हेल्मिंथोलॉजिकल तरीके। प्रोटोजोआ के अध्ययन की बुनियादी विधियाँ

प्रोटोजोआ को 4 वर्गों में बांटा गया है:

जब संकेंद्रित किया जाता है, तो सूक्ष्मजीव ग्रहण कर लेता है गोल आकारऔर एक सुरक्षा कवच से ढका हुआ है। सिस्ट के रूप में प्रोटोजोआ के प्रति संवेदनशीलता कम हो जाती है प्रतिकूल कारकपर्यावरण।

निम्नलिखित शोध का विषय हो सकता है:

टिप्पणी:निदान के कई प्रकार हैं; हम उन प्रकारों पर विचार करेंगे जो नैदानिक ​​प्रयोगशाला अभ्यास में सबसे आम हैं।

निजी प्रकार के निदान

प्रत्येक विशिष्ट मामले में, प्रयोगशाला सहायक को एक विशिष्ट रोगज़नक़ खोजने का काम सौंपा जाता है; कभी-कभी मुख्य रोगज़नक़ के साथ अन्य की भी खोज की जाती है।

इस सूक्ष्मजीव की 6 प्रजातियाँ हैं जो मानव आंत में रहने में सक्षम हैं। नैदानिक ​​महत्वकेवल पेचिश अमीबा में, जो वानस्पतिक रूप में और सिस्ट के रूप में होता है।

इसके अतिरिक्त, प्रतिरक्षाविज्ञानी तरीकों का उपयोग किया जाता है:

• अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस;
• अप्रत्यक्ष एग्लूटीनेशन (आईएनए);
• रेडियल इम्युनोडिफ्यूजन।

टिप्पणी: सीरोलॉजिकल तरीकेजानकारीहीन हैं और केवल संदिग्ध मामलों में मुख्य के अतिरिक्त उपयोग किए जाते हैं।

सिलिअटेड (सिलियेट्स) का निदान

इस जीनस के सूक्ष्मजीवों का रोगजनक रूप बैलेंटिडियम है। यह एक सूक्ष्म जीव है जो बैलेन्टिडायसिस का कारण बनता है, एक बीमारी जिसमें बड़ी आंत की अल्सरेटिव प्रक्रिया होती है। रोगज़नक़ का पता देशी स्मीयर में वानस्पतिक रूप और सिस्ट के रूप में लगाया जाता है। स्मीयर के लिए सामग्री (मल और बलगम) को सिग्मायोडोस्कोपी परीक्षा के दौरान लिया जाता है और विशेष मीडिया पर बोया जाता है।

फ्लैगेलेट्स का निदान (लीशमैनिया, जियार्डिया, ट्रिपैनोसोम्स, ट्राइकोमोनास)

लीशमैनिया, ट्रिपैनोसोम्स, लैम्ब्लिया और ट्राइकोमोनास इंसानों के लिए खतरनाक हैं।

लीशमैनिया– सूक्ष्म जीव, लीशमैनियासिस का कारण, रक्त स्मीयरों, सामग्रियों में जांच की जाती है अस्थि मज्जा, त्वचा से खरोंचें घुसपैठ करती हैं। कुछ मामलों में, लीशमैनिया का निदान करते समय, पोषक तत्व मीडिया पर संस्कृति का उपयोग किया जाता है।

ट्रिपैनोसोम्स– रोगज़नक़ नींद की बीमारी(अमेरिकी/अफ्रीकी ट्रिपैनोसोमियासिस, या चगास रोग)।

अफ़्रीकी संस्करण को परिभाषित किया गया है प्रारम्भिक कालशोध के दौरान परिधीय रक्त. जैसे-जैसे बीमारी बढ़ती है, पैथोलॉजिकल रोगाणु लिम्फ नोड पंचर की सामग्री में पाए जाते हैं, और उन्नत चरणों में - मस्तिष्कमेरु द्रव में।

चगास रोग का संदेह होने पर ट्रिपैनोसोम का निदान करने के लिए, जांच की जा रही सामग्री की जांच कम आवर्धन पर माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है। इस मामले में, धब्बा और मोटी बूंद पूर्व-दागदार होती है।

ट्रायकॉमोनास(आंतों, मौखिक) का पता प्रभावित श्लेष्म झिल्ली से ली गई सामग्री की माइक्रोस्कोपी द्वारा लगाया जाता है।

स्पोरोज़ोअन्स की पहचान (मलेरिया प्लास्मोडियम, कोक्सीडोसिस का प्रेरक एजेंट, आदि)

मनुष्यों के लिए सबसे आम और खतरनाक प्रजाति मलेरिया प्लास्मोडियम है, जिसमें 4 मुख्य प्रकार के रोगज़नक़ होते हैं: रोगज़नक़ तृतीयक मलेरिया, चार दिवसीय मलेरिया, उष्णकटिबंधीय मलेरियाऔर मलेरिया अंडाकार.

एनोफ़ेलीज़ मच्छरों में प्लाज़मोडियम (स्पोरोगोनी) का यौन विकास होता है। अलैंगिक (ऊतक और एरिथ्रोसाइट सिज़ोगोनी) - मानव यकृत ऊतक और एरिथ्रोसाइट्स में। ये सुविधाएं जीवन चक्रमलेरिया प्लास्मोडियम का निदान करते समय इसे ध्यान में रखा जाना चाहिए।

इस प्रकार, एक नए बीमार रोगी के रक्त में, स्पोरोगनी चक्र की रोगाणु कोशिकाओं का पता लगाया जा सकता है। लेकिन मलेरिया के हमलों के चरम पर, रक्त में शिज़ोन्ट बड़ी संख्या में दिखाई देते हैं।

इसके अलावा, में विभिन्न चरण मलेरिया बुखारके जैसा लगना विभिन्न आकारप्लाज्मोडियम:

• ठंड की अवधि के दौरान, रक्त मेरोज़ोइट्स से भर जाता है, एक प्रकार का शिज़ोन्ट;
• ऊंचे तापमान पर, रिंग के आकार के ट्रोफोज़ोइट्स एरिथ्रोसाइट्स में जमा हो जाते हैं;
• तापमान में कमी अमीबा जैसे ट्रोफोज़ोइट्स की प्रबलता की विशेषता है;
• पीरियड्स के दौरान सामान्य स्थितिरक्त में सिज़ोन्ट्स के वयस्क रूप होते हैं।

मलेरिया के प्रेरक एजेंट (मलेरिया प्लास्मोडियम) का अध्ययन एक स्मीयर और एक मोटी बूंद में किया जाता है।

टिप्पणी:रक्त के धब्बों और मोटी बूंदों की जांच से मलेरिया का निदान करना कभी-कभी गलत होता है। कुछ मामलों में रक्त प्लेटलेट्स को गलती से मलेरिया रोगज़नक़ के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है। इसके अलावा कभी-कभी ल्यूकोसाइट्स और अन्य कोशिकाओं के टुकड़े प्लास्मोडियम का अनुकरण करते हैं।

प्रोटोजोआ के अध्ययन की बुनियादी विधियाँ

आइए प्रोटोजोआ की उपस्थिति के लिए सबसे आम शोध विधियों पर संक्षेप में नज़र डालें।

देशी स्मीयर और लुगोल के घोल से सना हुआ स्मीयर (मल में) का उपयोग करके प्रोटोजोआ का निदान

यह दवा आइसोटोनिक घोल में मल के इमल्शन से तैयार की जाती है। सोडियम क्लोरीन और लुगोल के घोल की दो बूंदें एक कांच की स्लाइड पर डाली जाती हैं। परीक्षण सामग्री को लकड़ी की छड़ी के साथ दोनों रचनाओं में जोड़ा जाता है और कांच से ढकने के बाद, विभिन्न माइक्रोस्कोप रिज़ॉल्यूशन पर देखा जाता है।

पाए जाने वाले प्रोटोजोआ को कुछ विशेषताओं के आधार पर दर्ज किया जाता है। सटीकता के लिए, एक ही सामग्री से 2-3 तैयारी तैयार करें। संदिग्ध मामलों में, विश्लेषण 2-3 सप्ताह में कई बार दोहराया जाता है।

विधि वनस्पति और सिस्टिक रूपों का पता लगा सकती है:

• लैंबलिया;
• बैलेंटिडियम;
• पेचिश अमीबा.

रोगजनक रूपों के साथ-साथ गैर-रोगजनक प्रोटोजोआ की भी पहचान की जाती है। भी स्वस्थ वाहकल्यूमिनल और सिस्टिक रूप हैं।

महत्वपूर्ण:अशुद्धियों और त्रुटियों से बचने के लिए अनुसंधान बार-बार किया जाना चाहिए।

देशी और दागदार स्मीयर विधि का उपयोग करके प्रोटोजोआ के निदान के परिणाम में रोगज़नक़ (ल्यूमिनल, सिस्ट, ऊतक) के रूप का विवरण होना चाहिए।

अनुसंधान आवश्यकताएँ:

• विश्लेषण के लिए ली गई सामग्री (तरल मल) की जांच शौच के 30 मिनट बाद नहीं की जाती है;
• औपचारिक मल का निदान शौच के 2 घंटे के भीतर किया जाना चाहिए;
• सामग्री में अशुद्धियाँ नहीं होनी चाहिए ( कीटाणुनाशक, पानी, मूत्र);
• सामग्री के साथ काम करने के लिए, केवल लकड़ी की छड़ियों का उपयोग करें; बलगम के फिसलने के कारण कांच वाली छड़ें उपयुक्त नहीं हैं;
• उपयोग के तुरंत बाद लकड़ियों को जला देना चाहिए।

प्रोटोजोआ के निदान के लिए संरक्षण विधि (मल परीक्षण)।

एक परिरक्षक के साथ प्रोटोजोआ को ठीक करके अध्ययन किया जाता है। इस पद्धति और पिछली पद्धति के बीच अंतर यह है कि परिरक्षक आपको दवा को लंबे समय तक संरक्षित रखने की अनुमति देते हैं।

प्रयुक्त परिरक्षक:

• बैरो. इसमें संरक्षक तत्व शामिल हैं: 0.7 मिली सोडियम क्लोराइड, 5 मिली फॉर्मेलिन, 12.5 मिली 96% अल्कोहल, 2 ग्राम फिनोल और 100 मिली आसुत जल। रंग संरचना: थिओनिन (अज़ुरा) का 0.01% घोल।
• सफ़ार्लिव का समाधान। सामग्री: 1.65 ग्राम जिंक सल्फेट, 10 मिली फॉर्मेलिन, 2.5 ग्राम क्रिस्टलीय फिनोल, 5 मिली एसीटिक अम्ल, 0.2 ग्राम मेथिलीन ब्लू, 100 मिली पानी। इस परिरक्षक का उपयोग उन मामलों में किया जाता है जहां सामग्री को एक महीने से अधिक समय तक संग्रहीत किया जाना चाहिए।

खाली बोतलों को एक परिरक्षक से भर दिया जाता है, सामग्री को 3:1 के अनुपात में उनमें स्थानांतरित किया जाता है, फिर यदि आवश्यक हो तो डाई मिलाया जाता है। 2-3 दवाओं का अध्ययन करके परिणामों का आकलन किया जाता है।

फॉर्मेलिन-ईथर संवर्धन विधि (मल में प्रोटोजोआ की उपस्थिति का विश्लेषण)

यह निदान पद्धति आपको प्रोटोजोआ सिस्ट को अलग करने और केंद्रित करने की अनुमति देती है। विश्लेषण के लिए निम्नलिखित सामग्रियों की आवश्यकता है: फॉर्मेल्डिहाइड (10 मिली), 0.85 ग्राम आइसोटोनिक घोल, आसुत जल, सल्फ्यूरिक ईथर, लुगोल का समाधान।

सूचीबद्ध तरल पदार्थों के साथ बायोमटेरियल का मिश्रण मिश्रित और सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। टेस्ट ट्यूब के तल पर प्राप्त तलछट को लुगोल के घोल से रंगा जाता है और सिस्ट और वनस्पति रूपों की उपस्थिति के लिए जांच की जाती है।

लीशमैनिया (अस्थि मज्जा स्मीयर) का पता लगाने की विधि

लीशमैनियासिस का निदान करने के लिए, निम्नलिखित अभिकर्मकों का उपयोग किया जाता है: निकिफोरोव का मिश्रण (सल्फ्यूरिक ईथर और इथेनॉल), फॉस्फेट बफर, रोमानोव्स्की के अनुसार अज़ूर-एओसिन।

अस्थि मज्जा पदार्थ को बहुत सावधानी से कांच की स्लाइड पर रखा जाता है विशेष प्रशिक्षण. विसर्जन प्रणाली वाले माइक्रोस्कोप का उपयोग किया जाता है।

में तीव्र अवधिबिन्दुक में रोगों का पता लगाया जाता है एक बड़ी संख्या कीलीशमैनिया.

टिप्पणी:कभी-कभी रक्त कोशिकासंसाधित लीशमैनिया जैसा हो सकता है, इसलिए प्रयोगशाला तकनीशियन के लिए सावधान रहना और स्वतंत्र अनुसंधान करने के लिए पर्याप्त अनुभव होना बहुत महत्वपूर्ण है।

त्वचा की घुसपैठ से स्मीयर में लीशमैनिया का पता लगाने की विधि

आवश्यक अभिकर्मक पिछले विश्लेषण के समान हैं।

परीक्षण सामग्री मौजूदा ट्यूबरकल या अल्सरेटिव सामग्री से प्राप्त की जाती है। यदि लीशमैनियासिस का संदेह है, तो रक्त के बिना स्केलपेल के साथ स्क्रैपिंग बहुत सावधानी से की जाती है। फिर कांच पर तैयारी की जाती है. प्राप्त परिणामों की सटीकता सुनिश्चित करने के लिए, कई तैयारियों की एक साथ जांच की जाती है।

रोग की उपस्थिति में, परीक्षण सामग्री में मौजूद मैक्रोफेज, फ़ाइब्रोब्लास्ट और लिम्फोइड कोशिकाओं के बीच लीशमैनिया का भी पता लगाया जाता है।

पैथोलॉजिकल ऊतकों को खुरच कर प्राप्त लीशमैनिया की शुद्ध संस्कृति को अलग करने की विधि

प्रोटोजोआ के निदान की इस पद्धति के साथ, ऊतक स्क्रैपिंग को एक विशेष में रखा जाता है पोषक माध्यम, जिसमें लीशमैनिया का सक्रिय प्रजनन होता है।

स्क्रैपिंग लेने से पहले, त्वचा को पूरी तरह से अल्कोहल से उपचारित किया जाता है, फिर ट्यूबरकल में एक चीरा लगाया जाता है, जिसके नीचे से सामग्री को हटा दिया जाता है और माध्यम के साथ एक टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है। सामग्री को कई बार लिया जाता है, जिसके बाद इसे अलग-अलग टेस्ट ट्यूबों में रखा जाता है। फिर खेती थर्मोस्टेट में 22-24 डिग्री के तापमान पर होती है। परिणामों का मूल्यांकन माइक्रोस्कोप के तहत किया जाता है। इस विधि का उपयोग तब किया जाता है जब अन्य, सस्ता और त्वरित तरीकेप्रोटोजोआ का निदान अप्रभावी है।

आप वीडियो समीक्षा देखकर देख सकते हैं कि रक्त की एक बूंद का उपयोग करके प्रोटोजोआ की उपस्थिति के परीक्षणों को व्यवहार में कैसे समझा जाता है:

लोटिन अलेक्जेंडर, चिकित्सा स्तंभकार

मल की जांच दो तरीकों से की जाती है:

1. स्थूल - कृमि, उनके सिर, खंड, स्ट्रोबिला टुकड़े का पता लगाएं। मल के छोटे हिस्से को फ्लैट बाथ या पेट्री डिश में पानी के साथ मिलाया जाता है और अच्छी रोशनी में देखा जाता है गहरे रंग की पृष्ठभूमि, यदि आवश्यक हो तो एक आवर्धक लेंस का उपयोग करें। सभी संदिग्ध संरचनाओं को चिमटी के साथ पानी के साथ दूसरे कप में या पतला ग्लिसरॉल की एक बूंद में एक ग्लास स्लाइड पर स्थानांतरित किया जाता है।

विधि के साथ प्रतिवाद करनामल के परीक्षण भाग को एक कांच के सिलेंडर में पानी के साथ मिलाया जाता है और जमने के बाद सूखा दिया जाता है ऊपरी परतपानी। इसे कई बार दोहराया जाता है. जब तरल पारदर्शी हो जाता है, तो इसे सूखा दिया जाता है और पेट्री डिश में तलछट की जांच की जाती है।

2. सूक्ष्मदर्शी - कृमि के अंडे और लार्वा का पता लगाने के लिए। कई शोध विधियां हैं।

1). देशी धब्बा - सबसे आम और तकनीकी रूप से सुलभ शोध पद्धति। सभी कृमियों के अंडे और लार्वा का पता लगाया जा सकता है। हालाँकि, अंडों की कम संख्या के साथ उन्हें ढूंढना हमेशा संभव नहीं होता है। इसलिए, संवर्धन विधि का उपयोग किया जाता है।

1). फुलेबोर्ग विधि - यह एक संतृप्त NaCl घोल (1.2 - घनत्व; 400 ग्राम NaCl प्रति 1 लीटर पानी; 40% NaCl घोल) में हेल्मिंथियासिस अंडों के तैरने पर आधारित एक संवर्धन विधि है। यह विधि देशी स्मीयर से अधिक प्रभावी है। 2-5 ग्राम मल को कांच के जार में रखा जाता है और NaCl समाधान से भर दिया जाता है, हिलाया जाता है और 45 मिनट के बाद, धातु के लूप के साथ परिणामी फिल्म को हटा दिया जाता है, ग्लास स्लाइड पर ग्लिसरीन की एक बूंद रखी जाती है। माइक्रोस्कोप के नीचे जांच करें. विधि का नुकसान विभिन्न कृमियों के अंडों का धीमी गति से उभरना है, बौना टेपवर्म - 15-20 मिनट के बाद, राउंडवॉर्म - 1.5 घंटे, व्हिपवर्म - 2-3 घंटे।

2) कलन्तरायण विधि - यह भी एक संवर्धन विधि है, लेकिन NaNO 3 (1.38 घनत्व) के संतृप्त घोल का उपयोग किया जाता है। अधिकांश अंडे तैरते हैं; तलछट परीक्षण की आवश्यकता नहीं होती है। नुकसान यह है कि अंडों को लंबे समय तक घोल में रखने से यह तथ्य सामने आता है कि कुछ अंडे फूलने लगते हैं और सतह की फिल्म से गायब होकर नीचे बैठ जाते हैं।

3. गोरीचेव विधि - अंडे के जमाव, पता लगाने के सिद्धांत पर आधारित छोटे अंडेकंपकंपी एक संतृप्त NaCl घोल का उपयोग घोल के रूप में किया जाता है और 3-4 मिलीलीटर मल घोल को सावधानीपूर्वक शीर्ष पर रखा जाता है। 15-20 घंटों के बाद, ट्रेमेटोड अंडे नीचे बैठ जाते हैं। तरल को सूखा दिया जाता है और तलछट को कांच की स्लाइड पर और माइक्रोस्कोप के नीचे रखा जाता है।

4. शुलमैन घुमा विधि – मल में हेल्मिंथ लार्वा का पता लगाने के लिए। केवल ताजा उत्सर्जित मल की ही जांच की जाती है। 2-3 ग्राम को एक कांच के जार में रखा जाता है और 5 गुना पानी मिलाया जाता है, जार की दीवारों को छुए बिना एक छड़ी से जल्दी से हिलाया जाता है - 20-30 मिनट, फिर छड़ी को जल्दी से हटा दिया जाता है, और एक बूंद अंत में तरल को एक ग्लास स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है और माइक्रोस्कोप किया जाता है।

5. बर्मन विधि - हेल्मिंथ लार्वा की गर्मी की ओर स्थानांतरित होने की क्षमता पर आधारित है, और मल में उनकी पहचान करने का कार्य करता है।

6. हरदा और मोरी विधि (लार्वा पालन की विधि) और हुकवर्म संक्रमण के परीक्षण के लिए अनुशंसित है। यह विधि इस तथ्य पर आधारित है कि गर्मी में और नम फ़िल्टर्ड पेपर पर, हुकवर्म अंडे फिलारिफॉर्म लार्वा में विकसित होते हैं, जिन्हें आसानी से पता लगाया जा सकता है। फ़िल्टर किए गए कागज की एक पट्टी के बीच में 15 ग्राम मल लगाया जाता है; मल वाले कागज को एक जार में रखा जाता है ताकि निचला सिरा पानी में डूबा रहे और ऊपरी सिरा एक डाट से सुरक्षित रहे। जार को थर्मोस्टेट में 28 0 C पर 5-6 दिनों के लिए रखा जाता है। फिलारिफ़ॉर्म लार्वा इस समय के दौरान विकसित होते हैं और पानी में उतरते हैं। तरल की जांच एक आवर्धक कांच के नीचे की जाती है। यदि इसका पता लगाना मुश्किल है, तो तरल को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, पहले 60 0 तक गर्म करके लार्वा को मार दिया जाता है। प्रयोगशाला सहायक को दस्ताने पहनने होंगे।

7. एंटरोबियासिस के तरीके - पिनवॉर्म अंडे का पता लगाना और गोजातीय फीताकृमि.

ए) पेरिअनल सिलवटों से खुरचना - रुई के फाहे को लकड़ी की छड़ी पर कस कर लपेटें और 50% ग्लिसरीन के घोल में भिगोएँ। प्रयोगशाला में, स्वाब को ग्लिसरीन के 50% जलीय घोल की 1-2 बूंदों से धोया जाता है।

बी) चिपचिपा घुन विधि (ग्राहम विधि)

चिपकने वाला टेप पेरिअनल सिलवटों पर लगाया जाता है, फिर चिपकने वाली परत को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की जाती है।

सी) आंख की छड़ों (राबिनोविच विधि) का उपयोग करके स्क्रैपिंग। पेरिअनल स्क्रैपिंग के लिए, ग्लास आई रॉड्स का उपयोग किया जाता है, जिसका चौड़ा हिस्सा एक विशेष गोंद से ढका होता है, जो पिनवॉर्म अंडे को बनाए रखने की अनुमति देता है।

रक्त, पित्त, थूक और मांसपेशियों की जांच

रक्त माइक्रोस्कोपी से फाइलेरिया लार्वा का पता चलता है।

थूक की जांच - पैरागैनिम अंडे, राउंडवॉर्म लार्वा, नेकेटर, स्ट्रॉन्गिलॉइड, इचिनोकोकल मूत्राशय के तत्व।

मांसपेशियों की जांच - यदि ट्राइकिनोसिस का संदेह है, तो रोगी या शव की मांसपेशियों की जांच की जाती है, साथ ही उस मांस की भी जांच की जाती है जिसके कारण संभवतः व्यक्ति संक्रमित हुआ था। ट्राइचिनोस्कोपी के प्रयोजन के लिए, मांसपेशियों को छोटे टुकड़ों में काटा जाता है और एक कंप्रेसरियम में रखा जाता है, ये दो चौड़े, मोटे ग्लास होते हैं जो मांसपेशियों को कुचलते हैं और ट्राइचिनेला लार्वा कैप्सूल के रूप में पाए जाते हैं - एक संपीड़न विधि।

पाचन विधि - मांसपेशियों को कृत्रिम गैस्ट्रिक रस (समाधान) से भर दिया जाता है हाइड्रोक्लोरिक एसिड काऔर पेप्सिन)। मांसपेशियाँ पच जाती हैं, और लार्वा आसानी से पहचाने जाते हैं। आक्रमण की तीव्रता का निर्धारण: लार्वा की संख्या 200 प्रति 1 ग्राम तक मांसपेशियों का ऊतक– आक्रमण की मध्यम तीव्रता; 500 तक - तीव्र; 500 से अधिक - अति गहन आक्रमण।

सीरोलॉजिकल तरीके

हेल्मिन्थोलॉजिकल अनुसंधान विधियाँ. हेल्मिन्थ संक्रमण के निदान के तरीकों को सीधे हेल्मिन्थ या उनके टुकड़ों के साथ-साथ हेल्मिन्थ लार्वा और अंडों (मल, मूत्र, पित्त और ग्रहणी सामग्री, थूक, रक्त और ऊतकों, सामग्री की जांच के लिए तरीके) के प्रत्यक्ष पता लगाने के आधार पर विभाजित किया गया है। पेरिअनल क्षेत्र और उपनगरीय स्थानों से स्क्रैप करके प्राप्त किया जाता है), और अप्रत्यक्ष, जिसकी सहायता से वे प्रकट होते हैं द्वितीयक परिवर्तन, मानव शरीर में कृमि की महत्वपूर्ण गतिविधि के परिणामस्वरूप उत्पन्न होना (रक्त की रूपात्मक संरचना का अध्ययन, कृमि संक्रमण के निदान के लिए प्रतिरक्षाविज्ञानी तरीके, एक्स-रे अध्ययनवगैरह।)। प्रत्यक्ष तरीकों में से, सबसे आम स्कैटोलॉजिकल हैं, जिन्हें मैक्रो- और माइक्रोहेल्मिन्थोस्कोपिक में विभाजित किया गया है। कुछ मामलों में, विशेष तरीकों का उपयोग किया जाता है।

मैक्रोहेल्मिटोस्कोपिक अनुसंधान विधियाँइसका उद्देश्य हेल्मिंथ या उनके टुकड़ों (स्कोलेक्स, खंड, सेस्टोड्स के स्ट्रोबिला के हिस्से) की खोज करना है। उनका उपयोग उन हेल्मिंथियासिस के निदान के लिए किया जाता है जिसमें अंडे रोगी के मल में उत्सर्जित नहीं होते हैं या कम मात्रा में उत्सर्जित होते हैं और हमेशा नहीं (उदाहरण के लिए, एंटरोबियासिस के साथ, मल में पिनवर्म पाए जाते हैं, टेनियासिस - खंडों के साथ)।

मल में पिनवॉर्म या सेस्टोड खंडों का पता लगाने के लिए, मल की नग्न आंखों से जांच की जाती है। के लिए क्रमानुसार रोग का निदानटेनियासिस, पानी से पतला मल को अलग-अलग छोटे भागों में काले फोटोग्राफिक क्यूवेट में या गहरे रंग की पृष्ठभूमि के खिलाफ पेट्री डिश में देखने की सिफारिश की जाती है। दो स्लाइडों के बीच एक आवर्धक कांच के नीचे हेल्मिंथ के टुकड़ों के लिए संदिग्ध बड़ी संरचनाओं की जांच की जाती है। यदि अनुसार नैदानिक ​​संकेतउपचार के बाद छोटे हेल्मिंथ या सेस्टोड हेड का पता लगाने का सुझाव दिया जाता है, फिर संदिग्ध कणों की जांच ग्लिसरीन की एक बूंद में एक आवर्धक कांच के नीचे की जाती है, और यदि आवश्यक हो, तो एक माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है।

माइक्रोहेल्मिन्थोस्कोपिक अनुसंधान विधियाँ(गुणात्मक) का उद्देश्य हेल्मिंथ अंडे और लार्वा की पहचान करना है। काटो के अनुसार सिलोफ़न कवर प्लेट के साथ मोटी स्मीयर विधि का उपयोग किया जाता है। काटो मिश्रण में 6 होते हैं एमएलमैलाकाइट ग्रीन का 3% जलीय घोल, 500 एमएलग्लिसरीन और 500 एमएल 6% फिनोल समाधान। काटो प्लेट्स (हाइड्रोफिलिक सिलोफ़न को 20´ 40 मापने वाले टुकड़ों में काटा जाता है मिमी) 24 के लिए विसर्जित एचकाटो मिश्रण में डालें ताकि वे एक-दूसरे से सटे रहें (3-5)। एमएलकाटो घोल प्रति 100 प्लेट)। 100 एमजीकाटो के अनुसार मल को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है, सिलोफ़न कवर प्लेट से ढक दिया जाता है और नीचे दबाया जाता है ताकि मल सिलोफ़न प्लेट की सीमा के भीतर कांच की स्लाइड पर लग जाए। स्मीयर को कमरे के तापमान पर 40-50 तक हल्का होने के लिए छोड़ दिया जाता है मिनट,और फिर माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की गई। गर्मी के मौसम में, तैयारी को सूखने से बचाने के लिए, तैयार तैयारी की प्लेट पर एक नम स्पंज रखें।

सभी प्रकार के कृमियों का पूर्ण पता लगाने के लिए, सिलोफ़न कवर प्लेट के साथ काटो मोटी स्मीयर विधि का उपयोग संवर्धन विधियों में से एक के साथ संयोजन में किया जाना चाहिए। उनमें से सबसे आम कलंतार्यन विधि और फुलबॉर्न विधि हैं।

कलंतार्यन विधि: 100 की मात्रा वाली चौड़े मुंह वाली बोतलों में एमएलकांच की छड़ से अच्छी तरह हिलाएं 5 जीमल, धीरे-धीरे संतृप्त सोडियम नाइट्रेट समाधान जोड़ना (1 किलोग्रामसोडियम नाइट्रेट प्रति 1 एल(पानी उबलने पर) गिलास के किनारे तक। सतह पर तैरने वाले बड़े कणों को पेपर स्कूप से हटा दिया जाता है। नमकीन घोल की सतह पर एक ग्लास स्लाइड लगाई जाती है (खारा घोल तब तक डाला जाता है जब तक कि मिश्रण ग्लास स्लाइड के पूर्ण संपर्क में न आ जाए)। 20-30 में मिनस्लाइड को हटा दिया जाता है और माइक्रोस्कोप के तहत फिल्म की जांच की जाती है। इस नमक की अनुपस्थिति में, आप फॉलबॉर्न (400) के अनुसार टेबल नमक के संतृप्त घोल का उपयोग कर सकते हैं जी 1 में नमक एलउबला पानी)।

इस तथ्य के कारण कि अंडे बड़े होते हैं विशिष्ट गुरुत्व(राउंडवॉर्म के अनिषेचित अंडे, ट्रेमेटोड के अंडे और बड़े सेस्टोड) तैरते नहीं हैं, फुलबॉर्न विधि का उपयोग करते समय तरल की सतह परत की जांच करने के अलावा, माइक्रोस्कोप के तहत तलछट से 2-4 तैयारियों की जांच करना आवश्यक है।

विभिन्न कृमिरोगों के परीक्षण के लिए विशेष प्रयोगशाला विधियाँ।

कृमि के टुकड़ों का पता लगाने के लिए, मल की नग्न आंखों से जांच की जाती है, फिर पानी के साथ मिलाया जाता है और एक अंधेरे पृष्ठभूमि के खिलाफ पेट्री डिश में छोटे भागों में जांच की जाती है। सभी संदिग्ध कणों को पानी की एक बूंद में कांच की स्लाइड पर रखा जाता है और एक आवर्धक कांच के नीचे जांच की जाती है। आप 5-10 गुना पानी मिलाकर एक दैनिक भाग को सिलेंडर में रख सकते हैं। हिलाने के बाद, बर्तन को तब तक छोड़ दिया जाता है जब तक कि निलंबित कण पूरी तरह से बैठ न जाएं। सतह परततरल पदार्थों को निकाला और डाला जाता है साफ पानी. धुले हुए तलछट की जांच छोटे भागों में नग्न आंखों से या आवर्धक कांच के नीचे की जाती है। अंडों का पता लगाने के लिए सूक्ष्म परीक्षण विधियों का उपयोग किया जाता है।

देशी धब्बा विधि. मल की थोड़ी मात्रा अलग - अलग जगहेंपरीक्षण भाग को 50% ग्लिसरॉल घोल, आइसोटोनिक सोडियम क्लोराइड घोल या पानी की एक बूंद में कांच की स्लाइड पर डाला जाता है। मिश्रण को कवरस्लिप से ढक दिया जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है।

फुलबॉर्न फ्लोटिंग विधि। मल के एक भाग को सोडियम क्लोराइड (विशिष्ट गुरुत्व 1.18) के संतृप्त घोल के 20 भागों के साथ मिलाया जाता है, छोटे भागों में जोड़ा जाता है। सतह पर तैरने वाले बड़े कणों को तुरंत हटा दिया जाता है, और मिश्रण को 45 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है। इस समय के दौरान, हेल्मिंथ अंडे, सोडियम क्लोराइड समाधान की तुलना में कम विशिष्ट गुरुत्व वाले, सतह पर तैरते हैं। सतह की फिल्म को लगभग 1 सेमी व्यास वाले तार के लूप से हटा दिया जाता है और माइक्रोस्कोप के तहत जांच के लिए एक ग्लास स्लाइड में स्थानांतरित कर दिया जाता है।

कालांतरायण विधि. सोडियम क्लोराइड को सोडियम नाइट्रेट के संतृप्त घोल से बदलने पर फ्लोटिंग विधि की प्रभावशीलता बढ़ जाती है। ऐसे में मिश्रण को 10-15 मिनट तक रखा जाता है.

सोडियम क्लोराइड या सोडियम नाइट्रेट के घोल के साथ मल के मिश्रण को जमने के बाद बनी सतह की फिल्म को कांच की स्लाइड से भी हटाया जा सकता है। इस प्रयोजन के लिए, मल और नमक के घोल के मिश्रण से भरे एक जार को कांच की स्लाइड से ढक दिया जाता है ताकि इसकी निचली सतह तरल के संपर्क में रहे। जमने के बाद, कांच को हटा दिया जाता है और, जिस सतह पर फिल्म स्थित होती है, उसे तेजी से ऊपर की ओर मोड़कर माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की जाती है।

स्पेरियनल सिलवटों की स्क्रैपिंग (पिनवॉर्म अंडे और बोवाइन टेपवर्म ऑन्कोस्फीयर की पहचान करने के लिए) सुबह शौच से पहले की जाती है। पानी या 50% ग्लिसरीन के घोल में डूबा हुआ लकड़ी का स्पैटुला का उपयोग करके, चारों ओर खुरचें गुदा. परिणामी सामग्री को पानी की एक बूंद या 50% ग्लिसरॉल घोल में एक ग्लास स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है। स्पैटुला को एक नम कपास झाड़ू से बदला जा सकता है, जिसका उपयोग पेरिअनल क्षेत्र को पोंछने के लिए किया जाता है, फिर पानी में अच्छी तरह से कुल्ला किया जाता है। पानी को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और तलछट की जांच माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है।

बेहरमन विधि (लार्वा की पहचान के लिए)। एक धातु की जाली जिस पर 5-6 ग्राम मल लगा होता है, एक तिपाई में डाली गई कांच की फ़नल पर लगाई जाती है। क्लैंप के साथ एक रबर ट्यूब को फ़नल के निचले सिरे पर रखा जाता है। फ़नल को t° 50° तक गरम पानी से भर दिया जाता है, ताकि नीचे के भागमल युक्त जाली पानी के संपर्क में आ गई। लार्वा सक्रिय रूप से पानी में चले जाते हैं और रबर ट्यूब के निचले हिस्से में जमा हो जाते हैं। 4 घंटे के बाद, तरल को सेंट्रीफ्यूज ट्यूबों में डाला जाता है, सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, और तलछट की माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है।

थूक, नाक के बलगम और का विश्लेषण योनि स्रावफुफ्फुसीय ट्रेमेटोड पैरागोनिमस के अंडे, राउंडवॉर्म और हुकवर्म लार्वा, पिनवॉर्म अंडे और इचिनोकोकल मूत्राशय के टुकड़ों की पहचान करने के लिए। बलगम (निर्वहन) के जिस हिस्से की जांच की जा रही है उसे कांच पर लगाया जाता है और एक काले और सफेद पृष्ठभूमि के खिलाफ मैक्रोस्कोपिक रूप से देखा जाता है और फिर एक माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है। आप परीक्षण सामग्री में 25% एंटीफॉर्मिन घोल मिला सकते हैं, अच्छी तरह हिला सकते हैं और बलगम को घुलने के लिए 1-1.5 घंटे के लिए छोड़ सकते हैं। मिश्रण को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और अवक्षेप की माइक्रोस्कोप से जांच की जाती है।

ग्रहणी का विश्लेषण और आमाशय रसलिवर फ्लूक्स, हुकवर्म, स्ट्रॉन्गिलोइड्स लार्वा के अंडों की पहचान के लिए। प्राप्त ग्रहणी सामग्री के सभी तीन भागों को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और तलछट की माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। वे शोध भी कर रहे हैं.

ऊतक अनुसंधान. ट्राइचिनेला लार्वा की पहचान करने के लिए, बायोप्सीड मांसपेशियों के टुकड़ों को सावधानीपूर्वक फाइबर में विभाजित किया जाता है, कंप्रेसर ग्लास (स्क्रू के साथ मोटे ग्लास) के बीच निचोड़ा जाता है और एक अंधेरे प्रकाश के साथ माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की जाती है। सिस्टीसेरसी की पहचान करने के लिए, मांसपेशियों को विच्छेदन करने वाली सुइयों से विच्छेदित किया जाता है, पृथक पुटिका को आसपास के ऊतकों से साफ किया जाता है, दो ग्लास स्लाइडों के बीच निचोड़ा जाता है और एक आवर्धक कांच के नीचे जांच की जाती है।

रक्त परीक्षण (फाइलेरिया लार्वा का पता लगाने के लिए)। वैसलीन लगे कवर ग्लास पर लटकी हुई बूंद की जांच करें। आप 0.3 मिली रक्त को 3% घोल की 10 गुना मात्रा में मिला सकते हैं। मिश्रण को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है और अवक्षेप की माइक्रोस्कोप से जांच की जाती है। औषधियों के संवर्धन हेतु 1 मि.ली नसयुक्त रक्त 2% फॉर्मेलिन घोल के 3 मिलीलीटर या 5% फॉर्मेलिन घोल के 95 मिलीलीटर, एसिटिक एसिड के 5 मिलीलीटर और सांद्रित 2 मिलीलीटर वाले तरल की 5 गुना मात्रा मिलाएं। शराब समाधानहेमेटोक्सिलिन। मिश्रण को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, अवक्षेप को आसुत जल से धोया जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की जाती है। भेदभाव के लिए अलग - अलग प्रकारफाइलेरिया की जांच गिएम्सा-रोमानोव्स्की विधि का उपयोग करके दागे गए स्मीयरों द्वारा की जाती है।

तरीकों प्रतिरक्षाविज्ञानी निदान. संबंधित प्रकार के हेल्मिंथ (एग्लूटिनेशन, पूरक निर्धारण) के साथ एलर्जी निदान परीक्षण (देखें) का भी उपयोग किया जाता है।

हेल्मिन्थोलॉजिकल अनुसंधान विधियाँ। चावल। हेल्मिंथ अंडे. 1-10 - अंडे गोल(नेमाटोड): 1 - 3 - राउंडवॉर्म (1 - निषेचित अंडा, 2 - बिना एल्बुमेन के निषेचित अंडा, 3 - अनिषेचित अंडा); 4 - बिल्ली राउंडवॉर्म; 5 - मांसाहारी राउंडवॉर्म; 5 - पिनवर्म; 7 - व्हिपवर्म; 8 - टोमिनक्स; 9 - हुकवर्म; 10 - ट्राइकोस्ट्रॉन्गिलिड। 11-15 - अंडे फीता कृमि(सेस्टोड्स): 11 - गोजातीय टैपवार्म; 12 - बौना टेपवर्म; 13 - चूहा टेपवर्म; 14 - कद्दू टेपवर्म; 15 चौड़ा टेप. 16 - 24 - फ्लूक के अंडे (ट्रेमेटोड्स): 16 - ट्रैमेटोड (शिस्टोसोम्स) जापानी; 17 - ट्रेमेटोड्स (शिस्टोसोम्स) मूत्र - यौन; 18 - ट्रेमेटोड्स (शिस्टोसोम्स) मुन्सन; 19 - ट्रेमेटोड्स (पेरोगोनिमस) फुफ्फुसीय; 20 - ट्रेमेटोड्स (ऑपिसथोर्चिस) साइबेरियन (बिल्ली के समान); 21 - ट्रेमेटोड्स (क्लोनोर्किस) चिनेंसिस; 22 - आंतों का कंपकंपी (मेटागोनिमस); 23 - यकृत के कंपकंपी (फासीओलास); 24 - ट्रेमेटोड्स (डाइक्रोसेलियम) लांसोलेट।

हेल्मिंथोलॉजिकल अनुसंधान का एक प्रभावी और सुविधाजनक तरीका है काटो के अनुसार गाढ़े स्मीयर का अध्ययन, जिसका सार मल के गाढ़े टुकड़े में हेल्मिंथ अंडे का पता लगाना है, जिसे ग्लिसरीन से साफ किया जाता है और मैलाकाइट हरे रंग से रंगा जाता है। काटो मिश्रण की संरचना मैलाकाइट ग्रीन के 3% जलीय घोल का 6 मिलीलीटर, ग्लिसरीन का 500 मिलीलीटर, 6% फिनोल समाधान का 500 मिलीलीटर है। समाधान स्थिर है और इसे कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है। तैयारी तैयार करने के लिए, मटर के आकार के मल के टुकड़ों को एक ग्लास स्लाइड पर लगाया जाता है, 24 घंटे के लिए काटो मिश्रण में रखे हाइड्रोफिलिक सिलोफ़न की एक फिल्म के साथ कवर किया जाता है, और ग्लास पर दबाया जाता है वर्दी वितरणसामग्री। 40-60 मिनट तक साफ किए गए स्मीयरों की जांच माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है। पाए गए हेल्मिंथ अंडों की गिनती की जाती है और रूपात्मक विशेषताएँउनकी प्रजाति निर्धारित करें. यह विधि आपको राउंडवॉर्म, व्हिपवर्म, सेस्टोड, ट्रेमेटोड और कुछ हद तक हुकवर्म और बौने टेपवर्म के अंडों की पहचान करने की अनुमति देती है।

व्यापक रूप से उपयोग भी किया जाता है संवर्धन के तरीके. प्लवनशीलता विधियों का सिद्धांत मल को खारे घोल में निलंबित करना है, जिसमें हेल्मिंथ अंडों की तुलना में अधिक सापेक्ष घनत्व होता है, जिसके परिणामस्वरूप वे सतह पर तैरते हैं। सतह फिल्म की सामग्री की जांच माइक्रोस्कोप के तहत की जाती है। निम्नलिखित समाधानों का उपयोग संवर्धन मिश्रण के रूप में किया जाता है: टेबल नमक- 1 लीटर पानी में 400 ग्राम (फुलबॉर्न के अनुसार सापेक्ष घनत्व -1.18); सोडियम नाइट्रेट - 1 किलो 1 लीटर पानी में (सापेक्षिक घनत्व "कलनटारियन-1.38 के अनुसार); सोडियम नाइट्रेट - 900 ग्राम और पोटेशियम नाइट्रेट - 400 ग्राम 1 लीटर पानी में (ब्रुडास्टोव और क्रास्नोनोस-1.48 के अनुसार सापेक्ष घनत्व)। तैयार किया गया घोल को उबालकर ठंडा किया जाता है।
शोध के लिए एक गिलास या मिट्टी के गिलास में 5-10 ग्राम मल डालें, इसमें 100-200 मिलीलीटर खारा घोल डालें और अच्छी तरह हिलाएं। फिर तैरते हुए बड़े कणों को लकड़ी के स्पैटुला या कागज या कार्डबोर्ड से बने स्कूप से हटा दिया जाता है और तुरंत सतह फिल्म पर एक चौड़ी स्लाइड लगा दी जाती है ताकि खारा घोल और स्लाइड पूरी तरह से संपर्क में रहें। मिश्रण को 30-40 मिनट तक रहने देने के बाद, स्लाइड को हटा दिया जाता है, फिल्म को ऊपर की ओर करके माइक्रोस्कोप के नीचे रखा जाता है, और पूरी सतह की सावधानीपूर्वक जांच की जाती है। सूखने से बचाने के लिए, आप 50% ग्लिसरीन घोल की 2-3 बूंदें मिला सकते हैं। सतह की फिल्म को वायर लूप से भी हटाया जा सकता है। जैसे-जैसे सापेक्ष घनत्व बढ़ता है, प्लवनशीलता विधियों की दक्षता बढ़ती जाती है खारा समाधान. इन विधियों का उपयोग करके नेमाटोड, सेस्टोड और ट्रेमेटोड के अंडों का पता लगाना संभव है।

मल में अंडों का पता लगाने के लिए कसीसिलनिकोव अवसादन विधि का उपयोग किया जाता है. मल को 1% डिटर्जेंट घोल में मिलाया जाता है ( कपड़े धोने का पाउडरनिलंबन बनने तक 1:10 के अनुपात में "कमल", आदि)। डिटर्जेंट के प्रभाव में, मल के विभिन्न घटक (प्रोटीन, वसा, ऊतक तत्व) घुल जाते हैं। 30 मिनट के बाद, ट्यूब की सामग्री को 1-2 मिनट के लिए हिलाया जाता है, जिसके बाद उन्हें 5 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। तलछट से तैयारियां की जाती हैं और माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है।
में क्षेत्र की स्थितियाँ, साथ ही हेल्मिंथ संक्रमण के लिए आबादी की सामूहिक जांच के दौरान, काटो मोटी स्मीयर विधि का उपयोग करना सुविधाजनक है। में रोगी की स्थितियाँरोगियों की जांच करते समय, सबसे प्रभावी प्लवनशीलता विधियों का उपयोग करना बेहतर होता है। माइक्रोस्कोपी के दौरान इन विधियों का उपयोग करते समय, तैयारी में पाए गए अंडों की गिनती करने की सलाह दी जाती है। यदि मल के अध्ययन के लिए लिया गया नमूना या मात्रा मानकीकृत है (उदाहरण के लिए, 1 चम्मच या बड़ा चम्मच), और खारे घोल की एक समान मात्रा, तो कोई मोटे तौर पर आक्रमण की तीव्रता का अनुमान लगा सकता है। यह मात्रात्मक लेखांकन निर्धारित उपचार को उचित ठहराने और कृमि मुक्ति की प्रभावशीलता का आकलन करने में उपयोगी हो सकता है। इसके अलावा, संक्रमण की तीव्रता को स्थापित करने के लिए अन्य अधिक सटीक तरीकों का उपयोग किया जा सकता है। मात्रात्मक विधियां, विशेष रूप से स्टोल विधि।

टेनियारिन्चोसिस और एंटरोबियासिस के निदान के लिएपेरिअनल-रेक्टल स्क्रैपिंग का अध्ययन करने की विधि का उपयोग किया जाता है। 50% ग्लिसरीन के घोल में भिगोए हुए लकड़ी के स्पैटुला का उपयोग करके, सुबह शौच से पहले परिधि में पेरिअनल सिलवटों को खुरचें। गुदाऔर निचला भागमलाशय. परिणामी सामग्री को एक कवर ग्लास के किनारे से एक स्पैटुला से साफ किया जाता है, 50% ग्लिसरॉल समाधान की एक बूंद में एक ग्लास स्लाइड पर रखा जाता है, एक कवर ग्लास के साथ कवर किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। आप सेलूलोज़ टेप की एक पट्टी की भी जांच कर सकते हैं, जिसे पहले चिपकने वाले पक्ष से पेरिनाल सिलवटों पर दबाया जाता है, फिर एक ग्लास स्लाइड पर रखा जाता है और सूक्ष्मदर्शी रूप से जांच की जाती है।

बर्मन विधि का उपयोग करके मल में नेमाटोड लार्वा का पता लगाना. यह विधि लार्वा के थर्मोट्रोपिक गुण पर आधारित है। शोध के लिए, 1 बड़ा चम्मच मल लें और इसे धातु की जाली या तार के फ्रेम पर धुंध की कई परतों वाली जाली में रखें। जाल को एक तिपाई पर लगे फ़नल में स्थापित किया गया है। क्लैंप के साथ एक रबर ट्यूब फ़नल से जुड़ी होती है। जाल को उठाने के बाद, फ़नल को पानी (तापमान +40°...+50°C) से भर दिया जाता है ताकि जाल का निचला हिस्सा पानी में डूब जाए। मल से लार्वा सक्रिय रूप से पलायन करते हैं गर्म पानीऔर, बसते हुए, फ़नल के निचले हिस्से में जमा हो जाते हैं। 2-4 घंटों के बाद, क्लैंप खोला जाता है, पानी को एक सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में डाला जाता है और 2-3 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। फिर सतह पर तैरनेवाला तरल सूखा जाता है, तलछट को एक ग्लास स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है और एक माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है, जहां स्ट्रांगाइलोइडियासिस के प्रेरक एजेंट के मोबाइल लार्वा पाए जाते हैं।

हरदा विधि और मोरी हुकवर्म और नेकेटर लार्वा के बीच अंतर करना संभव बनाता है। हुकवर्म लार्वा को फिल्टर पेपर पर संवर्धित किया जाता है। इस प्रयोजन के लिए, शौच के 1 घंटे के भीतर रोगी से लिया गया 0.5 ग्राम ताजा मल, 12X1.5 सेमी मापने वाले फिल्टर पेपर की पट्टियों पर लगाया जाता है, जिससे पट्टी के दोनों सिरे साफ हो जाते हैं। पट्टी के एक सिरे को परखनली में डुबोया जाता है, जिसके एक चौथाई हिस्से में पानी भरा होता है और दूसरे सिरे को डाट से जकड़ दिया जाता है। टेस्ट ट्यूबों को थर्मोस्टेट में +26...+28°C के तापमान पर रखा जाता है। अंडों से विकसित होने वाले लार्वा फिल्टर पेपर के माध्यम से उतरते हैं और टेस्ट ट्यूब के निचले भाग में बस जाते हैं। 5-6 दिनों के बाद, कागज की पट्टी हटा दी जाती है, और परखनली में बचे तरल की जांच एक आवर्धक कांच या सेंट्रीफ्यूज के नीचे की जाती है। सेंट्रीफ्यूजेशन के दौरान बनने वाले अवक्षेप की जांच प्रकाश सूक्ष्मदर्शी से की जाती है। जब टेट्राहेड्रल ट्यूबों के स्थान पर उपयोग किया जाता है कांच का जार(आकार 15ХХХ7 सेमी), जिसकी दीवारों पर 4 कागज़ की पट्टियाँ जुड़ी होती हैं, विश्लेषण की दक्षता बढ़ जाती है (जी. एम. मारुशविली एट अल., 1966)।

शिस्टोसोमियासिस के लिए परीक्षण विधियाँ . मल की जांच - मल के एक हिस्से को 250 मिलीलीटर पानी के साथ मिलाया जाता है, धुंध की 3 परतों के माध्यम से एक शंक्वाकार बर्तन में फ़िल्टर किया जाता है, जिसे ऊपर तक पानी से भर दिया जाता है। 30 मिनट के बाद, तरल परत को सूखा दिया जाता है, और पानी का एक ताजा हिस्सा तलछट में जोड़ा जाता है। अवक्षेप को तब तक धोया जाता है जब तक कि एक स्पष्ट सतह पर तैरनेवाला प्राप्त न हो जाए और माइक्रोस्कोप के नीचे उसकी जांच न कर ली जाए।

लारवोस्कोपी विधि - 20-25 ग्राम मल को एर्लेनमेयर फ्लास्क में ऊपर की ओर इशारा करते हुए एक ग्लास ट्यूब के साथ रखा जाता है, और धोया जाता है नल का जल. फिर फ्लास्क को गहरे रंग के कागज से ढक दिया जाता है और एक सोल्डर ग्लास ट्यूब को +25...+30°C के तापमान पर प्रकाश में छोड़ दिया जाता है। रची हुई मिरासिडिया पार्श्व ट्यूब में मेनिस्कस पर केंद्रित होती हैं, जहां उन्हें एक आवर्धक कांच या नग्न आंखों से देखा जा सकता है। मूत्र परीक्षण - सुबह 10 बजे से दोपहर 2 बजे के बीच या दैनिक भाग में एकत्र किए गए 100 मिलीलीटर मूत्र को व्यवस्थित किया जाता है और फिर 1500 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। परिणामी तलछट को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की जाती है। WHO संपूर्ण मूत्र नमूने को फ़िल्टर करने की एक विधि की अनुशंसा करता है। निस्पंदन के बाद, फिल्टर को फॉर्मेल्डिहाइड से उपचारित किया जाता है या गर्म किया जाता है (अंडे को मारने के लिए) और फिर गीला किया जाता है जलीय घोलनिनहाइड्रिन। सूखी तैयारियों में, अंडे के भ्रूण बैंगनी रंग प्राप्त कर लेते हैं।

इम्यूनोलॉजिकल का अनुप्रयोग शिस्टोसोमियासिस के निदान के लिए अनुसंधान विधियां कठिनाइयों से जुड़ी हैं, क्योंकि वयस्क शिस्टोसोम और उनके अंडों में बड़ी संख्या में एंटीजन होते हैं जो इसका कारण बनते हैं प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं, जो प्रजाति-विशिष्ट नहीं हैं (डी. ब्रैडली, 1979)।

हमारे देश में उत्पादन के लिए प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाएँहेल्मिंथियासिस के लिए जारी किया गया है पूरी लाइनमानक निदान. प्रायोगिक उपयोगएलर्जी है त्वचा परीक्षणइचिनोकोकोसिस और एल्वोकॉकोसिस के लिए, इचिनोकोकल एंटीजन के साथ आरएलए, ठंड में आरएससी, विभिन्न संशोधनों में ठंड में वर्षा की प्रतिक्रिया (रिंग वर्षा, टेस्ट ट्यूब या केशिकाओं में वर्षा, जो ट्राइकिनोसिस, सिस्टीसर्कोसिस और माइग्रोस्कारियासिस एंटीजन के साथ रखी जाती है)। उपर्युक्त सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं को करने के लिए मानक डायग्नोस्टिक किट बैक्टीरिया की तैयारी करने वाले उद्यमों द्वारा उत्पादित किए जाते हैं। निर्माता उत्पादित डायग्नोस्टिक किट के साथ शामिल है विस्तृत निर्देशभंडारण नियमों, दवा के शेल्फ जीवन और प्रतिक्रिया के चरण निर्धारण की तकनीक के साथ प्रासंगिक एंटीजन के उपयोग पर निर्देश।

में पिछले साल काहेल्मिंथियासिस के निदान के लिए उपयोग की जाने वाली सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं की सूची में काफी विस्तार हुआ है। इन उद्देश्यों के लिए, निम्नलिखित प्रतिक्रियाओं का उपयोग किया जाता है: आरआईजीए, अप्रत्यक्ष इम्यूनोफ्लोरेसेंस (आरआईएफ), एक जेल में इम्यूनोडिफ्यूजन (आरआईडी), काउंटर इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस (सीआईईएफ), सीईएमए। इन प्रतिक्रियाओं का उपयोग एस्कारियासिस, टॉक्सोकेरिएसिस, ट्राइकिनोसिस, हुकवर्म रोग, फाइलेरिया, इचिनोकोकोसिस और एल्वोकॉकोसिस, ओपिसथोरकियासिस, शिस्टोसोमियासिस, पैरागोनिमियासिस के लिए किया जा सकता है। हालाँकि, हमारे देश में इन प्रतिक्रियाओं के लिए मानक नैदानिक ​​परीक्षण जारी नहीं किए जाते हैं और उनके निदान की तकनीक को विनियमित नहीं किया जाता है। व्यक्तिगत प्रयोगशालाएँ, मुख्यतः वैज्ञानिक प्रयोगशालाएँ, स्वतंत्र रूप से विशिष्ट एंटीजन तैयार करती हैं और उन्हें विभिन्न संशोधनों में उपयोग करती हैं। इन विधियों का विवरण साहित्य में व्यापक रूप से प्रस्तुत किया गया है और कड़ाई से एकीकृत नहीं है। प्रतिरक्षाविज्ञानी विश्लेषण डेटा की व्याख्या, प्रयुक्त प्रत्येक विधि की विशिष्टता और संवेदनशीलता के स्तर को ध्यान में रखते हुए, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की गतिशीलता का अध्ययन करने पर आधारित होनी चाहिए। सीरोलॉजिकल प्रतिक्रिया. इसलिए, निदान करते समय, साथ ही जनसंख्या के सेरोएपिडेमियोलॉजिकल सर्वेक्षण के दौरान, कई सबसे संवेदनशील प्रतिक्रियाओं का उपयोग करने की सलाह दी जाती है। इस दृष्टिकोण से, VIEF और REMA की प्रतिक्रियाएं, जो भिन्न हैं, ने खुद को अच्छी तरह साबित कर दिया है उच्च संवेदनशीलऔर काफी उच्च विशिष्टता (पी. एम्ब्रोज़-थॉमस, 1978; आई.ई. बैलाड, 1979; जी.एम. नेग्रीनु, 1980; ए.एम. पोनोमेरेवा, 1981; ए. हां. लिसेंको, 1978, आदि)। आरईएमए की प्रभावशीलता का परीक्षण अमीबियासिस, लीशमैनियासिस, ट्रिपैनोसोमियासिस और टॉक्सोप्लाज्मोसिस (जी. ए. एर्मोलिन, 1980) के लिए किया गया है।