Enteropatiile nou-născuților, simptome, tratament. Imunodeficiențe cauzate de imunitatea celulară afectată
Abstract
Această boală se caracterizează prin apariția imunodeficienței primare, care se exprimă ca insuficiență multisistem autoimună, de multe ori se manifestă clinic în primul an de viață; sunt doar aproximativ 150 de cazuri în lume descrise până acum. Sindromul IPEX este cauzat de defectul genei FOXP3, care este un factor de transcripție care afectează activitatea celulelor T de reglementare responsabile. pentru menținerea aytotoleranței. Există aproximativ 70 de mutații patogene în această genă descrise până acum. Majoritatea pacienților cu sindrom IPEX au manifestări clinice ale bolii în perioada neonatală timpurie sau în primele 3-4 luni de viață. Pentru această boală este tipică următoarea triadă clinică de manifestări: enteropatie autoimună (100%), diabet zaharat (70%), leziuni cutanate (65%), deoarece structura sindromului include întârziere severă a dezvoltării (50%), boala tiroidiană ( 30%), infecții recurente (20%), citopenie autoimună rară (anemie hemolitică Coombs-pozitivă), pneumonie, nefrită, hepatită, artrit, miozită, alopecie. Cu toate acestea, au fost descrise unele cazuri de manifestări ulterioare (la pacienții cu vârsta mai mare de 1 an) când pacienții nu prezentau toate simptomele clinice și de laborator tipice pentru formele severe ale bolii. Datorită severității bolii și a mortalității ridicate la acest grup de pacienți, este foarte important să se diagnosticheze precoce și să se înceapă terapia în timp util. Articolul descrie un caz clinic de diabet zaharat neonatal permanent în structura sindromului IPEX.
Sindromul IPEX (Imunodeficiență, Poliendocrinopatie, Enteropatie, Sindrom X-linked). Sinonime: XLAAD (X-linked Autoimmunity-Allergique Disregulation Syndrome) - boala rara; Aproximativ 150 de cazuri au fost descrise în lume. Potrivit unor surse străine, prevalența sindromului IPEX în rândul pacienților cu diabet zaharat neonatal permanent este de aproximativ 4%. Acest sindrom se caracterizează prin apariția imunodeficienței primare, care se manifestă ca leziuni autoimune de organe multiple și cel mai adesea se manifestă clinic în primul an de viață. În 1982, Powel și colab. a descris pentru prima dată o familie în care 19 bărbați aveau o boală legată de X, manifestată prin diaree și poliendocrinopatie, inclusiv diabet zaharat insulino-dependent. Mai târziu, în 2000, Catila et al. a identificat o mutație în gena care codifică domeniul de legare a ADN-ului C-terminal (FKN) în două diverși pacienți mascul cu similare tablou clinic. În 2000-2001 Bennett şi colab. şi Wildin şi colab. a confirmat în mod independent că sindromul IPEX se bazează pe mutații ale genei FOXP3. În prezent, au fost descrise aproximativ 70 de mutații patogene ale acestei gene. Gena FOXP3 este un factor de transcripție care influențează activitatea celulelor T reglatoare responsabile de menținerea auto-toleranței. Conform datelor publicate de Barzaghi et al. în 2012, principalul mecanism de afectare a organelor autoimune în sindromul IPEX este considerat a fi o disfuncție a celulelor T reglatoare. Astfel, sindromul IPEX se caracterizează prin dezvoltarea imunodeficienței severe, care poate duce la complicații septice și adesea deces. În prezent, se cunosc aproximativ 300 de gene care duc la dezvoltarea imunodeficiențe primare(PID). Anterior, se credea că aceste boli erau foarte rare, dar studiile recente indică prevalența lor semnificativă. Este extrem de important ca pediatrii să fie atenți la posibila prezență a BIP, mai ales în cazurile de infecții severe în combinație cu boli autoimune la copii. La majoritatea pacienților cu sindrom IPEX, manifestările clinice ale bolii încep în perioada neonatală timpurie sau în primele 3-4 luni de viață. O triadă clinică de manifestări este tipică pentru această patologie: enteropatie autoimună (100%), diabet zaharat (70%), leziuni ale pielii (65%), structura sindromului include și întârziere severă a dezvoltării (50%), afectarea Glanda tiroidă (30%), infecțiile recurente (20%), citopenia autoimună (anemie hemolitică Coombs-pozitivă), pneumonita, nefrita, hepatita, artrita, miozita, alopecia sunt mai puțin frecvente. Cu toate acestea, cazuri de manifestare au fost descrise peste vârsta de un an, când pacienții nu prezentau toate manifestările clinice și de laborator caracteristice formelor severe de boală. Una dintre componentele principale ale sindromului IPEX este poliendocrinopatia, manifestată prin dezvoltarea diabetului zaharat autoimun, tiroidita autoimună. Markerii imunologici ai endocrinopatiilor includ anticorpi la insulină (IAA), celulele insulare pancreatice (ICA), glutamat dehidrogenază (GAD), tirozin fosfataza (IA-2), anticorpi la transportorul de zinc (ZNT8), anticorpi la peroxidaza tiroidiană și tiroglobulina. De asemenea, sunt detectați și alți autoanticorpi - la neutrofile, eritrocite și trombocite, antinucleari, antimitocondriali, anticorpi la keratina, colagen etc. În plus, pentru a acestei boli se caracterizează prin dezvoltarea enteropatiei autoimune, manifestată clinic prin diaree apoasă abundentă cu dezvoltarea sindromului de malabsorbție, ai căror markeri imunologici sunt anticorpi la enterocite (villin VAA și armonin HAA). Nivelurile crescute de IgE și creșterea numărului de eozinofile sunt caracteristice pacienților cu forma severă clasică a bolii. Datorită severității bolii și a mortalității ridicate la acest grup de pacienți, este extrem de important diagnostic precoceși inițierea la timp a terapiei. Până în prezent, cea mai eficientă metodă de tratament este transplantul. măduvă osoasă sau transplantul alogenic de celule stem hematopoietice. Pentru a corecta imunodeficiența, este posibil să se utilizeze monoterapie imunosupresoare (ciclosporină A, tacrolimus) sau terapie combinată - o combinație de medicamente imunosupresoare cu steroizi. Sirolimus (rapamicina) s-a dovedit a fi eficient, mai mulți pacienți prezentând o remisiune susținută a bolii. Pe lângă terapia imunosupresoare, terapie de substituție tulburări endocrine, suport nutrițional adecvat, terapie simptomatică. Caz clinic Pacienta K., nascuta in data de 19 aprilie 2016, la termen cu greutatea de 2840 g si lungimea corpului de 51 cm.Nasterul s-a efectuat prin cezariana de urgenta datorita cresterii hipoxiei fetale intrauterine. Apgar scor 7/7 puncte. Din anamneză se știe că aceasta este a patra sarcină, a avut loc pe fondul infecției genitale cronice, insuficienței placentare, gastrită cronică, creștere mică în greutate, insuficiență istmico-cervicală, amenințare de întrerupere la 30 de săptămâni. Sarcinile anterioare s-au încheiat cu avort spontan primele etape. Cauzele avortului spontan sunt necunoscute, femeia nu a fost examinată. De la naștere, starea copilului a fost severă din cauza tulburărilor respiratorii și a semnelor de depresie a sistemului nervos central (SNC). S-a efectuat ventilație mecanică; extubată când respirația spontană a fost restabilită. Din prima zi de viață a fost detectată o creștere a zahărului din sânge la 10,4 mmol/l cu o creștere a dinamicii la 29,0 mmol/l; conform datelor CBS, au fost observate semne de acidoză metabolică. O creștere a nivelului glicemiei a fost însoțită de glucozurie (zahăr în urină până la 2000 mg/dL) și cetonurie. Un test de sânge biochimic a arătat semne de hiperenzimemie (ALT 87,8 U/L, AST 150 U/L). În a 2-a zi de viață, din cauza hiperglicemiei persistente (glicemie maximă 33,6 mmol/l), s-a început administrarea intravenoasă de insulină simplă cu o rată de 0,03-0,1 U/kg/h, în funcție de glicemia. Nutriția enterală cu amestecuri adaptate a fost primită în fracțiuni printr-un tub. În timpul monitorizării zilnice a nivelului de glucoză din sânge în timpul terapiei cu insulină, a fost înregistrată o variabilitate semnificativă a glicemiei în timpul zilei de la 1,7 la 22,0 mmol/l. În a 8-a zi de viață, s-a observat o deteriorare a stării (semne de depresie a sistemului nervos central, insuficiență respiratorie în creștere, tulburări metabolice asociate cu decompensarea metabolismului carbohidraților, febră persistentă de grad scăzut până la 37,9 °C, balonare, vărsături repetate). , diaree, tulburări trofice ale pielii sub formă de uscăciune și peeling cu plăci mari). Aceste simptome au fost considerate ca o manifestare a enterocolitei necrozante (NEC 2a). Pentru o examinare și un tratament ulterioare, pacientul a fost transferat la Centrul de Cercetare din Rusia al instituției de sănătate bugetară de stat a Spitalului de Copii din Petrozavodsk. În timpul unei examinări efectuate la Centrul de Cercetare din Rusia al instituției de sănătate bugetară de stat a Spitalului de Copii, o serie de teste clinice de sânge au evidențiat o scădere a nivelului de hemoglobină de la 150 la 110 g/l, leucocitoză de la 8,9 la 22,4 mii, o schimbare în formula leucocitară datorită creșterii numărului de eozinofile de la 5 la 31%, monocite și trombocite. Conform rezultatelor unui test de sânge biochimic, s-a înregistrat hipoproteinemie până la 36,4 g/l (N 49-69), o tendință de hiponatremie 135 mmol/l (N 135-155) cu indicatori normali potasiu 4,7 mmol/l (N 4,5-6,5), hiperenzimemie AlAT-87 U/l (N0-40) și AST 150 U/l (N0-40), titrul CRP crescut la 24,7 mg/m. Nu a existat o creștere a microflorei în hemocultură; în cultura de urină a fost găsit enterococ. Din cauza hiperglicemiei persistente, s-a determinat nivelul peptidei C, care s-a dovedit a fi redus (0,1 nmol/l; N0,1-1,22 nmol/l). La examenul cu ultrasunete Au fost detectate pneumatoze ale pereților intestinali și o creștere a dimensiunii pancreasului (cap - 9,0 mm, corp - 9,0 mm, coadă - 10,0 mm) și s-a observat o progresie a dimensiunilor în timp. A primit nutriție parenterală, terapie prin perfuzie care vizează eliminarea tulburărilor electrolitice, terapie antibacteriană, iar insulina a fost administrată intravenos. În timpul tratamentului, tulburările electrolitice au fost eliminate, dar nu a fost posibilă stabilirea nivelului de glucoză și au persistat și tulburările dispeptice severe. La încercarea de a restabili nutriția enterală, au apărut balonări abdominale, vărsături și diaree. În a 19-a zi de viață, băiatul a fost dus la secția de terapie intensivă în stare extrem de gravă. centru perinatal Clinicile Universității de Stat de Medicină Pediatrică din Sankt Petersburg. La internare, copilul a avut un plâns lent, lipsit de emoție, spontan activitate fizica iar tonusul muscular a fost redus, reflexele nou-născutului au fost slabe. Febră (temperatura corpului 38,1 °C). Fontanela mare 1,0 × 1,0 cm, scufundată. Pielea este palidă, uscată, turgescență redusă, peeling cu plăci mari. La auscultare, respirația a fost dură și efectuată uniform în toate părțile plămânilor; frecvența respiratorie 46 pe minut. Zgomotele inimii erau ritmice, ușor înăbușite; ritmul cardiac - 156 pe minut. Balonare vizibilă a abdomenului și mărire moderată a ficatului. Viteza diurezei este de 7-8 ml/kg/h (pe fondul terapiei perfuzie în curs). Scaune apoase de 7-9 ori pe zi. Dinamica creșterii în greutate a fost negativă (greutatea la naștere - 2840 g, la internarea la clinica Universității de Stat de Medicină Pediatrică din Sankt Petersburg - 2668 g). În secția de terapie intensivă s-a continuat terapia cu perfuzie, având ca scop eliminarea tulburărilor electrolitice. Hiponatremia a fost greu de corectat din cauza mecanism compensator echilibrul osmolarității sângelui ca răspuns la hiperglicemie, însoțită de poliurie până la 7-8 ml/kg/h și pierdere de sodiu în urină, precum și enteropatie severă (scaun de 6-10 ori pe zi, copios, lichid până la 350). ml/zi). Insulina a fost primită intravenos la 0,01-0,04 U/kg/h, în funcție de nivelul glicemiei. Nutriția enterală parțială a fost efectuată cu un amestec hidrolizat pasteurizat, cu o tranziție treptată de la hrănirea cu tub la hrănirea fracționată independentă pe fundalul stabilizării stării. În a 28-a zi de viață, a fost transferat la secția de patologie a nou-născuților și sugarilor, unde au continuat examinarea și tratamentul. În timpul examinării s-a notat anemie în hemogramă (hemoglobină - 93 g/l, eritrocite - 2,91 ∙ 1012/l); leucocitoză (până la 28,7 ∙ 109/l), eozinofilie severă (până la 61%); la testul biochimic de sânge a fost hipoproteinemie (proteine totale - 38,4 g/l). În timpul studiului nivelurilor de hormoni din sânge, a fost reidentificat nivel scăzut C-peptidă - 0,5 ng/ml (N 0,1-1,22 nmol/l); hormonii tiroidieni au fost normali (T4 liber - 14,8 pmol/l (N 10,0-23,2); TSH - 6,28 µU/ml (N 0,23-10,0). Combinația de diabet zaharat neonatal, enteropatie, specific manifestări ale pieliiși semne de infecție cronică recurentă (febră febrilă, creșterea leucocitozei la întrerupere terapie antibacteriană) a făcut posibilă suspectarea sindromului IPEX la pacient, a cărui structură include imunodeficiența. Pentru a clarifica natura poliendocrinopatiei, a fost efectuat un studiu care vizează căutarea markerilor imunologici. Ca urmare, un titru ridicat de anticorpi la peroxidaza tiroidiană (243,9 UI/ml; N 0-30) și anticorpi la insulele Langerhans într-un titru pozitiv (anticorpi la GAD1,29 U/ml; N 0-1,0), un titru de anticorpi la insulină a fost de 5,5 U/ml (N 0,0-10,0). Nu au fost detectați anticorpi la celulele suprarenale producătoare de steroizi. Astfel, a fost dovedită natura autoimună a diabetului zaharat și a fost diagnosticată tiroidita autoimună. Ținând cont de prezența semnelor clinice și de laborator ale imunodeficienței, s-a efectuat un examen imunologic aprofundat și s-a depistat un nivel ridicat de IgE (573,6 UI/ml, norma este 0-15). A fost efectuat un studiu genetic molecular (multigene targeted sequencing), care a relevat o mutație a genei FOXP3, confirmând prezența sindromului IPEX la copil. La vârsta de două luni, patru zile, din cauza riscului mare de sepsis și a amenințării rezultat fatal băiatul a fost transferat la Instituția Bugetarului Federal de Stat „FNKTs DGOI numită după. Dmitri Rogachev” de la Ministerul Rusiei de Sănătate pentru terapie imunosupresoare și transplant de măduvă osoasă. În cazul clinic prezentat, o mutație nedescrisă anterior a genei FOXP3 c.1190G > T (p.Arg397Leu) a fost identificată la un copil cu diabet zaharat neonatal, imunodeficiență primară și enteropatie severă. Analiza ADN a mamei pacientului a relevat aceleași leziuni în stare heterozigotă. Varianta detectată este localizată în domeniul forkhead C-terminal de legare a ADN-ului și este considerată patogenă de principalele programe predictive (Polyphen2, SIFT, Mutation Taster). Un argument indirect semnificativ în favoarea patogenității variantei identificate este faptul că mutațiile c. 1189C > T și s. 1190G>A, care afectează același codon 397, au fost găsite anterior la pacienții cu sindrom IPEX. Se știe că mamele pacienților cu sindrom IPEX se caracterizează prin multiple episoade de avorturi spontane atunci când poartă fetuși de sex masculin. În cazul descris, istoricul medical al mamei pacientului (purtător al mutației) a fost, de asemenea, agravat de pierderea precoce a sarcinii. Acest lucru confirmă în continuare că noua mutație pe care am descoperit-o are un efect serios asupra funcției FOXP3, provocând o letalitate embrionară crescută. Verificarea genetică a diabetului zaharat neonatal este extrem de utilă, deoarece permite clarificarea naturii bolii și alegerea tacticii optime de tratament. Acest lucru este valabil mai ales pentru pacienții cu forme sindromice, care de obicei au curs sever. Detectarea unei mutații la un copil bolnav este foarte importantă pentru consilierea medicală genetică a familiei, deoarece face posibilă efectuarea diagnosticului ADN prenatal în cazul sarcinilor ulterioare. The caz clinic indică faptul că interacțiunea medicilor de diferite specialități (neonatologi, endocrinologi, gastroenterologi, imunologi, geneticieni) contribuie la stabilirea mai eficientă a diagnosticului corect la pacienții cu boli rare.
Maria E Turkunova
Universitatea de Stat de Medicină Pediatrică din Sankt Petersburg, Ministerul Sănătății al Federației RuseAutoanticorpii la Harmonin și Villin sunt markeri de diagnostic la copiii cu sindrom IPEX
Sursa: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3826762/
Experimente concepute și concepute: V.L. Bosi R.B. Au efectuat experimentele: CL E. Bazzigaluppi CB. Date analizate: VL LP FB RB E. Bosi. Reactivi/materiale/instrumente de analiză utilizate: LP FB. A scris articolul: E. Bosi. A contribuit la scrierea/editarea manuscrisului: VL LP FB RB.
Autoanticorpii la antigenele enterocitelor conjunctivale (proteina USH1C de 75 kDa) și vilozitatea (proteina de legare a actinei de 95 kDa) sunt asociați cu sindromul de dereglare imună, poliendocrinopatie, enteropatie, X-linked (IPEX). În acest studiu, am evaluat valoarea diagnostică a autoanticorpilor armonici și viloși în sindroamele IPEX și IPEX-like. Autoanticorpii armonină și villină au fost măsurați printr-un nou test cantitativ al sistemului de imunoprecipitare a luminiscenței (LIPS) la pacienții cu IPEX, sindrom asemănător IPEX, imunodeficiențe primare (PID) cu enteropatie, toate diagnosticate prin secvențierea genei FOXP3 și diabet de tip 1 (T1D), boala celiacă și donatorii de sânge sănătoși ca grupuri de control. Autoanticorpii armonină și villină au fost detectați la 12 (92%) și 6 (46%) din 13 pacienți cu IPEX și nici la niciunul dintre pacienții cu IPEX, PID, T1D și, respectiv, boala celiacă. Toți pacienții cu IPEX, inclusiv un caz cu o prezentare clinică tardivă și atipică, au avut fie autoanticorpi armonici și/sau viloși sau au fost testați pozitivi pentru anticorpi anti-enterocite prin imunofluorescență indirectă. Când au fost măsurați la pacienții cu IPEX în remisie după terapie imunosupresoare sau transplant de celule stem hematopoietice, autoanticorpii armonici și viloși au devenit nedetectabili sau au persistat la titruri scăzute în toate cazurile, dar într-unul în care autoanticorpii armonici au rămas în mod persistent ridicat. La un pacient, vârful anticorpilor armonici a fost paralel cu faza de recidivă a enteropatiei. Studiul nostru demonstrează că autoanticorpii armonici și viloși măsurați de LIPS sunt markeri sensibili și specifici ai IPEX, diferențiază IPEX, inclusiv cazurile atipice, de alte tulburări legate de enteropatia timpurie a copilăriei și sunt utili pentru screening-ul și monitorizarea clinică a copiilor afectați.
Dereglarea imună, poliendocrinopatia, enteropatia, sindromul X-linked (IPEX) este o boală autoimună monogenă caracterizată prin enteropatie severă, diabet de tip 1 (DT1) și eczeme. Sindromul este cauzat de mutații ale genei FOXP3, responsabilă pentru încălcare gravă celule T reglatoare (Treg). În timp ce analiza genetică este metoda de alegere pentru diagnosticul definitiv, nu există o corelație clară genotip-fenotip, iar cursul bolii variază de la un pacient la altul. În plus, în ciuda clasificării IPEX ca tulburare de imunodeficiență, nu există parametri imunologici clari care prezic severitatea bolii sau răspunsul la terapie. În plus, tulburările cu un fenotip clinic similar, numite sindroame asemănătoare IPEX, pot exista în absența mutațiilor FOXP3, prezentând provocări pentru management clinicşi alegerea agenţilor terapeutici - . Prin urmare, identificarea markerilor asociați în mod specific cu disfuncția imună IPEX ar fi extrem de utilă în scopuri de diagnostic. Autoanticorpii enterocitelor circulanți detectați prin imunofluorescență indirectă au fost descriși în trecut în asociere cu diverse enteropatii, inclusiv cele identificate în cele din urmă ca sindrom IFEX, dar ținte moleculare Acești markeri serologici au fost de mult timp necunoscuți. Un autoantigen al enterocitelor distinct, recunoscut de serurile pacientului IPEX, a fost apoi identificat ca proteina AIE-75 de 75 kDa și caracterizat în continuare ca proteină Usher Syncrome (USH1C), cunoscută și ca armonică, o proteină despre care se spune că face parte din rețelele de proteine supramoleculare, conectând proteinele transmembranare la citoscheletul din celulele fotoreceptoare și celulele părului urechea internă. Autoanticorpi armonici (HAA), detectați prin imunoblot și radioligand, au fost raportați la pacienții cu IPEX și la o proporție mică de pacienți cu cancer de colon. Mai recent, o proteină de legare a actinei denumită actină 95 kDa, implicată în organizarea citoscheletului de actină la marginea perie a celulelor epiteliale, a fost descrisă ca o țintă suplimentară a autoanticorpilor la un subgrup de pacienți cu IPEX. Spre deosebire de cunoștințele noastre, nu au fost raportate informații despre HAA sau autoanticorpi viloși (VAA) în sindroamele asemănătoare IPEX, imunodeficiențe primare (PID) cu enteropatie sau în tulburările adesea asociate cu IPEX, cum ar fi T1D și enteropatiile autoimune ale diverse tipuri.origine.
Scopul acestui studiu a fost de a dezvolta teste cantitative pentru a măsura HAA și VAA pe baza noului sistem de precipitare luminescent imuno-precipitării (LIPS), de a determina acuratețea diagnosticului lor în sindroamele IPEX, IPEX-like și PID, de a le evalua în funcție de anticorpii enterocitari testați de către imunofluorescență și evaluează valoarea acestora în urmărirea clinică a pacienților cu IPEX.
Treisprezece pacienți cu IPEX și 14 pacienți cu sindrom asemănător IPEX au fost testați la LIPS pentru prezența HAA și VAA. Ca martori, am studiat 5 pacienți cu BIP de diverse origini [doi cu deficit de CD25, doi cu sindrom Wiskott Aldrich (WAS)] și unul cu deficiență de adenozin deaminază - tulburare de imunodeficiență combinată severă (ADA-SCID), toate afecțiunile caracterizate prin debut precoce. enteropatie] , 123 cu T1D, 70 cu boală celiacă și 123 donatori de sânge sănătoși. Diagnosticul IPEX sa bazat pe constatări clinice și moleculare, conform criteriilor stabilite de Asociația Italiană de Hematologie și Oncologie Pediatrică (AIEOP, www.AIEOP.org). Mutațiile și datele clinice ale pacienților cu IPEX și IPEX sunt rezumate în tabelele S1 și, respectiv, S2. Toți pacienții cu IPEX, cu excepția Pt19, Pt21, Pt22 și Pt24, au fost descriși în publicațiile anterioare. PT24 este o formă atipică a bolii caracterizată prin debut tardiv, fără semne de enteropatie, dar gastrită severă în prezența infiltratelor inflamatorii ale mucoasei asociate cu atrofia vilozității. Nivel general IgG a fost disponibilă la 10 dintre cei 13 pacienți IPEX studiați: dintre aceștia, 8 au fost în intervalul normalîn funcție de vârstă (cu un singur pacient în tratament cu Ig intravenos (IV), în timp ce în două cazuri au fost ușor crescute. Pacienții diagnosticați cu sindrom asemănător IPEX au avut manifestări clinice ale IPEX, dar au fost testați negativ pentru mutații ale genei FOXP3. Pacienții precum IPEX au prezentat cel puțin unul dintre principalele caracteristici clinice IPEX (enteropatie autoimună și/sau T1D) asociată cu una sau mai multe dintre următoarele boli autoimune sau mediate imun: dermatită, tiroidită, anemie hemolitică, trombocitopenie, nefropatie, hepatită, alopecie, hiper IgE cu sau fără eozinofilie. Parametrii clinici și de laborator au exclus alte boli monogenice, cum ar fi WAS, sindromul Omenn, sindromul hiper IgE și sindromul limfoproliferativ autoimun. Cel puțin o probă de ser de la pacienții cu IPEX și sindroame asemănătoare IPEX a fost disponibilă pentru testarea autoanticorpilor în momentul diagnosticării. La șase pacienți cu IPEX, mai multe probe de ser au fost, de asemenea, obținute în timpul urmăririi clinice și utilizate pentru măsurători suplimentare de autoanticorpi pentru a examina corelația cu rezultatul clinic (probele Pt12:8 de la naștere până la 8 ani, probe Pt14:7 de la 6 luni la 13 ani, probe Pt17-3, de la 4 luni la 3,5 ani, probe Pt19:44 de la 4 luni la 2 ani, probe Pt22:3 de la 0 la 5 luni; Pt 23:44 de la 4 la 10 ani). Toți pacienții cu BIP au fost diagnosticați pe baza testelor moleculare. Pacienții cu T1D au fost toți cazuri recente, cu un diagnostic bazat pe criteriile Asociației Americane de Diabet; pacienţii cu boală celiacă au fost studiaţi la momentul diagnosticului pe baza biochimiei jejunale.
Potrivit declarației de la Helsinki, fiecărui pacient și rude apropiată, tutore sau tutore a fost furnizat consimțământul informat scris în numele minorilor/copiilor care participă la acest studiu. Studiul a fost aprobat de comitetul local de etică a cercetării din San Raffaele.
Toți pacienții clasificați ca având sindrom IPEX sau IPEX-like au fost introduși pentru mutațiile FOXP3. ADN-ul genomic a fost izolat din sângele periferic folosind metoda fenol-cloroform sau QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen) urmând instrucțiunile producătorului. Unsprezece exoni, inclusiv toate granițele intron-exon, au fost amplificați din ADN-ul genomic prin PCR cu perechi de primeri intrronici flancați specific. Fragmentele de gene amplificate au fost secvențiate folosind kitul de ciclism BigDye Terminator (Applied Biosystems) pe un analizor genetic automat ABI PRISM 3130xl și un analizor genetic ABIPRISM 3730 (Applied Biosystems).
Secvența de codificare a luciferazei Renilla a fost donată în plasmida pTnT (Promega, Milano, Italia) pentru a genera vectorul pTnT-Rluc. Secvențele de codificare ADN armonice și vilozități de lungime completă au fost apoi amplificate prin RT-PCR și donate separat în pTnT-Rluc în aval și în cadru cu Renilla lumiferaza. Rluc-Harmonin și Rluc-Villin recombinante himerice au fost exprimate prin transcriere și translație cuplată in vitro folosind sistemul de celule fără lizat de reticulocite de iepure pTnT-quick SPM (Promega). Pentru a testa prezența HAA-urilor sau VAA-urilor, Rluc-Harmonin și Rluc-Villin au fost utilizate ca antigene în LIPS (17) prin incubarea a 4 × 106 echivalenți de unități luminoase cu 1 μl din serul fiecărui pacient în PBS pH 7,4-Tween 0,1% ( PBST) timp de 2 ore la temperatura camerei, complexele imune IgG au fost izolate prin adăugarea proteinei A-Sepharose (GE Healthcare, Milano, Italia) urmată de incubare timp de 1 oră la 4°C și spălarea cu PBST a Ag nelegat prin filtrare în Costar 96 -plăci de filtrare pentru godeuri 3504 (Corning Life Sciences, Tewksbury, SUA). Antigenele imunoprecipitate au fost apoi cuantificate prin măsurarea activității luciferazei recuperate după adăugarea substratului Renilla lumiferază (Promega) și măsurarea emisiei de lumină timp de 2 secunde într-un luminometru Centro XS3 (Berthold Technologies GmbH & Co. KG, Bad Wildbad, Germania). Rezultatele au fost exprimate în unități arbitrare derivate fie din indicele de anticorpi (BAA) folosind seruri pozitive și negative conform formulei (ser control cps-ser negativ cps) / (ser pozitiv cps-ser negativ cps) x100, fie din o curbă standard (HAA), constând din diluții în serie ale serului inițial pozitiv. Limita de pozitivitate a fost stabilită la percentila 99 a valorilor observate la donatorii de sânge sănătoși, așa cum este o practică obișnuită în atelierele de autoanticorpi sensibili la T1D care analizează sensibilitatea și specificitatea.
Autoanticorpii enterocite au fost determinați în grupurile de pacienți IPEX și IPEX-like prin imunofluorescență indirectă pe secțiuni criostat ale jejunului uman normal sau al maimuței așa cum s-a descris anterior.
Markeri ai autoanticorpilor T1D și boala celiacă, inclusiv anticorpii acidului glutamic decarboxilază (GADA), proteina asociată insulinomului 2, insulina, transportorul de zinc 8 și transglutaminaza-C, au fost măsurați în toate IPEX, IPEX-like, PID, T1D, celiac, și martori sănătoși.grupuri de control de donatori prin imunoprecipitare folosind LIPS sau radiolens așa cum s-a descris anterior. Toate rezultatele au fost exprimate în unități arbitrare derivate din curbele standard obținute prin diluarea în serie a serurilor stoc pozitive.
Acest studiu a folosit doar statistici descriptive. Calculul percentilei 99 de unități aleatorii la donatorii de sânge pentru selecția pragului a fost efectuat utilizând Stata (StataCorp LP, SUA). Probabilitatea condiționată de a testa pozitiv (sensibilitate) sau negativ (specificitate) pentru un HAA sau VAA, în funcție de prezența sau absența stării de boală IPEX și asociată. intervale de încredere 95% a fost calculat folosind site-ul web Vassar Stats pentru calcul statistic (http://vassarstats.net/clin1.html). Corelația dintre titrurile HAA și VAA sa bazat pe testele de corelare a rangului lui Spearman și a fost calculată folosind software-ul Graphpad Prism 5.
Concentrații de HAA circulante crescute au fost găsite la 12 din 13 (92%) pacienți cu IPEX, în timp ce au fost negative la pacienții cu IPEX, PID, T1D și boală celiacă (Figura 1A). Concentrații crescute de VAA circulante au fost găsite la 6 (46%) pacienți IPEX (Pt19, Pt14, Pt12, Pt17, Pt3, Pt21, ultimii patru având titruri egale sau mai mari de 98 VAA AU), inclusiv un pacient fără HAA ( Pt17), apoi modul în care VAA au fost negative în grupurile de control asemănător IPEX și alte boli (Fig. 1B). Toți pacienții cu IPEX au fost pozitivi fie pentru HAA, fie pentru VAA, dând combinației de HAA și VAA o sensibilitate la test de 100% (95% CI: 71,6 la 100%) și o specificitate a testului de 97,6% (95% CI: 92,5 la 99,4% ) pentru diagnosticarea sindromului IPEX. Nu există caracteristici clinice sau fenotipice corelate cu prezența fiecaruia a autoanticorpilor la pacienții cu IPEX. Nu a existat o corelație semnificativă observată la pacienții cu IPEX între titanii autoanticorpi AAA și VAA (Spearman r = -0,3 p = ns). GADA, ca fiind cei mai frecventi autoanticorpi T1D, a fost găsit la pacienții cu IPEX (9 din 13, 5 cu T1D), sindrom de tip IPEX (4 din 14, 2 cu T1D) și PID (3 din 5, 1 cu T1D) ( Fig. 1C). Alți autoanticorpi T1D au fost detectați în proporții mai mici, inclusiv autoanticorpi de insulină la 5 autoanticorpi IPEX, 4 IPEX-like și 2 PID și Zinc Transporter 8 autoanticorpi la un pacient IPEX. Nu a existat nicio corelație între titrurile GADA și HAA sau VAA (Spearman r = -0,017 p = ns și respectiv r = 0,34 p = ns). Niciunul dintre pacienții cu IPEX, sindrom asemănător IPEX sau PID nu a avut autoanticorpi IgA sau IgG de transglutaminază-C tisulară asociați bolii celiace (datele nu sunt prezentate).
Titruri de IgG serice HAA (panoul A), VAA (panoul B) și GADA (panoul C) exprimate în unități arbitrare în IPEX (n = 13), IPEX-like (n = 14), PID (n = 5), T1D ( VAA și GADA n = 123, VAA n = 46), pacienți cu boală celiacă (HAA n = 70, VAA n = 46, GADA n = 44) și martori (HAA și VAA n = 123, GADA n = 67). Linia punctată indică limita pentru pozitivitate.
Toate serurile IPEX, cu excepția unuia (Pt 22), 10 seruri asemănătoare IPEX și 3 seruri PID au fost testate pentru anticorpi enterociți prin imunofluorescență pe secțiuni de criostat intestinal. Toți pacienții IPEX testați au fost pozitivi pentru anticorpi enterociți. Serurile HAA pozitive au arătat o reactivitate puternică împotriva enterocitelor intestinale și a citosolului cu cea mai mare intensitate la marginea periei (Fig. 2A). VAA cu titru ridicat izolat a arătat o colorare puternică pentru a curăța granița, dar nu și citosolul (Fig. 2B). În afara grupului de pacienți IPEX, doar un ser de la un pacient cu infecție PID cu o mutație a genei CD25 și negativ pentru HAA și VAA (Pt L1) a prezentat colorare pozitivă a enterocitelor limitate la marginea mâinii (Fig. 2C).
HAA din IPEX Pt 19 leagă marginea periei și citosolul enterocitelor (panoul A), în timp ce VAA din IPEX Pt 17 leagă doar marginea periei (panoul B). IgG din PID Pt L1 leagă marginea periei enterocitelor (panoul C). Lipsa de legare în Pt L30 de tip IPEX (panoul D).
Au fost disponibile probe consecutive pentru măsurători HAA și VAA pentru 6 pacienți IPEX (Pt12, Pt14, Pt17, Pt19, Pt22 și Pt23): toți au suferit transplant de celule stem hematopoietice (HSCT) ca terapie terapeutică precedată în 4 cazuri de o perioadă variabilă de imunosupresie sistemică. La momentul prezentului raport (aprilie 2013), toți pacienții transplantați, cu excepția a doi, erau în viață, în remisie clinică din enteropatie, și nu sub terapie imunosupresoare (Tabelul S1). Analiza genetică a sângelui periferic recoltat după transplant a arătat himerism donator 100% în 4 cazuri (Pt12, Pt14, Pt19 și Pt22) și himerism mixt donor/primitor la alți pacienți. La debutul enteropatiei, trei pacienți aveau atât HAA, cât și VAA (Pt12, Pt14 și Pt19), unul avea doar VAA (Pt17) și doi doar HAA (Pt22 și Pt23) (Fig. 3). În cinci cazuri (Pt12, Pt14, Pt17, Pt22 și Pt23), remisiunea clinică sau ameliorarea marcată după imunodepresie sau HSCT a fost însoțită de o scădere a titrurilor HAA și/sau VAA, care au devenit nedetectabile sau au persistat la titruri foarte scăzute în patru cazuri. cazuri cu cea mai lungă observație. Într-un caz (Pt19), după HSCT, VAA a devenit nedetectabil, în timp ce HAA a persistat la titruri mari, în ciuda remisiunii clinice (Figura 3D). În cel puțin un caz (Pt14), HAA s-a dovedit a fi un marker sensibil al enteropatiei: HAA a fost detectat la titruri mari în asociere cu enteropatie severă la momentul diagnosticului IPEX și apoi a scăzut în timpul remisiunii clinice și histologice după terapia imunosupresoare, atingând vârful în timpul recidivei clinice și apoi a devenit persistent nedetectabil după HSCT cu succes și remisiune clinică (Figura 3B). Deși mai puțin răspândită, VAA a prezentat un model similar cu cel al HAA. Scăderea autoanticorpilor observată după HSCT a fost cauzată de deficitul de celule B și IgG secundar condiționării. Într-adevăr, cu excepția Pt22, care a avut un transplant postoperator scurt, toți pacienții cu titruri reduse de HAA sau VAA după HSCT (Pt12, 17 și 23) au fost deja imunizați, iar terapia cu IgIV era independentă la momentul primului post-HSCT. .
Axa verticală denotă HAA (diamante) și VAA (triunghiuri), titruri de autoanticorpi exprimate în unități arbitrare, de-a lungul axei orizontale în luni. Linia punctată verticală indică data HSCT, liniile punctate orizontale și liniile punctate indică limita pentru pozitivitatea HAA și, respectiv, VAA.
În acest studiu, arătăm că HAA și VAA, măsurate cu ușurință prin noi teste LIPS și utilizate în combinație, sunt markeri foarte sensibili și specifici ai sindromului IPEX și pot prezice rezultatul clinic al acestuia. De fapt, toți pacienții IPEX cu un diagnostic confirmat prin testare genetică au avut concentrații crescute de HAA sau VAA. În schimb, niciunul dintre pacienții cu enteropatie fără mutații FOXP3 (de exemplu, IPEX-like sau PID), pacienții cu T1D sau pacienții cu boală celiacă nu au fost pozitivi pentru HAA sau VAA. Dintre cei doi markeri, HAA a avut cea mai mare sensibilitate, găsită la 12 din 13 pacienți IPEX, în timp ce VAA a fost detectat doar la șase dintre ei. În special, HAA și VAA s-au dovedit a fi markeri valoroși ai sindromului IPEX și în cazuri atipice, cum ar fi Pt24, unde enteropatia nu făcea parte din prezentarea clinică, în schimb gastrita severă a fost dominantă, în care IPEX a fost suspectat și apoi confirmat prin secvențierea genei FOXP3. numai după detectarea HAA crescută. În viitor, noul test LIPS va permite un screening mai sistematic al HAA și VAA la pacienții cu eterogene sindroame clinice, cu capacitatea de identificare Mai mult cazuri de sindroame IPEX atipice clinic.
GADA au fost a doua cea mai frecventă reacție cu autoanticorpi observată la pacienții cu IPEX, după HAA. Deși GADA sunt cel mai frecvent marker al autoanticorpilor T1D, cu gamă largă titrul în timpul debutului clinic, acestea nu sunt întotdeauna asociate cu diabetul. De fapt, ele pot fi găsite în alte boli autoimune, inclusiv Sindromul persoanei rigide și Poliendocrinopatia autoimună (APS). Interesant este că la pacienții cu AFP, GADA este mai corelat cu dezvoltarea simptomelor gastrointestinale, mai degrabă decât cu diabetul. În mod intrigant, de asemenea, la pacienții noștri IPEX, GADA au fost în mare parte comune fără a fi asociate în mod constant cu T1D.
Pe lângă faptul că sunt markeri precisi ai sindromului IPEX, HAA și VAA pot avea o potențială valoare prognostică, în special în ceea ce privește enteropatia asociată. Șase pacienți cu probe disponibile post-provocare au avut titruri mari de HAA și VAA la momentul diagnosticului sau la debutul simptomelor gastrointestinale și înainte de tratament. Ulterior, în cinci cazuri după tratament imunosupresor și/sau HSCT (Pt12, Pt14, Pt17, Pt22 și Pt23), titrurile HAA și VAA au scăzut pentru a deveni nedetectabile sau au rămas la titruri scăzute în jurul pragului de detecție, reflectând remisiunea clinică și histologică a enteropatia asociată. Într-una dintre ele (Pt14), o recidivă tranzitorie a enteropatiei care apare în timpul tratamentului imunosupresor a fost însoțită de un vârf al HAA urmat de o scădere după remisiunea clinică. Din păcate, la acest pacient, lipsa probelor seriale ne-a împiedicat să documentăm momentul creșterii autoanticorpilor premergătoare recidivei enteropatiei. Într-un caz (Pt19), remisiunea clinică a fost însoțită de o scădere a VAA, dar nu a HAA, care a persistat la titruri mari până la 15 luni după HSCT. Descoperirea titrurilor scăzute de HAA și VAA după HSCT la majoritatea, dar nu la toți pacienții, este extrem de intrigantă, posibil legată de supraviețuirea limfocitelor reziduale gazdă sau a celulelor plasmatice responsabile de producerea persistentă a acestor autoanticorpi.
Introducerea acestor markeri de autoanticorpi în practica clinica ar fi relativ simplu, având în vedere ușurința măsurării lor folosind LIPS-ul recent dezvoltat. Recent, această tehnologie a fost propusă ca o nouă procedură neradioactivă pentru înlocuirea anticorpilor radioactivi și a imunoprecipitatului proteină-A în antigene umane recombinate marcate cu 35S-metionină transcrise și traduse in vitro, validate prin programele de standardizare a autoanticorpilor stabilite atât în T1D, cât și boala celiaca. În rapoartele recente, LIPS a demonstrat performanță comparabilă cu testele radiolink și mai mare decât ELISA existentă anterior. În acest studiu, LIPS a fost dezvoltat utilizând Renilla lumiferaza (Rluc)-Harmonin și Rluc-Villin recombinant himeric ca antigene, rezultând un test cu zgomot de fond scăzut și măsurători liniare cantitative de autoanticorpi capabile să distingă rezultate pozitive din probe negative de ser. În rezumat, măsurarea HAA și VAA folosind LIPS s-a dovedit a fi un test rapid, simplu și reproductibil, care este ușor de aplicat pentru uz clinic.
În mod interesant, aceeași performanță de diagnosticare a HAA și VAA combinate a fost observată cu autoanticorpii enterocite detectați prin imunofluorescență indirectă convențională. De asemenea, rămâne neclar, dar merită testat în viitor, dacă armonicile și vilozitățile sunt singurele antigene recunoscute pe enterocite de către autoanticorpii asociați IPEX sau dacă alte ținte autoantigene enterocite ale anticorpilor asociați IPEX nu au fost încă identificate.
Până acum, IPEX era considerată o celulă T și anume boala imunitara Disfuncția celulelor Treg, cu atenție limitată la defectele asociate în răspunsul imun umoral: rezultatele noastre evidențiază asocierea mutațiilor majore ale genei FOXP3 cu un autoanticorp specific antigen robust și cuantificabil. Cu toate acestea, deoarece celulele B nu exprimă FOXP3, este puțin probabil ca mutațiile FOXP3 să aibă un impact direct asupra dezvoltării celulelor B și/sau producției de anticorpi. Cu toate acestea, studii recente indică faptul că celulele B pot fi atât ținte directe, cât și indirecte ale funcției supresoare mediate de celulele Treg, iar alterarea celulelor Treg influențează titrurile de autoanticorpi atât la modele de șoarece, cât și la oameni - Mai mult, dovezile directe de la șoarecii mutanți foxp3 indică faptul că absența a celulelor Treg este asociată cu dezvoltarea anormală a celulelor B, pierderea celulelor B alergice și dezvoltarea celulelor plasmatice cu viață lungă. În plus, s-a demonstrat recent că la oameni, deficiența FOXP3 are ca rezultat acumularea de clone autoreactive în compartimentul celulelor B mature naive, sugerând un rol important pentru celulele Treg în controlul punctului de control din perspectiva celulelor B periferice.
Mecanismele responsabile de autoimunizarea hormonală și viloasă în IPEX și rolul acestor autoantigene în manifestările patologice ale sindromului IPEX rămân necunoscute. Harmonina este exprimată în mai multe țesuturi, inclusiv intestinul subtire, colon, rinichi, ochi, vestibulul urechii interne și, slab, pancreasul. În intestin, expresia armonizatorului se găsește predominant în celulele epiteliale de la suprafața luminală și în jumătatea superioară a criptelor intestinale - și este probabil localizată la microvilozitățile mâinii; localizare similară a fost demonstrată pentru vilozități,. Având în vedere că principala caracteristică histopatologică a enteropatiei IPEX este atrofia vilozității cu moartea celulelor epiteliale intestinale prin apoptoză combinată cu inflamație moderată până la severă, este probabil ca în acest context, armonica și țesutul vilos să poată acționa ca ținte moleculare relevante ale autoimunității patogene.
Acest studiu a arătat că HAA și VAA măsurate prin LIPS sunt markeri de diagnostic precis ai sindromului IPEX, cu o concordanță de 100% a mutațiilor genei FOXP3 care diferențiază IPEX, inclusiv cazurile atipice, de alte tulburări legate de enteropatia din copilărie. În general, aceste date indică faptul că HAA și VAA ar trebui incluse în fluxul de diagnostic și observatie clinica monitorizarea pacienților cu sindrom IPEX la care modificările titrurilor HAA și VAA sugerând enteropatie recurentă poate ajuta clinicienii să ia decizii terapeutice rapide.
Caracteristicile clinice ale pacienților cu IPEX.
Caracteristicile clinice ale pacienților de tip IPEX.
Faceți clic pe AICI pentru mai multe informații.
Autorii sunt recunoscători colegilor lor care au oferit cu amabilitate mostre de ser și informatii clinice despre pacienții lor IPEX și IPEX: E. S. Kang și Y. H. Choe, Seul, Republica Coreea; G. Zuin, Milano, Italia; A. Staiano, R. Troncone și V. Discepolo, Napoli, Italia; J. Schmidtko, Berna, Elveția; A. IkinciogullariZ. SedaUyan, M. Aydogan, E. O. Tzu, Ankara, Türkiye; G.R. Corazza și R. Ciccocioppo, Pavia, Italia; S. Vignola, Genova, Italia; A. Bilbao și S. Sanchez-Ramon, Madrid, Spania; J. Reichenbachand M. Hoernes, Zurich, Elveția; M. Abinun și M. Slatter, Newcastle upon Tyne, Marea Britanie; M. Cipolli, Verona, Italia; F. Guracan, Ankara, Türkiye; F. Locatelli și B. Lucarelli, Roma, Italia; C. Cancrini și S. Corrente, Roma, Italia; A. Tommasini, Trieste, Italia; L. Guidi, Roma, Italia; E. Richmond Padilla și O. Porras, San Jose, Costa Rica; S. Martino și D. Montin, Torino, Italia; M. Hauschild, Germania; K. Nadeau și M. Butte, Stanford, CA; A. Aiuti, G. Barera, F. Meschi și R. Bonfanti, Milano, Italia. Autorii le mulțumesc, de asemenea: M. Cecconi și D. Coviello pentru genotiparea FOXP3; și membri ai grupului de cercetare italian IPEX (www.ipexconsortium.org) R. Badolato, M. Cecconi, G. Colarusso, D. Coviello, E. Gambinera și A. Tommasini pentru sprijin și încurajare. Autorii le mulțumesc pacienților și familiilor lor pentru încrederea și participarea la studiile noastre.
Sindromul IPEX este un sindrom de dereglare imună, poliendocrinopatie și enteropatie cu un tip de moștenire recesiv legat de X (imunodisregilare, poliendocrinopatie și enteropatie, X-Linked).
Simptome: Poliendocrinopatie (o tulburare a sistemului glandelor endocrine), manifestată prin dezvoltarea diabetului zaharat de tip 1. În acest tip de diabet, celulele imune atacă și distrug celulele pancreasului care produc insulină, un hormon implicat în metabolismul glucozei (zahărului) în organism. La pacienții cu IPEX, insulina nu este produsă și se dezvoltă o stare de hiperglicemie - continut ridicat zahăr din sânge. De asemenea, este posibilă dezvoltarea tiroiditei autoimune - inflamație a glandei tiroide cauzată de un atac asupra propriului sistem imunitar; glanda tiroidă nu își mai poate îndeplini funcțiile în mod corespunzător (de exemplu, metabolismul calciului în organism este perturbat). Enteropatia (lezarea tractului gastrointestinal) se manifestă prin diaree persistentă care debutează înainte sau în timpul consumului de alimente, posibil sângerare intestinală. Anemia hemolitică - hemoliza (distrugerea) globulelor roșii și scăderea cantității de hemoglobină. Iritatii ale pieliiîn funcție de tipul de eczemă (erupție cutanată însoțită de mâncărime și peeling). Artrita (inflamația articulațiilor), limfadenopatie (mărire și durere noduli limfatici), afectarea rinichilor. Cașexia ( grad extrem epuizare). Susceptibilitate crescută la infecții din cauza prezenței dereglării imune (interacțiunea afectată a celulelor sistemului imunitar între ele și cu alte celule) și/sau neutropenie (reducerea numărului de neutrofile - celule ale sistemului imunitar, a căror funcție principală este protecție împotriva infecțiilor): pneumonie (inflamație plămânilor), peritonită ( inflamație purulentă peritoneu), sepsis (intoxicație cu sânge), artrită septică(inflamația purulentă a articulațiilor).
Sindromul IPEX este asociat cu mutații ale genei FOXP3
Metoda de cercetare: secvențierea genei FOXP3
proteina sindromului), care joacă un rol important în funcționarea citoscheletului. Reglează polimerizarea actinei. Funcția normală a acestei proteine este necesară pentru motilitatea totală a celulelor, polarizarea lor, formarea filopodiilor în timpul chemotaxiei, aderența celulară și formarea sinapselor imune în timpul interacțiunii celulelor sistemului imunitar.
În funcție de localizarea mutațiilor și de amploarea regiunii genice afectate de acestea, se dezvoltă trei variante clinice ale bolii: sindromul Wiskott-Aldrich complet (o consecință a delețiilor) și variante cu manifestări izolate de trombocitopenie sau neutropenie. Prezentarea clasică a sindromului Wiskott-Aldrich se caracterizează prin trombocitopenie cu trombocite mici, eczeme și infecții recurente.
Sindromul Wiskott-Aldrich se caracterizează prin tulburări multiple ale sistemului imunitar, care afectează predominant activitatea fagocitară și citolitică a celulelor imune înnăscute, adică. funcțiile care depind cel mai mult de mișcarea celulelor și de participarea activă a citoscheletului. Perturbarea formării sinapsei imune dintre limfocitele T și APC afectează toate manifestările imunității adaptive.
Ataxie-telangiectazie (sindromul Louis-Bar)
O boală ereditară cauzată de un defect al genei ATM (Ataxia telangiectasia mutată). Se referă la boli bazate pe sindromul defalcări cromozomiale. Boala se dezvoltă ca urmare a mutațiilor care apar în orice parte a genei ATM. Rezultatul mutațiilor poate fi o absență completă sau o slăbire a sintezei proteinelor ATM, precum și sinteza unei proteine defectuoase funcțional.
Proteina ATM este o serin treonin protein kinaza. Funcția sa principală este de a iniția semnale pentru repararea rupurilor de ADN dublu catenar care apar atât în condiții fiziologice (în timpul meiozei, rearanjarea genelor V ale receptorilor de recunoaștere a antigenului etc.), cât și induse de acțiunea factori externi(de exemplu, radiații ionizante). Când apar rupturi de ADN, kinaza ATM se autofosforilează și trece de la forma dimerică la forma monomerică. ATM kinaza asigură fosforilarea proteinelor complexului MRN și a factorilor asociați care efectuează direct repararea ADN-ului. În cazul unui număr mic de rupturi, acestea îndeplinesc cu succes această funcție. Dacă repararea cu succes este imposibilă, se dezvoltă apoptoza, declanșată de factorul p53. Lipsa reparării complete a ADN-ului determină instabilitatea genomului, ceea ce duce la o creștere a radiosensibilității celulelor și a frecvenței de dezvoltare. tumori maligne, în special limfoame și leucemii.
Cel mai caracteristic semn clinic al ataxiei-telangiectaziei este ataxia în creștere, manifestată prin modificări ale mersului. Este cauzată de neurodegenerare cu atrofie cerebeloasă. Dezvoltarea proceselor neurodegenerative este asociată cu faptul că în timpul maturizării neuronilor cerebrali au loc procese de recombinare a ADN-ului, însoțite de pauze duble. Un alt simptom care dă numele bolii, telangiectazia, este o dilatare persistentă a vaselor de sânge oculare și faciale.
Repararea afectată a rupurilor de ADN care apar în timpul maturizării limfocitelor T și B stă la baza imunodeficienței observate în ataxie-telangiectazie. Imunodeficiența se manifestă în boli infecțioase cronice recurente bacteriene și virale ale aparatului bronhopulmonar, care de obicei provoacă moartea pacientului.
sindromul Nijmegen
Nijmegen este orașul din Olanda unde sindromul a fost descris pentru prima dată. Această boală ereditară este clasificată ca un sindrom de defalcări cromozomiale însoțite de formarea instabilității genomului. Dezvoltarea acestei boli este asociată cu o mutație a genei NBS1, al cărei produs, nibrina, este implicată în repararea ADN-ului ca parte a complexului MRN, fiind un substrat pentru fosforilarea de către protein kinaza ATM. În acest sens, atât patogeneza, cât și manifestările clinice ale sindromului Nijmegen coincid practic cu cele ale ataxiei-telangiectaziei. În ambele cazuri se dezvoltă modificări neurodegenerative, dar în sindromul Nijmegen predomină fenomenele de microcefalie, deoarece procesele de recombinare a ADN-ului apar și în timpul maturizării neuronilor cerebrali.
Sindromul limfoproliferativ autoimun
Boala se caracterizează prin apoptoză afectată și limfoproliferare non-malignă asociată, hiperimunoglobulinemie, procese autoimune și o creștere a conținutului de celule CD3+ CD4-CD8- în sânge. Mutațiile care stau la baza sindromului sunt cel mai adesea localizate în gena TFRRSF6, care codifică receptorul Fas (CD95). Numai mutațiile care provoacă modificări în regiunea intracelulară a moleculei CD95 duc la manifestări clinice. Mai rar, mutațiile afectează ligandul Fas și genele caspazei 8 și 10 (vezi secțiunea 3.4.1.5). Mutațiile se manifestă prin expresia slăbită a moleculelor codificate de gena corespunzătoare și slăbirea sau absență completă transmiterea semnalului apoptotic.
Sindromul limfoproliferativ legat de X
O imunodeficiență rară caracterizată printr-un răspuns antiviral, antitumoral și imun pervertit. Agentul cauzal al sindromului limfoproliferativ legat de X este virusul Epstein-Barr. Virusul intră în celulele B prin interacțiunea moleculei gp150 a învelișului viral cu receptorul CD21 de pe membrana celulară. La pacienții cu sindrom limfoproliferativ legat de X, are loc activarea policlonală a celulelor B și are loc replicarea virală nestingherită.
Infecția cu virusul Epstein-Barr în sindromul limfoproliferativ X-linked este rezultatul unei mutații a genei SH2D1A, care codifică proteina adaptor SAP. Moleculă de activare limfocitară de semnalizare (SLAM) - proteină asociată]. Domeniul SH2 al proteinei SAP recunoaște un motiv de tirozină în partea citoplasmatică a SLAM și o serie de alte molecule. Procesele care se dezvoltă în celulele sistemului imunitar la activarea mediată prin receptorul SLAM joacă un rol principal în imunitatea antivirală. Receptorul SLAM este exprimat pe timocite, celule T-, B-dendritice și macrofage. Expresia crește atunci când celulele sunt activate. Efectul de reglare al proteinei SAP este asociat cu suprimarea activității tirozin fosfatazelor în
4.7. Imunodeficiențe | |
referitor la SLAM. În absența SAP, SH-2 fosfataza se leagă liber de receptorul SLAM, îl defosforilează și inhibă transducția semnalului. Principalii efectori ai apărării antivirale, celulele T și NK, nu sunt activați, ceea ce duce la proliferarea necontrolată a virusului Epstein-Barr. În plus, SAP facilitează interacțiunea tirozin kinazei Fyn cu receptorul SLAM, care promovează transmiterea semnalului de activare.
În diversele manifestări clinice ale sindromului limfoproliferativ legat de X, cea mai consistentă este fulminantă Mononucleoza infectioasa, tulburări limfoproliferative benigne și maligne, precum și disgammaglobulinemie sau hipogammaglobulinemie. Printre leziunile locale predomină afectarea ficatului, cauzată de infiltrarea celulelor B infectate cu virusul Epstein-Barr și a celulelor T activate, ceea ce duce la necroza țesutului hepatic. Insuficiența hepatică este una dintre principalele cauze de deces la pacienții cu sindrom limfoproliferativ legat de X.
sindromul IPEX
Sindromul legat de X de dereglare imună, poliendocrinopatie și enteropatie ( Dereglarea imună, poliendocrinopatie, enteropatie sindromul X-linked) se dezvoltă ca o consecință a mutațiilor în gena FOXP3, localizată pe cromozomul X. FOXP3 este o „genă principală” responsabilă de dezvoltarea celulelor T reglatoare ale fenotipului CD4+ CD25+. Aceste celule joacă un rol central în restrângerea activității clonelor de limfocite T autospecifice la periferie. Un defect al genei FOXP3 este asociat cu absența sau deficiența acestor celule și cu dezinhibarea diferitelor procese autoimune și alergice.
Sindromul IPEX se manifestă prin dezvoltarea de leziuni autoimune multiple ale organelor endocrine, tractului digestivși sistemul reproducător. Această boală debutează la o vârstă fragedă și se caracterizează prin afectarea unui număr de organe endocrine (diabet zaharat tip I, tiroidita) cu nivel inalt autoanticorpi, enteropatie severă, cașexie, statură mică, manifestări alergice(eczeme, alergii alimentare, eozinofilie, nivel crescut de IgE), precum și modificări hematologice (anemie hemolitică, trombocitopenie). Copiii bolnavi (băieți) mor în primul an de viață din cauza bolilor infecțioase severe repetate.
sindromul APECED
Poliendocrinopatie autoimună, candidoză, distrofie ectodermică ( Poliendocrinopatie autoimună, candidoză, distrofie ectodermică) este un sindrom autoimun cauzat de un defect în selecția negativă a timocitelor. Cauza sa sunt mutațiile genei AIRE, responsabile de expresia ectopică a proteinelor specifice organului în celulele epiteliale și dendritice ale medulei timusului, responsabile de selecția negativă (vezi secțiunea 3.2.3.4). Procesul autoimun afectează în primul rând glandele paratiroide și suprarenale, precum și insulele pancreasului (se dezvoltă diabetul de tip I), glanda tiroidă și organele genitale.
Adesea însoțită de dezvoltarea candidozei. De asemenea, sunt relevate defecte de morfogeneză a derivaților ectodermici.
Când se analizează spectrul imunodeficiențelor primare, se atrage atenția asupra absenței unităților nosologice asociate cu patologia celulelor NK. Până în prezent, au fost descrise puțin peste o duzină de mutații care afectează funcția acestor celule la indivizi, ceea ce sugerează că imunodeficiențele care afectează selectiv celulele NK sunt extrem de rare.
4.7.2. Infecția HIV și sindromul imunodeficienței dobândite
Pe lângă imunodeficiențe primare, singura boală pentru care afectarea sistemului imunitar stă la baza patogenezei și determină simptomele este sindromul imunodeficienței dobândite (SIDA; Sindromul imunodeficienței dobândite- SIDA). Numai ea poate fi recunoscută ca o boală independentă de imunodeficiență dobândită.
Istoria descoperirii SIDA datează din 1981, când Centrul pentru Controlul Bolilor (SUA, Atlanta) a publicat un raport al unor grupuri de medici din New York și Los Angeles despre o boală neobișnuită înregistrată la bărbații homosexuali. S-a caracterizat printr-o formă severă de pneumonie cauzată de ciuperca oportunistă Pneumocystis carinii. Rapoartele ulterioare au furnizat date despre extinderea grupului de pacienți și au furnizat date despre prezența imunodeficienței la ei, asociată cu o scădere bruscă a conținutului de limfocite T CD4+ în circulație, însoțită de dezvoltarea proceselor infecțioase care pot fi cauzată, pe lângă pneumocystis, de alți agenți patogeni facultativi. Unii pacienți au dezvoltat sarcomul Kaposi, care a fost caracterizat printr-o evoluție agresivă, neobișnuită pentru acesta. Până la data publicării acestor materiale, 40% dintre pacienții identificați au murit. Mai târziu s-a dovedit că epidemia bolii a capturat deja Africa ecuatorială, unde boala se răspândește în principal prin contact sexual heterosexual. Comunitatea medicală internațională nu numai că a recunoscut existența unei noi forme nosologice - „sindromul imunodeficienței dobândite” ( Sindromul imunodeficienței dobândite), Dar
Și a anunțat începutul unei pandemii a acestei boli. Un debut atât de dramatic al SIDA a atras atenția universală asupra acestuia, depășind cu mult mediul profesional. În știința medicală, în special în imunologie, problema SIDA a influențat semnificativ distribuția efortului și a finanțării în dezvoltarea cercetării științifice. Aceasta a fost prima dată când o boală asociată cu o leziune predominantă a sistemului imunitar s-a dovedit a fi atât de semnificativă din punct de vedere științific și social.
LA data începutului anului 2007 Au fost 43 de milioane de persoane infectate cu HIV, dintre care 25 de milioane au murit, creșterea anuală a acestui număr este de 5 milioane, iar rata anuală a mortalității este de 3 milioane.60% dintre cei infectați trăiesc în Africa sub-sahariană.
În 1983, aproape simultan în Franța [L. Montagnier (L. Montagnier)]
Și Statele Unite ale Americii [R.S. Galo ( R.C. Gallo)] a fost determinat
4.7. Imunodeficiențe | |
natura virală a SIDA și agentul său cauzator, HIV (virusul imunodeficienței umane, Virusul imunodeficienței umane - HIV). Aparține retrovirusurilor, adică. virusuri în care ARN-ul servește ca purtător de informații ereditare și este citit cu participarea transcriptazei inverse. Acest virus aparține subfamiliei lentivirusurilor - viruși cu acțiune lentă provocând boli cu lungi perioadă incubație. Genul HIV include specia HIV-1, care este agentul cauzal formă tipică SIDA și HIV-2, care diferă de HIV-1 în detalii privind structura și acțiunea patogenă, dar este în general similar cu acesta. HIV-2 provoacă o variantă mai ușoară a bolii, întâlnită în principal în Africa. Informațiile de mai jos se aplică în primul rând HIV-1 (cu excepția cazului în care se menționează altfel). Există 3 grupe de HIV - M, O și N, împărțite în 34 de subtipuri.
Viziunea actuală acceptată este că HIV-1 provine dintr-un virus cimpanzeu din Africa de Vest (cel mai probabil în Camerun, o țară endemică HIV) în jurul anilor 1930. HIV-2 provine din virusul simian SIVsm. Variantele HIV-1 sunt distribuite inegal în întreaga lume. În țările occidentale dezvoltate predomină subtipul B, în Europa centrală și Rusia - subtipurile A, B și recombinanții acestora. Alte variante predomină în Africa și Asia, toate subtipurile HIV cunoscute fiind prezente în Camerun.
Morfologia, genele și proteinele virusului imunodeficienței umane
Structura HIV este prezentată în Fig. 4,46. Virusul are un diametru de aproximativ 100 nm. Este înconjurat de o cochilie din care în formă de ciupercă
Coajă
Proteine și enzime nucleocapside
Nucleocapsid
Orez. 4,46. Schema structurii virusului 1 al imunodeficienței umane (HIV-1)
Capitolul 4. Imunitatea în protejarea și deteriorarea organismului... |
||||||||||||||||||||
Orez. 4,47. Structura genomului virusului 1 al imunodeficienței umane (HIV-1). Este indicată locația genelor pe două molecule de ARN ale virusului
spini, a căror parte exterioară este formată de proteina de înveliș gp120, iar părțile adiacente membranei și transmembranare sunt formate de proteina gp41. Picurile reprezintă trimeri ai acestor molecule. Aceste proteine sunt implicate în interacțiunea dintre virus și celula gazdă, iar răspunsul imun al acesteia din urmă este îndreptat în principal împotriva lor. Mai adânc este stratul de matrice, care acționează ca un cadru. Partea de mijloc a virusului este formată dintr-o capsidă în formă de con, care conține ARN genomic. Nucleoproteinele și enzimele sunt de asemenea localizate aici: revers transcriptaza (p66/p51), integraza (p31–32), proteaza (p10) și RNază (p15).
Structura genetică a HIV și proteinele codificate de genele sale sunt prezentate în Fig. 4,47. În două molecule de ARN monocatenar cu o lungime totală de 9,2 kb, sunt localizate 9 gene care codifică 15 proteine HIV. Secvențele care codifică structurile virusului sunt limitate la capetele 5’ și 3’ de repetări terminale lungi (LTR - Repetări terminale lungi), care îndeplinesc funcții de reglare. Genele structurale și de reglare se suprapun parțial. Principalele gene structurale sunt 3 - gag, pol și env. Gena gag determină formarea de antigene specifice grupului nucleului - nucleoid și matrice. Gena pol codifică ADN polimeraza (reverse transcriptază) și alte proteine nucleotidice. Gena env codifică formarea proteinelor de înveliș menționate mai sus. În toate cazurile, produsul genic primar este procesat, adică. se descompune în proteine mai mici. Genele reglatoare sunt situate între genele pol și env (genele vif, vpr, vpu, vpx, rev, tat) și, în plus, ocupă partea 3’-terminală a genomului (fragmente ale genelor tat și rev, gena nef ). Proteinele codificate de gene reglatoare sunt importante pentru formarea virionului și relația acestuia cu celula. Dintre acestea, cele mai importante proteine sunt tat, un transactivator al transcripției și nef (27 kDa), regulatorul său negativ. Proteina nef defectuoasă este detectată la „ficatul lung” infectat cu HIV, care nu prezintă progresia bolii.
Cele mai importante pentru imunologia infecției cu HIV, diagnosticul și dezvoltarea abordărilor imunoterapiei SIDA sunt proteinele anvelopei gp120 și gp41. Gena env este asociată cu o variabilitate extrem de mare a HIV. Gena conține 5 regiuni constante (C) și cinci regiuni variabile (V); la acesta din urmă, secvența de aminoacizi variază de la un izolat de virus la altul cu 30–90%. Bucla variabilă V3 este deosebit de importantă pentru imunogenitate. Frecvența mutațiilor în gena env este de 10-4-10-5 evenimente per genom pe ciclu, adică. 2-3 ordine de mărime mai mare decât frecvența normală a mutațiilor genelor. O parte semnificativă a moleculei este ocupată de reziduuri de carbohidrați.
4.7. Imunodeficiențe | |
Infecția celulelor cu virusul imunodeficienței umane
Procesul de infectare a celulelor umane cu HIV și replicarea lui ulterioară include mai multe etape. În faza incipientă ciclu de viață Se pot distinge următoarele faze:
– legarea HIV de suprafața celulei (recepție);
– fuziunea membranelor virusului și celulei și pătrunderea virusului în celulă (fuziune și „dezbrăcare”);
– începerea transcripției inverse; formarea unui complex de preintegrare;
– transportul complexului de preintegrare în nucleoplasmă;
– integrarea provirusului în genomul celular.
LA Etapele fazei târzii a ciclului de viață HIV includ:
– transcrierea ARN viral pe matricea ADN-ului proviral integrat;
– exportul de ARN viral în citosol;
– traducerea ARN viral, procesarea proteinelor;
– asamblarea unei particule virale pe o membrană celulară;
– eliberarea virionului nou format.
Principalele puncte de intrare pentru infecție sunt membranele mucoase ale tractului genito-urinar și digestiv. Pătrunderea virusului în organism este mult facilitată în prezența leziunilor membranei mucoase, dar infecția este posibilă chiar și în absența acestora. În acest caz, virusul este capturat de procesele celulelor dendritice care pătrund în lumenul organului. În orice caz, celulele dendritice sunt primele care interacționează cu HIV. Ei transportă virusul la ganglionul limfatic regional, unde infectează celulele T CD4+ prin interacțiunea celulelor dendritice cu limfocitele T în timpul prezentării antigenelor.
Recepția HIV se datorează recunoașterii reciproce a trimerului proteinei virusului gp120 și a glicoproteinei de membrană CD4 a celulei gazdă. Regiunile responsabile de interacțiunea lor sunt localizate pe ambele molecule. Pe molecula gp120, regiunea indicată este situată în partea sa C-terminală (reziduuri 420–469), în plus, există încă 3 regiuni importante pentru formarea situsului de interacțiune cu CD4 și o regiune (254–274) responsabil de pătrunderea virusului în celulă după legarea de membrana CD4. Pe molecula CD4, locul de legare pentru gp120 este situat în domeniul N-terminal V (D1) și include secvențele reziduurilor 31-57 și 81-94.
Deoarece molecula CD4 servește ca receptor pentru HIV, gama de celule țintă ale acestui virus este determinată de expresia acestuia (Tabelul 4.20). Desigur, principalele sale ținte sunt limfocitele T CD4+, precum și timocitele imature care exprimă ambii coreceptori (CD4 și CD8). Celulele dendritice și macrofagele care exprimă slab CD4 pe membrană sunt, de asemenea, infectate efectiv cu virusul și servesc ca producători activi ai acestuia (replicarea HIV în celulele dendritice este chiar mai mare decât în limfocitele T). Țintele HIV includ și alte celule care conțin cel puțin cantități mici de CD4 la suprafață - eozinofile, megacariocite, celule endoteliale, unele celule epiteliale (epiteliu timic, celule M intestinale) și celule nervoase(neuroni, celule microgliale, astrocite, oligodendrocite), spermatozoizi, celule corioalantoide, mușchi striați.
680 Capitolul 4. Imunitatea în protejarea și deteriorarea organismului...
Tabelul 4.20. Starea parametrilor imunologici în sindromul imunodeficienței dobândite
Index | Preclinic | Stadiul clinic |
manifestări |
||
Numărul de limfocite | ||
Normal sau redus | Mai puțin de 200 de celule per |
|
1 µl de sânge |
||
Normal sau crescut | Normal sau redus |
|
(procentul poate fi |
||
Raportul CD4+/CD8+ | ||
Raportul Th1/Th2 | Normal sau redus | |
Activitate de citotoxicitate | Promovat | |
celule T ice | ||
Răspunsul celulelor T | Normal sau redus | Ascuțit deprimat |
la mitogeni | ||
Normal sau redus | ||
Antigenemia | Apare pe | Absent |
2–8 săptămâni | ||
Anticorpi în circulație | De obicei apar după | Prezent |
Factori solubili în | Forme solubile ale lanțului α IL-2R, CD8, TNFR, |
|
circulaţie | β2-microglobulina, neopterina |
|
Funcție redusă |
||
Țesuturi limfoide, asociate | Scăderea precoce a conținutului | Suprimare puternică |
ciat cu mucus | Reducerea celulelor T CD4+ | celule T, în special subseturi |
scoici groase | populațiile CD4+ |
|
Imunitatea înnăscută | Normal sau deprimat | Deprimat |
Molecule suplimentare necesare pentru pătrunderea HIV în celule sunt coreceptorii săi - 2 receptori pentru chemokine: CXCR4 (receptor pentru chemokine CXCL12) și CCR5 (receptor pentru chemokinele CCL4 și CCL5). Într-o măsură mai mică, rolul coreceptorului este inerent în mai mult de o duzină de receptori de chemokine. CXCR4 servește ca coreceptor pentru tulpinile HIV-1 cultivate pe linii de celule T, iar CCR5 este pentru tulpini cultivate pe linii de macrofage (este prezent pe macrofage, celule dendritice și, de asemenea, pe celulele T CD4+). Ambii acești receptori sunt clasificați ca rodopsinei, transmitând un semnal în celulă prin proteina G asociată cu ei (vezi secțiunea 4.1.1.2). Ambii chemoreceptori interacționează
Cu proteina gp120; locul de legare pentru acești receptori se deschide în molecula gp120 după interacțiunea cu CD4 (Fig. 4.48). Diferitele izolate HIV diferă prin selectivitatea lor pentru anumiți coreceptori. Rol de susținere în recepție HIV-2 este jucat de moleculele de adeziune, în special de LFA-1. Când celulele dendritice sunt infectate în interacțiune
Cu Receptorul HIV lectin implicat DC-SIGN.
4.7. Imunodeficiențe | |
Regiuni hipervariabile ale gp120
Orez. 4,48. Schema de interacțiune între virus și celula țintă în timpul infecției sale. Ilustrată este una dintre opțiunile pentru interacțiunea moleculelor receptorului celulelor T și a moleculelor HIV-1, asigurând pătrunderea virusului în celulă
Coreceptorii joacă un rol important în fuziunea învelișului viral cu membrana celulară. Pe partea virală, proteina gp41 joacă un rol major în fuziune. După fazele de fuziune (fuziune) și „dezbrăcare” virusului, se formează un complex invers, care asigură transcrierea inversă cu formarea de ADN proviral dublu catenar.
Cu ajutorul enzimei virale integraza, cADN-ul este integrat în ADN-ul celulei, formând un provirus. Particularitatea integrării genelor HIV în genomul celular este că nu necesită diviziune celulară. Ca urmare a integrării, se formează o infecție latentă, care implică de obicei celule T de memorie, macrofage „latente”, care servesc ca rezervă de infecție.
Replicarea HIV are loc în principal sau exclusiv în celulele activate. Când celulele T CD4+ sunt activate, este indus factorul de transcripție NF-KB, care se leagă de promotorii ADN-ului atât celular, cât și viral. ARN polimeraza celulară transcrie ARN viral. Genele tat și rev sunt transcrise mai devreme decât altele, ale căror produse sunt implicate în replicarea virală.Tat este o proteină care interacționează cu secvențe terminale lungi (LTR), care crește brusc rata transcripției virale. Rev este o proteină care promovează ieșirea transcriptelor ARNm virale, atât spliced cât și nespliced, din nucleu. ARNm viral eliberat din nucleu servește ca șablon pentru sinteza proteinelor structurale și reglatoare. Proteinele structurale gag, env, pol formează o particulă virală care înflorește din celulă.
Stimularea limfocitelor cu mitogeni sporește replicarea HIV și efectul său citopatogen. Acest lucru poate fi facilitat de factorii endogeni care însoțesc activarea celulară, induși în limfocitele și macrofagele activate (NF-kB a fost deja menționat). Citokinele, în special TNFa și IL-6, pot fi, de asemenea, astfel de factori. Primul activează transcrierea genelor HIV, al doilea stimulează exprimarea HIV în celulele gazdă. Factorii de stimulare a coloniilor GM-CSF și G-CSF au un efect similar. IL-1, IL-2, IL-3 și IFNy pot acționa ca cofactori pentru activarea HIV. Hormonii glucocorticoizi ai glandelor suprarenale contribuie la implementarea programului genetic al HIV. IL-4, IL-7 și IFNa au efecte opuse.
Răspunsul imun la antigenele HIV
Infecția virală acută este caracterizată prin formarea relativ rapidă a celulelor T CD4+ și CD8+ specifice antigenului care sintetizează IFNγ. Acest lucru duce la o scădere rapidă a conținutului de virus din sânge, dar nu și la dispariția acestuia. Răspunsul celular la infecția cu HIV constă în formarea de celule T helper CD4+ specifice antigenului și celule T killer CD8+. Celulele T CD8+ citotoxice sunt detectate pe parcursul întregului curs al SIDA, cu excepția stadiilor târzii, în timp ce celulele T CD4+ specifice virusului sunt detectate doar în stadiile incipiente ale bolii. Celulele T ucigașe CD8+ ucid celulele infectate înainte ca virusul să părăsească celula, întrerupând astfel replicarea virală. Există o relație inversă clară între titrul virusului din plasma sanguină și numărul de celule ucigașe T CD8+ specifice. Activitatea proliferativă crescută a celulelor T specifice antigenului CD4+ și CD8+ se corelează cu progresia mai lentă a bolii. Pacienții care conțin un număr mare de celule T ucigașe CD8+ se caracterizează prin progresia lentă a bolii. Celulele T CD4+ joacă, de asemenea, un rol important în clearance-ul viral: există o relație între răspunsul proliferativ al celulelor T CD4+ la antigenele HIV și nivelurile de virus plasmatic. Sa observat că severitatea viremiei este mai strâns invers corelată cu producerea de IL-2 decât IFNy. În timpul infecției virale cronice, celulele T efectoare sunt conservate cantitativ, dar se modifică funcțional. Capacitatea celulelor T CD4+ de a sintetiza IL-2 scade; formarea de molecule citotoxice de către celulele T CD8+ este slăbită. Activitatea proliferativă a celulelor T CD8+ scade, considerată a fi rezultatul scăderii producției de IL-2 de către celulele CD4+ helper. Slăbirea protecției antivirale este facilitată de diferențierea celulelor T CD4+ în ajutoare de tip Th2. Chiar și spectrul de citokine sintetizate de limfocitele T citotoxice CD8+ se caracterizează printr-o predominanță a citokinelor Th2.
Ar fi firesc să ne așteptăm ca procesele imunitare, care, deși într-o formă slăbită, se dezvoltă ca răspuns la un virus invadator, vor putea cel puțin să grad mic protejează organismul de infecții. De fapt, dacă se va întâmpla acest lucru, va fi doar perioada initiala boli. Ulterior, în ciuda prezenței celulelor T CD4+ și CD8+ specifice antigenului, are loc replicarea intensivă a virusului. Aceasta este o consecință a selecției virusurilor cu modificări ale epitopilor recunoscute
Condițiile cauzate de imunitatea celulară afectată (defectul celulelor T) sunt sindroame severe de imunodeficiență combinată. La unii pacienți, aceste forme de imunodeficiență pot provoca dezvoltarea unor boli extrem de periculoase (chiar care pun viața în pericol), în timp ce la alții - doar probleme minore de sănătate. Să ne oprim mai în detaliu asupra bolilor care se dezvoltă atunci când imunitatea celulară este afectată.
Candidoza cronică a pielii și mucoaselor
Candidoza (afta) se dezvoltă atunci când pielea și membranele mucoase sunt afectate de o infecție fungică. În cazuri rare, infecția se poate răspândi la organele interne.Predispoziția la dezvoltarea candidozei există cu deficiența selectivă a celulelor T. Tratamentul candidozei necesită utilizarea unor medicamente speciale medicamente antifungice(unii pacienți trebuie să urmeze terapie de întreținere pe tot parcursul vieții).
Condrodisplazie metafizară
Această boală este o tulburare de imunodeficiență autosomal recesivă. Frecvent în căsătoriile consanguine. Pacienții care suferă de condrodisplazie metafizară au părul fin și fragil și sunt foarte sensibili la infecții virale. În unele cazuri, boala poate fi vindecată prin transplant de măduvă osoasă.Sindromul limfoproliferativ legat de X
Sindromul limfoproliferativ legat de X este caracterizat printr-o vulnerabilitate crescută la virusul Epstein-Barr. Virusul Epstein-Barr poate provoca dezvoltarea unor boli periculoase (mononucleoză infecțioasă, anemie aplastică, cancer la ganglioni limfatici, varicela, vasculită, herpes).Este de remarcat faptul că această boală este moștenită numai de bărbați.
