सेनेटरी-हेल्मिन्थोलॉजिकल रिसर्च। सब्जियों, फलों और जामुनों का अनुसंधान

मल की जांच

माइक्रोस्कोपी को पहले कम आवर्धन (X80) पर किया जाता है। सरलतम को प्रकाश के एक मजबूत अपवर्तन द्वारा और कुछ प्रजातियों को उनके आंदोलन या आकार में परिवर्तन द्वारा प्रतिस्थापित किया जा सकता है। कम आवर्धन पर देखी गई वस्तु की जांच 400 या 600 के आवर्धन पर की जाती है। अनुभव के अभाव में, स्मीयरों को तुरंत देखा जाना चाहिए उच्च आवर्धन, हालांकि, दवा का अध्ययन करने के लिए समय में काफी वृद्धि करता है। उच्च आवर्धन पर स्मीयरों को देखना तेज रोशनी में किया जाना चाहिए, इसे एक कंडेनसर के साथ समायोजित करना चाहिए।

अंतर संकेत ख़ास तरह केएक देशी स्मीयर में अमीबा शरीर का आकार और आकार, नाभिक की दृश्यता, स्यूडोपोडिया के गठन की प्रकृति, आंदोलन, साइटोप्लाज्म का एक्टो- और एंडोप्लाज्म में विभाजन, समावेशन की प्रकृति (फागोसाइटोज्ड एरिथ्रोसाइट्स, वगैरह।)। फ्लैगेलेट प्रजातियों को विभेदित करते समय - शरीर का आकार और आकार, फ्लैगेल्ला की संख्या, गति की प्रकृति, एक लहरदार झिल्ली की उपस्थिति या अनुपस्थिति। बैलेंटिडिया की विशिष्ट विशेषताएं आकार, शरीर का आकार, गति, सिलिया, साइटोस्टोम आदि हैं।

मुख्य बानगीजीवित अवस्था में प्रोटोजोआ का वानस्पतिक रूप गति करता है। स्मीयरों में मिला विभिन्न प्रकारअचल संरचनाएं - वनस्पति फाइबर, मांसपेशी फाइबर, बीजाणु, कवक, आदि। प्रोटोजूलॉजिकल निदान में उन्हें ध्यान में नहीं रखा जाना चाहिए।

नेटिव स्मीयर विधि किसी भी प्रयोगशाला के लिए सरल और सुलभ है। फागोसाइटोज्ड एरिथ्रोसाइट्स के साथ पेचिश अमीबा के ऊतक रूपों को खोजने पर यह अनुमति देता है, पूरी तरह से डालने के लिए सटीक निदानअमीबिक पेचिश, और बैलेंटिडिया और जियार्डिया का पता लगाने पर - बैलेन्टिडायसिस और जिआर्डियासिस का निदान।

ल्यूगोल के घोल से धुंधला स्मियर . इस दाग का उपयोग सिस्ट द्वारा प्रोटोजोआ के निदान के लिए किया जाता है। इसका उपयोग औपचारिक, अर्ध-गठित और गूदेदार मल के अध्ययन में किया जाता है।

स्मीयर तैयार करने के लिए, एक लकड़ी की छड़ी के सिरे को मल में भिगोया जाता है और एक बूंद में धोया जाता है आयोडीन घोल(जे - 1.0 ग्राम, केजे - 2 ग्राम, आसुत जल - 100 मिली) एक समान इमल्शन प्राप्त होने तक एक ग्लास स्लाइड पर जमा किया जाता है। तैयारी एक कवरस्लिप के साथ और 3-5 मिनट के बाद कवर की जाती है। सूक्ष्म। स्मीयर इतना पारदर्शी होना चाहिए कि संचरित प्रकाश में उसका अध्ययन किया जा सके।

अवशेषों के बीच अपचित भोजन, बीजाणु, कवक, आयोडोफिलिक बैक्टीरिया प्रोटोजोआ सिस्ट, भूरे या हरे-पीले रंग में चित्रित, एक कड़ाई से परिभाषित, प्रत्येक प्रजाति के आकार, आकार, किनारों की अलग-अलग रूपरेखा, एक चिकनी, पारदर्शी, डबल की उपस्थिति से प्रतिष्ठित हैं। सर्किट झिल्ली, साइटोप्लाज्म की सामग्री, साथ ही एक अस्पष्ट संरचना के साथ नाभिक की उपस्थिति। अमीबा सिस्ट में, भूरे (गहरे भूरे) रंग में रंगे हुए ग्लाइकोजन रिक्तिकाएं दिखाई देती हैं। इन रिक्तिका के रंग की डिग्री और उनकी सीमाओं की रूपरेखा उनकी परिपक्वता के आधार पर एक ही प्रजाति के प्रोटोजोअन सिस्ट में भिन्न होती है।

अध्याय III। हेल्मिंथियस का निदान और हेल्मिन्थोलॉजिकल रिसर्च के तरीके

आवेदन करने वाले सभी रोगियों को हेलमिंथियासिस की जांच करना आवश्यक है चिकित्सा देखभाल, और विशेष रूप से रोगी जो घटना की शिकायतों के साथ बाल रोग विशेषज्ञ, चिकित्सक और न्यूरोलॉजिस्ट के पास जाते हैं जठरांत्र पथ, तंत्रिका तंत्रऔर एनीमिया के साथ। यदि डॉक्टर हमेशा प्रयोगशाला अनुसंधान विधियों को लागू नहीं कर सकता है, तो हर कोई रोगी से हेलमन्थ्स की रिहाई के बारे में साक्षात्कार करने के लिए बाध्य है। चिकित्सा कार्यकर्ताएक आउट पेशेंट या अस्पताल सेटिंग में देखभाल प्रदान करना।

यदि प्रासंगिक अध्यायों में नैदानिक ​​​​संकेत दिए गए हैं, तो निदान का उपयोग करके स्पष्ट किया जाना चाहिए प्रयोगशाला के तरीकेहेल्मिंथियासिस पर शोध

प्रधानता के कारण आंतों के हेल्मिंथियासिसमहानतम व्यावहारिक मूल्यमल त्याग का अध्ययन किया है।

हेल्मिंथियासिस के लिए मल के अध्ययन के तरीके

मल को साफ कांच के बने पदार्थ (लगभग एक चौथाई कप मल से लिया गया) में प्रयोगशाला में पहुंचाया जाता है अलग - अलग जगहेंएक भाग); एक नियमित परीक्षा के दौरान, माचिस या लोकप्रिय प्रिंट में प्रयोगशाला में मल के वितरण की अनुमति है।

डीवॉर्मिंग को नियंत्रित करने के लिए, सेवन के बाद एकत्र किए गए मल के पूरे हिस्से को डिलीवर किया जाता है (जैसा कि डॉक्टर द्वारा निर्धारित किया गया है)। कृमिनाशकऔर रेचक (बड़े बंद कांच के जार, बाल्टी में)।

आंतों के हेल्मिंथियासिस के निदान में मल की सूक्ष्म जांच मुख्य है; बड़े सेस्टोड, पिनवॉर्म, राउंडवॉर्म आदि के खंडों का पता लगाने के लिए मल की सामान्य मैक्रोस्कोपिक परीक्षा से पहले इसे हमेशा किया जाना चाहिए।

मल ताजा या डिब्बाबंद (5% फॉर्मेलिन घोल में) होना चाहिए, क्योंकि सुखाने से अंडों की संरचना नाटकीय रूप से बदल जाती है। इसके अलावा, खड़े होने पर मल होता है तेजी से विकासकुछ हेलमिन्थ्स के अंडे (उदाहरण के लिए, हुकवर्म), जिससे निदान मुश्किल हो जाता है।

यूएसएसआर के स्वास्थ्य मंत्रालय के निर्देशों के अनुसार, फुलबॉर्न विधि और देशी स्मीयर का उपयोग करके एक साथ मल की जांच करना आवश्यक है।

देशी धब्बा

नेटिव स्मीयर: मल का एक छोटा टुकड़ा (एक मटर के आकार का), एक माचिस, एक कांच या लकड़ी की छड़ी के साथ वितरित हिस्से के विभिन्न स्थानों से लिया जाता है, 50% ग्लिसरॉल समाधान की एक बूंद में कांच की स्लाइड पर सावधानी से ट्रिट्यूरेट किया जाता है या खारे में, या पानी में। एक कवरस्लिप के साथ कवर करें, बाद वाले को थोड़ा दबाएं (एक विदारक सुई के साथ)। स्मीयर पतला, पारदर्शी और एक समान होना चाहिए। इसका उपयोग केवल अन्य तरीकों के अतिरिक्त के रूप में किया जाता है जो दवा को समृद्ध करते हैं। कम से कम दो तैयारी देखी जानी चाहिए।

हेल्मिंथ लार्वा (साथ ही उनके अंडे) का पता लगाने के लिए, एक देशी स्मीयर किया जाता है इस अनुसार(शुलमैन के अनुसार): 2-3 ग्राम मल को कांच की छड़ से "घुमा" कर पांच गुना मात्रा में पायस में मिलाया जाता है। शुद्ध पानीया शारीरिक खारा. सरगर्मी के दौरान, लार्वा कांच की छड़ पर जमा हो जाता है, इसलिए, सरगर्मी के अंत के तुरंत बाद, इमल्शन की एक बूंद को कांच की छड़ के साथ एक कांच की स्लाइड में स्थानांतरित किया जाता है, एक कवरस्लिप के साथ कवर किया जाता है और जांच की जाती है। S. D. Lyubchenko (1936) ने साबित किया कि घुमा विधि स्मीयर विधि की तुलना में अधिक प्रभावी है, विशेष रूप से एस्केरिस अंडे के संबंध में। S. D. Lyubchenko के काम के आधार पर, हम स्मीयर विधि को ट्विस्ट विधि से बदलना उचित समझते हैं।

फुलबॉर्न विधि

फुलबॉर्न विधि: अलग-अलग जगहों से लिए गए 5-10 ग्राम मल को 50-100 मिलीलीटर की क्षमता वाले जार में रखा जाता है और एक संतृप्त घोल में कांच या लकड़ी की छड़ से सावधानीपूर्वक ट्रिट्यूरेट किया जाता है। टेबल नमक(इस नमक के 400 ग्राम को 1 लीटर पानी में घोलकर उबालने के लिए गर्म किया जाता है और रूई या धुंध की एक परत के माध्यम से छान लिया जाता है; इस घोल का उपयोग ठंडा किया जाता है: विशिष्ट गुरुत्व 1,2)। एक समान निलंबन प्राप्त होने तक घोल को धीरे-धीरे डाला जाता है, और डाले गए घोल की कुल मात्रा लगभग 20 गुना होनी चाहिए अधिक मात्रामल। फुलबॉर्न ने मल के मिश्रण के लिए चाय के गिलास के उपयोग की सिफारिश की, लेकिन प्रत्येक विश्लेषण के लिए दो जार (या 100 मिलीलीटर कप में) का उपयोग करके 50-100 मिलीलीटर मरहम जार में निलंबन तैयार करना अधिक सुविधाजनक है।

निलंबन की तैयारी के तुरंत बाद, सतह पर तैरने वाले बड़े कण सतह से एक स्पैटुला, एक धातु स्कूप या साफ कागज के टुकड़े से हटा दिए जाते हैं ( पौधों की संरचना, बिना पका हुआ भोजन अवशेष, आदि), जिसके बाद मिश्रण को 1-1.5 घंटे के लिए खड़े रहने के लिए छोड़ दिया जाता है। इस समय के बाद, पूरी फिल्म को मिश्रण की सतह से एक तार या प्लेटिनम लूप (फ्लैट) को 1 सेमी से अधिक नहीं के व्यास के साथ छूकर हटा दिया जाता है, जो समकोण पर झुकता है; फिल्म को कांच की स्लाइड पर हिलाया जाता है और कवरस्लिप से ढका जाता है। प्रत्येक कवरस्लिप (18x18 मिमी) के नीचे 3-4 बूंदें रखें। कुल मिलाकर, कम से कम 4 तैयारी तैयार की जानी चाहिए (प्रत्येक तैयारी के लिए एक कवरस्लिप)। लूप को आग पर शांत किया जाता है और प्रत्येक विश्लेषण के बाद पानी से धोया जाता है।

फुलबॉर्न विधि के अनुसार, सभी नेमाटोड के अंडे (अनिषेचित राउंडवॉर्म अंडे के अपवाद के साथ) और बौने टैपवार्म अंडे जल्दी और आसानी से पाए जाते हैं।

बर्मन विधि का उपयोग हेल्मिंथ लार्वा (स्ट्रांग्लोडायसिस के साथ) के लिए मल का अध्ययन करने के लिए किया जाता है। यह विधि इस प्रकार है: एक धातु ग्रिड (इस उद्देश्य के लिए एक दूध छलनी सुविधाजनक है) पर 5 ग्राम मल को एक तिपाई से जुड़े कांच की कीप पर रखा जाता है। कीप के निचले सिरे पर क्लैंप के साथ एक रबर ट्यूब लगाई जाती है।

मल के साथ जाल को उठा लिया जाता है और पानी को लगभग 50 ° तक गर्म करके फ़नल में इस तरह डाला जाता है कि नीचे के भागमल वाले जाल पानी में डूबे हुए थे। लार्वा सक्रिय रूप से पानी में चले जाते हैं और रबर ट्यूब के निचले हिस्से में जमा हो जाते हैं। 2-4 घंटे के बाद, क्लैंप खोला जाता है और तरल को एक या दो अपकेंद्रित्र ट्यूबों में उतारा जाता है।

1-2 मिनट के लिए सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद ऊपरी हिस्सातरल पदार्थ जल्दी से निकल जाते हैं, और अवक्षेप को कांच की स्लाइड पर बूंदों में लगाया जाता है और कवरस्लिप या वितरित के तहत जांच की जाती है पतली परत 2-3 बड़े ग्लास पर और फिर बिना कवर ग्लास के जांच करें।

हुकवर्म लार्वा की उपस्थिति के लिए मिट्टी की जांच करने के लिए बर्मन विधि का भी उपयोग किया जाता है।

स्टोल विधि

आक्रमण की तीव्रता को निर्धारित करने के लिए स्टोल पद्धति का उपयोग किया जाता है। 56 सेमी 3 के निशान के लिए एक विशेष ग्लास फ्लास्क में एक विशेष सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल डाला जाता है, और तब तक मल डाला जाता है जब तक कि तरल स्तर 60 सेमी 3, यानी 4 सेमी 3 तक नहीं पहुंच जाता। कांच के मोतियों से हिलाने के बाद, मिश्रण का 0.075 मिलीलीटर परीक्षण के लिए लिया जाता है और एक या दो साधारण आवरणों के नीचे जांच की जाती है। मल के 1 सेमी 3 में निहित अंडों की संख्या प्राप्त करने के लिए परिणामी राशि को 200 से गुणा किया जाता है।

डुओडनल सामग्री का अध्ययन

डुओडेनल रस और पित्ताशय की थैली, सामान्य तरीके से जांच (और सिस्टिक पित्त और पित्ताशय की थैली से पलटा के बाद) द्वारा प्राप्त की जाती है, एक समान मात्रा के साथ अच्छी तरह से मिलाया जाता है एथिल ईथर; मिश्रण को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है, जिसके बाद सूक्ष्मदर्शी के नीचे अवक्षेप की जांच की जाती है। तलछट के अलावा सूक्ष्मदर्शी द्वारा परीक्षणतरल में तैरते हुए गुच्छे, जिसमें हेलमिन्थ अंडे हो सकते हैं, आवश्यक रूप से उजागर होते हैं। हेलमिंथ अंडे के लिए परीक्षण करते समय आमाशय रसऔर उल्टी, आप एक ही तकनीक का उपयोग कर सकते हैं।

यदि आपको संदेह है तो ग्रहणी रस और पेट की सामग्री की जांच की जानी चाहिए हेल्मिंथिक रोगजिगर, पित्ताशय की थैली (opisthorchiasis, fascioliasis, dicroceliosis) और ग्रहणी(स्ट्रांग्लोडायसिस)।

थूक की जांच

थूक को एक कांच की प्लेट पर रगड़ा जाता है, कसकर एक और कांच की प्लेट से ढक दिया जाता है और एक हल्की और काली पृष्ठभूमि पर नग्न आंखों के साथ-साथ संचरित प्रकाश में एक आवर्धक कांच के नीचे जांच की जाती है। थूक के अलग-अलग टुकड़े ("जंग" संचय, ऊतक के स्क्रैप, आदि) एक कांच की स्लाइड पर एक पतली परत में लगाए जाते हैं, एक कवरस्लिप के साथ कसकर कवर किया जाता है और कम और उच्च आवर्धन माइक्रोस्कोप पर जांच की जाती है।

ए) त्वचा के सिस्टीसर्कोसिस के निदान के लिए, चमड़े के नीचे ऊतकया मांसपेशियां, संबंधित ऊतक के एक असमान रूप से कटे हुए टुकड़े की पहले नग्न आंखों से जांच की जाती है। दृश्य का पता लगाने के लिए विदारक सुइयों के साथ ऊतक वर्गों को अलग किया जाता है एक साधारण आँख सेपुटिका - सिस्टीसर्कस (फोटो ए); इसकी लंबाई 6-20 मिमी, चौड़ाई 5-10 मिमी है। जब एक बुलबुला पाया जाता है जो सिस्टीसर्कस का संदिग्ध होता है, तो इसे दो ग्लास स्लाइड्स के बीच कुचल दिया जाता है और माइक्रोस्कोप के नीचे जांच की जाती है। सिस्टीसर्कस (Cistycercus cellulosae) चार सकर और हुक के प्रभामंडल के साथ एक स्कोलेक्स की उपस्थिति से निर्धारित होता है (फोटो बी)।

तस्वीर।ए - स्कोलेक्स के साथ सिस्टीसर्की बाहर की ओर निकला; बी - सूअर का मांस टैपवार्म का सिर।

बी) ट्राइचिनोसिस का निदान करने के लिए, मांसपेशियों के एक असमान रूप से कटे हुए टुकड़े (बाइसेप्स या गैस्ट्रोकेनमियस) को 50% ग्लिसरॉल के घोल में विदारक सुइयों का उपयोग करके सबसे पतले तंतुओं में कुचल दिया जाता है। कुचली हुई मांसपेशियों को दो कांच की स्लाइडों के बीच निचोड़ा जाता है और देखने के अंधेरे क्षेत्र में माइक्रोस्कोप के कम आवर्धन पर जांच की जाती है। ट्राइचिनोसिस के लिए मांसपेशियों की जांच रोग के 8 वें दिन से पहले नहीं करने की सलाह दी जाती है। त्रिचिनेला लार्वा मांसपेशियों में कुंडलित स्थिति में होते हैं: वे नींबू के आकार के कैप्सूल में बंद होते हैं।

तस्वीर।ए - मांसपेशियों में त्रिचीनेला लार्वा; बी - त्रिचिनेला के कैल्सिफाइड कैप्सूल।

प्रतिदीप्तिदर्शन

सबसे अधिक बार, फ्लोरोस्कोपी का उपयोग इचिनेकोकोसिस के निदान के लिए किया जाता है और, कम अक्सर, सिस्टीसर्कोसिस। कैल्सीफिकेशन के बाद ही फ्लोरोस्कोपी द्वारा सिस्टीसर्की का पता लगाया जाता है (मामलों में लंबी बीमारी). पीछे पिछले साल काप्रारंभिक लार्वा अवस्था में और आंशिक रूप से आंतों के चरण में एस्कारियासिस का निदान करने के लिए फ्लोरोस्कोपी का भी उपयोग किया जाता है।

फेफड़े में एस्केरिस लार्वा (और हुकवर्म) के प्रवास की अवधि के दौरान, अस्थिर, कभी-कभी कई भड़काऊ foci का पता लगाया जाता है; उसी समय, रक्त में महत्वपूर्ण ईोसिनोफिलिया प्रकट होता है।

प्रभावित व्यक्तियों की आंतों की फ्लोरोस्कोपी पर यौन रूप से परिपक्व राउंडवॉर्म स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं। यह विधि, इसकी जटिलता और बोझिलता के बावजूद, नकारात्मक स्कैटोलॉजिकल विश्लेषण वाले मामलों में एस्कारियासिस के निदान के लिए एक अतिरिक्त विधि के रूप में उपयोग की जानी चाहिए। ई। एस। गेसेलेविच के अनुसार, फ्लोरोस्कोपी द्वारा पहचाने गए एस्कारियासिस वाले 180 रोगियों में से 54 एस्केरिस अंडे मल में नहीं पाए गए (देखें)।

हेल्मिंथोलॉजिकल तरीकेशोध करना. हेल्मिंथियस के निदान के तरीकों को प्रत्यक्ष में विभाजित किया गया है, जो स्वयं या उनके टुकड़ों के प्रत्यक्ष पता लगाने के साथ-साथ लार्वा और हेलमिन्थ्स के अंडे (मल, मूत्र, पित्त और ग्रहणी सामग्री, थूक, रक्त और ऊतकों की जांच के तरीके) के आधार पर विभाजित हैं। पेरिअनल एरिया और सबंगुअल स्पेस से स्क्रैप करके प्राप्त सामग्री), और अप्रत्यक्ष, जिसकी मदद से वे प्रकट करते हैं माध्यमिक परिवर्तनहेल्मिन्थ्स की महत्वपूर्ण गतिविधि के परिणामस्वरूप मानव शरीर में उत्पन्न होना (रक्त की रूपात्मक संरचना का अध्ययन, इम्यूनोलॉजिकल तरीकेहेल्मिंथियासिस का निदान एक्स-रे अध्ययनवगैरह।)। प्रत्यक्ष विधियों में से, सबसे आम सह-वैज्ञानिक हैं, जिन्हें मैक्रो- और माइक्रोहेल्मिन्थोस्कोपी में विभाजित किया गया है। कुछ मामलों में, विशेष विधियों का उपयोग किया जाता है।

मैक्रोगेलमिटोस्कोपी अनुसंधान के तरीकेहेलमिंथ या उनके टुकड़े (स्कोलेक्स, सेगमेंट, सेस्टोड्स के स्ट्रोबिला के हिस्से) की खोज के उद्देश्य से। उनका उपयोग उन हेल्मिंथियासिस के निदान के लिए किया जाता है जिसमें रोगी के मलमूत्र के साथ अंडे नहीं निकलते हैं या थोड़ी मात्रा में उत्सर्जित होते हैं और हमेशा नहीं (उदाहरण के लिए, एंटरोबियासिस के साथ, पिनवॉर्म मल में पाए जाते हैं, टेनिडोज़, सेगमेंट के साथ)।

मल में पिनवॉर्म या सेस्टोड के खंडों का पता लगाने के लिए, मल को नग्न आंखों से देखा जाता है। के लिए क्रमानुसार रोग का निदानटेनिआसिस, काले फोटोग्राफिक क्युवेट्स में या पेट्री डिश में अलग-अलग छोटे भागों में पानी से पतला मल देखने की सिफारिश की जाती है डार्क बैकग्राउंड. दो कांच की स्लाइडों के बीच एक आवर्धक कांच के नीचे कीड़े के टुकड़ों के संदिग्ध बड़े संरचनाओं की जांच की जाती है। अगर द्वारा नैदानिक ​​संकेतउपचार के बाद छोटे हेलमिन्थ्स या सेस्टोड्स के सिर का पता लगाने का सुझाव दें, फिर ग्लिसरॉल की एक बूंद में एक आवर्धक कांच के नीचे संदिग्ध कणों की जांच की जाती है, और यदि आवश्यक हो, तो एक माइक्रोस्कोप के तहत।

माइक्रोहेल्मिन्थोस्कोपी अनुसंधान के तरीके(गुणात्मक) का उद्देश्य कीड़े के अंडे और लार्वा की पहचान करना है। काटो के अनुसार सिलोफ़न कवर प्लेट के साथ मोटी स्मीयर विधि लागू करें। काटो मिश्रण में 6 होते हैं एमएल 3% जलीय घोलमैलाकाइट ग्रीन, 500 एमएलग्लिसरीन और 500 एमएल 6% फिनोल समाधान। काटो प्लेटें (हाइड्रोफिलिक सिलोफ़न 20'40 टुकड़ों में कटी हुई मिमी) 24 पर विसर्जित होते हैं एचकाटो मिश्रण में डालें ताकि वे एक दूसरे से सटे हों (3-5 एमएल 100 प्लेटों के लिए काटो का घोल)। 100 एमजीमल को कांच की स्लाइड पर लगाया जाता है, काटो के अनुसार सिलोफ़न कवर प्लेट के साथ कवर किया जाता है और नीचे दबाया जाता है ताकि मल सिलोफ़न प्लेट के भीतर कांच की स्लाइड पर फैल जाए। स्मीयर को कमरे के तापमान पर 40-50 तक स्पष्टीकरण के लिए छोड़ दिया जाता है मिनट,और फिर एक खुर्दबीन के नीचे देखा। गर्म मौसम में, तैयारी को सूखने से रोकने के लिए, तैयार तैयारी की प्लेट पर एक गीला स्पंज रखा जाता है।

सभी प्रकार के कीटाणुओं का पूरी तरह से पता लगाने के लिए, काटो सिलोफ़न कवर प्लेट थिक स्मीयर विधि का उपयोग संवर्धन विधियों में से एक के साथ किया जाना चाहिए। इनमें से सबसे आम कलंतरायण पद्धति और फुलबॉर्न विधि हैं।

कलंतरायण विधि: 100 की चौड़ी गर्दन वाले फ्लास्क में एमएलकाँच की छड़ से अच्छी तरह हिलाएँ 5 जीमल, धीरे-धीरे सोडियम नाइट्रेट का एक संतृप्त घोल जोड़ना (1 किलोग्रामसोडियम नाइट्रेट प्रति 1 एलपानी जब उबल रहा हो) गिलास के रिम तक। बड़े कण जो सतह पर तैरते हैं, उन्हें पेपर स्कूप से हटा दिया जाता है। ज़मीनी स्तर पर नमकीन घोलएक स्लाइड लगाई जाती है (खारा घोल तब तक डाला जाता है जब तक कि मिश्रण स्लाइड के पूर्ण संपर्क में न आ जाए)। 20-30 के बाद मिनकांच की स्लाइड को हटा दिया जाता है और फिल्म को सूक्ष्मदर्शी के नीचे देखा जाता है। इस नमक की अनुपस्थिति में, आप Fholleborn (400 जी 1 में नमक एलउबला पानी)।

इस तथ्य के कारण कि एक बड़े विशिष्ट गुरुत्व वाले अंडे (एस्केरिड्स के अनिषेचित अंडे, ट्रेमेटोड्स के अंडे और बड़े सेस्टोड्स) तैरते नहीं हैं, तरल की सतह परत की जांच के अलावा, फुलबोर्न विधि का उपयोग करते समय, यह देखना आवश्यक है एक खुर्दबीन के नीचे तलछट से 2-4 तैयारी।

विभिन्न कृमिरोगों के लिए विशेष प्रयोगशाला अनुसंधान विधियाँ।

ट्राइकोमोनिएसिस बहुत आम है। जननांग संक्रमण, लेकिन इसके बिना इसकी पुष्टि करने के लिए प्रयोगशाला परीक्षणअसंभव। 1980 के दशक में वापस, अध्ययनों से पता चला कि यदि हम खुद को केवल रोगी के साक्षात्कार और जांच तक सीमित रखते हैं, तो केवल 12% मामलों में ट्राइकोमोनिएसिस का सही निदान करना संभव है। इसीलिए प्रयोगशाला निदानपुरुषों और महिलाओं में ट्राइकोमोनिएसिस बहुत मायने रखता है।

रोगज़नक़ (ट्राइकोमोनास वेजिनालिस) की पहचान करने के लिए, डॉक्टर उपयोग करते हैं विभिन्न तरीकेशोध करना। कुछ विश्लेषण अधिक सटीक होते हैं, और कुछ अक्सर गलत होते हैं; कुछ की कीमत मामूली है, और कुछ की काफी महंगी है।

हम समझते हैं कि पुरुषों और महिलाओं में ट्राइकोमोनिएसिस के लिए कौन से परीक्षण हैं: विधियों की सटीकता, लागत, पेशेवरों और विपक्ष।

संक्षेप में प्रत्येक विधि के बारे में: माइक्रोस्कोपी, संस्कृति, पीसीआर, एलिसा, आरआईएफ

अगर किसी पर शक है संक्रमणरोगी निर्धारित है सामान्य विश्लेषणरक्त और मूत्र। उनके परिणाम सूजन का संकेत दे सकते हैं, लेकिन यह नहीं दिखाते कि कौन सा रोगज़नक़ इसका कारण है।

उदाहरण के लिए, ट्राइकोमोनास के कारण सूजन के साथ, रक्त में ल्यूकोसाइट्स का स्तर ऊंचा हो सकता है - लेकिन यह अन्य संक्रमणों के कारण सूजन के साथ भी बढ़ जाएगा। इसीलिए यह विश्लेषणविशिष्ट कुछ नहीं कहता।

रोगज़नक़ की सटीक पहचान करने के लिए, अन्य नैदानिक ​​​​तरीकों की आवश्यकता होती है। कई मौलिक हैं विभिन्न तरीकेट्रायकॉमोनास खोजें। वे कार्यान्वयन, समय और विश्वसनीयता की जटिलता में भिन्न हैं। एक तरह से या किसी अन्य, उन सभी ने रोग के निदान में अपना स्थान पाया।

आइए इन तकनीकों और सही निदान करने में उनकी भूमिका पर करीब से नज़र डालें।

एक देशी स्मीयर की माइक्रोस्कोपी

चिकित्सा और जीव विज्ञान में "देशी" शब्द एक ऐसी वस्तु या सामग्री को संदर्भित करता है जो अपनी प्राकृतिक अवस्था में है - अर्थात, इसे किसी भी तरह से बदला या संसाधित नहीं किया गया है। तदनुसार, एक देशी स्मीयर जननांग या से एक नियमित स्मीयर है उत्सर्जन अंगएक व्यक्ति जो शोध के लिए किसी भी तरह से दागदार या परिवर्तित नहीं है।

ट्राइकोमोनिएसिस के निदान के लिए माइक्रोस्कोप के तहत इस तरह के स्मीयर की जांच सबसे आम तरीका है। ट्राइकोमोनास देशी स्मीयर में कैसा दिखता है, इसे नीचे दी गई तस्वीर में देखा जा सकता है।

इस विश्लेषण के लिए, आपको चयनों और कुछ कक्षों की आवश्यकता है:

• मूत्रमार्ग से
• प्रजनन नलिका
• रोगी / रोगी की ग्रीवा नहर।

कड़ाई से बोलते हुए, प्रक्रिया को "स्मीयर" नहीं कहा जाना चाहिए, बल्कि "स्क्रैपिंग" कहा जाना चाहिए, क्योंकि सामग्री के लिए न केवल स्राव लिया जाता है, बल्कि स्वयं श्लेष्म कोशिकाएं भी होती हैं। खुरचना बहुत सुखद नहीं है, लेकिन इससे चोट नहीं लगती है।

ली गई सामग्री को टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है और प्रयोगशाला में भेजा जाता है।

प्रयोगशाला में, खुर्दबीन से निकली कोशिकाओं की सूक्ष्मदर्शी के नीचे जांच की जाती है। यदि उनमें से स्मीयर में ट्राइकोमोनास है, तो उसे बाहर कर दिया जाएगा:

• बड़ा आकार (मानव नलछिद्रों की तुलना में)
• फ्लैगेल्ला की उपस्थिति
• विशिष्ट गतिशीलता।

इस पद्धति का उपयोग करके, ट्राइकोमोनास को 80-100% की संभावना के साथ अन्य रोगाणुओं से अलग करना संभव है।

लेकिन देशी स्मीयर के नुकसान भी हैं।

दुर्भाग्य से, प्रयोगशाला में सामग्री का लंबा परिवहन विधि की सटीकता को काफी कम कर सकता है। तथ्य यह है कि सामग्री लेने के क्षण से, ट्राइकोमोनास हर मिनट अपनी गतिशीलता खो देते हैं, और उन्हें पहचानना कठिन हो जाता है। आदर्श रूप से, स्क्रैपिंग से कोशिकाओं को तुरंत माइक्रोस्कोप के नीचे रखा जाना चाहिए। नियमों के अनुसार, मूल सामग्री का अध्ययन करने की सिफारिश की जाती है बाद में 10 मिनट से ज्यादा नहींखुरचने के बाद। लेकिन एक साधारण रूसी अस्पताल या प्रयोगशाला की स्थितियों में यह लगभग असंभव है।

यही कारण है कि नेटिव स्मीयर माइक्रोस्कोपी की सटीकता बहुत अधिक नहीं है और 40% से 80% तक होती है। यही है, ट्राइकोमोनास अभी भी अन्य रोगजनकों के साथ भ्रमित नहीं है यदि यह मोबाइल है - लेकिन अगर यह नहीं चलता है तो वे इसका पता नहीं लगा सकते हैं।

कमियों के बावजूद, यह विधि पेशेवर परीक्षाओं या वेनेरोलॉजिस्ट के शुरुआती दौरों के लिए उपयोगी हो सकती है। इसके लिए परिष्कृत उपकरणों की आवश्यकता नहीं होती है और साथ ही आपको मिश्रित संक्रमण के साथ अन्य सूक्ष्मजीवों (लेकिन सभी नहीं) की पहचान करने की अनुमति मिलती है। इसके अलावा, इस तरह के विश्लेषण को राज्य में बिल्कुल मुफ्त में लिया जा सकता है चिकित्सा संस्थान. निजी क्लीनिकों में, सेवा की कीमत 150-200 रूबल है।

दागदार स्मीयर की माइक्रोस्कोपी

दागदार स्मीयरों के अध्ययन से ट्राइकोमोनास का पता लगाने की संभावना बढ़ जाती है। सामग्री को उसी तरह से लिया जाता है जैसे देशी स्मीयर (जो वास्तव में, यह भी एक स्क्रैपिंग है)। लेकिन इस अध्ययन के लिए, सामग्री पहले से ही विशेष रूप से तैयार की जाती है: माइक्रोस्कोप के तहत जांच करने से पहले, इसमें विशेष पदार्थ जोड़े जाते हैं। ये वे रंग हैं जो ट्राइकोमोनास को रंग देते हैं - जब तक कि, निश्चित रूप से, यह स्मीयर में न हो। इससे प्रयोगशाला सहायक के लिए ट्राइकोमोनास वेजिनालिस को अन्य कोशिकाओं और कणों से अलग करना आसान हो जाता है। पूरी प्रक्रिया एक घंटे से अधिक नहीं होती है।

लेकिन यह विश्लेषण भी सही नहीं है। तथ्य यह है कि सभी रंजक मानव कोशिकाओं से संक्रमण के कारक एजेंट को अलग नहीं कर सकते हैं।

अक्सर, मेथिलीन ब्लू डाई का उपयोग सामग्री तैयार करने के लिए किया जाता है या ग्राम स्टेन (जटिल विधिकई रंगों के साथ धुंधला हो जाना)। दुर्भाग्य से, ये विधियाँ किसी को ट्राइकोमोनास को उपकला कोशिकाओं और के बीच स्पष्ट रूप से भेद करने की अनुमति नहीं देती हैं प्रतिरक्षा कोशिकाएं. माइक्रोब को पहचानना मुश्किल है क्योंकि ट्राइकोमोनास मानव कोशिकाओं जैसा दिखता है और उनके साथ लगभग समान होता है।

बहुत अधिक कुशल रोमानोव्स्की-गिमेसा विधि के अनुसार धुंधला हो जाना. रोमानोव्स्की की पेंट है जटिल रचना, जिसमें मेथिलीन ब्लू, इओसिन और नीला शामिल है, और आपको आसपास की कोशिकाओं से ट्राइकोमोनास को स्पष्ट रूप से उजागर करने की अनुमति देता है। इस विधि द्वारा अभिरंजक का उपयोग प्रत्येक प्रयोगशाला में नहीं किया जाता है - इस अभिरंजक घोल को तैयार करना काफी कठिन होता है, जिससे विश्लेषण की लागत बढ़ जाती है।

रंग के आधार पर, विश्लेषण की कीमत औसतन 400 - 600 रूबल है। कुछ क्षेत्रों में, कार्यक्रम के तहत विश्लेषण निःशुल्क उपलब्ध है ची.

औसतन, विधि की विश्वसनीयता 80% है।

एक माइक्रोस्कोप के तहत एक स्मीयर की जांच, चाहे वह देशी या दागयुक्त स्मीयर हो, इसे भी कहा जाता है बैक्टीरियोस्कोपिक परीक्षा.

सांस्कृतिक अनुसंधान (बुवाई)

सांस्कृतिक अनुसंधान (बुवाई)

देशी और दागदार स्मीयरों की माइक्रोस्कोपी की तुलना में, कल्चरल डायग्नोस्टिक पद्धति अधिक प्रभावी है। उदाहरण के लिए, 1990 के दौरान तुलनात्मक अध्ययनबुवाई की मदद से 80% रोगियों में ट्राइकोमोनास की सही पहचान करना संभव था।

विधि का सार यह है कि रोगी से ली गई सामग्री को पोषक माध्यम पर रखा जाता है (यदि ट्राइकोमोनिएसिस का संदेह है, तो यह जननांगों से एक धब्बा है)। एक बार "फूड पैराडाइज" में, ट्राइकोमोनास, जो स्मीयर होते हैं, तीव्रता से गुणा करते हैं, और 3-4 दिनों के बाद माइक्रोस्कोप के तहत उनका पता लगाना आसान होता है। यदि रोगाणुओं की संख्या में वृद्धि नहीं होती है, बहुत संभव हैवे धब्बा में नहीं थे, जिसका अर्थ है कि व्यक्ति स्वस्थ है।

एक पोषक माध्यम एक पदार्थ या पदार्थों का मिश्रण होता है जो बढ़ते सूक्ष्मजीवों के लिए उपयुक्त होता है। प्रत्येक रोगज़नक़ को अपनी रचना की आवश्यकता होती है तरक्की का जरिया: कुछ मीडिया पर वे अच्छी तरह से पुनरुत्पादन करते हैं, जबकि अन्य पर वे बिल्कुल भी पुनरुत्पादन नहीं कर सकते हैं।

ट्राइकोमोनास आयातित पोषक मीडिया जैसे कि इनपाउच टीवी और डायमंड पर बहुत अच्छी तरह से बढ़ता है। लेकिन हमारे देश में, इन मीडिया का उपयोग बहुत ही कम होता है, आमतौर पर निजी क्लीनिकों में, क्योंकि ये महंगे मिश्रण होते हैं।

लेकिन ध्यान में रखते हुए भी रूसी शर्तेंट्राइकोमोनास के लिए बैक्टीरियल कल्चर सबसे विश्वसनीय परीक्षणों में से एक है। उच्च गुणवत्ता वाले पोषक तत्व मीडिया पर इसकी सटीकता 90% तक पहुंच जाती है। फिर भी, एक सांस्कृतिक अध्ययन हमेशा निर्धारित नहीं होता है, क्योंकि इसके लिए समय और वित्तीय लागत की आवश्यकता होती है।

अध्ययन की कीमत 500 से 5000 रूबल तक होती है, जो काफी हद तक उपयोग किए जाने वाले पोषक माध्यम और संस्था की वित्तीय नीति पर निर्भर करती है।

पीसीआर विधि

प्रयोगशाला अध्ययन ट्राइकोमोनिएसिस का लगभग सटीक निदान करने में सक्षम हैं। उनमें से सबसे विश्वसनीय हैं पीसीआरऔर सांस्कृतिक अनुसंधान। यदि इन विधियों द्वारा प्राप्त विश्लेषण नकारात्मक हैं, तो यह रोग की अनुपस्थिति का लगभग 100 प्रतिशत प्रमाण है, जो अन्य विधियों द्वारा इंगित नहीं किया जाएगा।

याद रखें कि परीक्षण के परिणाम चाहे जो भी हों, कुछ भी भयानक और अपूरणीय नहीं हुआ है, और इस अप्रिय संक्रमण से छुटकारा पाना बिल्कुल भी मुश्किल नहीं है।

मल की जांच दो तरह से की जाती है:

1. मैक्रोस्कोपिक - हेल्मिन्थ्स, उनके सिर, खंड, स्ट्रोबिली के स्क्रैप का पता लगाएं। मल के छोटे हिस्से को एक फ्लैट बाथ या पेट्री डिश में पानी के साथ मिलाया जाता है और यदि आवश्यक हो तो एक आवर्धक कांच का उपयोग करके एक अंधेरे पृष्ठभूमि के खिलाफ अच्छी रोशनी में देखा जाता है। सभी संदिग्ध संरचनाओं को चिमटी के साथ दूसरे कप पानी में या पतला ग्लिसरीन की एक बूंद में एक ग्लास स्लाइड पर स्थानांतरित किया जाता है।

विधि से कायम रखनेमल के छाने हुए हिस्से को कांच के सिलेंडर में पानी से हिलाया जाता है, जमने के बाद उसे बहा दिया जाता है ऊपरी परतपानी। यह कई बार दोहराया जाता है। जब द्रव पारदर्शी हो जाता है, तो उसे निकाल दिया जाता है, और अवक्षेप को पेट्री डिश में देखा जाता है।

2. सूक्ष्मदर्शी - कृमि के अंडे और लार्वा का पता लगाने के लिए। कई शोध विधियां हैं।

देशी धब्बा - सबसे आम और तकनीकी रूप से उपलब्ध शोध पद्धति। आप सभी हेल्मिन्थ्स के अंडे और लार्वा पा सकते हैं। हालांकि, कम संख्या में अंडे के साथ, वे हमेशा नहीं पाए जाते हैं। इसलिए संवर्धन विधि का प्रयोग किया जाता है।

1. फुलबॉर्ग विधि - यह NaCl (1.2 - घनत्व; 400 ग्राम NaCl प्रति 1 लीटर पानी; 40% NaCl समाधान) के संतृप्त घोल में हेल्मिंथियासिस अंडे के उद्भव के आधार पर संवर्धन की एक विधि है। देशी स्मीयर की तुलना में विधि अधिक प्रभावी है। में कांच का जार 2-5 ग्राम मल रखा जाता है और NaCl समाधान के साथ डाला जाता है, हिलाया जाता है और 45 मिनट के बाद परिणामी फिल्म को धातु के लूप से हटा दिया जाता है, ग्लिसरीन की एक बूंद को कांच की स्लाइड पर रखा जाता है। एक खुर्दबीन के नीचे जांच करें। विधि का नुकसान विभिन्न हेल्मिन्थ्स, बौना टेपवर्म के अंडों के उभरने में देरी है - 15-20 मिनट के बाद, राउंडवॉर्म - 1.5 घंटे, व्हिपवॉर्म - 2-3 घंटे।

2. कलांतरायण विधि - भी एक संवर्धन विधि है, लेकिन NaNO3 (1.38 घनत्व) के एक संतृप्त समाधान का उपयोग किया जाता है। अधिकांश अंडे तैरते हैं, तलछट की जांच की आवश्यकता नहीं होती है। नुकसान यह है कि अंडे को लंबे समय तक समाधान में रखा जाता है, जो इस तथ्य की ओर जाता है कि कुछ अंडे सूजने लगते हैं और सतह की फिल्म से गायब हो जाते हैं।

3. गोर्याचेव की विधि - अंडे के जमाव, पहचान के सिद्धांत पर आधारित छोटे अंडेकंपकंपी। NaCl के एक संतृप्त घोल का उपयोग एक घोल के रूप में किया जाता है और 3-4 मिलीलीटर मल के घोल को ध्यान से शीर्ष पर रखा जाता है। 15-20 घंटों के बाद, ट्रेमेटोड अंडे तली में बैठ जाते हैं। तरल निकल जाता है, तलछट एक कांच की स्लाइड पर और एक माइक्रोस्कोप के नीचे होता है।

4. शुलमैन घुमा विधि – मल में हेल्मिंथ लार्वा का पता लगाने के लिए। केवल ताजा पृथक मल की जांच करें। 2-3 ग्राम एक कांच के जार में रखा जाता है और पानी की मात्रा का 5 गुना डाला जाता है, जल्दी से एक छड़ी से हिलाया जाता है, जार की दीवारों को छुए बिना - 20-30 मिनट, फिर छड़ी को जल्दी से हटा दिया जाता है, और एक बूंद अंत में तरल एक गिलास स्लाइड और सूक्ष्मदर्शी में स्थानांतरित किया जाता है।

5. बर्मन विधि - हेल्मिन्थ लार्वा की गर्मी की ओर पलायन करने की क्षमता के आधार पर, और मल में उनकी पहचान करने का कार्य करता है।

6. हरदा और मोरी की विधि (लार्वा बढ़ने की विधि) और एंकिलोस्टोमियासिस के परीक्षण के लिए अनुशंसित है। विधि इस तथ्य पर आधारित है कि गर्मी में और नम फ़िल्टर्ड पेपर पर, हुकवर्म अंडे फाइलेरिफॉर्म लार्वा में विकसित होते हैं, जिन्हें आसानी से पहचाना जा सकता है। फ़िल्टर्ड पेपर की एक पट्टी के बीच में 15 ग्राम मल लगाया जाता है, मल के साथ कागज को एक जार में रखा जाता है, ताकि निचला सिरा पानी में डूब जाए, और ऊपरी छोर एक कॉर्क के साथ तय हो जाए। जार को 5-6 दिनों के लिए थर्मोस्टेट में 28 0C पर रखा जाता है। फाइलेरिफॉर्म लार्वा इस समय के दौरान विकसित होता है और पानी में उतरता है। एक आवर्धक कांच के नीचे तरल की जांच की जाती है। यदि इसका पता लगाना मुश्किल है, तो 60 0 तक गर्म करके लार्वा को मारने के बाद तरल को सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। प्रयोगशाला तकनीशियन को दस्ताने पहनने चाहिए।

7. एंटरोबियासिस के लिए तरीके - पिनवॉर्म अंडे और गोजातीय टैपवार्म की पहचान।

ए) पेरिअनल सिलवटों से स्क्रैपिंग - एक कपास झाड़ू के साथ एक लकड़ी की छड़ी पर कसकर लपेटा जाता है और 50% ग्लिसरीन के घोल से सिक्त किया जाता है। प्रयोगशाला में, ग्लिसरीन के 50% जलीय घोल की 1-2 बूंदों से झाड़ू को धोया जाता है।

बी) चिपचिपा घुन विधि (ग्राहम विधि)

चिपकने वाला टेप पेरिअनल सिलवटों पर लगाया जाता है, फिर कांच की स्लाइड पर एक चिपचिपी परत के साथ और माइक्रोस्कोप किया जाता है।

ग) आंखों की छड़ियों (राबिनोविच की विधि) की मदद से खुरचना। पेरिअनल स्क्रैपिंग के लिए, ग्लास आई स्टिक्स का उपयोग किया जाता है, जिसका सबसे चौड़ा हिस्सा एक विशेष गोंद से ढका होता है, जिससे पिनवॉर्म अंडे पकड़ना संभव हो जाता है।

रक्त, पित्त, थूक और मांसपेशियों की जांच

ब्लड माइक्रोस्कोपी - फाइलेरिया लार्वा का पता लगाया जाता है।

थूक की जांच - पैरागनिम अंडे, राउंडवॉर्म लार्वा, नेकेटर, स्ट्रॉन्गिलॉयड, इचिनोकोकल ब्लैडर के तत्व।

मांसपेशियों की जांच - यदि ट्राइचिनोसिस का संदेह होता है, तो रोगी या लाश की मांसपेशियों के साथ-साथ उस मांस की जांच की जाती है जो कथित तौर पर व्यक्ति के संक्रमण का कारण बनता है। ट्राइचिनोस्कोपी के प्रयोजन के लिए, मांसपेशियों को छोटे टुकड़ों में काट दिया जाता है और कंप्रेशर्स में रखा जाता है, ये दो चौड़े, मोटे गिलास होते हैं जो मांसपेशियों को कुचलते हैं और ट्राइचिनेला लार्वा कैप्सूल के रूप में पाए जाते हैं - संपीड़न विधि।

पाचन विधि - मांसपेशियों को कृत्रिम गैस्ट्रिक जूस (घोल) डाला जाता है हाइड्रोक्लोरिक एसिड कीऔर पेप्सिन)। मांसपेशियां पच जाती हैं और लार्वा आसानी से पहचाने जाते हैं। आक्रमण की तीव्रता का निर्धारण: 200 प्रति 1 ग्राम तक लार्वा की संख्या मांसपेशियों का ऊतक- आक्रमण की मध्यम तीव्रता; 500 तक - गहन; 500 से अधिक - अधीक्षण आक्रमण।

सीरोलॉजिकल तरीके