Primjena bakteriofaga u medicini. Bakteriofagi i njihova praktična primjena bakteriofagi
Pripravci faga koriste se za liječenje i prevenciju zaraznih bolesti, kao iu dijagnostici - za određivanje osjetljivosti na fage i fagotipizaciju u identifikaciji mikroorganizama. Djelovanje faga temelji se na njihovoj strogoj specifičnosti. Terapeutski i profilaktički učinak faga određen je litičkom aktivnošću samog faga, kao i imunizirajućim svojstvom komponenti (antigena) uništenih mikrobnih stanica u fagolizatima, osobito u slučaju ponovljene uporabe. Pri dobivanju fagnih pripravaka koriste se dokazani proizvodni sojevi faga i sukladno tome tipične kulture mikroorganizama. Bakterijska kultura u tekućem hranjivom mediju, koja je u logaritamskoj fazi razmnožavanja, inficira se matičnom suspenzijom faga.
Fag-lizirana kultura (obično sljedeći dan) se filtrira kroz bakterijske filtre i otopina kinozola se dodaje kao konzervans filtratu koji sadrži fage.
Gotov proizvod fag je bistra tekućina žućkaste boje. Za duže skladištenje neki fagi dostupni su u suhom obliku (u tabletama). U liječenju i prevenciji crijevne infekcije fagi se koriste istovremeno s otopinom natrijevog bikarbonata, budući da kiseli sadržaj želuca uništava fag. Fag se ne zadržava dugo u tijelu (5-7 dana), pa se preporučuje ponovna aplikacija.
proizvedeno u Sovjetskom Savezu sljedećih lijekova koristi se za liječenje i prevenciju bolesti: tifusa, salmopeloze, dizenterije, kolifaga, stafilokoknog faga i streptokoka. Trenutno se fagi koriste za liječenje i prevenciju u kombinaciji s antibioticima. Ova aplikacija pruža više učinkovito djelovanje za bakterije otporne na antibiotike.
Dijagnostički bakteriofagi naširoko se koriste za identifikaciju bakterija izoliranih iz pacijenta ili iz zaraženih okolišnih objekata. Uz pomoć bakteriofaga, zbog njihove visoke specifičnosti, moguće je odrediti vrste bakterija te s većom točnošću pojedine vrste izoliranih bakterija. Razvijena je fagodijagnostika i fagotipizacija bakterija roda Salmonella, Vibrio i stafilokoka. Fagotipizacija pomaže u utvrđivanju izvora infekcije, proučavanju epidemioloških odnosa i razlikovanju sporadičnih i epidemijskih slučajeva bolesti.
Fagodijagnostika i fagotipizacija temelji se na principu zajedničkog uzgoja izoliranog mikroorganizma s odgovarajućom vrstom ili tipom faga. pozitivan rezultat razmatra se prisutnost dobro izražene lize proučavane kulture s fagom vrste, a zatim s jednim od tipičnih faga.
Bakteriofagi, primjena u medicini.
Bakteriofagi. Primjena u medicinskoj praksi.
Bakteriofagi su bakterijski virusi sposobni specifično prodrijeti u bakterijske stanice, razmnožavati ih i uzrokovati lizu.
Nalaze se svugdje gdje postoje bakterije - u tlu, vodi, crijevni trakt osoba. Svi su svojstveni fagu biološke značajke koji su karakteristični za viruse.
Morfologija faga:
Fagi se razlikuju po obliku - nitasti, sferični, kubični, fagi koji imaju glavu i rep (podsjećaju na spermatozoid).
Veličine su male, srednje i velike.
Veliki fagi, koji se sastoje od glave i repa, najsloženiji su. Glava ima oblik ikosaedra. Glava je povezana s procesom uz pomoć ovratnika i kišobrana. Unutar procesa nalazi se šuplja cilindrična šipka koja komunicira s glavom, izvana proces ima proteinski omotač sposoban za kontrakciju, kaudalni proces završava šesterokutnom bazalnom pločom s kratkim šiljcima, iz kojih se protežu nitaste fibrilne strukture. Ploča i šiljci sadrže lizozim. Dodatak ima 6 resica, koje osiguravaju čvrsto pričvršćivanje faga na bakterijsku stanicu. Mogu postojati fagi s ovojnicom koja se ne skuplja, fagi s kratkim procesima, fagi s procesnim analogom i fagi bez procesa.
Otpornost na fage: Fagi podnose temperature od 50-60°C. Otporan na smrzavanje, nestaje na temperaturi od 70 °C. Na njih ne utječu otrovi poput cijanida, fluora, kao ni kloroforma i fenola. Fagi se dobro čuvaju u zatvorenim ampulama, ali se mogu uništiti kuhanjem, djelovanjem kiselina i UV zračenjem.
Mehanizam interakcije faga s mikrobnom stanicom:
Prema međudjelovanju razlikuju se virulentni i umjereni fagi.
Virulentni fagi – ulaze u bakterijsku stanicu, razmnožavaju se i uzrokuju lizu bakterije.
Postoji niz značajki za fage s procesom i kontrakcijskim omotačem:
Ti se fagi adsorbiraju na površini bakterijske stanice uz pomoć fibrila procesa u prisutnosti odgovarajućih receptora. Zatim se aktivira enzim ATP-aza, što dovodi do kontrakcije ovojnice repnog nastavka i uvođenja šupljeg štapića u stanicu. Enzim, lizozim, uključen je u proces probijanja staničnih stijenki.
DNA faga prolazi kroz šuplju stabljiku izrastanja i ubrizgava se u stanicu. Kapsida i nastavak ostaju na površini stanice. Zatim se protein faga i nukleinska kiselina reproduciraju unutar stanice. Sljedeća razina sastoji se u sklapanju i formiranju čestica zrelog faga. Završna faza: liza stanice i oslobađanje čestica zrelog faga iz nje. Liza se može odvijati i iznutra - dolazi do pucanja stanične stijenke i otpuštanja zrelih faga u vanjsko okruženje a izvana - fagi prave mnogo rupa u staničnoj stijenci kroz koje istječe sadržaj stanice; takvom se lizom fag ne razmnožava.
Umjereni fagi - ne liziraju sve stanice u populaciji, stupaju u simbiozu s nekim od stanica, uslijed čega se DNA faga integrira u stanični kromosom. U ovom slučaju, genom faga naziva se profage.
Profag postaje dio staničnog kromosoma i tijekom svoje reprodukcije replicira se sinkrono sa staničnim genomom ne uzrokujući njegovu lizu i prenosi se na potomstvo.
Fenomen simbioze mikrobne stanice s profagom naziva se lizogenija.
A kultura bakterija koja sadrži profage je lizogena, ovo ime odražava sposobnost profaga da spontano ili pod utjecajem čimbenika okoliš premjestiti u citoplazmu i ponašati se kao virulentna bakterija koja razlaže fage. Nakon prijelaza u virulentni oblik, umjereni fag može uhvatiti dio kromosoma bakterijske stanice i nakon lize biti prebačen u drugi.
Prema spektru djelovanja fagi se dijele na:
1. Polivalentne - bakterije povezane s lizom (fag Salmonella lizira samo Salmonella).
2. Vrste (monofagi) - liziraju bakterije samo jedne vrste.
3. Specifično za tip - selektivno lizira pojedinačne varijante bakterija unutar vrste (patogen Staphylococcus aureus - 33 seta).
Praktična upotreba:
Pripravci faga koriste se za liječenje i prevenciju infekcija te njihovu dijagnostiku. Djelovanje faga temelji se na njihovoj strogoj specifičnosti, za dobivanje pripravka faga koriste se proizvodni sojevi i odgovarajuće bakterijske kulture.
Oblici otpuštanja: tekući, suhi, u obliku tableta, aerosola, supozitorija. U organizam se unosi parenteralno, enteralno i lokalno. Koristi se u terapeutske i profilaktičke svrhe razne bolesti(dizenterija, kolera, razne gnojno-upalne bolesti).
Dijagnostika faga: princip dijagnostike temelji se na zajedničkom uzgoju testnih kultura s poznatim i nepoznatim fagima, pozitivnim rezultatom smatra se prisutnost lize bakterijske stanice. Liza se može uočiti na tekućini i krutini hranjive podloge. Na tekućim hranjivim medijima pojavljuje se bistrenje bakterijske suspenzije, a na gustim se formiraju područja nedostatka rasta.
Tipizacija faga: određivanje varijante tipa vrste pomoću skupa faga tipa. Proizvode se tifusni fagi, dijagnostički fagi kolere, salmonelozni fagi i dizenterični fagi. Fagotipizacija je neophodna prilikom epidemiološke analize bolesti i utvrđivanja izvora i putova prijenosa. Detekcijom faga prosuđuje se sadržaj odgovarajućih mikroorganizama.
Zbog svog destruktivnog (litičkog) djelovanja na bakterije, fagi se mogu koristiti u terapijske i profilaktičke svrhe kod raznih bolesti (dizenterija, kolera, razne pioupalne bolesti i dr.). Skupovi standardnih faga, uključujući međunarodne, koriste se za fagotipizaciju uzročnika niza bolesti (kolera, trbušni tifus, salmoneloza, difterija, stafilokokne i druge bolesti). Bakteriofagi se također koriste u genetski inženjering kao vektori koji prenose segmente DNA, moguć je i prirodni prijenos gena između bakterija pomoću određenih faga (transdukcija). U pravilu se takvim pacijentima propisuju antibiotici. Ali zbog činjenice da stalno mutirajuće bakterije stječu otpornost na antibiotike, njihova je učinkovitost posljednjih godina oslabljena. Pozornost istraživača privukli su bakteriofagi - virusi koji proždiru bakterije. Za razliku od antibiotika koji uništavaju i štetne i zdrava mikroflora organizma, bakteriofagi su samo selektivni patogene bakterije. Kako bakteriofagi djeluju u tijelu? Oni prodiru samo u određene stanice i stupaju u interakciju s njihovom DNK, stvarajući lizogeni ili litički učinak. Djelujući na mikrobe u litičkom tipu, bakteriofagi ih uništavaju, što im omogućuje ubrzano razmnožavanje. Lizogeni tip je prodiranje genoma faga u bakterijski genom, njihova sinteza i daljnji prijelaz iz jedne generacije u drugu. Podaci o bakteriofazima pojavili su se prije više od jednog stoljeća kada su korišteni za liječenje Staphylococcus aureus. Trenutno se naširoko koriste za prevenciju i liječenje crijevnih, stafilokoknih, streptokoknih, tifusnih i mnogih drugih infekcija. moderna medicina traži metode koje ne koriste žive bakteriofage, već enzime koji lizom djeluju na patogene bakterije. Njihova primjena može biti u obliku spreja za nos ili usta, paste za zube, hrane, aditivi za hranu. Učinkovitost uporabe bakteriofaga sastoji se u odsutnosti kontraindikacija i komplikacija, kompatibilnosti s drugim lijekovima, aktivni utjecaj za mikrobe otporne na antibiotike. Zbog ovih svojstava bakteriofagi se ocjenjuju kao lijekovi budućnosti za uspješna borba s infekcijama.
Najvažnije prednosti fagoterapije su visoka osjetljivost patogene mikroflore na bakteriofag, mogućnost početne uporabe malih doza bakteriofaga, kompatibilnost sa svim vrstama tradicionalne antibiotske terapije, nepostojanje kontraindikacija za profilaksu fagom i terapiju fagom. Utvrđeno je da u prirodi ne postoje mikroorganizmi koji su apsolutno otporni na bakteriofag. Važno je da je reprodukcija bakteriofaga moguća samo u prisustvu bakterija osjetljivih na njega. Nakon smrti posljednje mikrobne stanice u žarištu infektivne lezije, ona prestaje snažna aktivnost te se potpuno eliminira iz organizma.
Zbog uočenog smanjenja terapeutski učinak koriste se antibiotski pripravci bakteriofaga u klinička praksa kao alternativa antibioticima iu kombinaciji s njima. Pripravci bakteriofaga nisu niži od antibakterijskih pripravaka u pogledu učinkovitosti, stimuliraju lokalne čimbenike specifičnih i nespecifična imunost i ne izazivaju popratne toksične i alergijske reakcije. Bakteriofagi se daju oralno, a koriste se i za ispiranje rana, za ubrizgavanje u drenirane šupljine - trbušne, pleuralne, sinusne, srednje uho, apscese, rane, maternicu, mjehur. Oralnom i aerosolnom primjenom, kao i kada se nanose na površinu sluznice, bakteriofagi prodiru u krv i limfu i izlučuju se kroz bubrege, sanirajući urinarni trakt.
Trenutno je obnovljen interes za fagoterapiju u kirurgiji, urologiji, oftalmologiji i traumatologiji.
Terapeutski i profilaktički pripravci bakteriofaga sastoje se od poliklonskih virulentnih bakteriofaga širokog spektra djelovanja, koji također djeluju protiv bakterija otpornih na antibiotike. Proizvode se u tekućem obliku, u tabletama s premazom otpornim na kiseline, u obliku čepića, masti, linimenata.
Pripravci bakteriofaga su sterilni filtrat bakterijskih fagolizata, daju se oralno, lokalno za ispiranje rana i sluznica, uvođenje u šupljinu maternice, mjehura, uha, paranazalnih sinusa, kao iu dreniranim šupljinama - trbušnoj, pleuralni, a također iu šupljini apscesa nakon uklanjanja eksudata.
Bakteriofagi mogu brzo prodrijeti u krv i limfu i izlučuju se putem bubrega s urinom. Kao što je pokazano u našim studijama, nakon ingestije 30 ml bakteriofaga, čestice faga nalaze se u urinu nakon 2 sata, a njihova maksimalna koncentracija u urinu postiže se 6-8 sati nakon ingestije.
Aktivnost terapeutskih i profilaktičkih bakteriofaga protiv patogena gnojno-septičkih i crijevnih bolesti prilično je visoka - od 72% do 90%, uključujući protiv sojeva bolničkog podrijetla, karakterizirana višestrukom rezistencijom na antibiotike. Usklađenost bakteriofagnih pripravaka sa suvremenom atiološkom strukturom uzročnika postiže se njihovom stalnom prilagodbom cirkulirajućim sojevima zbog obnove rasa faga i proizvodnih bakterijskih markica. Ovo svojstvo razlikuje fage od ostalih antimikrobna sredstva- antibiotici, eubiotici ili cjepiva, kod kojih proizvodni sojevi ili sojevi proizvođači ili sintetizirana tvar nisu podložni nikakvim modifikacijama. Takva plastičnost pripravaka bakteriofaga osigurava nastavak primarne fagne rezistencije patogena.
Dobrobiti pripravaka bakteriofaga
Prednosti pripravaka bakteriofaga uključuju usku specifičnost djelovanja, koja, za razliku od antibiotika, ne uzrokuje inhibiciju normalne mikroflore. Dokazano je stimulativno djelovanje stafilokoknog bakteriofaga na bifidobakterije - bitna komponenta crijevna mikrobiocenoza. Upotreba bakteriofaga za liječenje zarazne bolesti stimulira čimbenike specifične i nespecifične imunosti, što je posebno učinkovito u liječenju kroničnih upalne bolesti protiv pozadine imunosupresivnih stanja, bakterionositelj.
Eksperimentalni rad i dugo klinička opažanja dokazana je nemogućnost prijenosa plazmida rezistencije na antibiotike i toksigenosti terapijskim i profilaktičkim pripravcima bakteriofaga, jer se radi o poliklonalnim kompleksima virulentnih bakteriofaga.
U Rusiji, zemljama ZND-a, Poljskoj, Francuskoj, Španjolskoj, bakteriofagi se naširoko koriste u medicini i veterini. Nagomilano odlično iskustvo primjena bakteriofaga u liječenju crijevnih infekcija: visoka klinička učinkovitost fagoterapije za akutne i kronična dizenterija, salmoneloza, praćena sanitacijom nosača. Dokazana je visoka epidemiološka učinkovitost profilaktičke primjene bakteriofaga dizenterije, tifusa i salmonele.U kontroliranim epidemiološkim pokusima provedenim u predškolskim ustanovama i na industrijska poduzeća, utvrđeno je smanjenje stope incidencije za 3-6 puta. Primjena bakteriofaga pokazala je dobre rezultate u liječenju bolesti uzrokovanih oportunističkim bakterijama, disbakterioza, gnojne lezije koža, ORL organi, mišićno-koštani sustav, genitourinarni sustav, sustavi cirkulacijskih i dišnih organa, uključujući novorođenčad i djecu prve godine života.
Važan uvjet koji osigurava učinkovitost liječenja fagnim pripravcima je određena fagna osjetljivost uzročnika.
Dugogodišnje iskustvo fagoterapije na Istraživačkom institutu za urologiju je jasno; Kao rezultat prilagodbe komercijalnih bakteriofaga na bolničke sojeve koji cirkuliraju u urološkoj ambulanti NPO Biofag, fagna osjetljivost sojeva se povećala za 15% i bila je na ili iznad razine osjetljivosti na najsuvremenije strane antibiotike. Na pozadini dugotrajnu upotrebu bakteriofaga u bolnici među bolnički sojevi nije uočeno stvaranje rezistencije na fage, dok se rezistencija na antibiotike smanjila. Klinička učinkovitost fagoterapije uočena je u 92% slučajeva, često premašujući rezultate antibiotske terapije. Odsutnost kontraindikacija i komplikacija u primjeni pripravaka bakteriofaga, mogućnost njihove uporabe u kombinaciji s drugim lijekovi, uključujući s antibioticima, aktivnost protiv sojeva otpornih na antibiotike i prilagodbu bakteriofaga na moderni patogeni- sve to omogućuje procjenu bakteriofagnih pripravaka kao vrlo učinkovitog i obećavajućeg sredstva za hitno liječenje gnojno-septičkih i crijevnih infekcija. No, fagi, ti "prirodni bolničari", mogu se koristiti ne samo za liječenje, već i za prevenciju zaraznih bolesti. Mogu se propisati trudnicama, dojiljama i djeci bilo koje dobi, uključujući nedonoščad. Glavni uvjet za njihovu uspješnu primjenu je ispitivanje izolirane kulture na osjetljivost na odgovarajući fag. Uočen je nevjerojatan obrazac: za razliku od antibiotika, osjetljivost kliničkih sojeva mikroorganizama na bakteriofage je stabilna i ima tendenciju povećanja, što se može objasniti obogaćivanjem medicinski preparati nove rase faga. Osim medicinske primjene, bakteriofagi se široko koriste u veterini; posebno učinkovit stafilokokni bakteriofag u liječenju mastitisa kod krava. Pripravci bakteriofaga propisuju se oralno za bolesti unutarnji organi ili lokalno, izravno na leziju. Djelovanje faga se očituje već 2-4 sata nakon unošenja (što je posebno važno u intenzivnoj njezi). Bakteriofagi prodiru u krv, limfu i izlučuju se kroz bubrege, sanirajući urinarni trakt.
Dakle, bakteriofagi koriste:
U veterini za:
prevencija i liječenje bakterijske bolesti ptice i životinje;
liječenje gnojno-upalnih bolesti sluznice očiju, usne šupljine;
prevencija gnojno-upalnih komplikacija kod opeklina, rana, kirurških intervencija;
U genetičkom inženjeringu:
za transdukciju - prirodni prijenos geni između bakterija;
kao vektori koji prenose dijelove DNA;
korištenjem faga moguće je konstruirati usmjerene promjene u genomu DNA domaćina;
U prehrambenoj industriji:
masovni agensi koji sadrže fage već obrađuju proizvode od mesa i peradi gotove za konzumaciju;
bakteriofagi se koriste u proizvodnji prehrambenih proizvoda od mesa, peradi, sireva, biljnih proizvoda i dr.;
CM. ZAKHARENKO, kandidat medicinskih znanosti, izvanredni profesor, Vojni medicinske akademije ih. CM. Kirov, Sankt Peterburg
Bakteriofagi su jedinstveni mikroorganizmi, na temelju kojih je po svojim svojstvima i svojstvima stvorena posebna skupina terapijskih i profilaktičkih pripravaka. Njihove temeljne radnje su prirodne fizioloških mehanizama interakcije između faga i bakterija omogućuju predviđanje beskrajne raznolikosti samih bakteriofaga i moguće načine njihove primjene. Kako se zbirke bakteriofaga budu širile, nedvojbeno će se pojaviti novi ciljni patogeni, a širit će se i raspon bolesti kod kojih se fagi mogu koristiti i kao monoterapija i kao dio složenih režima liječenja.
Da, koristiti polivalentni piobakteriofag Sextaphage u liječenju inficirane nekroze gušterače (Državna medicinska akademija u Permu nazvana po akademiku E.A. Wagneru) omogućio je brzo vraćanje glavnih parametara homeostaze i funkcija organa i sustava u bolesnika. Došlo je i do značajnog smanjenja broja postoperativne komplikacije I smrtni slučajevi: u skupini bolesnika liječenih standardnom terapijom mortalitet je bio 100%, dok je u skupini liječenih BF-om 16,6%.
Zbog neškodljivosti i reaktogenosti pripravaka BP moguće ih je koristiti u pedijatrijska praksa, uključujući i novorođenčad. Iskustvo regionalnog dječjeg Nižnji Novgoroda klinička bolnica, gdje su u razdoblju kompliciranja epidemiološke situacije, uz uobičajene protuepidemijske mjere, korišteni BP - Intesti-bakteriofag i BP Pseucfomonas aeruginosa. Pokazalo se 11 puta manje incidencije nozokomijalnih infekcija etiologije Pseudomonas aeruginosa visoka efikasnost BF aplikacije. BF pripravci mogu se propisati i za liječenje disbakterioze i poremećaja probavni sustav te spriječiti kolonizaciju sluznice gastrointestinalnog trakta oportunističkim bakterijama. Višekomponentni pripravci BF idealni su za trenutačno ublažavanje prvih znakova gastrointestinalnih tegoba.
Do danas tvrtka planira cijela linija prioritetna područja razvoja i proizvodnje terapeutskih i profilaktičkih bakteriofaga, koja su u korelaciji s novonastalim svjetskim trendovima. U izradi su i uvode se novi pripravci: razvijeni su BF protiv seracija i enterobakterija, radi se na stvaranju fagnog pripravka protiv Helicobacter pylori.
Samo jedan proizvođač ovih lijekova je NPO Microgen, prema izvješću zamjenika načelnika Odjela za znanost i inovativni razvoj Alla Lobastova, proizvodi više od 2 milijuna pakiranja godišnje. Nažalost, ideje mnogih liječnika o bakteriofazima daleko su od objektivnih. Malo ljudi zna da bakteriofagi aktivni protiv istog patogena mogu pripadati različitim porodicama, imati različite životne cikluse itd. Na primjer, bakteriofagi P. aeruginosa pripadaju porodicama Myoviridae, Podoviridae, Siphoviridae, životni ciklus ili umjereno. Različiti sojevi istog patogena mogu imati različitu osjetljivost na bakteriofage. Većina stručnjaka zna (čuo, netko koristio) za postojanje tekućine i tableta oblik doziranja terapijski i profilaktički pripravci bakteriofaga. Međutim, njihov raspon je znatno širi, što se može pripisati bezuvjetnim prednostima, posebice u kombinaciji s različitim načinima primjene (oralna primjena, klistiri, aplikacije, ispiranje rana i sluznica, unošenje u šupljine rane i dr.) . DO očite koristi tradicionalno se nazivaju bakteriofagi specifični utjecaj na prilično ograničenu populaciju bakterija, vremenski ograničenu egzistenciju (dok ne nestane ciljana populacija mikroorganizama), nepostojanje takvog nuspojave kao otrovne i alergijske reakcije, disbiotičke reakcije, itd. Ovi se lijekovi mogu koristiti u različitim oblicima dobne skupine i tijekom trudnoće. Bakteriofagi sami po sebi nisu značajni alergeni. Slučajevi netolerancije na pripravke bakteriofaga uglavnom su povezani s reakcijom na komponente hranjivog medija. Svi veliki proizvođači ove skupine lijekova teže maksimalnoj kvaliteti korištenih komponenti, što smanjuje vjerojatnost takvih reakcija. U kontekstu rastuće rezistencije na antibiotike, neki autori predlažu razmatranje bakteriofaga kao najbolje alternative antibioticima. Terapeutski i profilaktički pripravci bakteriofaga su koktel posebno odabranih kombinacija (kompleks poliklonskih visoko virulentnih bakterijski virusi, posebno odabran protiv najčešćih skupina patogena bakterijske infekcije) na temelju kolekcija faga proizvođača. Podružnice saveznog državnog unitarnog poduzeća NPO Microgen u Ufi, Permu i Nižnji Novgorod – moderni centri proizvodnju takvih lijekova. Mogućnost izrade prilagođenih patogeni mikroorganizmi terapijski i profilaktički pripravci bakteriofaga još je jedna velika prednost ove skupine pripravaka. Porast otpornosti bakterija na antimikrobne lijekove i česta polietiologija suvremenih zaraznih bolesti zahtijevaju kombiniranu antibiotsku terapiju (dva, tri, a ponekad i više antimikrobnih lijekova). Za odabir učinkovita shema terapije antibioticima, osim stvarne osjetljivosti bakterije na lijek, potrebno je voditi računa o dovoljnoj veliki brojčimbenici. Terapija fagom također ima određene prednosti u tom pogledu. S jedne strane, uporaba kombinacije bakteriofaga nije popraćena njihovom međusobnom interakcijom i ne dovodi do promjene u shemama njihove primjene. Unutar postojećeg skupa terapijskih bakteriofaga postoji niz dobro dokazanih kombinacija - bakteriofag koliproteus, piobakteriofag polivalentni, intesti-bakteriofag. S druge strane, bakterije ne uobičajeni mehanizmi otpornost na antibiotike i fage, stoga se mogu koristiti i kada je uzročnik otporan na jedan od lijekova, iu kombinaciji "antibiotik + bakteriofag". Ova kombinacija je posebno učinkovita za uništavanje mikrobnih biofilmova. Eksperiment to uvjerljivo pokazuje kombinirana primjena antagonisti željeza i bakteriofag mogu poremetiti stvaranje biofilma Klebsiella pneumoniae. Istodobno se primjećuje značajno smanjenje broja mikrobnih populacija i smanjenje broja "mladih" stanica. Još jedan važna značajka djelovanje bakteriofaga je takav fenomen kao indukcija apoptoze. Neki sojevi E. coli imaju gene koji uzrokuju smrt stanice nakon unošenja bakteriofaga T4 u nju. Dakle, kao odgovor na ekspresiju kasnih gena T4 faga, lit gen (kodira proteazu koja uništava faktor elongacije EF-Tu neophodan za sintezu proteina) blokira sintezu svih staničnih proteina. Gen prrC kodira nukleazu koja cijepa lizinsku tRNA. Nukleaza se aktivira produktom gena stp faga T4. U stanicama zaraženim fagom T4, geni rex (koji pripadaju genomu faga i izraženi su u lizogenim stanicama) uzrokuju stvaranje ionskih kanala, što dovodi do gubitka vitalnih iona u stanicama i, posljedično, do smrti. Sam fag T4 može spriječiti smrt stanice zatvarajući kanale svojim proteinima, produktima gena rII. U slučaju stvaranja bakterijske rezistencije na antibiotik, potrebno je tražiti nove mogućnosti za modificiranje aktivne molekule ili fundamentalno nove tvari. Nažalost, posljednjih godina tempo uvođenja novih antibiotika znatno je usporen. Situacija s bakteriofazima je bitno drugačija. Zbirke velikih proizvođača uključuju desetke gotovih sojeva bakteriofaga i stalno se nadopunjuju novim aktivnim fagima. Zahvaljujući stalnom praćenju osjetljivosti izoliranih patogena na bakteriofage, proizvođači prilagođavaju sastave faga koji se isporučuju u regije. Zahvaljujući prilagođenim bakteriofazima, moguće je eliminirati izbijanje bolničkih infekcija uzrokovanih sojevima rezistentnim na antibiotike. 
Na oralni unos bakteriofagi brzo dopiru do žarišta lokalizacije infekcije: kada ih pacijenti s gnojno-upalnim bolestima uzimaju oralno, nakon sat vremena fagi ulaze u krvotok, nakon 1-1,5 sati otkrivaju se iz bronhopulmonalnog eksudata i s površine opeklinskih rana, nakon 2 sati - iz urina, a također i iz cerebrospinalne tekućine pacijenata s traumatskom ozljedom mozga.
Dakle, bakteriofagi su jedinstveni mikroorganizmi, na temelju kojih je po svojstvima i svojstvima stvorena posebna skupina terapijskih i profilaktičkih pripravaka. Prirodni fiziološki mehanizmi interakcije između faga i bakterija na kojima se temelji njihovo djelovanje omogućuju predviđanje beskonačne raznolikosti samih bakteriofaga i mogućih načina njihove uporabe. Kako se zbirke bakteriofaga budu širile, nedvojbeno će se pojaviti novi ciljni patogeni, a širit će se i raspon bolesti kod kojih se fagi mogu koristiti i kao monoterapija i kao dio složenih režima liječenja. Suvremeni pogled na buduću sudbinu terapije fagima trebao bi se temeljiti kako na visokoj specifičnosti njihovog djelovanja tako i na potrebi da se strogo poštuju sva pravila terapije fagima. Kontrastiranje bakteriofaga s bilo kojim sredstvom etiotropne terapije je pogrešno.
Praktična primjena faga. Bakteriofagi se koriste u laboratorijskoj dijagnostici infekcija tijekom intraspecifične identifikacije bakterija, odnosno određivanja fagovara (tipa faga). Da bi se to postiglo, koristi se metoda tipizacije faga, koja se temelji na strogoj specifičnosti djelovanja faga: kapi raznih faga specifičnih za dijagnostički tip nanose se na čašicu s gustim hranjivim medijem zasijanim "travnjakom" čiste kulture. patogena. Fag fag bakterije određen je tipom faga koji je uzrokovao njezinu lizu (stvaranje sterilne mrlje, "plaka", ili "negativne kolonije", fag). Tehnikom fagotipizacije utvrđuje se izvor i putevi širenja infekcije (epidemiološko označavanje). Izolacija bakterija istog fagovara od različitih pacijenata ukazuje na zajednički izvor njihove infekcije.
Fagi se također koriste za liječenje i prevenciju niza bakterijskih infekcija. Oni proizvode tifus, salmonelu, dizenteriju, pseudomonas, stafilokokne, streptokokne fage i kombinirani pripravci(koliproteični, piobakteriofagi itd.). Bakteriofagi se propisuju prema indikacijama oralno, parenteralno ili lokalno u obliku tekućine, tableta, čepića ili aerosola.
Bakteriofagi se široko koriste u genetičkom inženjerstvu i biotehnologiji kao vektori za dobivanje rekombinantne DNA.
Pripravci bakteriofaga koji se koriste u praksi su filtrat bujonske kulture odgovarajućih mikroba liziranih fagom, koji sadrži žive čestice faga, kao i otopljene bakterijske antigene oslobođene iz bakterijskih stanica tijekom njihove lize. Dobiveni pripravak - tekući bakteriofag trebao bi izgledati potpuno bistra tekućina žuta boja većeg ili manjeg intenziteta.
Za terapeutske i profilaktičke svrhe fagi se mogu proizvoditi u obliku tableta s ovojnicom otpornom na kiseline. Tabletirani suhi fag je stabilniji tijekom skladištenja i praktičniji za upotrebu. Jedna tableta suhog bakteriofaga odgovara 20-25 ml tekućeg pripravka. Rok trajanja suhog i tekućeg pripravka je 1 godina. Tekući bakteriofag treba čuvati na temperaturi od + 2 +10 C, suho - ne više od +1 ° C, ali se može čuvati u hladnjaku i na negativnoj temperaturi.
Bakteriofag uzet oralno ostaje u tijelu 5-7 dana. U pravilu, uzimanje bakteriofaga nije popraćeno nikakvim reakcijama ili komplikacijama. Nema kontraindikacija za prijem. Koriste se u obliku ispiranja, ispiranja, losiona, tampona, injekcija, a također se ubrizgavaju u šupljine - trbušne, pleuralne, zglobne i mjehur, ovisno o mjestu uzročnika.
Dijagnostički fagi se proizvode u tekućem i suhom obliku u ampulama.Prije početka rada suhi bakteriofag se razrjeđuje. Ako je na ampulama naveden titar, tr, DRT (radna doza titra), koristi se u testu lizabilnosti faga (Otto metoda) za identifikaciju bakterija, ako je naveden tip faga, onda za fagotipizaciju - za određivanje izvora infekcije.
Djelovanje bakteriofaga na mikrobnu kulturu u tekućem mediju i na gustom mediju
Ottova metoda (padajuća kap)
Napravite gust travnjak za sjetvu proučavane kulture. 5-10 minuta nakon sjetve na osušenu površinu hranjivog medija nanosi se tekući dijagnostički fag. Posuda se lagano nagne kako bi se kapljica faga raširila po površini agara. Šalica se stavlja u termostat 18-24 sata. Rezultat se obračunava totalna odsutnost rast kulture na mjestu aplikacije kapljice faga.
Pokus na tekućoj hranjivoj podlozi
Obavite sjetvu proučavane kulture u dvije epruvete s tekućim medijem. Dijagnostički bakteriofag dodaje se u petlji u jednu epruvetu („O“). Nakon 18-20 sati u epruveti u koju nije dodan bakteriofag ("K"), opaža se snažno zamućenje bujona - zasijana kultura je narasla. Juha u epruveti, u koju je dodan bakteriofag, ostala je prozirna zbog lize kulture pod njegovim utjecajem.
Fagotipizacija bakterija
Prema spektru djelovanja razlikuju se sljedeći bakteriofagi: polivalentni, lizirajuće vrste bakterija; monovalentne, lizirajuće bakterije određena vrsta; tipične, lizirajuće pojedine vrste (varijante) bakterija.
Na primjer, jedan soj patogenog stafilokoka može lizirati nekoliko vrsta faga, tako da svi tipični fagi (24) i sojevi patogeni stafilokok grupirani u 4 grupe.
Metoda fagotipizacije ima veliki značaj za epidemiološka istraživanja, jer omogućuje prepoznavanje izvora i načina širenja uzročnika. U tu svrhu određuje se fagovar izoliran iz patološkog materijala. čista kultura na gustim hranjivim podlogama pomoću tipičnih dijagnostičkih faga.
Fagovar kulture mikroorganizama određen je tipom faga koji je uzrokovao njegovu lizu, a izolacija bakterija istog fagovara iz različitih subjekata ukazuje na izvor infekcije.
