Újszülöttek enteropathiája, tünetei, kezelése. Csökkent sejtes immunitás által okozott immunhiányok
Absztrakt
Ezt a betegséget az elsődleges immunhiány kialakulása jellemzi, amely autoimmun multiszisztémás kudarcként fejeződik ki, és klinikailag gyakran az első életévben nyilvánul meg; mára csak mintegy 150 esetet írnak le a világon. Az IPEX-szindrómát a FOXP3 génhiba okozza, amely egy transzkripciós faktor, amely befolyásolja a felelős szabályozó T-sejtek aktivitását. a a tolerancia fenntartása. Ebben a génben eddig mintegy 70 patogén mutációt írtak le. A legtöbb IPEX-szindrómás betegnél a betegség klinikai megnyilvánulása a korai újszülöttkori időszakban vagy élete első 3-4 hónapjában jelentkezik. Erre a betegségre a következő klinikai megnyilvánulási triád jellemző: Autoimmun enteropátia (100%), diabetes mellitus (70%), bőrelváltozások (65%), mivel a szindróma szerkezetében súlyos fejlődési késés (50%), pajzsmirigybetegség ( 30%), visszatérő fertőzések (20%), ritkább autoimmun cytopenia (Coombs-pozitív hemolitikus anémia), tüdőgyulladás, nephritis, hepatitis, ízületi gyulladás, myositis, alopecia. Leírtak azonban néhány későbbi megnyilvánulást (1 évesnél idősebb betegeknél), amikor a betegek nem mutatták a betegség súlyos formáira jellemző összes klinikai és laboratóriumi tünetet. A betegség súlyossága és e betegcsoport magas mortalitása miatt nagyon fontos a korai diagnózis és a kezelés időben történő megkezdése. A cikk leírja a tartós újszülöttkori diabetes mellitus klinikai esetét az IPEX szindróma szerkezetében.
IPEX szindróma (immunhiány, poliendokrinopátia, enteropátia, X-hez kötött szindróma). Szinonimák: XLAAD (X-hez kapcsolódó autoimmunitás-allergiás diszregulációs szindróma) - ritka betegség; körülbelül 150 esetet írtak le világszerte. Egyes külföldi források szerint az IPEX-szindróma prevalenciája a tartós újszülöttkori diabetes mellitusban szenvedő betegek körében körülbelül 4%. Ezt a szindrómát az elsődleges immunhiány kialakulása jellemzi, amely autoimmun többszörös szervi károsodásban nyilvánul meg, és klinikailag leggyakrabban az első életévben nyilvánul meg. 1982-ben Powel et al. először írt le egy családot, amelyben 19 férfi X-hez kötött betegségben szenvedett, amely hasmenéssel és poliendokrinopátiával nyilvánult meg, beleértve az inzulinfüggő diabetes mellitus-t. Később, 2000-ben Catila et al. mutációt azonosított a C-terminális DNS-kötő domént (FKN) kódoló génben kettőben különféle betegek hasonlóval rendelkező férfi klinikai kép. 2000-2001-ben Bennet et al. és Wildin et al. egymástól függetlenül megerősítette, hogy az IPEX-szindróma a FOXP3 gén mutációin alapul. Jelenleg ennek a génnek körülbelül 70 patogén mutációját írták le. A FOXP3 gén egy transzkripciós faktor, amely befolyásolja az autotolerancia fenntartásáért felelős szabályozó T-sejtek aktivitását. Barzaghi et al. által közzétett adatok szerint. 2012-ben az IPEX szindróma autoimmun szervkárosodásának fő mechanizmusa éppen a szabályozó T-sejtek működési zavarát jelenti. Így az IPEX-szindrómát súlyos immunhiány kialakulása jellemzi, amely szeptikus szövődményekhez és gyakran halálhoz vezethet. Jelenleg körülbelül 300 olyan gén ismeretes, amelyek a fejlődéshez vezetnek elsődleges immunhiányok(PID). Korábban azt hitték, hogy ezek a betegségek nagyon ritkák, de az elmúlt évek tanulmányai jelentős elterjedtségüket mutatják. Rendkívül fontos a gyermekorvosok figyelmébe ajánlani a PID lehetséges jelenlétét, különösen a gyermekek autoimmun betegségeivel kombinált súlyos fertőzések esetén. A legtöbb IPEX-szindrómás betegnél a betegség klinikai megnyilvánulásai a korai újszülöttkori időszakban vagy az élet első 3-4 hónapjában kezdődnek. Erre a patológiára a klinikai megnyilvánulási hármas jellemző: autoimmun enteropathia (100%), diabetes mellitus (70%), bőrelváltozások (65%), emellett a szindróma szerkezetében súlyos fejlődési késés (50%), pajzsmirigy. károsodás (30%), visszatérő fertőzések (20%), ritkábban előforduló autoimmun cytopenia (Coombs-pozitív hemolitikus anémia), tüdőgyulladás, nephritis, hepatitis, ízületi gyulladás, myositis, alopecia. Leírják azonban az egy évnél idősebb megnyilvánulási eseteket, amikor a betegek nem rendelkeznek a betegség súlyos formáira jellemző klinikai és laboratóriumi megnyilvánulásokkal. Az IPEX-szindróma egyik fő összetevője a poliendokrinopátia, amely az autoimmun diabetes mellitus kialakulásában nyilvánul meg, autoimmun pajzsmirigygyulladás. Az endokrinopátiák immunológiai markerei közé tartoznak az inzulin elleni antitestek (IAA), a hasnyálmirigy-szigetsejtek (ICA), a glutamát-dehidrogenáz (GAD), a tirozin-foszfatáz (IA-2), a cink transzporter elleni antitestek (ZNT8), a tiroperoxidáz és a tiroglobulin elleni antitestek. Más autoantitestek is kimutathatók - neutrofilek, eritrociták és vérlemezkék, antinukleáris, antimitokondriális, keratin, kollagén stb. elleni antitestek. Ezen kívül azért ezt a betegséget jellemző az autoimmun enteropathia kialakulása, mely klinikailag bőséges vizes hasmenéssel nyilvánul meg felszívódási zavar szindróma kialakulásával, melynek immunológiai markerei az enterociták (villin VAA és harmin HAA) elleni antitestek. Az IgE-szint emelkedése és az eozinofilek számának növekedése a betegség klasszikus súlyos formájában szenvedő betegekre jellemző. A betegség súlyossága és a betegcsoport magas mortalitása miatt rendkívül fontos korai diagnózisés a terápia időben történő megkezdése. A mai napig a leghatékonyabb kezelési módszer a transzplantáció. csontvelő vagy allogén hematopoietikus őssejt-transzplantáció. Az immunhiány korrekciója érdekében immunszuppresszív monoterápia (ciklosporin A, takrolimusz) vagy kombinált - immunszuppresszív gyógyszerek és szteroidok kombinációja alkalmazható. A szirolimusz (rapamycin) hatásosnak bizonyult, számos betegnél a betegség tartós remissziója tapasztalható. Az immunszuppresszív szerek mellett, helyettesítő terápia endokrin rendellenességek, megfelelő táplálkozási támogatás, tüneti terápia. Klinikai eset 2016. április 19-én született, 2840 g testtömegű, 51 cm testhosszúságú, 2016. április 19-én született K. beteg A szülés sürgősségi császármetszéssel történt, fokozódó méhen belüli magzati hipoxia miatt. Apgar 7/7 pont. Az anamnézisből ismert, hogy ez a negyedik terhesség egy krónikus genitális fertőzés, placenta elégtelenség hátterében zajlott, krónikus gyomorhurut, kis súlygyarapodás, isthmic-cervicalis elégtelenség, megszakítás veszélye a 30. héten. A korábbi terhességek spontán vetéléssel végződtek korai időpontok. A vetélés okai ismeretlenek, a nőt nem vizsgálták meg. A gyermek állapota születésétől fogva súlyos volt a légzési rendellenességek és a központi idegrendszer (CNS) depressziójának tünetei miatt. IVL-t végeztek; a spontán légzés helyreállítása után extubálják. Az élet első napjától kezdve a vércukorszint 10,4 mmol/l-ig emelkedett, a dinamika 29,0 mmol/l-ig emelkedett, a CBS szerint metabolikus acidózis jeleit észlelték. A glikémiás szint emelkedését glucosuria (vizeletcukor 2000 mg/dl-ig) és ketonuria kísérte. A biokémiai vérvizsgálatban hiperenzimémia jelei mutatkoznak (ALT 87,8 U/l, AST 150 U/l). A 2. életnapon a perzisztáló hiperglikémia (maximum 33,6 mmol/l vércukorszint) miatt az egyszerű inzulin intravénás adagolását 0,03-0,1 E/kg/h sebességgel kezdtük, a vércukor értékektől függően. Az adaptált keverékekkel ellátott enterális táplálást részlegesen kaptuk egy szondán keresztül. A vércukorszint napi monitorozása során az inzulinterápia hátterében a glikémia napközbeni szignifikáns változékonyságát 1,7 és 22,0 mmol/l között rögzítették. Az élet 8. napján állapotromlást észleltek (a központi idegrendszeri depresszió jelei, a légzési elégtelenség fokozódása, a szénhidrát-anyagcsere dekompenzációjával járó anyagcserezavarok, tartós subfebrilis láz 37,9 ° C-ig, puffadás, ismételt hányás, hasmenés, trofikus rendellenességek a bőr kiszáradása és nagylemezes hámlás formájában). Ezeket a tüneteket a necrotizáló enterocolitis (NEC 2a) megnyilvánulásaként tekintették. További vizsgálat és kezelés céljából a beteget átszállították a petrozsényi RRC GBUZ DRB-be. Az RRC GBUZ DRB-ben végzett vizsgálat során a klinikai vérvizsgálatok sorozata a hemoglobinszint 150-ről 110 g/l-re csökkenését, a leukocitózist 8,9-ről 22,4 ezerre, a leukocitaképlet változását az eozinofilek számának növekedése miatt. 5-31%, monociták és vérlemezkék. A biokémiai vérvizsgálat eredményei szerint a hypoproteinémiát 36,4 g/l-ig (N 49-69), a hyponatraemiára való hajlamot 135 mmol/l-ig (N 135-155) regisztrálták. Normál kálium 4,7 mmol / l (N 4,5-6,5), hiperfermentémia AlAT-87 U / l (N0-40) és AST 150 U / l (N0-40), a CRP titer 24,7 mg / m-re emelkedett. A vértenyészetben nincs mikroflóra növekedés, a vizelettenyészetben enterococcust találtak. A perzisztáló hiperglikémia kapcsán meghatároztuk a C-peptid szintjét, amelyről kiderült, hogy csökkent (0,1 nmol/l; N0,1-1,22 nmol/l). Nál nél ultrahang vizsgálat feltárta a bélfalak pneumatosisát és a hasnyálmirigy méretének növekedését (fej - 9,0 mm, test - 9,0 mm, farok - 10,0 mm), a dinamikában a méret növekedése volt megfigyelhető. Parenterális táplálást, elektrolitzavarok megszüntetését célzó infúziós terápiát, antibiotikum-terápiát kapott, inzulint intravénásan adták be. A kezelés során az elektrolit zavarok megszűntek, azonban a glükóz indikátorok stabilizálását nem sikerült elérni, és a kifejezett dyspeptikus zavarok is fennmaradtak. Amikor megpróbálták helyreállítani az enterális táplálkozást, puffadást észleltek, hányás és hasmenés jelent meg. A 19. életnapon a fiút kritikus állapotban szállították az intenzív osztályra. perinatális központ A Szentpétervári Állami Orvostudományi Egyetem klinikái. Felvételkor a gyermeknek lomha, érzelemmentes, spontán sírása van a fizikai aktivitásés az izomtónus csökkent, az újszülöttkori reflexek gyengék. Láz (testhőmérséklet 38,1 °C). Nagy, 1,0 × 1,0 cm-es, süllyedő szökőkút. A bőr sápadt, száraz, a turgor csökkent, nagy-lamelláris hámlás. Az auskultáció során a légzés nehéz volt, egyenletesen zajlott a tüdő minden részében; légzésszám 46 percenként. A szívhangok ritmikusak, enyhén tompítottak; pulzusszám - 156 percenként. Kifejezett puffadás, a máj mérsékelt megnagyobbodása volt. A diurézis sebessége - 7-8 ml / kg / h (a folyamatban lévő infúziós terápia ellen). Napi 7-9 alkalommal vizes széklet. A súlygyarapodás dinamikája negatív volt (születési súly - 2840 g, a Szentpétervári Állami Gyermekorvosi Egyetem klinikájára való felvételkor - 2668 g). Az intenzív osztályon az elektrolitzavarok megszüntetését célzó infúziós kezelés folytatódott. A hyponatraemia nehezen korrigálható, mivel kompenzációs mechanizmus a vér ozmolaritásának egyensúlya hiperglikémiára adott válaszként, amelyet 7-8 ml / kg / h-ig terjedő polyuria és nátriumveszteség kísér a vizeletben, valamint súlyos enteropathia (széklet naponta 6-10 alkalommal, bőséges, folyékony 350 ml-ig) / nap). Intravénás inzulin 0,01-0,04 U/kg/h, a vércukorszinttől függően. A részleges enterális táplálás pasztőrözött keverék-hidrolizátummal történt, fokozatos átállással a szondás táplálásról a független frakcionált táplálásra, az állapotstabilizáció hátterében. Életének 28. napján átkerült az újszülöttek és csecsemők patológiai osztályára, ahol folytatták a kivizsgálást és a kezelést. A vizsgálat során vérszegénységet észleltek a hemogramon (hemoglobin - 93 g/l, eritrociták - 2,91 ∙ 1012/l); leukocytosis (28,7 ∙ 109/l-ig), súlyos eosinophilia (legfeljebb 61%); biokémiai vérvizsgálatban hipoproteinémia (összfehérje - 38,4 g/l). A vér hormonszintjének vizsgálatakor újra kimutatták alacsony szint C-peptid - 0,5 ng/ml (N 0,1-1,22 nmol/l); a pajzsmirigyhormonok normálisak voltak (T 4 szabad - 14,8 pmol / l (N 10,0-23,2); TSH - 6,28 μU / ml (N 0,23-10,0). Újszülöttkori cukorbetegség, enteropátia, specifikus kombináció bőr megnyilvánulásaiés krónikus visszatérő fertőzés jelei (lázas láz, a leukocitózis növekedése a kezelés abbahagyása után antibiotikum terápia) lehetővé tette a páciens IPEX-szindróma gyanúját, amelynek szerkezete immunhiányos. A poliendokrinopátia természetének tisztázása érdekében egy vizsgálatot végeztek immunológiai markerek felkutatására. Ennek eredményeként a tiroperoxidáz elleni antitestek magas titere (243,9 Med/ml; N 0-30) és a Langerhans-szigetek elleni antitestek pozitív titerében (GAD elleni antitestek 1,29 U/ml; N 0-1,0), a az inzulin elleni antitestek titere 5,5 U/ml volt (N 0,0-10,0). A mellékvesék szteroidtermelő sejtjei elleni antitesteket nem észleltek. Ezzel bizonyítást nyert a diabetes mellitus autoimmun jellege, és autoimmun pajzsmirigygyulladást diagnosztizáltak. Az immunhiány klinikai és laboratóriumi jeleinek meglétét figyelembe véve mélyreható immunológiai vizsgálatot végeztünk, magas IgE szintet mutattunk ki (573,6 IU/ml 0-15 arányban). Molekuláris genetikai vizsgálatot (multigén célzott szekvenálást) végeztek, melynek eredményeként a FOXP3 gén mutációját mutatták ki, amely megerősítette az IPEX szindróma jelenlétét a gyermekben. Két hónapos korban négy napos a szepszis magas kockázata és a veszélye miatt halálos kimenetelű a fiút áthelyezték a Szövetségi Állami Költségvetési Intézményhez „FNKTs DGOI őket. Dmitrij Rogacsov" az Oroszországi Egészségügyi Minisztérium munkatársa az immunszuppresszív terápia és a csontvelő-transzplantáció miatt. A bemutatott klinikai esetben a FOXP3 c.1190G > T (p.Arg397Leu) gén korábban nem leírt mutációját mutatták ki egy újszülöttkori diabetes mellitusban, primer immunhiányban szenvedő és súlyos enteropathiában szenvedő gyermekben. A páciens anyjának DNS-elemzése ugyanezt a léziót mutatta ki heterozigóta állapotban is. A detektált változat a DNS-kötő C-terminális forkhead doménben lokalizálódik, és a fő prediktív programok (Polyphen2, SIFT, Mutation Taster) patogénnek tekintik. Súlyos közvetett érv az azonosított variáns patogenitása mellett, hogy a mutációk c. 1189 C > T és s. Az 1190G>A-t, amely ugyanazt a 397-es kodont érinti, korábban IPEX-szindrómás betegeknél találták meg. Ismeretes, hogy az IPEX-szindrómás betegek anyjait a spontán vetélés többszörös epizódja jellemzi, amikor férfi magzatokat hordoznak. A leírt esetben a beteg anyjának (a mutáció hordozójának) anamnézisét is súlyosbította a korai stádiumú vetélés. Ez ismét megerősíti, hogy az általunk felfedezett új mutáció komoly hatással van a FOXP3 működésére, megnövekedett embrionális letalitást okozva. Az újszülöttkori diabetes mellitus genetikai verifikációja rendkívül hasznos, mivel lehetővé teszi a betegség természetének tisztázását és az optimális kezelési stratégia kiválasztását. Ez különösen igaz a szindrómás formákban szenvedő betegekre, amelyek általában rendelkeznek súlyos lefolyású. A beteg gyermeknél a mutáció kimutatása nagyon fontos a család orvosi genetikai tanácsadása szempontjából, mivel lehetővé teszi a prenatális DNS diagnosztikát a későbbi terhességek esetén. Az klinikai eset azt jelzi, hogy a különböző szakterületű orvosok (neonatológusok, endokrinológusok, gasztroenterológusok, immunológusok, genetikusok) együttműködése hozzájárul a ritka betegségekben szenvedő betegek helyes diagnózisának hatékonyabb felállításához.
Maria E Turkunova
Szentpétervári Állami Gyermekgyógyászati Egyetem, az Orosz Föderáció Egészségügyi MinisztériumaA Harmonin és Villin elleni autoantitestek diagnosztikai markerek az IPEX-szindrómás gyermekeknél
Forrás: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3826762/
Kigondolt és kidolgozott kísérletek: V.L. Bozi R.B. Végzett kísérletek: CL E. Bazzigaluppi CB. Az elemzett adatok: VL LP FB RB E. Bosi. Felhasznált reagensek / anyagok / elemző eszközök: LP FB. A cikket írta: E. Bozi. A kézirat megírásában/szerkesztésében közreműködött: VL LP FB RB.
Az enterocita antigének (75 kDa USH1C fehérje) és a bolyhok (95 kDa aktinkötő fehérje) kötőhártya autoantitestjei immunrendszeri diszregulációval, poliendokrinopátiával, enteropathiával, X-kapcsolt (IPEX) szindrómával járnak. Ebben a vizsgálatban felmértük a harmonikus és a villus autoantitestek diagnosztikus értékét IPEX és IPEX-szerű szindrómák esetén. A harmonin és villin autoantitesteket a lumineszcens immunprecipitáló rendszer (LIPS) új mennyiségi meghatározásával mérték IPEX-ben, IPEX-szerű szindrómában, primer immunhiányban (PID) szenvedő enteropátiás betegekben, amelyeket FOXP3 génszekvenálással diagnosztizáltak, valamint 1-es típusú cukorbetegségben. (T1D), cöliákia és egészséges véradók kontrollként. Harmonin és villin autoantitesteket 13 IPEX-es beteg közül 12-ben (92%) és 6-ban (46%) mutattak ki, míg az IPEX-es, PID-s, T1D-s, cöliákiás betegek egyikében sem. Minden IPEX-beteg, köztük egy késői és atipikus klinikai megjelenésű eset, vagy harmonika és/vagy bolyhok autoantitestjei voltak, vagy indirekt immunfluoreszcenciával pozitívnak bizonyult enterocita antitestekre. Immunszuppresszív kezelés vagy hematopoetikus őssejt-transzplantáció után remisszióban lévő IPEX-ben szenvedő betegeknél a harmonikus és bolyhos autoantitestek minden esetben kimutathatatlanokká váltak, vagy alacsony titeren maradtak, de abban az esetben, ahol a harmonikus autoantitestek folyamatosan magasak maradtak. Egy betegben a harmonikus antitestek csúcsa párhuzamos a visszatérő enteropathia fázisával. Vizsgálatunk bizonyítja, hogy a LIPS-szel mért harmonikus és villus autoantitestek érzékeny és specifikus markerei az IPEX-nek, megkülönböztetik az IPEX-et, beleértve az atipikus eseteket is, más enteropátiával összefüggő koragyermekkori rendellenességektől, és hasznosak az érintett gyermekek szűrésében és klinikai monitorozásában.
Immunszabályozási zavar, poliendokrinopátia, enteropathia, X-kapcsolt szindróma (IPEX) egy monogén eredetű autoimmun betegség, amelyet súlyos enteropathia, 1-es típusú cukorbetegség (T1D) és ekcéma jellemez. A szindrómát a felelős FOXP3 gén mutációi okozzák súlyos jogsértés szabályozó T (Treg) sejtek. Míg a genetikai elemzés a választott módszer a végleges diagnózishoz, nincs egyértelmű összefüggés a genotípus és a fenotípus között, és a betegség lefolyása betegenként változik. Ezen túlmenően, annak ellenére, hogy az IPEX-et immunhiányosnak minősítették, nincsenek egyértelmű immunológiai paraméterek, amelyek előre jeleznék a betegség súlyosságát vagy a terápiára adott választ -. Ezenkívül hasonló klinikai fenotípusú rendellenességek, az úgynevezett IPEX-szerű szindrómák előfordulhatnak FOXP3 mutációk hiányában, ami megnehezíti a klinikai kezelésés a terápiás szerek kiválasztása. Ezért az IPEX immundiszfunkcióhoz specifikusan kapcsolódó markerek azonosítása rendkívül hasznos lenne diagnosztikai célokra. Az indirekt immunfluoreszcenciával kimutatott keringő enterocita autoantitesteket a múltban különböző enteropathiákkal összefüggésben írtak le, beleértve azokat is, amelyeket végül IFEX-szindrómaként azonosítottak, de molekuláris célpontok ezek a szerológiai markerek régóta ismeretlenek. Az IPEX-betegek széruma által felismert másik enterocita autoantigént ezután a 75 kDa-os AIE-75 fehérjeként azonosították, majd Usher Syncrome Syndrome (USH1C) fehérjeként, más néven harmonikaként jellemezték, amely fehérje a szupramolekuláris fehérje része. hálózatok, amelyek transzmembrán fehérjéket kötnek a citoszkeletonhoz fotoreceptor sejtekben és szőrsejtekben belső fül. Immunblottal és radioligandummal kimutatott Harmonin autoantitesteket (HAA) jelentettek IPEX-betegeknél és a vastagbélrákos betegek kis hányadában. A közelmúltban egy aktinkötő fehérjét, amelyet 95 kDa-os aktinnak neveznek, és amely részt vesz az aktin citoszkeleton megszervezésében az epiteliális kefe határán, az autoantitestek további célpontjaként írtak le IPEX-betegek egy részében. Ezzel szemben tudomásunk szerint sem a HAA-ról, sem a villus autoantitestekről (VAA) nem számoltak be IPEX-szerű szindrómákban, enteropátiával járó primer immunhiányos állapotokban (PID), vagy az IPEX-hez gyakran társuló rendellenességekben, mint például a T1D és különböző autoimmun enteropathiákban. eredet.
A tanulmány célja kvantitatív vizsgálatok kidolgozása volt a HAA és VAA mérésére az újonnan kifejlesztett Luminescent Immuno Precipitation System (LIPS) alapján, diagnosztikai pontosságuk meghatározása IPEX, IPEX-szerű és PID szindrómák esetén, valamint ezek értékelése enterocita antitestek alapján. immunfluoreszcenciával tesztelték, és értékelik azok értékét az IPEX-betegek klinikai követésében.
Tizenhárom IPEX-ben szenvedő és 14 IPEX-szerű szindrómában szenvedő beteget teszteltek LIPS-ben HAA és VAA jelenlétére. Kontrollként 5 különböző eredetű PID-ben szenvedő (kettő CD25-hiányos, kettő Wiskott Aldrich-szindrómás (WAS)) és egy adenozin-deamináz-hiányban szenvedő beteget vizsgáltunk meg súlyos kombinált immunhiányban (ADA-SCID), minden állapotot korai enteropathia jellemez. ] , 123 T1D, 70 cöliákia és 123 egészséges véradó. Az IPEX diagnózisa klinikai és molekuláris leleteken alapult az Olasz Gyermekhematológiai és Onkológiai Szövetség (AIEOP, www.AIEOP.org) kritériumai szerint. Az IPEX-ben és IPEX-ben szenvedő betegek mutációit és klinikai adatait az S1 és S2 táblázat tartalmazza. A Pt19, Pt21, Pt22 és Pt24 kivételével minden IPEX-ben szenvedő beteget leírtak korábbi publikációkban , - . A PT24 a betegség atipikus formája, amelyet késői kezdés jellemez, enteropathia jelei nélkül, de súlyos gyomorhurut gyulladásos nyálkahártya-infiltrátumok jelenlétében, amelyek boholyatrophiával társulnak. Általános szint A vizsgált 13 IPEX-beteg közül 10-ben volt elérhető az IgG: közülük 8 volt normál tartományéletkor szerint (csak egy beteg intravénás (IV) Ig terápiában részesült), míg két esetben kismértékben emelkedtek. Az IPEX-szerű szindrómával diagnosztizált betegeknél az IPEX klinikai megnyilvánulásai voltak, de a FOXP3 gén mutációira negatív a teszt. Az olyan betegek, mint az IPEX, legalább egyet mutattak be klinikai szolgáltatások IPEX (autoimmun enteropathia és/vagy T1D), amely az alábbi autoimmun vagy immunmediált betegségek közül egy vagy többhez kapcsolódik: dermatitis, thyreoiditis, hemolitikus anémia, thrombocytopenia, nephropathia, hepatitis, alopecia, hyper IgE eozinofíliával vagy anélkül. A klinikai és laboratóriumi paraméterek kizártak más monogén betegségeket, mint például a WAS, Omenn-szindróma, hyper IgE szindróma és autoimmun limfoproliferatív szindróma. A diagnózis idején legalább egy IPEX- és IPEX-szerű szindrómában szenvedő betegek szérummintája állt rendelkezésre autoantitest-analízishez. Hat IPEX-es betegnél több szérummintát is vettek a klinikai követés során, és az autoantitestek további mérésére használták fel, hogy megvizsgálják a korrelációt a klinikai eredménnyel (Pt12:8 minták születéstől 8 éves korig, Pt14:7 minták 6 hónaptól 13 évig , Pt17-3 minták, 4 hónaptól 3,5 évig; Pt19:44 minták, 4 hónaptól 2 évig; Pt22:3 minták, 0-5 hónapig; Pt 23:44, 4-10 évig). Minden PID-ben szenvedő beteget molekuláris tesztek alapján diagnosztizáltak. A T1D-ben szenvedő betegek mindegyike friss eset volt, a diagnózis az American Diabetes Association kritériumai alapján történt; cöliákiás betegeket vizsgáltak a diagnózis idején a jejunális biokémia alapján.
A helsinki nyilatkozat szerint a tanulmányban részt vevő kiskorúak/gyermekek nevében írásos beleegyezést adtak. A tanulmányt a San Raffaele-i helyi kutatásetikai bizottság hagyta jóvá.
Az összes IPEX- vagy IPEX-szerű szindrómában szenvedő beteget bevitték FOXP3 mutációra. A genomiális DNS-t perifériás vérből izoláltuk fenol-kloroform módszerrel vagy a QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen) segítségével a gyártó utasításait követve. Tizenegy exont, beleértve az összes intron-exon határt, amplifikáltuk a genomiális DNS-ből PCR-rel specifikus intron primer szegélyező párokkal. Az amplifikált génfragmenseket BigDye Terminator cycling kit (Applied Biosystems) segítségével szekvenáltuk egy ABI PRISM 3130xl automata genetikai analizátoron és egy ABIPRISM 3730 genetikai analizátoron (Applied Biosystems).
A Renilla luciferázt kódoló szekvenciát a pTnT plazmidba klónoztuk (Promega, Milánó, Olaszország), hogy létrehozzuk a pTnT-Rluc vektort. A teljes hosszúságú harmonikus és bolyhos DNS-t kódoló szekvenciákat ezután RT-PCR-rel amplifikáltuk, és külön klónoztuk a pTnT-Rluc-ba a Renilla lumiferázzal downstream és keretben. A rekombináns kiméra Rluc-Harmonint és Rluc-Villint a pTnT-quick SPM nyúl retikulocita lizátummentes sejtrendszer (Promega) segítségével in vitro kapcsolt transzkripcióval és transzlációval fejeztük ki. A HAA vagy VAA jelenlétének tesztelésére az Rluc-Harmonint és az Rluc-Villint használtuk antigénként LIPS-ben (17) úgy, hogy 4 × 106 fényegységet 1 µl PBS ph 7,4-Tween 0,1% (PBST) szérummal inkubáltak. ) 2 órán át szobahőmérsékleten IgG-immunkomplexeket izoláltunk Protein-A-Sepharose (GE Healthcare, Milánó, Olaszország) hozzáadásával, majd 1 órás inkubációval 4 °C-on, és a nem kötött Ag PBST-vel történő mosásával 96-os szűréssel. -well Costar szűrőlemezek 3504 (Corning Life Sciences, Tewkesbury, USA). Az immunprecipitált antigének mennyiségi meghatározását a Renilla lumiferáz szubsztrát (Promega) hozzáadása után visszanyert luciferáz aktivitással határoztuk meg, és Centro XS3 luminométerben (Berthold Technologies GmbH & Co. KG, Bad Wildbad, Németország) 2 másodpercig mértük a fényemissziót. Az eredményeket tetszőleges egységekben fejeztük ki, amelyeket vagy az antitest indexből (BAA) származtattunk pozitív és negatív szérum felhasználásával a következő képlet szerint (kontroll szérum cps-cps-negatív szérum) / (cps-pozitív szérum-cp-negatív szérum) x100, vagy egy standard görbe (HAA), amely a pozitív törzsszérum sorozathígításaiból áll. A pozitivitás határértékét az egészséges véradóknál megfigyelt értékek 99. percentilisére állítottuk be, ahogy az az érzékenységet és specificitást elemző T1D szenzitív autoantitest műhelyekben megszokott.
Az enterocita autoantitesteket IPEX és IPEX-szerű betegpopulációkban határoztuk meg indirekt immunfluoreszcenciával normál humán vagy majom jejunum kriosztát helyein, a korábban leírtak szerint.
A T1D és a cöliákia autoantitest markereit, beleértve a glutaminsav-dekarboxiláz (GADA), az inzulinóma-asszociált protein 2, az inzulin, a cink transzporter 8 és a transzglutamináz-C elleni antitesteket, minden IPEX-ben, IPEX-szerű, PID-ben, T1D-ben, cöliákiában mértük. A donor kontroll csoportok immunprecipitációval, LIPS-sel vagy rádióobjektívvel a korábban leírtak szerint. Minden eredményt a pozitív kezdeti szérumok sorozathígításával kapott standard görbékből származó tetszőleges egységekben fejeztünk ki.
Ez a tanulmány csak leíró statisztikákat használt. A véradók tetszőleges mértékegységeinek 99. percentilisének kiszámítását a küszöb kiválasztásához a Stata (StataCorp LP, USA) segítségével végeztük. A pozitív (érzékenység) vagy negatív (specifitás) HAA-ra vagy VAA-ra vonatkozó teszt feltételes valószínűsége az IPEX-betegség meglététől vagy hiányától és a megfelelő konfidencia intervallumok A 95%-ot a Vassar Stats statisztikai számításokhoz használt weboldalán számították ki (http://vassarstats.net/clin1.html). A HAA és VAA titerek közötti korreláció Spearman rangkorrelációs kritériumokon alapult, és Graphpad Prism 5 szoftverrel számítottuk ki.
A 13 IPEX-ben szenvedő beteg közül 12-ben (92%) találtak emelkedett keringő HAA-koncentrációt, míg IPEX-ben, PID-ben, T1D-ben és cöliákiában szenvedő betegeknél negatívak voltak (1A. ábra). Emelkedett keringő VAA-koncentrációt 6 (46%) IPEX-betegnél találtak (Pt19, Pt14, Pt12, Pt17, Pt3, Pt21, az utolsó négy titere 98 VAA AU vagy nagyobb volt), beleértve a HAA-val nem rendelkező beteget is (Pt17). ), akkor hogyan voltak negatívak a VAA-k az IPEX-szerű és más betegség-kontroll csoportokban (1B. ábra). Minden IPEX-beteg pozitív volt HAA-ra vagy VAA-ra, ami a HAA- és VAA-teszt kombinációjának 100%-os érzékenységét (95% CI: 71,6-100%) és 97,6%-os tesztspecifitást (95% CI: 92,5-99,4%) eredményezett. IPEX szindróma diagnosztizálására. Az IPEX-ben szenvedő betegekben egyetlen klinikai vagy fenotípusos jellemző sem korrelált az autoantitestek jelenlétével. Az AAA és VAA autoantitest titánok között nem volt szignifikáns korreláció az IPEX betegekben (Spearman r = -0,3 p = ns). A GADA, mint a leggyakoribb T1D autoantitest, IPEX-ben (13-ból 9, T1D-vel 5), IPEX típusú szindrómában (14-ből 4, 2 T1D-vel) és PID-ben (5-ből 3, 1 T1D-vel) szenvedő betegeknél találták. 1C. ábra). Más T1D autoantitesteket kisebb arányban találtak, köztük inzulin autoantitesteket 5 IPEX-ben, 4 IPEX-szerű és 2 PID-ben, valamint Zinc Transporter 8 autoantitestet egy IPEX betegben. A GADA és a HAA vagy VAA titerek között nem figyeltek meg korrelációt (Spearman r = -0,017 p = ns és r = 0,34 p = ns). Az IPEX-ben, IPEX-szerű szindrómában vagy PID-ben szenvedő betegek egyikében sem voltak cöliákiával összefüggő IgA vagy IgG szöveti transzglutamináz-C autoantitestek (az adatokat nem mutatjuk be).
HAA (A panel), VAA (B panel) és GADA (C panel) szérum IgG titerek tetszőleges egységekben kifejezve IPEX-ben (n=13), IPEX-szerű (n=14), PID-ben (n=5), T1D-ben (VAA és GADA n = 123, VAA n = 46), cöliákiás betegek (HAA n = 70, VAA n = 46, GADA n = 44) és kontrollok (HAA és VAA n = 123, GADA n = 67). A pontozott vonal jelzi a pozitivitás határát.
Az összes IPEX szérumot, kivéve egy (Pt 22), 10 IPEX-szerű és 3 PID szérumot, megvizsgáltunk enterocita antitestekre immunfluoreszcenciával bél kriosztát metszeteken. Minden vizsgált IPEX-beteg pozitív volt enterocita antitestekre. A HAA-pozitív szérumok erős reaktivitást mutattak az intestinalis enterociták és a citoszol ellen, a legnagyobb intenzitással az ecset szélén (2A. ábra). Az izolált, magas titerű VAA erős festődést mutatott, ami a határt törölte, de a citoszolt nem (2B. ábra). Az IPEX-betegcsoporton kívül csak egy, a PID fertőzésben szenvedő, CD25 génmutációval rendelkező és HAA-ra és VAA-ra negatív (Pt L1) betegből származó szérum mutatott pozitív festődést az enterocitákban, amelyek a kéz szélére korlátozódtak (2C. ábra).
Az IPEX Pt 19-ből származó HAA köti a kézszegélyt és az enterocita citoszolt (A panel), míg az IPEX Pt 17-ből származó VAA csak a kézszegélyt (B panel). A PID Pt L1-ből származó IgG megköti az enterocita kefe határát (C panel). Nincs kötés az IPEX-szerű Pt L30-ban (D panel).
A HAA és VAA mérésekhez 6 IPEX-es beteg (Pt12, Pt14, Pt17, Pt19, Pt22 és Pt23) soros mintája állt rendelkezésre: mindegyikük vérképző őssejt-transzplantáción (HSCT) esett át. orvosi terápia 4 esetben a szisztémás immunszuppresszió változó periódusa előz meg. E jelentés idején (2013. április) a transzplantált betegek közül kettő kivételével mindegyik életben volt, enteropátiájuk klinikai remissziójában volt, és nem részesültek immunszuppresszív kezelésben (S1. táblázat). A transzplantáció után gyűjtött perifériás vér genetikai elemzése 4 esetben (Pt12, Pt14, Pt19 és Pt22) 100%-os donor kimérizmust, más betegeknél vegyes donor/recipiens kimérizmust mutatott. Az enteropathia kezdetén három betegnél volt HAA és VAA (Pt12, Pt14 és Pt19), egynél csak VAA (Pt17), kettőnél pedig csak HAA (Pt22 és Pt23) (3. ábra). Öt esetben (Pt12, Pt14, Pt17, Pt22 és Pt23) az immunszuppresszió vagy a HSCT után bekövetkezett klinikai remisszió vagy jelentős javulás a HAA és/vagy VAA titerek csökkenésével járt, ami négy esetben kimutathatatlanná vált, vagy nagyon alacsony titereken is megmaradt. esetek a leghosszabb megfigyeléssel. Egy esetben (Pt19) a HSCT után a VAA kimutathatatlanná vált, míg a HAA magas titereken fennmaradt a klinikai remisszió ellenére (3D. ábra). Legalább egy esetben (Pt14) a HAA az enteropathia érzékeny markere volt: a HAA-t magas titereken mutatták ki súlyos enteropathiával összefüggésben az IPEX-diagnózis idején, majd az immunszuppresszív terápia utáni klinikai és szövettani remisszió során csökkent, csúcsértékkel. a klinikai relapszus során, majd a sikeres HSCT és a klinikai remisszió után tartósan észlelhetetlenné vált (3B. ábra). Bár kevésbé gyakori, a VAA a HAA-hoz hasonló mintát mutatott. A HSCT után megfigyelt autoantitest-csökkenés a kondicionálás következtében fellépő B-sejt- és IgG-hiány következménye. Valójában, a Pt22 kivételével, akinek rövid posztoperatív transzplantációja volt, a HSCT után csökkent HAA- vagy VAA-titerekkel rendelkező betegek (Pt12, 17 és 23) már immunizáltak, és az IVIg-terápia független volt az első poszt-HSCT során.
A függőleges tengely a HAA (gyémántok) és VAA (háromszögek) autoantitest titereket jelöli, tetszőleges egységekben kifejezve, a vízszintes tengely ideje mentén hónapokban. A függőleges pontozott vonal jelzi a HSCT dátumát, a vízszintes pontozott és szaggatott vonal a HAA és VAA pozitivitás határértékét jelzi.
Ebben a tanulmányban bemutatjuk, hogy az új LIPS-vizsgálatokkal könnyen mérhető és kombinált HAA és VAA nagyon érzékeny és specifikus markerei az IPEX-szindrómának, és megjósolhatják annak klinikai kimenetelét. Valójában minden IPEX-betegnél, akinek a diagnózist genetikai vizsgálattal igazolták, emelkedett a HAA vagy VAA koncentrációja. Ezzel szemben a FOXP3 mutációval (pl. IPEX-szerű vagy PID) nem szenvedő enteropathiás betegek, T1D-betegek vagy cöliákiás betegek egyike sem volt pozitív sem HAA-ra, sem VAA-ra. A két marker közül a HAA volt a legmagasabb érzékenységgel, 13 IPEX-es betegből 12-ben, míg VAA-t csak hatban találtak. Nevezetesen, a HAA és a VAA értékes markereknek bizonyult az IPEX-szindrómában olyan atipikus esetekben is, mint a Pt24, ahol az enteropátia nem volt a klinikai megjelenés része, ehelyett a súlyos gastritis dominált, amelyben IPEX-re gyanakodtak, majd FOXP3 génszekvenálással igazolták csak a klinikai megjelenés után. emelkedett HAA kimutatása. A jövőben egy új LIPS-teszt lehetővé teszi a HAA és VAA szisztematikusabb szűrését heterogén betegeknél. klinikai szindrómák, észlelési lehetőséggel több klinikailag atípusos IPEX szindrómák esetei.
A GADA volt a második leggyakoribb autoantitest-reakció az IPEX-betegeknél a HAA után. Bár a GADA a leggyakoribb T1D autoantitest marker, azzal széleskörű titer a klinikai megjelenés során, ezek nem mindig járnak cukorbetegséggel. Valójában más autoimmun betegségekben is megtalálhatók, beleértve a Tough Man szindrómát és az autoimmun poliendokrinopátiát (APS). Érdekes módon az AFP-ben szenvedő betegeknél a GADA jobban korrelál a gyomor-bélrendszeri tünetek kialakulásával, mint a cukorbetegséggel. Érdekes módon az IPEX-betegeinkben is a GADA túlnyomórészt elterjedt volt, anélkül, hogy mindig összefüggésbe hozták volna a T1D-vel.
Amellett, hogy az IPEX-szindróma pontos markerei, a HAA és a VAA potenciális prediktív értékkel is bírhat, különösen a kapcsolódó enteropathiával kapcsolatban. Hat betegnél a rendelkezésre álló utólagos mintaminták magas HAA- és VAA-titereket mutattak a diagnózis idején vagy a gyomor-bélrendszeri tünetek megjelenésekor és a kezelés előtt. Ezt követően öt esetben immunszuppresszív kezelést és/vagy HSCT-t (Pt12, Pt14, Pt17, Pt22 és Pt23) követően a HAA- és VAA-titerek csökkentek, kimutathatatlanokká váltak, vagy a kimutatási küszöb körüli alacsony titereken is megmaradtak, ami a klinikai és szövettani remissziót tükrözi. a kapcsolódó enteropátia. Egyiküknél (Pt14) az immunszuppresszív kezelés során fellépő enteropathia átmeneti visszaesését HAA-csúcs kísérte, majd a klinikai remisszió utáni esés. Sajnos ennél a betegnél az egymást követő minták hiánya nem tette lehetővé az enteropathia kiújulását megelőző autoantitest-növekedés időpontjának rögzítését. Egy esetben (Pt19) a klinikai remissziót a VAA csökkenése kísérte, de a HAA-ban nem, ami magas titereken fennmaradt a HSCT után 15 hónapig. A HAA és VAA titerek HSCT utáni csökkenésének megállapítása a legtöbb, de nem minden betegnél rendkívül érdekes, valószínűleg az ezen autoantitestek tartós termeléséért felelős maradék gazda limfociták vagy plazmasejtek túlélésével függ össze.
Ezen autoantitest markerek bevezetése a klinikai gyakorlat viszonylag egyszerű lenne, tekintettel arra, hogy az újonnan kifejlesztett LIPS-szel könnyen mérhetőek. A közelmúltban ezt a technológiát új, nem radioaktív eljárásként javasolták a radioaktív antitestek helyettesítésére és az átírt és transzlált 35S-metioninnal jelzett rekombináns humán antigének aranystandard in vitro protein-A immunprecipitációjára, amelyet a bevett autoantitest szabványosítási programok validáltak mindkét országban. T1D és cöliákia. A legutóbbi jelentések szerint a LIPS a rádiókommunikációs tesztekhez hasonló teljesítményt mutatott, és jobb, mint a már meglévő ELISA, . Ebben a vizsgálatban a LIPS-t Renilla (Rluc)-Harmonin és Rluc-Villin rekombináns kiméra lumiferáz antigénként történő felhasználásával tervezték, ami egy alacsony háttérzajjal és lineáris autoantitest kvantifikációval rendelkező vizsgálatot eredményezett, amely képes megkülönböztetni. pozitív eredményeket negatív szérummintákból. Így a HAA és VAA mérése LIPS segítségével gyors, egyszerű és reprodukálható tesztnek bizonyult, könnyen alkalmazható klinikai felhasználásra.
Érdekes módon a kombinált HAA és VAA azonos diagnosztikai teljesítményét figyelték meg a hagyományos indirekt immunfluoreszcenciával kimutatott enterocita autoantitestek esetében. Az is tisztázatlan, de a jövőben érdemes ellenőrizni, hogy a harmonikusok és a bolyhok az egyedüli antigének, amelyeket az IPEX-hez kapcsolódó autoantitestek ismernek fel az enterocitákon, vagy az IPEX-hez kapcsolódó antitestek egyéb enterocita autoantigén célpontjait még nem azonosították.
Az IPEX eddig T-sejtnek számított, mégpedig immunbetegség Treg diszfunkciók, , , korlátozott figyelmet fordítva a humorális immunválasz kapcsolódó hibáira: eredményeink rávilágítanak a fő FOXP3 génmutációk megbízható és számszerűsíthető antigén-specifikus autoantitesttel való kapcsolatára. Mivel azonban a B-sejtek nem expresszálnak FOXP3-at, a FOXP3-mutációk nem valószínű, hogy közvetlenül befolyásolják a B-sejtek fejlődését és/vagy az antitest-termelést. A legújabb tanulmányok azonban azt mutatják, hogy a B-sejtek a Treg-sejtek által közvetített gátló funkció közvetlen és közvetett célpontjai is lehetnek, és a Treg-sejtek megváltozása hatással van az autoantitest-titerekre mind egérmodellben, mind emberben – Ráadásul a foxp3 mutánsokkal rendelkező egerekből származó közvetlen adatok azt mutatják, hogy A Treg-sejtek hiánya abnormális B-sejtek fejlődésével, a B-sejt-allergia elvesztésével és a hosszú életű plazmasejtek kialakulásával jár együtt. Ezenkívül a közelmúltban kimutatták, hogy emberben a FOXP3-hiány autoreaktív klónok felhalmozódásához vezet az érett, naiv B-sejtek kompartmentjében, ami azt jelzi, hogy a Treg-sejtek fontos szerepet játszanak az ellenőrzőpont-szabályozásban a perifériás B-sejtek szempontjából.
Az IPEX-ben a hormonok és a bolyhok autoimmunizációjáért felelős mechanizmusok, valamint ezen autoantigének szerepe az IPEX-szindróma kóros megnyilvánulásaiban továbbra sem ismert. A Harmonin számos szövetben expresszálódik, beleértve vékonybél, vastagbél, vese, szem, belső fül előcsarnoka és gyengén hasnyálmirigy. A bélben a harmonizátor kifejeződése túlnyomórészt a luminalis felszín hámsejtjeiben és a bélkripták felső felében található, és valószínűleg a kéz mikrobolyhaiban lokalizálódik; hasonló lokalizációt mutattak ki a bolyhok, . Tekintettel arra, hogy az IPEX enteropathia fő kórszövettani jellemzője a bolyhos atrófia, amely apoptotikus bélhámsejt-halálhoz társul, közepes vagy súlyos gyulladással párosulva, valószínű, hogy a harmonikusok és a bolyhok a patogén autoimmunitás megfelelő molekuláris célpontjaiként működhetnek ebben az összefüggésben.
Ez a tanulmány kimutatta, hogy a LIPS-szel mért HAA és VAA pontos diagnosztikai markerei az IPEX-szindrómának, és 100%-os egyezést mutatnak a FOXP3 génmutációkkal, amelyek megkülönböztetik az IPEX-et, beleértve az atipikus eseteket is, az enteropathiákkal összefüggő egyéb gyermekkori rendellenességektől. Összességében ezek az adatok azt mutatják, hogy a HAA-t és a VAA-t be kell vonni a diagnosztikai adatfolyamba és klinikai megfigyelés IPEX-szindrómás betegek számára, akiknél a HAA és VAA titerének visszatérő enteropathiára utaló változása segítheti a klinikusokat a gyors terápiás döntések meghozatalában.
Az IPEX-betegek klinikai jellemzői.
Az IPEX-szerű betegek klinikai jellemzői.
Kattintson ide további információért.
A szerzők köszönetet mondanak kollégáiknak, akik szérummintákkal és klinikai információk IPEX- és IPEX-betegeiken: E. S. Kang és Y. H. Choe, Szöul, Koreai Köztársaság; G. Zuin, Milánó, Olaszország; A. Staiano, R. Tronchone és V. Discepolo, Nápoly, Olaszország; J. Schmidtko, Bern, Svájc; A. IkinciogullariZ. SedaUyan, M. Aydogan, E. O. Zu, Ankara, Törökország; G.R. Corazza és R. Ciccocioppo, Pavia, Olaszország; S. Vignola, Genova, Olaszország; A. Bilbao és S. Sanchez-Ramon, Madrid, Spanyolország; J. Reichenbachand M. Hoernes, Zürich, Svájc; M. Abinun és M. Slatter, Newcastle upon Tyne, Egyesült Királyság; M. Cipolli, Verona, Olaszország; F. Gurakan, Ankara, Törökország; F. Locatelli és B. Lucarelli, Róma, Olaszország; C. Cancrini és S. Corrente, Róma, Olaszország; A. Tommasini, Trieszt, Olaszország; L. Guidi, Róma, Olaszország; E. Richmond Padilla és O. Porras, San José, Costa Rica; S. Martino és D. Montin, Torino, Olaszország; M. Hauschild, Németország; K. Nadeau és M. Butte, Stanford, CA; A. Aiuti, G. Barera, F. Meschi és R. Bonfanti, Milánó, Olaszország. A szerzők köszönetet mondanak: M. Cecconiand D. Coviello a FOXP3 genotipizálásért; valamint az olasz IPEX tanulmányi csoport (www.ipexconsortium.org) tagjainak R. Badolato, M. Cecconi, G. Colarusso, D. Coviello, E. Gambinera és A. Tommasini támogatásért és bátorításért. A szerzők köszönik a betegeknek és családtagjaiknak a bizalmat és a kutatásunkban való részvételt.
Az IPEX-szindróma immunrendszeri szabályozási zavar, poliendokrinopátia és enteropathia szindróma, X-hez kötött recesszív öröklődéssel (immunodysregiiláció, poliendokrinopátia és enteropathia, X-kapcsolt).
Tünetek: poliendokrinopátia (az endokrin mirigyek működésének megsértése), amely az 1-es típusú diabetes mellitus kialakulásában nyilvánul meg. Az ilyen típusú cukorbetegségben az immunsejtek megtámadják és elpusztítják azokat a hasnyálmirigy sejteket, amelyek inzulint termelnek, egy hormon, amely részt vesz a glükóz (cukor) anyagcseréjében (cseréjében) a szervezetben. IPEX-ben szenvedő betegeknél nem termelődik inzulin, hiperglikémia alakul ki - magas tartalom vércukor. Lehetséges az autoimmun pajzsmirigy-gyulladás kialakulása is - a pajzsmirigy gyulladása, amelyet saját immunrendszerének támadása okoz, a pajzsmirigy már nem tudja megfelelően ellátni funkcióit (például a szervezet kalcium-anyagcseréje megzavarodik). Az enteropátia (a gyomor-bél traktus fertőzése) tartós hasmenésben nyilvánul meg, amely étkezés előtt vagy közben kezdődik, lehetséges bélvérzés. Hemolitikus anémia - a vörösvértestek hemolízise (megsemmisítése) és a hemoglobin mennyiségének csökkenése. Bőrkiütések az ekcéma típusa szerint (bőrkiütés, viszketéssel és hámlással). Ízületi gyulladás (ízületi gyulladás), lymphadenopathia (növekedés és fájdalom nyirokcsomók), vesekárosodás. Cachexia ( szélsőséges fok kimerültség). Fokozott érzékenység a fertőzésekre az immunrendszer diszregulációja (az immunrendszer sejtjeinek károsodott kölcsönhatása egymással és más sejtekkel) és/vagy neutropenia (a neutrofilek számának csökkenése – az immunrendszer sejtjei, amelyek fő funkciója a védekezés az ellen). fertőzések): tüdőgyulladás (tüdőgyulladás), hashártyagyulladás ( gennyes gyulladás peritoneum), szepszis (vérmérgezés), szeptikus ízületi gyulladás(az ízületek gennyes gyulladása).
Az IPEX-szindróma a FOXP3 gén mutációihoz kapcsolódik
Kutatási módszer: FOXP3 génszekvenálás
szindróma fehérje), amely fontos szerepet játszik a citoszkeleton működésében. Szabályozza az aktin polimerizációját. Ennek a fehérjének a normál működése szükséges a sejtek teljes mobilitásához, polarizációjához, a kemotaxis során a filopodiák kialakulásához, a sejtadhézióhoz és az immunszinapszis kialakulásához az immunrendszer sejtjeinek interakciója során.
A mutációk elhelyezkedésétől és az általuk érintett génrégió hosszától függően a betegség három klinikai változata alakul ki: a teljes kifejlődésű Wiskott-Aldrich-szindróma (deléciók következménye) és a thrombocytopenia vagy neutropenia izolált manifesztációjával járó változatok. A Wiskott-Aldrich-szindróma klasszikus képét kis vérlemezkékkel járó thrombocytopenia, ekcéma és visszatérő fertőzések jellemzik.
A Wiskott-Aldrich-szindrómát az immunrendszer többszörös rendellenességei jellemzik, amelyek elsősorban a veleszületett immunitás sejtek fagocita és citolitikus aktivitását érintik, pl. olyan funkciókat, amelyek leginkább a sejtmozgástól és a citoszkeleton aktív részvételétől függenek. A T-limfociták és az APC közötti immunszinapszis kialakulásának megsértése az adaptív immunitás minden megnyilvánulását érinti.
Ataxia-telangiectasia (Louis-Bar szindróma)
Az ATM gén hibája által okozott örökletes betegség (Ataxia telangiectasia mutált). A kromoszóma-lebomlás szindrómáján alapuló betegségekre utal. A betegség az ATM gén bármely részében előforduló mutációk eredményeképpen alakul ki. A mutációk eredménye lehet az ATM fehérje szintézisének teljes hiánya vagy gyengülése, valamint egy funkcionálisan hibás fehérje szintézise.
ATM fehérje - szerin-treonin protein kináz. Fő funkciója, hogy helyreállító szignálokat indítson el a kettős szálú DNS-törésekre, amelyek fiziológiás körülmények között (meiózis, antigénfelismerő receptorok V-génjeinek átrendeződése stb. során) és a hatás által kiváltott külső tényezők(például ionizáló sugárzás). Amikor a DNS megszakad, az ATM-kináz autofoszforilálódik, és dimerből monomer formába változik. Az ATM kináz biztosítja az MRN komplex fehérjéinek foszforilációját és a kapcsolódó faktorokat, amelyek közvetlenül végrehajtják a DNS-javítást. Kis számú szünet esetén sikeresen ellátják ezt a funkciót. Ha a sikeres helyreállítás nem lehetséges, apoptózis alakul ki, amelyet a p53 faktor vált ki. A teljes DNS-javítás hiánya a genom instabilitását okozza, aminek következtében a sejtek sugárérzékenysége, a fejlődés gyakorisága nő. rosszindulatú daganatok különösen limfómák és leukémiák.
Az ataxia-telangiectasia legjellemzőbb klinikai tünete a progresszív ataxia, amely a járás megváltozásával nyilvánul meg. Ezt a neurodegeneráció okozza cerebelláris atrófiával. A neurodegeneratív folyamatok kialakulása annak köszönhető, hogy az agyi neuronok érése során DNS-rekombinációs folyamatok következnek be, amelyek kettős törései kísérik. Egy másik tünet, amely meghatározta a betegség nevét, a telangiectasia, a szem és az arc ereinek tartós kitágulása.
A T- és B-limfociták érése során fellépő DNS-törések helyreállításának megsértése is az ataxia-telangiectasia esetén megfigyelt immunhiány hátterében áll. Az immunhiány a bronchopulmonalis apparátus krónikus, visszatérő bakteriális és vírusos fertőző betegségeiben nyilvánul meg, amelyek általában a beteg halálát okozzák.
Nijmegen szindróma
Nijmegen az a város Hollandiában, ahol először leírták a szindrómát. Ezt az örökletes betegséget kromoszóma-lebomlás szindrómáinak nevezik, amelyek a genom instabilitásának kialakulásával járnak. Ennek a betegségnek a kialakulása az NBS1 gén mutációjával függ össze, amelynek terméke, a nibrin az MRN-komplex részeként részt vesz a DNS-javításban, mivel az ATM fehérjekináz általi foszforiláció szubsztrátja. Ebben a tekintetben a Nijmegen-szindróma patogenezise és klinikai megnyilvánulásai gyakorlatilag egybeesnek az ataxia-telangiectasia tüneteivel. Mindkét esetben neurodegeneratív elváltozások alakulnak ki, Nijmegen-szindrómában azonban a mikrokefáliás jelenségek dominálnak, mivel az agyi neuronok érése során DNS-rekombinációs folyamatok is előfordulnak.
Autoimmun limfoproliferatív szindróma
A betegséget károsodott apoptózis és ezzel járó nem rosszindulatú limfoproliferáció, hiperimmunglobulinémia, autoimmun folyamatok, valamint a vér CD3+ CD4-CD8- sejttartalmának növekedése jellemzi. A szindróma hátterében álló mutációk leggyakrabban a Fas receptort (CD95) kódoló TFRRSF6 génben lokalizálódnak. Csak azok a mutációk, amelyek változást okoznak a CD95 molekula intracelluláris régiójában, vezetnek klinikai megnyilvánulásokhoz. Ritkábban a mutációk a Fas ligandum és a kaszpáz 8 és 10 géneket érintik (lásd a 3.4.1.5. szakaszt). A mutációk a megfelelő gén által kódolt molekulák legyengült expressziójában, valamint a gyengülő ill. teljes hiánya apoptotikus jelátvitel.
X-hez kötött limfoproliferatív szindróma
Ritka immunhiány, amelyet perverz vírusellenes, daganatellenes és immunválasz jellemez. Az X-hez kötött limfoproliferatív szindróma kórokozója az Epstein-Barr vírus. A vírus a B-sejtekbe a vírusburok gp150 molekulájának és a sejtmembrán CD21 receptorának kölcsönhatása révén jut be. Az X-hez kötött limfoproliferatív szindrómában szenvedő betegeknél a B-sejtek poliklonális aktivációja és akadálytalan vírusreplikáció lép fel.
Az Epstein-Barr vírus fertőzés az X-hez kötött limfoproliferatív szindrómában az SAP adapter fehérjét kódoló SH2D1A gén mutációjának eredménye. Signaling lymphocytic activation molekula (SLAM)-asszociált fehérje]. Az SAP fehérje SH2 doménje felismeri a tirozin motívumot a SLAM citoplazmatikus részében és számos más molekulát. A vírusellenes immunitásban vezető szerepet játszanak azok a folyamatok, amelyek az immunrendszer sejtjeiben a SLAM-receptor által közvetített aktiváció hatására fejlődnek ki. A SLAM receptor timocitákon, T-, B-dendritikus sejteken és makrofágokon expresszálódik. Az expresszió fokozódik a sejt aktiválásakor. Az SAP fehérje szabályozó hatása összefügg a tirozin-foszfatázok aktivitásának elnyomásával.
4.7. Immunhiányok | |
a SLAM-mel kapcsolatban. SAP hiányában az SH-2 foszfatáz szabadon kötődik a SLAM receptorhoz, defoszforilálja azt, és elnyomja a jelátvitelt. Az antivirális védelem fő effektorai - a T- és NK-sejtek - nem aktiválódnak, ami az Epstein-Barr vírus ellenőrizetlen szaporodásához vezet. Ezenkívül az SAP elősegíti a Fyn tirozin kináz és a SLAM receptor kölcsönhatását, ami megkönnyíti az aktivációs jel átvitelét.
Az X-hez kötött limfoproliferatív szindróma számos klinikai megnyilvánulásában a legállandóbb a fulmináns Fertőző mononukleózis, jó- és rosszindulatú limfoproliferatív rendellenességek, valamint dysgammaglobulinémia vagy hipogammaglobulinémia. A lokális elváltozások között érvényesül az Epstein-Barr vírussal fertőzött B-sejtekkel és aktivált T-sejtekkel való beszűrődés okozta májkárosodás, amely a májszövet nekrózisához vezet. A májelégtelenség az egyik fő halálok az X-hez kötött limfoproliferatív szindrómában szenvedő betegeknél.
IPEX szindróma
X-hez kötött immunrendszeri diszregulációs szindróma, poliendokrinopátia és enteropathia ( Immunszabályozási zavar, poliendokrinopátia, enteropathia X-kapcsolt szindróma) az X kromoszómán található FOXP3 gén mutációi következtében alakul ki. A FOXP3 a „mestergén”, amely a CD4+ CD25+ fenotípusú szabályozó T-sejtek kialakulásáért felelős. Ezek a sejtek központi szerepet játszanak az autospecifikus T-limfocita klónok perifériás aktivitásának gátlásában. A FOXP3 gén hibája e sejtek hiányával vagy hiányával, valamint a különböző autoimmun és allergiás folyamatok gátlásával jár.
Az IPEX-szindróma az endokrin szervek többszörös autoimmun elváltozásainak kialakulásában nyilvánul meg, emésztőrendszerés a reproduktív rendszer. Ez a betegség korai életkorban kezdődik, és számos endokrin szerv károsodása (I-es típusú diabetes mellitus, pajzsmirigygyulladás) jellemzi. magas szint autoantitestek, súlyos enteropathia, cachexia, alacsony termet, allergiás megnyilvánulások(ekcéma, ételallergia, eozinofília, emelkedett IgE-szint), valamint hematológiai elváltozások (hemolitikus anémia, thrombocytopenia). A beteg gyermekek (fiúk) az első életévben halnak meg ismétlődő súlyos fertőző betegségekben.
APECED szindróma
Autoimmun poliendokrinopátia, candidiasis, ektodermális dystrophia ( Autoimmun poliendokrinopátia, candidiasis, ektodermális dystrophia) egy autoimmun szindróma, amelyet a timociták negatív szelekciójának hibája okoz. Ennek oka az AIRE gén mutációi, amelyek felelősek a szervspecifikus fehérjék ektopikus expressziójáért a thymus medulla hám- és dendrites sejtjeiben, amelyek a negatív szelekcióért felelősek (lásd a 3.2.3.4. pontot). Az autoimmun folyamat elsősorban a mellékpajzsmirigyeket és a mellékveséket, valamint a hasnyálmirigy szigeteit (I-es típusú cukorbetegség alakul ki), a pajzsmirigyet és a nemi szerveket érinti.
Gyakran a candidiasis kialakulásával jár együtt. Az ektoderma származékok morfogenezisének hibáit is feltárják.
Az elsődleges immundeficienciák spektrumának mérlegelésekor az NK-sejtek patológiájához kapcsolódó nozológiai egységek hiánya vonzza a figyelmet. A mai napig valamivel több mint egy tucat olyan mutációt írtak le, amelyek befolyásolják e sejtek működését egyénekben, ami arra enged következtetni, hogy az NK-sejteket szelektíven befolyásoló immunhiányok rendkívül ritkák.
4.7.2. HIV-fertőzés és szerzett immunhiányos szindróma
Az elsődleges immunhiányos állapotok mellett az egyetlen olyan betegség, amelynél az immunrendszer károsodása a patogenezis alapja és meghatározza a tüneteket, a szerzett immunhiányos szindróma (AIDS); Szerzett immunhiányos szindróma- AIDS). Csak önálló szerzett immunhiányos betegségként ismerhető fel.
Az AIDS felfedezésének története 1981-ig nyúlik vissza, amikor a New York-i és Los Angeles-i orvoscsoportok jelentése jelent meg a Center for Disease Control (USA, Atlanta) anyagában egy homoszexuális férfiaknál regisztrált szokatlan betegségről. A Pneumocystis carinii opportunista gomba által okozott tüdőgyulladás súlyos formája jellemezte. A későbbi jelentések a betegcsoport bővüléséről és a keringés CD4+ T-limfocita-tartalmának meredek csökkenésével járó immunhiány jelenlétéről, valamint a kiváltható fertőző folyamatok kialakulásáról szóltak. , a pneumocystákon kívül más fakultatív kórokozók is. Néhány betegnél Kaposi-szarkóma alakult ki, amelyet a tőle szokatlan agresszív lefolyás jellemez. Mire ezek az anyagok megjelentek, az azonosított betegek 40%-a meghalt. Később kiderült, hogy a járvány már elfogta Afrikát egyenlítői területen, ahol a betegség főként heteroszexuális szexuális érintkezés útján terjed. A nemzetközi orvostársadalom nemcsak egy új nozológiai forma, a "szerzett immunhiányos szindróma" létezését ismerte fel. Szerzett immunhiányos szindróma), de
és e betegség világjárványának kezdetét jelentette. Az AIDS drámai debütálása felhívta rá a közvélemény figyelmét, messze túlmutatva a szakmai környezeten. Az orvostudományban, különösen az immunológiában az AIDS-probléma jelentősen befolyásolta a tudományos kutatások fejlesztése során felmerülő erőfeszítések és pénzek megoszlását. Ez volt az első alkalom, hogy az immunrendszer túlnyomórészt elváltozásával összefüggő betegség tudományos és társadalmi szempontból ennyire jelentősnek bizonyult.
Nak nek 2007 eleji szám A HIV-fertőzöttek száma elérte a 43 milliót, ebből 25 millióan meghaltak, éves szinten ez a szám 5 millió, az éves halálozási arány pedig 3 millió. A fertőzöttek 60%-a a Szaharától délre fekvő Afrikában él.
1983-ban szinte egyidejűleg Franciaországban [L. Montagnier (L. Montagnier)]
és Amerikai Egyesült Államok [R.S. Gallo ( R.C. Gallo )] került meghatározásra
4.7. Immunhiányok | |
az AIDS vírusos természete és kórokozója - HIV (humán immunhiány vírus, Humán immunhiány vírus - HIV). A retrovírusokhoz tartozik, pl. vírusok, amelyekben az RNS az örökletes információ hordozójaként szolgál, és ezt reverz transzkriptáz segítségével olvassák ki. Ez a vírus a lentivírusok alcsaládjába tartozik - lassan ható vírusok, betegséget okozó hosszú lappangási időszak. A HIV nemzetségbe tartozik a HIV-1 faj, amely a kórokozó tipikus forma AIDS, és HIV-2, amely felépítésében és kórokozó hatásában eltér a HIV-1-től, de általánosságban hasonlít hozzá. A HIV-2 a betegség enyhébb változatát okozza, főleg Afrikában. Az alábbi információk elsősorban a HIV-1-re vonatkoznak (hacsak nincs másképp jelezve). A HIV-nek 3 csoportja van - M, O és N, 34 altípusra osztva.
A jelenleg elfogadott nézet szerint a HIV-1 egy nyugat-afrikai csimpánzvírusból származik (valószínűleg Kamerunból, egy HIV-fertőzött országból) az 1930-as évek környékén. A HIV-2 a SIVsm majomvírusból származik. A HIV-1 változatai egyenlőtlenül oszlanak meg a világon. A nyugati fejlett országokban a B altípus uralkodik, Közép-Európában és Oroszországban - az A, B altípusok és rekombinánsaik. Más változatok dominálnak Afrikában és Ázsiában, Kamerunban az összes ismert HIV-altípus megtalálható.
A humán immundeficiencia vírus morfológiája, génjei és fehérjéi
A HIV felépítését az ábra mutatja. 4.46. A vírus átmérője körülbelül 100 nm. Kagyló veszi körül, amelyből gomba alakúan nyúlnak ki
héj
A nukleokapszid fehérjéi és enzimei
Nukleokapszid
Rizs. 4.46. A humán immundeficiencia vírus 1 (HIV-1) szerkezeti diagramja
4. fejezet |
||||||||||||||||||||
Rizs. 4.47. A humán immundeficiencia vírus 1 (HIV-1) genom szerkezete. A gének elhelyezkedését a vírus két RNS-molekuláján jelzik
tüskék, amelyek külső részét a gp120 burokfehérje, a membránnal szomszédos és transzmembrán részeket pedig a gp41 fehérje alkotja. A tüskék a megnevezett molekulák trimereit képviselik. Ezek a fehérjék részt vesznek a vírus és a gazdasejt közötti kölcsönhatásban, és a gazdaszervezet immunválasza főként ellenük irányul. Mélyebb a mátrix réteg, amely keretként működik. A vírus középső részét egy kúp alakú kapszid alkotja, amely genomiális RNS-t tartalmaz. A nukleoproteinek és enzimek is itt találhatók: reverz transzkriptáz (p66/p51), integráz (p31–32), proteáz (p10) és RNáz (p15).
A HIV genetikai szerkezetét és a génjei által kódolt fehérjéket az 1. ábra mutatja. 4.47. Két, 9,2 kb teljes hosszúságú egyszálú RNS-molekula 9 gént tartalmaz, amelyek 15 HIV-fehérjét kódolnak. A vírus szerkezetét kódoló szekvenciákat az 5'- és 3'-végeken hosszú terminális ismétlődések (LTR -Long terminális ismétlődések) korlátozzák, amelyek szabályozó funkciókat látnak el. A strukturális és szabályozó gének részben átfedik egymást. A fő szerkezeti gének a 3-gag, pol és env. A gag gén meghatározza a csoportspecifikus magantigének - a nukleoid és a mátrix - képződését. A pol gén a DNS polimerázt (reverz transzkriptáz) és más nukleotid fehérjéket kódol. Az env gén a fent említett burokfehérjék képződését kódolja. Az elsődleges géntermék minden esetben feldolgozáson megy keresztül, azaz. kisebb fehérjékre bomlik. A szabályozó gének a pol és env gének között helyezkednek el (vif, vpr, vpu, vpx, rev, tat gének) és ezen felül a genom 3'-terminális részét foglalják el (tat és rev gének töredékei, gén nef) . A szabályozó gének által kódolt fehérjék fontosak a virion kialakulásában és a sejttel való kapcsolatában. Ezek közül a legfontosabb fehérjék a tat, egy transzkripciós transzaktivátor és a nef (27 kDa), ennek negatív szabályozója. A hibás nef fehérjét olyan HIV-fertőzött "hosszú májúakban" mutatják ki, akiknél a betegség nem halad előre.
A gp120 és gp41 burokfehérjék a legfontosabbak a HIV-fertőzés immunológiájában, a diagnosztikában és az AIDS immunterápiás megközelítéseinek kidolgozásában. A HIV rendkívül nagy variabilitása a menv genommal függ össze. A gén 5 állandó (C) és öt variábilis (V) régiót tartalmaz; az utóbbiban az aminosavszekvencia vírusizolátumonként 30-90%-ban változik. A V3 változó hurok különösen jelentős az immunogenitás szempontjából. Az env gén mutációinak gyakorisága genomonként ciklusonként 10-4-10-5 esemény, azaz. 2-3 nagyságrenddel magasabb a génmutációk szokásos gyakoriságánál. A molekula jelentős részét szénhidrát-maradékok foglalják el.
4.7. Immunhiányok | |
A sejtek fertőzése humán immunhiány vírussal
Az emberi sejtek HIV-fertőzésének folyamata és az azt követő replikáció több szakaszból áll. A korai fázisban életciklus a következő fázisok különböztethetők meg:
– HIV kötődés a sejtfelszínhez (recepció);
– a vírus és a sejt membránjainak összeolvadása és a vírus behatolása a sejtbe (fúzió és "vetkőzés");
– a fordított transzkripció kezdete; előintegrációs komplexum kialakítása;
– a preintegrációs komplex transzportja a nukleoplazmába;
– a provírus integrációja a sejtgenomba.
Nak nek A HIV életciklusának késői szakaszai a következők:
– a vírus RNS transzkripciója az integrált provirális DNS-templáton;
– vírus RNS exportálása a citoszolba;
– vírus RNS transzlációja, fehérjefeldolgozás;
– a vírusrészecske összeszerelése a sejtmembránon;
– az újonnan képződött virion felszabadulása.
A fertőzés fő bejárati kapuja a húgyúti és az emésztőrendszer nyálkahártyája. A nyálkahártya károsodása esetén a vírus behatolása a szervezetbe nagymértékben megkönnyíthető, de a fertőzés ezek hiányában is lehetséges. Ebben az esetben a vírust a dendrites sejtek a szerv lumenébe behatoló folyamatai fogják el. Mindenesetre a dendritikus sejtek az elsők, amelyek kölcsönhatásba lépnek a HIV-vel. A vírust a regionális nyirokcsomókba szállítják, ahol az antigénprezentáció során a dendritikus sejtek és a T-limfociták interakciója során megfertőzi a CD4+ T sejteket.
A HIV átvétele a vírus gp120 fehérje trimerjének és a gazdasejt CD4 membránglikoproteinjének kölcsönös felismerésének köszönhető. Mindkét molekulán lokalizálódnak a kölcsönhatásukért felelős helyek. A gp120 molekulán ez a régió a C-terminális részén található (420-469 aminosavak), ezen kívül van még 3 régió, ami fontos a CD4-gyel való kölcsönhatás helyének kialakítása szempontjából, és a régió (254-274) felelős a vírus behatolásáért a sejtbe, miután a CD4 membránhoz kötődik. A CD4 molekulán a gp120 kötőhely az N-terminális V-doménben (D1) található, és a 31-57. és 81-94. aminosavak szekvenciáit tartalmazza.
Mivel a HIV receptora a CD4 molekula, a vírus célsejtjeinek spektrumát az expressziója határozza meg (4.20. táblázat). Természetesen a fő célpontjai a CD4+ T-limfociták, valamint a mindkét koreceptort (CD4 és CD8) expresszáló éretlen timociták. A dendrites sejtek és makrofágok, amelyek gyengén expresszálják a CD4-et a membránon, szintén hatékonyan fertőződnek meg a vírussal, és aktív termelőiként szolgálnak (a dendritikus sejtekben a HIV replikációja még magasabb, mint a T-limfocitákban). Más sejtek, amelyek legalább kis mennyiségű CD4-et tartalmaznak a felszínen, szintén a HIV célpontjai – eozinofilek, megakariociták, endothelsejtek, egyes hámsejtek (csecsemőmirigy epitélium, bél M-sejtek) ill. idegsejtek(neuronok, mikroglia sejtek, asztrociták, oligodendrociták), spermiumok, chorionallantois sejtek, harántcsíkolt izmok.
680 4. fejezet
4.20. táblázat. Az immunológiai paraméterek állapota szerzett immunhiányos szindrómában
Index | Preklinikai | Klinikai stádium |
megnyilvánulásai |
||
A limfociták száma | ||
normál vagy csökkentett | Kevesebb mint 200 sejt per |
|
1 µl vért |
||
Normál vagy emelkedett | normál vagy csökkentett |
|
(százalék lehet |
||
CD4+ /CD8+ arány | ||
Th1/Th2 arány | normál vagy csökkentett | |
Citotoxikus aktivitás | Megnövekedett | |
iCal T-sejtek | ||
T sejt válasz | normál vagy csökkentett | élesen lehangolt |
mitogének számára | ||
normál vagy csökkentett | ||
Antigenemia | Ekkor jelenik meg | Hiányzó |
2-8 hét | ||
Antitestek keringésben | Általában azután jelennek meg | Jelenlegi |
Oldható tényezők a | Az α-lánc oldható formái IL-2R, CD8, TNFR, |
|
keringés | β2 -mikroglobulin, neopterin |
|
Funkció csökkentve |
||
Nyirokszövetek, ill. | A tartalom korai csökkenése | Erős elnyomás |
nyálkával idézett | CD4+ T-sejtek elnyomása | T-sejtek, különösen |
ty kagyló | CD4+ populációk |
|
veleszületett immunitás | normál vagy elnyomott | Nyomott |
A HIV sejtekbe való bejutásához további molekulák, társreceptorai két kemokin receptor: a CXCR4 (a CXCL12 kemokin receptora) és a CCR5 (a CCL4 és CCL5 kemokin receptora). Kisebb mértékben a társreceptor szerepe még több mint egy tucat kemokin receptorban is benne van. A CXCR4 társreceptorként szolgál a tenyésztett HIV-1 törzsek számára T-sejtvonalak, és CCR5 - a makrofág vonalakon tenyésztett törzsekhez (makrofágokon, dendritikus sejteken és CD4+ T-sejteken is jelen van). Mindkét receptor rodopszinszerű besorolású, és a hozzájuk kapcsolódó G-fehérjén keresztül jelet továbbít a sejtbe (lásd 4.1.1.2. szakasz). Mindkét kemoreceptor kölcsönhatásba lép
Val vel fehérje gp120; ezeknek a receptoroknak a kötőhelye megnyílik a gp120 molekulában a CD4-gyel való kölcsönhatás után (4.48. ábra). A különböző HIV-izolátumok szelektivitása különbözik bizonyos társreceptorok iránt. Támogató szerep a fogadásban A HIV-2-t adhéziós molekulák, különösen az LFA-1 játsszák. Dendritikus sejtek fertőzése esetén a kölcsönhatásban
Val vel A HIV részt vesz a lektin receptoron DC JEL.
4.7. Immunhiányok | |
A gp120 hipervariábilis régiói
Rizs. 4.48. A vírus és a célsejt közötti kölcsönhatás sémája a fertőzés során. A T-sejt receptormolekulák és a HIV-1 molekulák kölcsönhatásának egyik lehetőségét szemléltetjük, amely biztosítja a vírus sejtbe jutását.
A koreceptorok fontos szerepet játszanak a vírusburok és a sejtmembrán fúziójában. A vírus oldaláról a fúzióban a fő szerepet a gp41 fehérje játssza. A fúziós (fúziós) és a vírus "levetkőzésének" fázisai után reversetas komplex képződik, amely reverz transzkripciót biztosít a kettős szálú provirális DNS képződésével.
A vírus integráz enzim segítségével a cDNS beépül a sejt DNS-ébe, provírust hozva létre. A HIV gének sejtgenomba való integrációjának sajátossága, hogy a megvalósításhoz nincs szükség sejtosztódásra. Az integráció eredményeként látens fertőzés alakul ki, amely általában a memória T-sejteket, „alvó” makrofágokat érinti, amelyek a fertőzés tartalékaként szolgálnak.
A HIV replikációja túlnyomórészt vagy kizárólag az aktivált sejtekben történik. A CD4+ T-sejtek aktiválása indukálja az NF-KB transzkripciós faktort, amely mind a sejtes, mind a vírusos DNS promótereihez kötődik. A celluláris RNS polimeráz átírja a vírus RNS-ét. Másoknál korábban a tat és a rev gének íródnak át, amelyek termékei részt vesznek a vírus replikációjában A Tat egy olyan fehérje, amely kölcsönhatásba lép a hosszú terminális szekvenciákkal (LTR), ami drámaian megnöveli a vírus transzkripciójának sebességét. A Rev egy olyan fehérje, amely elősegíti a vírus-mRNS-transzkriptumok kijutását a sejtmagból, mind az összeillesztett, mind az össze nem illesztve. A sejtmagból felszabaduló vírus mRNS templátként szolgál a szerkezeti és szabályozó fehérjék szintéziséhez. A gag, env, pol strukturális fehérjék vírusrészecskéket alkotnak, amelyek a sejtből rügyeznek.
A limfociták mitogének általi stimulálása fokozza a HIV replikációját és citopatogén hatását. Ezt elősegíthetik a sejtaktivációt kísérő endogén tényezők, amelyek aktivált limfocitákban és makrofágokban indukálódnak (az NF-κB-t már említettük). A citokinek, különösen a TNFα és az IL-6 szintén ilyen faktorok lehetnek. Az első aktiválja a HIV gének transzkripcióját, a második serkenti a HIV expresszióját a gazdasejtekben. A GM-CSF és a G-CSF telepstimuláló faktorok hasonló hatást fejtenek ki. Az IL-1, IL-2, IL-3 és az IFNγ HIV aktivációs kofaktorként működhetnek. A mellékvese glükokortikoid hormonjai hozzájárulnak a HIV genetikai program végrehajtásához. Az IL-4, IL-7 és az IFNa ellentétes hatást fejt ki.
Immunválasz a HIV-antigénekre
Az akut vírusfertőzést az IFNγ-t szintetizáló antigén-specifikus CD4+ és CD8+ T-sejtek viszonylag gyors képződése jellemzi. Ez a vírus tartalmának gyors csökkenéséhez vezet a vérben, de nem tűnik el. A HIV-fertőzésre adott sejtes válasz antigén-specifikus CD4+ T-helperek és CD8+ T-gyilkosok képződéséből áll. A citotoxikus CD8+ T-sejtek az AIDS-ben a késői stádiumok kivételével az egész AIDS-ben kimutathatók, míg a vírusspecifikus CD4+ T-sejtek csak a betegség korai szakaszában mutathatók ki. A CD8+ T-gyilkosok megölik a fertőzött sejteket, mielőtt a vírus elhagyná a sejtet, ezáltal megszakítva a vírus replikációját. Egyértelmű fordított összefüggés van a vérplazmában lévő vírustiter és a specifikus CD8+ T-gyilkosok száma között. A CD4+ és CD8+ antigén-specifikus T-sejtek proliferatív aktivitásának növekedése korrelál a betegség progressziójának lelassulásával. A nagyszámú CD8+ T-ölőt tartalmazó betegekre a betegség lassú progressziója jellemző. A CD4+ T-sejtek a vírus eliminációjában is fontos szerepet játszanak: összefüggés van a CD4+ T-sejtek HIV-antigénekre adott proliferatív válasza és a vírus plazmaszintje között. Meg kell jegyezni, hogy a virémia súlyossága szorosabban fordítottan korrelál az IL-2 termelődésével, mint az IFNy-é. Krónikus vírusfertőzésben az effektor T-sejtek mennyiségileg megmaradnak, de funkcionálisan megváltoznak. A CD4+ T-sejtek IL-2-szintetizáló képességének csökkenése; a CD8+ T-sejtek citotoxikus molekulák képződése gyengül. Úgy gondolják, hogy a CD8+ T-sejtek csökkent proliferatív aktivitása a CD4+ helperek általi csökkent IL-2 termelés eredménye. Az antivirális védelem gyengülését elősegíti a CD4+ T-sejtek Th2 típusú helperré differenciálódása. Még a CD8+ citotoxikus T-limfociták által szintetizált citokinek spektrumára is jellemző a Th2 citokinek túlsúlya.
Természetes lenne elvárni, hogy az immunfolyamatok, amelyek legyengült formában, de egy behatoló vírus hatására alakulnak ki, legalább kis fok védi a szervezetet a fertőzésektől. Valójában, ha ez megtörténik, akkor csak tovább kezdeti időszak betegségek. Ezt követően az antigén-specifikus CD4+ és CD8+ T-sejtek jelenléte ellenére intenzív vírusreplikáció megy végbe. Ez azon vírusok szelekciójának a következménye, amelyekben az epitópokban megváltozott a felismerés
A károsodott celluláris immunitás (T-sejt-hiány) okozta állapotok súlyos kombinált immunhiányos szindrómák. Egyes betegeknél az immunhiány ezen formái rendkívül veszélyes (akár életveszélyes) betegségek kialakulását okozhatják, míg másokban csak kisebb egészségügyi problémákat okozhatnak. Nézzünk részletesebben azokon a betegségeken, amelyek a sejtes immunitás megsértésével alakulnak ki.
A bőr és a nyálkahártyák krónikus candidiasisa
Candidiasis (rigó) akkor alakul ki, ha a bőrt és a nyálkahártyákat gombás fertőzés érinti. Ritka esetekben a fertőzés átterjedhet a belső szervekre.A candidiasis kialakulására való hajlam fennáll a T-sejtek szelektív elégtelenségével. A candidiasis kezelése speciális szerek alkalmazását igényli gombaellenes szerek(Néhány beteg egész életen át tartó fenntartó terápiát igényel.)
Metaphysealis chondrodysplasia
Ez a betegség autoszomális recesszív immunhiány. Gyakori rokonsági házasságokban. A metaphysealis chondrodysplasiában szenvedő betegek hajszála vékony, törékeny, és nagyon fogékonyak a vírusfertőzésekre. Egyes esetekben a betegség csontvelő-transzplantációval gyógyítható.X-hez kötött limfoproliferatív szindróma
Az X-hez kötött limfoproliferatív szindrómát az Epstein-Barr vírussal szembeni fokozott sebezhetőség jellemzi. Epstein-Barr vírus veszélyes betegségek kialakulását okozhatja (fertőző mononukleózis, aplasztikus vérszegénység, nyirokcsomórák, bárányhimlő, vasculitis, herpesz).Meg kell jegyezni, hogy ezt a betegséget csak a férfiak öröklik.
