तैयार माध्यम का रंग और पारदर्शिता। यूरेनियम श्रृंखला प्रतिक्रिया और सनसनीखेज श्रृंखला प्रतिक्रिया
119. पाण्डेय और नोने - अपेल्ट प्रतिक्रियाएं
पाण्डेय अभिक्रिया को करने के लिए अभिकर्मक के रूप में, एक स्पष्ट सतह पर तैरनेवाला द्रव का उपयोग किया जाता है, जो 1000 मिलीलीटर आसुत जल के साथ 100 ग्राम तरल कार्बोलिक एसिड को जोर से हिलाकर प्राप्त किया जाता है। तलछट और के लिए साफ़ तरल(अभिकर्मक), इस मिश्रण को पहले थर्मोस्टैट में 3-4 घंटे के लिए रखा जाता है, और फिर 2-3 दिनों के लिए कमरे के तापमान पर रखा जाता है।
काले कागज पर घड़ी या कांच की स्लाइड रखें और उस पर अभिकर्मक की 2-3 बूंदें डालें, फिर 1 बूंद मस्तिष्कमेरु द्रव. यदि बूंद बादल बन जाती है या इसकी परिधि के साथ एक फिलामेंटस मैलापन दिखाई देता है, तो प्रतिक्रिया को सकारात्मक माना जाता है।
नॉन-अपेल्ट प्रतिक्रिया को अंजाम देने के लिए, साफ टेस्ट ट्यूब, अमोनियम सल्फेट का एक संतृप्त घोल, आसुत जल और डार्क पेपर की आवश्यकता होती है। अमोनियम सल्फेट का संतृप्त घोल तैयार किया जाता है इस अनुसार: 0.5 ग्राम रासायनिक रूप से शुद्ध तटस्थ अमोनियम सल्फेट को 1000 मिलीलीटर फ्लास्क में रखा जाता है, फिर 100 मिलीलीटर आसुत जल को 95 डिग्री सेल्सियस तक गर्म किया जाता है, तब तक हिलाया जाता है जब तक कि नमक पूरी तरह से भंग न हो जाए और कमरे के तापमान पर कई दिनों तक छोड़ दिया जाए। 2-3 दिनों के बाद, समाधान फ़िल्टर किया जाता है और पीएच निर्धारित किया जाता है। प्रतिक्रिया तटस्थ होनी चाहिए।
परिणामस्वरूप घोल का 0.5-1 मिलीलीटर टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है और मस्तिष्कमेरु द्रव की समान मात्रा को ट्यूब की दीवार के साथ सावधानी से जोड़ा जाता है। 3 मिनट के बाद, परिणाम का मूल्यांकन करें। एक सफेद अंगूठी की उपस्थिति एक सकारात्मक प्रतिक्रिया का संकेत देती है। फिर परखनली की सामग्री को हिलाया जाता है, आसुत जल युक्त परखनली से तुलना करके मैलापन की डिग्री निर्धारित की जाती है। प्रतिक्रिया के परिणामों का मूल्यांकन काले कागज की पृष्ठभूमि के खिलाफ किया जाता है।
120. बोर्डेट-जंगू प्रतिक्रिया
पहचान करने में मूल्यवान नैदानिक परीक्षण जीर्ण सूजाकपुराने लोगों के बीच सूजन संबंधी बीमारियां मूत्र तंत्र. साहित्य के अनुसार जब सही उपयोगयह विधि बैक्टीरियोस्कोपिक या बैक्टीरियोलॉजिकल विधि से सूजाक के 80% मामलों का पता नहीं लगाती है।
बोर्डेट-जंगु प्रतिक्रिया पिछली बीमारी या निदान के लिए एक गोनोवाक्सिन के उपयोग (उकसाने की इम्यूनोबायोलॉजिकल विधि) के साथ-साथ चिकित्सीय (बक्शेव के अनुसार महिलाओं में जननांग प्रणाली की पुरानी सूजन प्रक्रियाओं का उपचार) के परिणामस्वरूप पता लगाया जा सकता है। उद्देश्य। इसलिए, इसे करने से पहले, सावधानीपूर्वक इतिहास एकत्र करना आवश्यक है,
दूध की शुरूआत के साथ प्रतिक्रिया झूठी-सकारात्मक भी हो सकती है, में उपयोग करें औषधीय प्रयोजनोंपायरोजेनल
इसलिए, एक सकारात्मक बोर्डेट-जंगु प्रतिक्रिया उपस्थिति के निर्विवाद प्रमाण के रूप में काम नहीं करती है गोनोकोकल संक्रमण, साथ ही नकारात्मक सूजाक की अनुपस्थिति का प्रमाण नहीं हो सकता है। हालांकि सकारात्मक नतीजेशरीर में गोनोकोकल संक्रमण का ध्यान केंद्रित करने के लिए इसे लंबे समय तक डॉक्टर द्वारा निर्देशित किया जाना चाहिए।
एक प्रतिजन के रूप में, एक मारे गए गोनोकोकल संस्कृति का उपयोग किया जाता है, जिसमें प्रति 1 मिलीलीटर में 3-4 अरब सूक्ष्मजीव होते हैं। गोनोकोकल एंटीजन को फॉर्मल्डेहाइड समाधान के साथ संरक्षित किया जाता है और 1-5 मिलीलीटर ampoules में डाला जाता है। बंद ampoules 6 महीने के लिए उपयुक्त हैं, खोले गए 2-3 दिनों के लिए एक बाँझ टेस्ट ट्यूब में एक रेफ्रिजरेटर में 3-5 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है,
बोर्डे-झांग पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया वासरमैन प्रतिक्रिया (संख्या 121 देखें) के समान ही की जाती है। गोनोकोकल एंटीजन को ampoule के लेबल पर संकेतित अनुमापांक के अनुसार आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल से पतला किया जाता है। प्रतिक्रिया सबसे अधिक बार 2.5 मिलीलीटर की मात्रा में की जाती है, इसलिए, पतला 1: 5 परीक्षण सीरम के 0.5 मिलीलीटर में, प्रत्येक टेस्ट ट्यूब में पतला एंटीजन का 0.5 मिलीलीटर जोड़ा जाता है। शेष 1.5 मिली हेमोलिटिक प्रणाली का 1 मिली और पूरक का 0.5 मिली है।
की उपस्थिति में प्रतिक्रिया सकारात्मक मानी जाती है बदलती डिग्रियांहेमोलिसिस परीक्षण सीरम में देरी करता है। नियंत्रण में (रक्त सीरम स्वस्थ लोग) पूर्ण हेमोलिसिस मनाया जाता है।
121. वासरमैन प्रतिक्रिया
उपदंश के रोगियों के रक्त सीरम में रीजिन और एंटीबॉडी होते हैं। रीगिन में कार्डियोलिपिन एंटीजन के साथ यौगिकों में प्रवेश करने की क्षमता होती है। ट्रेपोनिमा पैलिडम के खिलाफ विशिष्ट एंटीबॉडी विशिष्ट एंटीजन के साथ गठबंधन करते हैं। परिणामी एंटीजन-एंटीबॉडी परिसरों को प्रतिक्रिया में जोड़े गए पूरक द्वारा अवशोषित किया जाता है। संकेत एक हेमोलिटिक प्रणाली (भेड़ एरिथ्रोसाइट्स + हेमोलिटिक सीरम) शुरू करके किया जाता है।
होने वाली प्रतिक्रिया के लिए:
ए) आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान;
बी) अल्ट्रासोनीफाइड ट्रेपोनेमल (+4 डिग्री सेल्सियस पर रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत) और कार्डियोलिपिन (कमरे के तापमान पर संग्रहीत) एंटीजन;
सी) पूरक, जो 5-10 स्वस्थ गिनी सूअरों के हृदय पंचर द्वारा प्राप्त रक्त सीरम है। रेफ्रिजरेटर में 2 महीने तक स्टोर किया जा सकता है बशर्ते
कैनिंग 4% घोल बोरिक एसिडऔर 5% सोडियम सल्फेट घोल;
डी) हेमोलिसिन - हेमोलिटिक खरगोश रक्त सीरम भेड़ एरिथ्रोसाइट्स के साथ विभिन्न टाइटर्स के साथ प्रतिरक्षित (4 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत);
ई) पंचर द्वारा प्राप्त भेड़ एरिथ्रोसाइट्स गले का नस. 15 मिनट के लिए हिलाकर कांच के मोतियों (मिश्रण के लिए) के साथ एक बाँझ जार में रक्त एकत्र किया जाता है। बाँझ धुंध के माध्यम से निस्पंदन द्वारा फाइब्रिन के थक्कों को अलग किया जाता है। डिफिब्रिनेटेड रक्त को रेफ्रिजरेटर में 5 दिनों तक संग्रहीत किया जा सकता है।
कभी-कभी भेड़ के खून के लंबे भंडारण की आवश्यकता होती है, और इसलिए इसे एक विशेष परिरक्षक (6 ग्राम ग्लूकोज, 4.5 ग्राम बोरिक एसिड, 100 मिलीलीटर आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान) के साथ संरक्षित किया जाता है, जिसे पानी के स्नान में उबाला जाता है। 3 दिन के लिए 20 मिनट प्रतिदिन 100 मिली डिफाइब्रिनेटेड भेड़ के खून के लिए 15 मिली प्रिजर्वेटिव की जरूरत होती है। इस तरह से संरक्षित डिफिब्रिनेटेड रक्त को रेफ्रिजरेटर में संग्रहित किया जाता है।
मुख्य प्रयोग कई चरणों से पहले होता है।
से एक रोगी में क्यूबिटल नस 5-10 मिली खून लें और सीरम को प्रोसेस करें। बच्चों में, अस्थायी शिरा से रक्त लिया जा सकता है या एड़ी में चीरा लगाया जा सकता है। पंचर बाँझ उपकरणों, एक सिरिंज और एक सुई के साथ किया जाता है
आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ पूर्व-धोया गया।
शोध के लिए खून खाली पेट लिया जाता है; अध्ययन से 3-4 दिन पहले, रोगी को उपयोग करने से मना किया जाता है दवाओं, डिजिटलिस की तैयारी, शराब ले लो।
रोगियों में अध्ययन नहीं किया जाना चाहिए उच्च तापमानशरीर, आघात के बाद, सर्जरी, एनेस्थीसिया, हाल के संक्रामक रोग, मासिक धर्म के दौरान महिलाओं में, गर्भवती महिलाओं में (गर्भावस्था के अंतिम 10 दिनों में), प्रसव में महिलाएं (प्रसव के बाद पहले 10 दिनों में), साथ ही नवजात शिशुओं (में) जीवन के पहले 10 दिन)।
एक बाँझ ट्यूब में प्राप्त रक्त को थर्मोस्टेट में 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 15-30 मिनट के लिए रखा जाता है। परिणामी थक्का टेस्ट ट्यूब की दीवारों से एक बाँझ कांच की छड़ से अलग किया जाता है और एक दिन के लिए रेफ्रिजरेटर में रखा जाता है। अलग किए गए पारदर्शी सीरम (थक्के के ऊपर) को रबर के नाशपाती का उपयोग करके पाश्चर पिपेट के साथ चूसा जाता है या सावधानी से किसी अन्य बाँझ ट्यूब में डाला जाता है और 56 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 30 मिनट के लिए पानी के स्नान में निष्क्रिय कर दिया जाता है। प्रयोग के लिए इस तरह से तैयार सीरम को फ्रिज में 5-6 दिनों तक स्टोर किया जा सकता है।
एंटीजन को लेबल पर इंगित विधि और अनुमापांक के अनुसार पतला किया जाता है।
हेमोलिटिक सिस्टम तैयार करें। ऐसा करने के लिए, प्रतिक्रिया के लिए आवश्यक मात्रा में डिफिब्रिनेटेड रक्त या भेड़ एरिथ्रोसाइट्स को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, प्लाज्मा को सावधानीपूर्वक अलग किया जाता है, और अवक्षेप को 5-6 मात्रा में आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान से धोया जाता है जब तक कि सतह पर तैरनेवाला पूरी तरह से रंगहीन न हो जाए। सोडियम क्लोराइड के एक आइसोटोनिक घोल में एरिथ्रोसाइट्स का 3% निलंबन ट्रिपल टिटर के अनुसार तलछट से तैयार किया जाता है।
हेमोलिटिक सीरम का एक समाधान और भेड़ एरिथ्रोसाइट्स का निलंबन जल्दी से मिश्रित होता है और थर्मोस्टेट में 30 मिनट के लिए रखा जाता है।
सूखा पूरक 1:10 के अनुपात में आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ पतला होता है, सामान्य निष्क्रिय मानव सीरम - 1: 5।
पूरक को 3 पंक्तियों में 10 ट्यूबों के रैक में रखे 30 ट्यूबों में शीर्षक दिया गया है। दो पंक्तियों में इसे दो एंटीजन की उपस्थिति में, तीसरे में - आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ शीर्षक दिया जाता है। पांच टेस्ट ट्यूब नियंत्रण हैं: दो संबंधित दो एंटीजन के लिए और एक प्रत्येक पूरक के नियंत्रण के लिए, हेमोलिटिक सीरम और हेमोटॉक्सिसिटी के लिए आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान; उन्हें इस तरह भरें:
अभिकर्मकों, एमएल | टेस्ट ट्यूब की पंक्ति |
||||
भेड़ एरिथ्रोसाइट्स का 3% निलंबन | |||||
हेमोलिटिक सीरम, ट्रिपल टिटर द्वारा पतला | |||||
पूरक 1:10 | |||||
ट्राइपोनेमल एंटीजन टिटर द्वारा पतला | |||||
कार्डियोलिपिन एंटीजन टिटर द्वारा पतला | |||||
आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान | |||||
ट्यूबों को थर्मोस्टेट में 45 मिनट के लिए रखा जाता है, जिसके बाद उनकी जांच की जाती है। हेमोलिसिस किसी भी टेस्ट ट्यूब में नहीं होना चाहिए।
1:10 के कमजोर पड़ने पर पूरक को रैक की पहली पंक्ति के 10 टेस्ट ट्यूबों में खुराक में डाला जाता है: 0.1, 0.16, 0.2,0.24, 0.3, 0.36,0.4,0.44, 0.5 और 0.55 मिली। प्रत्येक ट्यूब की सामग्री में 1 मिली तक आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल डालें और अच्छी तरह मिलाएँ। प्रत्येक ट्यूब से 0.25 मिली मिश्रण को दूसरी और तीसरी पंक्तियों के संबंधित टेस्ट ट्यूब में स्थानांतरित किया जाता है। टेस्ट ट्यूब के साथ रैक को हिलाया जाता है, हेमोलिटिक सिस्टम के 0.5 मिलीलीटर को टेस्ट ट्यूब की तीसरी पंक्ति में जोड़ा जाता है, फिर से हिलाया जाता है और 45 मिनट के लिए थर्मोस्टेट में 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर रखा जाता है। सामान्य मानव रक्त सीरम 1:5, 0.25 मिलीलीटर के अनुपात में आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान से पतला सभी 30 टेस्ट ट्यूबों में डाला जाता है।
एंटीजन I (ट्रेपोनेमल अल्ट्रासाउंड), आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ टिटर में पतला, पहली पंक्ति के 10 टेस्ट ट्यूब में 0.25 मिलीलीटर जोड़ा जाता है; एंटीजन II (एक ही कमजोर पड़ने पर और समान मात्रा में कार्डियोलिपिन) - दूसरी पंक्ति के 10 टेस्ट ट्यूब में। आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के 0.25 मिलीलीटर को तीसरी पंक्ति के 10 टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है, शेष 0.25 मिलीलीटर डाला जाता है। थर्मोस्टैट में ऊष्मायन के बाद, हेमोलिटिक प्रणाली के 0.5 मिलीलीटर को 20 टेस्ट ट्यूब (पहली और दूसरी पंक्ति) में जोड़ा जाता है, हिलाया जाता है और 45 मिनट के लिए थर्मोस्टैट में फिर से रखा जाता है।
45 मिनट के बाद, पूरक की कार्यशील खुराक निर्धारित की जाती है, अर्थात इसका अनुमापांक 15-20% की सीमा में भत्ता के साथ।
पूरक अनुमापांक माना जाता है न्यूनतम राशि, एंटीजन और सामान्य मानव रक्त सीरम की उपस्थिति में राम एरिथ्रोसाइट्स के पूर्ण हेमोलिसिस का कारण बनता है।
मुख्य अनुभव यह है कि प्रत्येक परीक्षण निष्क्रिय सीरम, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ 1: 5 के अनुपात में पतला, तीन टेस्ट ट्यूबों में 0.25 मिलीलीटर में डाला जाता है। पहली ट्यूब में 0.25 मिली एंटीजन I, दूसरी में 0.25 मिली एंटीजन II और तीसरे (कंट्रोल) में 0.25 मिली आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल डालें। सभी टेस्ट ट्यूबों में काम करने वाली खुराक के लिए पतला 0.25 मिलीलीटर पूरक जोड़ें। सभी टेस्ट ट्यूब को 45 मिनट के लिए थर्मोस्टैट में रखा जाता है, फिर उनमें 0.5 मिली हेमोलिटिक सिस्टम मिलाया जाता है, हिलाया जाता है और 45-50 मिनट के लिए थर्मोस्टैट में रखा जाता है। प्रयोग का परिणाम नियंत्रण ट्यूबों में पूर्ण हेमोलिसिस की शुरुआत के बाद दर्ज किया गया है।
प्रतिक्रिया के परिणामों का मूल्यांकन प्लसस के साथ किया जाता है: हेमोलिसिस में पूर्ण देरी (दृढ़ता से सकारात्मक प्रतिक्रिया) ++++, महत्वपूर्ण (सकारात्मक प्रतिक्रिया) +++, आंशिक (कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रिया) ++, महत्वहीन (संदिग्ध प्रतिक्रिया) - ±, हेमोलिसिस में कोई देरी नहीं (नकारात्मक प्रतिक्रिया) -।
पर मात्रात्मक पद्धतिवासरमैन प्रतिक्रिया करते हुए, अनुभव आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ पतला सीरम की घटती मात्रा के साथ सेट किया गया है।
वासरमैन प्रतिक्रिया के मुख्य अनुभव के संचालन की योजना
सामग्री (मिलीलीटर में)। कुल मात्रा 1.25 मिली | ट्यूबों की संख्या |
||
परीक्षण सीरम निष्क्रिय है, पतला 1:5 एंटीजन I (ट्रेपोनेमल), पतला टिटर द्वारा पतला एंटीजन II (कार्डियोलिपिन), टिटर द्वारा पतला आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान पूरक, काम करने वाली खुराक के अनुसार पतला | |||
वासरमैन प्रतिक्रिया के नैदानिक महत्व को कम करना मुश्किल है। यह उपचार शुरू होने से पहले सभी रोगियों के लिए किया जाता है, लेकिन विशेष अर्थउसके पास है गुप्त उपदंश, हार आंतरिक अंगऔर तंत्रिका तंत्र।
Wasserman प्रतिक्रिया के परिणाम उपचार की गुणवत्ता की विशेषता है, जो एक निश्चित अवधि के भीतर इलाज किए गए रोगियों को अपंजीकृत करने का आधार देता है।
प्राथमिक उपदंश में, संक्रमण के क्षण से छठे सप्ताह के अंत में वासरमैन प्रतिक्रिया आमतौर पर सकारात्मक होती है; माध्यमिक ताजा उपदंश के साथ, यह लगभग 100% मामलों में सकारात्मक है, माध्यमिक आवर्तक के साथ - 98-100% में; तृतीयक सक्रिय - 85% में; तृतीयक छिपा हुआ - 60% मामलों में।
वासरमैन प्रतिक्रिया सभी गर्भवती महिलाओं, दैहिक, तंत्रिका, मानसिक और के रोगियों के लिए दो बार की जाती है चर्म रोग, साथ ही जनसंख्या के निर्धारित दल। साथ ही, प्रतिक्रिया के सकारात्मक और कमजोर सकारात्मक परिणामों का गंभीर रूप से इलाज किया जाना चाहिए, क्योंकि वे गर्भावस्था के अंत में और बच्चे के जन्म के बाद हाइपरथायरायडिज्म, मलेरिया, कुष्ठ रोग, क्षय के साथ हो सकते हैं। मैलिग्नैंट ट्यूमर, संक्रामक रोग, कोलेजनोज, आदि। इसलिए, की उपस्थिति में नैदानिक अभिव्यक्तियाँरोग, उन्हें पहले स्थान पर, बैक्टीरियोस्कोपी के डेटा के साथ, ध्यान में रखा जाना चाहिए।
साथ ही, ऐसे कारक हैं जो वासरमैन प्रतिक्रिया के परिणामों की वास्तविक प्रकृति को विकृत कर सकते हैं: खराब धोया प्रयोगशाला कांच के बने पदार्थ (टेस्ट ट्यूबों में एसिड और क्षार के निशान), अनुसंधान के लिए लिए गए रक्त का दीर्घकालिक भंडारण, वसा की खपत और परीक्षा से पहले रोगियों द्वारा शराब, मासिक धर्म, आदि।
सभी मामलों में, रोगी की एक व्यापक परीक्षा आयोजित करना वांछनीय है, जिसमें वासरमैन प्रतिक्रिया के अलावा, आरआईबीटी (122, 123, 124 देखें), आदि शामिल हैं।
122. सैक्स की प्रतिक्रिया - विटेब्स्की (साइटोकोलिक)
उपदंश का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है। यह एक अवक्षेप के निर्माण पर आधारित होता है जब रोगी के रक्त सीरम को प्रतिजन के साथ मिलाया जाता है।
प्रतिजन तैयार करने के लिए, कई गोजातीय हृदयों की मांसपेशियों को कण्डरा, प्रावरणी, वसा से साफ किया जाता है, एक मांस की चक्की में कीमा बनाया जाता है और 96% इथेनॉल की 5 गुना मात्रा के साथ 15 दिनों के लिए दैनिक 20 मिनट के झटकों के साथ निकाला जाता है। प्राप्त अर्क वैक्यूम के तहत एक चीनी मिट्टी के बरतन कप में पानी के स्नान पर वाष्पित हो जाता है। निष्कर्षण के लिए ली गई मांसपेशियों की मात्रा के 1/3 की मात्रा में गर्म 96% एथिल अल्कोहल अवशेषों (लिपोइड्स का चमकीला पीला द्रव्यमान) में मिलाया जाता है।
अर्क 3 दिनों के लिए कमरे के तापमान पर रखा जाता है, फ़िल्टर किया जाता है (में .) ठंडा पानी) और सकारात्मक और नकारात्मक सेरा के साथ अनुमापन के परिणामों के आधार पर, क्रिस्टलीय कोलेस्ट्रॉल का 0.3-0.6% समाधान जोड़ें। साइटोकोलिक एंटीजन को कमरे के तापमान पर सीलबंद ampoules या सीलबंद टेस्ट ट्यूब में स्टोर करें।
कार्यप्रणाली। आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के 2 मिलीलीटर में, साइटोकॉल एंटीजन का 1 मिलीलीटर जल्दी से डाला जाता है और कमरे के तापमान पर 15 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है जब तक कि गुच्छे दिखाई न दें। 0.2 मिली निष्क्रिय सीरम में 0.1 मिली एंटीजेनिक इमल्शन मिलाएं, 3 मिनट के लिए हिलाएं और 30 मिनट के लिए अकेला छोड़ दें, फिर 1 मिली आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल डालें।
आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल के 1.2 मिली और एंटीजेनिक इमल्शन के 0.1 मिली को एंटीजन के साथ कंट्रोल ट्यूब में मिलाया जाता है। नियंत्रण में कोई गुच्छे नहीं होना चाहिए। प्रतिक्रिया के परिणामों को नेत्रहीन या एक आवर्धक कांच के साथ ध्यान में रखा जाता है और प्लसस (++++, +++, ++) के साथ गिरे हुए गुच्छे की मात्रा के आधार पर संकेत दिया जाता है। एक नकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, कोई गुच्छे नहीं होते हैं, लेकिन ट्यूब की सामग्री थोड़ी ओपेलेसेंट हो सकती है।
1931 में, पी। सैक्स और ई। विटेब्स्की ने इस तकनीक के एक संशोधन का प्रस्ताव रखा, जिसमें दो चरणों में प्रतिजन को पतला करना शामिल है: आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान के 2 भागों को एंटीजन के 1 भाग में जोड़ा जाता है, 5 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर रखा जाता है। , और आइसोटोनिक समाधान के अन्य 9 भागों में सोडियम क्लोराइड मिलाया जाता है। प्रतिजन को 2% सोडियम क्लोराइड समाधान के साथ पतला करने की भी सिफारिश की जाती है, जो लेखकों के अनुसार, प्रतिक्रिया की संवेदनशीलता को बढ़ाता है। सीरम कमजोर पड़ने के साथ प्रतिक्रिया का एक मात्रात्मक संशोधन भी संभव है (1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, आदि)।
प्रतिक्रिया काफी संवेदनशील है, इसमें कम समय लगता है (लगभग 1 घंटा), और इसके परिणाम तुरंत पढ़े जाते हैं।
123. पेल ट्रेपोनिमा स्थिरीकरण प्रतिक्रिया (RIBT)
उपदंश के रोगियों के रक्त सीरम में प्रतिक्रिया की मदद से, एंटीबॉडी और पूरक का पता लगाया जाता है जो पेल ट्रेपोनिमा को स्थिर करते हैं।
प्राथमिक सिफलिस के साथ, आरआईबीटी मुख्य रूप से नकारात्मक है, माध्यमिक के साथ - 92-96% मामलों में सकारात्मक, तृतीयक के साथ - 92-100% में, तंत्रिका तंत्र के सिफलिस के साथ और जन्मजात - 86-89% मामलों में।
आरआईबीटी के सकारात्मक परिणाम सारकॉइड, एरिथेमेटोसिस, मधुमेह, घातक ट्यूमर में नोट किए गए थे। वायरल हेपेटाइटिस, यकृत का सिरोसिस, मलेरिया, कुष्ठ, संक्रामक मोनोन्यूक्लिओसिस, गर्म देशों के कुछ रोग (पिंट, यॉ, आदि)।
प्रतिजन पेल ट्रेपोनिमा का निलंबन है जो सिफलिस से संक्रमित एक खरगोश के अंडकोष से लिया जाता है, जो आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान (प्रति क्षेत्र में 50 व्यक्ति) में पेल ट्रेपोनिमा के निलंबन के 0.75-1 मिलीलीटर अंडकोष में पेश किया जाता है।
पशु के संक्रमण के 6-8 दिन बाद वृषण सामग्री लेनी चाहिए। प्रतिजन लेने से पहले, खरगोश को बहिःस्राव (हृदय पंचर या .) द्वारा मार दिया जाता है कैरोटिड धमनी) वृषण ऊतक को कुचल दिया जाता है और स्वस्थ खरगोश रक्त सीरम से भर दिया जाता है जो आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान से पतला होता है, -30 मिनट के लिए हिलाया जाता है, और फिर 10 मिनट (1000 आरपीएम) के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। सतह पर तैरनेवाला सूक्ष्म रूप से जांच की जाती है। दृष्टि के प्रत्येक क्षेत्र में कम से कम 10-15 पेल ट्रेपोनिमा होने चाहिए।
पूरक तैयार किया जा रहा है सामान्य तरीके सेगिनी सूअरों के खून से।
आरआईबीटी के लिए, आपको चाहिए: 0.2% जिलेटिन घोल का 1.2 मिली, 5% एल्ब्यूमिन घोल का 2.8 मिली, पेल ट्रेपोनिमा सस्पेंशन का 1.6 मिली; मध्यम पीएच - 7.2। इस मिश्रण में 0.15 मिलीलीटर पूरक (कॉकटेल) मिलाया जाता है। समानांतर में, दो नमूने रखे जाते हैं: सक्रिय (प्रयोग) और प्रतिक्रियाशील (नियंत्रण) पूरक के साथ।
अध्ययन किए गए सीरम को "1" चिह्न तक मेलेन्जर्स में एकत्र किया जाता है, और फिर कॉकटेल को "2" चिह्न तक एकत्र किया जाता है और उन्हें एक बाँझ रबर की अंगूठी के साथ बंद कर दिया जाता है।
उसी समय, स्पष्ट रूप से सकारात्मक और स्पष्ट रूप से नकारात्मक सीरा के साथ एक समान प्रतिक्रिया की जाती है।
Melangers को क्रमांकित किया जाता है और थर्मोस्टैट में 35 ° C के तापमान पर 18-20 घंटों के लिए रखा जाता है, जिसके बाद उन्हें थर्मोस्टेट से जोड़े (प्रयोग - नियंत्रण) में हटा दिया जाता है और सामग्री को उपयुक्त टेस्ट ट्यूब में डाल दिया जाता है। ग्लास स्लाइड पर 2 बूंदें लगाई जाती हैं: बाईं ओर - अनुभव, दाईं ओर - नियंत्रण, एक कवर स्लिप के साथ कवर किया जाता है और एक अंधेरे क्षेत्र में सूक्ष्मदर्शी किया जाता है।
सबसे पहले, नियंत्रण के परिणामों का अध्ययन किया जाता है: मोबाइल और स्थिर पेल ट्रेपोनिमा का प्रतिशत निर्धारित किया जाता है। गणना सूत्र: एक्स = (ए - बी) / ए * 100, जहां ए नियंत्रण में मोबाइल पेल ट्रेपोनिमा की संख्या है; बी - प्रयोग में मोबाइल पेल ट्रेपोनिमा की संख्या।
उदाहरण: (24 - 19) / 24 * 100 = 21%।
RIBT के परिणामों का अनुमान: 20% से नीचे - नकारात्मक। 21-30% - संदिग्ध, 31-50% - कमजोर सकारात्मक, 50% से अधिक - सकारात्मक।
एंटीजन, पूरक और सहायक, संकेतक या हेमोलिटिक प्रणाली - हेमोलिटिक सीरम और भेड़ एरिथ्रोसाइट्स।
यदि पहली प्रणाली में एक विशिष्ट एंटीजन + एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स बनता है, तो पूरक adsorbed (इस कॉम्प्लेक्स के साथ संयुक्त) होता है और दूसरी प्रणाली में हेमोलिसिस नहीं होता है।
प्रतिक्रिया की आवश्यकता है:
1. टेस्ट सीरम, जो रोगी की क्यूबिटल नस के पंचर द्वारा लिए गए रक्त से प्राप्त किया जाता है। रक्त के थक्के जमने के बाद, सीरम को एक अलग ट्यूब में डाला जाता है और पानी के स्नान में 56 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए निष्क्रिय कर दिया जाता है।
2. एंटीजन - मारे गए गोनोकोकी का निलंबन।
3. भेड़ एरिथ्रोसाइट्स बाँझ डिफिब्रिनेटेड रक्त से प्राप्त होते हैं। लवण के नए भागों के साथ उन्हें 3 बार सेंट्रीफ्यूज करके धोया जाता है। प्रतिक्रिया में एरिथ्रोसाइट्स के 3% निलंबन का उपयोग किया जाता है।
4. खरगोशों को राम एरिथ्रोसाइट्स से प्रतिरक्षित करके हेमोलिटिक सीरम पहले से तैयार किया जाता है। उपयोग करने से पहले सीरम का शीर्षक दिया जाता है।
5. पूरक - ताजा गिनी पिग सीरम। एक गिनी पिग के दिल से एक सिरिंज के साथ रक्त चूसा जाता है, थक्के के बाद, सीरम अलग हो जाता है। प्रयोग से पहले, पूरक की कार्यशील खुराक का शीर्षक दिया जाता है। ऐसा करने के लिए, पूरक 1:10 का मुख्य पतलापन लें और इसे 0.1 से 0.5 तक परखनली में डालें, जिसके बाद प्रत्येक परखनली में मात्रा को खारा के साथ 1.5 मिलीलीटर तक समायोजित किया जाता है।
उसी समय, एक हेमोलिटिक प्रणाली तैयार की जाती है - ट्रिपल टिटर में पतला, हेमोलिटिक सीरम + भेड़ एरिथ्रोसाइट्स का 3% निलंबन। दोनों सामग्री अलग-अलग मात्रा में हैं और 30 मिनट (मिश्रण का संवेदीकरण) के लिए थर्मोस्टैट में रखा जाता है, जिसके बाद मिश्रण को 1 मिलीलीटर में टेस्ट ट्यूब में जोड़ा जाता है और 30 मिनट के लिए थर्मोस्टेट में रखा जाता है। 2 टेस्ट ट्यूब नियंत्रण के रूप में काम करते हैं:
1. 1 मिलीलीटर हेमोलिटिक सिस्टम + 1.5 मिलीलीटर खारा;
2. 0.5 मिली सप्लीमेंट 1:10 + 0.5 मिली एरिथ्रोसाइट सस्पेंशन + 1.5 मिली सेलाइन।
पूरक अनुमापांक वह न्यूनतम राशि है जिस पर हेमोलिसिस अभी भी होता है। प्रतिक्रिया को स्थापित करने के लिए, पूरक की एक कार्यशील खुराक ली जाती है, अनुमापांक के विरुद्ध 20-25% की वृद्धि की जाती है, अर्थात, आमतौर पर पूरक की मात्रा जो हेमोलिसिस के साथ अंतिम परखनली में होती है। पूरक की खुराक में वृद्धि आवश्यक है क्योंकि प्रतिक्रिया में, प्रतिक्रिया के अन्य अवयवों (एंटीजन, सीरम) द्वारा पूरक गतिविधि को कुछ हद तक दबा दिया जा सकता है।
43) आरएसके वासरमैन
एंटीबॉडी का पता लगाने के साथ-साथ प्रभावशीलता का निर्धारण करने के लिए सिफलिस का निदान करने के लिए उपयोग किया जाता है विशिष्ट चिकित्सा. यह बोर्डे-गांगौ पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया के सिद्धांत पर आधारित है। वासरमैन प्रतिक्रिया में एक महत्वपूर्ण अंतर एंटीजन की गैर-विशिष्टता है: लिपोइड अर्क सामान्य अंगजानवरों
वासरमैन प्रतिक्रिया को स्थापित करने के लिए, रोगी के सीरम, डायग्नोस्टिक्स, क्रॉस-रिएक्टिंग एंटीजन नंबर 1, नंबर 2, पूरक, हेमोलिटिक सीरम, रैम एरिथ्रोसाइट्स होना आवश्यक है। खारा.
डायग्नोस्टिकम नंबर 1 - विशिष्ट, ट्रेपोनेमल।
डायग्नोस्टिकम नंबर 2 - गैर-विशिष्ट, कार्डियोलिपिन प्रतिजन, जो अत्यधिक शुद्ध गोजातीय हृदय के अर्क होते हैं जिनमें लिपोइड्स की एक निरंतर रासायनिक संरचना होती है। लिपिड्स, बाय रासायनिक संरचनाट्रेपोनिमा पैलिडम लिपोइड्स के करीब हैं, इसलिए, हालांकि वे विशिष्ट नहीं हैं, वे स्पाइरोकेट्स के खिलाफ एंटीबॉडी को ठीक करते हैं।
इन प्रतिजनों को केंद्रीय रूप से उत्पादित किया जाता है और लेबल पर इंगित अनुमापांक के अनुसार पतला प्रतिक्रिया में उपयोग किया जाता है।
साथ ही मुख्य प्रयोग के साथ, 2 नियंत्रण रखे गए हैं: स्पष्ट रूप से नकारात्मक और स्पष्ट रूप से सकारात्मक सीरा के साथ।
मुख्य अनुभव सेट करना
सबसे पहले, निष्क्रिय और पतला 1:5 टेस्ट सीरम को 4 टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है। फिर, एंटीजन (नंबर 1, नंबर 2) को 2 टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है, शारीरिक खारा 3 टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है। उसके बाद, सभी ट्यूबों में पूरक की एक कार्यशील खुराक जोड़ी जाती है। सामग्री को मिलाने के बाद, टेस्ट ट्यूब वाले रैक को थर्मोस्टेट में 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए रखा जाता है। थर्मोस्टैट में रखने के बाद, सभी टेस्ट ट्यूबों में एक हेमोलिटिक सिस्टम जोड़ा जाता है। ट्यूबों को फिर से थर्मोस्टैट में 2 घंटे के लिए रखा जाता है, फिर कमरे के तापमान पर छोड़ दिया जाता है। अगले दिन, परिणाम नोट किया जाता है। प्रतिक्रिया की तीव्रता की डिग्री का अनुमान है, चार प्लस (++++), तीन (+++), दो (++) और एक (+) - तीव्रता के आधार पर तरल के रंग और तल पर एरिथ्रोसाइट तलछट के आकार का। पूर्ण हेमोलिसिस (-) माइनस द्वारा इंगित किया जाता है। विभिन्न प्रतिजनों के परिणामों के बीच एक तीव्र विसंगति के साथ, प्रयोग रक्त के एक नए हिस्से के साथ दोहराया जाता है।
44) आरआईटी-आर। पेल ट्रेपोनिमा का स्थिरीकरण।
इस प्रतिक्रिया में प्रयोग किया जाता है नैदानिक उद्देश्य, और मान्यता के लिए झूठे सकारात्मक परिणाममानक सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं, विशेष रूप से अव्यक्त उपदंश के साथ।
आरआईबीटी इस तथ्य में निहित है कि सिफलिस और सक्रिय पूरक वाले रोगियों के सीरम में इमोबिलिज़िन की उपस्थिति में, पीला ट्रेपोनिमा अपनी गतिशीलता खो देता है।
RIBT को रोगाणुहीन बक्सों में रखा जाता है। परीक्षण सीरम, पूरक और प्रतिजन प्रतिक्रिया में भाग लेते हैं।
आरआईबीटी में, एंटीजन एक खरगोश के अंडकोष से पेल ट्रेपोनिमा का निलंबन है प्रारंभिक तिथियां(संक्रमण के 7-8 दिन बाद) सिफिलिटिक ऑर्काइटिस। एक विशेष निलंबन माध्यम कम से कम एक दिन के लिए पेल ट्रेपोनिमा की व्यवहार्यता को बरकरार रखता है। पूरक RIBT में प्रयोग किया जाता है गिनी सूअर. RIBT अवायवीय परिस्थितियों में आगे बढ़ता है। सामग्री के साथ टेस्ट ट्यूब को माइक्रोएरोस्टेट में रखा जाता है, जिसमें से वायुमंडलीय हवाऔर एक गैस मिश्रण इंजेक्ट किया जाता है (95 भाग नाइट्रोजन और 5 भाग कार्बन डाइआक्साइड) परखनलियों के साथ माइक्रोएनेरोस्टेट को थर्मोस्टेट (35°C) में 18-20 घंटे के लिए रखा जाता है।
प्रतिक्रिया के निर्माण के समानांतर में, नियंत्रण अध्ययनपिछले अनुभव से लिए गए सकारात्मक और नकारात्मक रक्त सीरम के साथ।
आरआईबीटी के परिणामों का मूल्यांकन थर्मोस्टेट से टेस्ट ट्यूबों को हटाने के बाद किया जाता है (यानी, 18-20 घंटे के अनुभव के बाद)। पाश्चर पिपेट के साथ, परखनली की सामग्री की एक बूंद को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है, जो एक कवर स्लिप से ढकी होती है और माइक्रोस्कोप के अंधेरे क्षेत्र में जांच की जाती है (उद्देश्य 40, ऐपिस 10)। 20% तक पेल ट्रेपोनिमा के स्थिरीकरण के साथ, प्रतिक्रिया को नकारात्मक माना जाता है, 21 से 30% तक - संदिग्ध, 31 से 50% तक कमजोर सकारात्मक, 51 से 100% तक - सकारात्मक। पेल ट्रेपोनिमा के स्थिरीकरण का प्रतिशत एक विशेष तालिका के अनुसार निर्धारित किया जाता है।
45) ओप्सन-फागोसाइटिक प्रतिक्रिया
तंत्र: एंटीबॉडी, प्रतिरक्षा सीरम और पूरक के अनुकूल प्रभावों के प्रभाव में माइक्रोबियल कोशिकाओं के फागोसाइटोसिस में वृद्धि।
प्रतिक्रिया घटक:
1) प्रतिजन - दैनिक माइक्रोबियल संस्कृति;
3) पूरक - ताजा गिनी पिग सीरम;
4) फागोसाइट्स - ल्यूकोसाइट सस्पेंशन।
Opsonins सामान्य और प्रतिरक्षा सीरा में पाए जाने वाले एंटीबॉडी हैं और फागोसाइटोसिस के लिए रोगाणुओं को तैयार करते हैं।
अभिक्रिया को विशेष परखनलियों में t=37° मिनट पर रखा जाता है। फिर, प्रत्येक ट्यूब से स्मीयर तैयार किए जाते हैं, 100 फागोसाइट्स गिने जाते हैं, और फैगोसाइटेड माइक्रोकंट्रोल की संख्या निर्धारित की जाती है।
ओप्सोनिक इंडेक्स = फागोसाइटिक इंडेक्स। सामान्य सीरम का सीरम/फागोसाइटिक सूचकांक
अध्ययन के तहत सीरम का ऑप्सोनिक इंडेक्स (>1 होना चाहिए) जितना अधिक होगा, और इसलिए यह उतना ही अधिक होगा! ब्रुसेलोसिस)।
इसका उपयोग ऑप्सोनिन को निर्धारित करने के लिए किया जाता है - एंटीबॉडी जो ल्यूकोसाइट्स की फागोसाइटिक गतिविधि को उत्तेजित करते हैं, अर्थात। ब्रुसेलोसिस जैसे संक्रमणों का सेरोडायग्नोसिस।
फागोसाइटोसिस की वृद्धि सक्रिय केंद्रों (पाव-टुकड़ा) के साथ बैक्टीरिया के निर्धारकों के साथ ऑप्सिन के लगाव के कारण होती है, और फिर, पीसी-टुकड़ों की मदद से, फागोसाइट्स के पीसी-रिसेप्टर्स के लिए होती है। सामान्य सीरम में थोड़ी मात्रा में ऑप्सोनिन होते हैं, जो पूरक की उपस्थिति में कार्य करते हैं। प्रतिरक्षा सीरम में अधिक ऑप्सोनिन होते हैं, और उनकी गतिविधि पूरक पर कम निर्भर होती है।
अवयव:
अध्ययन के तहत सीरम
सामान्य सीरम
दैनिक माइक्रोबियल संस्कृति (जैसे स्टेफिलोकोकल)
फागोसाइट्स - न्यूट्रोफिल का निलंबन
37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए ऊष्मायन। रोमनोवस्की-गिमेसा के अनुसार दागे गए प्रत्येक ट्यूब से स्मीयर तैयार किए जाते हैं, और सूक्ष्म जीवों की संख्या को माइक्रोस्कोप के तहत 100 या अधिक न्यूग्रोफाइल में गिना जाता है, यानी। फागोसाइटिक सूचकांक निर्धारित करें।
फागोसाइटिक इंडेक्स - एक न्यूट्रोफिल द्वारा अवशोषित रोगाणुओं की संख्या।
ऑप्सोनिक इंडेक्स फागोसाइटिक इंडेक्स ऑफ इम्यून (परीक्षण) सीरम / सामान्य सीरम का फागोसाइटिक इंडेक्स।
ऑप्सोनिक इंडेक्स जितना अधिक होगा (> 1 होना चाहिए), इम्युनिटी उतनी ही अधिक होगी।
opsono-phagocytic अनुक्रमणिका एक डिजिटल संकेतक है = phagocytes की संख्या x phagocytosis स्कोर (अंतर्ग्रहण किए गए रोगाणुओं की संख्या के आधार पर)। अधिकतम स्कोर -75 है।
46) एक्सोटॉक्सिन स्थापित करने के लिए चूहों पर आरएन
यह प्रतिक्रिया एक्सोटॉक्सिन को बेअसर करने के लिए एक विशिष्ट एंटीटॉक्सिक सीरम की क्षमता पर आधारित है।
प्रतिरक्षा सीरम एंटीबॉडी संवेदनशील कोशिकाओं और ऊतकों पर रोगाणुओं या उनके विषाक्त पदार्थों के हानिकारक प्रभाव को बेअसर करने में सक्षम हैं, जो एंटीबॉडी द्वारा माइक्रोबियल एंटीजन की नाकाबंदी के साथ जुड़ा हुआ है, अर्थात, उनका बेअसर होना।
जानवरों में या संवेदनशील परीक्षण वस्तुओं (सेल संस्कृति, भ्रूण) में एंटीजन-एंटीबॉडी मिश्रण पेश करके न्यूट्रलाइजेशन रिएक्शन (आरएन) किया जाता है। सूक्ष्मजीवों या उनके एंटीजन, जानवरों और परीक्षण वस्तुओं में विषाक्त पदार्थों के हानिकारक प्रभाव की अनुपस्थिति में, वे प्रतिरक्षा सीरम के बेअसर प्रभाव की बात करते हैं और इसलिए, एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स की बातचीत की विशिष्टता।
प्रतिक्रिया करने के लिए, परीक्षण सामग्री, जिसमें एक्सोटॉक्सिन की उपस्थिति अपेक्षित है, के साथ मिलाया जाता है एंटीटॉक्सिक सीरम, थर्मोस्टेट में रखा जाता है और जानवरों (गिनी सूअरों, चूहों) को प्रशासित किया जाता है। नियंत्रण जानवरों को परीक्षण सामग्री के छानने के साथ इंजेक्शन लगाया जाता है, सीरम के साथ इलाज नहीं किया जाता है। इस घटना में कि एंटीटॉक्सिक सीरम के साथ एक्सोटॉक्सिन का बेअसर होना होता है, प्रायोगिक समूह के जानवर जीवित रहेंगे। एक्सोटॉक्सिन की कार्रवाई के परिणामस्वरूप नियंत्रण जानवर मर जाएंगे।
एक्सोटॉक्सिन के बेअसर होने की प्रतिक्रिया तब होती है जब यह एंटीटॉक्सिक सीरम (एंटीबॉडी-एंटीटॉक्सिन) के साथ बातचीत करती है। एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स के गठन के परिणामस्वरूप, विष अपने विषाक्त गुणों को खो देता है।
टॉक्सिन्स, टॉक्सोइड्स या एंटीटॉक्सिन्स का पता लगाने और उनका अनुमापन करने के लिए न्यूट्रलाइजेशन रिएक्शन किया जाता है।
तरल को छानकर विष प्राप्त किया जाता है तरक्की का जरियाया परीक्षण सामग्री जहां टॉक्सिजेनिक बैक्टीरिया का प्रसार हुआ है। जब 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 30-45 दिनों के लिए फॉर्मेलिन के साथ संसाधित किया जाता है, तो विष एनाटॉक्सिन में बदल जाता है, जिसका उपयोग एंटीटॉक्सिक सीरम प्राप्त करने के लिए जानवरों को प्रतिरक्षित करने के लिए किया जाता है।
विवो में तटस्थकरण प्रतिक्रिया। विष के प्रकार को निर्धारित करने के लिए, इसे डायग्नोस्टिक एंटीटॉक्सिक सीरम के साथ मिलाया जाता है और इस मिश्रण को सफेद चूहों को दिया जाता है। जब विष को एंटीटॉक्सिक सीरम से बेअसर किया जाता है, तो चूहे नहीं मरते हैं।
न्यूट्रलाइजेशन रिएक्शन का उपयोग डिप्थीरिया (स्किक टेस्ट) और स्कार्लेट फीवर (डिक टेस्ट) वाले बच्चों में एंटीटॉक्सिक इम्युनिटी निर्धारित करने के लिए किया जाता है। ऐसा करने के लिए, संबंधित विष (1/40 डीएलएम) की एक निश्चित मात्रा को प्रकोष्ठ क्षेत्र में अंतःक्षिप्त रूप से इंजेक्ट किया जाता है। यदि शरीर में एंटीटॉक्सिन हैं, तो विष निष्प्रभावी हो जाएगा और प्रतिक्रिया नकारात्मक होगी। शरीर में एंटीटॉक्सिन की अनुपस्थिति में, ज्वलनशील उत्तरइंजेक्शन स्थल पर।
47) वायरस की पहचान करने के लिए चूहों पर आरएन (न्यूट्रलाइजेशन रिएक्शन) टिक - जनित इन्सेफेलाइटिस
टीबीई वायरस कई प्रयोगशाला और जंगली जानवरों के लिए रोगजनक है। नवजात और युवा सफेद चूहे सबसे संवेदनशील होते हैं। मस्तिष्क में संक्रमण के बाद, इंट्रापेरिटोनियल, इंट्रामस्क्युलर रूप से, इन जानवरों में एन्सेफलाइटिस विकसित होता है, जो जानवरों की मृत्यु में समाप्त होता है। खेत जानवरों में से, बकरियां टीबीई वायरस के लिए अतिसंवेदनशील होती हैं, भेड़ और गाय कम संवेदनशील होती हैं, और घोड़े कमजोर रूप से अतिसंवेदनशील होते हैं। टीबीई वायरस में एक साइटोपैथोजेनिक प्रभाव (सीपीई) होता है, जिससे पोर्सिन भ्रूणीय किडनी कोशिकाओं (एसपीईवी और आरपीई) की प्राथमिक और प्रतिरोपित संस्कृतियों में साइटोपैथिक परिवर्तन होता है और कई अन्य में स्पष्ट सीपीई के बिना गुणा होता है। कोशिका संवर्धन. संक्रमित चूहों के मस्तिष्क और संक्रमित संस्कृतियों के सांस्कृतिक तरल पदार्थ में, टीबीई वायरस और विशिष्ट वायरल एंटीजन जमा होते हैं: पूरक-फिक्सिंग, हेमग्ग्लूटीनेटिंग, अवक्षेपण, आदि।
टीबीई वायरस लंबे समय तककम तापमान पर संरक्षित ( इष्टतम मोड-60 डिग्री सी और नीचे), लियोफिलाइजेशन को अच्छी तरह से सहन करता है, सूखे राज्य में यह कई सालों तक रहता है, लेकिन कमरे के तापमान पर जल्दी से निष्क्रिय हो जाता है। उबालने से 2 मिनट बाद और गर्म दूध में 60 डिग्री पर मर जाता है। C 20 मिनट के बाद मर जाता है।
फॉर्मेलिन, फिनोल, अल्कोहल और अन्य कीटाणुनाशक, पराबैंगनी विकिरण का भी एक निष्क्रिय प्रभाव पड़ता है।
न्यूट्रलाइजेशन रिएक्शन वायरस के संक्रामक प्रभाव को बुझाने के लिए विशिष्ट प्रतिरक्षा सीरा की क्षमता पर आधारित है। इसे दो दिशाओं में लगाया जाता है:
1) पृथक वायरस टाइप करने के लिए;
2) स्वस्थ रोगियों के सीरा में एंटीबॉडी के अनुमापन के लिए।
प्रतिक्रिया की स्थापना:
1. प्रयोगशाला पशुओं पर। वायरस की उपस्थिति के लिए मानदंड
प्रयोगशाला जानवरों की मौत है। LD50 की गणना की जाती है
वायरल निलंबन का अधिकतम कमजोर पड़ना, जो
50% संक्रमित जानवरों की मौत का कारण बना। के लिये
टिक-जनित एन्सेफलाइटिस वायरस की पहचान की जाती है
सफेद चूहों का इंट्रासेरेब्रल संक्रमण।
2. ऊतक संस्कृतियों में। परिणामों के लिए लेखांकन किया जाता है
साइटोपैथिक एक्शन (सीपीई) द्वारा
रंग परिवर्तन के आधार पर रंग परीक्षण विधि द्वारा
रक्त-अवशोषण द्वारा।
3. मुर्गे के भ्रूण में। परिणामों के लिए लेखांकन के अनुसार किया जाता है
कोरियोअलैंटोइक झिल्ली के साथ पॉकमार्क की उपस्थिति।
48) आरटीजीए
इस प्रतिक्रिया का उपयोग वायरोलॉजिकल अभ्यास में किया जाता है:
वायरस के प्रकार (कांच पर) का निर्धारण करने के लिए;
रोगियों के सीरम (तैनात) में पता लगाने के लिए।
एक अनुमानित हेमाग्लगुटिनेशन अवरोध प्रतिक्रिया की स्थापना करते समय, ग्लास पर टाइप-विशिष्ट प्रतिरक्षा सीरा की 1 बूंद लगाई जाती है, फिर परीक्षण सामग्री की 1 बूंद और एरिथ्रोसाइट्स के 5% निलंबन की 1 बूंद जोड़ दी जाती है।
परिणामों के लिए लेखांकन: वायरस का प्रकार उस सीरम द्वारा निर्धारित किया जाता है जिसके साथ प्रतिक्रिया नहीं हुई थी, क्योंकि पृथक वायरस के लिए विशिष्ट प्रतिरक्षा सीरम इसकी रक्तगुल्म गतिविधि को दबा देता है, और एरिथ्रोसाइट्स एकत्र नहीं होते हैं।
49) आरआईएफ
एक लेबल के रूप में चमकदार फ्लोरोक्रोम रंजक (फ्लोरिसिन आइसोथियोसाइनेट, आदि) का उपयोग किया जाता है।
आरआईएफ के विभिन्न संशोधन हैं। संक्रामक रोगों के स्पष्ट निदान के लिए - परीक्षण सामग्री में रोगाणुओं या उनके प्रतिजनों का पता लगाने के लिए, कून के अनुसार आरआईएफ का उपयोग किया जाता है।
कून के अनुसार आरआईएफ के दो तरीके हैं: प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष।
प्रत्यक्ष आरआईएफ घटक:
1) अध्ययन के तहत सामग्री (नासोफरीनक्स, आदि द्वारा अलग किया गया मल त्याग);
2) वांछित प्रतिजन के लिए एटी-ला युक्त विशिष्ट प्रतिरक्षा सीरम लेबल;
3) आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान।
परीक्षण सामग्री से एक स्मीयर को लेबल एंटीसेरम से उपचारित किया जाता है।
एक एजी-एटी प्रतिक्रिया होती है। उस क्षेत्र में जहां एजी-एटी परिसरों को स्थानीयकृत किया जाता है, ल्यूमिनसेंट सूक्ष्म परीक्षा से प्रतिदीप्ति - ल्यूमिनेसिसेंस का पता चलता है।
अप्रत्यक्ष आरआईएफ घटक:
1) अध्ययन के तहत सामग्री;
2) विशिष्ट एंटीसेरम;
3) फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किए गए एंटीग्लोबुलिन सीरम (इम्युनोग्लोबुलिन के खिलाफ एटी-ला);
4) आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल।
परीक्षण सामग्री से एक स्मीयर को पहले प्रतिरक्षा सीरम के साथ वांछित एंटीजन के साथ इलाज किया जाता है, और फिर लेबल वाले एंटीग्लोबुलिन सीरम के साथ।
ल्यूमिनस एजी-एटी कॉम्प्लेक्स - लेबल एटी एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप का उपयोग करके पता लगाया जाता है।
अप्रत्यक्ष विधि का लाभ यह है कि फ्लोरोसेंट विशिष्ट सीरा की एक विस्तृत श्रृंखला तैयार करने की कोई आवश्यकता नहीं है, और केवल एक फ्लोरोसेंट एंटीग्लोबुलिन सीरम का उपयोग किया जाता है।
जब पूरक (गिनी पिग सीरम) को अतिरिक्त रूप से पेश किया जाता है, तो अप्रत्यक्ष आरआईएफ की एक 4-घटक किस्म भी अलग हो जाती है। एक सकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, एक एजी-एटी कॉम्प्लेक्स बनता है - लेबल - एटी-पूरक।
प्रतिक्रिया को संदर्भित करता है सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएंलेबल किए गए एंटीजन या एंटीबॉडी शामिल हैं।
यह प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष तरीकों से किया जाता है।
पर सीधा तरीकारोगी से सामग्री में एंटीजन का पता लगाएं। एक नैदानिक फ्लोरोसेंट सीरम का उपयोग किया जाता है, जिसमें प्रतिरक्षा सीरा से पृथक इम्युनोग्लोबुलिन होता है और फ्लोरोक्रोम के साथ लेबल किया जाता है।
विशिष्ट प्रतिजन चमकीले हरे ल्यूमिनसेंट समूह के रूप में पाया जाता है, और तैयारी की पृष्ठभूमि नारंगी-लाल हो जाती है।
प्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया के घटक:
1) अध्ययन के तहत सामग्री;
2) विशिष्ट ल्यूमिनसेंट सीरम;
3) ल्यूमिनसेंट माइक्रोस्कोप।
इन्फ्लूएंजा का निदान करते समय, पैरेन्फ्लुएंजा के रोगजनकों से भेदभाव किया जाता है और एडेनोवायरस संक्रमण. नासॉफिरिन्जियल स्वैब का इलाज फ्लोरोसेंट इन्फ्लूएंजा सीरम या इन्फ्लूएंजा इम्युनोग्लोबुलिन के साथ किया जाता है।
हरे रंग की चमक के रूप में "+" परिणाम 3 घंटे के बाद प्राप्त होता है।
अप्रत्यक्ष विधि में, विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है और उनका शीर्षक दिया जाता है। सीरम अनुमापांक इसकी अधिकतम तनुता है, जिस पर प्रतिदीप्ति "+ +" पर नोट की जाती है।
अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया के घटक
एक्सप्रेस डायग्नोस्टिक्स में एंटीजन की खोज करने के लिए:
1) परीक्षण सामग्री (एंटीजन);
2) विशिष्ट सीरम;
3) एंटीग्लोबुलिन ल्यूमिनसेंट सीरम
4) ल्यूमिनसेंट माइक्रोस्कोप।
/ चरण विशिष्ट
सीरम एंटीबॉडी एंटीजन को सोख लेते हैं।
// गैर-विशिष्ट चरण
फ्लोरोक्रोम-लेबल वाले एंटीग्लोबुलिन सीरम का उपयोग किया जाता है। एक एंटीजन + एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स (I) + एंटीग्लोबुलिन सीरम (II) बनता है, जो चमकता है।
बोर्डे - जंगगू प्रतिक्रिया
बोर्डे झांगु प्रतिक्रिया (पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया, आरएसके) - प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रिया, मुक्त पूरक को ठीक करने के लिए "एंटीजन-एंटीबॉडी" परिसर की संपत्ति के आधार पर। सीएससी दो चरणों में आगे बढ़ता है: 1) एंटीजन पर एंटीबॉडी का सोखना; 2) हेमोलिटिक सिस्टम (हेमोलिसिस) की उपस्थिति में प्रतिक्रिया की अभिव्यक्ति। सीएससी स्थापित करने के लिए, अध्ययन की गई वस्तुओं (एंटीबॉडी और एंटीजन) को ऐसी स्थितियों में रखा जाता है जो पूरक की उपस्थिति में उनकी बातचीत सुनिश्चित करती हैं; फिर एक "संकेतक" - हेमोलिटिक प्रणाली - को विश्लेषण की गई प्रतिरक्षा प्रणाली में जोड़ा जाता है। यदि पूरक प्रतिरक्षा प्रणाली द्वारा तय किया गया था, तो हेमोलिसिस नहीं होता है (सकारात्मक आरएसके; अंजीर।, ए); यदि प्रतिरक्षा प्रणाली ने पूरक को ठीक नहीं किया और इसके घटक एक दूसरे के अनुरूप नहीं हैं, तो हेमोलिसिस होता है (नकारात्मक सीएफआर; अंजीर।, बी)। प्रतिक्रिया सामग्री: 1) 30 मिनट के लिए गर्म करके निष्क्रिय परीक्षण सीरम। टी ° 56 ° पर; 2) एंटीजन (बैक्टीरिया का निलंबन, अंगों और ऊतकों के अर्क, वायरस); 3) पूरक (ताजा गिनी पिग सीरम); 4) हेमोलिटिक सिस्टम (संवेदी भेड़ एरिथ्रोसाइट्स को हेमोलिटिक सीरम के साथ 30 मिनट के लिए टी ° 37 डिग्री पर ऊष्मायन किया जाता है)। सामग्री को पतला करने के लिए, एक आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड समाधान का उपयोग किया जाता है। आरएससी का पहला चरण 60 मिनट का होता है। t° 37° या 18-20 घंटे पर। टी ° 4-6 ° (अधिक संवेदनशील आरएसके) पर, दूसरा चरण - 60 मिनट। टी° 37° पर।
नैदानिक अभ्यास और फोरेंसिक चिकित्सा में, आरएससी के विभिन्न संशोधनों का उपयोग किया जाता है - गुणात्मक और मात्रात्मक। वासरमैन प्रतिक्रिया भी देखें, सीरोलॉजिकल अध्ययन.
बोर्डे झांगु प्रतिक्रिया - मुक्त पूरक को ठीक करने के लिए एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स की संपत्ति के आधार पर एक प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रिया। सीएससी 2 चरणों में आगे बढ़ता है: 1) एंटीजन पर एंटीबॉडी का सोखना, 2) प्रतिक्रिया की अभिव्यक्ति (बैक्टीरियोलिसिस या हेमोलिसिस), जिसके लिए पूरक की उपस्थिति की आवश्यकता होती है। पूरक की उपस्थिति पर बैक्टीरियोलाइटिक प्रतिक्रियाओं की निर्भरता बोर्डेट-जंगो प्रतिक्रिया में एंटीजन के साथ एंटीबॉडी की बातचीत की पहचान करना संभव बनाती है। इस प्रतिक्रिया में एंटीबॉडी के अनुपालन का एक संकेतक संबंधित प्रतिरक्षा प्रणाली द्वारा पूरक निर्धारण है, जिसे प्रतिक्रिया मिश्रण में एक "संकेतक" हेमोलिटिक प्रणाली जोड़कर पता लगाया जाता है।
बोर्डे झांग प्रतिक्रिया दो चरणों में की जाती है: पहला, अध्ययन किए गए एंटीजन और एंटीबॉडी को ऐसी स्थितियों में रखा जाता है जो पूरक की उपस्थिति में उनकी बातचीत सुनिश्चित करते हैं, और सोखना पूरा होने के बाद, हेमोलिटिक सिस्टम (हेमोलिसिन + एरिथ्रोसाइट्स) को जोड़ा जाता है। प्रतिरक्षा प्रणाली का विश्लेषण किया। जब एंटीजन और एंटीबॉडी मिलते हैं, तो वे परस्पर क्रिया करते हैं और प्रतिक्रियात्मक मिश्रण में मौजूद पूरक प्रतिरक्षा प्रणाली द्वारा तय किया जाता है। इस मामले में, जब संकेतक प्रणाली को जोड़ा जाता है, तो पूरक (सकारात्मक प्रतिक्रिया) की कमी के कारण हेमोलिसिस नहीं होता है। यदि विश्लेषण किए गए एंटीबॉडी को एंटीजन पर अधिशोषित नहीं किया जाता है, तो प्रतिक्रियाशील मिश्रण में पूरक मुक्त रहता है, और जब एक हेमोलिटिक सिस्टम जोड़ा जाता है, तो हेमोलिसिस होता है (नकारात्मक प्रतिक्रिया)।
बोर्डे और झांग द्वारा विकसित विधि का सिद्धांत सीरोलॉजिकल विश्लेषणनैदानिक अभ्यास और शोध कार्य में प्रयुक्त प्रतिक्रिया के कई संशोधनों का आधार बनाया।
पारंपरिक आरएसके, जिसमें 100% एरिथ्रोसाइट लसीका दर्ज किया गया है, एक प्रारंभिक पूरक अनुमापन की आवश्यकता है; उत्तरार्द्ध को एक हेमोलिटिक प्रतिक्रिया के लिए आवश्यक खुराक से अधिक नहीं पर प्रतिरक्षा प्रणाली में जोड़ा जाता है। प्रतिक्रिया निर्माण योजनाएँ इसके उद्देश्य से निर्धारित होती हैं। प्रयोग में, एंटीजन की विभिन्न खुराकों को सीरम और पूरक की निरंतर सामग्री पर परीक्षण किया जा सकता है, एंटीजन और पूरक की निरंतर खुराक पर सीरम के विभिन्न कमजोर पड़ने आदि। प्रतिक्रिया सामग्री हैं: 1) परीक्षण सीरम 30 मिनट के लिए गरम किया जाता है . इसमें मौजूद पूरक को निष्क्रिय करने के लिए 56 ° पर; 2) एंटीजन (जो बैक्टीरिया के निलंबन के रूप में उपयोग किए जाते हैं, उनसे निकाले गए प्रोटीन, पॉलीसेकेराइड, आदि), पौधे और पशु कोशिकाओं के अर्क, वायरस, आदि, 3) पूरक - गिनी सूअरों का ताजा सीरम, 4) हेमोलिटिक सिस्टम ( संवेदनशील भेड़ एरिथ्रोसाइट्स) - 30 मिनट के लिए हेमोलिटिक सीरम के संपर्क में एरिथ्रोसाइट्स का 5% निलंबन। टी° 37° पर।
सामग्री को पतला करने के लिए, शारीरिक NaCl समाधान. अलग-अलग अवयवों की प्रतिपूरकता का परीक्षण नियंत्रण नमूनों में किया जाता है। प्रतिक्रिया का पहला चरण (एंटीबॉडी का सोखना) 60 मिनट के लिए t° 37° पर किया जाता है। या 4-6 ° पर 18-20 घंटे के लिए। (ठंड में आरएसके)। बाद के मामले में, पूरक का अधिक पूर्ण निर्धारण होता है, जिससे विधि की संवेदनशीलता बढ़ जाती है। दूसरे चरण में, प्रतिक्रिया मिश्रण को t° 37° पर रखा जाता है। परिणाम नियंत्रण नमूनों में 100% हेमोलिसिस के समय दर्ज किया गया है।
नैदानिक अभ्यास में, पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया के सक्रिय और "अप्रत्यक्ष" तरीकों का उपयोग किया जाता है, जो बोर्डेट झांगु प्रतिक्रिया के संशोधन हैं। इनमें से पहले में, परीक्षण सीरम में पूरक सामग्री में परिवर्तन प्रतिक्रिया के संकेतक के रूप में कार्य करता है। उत्तरार्द्ध इस तथ्य पर आधारित हैं कि कुछ बीमारियों में, सीरा में पूरक-फिक्सिंग एंटीबॉडी नहीं होते हैं, लेकिन पूरक-फिक्सिंग गतिविधि के साथ सीरा के साथ प्रतिक्रियाओं को रोकने में सक्षम होते हैं।
सबसे बड़ी संवेदनशीलता और सटीकता मात्रात्मक आरएससी में निहित है, जिसमें आंशिक लसीका के क्षेत्र में हेमोलिसिस दर्ज किया जाता है। Bordet-Jangou प्रतिक्रिया के इस संशोधन की संवेदनशीलता इस तथ्य के कारण है कि in मध्य क्षेत्र lysis (20-80%), lysed एरिथ्रोसाइट्स की संख्या के पूरक की मात्रा का अनुपात रैखिक है। यह प्रतिक्रिया पर आधारित है विशेष विधिपूरक अनुमापन, जिसकी मात्रा 50% इकाइयों (CH50) में व्यक्त की जाती है और आंशिक लसीका के क्षेत्र में हेमोलिसिस के पाठ्यक्रम का प्रतिनिधित्व करते हुए, क्रोग समीकरण के आधार पर गणना की जाती है।
हेमोलिसिस की डिग्री एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर या फोटोइलेक्ट्रिक वर्णमापी का उपयोग करके निर्धारित की जाती है।
बदले में मात्रात्मक आरएससी में कई संशोधन हैं। विशेष रूप से, माइक्रोमेथोड सामग्री की कम खपत के साथ निर्धारण की अधिक सटीकता प्रदान करता है।
काली खांसी के साथ, परेशान करने वाले बोर्डेट-झांगु स्टिक और इसके विषाक्त पदार्थ हैं, जो लंबे समय तक श्लेष्म झिल्ली पर तंत्रिका रिसेप्टर्स की लगातार जलन पैदा करते हैं। श्वसन तंत्र, जो केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (श्वसन और खांसी केंद्रों में) में उत्तेजना के एक कंजेस्टिव फोकस के निर्माण की ओर जाता है, जो बच्चों में सांस लेने की प्रकृति को प्रभावित करता है।
I. A. Arshavsky, V. D. Soboleva (1948) के अनुसार, in स्पस्मोडिक अवधिसाँस लेना की ऊंचाई पर, श्वास (श्वसन एपनिया) आयोजित की जाती है। इस समय श्वसन की मांसपेशियां टॉनिक ऐंठन की स्थिति में आ जाती हैं, जो विशेष रूप से डायाफ्राम में स्पष्ट होती है। इस समय उत्तरार्द्ध व्यावहारिक रूप से श्वास के कार्य में भाग नहीं लेता है।
श्वसन आक्षेप की अवधि - 3 - 45 s,जिसकी पृष्ठभूमि के खिलाफ कॉस्टल तंत्र द्वारा किए गए छोटे बल के छोटे श्वसन झटके होते हैं। वे तब तक जारी रहते हैं जब तक बच्चा ली गई सारी हवा को बाहर नहीं निकाल देता। इसके बाद जोर से शोर करने वाली सांस आती है, साथ में एक सीटी (आश्चर्य) भी आती है। और यह सब हमले के दौरान कई बार दोहराया जाता है। I. A. Arshavsky, V. D. Soboleva (1948) का मानना है कि ट्रुब घटना श्वसन आक्षेप का आधार है। ट्रुब (1847), एक फैराडिक करंट के साथ केंद्रीय खंड को परेशान करता है वेगस तंत्रिकाप्रेरणा के चरण में सांस लेने की समाप्ति देखी गई।
काली खांसीबढ़ती चिड़चिड़ापन के साथ, श्वसन गिरफ्तारी एक या दूसरे चरण (समाप्ति या प्रेरणा) में हो सकती है, खासकर बच्चों में जीवन के पहले महीनों के दौरान।
केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में उत्तेजना का एक कंजेस्टिव फोकस उखटॉम्स्की के अनुसार एक प्रमुख के सभी लक्षणों को प्राप्त करता है: इस फोकस की उत्तेजना बढ़ जाती है, जिसके परिणामस्वरूप यह केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में प्रवेश करने वाले सभी परेशानियों और आवेगों को आकर्षित और सारांशित करता है। तंत्रिका प्रणाली; प्रमुख फोकस से उत्तेजना पड़ोसी केंद्रों तक जाती है - संवहनी (दबाव बढ़ जाता है), मांसपेशियों (चेहरे और अंगों की मांसपेशियों में ऐंठन देखी जाती है), उल्टी (हमले के अंत में उल्टी दिखाई देती है); फोकस लगातार बना रहता है, लंबे समय तक रहता है और एक ट्रेस प्रतिक्रिया छोड़ देता है।
यह जीवन में अच्छी तरह से पुष्टि की गई है। अक्सर, जिस बच्चे को काली खांसी होती है, वह 2-6 महीने में विकसित हो जाता है पैरॉक्सिस्मल खांसीश्वसन पथ के अन्य रोगों के साथ (फ्लू, ऊपरी श्वसन पथ के वायरल कैटरर्स, निमोनिया, आदि)।
"मार्गदर्शक हवाई संक्रमण”, आई.के.मुसाबेव
