استفاده از باکتریوفاژها در پزشکی باکتریوفاژها و کاربرد عملی آنها باکتریوفاژها

آماده سازی فاژ برای درمان و پیشگیری از بیماری های عفونی، و همچنین در تشخیص - برای تعیین حساسیت فاژ و نوع فاژ در شناسایی میکروارگانیسم ها استفاده می شود. عملکرد فاژها بر اساس ویژگی دقیق آنها است. اثر درمانی و پیشگیرانه فاژها به دلیل فعالیت لیتیک خود فاژ و همچنین خاصیت ایمن سازی اجزا (آنتی ژن) سلول های میکروبی تخریب شده در فاگولیزات ها به ویژه در صورت استفاده مکرر است. هنگام به دست آوردن آماده سازی فاژ، از سویه های تولید ثابت شده فاژها و بر این اساس، کشت های معمولی میکروارگانیسم ها استفاده می شود. کشت باکتری در یک محیط غذایی مایع، که در فاز لگاریتمی تولید مثل است، با سوسپانسیون مادر فاژ آلوده می شود.

کشت فاژ لیز شده (معمولاً روز بعد) از طریق فیلترهای باکتریایی فیلتر شده و محلول کینوزول به عنوان نگهدارنده به فیلتره حاوی فاژ اضافه می شود.
محصول نهاییفاژ یک مایع شفاف است رنگ مایل به زرد. برای نگهداری طولانی تر، برخی از فاژها به صورت خشک (در قرص) در دسترس هستند. در درمان و پیشگیری عفونت های روده ایفاژها به طور همزمان با محلول بی کربنات سدیم استفاده می شوند، زیرا محتویات اسیدی معده فاژ را از بین می برد. فاژ برای مدت طولانی (5-7 روز) در بدن باقی نمی ماند، بنابراین توصیه می شود دوباره استفاده شود.

در اتحاد جماهیر شوروی تولید می شود داروهای زیربرای درمان و پیشگیری از بیماری ها استفاده می شود: تیفوئید، سالموپلوز، اسهال خونی، کلیفاژ، فاژ استافیلوکوک و استرپتوکوک. در حال حاضر از فاژها برای درمان و پیشگیری در ترکیب با آنتی بیوتیک ها استفاده می شود. این نرم افزار بیشتر ارائه می دهد اقدام موثربرای باکتری های مقاوم به آنتی بیوتیک

باکتریوفاژهای تشخیصی به طور گسترده ای برای شناسایی باکتری های جدا شده از بیمار یا اشیاء محیطی آلوده استفاده می شوند. با کمک باکتریوفاژها، به دلیل ویژگی بالای آنها، می توان انواع باکتری ها و با دقت بیشتر، انواع تک تک باکتری های جدا شده را تعیین کرد. تشخیص فاژ و تایپ فاژی باکتری های جنس سالمونلا، ویبریو و استافیلوکوک توسعه یافته است. تایپ فاژ به تعیین منبع عفونت، مطالعه روابط اپیدمیولوژیک و تمایز بین موارد پراکنده و اپیدمی بیماری ها کمک می کند.
تشخیص فاژ و تایپ فاژ بر اساس اصل کشت مشترک یک میکروارگانیسم جدا شده با گونه های مربوطه یا نوع فاژها است. نتیجه مثبتوجود یک لیز به خوبی تلفظ از فرهنگ مورد مطالعه با گونه فاژ، و سپس با یکی از فاژهای معمولی در نظر گرفته شده است.

باکتریوفاژها، کاربرد در پزشکی.

باکتریوفاژها کاربرد در عمل پزشکی.

باکتریوفاژها ویروس‌های باکتریایی هستند که می‌توانند به طور خاص به سلول‌های باکتریایی نفوذ کنند، آنها را تکثیر کرده و باعث لیز شوند.

آنها در هر جایی که باکتری ها وجود داشته باشند یافت می شوند - در خاک، آب، دستگاه رودهشخص همه در فاژ ذاتی هستند ویژگی های بیولوژیکیکه مشخصه ویروس ها هستند.

مورفولوژی فاژ:

فاژها از نظر شکل متفاوت هستند - رشته ای، کروی، مکعبی، فاژهایی که دارای سر و دم هستند (یادآور اسپرم).

اندازه ها کوچک، متوسط ​​و بزرگ هستند.

فاژهای بزرگ، متشکل از یک سر و یک دم، پیچیده ترین هستند. سر به شکل ایکوسادرون است. سر با کمک یک یقه و یک چتر به فرآیند متصل می شود. در داخل فرآیند یک میله استوانه ای توخالی وجود دارد که با سر ارتباط برقرار می کند، از بیرون فرآیند دارای غلاف پروتئینی است که قادر به انقباض است، فرآیند دمی به یک صفحه پایه شش ضلعی با خوشه های کوتاه ختم می شود که از آن ساختارهای فیبریل رشته ای گسترش می یابد. صفحه و سنبله ها حاوی لیزوزیم هستند. آپاندیس دارای 6 پرز است که اتصال محکم فاژ را به سلول باکتری ایجاد می کند. ممکن است فاژهایی با غلاف غیر کوچک شونده، فاژهایی با فرآیندهای کوتاه، فاژهایی با آنالوگ فرآیند و فاژهایی بدون فرآیند وجود داشته باشند.

ترکیب شیمیایی:

مقاومت فاژها: فاژها دمای 50-60 درجه سانتیگراد را تحمل می کنند. مقاومت در برابر انجماد، در دمای 70 درجه سانتیگراد از بین می روند. آنها تحت تأثیر سمومی مانند سیانید، فلوراید، و همچنین کلروفرم و فنل قرار نمی گیرند. فاژها در آمپول های مهر و موم شده به خوبی حفظ می شوند، اما می توانند با جوشاندن، عمل اسیدها و تابش اشعه ماوراء بنفش از بین بروند.

مکانیسم تعامل فاژها با یک سلول میکروبی:

با توجه به تعامل، فاژهای بدخیم و معتدل متمایز می شوند.

فاژهای ویروسی - آنها وارد سلول باکتری می شوند، تولید مثل می کنند و باعث لیز باکتری می شوند.

تعدادی ویژگی برای فاژها با فرآیند و غلاف انقباض وجود دارد:

این فاژها با کمک فیبرهای فرآیند در حضور گیرنده های مربوطه بر روی سطح سلول باکتری جذب می شوند. سپس آنزیم ATP-ase فعال می شود که منجر به انقباض غلاف فرآیند دمی و ورود یک میله توخالی به داخل سلول می شود. آنزیمی به نام لیزوزیم در فرآیند سوراخ کردن دیواره سلولی نقش دارد.

DNA فاژ از ساقه توخالی رشد می گذرد و به سلول تزریق می شود. کپسید و فرآیند روی سطح سلول باقی می مانند. سپس پروتئین فاژ و اسید نوکلئیک در داخل سلول تکثیر می شوند. مرحله بعدشامل مونتاژ و تشکیل ذرات فاژ بالغ است. مرحله نهایی: لیز سلولی و آزادسازی ذرات فاژ بالغ از آن. لیز می تواند هر دو از داخل انجام شود - پارگی دیواره سلولی و آزاد شدن فاژهای بالغ به داخل وجود دارد. محیط خارجیو از بیرون - فاژها سوراخ های زیادی در دیواره سلولی ایجاد می کنند که محتویات سلول از آن خارج می شود؛ با چنین لیزی، فاژ تکثیر نمی شود.

فاژهای معتدل - تمام سلول های جمعیت را لیز نکنید، با برخی از سلول ها وارد همزیستی شوید، در نتیجه DNA فاژ در کروموزوم سلولی ادغام می شود. در این حالت ژنوم فاژ پروفاژ نامیده می شود.

پروفاژ بخشی از کروموزوم سلولی می شود و در طی تولید مثل خود به طور همزمان با ژنوم سلول بدون ایجاد لیز آن تکثیر می شود و به فرزندان منتقل می شود.

پدیده همزیستی یک سلول میکروبی با یک پروفاژ را لیزوژنی می نامند.

و کشت باکتری های حاوی پروفاژ لیزوژنیک است، این نام نشان دهنده توانایی پروفاژ به طور خود به خود یا تحت تأثیر عوامل است. محیطبه داخل سیتوپلاسم حرکت می کند و مانند یک فاژ بدخیم باکتری لیز کننده رفتار می کند. پس از انتقال به یک فرم بدخیم، یک فاژ معتدل می تواند بخشی از کروموزوم یک سلول باکتری را بگیرد و پس از لیز، به دیگری منتقل شود.

با توجه به طیف عمل، فاژها به موارد زیر تقسیم می شوند:

1. باکتری های مرتبط با لیز چند ظرفیتی (فاژ سالمونلا فقط سالمونلا را لیز می کند).

2. گونه (مونوفاژ) - باکتری های تنها یک گونه را لیز می کند.

3. نوع خاص - انواع مختلف باکتری ها را در یک گونه به طور انتخابی لیز کنید (استافیلوکوکوس اورئوس پاتوژن - 33 مجموعه).

استفاده عملی:

آماده سازی فاژ برای درمان و پیشگیری از عفونت ها و تشخیص آنها استفاده می شود. عمل فاژها بر اساس ویژگی دقیق آنهاست؛ سویه های تولیدی و کشت های باکتریایی مربوطه برای به دست آوردن یک آماده سازی فاژ استفاده می شود.

اشکال انتشار: مایع، خشک، به شکل قرص، آئروسل، شیاف. به صورت تزریقی، روده ای و موضعی وارد بدن می شود. برای اهداف درمانی و پیشگیری استفاده می شود بیماری های مختلف(اسهال خونی، وبا، انواع بیماری های چرکی-التهابی).

تشخیص فاژ: اصل تشخیص مبتنی بر کشت همزمان کشت های آزمایشی با فاژهای شناخته شده و ناشناخته است؛ در صورت وجود لیز سلولی باکتری، نتیجه مثبت در نظر گرفته می شود. لیز را می توان روی مایع و جامد مشاهده کرد رسانه های مغذی. در رسانه های غذایی مایع، شفافیت سوسپانسیون باکتریایی ظاهر می شود، و در محیط های متراکم، مناطق عدم رشد تشکیل می شود.

تایپ فاژی: تعیین نوع نوع یک گونه با استفاده از مجموعه ای از نوع فاژها. فاژهای تیفوئید، فاژهای تشخیصی وبا، فاژهای سالمونلا و فاژهای دیسانتریک تولید می شوند. تایپ فاژ هنگام انجام تجزیه و تحلیل اپیدمیولوژیک بیماری و به منظور تعیین منبع و مسیرهای انتقال ضروری است. با شناسایی یک فاژ، محتوای میکروارگانیسم های مربوطه قضاوت می شود.

فاژها به دلیل اثر مخرب (لیتیک) بر روی باکتری ها می توانند برای اهداف درمانی و پیشگیری در بیماری های مختلف (اسهال خونی، وبا، انواع بیماری های پیو التهابی و غیره) استفاده شوند. مجموعه ای از فاژهای استاندارد، از جمله فاژهای بین المللی، برای تایپ فاژی پاتوژن های تعدادی از بیماری ها (وبا، تب حصبهسالمونلوز، دیفتری، استافیلوکوک و سایر بیماری ها). از باکتریوفاژها نیز استفاده می شود مهندسی ژنتیکبه عنوان ناقل هایی که بخش های DNA را منتقل می کنند، انتقال طبیعی ژن ها بین باکتری ها با استفاده از فاژهای خاص (ترانسداکشن) نیز امکان پذیر است. به عنوان یک قاعده، برای چنین بیمارانی آنتی بیوتیک تجویز می شود. اما با توجه به اینکه باکتری‌های دائماً در حال جهش در برابر آنتی‌بیوتیک‌ها مقاومت پیدا می‌کنند، اثربخشی آنها بیشتر است سال های گذشتهضعیف شده است. توجه محققان توسط باکتریوفاژها - ویروس هایی که باکتری ها را می بلعند - جلب شد. بر خلاف آنتی بیوتیک ها که هم مضر و هم میکرو فلور سالمارگانیسم، باکتریوفاژها فقط انتخابی هستند باکتری های بیماری زا. چگونه باکتریوفاژها در بدن کار می کنند؟ آنها فقط به سلول های خاصی نفوذ می کنند و با DNA آنها تعامل می کنند و یک اثر لیزوژنیک یا لیتیک ایجاد می کنند. باکتریوفاژها با اثر بر روی میکروب‌های نوع لیتیک، آنها را از بین می‌برند که به آنها اجازه تکثیر سریع می‌دهد. نوع لیزوژنیک نفوذ ژنوم فاژ به ژنوم باکتری، سنتز آنها و انتقال بیشتر از یک نسل به نسل دیگر است. اطلاعات در مورد باکتریوفاژها بیش از یک قرن پیش هنگامی که آنها برای درمان استافیلوکوکوس اورئوس استفاده می شدند ظاهر شد. در حال حاضر، آنها به طور گسترده ای برای پیشگیری و درمان عفونت های روده، استافیلوکوک، استرپتوکوک، حصبه و بسیاری از عفونت های دیگر استفاده می شود. پزشکی مدرنبه دنبال روش‌هایی است که از باکتریوفاژهای زنده استفاده نمی‌کنند، بلکه از آنزیم‌هایی استفاده می‌کنند که با لیز کردن روی باکتری‌های بیماری‌زا عمل می‌کنند. کاربرد آنها می تواند به صورت اسپری بینی یا خوراکی، خمیر دندان، غذا، افزودنی های مواد غذایی. اثربخشی استفاده از باکتریوفاژها شامل عدم وجود موارد منع مصرف و عوارض، سازگاری با سایر داروها است. نفوذ فعالبرای میکروب های مقاوم به آنتی بیوتیک با توجه به این ویژگی ها، باکتریوفاژها به عنوان داروهای آینده مورد ارزیابی قرار می گیرند مبارزه موفقبا عفونت ها

مهمترین مزایای فاژ درمانی عبارتند از حساسیت بالامیکرو فلور بیماریزا به باکتریوفاژ، امکان استفاده اولیه از دوزهای کوچک باکتریوفاژ، سازگاری با انواع آنتی بیوتیک درمانی سنتی، عدم وجود موارد منع مصرف برای پروفیلاکسی فاژ و فاژ درمانی. مشخص شده است که در طبیعت هیچ میکروارگانیسمی وجود ندارد که کاملاً در برابر باکتریوفاژ مقاوم باشد. مهم است که تولید مثل باکتریوفاژ تنها در حضور باکتری های حساس به آن امکان پذیر است. پس از مرگ آخرین سلول میکروبی در کانون ضایعه عفونی، آن را متوقف می کند فعالیت شدیدو به طور کامل از بدن دفع می شود.

با توجه به کاهش مشاهده شده اقدام درمانیاز داروهای آنتی بیوتیکی باکتریوفاژها استفاده می شود عمل بالینیبه عنوان جایگزینی برای آنتی بیوتیک ها و در ترکیب با دومی. آماده سازی باکتریوفاژ از نظر اثربخشی کمتر از داروهای ضد باکتریایی نیست، آنها عوامل محلی خاص و ویژه را تحریک می کنند. ایمنی غیر اختصاصیو باعث ایجاد واکنش های سمی و آلرژیک جانبی نمی شود. باکتریوفاژها به صورت خوراکی تجویز می شوند و همچنین برای شستشوی زخم ها، برای تزریق در حفره های تخلیه شده - شکم، پلور، سینوس، گوش میانی، آبسه ها، زخم ها، رحم، مثانه استفاده می شوند. با استفاده از خوراکی و آئروسل، و همچنین هنگامی که روی سطح غشاهای مخاطی اعمال می شود، باکتریوفاژها به داخل خون و لنف نفوذ می کنند و از طریق کلیه ها دفع می شوند و مجرای ادرار را ضد عفونی می کنند.

در حال حاضر، علاقه به فاژ درمانی در جراحی، اورولوژی، چشم پزشکی و تروماتولوژی تجدید شده است.

آماده سازی های درمانی و پیشگیری از باکتریوفاژها از باکتریوفاژهای بدخیم پلی کلونال با طیف وسیعی از اثر تشکیل شده است و در برابر باکتری های مقاوم به آنتی بیوتیک ها فعال هستند. آنها به شکل مایع، در قرص هایی با پوشش مقاوم در برابر اسید، به شکل شیاف، پماد، لینینت تولید می شوند.

آماده سازی باکتریوفاژ یک فیلتر استریل فاگولیزات باکتریایی است، آنها به صورت خوراکی، موضعی برای شستشوی زخم ها و غشاهای مخاطی، ورود به حفره رحم، مثانه، گوش تجویز می شوند. سینوس های پارانازالو همچنین در حفره های تخلیه شده - شکمی، پلور و همچنین در حفره آبسه ها پس از برداشتن اگزودا.

باکتریوفاژها می توانند به سرعت به داخل خون و لنف نفوذ کنند و از طریق کلیه ها با ادرار دفع می شوند. همانطور که در مطالعات ما نشان داده شده است، پس از مصرف 30 میلی لیتر باکتریوفاژ، ذرات فاژ پس از 2 ساعت در ادرار یافت می شوند و حداکثر غلظت آنها در ادرار 6-8 ساعت پس از مصرف می رسد.

فعالیت باکتریوفاژهای درمانی و پیشگیرانه در برابر پاتوژن های بیماری های چرکی-سپتیک و روده بسیار زیاد است - از 72٪ تا 90٪، از جمله در برابر سویه های منشاء بیمارستانی، که با مقاومت چندگانه به آنتی بیوتیک ها مشخص می شود. انطباق آماده سازی باکتریوفاژ با ساختار آتیولوژیک مدرن پاتوژن ها با سازگاری مداوم آنها با سویه های در گردش به دلیل تجدید نژادهای فاژ و تولید تمبرهای باکتریایی حاصل می شود. این ویژگی فاژها را از سایرین متمایز می کند ضد میکروبی ها- آنتی‌بیوتیک‌ها، یوبیوتیک‌ها یا واکسن‌ها، در مواردی که سویه‌های تولیدی یا سویه‌های تولیدکننده یا ماده سنتز شده در معرض هیچ گونه تغییری نیستند. چنین پلاستیسیته آماده سازی باکتریوفاژ، ادامه مقاومت فاژی اولیه پاتوژن ها را تضمین می کند.

فواید آماده سازی باکتریوفاژ

مزایای آماده سازی باکتریوفاژ شامل ویژگی باریک عمل است که بر خلاف آنتی بیوتیک ها باعث مهار میکرو فلور طبیعی نمی شود. اثر تحریکی باکتریوفاژ استافیلوکوکی بر روی بیفیدوباکتری ها ثابت شده است - جزء ضروریمیکروبیوسنوز روده استفاده از باکتریوفاژها برای درمان بیماری های عفونیعوامل ایمنی اختصاصی و غیراختصاصی را تحریک می کند که به ویژه برای درمان مزمن موثر است بیماری های التهابیدر برابر پس زمینه حالت های سرکوب کننده سیستم ایمنی، ناقل باکتری.

کار تجربی و طولانی مشاهدات بالینیعدم امکان انتقال پلاسمیدهای مقاوم به آنتی بیوتیک ها و سم زایی توسط آماده سازی های درمانی و پیشگیری از باکتریوفاژها، به دلیل اینکه مجتمع های پلی کلونال باکتریوفاژهای بدخیم هستند، ثابت شده است.

در روسیه، کشورهای CIS، لهستان، فرانسه، اسپانیا، باکتریوفاژها به طور گسترده در پزشکی و دامپزشکی استفاده می شوند. جمع آوری شده تجربه عالیاستفاده از باکتریوفاژها در درمان عفونت های روده ای: اثربخشی بالینی بالای فاژ درمانی برای حاد و اسهال خونی مزمنسالمونلوز همراه با بهداشت ناقلین. اثر اپیدمیولوژیک بالای استفاده پیشگیرانه از باکتریوفاژهای اسهال خونی، تیفوئید و سالمونلا به اثبات رسیده است. شرکت های صنعتیکاهش در میزان بروز 3-6 برابر ایجاد شد. استفاده از باکتریوفاژها نتایج خوبی در درمان بیماری های ناشی از باکتری های فرصت طلب، دیس باکتریوز، ضایعات چرکیپوست، گوش و حلق و بینی - اندام ها، سیستم اسکلتی عضلانی، سیستم تناسلی ادراریسیستم های گردش خون و اندام های تنفسی، از جمله در نوزادان و کودکان سال اول زندگی.

یک شرط مهم که اثربخشی درمان با آماده سازی فاژ را تضمین می کند، حساسیت فاژی خاص پاتوژن است.

تجربه طولانی فاژ درمانی در پژوهشکده اورولوژی مشخص است. در نتیجه انطباق باکتریوفاژهای تجاری با سویه های بیمارستانی در حال گردش در کلینیک اورولوژی در NPO Biofag، حساسیت فاژی سویه ها 15 درصد افزایش یافت و در سطح یا بالاتر از سطح حساسیت به مدرن ترین آنتی بیوتیک های خارجی بود. در پس زمینه استفاده طولانی مدتباکتریوفاژها در بیمارستان از جمله سویه های بیمارستانیهیچ تشکیل مقاومت به فاژ مشاهده نشد، در حالی که مقاومت به آنتی بیوتیک ها کاهش یافت. اثربخشی بالینی فاژ درمانی در 92 درصد موارد مشاهده شد که اغلب از نتایج درمان با آنتی بیوتیک بیشتر بود. عدم وجود موارد منع مصرف و عوارض در استفاده از داروهای باکتریوفاژ، امکان استفاده از آنها در ترکیب با سایر داروها. داروهااز جمله با آنتی بیوتیک ها، فعالیت در برابر سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک و سازگاری باکتریوفاژها با پاتوژن های مدرن- همه اینها امکان ارزیابی آماده سازی باکتریوفاژ را به عنوان یک وسیله بسیار مؤثر و امیدوارکننده برای درمان اورژانسی عفونت های چرکی-سپتیک و روده ای فراهم می کند. با این حال، فاژها، این "نظم های طبیعی" نه تنها برای درمان، بلکه برای پیشگیری از بیماری های عفونی نیز قابل استفاده هستند. آنها را می توان برای زنان باردار، مادران شیرده و کودکان در هر سنی از جمله نوزادان نارس تجویز کرد. شرط اصلی برای کاربرد موفقیت آمیز آنها، آزمایش کشت جدا شده برای حساسیت به فاژ مربوطه است. یک الگوی شگفت انگیز ذکر شد: بر خلاف آنتی بیوتیک ها، حساسیت سویه های بالینی میکروارگانیسم ها به باکتریوفاژها پایدار است و تمایل به افزایش دارد، که می تواند با غنی سازی توضیح داده شود. آماده سازی پزشکینژادهای جدید فاژها علاوه بر کاربردهای پزشکی، باکتریوفاژها به طور گسترده در دامپزشکی استفاده می شوند. به ویژه باکتریوفاژ استافیلوکوکی در درمان ورم پستان در گاوها موثر است. آماده سازی باکتریوفاژ به صورت خوراکی برای بیماری ها تجویز می شود اعضای داخلییا به صورت موضعی، مستقیماً روی ضایعه. عمل فاژ در حال حاضر 2-4 ساعت پس از معرفی آن آشکار می شود (که به ویژه در مراقبت های ویژه مهم است). باکتریوفاژها به داخل خون، لنف نفوذ کرده و از طریق کلیه ها دفع می شوند و مجاری ادراری را ضد عفونی می کنند.

بنابراین، باکتریوفاژها از موارد زیر استفاده می کنند:

در دامپزشکی برای:

پیشگیری و درمان بیماری های باکتریاییپرندگان و حیوانات؛

درمان بیماری های چرکی و التهابی غشای مخاطی چشم، حفره دهان؛

پیشگیری از عوارض چرکی و التهابی در سوختگی ها، زخم ها، مداخلات جراحی؛

در مهندسی ژنتیک:

برای انتقال - انتقال طبیعیژن بین باکتری ها؛

به عنوان بردارهایی که بخش هایی از DNA را منتقل می کنند.

با استفاده از فاژها، امکان ایجاد تغییرات جهت دار در ژنوم DNA میزبان وجود دارد.

در صنایع غذایی:

عوامل حاوی فاژ در مقیاس انبوه در حال فرآوری گوشت و محصولات مرغداری آماده مصرف هستند.

باکتریوفاژها در تولید محصولات غذایی از گوشت، مرغ، پنیر، محصولات گیاهی و غیره استفاده می شوند.



سانتی متر. زاخارنکو، کاندیدای علوم پزشکی، دانشیار، نظامی آکادمی پزشکیآنها سانتی متر. کیروف، سن پترزبورگ

باکتریوفاژها میکروارگانیسم های منحصر به فردی هستند که بر اساس آنها گروه خاصی از آماده سازی های درمانی و پیشگیری از نظر خواص و ویژگی های آنها ایجاد شده است. اقدامات زیربنایی آنها طبیعی است مکانیسم های فیزیولوژیکیفعل و انفعالات بین فاژها و باکتری ها امکان پیش بینی تنوع بی نهایت هر دو باکتریوفاژ خود و راه های ممکنبرنامه های کاربردی آنها با گسترش مجموعه باکتریوفاژها، بدون شک پاتوژن های هدف جدید ظاهر می شوند و دامنه بیماری هایی که در آنها فاژها می توانند هم به عنوان تک درمانی و هم به عنوان بخشی از رژیم های درمانی پیچیده استفاده شوند، گسترش می یابد.

بله، استفاده کنید پیوباکتریوفاژ چند ظرفیتیسکستافاژ در درمان نکروز پانکراس عفونی (آکادمی پزشکی دولتی پرم به نام آکادمیسین E.A. Wagner) امکان بازیابی سریع پارامترهای اصلی هموستاز و عملکرد اندام ها و سیستم ها را در بیماران فراهم کرد. در این تعداد نیز کاهش چشمگیری داشته است عوارض بعد از عملو فوت‌شدگان: در گروه بیماران تحت درمان با درمان استاندارد، مرگ و میر 100٪ بود، در حالی که در گروه تحت درمان با BF - 16.6٪.

به دلیل بی ضرر بودن و واکنش زایی فرآورده های BP، امکان استفاده از آنها وجود دارد عمل اطفالاز جمله در نوزادان. تجربه کودکان منطقه ای نیژنی نووگورود بیمارستان بالینی، جایی که در طول دوره عارضه وضعیت اپیدمیولوژیک، همراه با اقدامات معمول ضد اپیدمی، از BP - Intesti-bacteriophage و BP Pseucfomonas aeruginosa استفاده شد. کاهش 11 برابری در بروز عفونت بیمارستانی با علت سودوموناس آئروژینوزا نشان داد. راندمان بالابرنامه های کاربردی BF آماده سازی BF را می توان هم برای درمان دیس باکتریوز و هم برای اختلالات تجویز کرد دستگاه گوارشو برای جلوگیری از کلونیزاسیون غشاهای مخاطی دستگاه گوارش توسط باکتری های فرصت طلب. آماده سازی چند جزئی BF برای تسکین فوری اولین علائم ناراحتی گوارشی ایده آل است.

تا به امروز، این شرکت در حال برنامه ریزی است کل خطمناطق دارای اولویت برای توسعه و تولید باکتریوفاژهای درمانی و پیشگیری کننده، که با روندهای جدید جهانی مرتبط است. آماده سازی های جدید در حال ایجاد و معرفی هستند: BF علیه دندانه ها و انتروباکتری ها ایجاد شده است، کار برای ایجاد یک آماده سازی فاژ علیه هلیکوباکتر پیلوری در حال انجام است.

بر اساس گزارش معاونت علمی معاونت علمی، تنها یک تولید کننده این داروها NPO Microgen است. توسعه نوآورانهآلا لوباستوا، سالانه بیش از 2 میلیون بسته تولید می کند. متأسفانه، ایده های بسیاری از پزشکان در مورد باکتریوفاژها به دور از عینیت است. بسیاری از مردم نمی دانند که باکتریوفاژهای فعال علیه یک پاتوژن می توانند به خانواده های مختلف تعلق داشته باشند، چرخه های زندگی متفاوتی داشته باشند و غیره. به عنوان مثال، باکتریوفاژهای P. aeruginosa متعلق به خانواده های Myoviridae، Podoviridae، Siphoviridae، چرخه زندگییا متوسط سویه های مختلف از یک پاتوژن ممکن است حساسیت متفاوتی نسبت به باکتریوفاژها داشته باشند. اکثر کارشناسان وجود مایع و قرص را می دانند (شنیده، کسی استفاده کرده است). فرم دوزآماده سازی درمانی و پیشگیری از باکتریوفاژها. با این حال، طیف آنها بسیار گسترده تر است، که می توان آن را به مزایای بی قید و شرط نسبت داد، به ویژه در ترکیب با انواع روش های تجویز (بلع، تجویز در تنقیه، کاربرد، شستشوی زخم ها و غشاهای مخاطی، ورود به حفره های زخم و غیره). . به مزایای آشکاربه طور سنتی به باکتریوفاژها اشاره می شود تاثیر خاصدر جمعیت نسبتاً محدودی از باکتری ها، محدود به زمان وجود (تا زمانی که جمعیت هدف میکروارگانیسم ها ناپدید شوند)، عدم وجود چنین اثرات جانبیبه عنوان سمی و واکنش های آلرژیک، واکنش های دیس بیوتیک و غیره این داروها را می توان در انواع مختلف استفاده کرد گروه های سنیو در دوران بارداری خود باکتریوفاژها آلرژن قابل توجهی نیستند. موارد عدم تحمل آماده سازی باکتریوفاژ بیشتر با واکنش به اجزای محیط غذایی همراه است. تمام تولید کنندگان اصلی این گروه از داروها برای حداکثر کیفیت اجزای مورد استفاده تلاش می کنند که احتمال چنین واکنش هایی را کاهش می دهد. در زمینه افزایش مقاومت آنتی بیوتیکی، برخی از نویسندگان پیشنهاد می کنند که باکتریوفاژها به عنوان بهترین جایگزین برای آنتی بیوتیک ها در نظر گرفته شوند. آماده سازی های درمانی و پیشگیری از باکتریوفاژها ترکیبی از ترکیبات خاص انتخاب شده (مجموعه ای از پلی کلونال بسیار خطرناک است. ویروس های باکتریایی، به ویژه در برابر رایج ترین گروه های پاتوژن انتخاب شده است عفونت های باکتریایی) بر اساس مجموعه فاژهای سازنده. شعبه های شرکت واحد فدرال NPO Microgen در اوفا، پرم و نیژنی نووگورود – مراکز مدرنتولید چنین داروهایی امکان ایجاد سفارشی میکروارگانیسم های بیماری زاآماده سازی درمانی و پیشگیری از باکتریوفاژها یکی دیگر از مزایای عمده این گروه از آماده سازی ها می باشد. رشد مقاومت باکتریایی به داروهای ضد میکروبی و پلیاتیولوژی بیماری‌های عفونی مدرن که اغلب رخ می‌دهند، نیازمند درمان ترکیبی آنتی‌بیوتیکی (دو، سه، و گاهی اوقات بیشتر داروهای ضد میکروبی) هستند. برای انتخاب طرح کارآمددرمان با آنتی بیوتیک ها، علاوه بر حساسیت واقعی باکتری ها به دارو، باید به اندازه کافی در نظر گرفته شود. عدد بزرگعوامل. فاژ درمانی نیز از این نظر مزایای خاصی دارد. از یک طرف، استفاده از ترکیبی از باکتریوفاژها با تعامل آنها با یکدیگر همراه نیست و منجر به تغییر در طرح های کاربرد آنها نمی شود. در مجموعه موجود از باکتریوفاژهای درمانی، تعدادی از ترکیبات به خوبی اثبات شده وجود دارد - باکتریوفاژ کولیپروتئوس، پیوباکتریوفاژ چند ظرفیتی، روده-باکتریوفاژ. از سوی دیگر، باکتری ها این کار را نمی کنند مکانیسم های رایجمقاومت در برابر آنتی بیوتیک ها و فاژها، بنابراین، آنها را می توان هم زمانی که پاتوژن به یکی از داروها مقاوم است و هم در ترکیب "آنتی بیوتیک + باکتریوفاژ" استفاده کرد. این ترکیب به ویژه برای از بین بردن بیوفیلم های میکروبی موثر است. آزمایش به طور قانع کننده ای این را نشان می دهد کاربرد ترکیبیآنتاگونیست های آهن و باکتریوفاژها می توانند تشکیل بیوفیلم ها را مختل کنند کلبسیلا پنومونیه. در عین حال، کاهش قابل توجهی در تعداد جمعیت های میکروبی و کاهش تعداد سلول های "جوان" مشاهده می شود. یکی بیشتر ویژگی مهمعمل باکتریوفاژها پدیده ای مانند القای آپوپتوز است. برخی از سویه های E. coli دارای ژن هایی هستند که پس از وارد شدن باکتریوفاژ T4 به آن باعث مرگ سلولی می شوند. بنابراین، در پاسخ به بیان ژن‌های دیررس فاژ T4، ژن روشن (که پروتئازی را کد می‌کند که فاکتور افزایش طول EF-Tu لازم برای سنتز پروتئین را از بین می‌برد) سنتز تمام پروتئین‌های سلولی را مسدود می‌کند. ژن prrC یک نوکلئاز را کد می کند که tRNA لیزین را می شکند. نوکلئاز توسط محصول ژن stp فاژ T4 فعال می شود. در سلول‌های آلوده به فاژ T4، ژن‌های رکس (که متعلق به ژنوم فاژ هستند و در سلول‌های لیزوژنیک بیان می‌شوند) باعث تشکیل کانال‌های یونی می‌شوند که منجر به از بین رفتن یون‌های حیاتی توسط سلول‌ها و متعاقباً مرگ می‌شود. خود فاژ T4 می تواند با بستن کانال ها با پروتئین های خود، محصولات ژن های rII، از مرگ سلولی جلوگیری کند. در مورد تشکیل مقاومت باکتریایی به یک آنتی بیوتیک، باید به دنبال گزینه های جدیدی برای اصلاح مولکول فعال یا مواد اساسی جدید بود. متاسفانه در سال های اخیر سرعت معرفی آنتی بیوتیک های جدید به میزان قابل توجهی کاهش یافته است. وضعیت باکتریوفاژها اساساً متفاوت است. مجموعه‌های تولیدکنندگان بزرگ شامل ده‌ها سویه باکتریوفاژ آماده هستند و دائماً با فاژهای فعال جدید پر می‌شوند. با توجه به نظارت مداوم بر حساسیت پاتوژن های جدا شده به باکتریوفاژها، تولیدکنندگان ترکیبات فاژی را که به مناطق عرضه می شود تنظیم می کنند. به لطف باکتریوفاژهای سازگار، می توان شیوع عفونت های بیمارستانی ناشی از سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک را از بین برد.

در مصرف خوراکیباکتریوفاژها به سرعت به کانون های محلی سازی عفونت می رسند: هنگام مصرف خوراکی توسط بیماران مبتلا به بیماری های چرکی-التهابی، پس از یک ساعت، فاژها وارد جریان خون می شوند، پس از 1-1.5 ساعت آنها از ترشحات برونش ریوی و از سطح زخم های سوختگی، پس از 2 شناسایی می شوند. ساعت - از ادرار، و همچنین از مایع مغزی نخاعی بیماران مبتلا به آسیب مغزی تروماتیک.

بنابراین، باکتریوفاژها میکروارگانیسم های منحصر به فردی هستند که بر اساس آنها گروه خاصی از آماده سازی های درمانی و پیشگیری از نظر خواص و ویژگی های آنها ایجاد شده است. مکانیسم‌های فیزیولوژیکی طبیعی تعامل بین فاژها و باکتری‌های زیربنای عمل آنها، پیش‌بینی تنوع بی‌نهایتی از خود باکتریوفاژها و راه‌های ممکن استفاده از آنها را ممکن می‌سازد. با گسترش مجموعه باکتریوفاژها، بدون شک پاتوژن های هدف جدید ظاهر می شوند و دامنه بیماری هایی که در آنها فاژها می توانند هم به عنوان تک درمانی و هم به عنوان بخشی از رژیم های درمانی پیچیده استفاده شوند، گسترش می یابد. یک دیدگاه مدرن از سرنوشت آینده فاژ درمانی باید هم بر اساس ویژگی بالای عمل آنها و هم بر نیاز به رعایت دقیق تمام قوانین فاژ درمانی باشد. تضاد باکتریوفاژها با هر وسیله ای از درمان اتیوتروپیک اشتباه است.

کاربرد عملی فاژها باکتریوفاژها در تشخیص آزمایشگاهی عفونت ها در طی شناسایی درون گونه ای باکتری ها، به عنوان مثال، تعیین فاگوار (نوع فاژ) استفاده می شوند. برای انجام این کار، از روش تایپ فاژ استفاده می شود، بر اساس ویژگی دقیق عمل فاژها: قطره های مختلف فاژهای تشخیصی نوع خاص روی فنجانی با یک محیط مغذی متراکم با یک "چمن" از یک کشت خالص بذر می شود. از عامل بیماری زا فاگوار فاژ یک باکتری بر اساس نوع فاژی که باعث لیز آن شده است (تشکیل یک لکه استریل، "پلاک" یا "کلنی منفی" فاژ) تعیین می شود. از تکنیک تایپ فاژ برای شناسایی منبع و راه های انتشار عفونت (علامت گذاری اپیدمیولوژیک) استفاده می شود. جداسازی باکتری های یک فاگوار از بیماران مختلف نشان دهنده منبع مشترک عفونت آنهاست.

فاژها همچنین برای درمان و پیشگیری از تعدادی از عفونت های باکتریایی استفاده می شوند. آنها تیفوئید، سالمونلا، اسهال خونی، سودوموناس، استافیلوکوک، فاژهای استرپتوکوک و آماده سازی ترکیبی(کلیپروتئیک، پیوباکتریوفاژها و غیره). باکتریوفاژها بر اساس موارد مصرف خوراکی، تزریقی یا موضعی به شکل مایع، قرص، شیاف یا آئروسل تجویز می شوند.

باکتریوفاژها به طور گسترده در مهندسی ژنتیک و بیوتکنولوژی به عنوان ناقل برای به دست آوردن DNA نوترکیب استفاده می شوند.

آماده سازی باکتریوفاژ که در عمل استفاده می شود، یک فیلتر از یک فرهنگ براث از میکروب های مربوطه لیز شده توسط فاژ است که حاوی ذرات فاژ زنده و همچنین آنتی ژن های باکتری محلول آزاد شده از سلول های باکتری در طول لیز آنها است. آماده سازی حاصل - یک باکتریوفاژ مایع باید کاملاً شبیه به یک باکتریوفاژ باشد مایع شفاف رنگ زردشدت بیشتر یا کمتر

برای اهداف درمانی و پیشگیری، فاژها را می توان به شکل قرص با پوشش مقاوم در برابر اسید تولید کرد. فاژ خشک قرص در طول ذخیره سازی پایدارتر است و استفاده از آن راحت است. یک قرص باکتریوفاژ خشک مربوط به 20-25 میلی لیتر آماده سازی مایع است. ماندگاری آماده سازی خشک و مایع 1 سال است. باکتریوفاژ مایعباید در دمای + 2 + 10 درجه سانتیگراد، خشک - نه بالاتر از +1 درجه سانتیگراد نگهداری شود، اما می توان آن را در یخچال و در دمای منفی نگهداری کرد.

باکتریوفاژی که به صورت خوراکی مصرف می شود به مدت 5-7 روز در بدن باقی می ماند. به عنوان یک قاعده، مصرف باکتریوفاژ با هیچ واکنش یا عارضه ای همراه نیست. هیچ گونه منع مصرفی برای پذیرش وجود ندارد. آنها به صورت آبیاری، شستشو، لوسیون، تامپون، تزریق و همچنین تزریق در حفره ها - شکمی، جنب، مفصلی و مثانهبسته به محل پاتوژن.

فاژهای تشخیصی به دو صورت مایع و خشک در آمپول تولید می شوند.قبل از شروع کار، باکتریوفاژ خشک رقیق می شود. اگر تیتر، tr، DRT (دوز تیتر کاری) روی آمپول ها نشان داده شده باشد، در آزمایش لیزپذیری فاژ (روش اتو) برای شناسایی باکتری ها استفاده می شود، اگر نوع فاژ مشخص شده باشد، سپس برای تایپ فاژ - برای تعیین منبع استفاده می شود. از عفونت

اثر یک باکتریوفاژ بر روی یک کشت میکروبی در یک محیط مایع و یک محیط متراکم

روش اتو (افتادن قطره)

یک چمن کاشت متراکم از محصول مورد مطالعه ایجاد کنید. 10-5 دقیقه پس از کاشت، یک فاژ تشخیصی مایع روی سطح خشک شده محیط غذایی اعمال می شود. ظرف کمی کج می شود تا قطره فاژ روی سطح آگار پخش شود. فنجان به مدت 18-24 ساعت در ترموستات قرار می گیرد. نتیجه به حساب می آید غیبت کاملرشد کشت در محل استفاده از قطرات فاژ.

روی یک محیط غذایی مایع آزمایش کنید

کاشت کشت مورد مطالعه را در دو لوله آزمایش با محیط مایع انجام دهید. یک باکتریوفاژ تشخیصی در یک حلقه به یک لوله آزمایش ("O") اضافه می شود. پس از 18-20 ساعت در یک لوله آزمایش که در آن باکتریوفاژ اضافه نشده است ("K")، کدر شدن شدید آبگوشت مشاهده می شود - کشت بذر رشد کرده است. آبگوشت در لوله آزمایش، جایی که باکتریوفاژ اضافه شد، به دلیل لیز کشت تحت تأثیر آن شفاف باقی ماند.

نوع فاژی باکتری ها

با توجه به طیف عمل، باکتریوفاژهای زیر متمایز می شوند: انواع باکتری های مرتبط چند ظرفیتی. باکتری تک ظرفیتی و لیز کننده یک نوع خاص; انواع معمولی، لیز کننده انواع (انواع) باکتری ها.

به عنوان مثال، یک سویه استافیلوکوک بیماری زا می تواند توسط چندین نوع فاژ لیز شود، بنابراین همه فاژها (24) و سویه های معمولی استافیلوکوک های بیماری زابه 4 گروه گروه بندی شده است.

روش تایپ فاژی دارد پراهمیتبرای تحقیقات اپیدمیولوژیک، زیرا امکان شناسایی منبع و راه های انتشار پاتوژن ها را فراهم می کند. برای این منظور، فاگووار جدا شده از مواد پاتولوژیک تعیین می شود. فرهنگ ناببر روی محیط های غذایی متراکم با استفاده از فاژهای تشخیصی استاندارد.

فاگوار کشت میکروارگانیسم بر اساس نوع فاژی که باعث لیز آن شده است تعیین می شود جداسازی باکتری همان فاگوار از افراد مختلف نشان دهنده منبع عفونت است.