Metodat helmintologjike. Metodat themelore të kërkimit për protozoarët

Më të thjeshtat ndahen në 4 klasa:

Gjatë encistacionit, mikroorganizmi fiton forme e rrumbullaket dhe të mbuluar me një këllëf mbrojtës. Në formën e një kisti, protozoarët bëhen më pak të ndjeshëm ndaj faktorë të pafavorshëm mjedisi.

Hulumtimi mund të përfshijë:

Shënim:Ka shumë lloje të diagnostifikimit, ne do të shqyrtojmë ato lloje që janë më të zakonshmet në praktikën laboratorike klinike.

Llojet private të diagnostifikimit

Në secilin rast specifik, asistenti i laboratorit ka për detyrë të gjejë një patogjen specifik, ndonjëherë të tjerët gjenden së bashku me atë kryesor.

Ekzistojnë 6 lloje të këtij mikroorganizmi të aftë për të jetuar në zorrën e njeriut. Rëndësia klinike ka vetëm amebë dizenterike, që gjendet në formë vegjetative dhe në formë kiste.

Për më tepër, përdoren metoda imunologjike:

• imunofluoreshencë indirekte;
• aglutinimi indirekt (PHA);
• imunodifuzion radial.

Shënim: metodat serologjike janë joinformative dhe përdoren vetëm si shtesë e atyre kryesore në raste të dyshimta.

Diagnoza e ciliare (ciliates)

Forma patogjene e mikroorganizmave të kësaj gjinie është balantidia. Ky është një mikrob që shkakton balantidiasis - një sëmundje e shoqëruar nga një proces ulceroz i zorrës së trashë. Agjenti shkaktar gjendet në një njollë amtare në formën e një forme vegjetative dhe një kist. Materiali për njollosjen (feçet dhe mukozën) merret gjatë ekzaminimit të sigmoidoskopisë dhe mbillet në media speciale.

Diagnostifikimi i flagjelatave (leishmania, giardia, tripanozomet, trikomonadat)

Leishmania, trypanosoma, giardia, trichomonads janë të rrezikshme për njerëzit.

Leishmania- mikrobet duke shkaktuar leishmaniozë, ekzaminohen në strishat e gjakut, materialet palca e eshtrave, gërvishtjet nga infiltratet e lëkurës. Në disa raste, në diagnozën e Leishmania, përdoret mbjellja në mjedise ushqyese.

Tripanosomet– patogjenët sëmundja e gjumit(Trypanosomiasis Amerikane/Afrikane, ose sëmundja Chagas).

Versioni afrikan është përcaktuar në periudha fillestare në studim gjaku periferik. Mikrobet patologjike gjatë përparimit të sëmundjes gjenden në materialin e shpimeve të nyjeve limfatike, në faza të avancuara - në lëngun cerebrospinal.

Për të diagnostikuar tripanozomet në rast të dyshimit të sëmundjes Chagas, materiali i provës ekzaminohet nën një mikroskop me zmadhim të ulët. Në këtë rast, njollat ​​dhe një pikë e trashë janë para-njollosur.

Trichomonas(intestinale, orale) zbulohen me mikroskop të materialeve të marra nga mukozat e prekura.

Identifikimi i sporozoanëve (plazmodiumi i malaries, agjenti shkaktar i kokcidozës, etj.)

Lloji më i zakonshëm dhe më i rrezikshëm për njerëzit është plazmodiumi i malaries, i cili ka 4 lloje kryesore të patogjenit: patogjen. malaria tre ditore, malaria katër ditore, malaria tropikale dhe malaria ovale.

Zhvillimi seksual i Plasmodiumit (sporogoni) zhvillohet te mushkonjat Anopheles. Aseksual (skizogonia e indeve dhe eritrociteve) - në indet e mëlçisë dhe eritrocitet e njeriut. Këto veçori cikli i jetes duhet të merret parasysh në diagnostikimin e plazmodiumit të malaries.

Pra, në gjakun e një pacienti të sapo sëmurë mund të gjenden qeliza germinale të ciklit sporogoni. Por në kulmin e sulmeve të malaries, skizontet shfaqen në numër të madh në gjak.

Për më tepër, në faza të ndryshme ethet malariale shfaqen forma të ndryshme Plazmodiumi:

• gjatë periudhës së të ftohtit, gjaku mbushet me merozoite, një lloj skizonti;
• në lartësinë e temperaturës, trofozoitët në formë unaze grumbullohen në eritrocite;
• ulja e temperaturës karakterizohet nga mbizotërimi i trofozoitëve amoeboid;
• gjatë periodave gjendje normale gjaku përmban forma të rritura të skizonteve.

Studimi i agjentit shkaktar të malaries (plazmodiumi i malaries) kryhet në një njollë dhe në një pikë të trashë.

Shënim:diagnoza e malaries në studimin e njollave dhe pikave të trasha të gjakut ndonjëherë është e gabuar. Trombocitet e gjakut në disa raste mund të klasifikohen gabimisht si patogjen i malaries. Gjithashtu, fragmente të leukociteve dhe qelizave të tjera ndonjëherë simulojnë plazmodiumin.

Metodat themelore të kërkimit për protozoarët

Le të hedhim një vështrim të shkurtër në metodat më të zakonshme të kërkimit për praninë e protozoarëve.

Diagnoza e protozoarëve duke përdorur një njollë amtare dhe një njollë të lyer me tretësirën e Lugol (në feces)

Ilaçi përgatitet nga një emulsion i feces në një zgjidhje izotonike. Dy pika të klorurit të natriumit dhe tretësirës së Lugolit aplikohen në një rrëshqitje xhami. Materiali i provës u shtohet të dyja kompozimeve me një shkop druri dhe pasi mbulohet me xham, shikohet me rezolucione të ndryshme të mikroskopit.

Sipas shenjave të caktuara, protozoarët e gjetur janë të regjistruar. Për saktësi, nga një material përgatiten 2-3 preparate. Në raste të dyshimta, analiza përsëritet disa herë gjatë 2-3 javëve.

Metoda mund të zbulojë format vegjetative dhe cistike:

• lamblia;
• balantidia;
• ameba dizenterie.

Së bashku me format patogjene përcaktohen edhe protozoarët jopatogjenë. Gjithashtu në bartës të shëndetshëm ka forma luminale dhe cistike.

E rëndësishme:kërkimet për të shmangur pasaktësitë dhe gabimet duhet të kryhen në mënyrë të përsëritur.

Rezultati i diagnozës së protozoarit me metodën e një njollosje amtare dhe të njollosur duhet të përmbajë një përshkrim të formës së patogjenit (të tejdukshëm, kist, ind).

Kërkesat e kërkimit:

• materiali i marrë për analizë (feçet e lëngshme) ekzaminohet jo më vonë se 30 minuta pas defekimit;
• feçet e formuara duhet të diagnostikohen brenda 2 orëve pas defekimit;
• materiali nuk duhet të përmbajë papastërti ( dezinfektuesit, ujë, urinë);
• vetëm shkopinj druri përdoren për të punuar me materialin, ato prej qelqi nuk janë të përshtatshme për shkak të rrëshqitjes së mukusit;
• Shkopinjtë duhet të digjen menjëherë pas përdorimit.

Metoda e konservimit (ekzaminimi i feçeve) në diagnostikimin e protozoarëve

Studimi kryhet duke fiksuar protozoarët me një konservues. Dallimi midis kësaj metode dhe asaj të mëparshme është se konservantët ju lejojnë të ruani ilaçin për një periudhë të gjatë.

Konservues të përdorur:

• Barrow. Përmban përbërës konservues: 0,7 ml klorur natriumi, 5 ml formalinë, 12,5 ml alkool 96%, 2 g fenol dhe 100 ml ujë të distiluar. Përbërja e ngjyrosjes: 0.01% tretësirë ​​e tioninës (azure).
• Zgjidhja e Safarliev. Përbërësit: 1,65 g sulfat zinku, 10 ml formalinë, 2,5 g fenol kristalor, 5 ml acid acetik, 0,2 g blu metilen, 100 ml ujë. Ky konservues përdoret në rastet kur materiali duhet të ruhet për më shumë se një muaj.

Shishet e zbrazëta mbushen me një ruajtës, materiali transferohet në to, në përmasa 3: 1, pastaj, nëse është e nevojshme, shtohet një bojë. Vlerësimi i rezultateve kryhet në studimin e 2-3 barnave.

Metoda e pasurimit të formalinës me eter (analizë për praninë e protozoarëve në feces)

Kjo metodë diagnostike ju lejon të veçoni dhe përqendroni kistet protozoare. Për analizë nevojiten përbërësit e mëposhtëm: formalinë (10 ml), 0,85 g tretësirë ​​izotonike, ujë të distiluar, eter sulfurik, zgjidhje Lugol.

Një përzierje e biomaterialeve me lëngjet e listuara përzihet dhe centrifugohet. Precipitati i përftuar në fund të tubit lyhet me tretësirën e Lugolit dhe ekzaminohet për praninë e cisteve dhe formave vegjetative.

Metoda e zbulimit të leishmanisë (njollosja e palcës së eshtrave)

Për diagnozën e leishmaniozës përdoren reagentë: një përzierje e Nikiforov (eter sulfurik dhe etanol), tampon fosfat, Azur-eozin sipas Romanovsky.

Substanca e palcës së eshtrave vendoset me shumë kujdes në një rrëshqitje xhami pas trajnim special. Përdoret një mikroskop me një sistem zhytjeje.

NË periudhë akute sëmundjet gjenden në pikën nje numer i madh i leishmania.

Shënim:Ndonjehere qelizat e gjakut mund të ngjajë me leishmaninë e përpunuar, ndaj është shumë e rëndësishme që laboranti të jetë i vëmendshëm dhe të ketë përvojë të mjaftueshme për vetëekzaminim.

Metoda për zbulimin e leishmanisë në një njollë nga një infiltrate e lëkurës

Reagentët e kërkuar janë të ngjashëm me analizën e mëparshme.

Materiali i provës është marrë nga përmbajtja ekzistuese e tuberkulozit ose ulçerozës. Skrapi me dyshimin për leishmaniozë bëhet me shumë kujdes me bisturi, pa gjak. Më pas preparati përgatitet në gotë. Për saktësinë e rezultateve të marra, ekzaminohen njëkohësisht disa përgatitje.

Në prani të një sëmundjeje, midis makrofagëve, fibroblasteve dhe qelizave limfoide të pranishme në materialin e testimit, përcaktohet edhe Leishmania.

Metoda për izolimin e një kulture të pastër të Leishmania të marrë nga gërvishtja e indeve patologjike

Me këtë metodë të diagnostikimit, gërvishtjet më të thjeshta të indeve vendosen në një speciale medium ushqyes, në të cilën ndodh riprodhimi aktiv i Leishmania.

Para marrjes së kruarjes, lëkura trajtohet me kujdes me alkool, më pas bëhet një prerje në tuberkuloz, nga fundi i së cilës hiqet përmbajtja dhe vendoset në një provëz me mediumin. Materiali merret disa herë, pas së cilës vendoset në epruveta të ndryshme. Më pas, në një termostat në një temperaturë prej 22-24 gradë, bëhet kultivimi. Rezultatet vlerësohen nën një mikroskop. Kjo metodë përdoret kur të tjera, më të lira dhe mënyra të shpejta Diagnoza e protozoarëve është e paefektshme.

Ju mund të shihni se si testet për praninë e protozoarëve deshifrohen në praktikë nga një pikë gjaku duke shikuar një përmbledhje video:

Lotin Alexander, kolumnist mjekësor

Jashtëqitja ekzaminohet në dy mënyra:

1. Makroskopike - gjeni helminthët, kokat e tyre, segmentet, mbetjet e strobilit. Pjesë të vogla të feçeve përzihen me ujë në një tabaka të sheshtë ose enë Petri dhe shihen në dritë të mirë. sfond i errët duke përdorur një xham zmadhues nëse është e nevojshme. Të gjitha formacionet e dyshimta transferohen me piskatore në një filxhan tjetër me ujë ose në një rrëshqitje xhami në një pikë glicerinë të holluar.

Me metodën duke mbajtur pjesa e ekzaminuar e feçeve përzihet me ujë në një cilindër qelqi, pasi të lyhet, kullohet. shtresa e sipërme ujë. Kjo përsëritet disa herë. Kur lëngu bëhet transparent, kullohet dhe sedimenti shikohet në një enë Petri.

2. Mikroskopik - për të zbuluar vezët dhe larvat e helminthëve. Ka shumë metoda kërkimore.

1). njollosje amtare - metoda më e zakonshme dhe teknikisht e disponueshme e kërkimit. Mund të gjeni vezë dhe larva të të gjitha helminthëve. Megjithatë, me një numër të vogël vezësh, ato nuk gjenden gjithmonë. Prandaj, përdoret metoda e pasurimit.

1). Metoda Fülleborg - kjo është një metodë pasurimi, e bazuar në shfaqjen e vezëve të helminthiazës në një zgjidhje të ngopur të NaCl (1,2 - dendësia; 400 g NaCl për 1 litër ujë; 40% zgjidhje NaCl). Metoda është më efektive se njollosja amtare. 2-5 g feçe vendosen në kavanoza qelqi dhe mbushen me tretësirë ​​NaCl, përzihen dhe pas 45 minutash filmi i formuar hiqet me një lak metalik, një pikë glicerinë vendoset në një rrëshqitje xhami. Ekzaminoni nën një mikroskop. Disavantazhi i metodës është shfaqja e vonuar e vezëve të helminthëve të ndryshëm, shiriti xhuxh - pas 15-20 minutash, krimbi i rrumbullakët - 1,5 orë, krimbi i kamxhikut - 2-3 orë.

2) Metoda Kalantaryan - gjithashtu një metodë pasurimi, por përdoret një zgjidhje e ngopur e NaNO 3 (densësia 1.38). Shumica e vezëve notojnë, nuk kërkohet ekzaminim i sedimentit. Disavantazhi është se vezët mbahen në tretësirë ​​për një kohë të gjatë, gjë që çon në faktin se disa vezë fillojnë të fryhen dhe vendosen në fund, duke u zhdukur nga filmi sipërfaqësor.

3. Metoda e Goryaçevit – bazuar në parimin e depozitimit, zbulimit të vezëve vezë të vogla trematodat. Si tretësirë ​​përdoret një tretësirë ​​e ngopur NaCl dhe sipër vendoset me kujdes 3-4 ml tretësirë ​​feçesh. Pas 15-20 orësh, vezët trematodë vendosen në fund. Lëngu kullohet, sedimentohet në një rrëshqitje xhami dhe nën një mikroskop.

4. Metoda e përdredhjes së Shulmanit – për të zbuluar larvat e helminthit në feces. Ekzaminoni vetëm feçet e sapoizoluara. 2-3 g vendosen në një kavanoz qelqi dhe hidhet 5 herë sasia e ujit, përzihet shpejt me shkop, pa prekur muret e kavanozit - 20-30 minuta, pastaj shkopi hiqet shpejt dhe një pikë. lëngu në fund transferohet në një rrëshqitës xhami dhe mikroskopi.

5. Metoda Berman - bazuar në aftësinë e larvave të helminthit për të migruar drejt ngrohtësisë dhe shërben për identifikimin e tyre në feçe.

6. Metoda e Haradës dhe Morit (metodë e rritjes së larvave) dhe rekomandohet për testim për ankilostomiazë. Metoda bazohet në faktin se në nxehtësi dhe në letër të lagësht të filtruar, vezët e krimbit të gjilpërave zhvillohen në larva filariforme, të cilat mund të zbulohen lehtësisht. Në mes të një rripi letre të filtruar aplikohen 15 gr jashtëqitje, letra me jashtëqitje vendoset në një kavanoz, në mënyrë që fundi i poshtëm të zhytet në ujë dhe skaji i sipërm të fiksohet me tapë. Kavanozi mbahet në termostat në 28 0 C për 5-6 ditë. Larvat filariforme zhvillohen gjatë kësaj kohe dhe zbresin në ujë. Lëngu ekzaminohet nën një xham zmadhues. Nëse është e vështirë për t'u zbuluar, lëngu centrifugohet, pasi vriten larvat duke ngrohur në 60 0. Tekniku i laboratorit duhet të mbajë doreza.

7. Metodat për enterobiasis – zbulimi i vezëve të krimbave dhe shirit demi.

a) kruarje nga palosjet perianale - me një shtupë pambuku të mbështjellë fort në një shkop druri dhe të lagur me një tretësirë ​​glicerinë 50%. Në laborator, shtupa lahet me 1-2 pika të një zgjidhje ujore 50% të glicerinës.

b) metoda e marimangave ngjitëse (metoda Graham)

Shiriti ngjitës aplikohet në palosjet perianale, më pas me një shtresë ngjitëse në rrëshqitjen e xhamit dhe mikroskopohet.

C) kruarje me ndihmën e shkopinjve të syrit (metoda e Rabinovich). Për gërvishtjet perianale përdoren shkopinj syri prej qelqi, pjesa më e gjerë e të cilave mbulohet me një ngjitës të veçantë, i cili bën të mundur mbajtjen e vezëve të krimbave.

Ekzaminimi i gjakut, biliare, pështymës dhe muskujve

Mikroskopi i gjakut - zbulohen larvat filariae.

Ekzaminimi i pështymës - vezët e paraganimit, larvat e krimbit të rrumbullakët, nekatori, strongulioti, elementët e fshikëzës së ekinokokut.

Ekzaminimi i muskujve - nëse dyshohet për trikinozë, ekzaminohen muskujt e pacientit ose të kufomës, si dhe mishi që supozohet se ka shkaktuar infeksionin e personit. Për qëllimin e trikinoskopisë muskuli pritet në copa të vogla dhe vendoset në kompresorë, këto janë dy gota të gjera e të trasha që shtypin muskujt dhe larvat e Trichinella gjenden në formë kapsulash - metoda e kompresimit.

Metoda e tretjes - muskujt derdhen me lëng gastrik artificial (zgjidhje të acidit klorhidrik dhe pepsina). Muskujt treten dhe larvat identifikohen lehtësisht. Përcaktimi i intensitetit të pushtimit: numri i larvave deri në 200 për 1 g ind muskulor– intensiteti i moderuar i pushtimit; deri në 500 - intensive; mbi 500 - pushtim superintensiv.

Metodat serologjike

Metodat e hulumtimit helmintologjik. Metodat për diagnostikimin e helminthiazave ndahen në ato të drejtpërdrejta, bazuar në zbulimin e drejtpërdrejtë të vetë helminthëve ose fragmenteve të tyre, si dhe larvat dhe vezët e helminthëve (metodat për ekzaminimin e feces, urinës, përmbajtjes së biliare dhe duodenale, pështymës, gjakut dhe indeve, material i përftuar me gërvishtje nga zona perianale dhe hapësira subunguale), dhe indirekte, me ndihmën e të cilave ato zbulojnë ndryshimet dytësore që lindin në trupin e njeriut si rezultat i aktivitetit jetësor të helminthëve (studime të përbërjes morfologjike të gjakut, metoda imunologjike për diagnostikimin e helminthiasis, studime me rreze x etj.). Nga metodat direkte, më të zakonshmet janë koprologjike, të cilat ndahen në makro- dhe mikrohelmintoskopia. Në disa raste, përdoren metoda të veçanta.

Metodat e kërkimit të makrogelmitoskopisë që synojnë kërkimin e helmintheve ose fragmenteve të tyre (scolex, segmente, pjesë të strobilës së cestodeve). Ato përdoren për të diagnostikuar ato helminthiaza në të cilat vezët nuk ekskretohen me jashtëqitjet e pacientit ose ekskretohen në një sasi të vogël dhe jo gjithmonë (për shembull, me enterobiasis, krimbat e pincave gjenden në feces, me teniidoza, segmente).

Për të zbuluar krimbat ose segmentet e cestodave në feces, feçet shikohen me sy të lirë. Për diagnoza diferenciale taeniasis, rekomandohet të shikoni feçet e holluara me ujë në pjesë të vogla të veçanta në kuveta fotografike të zeza ose në enët Petri në një sfond të errët. Formacione të mëdha të dyshimta për fragmente helminthësh ekzaminohen nën një xham zmadhues midis dy rrëshqitjeve të qelqit. Nëse nga indikacionet klinike sugjerojnë zbulimin e helminthëve të vegjël ose kokave të cestodeve pas trajtimit, pastaj grimcat e dyshimta ekzaminohen nën një xham zmadhues në një pikë glicerinë dhe, nëse është e nevojshme, nën një mikroskop.

Metodat e hulumtimit të mikrohelmintoskopisë(cilësore) kanë për qëllim identifikimin e vezëve dhe larvave të helminthëve. Aplikoni metodën e njollosjes së trashë me një pllakë celofani sipas Kato. Përzierja Kato përbëhet nga 6 ml Tretësirë ​​ujore 3% e malakitit jeshil, 500 ml glicerinë dhe 500 ml tretësirë ​​fenoli 6%. Pjata kato (celofan hidrofil të prera në copa 20' 40 mm) janë zhytur në 24 h në përzierjen Kato në mënyrë që të jenë ngjitur me njëra-tjetrën (3-5 ml Tretësira e Katos për 100 pjata). 100 mg feçet vendosen në një rrëshqitës xhami, mbulohen me një pllakë celofani sipas Katos dhe shtypen në mënyrë që feçet të lyhen në rrëshqitjen e xhamit brenda pllakës celofani. Ngjyrosja lihet në temperaturën e dhomës për t'u sqaruar me 40-50 min, dhe më pas shihet nën një mikroskop. Në stinën e nxehtë, për të mos u tharë preparati, në pjatën e preparatit të përgatitur vendoset një sfungjer i lagur.

Për zbulimin e plotë të të gjitha llojeve të helminthëve, duhet të përdoret metoda e njollosjes së trashë të pllakës së mbulesës së celofanit Kato së bashku me një nga metodat e pasurimit. Më të zakonshmet prej tyre janë metoda Kalantaryan dhe metoda Fülleborn.

Metoda Kalantaryan: në balona me një qafë të gjerë prej 100 ml përziejeni mirë me një shufër qelqi 5 G feces, duke shtuar gradualisht një zgjidhje të ngopur të nitratit të natriumit (1 kg nitrat natriumi për 1 l ujë kur zien) deri në buzë të gotës. Grimcat e mëdha që kanë dalë në sipërfaqe hiqen me një lugë letre. Një rrëshqitës xhami aplikohet në sipërfaqen e tretësirës së kripur (tretësira e kripur shtohet derisa përzierja të jetë në kontakt të plotë me rrëshqitjen e qelqit). Pas 20-30 min Rrëshqitja e xhamit hiqet dhe filmi shikohet nën një mikroskop. Në mungesë të kësaj kripe, mund të përdorni një zgjidhje të ngopur të kripës së tryezës sipas Fholleborn (400 G kripë në 1 l ujë të vluar).

Për shkak të faktit se vezët me një të madhe gravitet specifik(vezët e pafertilizuara të ascarideve, vezët e trematodave dhe cestodat e mëdha), mos notoni, përveç ekzaminimit të shtresës sipërfaqësore të lëngut, kur përdorni metodën Fülleborn, është e nevojshme të shikoni 2-4 preparate nga sedimenti në mikroskop. .

Metoda të veçanta kërkimore laboratorike për helminthiazat e ndryshme.

Për të zbuluar fragmente të helminthëve, feçet shikohen të zhveshura, pastaj përzihen me ujë dhe ekzaminohen në pjesë të vogla në një pjatë Petri në një sfond të errët. Të gjitha grimcat e dyshimta vendosen në një rrëshqitje xhami në një pikë uji dhe ekzaminohen nën një xham zmadhues. Ju mund ta vendosni pjesën ditore në një cilindër me shtimin e sasisë 5-10 herë më të madhe të ujit. Pas trazimit, ena lihet deri në sedimentimin e plotë të grimcave të pezulluara. Shtresa sipërfaqësore derdhja dhe derdhja e lëngjeve uje i paster. Precipitati i larë shikohet në pjesë të vogla me sy të lirë ose nën një xham zmadhues. Për zbulimin e vezëve përdoren metoda të ekzaminimit mikroskopik.

Metoda e njollosjes amtare. Një sasi e vogël feçesh vende te ndryshme pjesa e provës triturohet në një rrëshqitje qelqi në një pikë solucion gliceroli 50%, tretësirë ​​izotonike klorur natriumi ose ujë. Përzierja mbulohet me një mbulesë dhe shihet nën një mikroskop.

Metoda lundruese e Fülleborn-it. Një pjesë e fecesit përzihet me 20 pjesë të një solucioni të ngopur të klorurit të natriumit (pesha specifike 1.18), e shtuar në pjesë të vogla. Grimcat e mëdha që kanë dalë në sipërfaqe hiqen menjëherë dhe përzierja lihet për 45 minuta. Gjatë kësaj kohe, vezët e helminthit, që kanë një peshë specifike më të ulët se solucioni i klorurit të natriumit, notojnë në sipërfaqe. Filmi sipërfaqësor hiqet me një lak me diametër rreth 1 cm dhe transferohet në një rrëshqitës xhami për ekzaminim nën një mikroskop.

Metoda Kalantaryan. Efikasiteti i metodës lundruese rritet duke zëvendësuar klorurin e natriumit me një zgjidhje të ngopur të nitratit të natriumit. Në këtë rast, përzierja mbahet për 10-15 minuta.

Filmi sipërfaqësor i formuar pas vendosjes së një përzierjeje feçesh me një zgjidhje të klorurit të natriumit ose nitratit të natriumit mund të hiqet gjithashtu me një rrëshqitje xhami. Për këtë qëllim, një kavanoz i mbushur deri në buzë me një përzierje feçesh me një tretësirë ​​kripe mbulohet me një rrëshqitje xhami në mënyrë që sipërfaqja e poshtme e saj të jetë në kontakt me lëngun. Pas vendosjes, xhami hiqet dhe, duke e kthyer shpejt sipërfaqen në të cilën ndodhet filmi, shikohet nën një mikroskop.

Gërvishtja e palosjeve sperianale (për të identifikuar vezët e krimbave dhe onkosferat e shiritit të gjedhit) bëhet në mëngjes përpara se të bëhet tualeti. Me një shpatull druri të zhytur në ujë ose në një tretësirë ​​glicerinë 50%, kruajeni përreth anusit. Materiali që rezulton transferohet në një rrëshqitje qelqi në një pikë uji ose solucion 50% glicerol dhe shihet nën një mikroskop. Spatula mund të zëvendësohet me një shtupë pambuku të lagur, e cila përdoret për të fshirë zonën perianale, më pas shpëlajeni mirë me ujë. Uji centrifugohet dhe precipitati ekzaminohet me mikroskop.

Metoda e Bermann (për zbulimin e larvave). Një rrjetë metalike e veshur me 5-6 g feçe fiksohet në një gyp qelqi të futur në një stendë. Një tub gome me një kapëse vendoset në skajin e poshtëm të hinkës. Hinka mbushet me ujë të ngrohur në t ° 50 °, në mënyrë që Pjesa e poshtme rrjetat me feçe ishin në kontakt me ujin. Larvat lëvizin në mënyrë aktive në ujë dhe grumbullohen në pjesën e poshtme të tubit të gomës. Pas 4 orësh, lëngu ulet në tuba centrifuge, centrifugohet dhe precipitati ekzaminohet në mikroskop.

Analiza e pështymës, mukusit të hundës dhe rrjedhje vaginale për të zbuluar vezët e trematodës së mushkërive paragonimus, larvat e ascarideve dhe krimbave të gremisit, vezët e krimbave, fragmente të fshikëzës së ekinokokut. Pjesa e ekzaminuar e mukusit (sekrecioneve) lyhet në xhami dhe shikohet në mënyrë makroskopike në një sfond bardh e zi dhe më pas nën mikroskop. Mund të shtoni një tretësirë ​​25% të antiforminës në materialin e provës, shkundni plotësisht dhe mbajeni për 1-1,5 orë për të shpërndarë mukozën. Përzierja centrifugohet dhe precipitati ekzaminohet në mikroskop.

Analiza e duodenale dhe lëngu gastrik për zbulimin e vezëve të mëlçisë, krimbit të gremit, larvat Strongyloides. Të tre pjesët e përmbajtjes duodenale të marra me centrifugohen dhe sedimenti ekzaminohet nën një mikroskop. Gjithashtu eksploroni dhe.

Studimi i indeve. Për të identifikuar larvat e Trichinella-s, pjesët e muskulit të biopsifikuar ndahen me kujdes në fibra, shtrydhen midis gotave të kompresorit (xhama të trasha me vida) dhe ekzaminohen nën një mikroskop me dritë të hijezuar. Për të identifikuar cisticerkët, muskujt shtresohen me gjilpëra disekuese, fshikëza e izoluar pastrohet nga indet përreth, shtrydhet midis dy rrëshqitjeve të qelqit dhe ekzaminohet nën një xham zmadhues.

Testi i gjakut (për të zbuluar larvat filariae). Një pikë e varur ekzaminohet në një mbulesë të veshur me vazelinë. Mund të përzieni 0,3 ml gjak me 10 herë më shumë se sa një tretësirë ​​3%. Përzierja centrifugohet dhe precipitati ekzaminohet në mikroskop. Për pasurimin e preparateve në 1 ml gjaku venoz shtoni 3 ml tretësirë ​​formaline 2% ose 5 herë sasinë e lëngut që përbëhet nga 95 ml tretësirë ​​formaline 5%, 5 ml acid acetik dhe 2 ml të koncentruar. tretësirë ​​alkooli hematoksilina. Përzierja centrifugohet, precipitati lahet me ujë të distiluar dhe ekzaminohet në mikroskop. Për diferencim tipe te ndryshme filariae ekzaminojnë njollat ​​e ngjyrosura sipas metodës Giemsa-Romanovsky.

Metodat diagnostifikimi imunologjik. Aplikoni (aglutinimin, fiksimin e komplementit) dhe testet diagnostike alergjike (shih) me nga lloji përkatës i helminthit.

Metodat e hulumtimit helmintologjik. Oriz. Vezët e helminthit. 1-10 - vezë krimbat e rrumbullakët(nematoda): 1 - 3 - krimba të rrumbullakët (1 - një vezë e fekonduar, 2 - një vezë e fekonduar pa një shtresë proteine, 3 - një vezë e pafertilizuar); 4 - krimb i rrumbullakët i maces; 5 - mishngrënës të krimbave të rrumbullakët; 5 - pinworms; 7 - kamzhik; 8 - tominx; 9 - krimbi i gjirit; 10 - triko-strongylide. 11-15 - vezë shiritat(cestodes): 11 - shirit gjedhi; 12 - xhuxh shirit; 13 - shirit miu; 14 - shirit pagur; 15 - fjongo e gjerë. 16 - 24 - vezë flukes (trematoda): 16 - trematoda (shistozome) japoneze; 17 - trematoda (shistozome) urinë - seksuale; 18 - trematode (shistozome) Munson; 19 - trematodat (parogonymus) pulmonare; 20 - trematoda (opisthorchis) siberian (mace); 21 - trematoda (clonorchis) kineze; 22 - trematodat e zorrëve (metagonimus); 23 - trematodat (fasciolas) të mëlçisë; 24 - trematoda (dikrocelium) heshtak.

Një metodë efektive dhe e përshtatshme e hulumtimit helmintologjik është studimi i një njolleje të trashë sipas Katos, thelbi i së cilës është zbulimi i vezëve të helminthit në një njollë të trashë feçesh, të pastruar me glicerinë dhe të lyer me të gjelbër malakit. Përbërja e përzierjes Kato është 6 ml një zgjidhje ujore 3% e malakitit jeshil, 500 ml glicerinë, 500 ml një zgjidhje fenoli 6%. Tretësira është e qëndrueshme dhe mund të ruhet në temperaturën e dhomës. Për përgatitjen e preparateve, copa feçesh në madhësinë e një bizele aplikohen në një rrëshqitje qelqi, të mbuluara me një film celofani hidrofil të vjetëruar në një përzierje Kato për 24 orë dhe shtypen kundër xhamit për shpërndarje uniforme material. Ekzaminohen mikroskopikisht njollat ​​e kthjelluara për 40-60 minuta. Vezët e zbuluara të helminthit numërohen dhe veçoritë morfologjike përcaktoni speciet e tyre. Metoda ju lejon të zbuloni vezët e ascaris, krimbit të kamxhikut, cestodeve, trematodave, në një masë më të vogël - krimbit të gresorit dhe shiritit pigme.

Gjithashtu përdoret gjerësisht metodat e pasurimit. Parimi i metodave të flotacionit është pezullimi i feçeve në një zgjidhje të kripur, e cila ka një dendësi relative më të lartë në krahasim me vezët e helminthit, si rezultat i së cilës ato notojnë në sipërfaqe. Përmbajtja e filmit sipërfaqësor ekzaminohet nën një mikroskop. Zgjidhjet përdoren si përzierje pasuruese: kripë tryezë- 400 g në 1 litër ujë (dendësia relative sipas Fülleborn -1,18); nitrat natriumi - 1 kg në 1 litër ujë (dendësia relative sipas Kalantaryan-1,38); nitrat natriumi - 900 g dhe nitrat kaliumi - 400 g në 1 litër ujë (dendësia relative sipas Brudastov dhe Krasnonos-1,48). zihet dhe ftohet.
Për hulumtime, 5-10 g feçe shtohen në një gotë ose gotë faience, i shtohen 100-200 ml zgjidhje të kripur dhe përzihen plotësisht. Më pas, grimcat e mëdha që kanë dalë në sipërfaqe hiqen me një shpatull druri ose një lugë prej letre ose kartoni dhe një rrëshqitje e gjerë xhami vendoset menjëherë në filmin sipërfaqësor në mënyrë që tretësira e kripur dhe rrëshqitja e qelqit të jenë në kontakt të plotë. Pas 30-40 minutash nga vendosja e përzierjes, rrëshqitja e xhamit hiqet, vendoset nën mikroskop me film lart dhe e gjithë sipërfaqja ekzaminohet me kujdes. Për të shmangur tharjen, mund të shtoni 2-3 pika zgjidhje glicerinë 50%. Filmi i sipërfaqes gjithashtu mund të hiqet me një lak teli. Efikasiteti i metodave të flotacionit rritet me rritjen e densitetit relativ tretësirat e kripura. Duke përdorur këto metoda, është e mundur të zbulohen vezët e nematodave, cestodave dhe trematodave.

Për të zbuluar vezët në feçe, përdoret metoda e sedimentimit Krasilnikov.. Feçet përzihen me një tretësirë ​​detergjenti 1% ( pluhur larës"Lotus", etj.) në një raport 1:10 derisa të formohet një pezullim. Nën ndikimin e detergjentit, përbërës të ndryshëm të feçeve (proteinat, yndyrat, elementët e indeve) treten. Pas 30 minutash, përmbajtja e tubit tundet për 1-2 minuta, pas së cilës ato centrifugohen për 5 minuta. Preparatet përgatiten nga sedimenti dhe shikohen nën një mikroskop.
NË kushtet e terrenit, si dhe në anketat masive të popullatës për infektimin me helminth, është e përshtatshme të përdoret metoda e njollosjes së trashë Kato. NË kushtet stacionare gjatë ekzaminimit të pacientëve, preferohet të përdoren metodat më efektive të flotacionit. Kur përdorni këto metoda gjatë mikroskopisë, këshillohet që të numërohen vezët që gjenden në preparat. Në varësi të peshës ose vëllimit standard të marrë për studimin e feçeve (për shembull, 1 lugë çaji ose lugë gjelle) dhe një vëllimi të vetëm konstant të solucioneve të kripura, mund të gjykohet përafërsisht intensiteti i pushtimeve. Ky regjistrim sasior mund të jetë i dobishëm në vërtetimin e trajtimit të përshkruar dhe vlerësimin e efektivitetit të heqjes së krimbave. Përveç kësaj, metoda të tjera më të sakta mund të përdoren për të përcaktuar intensitetin e infeksionit. metodat sasiore, në veçanti metodën Stoll.

Për diagnostikimin e teniarinkozës dhe enterobiazës aplikoni metodën e hulumtimit të skrapimeve perianale-rektale. Me një shpatull druri të zhytur në një tretësirë ​​glicerine 50%, bëhet një kruarje nga palosjet perianale në mëngjes para defekimit në një rreth. anusit Dhe ndarjet më të ulëta rektum. Materiali që rezulton, i pastruar me një shpatull nga skaji i rrëshqitjes së mbulesës, vendoset në një rrëshqitës xhami në një pikë solucion gliceroli 50%, mbulohet me një kapak dhe ekzaminohet në mikroskop. Ju gjithashtu mund të ekzaminoni një rrip shiriti celuloze, i cili fillimisht shtypet me një anë ngjitëse në palosjet pernanale, më pas vendoset në një rrëshqitje xhami dhe mikroskopi.

Zbulimi i larvave nematode në feçe me metodën Berman. Metoda bazohet në vetinë termotropike të larvave. Për kërkime, merret 1 lugë feçe, e vendosur në një rrjetë metalike ose një rrjetë prej disa shtresash garzë në një kornizë teli. Rrjeti është instaluar në një gyp të fiksuar në një trekëmbësh. Një tub gome me një kapëse bashkohet me hinkën. Duke e ngritur rrjetën, hinka mbushet me ujë (temperatura +40°...+50°C) në mënyrë që pjesa e poshtme e rrjetës të zhytet në ujë. Larvat nga feçet migrojnë në mënyrë aktive në ujë të ngrohtë dhe, duke u vendosur, grumbullohen në fund të hinkës. Pas 2-4 orësh, kapësi hapet, uji ulet në një tub centrifuge dhe centrifugohet për 2-3 minuta. Më pas kullohet supernatanti, sedimenti transferohet në një rrëshqitje qelqi dhe shikohet në mikroskop, ku gjenden larvat e lëvizshme të patogjenit të strongyloidiasis.

Metoda Harad dhe Mori lejon të diferencohen larvat e krimbave të grepeve dhe nekatorëve. Larvat e krimbit të gjirit kultivohen në letër filtri. Për këtë qëllim, 0,5 g feçe të freskëta të marra nga pacienti jo më vonë se 1 orë pas defekimit, aplikohet në shirita letre filtri me përmasa 12X1,5 cm, duke i lënë të pastra të dy skajet e shiritit. Njëra skaj i shiritit është zhytur në një epruvetë, pjesa e katërt e së cilës është e mbushur me ujë dhe tjetra është e mbërthyer me një tapë. Tubat vendosen në një termostat në një temperaturë prej +26 ... + 28°C. Larvat që janë zhvilluar nga vezët zbresin përgjatë letrës filtri dhe vendosen në fund të epruvetës. Pas 5-6 ditësh, rripi i letrës hiqet dhe lëngu i mbetur në epruvetë ekzaminohet nën një xham zmadhues ose centrifugohet. Precipitati i formuar gjatë centrifugimit ekzaminohet nën një mikroskop me dritë. Kur përdoret në vend të provëzave tetraedrale kavanoza qelqi(15XYX7 cm në madhësi), në muret e të cilave janë ngjitur 4 shirita letre, efikasiteti i analizave rritet (G. M. Maruashvili et al., 1966).

Metodat e kërkimit për shistozomiazën . Ekzaminimi i feçeve - një pjesë e feçeve përzihet me 250 ml ujë, filtrohet përmes 3 shtresave të garzës në një enë konike, e cila mbushet deri në majë me ujë. Pas 30 minutash, shtresa e lëngshme kullohet, një pjesë e freskët e ujit i shtohet precipitatit. Precipitati lahet derisa të merret një supernatant i pastër dhe ekzaminohet mikroskopikisht.

Metoda e larvoskopisë - 20-25 g feçe vendosen në një balonë Erlenmeyer me një tub qelqi të salduar anash dhe lahen. ujë rubineti. Pastaj balona mbulohet me letër të errët, duke e lënë tubin e xhamit të salduar në dritë në temperaturë +25...+30°C. Miracidet e çelura janë të përqendruara në meniskun në tubin anësor, ku mund të shihen me xham zmadhues ose me sy të lirë. Ekzaminimi i urinës - 100 ml urinë të mbledhura nga ora 10 e mëngjesit deri në 14:00, ose pjesa ditore zgjidhet dhe më pas centrifugohet me 1500 rpm. Precipitati që rezulton aplikohet* në një rrëshqitje qelqi dhe mikroskopi. OBSH rekomandon një metodë për filtrimin e të gjithë pjesës së urinës. Pas filtrimit, filtrat trajtohen me formalinë ose nxehen (për të vrarë vezët) dhe më pas njomet. tretësirë ​​ujore ninhidrin. Në përgatitjet e thara, embrionet e vezëve marrin një ngjyrë vjollcë.

Përdorimi i imunologjike metodat e kërkimit për diagnostikimin e shistozomiazës janë të vështira, pasi skistozomet e rritur dhe vezët e tyre përmbajnë një numër të madh antigjenesh që shkaktojnë reaksionet imune, të cilat nuk janë specifike për speciet (D. Bradley, 1979).

Në vendin tonë për vënien në skenë reaksionet imunologjike me helminthiasis prodhohet linjë e tërë diagnostifikimi standard. Përdorimi praktik kanë një alergji testi i lëkurës për ekinokokozën dhe alveokokozën, RLA me antigjen ekinokokal, CSC në të ftohtë, reaksion precipitimi në të ftohtë në modifikime të ndryshme (reshje unazore, precipitim në epruveta ose kapilarë, të cilët vendosen me antigjenet e trikinozës, cisticerkozës dhe migroaskariazës). Diagnostikimet standarde për vendosjen e reaksioneve serologjike të mësipërme bëhen nga ndërmarrjet që prodhojnë preparate bakteriale. Prodhuesi i bashkëngjitet diagnostifikimit të prodhuar udhëzime të hollësishme mbi rregullat e ruajtjes, datat e skadencës së barit dhe udhëzimet për përdorimin e antigjeneve të duhura me teknikën e vendosjes së reaksionit.

NË vitet e fundit Lista e testeve serologjike të përdorura për diagnostikimin e helminthiazave është zgjeruar ndjeshëm. Për këtë qëllim përdoren këto reaksione: RIGA, imunofluoreshencë indirekte (RIF), imunodifuzion me xhel (RID), kundër imunoelektroforezë (VIEF), REAMA. Këto reaksione mund të përdoren për infeksionet e askariazës, toksokariazës, trikinozës, krimbit të gjilpërës, filariazës, ekinokokozës dhe alveokokozës, opisthorkiazës, skistozomiazës, paragonimiazës. Megjithatë, për këto reagime në vendin tonë nuk jepen diagnoza standarde dhe teknika e vendosjes së tyre nuk është e rregulluar. Laboratorë të veçantë, kryesisht shkencorë, përgatisin antigjenet e tyre specifike dhe i përdorin ato në modifikime të ndryshme. Përshkrimi i këtyre metodave është paraqitur gjerësisht në literaturë dhe nuk është rreptësisht i unifikuar. Interpretimi i të dhënave imunologjike duhet të bazohet në studimin e dinamikës së përgjigjes imune, duke marrë parasysh nivelin e specifikës dhe ndjeshmërisë së secilit të aplikuar. reaksioni serologjik. Prandaj, gjatë vendosjes së një diagnoze, si dhe gjatë anketave seroepidemiologjike të popullatës, këshillohet të përdoren disa nga reagimet më të ndjeshme. Nga ky këndvështrim, reagimet VIEF dhe REMA ndryshojnë ndjeshmëri të lartë dhe specifikë mjaft të lartë (P. Ambroise-Thomas, 1978; I. E. Ballad, 1979; G. M. Negryanu, 1980; A. M. Ponomareva, 1981; A. Ya. Lysenko, 1978, etj.). Efektiviteti i REAMA është testuar në amebiazë, leishmaniozë, tripanozomiazë dhe toksoplazmozë (GA Ermolin, 1980).