Na čo sa používajú bakteriofágy v medicíne? Čo sú bakteriofágy a na čo sa používajú?

CM. ZAKHARENKO, kandidát lekárskych vied, docent, Vojenské lekárska akadémia ich. CM. Kirov, Petrohrad

Bakteriofágy sú jedinečné mikroorganizmy, na základe ktorých sa svojimi vlastnosťami a charakteristikami vytvorila špeciálna skupina liečebných a profylaktických prípravkov. Ich základné činy sú prirodzené fyziologické mechanizmy interakcie medzi fágmi a baktériami umožňujú predpovedať nekonečnú diverzitu oboch samotných bakteriofágov a možné spôsoby ich aplikácie. S rozširovaním bakteriofágových zbierok sa nepochybne objavia nové cieľové patogény a rozšíri sa rozsah ochorení, pri ktorých možno fágy použiť ako monoterapiu, tak aj ako súčasť komplexných liečebných režimov.

Použitie polyvalentného pyobakteriofága Sextaphage v liečbe infikovanej nekrózy pankreasu (Perm State Medical Academy pomenovaná po akademik E.A. Wagnerovi) teda umožnilo rýchlo obnoviť hlavné parametre homeostázy a funkcie orgánov a systémov u pacientov. Došlo aj k výraznému poklesu počtu pooperačné komplikácie a úmrtia: v skupine pacientov liečených štandardnou terapiou bola úmrtnosť 100 %, kým v skupine liečenej BF - 16,6 %.

Vzhľadom na neškodnosť a reaktogenitu prípravkov BP je možné ich použiť v pediatrická prax vrátane novorodencov. Skúsenosti regionálneho detského Nižného Novgorodu klinická nemocnica, kde v období komplikácií epidemiologickej situácie boli spolu s bežnými protiepidemickými opatreniami nasadené BP - Intesti-bacteriophage a BP Pseucfomonas aeruginosa. 11-násobný pokles incidencie nozokomiálnej infekcie etiológie Pseudomonas aeruginosa ukázal vysoká účinnosť BF aplikácie. Prípravky BF môžu byť predpísané ako na liečbu dysbakteriózy, tak aj na liečbu porúch zažívacie ústrojenstvo a zabrániť kolonizácii slizníc gastrointestinálny trakt oportúnne baktérie. Viaczložkové prípravky BF sú ideálne na okamžitú úľavu pri prvých príznakoch gastrointestinálnych ťažkostí.

K dnešnému dňu spoločnosť plánuje celý riadok prioritné oblasti pre vývoj a výrobu terapeutických a profylaktických bakteriofágov, ktoré korelujú s novovznikajúcimi globálnymi trendmi. Vytvárajú sa a zavádzajú sa nové preparáty: Vyvinuli sa BF proti zúbkovaniu a enterobaktériám, pracuje sa na vytvorení fágového preparátu proti Helicobacter pylori.

Iba jeden výrobca týchto liekov je NPO Microgen, podľa správy zástupcu vedúceho oddelenia vedy a inovatívny vývoj Alla Lobastova, vyrába viac ako 2 milióny balení ročne. Žiaľ, predstavy mnohých lekárov o bakteriofágoch nie sú ani zďaleka objektívne. Málokto vie, že bakteriofágy aktívne proti tomu istému patogénu môžu patriť do rôznych čeľadí, majú rôzne životné cykly atď. Napríklad bakteriofágy P. aeruginosa patria do čeľadí Myoviridae, Podoviridae, Siphoviridae, životný cyklus alebo mierny. Rôzne kmene toho istého patogénu môžu mať rôznu citlivosť na bakteriofágy. Väčšina odborníkov vie (počula, niekto použil) o existencii tekutiny a tablety lieková forma terapeutické a profylaktické prípravky bakteriofágov. Ich rozsah je však oveľa širší, čo možno pripísať bezpodmienečným výhodám najmä v kombinácii s rôznymi spôsobmi podávania (orálne podávanie, klystíry, aplikácie, výplachy rán a slizníc, zavádzanie do dutín rany a pod.). Komu zrejmé výhody bakteriofágy tradične zahŕňajú špecifický účinok na pomerne obmedzenú populáciu baktérií, obmedzenú existenciu (do vymiznutia cieľovej populácie mikroorganizmov), absenciu vedľajších účinkov, ako sú toxické a alergické reakcie, dysbiotické reakcie atď. rôznymi spôsobmi. vekových skupín a počas tehotenstva. Bakteriofágy samotné nie sú významnými alergénmi. Prípady intolerancie bakteriofágových prípravkov sú väčšinou spojené s reakciou na zložky rastové médium. Všetci hlavní výrobcovia tejto skupiny liekov sa snažia o maximálnu kvalitu použitých komponentov, čo znižuje pravdepodobnosť takýchto reakcií. V kontexte rastúcej rezistencie na antibiotiká niektorí autori navrhujú zvážiť bakteriofágy ako najlepšiu alternatívu k antibiotikám. Terapeutické a profylaktické prípravky bakteriofágov sú kokteilom špeciálne vybraných kombinácií (komplex polyklonálnych vysoko virulentných bakteriálne vírusy, špeciálne vybrané proti najbežnejším skupinám patogénov bakteriálnych infekcií) na základe fágových zbierok výrobcu. Pobočky FSUE "NPO Microgen" v Ufe, Perme a Nižnom Novgorode - moderné centrá výrobu takýchto liekov. Ďalšou veľkou výhodou tejto skupiny prípravkov je možnosť tvorby terapeutických a profylaktických prípravkov bakteriofágov prispôsobených špecifickým patogénnym mikroorganizmom. Rast bakteriálnej rezistencie na antimikrobiálne lieky a častá polyetiológia modernej infekčné choroby vyžadujú kombinovanú antibiotickú liečbu (dve, tri a niekedy aj viac antimikrobiálne látky). Na výber efektívna schéma terapiu antibiotikami je potrebné okrem samotnej citlivosti baktérií na liek dostatočne brať do úvahy veľké číslo faktory. Fágová terapia má v tomto smere aj určité výhody. Na jednej strane použitie kombinácie bakteriofágov nie je sprevádzané ich vzájomnou interakciou a nevedie k zmene schém ich aplikácie. V rámci existujúceho súboru terapeutických bakteriofágov existuje množstvo osvedčených kombinácií - bakteriofág coliproteus, pyobakteriofág polyvalentný, intesti-bakteriofág. Na druhej strane baktérie nie spoločné mechanizmy rezistencie na antibiotiká a fágy, preto ich možno použiť ako pri rezistencii patogénu na niektorý z liekov, tak aj v kombinácii „antibiotikum + bakteriofág“. Táto kombinácia je obzvlášť účinná pri ničení mikrobiálnych biofilmov. Experiment to presvedčivo ukazuje kombinovaná aplikácia antagonisty železa a bakteriofágy môžu narušiť tvorbu biofilmov Klebsiella pneumoniae. Zároveň je zaznamenaný výrazný pokles počtu mikrobiálnych populácií a pokles počtu „mladých“ buniek. Ešte jeden dôležitá vlastnosť pôsobením bakteriofágov je taký jav ako indukcia apoptózy. Niektoré kmene E. coli majú gény, ktoré spôsobujú bunkovú smrť po zavedení bakteriofága T4. V reakcii na expresiu neskorých génov fágu T4 teda gén lit (kóduje proteázu, ktorá ničí predlžovací faktor EF-Tu potrebný na syntézu proteínov) blokuje syntézu všetkých bunkových proteínov. Gén prrC kóduje nukleázu, ktorá štiepi lyzínovú tRNA. Nukleáza je aktivovaná produktom T4 fágového stp génu. V bunkách infikovaných fágom T4 spôsobujú gény rex (patriace do fágového genómu a exprimované v lyzogénnych bunkách) tvorbu iónových kanálov, čo vedie k strate životne dôležitých iónov bunkami a následne k smrti. Samotný fág T4 môže zabrániť bunkovej smrti uzavretím kanálov svojimi proteínmi, produktmi génov rII. V prípade vzniku bakteriálnej rezistencie na antibiotikum treba hľadať nové možnosti modifikácie aktívnej molekuly alebo zásadne nové látky. Bohužiaľ pre posledné roky tempo zavádzania nových antibiotík sa výrazne spomalilo. Situácia s bakteriofágmi je zásadne odlišná. Kolekcie hlavných výrobcov obsahujú desiatky hotových bakteriofágových kmeňov a sú neustále dopĺňané novými aktívnymi fágmi. Vďaka neustálemu monitorovaniu citlivosti izolovaných patogénov na bakteriofágy výrobcovia upravujú fágové kompozície dodávané do regiónov. Vďaka adaptovaným bakteriofágom je možné eliminovať prepuknutie nozokomiálnych nákaz spôsobených kmeňmi rezistentnými na antibiotiká.

O perorálny príjem bakteriofágy sa rýchlo dostanú do ohniska lokalizácie infekcie: pri perorálnom podaní pacientom s hnisavými zápalovými ochoreniami sa fágy po hodine dostávajú do krvného obehu, po 1–1,5 hodine sa zistia z bronchopulmonálneho exsudátu a z povrchu popálenín, po 2 hodín - z moču, a tiež z mozgovomiechového moku pacientov s traumatickým poranením mozgu.

Bakteriofágy sú teda jedinečné mikroorganizmy, na základe ktorých sa svojimi vlastnosťami a charakteristikami vytvorila špeciálna skupina terapeutických a profylaktických prípravkov. Prirodzené fyziologické mechanizmy interakcie medzi fágmi a baktériami, ktoré sú základom ich pôsobenia, umožňujú predpovedať nekonečnú rozmanitosť samotných bakteriofágov a možných spôsobov ich použitia. S rozširovaním bakteriofágových zbierok sa nepochybne objavia nové cieľové patogény a rozšíri sa rozsah ochorení, pri ktorých možno fágy použiť ako monoterapiu, tak aj ako súčasť komplexných liečebných režimov. Moderný pohľad na budúci osud fágoterapie by mal byť založený jednak na vysokej špecifickosti ich pôsobenia, jednak na potrebe prísneho dodržiavania všetkých pravidiel fágovej terapie. Kontrast bakteriofágov s akýmikoľvek prostriedkami etiotropnej terapie je chybný.

Získavanie stále viac priaznivcov medzi lekármi, zatláčanie antibiotík do úzadia. Kedysi príchod antibiotík úplne zmenil pohľad lekárov na liečbu. Predtým beznádejní pacienti sa začali zotavovať, liečebné algoritmy boli extrémne zjednodušené, úmrtnosť prudko klesla... Zázraky! Magické lieky! Nadšený postoj však netrval dlho. Začalo sa objavovať príliš veľa problémov.

Nepriateľ môjho nepriateľa je môj priateľ

Teraz sú „klzké“ problémy antibiotickej terapie známe každému. Účinok antibiotík je sprevádzaný:

Zničenie potrebnej, "užitočnej", črevnej mikroflóry a slizníc;

Aktívny rast nových kmeňov baktérií odolných voči nim;

Výskyt vedľajších účinkov v dôsledku systémového pôsobenia liekov.

V tomto ohľade sa stalo relevantným hľadanie zásadne odlišných liekov na liečbu bakteriálnych infekcií. A potom prišli na rad bakteriofágy.

Bakteriofágy sú vírusy, ktoré selektívne infikujú bakteriálne bunky. Vírus sa prichytí na bunkovú stenu baktérie a vstrekne do bunky svoj genetický materiál. V dôsledku toho začína syntéza nových vírusov a potom dochádza k lýze bakteriálnej bunky a uvoľneniu 200-1000 nových fágov, ktoré infikujú iné baktérie. Keď sú všetky baktérie patogénneho kmeňa zničené, bakteriofágy sú vylúčené z tela bez stopy. Mnohé bakteriofágy sú vysoko špecifické a každý kmeň vírusu infikuje len určitý typ baktérií bez ovplyvnenia iných mikroorganizmov a buniek tela. To poskytuje významné zníženie počtu vedľajších účinkov.

Teda k nepochybným výhodám použitie bakteriofágov možno pripísať:

Vysoký bezpečnostný profil, ktorý umožňuje ich použitie u pacientov v akomkoľvek veku, od novorodencov až po veľmi starých ľudí;

Zníženie rizika vzniku rezistentných kmeňov baktérií;

Možnosť ich kombinácie s akýmikoľvek inými liekmi vrátane antibiotík.

Snáď jediná vec, ktorá obmedzuje použitie bakteriofágov, je ich selektivita, kvôli ktorej je potrebné pred liečbou objasniť povahu patogénu a jeho citlivosť na rôzne druhy bakteriofágy. Takáto analýza sa v žiadnom prípade nevykonáva všade a trvá určitý čas, ale zlepšenie diagnostických systémov nám umožňuje dúfať, že tento problém bude možné čoskoro vyriešiť.

Od teórie k praxi

Existovať odlišné typy bakteriofágy: monofágy zamerané na ničenie iba jedného typu baktérií a polyfágy, pôsobiace na niekoľko druhov naraz patogénne baktérie. Keďže bakteriofágy sú mimoriadne žiadané takmer vo všetkých oblastiach medicíny, od chirurgie a gynekológie až po neonatológiu a ORL prax, uvoľňovanie bakteriofágov v r. rôzne formy. Používajú sa na orálne podávanie reg os, vo forme klystírov, aplikácií, výplachov, na zavedenie do dutiny rán, vagíny, maternice, nosa, dutín, ako aj na zavedenie do drenážnych dutín - brušných, pleurálnych, močového mechúra, obličkovej panvičky. Trvanie kurzu závisí od klinických indikácií a môže byť 7-20 dní. Bezpečné, účinné a spoľahlivé bakteriofágy sú presne tou zbraňou, ktorá je taká potrebná v boji proti patogénnym baktériám.

Nielen medicína

Pokrok v molekulárnej biológii a biotechnológii umožnil využiť bakteriofágy nielen na liečbu, ale aj na iné účely. Napríklad v Spojených štátoch sa bakteriofágy používajú ako bezpečný konzervačný prostriedok produkty na jedenie. Bakteriofágy pridané do potravín zabraňujú rastu nežiaducich baktérií.

Zaujímavosti

K objavu bakteriofágov došlo v roku 1894, keď si britský bakteriológ Ernest Hankin všimol, že indické rieky Ganga a Jumna majú významný antibakteriálna aktivita, ktorý po prevarení úplne zmizne. Navrhol, že vo vode je nejaká látka, ktorá zabíja baktérie. Názov "bakteriofág" ("požierač baktérií") dostali tieto vírusy v roku 1917 od francúzskeho vedca Felixa d'Herelle, ktorý objavil "neviditeľný mikrób, ktorý infikuje bacil úplavice." Objasnenie podstaty tejto „neviditeľnosti“ bolo možné až po nástupe elektrónovej mikroskopie.

Úspechy moderná medicína a liečivá sú skvelé, ale aj patogény sa neustále zlepšujú a prispôsobujú pôsobeniu tých liekov, ktoré boli pre nich pred pár rokmi smrteľné. Tam, kde sú antibiotiká bezmocné, bakteriofágy pomôžu bojovať proti patogénnym mikroorganizmom.

Čo sú bakteriofágy

V doslovnom preklade zo starovekej gréčtiny sú bakteriofágy požierači baktérií. Tento biologický termín označuje vírusy, ktoré selektívne infikujú bakteriálne bunky.

Bakteriofágy sú prítomné všade tam, kde baktérie žijú, takže ich biotopom môže byť vzduch, voda, pôda, ľudské telo, jedlo, oblečenie.

Štrukturálne znaky bakteriofága: takýto vírus nemá bunkovej štruktúry, existuje len genetický materiál pokrytý proteínovým plášťom na vrchu. Na rozmnožovanie preto musia hľadať vhodné bunkové mikroorganizmy.

Fág začína svoju deštruktívnu aktivitu pre baktériu vstreknutím vlastnej genetickej informácie do jej tela a potom pokračuje v aktívnej reprodukcii. Keď je bakteriálna bunka zničená, prostredníctvom jej fragmentov sa objaví 100 až 200 nových bakteriofágov, ktoré okamžite začnú napádať blízke baktérie.

Druhy

Najznámejšie bakteriofágy:

• dysenterický;
• stafylokokové;
• streptokok;
• draslík;
• pseudomonadický;
• Pseudomonas aeruginosa.

Výhody

Niektorí vedci tvrdia, že používanie liekov na báze bakteriofágov bude čoskoro konkurovať používaniu antibiotík pri liečbe rôznych chorôb.

Základom tohto odvážneho predpokladu sú nasledujúce výhody použitia fágov:

• nedostatok závislosti a kontraindikácie užívania drogy;
• žiadny inhibičný účinok na imunitný systém;
• selektívne pôsobenie (prospešná bakteriálna flóra zostáva nedotknutá);
• harmonická kombinácia s inými metódami liečby, vrátane terapie antibiotikami (podľa výsledkov výskumu fágy dokonca zvyšujú svoj účinok);
• výrazný účinok pri liečbe pomalosti bolestivé stavy spôsobené bakteriálnymi činidlami necitlivými na antibiotiká.

To umožňuje úspešne použiť bakteriofág pre deti, starších ľudí, tehotné ženy, oslabených pacientov.

Indikácie

Indikácie pre zahrnutie bakteriofágov do liečebného režimu sú nasledujúce infekcie:

• chirurgické (absces, zločinec, paraproktitída, osteomyelitída, vriedky, popáleniny, flegmóna, karbunky, hnisavé rany);
• urogenitálne (cystitída, pyelonefritída, kolpitída, uretritída, endometritída, salpingo-ooforitída);
• enterálne (cholecystitída, gastroenterokolitída, črevná dysbakterióza);
• otrava krvi;
• ochorenia orgánov ORL (tonzilitída, sinusitída, zápal stredného ucha);
• choroby dýchacieho traktu a pľúca (tracheitída, zápal pohrudnice, laryngitída, bronchitída, zápal pľúc).

Spôsoby aplikácie

Spôsob, akým by sa mal bakteriofág aplikovať, priamo závisí od povahy a lokalizácie ohniska zápalu. AT rôzne situácie Vhodné by boli nasledujúce použitia:

• perorálne (liek sa užíva ústami);
• rektálne (klystírový bakteriofág);
• lokálne (vo forme umývania, pleťových vôd, zavlažovania, instilácie, oplachovania, zavádzania turundov namočených v lieku).

Bakteriofág funguje efektívnejšie, ak sa liečba kombinuje rôzne cesty aplikácie. Existujú isté klinické indikácie, podľa ktorého sa bakteriofág užíva perorálne v tabletách, a miestna akcia robí bakteriofágovú tekutinu vo forme pleťovej vody.

Lieky na báze bakteriofágov získavajú na popularite vo forme roztokov, aerosólov, tabliet, čapíkov a gélov. Lekárenské formuláre sú dodávané lieky podrobné pokyny ako užívať bakteriofág.

Kontraindikácie

Väčšina ľudí s istou mierou nedôvery zvažuje možnosť liečby bakteriofágmi, hoci účinnosť a hlavne bezpečnosť takejto terapie je už preukázaná.

jediný možná kontraindikácia možno precitlivenosť na bakteriofágy, hoci prípady Alergická reakcia na bakteriofágoch nie sú typické.

Bakteriofágové prípravky

Farmaceutický priemysel ponúka veľa liekov, ktorých princíp účinku je založený na antimikrobiálnej orientácii bakteriofágov.

• Intesti-bakteriofág (Intestifag)

  

  Kvapalina imunobiologický prípravok antimikrobiálne zameranie. Inhibuje aktivitu mikroorganizmov, choroboplodný gastrointestinálny trakt ( bacilárna dyzentéria brušný týfus, enterokolitída, paratýfus, dysbakterióza, salmonelóza). Používa sa vnútorne a ako klystír. Kontraindikácie: precitlivenosť na liek. Vedľajšie účinky: u novorodencov v prvých 2 dňoch prijatia sú možné kožné vyrážky a regurgitácia.

• Polyvalentný pyobakteriofág (Sextafág)

  

  Úspešne zvláda hnisavé-septické ochorenia novorodencov a dojčiat, hnisavé zápalové ochorenia horných dýchacích ciest, enterálne infekcie. Používa sa na liečbu čerstvo infikovaných rán. Neexistujú žiadne kontraindikácie a vedľajšie účinky.

• Bakteriofág Klebsielovej pneumónie (Klebsifag)

  

  Ovplyvňuje baktérie, ktoré spôsobujú zápal pľúc, ozeny, rinosklerómy. Pomáha tiež pri všeobecných septických stavoch, aby sa zabránilo kontaminácii. nozokomiálne kmene Klebsiell. Neexistujú žiadne vedľajšie účinky. Kontraindikácie: precitlivenosť na zložky.

• Bakteriofág Salmonella

  

  Ničí bunky Salmonella a im podobné mikroorganizmy v antigénnej štruktúre. Vhodné na liečbu salmonelózy u detí a dospelých. Neexistujú žiadne kontraindikácie a vedľajšie účinky.

• Bakteriofág Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa)

  

  Používa sa na ošetrenie poranení rôzne telá Pseudomonas aeruginosa. Vedľajšie účinky nezistené. Kontraindikácia - precitlivenosť na liek.

• Streptokokový bakteriofág (streptofág)

  

  Zabíja streptokokové baktérie, vďaka čomu sú prípravky na jeho základe nevyhnutné pri liečbe angíny, angíny, sinusitídy, panarícia, hnisavých rán a mnohých ďalších ochorení. Na liečbu sínusitídy sa odporúča pochovať tento bakteriofág v nose. Neexistujú žiadne vedľajšie účinky. Kontraindikácie: precitlivenosť na liečivo.

• bakteriofág coli

  

  Má špecifický antibakteriálny účinok namierený výlučne proti patogénnym kmeňom coli. Predpisuje sa na lézie gastrointestinálneho traktu, hnisanie rán, novorodeneckú sepsu, konjunktivitídu, urogenitálne infekcie. Kontraindikácie: precitlivenosť na liečivo. Neboli zistené žiadne vedľajšie účinky.

• Bakteriofág Klebsiella polyvalentný

  

  Účinné pri liečbe zápalu pobrušnice, pleurisy, hnisavých zápalových ochorení v gynekológii. Používa sa aj pri liečbe stomatitídy, paradentózy a zápalu prínosových dutín. Neexistujú žiadne vedľajšie účinky. Kontraindikácia - precitlivenosť na zložky lieku.

• Bakteriofág Coliproteus

  

  AT tekutá forma v dopyte po prevencii a liečbe kolpitídy, enterokolitídy. Vo forme tabliet sa častejšie používa pri pokročilých formách pyelonefritídy a cystitídy, zápalové procesy v panvových orgánoch. Kontraindikácie: alergia na niektorú z jeho zložiek lieku. Neexistujú žiadne vedľajšie účinky.

• Dysenterický bakteriofág

  

  Používa sa na liečbu a prevenciu dyzentérie. Vedľajšie účinky neboli zistené. Kontraindikácie: precitlivenosť na zložky a na formu lieku v tabletách - vek pacienta je menej ako 1 rok, obdobie tehotenstva a laktácie.

Nepreháňajte nebezpečenstvo vírusov, ktoré tvoria podobné lieky a bakteriofágové analógy. Smrteľné sú len pre baktérie, choroboplodný. Ak lekár uzná za vhodné zaradiť bakteriofágy do liečebného režimu, mali by ste dôverovať a naladiť sa na rýchle uzdravenie.

Použitie bakteriofágov sa vykonáva výlučne na určený účel a pod dohľadom ošetrujúceho lekára.

bakteriofágy v lekárska prax používa sa pri diagnostike, liečbe a prevencii infekčných chorôb.

A. V diagnostike sa bakteriofág využíva pri realizácii kultúrnej metódy výskumu na určenie typu izolovanej čistej kultúry, ako aj na jej typizáciu. Nasledujúca metóda použitia bakteriofága na indikáciu prítomnosti v patologickom materiáli určitý druh baktérie bez jej izolácie v čistej kultúre sa veľmi nepoužíva.

1. Reakcia zvýšenia fágového titra je založená na schopnosti špecifického bakteriofága replikovať sa iba v bakteriálnych bunkách svojho „vlastného“ druhu. Vykonáva sa podľa nasledujúceho princípu. K patologickému materiálu sa pridá určité množstvo špecifického bakteriofága, ten sa inkubuje v termostate a potom sa opäť stanoví množstvo fágu. Ak sa zvýšil, znamená to, že bakteriofág "našiel" bunky "vlastného" druhu na replikáciu, preto sú v patologickom materiáli prítomné baktérie požadovaného druhu.

2. V procese identifikácie čistej kultúry sa používajú druhové a typové bakteriofágy.
a. Na fágovú indikáciu sa používajú druhové bakteriofágy. Oddaný čistá kultúra naočkujte trávnik na tanierový agar a kvapnite naň kvapku bakteriofága druhu. Ak kultúra patrí k požadovanému druhu, potom v mieste aplikácie kvapky nedôjde k rastu, inak sa v mieste aplikácie kvapky pozoruje fág. rast baktérií. Niekedy po aplikácii bakteriofága sa Petriho miska s agarovou platňou nakloní, čo umožní kvapke stekať po okraji misky (preto sa táto metóda nazýva „kvapkanie“).

b. Na typizáciu fágov sa používajú typické bakteriofágy. Princíp metódy je nasledujúci.
1. Kmeň, ktorý sa má typizovať, sa naočkuje trávnikom na tanierový agar.
2. Potom sa na naočkovaný povrch nakvapkajú kvapky typických bakteriofágov (každý do svojho štvorčeka, vopred označeného napr. skleneným grafom na dne Petriho misky).
3. Inokulačná miska sa inkubuje v termostate.
4. Skúsenosti sa zohľadňujú pri registrácii „sterilných škvŕn“ alebo „plakov“ – miesta nedostatočného rastu v mieste aplikácie kvapky bakteriofága, na ktoré je citlivý túto možnosť baktérie.
5. Fagovar (fagotyp) je označený zoznamom typických fágov, ktoré lyzujú tento variant.
B. Použitie bakteriofágov (zvyčajne druhov) na liečbu sa označuje ako fágová terapia. Za účelom liečby sa bakteriofágy aplikujú lokálne (vo forme výplachu postihnutého povrchu, injekciou do lokálneho ložiska patologický proces atď.), pretože ich parenterálne podanie vedie k rozvoju imunitnej odpovede na cudzí fágový proteín. Ak sa terapeutický bakteriofág používa perorálne (na liečbu črevné infekcie), vtedy je najlepšie použiť tabletovú formu lieku, obalenú kyselinovzdorným obalom, ktorý sa rozpúšťa v zásaditom prostredí čreva – bakteriofágy sú veľmi citlivé na nízke pH a v kyslom prostredí žalúdka sa rýchlo inaktivujú .
B. Fágová profylaxia - použitie bakteriofága (tiež spravidla druhový fág) na zabránenie vzniku bakteriálna infekcia. V súčasnosti sa používa na núdzovú prevenciu brušný týfus a úplavica (pod núdzová prevencia sa chápe ako súbor opatrení na zabránenie vzniku ochorenia po prebehnutí aktu infekcie, t.j. vstup patogénu do tela pacienta).

1. V medicíne:

Jednou z oblastí použitia bakteriofágov je antibiotická terapia alternatíva k užívaniu antibiotík. Používajú sa napríklad bakteriofágy: streptokoky, stafylokoky, klebsiella, polyvalentná dyzentéria, pyobakteriofágy, coli, proteus a coliproteus a iné.

Bakteriofágy sa tiež používajú v genetickom inžinierstve ako vektory, ktoré prenášajú segmenty DNA, je to tiež možné prirodzený prenos génov medzi baktériami prostredníctvom niektorých fágov (transdukcia).

2. V biológii

Bakteriofágy M13, fág T4, T7 a fág l sa používajú na štúdium interakcií proteín-proteín, proteín-peptid a DNA-proteín pomocou fágového displeja.

Keďže reprodukcia bakteriofágov je možná len v živých bunkách, na určenie životaschopnosti baktérií sa môžu použiť bakteriofágy. Tento smer má veľkú perspektívu, keďže jednou z hlavných otázok v rôznych biotechnologických procesoch je stanovenie životaschopnosti použitých kultúr.

VÝHODY BAKTERIOfágov oproti antibiotikám:

• vysoko efektívny biologické prípravky antibakteriálne pôsobenie na prevenciu a liečbu akútnych črevných infekcií a purulentno-zápalových ochorení, liečbu dysbakteriózy;
• pri aplikácii neporušujú normálna biocenózačlovek (na rozdiel od antibiotík, po ktorých je vždy potrebné liečiť dysbakteriózu – pozn. autora);
• Nepostrádateľný pri rezistencii patogénov na antibiotiká;
• Možno aplikovať v komplexná terapia s ostatnými lieky;
• nevyhnutné pri liečbe dysbakteriózy v kombinácii s liekmi, ktoré normalizujú črevnú mikroflóru;
• Odporúča sa pre dospelých a deti
• · Vyrobené z prírodných surovín.

K výhodám bakteriofágové prípravky zahŕňajú úzku špecifickosť účinku, ktorý na rozdiel od antibiotík nespôsobuje útlak normálnej mikroflóry. Osvedčený stimulačný účinok stafylokokový bakteriofág na bifidobaktérie - podstatnú zložkučrevná mikrobiocenóza. Použitie bakteriofágov na liečbu infekčných ochorení stimuluje faktory špecifickej a nešpecifickej imunity, čo je obzvlášť účinné pri liečbe chronických zápalových ochorení na pozadí imunosupresívnych stavov, bakterionosičov.

Antibiotiká aj bakteriofágy pôsobia priamo na mikróby, len antibiotiká ničia nielen patogénne, ale aj normálna mikroflóra, lámanie prirodzená rovnováha, kým bakteriofágy pôsobia len na patogénne mikroorganizmy. Keď sa fág stretne s citlivou mikrobiálnou bunkou, prenikne do nej, prepne svoj mechanizmus pôsobenia na reprodukciu vlastného druhu, ktorý po rozbití bunkovej membrány desaťnásobne napadne ostatné mikróby. Lýza sa stáva spontánnou a k uvoľneniu nežiaducich mikróbov dochádza v priebehu niekoľkých hodín. Treba to tiež spomenúť komplexné prípravky, ktoré sú súborom fágov pre niekoľko patogénov naraz: ide o pyobakteriofágy na liečbu hnisavé-septické ochorenia a intestibakteriofág proti črevným infekciám.

Hlavnými výrobcami bakteriofágov v našej krajine sú NPO "Immunopreparat" (Ufa), podnik na výrobu bakteriálnych prípravkov ( Nižný Novgorod), poslanec "Biofon" (Saratov), ​​​​NPO "Biomed" (Perm).

Klinická prax preukázala účinnosť použitia bakteriofágov pri infekčných ochoreniach tráviaceho traktu, ako aj v r. zápalové ochorenia dutiny, ústna dutina, horné dýchacie cesty, genitourinárny systém cholecystitída atď., spôsobená baktériami citlivými na fág. Fágy, tieto „prirodzené poriadky“, však možno využiť nielen na liečbu, ale aj na prevenciu infekčných chorôb. Sú netoxické, nemajú žiadne kontraindikácie na použitie, môžu sa používať v kombinácii s akýmikoľvek inými lieky. Môžu byť predpísané tehotným ženám, dojčiacim matkám a deťom v akomkoľvek veku, vrátane predčasne narodených detí.

Hlavnou podmienkou ich úspešnej aplikácie je testovanie citlivosti izolovanej kultúry na príslušný fág. Odporúčané úžasný vzor: na rozdiel od antibiotík je citlivosť klinických kmeňov mikroorganizmov na bakteriofágy stabilná a má tendenciu sa zvyšovať, čo možno vysvetliť obohatením lekárske prípravky nové rasy fágov.

Pri ochoreniach sa perorálne predpisujú bakteriofágové prípravky vnútorné orgány alebo lokálne, priamo na léziu. Pôsobenie fága sa prejavuje už 2-4 hodiny po jeho zavedení (čo je dôležité najmä v intenzívnej starostlivosti). Bakteriofágy prenikajú do krvi, lymfy a vylučujú sa obličkami a dezinfikujú močové cesty. V 20. rokoch 20. storočia sa fágy aktívne používali pri liečbe rôznych chorôb.