Fágy možno použiť na praktické účely. Použitie bakteriofágov v medicíne a mimo nej

Výdobytky modernej medicíny a liečiv sú skvelé, ale aj patogénne mikroorganizmy sa neustále zlepšujú a prispôsobujú pôsobeniu tých liekov, ktoré boli pre nich ešte pred pár rokmi smrteľné. Tam, kde sú antibiotiká bezmocné, bakteriofágy pomôžu bojovať proti patogénnym mikroorganizmom.

Čo sú bakteriofágy

V doslovnom preklade zo starovekej gréčtiny sú bakteriofágy požierači baktérií. Tento biologický termín označuje vírusy, ktoré selektívne infikujú bakteriálne bunky.

Bakteriofágy sú prítomné všade tam, kde baktérie žijú, takže ich biotopom môže byť vzduch, voda, pôda, ľudské telo, jedlo a oblečenie.

Štrukturálne znaky bakteriofága: tento vírus nemá bunkovej štruktúry, existuje len genetický materiál pokrytý proteínovým plášťom na vrchu. Preto musia hľadať vhodné bunkové mikroorganizmy na rozmnožovanie.

Fág začína svoju deštruktívnu aktivitu pre baktériu vstreknutím vlastnej genetickej informácie do jej tela a potom začne aktívnu reprodukciu. Keď je bakteriálna bunka zničená, prostredníctvom jej fragmentov sa objaví 100 až 200 nových bakteriofágov, ktoré okamžite začnú infikovať blízke baktérie.

Druhy

Najznámejšie bakteriofágy:

• dysenterický;
• stafylokokové;
• streptokok;
• draslík;
• pseudomonas;
• Pseudomonas aeruginosa.

Výhody

Niektorí vedci tvrdia, že čoskoro bude používanie liekov na báze bakteriofágov konkurovať používaniu antibiotík pri liečbe rôznych chorôb.

Základom tohto odvážneho predpokladu sú nasledujúce výhody použitia fágov:

• absencia závislosti a kontraindikácií pri užívaní drogy;
• žiadny inhibičný účinok na imunitný systém;
• selektívne pôsobenie (prospešná bakteriálna flóra zostáva nedotknutá);
• harmonická kombinácia s inými metódami liečby, vrátane terapie antibiotikami (podľa výsledkov výskumu fágy dokonca zvyšujú svoj účinok);
• výrazný účinok pri liečbe pomalosti bolestivé stavy spôsobené bakteriálnymi činidlami, ktoré sú necitlivé na antibiotiká.

To umožňuje úspešné použitie bakteriofága u detí, starších ľudí, tehotných žien a oslabených pacientov.

Indikácie

Indikácie na zahrnutie bakteriofágov do liečebného režimu sú nasledujúce infekcie:

• chirurgické (absces, panaritium, paraproktitída, osteomyelitída, vriedky, popáleniny, flegmóna, karbunky, hnisavé rany);
• urogenitálne (cystitída, pyelonefritída, kolpitída, uretritída, endometritída, salpingooforitída);
• enterálna (cholecystitída, gastroenterokolitída, črevná dysbióza);
• otrava krvi;
• ochorenia orgánov ORL (tonzilitída, sinusitída, zápal stredného ucha);
• choroby dýchacieho traktu a pľúca (tracheitída, zápal pohrudnice, laryngitída, bronchitída, zápal pľúc).

Spôsoby aplikácie

Spôsob, akým by sa mal bakteriofág použiť, priamo závisí od povahy a lokalizácie zdroja zápalu. IN rôzne situácie Vhodné by boli nasledujúce spôsoby aplikácie:

• ústne ( liek užívané perorálne);
• rektálne (bakteriofágový klystír);
• lokálne (formou umývania, pleťových vôd, výplachov, instilácií, výplachov, podávania turundiek namočených v droge).

Bakteriofág pôsobí efektívnejšie, ak liečba kombinuje rôzne spôsoby aplikácie. Existujú isté klinické indikácie, podľa ktorého sa bakteriofág užíva perorálne v tabletách, a miestna akcia poskytuje tekutý bakteriofág vo forme pleťovej vody.

Prípravky na báze bakteriofágov, vyrábané vo forme roztokov, aerosólov, tabliet, čapíkov a gélov, získavajú na popularite. Lekárenské formuláre lieky sú vybavené podrobnými pokynmi, ako užívať bakteriofág.

Kontraindikácie

Väčšina ľudí s istou mierou nedôvery zvažuje možnosť liečby bakteriofágmi, hoci účinnosť a hlavne bezpečnosť takejto terapie je už preukázaná.

Jediný možná kontraindikácia Možno zvýšená citlivosť na bakteriofágy, hoci prípady Alergická reakcia bakteriofágy nie sú typické.

Bakteriofágové prípravky

Farmaceutický priemysel ponúka veľa liekov, ktorých princíp účinku je založený na antimikrobiálnej aktivite bakteriofágov.

• Intesti-bakteriofág (Intestiphage)

  

  Kvapalný imunobiologický antimikrobiálny prípravok. Inhibuje aktivitu mikroorganizmov, spôsobujúce choroby gastrointestinálny trakt(bakteriálna dyzentéria, brušný týfus, enterokolitída, paratýfus, dysbakterióza, salmonelóza). Používa sa vnútorne a ako klystír. Kontraindikácie: precitlivenosť na liek. Vedľajšie účinky: U novorodencov sú možné kožné vyrážky a regurgitácia počas prvých 2 dní používania.

• Polyvalentný pyobakteriofág (Sextafág)

  

  Úspešne sa vyrovnáva s hnisavé-septické ochorenia novorodencov a dojčiat, purulentno-zápalové ochorenia ORL orgánov, enterálne infekcie. Používa sa na liečbu novo infikovaných rán. Neexistujú žiadne kontraindikácie ani vedľajšie účinky.

• Bakteriofág Klebsiella pneumoniae (Klebsifag)

  

  Ovplyvňuje baktérie, ktoré spôsobujú zápal pľúc, ozenu a rinosklerómu. Pomáha tiež pri všeobecných septických stavoch, aby sa zabránilo kontaminácii nozokomiálne kmene Klebsiella Neexistujú žiadne vedľajšie účinky. Kontraindikácie: precitlivenosť na zložky.

• Bakteriofág Salmonella

  

  Ničí bunky Salmonella a mikroorganizmy podobné antigénnej štruktúre. Vhodné na liečbu salmonelózy u detí a dospelých. Neexistujú žiadne kontraindikácie ani vedľajšie účinky.

• Bakteriofág Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa)

  

  Používa sa na liečbu lézií rôzne orgány Pseudomonas aeruginosa. Vedľajšie účinky nezistené. Kontraindikácie: precitlivenosť na liečivo.

• Bakteriofágový streptokok (Streptophage)

  

  Zabíja streptokokové baktérie, vďaka čomu sú lieky na jeho báze nevyhnutné pri liečbe angíny, angíny, sinusitídy, panária, hnisavých rán a mnohých ďalších ochorení. Na liečbu sínusitídy sa odporúča instilovať tento bakteriofág do nosa. Neexistujú žiadne vedľajšie účinky. Kontraindikácie: precitlivenosť na liečivo.

• Bakteriofág coli

  

  Má špecifické antibakteriálny účinok, namierené výhradne proti patogénnym kmeňom Escherichia coli. Predpísané na lézie gastrointestinálneho traktu, hnisanie rán, sepsu novorodencov, konjunktivitídu, urogenitálne infekcie. Kontraindikácie: precitlivenosť na liečivo. Neboli zistené žiadne vedľajšie účinky.

• Bakteriofág Klebsiella polyvalentný

  

  Účinné pri liečbe zápalu pobrušnice, pleurisy, hnisavých zápalových ochorení v gynekológii. Používa sa aj pri liečbe stomatitídy, paradentózy a zápalu prínosových dutín. Neexistujú žiadne vedľajšie účinky. Kontraindikácie: precitlivenosť na zložky lieku.

• Bakteriofág Coliproteus

  

  IN tekutá forma v dopyte po prevencii a liečbe kolpitídy a enterokolitídy. Vo forme tabliet sa častejšie používa pri pokročilých formách pyelonefritídy a cystitídy, zápalové procesy v panvových orgánoch. Kontraindikácie: alergia na niektorú z jeho zložiek lieku. Neexistujú žiadne vedľajšie účinky.

• Dysenterický bakteriofág

  

  Používa sa na liečbu a prevenciu dyzentérie. Neboli zistené žiadne vedľajšie účinky. Kontraindikácie: precitlivenosť na zložky a na tabletovú formu lieku - vek pacienta je mladší ako 1 rok, tehotenstvo a dojčenie.

Nepreháňajte nebezpečenstvo vírusov obsiahnutých v podobné lieky a bakteriofágové analógy. Sú smrteľné iba pre baktérie, ktoré spôsobujú choroby. Ak lekár považuje za vhodné zaradiť bakteriofágy do liečebného režimu, mali by ste dôverovať a byť pripravení na rýchle zotavenie.

Použitie bakteriofágov sa vykonáva výlučne na určený účel a pod dohľadom ošetrujúceho lekára.

Bakteriofágy alebo fágy (z iného gréckeho φᾰγω „požieram“) sú vírusy, ktoré selektívne infikujú bakteriálne bunky. Najčastejšie sa bakteriofágy množia vo vnútri baktérií a spôsobujú ich lýzu. Bakteriofág sa zvyčajne skladá z proteínového obalu a genetického materiálu jednovláknovej alebo dvojvláknovej nukleovej kyseliny (DNA alebo menej často RNA). Celkový počet bakteriofágov v prírode sa približne rovná celkovému počtu baktérií (1030 – 1032 častíc). Bakteriofágy sa aktívne podieľajú na obehu chemických látok a energie, majú citeľný vplyv na vývoj mikróbov a baktérií.Štruktúra typického bakteriofágového myovírusu.

Štruktúra bakteriofágov 1 - hlava, 2 - chvost, 3 - nukleová kyselina, 4 - kapsida, 5 - „golier“, 6 - proteínová pošva chvosta, 7 - fibrila chvosta, 8 - tŕne, 9 - bazálna platnička

Bakteriofágy sa líšia v chemická štruktúra, typ nukleovej kyseliny, morfológia a povaha interakcie s baktériami. Podľa veľkosti bakteriálne vírusy sto a tisíckrát menšie ako mikrobiálne bunky. Typická fágová častica (virión) pozostáva z hlavy a chvosta. Dĺžka chvosta je zvyčajne 2-4 násobok priemeru hlavy. Hlavička obsahuje genetický materiál – jednovláknovú alebo dvojvláknovú RNA alebo DNA s enzýmom transkriptázou v neaktívnom stave, obklopenú proteínovým alebo lipoproteínovým obalom – kapsidou, ktorá ukladá genóm mimo bunky. Nukleová kyselina a kapsid spolu tvoria nukleokapsid. Bakteriofágy môžu mať ikosaedrickú kapsidu zostavenú z viacerých kópií jedného alebo dvoch špecifických proteínov. Typicky sú rohy vyrobené z pentamérov proteínu a podpora každej strany je vyrobená z hexamérov rovnakého alebo podobného proteínu. Okrem toho môžu mať fágy guľovitý, citrónový alebo pleomorfný tvar. Chvost alebo prívesok je proteínová trubica - pokračovanie proteínovej škrupiny hlavy; v spodnej časti chvosta je ATPáza, ktorá regeneruje energiu na injekciu genetického materiálu. Existujú aj bakteriofágy s krátkym procesom, bez procesu a vláknité.

Taxonómia bakteriofágov Veľký počet izolovaných a študovaných bakteriofágov predurčuje potrebu ich systematizácie. Robí to Medzinárodný výbor pre taxonómiu vírusov (ICTV). V súčasnosti podľa Medzinárodná klasifikácia a nomenklatúry vírusov sa bakteriofágy delia v závislosti od typu nukleovej kyseliny a morfológie. Zapnuté tento moment Rozlišuje sa devätnásť rodín. Z nich iba dve obsahujú RNA a iba päť rodín je obalených. Z rodín DNA vírusov majú iba dve rodiny jednovláknové genómy. Deväť rodín obsahujúcich DNA má kruhový DNA genóm, zatiaľ čo ďalších deväť má lineárnu DNA. Deväť čeľadí je špecifických iba pre baktérie, zvyšných deväť je špecifických iba pre archaea a (Tectiviridae) infikuje baktérie aj archaea.

Interakcia bakteriofága s bakteriálnymi bunkami Na základe povahy interakcie bakteriofága s bakteriálnou bunkou sa rozlišujú virulentné a mierne fágy. Počet virulentných fágov sa môže zvyšovať iba počas lytického cyklu. Proces interakcie medzi virulentným bakteriofágom a bunkou pozostáva z niekoľkých fáz: adsorpcia bakteriofága na bunku, penetrácia do bunky, biosyntéza zložiek fágu a ich zostavenie a uvoľnenie bakteriofágov z bunky. Spočiatku sa bakteriofágy naviažu na fágovo špecifické receptory na povrchu bakteriálnej bunky. Fágový chvost pomocou enzýmov umiestnených na jeho konci (hlavne lyzozýmu) lokálne rozpúšťa bunkovú membránu, sťahuje sa a DNA obsiahnutá v hlavičke sa vstrekuje do bunky, zatiaľ čo proteínový obal bakteriofága zostáva vonku. Injikovaná DNA spôsobuje úplnú reštrukturalizáciu metabolizmu bunky: zastaví sa syntéza bakteriálnej DNA, RNA a proteínov. DNA bakteriofága sa začne prepisovať pomocou vlastného enzýmu transkriptázy, ktorý sa aktivuje po vstupe do bakteriálnej bunky. Najprv sa syntetizujú skoré a potom neskoré. RNA, ktoré vstupujú do ribozómov hostiteľskej bunky, kde sa syntetizujú skoré (DNA polymerázy, nukleázy) a neskoré (kapsidové a chvostové proteíny, enzýmy lyzozým, ATPáza a transkriptáza) bakteriofágové proteíny. Replikácia bakteriofágovej DNA prebieha podľa semikonzervatívneho mechanizmu a uskutočňuje sa za účasti vlastných DNA polymeráz. Po syntéze neskorých proteínov a dokončení replikácie DNA začína konečný proces - dozrievanie fágových častíc alebo kombinácia fágovej DNA s obalovým proteínom a tvorba zrelých infekčných fágových častíc

Životný cyklus Stredne silné a virulentné bakteriofágy v počiatočných štádiách interakcie s bakteriálnou bunkou majú rovnaký cyklus. Adsorpcia bakteriofága na fágovo špecifické bunkové receptory. Injekcia fágovej nukleovej kyseliny do hostiteľskej bunky. Ko-replikácia fágovej a bakteriálnej nukleovej kyseliny. Bunkové delenie. Ďalej sa bakteriofág môže vyvíjať podľa dvoch modelov: lyzogénnej alebo lytickej cesty. Mierne bakteriofágy po rozdelení sú v stave profázy (lyzogénna dráha) Virulentné bakteriofágy sa vyvíjajú podľa lytického modelu: Nukleová kyselina fága riadi syntézu fágových enzýmov pomocou aparátu baktérie syntetizujúceho proteíny. Fág tak či onak inaktivuje hostiteľskú DNA a RNA a fágové enzýmy ju úplne rozložia; RNA fága „podriaďuje“ bunkový aparát syntéze proteínov. Fágová nukleová kyselina sa replikuje a riadi syntézu nových obalových proteínov. Nové fágové častice sa tvoria ako výsledok spontánneho samousporiadania proteínového obalu (kapsid) okolo fágovej nukleovej kyseliny; Lysozým sa syntetizuje pod kontrolou fágovej RNA. Bunková lýza: bunka praskne pod vplyvom lyzozýmu; uvoľní sa asi 200-1000 nových fágov; fágy infikujú iné baktérie.

Aplikácia v medicíne Jednou z oblastí použitia bakteriofágov je antibiotická terapia, alternatíva k užívaniu antibiotík. Používajú sa napríklad bakteriofágy: streptokoky, stafylokoky, klebsiella, dyzentéria a polyalentné, pyobakteriofágy, coli, proteus a coliproteus a iné. 13 sú registrované a používané v Rusku zdravotnícky materiál na základe fágov. V súčasnosti sa používajú na liečbu bakteriálne infekcie, ktoré nie sú citlivé na tradičná liečba antibiotiká, najmä v Gruzínskej republike. Zvyčajne je použitie bakteriofágov sprevádzané väčším úspechom ako antibiotiká tam, kde sú prítomné. biologické membrány, obalené polysacharidmi, cez ktoré antibiotiká väčšinou nepreniknú. V súčasnosti nebolo terapeutické použitie bakteriofágov schválené na Západe, hoci fágy sa používajú na ničenie baktérií, ktoré spôsobujú otravu jedlom, ako je Listeria. S dlhoročnými skúsenosťami vo výške veľké mesto A vidiecke oblasti bola preukázaná nezvyčajne vysoká terapeutická a profylaktická účinnosť bakteriofága dyzentérie (P. M. Lerner, 2010). V Rusku sa už dlho vyrábajú terapeutické fágové prípravky, liečili sa fágmi ešte pred antibiotikami. IN posledné roky fágy boli široko používané po povodniach v Krymsku a Chabarovsku na prevenciu úplavice.

V biológii sa bakteriofágy používajú v genetické inžinierstvo Ako vektory, ktoré prenášajú úseky DNA, je možný aj prirodzený prenos génov medzi baktériami cez určité fágy (transdukcia). Fágové vektory sa zvyčajne vytvárajú na báze mierneho bakteriofága λ, ktorý obsahuje dvojvláknovú lineárnu molekulu DNA. Vľavo a pravé ramená fág má všetky gény potrebné pre lytický cyklus (replikáciu, reprodukciu). stredná časť Genóm bakteriofága λ (obsahuje gény, ktoré riadia lyzogenézu, teda jeho integráciu do DNA bakteriálnej bunky) nie je nevyhnutný pre jeho reprodukciu a tvorí približne 25 tisíc nukleotidových párov. Táto časť môže byť nahradená cudzím fragmentom DNA. Takto modifikované fágy prechádzajú lytickým cyklom, ale lyzogénia sa nevyskytuje. Bakteriofágové λ vektory sa používajú na klonovanie eukaryotických fragmentov DNA (teda väčších génov) až do 23 tisíc nukleotidových párov (kb). Navyše, fágy bez inzertov sú menšie ako 38 kb. alebo naopak s príliš veľkými vložkami - viac ako 52 kb. nevyvíjajú ani neinfikujú baktérie. Keďže reprodukcia bakteriofágov je možná len v živých bunkách, bakteriofágy možno použiť na určenie životaschopnosti baktérií. Tento smer má veľkú perspektívu, keďže jednou z hlavných otázok v rôznych biotechnologických procesoch je určenie životaschopnosti použitých plodín. Pomocou metódy elektrooptickej analýzy bunkových suspenzií bola ukázaná možnosť štúdia štádií interakcie fág-mikrobiálna bunka

A tiež vo veterinárnej medicíne na: prevenciu a liečbu bakteriálnych chorôb vtákov a zvierat; liečba hnisavých zápalových ochorení slizníc očí a ústnej dutiny; prevencia hnisavých zápalových komplikácií pri popáleninách, ranách, chirurgických zákrokoch; v genetickom inžinierstve: na transdukciu - prirodzený prenos gény medzi baktériami; ako vektory prenášajúce úseky DNA; pomocou fágov je možné vytvoriť cielené zmeny v genóme hostiteľskej DNA; V Potravinársky priemysel: mäso a hydinové výrobky na priamu spotrebu sa už hromadne spracúvajú prostriedkami obsahujúcimi fágy; bakteriofágy sa používajú pri výrobe potravinárskych výrobkov z mäsa, hydiny, syrov, rastlinných produktov atď.;

V poľnohospodárstvo: postrek fágových prípravkov na ochranu rastlín a plodín pred hnilobou a bakteriálnymi chorobami; chrániť hospodárske zvieratá a hydinu pred infekciami a bakteriálnymi chorobami; Pre environmentálna bezpečnosť: antibakteriálna úprava semien a rastlín; čistenie priestorov potravinárskych podnikov; dezinfekcia pracovného priestoru a vybavenia; prevencia nemocničných priestorov; vykonávanie environmentálnych aktivít

Preto sú dnes bakteriofágy veľmi obľúbené v živote ľudí a zvierat. V podnikoch sa to plánuje celý riadok prioritné oblasti pre vývoj a výrobu terapeutických a profylaktických bakteriofágov, ktoré korelujú s novovznikajúcimi globálnymi trendmi. Na liečbu mnohých chorôb sa vytvárajú a zavádzajú nové lieky. Štúdium a využitie bakteriofágov vykonávajú bakteriológovia, virológovia, biochemici, genetici, biofyzici, molekulárni biológovia, experimentálni onkológovia, odborníci v oblasti genetického inžinierstva a biotechnológie.

Bakteriofágy v lekárska prax používa sa na diagnostiku, liečbu a prevenciu infekčné choroby.

A. V diagnostike sa bakteriofág používa pri vykonávaní metódy kultúrneho výskumu na určenie typu izolovaného čistá kultúra, aj pre jeho typizáciu. Nižšie opísaný spôsob použitia bakteriofága na indikáciu prítomnosti určitého typu baktérií v patologickom materiáli bez jeho izolácie v čistej kultúre sa nerozšíril.

1. Reakcia zvyšujúceho sa fágového titra je založená na schopnosti špecifického bakteriofága replikovať sa len v bunkách baktérií „svojho“ druhu. Vykonáva sa podľa nasledujúceho princípu. K patologickému materiálu sa pridá určité množstvo špecifického bakteriofága, ten sa inkubuje v termostate a potom sa opäť stanoví množstvo fágu. Ak sa zvýši, znamená to, že bakteriofág „našiel“ bunku „svojho“ druhu, aby sa replikoval, a preto sú v patologickom materiáli prítomné baktérie požadovaného druhu.

2. V procese identifikácie čistej kultúry sa používajú druhové a typové bakteriofágy.
A. Na fágovú indikáciu sa používajú druhovo špecifické bakteriofágy. Izolovaná čistá kultúra sa naočkuje na misku agaru a nakvapká sa na ňu kvapka špecifického bakteriofága. Ak kultúra patrí k požadovanému druhu, potom na mieste, kde sa kvapka aplikuje, nedôjde k rastu, inak sa na mieste, kde sa kvapka aplikuje, bude pozorovať fág. rast baktérií. Niekedy sa po aplikácii bakteriofága Petriho miska s agarovou platňou nakloní, čím sa umožní, aby kvapôčka stekala na okraj misky (preto sa táto metóda nazýva „kvapkanie“).

b. Na typizáciu fágov sa používajú typické bakteriofágy. Princíp metódy je nasledujúci.
1. Kmeň, ktorý sa má typizovať, sa naočkuje na platňový agar.
2. Potom sa na naočkovaný povrch nakvapkajú kvapky typických bakteriofágov (každý do svojho štvorčeka, vopred označeného napr. skleneným grafom na dne Petriho misky).
3. Naočkovaná miska sa inkubuje v termostate.
4. Zohľadnite skúsenosti zaznamenaním „sterilných škvŕn“ alebo „plakov“ – miest nedostatočného rastu v mieste aplikácie kvapky bakteriofága, na ktoré je citlivý túto možnosť baktérie.
5. Fagovar (fagotyp) je označený zoznamom typických fágov, ktoré lyzujú daný variant.
B. Použitie bakteriofágov (zvyčajne druhov) na liečbu sa označuje ako fágová terapia. Na účely liečby sa lokálne používajú bakteriofágy (vo forme výplachu postihnutého povrchu, injekcie do lokálneho ložiska patologický proces atď.), pretože ich podávanie parenterálnou cestou vedie k rozvoju imunitnej odpovede na cudzí fágový proteín. Ak sa terapeutický bakteriofág podáva perorálne (na liečbu črevné infekcie), vtedy je najlepšie použiť tabletovú formu lieku, potiahnutú kyselinovzdorným povlakom, ktorý sa rozpúšťa v zásaditom prostredí čreva – bakteriofágy sú veľmi citlivé na nízke pH a v kyslom prostredí žalúdka sa rýchlo inaktivujú .
B. Fágová profylaxia je použitie bakteriofága (aj spravidla špecifického) na zabránenie vzniku bakteriálnej infekcie. V súčasnosti sa používa na núdzovú profylaxiu brušný týfus a úplavica (pod núdzová prevencia označuje súbor opatrení na zabránenie vzniku ochorenia po tom, ako došlo k aktu infekcie, t.j. vstup patogénu do tela pacienta).

Prvýkrát sa predpokladalo, že bakteriofágy sú vírusy. D. Errel. Následne boli objavené hubové vírusy atď., ktoré sa stali známymi ako fágy.

Fágová morfológia.

Rozmery - 20 - 200nm. Väčšina fágov má tvar pulca. Najzložitejšie fágy pozostávajú z mnohostrannej hlavy, v ktorej sa nachádza nukleová kyselina, krku a procesov. Na konci procesu je bazálna doska, z ktorej vychádzajú závity a zuby. Tieto vlákna a zuby slúžia na pripojenie fága k bakteriálnej membráne. V najzložitejšie organizovaných fágoch obsahuje distálna časť procesu enzým - lyzozým. Tento enzým podporuje rozpúšťanie bakteriálnej membrány počas prenikania fágového NK do cytoplazmy. V mnohých fágoch je proces obklopený plášťom, ktorý sa v niektorých fágoch môže sťahovať.

Existuje 5 morfologických skupín

1. Bakteriofágy s dlhým procesom a kontraktilným puzdrom
2. Fágy s dlhým procesom, ale bez kontraktilného obalu
3. Krátke vetvové fágy
4. Fágy s procesným analógom
5. Vláknité fágy

Chemické zloženie.

Fágy sú zložené z nukleovej kyseliny a proteínov. Väčšina z nich obsahuje 2-vláknovú DNA, uzavretú do kruhu. Niektoré fágy obsahujú jeden reťazec DNA alebo RNA.

Fágová škrupina - kapsid, pozostáva z usporiadaných proteínových podjednotiek – kapsomérov.

V najzložitejšie organizovaných fágoch obsahuje distálna časť procesu enzým - lyzozým. Tento enzým podporuje rozpúšťanie bakteriálnej membrány počas prenikania fágového NK do cytoplazmy.

Fágy dobre znášajú mrazenie, zahrievanie na 70 °C a sušenie. Citlivý na kyseliny, UV žiarenie a var. Fágy infikujú presne definované baktérie interakciou so špecifickými bunkovými receptormi.

Podľa špecifickosti interakcie -

Polyfágy – interagujúce s niekoľkými príbuznými druhmi baktérií

Monofágy – druhovo špecifické fágy – interagujú s jedným typom baktérií

Typ fágov – interaguje s jednotlivými variantmi baktérií v rámci druhu.

Podľa pôsobenia typických fágov možno druhy rozdeliť na fágová séria. Interakcia fágov s baktériami môže prebiehať prostredníctvom produktívny, aproduktívny a integračný typ.

Produktívny typ- vytvorí sa fágové potomstvo a bunka sa lýzuje

S aproduktívnym- bunka naďalej existuje, proces interakcie je v počiatočnom štádiu prerušený

Integratívny typ- fágový genóm sa integruje do bakteriálneho chromozómu a koexistuje s ním.

V závislosti od typov interakcie sa rozlišujú virulentné a mierne fágy.

Virulentný interagovať s baktériami produktívnym spôsobom. Po prvé, absorpcia fága na bakteriálnej membráne nastáva v dôsledku interakcie špecifických receptorov. Existuje penetrácia alebo penetrácia vírusovej nukleovej kyseliny do cytoplazmy baktérií. Vplyvom lyzozýmu sa v obale baktérie vytvorí malý otvor, obal fága sa stiahne a vstrekne sa NK. Fágový obal mimo baktérie. Ďalej dochádza k syntéze skorých proteínov. Zabezpečujú syntézu fágových štruktúrnych proteínov, replikáciu fágovej nukleovej kyseliny a represiu aktivity bakteriálnych chromozómov.

Potom nastáva syntéza konštrukčné komponenty fágov a replikácie nukleových kyselín. Z týchto prvkov sa poskladá nová generácia fágových častíc. Zostava sa nazýva morfogenéza, nové častice, ktorých v jednej baktérii môže vzniknúť 10-100. Ďalej nasleduje lýza baktérií a uvoľnenie novej generácie fágov do vonkajšieho prostredia.

Mierne bakteriofágy interagovať buď produktívnym alebo integračným spôsobom. Výrobný cyklus prebieha podobne. Pri integračnej interakcii sa DNA mierneho fága po vstupe do cytoplazmy v určitej oblasti integruje do chromozómu a pri delení buniek sa synchrónne replikuje s bakteriálnou DNA a tieto štruktúry sa prenášajú do dcérskych buniek. Takáto vstavaná fágová DNA - profágia a baktéria obsahujúca profág sa nazýva lyzogénna a tento jav je taký lyzogenéza.

Spontánne, alebo pod vplyvom množstva vonkajších faktorov môže dôjsť k vyrezaniu profága z chromozómu, t.j. prejsť do voľného stavu, prejaviť vlastnosti virulentného fága, čo povedie k vytvoreniu novej generácie bakteriálnych tiel - profágová indukcia.

Lyzogenéza baktérií je základom fágovej (lyzogénnej) konverzie. Toto sa chápe ako zmena charakteristík alebo vlastností lyzogénnych baktérií v porovnaní s nelyzogénnymi baktériami rovnakého druhu. Predmet zmeny rôzne vlastnosti- morfologické, antigénne atď.

Mierne fágy môžu byť defektné – neschopné tvoriť fágové potomstvo, ktoré nie je in prírodné podmienky a na indukcii.

Virion je plnohodnotná vírusová častica pozostávajúca z NK a proteínového obalu

Praktická aplikácia fágov -

1. Aplikácia v diagnostike. Vo vzťahu k množstvu bakteriálnych druhov sa monofágy používajú v reakcii fagolyzovateľnosti ako jedno z kritérií na identifikáciu bakteriálnej kultúry, typické fágy sa používajú na fagotypizáciu a vnútrodruhovú diferenciáciu baktérií. Vykonáva sa na epidemiologické účely, na zistenie zdroja infekcie a spôsobov jej eliminácie
2. Na liečbu a prevenciu mnohých bakteriálnych infekcií - brušný typ stafylokokové a streptokokové infekcie (kyselinovzdorné tablety)
3. Mierne bakteriofágy sa používajú v genetickom inžinierstve ako vektor schopný vniesť genetický materiál do živej bunky.

Genetika baktérií

Bakteriálny genóm pozostáva z genetických prvkov schopných samoreprodukcie - replikóny. Replikóny sú bakteriálne chromozómy a plazmidy. Bakteriálny chromozóm tvorí nukleoid, uzavretý kruh, ktorý nie je spojený s proteínmi a nesie haploidnú sadu génov.

Plazmid je tiež uzavretý kruh molekuly DNA, ale je oveľa menší ako chromozóm. Prítomnosť plazmidov v cytoplazme baktérií nie je potrebná, ale poskytujú výhodu v životné prostredie. Veľké plazmidy sa redukujú s chromozómom a ich počet v bunke je malý. A počet malých plazmidov môže dosiahnuť niekoľko desiatok. Niektoré plazmidy sú schopné reverzibilnej integrácie do bakteriálneho chromozómu v určitej oblasti a fungujú ako jeden replikón. Takéto plazmidy sa nazývajú integračné. Niektoré plazmidy sú schopné prenosu z jednej baktérie na druhú priamym kontaktom - konjugatívne plazmidy. Obsahujú gény zodpovedné za tvorbu F-pilies, ktoré tvoria konjugačný mostík na prenos genetických materiálov.

Hlavné typy plazmidov sú

F - integračný kongatívny plazmid. Pohlavný faktor určuje schopnosť baktérií byť darcami počas konjugácie

R - plazmidy. Odolný. Obsahuje gény, ktoré určujú syntézu faktorov, ktoré ničia antibakteriálne lieky. Baktérie, ktoré majú takéto plazmidy, nie sú citlivé na mnohé lieky. Preto sa vytvárajú faktory rezistentné voči liekom.

Plazmidový tox - určujúce faktory patogenity -

Ent – plazmidy – obsahuje gén na tvorbu enterotoxínov.

Hly - ničí červené krvinky.

Mobilné genetické prvky. Medzi ne patrí vkladanie - vkladacie prvky. Všeobecne akceptované označenie je Is. Sú to úseky DNA, ktoré sa môžu pohybovať v rámci replikónu aj medzi nimi. Obsahujú len gény potrebné pre vlastný pohyb.

transpozóny- väčšie štruktúry, ktoré majú rovnaké vlastnosti ako Is, ale navyše obsahujú štruktúrne gény, ktoré určujú syntézu biologické látky, ako sú toxíny. Mobilné genetické prvky môžu spôsobiť inaktiváciu génov, poškodenie genetického materiálu, fúziu replikónov a rozšírenie génov v celej bakteriálnej populácii.

Variabilita v baktériách.

Všetky typy variability sú rozdelené do 2 skupín – nededičná (fenotypová, modifikačná) a dedičná (genotypová).

Úpravy- fenotypové nezdedené zmeny znakov alebo vlastností. Modifikácie neovplyvňujú genotyp, a preto sa nededia. Sú to adaptívne reakcie na zmeny špecifických podmienok vonkajšie prostredie. Spravidla sa strácajú v prvej generácii, keď faktor prestane pôsobiť.

Genotypová variabilita ovplyvňuje genotyp organizmu, a preto sa môže preniesť na potomkov. Genotypová variabilita sa delí na mutácie a rekombinácie.

Mutácie- pretrvávajúce, dedičné zmeny vlastností alebo vlastností organizmu. Základom mutácií je kvalitatívna alebo kvantitatívna zmena sekvencie nukleotidov v molekule DNA. Mutácie môžu zmeniť takmer akúkoľvek vlastnosť.

Podľa pôvodu sú mutácie spontánne a indukované.

Spontánne mutácie sa vyskytuje v prirodzených podmienkach existencie organizmu a vyvolané vznikajú v dôsledku riadeného pôsobenia mutagénneho faktora. Na základe charakteru zmien primárnej štruktúry DNA u baktérií sa rozlišujú génové alebo bodové mutácie a chromozomálne aberácie.

Génové mutácie vyskytujú v rámci jedného génu a zahŕňajú minimálne jeden nukleotid. Tento typ mutácie môže byť výsledkom nahradenia jedného nukleotidu iným, straty nukleotidu alebo vloženia ďalšieho nukleotidu.

Chromozomálne- môže postihnúť niekoľko chromozómov.

Môže dôjsť k delécii – strate časti chromozómu, alebo k duplikácii – zdvojeniu časti chromozómu. Otočenie časti chromozómu o 180 stupňov je inverzia.

Akákoľvek mutácia sa vyskytuje pod vplyvom určitého mutagénneho faktora. Mutagény sú svojou povahou fyzikálne, chemické a biologické. Ionizujúce žiarenie, röntgenové lúče, UV lúče. Medzi chemické mutagény patria analógy dusíkatých zásad, samotná kyselina dusitá a dokonca aj niektoré lieky, cytostatiká. Biologické – niektoré vírusy a transfazóny

Rekombinácia- výmena chromozómových úsekov

Transdukcia - prenos genetického materiálu pomocou bakteriofága

Oprava genetického materiálu - obnovenie poškodenia spôsobeného mutáciami.

Existuje niekoľko druhov nápravy

1. Fotoreaktivácia – tento proces zabezpečuje špeciálny enzým, ktorý sa aktivuje za prítomnosti viditeľného svetla. Tento enzým sa pohybuje pozdĺž reťazca DNA a opravuje poškodenie. Kombinuje časovače, ktoré sa vytvárajú pôsobením UV žiarenia. Výsledky reparácie tmy sú výraznejšie. Nezávisí od svetla a zabezpečuje ho viacero enzýmov – najskôr nukleázy vyrežú poškodený úsek reťazca DNA, potom DNA polymeráza, na matrici komplementárneho reťazca zachovaná, syntetizuje náplasť a ligázy všijú náplasť do náplasti. poškodená oblasť.

Náhrady podliehajú génové mutácie, ale chromozomálne zvyčajne nie sú

1. Genetická rekombinácia v baktériách. Vyznačujú sa prienikom genetického materiálu z baktérie darcu do baktérie príjemcu s vytvorením dcérskeho genómu obsahujúceho gény oboch pôvodných jedincov.

Inkorporácia fragmentu donorovej DNA do príjemcu nastáva krížením

Tri typy prenosu -

1. Transformácia- proces, pri ktorom sa prenáša fragment izolovanej darcovskej DNA. Závisí od kompetencie príjemcu a stavu darcovskej DNA. kompetencie- schopnosť absorbovať DNA. Závisí od prítomnosti špeciálnych proteínov v bunkovej membráne príjemcu a vytvára sa počas určitých období rastu baktérií. Darcovská DNA musí byť dvojvláknová a nie príliš veľká. Darcovská DNA preniká bakteriálnou membránou a jeden z reťazcov je zničený, druhý je integrovaný do DNA príjemcu.
2. Transdukcia- vykonáva sa pomocou bakteriofágov. Všeobecná transdukcia a špecifická transdukcia.

Všeobecné - sa vyskytuje za účasti faktorov virulencie. Počas zostavovania fágových častíc môže hlava fága omylom obsahovať nie fágovú DNA, ale kúsok bakteriálneho chromozómu. Takéto fágy sú defektné fágy.

Špecifické- uskutočňujú ho mierne fágy. Pri rezaní sa rezanie striktne vykonáva pozdĺž hranice.Sú postavené medzi určité gény a prenášajú ich.

1. Konjugácia- prenos genetického materiálu z darcovskej baktérie na príjemcu pri ich priamom kontakte. Nevyhnutná podmienka- prítomnosť kongatívneho plazmidu v darcovskej bunke. Pri konjugácii sa vďaka pili vytvorí konjugačný mostík, cez ktorý sa prenáša genetický materiál od darcu k pacientovi.

Génová diagnostika

Súbor metód, ktoré umožňujú identifikovať genóm mikroorganizmu alebo jeho fragment v skúmanom materiáli. Ako prvá bola navrhnutá metóda NC hybridizácie. Založené na využití princípu komplementarity. Táto metóda umožňuje zistiť prítomnosť markerových fragmentov DNA patogénu v genetickom materiáli pomocou molekulárnych sond. Molekulárne sondy sú krátke reťazce DNA komplementárne k oblasti markera. K sonde sa pridá fluorescenčná značka, rádioaktívny izotop, enzým. Skúmaný materiál je podrobený špeciálnej úprave, ktorá mu umožňuje ničiť mikroorganizmy, uvoľňovať DNA a deliť ju na jednovláknové fragmenty. Potom je materiál fixovaný. Potom sa zistí aktivita značky. Táto metóda nie je príliš citlivá. Identifikovať patogén je možné len vtedy, ak je jeho množstvo dostatočne veľké. 10 až 4 mikroorganizmy. Je to dosť technicky zložité a vyžaduje si to veľká kvantita sondy. Rozšírené v praxi ho nenašiel. Bol nadizajnovaný nová metóda - polymeráza reťazová reakcia- PCR.

Táto metóda je založená na schopnosti DNA a vírusovej RNA replikovať sa, t.j. k vlastnej reprodukcii. Podstatou pacienta je opakované kopírovanie – in vitro amplifikácia fragmentu DNA, ktorý je markerom pre daný mikroorganizmus. Keďže proces prebieha pri dostatočnej vysoké teploty 70-90 sa metóda stala možná po izolácii termostabilnej DNA polymerázy z termofilných baktérií. Mechanizmus amplifikácie je taký, že kopírovanie reťazcov DNA nezačína v žiadnom bode, ale až v určitých štartovacích blokoch, na vytvorenie ktorých sa používajú tzv. Priméry sú polynukleotidové sekvencie komplementárne ku koncovým sekvenciám skopírovaného fragmentu požadovanej DNA a priméry nielen iniciujú amplifikáciu, ale ju aj obmedzujú. Teraz existuje niekoľko možností PCR, ktoré sa vyznačujú 3 fázami -

1. Denaturácia DNA (rozdelenie na 1 reťazec fragmentov)
2. Pripevnenie základného náteru.
3. Komplementárna adícia reťazcov DNA k dvojitým reťazcom

Tento cyklus trvá 1,5-2 minúty. V dôsledku toho sa počet molekúl DNA zdvojnásobí 20-40 krát. Výsledkom je 10 až 8 mocnina kópií. Po amplifikácii sa uskutoční elektroforéza a izoluje sa vo forme pruhov. Vykonáva sa v špeciálnom zariadení nazývanom zosilňovač.

Výhody PCR

1. Poskytuje priame indikácie prítomnosti patogénu v testovanom materiáli bez izolácie čistej kultúry.
2. Veľmi vysoká citlivosť. Teoreticky sa dá zistiť 1.
3. Materiál na výskum je možné po odbere ihneď dezinfikovať.
4. 100% špecifickosť
5. Rýchle výsledky. Úplná analýza- 4-5 hodín. Expresná metóda.

Široko sa používa na diagnostiku infekčných chorôb, ktorých pôvodcami sú nekultivovateľné alebo ťažko kultivovateľné organizmy. Chlamýdie, mykoplazmy, mnohé vírusy - hepatitída, herpes. Na určenie boli vyvinuté testovacie systémy antrax, tuberkulóza.

Analýza obmedzenia- pomocou enzýmov sa molekula DNA oddelí podľa určitých sekvencií nukleoidov a fragmenty sa analyzujú na základe ich zloženia. Týmto spôsobom môžete nájsť jedinečné oblasti.

Biotechnológia a genetické inžinierstvo

Biotechnológia je veda, ktorá na základe štúdia životne dôležitých procesov živých organizmov využíva tieto bioprocesy, ako aj samotné biologické objekty na priemyselnú výrobu produktov potrebných pre človeka, na reprodukciu bioefektov, ktoré sa neprejavujú neprirodzene. podmienky. Ako biologické objekty Najčastejšie sa používajú jednobunkové mikroorganizmy, ale aj bunky zo zvierat a rastlín. Bunky sa množia veľmi rýchlo, čo umožňuje krátky čas zvýšiť biomasu výrobcu. V súčasnosti je biosyntéza komplexných látok, ako sú bielkoviny, antibiotiká, ekonomickejšia a technologicky dostupnejšia ako iné druhy surovín.

Biotechnológia využíva ako zdroj cieľového produktu samotné bunky, ako aj veľké molekuly syntetizované bunkou, enzýmy, toxíny, protilátky a primárne a sekundárne metabolity – aminokyseliny, vitamíny, hormóny. Technológia získavania produktov mikrobiálnej a bunkovej syntézy pozostáva z niekoľkých typických etáp - výber alebo vytvorenie produktívneho sídla. Výber optimálneho živného média, kultivácia. Izolácia cieľového produktu, jeho čistenie, štandardizácia, podávanie lieková forma. Genetické inžinierstvo spočíva v vytváraní cieľových produktov potrebných pre ľudí. Výsledný cieľový gén je fúzovaný s vektorom a vektorom môže byť plazmid a je vložený do recipientnej bunky. Príjemca – baktérie – E. coli, kvasinky. Cieľové produkty syntetizované rekombinantmi sú izolované, purifikované a používané v praxi.

Ako prvé boli vytvorené inzulín a ľudský interferón. Erytropoetín, rastový hormón, monoklonálne protilátky. Vakcína proti hepatitíde B.

Praktická aplikácia fágov. Bakteriofágy sa používajú v laboratórnej diagnostike infekcií na intrašpecifickú identifikáciu baktérií, t.j. stanovenie fagovaru (fagotypu). Na tento účel sa používa metóda fágová typizácia, na základe prísnej špecifickosti pôsobenia fágov: kvapky rôznych diagnostických typovo špecifických fágov sa aplikujú na doštičku s hustým živným médiom vysiatym „trávnikom“ čistej kultúry patogénu. Fág baktérie je určený typom fága, ktorý spôsobil jej lýzu (tvorba sterilnej škvrny, „plaku“ alebo „negatívnej kolónie“, fág). Technika fágovej typizácie sa používa na identifikáciu zdroja a ciest šírenia infekcie (epidemiologické značenie). Izolácia baktérií rovnakého fagovaru od rôznych pacientov naznačuje spoločný zdroj ich infekcie.

Fágy sa tiež používajú na liečbu a prevenciu množstvo bakteriálnych infekcií. Produkujú týfus, salmonelu, dyzentériu, pseudomonas, stafylokokové, streptokokové fágy a kombinované prípravky (koliproteus, pyobakteriofágy atď.). Bakteriofágy sa predpisujú podľa indikácií perorálne, parenterálne alebo lokálne vo forme tekutín, tabliet, čapíkov alebo aerosólov.

Bakteriofágy sú široko používané v genetickom inžinierstve a biotechnológii ako vektory na produkciu rekombinantnej DNA.

Pôvodcovia escherichiózy. Taxonómia a charakteristika. Úloha Escherichia coli v normálnych a patologických stavoch. Mikrobiologická diagnostika enterálnej escherichiózy. Zásady liečby a prevencie.

Escherichióza- infekčné choroby, ktorej pôvodcom je Escherichia coli.

Existuje enterálna (črevná) a parenterálna escherichióza. Enterálna escherichióza je akútne infekčné ochorenie charakterizované primárnym poškodením gastrointestinálneho traktu. Vyskytujú sa vo forme ohnísk, pôvodcami sú hnačkové kmene E. coli. Parenterálna escherichióza je ochorenie spôsobené oportúnnymi kmeňmi E. coli - predstaviteľmi normálnej mikroflóry hrubého čreva. Pri týchto ochoreniach je možné poškodenie akýchkoľvek orgánov.

Taxonomická pozícia. Pôvodca - Escherichia coli - je hlavným predstaviteľom rodu Escherichia, čeľade Enterobacteriaceae, patriacej do oddelenia Gracilicutes.

Morfologické a farbiace vlastnosti. E.coli sú malé gramnegatívne tyčinky so zaoblenými koncami. V náteroch sú usporiadané náhodne, netvoria spóry, peritrichózne. Niektoré kmene majú mikrokapsulu, pili.

Kultúrne vlastnosti. Escherichia coli je fakultatívne anaeróbne, optimálne. tempo. pre výšku - 37C. E.coli nie náročné živné médiá a dobre rastie na jednoduchých médiách, čím vytvára difúzny zákal na tekutých médiách a vytvára kolónie na hustých médiách. Na diagnostiku escherichiózy sa používajú diferenciálne diagnostické médiá s laktózou - Endo, Levin.

Enzýmová aktivita. E.coli má veľký súbor rôznych enzýmov. Väčšina punc E.coli je jeho schopnosť fermentovať laktózu.

Antigénna štruktúra. Escherichia coli má somatické O-, bičíkové H a povrchové K antigény. O-antigén má viac ako 170 variantov, K-antigén - viac ako 100, H-antigén - viac ako 50. Štruktúra O-antigénu určuje jeho séroskupinu. Kmene E. coli majúce vlastnú sadu antigénov (antigénny vzorec) sa nazývajú sérologické varianty (sérovary).

Podľa antigénnych, toxigénnych vlastností sa rozlišujú dve: biologický variant E. coli:

1) oportunistické coli;

2) „určite“ patogénne, hnačkové.

Faktory patogenity. Tvorí endotoxín, ktorý má enterotropné, neurotropné a pyrogénne účinky. Hnačková Escherichia produkuje exotoxín, ktorý spôsobuje výrazné narušenie metabolizmu voda-soľ. Okrem toho niektoré kmene, ako napríklad pôvodcovia dyzentérie, obsahujú invazívny faktor, ktorý podporuje prenikanie baktérií do buniek. Patogenita hnačkovej escherichie je vo výskyte krvácania a nefrotoxického účinku. K faktorom patogenity všetkých kmeňov E.coli zahŕňajú pili a proteíny vonkajšej membrány, ktoré podporujú adhéziu, ako aj mikrokapsulu, ktorá zabraňuje fagocytóze.

Odpor. E.coli má vyššiu odolnosť voči pôsobeniu rôznych faktorov vonkajšie prostredie; je citlivý na dezinfekčné prostriedky a pri varení rýchlo odumiera.

RoleE.coli. Escherichia coli je predstaviteľom normálnej mikroflóry hrubého čreva. Je antagonistom patogénnych črevných baktérií, hnilobných baktérií a húb rodu Candida. Okrem toho sa podieľa na syntéze vitamínov B, E A TO,čiastočne rozkladá vlákninu.

Kmene, ktoré žijú v hrubom čreve a sú oportúnne, sa môžu dostať mimo gastrointestinálny trakt a s poklesom imunity a ich hromadením sa stávajú príčinou rôznych nešpecifických hnisavých zápalových ochorení (cystitída, cholecystitída) - parenterálna escherichióza.

Epidemiológia. Zdrojom enterickej escherichiózy sú chorí ľudia. Mechanizmus infekcie - fekálno-orálny, prenosové cesty - stravovacie, kontaktné a domáce.

Patogenéza.Ústna dutina.Dostáva sa do tenké črevo, sa adsorbuje v epitelových bunkách pomocou pili a proteínov vonkajšej membrány. Baktérie sa množia a odumierajú, pričom sa uvoľňuje endotoxín, ktorý zvyšuje intestinálnu motilitu, spôsobuje hnačku, horúčku a iné príznaky celkovej intoxikácie. Produkuje exotoxín - silné hnačky, vracanie a výrazné narušenie metabolizmu voda-soľ.

POLIKLINIKA. Inkubačná doba je 4 dni. Choroba začína akútne, horúčkou, bolesťou brucha, hnačkou a vracaním. Vyskytujú sa poruchy spánku a chuti do jedla a bolesti hlavy. Pri hemoragickej forme sa krv nachádza v stolici.

Imunita. Po minulé ochorenie imunita je krehká a krátkodobá.

Mikrobiologická diagnostika . Základná metóda - bakteriologické. Je určený typ čistej kultúry (gramnegatívne bacily, oxidázanegatívne, fermentujúce glukózu a laktózu na kyselinu a plyn, tvoriace indol, netvoriace sírovodík) a príslušnosť k séroskupine, ktorá umožňuje rozlíšiť oportúnne E. coli od hnačkových. Vnútrošpecifická identifikácia, ktorá má epidemiologický význam, spočíva v stanovení sérovaru pomocou diagnostických adsorbovaných imunitných sér.

83. Štruktúra a funkcie imunitného systému.