Enteropatia nou-născuților, simptome, tratament. Imunodeficiențe cauzate de imunitatea celulară afectată
Abstract
Această boală se caracterizează prin apariția imunodeficienței primare, care se exprimă ca o insuficiență multisistem autoimună, de multe ori se manifestă clinic în primul an de viață; sunt doar aproximativ 150 de cazuri în lume descrise până acum. Sindromul IPEX este cauzat de defectul genei FOXP3, care este un factor de transcripție care afectează activitatea celulelor T de reglementare responsabile. pentru mentinerea tolerantei. Există aproximativ 70 de mutații patogene în această genă descrise până acum. Majoritatea pacienților cu sindrom IPEX au manifestări clinice ale bolii în perioada neonatală timpurie sau în primele 3-4 luni de viață. Pentru această boală este tipică următoarea triadă clinică de manifestări: enteropatie autoimună (100%), diabet zaharat (70%), leziuni cutanate (65%), deoarece structura sindromului include întârziere severă a dezvoltării (50%), boala tiroidiană ( 30%), infecții recurente (20%), citopenie autoimună mai rară (anemie hemolitică Coombs-pozitivă), pneumonie, nefrită, hepatită, artrit, miozită, alopecie. Cu toate acestea, au fost descrise unele cazuri de manifestări ulterioare (la pacienții cu vârsta mai mare de 1 an) când pacienții nu prezentau toate simptomele clinice și de laborator tipice pentru formele severe ale bolii. Datorită severității bolii și a mortalității ridicate la acest grup de pacienți, este foarte important să se diagnosticheze precoce și să se înceapă terapia în timp util. Articolul descrie un caz clinic de diabet zaharat neonatal permanent în structura sindromului IPEX.
Sindromul IPEX (Imunodeficiență, Poliendocrinopatie, Enteropatie, Sindrom X-linked). Sinonime: XLAAD (X-linked Autoimmunity-Allergique Disregulation Syndrome) - boala rara; aproximativ 150 de cazuri au fost descrise în întreaga lume. Potrivit unor surse străine, prevalența sindromului IPEX în rândul pacienților cu diabet zaharat neonatal permanent este de aproximativ 4%. Acest sindrom se caracterizează prin apariția imunodeficienței primare, care se manifestă prin leziuni autoimune de organe multiple și cel mai adesea se manifestă clinic în primul an de viață. În 1982 Powel și colab. a descris pentru prima dată o familie în care 19 bărbați aveau o boală legată de X, manifestată prin diaree și poliendocrinopatie, inclusiv diabet zaharat insulino-dependent. Mai târziu, în 2000, Catila et al. a identificat o mutație în gena care codifică domeniul de legare a ADN-ului C-terminal (FKN) în două diverși pacienți mascul cu un asemanator tablou clinic. În 2000-2001 Bennet şi colab. şi Wildin şi colab. a confirmat în mod independent că sindromul IPEX se bazează pe mutații ale genei FOXP3. În prezent, au fost descrise aproximativ 70 de mutații patogene ale acestei gene. Gena FOXP3 este un factor de transcripție care afectează activitatea celulelor T reglatoare responsabile de menținerea autotoleranței. Conform datelor publicate de Barzaghi et al. în 2012, principalul mecanism de afectare a organelor autoimune în sindromul IPEX este considerat a fi tocmai disfuncția celulelor T reglatoare. Astfel, sindromul IPEX se caracterizează prin dezvoltarea imunodeficienței severe, care poate duce la complicații septice și adesea la moarte. În prezent, se cunosc aproximativ 300 de gene care duc la dezvoltarea imunodeficiențe primare(PID). Anterior se credea că aceste boli sunt foarte rare, dar studiile din ultimii ani arată prevalența lor semnificativă. Este extrem de important să fim atenți la pediatri cu privire la posibila prezență a BIP, mai ales în cazurile de infecții severe în combinație cu boli autoimune la copii. La majoritatea pacienților cu sindrom IPEX, manifestările clinice ale bolii încep în perioada neonatală timpurie sau în primele 3-4 luni de viață. Pentru această patologie, este tipică o triadă clinică de manifestări: enteropatie autoimună (100%), diabet zaharat (70%), leziuni cutanate (65%), de asemenea, structura sindromului include întârziere severă a dezvoltării (50%), glanda tiroidă. afectare (30%), infecții recurente (20%), citopenie autoimună mai puțin frecventă (anemie hemolitică Coombs-pozitivă), pneumonită, nefrită, hepatită, artrită, miozită, alopecie. Cu toate acestea, sunt descrise cazuri de manifestare peste vârsta de un an, când pacienții nu prezentau toate manifestările clinice și de laborator caracteristice formelor severe ale bolii. Una dintre componentele principale ale sindromului IPEX este poliendocrinopatia, manifestată prin dezvoltarea diabetului zaharat autoimun, tiroidita autoimună. Markerii imunologici ai endocrinopatiilor includ anticorpi la insulină (IAA), celulele insulare pancreatice (ICA), glutamat dehidrogenază (GAD), tirozin fosfataza (IA-2), anticorpi la transportorul de zinc (ZNT8), anticorpi la tiroperoxidază și tiroglobulină. De asemenea, sunt detectați și alți autoanticorpi - la neutrofile, eritrocite și trombocite, antinucleari, antimitocondriali, anticorpi la cheratina, colagen etc. În plus, pentru această boală este caracteristică dezvoltarea enteropatiei autoimune, manifestată clinic prin diaree apoasă abundentă cu dezvoltarea sindromului de malabsorbție, ai căror markeri imunologici sunt anticorpii la enterocite (villin VAA și harmin HAA). O creștere a nivelului de IgE și o creștere a numărului de eozinofile este caracteristică pacienților cu o formă severă clasică a bolii. Datorită severității bolii și a mortalității ridicate la acest grup de pacienți, este extrem de important diagnostic precoceși inițierea la timp a terapiei. Până în prezent, cea mai eficientă metodă de tratament este transplantul. măduvă osoasă sau transplantul alogenic de celule stem hematopoietice. Pentru a corecta imunodeficiența, este posibilă utilizarea monoterapiei imunosupresoare (ciclosporină A, tacrolimus) sau combinată - o combinație de medicamente imunosupresoare cu steroizi. Sirolimus (rapamicina) s-a dovedit a fi eficient, mai mulți pacienți prezentând o remisiune susținută a bolii. Pe lângă imunosupresoare, terapie de substituție tulburări endocrine, suport nutrițional adecvat, terapie simptomatică. Caz clinic Pacienta K., nascuta in data de 19 aprilie 2016, la termen, greutate 2840 g, lungime corporala 51 cm.Nasterul s-a efectuat prin cezariana de urgenta datorita cresterii hipoxiei fetale intrauterine. Apgar scor 7/7 puncte. Din anamneză se știe că această a patra sarcină a avut loc pe fondul unei infecții genitale cronice, insuficiență placentară, gastrită cronică, creștere mică în greutate, insuficiență istmico-cervicală, amenințare de întrerupere la a 30-a săptămână. Sarcinile anterioare s-au încheiat cu avort spontan întâlniri timpurii. Motivele avortului spontan sunt necunoscute, femeia nu a fost examinată. De la naștere, starea copilului a fost gravă din cauza tulburărilor respiratorii și a semnelor de depresie a sistemului nervos central (SNC). a fost efectuat IVL; extubată la restabilirea respirației spontane. Din prima zi de viață s-a evidențiat o creștere a zahărului din sânge până la 10,4 mmol/l cu o creștere a dinamicii până la 29,0 mmol/l, conform CBS, au fost observate semne de acidoză metabolică. O creștere a nivelului glicemic a fost însoțită de glucozurie (zahăr urinar până la 2000 mg/dl) și cetonurie. În testul biochimic de sânge, există semne de hiperenzimemie (ALT 87,8 U/l, AST 150 U/l). În a 2-a zi de viață, din cauza hiperglicemiei persistente (glicemie maximă de 33,6 mmol/l), s-a început administrarea intravenoasă de insulină simplă cu o rată de 0,03-0,1 U/kg/h, în funcție de valorile glicemiei. Nutriția enterală cu amestecuri adaptate a fost primită fracționat printr-o sondă. În timpul monitorizării zilnice a nivelului de glucoză din sânge pe fondul terapiei cu insulină, a fost înregistrată o variabilitate semnificativă a glicemiei în timpul zilei de la 1,7 la 22,0 mmol/l. În a 8-a zi de viață s-a observat deteriorarea (semne de depresie a SNC, creșterea insuficienței respiratorii, tulburări metabolice asociate cu decompensarea metabolismului glucidic, febră subfebrilă persistentă până la 37,9 ° C, balonare, vărsături repetate, diaree, tulburări trofice ale pielea sub formă de uscăciune și peeling lamelar mare). Aceste simptome au fost considerate ca o manifestare a enterocolitei necrozante (NEC 2a). Pentru examinare și tratament suplimentar, pacientul a fost transferat la RRC GBUZ DRB, Petrozavodsk. În timpul examinării la RRC GBUZ DRB, o serie de teste clinice de sânge au evidențiat o scădere a nivelului de hemoglobină de la 150 la 110 g/l, leucocitoză de la 8,9 la 22,4 mii, o modificare a formulei leucocitelor datorită creșterii numărului de eozinofile. de la 5 la 31%, monocite și trombocite. Conform rezultatelor unui test biochimic de sânge, hipoproteinemie a fost înregistrată până la 36,4 g/l (N 49-69), o tendință la hiponatremie 135 mmol/l (N 135-155) cu normal potasiu 4,7 mmol / l (N 4,5-6,5), hiperfermentemie AlAT-87 U / l (N0-40) și AST 150 U / l (N0-40), titrul CRP crescut la 24,7 mg / m. Nu există o creștere a microflorei în hemocultură, în cultura de urină a fost găsit enterococ. În legătură cu hiperglicemia persistentă, a fost determinat nivelul peptidei C, care s-a dovedit a fi redus (0,1 nmol/l; N0,1-1,22 nmol/l). La examenul cu ultrasunete a evidențiat pneumatoză a pereților intestinali și o creștere a dimensiunii pancreasului (cap - 9,0 mm, corp - 9,0 mm, coadă - 10,0 mm), în dinamică a existat o progresie a dimensiunii. A primit nutriție parenterală, terapie prin perfuzie care vizează eliminarea tulburărilor electrolitice, terapie cu antibiotice, i s-a administrat insulină intravenos. În timpul tratamentului, tulburările electrolitice au fost eliminate, cu toate acestea, nu a fost posibilă stabilirea indicatorilor de glucoză și au persistat și tulburări dispeptice pronunțate. În încercarea de a restabili nutriția enterală, s-a observat balonare, au apărut vărsături și diaree. În a 19-a zi de viață, băiatul a fost dus la secția de terapie intensivă în stare critică. centru perinatal Clinicile Universității Medicale de Stat din Sankt Petersburg. La internare, copilul are un plâns lent, lipsit de emoție, spontan activitate fizica iar tonusul muscular a fost redus, reflexele neonatale au fost slabe. Febră (temperatura corpului 38,1 °C). Fontanela mare 1,0 × 1,0 cm, scufundată. Pielea este palidă, uscată, turgența este redusă, peeling lamelar mare. În timpul auscultării, respirația a fost grea, efectuată uniform în toate părțile plămânilor; frecvența respiratorie 46 pe minut. Zgomotele inimii erau ritmice, ușor înăbușite; ritmul cardiac - 156 pe minut. A existat o balonare pronuntata, o marire moderata a ficatului. Rata diurezei - 7-8 ml / kg / h (față de terapia perfuzabilă în curs). Scaun apos de 7-9 ori pe zi. Dinamica creșterii în greutate a fost negativă (greutatea la naștere - 2840 g, la internarea la clinica Universității de Stat de Medicină Pediatrică din Sankt Petersburg - 2668 g). În secția de terapie intensivă a continuat terapia cu perfuzie care vizează eliminarea tulburărilor electrolitice. Hiponatremia este greu de corectat din cauza mecanism compensator echilibrul osmolarității sângelui ca răspuns la hiperglicemie, însoțită de poliurie până la 7-8 ml/kg/h și pierderi de sodiu în urină, precum și enteropatie severă (scaun de 6-10 ori pe zi, abundent, lichid până la 350 ml /zi). Insulina primita intravenos 0,01-0,04 U/kg/h, in functie de glicemia. Nutriția enterală parțială a fost efectuată cu un amestec pasteurizat-hidrolizat cu o tranziție treptată de la hrănirea cu tub la hrănirea fracționată independentă pe fondul stabilizării stării. În a 28-a zi de viață, a fost transferat la secția de patologie a nou-născuților și sugarilor, unde au continuat examinarea și tratamentul. În timpul examinării, s-a notat anemie în hemogramă (hemoglobină - 93 g/l, eritrocite - 2,91 ∙ 1012/l); leucocitoză (până la 28,7 ∙ 109/l), eozinofilie severă (până la 61%); într-un test de sânge biochimic, hipoproteinemie (proteine totale - 38,4 g/l). La examinarea nivelului de hormoni din sânge, a fost re-detectat nivel scăzut C-peptidă - 0,5 ng/ml (N 0,1-1,22 nmol/l); hormonii tiroidieni au fost normali (T 4 liber - 14,8 pmol/l (N 10,0-23,2); TSH - 6,28 μU/ml (N 0,23-10,0). Combinația de diabet zaharat neonatal, enteropatie, specific manifestări ale pieliiși semne de infecție cronică recurentă (febră febrilă, creșterea leucocitozei la întreruperea tratamentului). terapie cu antibiotice) a făcut posibilă suspectarea pacientului cu sindromul IPEX, a cărui structură include imunodeficiența. Pentru a clarifica natura poliendocrinopatiei, a fost efectuat un studiu care vizează căutarea markerilor imunologici. Ca urmare, un titru ridicat de anticorpi la tiroperoxidază (243,9 Med/ml; N 0-30) și anticorpi la insulele Langerhans într-un titru pozitiv (anticorpi la GAD1,29 U/ml; N 0-1,0), a titrul de anticorpi la insulină a fost de 5,5 U/ml (N 0,0-10,0). Nu au fost detectați anticorpi la celulele producătoare de steroizi ale glandelor suprarenale. Astfel, s-a dovedit natura autoimună a diabetului zaharat și a fost diagnosticată tiroidita autoimună. Ținând cont de prezența semnelor clinice și de laborator ale imunodeficienței, s-a efectuat un examen imunologic aprofundat, s-a depistat un nivel ridicat de IgE (573,6 UI/ml la o rată de 0-15). A fost efectuat un studiu genetic molecular (multigenic targeted sequencing), în urma căruia a fost depistată o mutație a genei FOXP3, confirmând prezența sindromului IPEX la copil. La vârsta de două luni patru zile din cauza riscului ridicat de sepsis și amenințare rezultat letal băiatul a fost transferat la Instituția Federală a Bugetului de Stat „FNKTs DGOI ei. Dmitri Rogachev" de la Ministerul Sănătății al Rusiei pentru terapie imunosupresoare și transplant de măduvă osoasă. În cazul clinic prezentat, o mutație nedescrisă anterior a genei FOXP3 c.1190G > T (p.Arg397Leu) a fost detectată la un copil cu diabet zaharat neonatal, imunodeficiență primară și enteropatie severă. Analiza ADN a mamei pacientului a relevat aceeași leziune în stare heterozigotă. Varianta detectată este localizată în domeniul forkhead C-terminal de legare a ADN-ului și este considerată patogenă de principalele programe predictive (Polyphen2, SIFT, Mutation Taster). Un argument indirect puternic în favoarea patogenității variantei identificate este faptul că mutațiile c. 1189C > T și s. 1190G>A, care afectează același codon 397, au fost găsite anterior la pacienții cu sindrom IPEX. Se știe că mamele pacienților cu sindrom IPEX se caracterizează prin prezența mai multor episoade de avorturi spontane în timp ce poartă fetuși de sex masculin. În cazul descris, istoricul mamei pacientului (purtător al mutației) a fost, de asemenea, agravat de avortul spontan în stadiile incipiente. Acest lucru confirmă încă o dată că noua mutație pe care am descoperit-o are un impact grav asupra funcției FOXP3, provocând o letalitate embrionară crescută. Verificarea genetică a diabetului zaharat neonatal este extrem de utilă, deoarece permite clarificarea naturii bolii și alegerea strategiei optime de tratament. Acest lucru este valabil mai ales pentru pacienții cu forme sindromale, care, de regulă, au curs sever. Detectarea unei mutații la un copil bolnav este foarte importantă pentru consilierea medicală genetică a familiei, deoarece face posibilă efectuarea diagnosticului ADN prenatal în cazul sarcinilor ulterioare. The caz clinic indică faptul că interacțiunea medicilor de diferite specialități (neonatologi, endocrinologi, gastroenterologi, imunologi, geneticieni) contribuie la stabilirea mai eficientă a diagnosticului corect la pacienții cu boli rare.
Maria E Turkunova
Universitatea de Stat de Medicină Pediatrică din Sankt Petersburg, Ministerul Sănătății al Federației RuseAutoanticorpii la Harmonin și Villin sunt markeri de diagnostic la copiii cu sindrom IPEX
Sursa: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3826762/
Experimente concepute și dezvoltate: V.L. Bozi R.B. Experimente realizate: CL E. Bazzigaluppi CB. Date analizate: VL LP FB RB E. Bosi. Reactivi / materiale / instrumente de analiză utilizate: LP FB. A scris articolul: E. Bozi. A contribuit la scrierea/editarea manuscrisului: VL LP FB RB.
Autoanticorpii conjunctivali ai antigenelor enterocitelor (proteina USH1C de 75 kDa) și vilozităților (proteina care leagă actina de 95 kDa) sunt asociați cu dereglarea imună, poliendocrinopatie, enteropatie, sindromul X-linked (IPEX). În acest studiu, am evaluat valoarea diagnostică a autoanticorpilor armonici și viloși în sindroamele IPEX și IPEX-like. Autoanticorpii armonină și villină au fost măsurați printr-o nouă cuantificare a sistemului imuno-precipitator luminescent (LIPS) la pacienții cu IPEX, sindrom asemănător IPEX, imunodeficiențe primare (PID) cu enteropatie, toate diagnosticate prin secvențierea genei FOXP3 și în diabet zaharat de tip 1. (T1D), boala celiacă și donatorii de sânge sănătoși ca controale. Autoanticorpii armonină și villină au fost detectați la 12 (92%) și 6 (46%) din 13 pacienți IPEX și, respectiv, niciunul dintre pacienții cu IPEX, PID, T1D, celiachi. Toți pacienții cu IPEX, inclusiv un caz cu o prezentare clinică tardivă și atipică, au avut fie autoanticorpi pentru armonică și/sau vilozități, fie au fost testați pozitivi pentru anticorpi enterocitari prin imunofluorescență indirectă. Când au fost măsurați la pacienții cu IPEX în remisie după terapie imunosupresoare sau transplant de celule stem hematopoietice, autoanticorpii armonici și vilozități au devenit în toate cazurile nedetectabili sau au rămas la titruri scăzute, dar la unul în care autoanticorpii armonici au rămas constant ridicate. La un pacient, vârful anticorpilor armonici este paralel cu faza de enteropatie recurentă. Studiul nostru demonstrează că autoanticorpii armonici și vilozități măsurați cu LIPS sunt markeri sensibili și specifici ai IPEX, diferențiază IPEX, inclusiv cazurile atipice, de alte tulburări ale copilăriei timpurii legate de enteropatie și sunt utili pentru screening-ul și monitorizarea clinică a copiilor afectați.
Dereglarea imună, poliendocrinopatia, enteropatia, sindromul X-linked (IPEX) este o boală autoimună monogenă caracterizată prin enteropatie severă, diabet de tip 1 (DT1) și eczeme. Sindromul este cauzat de mutații ale genei FOXP3 responsabile de încălcare gravă celule T reglatoare (Treg). În timp ce analiza genetică este metoda de alegere pentru un diagnostic definitiv, nu există o corelație clară între genotip și fenotip, iar cursul bolii variază de la pacient la pacient. În plus, în ciuda clasificării IPEX ca imunodeficiență, nu există parametri imunologici clari care prezic severitatea bolii sau răspunsul la terapie -. În plus, tulburările cu un fenotip clinic similar, denumite sindroame asemănătoare IPEX, pot exista în absența mutațiilor FOXP3, ceea ce face dificilă management clinicși alegerea agenților terapeutici. Prin urmare, identificarea markerilor asociați în mod specific cu disfuncția imună IPEX ar fi extrem de utilă în scopuri de diagnostic. Autoanticorpii enterocitelor circulanți detectați prin imunofluorescență indirectă au fost descriși în trecut în asociere cu diverse enteropatii, inclusiv cele identificate în cele din urmă ca sindrom IFEX, dar ținte moleculare aceşti markeri serologici au fost de mult timp necunoscuţi. Un autoantigen al enterocitelor diferit, recunoscut de serurile pacienților cu IPEX, a fost apoi identificat ca proteina AIE-75 de 75 kDa și caracterizat în continuare ca proteină Sindromul Sincrom Usher (USH1C), cunoscută și sub numele de armonică, o proteină raportată a fi parte a proteinei supramoleculare. rețele, care leagă proteinele transmembranare de citoscheletul din celulele fotoreceptoare și celulele părului urechea internă. Autoanticorpi armonici (HAA) detectați prin imunobblotare și radioligand au fost raportați la pacienții cu IPEX și la o proporție mică de pacienți cu cancer de colon. Mai recent, o proteină care leagă actina, denumită actină de 95 kDa, implicată în organizarea citoscheletului de actină la marginea periei epiteliale, a fost descrisă ca o țintă suplimentară a autoanticorpilor la un subgrup de pacienți cu IPEX. Spre deosebire de cunoștințele noastre, nu au fost raportate informații despre HAA sau autoanticorpi viloși (VAA) în sindroamele asemănătoare IPEX, imunodeficiențe primare (PID) cu enteropatie sau în tulburările adesea asociate cu IPEX, cum ar fi T1D și diverse enteropatii autoimune. .origine.
Scopul acestui studiu a fost acela de a dezvolta teste cantitative pentru măsurarea HAA și VAA pe baza noului sistem de precipitare luminescent imuno-precipitării (LIPS), pentru a determina acuratețea diagnosticului lor în sindroamele IPEX, IPEX-like și PID, pentru a le evalua în funcție de anticorpii enterocitari. testate prin imunofluorescență și evaluează valoarea lor în urmărirea clinică a pacienților cu IPEX.
Treisprezece pacienți cu IPEX și 14 pacienți cu sindrom asemănător IPEX au fost testați în LIPS pentru prezența HAA și VAA. Ca martori, am examinat 5 pacienți cu PID de diverse origini [doi cu deficit de CD25, doi cu sindrom Wiskott Aldrich (WAS)) și unul cu deficit de adenozin deaminază în imunodeficiența combinată severă (ADA-SCID), toate afecțiunile caracterizate prin enteropatie cu debut precoce. ] , 123 cu T1D, 70 cu boala celiacă și 123 donatori de sânge sănătoși. Diagnosticul IPEX sa bazat pe constatări clinice și moleculare, conform criteriilor stabilite de Asociația Italiană de Hematologie și Oncologie Pediatrică (AIEOP, www.AIEOP.org). Mutațiile și datele clinice ale pacienților cu IPEX și IPEX sunt prezentate în tabelele S1 și, respectiv, S2. Toți pacienții cu IPEX, cu excepția Pt19, Pt21, Pt22 și Pt24, au fost descriși în publicațiile anterioare, - . PT24 este o formă atipică a bolii caracterizată prin debut tardiv, fără semne de enteropatie, dar gastrită severă în prezența infiltratelor inflamatorii ale mucoasei asociate cu atrofia vilozității. Nivel general IgG a fost disponibilă la 10 dintre cei 13 pacienți IPEX studiați: dintre aceștia, 8 au fost în intervalul normalîn funcție de vârstă (cu un singur pacient în tratament cu Ig intravenos (IV), în timp ce în două cazuri au fost ușor crescute. Pacienții diagnosticați cu sindrom asemănător IPEX au avut manifestări clinice ale IPEX, dar au fost testați negativ pentru mutații ale genei FOXP3. Pacienții precum IPEX au prezentat cel puțin unul dintre cele mai importante caracteristici clinice IPEX (enteropatie autoimună și/sau T1D) asociată cu una sau mai multe dintre următoarele boli autoimune sau mediate imun: dermatită, tiroidite, anemie hemolitică, trombocitopenie, nefropatie, hepatită, alopecie, hiper IgE cu sau fără eozinofilie. Parametrii clinici și de laborator au exclus alte boli monogenice, cum ar fi WAS, sindromul Omenn, sindromul hiper IgE și sindromul limfoproliferativ autoimun. Cel puțin o probă de ser de la pacienții cu IPEX și sindroame asemănătoare IPEX a fost disponibilă pentru analiza autoanticorpilor în momentul diagnosticării. La șase pacienți cu IPEX, mai multe probe de ser au fost, de asemenea, obținute în timpul urmăririi clinice și utilizate pentru măsurători suplimentare ale autoanticorpilor pentru a investiga corelația cu rezultatul clinic (probele Pt12:8 de la naștere până la 8 ani, probe Pt14:7 de la 6 luni la 13 ani). , Pt17-3 probe, 4 luni până la 3,5 ani; Pt19:44 probe, 4 luni până la 2 ani; Pt22:3 probe, 0 până la 5 luni; Pt 23:44, 4 până la 10 ani). Toți pacienții cu BIP au fost diagnosticați pe baza testelor moleculare. Pacienții cu T1D au fost toți cazuri recente, cu un diagnostic bazat pe criteriile Asociației Americane de Diabet; pacienţii cu boală celiacă au fost studiaţi la momentul diagnosticului pe baza biochimiei jejunale.
Consimțământul informat scris a fost acordat în numele minorilor/copiilor care participă la acest studiu, potrivit declarației de la Helsinki. Studiul a fost aprobat de comitetul local de etică a cercetării din San Raffaele.
Toți pacienții clasificați ca având sindrom IPEX sau IPEX-like au fost introduși pentru mutațiile FOXP3. ADN-ul genomic a fost izolat din sângele periferic folosind metoda fenol-cloroform sau QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen) urmând instrucțiunile producătorului. Unsprezece exoni, incluzând toate limitele intron-exon, au fost amplificați din ADN-ul genomic prin PCR cu perechi de flancare a primerului de intron specific. Fragmentele de gene amplificate au fost secvențiate folosind kitul de ciclism BigDye Terminator (Applied Biosystems) pe un analizor genetic automat ABI PRISM 3130xl și un analizor genetic ABIPRISM 3730 (Applied Biosystems).
Secvența de codificare a luciferazei Renilla a fost donată în plasmida pTnT (Promega, Milano, Italia) pentru a genera vectorul pTnT-Rluc. Secvențele de codificare armonice și viloase de lungime completă au fost apoi amplificate prin RT-PCR și donate separat în pTnT-Rluc în aval și în cadru cu Renilla lumiferaza. Rluc-Harmonin și Rluc-Villin recombinante himerice au fost exprimate in vitro cuplate transcripție și translație folosind sistemul de celule fără lizat de reticulocite de iepure pTnT-quick SPM (Promega). Pentru a testa prezența HAA sau VAA, Rluc-Harmonin și Rluc-Villin au fost utilizate ca antigene în LIPS (17) prin incubarea a 4 × 106 unități de lumină cu 1 µl de ser al fiecărui pacient în PBS ph 7,4-Tween 0,1% (PBST). ) timp de 2 ore la temperatura camerei, complexele imune IgG au fost izolate prin adăugarea de Protein-A-Sepharose (GE Healthcare, Milano, Italia) urmată de o incubare de 1 oră la 4 °C și spălare cu PBST a Ag nelegat prin filtrare în 96 -plăci de filtrare Costar 3504 (Corning Life Sciences, Tewkesbury, SUA). Antigenele imunoprecipitate au fost apoi cuantificate prin măsurarea activității luciferazei recuperate după adăugarea substratului Renilla lumiferazei (Promega) și măsurarea emisiei de lumină timp de 2 secunde într-un luminometru Centro XS3 (Berthold Technologies GmbH & Co. KG, Bad Wildbad, Germania). Rezultatele au fost exprimate în unități arbitrare derivate fie din indicele de anticorpi (BAA) folosind seruri pozitive și negative conform formulei (ser de control cps-cps-ser negativ) / (ser pozitiv cps-ser negativ cp) x100, fie din o curbă standard (HAA) constând din diluții în serie de ser stoc pozitiv. Limita de pozitivitate a fost stabilită la percentila 99 a valorilor observate la donatorii de sânge sănătoși, așa cum este obișnuit în atelierele de autoanticorpi sensibili T1D care analizează sensibilitatea și specificitatea.
Autoanticorpii de enterocite au fost determinați în populațiile de pacienți IPEX și IPEX-like prin imunofluorescență indirectă pe situsurile criostate ale jejunului uman normal sau al maimuței așa cum s-a descris anterior.
Markerii de autoanticorpi pentru T1D și boala celiacă, inclusiv anticorpii împotriva acidului glutamic decarboxilază (GADA), proteina asociată insulinomului 2, insulină, transportor de zinc 8 și transglutaminaza-C, au fost măsurați în toate IPEX, IPEX-like, PID, T1D, celiac boală și martori sănătoși.grupuri de control de donatori prin imunoprecipitare folosind LIPS sau un obiectiv radio așa cum a fost descris anterior. Toate rezultatele au fost exprimate în unități arbitrare derivate din curbele standard obținute prin diluarea în serie a serurilor inițiale pozitive.
Acest studiu a folosit doar statistici descriptive. Calculul percentilei 99 de unități arbitrare la donatorii de sânge pentru selecția pragului a fost efectuat folosind Stata (StataCorp LP, SUA). Probabilitatea condiționată de a testa pozitiv (susceptibilitate) sau negativ (specificitate) pentru HAA sau VAA, în funcție de prezența sau absența unei stări de boală IPEX și de starea corespunzătoare intervale de încredere 95% a fost calculat folosind site-ul web Vassar Stats pentru calcule statistice (http://vassarstats.net/clin1.html). Corelația dintre titrurile HAA și VAA sa bazat pe criteriile de corelare a rangului Spearman și a fost calculată folosind software-ul Graphpad Prism 5.
Concentrații de HAA circulante crescute au fost găsite la 12 din 13 (92%) pacienți cu IPEX, în timp ce au fost negative la pacienții cu IPEX, PID, T1D și boală celiacă (Figura 1A). Concentrații de VAA circulante crescute au fost găsite la 6 (46%) pacienți IPEX (Pt19, Pt14, Pt12, Pt17, Pt3, Pt21, ultimii patru având titruri egale sau mai mari de 98 VAA AU), inclusiv un pacient fără HAA (Pt17). ), apoi modul în care VAA au fost negative în grupurile de control asemănător IPEX și alte boli (Figura 1B). Toți pacienții cu IPEX au fost pozitivi fie pentru HAA, fie pentru VAA, rezultând o combinație de sensibilitate la testul HAA și VAA de 100% (95% CI: 71,6 până la 100%) și specificitatea testului de 97,6% (95% CI: 92,5 până la 99,4%) pentru diagnosticul sindromului IPEX. Nu există caracteristici clinice sau fenotipice corelate cu prezența fiecaruia a autoanticorpilor la pacienții cu IPEX. Nu a fost observată nicio corelație semnificativă la pacienții cu IPEX între titanii autoanticorpi AAA și VAA (Spearman r = -0,3 p = ns). GADA, ca fiind cei mai frecventi autoanticorpi T1D, a fost găsit la pacienții cu IPEX (9 din 13, 5 cu T1D), sindrom de tip IPEX (4 din 14, 2 cu T1D) și PID (3 din 5, 1 cu T1D) ( Fig. 1C). Alți autoanticorpi T1D au fost găsiți în proporții mai mici, inclusiv autoanticorpi de insulină la 5 IPEX, 4 IPEX-like și 2 PID și Zinc Transporter 8 autoanticorpi la un pacient IPEX. Nu a fost observată nicio corelație între titrurile GADA și HAA sau VAA (Spearman r = -0,017 p = ns și respectiv r = 0,34 p = ns). Niciunul dintre pacienții cu IPEX, sindrom asemănător IPEX sau PID nu a avut autoanticorpi IgA sau IgG de țesut IgA asociați cu boala celiacă transglutaminază-C (datele nu sunt prezentate).
Titruri de IgG serice HAA (panoul A), VAA (panoul B) și GADA (panoul C) exprimate ca unități arbitrare în IPEX (n=13), IPEX-like (n=14), PID (n=5), T1D (VAA și GADA n = 123, VAA n = 46), pacienți cu boală celiacă (HAA n = 70, VAA n = 46, GADA n = 44) și martori (HAA și VAA n = 123, GADA n = 67). Linia punctată indică limita pentru pozitivitate.
Toate serurile IPEX, cu excepția unuia (Pt 22), 10 seruri asemănătoare IPEX și 3 seruri PID au fost testate pentru anticorpi enterociți prin imunofluorescență pe secțiuni de criostat intestinal. Toți pacienții IPEX testați au fost pozitivi pentru anticorpi enterociți. Serurile HAA pozitive au arătat o reactivitate puternică împotriva enterocitelor intestinale și citosolului cu cea mai mare intensitate la marginea periei (Figura 2A). VAA cu titru ridicat izolat a arătat o colorare puternică pentru a curăța granița, dar nu și citosolul (Figura 2B). În afara grupului de pacienți IPEX, doar un ser de la un pacient cu infecție PID cu o mutație a genei CD25 și negativ pentru HAA și VAA (Pt L1) a arătat colorare pozitivă a enterocitelor limitate la marginea mâinii (Figura 2C).
HAA din IPEX Pt 19 leagă marginea mâinii și citosolul enterocitelor (panoul A), în timp ce VAA din IPEX Pt 17 leagă doar marginea mâinii (panoul B). IgG din PID Pt L1 leagă marginea periei de enterocite (panoul C). Fără legare în Pt L30 de tip IPEX (panoul D).
Probele seriale pentru măsurători HAA și VAA au fost disponibile pentru 6 pacienți IPEX (Pt12, Pt14, Pt17, Pt19, Pt22 și Pt23): toți au suferit transplant de celule stem hematopoietice (HSCT) ca terapie medicală precedând în 4 cazuri o perioadă variabilă de imunosupresie sistemică. La momentul prezentului raport (aprilie 2013), toți pacienții cu transplant, cu excepția a doi, erau în viață, în remisie clinică din enteropatie și nu urmau terapie imunosupresoare (Tabelul S1). Analiza genetică a sângelui periferic recoltat după transplant a arătat himerism donator 100% în 4 cazuri (Pt12, Pt14, Pt19 și Pt22) și himerism mixt donor/primitor la alți pacienți. La debutul enteropatiei, trei pacienți aveau atât HAA, cât și VAA (Pt12, Pt14 și Pt19), unul avea doar VAA (Pt17) și doi doar HAA (Pt22 și Pt23) (Figura 3). În cinci cazuri (Pt12, Pt14, Pt17, Pt22 și Pt23), remisiunea clinică sau ameliorarea marcată după imunodepresie sau HSCT a fost însoțită de o scădere a titrurilor HAA și/sau VAA care au devenit nedetectabile sau au persistat la titruri foarte scăzute în patru cazuri. cazurile cu cea mai lungă observație. Într-un caz (Pt19) după HSCT, VAA a devenit nedetectabil, în timp ce HAA a persistat la titruri mari, în ciuda remisiunii clinice (Figura 3D). În cel puțin un caz (Pt14), HAA s-a dovedit a fi un marker sensibil al enteropatiei: HAA au fost detectate la titruri mari în asociere cu enteropatie severă la momentul diagnosticării IPEX și apoi au scăzut în timpul remisiunii clinice și histologice după terapia imunosupresoare, atingând un vârf. în timpul recidivei clinice și apoi a devenit persistent nedetectabil după HSCT cu succes și remisiune clinică (Figura 3B). Deși mai puțin frecvent, VAA a prezentat un model similar cu cel al HAA. Scăderea autoanticorpilor observată după HSCT sa datorat deficienței de celule B și IgG secundar condiționării. Într-adevăr, cu excepția Pt22, care a avut un transplant postoperator scurt, toți pacienții cu titruri reduse de HAA sau VAA după HSCT (Pt12, 17 și 23) au fost deja imunizați, iar terapia cu IgIV a fost independentă în timpul primului post-HSCT.
Axa verticală indică HAA (diamante) și VAA (triunghiuri), titruri de autoanticorpi, exprimate în unități arbitrare, de-a lungul timpului axei orizontale în luni. Linia punctată verticală indică data HSCT, liniile punctate orizontale și liniile întrerupte indică limita pentru pozitivitatea HAA și, respectiv, VAA.
În acest studiu, arătăm că HAA și VAA, ușor de măsurat prin noile teste LIPS și utilizate în combinație, sunt markeri foarte sensibili și specifici ai sindromului IPEX și pot prezice rezultatul clinic al acestuia. De fapt, toți pacienții IPEX cu un diagnostic confirmat prin teste genetice aveau concentrații crescute de HAA sau VAA. În schimb, niciunul dintre pacienții cu enteropatie fără mutații FOXP3 (de exemplu, IPEX-like sau PID), pacienții cu T1D sau pacienții cu boală celiacă nu au fost pozitivi pentru HAA sau VAA. Dintre cei doi markeri, HAA a avut cea mai mare sensibilitate, găsită la 12 din 13 pacienți IPEX, în timp ce VAA au fost găsite la doar șase dintre ei. În special, HAA și VAA s-au dovedit a fi markeri valoroși ai sindromului IPEX și în cazuri atipice, cum ar fi Pt24, în care enteropatia nu a făcut parte din prezentarea clinică, în schimb a dominat gastrita severă în care IPEX a fost suspectat și apoi confirmat prin secvențierea genei FOXP3 numai după detectarea HAA crescută. În viitor, un nou test LIPS va permite un screening mai sistematic pentru HAA și VAA la pacienții cu eterogene sindroame clinice, cu posibilitate de detectare Mai mult cazuri de sindroame IPEX atipice clinic.
GADA a fost a doua cea mai frecventă reacție cu autoanticorpi observată la pacienții cu IPEX, după HAA. Deși GADA este cel mai frecvent marker autoanticorp T1D, cu gamă largă titrul în timpul debutului clinic, acestea nu sunt întotdeauna asociate cu diabetul. De fapt, ele pot fi găsite în alte boli autoimune, inclusiv sindromul Tough Man și poliendocrinopatia autoimună (APS). Interesant este că la pacienții cu AFP, GADA este mai corelat cu dezvoltarea simptomelor gastrointestinale decât cu diabetul. În mod intrigant, și la pacienții noștri IPEX, GADA a fost predominant, fără a fi asociat invariabil cu T1D.
Pe lângă faptul că sunt markeri precisi ai sindromului IPEX, HAA și VAA pot avea o potențială valoare predictivă, în special în legătură cu enteropatia asociată. Șase pacienți cu probe disponibile după eșantion au prezentat titruri ridicate atât de HAA, cât și de VAA la momentul diagnosticului sau la debutul simptomelor gastrointestinale și înainte de tratament. Ulterior, în cinci cazuri după tratament imunosupresor și/sau HSCT (Pt12, Pt14, Pt17, Pt22 și Pt23), titrurile HAA și VAA au scăzut, devenind nedetectabile sau au persistat la titruri scăzute în jurul pragului de detecție, reflectând remiterea clinică și histologică a enteropatia asociată. Într-una dintre ele (Pt14), o recidivă tranzitorie a enteropatiei care apare în timpul tratamentului imunosupresor a fost însoțită de un vârf HAA urmat de o cădere după remisiune clinică. Din păcate, la acest pacient, lipsa probelor consecutive nu ne-a permis să stabilim momentul creșterii autoanticorpilor premergător recidivei enteropatiei. Într-un caz (Pt19), remisiunea clinică a fost însoțită de o scădere a VAA, dar nu și a HAA, care a persistat la titruri mari până la 15 luni după HSCT. Constatarea unei scăderi a titrurilor HAA și VAA după HSCT la majoritatea, dar nu la toți pacienții, este extrem de intrigantă, posibil legată de supraviețuirea limfocitelor reziduale gazdă sau plasmocellelor responsabile de producerea persistentă a acestor autoanticorpi.
Introducerea acestor markeri de autoanticorpi în practica clinica ar fi relativ simplu, având în vedere ușurința de a le măsura cu LIPS-ul nou dezvoltat. Recent, această tehnologie a fost propusă ca o nouă procedură neradioactivă pentru înlocuirea anticorpilor radioactivi și imunoprecipitarea in vitro a proteinei A standard de aur a antigenelor umane recombinate marcate cu 35S-metionină transcrise și traduse validate de programele de standardizare a autoanticorpilor consacrate în ambele T1D și boala celiacă. În rapoartele recente, LIPS a arătat performanțe comparabile cu testele de radiocomunicații și mai bune decât ELISA preexistent, . În acest studiu, LIPS a fost proiectat utilizând Renilla (Rluc)-Harmonin și lumiferaza himerică recombinată Rluc-Villin ca antigene, rezultând un test cu zgomot de fond scăzut și cuantificare liniară a autoanticorpilor capabilă să distingă rezultate pozitive din probe negative de ser. Astfel, măsurarea HAA și VAA folosind LIPS s-a dovedit a fi un test rapid, simplu și reproductibil, ușor de aplicat pentru uz clinic.
În mod interesant, aceeași performanță de diagnosticare a HAA și VAA combinate a fost observată cu autoanticorpii enterocite detectați prin imunofluorescență indirectă convențională. De asemenea, rămâne neclar, dar merită verificat în viitor, dacă armonicile și vilozitățile sunt singurele antigene recunoscute pe enterocite de către autoanticorpii asociați IPEX sau dacă alte ținte autoantigene enterocite ale anticorpilor asociați IPEX nu au fost încă identificate.
Până acum, IPEX a fost considerat o celulă T și anume boala imunitara Disfuncții Treg, , , cu o atenție limitată la defectele asociate în răspunsul imun umoral: rezultatele noastre evidențiază asocierea mutațiilor majore ale genei FOXP3 cu un autoanticorp specific antigenului fiabil și cuantificabil. Cu toate acestea, deoarece celulele B nu exprimă FOXP3, este puțin probabil ca mutațiile FOXP3 să afecteze în mod direct dezvoltarea celulelor B și/sau producția de anticorpi. Cu toate acestea, studii recente sugerează că celulele B pot fi atât ținte directe, cât și indirecte ale funcției inhibitorii mediate de celulele Treg, iar alterarea celulelor Treg afectează titrurile de autoanticorpi atât la modele de șoarece, cât și la oameni - Mai mult, datele directe de la șoareci cu mutanți foxp3 indică faptul că absența celulelor Treg este asociată cu dezvoltarea anormală a celulelor B, pierderea alergiei la celulele B și dezvoltarea celulelor plasmatice cu viață lungă. În plus, s-a demonstrat recent că la om, deficiența de FOXP3 duce la acumularea de clone autoreactive în compartimentul celulelor B mature naive, indicând un rol important pentru celulele Treg în controlul punctului de control din perspectiva celulelor B periferice.
Mecanismele responsabile de autoimunizarea hormonilor și vilozităților din IPEX și rolul acestor autoantigene în manifestările patologice ale sindromului IPEX rămân necunoscute. Harmonina este exprimată în mai multe țesuturi, inclusiv intestinul subtire, colon, rinichi, ochi, vestibulul urechii interne și, slab, pancreasul. În intestin, expresia armonizatorului se regăsește predominant în celulele epiteliale ale suprafeței luminale și în jumătatea superioară a criptelor intestinale și este probabil localizată în microvilozitățile mâinii; localizare similară a fost demonstrată pentru vilozități , . Având în vedere că principala caracteristică histopatologică a enteropatiei IPEX este atrofia vilozității cu moartea apoptotică a celulelor epiteliale intestinale cuplate cu inflamație moderată până la severă, este probabil ca armonicile și vilozitățile să poată acționa ca ținte moleculare adecvate ale autoimunității patogene în acest context.
Acest studiu a arătat că HAA și VAA măsurate cu LIPS sunt markeri de diagnostic precis ai sindromului IPEX, cu o potrivire de 100% pentru mutațiile genei FOXP3 care diferențiază IPEX, inclusiv cazurile atipice, de alte tulburări ale copilăriei asociate cu enteropatii. În general, aceste date indică faptul că HAA și VAA ar trebui incluse în fluxul de diagnosticare și observatie clinica pentru pacienții cu sindrom IPEX, la care modificările titrurilor HAA și VAA care indică o enteropatie recurentă pot ajuta clinicienii să ia decizii terapeutice rapide.
Caracteristicile clinice ale pacienților cu IPEX.
Caracteristicile clinice ale pacienților de tip IPEX.
Faceți clic pe AICI pentru mai multe informații.
Autorii sunt recunoscători colegilor lor care au oferit cu amabilitate mostre de ser și informatii clinice la pacienții lor IPEX și IPEX: E. S. Kang și Y. H. Choe, Seul, Republica Coreea; G. Zuin, Milano, Italia; A. Staiano, R. Tronchone și V. Discepolo, Napoli, Italia; J. Schmidtko, Berna, Elveția; A. IkinciogullariZ. SedaUyan, M. Aydogan, E. O. Zu, Ankara, Turcia; G.R. Corazza și R. Ciccocioppo, Pavia, Italia; S. Vignola, Genova, Italia; A. Bilbao și S. Sanchez-Ramon, Madrid, Spania; J. Reichenbachand M. Hoernes, Zurich, Elveția; M. Abinun și M. Slatter, Newcastle upon Tyne, Marea Britanie; M. Cipolli, Verona, Italia; F. Gurakan, Ankara, Turcia; F. Locatelli și B. Lucarelli, Roma, Italia; C. Cancrini și S. Corrente, Roma, Italia; A. Tommasini, Trieste, Italia; L. Guidi, Roma, Italia; E. Richmond Padilla și O. Porras, San José, Costa Rica; S. Martino și D. Montin, Torino, Italia; M. Hauschild, Germania; K. Nadeau și M. Butte, Stanford, CA; A. Aiuti, G. Barera, F. Meschi și R. Bonfanti, Milano, Italia. Autorii le mulțumesc, de asemenea: M. Cecconi și D. Coviello pentru genotiparea FOXP3; și membri ai Grupului de studiu IPEX italian (www.ipexconsortium.org) R. Badolato, M. Cecconi, G. Colarusso, D. Coviello, E. Gambinera și A. Tommasini pentru sprijin și încurajare. Autorii sunt recunoscători pacienților și familiilor lor pentru încrederea și participarea la cercetarea noastră.
Sindromul IPEX este un sindrom de dereglare imună, poliendocrinopatie și enteropatie cu moștenire recesivă legată de X (Imunodisregilare, Poliendocrinopatie și Enteropatie, X-Linked).
Simptome: Poliendocrinopatie (încălcarea glandelor endocrine), manifestată prin dezvoltarea diabetului zaharat de tip 1. În acest tip de diabet, celulele imune atacă și distrug celulele pancreatice care produc insulină, un hormon implicat în metabolismul (schimbul) glucozei (zahărului) în organism. La pacienții cu IPEX, insulina nu este produsă, se dezvoltă o stare de hiperglicemie - continut ridicat zahăr din sânge. De asemenea, este posibilă dezvoltarea tiroiditei autoimune - inflamație a glandei tiroide cauzată de un atac al propriului sistem imunitar, glanda tiroidă nu își mai poate îndeplini funcțiile în mod corespunzător (de exemplu, metabolismul calciului în organism este perturbat). Enteropatia (infecția tractului gastrointestinal) se manifestă prin diaree persistentă care debutează înainte sau în timpul mesei, posibil sângerare intestinală. Anemia hemolitică - hemoliza (distrugerea) globulelor roșii și scăderea cantității de hemoglobină. Iritatii ale pielii după tipul de eczemă (erupție cutanată, însoțită de mâncărime și peeling). Artrita (inflamația articulațiilor), limfadenopatie (creștere și durere noduli limfatici), afectarea rinichilor. Cașexia ( grad extrem epuizare). Susceptibilitate crescută la infecții datorită prezenței dereglării imune (interacțiunea afectată a celulelor sistemului imunitar între ele și cu alte celule) și/sau neutropenie (scăderea numărului de neutrofile - celule ale sistemului imunitar a căror funcție principală este de a proteja împotriva infecții): pneumonie (inflamație a plămânilor), peritonită ( inflamație purulentă peritoneu), sepsis (intoxicație cu sânge), artrită septică(inflamația purulentă a articulațiilor).
Sindromul IPEX este asociat cu mutații ale genei FOXP3
Metoda de cercetare: secvențierea genei FOXP3
proteina sindromului), care joacă un rol important în funcționarea citoscheletului. Reglează polimerizarea actinei. Funcția normală a acestei proteine este necesară pentru mobilitatea completă a celulelor, polarizarea lor, formarea filopodiilor în timpul chemotaxiei, aderența celulară și formarea unei sinapse imune în timpul interacțiunii celulelor sistemului imunitar.
În funcție de localizarea mutațiilor și de lungimea regiunii genice afectate de acestea, se dezvoltă trei variante clinice ale bolii: sindromul Wiskott-Aldrich complet (o consecință a delețiilor) și variante cu o manifestare izolată de trombocitopenie sau neutropenie. Tabloul clasic al sindromului Wiskott-Aldrich se caracterizează prin trombocitopenie cu trombocite mici, eczeme și infecții recurente.
Sindromul Wiskott-Aldrich se caracterizează prin tulburări multiple ale sistemului imunitar, care afectează în principal activitatea fagocitară și citolitică a celulelor imunității înnăscute, adică. funcțiile care depind cel mai mult de mișcarea celulelor și de participarea activă a citoscheletului. Încălcarea formării unei sinapse imune între limfocitele T și APC afectează toate manifestările imunității adaptive.
Ataxie-telangiectazie (sindromul Louis-Bar)
Boală ereditară cauzată de un defect al genei ATM (Ataxia telangiectasia mutată). Se referă la boli bazate pe sindromul defalcări cromozomiale. Boala se dezvoltă ca urmare a mutațiilor care apar în orice parte a genei ATM. Rezultatul mutațiilor poate fi o absență completă sau o slăbire a sintezei proteinei ATM, precum și sinteza unei proteine defectuoase funcțional.
Proteina ATM - serin-treonin protein kinaza. Funcția sa principală este de a iniția semnale de reparare pentru rupturile ADN-ului dublu catenar care apar atât în condiții fiziologice (în timpul meiozei, rearanjarea genelor V ale receptorilor care recunosc antigenul etc.), cât și induse de acțiune. factori externi(de exemplu, radiații ionizante). Când ADN-ul se rupe, kinaza ATM este autofosforilată și trece de la forma dimerică la forma monomerică. ATM kinaza asigură fosforilarea proteinelor complexului MRN și a factorilor înrudiți care efectuează direct repararea ADN-ului. În cazul unui număr mic de pauze, aceștia îndeplinesc cu succes această funcție. Dacă repararea cu succes nu este posibilă, se dezvoltă apoptoza, declanșată de factorul p53. Lipsa reparării complete a ADN-ului determină instabilitatea genomului, rezultând o creștere a radiosensibilității celulelor, a frecvenței de dezvoltare tumori maligneîn special limfoame şi leucemii.
Cel mai caracteristic semn clinic al ataxiei-telangiectaziei este ataxia progresivă, manifestată prin modificarea mersului. Este cauzată de neurodegenerare cu atrofie cerebeloasă. Dezvoltarea proceselor neurodegenerative se datorează faptului că în timpul maturizării neuronilor cerebrali au loc procese de recombinare a ADN-ului, însoțite de dublele lui pauze. Un alt simptom care a determinat denumirea bolii, telangiectazia, este o dilatare persistentă a ochiului și a vaselor de sânge faciale.
Încălcarea reparării rupurilor de ADN care apar în timpul maturării limfocitelor T și B stă la baza imunodeficienței observate în ataxie-telangiectazie. Imunodeficiența se manifestă în boli infecțioase cronice recurente bacteriene și virale ale aparatului bronhopulmonar, care de obicei provoacă moartea pacientului.
sindromul Nijmegen
Nijmegen este orașul din Olanda unde sindromul a fost descris pentru prima dată. Această boală ereditară este denumită sindroame de defalcări cromozomiale, însoțite de formarea instabilității genomului. Dezvoltarea acestei boli este asociată cu o mutație a genei NBS1, al cărei produs, nibrina, este implicată în repararea ADN-ului ca parte a complexului MRN, fiind un substrat pentru fosforilarea de către protein kinaza ATM. În acest sens, atât patogeneza, cât și manifestările clinice ale sindromului Nijmegen coincid practic cu cele din ataxie-telangiectazie. În ambele cazuri se dezvoltă modificări neurodegenerative, totuși, în sindromul Nijmegen predomină fenomenele de microcefalie, deoarece procesele de recombinare a ADN-ului apar și în timpul maturizării neuronilor cerebrali.
Sindromul limfoproliferativ autoimun
Boala se caracterizează prin apoptoză afectată și limfoproliferare non-malignă asociată, hiperimunoglobulinemie, procese autoimune și o creștere a conținutului de celule CD3+ CD4-CD8- în sânge. Mutațiile care stau la baza sindromului sunt cel mai adesea localizate în gena TFRRSF6 care codifică receptorul Fas (CD95). Numai mutațiile care provoacă modificări în regiunea intracelulară a moleculei CD95 duc la manifestări clinice. Mai rar, mutațiile afectează ligandul Fas și genele caspazei 8 și 10 (vezi Secțiunea 3.4.1.5). Mutațiile se manifestă printr-o expresie slăbită a moleculelor codificate de gena corespunzătoare și o slăbire sau absenta totala transmiterea semnalului apoptotic.
Sindromul limfoproliferativ legat de X
O imunodeficiență rară caracterizată printr-un răspuns antiviral, antitumoral și imun pervertit. Agentul cauzal al sindromului limfoproliferativ legat de X este virusul Epstein-Barr. Virusul intră în celulele B prin interacțiunea moleculei gp150 a învelișului viral cu receptorul CD21 de pe membrana celulară. La pacienții cu sindrom limfoproliferativ legat de X, apare activarea policlonală a celulelor B și replicarea nestingherită a virusului.
Infecția cu virusul Epstein-Barr în sindromul limfoproliferativ X-linked este rezultatul unei mutații a genei SH2D1A care codifică proteina adaptor SAP. Proteine asociate cu moleculele de activare limfocitară de semnalizare (SLAM).]. Domeniul SH2 al proteinei SAP recunoaște motivul tirozină în partea citoplasmatică a SLAM și o serie de alte molecule. Procesele care se dezvoltă în celulele sistemului imunitar la activarea mediată prin receptorul SLAM joacă un rol principal în imunitatea antivirală. Receptorul SLAM este exprimat pe timocite, celule T-, B-dendritice și macrofage. Expresia este îmbunătățită la activarea celulei. Acțiunea de reglare a proteinei SAP este asociată cu suprimarea activității tirozin fosfatazelor în
4.7. Imunodeficiențe | |
referitor la SLAM. În absența SAP, SH-2 fosfataza se leagă liber de receptorul SLAM, îl defosforilează și suprimă transducția semnalului. Nu există nicio activare a principalilor efectori ai protecției antivirale - celulele T și NK, ceea ce duce la reproducerea necontrolată a virusului Epstein-Barr. În plus, SAP facilitează interacțiunea tirozin kinazei Fyn cu receptorul SLAM, ceea ce facilitează transmiterea semnalului de activare.
Într-o varietate de manifestări clinice ale sindromului limfoproliferativ legat de X, cea mai constantă este fulminantă Mononucleoza infectioasa, tulburări limfoproliferative benigne și maligne, precum și disgammaglobulinemie sau hipogammaglobulinemie. Printre leziunile locale predomină afectarea ficatului cauzată de infiltrarea cu celule B infectate cu virusul Epstein-Barr și celule T activate, ceea ce duce la necroza țesutului hepatic. Insuficiența hepatică este una dintre principalele cauze de deces la pacienții cu sindrom limfoproliferativ legat de X.
sindromul IPEX
Sindromul legat de X de dereglare imună, poliendocrinopatie și enteropatie ( Dereglarea imună, poliendocrinopatie, enteropatie sindromul X-linked) se dezvoltă ca urmare a mutațiilor în gena FOXP3, situată pe cromozomul X. FOXP3 este „gena principală” responsabilă de dezvoltarea celulelor T reglatoare ale fenotipului CD4+ CD25+. Aceste celule joacă un rol central în inhibarea activității clonelor de limfocite T autospecifice la periferie. Un defect al genei FOXP3 este asociat cu absența sau deficiența acestor celule și cu dezinhibarea diferitelor procese autoimune și alergice.
Sindromul IPEX se manifestă prin dezvoltarea mai multor leziuni autoimune ale organelor endocrine, tractului digestivși sistemul reproducător. Această boală debutează de la o vârstă fragedă și se caracterizează prin afectarea unui număr de organe endocrine (diabet zaharat de tip I, tiroidită) cu nivel inalt autoanticorpi, enteropatie severă, cașexie, statură mică, manifestări alergice(eczeme, alergii alimentare, eozinofilie, niveluri crescute de IgE), precum și modificări hematologice (anemie hemolitică, trombocitopenie). Copiii bolnavi (băieți) mor în primul an de viață din cauza bolilor infecțioase severe repetate.
sindromul APECED
Poliendocrinopatie autoimună, candidoză, distrofie ectodermică ( Poliendocrinopatie autoimună, candidoză, distrofie ectodermică) este un sindrom autoimun cauzat de un defect în selecția negativă a timocitelor. Cauza sa sunt mutațiile genei AIRE responsabile de expresia ectopică a proteinelor specifice unui organ în celulele epiteliale și dendritice ale medulei timusului responsabile de selecția negativă (vezi secțiunea 3.2.3.4). Procesul autoimun afectează în principal glandele paratiroide și suprarenale, precum și insulele pancreasului (se dezvoltă diabetul de tip I), glanda tiroidă și organele genitale.
Adesea însoțită de dezvoltarea candidozei. De asemenea, sunt relevate defecte de morfogeneză a derivaților ectodermici.
Când se ia în considerare spectrul imunodeficiențelor primare, atrage atenția absența unităților nosologice asociate cu patologia celulelor NK. Până în prezent, au fost descrise puțin mai mult de o duzină de mutații care afectează funcția acestor celule la indivizi, ceea ce ne permite să concluzionam că imunodeficiențele care afectează selectiv celulele NK sunt extrem de rare.
4.7.2. Infecția HIV și sindromul imunodeficienței dobândite
Pe lângă imunodeficiențe primare, singura boală pentru care afectarea sistemului imunitar stă la baza patogenezei și determină simptomele este sindromul imunodeficienței dobândite (SIDA); Sindromul imunodeficienței dobândite- SIDA). Numai ea poate fi recunoscută ca o boală independentă de imunodeficiență dobândită.
Istoria descoperirii SIDA datează din 1981, când un raport al unor grupuri de medici din New York și Los Angeles a fost publicat în lucrările Centrului pentru Controlul Bolilor (SUA, Atlanta) despre o boală neobișnuită înregistrată la bărbații homosexuali. S-a caracterizat printr-o formă severă de pneumonie cauzată de ciuperca oportunistă Pneumocystis carinii. În rapoartele ulterioare, au fost date date despre extinderea grupului de pacienți și date despre prezența imunodeficienței asociate cu o scădere bruscă a conținutului de limfocite T CD4+ în circulație, însoțită de dezvoltarea proceselor infecțioase care pot fi cauzate. , pe lângă pneumochisturi, de către alți agenți patogeni facultativi. Unii pacienți au dezvoltat sarcomul Kaposi, care a fost caracterizat printr-un curs agresiv neobișnuit pentru acesta. Până la data publicării acestor materiale, 40% dintre pacienții identificați au murit. Mai târziu s-a dovedit că epidemia bolii a capturat deja Africa ecuatorială, unde boala se răspândește în principal prin contact sexual heterosexual. Comunitatea medicală internațională nu numai că a recunoscut existența unei noi forme nosologice - „sindromul imunodeficienței dobândite” ( Sindromul imunodeficienței dobândite), dar
și a marcat începutul unei pandemii a acestei boli. Debutul dramatic al SIDA a adus-o în atenția publicului, cu mult dincolo de mediul profesional. În știința medicală, în special în imunologie, problema SIDA a afectat semnificativ distribuția eforturilor și finanțelor în dezvoltarea cercetării științifice. Aceasta a fost prima dată când o boală asociată cu o leziune predominantă a sistemului imunitar s-a dovedit a fi atât de semnificativă din punct de vedere științific și social.
La numărul începutului anului 2007 Persoanele infectate cu HIV s-au ridicat la 43 de milioane, dintre care 25 de milioane au murit, creșterea anuală a acestui număr este de 5 milioane, iar rata anuală de deces este de 3 milioane. 60% dintre cei infectați trăiesc în Africa sub-sahariană.
În 1983 aproape simultan în Franţa [L. Montagnier (L. Montagnier)]
și Statele Unite ale Americii [R.S. Galo ( R.C. Gallo )] a fost definit
4.7. Imunodeficiențe | |
natura virală a SIDA și agentul său cauzator - HIV (virusul imunodeficienței umane, Virusul imunodeficienței umane - HIV). Aparține retrovirusurilor, adică. virusuri în care ARN-ul servește ca purtător de informații ereditare și este citit folosind transcriptază inversă. Acest virus aparține subfamiliei lentivirusurilor - viruși cu acțiune lentă, cauzatoare de boli cu lungi perioadă de incubație. Genul HIV include specia HIV-1, care este agentul cauzal formă tipică SIDA și HIV-2, care diferă de HIV-1 în detalii privind structura și acțiunea patogenă, dar în termeni generali similar cu acesta. HIV-2 provoacă o variantă mai ușoară a bolii, întâlnită predominant în Africa. Informațiile de mai jos se aplică în principal HIV-1 (dacă nu este menționat altfel). Există 3 grupe de HIV - M, O și N, împărțite în 34 de subtipuri.
Viziunea actuală acceptată este că HIV-1 provine dintr-un virus cimpanzeu din Africa de Vest (cel mai probabil în Camerun, o țară endemică HIV) în jurul anilor 1930. HIV-2 este derivat din virusul simian SIVsm. Variantele HIV-1 sunt distribuite inegal în întreaga lume. În țările dezvoltate din Vest, predomină subtipul B, în Europa Centrală și Rusia - subtipurile A, B și recombinanții lor. Alte variante predomină în Africa și Asia, toate subtipurile HIV cunoscute fiind prezente în Camerun.
Morfologia, genele și proteinele virusului imunodeficienței umane
Structura HIV este prezentată în fig. 4,46. Virusul are un diametru de aproximativ 100 nm. Este înconjurat de o cochilie din care iese în formă de ciupercă
Coajă
Proteinele și enzimele nucleocapsidei
Nucleocapsid
Orez. 4,46. Diagrama structurală a virusului imunodeficienței umane 1 (HIV-1)
capitolul 4 |
||||||||||||||||||||
Orez. 4,47. Structura genomului virusului 1 al imunodeficienței umane (HIV-1). Este indicată locația genelor pe două molecule de ARN ale virusului
vârfurile, a căror parte exterioară este formată din proteina învelișului gp120, iar părțile adiacente membranei și transmembranare sunt formate din proteina gp41. Picurile reprezintă trimeri ai moleculelor numite. Aceste proteine sunt implicate în interacțiunea dintre virus și celula gazdă, iar răspunsul imun al gazdei este îndreptat în principal împotriva lor. Mai adânc este stratul de matrice, care acționează ca un cadru. Partea de mijloc a virusului este formată dintr-o capsidă în formă de con, care conține ARN genomic. Nucleoproteinele și enzimele sunt, de asemenea, localizate aici: transcriptaza inversă (p66/p51), integraza (p31-32), proteaza (p10) și RNază (p15).
Structura genetică a HIV și proteinele codificate de genele sale sunt prezentate în Fig. 4,47. Două molecule de ARN monocatenar cu o lungime totală de 9,2 kb conțin 9 gene care codifică 15 proteine HIV. Secvențele care codifică structurile virusului sunt limitate la capete 5’ și 3’ de repetări terminale lungi (LTR -repetări terminale lungi) care îndeplinesc funcții de reglare. Genele structurale și de reglare se suprapun parțial. Principalele gene structurale sunt 3-gag, pol și env. Gena gag determină formarea de antigene de bază specifice grupului - nucleoidul și matricea. Gena pol codifică ADN polimeraza (reverse transcriptază) și alte proteine nucleotidice. Gena env codifică formarea proteinelor de înveliș menționate mai sus. În toate cazurile, produsul genic primar este supus procesării, adică. descompuse în proteine mai mici. Genele reglatoare sunt situate între genele pol și env (genele vif, vpr, vpu, vpx, rev, tat) și, în plus, ocupă partea 3’-terminală a genomului (fragmente ale genelor tat și rev, gena nef) . Proteinele codificate de gene reglatoare sunt importante pentru formarea virionului și relația acestuia cu celula. Dintre acestea, cele mai importante proteine sunt tat, un transactivator al transcripției și nef (27 kDa), regulatorul său negativ. Proteina nef defectuoasă este detectată la „ficatul lung” infectat cu HIV, care nu prezintă progresie a bolii.
Proteinele anvelopei gp120 și gp41 sunt cele mai importante pentru imunologia infecției HIV, diagnosticare și dezvoltarea abordărilor imunoterapiei SIDA. Variabilitatea extrem de mare a HIV este asociată cu genomul menv. Gena conține 5 regiuni constante (C) și cinci regiuni variabile (V); la acesta din urmă, secvența de aminoacizi variază de la un izolat de virus la altul cu 30–90%. Bucla variabilă V3 este deosebit de importantă pentru imunogenitate. Frecvența mutațiilor în gena env este de 10-4-10-5 evenimente per genom pe ciclu, adică. 2-3 ordine de mărime mai mare decât frecvența obișnuită a mutațiilor genelor. O parte semnificativă a moleculei este ocupată de reziduuri de carbohidrați.
4.7. Imunodeficiențe | |
Infecția celulelor cu virusul imunodeficienței umane
Procesul de infectare a celulelor umane cu HIV și replicarea lui ulterioară include mai multe etape. În faza incipientă ciclu de viață se pot distinge următoarele faze:
– legarea HIV de suprafața celulei (recepție);
– fuziunea membranelor virusului și celulei și pătrunderea virusului în celulă (fuziune și „dezbrăcare”);
– începerea transcripției inverse; formarea unui complex de preintegrare;
– transportul complexului de preintegrare în nucleoplasmă;
– integrarea provirusului în genomul celular.
La etapele fazei târzii a ciclului de viață HIV includ:
– transcrierea ARN-ului viral pe matrița ADN proviral integrat;
– exportul de ARN viral în citosol;
– traducerea ARN viral, procesarea proteinelor;
– asamblarea particulei virale pe membrana celulară;
– eliberarea virionului nou format.
Principalele porți de intrare ale infecției sunt membranele mucoase ale tractului genito-urinar și digestiv. Pătrunderea virusului în organism este mult facilitată în prezența leziunilor membranei mucoase, dar infecția este posibilă chiar și în absența acestora. În acest caz, virusul este capturat de procesele celulelor dendritice care pătrund în lumenul organului. În orice caz, celulele dendritice sunt primele care interacționează cu HIV. Ei transportă virusul la ganglionul limfatic regional, unde infectează celulele T CD4+ în timpul interacțiunii celulelor dendritice cu limfocitele T în timpul prezentării antigenului.
Recepția HIV se datorează recunoașterii reciproce a trimerului proteinei gp120 a virusului și a glicoproteinei de membrană CD4 a celulei gazdă. Pe ambele molecule, situsurile responsabile de interacțiunea lor sunt localizate. Pe molecula gp120, această regiune este situată în partea sa C-terminală (reziduuri 420-469), în plus, există încă 3 regiuni importante pentru formarea locului de interacțiune cu CD4 și regiunea (254-274) responsabil de pătrunderea virusului în celulă după legarea de membrana CD4. Pe molecula CD4, situsul de legare a gp120 este situat în domeniul N-terminal V (D1) și include secvențe de resturi 31-57 și 81-94.
Deoarece receptorul pentru HIV este molecula CD4, spectrul celulelor țintă ale acestui virus este determinat de expresia acestuia (Tabelul 4.20). Desigur, principalele ținte ale acesteia sunt limfocitele T CD4+, precum și timocitele imature care exprimă ambii co-receptori (CD4 și CD8). Celulele dendritice și macrofagele care exprimă slab CD4 pe membrană sunt, de asemenea, infectate efectiv cu virusul și servesc ca producători activi ai acestuia (replicarea HIV în celulele dendritice este chiar mai mare decât în limfocitele T). Alte celule care conțin cel puțin cantități mici de CD4 la suprafață sunt, de asemenea, ținte ale HIV - eozinofile, megacariocite, celule endoteliale, unele epiteliale (epiteliul timusului, celulele M intestinale) și celule nervoase(neuroni, celule microgliale, astrocite, oligodendrocite), spermatozoizi, celule corionallantoase, mușchi striați.
680 Capitolul 4
Tabelul 4.20. Starea parametrilor imunologici în sindromul imunodeficienței dobândite
Index | Preclinic | Stadiul clinic |
manifestări |
||
Numărul de limfocite | ||
normale sau reduse | Mai puțin de 200 de celule per |
|
1 µl de sânge |
||
Normal sau crescut | normale sau reduse |
|
(procentul poate fi |
||
Raportul CD4+/CD8+ | ||
Raportul Th1/Th2 | normale sau reduse | |
Activitate citotoxică | A crescut | |
celulele T iCal | ||
Răspunsul celulelor T | normale sau reduse | puternic deprimat |
pentru mitogeni | ||
normale sau reduse | ||
Antigenemia | Apare pe | Dispărut |
a 2-a-8-a săptămână | ||
Anticorpi în circulație | Ele apar de obicei după | Prezent |
Factori solubili în | Forme solubile ale lanțului α IL-2R, CD8, TNFR, |
|
circulaţie | β2 -microglobulina, neopterina |
|
Caracteristică redusă |
||
Țesuturi limfoide, asociate | Scăderea precoce a conținutului | Suprimare puternică |
citat cu mucus | reprimarea celulelor T CD4+ | celulele T, în special sub- |
ty scoici | populațiile CD4+ |
|
imunitatea înnăscută | normală sau suprimată | Deprimat |
Molecule suplimentare necesare pentru ca HIV să intre în celule, coreceptorii săi sunt 2 receptori de chemokine: CXCR4 (receptorul pentru chemokinele CXCL12) și CCR5 (receptorul pentru chemokinele CCL4 și CCL5). Într-o măsură mai mică, rolul unui co-receptor este inerent chiar și în mai mult de o duzină de receptori de chemokine. CXCR4 servește ca co-receptor pentru tulpinile HIV-1 cultivate pe linii de celule T, și CCR5 - pentru tulpini cultivate pe linii de macrofage (este prezent pe macrofage, celule dendritice și, de asemenea, pe celulele T CD4+). Ambii acești receptori sunt clasificați ca rodopsinei, transmitând un semnal în celulă prin proteina G asociată cu ei (vezi Secțiunea 4.1.1.2). Ambii chemoreceptori interacționează
Cu proteina gp120; locul de legare pentru acești receptori se deschide în molecula gp120 după interacțiunea cu CD4 (Fig. 4.48). Diferitele izolate de HIV diferă prin selectivitatea lor pentru anumiți coreceptori. Rol suport in receptie HIV-2 este jucat de moleculele de adeziune, în special de LFA-1. La infectarea celulelor dendritice în interacțiune
Cu HIV participă la receptorul de lectină SEMN DC.
4.7. Imunodeficiențe | |
Regiuni hipervariabile ale gp120
Orez. 4,48. Schema de interacțiune între virus și celula țintă în timpul infecției sale. Este ilustrată una dintre opțiunile de interacțiune a moleculelor receptorului celulelor T și a moleculelor HIV-1, care asigură pătrunderea virusului în celulă.
Coreceptorii joacă un rol important în fuziunea învelișului viral cu membrana celulară. Din partea virusului, rolul principal în fuziune este jucat de proteina gp41. După fazele de fuziune (fuziune) și „dezbrăcare” virusului, se formează un complex de revertase, care asigură transcripția inversă cu formarea de ADN proviral dublu catenar.
Cu ajutorul enzimei virale integraza, cADN-ul este integrat în ADN-ul celulei, formând un provirus. O caracteristică a integrării genelor HIV în genomul celular este că diviziunea celulară nu este necesară pentru implementarea acesteia. Ca urmare a integrării, se formează o infecție latentă, care implică de obicei celule T de memorie, macrofage „latente” care servesc drept rezervă de infecție.
Replicarea HIV are loc predominant sau exclusiv în celulele activate. Activarea celulelor T CD4+ induce factorul de transcripție NF-KB, care se leagă de promotorii ADN-ului atât celular, cât și viral. ARN polimeraza celulară transcrie ARN-ul viral. Mai devreme decât altele, genele tat și rev sunt transcrise, ale căror produse sunt implicate în replicarea virusului.Tat este o proteină care interacționează cu secvențe terminale lungi (LTR), care crește dramatic rata transcripției virale. Rev este o proteină care facilitează ieșirea din nucleu a transcriptelor ARNm virale, atât spliced cât și nespliced. ARNm viral eliberat din nucleu servește ca șablon pentru sinteza proteinelor structurale și reglatoare. Proteinele structurale gag, env, pol formează o particulă virală care înflorește din celulă.
Stimularea limfocitelor de către mitogeni îmbunătățește replicarea HIV și efectul său citopatogen. Acest lucru poate fi facilitat de factorii endogeni care însoțesc activarea celulară, induși în limfocitele și macrofagele activate (NF-kB a fost deja menționat). Citokinele, în special TNFa și IL-6, pot fi, de asemenea, astfel de factori. Primul activează transcrierea genelor HIV, al doilea stimulează exprimarea HIV în celulele gazdă. Factorii de stimulare a coloniilor GM-CSF și G-CSF au un efect similar. IL-1, IL-2, IL-3 și IFNy pot acționa ca cofactori de activare a HIV. Hormonii glucocorticoizi ai glandelor suprarenale contribuie la implementarea programului genetic HIV. IL-4, IL-7 și IFNa au efecte opuse.
Răspunsul imun la antigenele HIV
Infecția virală acută este caracterizată prin formarea relativ rapidă a celulelor T CD4+ și CD8+ specifice antigenului care sintetizează IFNγ. Acest lucru duce la o scădere rapidă a conținutului de virus în sânge, dar nu și la dispariția acestuia. Răspunsul celular la infecția cu HIV constă în formarea de T-helpers CD4+ specifici antigenului și CD8+ T-killers. Celulele T CD8+ citotoxice sunt detectate pe tot parcursul SIDA, cu excepția stadiilor târzii, în timp ce celulele T CD4+ specifice virusului sunt detectate doar în stadiile incipiente ale bolii. T-killers CD8+ ucid celulele infectate înainte ca virusul să părăsească celula, întrerupând astfel replicarea virusului. Există o relație inversă clară între titrul virusului din plasma sanguină și numărul de T-killers CD8+ specifici. O creștere a activității proliferative a celulelor T specifice antigenului CD4+ și CD8+ se corelează cu o încetinire a progresiei bolii. Pentru pacienții care conțin un număr mare de CD8+ T-killers, progresia lentă a bolii este caracteristică. Celulele T CD4+ joacă, de asemenea, un rol important în eliminarea virusului: există o relație între răspunsul proliferativ al celulelor T CD4+ la antigenele HIV și nivelul virusului în plasmă. Se observă că severitatea viremiei este mai strâns invers corelată cu producerea de IL-2 decât IFNy. În infecția virală cronică, celulele T efectoare sunt reținute cantitativ, dar se modifică funcțional. Scăderea capacității celulelor T CD4+ de a sintetiza IL-2; formarea de molecule citotoxice de către celulele T CD8+ este slăbită. Se crede că scăderea activității proliferative a celulelor T CD8+ rezultă din producția redusă de IL-2 de către ajutoarele CD4+. Slăbirea protecției antivirale este facilitată de diferențierea celulelor T CD4+ în ajutoare de tip Th2. Chiar și spectrul citokinelor sintetizate de limfocitele T citotoxice CD8+ se caracterizează prin predominanța citokinelor Th2.
Ar fi firesc să ne așteptăm ca procesele imunitare, care, deși într-o formă slăbită, se dezvoltă ca răspuns la un virus invadator, să poată cel puțin grad mic protejează organismul de infecții. De fapt, dacă se întâmplă acest lucru, atunci numai pe perioada initiala boli. Ulterior, în ciuda prezenței celulelor T CD4+ și CD8+ specifice antigenului, are loc replicarea intensivă a virusului. Aceasta este o consecință a selecției virusurilor cu modificări ale epitopilor recunoscuți de
Condițiile cauzate de imunitatea celulară afectată (defectul celulelor T) sunt sindroame severe de imunodeficiență combinată. La unii pacienți, aceste forme de imunodeficiență pot provoca dezvoltarea unor boli extrem de periculoase (până la amenințarea vieții), în timp ce la alții - doar probleme minore de sănătate. Să ne oprim mai în detaliu asupra bolilor care se dezvoltă cu încălcarea imunității celulare.
Candidoza cronică a pielii și mucoaselor
Candidoza (afta) se dezvoltă atunci când pielea și membranele mucoase sunt afectate de o infecție fungică. În cazuri rare, infecția se poate răspândi la organele interne.Există o predispoziție la dezvoltarea candidozei cu o insuficiență selectivă a celulelor T. Tratamentul candidozei necesită utilizarea unor medicamente speciale medicamente antifungice(Unii pacienți necesită terapie de întreținere pe tot parcursul vieții.)
Condrodisplazie metafizară
Această boală este o imunodeficiență autozomal recesivă. Frecvent în căsătoriile consanguine. Pacienții care suferă de condrodisplazie metafizară au păr subțire fragil și sunt foarte sensibili la infecții virale. În unele cazuri, boala poate fi vindecată prin transplant de măduvă osoasă.Sindromul limfoproliferativ legat de X
Sindromul limfoproliferativ legat de X este caracterizat printr-o vulnerabilitate crescută la virusul Epstein-Barr. Virusul Epstein-Barr poate provoca dezvoltarea unor boli periculoase (mononucleoză infecțioasă, anemie aplastică, cancer la ganglioni limfatici, varicela, vasculită, herpes).Trebuie remarcat faptul că această boală este moștenită numai de bărbați.
