Causas de la aglutinación de glóbulos rojos, sus tipos y prueba de antiglobulina. Enfermedad de aglutininas frías (centro)

Enfermedades de la sangre

Aglutininas frías

Las aglutininas frías, o crioproteínas, son anticuerpos que interactúan con los antígenos de la membrana de los glóbulos rojos. En este caso, el sistema del complemento puede activarse, provocando una reacción autoinmune que conduce a la agregación y destrucción de los glóbulos rojos, pero sólo cuando temperaturas bajas Oh. Esta patología se presenta principalmente en pacientes mayores de 50 años. Los anticuerpos pueden estar representados por IgM, IgG o IgA; en el primer caso, la aglutinación se expresa significativamente. Existen métodos de laboratorio para diagnosticar aglutininas frías y determinar la temperatura a la que comienza la aglutinación. Por lo general, la causa de las aglutininas frías es una infección, generalmente viral. Su número puede disminuir gradualmente, por lo que si se detectan, es mejor posponer la cirugía en condiciones de hipotermia y con cardioplejía fría, si es posible. También se pueden determinar los títulos de aglutininas frías cuando diferentes temperaturas sangre y, al perfundir, evitar enfriar a una temperatura a la que pueda producirse aglutinación. Sin embargo, si aún es necesaria una hipotermia más profunda, se requiere plasmaféresis para eliminar los anticuerpos contenidos en el suero. Con títulos elevados de crioaglutininas, el enfriamiento puede provocar complicaciones graves: infarto de miocardio perioperatorio, insuficiencia renal, anemia hemolítica, trombosis. La planificación de la cirugía en estos pacientes debe ser especialmente cuidadosa, con el fin de evitar el enfriamiento del paciente. La hemodilución durante la CEC reduce en cierta medida el riesgo de aglutinación, pero este efecto no es lo suficientemente predecible, por lo que no se debe enfriar al paciente antes, durante o después de la CEC. Es recomendable utilizar un colchón de agua calentado, la IR debe realizarse en normotermia, precalentando la solución llenando el sistema. Si se administran glóbulos rojos durante la CEC, también se deben precalentar. Si es necesaria cardioplejía fría, debe ser cristaloide y no contener sangre. En este caso, comienzan con la introducción de 200 a 300 ml de una solución tibia, que lava la sangre de las arterias coronarias, luego se introduce una solución fría. La temperatura de una solución cardiopléjica fría es tal que casi con seguridad provocará aglutinación, por lo que la cardioplejía que contiene sangre se administra sólo tibia. Inmediatamente antes de retirar la pinza de la aorta, es aconsejable inyectar una solución cardiopléjica tibia para que la sangre que ingresa arterias coronarias, no se enfrió.

Anemia falciforme

Normalmente, los eritrocitos humanos contienen principalmente hemoglobina A, la anemia de células falciformes es causada por el contenido anormal de hemoglobina S en los eritrocitos. En pacientes homocigotos para este rasgo, los eritrocitos contienen predominantemente hemoglobina S, clínicamente esto se manifiesta como falciforme. anemia celular. En los pacientes heterocigotos la hemoglobina S es inferior al 45% del total; son portadores del gen de la enfermedad. En la anemia falciforme, los glóbulos rojos tienen una forma característica de hoz o media luna, son menos móviles, tienden a agregarse y se destruyen más rápidamente. Cuando los niveles de oxígeno son bajos, los glóbulos rojos falciformes pueden precipitar. En pacientes con anemia falciforme, además de la anemia misma, se observa trombosis intravascular. Durante una crisis (o crisis, no estoy seguro, no lo recuerdo) se produce una oclusión vasos sanguineos acompañado de dolor, dificultad para respirar y convulsiones.

Las tácticas de perfusión deben tener como objetivo evitar una crisis con todas sus consecuencias. Es necesario mantener un alto nivel de saturación de oxígeno y no enfriar al paciente. En pacientes con un contenido predominante de hemoglobina S, la saturación de oxígeno de los eritrocitos debe ser de al menos el 85%, en pacientes con un contenido parcial de hemoglobina S, al menos del 40%. En pacientes con niveles parciales de hemoglobina S, durante la CEC es necesario mantener un alto nivel de saturación de oxígeno y evitar la acidosis, que contribuye a la destrucción. glóbulos rojos falciformes. Si se siguen estas reglas, normalmente se pueden evitar las complicaciones. El enfriamiento también contribuye a la disfunción de las células falciformes, por lo que es mejor evitar el enfriamiento y utilizar cardioplejía tibia o cristaloide de la misma manera que para las aglutininas frías. La hemodilución durante la perfusión también juega un papel positivo. Para prevenir la obstrucción vascular se deben utilizar vasodilatadores.

Prueba de laboratorio destinada a identificar autoanticuerpos que provocan aglutinación y hemólisis de los glóbulos rojos a bajas temperaturas.

Sinónimos ruso

Aglutininas frías, estudio de aglutininas frías completas.

Sinónimos en inglés

Análisis de sangre de aglutininas frías, Autoanticuerpos del frío, Anticuerpos que reaccionan al frío.

Método de investigación

Reacción de aglutinación.

¿Qué biomaterial se puede utilizar para la investigación?

Sangre venosa.

¿Cómo prepararse adecuadamente para la investigación?

• No fume durante 30 minutos antes de la prueba.

Información general sobre el estudio.

La anemia hemolítica autoinmune (AIHA) se produce como resultado de una degradación debida a diversas razones de tolerancia inmunológica y a la producción de anticuerpos contra los propios glóbulos rojos. Hay autoanticuerpos cálidos y fríos. Los calientes se unen más eficazmente a los antígenos de eritrocitos a una temperatura de 37 °C, y los fríos, a 4-18 °C. Dependiendo del efecto que los autoanticuerpos tienen sobre los glóbulos rojos en un tubo de ensayo, se liberan hemolisinas (destruyen las células) y aglutininas (hacen que los glóbulos rojos se peguen).

autoinmune anemia hemolítica con aglutininas frías, una forma relativamente rara de anemia hemolítica inmune (según algunos datos, el 20% de todos los casos de AIHA). Puede ser idiopático (se desconoce la causa) o sintomático. La variante idiopática es más común en ancianos y vejez(60-80 años), mientras que los sintomáticos pueden ocurrir en la infancia y la adolescencia, complicando el curso de la neumonía por micoplasma, la mononucleosis infecciosa, la legionelosis y también la sistémica. Enfermedades autoinmunes(lupus eritematoso sistémico, artritis reumatoide). En adultos mayores, la AIHA con aglutininas frías a menudo se asocia con enfermedades linfoproliferativas como leucemia linfocítica crónica y macroglobulinemia de Waldenström.

Las aglutininas frías suelen ser IgM, con menos frecuencia están representadas por una mezcla de inmunoglobulinas. diferentes clases. Se unen a la membrana de los glóbulos rojos a bajas temperaturas y adjuntan complemento, una familia de proteínas séricas que destruyen las células marcadas con anticuerpos. Después de la adición de complemento, se forma un complejo que daña la membrana en la membrana de los eritrocitos, cuya formación conduce a la formación gran cantidad poros en la membrana celular, su hinchazón y destrucción.

Como marcador de laboratorio de hemólisis autoinmune causada por aglutininas frías, es aconsejable utilizar la detección de anticuerpos en el suero sanguíneo del paciente que conducen a la aglutinación de los glóbulos rojos durante la incubación a bajas temperaturas.

El método moderno de prueba de aglutininas frías es la reacción de aglutinación en gel. Se añade una suspensión de glóbulos rojos de un donante a microtubos que contienen un gel neutro. Luego se añade el suero problema y se incuba a una temperatura de 2-8 °C. Si durante la incubación a bajas temperaturas hay aglutininas frías en el suero problema, se unen a los eritrocitos y provocan su aglutinación. El resultado de la prueba se evalúa después de la centrifugación, durante la cual se separan los glóbulos rojos aglutinados y no aglutinados. Los eritrocitos no aglutinados tienen un tamaño comparable al tamaño de las partículas de gel y pasan libremente a través de ellas bajo la influencia de la fuerza centrífuga, formando un sedimento rojo compacto en el fondo del microtubo, y los eritrocitos aglutinados debido a tallas grandes permanecen en la superficie del gel o en su espesor.

¿Para qué se utiliza la investigación?

• Detectar anticuerpos antieritrocitos en el suero sanguíneo del paciente que provocan hemólisis a bajas temperaturas.

¿Cuándo está programado el estudio?

• Si se sospecha anemia hemolítica autoinmune con crioaglutininas: característica distintiva enfermedades - mala tolerancia resfriado, cuando aparecen los síntomas principales.

¿Qué significan los resultados?

Valores de referencia: no detectado.

• Un resultado negativo (las células forman un sedimento compacto en el fondo del microtubo) indica la ausencia de aglutininas frías en el suero problema.
• Un resultado positivo (las células aglutinadas forman una capa roja en la superficie o en el espesor del gel) indica la presencia de anticuerpos fríos en el suero problema.

¿Qué puede influir en el resultado?

• En títulos bajos, también se pueden detectar aglutininas frías en gente sana.



Notas importantes

• En la anemia hemolítica autoinmune con crioaglutininas, la autoaglutinación de los glóbulos rojos se produce a temperatura ambiente, lo que crea problemas y conduce a resultados incorrectos al determinar el tipo de sangre y calcular los parámetros. Sangre periférica(recuento de eritrocitos e índices de eritrocitos). Esta aglutinación es reversible a 37 °C, por lo que cuando la sangre se calienta a la temperatura corporal, se eliminan los problemas durante la investigación.

La aglutinación de glóbulos rojos es proceso bioquímico agregación, aglomeración y precipitación de glóbulos rojos, que ocurren in vitro o in vivo.

El término "aglutinación" se traduce del latín "agglutinatio", que significa "pegarse". EN sistemas biológicos o análisis de laboratorio Se trata del pegado y agregación de partículas orgánicas (bacterias, espermatozoides, células sanguíneas) que tienen antígenos aglutinógenos en su superficie cuando interactúan con anticuerpos aglutininas específicos. El aglomerado resultante se llama aglutinado.

Incluso normalmente, en la sangre humana pueden haber anticuerpos y antígenos que no provocan adhesión. Se trata de componentes del sistema de antígenos ABO, que corresponden al grupo sanguíneo, anticuerpos que aparecen como respuesta inmune cuando entran en el organismo determinadas bacterias u otros patógenos de enfermedades infecciosas (disentería, fiebre tifoidea).

Aglutinación de glóbulos rojos

El mecanismo de reacción de aglutinación puede ser directo (activo) o indirecto (pasivo). El efecto de la aglutinación directa se produce en un organismo o muestra cuando los antígenos de membrana estructurales de los glóbulos rojos comienzan a interactuar con los propios anticuerpos del plasma o componentes de las células bacterianas.

La aglutinación directa se utiliza cuando estudios clínicos, determinando el tipo de sangre o la presencia del factor Rh. El efecto de la adhesión pasiva se utiliza ampliamente para diagnosticar enfermedades infecciosas (bacterianas, virales).

¿Por qué se produce la aglutinación de los glóbulos rojos?

La aglutinación de la masa de eritrocitos es consecuencia de la interacción bioquímica de moléculas de antígeno localizadas en la estructura de la membrana de las células sanguíneas con anticuerpos que se encuentran en el plasma. Esto reduce la carga negativa natural de los glóbulos rojos y los acerca. Las moléculas de aglutinina que no corresponden al tipo de sangre pueden formar "puentes" entre los glóbulos rojos. Como resultado, se forma un coágulo de sangre, se desarrolla una enfermedad hemolítica e incluso la muerte.

La adhesión de los glóbulos rojos (reacción de hemaglutinación - HRA) es causada por varios factores, que dependen de la naturaleza del agente aglutinante en la superficie del elemento formado o en el plasma:

• Aglutininas frías. Se pueden detectar en la sangre durante enfermedades causadas por virus y bacterias, algunas neoplasias e hipotermia, provocando síntomas de hemólisis intravascular. Las aglutininas frías se pueden encontrar en títulos bajos en personas sanas sin causar efectos perceptibles. manifestaciones hemolíticas. Por naturaleza química Se trata, por regla general, de proteínas inmunoglobulinas (con mayor frecuencia, IgM). Se activan cuando la temperatura desciende por debajo de 37°C, por ejemplo, cuando la sangre entra en la parte superior o miembros inferiores u otras áreas del cuerpo propensas a la hipotermia. Las aglutininas frías, según el tipo, pueden mostrar actividad y localizarse de diferentes maneras: actuar en un rango de temperatura amplio o estrecho, cuando se restablece la temperatura, permanecer fijadas en la superficie de los eritrocitos o estar en el plasma.
• Antígenos eritrocitarios. Hoy en día, se han identificado más de 400 sistemas de antígenos, cuya combinación es individual para cada persona. La mayoría de ellos tienen propiedades antigénicas débiles y no provocan una aglutinación notable de los glóbulos rojos. Los más críticos durante la transfusión de sangre son los sistemas ABO y Rh, cuya incompatibilidad puede provocar adherencias. células de sangre seguido de shock transfusional.
• Hemaglutinógenos que determinan el grupo sanguíneo. En la estructura de las membranas de los eritrocitos hay marcadores-antígenos específicos de naturaleza glicoproteica (aglutinógenos A y B), y en el plasma hay sustancias-anticuerpos de inmunoglobulinas específicas (aglutininas alfa y beta). Una de las cuatro combinaciones posibles de estos antígenos y anticuerpos determina el tipo de sangre, que está determinado genéticamente y no puede cambiar a lo largo de la vida. Los aglutinógenos y aglutininas del mismo nombre no pueden estar presentes en el cuerpo humano al mismo tiempo; de lo contrario, los glóbulos rojos se pegarán y se producirá hemólisis. Esta es una de las reacciones del cuerpo desarrolladas genéticamente, cuyo objetivo es preservar la individualidad antigénica y principio básico transfusiones de sangre.

• antígenos Rh . Los antígenos Rh (Rh) son lipoproteínas por naturaleza química. Los antígenos del sistema Rh están representados por varios tipos (C, E, D), el más fuerte de ellos es el tipo D. Las personas que tienen dicho antígeno se denominan Rh positivas, el resto se denomina Rh negativo. El plasma normal no contiene anticuerpos contra los antígenos Rh. Aparecen por violación de las reglas de transfusión de sangre y en caso de conflicto Rh durante el embarazo.
• Aglutinación viral y bacteriana de eritrocitos. Agregación de glóbulos rojos debido a ciertos virus o enfermedades bacterianas puede manifestarse debido a la interacción directa de un virus o bacteria con las moléculas estructurales de la superficie de los eritrocitos o debido a una reacción con el título de suero inmunizado de eritrocitos específicamente sensibilizados con el antígeno deseado (in vitro). La aglutinación de las células sanguíneas se produce después de la adsorción del virus en la superficie de los glóbulos rojos. En la mayoría de los virus, la hemaglutinina es componente estructural virión.

Marcadores específicos: antígenos de naturaleza glicoproteica (aglutinógenos A y B)

Técnicas de laboratorio basadas en reacciones de aglutinación.

Las reacciones de aglutinación tienen valor diagnóstico. Son técnicas serológicas para detectar y estudiar anticuerpos o antígenos presentes en el título sérico de los pacientes en función de reacciones inmunologicas, identificación de marcadores antigénicos de bacterias y virus, determinación de la estructura antigénica de un patógeno microbiano.

Las reacciones de hemaglutinación indirecta o pasiva (IPHA o RIHA) son la base de los métodos para identificar ciertos antígenos o anticuerpos en la sangre del paciente. Este método se utiliza para identificar el patógeno. enfermedad infecciosa, determinación cualitativa y cuantitativa de hormona gonadotrópica en caso de sospecha de embarazo. El equipo utilizado incluye portaobjetos de vidrio, tubos de ensayo estériles y placas de plástico con pocillos.

El reactivo principal es el llamado diagnóstico de eritrocitos(ED), que puede fabricarse según dos principios:

• DE antigénica (usada con más frecuencia);
• DE de anticuerpos.

Dependiendo del tipo de diagnóstico, el antígeno o anticuerpo identificado se adsorbe en la superficie de la célula eritrocitaria, lo que, tras la reacción posterior con los anticuerpos o antígenos correspondientes del suero sanguíneo del paciente, provoca la adhesión. elementos con forma y la formación de un sedimento en forma de vieira que cubre uniformemente el fondo del tubo o celda. Si la muestra resulta negativa, el sedimento en el fondo del tubo de ensayo será de otro tipo.

Para la RPHA, un kit de diagnóstico se fabrica a partir de células sanguíneas humanas o animales (conejo, oveja, rata, caballo), que se tratan con formaldehído u otros reactivos para su conservación. Para aumentar su capacidad de adsorción, los propios glóbulos rojos se sensibilizan medicamentos especiales(tanino, cloruro de cromo, rivanol).

El proceso inverso es la reacción de inhibición de la hemaglutinación.

Algunos virus (influenza, rubéola, sarampión, adenovirus, peste ganado) puede provocar aglutinación de elementos formados. Las técnicas de diagnóstico para estos tipos se basan en reacciones que detienen este proceso. enfermedades virales. Los anticuerpos antivirales en el suero preinmunizado contrarrestan los virus, haciendo que pierdan su capacidad de provocar que los glóbulos rojos se agrupen.

Prueba de antiglobulina - prueba de Coombs

La prueba de Coombs se realiza para identificar anticuerpos incompletos que se localizan en la estructura de la membrana de los eritrocitos y causan aglutinación cuando se agrega un suero antiglobulina especial. Hay reacciones de Coombs directas e indirectas. Se realiza una prueba de antiglobulina directa si se sospecha la presencia de dichos anticuerpos incompletos en la superficie de los glóbulos rojos.

muestra indirecta Coombs se realiza con una sensibilización preliminar de los eritrocitos con un anticuerpo adecuado y la posterior introducción de un componente antiglobulina. Realizado durante el diagnóstico. enfermedad hemolítica curso autoinmune o en recién nacidos, para establecer un conflicto de Rh entre la madre (Rh negativo) y el niño (Rh positivo).

La reacción de Coombs indirecta es ampliamente utilizada por los transfusiólogos, ya que permite alta precisión determinar la compatibilidad material donante con la sangre del receptor basándose en antígenos eritrocitarios.

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Hay dos formas de esta enfermedad: enfermedad de aglutininas frías y hemoglobinuria fría paroxística. En ambos casos, la hemólisis inmune intravascular puede ser primaria o secundaria. En este último caso, se desarrolla en el contexto de infecciones virales (por ejemplo, mononucleosis infecciosa), malaria, neumonía por micoplasma, hemoblastosis o colagenosis. La anemia hemolítica autoinmune, causada por hemólisis intravascular primaria, suele ocurrir de forma crónica.

3. Enfermedad de aglutininas frías, causada por hemólisis intravascular secundaria,ocurre en muchas enfermedades: infecciones (neumonía por micoplasma, Mononucleosis infecciosa, sarampión, parotiditis y otros infecciones virales, tripanosomiasis y malaria), colagenosis (raramente), hemoblastosis (linfoma no Hodgkin, macroglobulinemia de Waldenström, leucemia linfocítica crónica), sarcoma de Kaposi. Cabe destacar que en estas enfermedades las aglutininas frías se detectan con mucha más frecuencia que la hemólisis. En todo casos enumerados En primer lugar, se trata la enfermedad subyacente. Por lo demás, el tratamiento es el mismo que para la enfermedad de aglutininas frías causada por hemólisis intravascular primaria.

4. paroxístico hemoglobinuria fría - una forma rara de anemia hemolítica autoinmune. La hemólisis en esta enfermedad se produce como resultado de una reacción de dos fases en la que participa la IgG, que se denomina anticuerpos de Donath-Landsteiner. En la primera fase, la IgG se une a los glóbulos rojos a bajas temperaturas y fija el complemento. En la segunda fase, a una temperatura de 37°C, se produce la activación del complemento, lo que lleva a la hemólisis. Los anticuerpos de Donath-Landsteiner son específicos del antígeno P de los eritrocitos.

A. Cuadro clinico.La hemoglobinuria fría paroxística ocurre a menudo en pacientes con sífilis, especialmente congénita, y puede complicar infecciones virales (sarampión, paperas, varicela, mononucleosis infecciosa, influenza), a veces es primaria. La hemólisis intravascular se desarrolla cuando el paciente se calienta después de una hipotermia. El pronóstico es favorable. Los pacientes suelen recuperarse por sí solos. En ocasiones, la enfermedad dura mucho tiempo con crisis hemolíticas periódicas.

b. Investigación de laboratorio. Diagnóstico de laboratorio La hemoglobinuria paroxística por frío se basa en la detección de anticuerpos de Donath-Landsteiner. Para ello, 1) el suero del paciente se mezcla con glóbulos rojos normales del grupo 0; 2) incubar durante 30 minutos a 4°C (para fijar anticuerpos y complemento en los eritrocitos); 3) incubar durante 30 minutos a 37°C (para activar el complemento). Como control negativo, utilice: 1) una muestra con suero de paciente inactivado por calor (para eliminar el complemento); 2) una muestra con suero del paciente incubado con glóbulos rojos del grupo 0 en orden inverso (primero a 37°C, luego a 4°C).

v. Tratamiento. Los pacientes deben evitar la hipotermia.Los corticosteroides y la esplenectomía son ineficaces. Si es necesaria una transfusión de glóbulos rojos, se calienta. Asegúrese de tratar la enfermedad subyacente.

Una prueba de aglutinina fría es un análisis de sangre que mide los niveles de estos anticuerpos en el cuerpo. Nuestro cuerpo produce aglutininas frías en respuesta a una infección. Hacen que los glóbulos rojos se agrupen a bajas temperaturas. En personas sanas, por regla general, nivel bajo Anticuerpos fríos en la sangre. Pero el linfoma y algunas infecciones (SARS) aumentan el nivel de aglutininas frías.

Un poco nivel aumentado Las aglutininas frías generalmente no causan problemas serios. A veces, las aglutininas frías agrupan los glóbulos rojos en grupos que se quedan atrapados en los vasos situados cerca de la piel enfriada. Esto puede hacer que la piel se ponga pálida y entumecida. En casos avanzados (con hipotermia extremadamente prolongada), esto puede provocar gangrena.

¿Por qué medir las aglutininas frías?

La prueba de aglutinina fría se realiza para:

• Descubra si lo son anticuerpos fríos causa de anemia hemolítica autoinmune;
• Diagnosticar neumonía atípica.

Nuestra clínica tiene expertos en la materia en este tema.

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2. ¿Cómo prepararse y cómo se realiza el análisis?

¿Cómo prepararse para una prueba de aglutininas frías?

No se requiere preparación antes de la prueba de anticuerpos en frío.

¿Cómo se realiza el análisis de aglutininas frías?

El nivel de anticuerpos contra el resfriado se mide después de extraer sangre de una vena. La toma de muestras de sangre se realiza según un procedimiento estándar.

3. ¿Cuáles son los riesgos y qué puede afectar el análisis?

¿Cuáles son los riesgos de la prueba de aglutininas frías?

Los posibles riesgos de un análisis de sangre para detectar anticuerpos contra el resfriado solo pueden asociarse con la propia extracción de sangre. En particular, la aparición de hematomas en el lugar de la punción y la inflamación de la vena (flebitis). Compresas calientes varias veces al día le aliviará la flebitis. Si está tomando medicamentos anticoagulantes, es posible que sangre en el lugar de la punción.

¿Qué puede interferir con la prueba de aglutininas frías?

El resultado de la prueba de aglutininas frías será inexacto si está tomando antibióticos, especialmente penicilina y cefalosporina.

¿Qué vale la pena saber?

Más de la mitad de las personas que padecen neumonía atípica, tienen altos niveles de anticuerpos contra el resfriado. Sin embargo, a menudo se utilizan otras pruebas más confiables para diagnosticar la neumonía atípica.

Si se encuentran glóbulos rojos unidos durante análisis general sangre, el médico puede requerir una prueba de aglutininas frías.

El tipo de sangre es más difícil de determinar si los niveles de aglutininas son altos.

Si una persona tiene alto contenido aglutininas frías y no ha estado expuesto a bajas temperaturas, entonces necesita mantenerse caliente. Nivel alto Las aglutininas frías pueden provocar anemia, congelación o enfermedad de Raynaud.