Diagnosticum Salmonella eritrocitos vi líquido antigénico. Diagnosticum eritrocitos salmonella vi-antigénico

El kit de reactivos del antígeno Diagnosticum Salmonella VI está diseñado para la detección en suero sanguíneo humano de anticuerpos específicos contra el antígeno VI de Salmonella typhus en una reacción de hemaglutinación pasiva (RPHA).

1. CARACTERÍSTICAS DEL CONJUNTO

2.1. Principio del método.

El principio activo del antígeno VI de Diagnosticum Salmonella es el antígeno Vi fijado en la superficie de los glóbulos rojos. Al interactuar con sueros que contienen anticuerpos contra el antígeno Vi, se observa el fenómeno de aglutinación de eritrocitos.

2.2. ESTABLECER CONTENIDO

1. CARACTERÍSTICAS ANALÍTICAS Y DIAGNÓSTICAS.

3.1. El diagnosticum debe ser aglutinado en la RPHA con el suero diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B seco en una dilución no menor a 1:160.

El nivel condicional de las características diagnósticas del suero sanguíneo de personas sanas debe considerarse una dilución de suero no superior a 1:20.

3.2. Tiempo de análisis: 2 horas.

3.3. El conjunto contiene 8 definiciones.

1. MEDIDAS DE PRECAUCIÓN

Al trabajar con el kit, se deben observar las “Reglas de diseño, medidas de seguridad, saneamiento industrial, régimen antiepidémico e higiene personal cuando se trabaja en laboratorios (departamentos, departamentos) de instituciones sanitarias y epidemiológicas del Ministerio de Salud de la URSS ( M., 1981).

Los sueros analizados, así como los reactivos que entran en contacto con ellos, deben considerarse potencialmente infectados, capaces de conservar o transmitir a largo plazo el VIH, el virus de la hepatitis o cualquier otro agente causante de una infección viral; deben manipularse con cuidado:

• trabajar con guantes de goma;
• al pipetear es necesario utilizar dispensadores automáticos;
• al finalizar el trabajo, trate los sueros analizados y los reactivos e instrumentos en contacto con ellos con una solución desinfectante
• Limpie el equipo con alcohol etílico al 70% antes y después de su uso.

Los sueros analizados deben inactivarse a una temperatura de 56 0 C durante 30 minutos.

El suero diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B, incluido en el kit, está seco e inactivado.

Los resultados del análisis objetivo están garantizados si se cumplen las siguientes condiciones:

• Todos los reactivos del kit deben almacenarse a temperaturas de 2 a 8 0 C;
• no utilice reactivos caducados;
• no utilice los reactivos del kit si no hay una marca adecuada en su embalaje;
• Para realizar RPHA, utilice reactivos incluidos únicamente en este kit.

Vi-Diagnóstico

Diagnóstico VI

Vi-antigénico

Un análisis de sangre realizado correctamente ayuda a detectar los agentes causantes de diversas enfermedades complejas en el cuerpo en las primeras etapas de su desarrollo y, a veces, incluso antes de que aparezcan los síntomas clínicos de la enfermedad. Muy a menudo, los médicos prescriben a los pacientes una prueba de reacción de aglutinación. A continuación, descubriremos qué es: un análisis de sangre RPGA, ¿cuándo se utiliza y qué nos puede decir?

Principio de operación

La reacción de hemaglutinación indirecta (también llamada reacción de hemaglutinación pasiva, también conocida como RPHA, RNGA) ocurre cuando los glóbulos rojos que han adsorbido un antígeno se exponen a un suero inmune que coincide con el antígeno dado.

Los estudios han demostrado que este método es significativamente superior a otras pruebas serológicas en términos de especificidad y sensibilidad. Por ello, se suele utilizar para detectar enfermedades provocadas por bacterias o rickettsias. Los antígenos para dicho análisis pueden ser extractos bacterianos, antígenos purificados de diversos microbios y componentes de vacunas bacterianas.

Después de que una bacteria patógena ingresa al cuerpo humano, comienza a producir anticuerpos específicos e inespecíficos, formando una respuesta inmune específica. En el caso de la sífilis, cuyo agente causal es Treponema pallidum, que pertenece a las espiroquetas gramnegativas, en la sangre humana se producen anticuerpos treponémicos o no treponémicos. Las pruebas de diagnóstico de laboratorio se basan en su identificación, que debe confirmar o refutar la presencia del agente causante del virus en el organismo.

Con RPHA, los glóbulos rojos, cuya superficie ha adsorbido antígenos de treponema pallidum, cuando se agrega suero con anticuerpos contra treponema del material de una persona infectada con sífilis, se adhieren entre sí, es decir, se aglutinan.

Fiabilidad del estudio.

Es importante recordar que los anticuerpos contra la espiroqueta pálida comienzan a aparecer en el cuerpo de las personas infectadas entre 2 y 4 semanas después de la infección y, en algunos casos, este período puede extenderse hasta 6 semanas.

Por esta razón, la sensibilidad del análisis de RPHA en la etapa primaria de la enfermedad es de aproximadamente el 86%, lo que es significativamente inferior a la precisión del diagnóstico de pacientes en las dos etapas siguientes. La sensibilidad del análisis para estos pacientes, así como para los portadores de sífilis latente, alcanza el 99-100%.

Sin embargo, la reacción de hemaglutinación pasiva tiene una especificidad muy alta, que alcanza un nivel del 96-100%.

Esto permite utilizar este examen para confirmar el diagnóstico en caso de una reacción positiva de un estudio preliminar no treponémico, por ejemplo, una reacción de microprecipitación del cáncer de vejiga.

Teniendo en cuenta que la sensibilidad de las pruebas treponémicas, incluida la RPGA, excede significativamente la sensibilidad de los métodos no treponémicos, estos exámenes se prescriben cada vez más al realizar pruebas de detección de sífilis. Sin embargo, si se recibe una reacción positiva de una prueba de detección, se requiere otro análisis específico (treponémico), pero no RPGA, para aclarar el diagnóstico.

Transcripción del análisis

Cuando se agrega suero con anticuerpos contra treponema del material de una persona infectada con sífilis al reactivo con el que se realiza el estudio, los glóbulos rojos se aglutinan, como resultado de lo cual precipitan.

La cantidad de glóbulos rojos pegajosos está influenciada por el nivel de anticuerpos en el suero. Por lo tanto, la hemaglutinación pasiva no solo muestra la presencia de anticuerpos, sino que también permite determinar su cantidad. El resultado del estudio se presenta por el nivel de título de anticuerpos.

Una reacción positiva indica la presencia del patógeno en el cuerpo del paciente. Sin embargo, durante el proceso de diagnóstico, pueden ocurrir reacciones falsas positivas, cuyo número no excede estadísticamente el nivel del 0,05-2,5% del número total de estudios.

Puede ocurrir una reacción positiva de RPHA en personas no infectadas con sífilis si:

• enfermedades sistémicas del tejido conectivo,
• en la sangre del paciente anticuerpos contra patógenos similares a Treponema pallidum,
• patologías fisiológicas, como el infarto de miocardio,
• hepatitis B o C,
• enfermedades oncológicas,
• tifus, leptospirosis, tuberculosis,
• infecciones por VIH,
• borreliosis de etiología transmitida por garrapatas,
• lesiones extensas o fracturas,
• el embarazo,
• en caso de inyección de estupefacientes.

En la mayoría de los casos, las reacciones falsas positivas van acompañadas de un título bajo. Los títulos elevados son típicos de la etapa secundaria de la enfermedad y de una sífilis previamente latente. Sin embargo, también pueden aparecer durante una reacción falsa positiva en pacientes con neoplasias malignas.

En personas que han tenido sífilis al menos una vez, la reacción RPHA sigue siendo positiva por el resto de sus vidas.

Las raras excepciones pueden ser aquellas situaciones en las que la enfermedad se identificó en una etapa temprana de desarrollo, después de lo cual se llevó a cabo una terapia intensiva y eficaz. Por lo tanto, el análisis RPGA no se puede utilizar para evaluar la dinámica de recuperación o el diagnóstico comparativo de las etapas tempranas o tardías de la enfermedad.

Si se obtiene una reacción positiva, es necesario examinar a los familiares del enfermo y a las personas que hayan tenido contacto sexual con él.

Se puede obtener una reacción negativa en los siguientes casos:

• la persona no tiene sífilis,
• la sangre se tomó incorrectamente para la prueba,
• Han pasado de 2 a 4 semanas desde la infección y la producción de anticuerpos aún no ha comenzado.

En cualquier caso, el resultado del estudio debe evaluarse en combinación con indicadores anamnésicos y de laboratorio adicionales.

¿A quién está indicado el análisis?

Un médico puede derivar pacientes a donar sangre para RPHA en los siguientes casos:

• en presencia de manifestaciones clínicas de sífilis: erupciones ulcerosas, agrandamiento de los ganglios linfáticos, alopecia difusa y otros,
• si sospecha de una posible infección en caso de contacto con personas ya enfermas,
• donantes que deseen donar sangre,
• personas que se someten a exámenes preventivos anuales o que expiden certificados sanitarios,
• pacientes con una prueba de detección positiva,
• antes de la hospitalización en un hospital para pacientes hospitalizados,
• durante el examen preoperatorio,
• identificar patógenos de salmonelosis, difteria y disentería utilizando el método RPGA con el diagnóstico adecuado.

Procedimiento para realizar el estudio.

Se envía para su análisis una muestra de sangre venosa donada por el paciente. Para no llegar a una conclusión errónea, el paciente debe ser responsable en la preparación del análisis. Para que los resultados de la prueba sean confiables, se deben seguir las siguientes recomendaciones:

• La prueba sólo debe realizarse con el estómago vacío.
• El día del análisis se puede beber agua mineral sin gas en cantidades mínimas.
• No conviene fumar al menos 30 minutos antes del análisis, pero es mejor aumentar este tiempo a varias horas.
• Se impone una prohibición directa al consumo de bebidas alcohólicas.
• Los pacientes que necesiten utilizar algún medicamento con regularidad deben informar al médico que los remita para un examen.
• Si se siente mal o no se siente bien, debe notificar a la enfermera que le está tomando la sangre o al médico de la clínica ambulatoria donde necesita realizar la prueba.

Sea responsable no sólo de la cuestión de dónde hacerse la prueba, sino también de la preparación para el examen.

Diagnóstico de otras enfermedades infecciosas.

No se debe pensar que un estudio como RPGA se puede realizar únicamente para identificar el agente causante de la sífilis en el cuerpo.

Un análisis con Salmonella diagnosticum le permite detectar la presencia de una infección en el sistema digestivo: la salmonella. A partir del cuarto día después de la infección, el cuerpo produce anticuerpos contra los antígenos de Salmonella, que el método RPGA ayuda a identificar. Un resultado negativo indica la ausencia de infección, y un título positivo, que aumenta de 1:200 a 1:800 en la fase aguda, indicará su presencia.

El método de realizar RPHA con un marcador de difteria permite diagnosticar la difteria y evaluar la inmunidad después de la vacunación. El sistema inmunológico comienza a producir anticuerpos al día siguiente de la infección y permanecen en el cuerpo durante varias semanas. La sensibilidad de este análisis es superior al método de investigación bacteriológica. Un título de 1:80 confirma la presencia de difteria en el cuerpo.

El marcador de disentería para RPHA detecta con mayor precisión la shigelosis (disentería bacteriana), incluso en comparación con el método de diagnóstico de laboratorio mediante cultivo bacteriano. Si el paciente no recibe un tratamiento de calidad, la enfermedad se convierte en un proceso crónico, en el que a menudo se producen recaídas. El análisis le permite diagnosticar las fases aguda y crónica de la diarrea, identificar el agente causante de la disentería, distinguir la shigelosis bacteriana del cáncer colorrectal, los trastornos endocrinos o la inflamación del colon. Una reacción negativa indica la ausencia del bacilo y su presencia se confirma mediante un título de 1:80 para niños o 1:320 para adultos.

La realización de una prueba con un marcador de sarampión le permite determinar la enfermedad del sarampión. Un examen de este tipo puede convertirse en una alternativa al análisis RTGA que a menudo se realiza para diagnosticar el sarampión.

Entonces, análisis de sangre RPGA: ¿qué es? En resumen, podemos decir con seguridad que se trata de un método moderno, muy sensible y fiable para diagnosticar diversas enfermedades de etiología bacteriológica.

En contacto con

Certificado de registro No. RZN 2016/3905 del 04/04/2016

Objetivo

El conjunto de reactivos "Diagnosticum eritrocitos salmonella Vi-antígeno para RPHA" (SED-Vi) está destinado a la detección de anticuerpos contra el antígeno Vi del agente causante de la fiebre tifoidea en sueros sanguíneos humanos mediante la reacción de hemaglutinación pasiva (RPHA ).

Características del conjunto

Principio de operación

En presencia de anticuerpos contra el agente causante de la fiebre tifoidea, se observa hemaglutinación de eritrocitos de pollo sensibilizados con el antígeno Vi, lo que conduce a la formación de un "paraguas" de eritrocitos sedimentados en el fondo de los pocillos en forma de U de la placa. . En ausencia de anticuerpos contra el agente causante de la fiebre tifoidea, los glóbulos rojos sedimentados forman un "punto".

Establecer contenidos

Nombre del reactivo	Descripción	Cantidad en juego
Antígeno Vi de eritrocitos de salmonella de Diagnosticum, seco 6% (EDS)	Eritrocitos de pollo formalizados sensibilizados con el antígeno Vi de S. typhi. Masa higroscópica seca de color marrón. Después de la disolución, la suspensión adquiere un color marrón rojizo.	1 fl., desde 0,6 ml
Suero de diagnóstico de Salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (diluido 1:20, (K+))	Suero de conejo Salmonella adsorbida, receptor Vi, diluido 1:20. Masa porosa higroscópica seca de color blanco. Después de la disolución, es un líquido transparente amarillento o incoloro.	1 fl., desde 0,3 ml
Diluyente de muestra de prueba (RSD)	Líquido transparente de color azul violeta.	1 fl., 10ml
Solución tampón de fosfato (PBS)	Líquido transparente incoloro.	1 fl., 10ml
Tableta polimérica de un solo uso para reacciones inmunológicas.	Comprimido polimérico de un solo uso para reacciones inmunológicas fabricado en poliestireno transparente incoloro.	1 PC.

Características diagnósticas

El diagnóstico debe aglutinarse en RPHA con suero de diagnóstico de salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (dilución 1:20), hasta el título indicado en la etiqueta del suero. El nivel condicional de las características diagnósticas del suero sanguíneo de personas sanas debe considerarse una dilución de suero no superior a 1:20. El tiempo de análisis es de 3040 minutos. El kit está diseñado para analizar 42 sueros sanguíneos en la opción de detección o 10 sueros sanguíneos en la opción de titulación.

Medidas de precaución

El kit está destinado únicamente para uso de diagnóstico in vitro. Las sustancias incluidas en el kit están inactivadas y son seguras. Cuando trabaje con el kit, debe cumplir con SP 1.3.2322-08 y SanPiN 2.1.7.2790-10.

Equipos y materiales adicionales.

Equipos, materiales, soluciones:

• Dispensadores de pipetas de 1 canal con volumen de dosificación variable de 5 a 40 µl; 40 - 200 µl; 200 - 1000 µl y 1000 - 5000 µl;
• Dispensadores de pipetas de 8 o 12 canales con volúmenes de dosificación variables de 5 a 40 µl y de 40 a 200 µl;
• agua destilada (GOST 6709-72).

Muestras analizadas

Las muestras de suero sanguíneo en estudio se almacenan a una temperatura de 2 a 8 °C durante no más de 3 días desde el momento de la extracción de sangre. El suero se puede almacenar congelado a una temperatura no superior a -18 °C durante no más de 1 año. Antes de su uso, las muestras se descongelan a una temperatura de 16 a 25 °C y se mezclan mediante agitación. No se permite volver a congelar. No se deben utilizar muestras con crecimiento bacteriano y hemólisis. Antes de realizar la reacción, los sueros problema se calientan a 56 °C durante 30 minutos.

Realización de análisis

Preparación de suero de control diagnóstico (K+)

Preparar una solución de trabajo de suero diagnóstico de Salmonella adsorbido, receptor Vi, seco (dilución 1:20) a partir de 0,3 ml (K+). Para ello, añadir 0,3 ml de solución tampón fosfato (PBS) al contenido del frasco con K+. La cantidad restante de suero se puede dividir en alícuotas y almacenar congelada a una temperatura que no exceda los -18 ° C durante no más de 6 meses.

Preparación de Salmonella eritrocitos diagnosticum (SED)

Para preparar una dilución de trabajo de la suspensión de diagnóstico de eritrocitos de Salmonella, se añaden 0,6 ml de agua destilada al contenido del frasco con SED seco al 6 % y se deja hidratar durante 2 horas a una temperatura de 16 a 25 °C. Luego se añaden a la solución 2,4 ml de solución tampón fosfato (PBS). La solución de trabajo se almacena a una temperatura de 2 a 8 °C durante no más de 1 mes. No se permite la congelación.

Declaración de RPGA durante el cribado de sueros sanguíneos.

Los sueros sanguíneos para estudios de detección se diluyen en los pocillos de la tableta de la siguiente manera:

• En los primeros pocillos de la placa se preparan diluciones preliminares de 1:20, añadiéndoles primero 190 µl de solución RIP y luego 10 µl de suero problema. Cada suero se agrega con una punta separada y se pipetea con cuidado (el color de la solución en los pocillos después de agregar los sueros debe cambiar de azul violeta a verde);
• Se preparan diluciones de detección de 1:40 en los segundos pocillos añadiendo primero 25 µl de solución de PBS y luego 25 µl de sueros prediluidos y pipeteando con cuidado.

Cada vez que se realiza RPGA es necesario realizar una determinación de control del título de K+. Para ello, agregue 50 l de solución de PBS a 8 pocillos en una fila larga. Luego agregue 50 l de solución de trabajo de K+ (1:20) al primer pocillo, pipetee con cuidado y transfiera 50 l a los siguientes pocillos, obteniendo diluciones dobles de 1:40 a 1:5120. Se añaden 50 µl de solución de PBS a otros 4 pocillos para controlar la EDS en busca de ausencia de hemaglutinación espontánea.

Se añaden 25 µl de SED a todos los pocillos de la placa con diluciones de detección de los sueros problema (excepto los primeros que contienen RIP) y controles. ¡Agite la suspensión de SED en un biberón o baño antes de usarla! La tableta se agita bien y se deja a una temperatura de 16 a 25 ° C durante 30 a 40 minutos hasta que los eritrocitos del control se asienten por completo.

Declaración de RPGA durante la titulación de sueros sanguíneos de prueba

La titulación de los sueros problema y de la solución de trabajo de K+ se realiza en hileras cortas de la placa. Se utiliza otra fila corta para controlar la ausencia de hemaglutinación espontánea de EDS.

Se añaden 180 µl de solución RIP a los primeros pocillos de las filas cortas para la titulación del suero problema. Agregue 50 l de solución de PBS a todos los demás pocillos.

Se añaden 20 µl de suero problema a los pocillos con la solución RIP (se obtiene una dilución de 1:10). Cada suero se añade con su propia punta y se pipetea con cuidado (el color de la solución en los pocillos debe cambiar de azul violeta a verde). Luego, se transfieren 50 μl de los primeros pocillos a los siguientes pocillos de las filas, obteniendo diluciones dobles de 1:20 a 1:1280. Al final de la titulación se retiran de los últimos pocillos soluciones en un volumen de 50 µl.

Cada vez que se realiza RPGA es necesario realizar una determinación de control del título de K+. Para ello, agregue 50 l de solución de PBS a 8 pocillos en una fila larga. Luego agregue 50 l de solución de trabajo de K+ (1:20) al primer pocillo, pipetee con cuidado y transfiera 50 l a los siguientes pocillos, obteniendo diluciones dobles de 1:40 a 1:5120.

Para controlar el diagnóstico de ausencia de hemaglutinación espontánea, se añaden 50 µl de solución de PBS a todos los pocillos de una fila corta.

Se añaden 25 µl de SED a todos los pocillos (excepto los primeros pocillos de cada fila para los sueros problema que contienen RIP). ¡Agite la suspensión de SED en un biberón o baño antes de usarla! La tableta se agita bien y se deja a una temperatura de 16 a 25 ° C durante 30 a 40 minutos hasta que los eritrocitos del control se asienten por completo.

Contabilidad e interpretación de resultados.

Contabilización de resultados al analizar el suero sanguíneo.

Los resultados se tienen en cuenta en una escala convencional de cuatro cruces. Se considera título sérico su dilución, que produce hemaglutinación mediante al menos 3 (+++) cruces.

• ++++ (4+): los eritrocitos aglutinados forman un "paraguas" invertido en el fondo del agujero, sus bordes se caen;
• +++ (3+): los eritrocitos aglutinados forman un "paraguas" invertido en el fondo del agujero, sus bordes son lisos;
• ++ (2+) - junto con los eritrocitos aglutinados, en el fondo del pozo hay un sedimento en forma de un pequeño "anillo" de eritrocitos no aglutinados;
• + (1+) - la mayoría de los glóbulos rojos no se aglutinan y se asientan en forma de un pequeño "anillo";
• (-) - los glóbulos rojos no aglutinados forman un "punto" en el fondo del pocillo.

Se considera resultado positivo la hemaglutinación de eritrocitos cargados con antígeno Vi mediante al menos 3 cruces (+++).

El control de calidad del diagnóstico lo proporcionan 4 pocillos de la fila de control, a los que sólo se añadieron PBS y solución SED. En estos pocillos no debería haber hemaglutinación espontánea; la reacción es negativa (-). En caso contrario, se deberá repetir el estudio. Si aparece hemaglutinación al volver a estadificar, no se usa el medicamento.

Se debe considerar que los sueros con un resultado negativo no contienen anticuerpos contra el antígeno Vi con un título de diagnóstico de 1:40 o inferior.

Los sueros que den un resultado positivo a una dilución de 1:40 deben volver a analizarse con titulación del suero para establecer su título.

Contabilización de resultados al titular el suero sanguíneo.

Se considera título sérico su dilución, que da hemaglutinación de al menos 3 (+++) cruces.

El control de calidad del diagnóstico lo proporcionan los pocillos de la fila para controlar EDS. En estos pocillos no debería haber hemaglutinación espontánea; la reacción es negativa (-). En caso contrario, se deberá repetir el estudio. Si aparece hemaglutinación al volver a estadificar, no se usa el medicamento.

El principio activo del diagnóstico es el antígeno Vi, fijado en la superficie de los glóbulos rojos. Al interactuar con sueros que contienen anticuerpos contra el antígeno Vi, se observa el fenómeno de aglutinación de eritrocitos.

Forma de liberación

Disponible en un juego de 1 frasco con diagnóstico - 3 ml, suero de diagnóstico Receptor adsorbido de Salmonella Vi Dry en forma de liofilizado de 0,1 ml 1 frasco; Solución de cloruro de sodio al 0,9% - 2 botellas de 8 ml; comprimido de un solo uso para reacciones inmunológicas - 1 ud.

Compuesto

Cantidad de reactivos:

Diagnosticum eritrocitos salmonella Vi-antígeno, que es una suspensión al 0,75% de eritrocitos humanos formalinizados y sensibilizados del grupo sanguíneo O (I) con antígeno Vi en una solución tampón de fosfato (pH - 7,2 ± 0,2; concentración - 0,06 mol/l). Conservante - formaldehído. Suspensión homogénea de color marrón sin escamas; al asentarse se forman 2 capas: un sedimento denso de color marrón de eritrocitos y un líquido sobrenadante amarillento transparente 1 botella-3 ml.

El suero de diagnóstico de Salmonella adsorbe el receptor B seco: una masa homogénea de blanco con un tinte marrón a beige. 1 botella - desde 0,1 ml.

Solución de mantenimiento: solución de cloruro de sodio al 0,9%: líquido transparente e incoloro, pH de 6,5 a 7,5. 2 botellas de 8 ml cada una.

Placa de fondo redondo para reacciones inmunológicas de un solo uso: consta de 8 filas, cada una de las cuales incluye 12 pocillos con un fondo redondo, transparente e incoloro. 1 PC.

El diagnosticum debe ser aglutinado en la RPHA por el suero diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B seco en una dilución no inferior a la mitad de su título, pero no inferior a 1/160. Diagnosticum no debe aglutinarse con sueros secos adsorbidos de diagnóstico de Salmonella para AR: receptor O 9 - en una dilución de 1:40 y superior, receptor H d - en una dilución de 1:10 y superior.


Indicaciones para el uso

Diseñado para detectar anticuerpos específicos contra el antígeno Vi de Salmonella typhus en suero sanguíneo humano en una reacción de hemaglutinación pasiva (RPHA).

Régimen posológico y método de administración.

Como muestras analizadas se utilizan muestras de suero sanguíneo humano.
La muestra analizada se almacena en condiciones que impidan el crecimiento bacteriano a una temperatura de 2 a 8 °C durante no más de 72 horas. Se permite la congelación; las muestras de prueba congeladas deben descongelarse a temperatura ambiente antes de realizar la prueba.
No se permite el análisis de muestras con hemólisis severa, crecimiento bacteriano, así como aquellas almacenadas durante mucho tiempo sin congelar o volver a congelar.

REALIZANDO EL ANÁLISIS
Preparación de soluciones para RPHA.
Seque los viales con suero de diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B y agregue 1 ml de la solución de cloruro de sodio al 0,9 % suministrada, obteniendo así una dilución de 1:10, que es una dilución de trabajo.
Un frasco abierto con suero de diagnóstico de Salmonella adsorbido seco en una dilución de 1:10, cerrado, se puede almacenar a una temperatura de 2 a 8 °C durante un mes.
Diagnosticum está listo para su uso. Antes de abrir el vial con diagnosticum se debe agitar cuidadosamente hasta obtener una suspensión homogénea. Se recomienda repetir la agitación durante el funcionamiento.
Un frasco abierto con diagnóstico en forma cerrada se puede almacenar a una temperatura de 2 a 8 ° C durante un mes.
Solución de cloruro de sodio al 0,9%. Listo para usar.

Realización de RPGA.
Al monitorear cualquier número de sueros analizados, es obligatorio realizar 1 serie de aglutinación con suero diagnóstico de Salmonella adsorbido por el receptor B seco.
Para realizar la RPHA se utiliza una tableta de un solo uso para reacciones inmunológicas. Prepare diluciones en serie dobles de los sueros analizados en 0,05 ml de la solución de cloruro de sodio al 0,9% suministrada a partir de 1:10 a 1:2560 y 1 fila de dilución en serie doble del receptor B adsorbido en suero de Salmonella de diagnóstico seco, a partir de una dilución de 1:10, hasta el doble del título indicado en la etiqueta de los frascos de este suero.
Añadir 0,025 ml de diagnosticum a cada pocillo con diluciones de suero.

Los controles obligatorios son:
1. Control del suero diagnóstico de salmonella adsorbido por el receptor
Vi suero seco y analizado, que se añade en una dilución de 1:10 en un volumen de 0,05 ml.
en dos pozos de control.
2. Comprobar la ausencia de aglutinación espontánea del diagnóstico, para lo cual se añaden 0,025 ml de diagnóstico a dos pocillos que contienen 0,05 ml de solución de cloruro de sodio al 0,9%.
La pastilla se agita y se coloca durante 1,5-2,0 horas en un termostato a una temperatura de (37+1) °C.

CONTABILIDAD DE RESULTADOS
La reacción se tiene en cuenta mediante el sistema de cuatro cruces:
4+: todos los glóbulos rojos están aglutinados y cubren uniformemente el fondo del pocillo;
3+: casi todos los glóbulos rojos están aglutinados. En su contexto, hay un anillo discreto de eritrocitos asentados y no aglutinados;
3+ - junto con el aglutinado uniforme en el fondo del pozo hay un sedimento de eritrocitos no aglutinados en forma de un pequeño "anillo" o "botón";
1+: la mayoría de los glóbulos rojos no están aglutinados y se asientan en forma de un pequeño "anillo" con bordes lisos o un "botón" en el centro del fondo del agujero.
(-) - no hay signos de aglutinación. Los glóbulos rojos se asentaron en forma de un pequeño “anillo” con bordes lisos o un botón en el centro del pocillo o en el fondo del tubo de ensayo.
Una reacción de al menos 3+ se considera positiva.
Los resultados obtenidos en el RPGA pueden considerarse confiables si el suero diagnóstico de Salmonella adsorbido receptor B seco 1:10 obtuvo un resultado positivo en una dilución de no menos de 14 de sus títulos, y en 2 pocillos con el suero analizado y con el diagnóstico Suero de Salmonella absorbido por el receptor B seco en diluciones de 1:10 no debe haber escamas ni sedimentos; en pocillos con solución de cloruro de sodio al 0,9% y diagnóstico: la reacción es negativa.
El título de anticuerpos del suero analizado se considera la última dilución del suero, que aún produce una aglutinación positiva de los glóbulos rojos.
Interpretación de resultados.
Se considera que las personas que tienen anticuerpos contra el antígeno B en una dilución de 1:40 o superior son portadoras crónicas de la bacteria tifoidea. Sin embargo, debido a que el diagnóstico no puede realizarse únicamente sobre la base de un estudio serológico, es necesario un examen bacteriológico en profundidad.

Precauciones de uso

El kit incluye suero de diagnóstico del receptor B adsorbido de Salmonella inactivado en seco.
Los sueros problema deben inactivarse a 56°C durante 30 minutos.
Los sueros de prueba, así como los reactivos, equipos e instrumentos en contacto con ellos, pueden constituir material potencialmente infeccioso y deben manipularse con cuidado:
- trabajar con guantes de goma;
- al pipetear es necesario utilizar dispositivos automáticos;
- al finalizar el trabajo, tratar los sueros analizados y los reactivos e instrumentos en contacto con ellos con una solución desinfectante;
- limpie el equipo con alcohol etílico al 96% antes y después de su uso.

Los resultados del análisis objetivo están garantizados si se cumplen las siguientes condiciones:
- todos los reactivos del kit deben conservarse a una temperatura de 2 a 8 °C;
- no utilizar reactivos caducados;
- no utilizar los reactivos del kit si no están marcados apropiadamente en su embalaje;
- para realizar RPGA utilizar reactivos incluidos únicamente en este kit.

2.diagnóstico

4.de microbios destruidos (aislamiento de un Ag específico)

Diagnóstico de HBs de eritrocitos

2.diagnóstico

4. Suspensión de ovejas aéreas tratadas con tanino y precipitadas en HBs.

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Diagnóstico gp120

2.diagnóstico

4.separar un\g ej. VIH

5. para la detección del VIH

Diagnóstico de eritrocitos del tétanos

2.diagnóstico

4. Suspensión de er.ram, tratada con tanino y ag de tétanos.

5. para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo (contra el tétanos

Antígeno de cardiolipina para microprecipitación.

2.diagnóstico

4.fracciones de lípidos extraídas del corazón de un toro sano

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Antígeno treponémico ultrasónico

2.diagnóstico

4. de muertos exc. sífilis

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Diagnóstico de tularemia corpuscular

2.diagnóstico

4.de partículas patógenas individuales

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Diagnóstico de disentería

2.diagnóstico

4. suspensión de animales sacrificados

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo del paciente

Diagnóstico de eritrocitos de Shigella Sonne

2.diagnóstico

4.suspensión de er.ram, tratada con tonina

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Diagnóstico de Salmonella typhimurium

2.diagnóstico

4. de muertos exc. salmonela

5.para detectar anticuerpos específicos en el suero sanguíneo

Sueros

Suero de caballo antigangrenoso 5000 UI

2.suero

4.del suero sanguíneo de caballos con hiperimmia con anatoxina de gangrena gaseosa excitadora

6. por vía parenteral, tras una prueba con globulina 1:100

Inmunoglobulina humana normal

2.suero

4.de suero sanguíneo de donante

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

6.parenteral

Suero precipitante de ántrax

2.suero

4. Del suero sanguíneo de animales hiperinmunizados a\g exc.sib. úlceras

6.reacción de precipitación (RP)

Tipo de suero botulínico – A 400 UI

2.suero

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

6.reacción de neutralización (RN)

Globulina anti-ántrax

2.suero

4.del suero sanguíneo de animales hiperinmunizados y/o exc. ántrax

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

6.parenteral

suero hemolítico

2.suero

4.del suero de animales hiperinmunizados con eritrocitos de animales de otro tipo

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

Suero aglutinante del cólera Ogawa

2.suero

4.de suero sanguíneo de animales hiperinmunizados

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

Suero luminiscente de tularemia

2.suero

4.del suero sanguíneo de animales hiperinmunizados y exc.tulares.

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

Inmunoglobulina contra la encefalitis humana transmitida por garrapatas

2.suero

4.de suero sanguíneo de donante

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

6.parenteral

Suero diagnóstico ESNO

2.suero

4.del suero sanguíneo de animales hiperinmunizados con virus ESNO

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba

Inmunoglobulina humana contra la hepatitis B

2.suero

4.del suero sanguíneo de un donante vacunado contra la hepatitis B

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy

6.parenteral

Suero antiglobulina marcado con peroxidasa

2.suero

4.de suero sanguíneo de animales hiperinmunizados

5.para detectar un antígeno específico en el material de prueba (VIH)

Inmunoglobulina antirrábica

2.suero

4.de suero sanguíneo de donante

5. pase formulario-e. específico comprado letras soy