Dijagram probira spremnika za dizenteriju. Laboratorijska dijagnostika dizenterije (pregled literature)

Dizenterija je teška crijevna infekcija koju karakterizira akutni početak. Mikrobiološka dijagnostika dizenterija sastoji se u izolaciji patogena iz fekalnih masa pacijenta sjetvom u poseban hranjivi medij. Bolest je potrebno razlikovati od drugih crijevnih bolesti i otrovanja. Rana dijagnoza i pravodobno liječenje pomoći će izbjeći komplikacije.

Važnost pravovremene dijagnoze

Prepoznavanje dizenterije u praksi nije tako lako jer postoje zarazne i nezarazne bolesti sa sličnim kliničkim manifestacijama. Karakteristična značajka uzročnika dizenterije (shigella) je sposobnost promjene otpornosti na antibakterijske lijekove. Nepravovremeno dijagnosticirana bolest dovest će do infekcije veliki broj od ljudi. Zlouporaba antibiotika razlog je pojave rezistencije kod bakterija, što dovodi do masovnih infekcija i epidemija smrtni slučajevi. Izvor infekcije su bolesnici i kliconoše bakterija koje fekalijama izlučuju patogene mikroorganizme. Trajanje inkubacije dizenterija - 2-3 dana.

Klinički simptomi bolesti

• Iznenadna groznica s tjelesnom temperaturom od 40 stupnjeva ili više.
• Proljev više od 10 puta dnevno.
• Pojava u stolici krvi, sluzi, in rijetki slučajevi gnoj.
• Gubitak apetita do potpune odsutnosti.
• Mučnina i povračanje.
• Rezanje u abdomenu i desnom hipohondriju.
• Bol u rektumu.
• Dehidracija.
• Suhi jezik s bijelom prevlakom.
• Aritmija.
• Smanjeni krvni tlak.
• Poremećaji svijesti.

Dijagnostički postupci

Liječnik postavlja dijagnozu dizenterije tek nakon provedenih istraživanja.

Dijagnostika bolesti uključuje općeprihvaćene i posebne metode koje utvrđuju ne samo konačna dijagnoza, ali i procjena stupnja poremećaja probavnih organa. Kod dizenterije dijagnoza se postavlja na temelju epidemiološke slike bolesti, klinički simptomi i provedeno istraživanje. Glavna laboratorijska dijagnostika je analiza izmeta za mikrobiologiju, sjetva do 80% patogena. Serološka metoda provodi se ne prije 5. dana bolesti, ova vrsta studije nadopunjuje, ali ne zamjenjuje mikrobiološku analizu. Ostale metode:

• Koprološki pregled je jednostavna i pristupačna klinička metoda kojom se otkrivaju sluz, krvne mrlje, eritrociti, neutrofili (do 50 po vidnom polju) i promijenjene epitelne stanice.
• Sigmoidoskopija - omogućuje vam praćenje procesa ozdravljenja. Nije primjenjivo na djecu.
• Metoda ispitivanja alergije - pomoćna metoda, na temelju uzimanja alergijskog kožnog testa s dizenterijom (Tsuverkalovljeva metoda).

Opća analiza krvi

Imunološke stanice uništavaju uzročnike dizenterije čak iu crijevima, a teži slučajevi bolesti nastaju kada bakterija uđe u limfne čvorove, nakon čega slijedi ulazak u krvotok. Krvni test za dizenteriju procjenjuje stanje pacijenta i omogućuje vam da na vrijeme reagirate moguće komplikacije. Povećanje sedimentacije eritrocita je laboratorijski pokazatelj koji karakterizira stupanj upale. Također, dizenterija uzrokuje povećanje koncentracije ubodnih neutrofila i monocita.

Kako donirati izmet za koprogram?

Za potvrdu bolesti provodi se analiza stolice. Coprogram - detaljna laboratorijska studija koja procjenjuje rad gastrointestinalnog trakta, brzinu i učinkovitost probave i rad crijeva. Laboratorijske metode ispitivanja izmeta otkrivaju fizikalne i Kemijska svojstva izmet, sastav, prisutnost stranih organizama i inkluzija. Zahtjevi za prikupljanje stolice:

• Materijal se uzima nakon prirodnog čina defekacije.
• Sakupljanje se vrši u posebnom spremniku.
• Zabranjeno je uzimati biološki materijal dobiven kao rezultat klistira za ispitivanje izmeta na dizenteriju.
• Prije studije zabranjeno je koristiti pripravke željeza, staviti rektalne čepiće, uzimati laksative i piti alkoholna pića.

Mikrobiološka dijagnostika

Sjetva u spremniku za dizenteriju točno određuje vrstu patogena.

Bakteriološka dijagnostika - prikupljanje fekalnih tvari i naknadno sijanje izmeta u poseban hranjivi medij. Pojava kolonija patogenih bakterija (shigella) nakon sjetve potvrđuje predloženu dijagnozu. Bakteriološka analiza za dizenteriju točno određuje patogen, njegovu vrstu, podvrstu i osjetljivost na antibakterijska sredstva, što vam omogućuje da odaberete pravi lijek za liječenje.

Istraživani materijal - dobiveni izmet sa stranim nečistoćama prirodno ili posebna cijev za sigmoidoskopiju. U djece se bris uzima posebnim tuferom (bris za VD ili bris za crijevnu skupinu). Utvrditi osjetljivost na lijekove postavljanjem kolonija Shigella uz razne antibiotike. Ako se vitalna aktivnost mikroorganizama nastavi u blizini tablete antibiotika, tada se lijek ne koristi za liječenje, ako mikroorganizmi umru, propisano je liječenje takvim antibiotikom.

Serološki testovi na dizenteriju

U slučaju negativnih ili dvojbenih rezultata bakteriološke pretrage, koristi se serološka metoda. NA izmet pacijent se otkriva bakterijskim antigenom, au plazmi - specifičnim protutijelima. Da biste utvrdili titar antitijela, možete koristiti metodu RIGA, ponekad - RPHA ili RA. Kao antigeni koristi se suspenzija dnevne kolonije šegela. Minus metoda - pouzdane rezultate primiti samo 5 dana od početka bolesti, kada koncentracija antitijela dosegne željenu razinu.

Sigmoidoskopija

S obzirom na to da uzročnik dizenterije zahvaća debelo crijevo, sigmoidoskopija je značajna dijagnostička metoda, ali ne i odlučujuća. Dijagnoza se sastoji u uvođenju rektoskopa opremljenog uređajem za dovod zraka u anus. Oteklina, crijevna šupljina postaje dostupna za istraživanje. Ova metoda pomaže u procjeni stupnja oštećenja crijevnog epitela. S dizenterijom, stijenke crijeva su hiperemične kao rezultat vazodilatacije. Na pojedinim segmentima stvaraju se erozije i krvarenja. Sigmoidoskopija ne zahtijeva pripremu, ali se postupak ne provodi ako postoje analne fisure ili patologije anusa.

Metodičke upute studentima za praktičnu nastavu br.28.

Tema lekcije:

Cilj: Proučavanje metoda mikrobiološke dijagnostike, etiotropne terapije i prevencije šigeloza.

Modul 2 . Specijalna, klinička i ekološka mikrobiologija.

Tema 5: Metode mikrobiološke dijagnostike dizenterije.

Relevantnost teme:Šigeloza je sveprisutna i je ozbiljan problem u zemljama s niskom sanitarnom kulturnom razinom i visokom učestalošću pothranjenosti i loše prehrane. U zemljama u razvoju širenju infekcije pogoduju loši sanitarni uvjeti, loša osobna higijena, prenapučenost i veliki udio djece u populaciji. U Ukrajini su izbijanja šigeloze češća u zatvorenim zajednicama s lošim sanitarnim i higijenskim uvjetima, kao što su jaslice i vrtići, turistički brodovi, psihijatrijske klinike ili skloništa za osobe s invaliditetom. Shigella je uzrok proljeva putnika i turista.

Uzrok skupnih bolesti može se smatrati korištenjem prehrambenih proizvoda zaraženih nemarom trgovačkih radnika koji su nositelji shigella. Postoje izbijanja povezana s korištenjem vode za piće, a plivanje u zagađenim rezervoarima također je dovelo do infekcije. Međutim, čini se da put prijenosa hranom i vodom ima manju ulogu u širenju šigeloze u usporedbi s kolerom i trbušnim tifusom, kod kojih su obično potrebne velike doze patogena da bi se osoba zarazila. U zemljama u razvoju, gdje se bolest pretežno prenosi s osobe na osobu, kliconoše mogu biti važan rezervoar uzročnika infekcije. U bolesnika koji nisu uzimali antibakterijske lijekove izlučivanje šigela fecesom obično traje 14 tjedana, ali u manjem broju slučajeva traje i znatno dulje.

Šigeloza je akutna bakterijska infekcija crijeva uzrokovana jednom od četiri vrste Shigella. Spektar kliničkih oblika infekcije kreće se od blagog, vodenastog proljeva do teške dizenterije koju karakteriziraju grčevi u trbuhu, tenezmi, vrućica i znakovi opće intoksikacije.

Etiologija.

Rod Shigella (nazvan po K. Shigi, koji je 1898. godine detaljno proučavao i opisao izoliranog uzročnika bakterijske dizenterije A.V. Grigoriev) iz obitelji Enterobacteriaceae sastoji se od skupine blisko povezanih bakterijskih vrsta sa sljedećim svojstvima:

ja Morfološki: šigela - male štapiće sa zaobljenim krajevima. Razlikuju se od ostalih predstavnika obitelji Enterobacteriaceae u odsutnosti flagela (nepokretnih), nemaju spore i kapsule i gram-negativne su.

II. Kulturni: šigele su aerobi ili fakultativni anaerobi; optimalni uvjeti temperatura uzgoja 37°C, pH 7,2-7,4. Rastu na jednostavnim hranjivim podlogama (MPA, MPB) u obliku malih, sjajnih, prozirnih, sivkastih, okruglih kolonija, veličine 1,52 mm. S oblik. Izuzetak su Sonneove šigele, koje se često odvajaju, stvarajući velike, ravne, zamućene kolonije s neravnim rubovima. R forme (kolonije izgledaju kao „lišće grožđa“). U tekućim hranjivim podlogama Shigella daje jednoliku mutnoću, R oblici tvore talog. Tekući medij za obogaćivanje je selenitni bujon.

III. Enzimski: glavne biokemijske značajke potrebne za identifikaciju šigele u izolaciji čiste kulture su sljedeće:

1. nedostatak stvaranja plina tijekom fermentacije glukoze;
2. nema proizvodnje sumporovodika;
3. nema fermentacije laktoze unutar 48 sati.

Sveukupno, četiri vrste dalje su podijeljene u približno 40 serotipova. Prema karakteristikama glavnih somatskih (O) antigena i biokemijskim svojstvima razlikuju se sljedeće četiri vrste ili skupine: S. dysenteriae (skupina A, uključuje: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri (skupina B), S. boydii (skupina C) i S. sonnei (skupina D).

U odnosu na manitol, sve šigele se dijele na cijepajuće (Flexner, Boyd, Sonne shigella) i necijepajuće (Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs shigella) manitol.

IV. Faktori patogenosti:

1. Invazija plazmidaosigurava sposobnost šigele da izazove invaziju s naknadnim međustaničnim širenjem i razmnožavanjem u epitelu sluznice debelog crijeva;
2. stvaranje toksina: Shigella ima lipopolisaharidni endotoksin, koji je kemijski i biokemijski sličan endotoksinima drugih članova obitelji Enterobacteriaceae. Osim toga, S. dysenteriae tip I (Shigin bacil) proizvodi egzotoksin. Od otkrića potonjeg, utvrđeno je da ima enterotoksinsko djelovanje i može izazvati crijevnu sekreciju, kao i citotoksični učinak protiv crijevnih epitelnih stanica; ima neurotoksični učinak, koji je zabilježen kod djece sa šigelozom. Shiga toksin, ulazeći u krv, uz oštećenje submukoznog endotela, utječe i na glomerule bubrega, zbog čega se, uz krvavi proljev, razvija hemolitički uremijski sindrom s razvojem zatajenja bubrega.

V. Antigenska struktura:Sve šigele imaju somatski O-antigen, ovisno o čijoj strukturi se dijele na serovare.

VI. Otpornost: Temperatura 100 0 C trenutno ubija šigelu. Šigele su otporne na niske temperature u riječna vodačuvaju se do 3 mjeseca, na povrću i voću - do 15 mjeseci.Pod povoljnim uvjetima, Shigella se može razmnožavati u prehrambeni proizvodi(salate, vinaigrettes, kuhano meso, mljeveno meso, kuhana riba, mlijeko i mliječni proizvodi, kompoti i žele), posebno Shigella Sonne.

Epidemiologija.

1. Izvor zaraze:Osoba koja pati od akutnog i kroničnog oblika šigeloze; bakterionosac.

2. Putevi prijenosa:

• Hrana (uglavnom za S. sonnei)
• Vodeni (uglavnom za S. flexneri)
• Kontakt kućanstvo (uglavnom za S. dysenteriae)

3. ulazna kapija infekcija služi gastrointestinalni trakt.

Patogeneza i patološke promjene.

Nakon gutanja, Shigella kolonizira gornje regije tanko crijevo i tamo se razmnožavaju, moguće uzrokujući pojačano izlučivanje ranoj fazi infekcije. Šigele potom prodiru kroz M stanice u submukozu, gdje ih progutaju makrofagi. To dovodi do smrti nekih šigela, što rezultira oslobađanjem upalnih medijatora, koji iniciraju upalu u submukozi. Apoptoza fagocita omogućuje drugom dijelu Shigella da preživi i prodre u epitelne stanice sluznice kroz bazalnu membranu. Unutar enterocita šigele se razmnožavaju i međustanično šire, što rezultira razvojem erozija. Uginućem Shigelle oslobađaju se Shige i shigi slični toksini čije djelovanje dovodi do intoksikacije. Poraz sluznice prati oticanje, nekroza i krvarenje, što uzrokuje pojavu krvi u stolici. Osim toga, toksin utječe na središnji živčani sustav, što dovodi do trofičkih poremećaja.

Kliničke manifestacije.

Spektar kliničkih manifestacija šigeloza vrlo je širok, od blagog proljeva do teške dizenterije s grčevitim bolovima u trbuhu, tenezmima, vrućicom i općom intoksikacijom.

Trajanje inkubacijekreće se od nekoliko sati do 7 dana, najčešće 2-3 dana.U početku pacijenti imaju vodenastu stolicu, groznica (do 41 °C), difuzna bol u abdomenu, mučnina i povraćanje. Uz to, pacijenti se žale na mialgiju, zimicu, bolove u leđima i glavobolju. Narednih dana od početka bolesti javljaju se znaci dizenterije - tenezmi, učestale, oskudne, krvavo-sluzave stolice. Tjelesna temperatura postupno opada, bol se može lokalizirati u donji kvadranti trbuh. Intenzitet proljeva doseže maksimum oko kraja 1. tjedna bolesti. Dizenterija s krvavim stolicama je češća i pojavljuje se ranije u bolesti uzrokovanoj S. dysenteriae tipa I nego u drugim oblicima šigeloza.

Za šigelozu Sonne karakterističan je blaži tijek bolesti (gastroenterična ili gastroenterokolitička varijanta). Grozničavo razdoblje je kraće, učinci intoksikacije kratkotrajni, a destruktivne promjene na sluznici crijeva nisu tipične.

Shigellosis FlexnerU osnovi su karakteristične dvije varijante kliničkog tijeka - gastroenterokolitička i kolitis.

Ekstraintestinalne komplikacije kod šigelozerijetko:

1. Komplikacija šigeloze može biti razvoj crijevne disbakterioze.
2. Uz glavobolje, mogu postojati znakovi meningitisa i konvulzivnih napadaja.
3. Slučajevi periferne neuropatije opisani su kod infekcije S. dysenteriae tipa I, a slučajevi Guillain-Barréovog sindroma (polineuritis) prijavljeni su tijekom izbijanja gastroenteritisa S. boydii.
4. Uz iznimku distrofične djece, hematogena diseminacija uzročnika je relativno rijetka, a opisani su i slučajevi šigeloznih apscesa i meningitisa.
5. Kod šigeloze moguć je razvoj Reiterova sindroma s artritisom, sterilnim konjunktivitisom i uretritisom, obično se to događa nakon 1-4 tjedna od početka proljeva u bolesnika.
6. U djece je šigeloza popraćena hemolitičko-uremičkim sindromom, često udruženim s reakcijama sličnim leukemiji, teškim kolitisom i cirkulirajućim endotoksinom, no bakterijemija se obično ne otkrije.
7. Vrlo rijetko, gnojni keratokonjunktivitis uzrokovan je šigelom koja je ušla u oko kao rezultat samoinfekcije kontaminiranim prstima.
8. Hipovolemijski šok i DIC.
9. Peritonitis, intestinalna gangrena, intestinalno krvarenje.

Imunitet: Ljudi imaju prirodnu otpornost na šigelozu. Nakon prošle bolesti imunitet nije stabilan, a nakon shigellosis Sonne praktički nema. Uz bolest uzrokovanu Shigella Grigoriev Shigi, razvija se stabilniji antitoksični imunitet. Glavnu ulogu u zaštiti od infekcije ima sekretor IgA , sprječavanje adhezije i aktivnost intraepitelnih limfocita ovisnu o citotoksičnim antitijelima, koji zajedno sa sekretornim IgA ubiti šigelu.

Dijagnostika i laboratorijska istraživanja.

Svrha studije: detekcija i identifikacija šigela za dijagnozu; otkrivanje nositelja bakterija; otkrivanje šigele u hrani.

Istraživački materijal: izmet, sekcijski materijal, prehrambeni proizvodi.

Dijagnostičke metode:mikrobiološki (bakteriološki, mikroskopski (luminiscentni); serološki; biološki; alergotest.

Napredak istraživanja:

1 dan učenja:Kulture treba napraviti iz svježe izlučenog izmeta ili korištenjem rektalnih briseva (rektalna cijev); u nedostatku odgovarajućih uvjeta, materijal se mora staviti u transportno okruženje. Za to se treba koristiti enterički agar (McConkey ili Shigella-Salmonella medij), umjereno selektivni ksiloza-lizin-deoksikolat agar, KLD) i hranjivi bujon (selenitni bujon). Ako vrijeme između uzorkovanja i inokulacije prelazi 2 sata, treba upotrijebiti otopine konzervansa: 20% žučni bujon, kombinirani Kauffmannov medij.

• Izmet u glicerinskoj smjesi se emulgira, kap emulzije se nanese na medij i utrlja lopaticom. Diferencijalne podloge za Shigella su Ploskirev, Endo i EMS podloge (eozinmetilen plavi agar). Ploskirevljeva podloga (sastav podloge uključuje: MPA, laktozu, žučne soli i indikator briljantno zeleno) također je elektivna podloga za shigelle, jer inhibira rast Escherichie coli.
• Paralelno s direktnom sjetvom, sakupljeni materijal se sije na podlogu za obogaćivanje - selenitni bujon.
• Svi usjevi se stavljaju u termostat.

2. dan studije:

• Čašice se skinu s termostata, sumnjive kolonije pregledaju na Resselovoj podlozi (hranjiva podloga koja sadrži: agar-agar, Andrede indikator, 1% laktoze, 0,1% glukoze) i manitola. Sjetva se vrši potezima po kosoj površini i ubrizgavanjem u stupac agara. Inokulirana Resselova podloga stavlja se u termostat na 18-24 sata (paralelno se vrši presađivanje sa selenitne podloge na diferencijalno dijagnostičku podlogu).
• Napravite razmaze (bojenje po Gramu), mikroskopirajte.
• Pripremite pripravke "viseće" ili "zgnječene" kapi.
• Iskaz indikativnog RA s polivalentnim dijagnostičkim serumima za šigelozu.
• Sjetva sumnjivih kolonija na kosi agar.

3. dan studije:

• Mikroskopija kosog agar materijala.
• Kulture koje nisu fermentirale laktozu na Resselovom mediju podvrgavaju se daljnjem proučavanju: rade se razmazi (bojenje po Gramu), provjerava se čistoća kulture. U prisutnosti gram-negativnih štapića, sije se na Hissove medije, bujon s indikatorskim papirima (za otkrivanje indola i sumporovodika) i na lakmusovo mlijeko.
• Inokulirani medij se stavlja u termostat na 18-24 sata.

4. dan studije:

• Računovodstvo za kratku "šaroliku seriju".
• Kulture sumnjive zbog svojih enzimskih i kulturnih svojstava protiv Shigella podvrgavaju se serološkoj identifikaciji. Iskaz RA na staklu (tipični i skupni dijagnostički serumi). Postavljanje raspoređenog RA.

Kao ubrzane metode za shigellosis, primijenitifluorescentna mikroskopija i biološki uzorak(unošenje virulentnih sojeva Shigella u konjunktivalnu vrećicu (ispod donjeg kapka) zamorčića konjunktivitis se razvija do kraja 1. dana).

Alergijski test Zuverkalovintradermalni alergijski test s dizenterijom (uvođenje 0,1 ml dizenterije u podlaktici pozitivna reakcija u slučaju infiltracije i hiperemije). Alergološka dijagnostika trenutno se praktički ne koristi. Tsurvekalov test se ne razlikuje u specifičnosti, pozitivne reakcije bilježe se ne samo kod šigeloze, već i kod salmoneloze, escherichiosis, yersiniosis i drugih akutnih crijevnih infekcija, a ponekad i kod zdravih osoba.

Liječenje i prevencija.Bakteriofag se koristi za liječenje i prevenciju prema epidemiološkim indikacijama. oralna primjena, antibiotici nakon određivanja antibiograma; u slučaju disbakterioze pripravci probiotika za korekciju mikroflore. Za nadoknadu gubitka tekućine i elektrolita - uvođenje otopine glukoze i elektrolita unutra.

Specifični ciljevi:

Protumačiti biološka svojstva uzročnika šigeloza.

Upoznajte se s klasifikacijom Shigella.

Naučiti interpretirati patogenetske obrasce infektivnog procesa uzrokovanog shigellama.

Odrediti metode mikrobiološke dijagnostike, etiotropne terapije i prevencije šigeloza.

Biti u mogućnosti:

• Inokulirajte ispitni materijal na hranjive podloge.
  • Pripremite razmaze i obojite po Gramu.
  • Provedite mikroskopiranje preparata pomoću uronjenog mikroskopa.
  • Analizirati morfološke, kulturalne i enzimske značajke Shigella.

Teorijska pitanja:

1. Obilježja uzročnika šigeloza. biološka svojstva.

2. Klasifikacija šigela. Temeljna načela.

3. Epidemiologija, patogeneza i kliničke značajkešigeloza.

4. Laboratorijska dijagnostika.

5. Načela liječenja i prevencije šigeloza.

Praktični zadaci koji se izvode u nastavi:

1. Mikroskopiranje oglednih preparata iz čistih kultura uzročnika šigeloza.

2. Rad na bakteriološkoj dijagnozi šigeloze: proučavanje fekalnih kultura na Ploskirevovoj podlozi.

3. Potkultura sumnjivih kolonija na Resselovu podlogu i na BCH za određivanje stvaranja indola i H 2 S .

4. Skiciranje pokaznih pripravaka i sheme mikrobiološke dijagnostike šigeloza u protokolu nastave.

5. Registracija protokola.

Književnost:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Medicinska mikrobiologija, imunologija i virologija / Udžbenik za medicinska sveučilišta, St. Petersburg "Posebna literatura", 1998. - 592 str.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiologija / Udžbenik.-2. izdanje, dopunjeno. I dodatno - M .: Medicina, 1983, -512s.

3. Pjatkina K.D. Krivoshein Yu.S. Mikrobiologija s virologijom i imunologijom.- Kijev: In and shcha škola, 1992. - 431s.

4. Medicinska mikrobiologija / Uredio V.I. Pokrovski.-M.: GEOTAR-MED, 2001.-768s.

5. Vodič za praktični trening u mikrobiologiji, imunologiji i virologiji. Ed. M.P. Zykov. M. "Medicina". 1977. 288 str.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiologija. / Ed. F.K. Čerkez. M.: Medicina, 1986. 512 str.

7. Bilješke s predavanja.

Dodatna literatura:

1. Makijarov K.A. Mikrobiologija, virusologija i imunologija. Alma-Ata, "Kazahstan", 1974. 372 str.

2. Titov M.V. Zarazne bolesti. - K., 1995. 321s.

3. Shuvalova E.P. zarazne bolesti. - M.: Medicina, 1990. - 559 str.

4. BME, svezak 1, 2, 7.

5. Pavlovich S.A. Medicinska mikrobiologija u grafikonima: Zbornik. dodatak za liječnički in-drug. Mn.: Vysh. škola, 1986. 255 str.

Kratak smjernice za rad na praktičnoj nastavi.

Na početku sata provjerava se razina pripremljenosti učenika za nastavni sat.

Samostalni rad sastoji se od proučavanja klasifikacije šigela, analize sheme patogenetske i kliničke slike šigela. Proučavanje metoda laboratorijske dijagnostike šigeloza. Studenti provode sjetvu biomaterijala na hranjive podloge. Zatim se izrađuju mikropreparati, boje po Gramu, mikroskopiraju, skiciraju mikropreparati i daju potrebna objašnjenja. Sastav samostalnog rada uključuje i mikroskopiranje demonstracijskih preparata i njihovo skiciranje u protokolu nastavnog sata.

Na kraju sata provodi se probna kontrola i analiza konačnih rezultata samostalnog rada svakog studenta.

Tehnološka karta praktične nastave.

p/n	Faze	Vrijeme u minutama	Načini učenja	Oprema	Mjesto
	Provjera i ispravljanje početne razine pripreme za nastavu		Testni zadaci početne razine	Tablice, atlas	radna soba
	Samostalni rad		Graf logičke strukture	Imerzijski mikroskop, boje, predmetna stakla, bakteriološke petlje, hranjive podloge, Ploskirevljev medij, Resselov medij, "šarolika Hissova serija"
	Samoprovjera te korekcija savladanosti gradiva		Zadaci ciljanog učenja
	Test kontrola		Testovi
	Analiza rezultata rada

Ciljani zadaci učenja:

1. Od djeteta s akutnom crijevnom infekcijom uzet je izmet (izmet je uzet rektalnom sondom) koji sadrži sluz i gnoj. Koju ekspresnu dijagnostičku metodu treba koristiti?

A. ELISA.

b. GREBEN.

C. RA.

D. RSK.

E. RIA.

1. Uzročnik dizenterije izoliran je iz bolesnog djeteta s akutnom crijevnom infekcijom. Koje su morfološke značajke karakteristične za uzročnika?

A . Gram-negativni nepomični štapić.

B . Gram-pozitivna pokretna šipka.

C . Formira kapsulu na hranjivoj podlozi.

D . U vanjskom okruženju stvara spore.

E . Gram-pozitivni streptobacili.

3. Bolesnik koji je obolio prije tri dana i tuži se na temperaturu 38°C, bolove u trbuhu, česte tekuća stolica, prisutnost krvi u stolici, liječnik je klinički dijagnosticirao bakterijsku dizenteriju. Koju metodu mikrobiološke dijagnostike treba primijeniti u ovom slučaju i koji materijal uzeti od bolesnika za potvrdu dijagnoze?

A. Bakterioskopski kal.

B. Bakteriološka kal.

C. Bakterioskopska krv.

D. Bakteriološki urin.

E. Serološka krv.

4. Shigella Sonne je izolirana iz fecesa pacijenta. Koje je dodatno istraživanje potrebno za utvrđivanje izvora infekcije?

A . Provedite fagotipizaciju izolirane čiste kulture.

B . Odrediti antibiogram.

C . Postavite reakciju taloženja.

D . Postavite reakciju fiksacije komplementa.

E . Postavite reakciju neutralizacije.

5. U grupi turista (27 osoba) koji su pili vodu iz jezera nakon dva dana 7 osoba je dobilo simptome akutne dijareje. Koji materijal treba poslati u bakteriološki laboratorij za utvrđivanje etiologije ove bolesti?

A. Voda, stolica bolesnika.

B. Voda, krv bolesnika.

C. Prehrambeni proizvodi.

D. Urin.

E. Flegma.

6. Značajan nedostatak mikroskopske dijagnostičke metode za akutne crijevne infekcije je njezina nedovoljna informativnost zbog morfološkog identiteta bakterija iz obitelji Enterobacteriaceae . Što ovu metodu čini informativnijom?

A . radioimunotest.

B . Coombsova reakcija.

C . Vezani imunosorbentni test.

D . reakcija opsonizacije.

E . Reakcija imunofluorescencije.

7. 29-godišnji pacijent je hospitaliziran s napadima povraćanja, proljeva i tenezma. Izmet s komadićima sluzi i primjesom krvi. Bakteriološkim pregledom bakterija iz kolonija na Ploskirevovoj podlozi utvrđene su nepokretne, gram-negativne štapiće koje ne fermentiraju laktozu. Navedite uzročnika zaraznog procesa.

A. Shigella flexneri.

b. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. U mikrobiološki laboratorij dostavljena je zelena salata za koju se pretpostavlja da je uzročnik akutne crijevne infekcije. Koja se hranjiva podloga koristi za primarnu inokulaciju?

A . Žumanjak-solni agar, MPB.

b. MPA, MPB.

C . Selenit bujon, Endo, Ploskireva.

D . Juha od jetre, Roux medium.

E . Krvni agar, alkalni agar.

9. Kod mikrobioloških istraživanja mljeveno meso izolirane bakterije iz roda Shigella. Proučavanje kojih je svojstava mikroba dovelo do takvog zaključka?

A . Kulturno, tinktorijalno.

B . Antigeni, kulturni.

C . Saharolitik, proteolitik.

D . Antigeni, imunogeni.

E . Morfološki, antigenski.

10. Mikroskopskim pregledom bljuvotine uzete od bolesnika sa simptomima akutne crijevne infekcije utvrđene su nepokretne štapiće. U kojem se razmazu ili preparatu može proučavati pokretljivost bakterija?

A . U razmazu obojenom po Gramu.

B . U razmazu obojenom po Tsil - Nelsenu.

C . U pripremi "gusta kap".

D . U razmazu obojenom po Neisseru.

E . U pripravku "zgnječena kapljica".

Algoritam laboratorijski rad :

1. Proučavanje bioloških svojstava Shigella.

2. Upoznavanje s klasifikacijom šigela.

3. Analiza sheme patogenetskih i kliničkih manifestacija šigeloza.

4. Proučavanje metoda laboratorijske dijagnostike šigeloza.

5. Proučavanje osnovnih principa terapije i prevencije šigeloza.

1. Izrada fiksiranih preparata iz bakterijske kulture.
2. Bojanje mikropreparati po Gramu.
3. Mikroskopiranje mikropreparata S pomoću uronjenog mikroskopa, njihova analiza i skiciranje u protokolu sata.
4. Mi kromoskopija i analiza demonstracijskih preparata iz čistih kultura Shigella.
5. Skica pokaznih pripravaka i shema laboratorijske dijagnostike šigeloza u protokolu.
6. Formuliranje protokola.

Klasifikacija šigela, njihova svojstva. Patogeneza šigeloza.

Bakterijska dizenterija ili šigeloza je zarazna bolest uzrokovana bakterijama iz roda Shigella, koja se javlja s pretežnom lezijom debelog crijeva. Ime roda povezano je s K. Shigi, koji je otkrio jedan od patogena

dizenterija.

Taksonomija i klasifikacija. Uzročnici dizenterije pripadaju odjelu Gracilicutes, obitelji Enterobacteriaceae, rodu Shigella.

Morfologija i tinktorijalna svojstva. Shigella - gram-negativne šipke sa zaobljenim krajevima, duge 2-3 mikrona, debljine 0,5-7 mikrona (vidi sl. 10.1); ne stvaraju spore, nemaju flagele, nepokretni su. Kod mnogih sojeva nalaze se resice općeg tipa i genitalni pili. Neke šigele imaju mikrokapsulu.

Uzgoj. Dizenterijski štapići su fakultativni anaerobi. Oni su nezahtjevni za hranjive medije, dobro rastu na temperaturi od 37 ° C i pH od 7,2-7,4. Na gustim medijima stvaraju male prozirne kolonije, u tekućim medijima -

difuzna izmaglica. Selenitni bujon se najčešće koristi kao medij za obogaćivanje za uzgoj Shigella.

Enzimska aktivnost. Šigele imaju manju enzimsku aktivnost od ostalih enterobakterija. Oni fermentiraju ugljikohidrate uz stvaranje kiseline. Važna značajka koja omogućuje razlikovanje Shigella je njihov odnos prema manitolu: S. dysenteriae ne fermentira manitol, predstavnici skupina B, C, D su manitol-pozitivni. Biokemijski najaktivniji su S. sonnei, koji sporo (unutar 2 dana) mogu fermentirati laktozu. Na temelju odnosa S. sonnei prema ramnozi, ksilozi i maltozi, razlikuje se 7 njezinih biokemijskih varijanti.

Antigenska struktura. Šigele imaju O-antigen, njegova heterogenost omogućuje razlikovanje serovara i subserovara unutar skupina; u nekih pripadnika roda nalazi se K-antigen.

faktori patogenosti. Svi dizenterični bacili stvaraju endotoksin, koji ima enterotropni, neurotropni, pirogeni učinak. Osim toga, S. dysenteriae (serovar I) - Shigella Grigoriev-Shigi - izlučuje egzotoksin koji ima enterotoksično, neurotoksično, citotoksično i nefrotoksično djelovanje na tijelo, što u skladu s tim remeti metabolizam vode i soli i aktivnost središnjeg živčanog sustava, dovodi do smrti epitelnih stanica debelog crijeva, oštećenja bubrežnih tubula. Više od teški tok dizenterije uzrokovane ovim uzročnikom. Druge vrste Shigella mogu lučiti egzotoksin. Otkriven je faktor RF permeabilnosti, zbog čega su zahvaćene krvne žile. Čimbenici patogenosti također uključuju invazivni protein koji olakšava njihov prodor u epitelne stanice, kao i proteine ​​pili i vanjske membrane odgovorne za adheziju, te mikrokapsulu.

otpornost. Šigele imaju nisku otpornost na djelovanje razni faktori. Otporniji su S. sonnei, koji u vodi iz slavine opstaju do 2 "/2 mjeseca, u vodi otvorenih rezervoara prežive do V / 2 mjeseca. S. sonnei ne samo da može dugo opstati, već i razmnožavaju se u proizvodima, posebno mliječnim proizvodima.

Epidemiologija. Dizenterija je antroponozna infekcija: izvor su bolesni ljudi i kliconoše. Mehanizam prijenosa infekcije je fekalno-oralni. Putevi prijenosa mogu biti različiti - kod Sonneove dizenterije prevladava put hrane, kod Flexnerove dizenterije - voda, za Grigoriev-Shiginu dizenteriju karakterističan je put kontakt-kućanstva. Dizenterija se javlja u mnogim zemljama svijeta. U posljednje vrijeme

godine došlo je do naglog porasta učestalosti ove infekcije. Obolijevaju ljudi svih dobnih skupina, no dizenteriji su najosjetljivija djeca od 1 do 3 godine. Broj oboljelih raste u srpnju - rujnu. Različite vrste shigella po pojedinim

regije su neravnomjerno raspoređene.

Patogeneza. Shigella ulazi u gastrointestinalni trakt kroz usta i dolazi do debelog crijeva. Posjedujući tropizam za svoj epitel, patogeni se pričvršćuju na stanice uz pomoć pila i proteina vanjske membrane. Zahvaljujući invazivnom faktoru, oni prodiru unutar stanica, tamo se razmnožavaju, uslijed čega stanice umiru. Na stijenci crijeva nastaju ulceracije, na čijem se mjestu zatim stvaraju ožiljci. Endotoksin, koji se oslobađa tijekom uništavanja bakterija, uzrokuje opću intoksikaciju, povećanu pokretljivost crijeva i proljev. Krv iz formiranih ulkusa ulazi u stolicu. Kao rezultat djelovanja egzotoksina, uočava se izraženije kršenje metabolizma vode i soli, aktivnosti središnjeg živčanog sustava i oštećenja bubrega.

klinička slika. Period inkubacije traje od 1 do 5 dana. Bolest počinje akutno povećanjem tjelesne temperature na 38-39 ° C, bolovima u trbuhu, pojavljuju se proljev. U stolici se nalazi primjesa krvi, sluzi. Najteža dizenterija je Grigoriev-Shiga.

Imunitet. Nakon bolesti, imunitet nije specifičan samo za vrstu, već i za varijantu. Kratkotrajan je i nestabilan. Često bolest postaje kronična.

Mikrobiološka dijagnostika. Kao materijal za ispitivanje uzima se stolica pacijenta. Temelj dijagnoze je bakteriološka metoda koja omogućuje identifikaciju patogena, određivanje njegove osjetljivosti na

antibiotici, provesti intraspecifičnu identifikaciju (odrediti biokemijsku varijantu, serovar ili kolicinogenovar). Uz dugotrajni tijek dizenterije, može se koristiti kao pomoćna serološka metoda, koja se sastoji u postavljanju stadija RA, RNHA (povećanjem titra protutijela tijekom ponovljene reakcije, dijagnoza se može potvrditi).

Liječenje. Bolesnici s teškim oblicima dizenterije Grigoriev-Shiga i Flexner liječe se antibioticima širokog spektra uz obvezno uzimanje u obzir antibiograma, jer među šigelama često ima ne samo rezistentnih na antibiotike.

vlasac, ali i oblici ovisni o antibioticima. U blagim oblicima dizenterije antibiotici se ne koriste, jer njihova uporaba dovodi do disbakterioze, koja pogoršava patološki proces, te poremećaj procesa oporavka u sluznici debelog crijeva.

Prevencija. Jedini lijek koji se može koristiti u žarištima infekcije u profilaktičke svrhe je dizenterični bakteriofag. Glavnu ulogu ima nespecifična profilaksa.

11. Yersinia - uzročnici kuge. Svojstva. Patogeneza, imunitet, laboratorijska dijagnostika, epidemiologija, prevencija, liječenje. Uloga domaćih znanstvenika u proučavanju kuge.

Taksonomija: Y.pestis uzrokuje kugu; odjel Gracilicutes, obitelj Enterobacteriaceae, rod Yersinia. Uzročnik je Yersinia pestis.

Morfološka svojstva: Gram-negativne štapiće, ovoidne, obojene bipolarno. Pokretni su, imaju kapsulu, ne stvaraju spore.

kulturnih dobara.

fakultativni anaerobi. Optimalna temperatura + 25 ° C. Dobro se uzgaja na jednostavnim hranjivim podlogama. Većina ugljikohidrata fermentira bez stvaranja plinova. Psihofili - sposobni mijenjati svoj metabolizam ovisno o temperaturi i razmnožavati se na niske temperature. Virulentni sojevi stvaraju grube (R) kolonije, prijelazne (RS) i sivkasto sluzave glatke avirulentne (S) oblike.

Dvije vrste kolonija - mlade i zrele. Juvenil s nepravilnim rubovima. Zrele kolonije su velike, sa smeđim granularnim središtem i nazubljenim rubovima. Na kosom agaru, nakon dva dana na +28 C formira se sivkasta - bijeli premaz, raste u okoliš, na juhu - delikatan površinski film i pamučni talog.

Biokemijska svojstva: visoka enzimska aktivnost: fermentacija do kisele ksiloze, sinteza plazmakoagulaze, fibrinolizina, hemolizina, lecitinaze, hidrogen sulfida. Ramnoza, urea ne fermentira.

Antigenska struktura.

Skupina proteinsko polisaharidnih i lipopolisaharidnih antigena: termostabilni somatski O-antigen i termolabilni kapsularni V, W antigeni. Virulencija bakterija povezana je s W antigenom. Proizvodi faktore patogenosti: fibrinolizin, plazmakoagulazu, endotoksin, egzotoksin, kapsulu, V, W antigene.

Otpornost: osjetljiv na antibiotike (osobito streptomicin), nestabilan na okoliš pri visokim temperaturama.

patogena svojstva.

Posjeduje patogeni potencijal, potiskuje funkcije fagocitnog sustava, suzbija oksidativni nalet u fagocitima i u njima se slobodno razmnožava. Čimbenike patogenosti kontroliraju tri klase plazmida. U patogenezi postoje tri glavne faze - limfogeni drift, bakterijemija, generalizirana septikemija. Imaju adhezine i invazine, proteine ​​niske molekulske mase (inhibiraju baktericidne faktore), enterotoksin. Neke čimbenike kontroliraju virulentni plazmidi.

Kliničke značajke: Razdoblje inkubacije je nekoliko sati do 8 dana. Razlikovati lokalne - kožno-bubonske, bubonske; eksterno diseminirana - primarna plućna, sekundarna plućna i crijevna; generalizirani - primarni septički, sekundarni septički oblici kuge. Regionalna limfadenopatija, enterokolitis, reaktivni artritis, spondilitis, groznica.

Epidemiologija: Kuga je klasična prirodna žarišna zoonoza divljih životinja. Glavni prijenosnici u prirodi su svisci, vjeverice, u urbanim uvjetima - štakori. U prijenosu uzročnika - buhe životinja koje mogu zaraziti ljude.

Imunitet: stanično-humoralni, ograničenog trajanja i intenziteta.

Mikrobiološka dijagnostika:

Bakterioskopski pregled. Brisevi se pripremaju od ispitivanog materijala, obojenog po Gramu i vodene otopine metilenskog modrila. Bakterije kuge su gram-negativne štapići jajolikog oblika. Bakteriološka istraživanja. Ispitivani materijal inokuliran je na ploče s hranjivim agarom. Kulture su inkubirane na 25°C. Primarno proučavanje usjeva provodi se nakon 10 sati. Do tog vremena pojavljuju se kolonije koje su formirane od virulentnih R-formi. Niske i avirulentne bakterije formiraju kolonije u obliku slova S. Identifikacija čiste kulture provodi se prema morfologiji bakterijskih stanica, prirodi rasta, antigenskim i biokemijskim svojstvima, osjetljivosti na određeni fag i biološkom testu.

Bakterije stvaraju film na bujonu; fermentiraju mnoge šećere u kiselinu, ne stvaraju indol, ne ukapljuju želatinu. Sadrže grupni termostabilni somatski antigen i specifični termolabilni kapsularni antigen.

Biotest. Provodi se kako bi se izolirala čista kultura iz materijala kontaminiranog stranom mikroflorom. Najosjetljivije laboratorijske životinje su zamorci, kojima se materijal ubrizgava supkutano. Materijal se ubrizgava intraperitonealno ako nije kontaminiran drugim bakterijama. Nakon uginuća životinja uočavaju se patološke promjene na organima i provodi bakteriološka pretraga.

Ekspresne metode laboratorijske dijagnostike:

2.RPGA - za detekciju bakterijskih antigena u materijalu koristi se standardni serum protiv kuge, čija su antitijela napunjena na eritrocite.

Liječenje: antibiotici - streptomicin, tetraciklinski lijekovi.

Prevencija: specifična profilaksa – živo atenuirano cjepivo protiv EV kuge. Dostupno je suho cjepivo u obliku tableta za oralnu primjenu. Za procjenu imuniteta na kugu (prirodna postinfekcija i cjepivo) može se koristiti intradermalni alergijski test s pestinom.

Bakteriofag kuge– pri identifikaciji Y.pestis.

Suho cjepivo protiv kuge - sušena živa kultura Y. pestis cjepnog soja EV, koja se koristi za prevenciju kuge.

Mikrobiologija dizenterije

Dizenterija je zarazna bolest koju karakterizira opća intoksikacija tijela, proljev i osebujna lezija sluznice debelog crijeva. Jedna je od najčešćih akutnih crijevnih bolesti u svijetu. Bolest je poznata od davnina pod imenom "krvavi proljev", ali se pokazalo da je njena priroda drugačija. Godine 1875. ruski znanstvenik F. A. Lesh izolirao je amebu iz pacijenta s krvavim proljevom Entamoeba histolytica, u sljedećih 15 godina utvrđuje se samostalnost ove bolesti za koju se sačuvao naziv amebijaza.

Uzročnici prave dizenterije su velika skupina biološki sličnih bakterija udruženih u rod šigela. Uzročnik su prvi put otkrili 1888. A. Chantemes i F. Vidal; 1891. opisao ju je A. V. Grigoriev, a 1898. K. Shiga je pomoću seruma dobivenog od bolesnika identificirao uzročnika kod 34 bolesnika s dizenterijom, čime je konačno dokazana etiološka uloga ove bakterije. Međutim, u narednim godinama otkriveni su i drugi uzročnici dizenterije: 1900. - S. Flexner, 1915. - K. Sonne, 1917. - K. Stutzer i K. Schmitz, 1932. - J. Boyd. , 1934. - D. Large, 1943. - A. Sachs. Trenutno rod šigela uključuje više od 40 serotipova. Sve su to kratke nepokretne gram-negativne štapiće koje ne stvaraju spore i kapsule, dobro rastu na običnim hranjivim podlogama, ne rastu na podlozi za izgladnjivanje s citratom ili malonatom kao jedinim izvorom ugljika; ne stvaraju H 2 S, nemaju ureazu; Voges-Proskauerova reakcija je negativna; glukoza i neki drugi ugljikohidrati fermentiraju u kiselinu bez plina (osim za neke biotipove Shigella flexneri: S. Manchester i S. Newcastle); u pravilu ne fermentiraju laktozu (s izuzetkom Shigella Sonne), adonit, salicin i inozitol, ne ukapljuju želatinu, obično tvore katalazu, nemaju lizin dekarboksilazu i fenilalanin deaminazu. Sadržaj G + C u DNA je 49 - 53 mol%. Šigele su fakultativni anaerobi, temperaturni optimum za rast je 37 °C, ne rastu na temperaturama iznad 45 °C, optimalni pH medija je 6,7 - 7,2. Kolonije na gustom mediju su okrugle, konveksne, prozirne, u slučaju disocijacije nastaju grube kolonije u obliku slova R. Rast na BCH u obliku jednolike zamućenosti, grubi oblici stvaraju talog. Svježe izolirane kulture Sonne Shigella obično formiraju kolonije dvije vrste: male okrugle konveksne (I faza), velike ravne (II faza). Priroda kolonije ovisi o prisutnosti (I faza) ili odsutnosti (II faza) plazmida s m. m. 120 MD, koji također određuje virulentnost Shigella Sonne.

Međunarodna klasifikacija Shigella je izgrađena uzimajući u obzir njihove biokemijske karakteristike (šigele koje ne fermentiraju manitol, fermentiraju manitol, šigele koje sporo fermentiraju laktozu) i značajke antigene strukture (tablica 37).

U Shigella su pronađeni O-antigeni različite specifičnosti: zajednički za obitelj Enterobacteriaceae generički, specifični za vrstu, grupu i tip, kao i K-antigeni; Nemaju H antigene.

Tablica 37

Klasifikacija bakterija roda šigela

Klasifikacija uzima u obzir samo O-antigene specifične za skupinu i tip. Prema tim značajkama, šigela podijeljen u 4 podskupine, odnosno 4 vrste, i uključuje 44 serotipa. U podskupini A (vrste Shigella dysenteriae) uključuje šigele koje ne fermentiraju manitol. Vrsta uključuje 12 serotipova (1 - 12). Svaki serotip ima svoj specifični tip antigena; antigenski odnosi između serotipova, kao i kod drugih vrsta šigela, slabo su izraženi. U podskupinu B (tip Shigella flexneri) uključuju Shigella, obično fermentirajući manitol. Šigele ove vrste međusobno su serološki srodne: sadrže tip-specifične antigene (I-VI), prema kojima se dijele na serotipove (1-6), i grupne antigene, koji se u svakom serotipu nalaze u različitim sastavima. a prema kojem se serotipovi dijele na subserotipove. Osim toga, ova vrsta uključuje dvije antigene varijante, X i Y, koje nemaju tipične antigene, razlikuju se u skupovima antigena skupine. Serotip S. flexneri 6 nema subserotipova, ali se prema karakteristikama fermentacije glukoze, manitola i dulcita dijeli na 3 biokemijska tipa (tablica 38).

Tablica 38

Biotipovi S. flexneri 6

Bilješka. K - fermentacija uz stvaranje samo kiseline; KG - fermentacija uz stvaranje kiseline i plina; (-) - nema fermentacije.

Lipopolisaharidni antigen O kod svih Shigella Flexner sadrži antigen skupine 3, 4 kao glavnu primarnu strukturu, njegovu sintezu kontrolira kromosomski gen lokaliziran blizu his-lokusa. Tipski specifični antigeni I, II, IV, V i antigeni skupine 6, 7, 8 rezultat su modifikacije antigena 3, 4 (glikozilacija ili acetilacija) i određeni su genima odgovarajućih konvertirajućih profaga, integracijskim mjestom koji se nalazi u lac – pro regiji kromosoma Shigella.

Pojavio se na teritoriju zemlje 80-ih godina. 20. stoljeće i naširoko korišten novi podserotip S. flexneri 4(IV:7, 8) razlikuje se od subserotipa 4a (IV:3, 4) i 4b (IV:3, 4, 6), nastao iz varijante S. flexneri Y(IV:3, 4) zbog lizogenizacije njegovim konvertirajućim profagima IV i 7, 8.

U podskupinu C (vrsta Shigella boydii) uključuju Shigella, obično fermentirajući manitol. Članovi skupine serološki se razlikuju jedni od drugih. Antigenski odnosi unutar vrste su slabo izraženi. Vrsta uključuje 18 serotipova (1 - 18), od kojih svaki ima svoj glavni tip antigena.

U podskupini D (vrste Shigella sonnei) uključuje Shigella, koje obično fermentiraju manitol i mogu polagano (nakon 24 sata inkubacije i kasnije) fermentirati laktozu i saharozu. Pogled S. sonnei uključuje jedan serotip, međutim, kolonije faza I i II imaju svoje antigene specifične za tip. Predložene su dvije metode za intraspecifičnu klasifikaciju Sonneove šigele:

1) podijeliti ih u 14 biokemijskih tipova i podtipova prema njihovoj sposobnosti fermentacije maltoze, ramnoze i ksiloze; 2) podjela na tipove faga prema osjetljivosti na skup odgovarajućih faga.

Ove metode tipizacije uglavnom su od epidemiološkog značaja. Osim toga, Sonneove šigele i Flexnerove šigele podvrgavaju se tipizaciji za istu svrhu sposobnošću sintetiziranja specifičnih kolicina (kolicinogenotipizacija) i osjetljivošću na poznate kolicine (kolicinotipizacija). Da bi se odredio tip kolicina koje proizvode šigele, J. Abbott i R. Shannon predložili su skupove tipičnih i indikatorskih sojeva šigela, a da bi se odredila osjetljivost šigela na poznate tipove kolicina, skup referentnih kolicinogenih sojeva P. Fredericka koristi se.

otpornost. Shigella ima prilično visoku otpornost na čimbenike okoliša. Preživljavaju na pamučnoj tkanini i papiru do 30-36 dana, u osušenom izmetu - do 4-5 mjeseci, u tlu - do 3-4 mjeseca, u vodi - od 0,5 do 3 mjeseca, na voću i povrću - do 2 tjedna, u mlijeku i mliječnim proizvodima - do nekoliko tjedana; na temperaturi od 60 °C ugibaju za 15 - 20 minuta. Osjetljivo na otopine kloramina, aktivni klor i druga sredstva za dezinfekciju.

faktori patogenosti. Najvažnije biološko svojstvo šigela, koje određuje njihovu patogenost, jest sposobnost invazije epitelnih stanica, razmnožavanja u njima i uzrokovanja njihove smrti. Taj se učinak može otkriti pomoću keratokonjunktivalnog testa (unošenje jedne petlje kulture Shigella (2-3 milijarde bakterija) ispod donjeg kapka zamorca uzrokuje razvoj serozno gnojnog keratokonjunktivitisa), kao i infekcijom stanica kulturama (citotoksični učinak) ili pilećim embrijima (njihova smrt) ili intranazalno u bijelih miševa (razvoj upale pluća). Glavni faktori patogenosti šigele mogu se podijeliti u tri skupine:

1) čimbenici koji određuju interakciju s epitelom sluznice;

2) čimbenici koji osiguravaju otpornost na humoralne i stanične obrambene mehanizme makroorganizma i sposobnost šigele da se razmnožava u svojim stanicama;

3) sposobnost proizvodnje toksina i toksičnih proizvoda koji određuju razvoj stvarnog patološkog procesa.

Prva skupina uključuje čimbenike adhezije i kolonizacije: njihovu ulogu igraju pili, proteini vanjske membrane i LPS. Enzimi koji uništavaju sluz kao što su neuraminidaza, hijaluronidaza i mucinaza potiču adheziju i kolonizaciju. Druga skupina uključuje čimbenike invazije koji pridonose prodiranju Shigella u enterocite i njihovu reprodukciju u njima iu makrofagima uz istodobnu manifestaciju citotoksičnog i (ili) enterotoksičnog učinka. Ta svojstva kontroliraju geni plazmida s m. m. 140 MD (kodira sintezu proteina vanjske membrane koji uzrokuju invaziju) i kromosomski geni Shigella: kcp A (uzrokuje keratokonjunktivitis), cyt (odgovoran za uništavanje stanica), kao i drugi geni, koji još nisu identificirani. Zaštitu Shigella od fagocitoze osiguravaju površinski K-antigen, antigeni 3, 4 i lipopolisaharid. Osim toga, lipid A endotoksina Shigella ima imunosupresivni učinak: potiskuje aktivnost stanica imunološke memorije.

Treća skupina čimbenika patogenosti uključuje endotoksin i dvije vrste egzotoksina koje nalazimo u Shigella - Shiga egzotoksine i Shiga-like egzotoksine (SLT-I i SLT-II), čija su citotoksična svojstva najizraženija u S. dysenteriae 1. Shiga- i shiga-slični toksini također se nalaze u drugim serotipovima S. dysenteriae, također se formiraju S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, EHEC i nešto salmonele. Sintezu ovih toksina kontroliraju tox geni konvertirajućih faga. Enterotoksini tipa LT pronađeni su kod Flexner, Sonne i Boyd Shigella. Sintezu LT u njih kontroliraju plazmidni geni. Enterotoksin stimulira aktivnost adenilat ciklaze i odgovoran je za razvoj proljeva. Shiga toksin ili neurotoksin ne reagira sa sustavom adenilat ciklaze, ali ima izravan citotoksični učinak. Shiga i shigi slični toksini (SLT-I i SLT-II) imaju MW od 70 kD i sastoje se od A i B podjedinica (zadnja od 5 identičnih malih podjedinica). Receptor za toksine je glikolipid stanične membrane.

Virulencija Shigella Sonne također ovisi o plazmidu s m. m. 120 MD. On kontrolira sintezu oko 40 polipeptida vanjske membrane, od kojih je sedam povezano s virulencijom. Shigella Sonne s ovim plazmidom formira kolonije faze I i virulentne su. Kulture koje su izgubile plazmid formiraju kolonije faze II i nemaju virulentnost. Plazmidi s m.m. 120 - 140 MD pronađeni su u Shigella Flexner i Boyd. Shigella lipopolisaharid je snažan endotoksin.

Značajke epidemiologije. Jedini izvor zaraze je čovjek. Nijedna životinja u prirodi ne boluje od dizenterije. U eksperimentalnim uvjetima, dizenterija se može reproducirati samo kod majmuna. Način infekcije je fekalno-oralni. Putevi prijenosa - voda (pretežno za Shigella Flexner), hrana, posebno važnu ulogu imaju mlijeko i mliječni proizvodi (pretežni put zaraze za Shigella Sonne), te kontaktno-kućanstvo, posebno za vrste S. dysenteriae.

Značajka epidemiologije dizenterije je promjena sastava vrsta patogena, kao i biotipova Sonne i Flexner serotipova u određenim regijama. Primjerice, do kraja 1930-ih 20. stoljeće dijeliti S. dysenteriae 1činio do 30 - 40% svih slučajeva dizenterije, a zatim se ovaj serotip počeo javljati sve rjeđe i gotovo nestao. Međutim, 1960-ih - 1980-ih. S. dysenteriae ponovno pojavio na povijesnoj areni i izazvao niz epidemija koje su dovele do formiranja tri njegova hiperendemična žarišta – u Srednjoj Americi, Srednjoj Africi i Južnoj Aziji (Indija, Pakistan, Bangladeš i druge zemlje). Razlozi promjene vrstnog sastava uzročnika dizenterije vjerojatno su povezani s promjenom kolektivne imunosti i promjenom svojstava bakterija dizenterije. Konkretno, povratak S. dysenteriae 1 i njegova široka rasprostranjenost, koja je uzrokovala stvaranje hiperendemičnih žarišta dizenterije, povezana je s njegovim dobivanjem plazmida, što je uzrokovalo višestruke otpornost na lijekove i povećana virulentnost.

Značajke patogeneze i klinike. Razdoblje inkubacije za dizenteriju je 2-5 dana, ponekad manje od jednog dana. Formiranje infektivni fokus u sluznici silaznog dijela debelog crijeva (sigmoida i rektuma), gdje prodire uzročnik dizenterije, odvija se ciklički: adhezija, kolonizacija, unošenje šigela u citoplazmu enterocita, njihovo intracelularno razmnožavanje, razaranje i odbacivanje. epitelnih stanica, otpuštanje patogena u lumen crijeva; nakon toga počinje sljedeći ciklus - adhezija, kolonizacija itd. Intenzitet ciklusa ovisi o koncentraciji uzročnika u parijetalnom sloju sluznice. Kao rezultat ponovljenih ciklusa, žarište upale raste, nastali čirevi, povezujući se, povećavaju izloženost crijevna stijenka, zbog čega se u stolici pojavljuju krv, mukopurulentne nakupine, polimorfonuklearni leukociti. Citotoksini (SLT-I i SLT-II) uzrokuju razaranje stanica, enterotoksin - proljev, endotoksini - opću intoksikaciju. Klinika dizenterije uvelike je određena vrstom egzotoksina koju uzročnik u većoj mjeri proizvodi, stupnjem njegovog alergenog učinka i imunološkim stanjem organizma. Međutim, mnoga pitanja patogeneze dizenterije ostaju nerazjašnjena, posebice: značajke tijeka dizenterije u djece prve dvije godine života, razlozi prijelaza akutne dizenterije u kroničnu, značaj senzibilizacije, mehanizam lokalne imunosti crijevne sluznice itd. Najtipičnije kliničke manifestacije dizenterije su proljev, česti nagoni: u teškim slučajevima do 50 i više puta dnevno, tenezmi (bolni grčevi rektuma) i opća intoksikacija. Priroda stolice određena je stupnjem oštećenja debelog crijeva. Najtežu dizenteriju uzrokuje S. dysenteriae 1, najlakše - Sonneova dizenterija.

postinfektivni imunitet. Kao što su promatranja na majmunima pokazala, nakon preboljele dizenterije ostaje jak i prilično dugotrajan imunitet. Uzrokuju ga antimikrobna protutijela, antitoksini, povećana aktivnost makrofaga i T-limfocita. Značajnu ulogu ima lokalna imunost crijevne sluznice, posredovana IgA. Međutim, imunitet je po prirodi specifičan za određeni tip, ne dolazi do snažnog unakrsnog imuniteta.

Laboratorijska dijagnostika. Glavna metoda je bakteriološka. Materijal za studiju je izmet. Shema izolacije patogena: inokulacija na podloge za diferencijalnu dijagnostiku Endo i Ploskirev (paralelno na podlogu za obogaćivanje, nakon čega slijedi inokulacija na podloge Endo i Ploskirev) za izolaciju izoliranih kolonija, dobivanje čiste kulture, proučavanje njezinih biokemijskih svojstava i, uzimajući u obzir potonji, identifikacija pomoću polivalentnih i monovalentnih dijagnostičkih aglutinirajućih seruma. Proizvode se sljedeći komercijalni serumi.

1. Šigele koje ne fermentiraju manitol:

do S. dysenteriae 1 i 2

do S. dysenteriae 3–7(polivalentni i monovalentni),

do S. dysenteriae 8 – 12(polivalentni i monovalentni).

2. Manitol koji fermentira šigelu:

na tipične antigene S. flexneri I, II, III, IV, V, VI,

grupirati antigene S. flexneri 3, 4, 6, 7, 8- polivalentan,

na antigene S.boydii 1–18(polivalentne i monovalentne), na antigene S. sonnei I faza, II faza,

na antigene S. flexneri I–VI+ S. sonnei- polivalentan.

Za brzu identifikaciju Shigella preporučuje se sljedeća metoda: sumnjiva kolonija (laktosonegativna na Endo mediju) se potkulturi na TSI mediju (eng. trostruki šećer željezo) - agar s tri šećera (glukoza, laktoza, saharoza) sa željezom za određivanje proizvodnje H 2 S; ili na mediju koji sadrži glukozu, laktozu, saharozu, željezo i ureu. Svaki organizam koji razgrađuje ureu nakon 4 do 6 sati inkubacije najvjerojatnije pripada rodu Proteus a može se isključiti. Mikroorganizam koji proizvodi H 2 S ili ima ureazu ili proizvodi kiselinu na zglobu (fermentira laktozu ili saharozu) može se isključiti, iako se sojevi koji proizvode H 2 S trebaju istražiti kao mogući članovi roda Salmonela. U svim drugim slučajevima treba ispitati kulturu uzgojenu na tim podlogama i, ako fermentira glukozu (promjena boje trake), izolirati je u čistom obliku. Istodobno se može proučavati u testu aglutinacije na staklu s odgovarajućim antiserumima za rod šigela. Po potrebi provesti i druge biokemijske pretrage kojima se provjerava pripadnost rodu šigela i mobilnost studija.

Za otkrivanje antigena u krvi (uključujući kao dio CEC-a), urinu i izmetu mogu se koristiti sljedeće metode: RPHA, RSK, reakcija koaglutinacije (u urinu i izmetu), IFM, RAGA (u krvnom serumu). Ove su metode vrlo učinkovite, specifične i pogodne za ranu dijagnostiku.

Za serološku dijagnostiku mogu se koristiti: RPGA s pripadajućim eritrocitnim dijagnostikumima, imunofluorescentna metoda (u neizravnoj modifikaciji), Coombsova metoda (određivanje titra nekompletnih protutijela). Alergijski test s dizenterijom (otopina proteinskih frakcija Shigella Flexner i Sonne) također je od dijagnostičke vrijednosti. Reakcija se uzima u obzir nakon 24 sata.Smatra se pozitivnom u prisutnosti hiperemije i infiltracije promjera 10-20 mm.

Liječenje. Glavna pozornost posvećena je obnovi normalnog metabolizma vode i soli, racionalnoj prehrani, detoksikaciji, racionalnoj antibiotskoj terapiji (uzimajući u obzir osjetljivost patogena na antibiotike). Dobar učinak postiže se ranom upotrebom polivalentnog dizenteričnog bakteriofaga, posebno tableta s pektinskim omotačem, koji štiti fag od djelovanja HCl želučanog soka; u tankom crijevu pektin se otapa, fagi se oslobađaju i pokazuju svoje djelovanje. U profilaktičke svrhe, fag treba dati najmanje jednom svaka tri dana (razdoblje njegovog preživljavanja u crijevima).

Problem specifične prevencije. Za stvaranje umjetne imunosti protiv dizenterije korištena su razna cjepiva: od ubijenih bakterija, kemijska, alkoholna, no sva su se pokazala neučinkovitima i ukinuta su. Cjepiva protiv Flexnerove dizenterije stvorena su od žive (mutirane, ovisne o streptomicinu) Shigelle Flexner; ribosomska cjepiva, ali ona također nisu našla široku primjenu. Stoga ostaje neriješen problem specifične prevencije dizenterije. Glavni način borbe protiv dizenterije je poboljšanje vodoopskrbnog i kanalizacijskog sustava, osiguranje strogih sanitarnih i higijenskih režima u prehrambenim poduzećima, posebno u mliječnoj industriji, u dječjim vrtićima, na javnim mjestima iu osobnoj higijeni.

UDK 616.935-074(047)

prije podneSadykova

Kazahstansko nacionalno medicinsko sveučilište

nazvan po S.D. Asfendijarov, Almati

Odjel za zarazne i tropske bolesti

Pouzdana dijagnoza dizenterije jedan je od hitnih zadataka nadzora AEI. Točna dijagnoza bacilarne dizenterije je važnost za pravo i pravodobno liječenje bolesnika i za provođenje potrebnih protuepidemijskih mjera. Podaci predstavljeni u pregledu pokazuju da, s obzirom na raširenu prevalenciju dizenterije, nedostatak osjetljivosti i kasno pojavljivanje pozitivnih rezultata mnogih dijagnostičkih metoda, preporučljivo je razviti dijagnostički potencijal otkrivanja ove infekcije.

Ključne riječi: dijagnostika, dizenterija, metoda antigen-vezujućih limfocita.

Prepoznavanje infekcije šigelozama u kliničkoj praksi nailazi na značajne poteškoće zbog objektivnih čimbenika koji uključuju klinički patomorfizam dizenterije, porast broja atipične forme bolesti, postojanje značajnog broja bolesti zarazne i nezarazne prirode, koje imaju kliničke manifestacije slične dizenteriji. Pod dijagnozom "kliničke dizenterije" u polovici slučajeva skrivaju se neprepoznate bolesti različite etiologije.

Najveće poteškoće nastaju pred liječnikom tijekom inicijalnog pregleda bolesnika prije dobivanja rezultata parakliničkih dijagnostičkih metoda. Prepoznavanje dizenterije također je teško u prisutnosti popratne bolesti gastrointestinalni trakt.

Od početka primjene etiološke laboratorijske dijagnostike dizenterije predloženo je i ispitano dosta metoda. Postoje mnoge klasifikacije metoda za etiološku dijagnozu infekcija. Metodološki, klasifikacija koju je predložio B.V. Kazna. Što se tiče dijagnoze dizenterije, načela metodološki ispravne klasifikacije koristio je B.V. Karalnik, N.M. Nurkina, B.K. Erkinbekova..

Od laboratorijskih metoda za dijagnosticiranje dizenterije poznate su bakteriološka (izolacija i identifikacija uzročnika) i imunološka. Potonji uključuju imunološke metode in vivo (alergološki test Zuverkalov) i in vitro. Imunološke metode in vitro imaju jednu nedvojbenu prednost u odnosu na Zuverkalov test - nisu povezane s uvođenjem stranih antigena u tijelo.

Većina istraživača još uvijek vjeruje da bakteriološka istraživanja, koja uključuju izolaciju u čista kultura uzročnika bolesti uz njegovu naknadnu identifikaciju morfološkim, biokemijskim i antigenskim karakteristikama, najpouzdanija je metoda za dijagnosticiranje infekcije šigelom. Učestalost izolacije shigella iz fecesa bolesnika s kliničkom dijagnozom "akutne dizenterije", prema različitim autorima, kreće se od 30,8% do 84,7%, pa čak i 91,1%. Takav značajan raspon za različite autore ne ovisi samo o objektivnim čimbenicima koji utječu na učinkovitost bakteriološkog pregleda, već io temeljitosti dijagnoze (ili isključenja) "kliničke dizenterije". Na učinkovitost bakterioloških istraživanja utječu takvi objektivni faktori, kao značajke tijeka bolesti, način uzorkovanja i dostave materijala u laboratorij, kvaliteta hranjivih medija, kvalifikacije osoblja, vrijeme kontakta pacijenta sa zdravstvenim radnicima, korištenje antimikrobna sredstva prije uzimanja materijala za istraživanje. kvantitativni mikrobiološka istraživanja feces u akutnoj dizenteriji pokazuje da se u svim kliničkim oblicima infekcije najmasovnije oslobađanje uzročnika događa u prvim danima bolesti, a počevši od 6., a posebno od 10. dana bolesti, koncentracija šigela u izmet je značajno smanjen. T.A. Avdeeva je otkrila da nizak sadržaj shigella i oštra prevlast nepatogenih mikroorganizama u izmetu praktički isključuju mogućnost bakteriološkog otkrivanja bakterija dizenterije.

Poznato je da je bakteriološka potvrda infekcije šigelozom najčešće uspješna pri pregledu bolesnika u prvim danima bolesti - koprokultura uzročnika u velikoj većini slučajeva prvo se izolira tijekom prve studije. Pozitivni rezultati bakteriološkog pregleda zabilježeni su samo u prva 3 dana bolesti u 45 - 49% pacijenata, u prvih 7 dana - u 75%. Tillet i Thomas također smatraju vrijeme pregleda bolesnika važnim čimbenikom koji određuje učinkovitost bakteriološke metode za dijagnosticiranje dizenterije. Prema T.A. Avdeeva, u prvim danima bolesti, najintenzivnije oslobađanje patogena opaženo je kod dizenterije Sonne, manje intenzivno kod dizenterije Flexner i najmanje kod dizenterije Flexner VI; u kasnijim stadijima bolesti najveća koncentracija se najdulje održava kod Flexnerove dizenterije, kraće - Shigella Sonne i najkraće - Shigella Flexner VI.

Dakle, iako je bakteriološki pregled fecesa najpouzdanija metoda za dijagnosticiranje infekcije šigelozom, ograničenja njegove učinkovitosti navedena gore su značajni nedostaci. Također je važno istaknuti ograničenja rane dijagnoze bakteriološkom metodom, u kojoj je trajanje analize 3-4 dana. U vezi s tim okolnostima, korištenje drugih metoda laboratorijske dijagnostike od velike je praktične važnosti. Druga mikrobiološka metoda za dijagnosticiranje dizenterije također se temelji na dokazivanju živih šigela. Ovo je reakcija porasta titra faga (RNF) koja se temelji na sposobnosti specifičnih faga da se razmnožavaju isključivo u prisutnosti homolognih živih mikroorganizama. Povećanje titra indikatorskog faga ukazuje na prisutnost odgovarajućih mikroba u mediju. Dijagnostičku vrijednost RNF-a u infekciji šigelozom ispitao je B.I. Khaimzon, T.S. Vilkomirskaja. RNF ima prilično visoku osjetljivost. Mapiranje minimalna koncentracijaŠigele u stolici uhvaćene bakteriološkom metodom (12,5 tisuća bakterija u 1 ml) i RNF (3,0 - 6,2 tisuće) ukazuju na superiornost RNF-a.

Budući da je učestalost pozitivnih rezultata RNF izravno ovisna o stupnju kontaminacije fecesa, primjena metode daje i najveći učinak u prvim danima bolesti i kod težih oblika infektivnog procesa. Međutim, veća osjetljivost metode uvjetuje njezine posebne prednosti u odnosu na bakteriološke pretrage u kasnim stadijima bolesti, kao iu ispitivanju bolesnika s blagim, asimptomatskim i subkliničkim oblicima infekcije, s niskom koncentracijom uzročnika u stolica. RNF se također koristi u pregledu pacijenata koji uzimaju antibakterijska sredstva, budući da potonji drastično smanjuju učestalost pozitivnih rezultata bakteriološke metode istraživanja, ali u znatno manjoj mjeri utječu na učinkovitost RNF-a. Osjetljivost RNF-a nije apsolutna zbog postojanja sojeva šigela otpornih na fage: udio sojeva otpornih na fage može varirati u vrlo širokom rasponu - od 1% do 34,5%.

Velika prednost RNF-a je njegova visoka specifičnost. Prilikom ispitivanja zdravih ljudi, kao i pacijenata sa zaraznim bolestima različite etiologije, pozitivni rezultati reakcije uočeni su samo u 1,5% slučajeva. RNF je vrijedna dodatna metoda za dijagnosticiranje infekcije šigelom. Ali danas se ova metoda rijetko koristi zbog svoje tehničke složenosti. Ostale metode su imunološke. Uz njihovu pomoć registrira se specifičan imunološki odgovor s obzirom na uzročnika ili se imunološkim metodama određuju antigeni uzročnika.

Zbog težine procesa specifične infektivne alergije kod infekcije šigelozama, prve su korištene alergološke dijagnostičke metode koje uključuju intradermalni alergijski test s dizenterijom (VPD). Lijek "dizenterija", koji je specifičan alergen Shigella lišen toksičnih tvari, dobio je D.A. Tsuverkalov i prvi put je korišten u kliničkim uvjetima pri postavljanju intradermalnog testa L.K. Korovitsky 1954. Prema E.V. Golyusova i M.Z. Trokhimenko, u prisutnosti prethodne akutne dizenterije ili povezanih alergijskih bolesti s kožnim manifestacijama (ekcem, urtikarija, itd.). mnogo češće se opažaju pozitivni rezultati VPD (paraalergija). Analiza rezultata VPD u različita razdoblja akutne dizenterije pokazuje da se specifična alergija javlja već u prvim danima bolesti, dostiže maksimalnu težinu do 7.-15. dana i zatim postupno jenjava. Pozitivni rezultati reakcije dobiveni su pri ispitivanju zdravih ljudi u dobi od 16 do 60 godina u 15 - 20% slučajeva i u dobi od 3 do 7 godina - u 12,5% slučajeva. Još češće, nespecifični pozitivni rezultati VPD-a uočeni su u bolesnika s gastrointestinalnim bolestima - u 20 - 36% slučajeva. Uvođenje alergena popraćeno je razvojem lokalne reakcije u 35,5 - 43,0% bolesnika sa salmonelozom, u 74 - 87% bolesnika s coli-0124-enterokolitisom. Ozbiljan argument protiv široke uporabe VPD-a u kliničkoj praksi bio je njegov alergeni učinak na tijelo. S obzirom na navedeno, možemo reći da ova metoda nije previše specifična. Tsuverkalovljev test također nije specifičan za vrstu. Pozitivni rezultati reakcije bili su jednako česti kod različitih etioloških oblika dizenterije.

Osim VPD-a, korištene su i druge dijagnostičke reakcije, s različitim stupnjevima valjanosti, smatrane alergijskim, na primjer, reakcija alergenske leukocitolize (ALC), čija je bit specifično oštećenje ili potpuno uništenje aktivno ili pasivno senzibiliziranih neutrofila nakon kontakta s odgovarajućim AG. Ali ova se reakcija ne može pripisati metodama rane dijagnoze, budući da je maksimalna učestalost pozitivnih rezultata uočena 6-9 dana bolesti i iznosila je 69%. Predložena je i reakcija alergenske leukergije (ALE). Temelji se na sposobnosti leukocita senzibiliziranog organizma da se aglomeriraju kada su izloženi homolognom alergenu (dizenterija). S obzirom na nedostatak dokaza o točnim mehanizmima takvih testova, nedovoljnu korespondenciju njihovih rezultata s etiologijom bolesti, ove metode, nakon kratkog razdoblja njihove uporabe u SSSR-u, nisu postale široko rasprostranjene u budućnosti.

Detekcija antigena Shigella u tijelu dijagnostički je ekvivalentna izolaciji uzročnika. Glavne prednosti metoda za otkrivanje antigena u odnosu na bakteriološki pregled, njihovo opravdanje klinička primjena, je mogućnost otkrivanja ne samo živih mikroorganizama, već i mrtvih, pa čak i uništenih, što stječe posebno značenje prilikom pregleda pacijenata tijekom ili kratko nakon terapije antibioticima.

Jedna od najboljih metoda za brzu dijagnozu dizenterije bila je imunofluorescentna studija fecesa (Koonsova metoda). Bit metode je u detekciji šigela tretiranjem ispitivanog materijala serumom koji sadrži specifična antitijela obilježena fluorokromima. Kombinacija obilježenih protutijela s homolognim antigenima popraćena je specifičnim sjajem kompleksa detektiranih u fluorescentnom mikroskopu. U praksi se koriste dvije glavne varijante Koonsove metode: izravna, u kojoj se koristi serum koji sadrži obilježena protutijela protiv antigena Shigella, i neizravna (dvostupanjska) u kojoj se u prvoj fazi koristi serum koji nije obilježen fluorokromom (ili globulinskom frakcijom). seruma protiv šigele). U drugoj fazi koristi se serum obilježen fluorokromom protiv globulina antišigeloznog seruma korištenog u prvoj fazi. Usporedna studija dijagnostičke vrijednosti dviju varijanti imunofluorescentne metode nije otkrila velike razlike u njihovoj specifičnosti i osjetljivosti. U kliničkoj praksi uporaba ove metode najučinkovitija je pri pregledu pacijenata u rani datumi bolesti, kao i kod težih oblika infekcija. Značajan nedostatak metode imunofluorescencije je njezina nespecifičnost. Najvažniji razlog nedovoljna specifičnost reakcije imunofluorescencije je antigenski odnos enterobakterija različitih rodova. Stoga se ova metoda smatra indikativnom u prepoznavanju infekcije šigelom.

Za otkrivanje antigena shigella bez mikroskopa koriste se različite reakcije. Ove metode omogućuju otkrivanje antigena patogena u izmetu u 76,5 - 96,0% bolesnika s bakteriološki potvrđenom dizenterijom, što ukazuje na njihovu prilično visoku osjetljivost. Najpoželjnije je koristiti ove metode u kasnim fazama bolesti. Specifičnost ovih dijagnostičkih metoda većina autora visoko cijeni. Međutim, F.M. Ivanov, koji je koristio RSK za otkrivanje antigena šigele u izmetu, dobio je pozitivne rezultate pri pregledu zdravih ljudi i bolesnika s crijevnim infekcijama druge etiologije u 13,6% slučajeva. Prema autoru, uporaba metode je prikladnija za otkrivanje specifičnih antigena u urinu, budući da je učestalost nespecifičnih pozitivnih reakcija u potonjem slučaju znatno manja. Korištenje različitih metoda istraživanja omogućuje otkrivanje antigena Shigella u urinu velike većine bolesnika s bakteriološki potvrđenom dizenterijom. Dinamika izlučivanja antigena u urinu ima neke značajke - otkrivanje antigenskih tvari u nekim slučajevima moguće je već od prvih dana bolesti, ali s najvećom učestalošću i stalnošću uspijeva 10-15 dana, pa čak i na kasniji datum. Prema B.A. Godovanny i sur., udio pozitivnih rezultata na shigella antigene (RSK) u urinu nakon 10. dana bolesti je 77% (odgovarajuća brojka za bakteriološko ispitivanje fecesa je 47%). U vezi s tom okolnošću, ispitivanje urina na prisutnost antigena patogena ima vrijednost vrijedne dodatne metode u dizenteriji, prvenstveno u svrhu kasne i retrospektivne dijagnoze.

Prema N.M. Nurkina, ako je imunoreagens s antitijelima dobiven iz poliklonskih seruma, mogući su pozitivni rezultati indikacije ako su srodni antigeni prisutni u uzorku. Na primjer, s dijagnostikumom eritrocita iz visoko aktivnog seruma protiv S.flexneri VI, također se detektira antigen S.flexneri I-V, budući da Shigella obje podvrste imaju zajednički antigen vrste. Antigeni Shigella mogu se odrediti tijekom razdoblja bolesti kako u krvnom serumu tako iu sekretima.

Lee Won Ho i sur. pokazalo se da je učestalost detekcije antigena Shigella i njihova koncentracija u krvi i urinu veća u prvim danima bolesti te da je koncentracija dokazanih antigena viša kod srednje teške bolesti nego kod blage bolesti.

CM. Omirbayeva je predložila metodu indikacije Shigella antigena, koja se temelji na upotrebi formaliziranih eritrocita kao sorbenta za antigene iz ispitivanog fekalnog ekstrakta, nakon čega slijedi njihova aglutinacija s imunološkim serumima. Procjena specifičnosti ove metode, po našem mišljenju, zahtijeva dodatna istraživanja, budući da fekalni ekstrakti sadrže značajne količine antigeni drugih bakterija koje nisu uzročnici ove crijevne bolesti.

Niz istraživača predlaže imunoenzimski test kao metodu za brzu dijagnostiku akutne dizenterije, koja se prema mnogim autorima smatra visoko osjetljivom i visoko specifičnom. Istovremeno, najviše visoka razina antigen se nalazi za 1-4 dana bolesti. Unatoč očitim prednostima ELISA-e, koje uključuju visoku osjetljivost, mogućnost strogog instrumentalnog kvantitativnog računovodstva i jednostavnost postavljanja reakcije, široka uporaba ove metode ograničena je zbog potrebe za posebnom opremom.

Preporučuju se monoklonska protutijela, fragmenti imunoglobulina, sintetska protutijela, bojanje LPS srebrom i druga tehnološka poboljšanja za povećanje osjetljivosti i specifičnosti različitih seroloških metoda za otkrivanje antigena.

Često nije moguće detektirati antigen infektivnog agensa čak ni kada se koriste visoko osjetljive reakcije za otkrivanje antigena patogena u biološkim supstratima tijela, budući da je značajan dio antigenskih tvari, očito, u biotestu u obliku imunoloških kompleksa u tijelu. Pri pregledu bolesnika s bakteriološki potvrđenom akutnom dizenterijom, pozitivni rezultati određivanja antigena pomoću CSC zabilježeni su, prema nekim izvješćima, samo u 18% slučajeva.

TELEVIZOR. Remneva i sur. predlažu korištenje ultrazvuka za dezintegraciju kompleksa protutijela s česticama patogena, a zatim određivanje antigena patogena u CSC-u na hladnoći. Metoda je korištena za dijagnosticiranje dizenterije, a kao materijal za istraživanje korišteni su uzorci urina bolesnika s akutnim crijevnim infekcijama.

Primjena precipitacijske reakcije za dokazivanje antigena u akutnoj dizenteriji nije opravdana zbog niske osjetljivosti i specifičnosti. Smatramo da se specifičnost svake metode za indikaciju antigena šigele može značajno povećati primjenom monoklonskih protutijela na šigele.

Reakcija koaglutinacije također je jedna od metoda brze dijagnoze šigeloza, kao i antigena uzročnika niza drugih infekcija. Kod šigeloze, antigeni patogena mogu se odrediti od prvih dana bolesti tijekom akutnog razdoblja, kao i unutar 1-2 tjedna nakon prestanka izlučivanja bakterija. Prednosti reakcije koaglutinacije su jednostavnost izrade dijagnostikuma, postavljanje reakcije, ekonomičnost, brzina, osjetljivost i visoka specifičnost.

Kod provođenja dijagnostike određivanjem antigena Shigella od samog početka bolesti najučinkovitije je, prema mnogim autorima, pregledati feces bolesnika. S razvojem bolesti smanjuje se mogućnost otkrivanja antigena Shigella u mokraći i slini, iako se u fecesu nalaze gotovo jednakom učestalošću kao na početku bolesti. Treba imati na umu da se u prva 3-4 dana bolesti feces na antigen nešto učinkovitije ispituje u RPHA. U sredini bolesti jednako su učinkoviti RPHA i RNAb, a od 7. dana RNAb je učinkovitiji u potrazi za antigenom Shigella. Ova obilježja posljedica su postupnog uništavanja stanica Shigella i njihovih antigena u crijevima bolesnika tijekom bolesti. Antigeni šigele izlučeni u urinu relativno su manji od antigena u fecesu. Stoga je preporučljivo ispitati urin na RNAt. U urinu žena, za razliku od urina muškaraca, zbog vjerojatne fekalne kontaminacije, antigeni Shigella se podjednako često otkrivaju pomoću TPHA i RNAb.

Iako se antigen znatno češće (94,5 - 100%) detektira u onim uzorcima fecesa iz kojih je moguće izolirati Shigella nego u onim uzorcima iz kojih Shigella nije izolirana (61,8 - 75,8%), uz paralelne bakteriološke i serološke ( za antigen) u istraživanju uzoraka izmeta bolesnika s dizenterijom općenito, šigela je izolirana samo iz 28,2 - 40,0% uzoraka, a antigen je nađen u 65,9 - 91,5% uzoraka. Važno je naglasiti da specifičnost vrste detektiranog antigena uvijek odgovara specifičnosti serumskih protutijela, čiji titar u dinamici raste do maksimuma. Kada se fokusirate na uvjetni dijagnostički titar protutijela, ponekad se mogu uočiti razlike u specifičnosti takvih protutijela i otkrivenog antigena. Ova razlika je posljedica nedovoljne dijagnostičke pouzdanosti jednog određivanja aktivnosti serumskih antitijela. U ovom slučaju etiološka dijagnoza treba postaviti prema specifičnosti otkrivenog antigena.

Metoda PCR za zadatak izravnog otkrivanja znakova patogena bliska je metodama indikacije antigena. Omogućuje određivanje DNK patogena i temelji se na principu prirodne replikacije DNK, uključujući odmotavanje dvostruke spirale DNK, divergenciju DNK lanaca i komplementarno dodavanje oba. Replikacija DNA ne mora započeti ni u jednom trenutku, već samo u određenim početnim blokovima – kratkim dvolančanim dijelovima. Suština metode leži u činjenici da je označavanjem takvim blokovima segmenta DNK specifičnog samo za određenu vrstu (ali ne i za druge vrste) moguće opetovano reproducirati (amplificirati) tu određenu regiju. Testni sustavi koji se temelje na principu amplifikacije DNA u većini slučajeva omogućuju otkrivanje bakterija i virusa patogenih za čovjeka, čak iu slučajevima kada ih nije moguće otkriti drugim metodama. Specifičnost PCR testnih sustava (s pravilnim odabirom početnica specifičnih za taksone, isključivanjem lažno pozitivnih rezultata i odsutnošću inhibitora pojačanja u biološkim testovima) u načelu vam omogućuje da izbjegnete probleme povezane s antigenima koji reagiraju unakrsno, čime se osigurava vrlo visoka specifičnost. Određivanje se može provesti izravno u kliničkom materijalu koji sadrži živi patogen. No, unatoč činjenici da osjetljivost PCR-a može doseći matematički moguću granicu (otkrivanje 1 kopije DNK uzorka), metoda se ne koristi u praksi dijagnosticiranja šigeloze zbog relativno visoke cijene.

U širokoj kliničkoj praksi od seroloških metoda istraživanja najviše se koriste metode koje se temelje na određivanju razine i dinamike serumskih protutijela na navodnog uzročnika bolesti.

Neki autori su određivali antitijela na Shigella u koprofiltratima. Koproantitijela se pojavljuju mnogo ranije od serumskih antitijela. Aktivnost protutijela doseže maksimum 9-12 dana, a do 20-25 dana obično se ne otkrivaju. R. Laplane i dr. sugeriraju da je to posljedica razaranja antitijela u crijevima pod djelovanjem proteolitičkih enzima. Koproantitijela se ne mogu otkriti u zdravih ljudi.

W. Barksdale et al, T.H. Nikolajev i sur. izvješćuju o povećanju učinkovitosti dešifriranja dijagnoze i otkrivanja rekonvalescenata istodobnim određivanjem serumskih i koproantitijela.

Dokazivanje aglutinina u dijagnostičkim titrima moguće je s bakteriološki potvrđenom dizenterijom samo u 23,3% bolesnika. Ograničena osjetljivost RA također se očituje u nedovoljno visokim titrima aglutinina detektiranih uz njegovu pomoć. Postoje dokazi o nejednakoj osjetljivosti RA u različitim etiološkim oblicima infekcije šigelozama. Prema A.A. Klyucharev, antitijela u titru od 1:200 i više otkrivaju se pomoću RA samo u 8,3% bolesnika s Flexnerovom dizenterijom i još rjeđe sa Sonneovom dizenterijom. Pozitivni rezultati reakcije ne samo da su češći, nego i u višim titrima opaženi su kod Flexner I-V i Flexner VI dizenterije nego kod Sonne dizenterije. Pozitivni rezultati RA pojavljuju se od kraja prvog tjedna bolesti i najčešće se bilježe u drugom ili trećem tjednu. Prvih 10 dana bolesti čini 39,6% svih pozitivnih reakcija. Prema A.F. Podlevsky i sur., aglutinini u dijagnostičkim titrima otkrivaju se u prvom tjednu bolesti u 19% bolesnika, u drugom tjednu - u 25% iu trećem - u 33% bolesnika.

Učestalost pozitivnih rezultata RA i visina titra antitijela otkrivenih uz njegovu pomoć izravno ovise o težini tijeka infekcije šigelom. Prema V.P. Zubareva, primjena antibiotske terapije ne smanjuje učestalost pozitivnih rezultata RA, međutim, kada se antibiotici propisuju u prva 3 dana bolesti, aglutinini se otkrivaju u nižim titrima.

RA ima ograničenu specifičnost. Prilikom ispitivanja zdravih ljudi, pozitivni rezultati RA dobiveni su u 12,7% slučajeva, u 11,3% slučajeva zabilježene su grupne reakcije. Zbog antigenskog odnosa bakterija Flexner I-V i Flexner VI posebno se često uočavaju križne reakcije kod odgovarajućih etioloških oblika infekcije šigelozama.

Pojavom naprednijih metoda serodijagnostike infekcije šigelozama RA postupno gubi na značaju. Dijagnostičku vrijednost reakcije aglutinacije ("Vidalova dizenterijska reakcija") (RA) u dizenteriji različiti istraživači procjenjuju dvosmisleno, međutim, rezultati rada većine autora ukazuju na ograničenu osjetljivost i specifičnost ove metode.

Najčešće se za određivanje protutijela koristi neizravna (pasivna) reakcija hemaglutinacije (RPHA). Detaljna istraživanja dijagnostičke vrijednosti reakcije pasivne hemaglutinacije (RPHA) u infekciji šigelozom proveli su A.V. Lullu, L. M. Schmuter, T. V. Vlohom i niz drugih istraživača. Njihovi rezultati omogućuju nam da zaključimo da je RPHA jedna od najučinkovitijih metoda za serološku dijagnostiku dizenterije, iako nije bez nekih zajedničkih nedostataka svojstvenih metodama ove skupine.

Usporedna studija osjetljivosti kod dizenterijske RPHA i reakcije aglutinacije pokazuje veliku superiornost prve metode. Prema A. V. Lullu, prosječni titri RPHA u ovoj bolesti premašuju prosječne titre RA za 15 puta (na vrhuncu bolesti za 19-21 puta), antitijela u visokim (1: 320 - RPHA) otkrivaju se pri upotrebi 4,5 puta češće nego u titru (1:160 kod postavljanja reakcije aglutinacije). Uz bakteriološki potvrđenu akutnu dizenteriju, pozitivna reakcija RPHA u dijagnostičkim titrima zabilježena je tijekom pregleda 53-80% pacijenata.

Hemaglutinini se detektiraju od kraja prvog tjedna bolesti, povećava se učestalost detekcije i titar protutijela, dostižući maksimum krajem drugog i trećeg tjedna, nakon čega se njihov titar postupno smanjuje.

Postoji jasna ovisnost učestalosti pozitivnih rezultata RPHA i titra hemaglutinina o težini i prirodi tijeka infekcije šigelom. Relevantne studije pokazale su da su s izbrisanim i subkliničkim oblicima infekcije pozitivni rezultati RPHA dobiveni rjeđe nego s akutnom klinički izraženom dizenterijom (52,9 odnosno 65,0%), dok su u titrima od 1:200 - 1:400 samo 4 odgovorilo je 2% seruma (s klinički izraženim oblikom - 31,2%), a kod produljenih i kroničnih oblika pozitivni rezultati RPHA zabilježeni su u 40,8% bolesnika, uključujući samo 2,0% u titru 1:200. Također postoje izvještaji o različitoj osjetljivosti RPHA u pojedinim etiološkim oblicima infekcije šigelozama. Prema riječima L.M. Schmuter, najviši titri hemaglutinina opaženi su kod dizenterije po Sonneu, a značajno niži titri kod dizenterije Flexner I-V i Flexner VI. Antibakterijsko liječenje započeto u ranoj fazi bolesti, zbog smanjenja trajanja i intenziteta antigenske iritacije, može uzrokovati pojavu hemaglutinina u krvnom serumu u nižim titrima.

Kao i reakcija aglutinacije, RPGA ne omogućuje uvijek točno prepoznavanje etiološkog oblika infekcije šigelozom, što je povezano s mogućnošću grupnih reakcija. Križne reakcije opažene su uglavnom kod Flexner dizenterije - između Flexner I-V i Flexner VI dizenterije. Humoralni imunološki odgovor kod mnogih pacijenata je slabo izražen. Također nije isključena mogućnost križne aglutinacije zbog zajedničkih antigena. Međutim, prednosti ove metode uključuju jednostavnost postavljanja reakcije, mogućnost brzog dobivanja rezultata i relativno visoku dijagnostičku učinkovitost. Značajan nedostatak ovu metodu je da se dijagnoza ne može postaviti prije 5. dana bolesti, maksimalni dijagnostički titri protutijela mogu se odrediti do 3. tjedna bolesti, pa se metoda može klasificirati kao "retrospektivna".

Za dijagnosticiranje dizenterije također se predlaže određivanje razine specifičnih cirkulirajućih imunoloških kompleksa predstavljenih S.sonnei O-antigenom, povezanih sa specifičnim protutijelima, korištenjem neizravne "sendvič verzije" enzimskog imunološkog testa zbog njegove visoke osjetljivosti i specifičnosti.Međutim, metoda se preporuča koristiti samo s 5 dana bolesti.

U bolesnika s dizenterijom od samog početka bolesti nalazi se specifično povećanje bakteriofiksacijske aktivnosti krvi zbog antigen-vezne aktivnosti eritrocita. U prvih 5 dana AII, određivanje antigen-vezne aktivnosti eritrocita omogućuje utvrđivanje etiologije bolesti u 85-90% slučajeva. Mehanizam ovog fenomena nije dobro shvaćen. Može se pretpostaviti da je njegova osnova vezanje eritrocita na njihove C3v receptore (kod primata, uključujući ljude) ili Fcγ receptore (kod drugih sisavaca) imunološkog kompleksa antigen-antitijelo.

Među relativno novim metodama za bilježenje specifičnog imunološkog odgovora na staničnoj razini pozornost privlači određivanje antigen-vezujućih limfocita (ABL) koji reagiraju sa specifičnim, taksonomski značajnim antigenom. Detekcija ASL provodi se različitim metodama - uparenom aglutinacijom limfocita s antigenom, imunofluorescencijom, RIA, adsorpcijom limfocita na stupcima koji sadrže antigen, adhezijom mononuklearnih stanica na staklenim kapilarama, reakcijom neizravnog stvaranja rozete (RNRO). Treba napomenuti da su tako visokoosjetljive metode registracije ASL kao što su ELISA i RIA, adsorpcija limfocita na stupcima koji sadrže antigen tehnički relativno složene i nisu uvijek dostupne za široku primjenu. Radovi niza autora pokazali su visoku osjetljivost i specifičnost PHPR za otkrivanje ASL-a u različitim bolestima. Brojni su istraživači otkrili blisku vezu između sadržaja ASL u krvi pacijenata s različitim patologijama i oblicima, ozbiljnosti i razdoblja bolesti, njezinog prijelaza u dugotrajno ili kronični oblik.

Neki autori vjeruju da se određivanjem razine ASL-a u dinamici bolesti može suditi o učinkovitosti terapije. Većina autora smatra da ako je uspješno, broj ASL pada, a ako je učinkovitost liječenja nedovoljna, bilježi se porast ili stabilizacija ovog pokazatelja. Zabilježeno je da se ASL može koristiti za kvantificiranje senzibilizacije na tkivo, bakterijske antigene i antibiotike, što je važno. dijagnostička vrijednost. ASL metoda se u ograničenoj mjeri koristila za dijagnosticiranje dizenterije.

Mogućnost rano otkrivanje ASL je već u prvim danima nakon infekcije vrlo važan za ranu dijagnozu i pravodobno liječenje koje je neophodno kliničaru.

Dakle, podaci prikazani u pregledu pokazuju da je, s obzirom na raširenost dizenterije, nedovoljnu osjetljivost i kasnu pojavu pozitivnih rezultata mnogih dijagnostičkih metoda, uputno razvijati dijagnostički potencijal za otkrivanje ove infekcije. Podaci dobiveni u mnogim zaraznim bolestima o visokoj učinkovitosti ASL metode, ranoj pojavi njegovog pozitivnog rezultata, određuju izglede za proučavanje i primjenu ove metode kod šigeloze.

Bibliografija

1 Yushchuk N.D., Brodov L.E. Diferencijalna dijagnoza i liječenje akutnih crijevnih infekcija // Ros. i. gastroenterol., hepatol., koloproktol. - 2000. - 10, br. 5. - S. 13 - 16. - Rus. – ISSN 1382-4376. – RU.

2 Šuvalova E.P., Zmuško E.I. Sindromska dijagnostika zaraznih bolesti. // Udžbenik. - St. Petersburg: Peter, 2001. - S. 138-141.

3 Karalnik B.V., Amireev S.A., Syzdykov M.S. Načela i mogućnosti metoda laboratorijske dijagnostike i tumačenja njihovih rezultata u radu epidemiologa // Metoda. preporučeno - Almaty. - 1997. - 21 str.

4 Karalnik B.V. Serološka dijagnostika bakterijskih crijevnih infekcija. // Metoda. preporuke. - Almaty, 1973. - 3-20 str.

5 5. Nurkina N.M. Komparativna učinkovitost metoda za serološku dijagnostiku dizenterije pomoću senzibiliziranih eritrocita: Sažetak disertacije. dis. kand. - Almaty, 1984. - 22 str.

6 Karalnik B.V., Nurkina N.M. Kompleksna serološka dijagnostika dizenterije. // Metoda. preporuke. - Almaty, 1983. - 24 str.

7 Erkinbekova B.K. Metoda indikacije antigena Shigella u sanitarnim i epidemiološkim studijama dizenterije: Sažetak disertacije. diss. ...kandidat medicinskih znanosti. - Almaty, 1995. - 18 str.

8 Nikitin V.M., Georgita F.I., Plugaru S.V. i tako dalje. Ubrzane metode dijagnoza zaraznih bolesti. // Chisinau. - 1987. - 106 str.

9 Neverov V.A. Strategija i taktika dijagnostike i liječenja akutnih crijevnih infekcija. // St. Petersburg - 1996. - 12 str.

10 Vorobyov A.A. Medicinska mikrobiologija, virusologija i imunologija. // M.- 2004.- S. 7-8.

11 Ivanov K.S., Ivanov A.I. Dijagnostika akutnih proljevastih infekcija // Klin. med. - 1992. - br. 7-8 - S. 64-69.

12 Ciudin L., Pencu E., Mihai, I. et al. Serološka identifikacija sojeva Shigella flex neri reakcijom koaglutinacije // Roum. Arh. Microbiol. Immunol. -1995/ - Vol/ 54(4). - Str. 295 - 311.

13 Lindberg A.A., Cam P.D., Chan N. et al. Šigeloza u Vijetnamu: miološka ispitivanja seroepida s upotrebom lipopolisaharidnih antigena u enzimskim imunološkim testovima // Rev. Zaraziti. Dis - 1991. - Vol. 13, Suppl 4. - P.231 - 237.

14 Sloper S. Shigella. // U: Enterobacteriaceae infekcija. Leipzig.- 1968.- P. 375-441.

15 Jacobs J., Rudensky B., Dresner J. et al. Usporedba četiri laboratorijska testa za dijagnozu proljeva izazvanog Clostridium difficile // Eur. J. Clin Microbiol. Infect.Dis. - 1996. - Vol. 15(7). - Str. 561-566.

16 Klyucharev A.A., Poleshko D.V., Vershenya M.I. Kliničke i epidemiološke značajke tijeka dizenterije posljednjih godina. // Zdravstvena zaštita Bjelorusije. - 1973. - br. 11. - str. 54-56.

17 Gusarskaya I.L. Značajke kliničkog tijeka Sonneove dizenterije u sadašnjoj fazi i neka pitanja njegove prevencije. // U knjizi: Problemi zaraznih bolesti. - Vologda. - 1970. -S. 23-27 (prikaz, ostalo).

18 Shitov I.A., Trinitatskaya M.I. Trajanje bakterioizlučivanja u bolesnika s akutnom dizenterijom. // U knjizi: Crijevne infekcije.- Dio 2.- L. 1972.- S. 161-163.

19 Avdeeva T.A. Kvantitativno mikrobiološko ispitivanje dizenterije (rezultati razvoja i primjene metode proučavanja kliničkih, mikrobioloških i epidemioloških obrazaca dizenterije). Sažetak. dis. za natjecanje znanstvenik korak. dr. med. znanosti. L., 1964., 28 str.

20 Tillet H., Thomas M. Kultura fecesa u dijagnozi Sonne dizenterije: statistička metoda za procjenu prave stope izolacije. // Ukrcaj. J. Epidemiol.- 1974.- vol. 3.- R. 177-181.

21 Khaimzon B.I. Reakcija porasta titra faga u dijagnozi akutne dizenterije u odraslih. Sažetak. dis. za natjecanje znanstvenik korak. limenka. medicinske znanosti Voronjež, 1965., 16 str.

22 Vilkomirskaya T.S. Materijali o proučavanju osjetljivosti i specifičnosti reakcije porasta titra faga (RNF) u dijagnozi dizenterije. // U knjizi: Problemi imunologije zaraznih i alergijskih bolesti. Ufa.- 1970.- S. 48-49.

23 Ivanov F.M. Usporedna vrijednost metoda sjetve, rasta titrafaga i detekcije antigenskih tvari u različitim fazama dizenteričnog procesa. Sažetak. dis. za natjecanje znanstvenik korak. limenka. medicinske znanosti Orenburg, 1963, 10 str.

24 Vilkomirskaya T.S. O kliničkom i epidemiološkom značaju reakcije povećanja titra faga (RNF) u dijagnozi dizenterije u Ufi. Sažetak. dis. za natjecanje znanstvenik korak. limenka. med. znanosti. Ufa, 1971, 24 str.

25 Mazurin N.D., Rozina-Itskina Ts.S. Reakcija porasta titra faga u dijagnozi dizenterije. // JMPEI.- 1963. - Br. 1.- Str. 113-116.

26 Golyusova E.V., Trokhimenko M.Z. O značaju Tsuverkalovljevog testa u dijagnostici akutne dizenterije u djece. // Intestinalne infekcije (Kijev).- 1972. - br. 5. - S. 97-99.

27 Fradkin V.A., Lodinova L.M. Primjena alergena u dijagnostici kroničnih crijevnih infekcija. // U knjizi: Bakterionositeljstvo i kronični oblici zaraznih bolesti. - dio 2. - M.-1975.- S. 213-215.

28 Lukashevich K.K. Alergijska metoda dijagnoza dizenterije. // U knjizi: Neka pitanja klinike i alergije u infektivnoj patologiji Kuibyshev - 1970. - P. 41-43.

29 Chechelnitsky V.M. Vrijednost Tsuverkalovljeve reakcije u dijagnostici akutne dizenterije. // U knjizi: Imunologija i crijevne infekcije Voronjež - 1970. - P. 110-114.

30 Bogdanov I.L. Alergija u patogenezi, klinici i terapiji zaraznih bolesti. // M.- 1974.- 245 str.

31 Gorchakova G.A. Dizenterin (lijek za intradermalno ispitivanje u dijagnostici dizenterije). Sažetak. dis. za natjecanje znanstvenik korak. dr. medicinske znanosti Odesa, 1969., 19 str.

32 Lubitskaya N.A., Polyak A.I. Imunodijagnostika dizenterije u djece // VI All-Union. konf. prema kliničkim biokemije, morfologije i imunol.infekts. Bol.: Sažeci izvješća. - Riga, 1983. - S. 106-107.

33 Furman A.A. Komparativna studija neke ubrzane metode laboratorijske dijagnostike dizenterije i kolienteritisa. Sažetak. dis. Pumpa znanstvenik korak. limenka. med. znanosti. Kijev, 1970, 19 str.

34 Mikhailov I.F., Pers I.F. Identifikacija antigenih odnosa između bakterija crijevna skupina metoda fluorescentnih antitijela. ZHMEI, 1975, broj 5, S. 97-103.

35 Šmuter L.M. Reakcije neizravne hemaglutinacije i neutralizacije protutijela u dijagnostici dizenterije. Sažetak. dis. za natjecanje znanstvenik korak kanal med. znanosti. Harkov, 1968., 19 str.

36 Evdokimova T.V., Podlevsky A.F., Yafaev R.Kh. Kliničke i laboratorijske paralele u akutnoj dizenteriji u odraslih. - JMPEI, 1974, br. 6, S. 82-85.

37 Mogilev V.E. Pasivna hemaglutinacija kod dizenterije. Sažetak diplomskog rada za natjecanje znanstvenik korak. limenka. med. znanosti. Kujbišev, 1968., 20 str.

38 Rybakova N.A. Primjena reakcije inhibicije pasivne hemaglutinacije za dijagnozu Sonneove dizenterije u praktičnom laboratoriju. - Laboratorij. slučaj, 1975, br. 3, str. 168-170.

39 Ivanov F.M. Usporedna vrijednost metoda sjetve, rasta titrafaga i detekcije antigenskih tvari u različitim fazama dizenteričnog procesa. Sažetak. dis. za natjecanje znanstvenik korak. limenka. med. znanosti. Orenburg, 1963, 10 str.

40 Godovanny B.A., Litinsky Yu.I., Bodisko V.P. Kvantitativno određivanje antigena Shigella Sonne u urinu bolesnika i kliconoša. - Laboratorij. slučaj, 1974, br. 6, str. 360-363.

41 Kaškin G.S. Proučavanje dinamike mikrobnih antigena u krvi i urinarnom traktu kod akutne dizenterije. - U knjizi: Problemi zaraznih bolesti. Vologda, 1970, str. 47-50.

42 Nurkina N.M. Komparativna učinkovitost metoda za serološku dijagnostiku dizenterije pomoću senzibiliziranih eritrocita: Sažetak disertacije. dis. kand. - Almaty, 1984. - 22 str.

43 Li Van Ho., Rubtsov I.V., Tregub A.V., Remneva T.V. Usporedna dijagnostička vrijednost nekih metoda za otkrivanje dizenteričnih antigena u supstratima tijela bolesnika. // J. microbiol. - 1989. - br. 1. - S. 57-61.

45 Sakal N.N. Primjena i procjena učinkovitosti enzimskog imunološkog testa u ranoj dijagnozi i prognozi tijeka Sonneove dizenterije: Sažetak disertacije. diss. … kand. med. znanosti. - St. Petersburg, 1993. - 21 str.

46 Rubtsov I.V., Pimenova G.N., Kulakova V.N. Za statističku procjenu kliničkih i laboratorijskih podataka ELISA // Zbornik radova obljetnice znanstveno-praktične. konferencije, posvećene 80. obljetnica formiranja Zavoda za zarazne bolesti MMA nazvana. I. M. Sechenov (22.-23. svibnja 2003.). - M.: VMA im. I. M. Sechenov. - 2003. - S. 152-153.

47 Downes F.P., Green J.K. et al. Razvoj i procjena imunoenzimske analize za detekciju Shiga – sličnog toksina I i Shiga – sličnog toksina II // J. Clin. mikrobiol. - 1989. - V. 27, br. 6. - Str. 1292-1297.

48 Barbans P.S., Pantyukhina A.N. Metoda za dobivanje i praćenje fluorescentnih Fav - fragmenata antitijela protiv serumskih proteina ljudi koji su imali trbušni tifus // J. microbiol., epidemiol. i imunobiol. - 1984. - br. 2. - S. 102-105.

49 Upotreba sintetskih antigena za dijagnostiku zaraznih bolesti //Techn.ser/WHO. - 1989. - br. 784. - Str. 1-74.

50 Ekwall E., Norberg T., Swensons S.B. et al. specifična identifikacija antigena O3 serogrupe E salmonele imunofluorescencijom i koaglutinacijom s antiserumom izazvanim 1 sintetskim trisaharidom – albuminglikokonjugatom goveđeg seruma // J. Clin.Microb. - 1994. - 19, br. 5. - Str. 699-702.

51 Lee Kuo-Ka, Ellis A.E. Brzo i osjetljivo bojenje srebro-lipopolisaharidom korištenjem Phast sustava u brzoj horizontalnoj elektroforezi u poliakrilamidnom gelu //Electrophoresis. - 1989. - V. 10, br. 10. - Str. 729-731.

52 Tempieva T.V., Yuditskaya N.M., Litinsky Yu.I., Lee Wam Ho. Ultrazvučna dezintegracija imunoloških kompleksa za detekciju antigena Shigella u urinu bolesnika s dizenterijom // Lab. posao. - 1988. - br. 9. - S. 64-66.

53 Chaika N.A. Proučavanje crijevnih infekcija i njihovih uzročnika suvremenim imunološkim metodama // Akutne crijevne infekcije. - L.: Lenjingrad. Istraživački institut za epid. i mikrofon. - 1987. - br. II. - Str.3-8.

54 Khazenson L.B., Chaika N.A. Imunološke osnove dijagnostike i epidemiološke analize crijevnih infekcija. – M.: Medicina. –1987. – 112 str.

55 Kaškin G.S. Proučavanje dinamike mikrobnih antigena u krvi i urinu djece s akutnom dizenterijom. // U knjizi: Problemi zaraznih bolesti. - Vologda. – 1970.- S. 47-50.

56 Godovannyy B.A., Litinsky Yu.I., Bodisko V.P. Kvantitativno određivanje antigena Shigella Sonne u mokraći bolesnika i kliconoša. // Lab. posao. - 1970. - br. 6. - S. 360-363.

57 Rybakova N.A., Rybakov D.A. Primjena RNGA i RNAt u epidemiološkom ispitivanju bolesti etiologije dizenterije. – Zbornik Lenjingradskog istraživačkog instituta za epidemiol. i mikrobiol. ime Pasteur. -t. 56. - L., 1981. - S. 58-61.

58 Vasiljeva A.V. Usporedna procjena različitih metoda serološke dijagnostike Sonneove dizenterije. // Crijevne infekcije. - 1972. - Br. broj 5. - S. 129-132.

59 Dubinina I.G., Shcherbo S.N., Makarov V.B. Metode lančane reakcije polimerazom u laboratorijskoj praksi. // Klinička laboratorijska dijagnostika. - 1997, br. 7. - Str. 4 - 6.

60 Turkadze K.A., Podkolzin T.A., Kokoreva L.N. Usporedna učinkovitost korištenja PCR-a i bakteriološke metode u dijagnostici salmoneloze i šigeloze // Zbornik obljetničkih znanstvenih i praktičnih radova. konferencije, posvećene 80. obljetnica formiranja Zavoda za zarazne bolesti MMA nazvana. I. M. Sechenov (22.-23. svibnja 2003.). - M.: VMA im. I. M. Sechenov. - 2003. - S. 172-173.

61 Akhtamov M.A., Akhmedov A.A. Usporedna studija djelotvornosti nekih serološke reakcije u laboratorijskoj dijagnostici akutne dizenterije // Med. Časopis Uzbekistana. - 1984. - br.1. - S. 29-31.

62 Borisov V.A. Na usporednu ocjenu nekih seroloških metoda za dijagnosticiranje dizenterije. - Laboratorij. slučaj, 1972, br. 9, str. 564-566.

63 Laplane R., Be, gue P., Omanga V. Anticorps seriques et copro-anticorps dansles infections bacteriennes digestives de l, infant. // Bik. Akad. nat. med. - 1975. - Vol. 159. - Broj 7. - Str. 596-600.

64 Barksdale W., Ghoda A. Aglutinirajuća protutijela u serumu i fezama.// J. Immunol. - 1951. - God. 66. – Str. 395 – 401.

65 Nikolaeva T.A., Kukain E.M., Khazenson L.B. Imunokemijska priroda kopro- i serumskih protutijela u bolesnika sa Sonneovom dizenterijom i drugim ICD-ima. - Tez. izvješće Na znanstveno-praktične. konf., posvećen 50. obljetnica LeningrNIIEM im. Pasteur. L., 1973, str. 53-54 (prikaz, ostalo).

66 Lullu A.V. Primjena reakcije neizravne hemaglutinacije za dijagnostiku i proučavanje imunologije akutne dizenterije. // Sažetak. dis. za natjecanje znanstvenik korak. limenka. med. znanosti. - Tartu. - 1963. - 10 str.

67 Klyucharev A.A. Materijali za proučavanje dizenterije u Bjelorusiji. Poleshko D.V., Vershenya M.I. Kliničke i epidemiološke značajke tijeka dizenterije posljednjih godina. // Sažetak. dis. za natjecanje akademski korak. dr. med. znanosti. - Kaunas. - 1970. - 32 str.

68 Podlevsky A.F., Tselinskaya N.M., Zhuravleva L.V., Buchel N.E. Reakcija neizravne hemaglutinacije kod dizenterije u bolesnika različite dobi. // U knjizi: Problemi epidemiologije i prevencije crijevnih i prirodnožarišnih infekcija. L., 1971, S. 93-99.

69 Zaitlenok M.A., Eremina A.M., Subbotina Yu.L. Serološke studije akutnih crijevnih infekcija nisu bakteriološki potvrđene // Imunologija i imunopatologija. - Voronjež, 1983. - S. 35-37.

70 Borisov V.A., Orlik N.S., Kirilyuk M.A. Imunološki odgovor u bolesnika s dizenterijom s produljenim izbacivanjem shigella. // All-Union. konf. kliničke biokemije, morfologije i imunologije zaraznih bolesti. Tez. izvješće - Riga. - 1977. - S. 377-378.

71 Chilingaryan A.V. Rezultati paralelne primjene modela pluća, testa neizravne hemaglutinacije i testa aglutinacije za dokazivanje antidizenteričnih protutijela u krvi zdravih osoba. // U knjizi: Akutne crijevne infekcije. Dizenterija, escherichiosis, salmoneloza. - L. - 1970. - S. 93-101.

72 Patton C.M., Gangorosa E.J., Weissman J.B. et al. Dijagnostička vrijednost inderektne hemaglutinacije u seroepidemiologiji infekcija šigelama. // J.ofClin. Microb. - 1976. - Vol. - 23. - Str. 143-148.

73 Martinez J. Epidemiološka studija bakterijske dizenterije. // Bol. ofic. sanitacija panamer. - 1973. - Vol. 75. - Str. 213-224.

74 Musabaev I.K., Abubakirova F.Z. Bakterijska dizenterija. - Taškent - 1973. - 258 str.

75 Dulatova M.V., Golovacheva S.N., Savitskaya O.V. Princip RPGA u ekspresnoj dijagnostici infekcija i imuniteta. // U knjizi: Pripreme za ekspresnu dijagnostiku. - L., 1981. - S. 31-42.

76 Safonova N.V. Primjena reakcije neizravne hemaglutinacije u žarištima akutne crijevne infekcije za identifikaciju zaraženih osoba i traženje izvora. - L., 1974. - 11s.

77 Solodovnikov Yu.P., Kalashnikova GK, Subbotina Yu.L., Bobkin SV Reakcija neizravne hemaglutinacije u proučavanju antitijela kod zdravih, bolesnih i oporavljenih dizenterije Sonne. - JMPEI, 1971, br. 1. - Str.13-18.

78 Provotorov V.Ya. Na pitanje liječenja bolesnika s dizenterijom. - U knjizi: Patronažna skrb za zarazne bolesnike i problematika liječenja zaraznih bolesnika. Saratov, 1973. - S. 153-155.

79 Karalnik B.V. Metodologija i taktika imunodijagnostike zarazne patologije. - U knjizi: Problemi kliničke imunologije i imunološke dijagnostike. Alma-Ata, 1988. - 10 str.

80 Kaplin V.I., Klevtsova G.A., Koryukhina I.P. itd. Specifična reakcija krvi u početno razdoblje infekcije dizenterijom i salmonelom i nove mogućnosti rane specifične dijagnoze akutnih crijevnih infekcija // VI All-Union. konf. prema kliničkim biokemije, morfologije i imunol. zarazna Bol.: Sažeci izvješća. – Riga, 1983. – P.76-77.

81 Savilov E.D., Astafiev V.A., Mamontova L.M., Volodin Yu.F. Epidemiološke značajke dizenterije u Istočni Sibir. //Novosibirsk "Nauka", 1994. - P.42-43.

82 Ivanov K.S., Ivanov A.I. Dijagnostika akutnih proljevastih infekcija //Klin. med. - 1992. - br. 7-8 - S. 64-69.

83 Karalnik B.V. Eritrociti, njihovi receptori i imunitet. // Uspjeh moderne biol., M. - 1992. - v. 112, br. 1. - Str.52-61.

84 Garib F.Yu., Zalyalieva M.V. Metode za proučavanje subpopulacije limfocita u ljudi u različitim patološkim stanjima // Method.recommendations. - Taškent, 1989. - 17p.

85 Bahrg. Modabber F.Z. // J. Immunol. Meth. - 1980. - V. 38, br. 3-4. - Str. 203-216.

86 Tyagotin Yu.A. // Pitanja pregleda i liječenja bolesnika s bolestima krvnog sustava. - L., 1975. - S. 21-25.

87 Novikov D.K., Novikova V.I. Stanične metode imunodijagnostike. // Minsk, 1979. - 222 str.

88 Smirnov B.N., Toropova N.I., Mokhova G.A. i drugi // Zbornik radova Svesavezne znanstvene konferencije "Problemi medicinske biotehnologije". lis. 1988. - L., 1990. - S. 114-116.

89 Slavko E.A., Deryabin P.N., Karalnik B.V. Određivanje limfocita koji vežu antigene kao metoda rane dijagnoze dizenterije salmoneloze // Health of Kazakhstan.-Almaty.- 1999. - No. 5-6.-C.43-45.

90 Karalnik B.V., Kozhageldieva A.A., Karabekov A.Zh., Denisova T.G., Raipov O.R. Praćenje učinkovitosti liječenja jersinioza uzrokovanih Yersinia enterocolitica // Medicina. - Almaty - 2004. - Broj 4. - S. 51-53.

91 Karalnik B.V., Denisova T.G., Plazun A.A. Antigen-vezujući limfociti tuberkulinske specifičnosti u kunića inficiranih s M. bovis u dinamici liječenja tuberkuloze // Problemi tuberkuloze i plućnih bolesti. -M.-2006.- Broj 5.-S.48-53.

92 Karalnik B.V., Karabekov A.Zh., Denisova T.G., Kozhageldieva A.A., Zhunusova G.B. Diferencijalna dijagnoza bruceloze i intestinalne jersinioze uzrokovane Yersinia enterocolitica serovar O9 // Medicina.-Almaty.-2004.- Br. 3.- P.155-157.

93 Karalnik B.V., Denisova T.G., Zhunusova G.B., Fedosov S.A., Zhankin A.A., Ospanov K.S., Mizanbajeva S.U. Učinkovitost različitih testova na antitijela i testa antigen-vezujućih limfocita u dijagnostici bruceloze u ljudi. // Medicinska imunologija. – S.-P. - 2006. - Vol. 8. - Broj 4. - S. 567 - 572.

94 Karalnik B.V., Denisova T.G., Grushina T.A., Tugambaev T.I. Analiza imunološkog odgovora zamoraca zaraženih Brucella melitensis // Zh.

95 Karalnik B.V., Berezin V.E., Denisova T.G., Deryabin P.N., Slavko E.A. Dinamika sadržaja limfocita s receptorima za virus Sendai tijekom imunizacije virusom i imunostimulirajućim kompleksom iz njegovih glikoproteina // Izvest. Min.znanosti i više obrazovanje RK. Ser.biol. i medicinski-Almaty.-1999.- Br. 3.- P.50-51.

96 Garib F.Yu., Gurariy N.I., Aliev Sh.R. Karakterizacija antigen-vezujućih limfocita kod kroničnog hepatitisa u djece // Imunologija - 1988. - Br. 5. str. 91-93.

97 Finlay B.B., Falkow S.A. Usporedba mikrobnih strategija vrsta Salmonella, Shigella i Jersinia // Interakcija bakterija – stanica domaćin, Alban R. Liss. Inc. - 1988. - P. 227-243.

98 Karalnik B.V., Denisova T.G., Keshileva Z.B., Pshenichnaya L.A. i dr. Antigen-vezujući limfociti i antitijela u dijagnozi sifilisa // Spolno prenosive infekcije. - M. - 1999. - br. 5. — str. 34–36.

99 Sakanova L.M., Karalnik B.V., Ukbaeva T.D. i dr. Imunoreagensi za detekciju antigen-vezujućih limfocita i njihova aprobacija u dijagnostici meningokokna infekcija// Higijena, epidemiologija i imunobiologija - Almaty. -2002.- Broj 1-2.-S.69-72.

100 Slavko E.A., Deryabin P.N., Karalnik B.V., Karabekov A.Zh. O specifičnosti antigen-vezujućih limfocita otkrivenih u bolesnika s akutnim upalnim bolestima gastrointestinalnog trakta. // Higijena, epidemiologija i imunobiologija. - Almaty. - 1999. - br. 2. - S. 102 - 105.

prije podneSadykova

Laboratorijska dijagnostika dizenterije

Tү jin: Zhedel íshek infectionalaryn bakylauda, ​​​​dizenterija naқty diagnostics en özu maselesi bolyp tabylady. Bakterijski dizenterični dұrys қoyylғan dijagnosticira nauқaska vaқytynda em zhүrgizuge zhane epidemica қarsy sharalardy өtkízu үshín manyzdy. Обзордағы көрсетілген мәліметтер, дизентерияның кең таралуын негіздей отырып, сезімталдығының жеткіліксіздігі және көп деген диагностикалық әдістердің оң нәтижесінің кеш анықталуына байланысты, осы инфекцияны анықтауда диагностикалық потенциалды мақсатты түрде дамыту керек екенін көрсетеді.

Tү indi sө zder: dijagnostika, dizenterija, antigenbaylanystyrushy adis.

prije podneSadycova

Laboratorijska dijagnostika dizenterije

Sažetak: Pouzdana dijagnoza proljeva jedno je od najvažnijih pitanja u kontroli akutne crijevne infekcije. Točna dijagnoza bakterioznih proljeva ima životno značenje za pravilno i točno liječenje bolesnika, kao i za poduzimanje potrebnih protuepidemijskih mjera. Članovi navedeni u anketi, s obzirom na raširenost proljeva, pokazuju neosjetljivost i kasnu pojavu pozitivnih rezultata mnogih dijagnostičkih metoda. Neophodno je ciljno razviti dijagnostički potencijal za dizajniranje infekcije.

ključne riječi: dijagnostika, dizenterija, metoda antigen-vezujućih limfocita.