Dizanteride bakteriyolojik araştırma. Dizanteri, amoebiasis ve balantidiasisin laboratuvar teşhisi

Dizanteri.

dizanteri - enfeksiyon vücudun genel zehirlenmesi, gevşek dışkı ve kalın bağırsağın mukoza zarının tuhaf bir lezyonu ile karakterizedir. Dünyada en sık görülen akut bağırsak hastalıklarından biridir. Hastalık eski zamanlardan beri "kanlı ishal" adı altında biliniyordu ancak doğasının farklı olduğu ortaya çıktı. 1875 yılında Rus bilim adamı Lesh, kanlı ishalli bir hastadan amip izole etti Entamoeba histolytica,Önümüzdeki 15 yıl içinde, amoebiasis adını koruyan bu hastalığın bağımsızlığı kuruldu. Uygun dizanteri etken maddeleri, cins içinde birleşmiş biyolojik olarak benzer büyük bir bakteri grubudur. Şigelta. Patojen ilk olarak 1888'de keşfedildi. A. Chantemes ve Vidal; 1891'de A.V. Grigoriev tarafından ve 1898'de tanımlandı. K. Shiga, hastadan elde edilen serumu kullanarak, dizanterili 34 hastada patojeni tanımladı ve sonunda bu bakterinin etiyolojik rolünü kanıtladı. Bununla birlikte, sonraki yıllarda, diğer dizanteri patojenleri keşfedildi: 1900'de. - S. Flexner, 1915'te. - K. Sonne, 1917'de. - K. Stutzer ve K. Schmitz, 1932'de. - J. Boyd, 1934'te - D. Büyük, 1943'te - A. Saks.

Şu anda cins Şigella 40'tan fazla serotip içerir. Hepsi, sporlar ve kapsüller oluşturmayan kısa hareketsiz gram-negatif çubuklardır, ki bunlar (sıradan ortamda iyi büyürler). besin ortamı, tek karbon kaynağı olarak sitrat içeren bir ortamda büyümeyin; H2S oluşturmaz, üreaz içermez; Voges-Proskauer reaksiyonu negatiftir; glikoz ve diğer bazı karbonhidratlar gazsız asit oluşturmak üzere fermente edilir (bazı biyotipler hariç). Shigella flexneri: S.manchester ve ewcastle); kural olarak, laktozu fermente etmeyin (Shigella Sonne hariç), adonit, inositol, jelatini sıvılaştırmaz, genellikle katalaz oluşturur, lizin dekarboksilaz ve fenilalanin deaminaz içermez. DNA'daki G+C içeriği %49-53 mol'dür. Shigella fakültatif anaeroblardır, büyüme için optimum sıcaklık 37 ° C'dir, 45 ° C'nin üzerinde büyümezler, ortamın optimum pH'ı 6.7-7.2'dir. Yoğun ortamdaki koloniler yuvarlak, dışbükey, yarı saydamdır; birleşme durumunda kaba R şeklinde koloniler oluşur. BCH üzerinde tek tip bulanıklık şeklinde büyüme, kaba formlar bir çökelti oluşturur. Shigella Sonne J4HO'nun yeni izole edilmiş kültürleri iki tip koloni oluşturur: küçük yuvarlak dışbükey (I fazı), büyük düz (Aşama 2). Koloninin doğası, Shigella Sonne'nin virülansını da belirleyen mm 120 MD ile plazmitin varlığına (I fazı) veya yokluğuna (II fazı) bağlıdır.

Shigella'da farklı özgüllükteki O-antijenleri bulundu: aile için ortak enterobakterigiller, jenerik, tür, grup ve tipe özgü ve ayrıca K-antijenleri; H antijenleri yoktur.

Sınıflandırma sadece gruba ve tipe özgü O-antijenlerini dikkate alır. Bu özelliklere göre, Şigella 4 alt gruba veya 4 türe bölünmüştür ve 44 serotip içerir. A alt grubunda (tür Shigella dizanteri) Mannitol fermente etmeyen Shigella dahildir. Tür, 12 serotip (1-12) içerir. Her stereotipin kendi spesifik tip antijeni vardır; serotipler ve diğer shigella türleri arasındaki antijenik ilişkiler zayıf bir şekilde ifade edilir. B alt grubuna (tip Shigella flexneri) genellikle mannitolü fermente eden shigella içerir. Bu türün Shigella'sı serolojik olarak birbirleriyle ilişkilidir: serotiplere (1-6) ayrıldıkları tipe özgü antijenler (I-VI) ve her serotipte farklı bileşimlerde bulunan grup antijenleri içerirler. ve hangi serotiplerin alt serotiplere ayrıldığına göre. Ek olarak, bu tür iki antijenik varyant içerir - tipik antijenlere sahip olmayan X ve Y, grup antijenleri setlerinde farklılık gösterir. serotip S.flexneri 6 subserotipleri yoktur ancak glukoz, mannitol ve dulsit fermantasyonunun özelliklerine göre 3 biyokimyasal tipe ayrılır.

C alt grubuna (tür Shlgella boydll) genellikle mannitolü fermente eden shigella içerir. Grubun üyeleri serolojik olarak birbirinden farklıdır. Türler içindeki antijenik ilişkiler zayıf bir şekilde ifade edilir. Tür, her biri kendi ana tip antijenine sahip 18 serotip (1-18) içerir.

D alt grubunda (tür Shlgella soneli Genellikle mannitolü fermente eden ve yavaş yavaş (24 saat inkübasyondan sonra ve daha sonra) laktoz ve sakarozu fermente edebilen Shigella'yı içeriyordu. görüş S. sonnei bir serotip içerir, ancak faz I ve II kolonilerinin kendi tip spesifik antijenleri vardır. Sonne's Shigella'nın tür içi sınıflandırması için iki yöntem önerilmiştir:

1) maltoz, ramnoz ve ksilozu fermente etme yeteneklerine göre 14 biyokimyasal tipe ve alt tipe ayırmak;

2) karşılık gelen bir dizi fajın duyarlılığına göre faj türlerine ayırma.

Bu tipleme yöntemleri esas olarak epidemiyolojik öneme sahiptir. Ek olarak, Sonne'nin shigella'sı ve Flexner'ın shigella'sı, spesifik kolikinleri sentezleme yeteneği (kolisinojenotipleme) ve bilinen kolikinlere duyarlılık (kolisinotipleme) ile aynı amaç için tiplemeye tabi tutulur. Shigella, J. Abbott ve R. Shannon, Shigella'nın önerilen tipik ve indikatör suşları setleri tarafından üretilen kolikinlerin tipini belirlemek ve Shigella'nın bilinen türler kolisinler bir dizi referans kolikinojenik suş kullanır P. Frederick.

direnç. Shigella, çevresel faktörlere karşı oldukça yüksek bir dirence sahiptir. Pamuklu kumaş ve kağıt üzerinde 30-36 gün, kuru dışkıda - 4-5 aya kadar, toprakta - 3-4 aya kadar, suda - 0,5 ile 3 ay arasında, meyve ve sebzelerde - yukarıya kadar hayatta kalırlar. süt ve süt ürünlerinde 2 üniteye kadar - birkaç haftaya kadar; 60 °C'de 15-20 dakika içinde ölürler.

Kloramin solüsyonlarına, aktif klora ve diğer dezenfektanlara karşı hassastır.

patojenite faktörleri. En önemli biyolojik özellik Patojenliklerini belirleyen Shigella - epitel hücrelerini istila etme, içlerinde çoğalma ve ölümlerine neden olma yeteneği. Bu etki, bir keratokonjonktival testi (bir Shigella kültürünün (2-3 milyar bakteri) bir kobayın alt göz kapağının altına girmesi, seröz-pürülan keratokonjonktivit gelişimine neden olur) ve ayrıca hücre enfeksiyonu ile tespit edilebilir. kültürler (sitotoksik etki) veya tavuk embriyoları (ölümleri) veya intranazal beyaz fareler (pnömoni gelişimi). Shigella'nın ana patojenite faktörleri üç gruba ayrılabilir:

1) mukoza zarının epiteli ile etkileşimi belirleyen faktörler;

2) makroorganizmanın hümoral ve hücresel savunma mekanizmalarına direnç ve Shigella'nın hücrelerinde çoğalma kabiliyetini sağlayan faktörler;

3) gerçek patolojik sürecin gelişimini belirleyen toksinler ve toksik ürünler üretme yeteneği.

İlk grup, yapışma ve kolonizasyon faktörlerini içerir: rolleri pili, dış zar proteinleri ve LPS tarafından oynanır. Yapışma ve kolonizasyon, mukus - nöraminidaz, hiyalüronidaz, müsinazı yok eden enzimler tarafından kolaylaştırılır. İkinci grup, Shigella'nın enterositlere nüfuz etmesini ve bunların içinde ve makrofajlarda sitotoksik ve (veya) enterotoksik bir etkinin eşzamanlı tezahürü ile üremelerini destekleyen istila faktörlerini içerir. Bu özellikler, m.m ile plazmitin genleri tarafından kontrol edilir. 140 MD (invazyona neden olan dış zar proteinlerinin sentezini kodlar) ve Shigella kromozomal genleri: ksr A (keratokonjonktivit'e neden olur), cyt (hücre yıkımından sorumlu) ve henüz tanımlanmamış diğer genler. Shigella'nın fagositozdan korunması, yüzey K-antijeni, antijenler 3, 4 ve lipopolisakkarit tarafından sağlanır. Ek olarak, Shigella endotoksin lipid A'nın bağışıklık bastırıcı bir etkisi vardır - bağışıklık hafıza hücrelerinin aktivitesini bastırır.

Patojenite faktörlerinin üçüncü grubu, sitotoksik özellikleri en belirgin olan Shigella - Shiga eksotoksinleri ve Shiga benzeri eksotoksinlerde (SLT-I ve SLT-II) bulunan endotoksin ve iki tip ekzotoksin içerir. S. dizanteri 1. Diğer serotiplerde de bulunan Shiga ve Shiga benzeri toksinler S. dizanteri, onlar da oluşur S.flexneri, S.sonnei, S.boydii, ETEC ve biraz salmonella. Bu toksinlerin sentezi, dönüştürücü fajların toksin genleri tarafından kontrol edilir. LT tipi enterotoksinler Flexner, Sonne ve Boyd Shigella'da bulunmuştur. İçlerinde LT sentezi, plazmit genleri tarafından kontrol edilir. Enterotoksin, adenilat siklazın aktivitesini uyarır ve diyare gelişiminden sorumludur. Shiga toksini veya nörotoksin, adenilat siklaz sistemi ile reaksiyona girmez, ancak doğrudan sitotoksik etkiye sahiptir. Shiga ve Shiga benzeri toksinler (SLT-I ve SLT-II) m.m.'ye sahiptir. -70 kD ve A ve B alt birimlerinden (5 özdeş küçük alt birimden sonuncusu) oluşur. Toksinlerin reseptörü hücre zarının glikolipididir.

Shigella Sonne'nin virülansı ayrıca m.m.'li plazmide de bağlıdır. 120 MD. Yedi tanesi virülans ile ilişkili olan yaklaşık 40 dış zar polipeptidinin sentezini kontrol eder. Shigella Sonne bu plazmit ile faz I koloniler oluşturur ve virülenttir. Plazmidi kaybeden kültürler, faz II kolonileri oluşturur ve virülans göstermez. m.m ile plazmitler 120-140 MD, Flexner ve Boyd Shigella'da bulundu. Shigella lipopolisakkarit güçlü bir endotoksindir.

Epidemiyolojinin özellikleri. Tek enfeksiyon kaynağı insandır. Doğada hiçbir hayvan dizanteriden muzdarip değildir. Deneysel koşullar altında dizanteri yalnızca maymunlarda yeniden üretilebilir. Enfeksiyon yöntemi fekal-oraldır. Bulaşma yolları - su (Shigella Flexner için baskın), gıda, özellikle önemli rol süt ve süt ürünlerine aittir (Shigella Sonne için baskın enfeksiyon yolu) ve temas-hane, özellikle türler için S. dizanteri.

Dizanteri epidemiyolojisinin bir özelliği, belirli bölgelerdeki patojenlerin tür kompozisyonunun yanı sıra Sonne biyotipleri ve Flexner serotiplerindeki değişikliktir. Örneğin, XX yüzyılın 30'lu yıllarının sonuna kadar, hisse S. dizanteri 1 tüm dizanteri vakalarının %30-40'ını oluşturuyordu ve daha sonra bu serotip daha az oluşmaya başladı ve neredeyse ortadan kayboldu. Ancak 1960'larda ve 1980'lerde S. dizanteri tarihsel arenada yeniden ortaya çıktı ve Orta Amerika, Orta Afrika ve Güney Asya'da (Hindistan, Pakistan, Bangladeş ve diğer ülkeler) üç hiperendemik odak oluşumuna yol açan bir dizi salgına neden oldu. Dizanteri patojenlerinin tür kompozisyonundaki değişikliğin nedenleri muhtemelen bir değişiklikle ilişkilidir. sürü bağışıklığı ve dizanteri bakterilerinin özelliklerinde bir değişiklik ile. Özellikle, dönüş S. dizanteri 1 ve dizanteri hiperendemik odaklarının oluşumuna neden olan geniş dağılımı, çoklu ilaç direncine ve virülans artışına neden olan plazmitlerin edinilmesiyle ilişkilidir.

Patogenez ve klinik özellikleri. Dizanteri için kuluçka süresi 2-5 gün, bazen bir günden kısadır. oluşum bulaşıcı odak dizanteriye neden olan ajanın nüfuz ettiği kalın bağırsağın (sigmoid ve rektum) inen kısmının mukoza zarında döngüseldir: yapışma, kolonizasyon, shigella'nın enterositlerin sitoplazmasına girmesi, hücre içi üreme, yıkım ve reddi epitel hücrelerinin, patojenlerin bağırsak lümenine salınması; bundan sonra, bir sonraki döngü başlar - yapışma, kolonizasyon, vb. Döngülerin yoğunluğu, mukoza zarının paryetal tabakasındaki patojenlerin konsantrasyonuna bağlıdır. Tekrarlanan döngülerin bir sonucu olarak, inflamatuar odak büyür, ortaya çıkan ülserler, bağlanma, maruziyeti artırır bağırsak duvarı dışkıda kan, mukopürülan topaklar, polimorfonükleer lökositler ortaya çıkar. Sitotoksinler (SLT-I ve SLT-II) hücre yıkımına, enterotoksin - ishale, endotoksinler - genel zehirlenmeye neden olur. Dizanteri kliniği büyük ölçüde patojen tarafından ne tür eksotoksinlerin üretildiği, alerjenik etkisinin derecesi ve bağışıklık durumu organizma. Bununla birlikte, dizanteri patogenezi ile ilgili birçok soru, özellikle: yaşamın ilk iki yılındaki çocuklarda dizanteri seyrinin özellikleri, akut dizanteriden kronik hale geçişin nedenleri, duyarlılığın önemi, mekanizma bağırsak mukozasının yerel bağışıklığının, vb. En tipik klinik bulgular dizanteri ishal görevi görür, sık dürtüler- Ağır vakalarda, günde 50 veya daha fazla kez, tenesmus (rektumun ağrılı spazmları) ve genel zehirlenme. Dışkının doğası, kalın bağırsağa verilen hasarın derecesine göre belirlenir. En şiddetli dizanteri neden olur S. dizanteri 1, en kolay - Sonne'nin dizanteri.

Enfeksiyon sonrası bağışıklık. Maymunlar üzerinde yapılan gözlemlerin gösterdiği gibi, dizanteri geçirdikten sonra, güçlü ve oldukça uzun süreli bir bağışıklık kalır. Antimikrobiyal antikorlar, antitoksinler, makrofajların ve T-lenfositlerin artan aktivitelerinden kaynaklanır. Önemli bir rol oynar yerel bağışıklık IgA'ların aracılık ettiği bağırsak mukozası. Bununla birlikte, bağışıklık doğası gereği türe özgüdür, güçlü çapraz bağışıklık oluşmaz.

Laboratuvar teşhisi . Ana yöntem bakteriyolojiktir. Çalışma için malzeme dışkıdır. Patojen izolasyon şeması: İzole kolonileri izole etmek için Endo ve Ploskirev ayırıcı tanı besiyerinde aşılama (zenginleştirme besiyerinde paralel olarak, ardından Endo ve Ploskirev besiyerinde aşılama), saf kültür, biyokimyasal özelliklerinin incelenmesi ve ikincisini dikkate alarak, polivalent ve monovalent tanı aglütinasyon serumları kullanılarak tanımlama. Aşağıdaki ticari serumlar üretilmektedir:

1. Mannitolü fermente etmeyen Shigella'ya: S.dysenteriae 1 ila 2 S. dizanteri 3-7(çok değerlikli ve tek değerli), S. dizenteriae 8-12(çok değerlikli ve tek değerli).

2. Shigella mannitolü fermente etmek için:

tipik antijenlere S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

antijenleri gruplandırmak S.flexneri 3, 4, 6,7,8- çok değerlikli,

antijenlere S.boydii 1-18(çok değerlikli ve tek değerli),

antijenlere S. sonnei I faz, II faz,

antijenlere S.flexneri I-VI+ S.sonnei- çok değerlikli.

Kandaki antijenleri saptamak için (MSK'nın bir parçası olarak dahil), idrar ve dışkı kullanılabilir aşağıdaki yöntemler: RPHA, RSK, pıhtılaşma reaksiyonu (idrar ve dışkıda), IFM, RPHA (kan serumunda). Bu yöntemler oldukça etkili, spesifik ve erken teşhis için uygundur.

Serolojik tanı için kullanılabilir: RPHA ile uygun eritrosit teşhisi, immünofloresan yöntemi (dolaylı modifikasyonda), Coombs yöntemi (eksik antikorların titresinin belirlenmesi). tanı değeri ayrıca dizanteri ile alerjik bir testi vardır (Shigella Flexner ve Sonne'nin protein fraksiyonlarının bir çözeltisi). Reaksiyon 24 saat sonra dikkate alınır, 10-20 mm çapında hiperemi ve infiltrasyon varlığında pozitif kabul edilir.

Tedavi. Odak normale dönmek su-tuz metabolizması, rasyonel beslenme, detoksifikasyon, rasyonel antibiyotik tedavisi (patojenin antibiyotiklere duyarlılığı dikkate alınarak). iyi etki polivalan dizanterik bakteriyofajın, özellikle fajları gastrik HCl'nin etkisinden koruyan pektin kaplamalı tabletlerin erken kullanımını sağlar; içinde ince bağırsak pektin çözülür, fajlar salınır ve etkisini gösterir. Profilaktik amaçlar için, faj en az üç günde bir (bağırsakta hayatta kalma süresi) verilmelidir.

Özel önleme sorunu. oluşturmak için yapay bağışıklık dizanteriye karşı çeşitli aşılar kullanıldı: öldürülen bakterilerden, kimyasallardan, alkolden, ancak hepsinin etkisiz olduğu ve durdurulduğu ortaya çıktı. Flexner dizanterisine karşı aşılar canlı (mutant, streptomisine bağımlı) Shigella Flexner'dan oluşturulmuştur; ribozomal aşılar, ama onlar da bulamadılar geniş uygulama. Bu nedenle, dizanteriyi spesifik olarak önleme sorunu çözülmemiştir. Dizanteri ile mücadelenin ana yolu, su temini ve kanalizasyon sistemini iyileştirmek, gıda işletmelerinde, özellikle süt endüstrisinde, çocuk bakım tesislerinde, halka açık yerlerde ve kişisel hijyende katı sıhhi ve hijyenik rejimler sağlamaktır.

Kolera mikrobiyolojisi

WHO, kolera'yı Vibrio cholerae enfeksiyonundan kaynaklanan akut, şiddetli, dehidrate pirinç suyu ishali ile karakterize bir hastalık olarak tanımlar. Geniş salgın yayılımı için belirgin bir yetenek ile karakterize edilmesi nedeniyle, şiddetli seyir ve yüksek ölüm oranı, kolera en tehlikeli enfeksiyonlardan biridir.

Kolera'nın tarihi anavatanı Hindistan, daha doğrusu, çok eski zamanlardan beri var olduğu Ganj ve Brahmaputra nehirlerinin (şimdi Doğu Hindistan ve Bangladeş) deltasıdır (bu bölgede kolera salgınları o zamandan beri gözlenmiştir). 500 yıl M.Ö.). Kolera'nın endemik odağının uzun süredir burada bulunması birçok nedenden dolayı açıklanmaktadır. Vibrio cholerae sadece suda uzun süre kalmakla kalmaz, aynı zamanda uygun koşullar altında - +12 ° C'nin üzerindeki sıcaklıklar, organik maddelerin varlığı ile çoğalır. Tüm bu koşullar Hindistan'da mevcuttur - tropik bir iklim (ortalama yıllık sıcaklık +25 +29 °С'ye kadar), yağış bolluğu ve bataklık, yüksek yoğunlukluözellikle Ganj Deltası'ndaki nüfus, çok sayıda sudaki organik madde, yıl boyunca sürekli su kirliliği kanalizasyon ve dışkı, düşük maddi yaşam standardı ve nüfusun kendine özgü dini ve dini ayinleri.

Kolera etkeni titreşimli kolera 1883 yılında açılmıştır. Bununla birlikte, R. Koch tarafından beşinci pandemi sırasında, ilk kez, 1854'te ishalli hastaların dışkısında vibrio keşfedildi. F. Patsini.

V. kolera aileye ait vibrionaceae, birkaç cins içeren (Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas, Photobacterium). cins titreşim 1985'ten beri 25'ten fazla tür, bunlardan en yüksek değer bir kişi için V.cholerae, V.parahaemolyticus, V.alginolyticus, dnificus ve V.fluvialis.

Cinsin temel özellikleri titreşim : kısa, spor ve kapsül oluşturmayan, eğri veya düz gram negatif çubuklar, 0,5 µm çapında, 1,5-3,0 µm uzunluğunda, hareketli ( V. kolera- monotrik, bazı türlerde iki veya daha fazla polar flagella); sıradan ortamlarda, kemoorganotroflarda, karbonhidratları gazsız asit oluşumuyla fermente ederek iyi ve hızlı bir şekilde büyürler (glikoz, Embden-Meyerhof yolu boyunca fermente edilir). Oksidaz pozitif, indol oluşturur, nitratları nitritlere indirger (V.cholerae pozitif nitrozo-indol reaksiyonu verir), jelatini parçalar, sıklıkla pozitif bir Voges-Proskauer reaksiyonu verir (yani asetilmetilkarbinol oluşturur), üreaz içermez, H S oluşturmaz. lisin ve ornitin dekarboksilazları vardır, ancak argininleri yoktur dihidrolazlar.

Vibrio cholerae, besin ortamına karşı çok iddiasız. %0.5-1.0 NaCl içeren %1 alkali (pH 8.6-9.0) pepton su (PV) üzerinde iyi ve hızlı çoğalır, diğer bakterilerin büyümesini geride bırakır. Proteus'un büyümesini bastırmak için, potasyum tellürit %4 ila %1 (PV) eklenmesi tavsiye edilir (nihai seyreltme 1:100.000). %1 PV, V. cholerae için en iyi zenginleştirme ortamıdır. Büyüme sırasında, 6-8 saat sonra, HP'nin yüzeyinde, çalkalandığında kolayca tahrip olan ve pul şeklinde dibe düşen, HP'nin yüzeyinde hassas, gevşek grimsi bir film oluşturur, HP orta derecede bulutlu hale gelir. Vibrio cholerae'yi izole etmek için çeşitli seçici ortamlar önerilmiştir: alkalin ağar, yumurta sarısı-tuz ağarı, alkalin albüminat, kanlı alkali ağar, laktoz-sakaroz ve diğer ortamlar. En iyi besiyeri TCBS (tiyosülfat sitrat-bromotimol sukroz agar) ve modifikasyonlarıdır. Bununla birlikte, Vibrio cholerae'nin üzerinde mavimsi bir renk tonu ile pürüzsüz, camsı-şeffaf, viskoz bir kıvamda disk şeklinde koloniler oluşturduğu alkalin MPA en sık kullanılır.

Bir jelatin kolonuna enjeksiyonla ekim yaparken, 22-23 ° C'de 2 gün sonra, vibrio yüzeyden bir kabarcık şeklinde sıvılaşmaya, daha sonra huni şeklinde ve son olarak katman katman sıvılaşmaya neden olur.

Sütte vibrio hızla çoğalır, 24-48 saat sonra pıhtılaşmaya neden olur ve ardından süt peptonizasyonu meydana gelir ve 3-4 gün sonra sütün pH'ının asit tarafına kayması nedeniyle vibrio ölür.

B. Heiberg, mannoz, sakaroz ve arabinozu fermente etme yeteneğine göre, tüm vibrioları (kolera ve kolera benzeri) şimdi sayısı 8 olan bir dizi gruba dağıttı. Vibrio cholerae, Heiberg'in ilk grubuna aittir.

Morfolojik, kültürel ve biyokimyasal özellikler bakımından koleraya benzeyen vibriolar farklı şekilde adlandırılmış ve adlandırılmıştır: paracholera, kolera benzeri, NAG vibrios (aglutine olmayan vibrios); 01 grubuna ait olmayan vibriolar. İkinci isim, kolera vibrio ile ilişkilerini en doğru şekilde vurgular. A. Gardner ve K. Venkatraman tarafından belirlendiği gibi, kolera ve kolera benzeri vibriolar ortak bir H-antijenine sahiptir, ancak O-antijenlerinde farklıdır. O-antijenine göre, kolera ve kolera benzeri vibriolar şu anda 139 O-serogrubuna bölünmüştür, ancak sayıları sürekli olarak yenilenmektedir. Vibrio cholerae, 01 grubuna aittir. Üç serotipin ayırt edildiği ortak bir A antijenine ve iki tip spesifik antijene - B ve C'ye sahiptir. V. kolera- Ogawa serotipi (AB), Inaba serotipi (AC) ve Gikoshima serotipi (ABC). Ayrışma aşamasındaki Vibrio cholerae bir VEYA antijenine sahiptir. Bu sebeple kimlik tespiti için V. kolera O-serum, OR-serum ve tipe özgü Inaba ve Ogawa serumları kullanılır.

patojenite faktörleri V. kolera :

1. Hareketlilik.

2. Kemotaksis. Bu özelliklerin yardımıyla vibrio, mukoza tabakasının üstesinden gelir ve epitel hücreleri ile etkileşime girer. Che" mutantlarında (kemotaksis yeteneğini kaybetmiş) virülans keskin bir şekilde azalır. Mot" mutantlarında (hareket kabiliyetini kaybetmiş) virülans ya tamamen kaybolur ya da 100-1000 kat azalır.

3. Vibrio'nun mikrovillilere yapıştığı ve ince bağırsağın mukoza zarını kolonize ettiği yapışma ve kolonizasyon faktörleri.

4. Enzimler: müsinaz, proteazlar, nöraminidaz, lesitinaz, vb.

Mukusu oluşturan maddeleri yok ettikleri için yapışmayı ve kolonizasyonu teşvik ederler. Epitelyal glikoproteinlerden sialik asidi ayıran nöraminidaz, vibriolar için bir "iniş" platformu oluşturur. Ayrıca tri- ve disialogangliosidleri kollerojen reseptörü olarak görev yapan monosialogangliosid Gm b'ye modifiye ederek kollerojen reseptörlerinin sayısını arttırır.

5. Patojenitenin ana faktörü V. kolera kolera patogenezini belirleyen bir ekzotoksin-kolerojendir. Kollerojen molekülü m.m.'ye sahiptir. 84 kD ve iki fragmandan oluşur - A ve B. Fragman A, iki peptitten oluşur - A1 ve A2 - ve kolera toksininin spesifik özelliğine sahiptir. Fragman B 5 özdeş alt birimden oluşur ve iki işlevi yerine getirir: 1) enterositin reseptörünü (monosialoganglioside) tanır ve ona bağlanır;

2) alt birim A'nın geçişi için bir intramembran hidrofobik kanal oluşturur. Peptid A2Sl, A ve B fragmanlarını bağlamaya hizmet eder. Peptid A t, kendi toksik işlevini yerine getirir. NAD ile etkileşime girer, hidrolizine neden olur, ortaya çıkan ADP-riboz, adenilat siklazın düzenleyici alt birimine bağlanır. Bu, GTP hidrolizinin inhibisyonuna yol açar. Ortaya çıkan kompleks GTP + adenilat siklaz, cAMP oluşumu ile ATP hidrolizine neden olur. (cAMP birikiminin başka bir yolu, cAMP'yi 5-AMP'ye hidrolize eden enzimin kolerojen tarafından baskılanmasıdır).

6. Kollerojene ek olarak Vibrio cholerae, kılcal geçirgenliği artıran bir faktörü sentezler ve salgılar.

7. V. cholerae'de, özellikle LT, ST ve SLT tiplerinde başka eksotoksinler de bulunmuştur.

8. Endotoksin. lipopolisakkarit V. kolera güçlü bir endotoksik özelliğe sahiptir. Vücudun genel zehirlenmesinden ve kusmadan sorumludur. Endotoksine karşı oluşturulan antikorların belirgin bir vibriosidal etkisi vardır (kompleman varlığında vibrioları çözer) ve enfeksiyon sonrası ve aşılama sonrası bağışıklığın önemli bir bileşenidir.

01 grubuna ait olmayan vibrioların insanlarda sporadik veya grup ishalli hastalıklara neden olma yeteneği, sırasıyla adenilat veya guanilat siklaz sistemlerini uyaran LT veya ST tipi enterotoksinlerin varlığı ile ilişkilidir.

kollerojen sentezi - en önemli mülk V. kolera. Kollerojenin A ve B parçalarının sentezini kontrol eden genler, vctAB veya ctxB operonunda birleştirilir; vibrio kromozomu üzerinde bulunurlar. Vibrio cholerae'nin bazı suşlarında bu tür iki ardışık olmayan operon bulunur. Operonun işlevi iki düzenleyici gen tarafından kontrol edilir. ToxR geni pozitif kontrol sağlar; bu gendeki mutasyonlar toksin üretiminde 1000 kat azalmaya yol açar. Htx geni negatif bir kontroldür; bu gendeki mutasyonlar toksin üretimini 3-7 kat arttırır.

Kollerojeni tespit etmek için aşağıdaki yöntemler kullanılabilir:

1. Tavşanlar üzerinde biyolojik testler. Emici tavşanlara (2 haftadan fazla olmayan) bağırsak içi kolera vibrios uygulaması ile, tipik bir kollerojenik sendrom geliştirirler: ishal, dehidrasyon ve tavşanın ölümü. Otopside - mide damarlarının keskin bir enjeksiyonu ve ince
bağırsaklar, bazen içinde berrak bir sıvı birikir. Ancak kalın bağırsaktaki değişiklikler özellikle karakteristiktir - büyütülür ve pullar ve gaz kabarcıkları ile tamamen şeffaf, saman renginde bir sıvıyla doludur. Yetişkin tavşanlarda ince bağırsağın bağlı bölgesine V. cholerae enjekte edildiğinde, süt emen tavşanların enfeksiyonu durumunda kalın bağırsaktaki aynı değişiklikler not edilir.

2. Kollerojenin immünofloresan veya enzim immünoanaliz yöntemleri veya pasif immün hemoliz reaksiyonu kullanılarak doğrudan tespiti (kolerojen, eritrositlerin Gm1'ine bağlanır ve antitoksik antikorlar ve tamamlayıcı eklendiğinde bunlar parçalanır).

3. Hücre kültürlerinde hücresel adenilat siklazın uyarılması.

4. Bir kromozom parçasının DNA probu olarak kullanılması V. kolera, taşıyıcı operonkolerojen.

Yedinci pandemi sırasında suşlar izole edildi V. koleraİle birlikte değişen dereceler virülans: kollerojenik (virülent), hafif cholerojenik (düşük virülans) ve kollerojenik olmayan (virülent olmayan). Kollerojenik olmayan V. kolera, kural olarak hemolitik aktiviteye sahiptirler, kolera tanısal faj 5 (HDF-5) tarafından parçalanmazlar ve insan hastalığına neden olmazlar.

Faj yazmak için V. kolera(içermek V.eltor) S. Mukherjee, daha sonra Rusya'da diğer fajlarla desteklenen karşılık gelen faj setleri önerdi. Bu tür fajlar (1-7) kümesi, aralarında ayrım yapmayı mümkün kılar. V. kolera 16 faj türü. HDF-3, Vibrio cholerae'yi seçici olarak lize eder klasik tip, HDF-4 - El Tor vibrios ve HDF-5, her iki tipte de yalnızca kollerojenik (virülent) vibrioları lize eder ve kollerojenik olmayan vibrioları lize etmez.

Vibrio cholerogens, kural olarak, hemolitik aktiviteye sahip değildir, HDF-5 tarafından parçalanır ve insanlarda koleraya neden olur.

kolera patojenlerinin direnci. Vibrio cholerae düşük sıcaklıklarda iyi hayatta kalır: 1 aya kadar buzda yaşayabilirler; deniz suyunda - 47 güne kadar, nehir suyunda - 3-5 günden birkaç haftaya kadar, kaynatılmış maden suyu 1 yıldan fazla, toprakta - 8 günden 3 aya kadar, taze dışkıda - 3 güne kadar, haşlanmış gıdalarda (pirinç, erişte, et, tahıllar, vb.) 2-5 gün, çiğ olarak hayatta kalır sebzelerde - 2- 4 gün, meyvelerde - 1-2 gün, süt ve süt ürünlerinde - 5 gün; soğukta saklandığında, hayatta kalma süresi 1-3 gün artar: dışkı ile kirlenmiş çamaşırlarda 2 güne kadar ve ıslak malzemede - bir hafta. 80 ° C'de vibrio cholerae, 100 ° C'de 5 dakika sonra ölür - anında; asitlere karşı oldukça hassas; kloramin ve diğer dezenfektanların etkisi altında 5-15 dakika içinde ölür. Kurumaya ve doğrudan harekete duyarlıdırlar. Güneş ışınları, ancak iyi ve uzun süre korunurlar ve hatta alkali pH'a ve 10-12 ° C'nin üzerinde bir sıcaklığa sahip organik maddelerden zengin atık sularda ve açık rezervuarlarda çoğalırlar. Klora karşı son derece hassas: 30 dakika içinde 0,3-0,4 mg / l su dozunda aktif klor, kolera vibrio'dan güvenilir dezenfeksiyona neden olur.

Epidemiyolojinin özellikleri. Ana enfeksiyon kaynağı sadece bir kişidir - bir kolera hastası veya bir vibrio taşıyıcısı ve ayrıca bunlarla kirlenmiş su. Doğada hiçbir hayvan kolera hastalığına yakalanmaz. Enfeksiyon yöntemi fekal-oraldır. Enfeksiyon yolları: a) ana - içme, banyo ve ev ihtiyaçları için kullanılan sular; b) ev içi iletişim ve c) gıda yoluyla. Tüm büyük kolera salgınları ve pandemileri su niteliğindeydi. Vibrio cholerae, popülasyonlarının hem insan vücudunda hem de açık su kütlelerinin belirli ekosistemlerinde varlığını sağlayan böyle uyarlanabilir mekanizmalara sahiptir. Vibrio cholerae'nin neden olduğu aşırı ishal, rakip bakterilerin bağırsak temizliğine yol açar ve patojenin, başta kanalizasyon ve açık su olmak üzere, çevreye atıldığı geniş bir alana yayılmasına katkıda bulunur. Koleralı bir kişi patojeni içine atar. büyük sayı- 1 ml dışkı başına 100 milyondan 1 milyara kadar, vibrio taşıyıcı 1 ml başına 100-100.000 vibrio salıyor, enfekte edici doz yaklaşık 1 milyon vibrio. Vibrio cholerae'nın sağlıklı taşıyıcılarda izolasyon süresi 7 ila 42 gün, hasta olanlarda 7-10 gündür. Daha uzun bir sürüm son derece nadirdir.

Kolera'nın bir özelliği, ondan sonra, kural olarak, uzun süreli taşıma olmaması ve kalıcı endemik odakların oluşmamasıdır. Bununla birlikte, daha önce de belirtildiği gibi, açık su kütlelerinin büyük miktarda içeren atık sularla kirlenmesi nedeniyle, organik madde, deterjanlar ve sofra tuzu, yaz aylarında, içlerindeki kolera vibrio sadece uzun süre hayatta kalmaz, hatta çoğalır.

Büyük epidemiyolojik öneme sahip olan, hem toksik olmayan hem de toksijenik olan 01 grubunun vibrio cholerae'sinin çeşitli koşullarda uzun süre devam edebilmesidir. su ekosistemleri ekilmemiş formlar şeklinde. Çeşitli su kütlelerinde BDT'nin bir dizi endemik bölgesinde negatif bakteriyolojik çalışmalarla bir polimeraz zincir reaksiyonu yardımıyla, ekilmemiş formların veteriner genleri bulundu. V. kolera.

Kolera hastalıkları durumunda, önde gelen ve belirleyici olanın aktif olduğu bir dizi anti-salgın önlem gerçekleştirilir. zamanında algılama ve akut ve akut durumdaki hastaların izolasyonu (hastaneye yatış, tedavi) atipik form ve sağlıklı vibrio taşıyıcılar; enfeksiyonu yaymanın olası yollarını önlemek için önlemler alınmaktadır; su teminine özel önem verilir (klorlama içme suyu), gıda işletmelerinde, çocuk kurumlarında, halka açık yerlerde sıhhi ve hijyenik rejime uygunluk; açık su kütleleri üzerinde bakteriyolojik kontrol de dahil olmak üzere sıkı kontrol yapılır, nüfusun aşılanması yapılır, vb.

Patogenez ve klinik özellikleri. Kolera için kuluçka süresi kaymaz saatten 6 güne, çoğu zaman 2-3 güne kadar değişir. İnce bağırsağın lümenine girdikten sonra, mukus zarına hareketlilik ve kemotaksis nedeniyle Vibrio cholerae mukusa gönderilir. Vibrio, nüfuz etmek için bir dizi enzim üretir: nöraminidaz, müsinaz, proteazlar, lesitinaz, bazıları mukusta bulunan maddeleri yok eder ve vibrioların epitel hücrelerine hareketini kolaylaştırır. Yapışma ile vibriolar epitelin glikokaliksine bağlanır ve hareketliliğini kaybederek yoğun bir şekilde çoğalmaya başlar, ince bağırsağın mikrovillilerini kolonize eder ve aynı zamanda büyük miktarda eksotoksin-kolerojen üretir. Kollerojen molekülleri monosialogangliosid Gm1'e bağlanır ve hücre zarına nüfuz eder, adenilat siklaz sistemini aktive eder ve biriken cAMP, enterositlerden sıvı, katyon ve anyon Na + , HCO 3 ~, K + , SG'nin aşırı salgılanmasına neden olarak kolera ishaline yol açar, dehidrasyon ve tuzdan arındırma organizması. Hastalığın seyrinin üç türü vardır:

1. hastanın birkaç saat içinde ölümüne yol açan şiddetli, şiddetli dehidrate edici ishal hastalığı;

2. daha az şiddetli veya dehidrasyon olmaksızın ishal;

3. hastalığın asemptomatik seyri (vibrio taşıyıcı).

Şiddetli kolerada hastalarda ishal görülür, dışkı daha sık hale gelir, dışkı giderek daha bol olur, sulu bir karakter alır, dışkı kokusunu kaybeder ve pirinç suyuna benzer (içinde yüzen mukus kalıntıları ve epitel hücreleri olan bulanık sıvı). Daha sonra zayıflatıcı kusma önce bağırsak içeriğiyle birleşir ve ardından kusmuk pirinç suyu şeklini alır. Hastanın ateşi normalin altına düşer, cilt siyanotik, kırışık ve soğuk - kolera algid hale gelir. Dehidrasyon sonucunda kan kalınlaşır, siyanoz gelişir, oksijen açlığı, böbrek fonksiyonu keskin bir şekilde acı çeker, kasılmalar ortaya çıkar, hasta bilincini kaybeder ve ölüm meydana gelir. Yedinci pandemi sırasında kolera mortalitesi gelişmiş ülkelerde %1,5'ten gelişmekte olan ülkelerde %50'ye kadar değişmekteydi.

Enfeksiyon sonrası bağışıklık dayanıklı, uzun süreli, tekrarlayan hastalıklar nadirdir. Bağışıklık, antikorlar (antitoksinler, antimikrobiyal antikorlardan daha uzun süre kalıcıdır), bağışıklık hafıza hücreleri ve fagositler nedeniyle antitoksik ve antimikrobiyaldir.

Laboratuvar teşhisi. Ana ve belirleyici yöntem Kolera tanısı bakteriyolojiktir. Hastadan araştırma materyali dışkı ve kusmuktur; dışkı vibrio taşıma açısından incelenir; koleradan ölen kişilerde, araştırma için ince bağırsağın ve safra kesesinin bağlı bir bölümü alınır; Dış ortamın nesnelerinden, açık rezervuarlardan gelen su ve atık su en çok incelenir.

Bakteriyolojik bir çalışma yürütürken, aşağıdaki üç koşula uyulmalıdır:

1) hastadan materyali mümkün olan en kısa sürede aşılamak (kolera vibrio dışkıda devam eder) kısa dönem);

2) Malzemenin alındığı kaplar, Vibrio cholerae çok hassas olduğundan kimyasallarla dezenfekte edilmemeli ve eser miktarda içermemelidir;

3) başkalarının kontaminasyon ve enfeksiyon olasılığını ortadan kaldırın.

olduğu durumlarda V. kolera 01 grupları değil, diğer serogruplardan uygun aglütinasyon serumları kullanılarak yazılmalıdır. İshalli bir hastadan taburcu (kolera benzeri dahil) V. kolera 01-olmayan grup, izolasyon durumunda olduğu gibi aynı anti-salgın önlemleri gerektirir V. kolera 01-gruplar. Gerekirse, bir DNA probu kullanılarak izole edilmiş vibrio cholerae'da kollerojen sentezleme yeteneği veya kollerojen genlerinin varlığı, yöntemlerden biri ile belirlenir.

Kolera'nın serolojik teşhisi yardımcı niteliktedir. Bu amaçla, bir aglütinasyon reaksiyonu kullanılabilir, ancak vibriocidal antikorların veya antitoksinlerin titresini belirlemek daha iyidir (kolerojene karşı antikorlar, enzim immünoassay veya immünofloresan yöntemleri ile belirlenir).

Tedavi kolera hastaları öncelikle rehidrasyon ve normal su-tuz metabolizmasının restorasyonundan oluşmalıdır. Bu amaçla, örneğin aşağıdaki bileşime sahip tuzlu su çözeltilerinin kullanılması tavsiye edilir: NaCl - 3.5; NaHC03 - 2.5; KS1 - 1.5 ve glikoz - 1 litre su için 20.0 g. Akılcı antibiyotik tedavisi ile kombinasyon halinde bu tür patogenetik olarak doğrulanmış tedavi, koleradaki mortaliteyi %1 veya daha azına indirebilir.

özel profilaksi. Yapay bağışıklık oluşturmak için, öldürülen Inaba ve Ogawa suşlarından alınanlar da dahil olmak üzere çeşitli aşılar önerilmiştir; deri altı kullanım ve enteral kimyasal bivalan aşı için cholerogen toksoid, sos

DİZENTERİ, AMEBİAZİS VE BALANTİDİAZİS LABORATUVAR TEŞHİSİ

Modern koşullarda, bazı durumlarda veya genellikle belirsiz semptomlarla ortaya çıkan küçük fokal bağırsak hastalıkları salgınlarında, laboratuvar araştırma yöntemleri büyük pratik öneme sahiptir.

Teşhis amacıyla yürütülen araştırmalar, yerleşik önerilere sıkı sıkıya bağlı kalınarak ve mümkün olduğunca erken yapılmalıdır.

Toplamak dışkı araştırma için, dezenfektan kalıntıları içermeyen temiz tabaklara (gece vazoları, sürgüler) konur; araştırma için malzeme sigmoidoskopi sırasında tamponlarla rektal mukozadan alınır.

Teşhisin bakteriyolojik olarak doğrulanması için, antibiyotik ve sülfonamidlerle tedaviden önce dizanterili hastalardan dışkı almak ve bu ilaçlarla tedaviden sonra bakteriyotaşıyıcıyı belirlemek daha iyidir.

Petri kaplarına ekim, malzeme alındıktan hemen sonra yapılmalıdır.

Her şeyden önce, dışkının makroskopik bir incelemesi yapılır, ancak bunlar şunları tespit edebilir: yiyecek artıkları - et parçaları, yağ artıkları, gübre ve patolojik safsızlıklar - topaklar şeklinde viskoz bir kıvamda mukus (dizanteride şeffaf değil ve amebiasiste şeffaf); dizanteride değişmeyen kan ve ülseratif lezyon farklı bir etiyolojiye sahip kolonun alt kısmı ve amoebiasis, balantidiasis ile değişen bir renk (“ahududu jölesi”); irin şiddetli uzun süreli dizanteri formlarında tespit edilir.

Dışkıların mikroskobik incelemesi, kan, amip, balantidia ve bunların kistlerinin hücresel elementlerini tespit etmek için kullanılır. Doğal preparasyon şu şekilde hazırlanır: bir cam slayta bir parça dışkı ve yanına bir damla izotonik sodyum klorür çözeltisi uygulanır, karıştırılır ve bir lamel ile kaplanır. Protozoonları boyamak için Lugol çözeltisi kullanılır.

Kanın hücresel elementlerini ayırt etmek için müstahzarlar Romanovsky-Giemsa boyası veya azure-eozin ile muamele edilir. Dizanteride, mukustan hazırlanan bir preparat birçok nötrofilik granülosit (tüm hücresel elementlerin %90'ından fazlası), tekli eozinofilik granülositler (eozinofiller) ve farklı miktar eritrositler; amebiasis ile, birkaç hücresel element vardır, bunların ana kütlesi, piknotik bir çekirdeğe ve dar bir protoplazma kenarına sahip değiştirilmiş hücrelerdir. Eozinofilik granülositleri ve Charcot-Leiden kristallerini bulun.

Amipin (Entamoeba histolytica) boyanmamış bir preparasyondaki doku formları renksizdir, hareketlidir (psödopodia yardımıyla), uzamış halde 50-60 mikrona ulaşır, genellikle eritrositli endoplazmada ve periferde bulunurlar - çekirdek. Hücrede eritrositlerin varlığı, Entamoeba histolutica'yı patojenik olmayan formlardan (E. hartmani, E. coli.) ayırt etmeyi mümkün kılar.

Amipin yarı saydam formu daha küçüktür (20 mikrona kadar), aktif değildir ve eritrosit içermez. Daha küçük kistler (10-12 mikron), yuvarlak biçimde, hareketsiz; gelişimin erken aşamalarında, 2 çekirdek ve olgun olanlar içerirler - 4. Lugol çözeltisi ile boyanmış müstahzarlarda, amip çekirdekleri ve kistleri açık kahverengidir (Şekil 6).

Balantidia(Balantidium coli) - bazen 200 mikron uzunluğa ve 50-70 mikron çapa ulaşan büyük siliatlar, kirpiklerin varlığından dolayı hareketli, ağız (peristom) ve anüs (sitopigus) açıklıkları vardır. Endoplazmada büyük (makronükleos) ve küçük (mikronükleos) çekirdekler, vakuoller, yakalanan eritrositler görülebilir. Balantidia kistleri hareketsiz, yuvarlak, 50-60 μm çapında, iki konturlu bir membrana sahiptir, içlerinde makronükleos ve vakuoller bulunur (Şekil 7).

Basilli dizanteride dışkının bakteriyolojik muayenesi en iyi dışkılamadan kısa bir süre sonra yapılırken, dışkının son kısımlarından malzeme (mukus ve irin) almanız gerekir. Test materyali elektif besiyerli (Ploskirev, Ploskirev + levomycetin, Levin) Petri kapları üzerinde bir ilmek ile aşılanır ve 18-24 saat +37 °C sıcaklıkta bir termostata yerleştirilir. Ertesi gün şüpheli (renksiz) koloniler Ressel besiyerinde alt kültürlenir ve test tüpleri bir gün boyunca +370 C sıcaklıkta bir termostata yerleştirilir. Üçüncü gün, saf bir kültür aldıktan sonra, mikroskopi ve hareketlilik çalışması için yaymalar hazırlanır (shigella hareketsizdir) . Aglütinasyon reaksiyonunu camın üzerine tipe özgü serumlarla koydular, önce sera ile bölgede hakim olan tiplere karşı koydular ve ardından belirlemek için "alacalı" bir sıraya yerleştirdiler ve tohumladılar. biyokimyasal özellikler seçilmiş kültür

Dizanteriye neden olan ajanlar laktozu ve sükrozu fermente etmez (Sonne hariç), glikozu ayrıştırmaz (asite), hidrojen sülfit oluşturmaz.

Bakteriyolojik muayenede son cevap 5. günde verilir. Bazen patojenin atipik suşları, aglutinabilitesini kaybetmiş kültürler ve diğer özellikler izole edilir. Bu gibi durumlarda çalışmalar daha uzun süre devam eder.

Ayrıca hızlandırılmış bakteriyolojik yöntemler de vardır - çalışmanın başlangıcından 18-20 saat sonra Petri kaplarından şüpheli kolonileri Ressel besiyerli 2 test tüpüne yeniden tohumlamak (%1 laktoz ve %0.1 glukozlu slant agar - bir ve %1 sakarozda ve % 0.1 mannitol - diğerinde). 4 saat sonra, smearlerin hazırlandığı, Gram'a göre boyandığı, mobilitenin incelendiği ve bölgedeki en yaygın patojenlere karşı serum ile yaklaşık bir aglütinasyon reaksiyonunun ayarlandığı kolonilerin büyümesi zaten görünebilir. Böylece, zaten ikinci günde bir ön cevap verebilirsiniz. Nihai cevap, "alacalı" sıradaki ekim sonuçları ve ayrıntılı bir aglütinasyon reaksiyonu dikkate alındıktan sonra üçüncü günde verilir.

Dizanteri patojenlerinin aşılanması her zaman aynı değildir, birçok faktöre bağlıdır - araştırma için malzeme alma yöntemi, ortam kalitesi ve biri birim dışkı hacmi başına patojen sayısı olan diğer nedenlerle. Bir gram dışkıda en az yüz milyonlarca mikrobiyal cismin bulunduğu durumlarda dizanteriye neden olan ajanların ekildiği kanıtlanmıştır. AT nadir durumlar dizanteriye neden olan ajanı kandan izole etmek mümkündür.

Bir lüminesan mikroskop, florokromlu spesifik serumların varlığında, öğrencilere antikorların doğrudan floresan yöntemi gösterilir.

Hastanın kan serumu ve teşhisleri ile bir aglütinasyon reaksiyonu üretmek de mümkündür, ancak dizanterili hastalarda antikor titreleri düşüktür ve ayrıca paraaglütinasyon fenomenleriyle sıklıkla karşılaşılır, bu da elde edilmesini zorlaştırır. güvenilir sonuçlar. Dolaylı hemaglütinasyonun (IHA) standart eritrosit tanıları ile reaksiyonu daha hassastır. yardımcı yöntem araştırma, oluşan papülün boyutuna göre 24 saat sonra dikkate alınan D. A. Tsuverkalov'a göre dizanteri ile intradermal alerjik bir testtir.

28 numaralı uygulamalı ders için öğrenciler için metodolojik talimatlar.

Ders konusu:

Hedef: Mikrobiyolojik teşhis, etiyotropik tedavi ve shigellozun önlenmesi yöntemlerinin incelenmesi.

Modül 2 . Özel, klinik ve ekolojik mikrobiyoloji.

Konu 5: Dizanteri mikrobiyolojik tanı yöntemleri.

Konunun alaka düzeyi:Şigelloz her yerde bulunur ve sıhhi kültür seviyesinin düşük olduğu ve yetersiz beslenme ve yetersiz beslenme insidansının yüksek olduğu ülkelerde ciddi bir sorun teşkil eder. Gelişmekte olan ülkelerde, enfeksiyonun yayılması, yetersiz temizlik, kötü kişisel hijyen, aşırı kalabalık ve nüfustaki çocukların büyük bir kısmı tarafından desteklenmektedir. Ukrayna'da, shigelloz salgınları, arka planda kapalı gruplarda daha yaygındır. düşük seviyeörneğin kreşlerde ve anaokullarında, turist teknelerinde, psikiyatri kliniklerinde veya engelli barınaklarında sanitasyon ve hijyen. Shigella, gezginlerin ve turistlerin ishali nedeni olmuştur.

Grup hastalıklarının nedeni, shigella taşıyıcısı olan ticaret işçilerinin ihmali ile bulaşan gıda ürünlerinin kullanımı olarak düşünülebilir. İçme suyu kullanımıyla ilgili salgınlar var ve kirli rezervuarlarda yüzmek de enfeksiyona yol açtı. Bununla birlikte, gıda ve su bulaşma yollarının, şigellozun yayılmasında, genellikle hastalık gerektiren kolera ve tifo ateşine kıyasla daha küçük bir rol oynadığı görülmektedir. büyük dozlar patojenler. Hastalığın yayılmasının ağırlıklı olarak kişiden kişiye olduğu gelişmekte olan ülkelerde, taşıyıcılar bulaşıcı ajanın önemli bir rezervuarı olabilir. Antibakteriyel ilaç almamış hastalarda feçeste shigella dökülmesi genellikle 14 hafta sürer, ancak vakaların küçük bir kısmında çok daha uzun sürer.

Shigelloz, dört Shigella türünden birinin neden olduğu bağırsağın akut bir bakteriyel enfeksiyonudur. Enfeksiyonun klinik formlarının spektrumu, hafif, sulu ishalden karın krampları, tenesmus, ateş ve genel zehirlenme belirtileri ile karakterize şiddetli dizanteriye kadar uzanır.

etiyoloji.

Enterobacteriaceae familyasının Shigella cinsi (adını 1898'de ayrıntılı olarak inceleyen ve A.V. Grigoriev tarafından bakteriyel dizanteriye neden olan izole etkeni tanımlayan K. Shiga'dan almıştır) bir grup yakından ilişkili bakteri türünden oluşur. aşağıdaki özellikler:

BEN. Morfolojik: shigella - küçük çubuklar yuvarlak uçlu. Flagella (hareketsiz) yokluğunda Enterobacteriaceae ailesinin diğer temsilcilerinden farklıdırlar, sporları ve kapsülleri yoktur ve gram negatiftirler.

II. Kültürel: shigella aeroblar veya fakültatif anaeroblardır; optimum yetiştirme koşulları sıcaklık 37°C, pH 7.2-7.4. 1.52 mm büyüklüğünde küçük, parlak, yarı saydam, grimsi, yuvarlak koloniler şeklinde basit besin ortamları (MPA, MPB) üzerinde büyürler. S biçim. İstisna, genellikle ayrışan, büyük, düz, bulutlu, pürüzlü kenarlı koloniler oluşturan Sonne'nin Shigella'sıdır. R formlar (koloniler “üzüm yaprağı” gibi görünür). Sıvı besin ortamında, Shigella homojen bir bulanıklık verir, R formlar bir çökelti oluşturur. Zenginleştirme sıvı ortamı selenit suyudur.

III. enzimatik: saf bir kültürün izolasyonunda shigella'nın tanımlanması için gerekli olan ana biyokimyasal özellikler şunlardır:

1. glikoz fermantasyonu sırasında gaz oluşumunun olmaması;
2. hidrojen sülfür üretimi yok;
3. 48 saat içinde laktoz fermantasyonu olmaz.

Toplamda, dört tür ayrıca yaklaşık 40 serotipe bölünmüştür. Ana somatik (O) antijenlerin ve biyokimyasal özelliklerin özelliklerine göre, aşağıdaki dört tür veya grup ayırt edilir: S. dysenteriae (grup A, şunları içerir: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri (Grup B), S. boydii (Grup C) ve S. sonnei (Grup D).

Mannitol ile ilgili olarak, tüm shigella, bölme (Flexner, Boyd, Sonne shigella) ve bölünmeyen (Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs shigella) mannitol olarak ayrılır.

IV. Patojenik faktörler:

1. plazmit istilasıshigella'nın kolon mukozasının epitelinde müteakip hücreler arası yayılma ve üreme ile istilaya neden olma kabiliyetini sağlar;
2. toksin oluşumu: Shigella, Enterobacteriaceae familyasının diğer üyelerinin endotoksinlerine kimyasal ve biyokimyasal olarak benzeyen lipopolisakkarit endotoksine sahiptir. Ayrıca S. dysenteriae tip I (Shiga basili) bir ekzotoksin üretir. İkincisinin keşfinden bu yana, enterotoksin aktivitesine sahip olduğu ve bağırsak salgılanmasına neden olabileceği, ayrıca bağırsak epitel hücrelerine karşı sitotoksik bir etkiye sahip olduğu tespit edilmiştir; render nörotoksik etkiŞigellozlu çocuklarda görülür. Kana giren Shiga toksini, submukozal endotel hasarı ile birlikte böbreğin glomerüllerini de etkiler, bunun sonucunda kanlı ishalin yanı sıra böbrek yetmezliği gelişimi ile hemolitik üremik sendrom gelişir.

V. Antijenik yapı:Tüm Shigella, yapılarına bağlı olarak serovarlara bölündükleri somatik bir O-antijenine sahiptir.

VI. Direnç: Sıcaklık 100 0 C, shigella'yı anında öldürür. Shigella, düşük sıcaklıklara dayanıklıdır. nehir suyu sebze ve meyvelerde 3 aya kadar saklanırlar - 15 aya kadar.Uygun koşullar altında, shigella gıda ürünlerinde (salatalar, salata sosu, haşlanmış et, kıyma, haşlanmış balık, süt ve süt ürünleri, kompostolar ve jöle), özellikle sonne shigella'da çoğalabilir.

Epidemiyoloji.

1. Enfeksiyon kaynağı:Akut ve kronik shigelloz formlarından muzdarip bir kişi; bakteriyotaşıyıcı.

2. İletim yolları:

• Yiyecek (özellikle S. sonnei için)
• Sucul (esas olarak S. flexneri için)
• Evle iletişim kurun (esas olarak S. dysenteriae için)

3. Giriş kapısıenfeksiyon servisi gastrointestinal sistem.

Patogenez ve patolojik değişiklikler.

Bir kez alındığında, Shigella kolonize olur. üst bölümler ince bağırsak ve orada çoğalır, muhtemelen sekresyonun artmasına neden olur erken aşama enfeksiyonlar. Shigella daha sonra M hücrelerinden submukozaya nüfuz eder ve burada makrofajlar tarafından yutulur. Bu, shigella'nın bir kısmının ölümüne yol açar ve submukozada iltihabı başlatan enflamatuar aracıların salınmasına neden olur. Fagositlerin apoptozu, Shigella'nın başka bir bölümünün hayatta kalmasına ve mukozanın epitel hücrelerine nüfuz etmesine izin verir. bazal membran. Enterositlerin içinde, shigella çoğalır ve hücreler arası yayılır, bu da erozyonların gelişmesine neden olur. Shigella öldüğünde, eylemi zehirlenmeye yol açan shiga ve shiga benzeri toksinler salınır. Mukoza zarının yenilgisine, dışkıda kanın ortaya çıkmasına neden olan şişlik, nekroz ve kanama eşlik eder. Ek olarak, toksin merkezi sinir sistemini etkiler ve bu da trofik bozukluklara yol açar.

Klinik bulgular.

Şigellozun klinik belirtilerinin spektrumu, hafif diyareden kramplı karın ağrısı, tenesmus, ateş ve genel zehirlenme ile şiddetli dizanteriye kadar çok geniştir.

Kuluçka süresibirkaç saatten 7 güne kadar değişir, çoğu zaman 2-3 gündür.Başlangıçta, hastaların sulu dışkı, ateş (41 ° C'ye kadar), karında yaygın ağrı, bulantı ve kusma. Bununla birlikte hastalar kas ağrısı, titreme, sırt ağrısı ve baş ağrısı. Hastalığın başlangıcından sonraki günlerde dizanteri belirtileri ortaya çıkıyor - tenesmus, sık, yetersiz, kanlı mukuslu dışkı. Vücut ısısı giderek azalır, ağrı karnın alt kadranlarında lokalize olabilir. İshalin yoğunluğu, hastalığın 1. haftasının sonunda maksimuma ulaşır. Kanlı dışkı ile dizanteri daha yaygındır ve neden olduğu hastalıkta daha erken ortaya çıkar. S. dizanteri diğer shigelloz formlarından daha tip I.

Şigelloz Sonne için hastalığın daha hafif seyri karakteristiktir (gastroenterik veya gastroenterokolit varyantı). Ateşli dönem daha kısadır, zehirlenmenin etkileri kısa ömürlüdür ve bağırsak mukozasında yıkıcı değişiklikler tipik değildir.

Şigelloz FlexnerTemel olarak, klinik seyrin iki çeşidi karakteristiktir - gastroenterokolit ve kolit.

Şigellozda bağırsak dışı komplikasyonlarnadir:

1. Şigellozun bir komplikasyonu, bağırsak disbakteriyozunun gelişimi olabilir.
2. Baş ağrısı ile birlikte menenjit ve konvülsif nöbet belirtileri olabilir.
3. S. dysenteriae tip I enfeksiyonunda periferik nöropati vakaları tanımlanmıştır ve bir S. boydii gastroenterit salgını sırasında Guillain-Barré sendromu (polinörit) vakaları bildirilmiştir.
4. Distrofiden muzdarip çocuklar dışında, patojenin hematojen yayılımı nispeten nadirdir ve şigelloz apsesi ve menenjit vakaları da tanımlanmıştır.
5. Şigelloz ile artrit, steril konjonktivit ve üretrit ile Reiter sendromunun gelişimi mümkündür, bu genellikle hastalarda ishalin başlangıcından 1-4 hafta sonra ortaya çıkar.
6. Çocuklarda shigelloza, sıklıkla lösemi benzeri reaksiyonlar, şiddetli kolit ve dolaşımdaki endotoksin ile ilişkili hemolitik üremik sendrom eşlik eder, ancak bakteriyemi genellikle saptanmaz.
7. Çok nadiren, pürülan keratokonjonktivit, kontamine parmaklarla kendi kendine enfeksiyon sonucu göze giren shigelladan kaynaklanır.
8. Hipovolemik şok ve DIC.
9. Peritonit, bağırsak kangreni, bağırsak kanaması.

bağışıklık: İnsanlar shigelloza karşı doğal bir dirence sahiptir. Sonrasında geçmiş hastalık bağışıklık stabil değildir ve şigellozdan sonra Sonne pratikte yoktur. Shigella Grigoriev Shigi'nin neden olduğu bir hastalık ile daha kararlı bir antitoksik bağışıklık geliştirilir. Enfeksiyona karşı korunmada ana rol salgı organına aittir. IgA , salgı ile birlikte, intraepitelyal lenfositlerin yapışmasını ve sitotoksik antikora bağımlı aktivitesini önleme IgA shigella'yı öldür.

Teşhis ve laboratuvar araştırmaları.

Bu çalışmanın amacı: teşhis için shigella'nın tespiti ve tanımlanması; bakteri taşıyıcılarının tespiti; gıdalarda shigella tespiti.

Araştırma materyali: dışkı, kesit malzemesi, gıda maddeleri.

Teşhis yöntemleri:mikrobiyolojik (bakteriyolojik, mikroskobik (lüminesan); serolojik; biyolojik; alerji testi.

Araştırma ilerlemesi:

1 günlük eğitim:Kültürler taze dışkıdan veya rektal sürüntü (rektal tüp) kullanılarak yapılmalıdır; uygun koşulların olmaması durumunda, malzeme bir nakliye ortamına yerleştirilmelidir. Bunun için enterik agar (MacConkey veya Shigella-Salmonella besiyeri), orta derecede seçici ksiloz-lisin-deoksikolat agar, KLD) ve besin suyu (selenit suyu) kullanılmalıdır. Toplama ve aşılama arasındaki süre 2 saati aşarsa, koruyucu solüsyonlar kullanılmalıdır: %20 safra suyu, kombine Kauffmann besiyeri.

• Gliserin karışımındaki dışkılar emülsiyon haline getirilir, ortama bir damla emülsiyon uygulanır ve bir spatula ile ovalanır. Shigella için diferansiyel ortam, Ploskirev, Endo ve EMS ortamıdır (eozinmetilen mavi agar). Ploskirev ortamı (ortamın bileşimi şunları içerir: MPA, laktoz, tuzlar safra asitleri ve parlak yeşil gösterge) Shigella için de seçmeli bir ortamdır, çünkü Escherichia coli'nin büyümesini engeller.
• Doğrudan ekime paralel toplanan malzeme zenginleştirme ortamına ekilir - selenit suyu.
• Tüm mahsuller bir termostata yerleştirilir.

Çalışmanın 2. Günü:

• Kaplar termostattan çıkarılır, şüpheli koloniler Ressel besiyeri (agar-agar, Andrede indikatörü, %1 laktoz, %0.1 glikoz içeren besin ortamı) ve mannitol üzerinde taranır. Ekim, eğimli bir yüzeye vuruşlar ve bir agar kolonuna enjeksiyon ile yapılır. İnoküle edilmiş Ressel besiyeri 18-24 saat süreyle bir termostata yerleştirilir (paralel olarak selenit besiyerinden ayırıcı tanı ortamına yeniden tohumlama yapılır).
• Smear (Gram boyama), mikroskop yapın.
• "Asılı" veya "ezilmiş" damla hazırlıkları hazırlayın.
• Çok değerlikli diagnostik shigellosis serumu ile gösterge niteliğindeki RA beyanı.
• Agar eğiminde şüpheli koloniler ekiyor.

Çalışmanın 3. Günü:

• Agar slant materyalinin mikroskopisi.
• Ressel besiyerinde laktozu fermente etmeyen kültürler daha fazla çalışmaya tabi tutulur: yaymalar yapılır (Gram boyama), kültür saflığı kontrol edilir. Gram-negatif çubukların varlığında, Hiss besiyerinde, gösterge kağıtlı et suyu (indol ve hidrojen sülfürü tespit etmek için) ve turnusol sütünde aşılama yapılır.
• Aşılanmış ortam, 18-24 saat boyunca bir termostata yerleştirilir.

Çalışmanın 4. Günü:

• Kısa bir "alacalı seri" için muhasebe.
• Shigella'ya karşı enzimatik ve kültürel özelliklerinden şüphelenilen kültürler serolojik tanımlamaya tabi tutulur. Cam üzerinde RA ifadesi (tipik ve grup tanı serumu). Dağıtılan RA'yı ayarlama.

Olarak hızlandırılmış yöntemlerŞigelloz için kullanılırFloresan mikroskobu ve biyolojik örnek(Gine domuzlarının konjonktivitinin konjonktival kesesine (alt göz kapağının altında) virülan Shigella suşlarının girmesi 1. günün sonunda konjonktivit gelişir).

Alerjik test Zuverkalovdizanteri ile intradermal alerjik test (sızma ve hiperemi durumunda önkol pozitif reaksiyonunda 0.1 ml dizanteri girişi). Alerjik teşhis şu anda pratik olarak kullanılmamaktadır. Tsurvekalov'un testi özgüllük açısından farklılık göstermez, pozitif reaksiyonlar sadece şigellozda değil, aynı zamanda salmonelloz, escherichiosis, yersiniosis ve diğer akut bağırsak enfeksiyonlarında ve bazen sağlıklı kişilerde kaydedilir.

Tedavi ve önleme.Bakteriyofaj, epidemiyolojik endikasyonlara göre tedavi ve korunma için kullanılır. oral uygulama, antibiyotiklerin antibiyogramı belirlendikten sonra; disbacteriosis durumunda mikrofloranın düzeltilmesi için probiyotik preparatları. Sıvı ve elektrolit kaybını yenilemek için - içeride bir glikoz-elektrolit çözeltisinin tanıtılması.

Özel hedefler:

Şigelloz patojenlerinin biyolojik özelliklerini yorumlar.

Shigella'nın sınıflandırmasını öğrenin.

Shigella'nın neden olduğu bulaşıcı sürecin patojenetik modellerini yorumlamayı öğrenin.

Mikrobiyolojik teşhis, etiyotropik tedavi ve şigellozun önlenmesi yöntemlerini belirlemek.

Yapabilmek:

• Test materyalini besin ortamına aşılayın.
  • Smear ve Gram boyama hazırlayın.
  • Bir daldırma mikroskobu kullanarak preparatların mikroskopisini yapın.
  • Shigella'nın morfolojik, kültürel, enzimatik özelliklerini analiz eder.

Teorik sorular:

1. Şigelloz patojenlerinin özellikleri. biyolojik özellikler.

2. Shigella'nın sınıflandırılması. Temel ilkeler.

3. Epidemiyoloji, patogenez ve klinik özelliklerşigelloz.

4. Laboratuvar teşhisi.

5. Şigellozun tedavi ve önlenmesi ilkeleri.

Sınıfta gerçekleştirilen pratik görevler:

1. Şigelloz patojenlerinin saf kültürlerinden gösteri preparatlarının mikroskopisi.

2. Şigellozun bakteriyolojik teşhisi üzerinde çalışın: Ploskirev'in besiyerinde dışkı kültürlerinin incelenmesi.

3. İndol oluşumunu ve H2'yi belirlemek için Ressel besiyerinde ve BCH'de şüpheli kolonilerin alt kültürü 2 S .

4. Ders protokolünde gösteri hazırlıklarının taslağı ve shigellozun mikrobiyolojik teşhisi şeması.

5. Protokolün kaydı.

Edebiyat:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Tıbbi mikrobiyoloji, immünoloji ve viroloji / Tıp üniversiteleri için ders kitabı, St. Petersburg "Özel Edebiyat", 1998. - 592p.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiyoloji / Ders Kitabı.-2. baskı, gözden geçirilmiş. Ve ek - M.: Tıp, 1983, -512s.

3. Pyatkin K.D. Krivoshein Yu.S. Viroloji ve immünoloji ile mikrobiyoloji.- Kiev: In and shcha okulu, 1992. - 431'ler.

4. Tıbbi mikrobiyoloji / Editör V.I. Pokrovski.-M.: GEOTAR-MED, 2001.-768s.

5. Kılavuz uygulamalı eğitim mikrobiyoloji, immünoloji ve virolojide. Ed. MP Zikov. M. "Tıp". 1977. 288 s.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiyoloji. / Ed. F.K. Çerkes. M.: Tıp, 1986. 512 s.

7. Ders notları.

Ek literatür:

1. Makiyarov K.A. Mikrobiyoloji, viroloji ve immünoloji. Alma-Ata, "Kazakistan", 1974. 372 s.

2. Titov M.V. Bulaşıcı hastalıklar. - K., 1995. 321'ler.

3. Shuvalova E.P. bulaşıcı hastalıklar. - M.: Tıp, 1990. - 559 s.

4. BME, Cilt 1, 2, 7.

5. Pavloviç S.A. Grafiklerde tıbbi mikrobiyoloji: Proc. tıbbi ödenek yoldaş. Mn.: Vysh. okul, 1986. 255 s.

Kısa bilgi yönergeler pratik oturumda çalışmak için.

Dersin başında öğrencilerin derse hazırlık düzeyi kontrol edilir.

Bağımsız çalışma, shigella sınıflandırmasını incelemek, patojenetik şemayı analiz etmek ve klinik işaretlerşigelloz. Şigellozun laboratuvar teşhis yöntemlerinin incelenmesi. Öğrenciler, besin ortamlarına biyomateryal ekimini gerçekleştirir. Daha sonra mikropreparasyonlar hazırlanır, Gram'a göre boyanır, mikroskopi yapılır, mikropreparasyonlar çizilir ve gerekli açıklamalar yapılır. Bağımsız çalışmanın bileşimi ayrıca gösteri hazırlıklarının mikroskopisini ve ders protokolünde eskizlerini içerir.

Dersin sonunda, her öğrencinin bağımsız çalışmasının nihai sonuçlarının bir test kontrolü ve analizi gerçekleştirilir.

Pratik dersin teknolojik haritası.

p/n	Aşamalar	Dakika cinsinden süre	öğrenme yolları	Teçhizat	Konum
	Ders için ilk hazırlık seviyesini kontrol etme ve düzeltme		Test görevleri temel	tablolar, atlas	çalışma odası
	Bağımsız iş		Mantıksal Yapı Grafiği	Daldırma mikroskobu, boyalar, cam slaytlar, bakteriyolojik döngüler, besleyici ortam, Ploskirev ortamı, Ressel ortamı, "alacalı Hiss serisi"
	Kendi kendine kontrol ve malzemede ustalaşmanın düzeltilmesi		Hedeflenen öğrenme görevleri
	Test kontrolü		testler
	İş sonuçlarının analizi

Hedeflenen öğrenme görevleri:

1. Mukus ve irin içeren akut bağırsak enfeksiyonu olan bir çocuktan (dışkı toplama rektal tüp ile gerçekleştirildi) dışkı alındı. Hangi hızlı tanı yöntemi kullanılmalıdır?

A. ELISA.

b. KAYALIK.

C. RA.

D. RSK.

E. DEA.

1. Dizanteri etkeni, akut bağırsak enfeksiyonu olan hasta bir çocuktan izole edildi. Ne tür morfolojik özellikler patojenin özelliği?

A . Gram negatif hareketsiz çubuk.

B . Gram pozitif hareketli çubuk.

C . Besin ortamında bir kapsül oluşturur.

D . Dış ortamda sporlar oluşturur.

E . Gram pozitif streptobasiller.

3. Üç gün önce hastalanan ve 38°C ateş, karın ağrısı, sık sık şikayet eden bir hasta sıvı dışkı, dışkıda kan varlığı, doktor klinik olarak teşhis koydu basilli dizanteri. Bu durumda hangi mikrobiyolojik tanı yöntemi kullanılmalı ve tanıyı doğrulamak için hastadan hangi materyal alınmalıdır?

A. Bakteriyoskopik kal.

B. Bakteriyolojik kal.

C. Bakteriyoskopik kan.

D. Bakteriyolojik idrar.

E. Serolojik kan.

4. Shigella Sonne hastanın dışkısından izole edildi. Ne yapılması gerekiyor ek araştırma enfeksiyonun kaynağını belirlemek için?

A . İzole edilmiş saf kültürün faj tiplemesini gerçekleştirin.

B . Antibiyogramı belirleyin.

C . Yağış reaksiyonunu ayarlayın.

D . Tamamlayıcı sabitleme reaksiyonunu ayarlayın.

E . Bir nötralizasyon reaksiyonu kurun.

5. Gölden su içen turist grubundan (27 kişi) iki gün sonra 7 kişide semptom gelişti akut ishal. Etiyolojiyi oluşturmak için hangi materyal Bu hastalık laboratuvara gönderilmelidir?

A. Su, hastaların dışkısı.

B. Su, hastaların kanı.

C. Gıda ürünleri.

D. İdrar.

E. Balgam.

6. Akut bağırsak enfeksiyonları için mikroskobik tanı yönteminin önemli bir dezavantajı, ailenin bakterilerinin morfolojik kimliği nedeniyle yetersiz bilgi içeriğidir. enterobakterigiller . Bu yöntemi daha bilgilendirici yapan nedir?

A . Radyoimmunoassay.

B . Coombs reaksiyonu.

C . Bağlantılı immünosorbent tahlili.

D . opsonizasyon reaksiyonu.

E . İmmünofloresan reaksiyonu.

7. 29 yaşında hasta kusma, ishal ve tenesmus nöbetleri ile hastaneye kaldırıldı. Mukus parçaları ve kan karışımı olan dışkı. Ploskirev'in besiyerindeki kolonilerden bakterilerin bakteriyolojik incelemesi, laktozu fermente etmeyen hareketsiz, gram negatif çubukları ortaya çıkardı. Enfeksiyöz sürecin nedensel ajanını adlandırın.

A. Shigella flexneri.

b. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. Mikrobiyoloji laboratuvarına akut bir hastalığa neden olduğundan şüphelenilen bir marul teslim edildi. bağırsak enfeksiyonu. Birincil aşılama için hangi besin ortamı kullanılır?

A . Sarısı-tuz ağarı, MPB.

b. MPA, MPB.

C . Selenit suyu, Endo, Ploskireva.

D . Karaciğer suyu, Roux orta.

E . Kanlı agar, alkali agar.

9. Kıyma mikrobiyolojik çalışmasında Shigella cinsine ait bakteriler izole edilmiştir. Mikropların hangi özelliklerinin incelenmesi böyle bir sonuca yol açtı?

A . Kültürel, tentür.

B . Antijenik, kültürel.

C . Sakkarolitik, proteolitik.

D . Antijenik, immünojenik.

E . Morfolojik, antijenik.

10. Ne zaman mikroskobik muayene akut barsak enfeksiyonu semptomları olan bir hastadan alınan kusmukta, hareketsiz çubuklar bulundu. Bakteri motilitesi hangi yayma veya preparasyonda incelenebilir?

A . Gram boyanmış bir yaymada.

B . Tsil - Nelsen'e göre boyanmış bir yaymada.

C . Hazırlıkta "kalın damla".

D . Neisser lekeli bir yaymada.

E . Hazırlıkta "ezilmiş damla".

algoritma laboratuvar işi:

1. Shigella'nın biyolojik özelliklerinin incelenmesi.

2. Shigella'nın sınıflandırılması ile tanışma.

3. Şigellozun patojenetik ve klinik belirtileri şemasının analizi.

4. Şigellozun laboratuvar teşhis yöntemlerinin incelenmesi.

5. Şigellozun tedavisinin ve önlenmesinin temel ilkelerinin incelenmesi.

1. Bakteri kültüründen sabit preparatların hazırlanması.
2. Boyama mikro hazırlıklar Gram tarafından.
3. Mikropreparasyonların mikroskopisiİle birlikte daldırma mikroskobu kullanarak, ders protokolünde analizleri ve eskizleri.
4. Mi Shigella'nın saf kültürlerinden elde edilen gösteri preparatlarının kromoskopisi ve analizi.
5. Protokolde shigellozun laboratuvar teşhisinin gösterim hazırlıklarının ve şemasının taslağı.
6. Protokolün formülasyonu.

Dizanteri - bu, kan, irin ve mukus salınımı ile ishalin eşlik ettiği ağrılı bir enfeksiyondur, karın ağrısı ve kolonun baskın bir lezyonu ile ortaya çıkan genel zehirlenme semptomlarının neden olduğu farklı şekiller tür Şigella(dizanteri bakterileri).

dizanteri etkeni departmana ait Gracilicutes, aile enterobakterigiller, tür Şigella.
Dizanteri , aranan Shigella dizanteri, diğer Shigella'nın neden olduğu hastalıklardan daha şiddetlidir, çünkü bağırsak iltihabına neden olan endotoksine ek olarak, bu tür bakteriler bir nörotoksin görevi gören güçlü bir ekzotoksin üretir.

Bakteriyel dizanteri veya shigelloz, cinsin bakterilerinin neden olduğu bulaşıcı bir hastalıktır. Şigella,

Dizanteri.Morfoloji ve tentür özellikleri.
Shigella - yuvarlak uçlu gram negatif çubuklar, 2-3 mikron uzunluğunda, 0,5-7 mikron kalınlığında, spor oluşturmaz, kamçısı yoktur, hareketsizdir. Birçok suşta genel tipte villus ve genital pili bulunur. Bazı Shigella'ların bir mikrokapsülü vardır.

Dizanteri. Yetiştirme.
Dizanteri çubukları fakültatif anaeroblardır. Besin ortamına iddiasızdırlar, 37 ° C sıcaklıkta ve 7.2-7.4 pH'ta iyi büyürler. Yoğun ortamda küçük şeffaf koloniler oluştururlar, sıvı ortamda - dağınık bulanıklık. Selenit suyu, çoğunlukla Shigella'nın yetiştirilmesi için bir zenginleştirme ortamı olarak kullanılır.

Dizanteri.enzimatik aktivite.
Shigella, diğer enterobakterilerden daha az enzimatik aktiviteye sahiptir. Karbonhidratları asit oluşumu ile fermente ederler. Shigella'yı ayırt etmeyi mümkün kılan önemli bir özellik, mannitol ile olan ilişkileridir: S. dysenteriae mannitolü fermente etmez, B, C, D gruplarının temsilcileri mannitol pozitiftir. Biyokimyasal olarak en aktif olanı, yavaş yavaş (2 gün içinde) laktozu fermente edebilen S. sonnei'dir. S. sonnei'nin ramnoz, ksiloz ve maltoz ile olan ilişkisine göre 7 biyokimyasal varyantı ayırt edilir.

Dizanteri.Antijenik yapı.
Shigella'nın O-antijeni vardır, heterojenliği serovarların ve alt serovarların gruplar içinde ayırt edilmesini sağlar; cinsin bazı üyelerinde K-antijeni bulunur.

Dizanteri.patojenite faktörleri.
Tüm dizanterik basiller, enterotropik, nörotropik, pirojenik etkiye sahip endotoksin oluşturur. Ek olarak, S. dysenteriae - Shigella Grigoriev-Shiga - vücut üzerinde enterotoksik, nörotoksik, sitotoksik ve nefrotoksik etkiye sahip olan ve buna göre su-tuz metabolizmasını ve merkezi sinir sisteminin aktivitesini bozan bir ekzotoksin salgılar ve ölüme yol açar. kolon epitel hücrelerinin barsakları, böbrek tübüllerinde hasar.

Ekzotoksin oluşumu ile, bu patojenin neden olduğu daha şiddetli bir dizanteri seyri ilişkilidir. Ekzotoksin, diğer Shigella türleri tarafından da salgılanabilir. Kan damarlarının etkilenmesi sonucunda RF geçirgenlik faktörü keşfedilmiştir. Patojenik faktörler ayrıca şunları içerir: istilacı protein, epitel hücrelerine penetrasyonlarını kolaylaştırmanın yanı sıra yapışmadan sorumlu pili ve dış zar proteinleri ve bir mikrokapsül.

Dizanteri.direnç.
Shigella, harekete karşı düşük bir dirence sahiptir Çeşitli faktörler. S. sonnei daha büyük bir dirence sahiptir. musluk suyu 2,5 aya kadar, açık rezervuarların sularında ise 1,5 aya kadar hayatta kalır. S. sonnei sadece uzun süre hayatta kalamaz, aynı zamanda süt ürünleri başta olmak üzere ürünlerde de çoğalır.

Dizanteri.Epidemiyoloji.
Dizanteri antroponotik bir enfeksiyondur: kaynak hasta insanlar ve taşıyıcılardır. Enfeksiyonların bulaşma mekanizması fekal-oraldır. İletim yolları farklı olabilir - Sonne'nin dizanteri ile, gıda yolu baskındır, Flexner'ın dizanterisi ile - su, Grigoriev-Shiga'nın dizanterisi için temas-ev yolu karakteristiktir.

Dizanteri dünyanın birçok ülkesinde bulunur. AT son yıllar bu enfeksiyonun insidansında keskin bir artış olmuştur. Her yaştan insan hastalanır, ancak 1 ila 3 yaş arasındaki çocuklar dizanteriye en yatkındır. Temmuz-Eylül aylarında hasta sayısı artar. Farklı Shigella türleri belirli bölgelerde eşit olmayan bir şekilde dağılmıştır.

Dizanteri.Patogenez.
Shigella ağız yoluyla gastrointestinal sisteme girer ve kalın bağırsağa ulaşır. Epitel için tropizme sahip olan patojenler, dış zarın pili ve proteinleri yardımıyla hücrelere bağlanır. İstilacı faktör sayesinde hücrelerin içine nüfuz ederler, orada çoğalırlar ve bunun sonucunda hücreler ölür.

Bağırsak duvarında ülserler oluşur ve bunun yerine yara izleri oluşur. Bakterilerin yok edilmesi sırasında salınan endotoksin, genel zehirlenmeye, artan bağırsak hareketliliğine ve ishale neden olur. Oluşan ülserlerden gelen kan dışkıya girer. Ekzotoksinin etkisinin bir sonucu olarak, daha belirgin bir su-tuz metabolizması ihlali, merkezi sinir sisteminin aktivitesi ve böbrek hasarı gözlenir.

Dizanteri.klinik tablo.
Kuluçka süresi 1 ila 5 gün sürer. Hastalık, vücut ısısının 38-39 ° C'ye yükselmesiyle akut olarak başlar, karın ağrısı, ishal görülür. Kanın bir karışımı, dışkıda mukus bulunur. Grigoriev-Shiga dizanteri en şiddetlisidir.

Dizanteri.bağışıklık.
Bir hastalıktan sonra bağışıklık, türe özgü ve varyanta özgüdür. Kısa ömürlü ve kararsızdır. Genellikle hastalık kronik hale gelir. Bir sezonda bile tekrarlayan hastalıklar kaydedildi.

Dizanteri.laboratuvar teşhis.
Test materyali olarak hastanın dışkısı alınır. Teşhisin temeli, patojeni tanımlamaya, antibiyotiklere duyarlılığını belirlemeye, intraspesifik tanımlama gerçekleştirmeye (biyokimyasal varyantı, serovar veya kolikinovarı belirlemeye) izin veren bakteriyolojik yöntemdir. Uzun süreli dizanteri seyri ile yardımcı olarak kullanılabilir. serolojik yöntem, RA, RNHA formülasyonundan oluşan (reaksiyonun tekrarlanan formülasyonu ile antikor titresini artırarak tanı doğrulanabilir).

Dizanteri.Tedavi.
Şiddetli Grigorieva-Shish ve Flexner dizanterisi olan hastalar antibiyotiklerle tedavi edilir geniş bir yelpazede antibiyogramın zorunlu olarak dikkate alınması ile eylemler, çünkü shigella arasında genellikle sadece antibiyotiğe dirençli değil, aynı zamanda antibiyotiğe bağımlı formlar da vardır. Hafif dizanteri formlarında antibiyotikler kullanılmaz, çünkü kullanımları disbakteriyoza yol açar ve bu da durumu kötüleştirir. patolojik süreç ve kolonun mukoza zarındaki iyileşme süreçlerinin bozulması.

Dizanteri.Önleme.
Enfeksiyon odaklarında profilaktik amaçlı kullanılabilecek tek ilaç dizanterik bakteriyofajdır. Ana rol, spesifik olmayan profilaksi tarafından oynanır.

Spesifik olmayan önleme, insanların yaşamlarının uygun sıhhi ve hijyenik düzenlenmesini sağlar ve onlara yüksek kaliteli su ve yiyecek sağlar.

Hastanın bulunduğu ortamda patojenin yayılmasını önlemek için önlemler alınmalıdır.

dizanteri mikrobiyolojisi

Dizanteri, vücudun genel zehirlenmesi, ishal ve kalın bağırsağın mukoza zarının tuhaf bir lezyonu ile karakterize bulaşıcı bir hastalıktır. Dünyada en sık görülen akut bağırsak hastalıklarından biridir. Hastalık eski zamanlardan beri "kanlı ishal" adı altında biliniyordu ancak doğasının farklı olduğu ortaya çıktı. 1875'te Rus bilim adamı F. A. Lesh, kanlı ishali olan bir hastadan bir amip izole etti. Entamoeba histolytica, önümüzdeki 15 yıl içinde, amoebiasis adının korunduğu bu hastalığın bağımsızlığı kuruldu.

Uygun dizanteri etken maddeleri, cins içinde birleşmiş biyolojik olarak benzer büyük bir bakteri grubudur. Şigella. Patojen ilk olarak 1888'de A. Chantemes ve F. Vidal tarafından keşfedildi; 1891'de A. V. Grigoriev tarafından tanımlandı ve 1898'de K. Shiga, bir hastadan aldığı serumu kullanarak, dizanterili 34 hastada patojeni tanımladı ve sonunda bu bakterinin etiyolojik rolünü kanıtladı. Bununla birlikte, sonraki yıllarda, dizanteriye neden olan diğer ajanlar da keşfedildi: 1900'de - S. Flexner, 1915'te - K. Sonne, 1917'de - K. Stutzer ve K. Schmitz, 1932'de - J. Boyd tarafından , 1934'te - D. Large tarafından, 1943'te - A. Sachs tarafından. Şu anda cins Şigella 40'tan fazla serotip içerir. Bunların hepsi, sıradan besin ortamında iyi gelişen, tek karbon kaynağı olarak sitrat veya malonat içeren bir açlık ortamında gelişmeyen, spor ve kapsül oluşturmayan, kısa hareketsiz gram-negatif çubuklardır; H 2 S oluşturmaz, üreaz içermez; Voges-Proskauer reaksiyonu negatiftir; glikoz ve diğer bazı karbonhidratlar gazsız asit oluşturmak üzere fermente edilir (bazı biyotipler hariç). Shigella flexneri: S. manchester ve S. newcastle); kural olarak, laktozu fermente etmeyin (Shigella Sonne hariç), adonit, salisin ve inositol, jelatini sıvılaştırmaz, genellikle katalaz oluşturur, lizin dekarboksilaz ve fenilalanin deaminaz içermez. DNA'daki G + C içeriği % 49 - 53 mol'dür. Shigella fakültatif anaeroblardır, büyüme için optimum sıcaklık 37 °C'dir, 45 °C'nin üzerindeki sıcaklıklarda büyümezler, ortamın optimum pH'ı 6,7 - 7,2'dir. Yoğun ortamdaki koloniler yuvarlak, dışbükey, yarı saydamdır; ayrışma durumunda kaba R şeklinde koloniler oluşur. BCH üzerinde tek tip bulanıklık şeklinde büyüme, kaba formlar bir çökelti oluşturur. Sonne Shigella'nın yeni izole edilmiş kültürleri genellikle iki tip koloni oluşturur: küçük yuvarlak dışbükey (I fazı), büyük düz (II fazı). Koloninin doğası, Shigella Sonne'nin virülansını da belirleyen m.m.120 MD'li bir plazmitin varlığına (I fazı) veya yokluğuna (II fazı) bağlıdır.

Shigella'nın uluslararası sınıflandırması, biyokimyasal özellikleri (mannitol fermente etmeyen, mannitol fermente eden, yavaş laktozu fermente eden Shigella) ve antijenik yapının özellikleri dikkate alınarak oluşturulmuştur (Tablo 37).

Shigella'da farklı özgüllükteki O-antijenleri bulundu: aile için ortak enterobakterigiller, jenerik, tür, grup ve tipe özgü ve ayrıca K-antijenleri; H antijenleri yoktur.

Tablo 37

Cins bakterilerinin sınıflandırılması Şigella

Sınıflandırma sadece gruba ve tipe özgü O-antijenlerini dikkate alır. Bu özelliklere göre, Şigella 4 alt gruba veya 4 türe bölünmüştür ve 44 serotip içerir. A alt grubunda (tür Shigella dizanteri) mannitolü fermente etmeyen shigella içerir. Tür, 12 serotip (1 - 12) içerir. Her serotipin kendi spesifik tip antijeni vardır; serotipler ve diğer shigella türleri arasındaki antijenik ilişkiler zayıf bir şekilde ifade edilir. B alt grubuna (tip Shigella flexneri) genellikle mannitolü fermente eden Shigella'yı içerir. Bu türün Shigella'sı serolojik olarak birbirleriyle ilişkilidir: serotiplere (1 - 6) bölündüklerine göre tipe özgü antijenler (I - VI) ve her serotipte farklı bileşimlerde bulunan grup antijenleri içerirler. ve hangi serotiplerin alt serotiplere ayrıldığına göre. Ek olarak, bu tür, tipik antijenlere sahip olmayan iki antijenik varyantı, X ve Y'yi içerir; grup antijenlerinin setlerinde farklılık gösterirler. serotip S. flexneri 6 subserotipleri yoktur ancak glukoz, mannitol ve dulsit fermantasyon özelliklerine göre 3 biyokimyasal tipe ayrılır (Tablo 38).

Tablo 38

Biyotipler S. flexneri 6

Not. K - sadece asit oluşumu ile fermantasyon; KG - asit ve gaz oluşumu ile fermantasyon; (-) - fermantasyon yok.

Tüm Shigella Flexner'daki lipopolisakarit antijeni O, ana birincil yapı olarak grup antijeni 3, 4'ü içerir, sentezi his-lokusu yakınında lokalize olan bir kromozomal gen tarafından kontrol edilir. Tipe özgü antijenler I, II, IV, V ve grup antijenleri 6, 7, 8, antijen 3, 4'ün (glikosilasyon veya asetilasyon) modifikasyonunun sonucudur ve ilgili dönüştürücü profajların genleri tarafından belirlenir, entegrasyon bölgesi Shigella kromozomunun lac-pro bölgesinde bulunur.

80'lerde ülke topraklarında ortaya çıktı. 20. yüzyıl ve yaygın olarak kullanılan yeni bir alt serotip S. flexneri 4(IV:7, 8) alt serotip 4a'dan (IV:3, 4) ve 4b'den (IV:3, 4, 6) farklıdır, varyanttan doğmuştur S. flexneri Y(IV:3, 4) dönüştürücü profajları IV ve 7, 8 ile lizojenizasyon nedeniyle.

C alt grubuna (tür Shigella boydii) genellikle mannitolü fermente eden Shigella'yı içerir. Grubun üyeleri serolojik olarak birbirinden farklıdır. Türler içindeki antijenik ilişkiler zayıf bir şekilde ifade edilir. Tür, her biri kendi ana tip antijenine sahip 18 serotip (1 - 18) içerir.

D alt grubunda (tür Shigella sonnei), genellikle mannitolü fermente eden ve yavaş yavaş (24 saat inkübasyondan sonra ve daha sonra) laktozu ve sakarozu fermente edebilen Shigella'yı içerir. görüş S. sonnei bir serotip içerir, ancak faz I ve II kolonilerinin kendi tip spesifik antijenleri vardır. Sonne's Shigella'nın tür içi sınıflandırması için iki yöntem önerilmiştir:

1) maltoz, ramnoz ve ksilozu fermente etme yeteneklerine göre 14 biyokimyasal tipe ve alt tipe ayırmak; 2) karşılık gelen bir dizi fajın duyarlılığına göre faj türlerine ayırma.

Bu tipleme yöntemleri esas olarak epidemiyolojik öneme sahiptir. Ek olarak, Sonne'nin shigella'sı ve Flexner'ın shigella'sı, spesifik kolikinleri sentezleme yeteneği (kolisinojenotipleme) ve bilinen kolikinlere duyarlılık (kolisinotipleme) ile aynı amaç için tiplemeye tabi tutulur. Shigella tarafından üretilen kolikinlerin tipini belirlemek için J. Abbott ve R. Shannon, shigella'nın tipik ve indikatör suşları setleri ve shigella'nın bilinen kolikin tiplerine duyarlılığını belirlemek için P. Frederick tarafından bir dizi referans kolikinojenik suş önerdi. kullanıldı.

direnç. Shigella, çevresel faktörlere karşı oldukça yüksek bir dirence sahiptir. Pamuklu kumaş ve kağıt üzerinde 30-36 gün, kuru dışkıda - 4-5 aya kadar, toprakta - 3-4 aya kadar, suda - 0,5 ile 3 ay arasında, meyve ve sebzelerde - süt ve süt ürünlerinde 2 haftaya kadar - birkaç haftaya kadar; 60 ° C sıcaklıkta 15-20 dakika içinde ölürler. Kloramin solüsyonlarına, aktif klora ve diğer dezenfektanlara karşı hassastır.

patojenite faktörleri. Shigella'nın patojenitelerini belirleyen en önemli biyolojik özelliği, epitel hücrelerini istila etme, içlerinde çoğalma ve ölümlerine neden olma yeteneğidir. Bu etki, bir keratokonjonktival testi (bir Shigella kültürünün (2-3 milyar bakteri) bir kobayın alt göz kapağının altına sokulması, seröz pürülan keratokonjonktivit gelişimine neden olur) ve ayrıca hücre enfeksiyonu ile tespit edilebilir. kültürler (sitotoksik etki) veya tavuk embriyoları (ölümleri) veya beyaz farelerde intranazal olarak (pnömoni gelişimi). Shigella'nın ana patojenite faktörleri üç gruba ayrılabilir:

1) mukoza zarının epiteli ile etkileşimi belirleyen faktörler;

2) makroorganizmanın hümoral ve hücresel savunma mekanizmalarına direnç ve Shigella'nın hücrelerinde çoğalma kabiliyetini sağlayan faktörler;

3) gerçek patolojik sürecin gelişimini belirleyen toksinler ve toksik ürünler üretme yeteneği.

İlk grup, yapışma ve kolonizasyon faktörlerini içerir: rolleri pili, dış zar proteinleri ve LPS tarafından oynanır. Nöraminidaz, hiyalüronidaz ve müsinaz gibi mukus yok edici enzimler, yapışmayı ve kolonizasyonu destekler. İkinci grup, Shigella'nın enterositlere nüfuz etmesini ve bunların içinde ve makrofajlarda sitotoksik ve (veya) enterotoksik bir etkinin eşzamanlı tezahürü ile üremelerini destekleyen istila faktörlerini içerir. Bu özellikler, m.m.140 MD (dış zarın istilasına neden olan proteinlerin sentezini kodlar) ve Shigella kromozomal genleri olan plazmidin genleri tarafından kontrol edilir: kcp A (keratokonjonktivit'e neden olur), cyt (hücre yıkımından sorumlu), ve henüz tanımlanmamış diğer genler. Shigella'nın fagositozdan korunması, yüzey K-antijeni, antijenler 3, 4 ve lipopolisakkarit tarafından sağlanır. Ek olarak, Shigella endotoksin lipid A'nın bir bağışıklık bastırıcı etkisi vardır: bağışıklık hafıza hücrelerinin aktivitesini bastırır.

Patojenite faktörlerinin üçüncü grubu, sitotoksik özellikleri en belirgin olan Shigella - Shiga eksotoksinleri ve Shiga benzeri eksotoksinlerde (SLT-I ve SLT-II) bulunan endotoksin ve iki tip ekzotoksin içerir. S. dizanteri 1. Diğer serotiplerde de bulunan Shiga ve Shiga benzeri toksinler S. dizanteri, onlar da oluşur S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC ve biraz salmonella. Bu toksinlerin sentezi, dönüştürücü fajların toksin genleri tarafından kontrol edilir. LT tipi enterotoksinler Flexner, Sonne ve Boyd Shigella'da bulunmuştur. İçlerinde LT sentezi, plazmit genleri tarafından kontrol edilir. Enterotoksin, adenilat siklazın aktivitesini uyarır ve diyare gelişiminden sorumludur. Shiga toksini veya nörotoksin, adenilat siklaz sistemi ile reaksiyona girmez, ancak doğrudan sitotoksik etkiye sahiptir. Shiga ve Shiga benzeri toksinler (SLT-I ve SLT-II) 70 kD'lik bir MW'ye sahiptir ve A ve B alt birimlerinden (5 özdeş küçük alt birimin sonuncusu) oluşur. Toksinlerin reseptörü hücre zarının glikolipididir.

Shigella Sonne'nin virülansı ayrıca m.m.120 MD olan plazmide de bağlıdır. Yedi tanesi virülans ile ilişkili olan yaklaşık 40 dış zar polipeptidinin sentezini kontrol eder. Shigella Sonne bu plazmit ile faz I koloniler oluşturur ve virülenttir. Plazmidi kaybeden kültürler, faz II kolonileri oluşturur ve virülans göstermez. Shigella Flexner ve Boyd'da mm 120 - 140 MD olan plazmitler bulundu. Shigella lipopolisakkarit güçlü bir endotoksindir.

Epidemiyolojinin özellikleri. Tek enfeksiyon kaynağı insandır. Doğada hiçbir hayvan dizanteriden muzdarip değildir. Deneysel koşullar altında dizanteri yalnızca maymunlarda yeniden üretilebilir. Enfeksiyon yöntemi fekal-oraldır. Bulaşma yolları - su (Shigella Flexner için baskın), gıda, özellikle önemli rol süt ve süt ürünlerine aittir (Shigella Sonne için baskın enfeksiyon yolu) ve temas-hane, özellikle türler için S. dizanteri.

Dizanteri epidemiyolojisinin bir özelliği, belirli bölgelerdeki patojenlerin tür kompozisyonunun yanı sıra Sonne biyotipleri ve Flexner serotiplerindeki değişikliktir. Örneğin, 1930'ların sonuna kadar 20. yüzyıl paylaşmak S. dizanteri 1 tüm dizanteri vakalarının %30-40'ını oluşturuyordu ve daha sonra bu serotip daha az oluşmaya başladı ve neredeyse ortadan kayboldu. Ancak, 1960'larda - 1980'lerde. S. dizanteri tarihsel arenada yeniden ortaya çıktı ve Orta Amerika, Orta Afrika ve Güney Asya'da (Hindistan, Pakistan, Bangladeş ve diğer ülkeler) üç hiperendemik odak oluşumuna yol açan bir dizi salgına neden oldu. Dizanteri patojenlerinin tür kompozisyonundaki değişikliğin nedenleri muhtemelen toplu bağışıklıktaki bir değişiklik ve dizanteri bakterilerinin özelliklerindeki bir değişiklik ile ilişkilidir. Özellikle, dönüş S. dizanteri 1 ve dizanteri hiperendemik odaklarının oluşumuna neden olan geniş dağılımı, çoklu ilaç direncine ve virülans artışına neden olan plazmitlerin edinilmesiyle ilişkilidir.

Patogenez ve klinik özellikleri. Dizanteri için kuluçka süresi 2-5 gün, bazen bir günden kısadır. Dizanteriye neden olan ajanın nüfuz ettiği kalın bağırsağın (sigmoid ve rektum) inen kısmının mukoza zarında bulaşıcı bir odak oluşumu döngüseldir: yapışma, kolonizasyon, Shigella'nın enterositlerin sitoplazmasına girmesi, bunların hücre içi üreme, epitel hücrelerinin yok edilmesi ve reddedilmesi, patojenlerin lümen bağırsaklarına salınması; bundan sonra, bir sonraki döngü başlar - yapışma, kolonizasyon, vb. Döngülerin yoğunluğu, mukoza zarının paryetal tabakasındaki patojenlerin konsantrasyonuna bağlıdır. Tekrarlanan döngülerin bir sonucu olarak, enflamatuar odak büyür, sonuçta ortaya çıkan ülserler, bağırsak duvarının maruz kalmasını arttırır, bunun sonucunda dışkıda kan, mukopürülan topaklar ve polimorfonükleer lökositler ortaya çıkar. Sitotoksinler (SLT-I ve SLT-II) hücre yıkımına, enterotoksin - ishale, endotoksinler - genel zehirlenmeye neden olur. Dizanteri kliniği büyük ölçüde patojen tarafından ne tür eksotoksinlerin üretildiği, alerjenik etkisinin derecesi ve vücudun bağışıklık durumu ile belirlenir. Bununla birlikte, dizanteri patogenezinin birçok konusu, özellikle: yaşamın ilk iki yılındaki çocuklarda dizanteri seyri, akut dizanteriden kronik hale geçişin nedenleri, duyarlılığın önemi, yerel bağışıklık mekanizması açıklanamamıştır. bağırsak mukozası, vb. Dizanteri en tipik klinik belirtileri ishal, sık dürtüler: şiddetli vakalarda günde 50 veya daha fazla kez, tenesmus (rektumun ağrılı spazmları) ve genel zehirlenme. Dışkının doğası, kalın bağırsağa verilen hasarın derecesine göre belirlenir. En şiddetli dizanteri neden olur S. dizanteri 1, en kolay - Sonne'nin dizanteri.

Enfeksiyon sonrası bağışıklık. Maymunlar üzerinde yapılan gözlemlerin gösterdiği gibi, dizanteri geçirdikten sonra, güçlü ve oldukça uzun süreli bir bağışıklık kalır. Antimikrobiyal antikorlar, antitoksinler, makrofajların ve T-lenfositlerin artan aktivitelerinden kaynaklanır. IgA'ların aracılık ettiği bağırsak mukozasının lokal bağışıklığı önemli bir rol oynar. Bununla birlikte, bağışıklık doğası gereği türe özgüdür, güçlü çapraz bağışıklık oluşmaz.

Laboratuvar teşhisi. Ana yöntem bakteriyolojiktir. Çalışma için malzeme dışkıdır. Patojen izolasyon şeması: İzole kolonileri izole etmek, saf bir kültür elde etmek, biyokimyasal özelliklerini incelemek ve dikkate alarak Endo ve Ploskirev ayırıcı tanı ortamlarında aşılama (zenginleştirme ortamında paralel olarak, ardından Endo ve Ploskirev ortamında aşılama) ikincisi, çok değerlikli ve tek değerli tanı aglütinasyon serumları kullanılarak tanımlama. Aşağıdaki ticari serumlar üretilmektedir.

1. Mannitolü fermente etmeyen Shigella:

ile S. dizanteri 1 ve 2

ile S. dizanteri 3–7(çok değerlikli ve tek değerli),

ile S. dizanteri 8 – 12(çok değerlikli ve tek değerli).

2. Shigella mannitolü fermente etmek için:

tipik antijenlere S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

antijenleri gruplandırmak S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8- çok değerlikli,

antijenlere S.boydii 1-18(polivalent ve monovalent), antijenlere S. sonnei I faz, II faz,

antijenlere S. flexneri I–VI+ S. sonnei- çok değerlikli.

Shigella'nın hızlı tanımlanması için aşağıdaki yöntem önerilir: şüpheli bir koloni (Endo ortamında laktosonegatif), TSI ortamında (eng. üçlü şeker demir) - H2S üretimini belirlemek için demirli üç şekerli agar (glukoz, laktoz, sakaroz); veya glikoz, laktoz, sakaroz, demir ve üre içeren bir ortam üzerinde. 4 ila 6 saatlik inkübasyondan sonra üreyi parçalayan herhangi bir organizmanın büyük olasılıkla cinse ait olması muhtemeldir. protein ve hariç tutulabilir. H2S üreten veya eklemde üreaz veya asit üreten bir mikroorganizma (laktozu veya sakarozu fermente eder) hariç tutulabilir, ancak H2S üreten suşlar cinsin olası üyeleri olarak araştırılmalıdır. Salmonella. Diğer tüm durumlarda, bu besiyerlerinde yetiştirilen kültür incelenmeli ve eğer glikozu fermente ediyorsa (kolonun renk değişikliği), izole edilmelidir. saf formu. Aynı zamanda cinse uygun antiserumlar ile cam üzerindeki aglütinasyon testinde de araştırılabilir. Şigella. Gerekirse cinse ait olup olmadığını kontrol etmek için diğer biyokimyasal testler yapılır. Şigella ve hareketliliği inceleyin.

Kandaki (CEC'nin bir parçası olarak dahil), idrar ve dışkıdaki antijenleri saptamak için aşağıdaki yöntemler kullanılabilir: RPHA, RSK, pıhtılaşma reaksiyonu (idrar ve dışkıda), IFM, RAGA (kan serumunda). Bu yöntemler oldukça etkili, spesifik ve erken teşhis için uygundur.

Serolojik tanı için aşağıdakiler kullanılabilir: karşılık gelen eritrosit tanıları ile RPGA, immünofloresan yöntemi (dolaylı modifikasyonda), Coombs yöntemi (eksik antikorların titresinin belirlenmesi). Dizanteri ile alerjik bir test (Shigella Flexner ve Sonne'nin protein fraksiyonlarının bir çözeltisi) de tanısal değere sahiptir. Reaksiyon 24 saat sonra dikkate alınır, 10-20 mm çapında hiperemi ve infiltrasyon varlığında pozitif kabul edilir.

Tedavi. Normal su-tuz metabolizmasının restorasyonuna, rasyonel beslenmeye, detoksifikasyona, rasyonel antibiyotik tedavisine (patojenin antibiyotiklere duyarlılığı dikkate alınarak) dikkat edilir. Çok değerlikli bir dizanterik bakteriyofajın, özellikle fajı mide suyunun HCl'sinin etkisinden koruyan pektin kaplamalı tabletlerin erken kullanımıyla iyi bir etki elde edilir; ince bağırsakta pektin çözülür, fajlar salınır ve etkisini gösterir. Profilaktik amaçlar için, faj en az üç günde bir (bağırsakta hayatta kalma süresi) verilmelidir.

Özel önleme sorunu. Dizanteriye karşı yapay bağışıklık oluşturmak için çeşitli aşılar kullanıldı: öldürülen bakterilerden, kimyasallardan, alkolden, ancak hepsinin etkisiz olduğu ve durdurulduğu ortaya çıktı. Flexner dizanterisine karşı aşılar canlı (mutant, streptomisine bağımlı) Shigella Flexner'dan oluşturulmuştur; ribozomal aşılardır, ancak yaygın olarak kullanılmamışlardır. Bu nedenle, dizanteriyi spesifik olarak önleme sorunu çözülmemiştir. Dizanteri ile mücadelenin ana yolu, su temini ve kanalizasyon sistemini iyileştirmek, gıda işletmelerinde, özellikle süt endüstrisinde, çocuk bakım tesislerinde, halka açık yerlerde ve kişisel hijyende katı sıhhi ve hijyenik rejimler sağlamaktır.