Metódy stanovenia krvnej skupiny a Rh faktora. Stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora

Každý človek potrebuje poznať svoju krvnú skupinu a Rh faktor. To sa môže zrazu hodiť, keď núdzové situácie. Je známe, že pre všetkých vojenských pracovníkov je povinné uvádzať tieto parametre na svojich uniformách alebo odznakoch. Vo veľkom lekárske organizácie Laboratóriá nevykonávajú analýzy.

Malé dedinské kliniky sú však vybavené aj štandardným laboratórnym komplexom na vykonávanie testu. Zapnuté tento moment Existuje veľké množstvo metód určovania.

Určenie krvnej skupiny dieťaťa na základe krvnej skupiny rodičov je pomerne bežnou metódou získavania údajov. Napríklad, ak má matka alebo otec druhého, tretieho alebo štvrtého, krvná skupina ich dieťaťa nikdy nebude prvá. Aj keď ide o skôr povrchné poznatky. Samozrejme, testovanie krvných skupín je lepšie zveriť odborníkom.

Definícia domova

Takéto rady dávajú ľudia, ktorí žijú na internete a zbierajú akékoľvek informácie bez toho, aby im skutočne rozumeli. Niekedy to chápať veľmi špecifickým spôsobom.

Skutočne existuje koncept založený na krvnej skupine, ako aj rôzne učenia, ktoré s ňou spájajú osobnosť. Ale tieto teórie boli vyvinuté na výber najvhodnejších a zdravá diéta výživa, prevencia chorôb.

Séra sa odoberajú z transfúznych staníc a majú trvanlivosť. Povinná požiadavka sú podmienky skladovania laboratórneho materiálu.

Ampulky musia byť označené sériovým číslom. Pre presnosť túto metódu séra z niekoľkých sérií sú potrebné, aby sa predišlo nepresným výsledkom analýzy.

Algoritmus na vykonanie analýzy na určenie krvných skupín je nasledujúci:

• Na vykonanie analýzy touto metódou sú potrebné veľké kvapky štyroch typov sér (stačí len tretie a druhé, ale pre presnosť výsledku sú potrebné aj prvé a štvrté).
• Testovaná krv sa pridá do séra a premieša sa (pomer približne 1:10). Počas piatich minút sa vzorky krvi a séra jemne miešajú.

Dešifrovanie analýzy pomocou štandardnej metódy

Po piatich minútach môžete získať . Vo veľkých časticiach srvátky dochádza k číreniu, v niektorých sa objavujú malé vločky (reakcia zrážania a zrážania), v iných sa tak nestane.

Možnosti a interpretácia testu na zistenie krvnej skupiny môžu byť nasledovné:

• aglutinácia chýba v oboch vzorkách séra tretieho a druhého typu (+ ďalší prvý a štvrtý) - ide o prvý typ krvi;
• koagulácia sa vyskytuje vo všetkých okrem druhej - to hovorí o ;
• ak aglutinácia chýba iba pri treťom type séra - to je;
• ak dôjde ku koagulácii vo všetkých vzorkách, je to .

V prípade, že sú údaje o sére uvedené v správnom poradí a na vzorkách sú uvedené podpisy, je ľahké určiť výsledok štúdie: ak nedôjde ku koagulácii, krvná skupina sa určí automaticky.

Môžu nastať situácie, keď je viditeľnosť väzby nejasná.

V tomto prípade sa to uskutoční druhýkrát, pod mikroskopom sa pozorujú malé reakcie adhézie a precipitácie.

Zoliklony sú umelé analógy sér. Obsahujú syntetické náhrady aglutinínov ά a β. v medicínskom prostredí sa považuje za metódu, ktorá dáva najviac presné výsledky. Druhý názov analýzy je „erythrotests“.

Na analýzu formovania skupinovej príslušnosti existujú dva typy cyklónov:

• anti-A;
• anti-B;

Táto technika stanovenie krvnej skupiny je v súčasnosti najkvalitnejšie. Predpokladaná aglutinácia nastáva medzi červenými krvinkami pacienta a aglutinínmi týchto koliklonov. Výsledky tejto metódy sú tiež dešifrované, rovnako ako pri analýze pomocou sérovej metódy. Táto metóda stanovenie krvnej skupiny si na rozdiel od štandardnej metódy nevyžaduje použitie dvoch sérií vzoriek na analýzu.

Táto metóda má tiež špecifická vlastnosť: štvrtá krvná skupina povinné určený špeciálnym anti-AV cyklónom.

Vďaka tomu je možné určiť vašu krvnú skupinu a jej Rh faktor takmer v akomkoľvek domácom prostredí. Expresná súprava obsahuje špeciálnu kartu, na ktorej sú vytvorené priehlbiny. Hlavnou výhodou rýchleho testu je rýchlosť analýzy a jednoduchá implementácia. Výsledok štúdie je známy približne po piatich minútach.

Expresný test

Okrem štandardných protilátok sa používa aj „anti-D“. Poskytuje informácie o Rh faktore pacienta. Na tento rozbor je krv vhodná takmer v akejkoľvek forme. Špecifické činidlá sú už zahrnuté v expresnej metóde.

Pred transfúziou alebo vážne chirurgická intervencia Krvná skupina sa znova kontroluje, aby sa zabezpečila absolútna presnosť údajov. Je to tiež veľmi dôležité individuálna kompatibilita osoba, okrem skupiny.

Stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora sa delí na dva spôsoby:

1. primárna definícia krvné skupiny a Rh faktor Anti-A, Anti-B a Anti-D)
2. sekundárna diagnóza krvná skupina a Rh faktor ( A, t.j. )

Expresná diagnostika (primárne stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora) neberie do úvahy , nehovoriac o iných overovacích systémoch. Preto sa používajú zoliklony len pre krvná skupina a Rh faktor a zložky krvi.

P viac informácií o sebe vzácna skupina krv sa dá nájsť vo svete.

Stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora pomocou anti-A, anti-B a Anti-D cyklónov podľa systému AB0 a systému Rhesus

Stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora pomocou anti-A, anti-B a Anti-D superkoliklonov je najmodernejší a relatívne jednoduchá metóda. Na stanovenie krvnej skupiny sa používajú zoliklony, t.j. monoklonálne protilátky.

Čo je potrebné na určenie krvnej skupiny a Rh faktora?

– zoliklon anti-A ;

– zoliklon anti-B;

– zoliklon anti-D;

– roztok chloridu sodného 0,9 %; špeciálna tableta; sterilné tyčinky.

Algoritmus a postup na určenie krvnej skupiny

Aplikujte anti-A, anti-B zoliklony na špeciálnu tabletu, jednu veľkú kvapku (0,1 ml), pod príslušnými nápismi.

Vedľa nich nakvapkajte testovanú krv (0,01–0,03 ml) po jednej malej kvapke. Zmiešajte ich a pozorujte výskyt alebo absenciu aglutinačnej reakcie počas 3 minút. Ak je výsledok pochybný, pridajte 1 kvapku 0,9 % fyziologického roztoku.

Dekódovanie výsledkov stanovenia krvnej skupiny

• anti-A zolikón, potom testovaná krv patrí do skupiny A (II);
• ak dôjde k aglutinačnej reakcii s anti-B zolikón, potom testovaná krv patrí do skupiny B (III);
• ak sa aglutinačná reakcia nevyskytla pri anti-A a anti-B koliklonoch, potom testovaná krv patrí do skupiny 0 (I);
• ak sa aglutinačná reakcia vyskytla pri anti-A a anti-B koliklonoch, potom testovaná krv patrí do skupiny AB (IV), ako je znázornené na obrázku.

Stanovenie Rh faktora zoliclon Anti-D

Na tanieri zmiešajte veľkú kvapku (0,1 ml) anti-D zoliclonu a malú kvapku (0,01 ml) krvi pacienta, ktorý sa má testovať. Nástup aglutinačnej reakcie alebo jej neprítomnosť sa pozoruje 3 minúty.

• ak dôjde k aglutinačnej reakcii s anti-D koliklonom, potom je testovaná krv Rh pozitívna (Rh +)
• ak sa aglutinačná reakcia pri anti-D zolikóne nevyskytuje, potom je testovaná krv Rh-negatívna (Rh -)

Inými slovami, keď sa Anti-D coliclone zmieša s Rh-pozitívnymi erytrocytmi, dôjde k aglutinačnej reakcii, a ak je krv Rh-negatívna, nedochádza k aglutinácii (ako je znázornené na obrázku - štvrtá krvná skupina Rh-negatívna ).

Stanovenie krvných skupín pomocou štandardných sér

Stanovenie krvných skupín pomocou štandardných izohemaglutinačných sér- vyhľadávanie a detekcia antigénov A a B v krvi pomocou aglutinačnej reakcie. Na dosiahnutie cieľa použite:

• Štandardné izohemaglutinačné séra krvných skupín O (I) - bezfarebné, A (II) - modré, B (III) - červené, AB (IV) - žlté.
• Biele dosky označené krvnými skupinami: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
• NaCl 0,9 %
• Sklenené tyčinky

Spôsob stanovenia krvnej skupiny pomocou štandardných sér

Spôsob stanovenia krvnej skupiny pomocou štandardných sér

1. Podpíšte štítok (celé meno pacienta);
2. Označte dve série štandardných sér krvných skupín I, II a III v objeme 0,1 ml, ktoré tvoria dva rady po troch kvapkách zľava doprava: 0 (I), A (II), B (III);
3. Vezmite krv zo žily. Preneste šesť kvapiek testovanej krvi pacienta sklenenou tyčinkou na doštičku v šiestich bodoch vedľa kvapky štandardného séra a premiešajte.

Aglutinácia začne o 30 sekúnd. Pridajte jednu kvapku 0,9% NaCl do tých kvapiek, kde došlo k aglutinácii a vyhodnoťte výsledok.

Vyhodnotenie výsledkov stanovenia krvnej skupiny pomocou štandardných sér

Pozitívna aglutinačná reakcia môže byť piesčitá alebo podobná okvetnému lístku. V prípade negatívnej reakcie zostáva kvapka rovnomerne sfarbená do červena. Výsledky reakcií v kvapkách so sérami rovnakej skupiny (dve série) sa musia zhodovať. Príslušnosť testovanej krvi k zodpovedajúcej skupine je určená prítomnosťou alebo neprítomnosťou aglutinácie pri reakcii so zodpovedajúcimi sérami po 5 minútach pozorovania. Treba poznamenať, že ak sérum všetkých tri skupiny vykázala pozitívnu reakciu, čo naznačuje, že testovaná krv obsahuje oba aglutinogény (A a B) a patrí do skupiny AB (IV). V takýchto prípadoch je však potrebné vykonať ďalšie, aby sa vylúčila nešpecifická aglutinačná reakcia kontrolná štúdia test krvi štandardným izohemaglutinačným sérom skupiny AB (IV), ktoré neobsahuje aglutiníny. Iba neprítomnosť aglutinácie v tejto kvapke v prítomnosti aglutinácie v kvapkách obsahujúcich štandardné séra skupín 0 (I), A (II) a B (III) nám umožňuje považovať reakciu za špecifickú a klasifikovať testovanú krv ako skupinu AB ( IV). sú potrebné štandardné červené krvinky troch krvných skupín: 0 (I), A (II), B (III).

Postup reakcie so štandardnými červenými krvinkami

1. Krv odobratý na výskum z žily do skúmavky, odstred'ujte alebo nechajte 30 minút, aby ste získali sérum.
2. Na označenú doštičku sa aplikujú tri veľké kvapky (0,1 ml) krvného séra zo skúmavky a vedľa nich jedna malá kvapka (0,01 ml) štandardných červených krviniek skupín.
3. Zodpovedajúce kvapky sa zmiešajú so sklenenými tyčinkami, tableta sa pretrepe, pozoruje sa 5 minút, k aglutinačným kvapkám sa pridá NaCl 0,9 % a vyhodnotí sa výsledok.

Vyhodnotenie výsledkov reakcie so štandardnými červenými krvinkami

Hodnotia sa výsledky získané so štandardnými izohemaglutinačnými sérami a štandardnými erytrocytmi. Zvláštnosťou výsledkov reakcie so štandardnými erytrocytmi je, že erytrocyty skupiny 0 (I) sa považujú za kontrolu. Výsledok krížovej metódy sa považuje za spoľahlivý, ak sa pri reakcii so štandardnými izohemaglutinačnými sérami a so štandardnými erytrocytmi zhodujú odpovede o testovanej krvnej skupine. Ak sa tak nestane, obe reakcie by sa mali zopakovať.

IN moderná medicína Krvná skupina charakterizuje súbor antigénov umiestnených na povrchu červených krviniek, ktoré určujú ich špecifickosť. Existuje veľké množstvo takéto antigény (zvyčajne sa používa tabuľka krvných skupín s rôznymi antigénmi), ale krvná skupina sa široko určuje pomocou klasifikácie podľa Rh faktora a systému AB0.

Určenie skupiny je povinným postupom pri príprave na akúkoľvek operáciu. Takáto analýza je potrebná aj pri vstupe do služby v niektorých kontingentoch vrátane vojenského personálu, pracovníkov vnútorné orgány a bezpečnostné zložky. Táto udalosť vykonávané z dôvodu zvýšené riziko výskyt stavu, životu nebezpečné osobu, aby sa skrátil čas potrebný na poskytnutie pomoci vo forme transfúzie krvi.

Zloženie krvi rôznych krvných skupín

Podstatou systému AB0 je prítomnosť antigénnych štruktúr na červených krvinkách. V plazme nie sú žiadne zodpovedajúce typické protilátky (gamaglobulíny). Preto sa na testovanie krvi môže použiť reakcia „antigén + protilátka“.

Červené krvinky sa zlepia, keď sa antigén a protilátka stretnú. Táto reakcia sa nazýva hemaglutinácia. Reakcia sa pri testovaní javí ako malé vločky. Štúdia je založená na získavaní obrazov aglutinácie so sérami.

Antigény červených krviniek „A“ sa viažu na protilátky „ά“, ako aj „B“ na „β“.

Odlíšte sa nasledujúce skupiny zloženie krvi:

• I (0) – ά, β - povrch erytrocytov vôbec neobsahuje antigény;
• II (A) – β - na povrchu je antigén A a protilátka β;
• III (B) – ά - povrch obsahuje B s protilátkou typu ά;
• IV (AB) – 00 - povrch obsahuje oba antigény, ale nemá protilátky.

Plod má antigény už v embryonálnom stave a v prvom mesiaci života sa objavujú aglutiníny (protilátky).

Metódy stanovenia

Štandardná metóda

Existuje mnoho techník, ale laboratórne testy zvyčajne používajú štandardné séra.

Na stanovenie typov antigénov AB0 sa používa štandardná sérová metóda. Zloženie štandardného izohemaglutinačného séra obsahuje sadu protilátok proti molekulám červených krviniek. V prítomnosti antigénu, ktorý je citlivý na pôsobenie protilátok, vzniká komplex antigén-protilátka, ktorý spúšťa kaskádu imunitných reakcií.

Výsledkom tejto reakcie je aglutinácia červených krviniek, na základe charakteru aglutinácie, ku ktorej dochádza, je možné určiť, či vzorka patrí do nejakej skupiny.

Na prípravu štandardného séra sa používa darcovská krv a určitý systém – cez izoláciu plazmy vrátane protilátok a jej následné riedenie. Riedenie sa uskutočňuje pomocou izotonického roztoku chloridu sodného.

Chov sa vykonáva takto:

Samotný výskum sa vykonáva takto:

1. Kvapka z každého séra (s celkovým objemom približne 0,1 mililitra) sa umiestni na špeciálnu tabletu na oblasť, kde je príslušná značka (používajú sa 2 vzorky, jedna z nich je kontrolná, druhá je určená na výskum) .
2. Potom sa ku každej kvapke séra umiestni testovaná vzorka v objeme 0,01 mililitra a potom sa zmieša s každým diagnostickým liekom.

Pravidlá pre dekódovanie výsledkov

Po piatich minútach môžete vyhodnotiť výsledky štúdie. Vo veľkých kvapkách séra dochádza k vyčisteniu, v niektorých sa pozoruje aglutinačná reakcia (tvoria sa malé vločky), v iných nie.

Video: Stanovenie krvnej skupiny a Rh faktora

Tu sú možné možnosti:

• Ak nie je žiadna aglutinačná reakcia v oboch vzorkách so sérami II a III (+ kontrola 1 a IV) - stanovenie prvej skupiny;
• Ak je koagulácia pozorovaná vo všetkých vzorkách okrem II, stanovte druhú;
• V neprítomnosti aglutinačnej reakcie len vo vzorke s Skupina III- definícia III;
• Ak je vo všetkých vzorkách, vrátane IV kontroly, pozorovaná koagulácia, stanovte IV.

Keď sú séra usporiadané v správnom poradí a označené na doštičke, je ľahké sa orientovať: skupina zodpovedá miestam bez aglutinácie.

V niektorých prípadoch nie je lepenie jasne viditeľné. Potom sa musí analýza zopakovať, pod mikroskopom sa pozoruje jemná aglutinácia.

Metóda krížovej reakcie

Podstatou tejto techniky je stanovenie aglutinogénov pomocou štandardných sér alebo koliklonov s paralelným stanovením aglutinínov pomocou štandardných erytrocytov.

Technika prierezovej analýzy sa prakticky nelíši od štúdie s použitím séra, existujú však niektoré doplnky.

Na platničku pod séra je potrebné pridať kvapku štandardných červených krviniek. Potom sa zo skúmavky s krvou pacienta, ktorá prešla centrifúgou, extrahuje plazma pomocou pipety, do ktorej sa umiestnia štandardné červené krvinky, ktoré sú umiestnené na dne - pridané do štandardného séra.

Rovnako ako pri štandardnej technike sa výsledky štúdie hodnotia niekoľko minút po začiatku reakcie. V prípade aglutinačnej reakcie môžeme hovoriť o prítomnosti AB0 aglutinínov, v prípade plazmatickej reakcie o aglutinogénoch.

Výsledky krvných testov s použitím štandardných červených krviniek a sér:

aglutinácia;

– nedochádza k aglutinácii;

- reakcia sa neuskutoční.

Metóda kríženia sa rozšírila vďaka tomu, že zabraňuje diagnostickým chybám, ktoré vznikajú pri použití štandardných techník.

Stanovenie krvnej skupiny zoliklonmi

Zoliklony sú syntetické náhrady séra, ktoré obsahujú umelé náhrady za aglutiníny typu ά a β. Nazývajú sa erythrotesty "Tsoliklon anti-A" (majú ružová farba), ako aj „anti-B“ (mať Modrá farba). Očakávaná aglutinácia sa pozoruje medzi aglutinínmi koliklonov a červenými krvinkami.

Táto technika nevyžaduje dve série, je spoľahlivejšia a presnejšia. Vykonanie štúdie a vyhodnotenie jej výsledkov prebieha rovnakým spôsobom ako pri štandardnej metóde.

Skupina IV (AB) je nevyhnutne potvrdená aglutináciou s anti-AB koliklonom, ako aj absenciou adhézie červených krviniek v izotonickom roztoku chloridu sodného.

Expresná metóda pomocou súpravy „Erythrotest-group card“.

Hoci sú všeobecne akceptované metódy na určenie, či krv patrí do určitej skupiny, rozšírené, v modernej medicíne sa zavádzajú expresné metódy, z ktorých najbežnejší je „Erythrotest“.

Pri určovaní skupiny pomocou techniky „Erythrotest group card“ je potrebná sada nástrojov vrátane nasledujúcich zariadení:

• Tableta s piatimi otvormi na určenie skupiny podľa jej Rh príslušnosti a systému AB0;
• Vertikutátor určený na získanie vzorky potrebnej na výskum;
• Sklenené tyčinky na miešanie vzoriek;
• Čistá pipeta na zachytávanie roztokov.

Všetky uvedené nástroje sú potrebné pre bezchybnú diagnostiku.

Súprava na krvný test „Erythrotest-Groupcard“ vám umožňuje študovať Rh faktor a určiť vašu krvnú skupinu za akýchkoľvek podmienok; je obzvlášť účinná, keď nie je možné použiť všeobecne uznávané metódy.

V jamkách na tablete sú tsoliklony k antigénom (sú to tsoliclony anti-A, -B, -AB) a k hlavnému antigénu, ktorý určuje dedičnosť Rh faktora (ide o tsoliclon anti-D). Piata jamka obsahuje kontrolné činidlo, ktoré pomáha predchádzať možné chyby a správne určiť krvnú skupinu.

Video: Stanovenie krvných skupín pomocou zoliklónov

Tento článok bude diskutovať o metódach určovania krvnej skupiny pomocou systému AB0, ako aj o expresnej metóde určovania Rh faktora.

Najprv si povedzme o účeloch určovania krvnej skupiny, ako aj o histórii štúdia tejto problematiky. Záujem o transfúziu krvi sa datuje od dávnych čias. Tiež v Staroveký Egypt lekári sa ho pokúšali podať transfúziou raneným, chorým a umierajúcim. Ako darcovia boli použité prevažne mladé zvieratá. Verilo sa, že majú špeciálne prirodzená sila a okrem toho nepodliehajú nerestiam, ako ľudia. Osobné transfúzie boli najčastejšie neúspešné. Dôvody na to objavil až oveľa neskôr rakúsky lekár Karl Landsteiner. Zistil, že ľudia majú rôzne antigény a protilátky, ktoré tvoria špeciálny imunitný systém.