिए और शीघ्र स्वस्थ होने के लिए तैयार रहना चाहिए।

बैक्टीरियोफेज का उपयोग विशेष रूप से इच्छित उद्देश्य के लिए और उपस्थित चिकित्सक की देखरेख में किया जाता है।

बैक्टीरियोफेज में मेडिकल अभ्यास करनासंक्रामक रोगों के निदान, उपचार और रोकथाम में उपयोग किया जाता है।

ए. निदान में, बैक्टीरियोफेज का उपयोग सांस्कृतिक अनुसंधान पद्धति में पृथक शुद्ध संस्कृति के प्रकार को निर्धारित करने के साथ-साथ इसकी टाइपिंग के लिए भी किया जाता है। की उपस्थिति को इंगित करने के लिए बैक्टीरियोफेज का उपयोग करने की विधि नीचे दी गई है खास प्रकार काशुद्ध कल्चर में अलग किए बिना बैक्टीरिया व्यापक नहीं हुआ है।

1. बढ़ती हुई फेज टिटर की प्रतिक्रिया एक विशिष्ट बैक्टीरियोफेज की केवल "अपनी" प्रजाति के बैक्टीरिया की कोशिकाओं में दोहराने की क्षमता पर आधारित होती है। इसे निम्नलिखित सिद्धांत के अनुसार किया जाता है। एक विशिष्ट बैक्टीरियोफेज की एक निश्चित मात्रा को पैथोलॉजिकल सामग्री में जोड़ा जाता है, इसे थर्मोस्टेट में इनक्यूबेट किया जाता है, और फिर फेज की मात्रा फिर से निर्धारित की जाती है। यदि यह बढ़ गया है, तो इसका मतलब है कि बैक्टीरियोफेज को दोहराने के लिए "अपनी" प्रजाति की एक कोशिका "मिल गई" है, इसलिए, वांछित प्रजाति के बैक्टीरिया रोग संबंधी सामग्री में मौजूद हैं।

2. शुद्ध संस्कृति की पहचान करने की प्रक्रिया में प्रजातियों और प्रकार के बैक्टीरियोफेज का उपयोग किया जाता है।
एक। फेज संकेत के लिए प्रजाति-विशिष्ट बैक्टीरियोफेज का उपयोग किया जाता है। समर्पित शुद्ध संस्कृतिलॉन को प्लेट एगर पर टीका लगाएं और उस पर एक विशिष्ट बैक्टीरियोफेज की एक बूंद डालें। यदि कल्चर वांछित प्रजाति का है, तो उस स्थान पर कोई वृद्धि नहीं होगी जहां बूंद लागू की गई है, अन्यथा फेज उस स्थान पर देखा जाएगा जहां बूंद लागू की गई है। जीवाणु वृद्धि. कभी-कभी, बैक्टीरियोफेज लगाने के बाद, अगर प्लेट वाली पेट्री डिश को झुका दिया जाता है, जिससे बूंदें डिश के किनारे में चली जाती हैं (यही कारण है कि इस विधि को "ड्रिप ड्रिपिंग" कहा जाता है)।

बी। विशिष्ट बैक्टीरियोफेज का उपयोग फेज टाइपिंग के लिए किया जाता है। विधि का सिद्धांत इस प्रकार है.
1. टाइप किए जाने वाले स्ट्रेन को प्लेट एगर पर टीका लगाया जाता है।
2. फिर विशिष्ट बैक्टीरियोफेज की बूंदों को टीकाकृत सतह पर गिराया जाता है (प्रत्येक को अपने स्वयं के वर्ग में, पहले से चिह्नित किया जाता है, उदाहरण के लिए, पेट्री डिश के नीचे एक ग्लास ग्राफ के साथ)।
3. इनोक्यूलेटेड डिश को थर्मोस्टेट में इनक्यूबेट किया जाता है।
4. "बाँझ धब्बे" या "सजीले टुकड़े" को रिकॉर्ड करके अनुभव को ध्यान में रखें - बैक्टीरियोफेज की एक बूंद के आवेदन के स्थल पर विकास की कमी के स्थान जिसके प्रति यह संवेदनशील है इस विकल्पबैक्टीरिया.
5. फागोवर (फागोटाइप) को उन विशिष्ट फेजों को सूचीबद्ध करके निर्दिष्ट किया जाता है जो किसी दिए गए प्रकार को जोड़ते हैं।
बी. उपचार के लिए बैक्टीरियोफेज (आमतौर पर प्रजाति) के उपयोग को फेज थेरेपी कहा जाता है। उपचार के प्रयोजन के लिए, बैक्टीरियोफेज का उपयोग शीर्ष पर किया जाता है (प्रभावित सतह की सिंचाई के रूप में, स्थानीय फोकस में इंजेक्शन के रूप में) पैथोलॉजिकल प्रक्रियाआदि), क्योंकि पैरेंट्रल मार्ग से उनके प्रशासन से विदेशी फ़ेज़ प्रोटीन के प्रति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का विकास होता है। यदि चिकित्सीय बैक्टीरियोफेज को मौखिक रूप से प्रशासित किया जाता है (इलाज के लिए)। आंतों में संक्रमण), तो दवा के टैबलेट रूप का उपयोग करना सबसे अच्छा है, जो एसिड-प्रतिरोधी कोटिंग के साथ लेपित होता है जो आंत के क्षारीय वातावरण में घुल जाता है - बैक्टीरियोफेज कम पीएच के प्रति बहुत संवेदनशील होते हैं और पेट के अम्लीय वातावरण में जल्दी से निष्क्रिय हो जाते हैं .
बी. फेज रोकथाम - के विकास को रोकने के लिए बैक्टीरियोफेज का उपयोग (एक नियम के रूप में, एक प्रजाति-विशिष्ट भी) जीवाणु संक्रमण. वर्तमान में आपातकालीन रोकथाम के लिए उपयोग किया जाता है टाइफाइड ज्वरऔर पेचिश (अंडर आपातकालीन रोकथामसंक्रमण की क्रिया होने के बाद रोग के विकास को रोकने के लिए उपायों के एक सेट को संदर्भित करता है, अर्थात। रोगी के शरीर में रोगज़नक़ का प्रवेश)।

1. चिकित्सा में:

बैक्टीरियोफेज के उपयोग के क्षेत्रों में से एक है जीवाणुरोधी चिकित्सा, एंटीबायोटिक्स लेने का एक विकल्प। उदाहरण के लिए, बैक्टीरियोफेज का उपयोग किया जाता है: स्ट्रेप्टोकोकल, स्टेफिलोकोकल, क्लेबसिएला, पेचिश पॉलीवलेंट, पायोबैक्टीरियोफेज, कोली, प्रोटीस और कोलिप्रोटस और अन्य।

बैक्टीरियोफेज का उपयोग आनुवंशिक इंजीनियरिंग में डीएनए अनुभागों को स्थानांतरित करने वाले वैक्टर के रूप में भी किया जाता है; यह भी संभव है प्राकृतिक संचरणकुछ चरणों (ट्रांसडक्शन) के माध्यम से बैक्टीरिया के बीच जीन।

2. जीव विज्ञान में

बैक्टीरियोफेज एम13, फेज टी4, टी7 और फेज एल का उपयोग फेज डिस्प्ले विधि का उपयोग करके प्रोटीन-प्रोटीन, प्रोटीन-पेप्टाइड और डीएनए-प्रोटीन इंटरैक्शन का अध्ययन करने के लिए किया जाता है।

चूँकि बैक्टीरियोफेज का प्रजनन केवल जीवित कोशिकाओं में ही संभव है, इसलिए बैक्टीरिया की व्यवहार्यता निर्धारित करने के लिए बैक्टीरियोफेज का उपयोग किया जा सकता है। यह दिशाइसमें काफी संभावनाएं हैं, क्योंकि विभिन्न जैव प्रौद्योगिकी प्रक्रियाओं में मुख्य मुद्दों में से एक उपयोग की जाने वाली फसलों की व्यवहार्यता का निर्धारण करना है।

एंटीबायोटिक्स की तुलना में बैक्टीरियोफेज के लाभ:

• · अत्यधिक कुशल जैविक औषधियाँ जीवाणुरोधी क्रियातीव्र आंतों के संक्रमण और प्युलुलेंट-सूजन संबंधी रोगों की रोकथाम और उपचार के लिए, डिस्बिओसिस का उपचार;
• · जब उपयोग किया जाता है तो वे उल्लंघन नहीं करते हैं सामान्य बायोसेनोसिसमानव (एंटीबायोटिक दवाओं के विपरीत, जिसके बाद डिस्बिओसिस का इलाज करना हमेशा आवश्यक होता है - लेखक का नोट);
• · एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति रोगज़नक़ प्रतिरोध के लिए अपरिहार्य;
• में उपयोग किया जा सकता है जटिल चिकित्सादूसरों के साथ दवाइयाँ;
• · आंतों के माइक्रोफ़्लोरा को सामान्य करने वाली दवाओं के साथ संयोजन में डिस्बैक्टीरियोसिस के उपचार के लिए आवश्यक;
• · वयस्कों और बच्चों के लिए अनुशंसित;
• · प्राकृतिक कच्चे माल का उपयोग करके बनाए जाते हैं।

लाभ के लिएबैक्टीरियोफेज दवाओं में कार्रवाई की एक संकीर्ण विशिष्टता होती है, जो एंटीबायोटिक दवाओं के विपरीत, सामान्य माइक्रोफ्लोरा के अवरोध का कारण नहीं बनती है। सिद्ध उत्तेजक प्रभाव स्टेफिलोकोकल बैक्टीरियोफेजबिफीडोबैक्टीरिया पर -- आवश्यक भागआंतों का माइक्रोबायोसेनोसिस। संक्रामक रोगों के उपचार के लिए बैक्टीरियोफेज का उपयोग विशिष्ट और गैर-विशिष्ट प्रतिरक्षा के कारकों को उत्तेजित करता है, जो प्रतिरक्षादमनकारी स्थितियों और जीवाणु वाहक की पृष्ठभूमि के खिलाफ पुरानी सूजन संबंधी बीमारियों के उपचार के लिए विशेष रूप से प्रभावी है।

एंटीबायोटिक्स और बैक्टीरियोफेज दोनों सीधे रोगाणुओं पर कार्य करते हैं; केवल एंटीबायोटिक्स न केवल रोगजनक को नष्ट करते हैं, बल्कि उन्हें भी नष्ट करते हैं सामान्य माइक्रोफ़्लोरा, उल्लंघन करना प्राकृतिक संतुलन, जबकि बैक्टीरियोफेज केवल कार्य करते हैं रोगजनक सूक्ष्मजीव. जब यह एक संवेदनशील माइक्रोबियल कोशिका का सामना करता है, तो फ़ेज़ इसके अंदर प्रवेश करता है, अपनी क्रिया के तंत्र को अपनी तरह के प्रजनन में बदल देता है, जो कोशिका झिल्ली को फाड़कर, दस गुना संख्या में अन्य रोगाणुओं पर हमला करता है। लसीका स्वतःस्फूर्त हो जाता है, और अवांछित रोगाणुओं का निष्कासन कुछ ही घंटों में हो जाता है। इसका भी जिक्र होना चाहिए जटिल तैयारी, जो एक साथ कई रोगजनकों के लिए फ़ेज का एक सेट है: यह उपचार के लिए एक पायोबैक्टीरियोफेज है प्युलुलेंट-सेप्टिक रोगऔर आंतों के संक्रमण के खिलाफ इंटेस्टिबैक्टीरियोफेज।

हमारे देश में बैक्टीरियोफेज के मुख्य उत्पादक एनपीओ इम्यूनोप्रेपरेट (ऊफ़ा) हैं, जो बैक्टीरिया संबंधी तैयारियों के उत्पादन के लिए एक उद्यम है ( निज़नी नावोगरट), एमपी "बायोफ़ोन" (सेराटोव), ​​एनपीओ "बायोमेड" (पर्म)।

नैदानिक ​​​​अभ्यास ने जठरांत्र संबंधी मार्ग के संक्रामक रोगों के साथ-साथ बैक्टीरियोफेज के उपयोग की प्रभावशीलता को दिखाया है सूजन संबंधी बीमारियाँसाइनस, मुंह, ऊपरी श्वांस नलकी, मूत्र तंत्र, कोलेसीस्टाइटिस, आदि, जो फ़ेज़ के प्रति संवेदनशील बैक्टीरिया के कारण होता है। हालाँकि, फ़ेज़, ये "प्राकृतिक ऑर्डरलीज़" का उपयोग न केवल उपचार के लिए, बल्कि संक्रामक रोगों की रोकथाम के लिए भी किया जा सकता है। वे गैर विषैले हैं, उपयोग के लिए कोई मतभेद नहीं हैं, और किसी अन्य के साथ संयोजन में उपयोग किया जा सकता है दवाइयाँ. इन्हें गर्भवती, स्तनपान कराने वाली माताओं और समय से पहले जन्मे शिशुओं सहित किसी भी उम्र के बच्चों को दिया जा सकता है।

उनके सफल उपयोग के लिए मुख्य शर्त संबंधित फ़ेज़ के प्रति संवेदनशीलता के लिए पृथक संस्कृति का परीक्षण करना है। चिह्नित अद्भुत पैटर्न: एंटीबायोटिक दवाओं के विपरीत, बैक्टीरियोफेज के प्रति सूक्ष्मजीवों के नैदानिक ​​उपभेदों की संवेदनशीलता स्थिर होती है और बढ़ने लगती है, जिसे संवर्धन द्वारा समझाया जा सकता है औषधीय औषधियाँफ़ेज़ की नई जातियाँ।

बैक्टीरियोफेज की तैयारी बीमारियों के लिए मौखिक रूप से निर्धारित की जाती है आंतरिक अंगया स्थानीय रूप से, सीधे घाव पर। फ़ेज़ का प्रभाव इसके प्रशासन के 2-4 घंटों के भीतर प्रकट होता है (जो गहन देखभाल स्थितियों में विशेष रूप से महत्वपूर्ण है)। बैक्टीरियोफेज रक्त, लसीका में प्रवेश करते हैं और गुर्दे के माध्यम से उत्सर्जित होते हैं, स्वच्छ होते हैं मूत्र पथ. 1920 के दशक में, विभिन्न रोगों के उपचार में फेज का सक्रिय रूप से उपयोग किया जाने लगा।