Причини за аглутинация на червените кръвни клетки, нейните видове и антиглобулинов тест. Болест на студов аглутинин (хъб)

Болести на кръвта

Студови аглутинини

Студените аглутинини или криопротеините са антитела, които взаимодействат с мембранните антигени на червените кръвни клетки. В този случай системата на комплемента може да се активира, причинявайки автоимунна реакция, водеща до агрегация и разрушаване на червените кръвни клетки, но само когато ниски температурио Тази патология се среща предимно при пациенти на възраст над 50 години. Антителата могат да бъдат представени от IgM, IgG или IgA; в първия случай аглутинацията е значително изразена. Има лабораторни методи за диагностика на студените аглутинини и определяне на температурата, при която започва аглутинацията. Обикновено причината за студовите аглутинини е инфекция, най-често вирусна. Техният брой може постепенно да намалява, така че ако бъдат открити, операцията при условия на хипотермия и използване на студена кардиоплегия е най-добре да се отложи, ако е възможно. Можете също така да определите титрите на студените аглутинини, когато различни температурикръв и при перфузия избягвайте охлаждането до температура, при която може да възникне аглутинация. Ако все пак е необходима по-дълбока хипотермия, е необходима плазмафереза ​​за отстраняване на антителата, съдържащи се в серума. При високи титри на студови аглутинини, охлаждането може да доведе до сериозни усложнения: периоперативен миокарден инфаркт, бъбречна недостатъчност, хемолитична анемия, тромбоза. Планирането на операцията при такива пациенти трябва да бъде особено внимателно, насочено към избягване на охлаждане на пациента. Хемодилуцията по време на CPB намалява до известна степен риска от аглутинация, но този ефект не е достатъчно предвидим, така че пациентът не трябва да се охлажда преди, по време или след CPB. Препоръчително е да се използва нагрят воден матрак; IR трябва да се извършва при нормотермия, като предварително се загрява разтворът, който пълни системата. Ако червените кръвни клетки се прилагат по време на CPB, те също трябва да бъдат предварително затоплени. Ако е необходима студена кардиоплегия, тя трябва да бъде кристалоидна, без кръв. В този случай те започват с въвеждането на 200 - 300 ml топъл разтвор, който измива кръвта от коронарните артерии, след което се въвежда студен разтвор. Температурата на студен кардиоплегичен разтвор е такава, че почти сигурно ще доведе до аглутинация, така че кардиоплегията, съдържаща кръв, се прилага само топла. Непосредствено преди отстраняване на скобата от аортата, препоръчително е да инжектирате топъл кардиоплегичен разтвор, така че кръвта да влезе коронарни артерии, не изстина.

Сърповидно-клетъчна анемия

Обикновено човешките еритроцити съдържат главно хемоглобин А, сърповидно-клетъчната анемия се причинява от съдържанието в еритроцитите на анормален хемоглобин S. При пациенти, хомозиготни по този признак, еритроцитите съдържат предимно хемоглобин S, клинично това се проявява като сърповидно- клетъчна анемия. При хетерозиготни пациенти хемоглобин S е по-малко от 45% от общия, те са носители на гена на болестта. При сърповидноклетъчна анемия червените кръвни клетки имат характерна форма на сърп или полумесец, по-малко подвижни са, склонни са към агрегиране и се разрушават по-бързо. Когато нивата на кислород са ниски, сърповидните червени кръвни клетки могат да се утаят. При пациенти със сърповидно-клетъчна анемия, в допълнение към самата анемия, се отбелязва вътресъдова тромбоза. По време на криза (или криза - не съм сигурен, не помня) възниква оклузия кръвоносни съдовепридружен от болка, задух и конвулсии.

Тактиката на перфузията трябва да е насочена към избягване на криза с всичките й последствия. Необходимо е да се поддържа високо ниво на насищане с кислород и да не се охлажда пациента. При пациенти с преобладаващо съдържание на хемоглобин S насищането на еритроцитите с кислород трябва да бъде най-малко 85%, при пациенти с частично съдържание на хемоглобин S - най-малко 40%. При пациенти с частични нива на хемоглобин S, по време на CPB е необходимо да се поддържа високо ниво на насищане с кислород и да се избягва ацидоза, която допринася за разрушаването. сърповидни червени кръвни клетки. При спазване на тези правила усложненията обикновено могат да бъдат избегнати. Охлаждането също допринася за сърповидно-клетъчна дисфункция, така че е най-добре да избягвате охлаждането и да използвате топла или кристалоидна кардиоплегия по същия начин, както при студените аглутинини. Хемодилуцията по време на перфузия също играе положителна роля. За да се предотврати съдова обструкция, трябва да се използват вазодилататори.

Лабораторен тест, насочен към идентифициране на автоантитела, които причиняват аглутинация и хемолиза на червените кръвни клетки при ниски температури.

Синоними руски

Студови аглутинини, изследване на пълни студени аглутинини.

английски синоними

Кръвен тест за студени аглутинини, студови автоантитела, студено-реагиращи антитела.

Изследователски метод

Реакция на аглутинация.

Какъв биоматериал може да се използва за изследване?

Венозна кръв.

Как правилно да се подготвим за изследване?

• Не пушете 30 минути преди теста.

Обща информация за изследването

Автоимунната хемолитична анемия (AIHA) възниква в резултат на срив поради редица причини за имунологичен толеранс и производството на антитела срещу собствените червени кръвни клетки. Има топли и студени автоантитела. Топлините се свързват най-ефективно с еритроцитните антигени при температура 37 °C, а студените - при 4-18 °C. В зависимост от ефекта, който автоантителата имат върху червените кръвни клетки в епруветка, се освобождават хемолизини (унищожават клетките) и аглутинини (причиняват слепването на червените кръвни клетки).

Автоимунни хемолитична анемиясъс студени аглутинини - сравнително рядка форма на имунна хемолитична анемия (според някои данни, 20% от всички случаи на AIHA). То може да бъде идиопатично (причината е неизвестна) или симптоматично. Идиопатичният вариант е по-често при възрастни и старост(60-80 години), докато симптоматичната може да се появи в детството и юношеството, усложнявайки протичането на микоплазмена пневмония, инфекциозна мононуклеоза, легионелоза, както и системна автоимунни заболявания(системен лупус еритематозус, ревматоиден артрит). При по-възрастни хора AIHA със студови аглутинини често се свързва с лимфопролиферативни заболявания като напр. хронична лимфоцитна левкемияи макроглобулинемия на Waldenström.

Студените аглутинини са най-често IgM, по-рядко са представени от смес от имуноглобулини различни класове. Те се свързват с мембраната на червените кръвни клетки при ниски температури и прикрепят комплемент, семейство от серумни протеини, които унищожават маркирани с антитела клетки. След добавянето на комплемента върху мембраната на еритроцита се образува мембраноувреждащ комплекс, образуването на който води до образуването големи количествапори в клетъчната мембрана, нейното подуване и разрушаване.

Като лабораторен маркер за автоимунна хемолиза, причинена от студови аглутинини, е препоръчително да се използва откриването на антитела в кръвния серум на пациента, които водят до аглутинация на червените кръвни клетки по време на инкубация при ниски температури.

Съвременният метод за изследване на студените аглутинини е реакцията на гел аглутинация. Суспензия от донорни червени кръвни клетки се добавя към микроепруветки, съдържащи неутрален гел. След това се добавя тест серумът и се инкубира при температура 2-8 °C. Ако има студени аглутинини в тестовия серум по време на инкубация при ниски температури, те се свързват с еритроцитите и предизвикват тяхната аглутинация. Резултатът от теста се оценява след центрофугиране, при което се отделят аглутинираните и неаглутинираните червени кръвни клетки. Неаглутинираните еритроцити имат размер, сравним с размера на частиците на гела и свободно преминават през тях под въздействието на центробежна сила, образувайки компактна червена утайка на дъното на микроепруветката, а аглутинираните еритроцити поради големи размериостават върху повърхността на гела или в неговата дебелина.

За какво се използва изследването?

• За откриване на антиеритроцитни антитела в кръвния серум на пациента, които причиняват хемолиза при ниски температури.

Кога е насрочено изследването?

• Ако се подозира автоимунна хемолитична анемия със студови аглутинини: характерна особеностболести – лоша толерантностнастинка, когато се появят основните симптоми.

Какво означават резултатите?

Референтни стойности:не е открит.

• Отрицателен резултат - клетките образуват компактна утайка на дъното на микроепруветката - показва липсата на студени аглутинини в тестовия серум.
• Положителен резултат - аглутинираните клетки образуват червен слой на повърхността или в дебелината на гела - показва наличието на студени антитела в тестовия серум.

Какво може да повлияе на резултата?

• В ниски титри могат да се открият и студени аглутинини здрави хора.



Важни бележки

• При автоимунна хемолитична анемия със студени аглутинини, автоаглутинацията на червените кръвни клетки настъпва при стайна температура, което създава проблеми и води до неправилни резултати при определяне на кръвна група и изчисляване на параметрите периферна кръв(брой на еритроцитите и еритроцитни индекси). Тази аглутинация е обратима при 37 ° C, така че когато кръвта се нагрее до телесна температура, проблемите по време на изследването се елиминират.

Аглутинацията на червените кръвни клетки е биохимичен процесагрегация, слепване и утаяване на червени кръвни клетки, възникващи in vitro или in vivo.

Терминът "аглутинация" се превежда от латинското "agglutinatio", което означава "залепване". IN биологични системиили лабораторен анализТова е слепването и агрегацията на органични частици (бактерии, сперматозоиди, кръвни клетки), които имат на повърхността си аглутиногенни антигени при взаимодействие със специфични аглутининови антитела. Полученият агломерат се нарича аглутинат.

Дори обикновено в човешката кръв може да има антитела и антигени, които не причиняват адхезия. Това са компоненти на антигенната система ABO, които съответстват на кръвната група, антитела, които се появяват като имунен отговор, когато в тялото навлязат определени бактерии или други патогени на инфекциозни заболявания (дизентерия, коремен тиф).

Аглутинация на червени кръвни клетки

Механизмът на реакцията на аглутинация може да бъде директен (активен) или индиректен (пасивен). Ефектът на директната аглутинация възниква в организъм или проба, когато антигените на структурната мембрана на червените кръвни клетки започват да взаимодействат със собствените антитела на плазмата или компоненти на бактериални клетки.

Директната аглутинация се използва, когато клинични изследвания, определяне на кръвна група или наличие на Rh фактор. Ефектът на пасивната адхезия се използва широко за диагностика на инфекциозни заболявания (бактериални, вирусни).

Защо възниква аглутинация на червените кръвни клетки?

Аглутинацията на еритроцитната маса става следствие от биохимичното взаимодействие на антигенни молекули, локализирани в структурата на мембраната на кръвните клетки, с антитела, намиращи се в плазмата. Това намалява естествения отрицателен заряд на червените кръвни клетки и ги сближава. Молекулите аглутинин, които не отговарят на кръвната група, могат да образуват "мостове" между червените кръвни клетки. В резултат на това се образува кръвен съсирек, развива се хемолитична болест и дори смърт.

Слепването на червените кръвни клетки (реакция на хемаглутинация - HRA) се причинява от различни фактори, които зависят от естеството на аглутиниращия агент на повърхността на образувания елемент или в плазмата:

• Студови аглутинини. Те могат да бъдат открити в кръвта по време на заболявания, причинени от вируси и бактерии, някои неоплазми и хипотермия, причинявайки симптоми на интраваскуларна хемолиза. Студовите аглутинини могат да бъдат намерени в ниски титри при здрави хора, без да причиняват забележими хемолитични прояви. от химическа природатова са, като правило, имуноглобулинови протеини (най-често IgM). Те се активират, когато температурата падне под 37°C, например, когато кръвта навлезе в горната или долните крайнициили други области на тялото, склонни към хипотермия. Студените аглутинини, в зависимост от вида, могат да проявяват активност и да се локализират по различен начин: да действат в широк или тесен температурен диапазон, когато температурата се възстанови, да останат фиксирани на повърхността на еритроцита или да бъдат в плазмата.
• Еритроцитни антигени. Днес са идентифицирани повече от 400 антигенни системи, чиято комбинация е индивидуална за човек. Повечето от тях имат слаби антигенни свойства и не предизвикват забележима аглутинация на червените кръвни клетки. Най-критичните по време на кръвопреливане са системите ABO и Rh, чиято несъвместимост може да причини залепване кръвни клеткипоследвано от трансфузионен шок.
• Хемаглутиногени, които определят кръвната група. В структурата на мембраните на еритроцитите има специфични маркери-антигени с гликопротеинова природа (аглутиногени А и В), а в плазмата има специфични имуноглобулинови вещества-антитела (аглутинини алфа и бета). Една от четирите възможни комбинации от тези антигени и антитела определя кръвната група, която е генетично обусловена и не може да се променя през целия живот. Аглутиногените и аглутинините със същото име не могат да присъстват в човешкото тяло едновременно, в противен случай червените кръвни клетки ще се слепят, последвано от хемолиза. Това е една от генетично развитите реакции на тялото, насочени към запазване на антигенната индивидуалност и основен принципкръвопреливане.

• Rh антигени . Rh антигените (Rh) са липопротеини по химическа природа. Антигените на системата Rh са представени от няколко типа (C, E, D), като най-силният от тях е тип D. Хората, които имат такъв антиген, се наричат ​​Rh-положителни, останалите се наричат ​​Rh-отрицателни. Нормалната плазма не съдържа антитела срещу Rh антигени. Те се появяват поради нарушаване на правилата за кръвопреливане и при Rh конфликт по време на бременност.
• Вирусна и бактериална аглутинация на еритроцитите. Агрегация на червени кръвни клетки поради определени вирусни или бактериални заболяванияможе да се прояви поради директното взаимодействие на вирус или бактерия с повърхностните структурни молекули на еритроцитите или поради реакция с титъра на имунизирания серум на еритроцитите, специфично сенсибилизирани с желания антиген (in vitro). Аглутинацията на кръвните клетки възниква след адсорбцията на вируса върху повърхността на червените кръвни клетки. При повечето вируси хемаглутининът е структурен компонентвирион.

Специфични маркери - антигени от гликопротеинова природа (аглутиногени А и В)

Лабораторни методи, базирани на реакции на аглутинация

Реакциите на аглутинация имат диагностична стойност. Това са серологични техники за откриване и изследване на антитела или антигени, присъстващи в серумния титър на пациенти въз основа на имунологични реакции, идентифициране на антигенни маркери на бактерии и вируси, определяне на антигенната структура на микробен патоген.

Реакциите на индиректна или пасивна хемаглутинация (IPHA или RIHA) са в основата на методите за идентифициране на определени антигени или антитела в кръвта на пациента. Този метод се използва за идентифициране на патогена заразна болест, качествено и количествено определяне на гонадотропен хормон при съмнение за бременност. Използваното оборудване включва стъклени предметни стъкла, стерилни епруветки и пластмасови плочи с ямкови клетки.

Основен реагент е т.нар еритроцитен диагностикум(ED), който може да бъде произведен по два принципа:

• антигенна ЕД (използвана по-често);
• антитяло ED.

В зависимост от вида на диагностикума, идентифицираният антиген или антитяло се адсорбира върху повърхността на еритроцитната клетка, което при последваща реакция със съответните антитела или антигени на кръвния серум на пациента провокира адхезия профилирани елементии образуването на утайка, подобна на миди, равномерно покриваща дъното на тръбата или клетката. Ако пробата се окаже отрицателна, утайката на дъното на епруветката ще бъде от различен тип.

За RPHA се прави диагностичен комплект от човешки или животински кръвни клетки (заек, овца, плъх, кон), които се третират с формалдехид или други реагенти за консервиране. За да се увеличи техният адсорбционен капацитет, самите червени кръвни клетки се сенсибилизират специални лекарства(танин, хромен хлорид, риванол).

Обратният процес е реакцията на инхибиране на хемаглутинацията

Някои вируси (грип, рубеола, морбили, аденовируси, чума говеда) може да предизвика аглутинация на формирани елементи. Диагностичните техники за такива видове се основават на реакции, които спират този процес. вирусни заболявания. Антивирусните антитела в предварително имунизирания серум противодействат на вирусите, като ги карат да загубят способността си да предизвикват слепване на червените кръвни клетки.

Антиглобулинов тест - тест на Кумбс

Тестът на Coombs се провежда за идентифициране на непълни антитела, които са локализирани в структурата на мембраната на еритроцитите и причиняват аглутинация, когато се добави специален антиглобулинов серум. Има директни и косвени реакции на Кумбс. Директен антиглобулинов тест се извършва, ако има съмнение за наличие на такива непълни антитела на повърхността на червените кръвни клетки.

Косвена проба Coombs се извършва с предварителна сенсибилизация на еритроцита с подходящо антитяло и последващо въвеждане на антиглобулинов компонент. Извършва се по време на диагностика хемолитична болеставтоимунен курс или при новородени, за установяване на Rh конфликт между майката (Rh-отрицателен) и детето (Rh-положителен).

Индиректната реакция на Coombs се използва широко от трансфузиолозите, тъй като позволява висока точностопределяне на съвместимостта донорски материалс кръвта на реципиента въз основа на еритроцитни антигени.

Повече ▼:

Предписване на имуноглобулин за резус конфликт, показания и противопоказания

Има две форми на това заболяване: студова аглутинова болест и пароксизмална студова хемоглобинурия. И в двата случая интраваскуларната имунна хемолиза може да бъде първична или вторична. В последния случай се развива на фона на вирусни инфекции (например инфекциозна мононуклеоза), малария, микоплазмена пневмония, хемобластоза или колагеноза. Автоимунната хемолитична анемия, причинена от първична интраваскуларна хемолиза, обикновено протича хронично.

3. Студова аглутинова болест, причинена от вторична интраваскуларна хемолиза,среща се при много заболявания: инфекции (микоплазмена пневмония, Инфекциозна мононуклеоза, дребна шарка, паротити други вирусни инфекции, трипанозомиаза и малария), колагенози (рядко), хемобластози (неходжкинов лимфом, макроглобулинемия на Waldenström, хронична лимфоцитна левкемия), сарком на Капоши. Трябва да се подчертае, че при тези заболявания студените аглутинини се откриват много по-често, отколкото се наблюдава хемолиза. Във всичко изброени случаиНа първо място се лекува основното заболяване. В противен случай лечението е същото като при болестта на студовия аглутинин, причинена от първична интраваскуларна хемолиза.

4. Пароксизмална студена хемоглобинурия - рядка форма на автоимунна хемолитична анемия. Хемолизата при това заболяване възниква в резултат на двуфазова реакция, включваща IgG, която се нарича антитела на Donath-Landsteiner. В първата фаза IgG се свързва с червените кръвни клетки при ниски температури и фиксира комплемента. Във втората фаза при температура 37°С настъпва активиране на комплемента, което води до хемолиза. Антителата на Donath-Landsteiner са специфични за P-антигена на еритроцитите.

А.Клинична картина.Пароксизмална студова хемоглобинурия често се среща при пациенти със сифилис, особено вроден, и може да усложни вирусни инфекции (морбили, паротит, варицела, инфекциозна мононуклеоза, грип), понякога е първичен. Интраваскуларната хемолиза се развива, когато пациентът се затопли след хипотермия. Прогнозата е благоприятна. Обикновено пациентите се възстановяват сами. Понякога заболяването продължава дълго време с периодични хемолитични кризи.

b.Лабораторни изследвания. Лабораторна диагностикаПароксизмалната студова хемоглобинурия се основава на откриването на антитела на Donath-Landsteiner. За да направите това, 1) серумът на пациента се смесва с нормални червени кръвни клетки от група 0; 2) инкубирайте за 30 минути при 4°C (за фиксиране на антитела и комплемент върху еритроцитите); 3) инкубирайте за 30 минути при 37°C (за активиране на комплемента). Като отрицателна контрола използвайте: 1) проба с топлинно инактивиран (за отстраняване на комплемента) серум на пациента; 2) проба със серум на пациента, инкубиран с червени кръвни клетки от група 0 в обратен ред (първо при 37°C, след това при 4°C).

V.Лечение. Пациентите трябва да избягват хипотермия.Кортикостероидите и спленектомията са неефективни. Ако е необходимо преливане на червени кръвни клетки, те се нагряват. Не забравяйте да лекувате основното заболяване.

Тестът за студен аглутинин е кръвен тест, който измерва нивата на тези антитела в тялото. Студовите аглутинини се произвеждат от нашето тяло в отговор на инфекция. Те карат червените кръвни клетки да се слепват при ниски температури. При здрави хора, като правило, ниско нивостудени антитела в кръвта. Но лимфомът и някои инфекции (ТОРС) повишават нивото на студовите аглутинини.

Малко повишено нивостудените аглутинини обикновено не причиняват сериозни проблеми. Понякога студените аглутинини събират червени кръвни клетки в групи, които се забиват в съдовете, разположени близо до охладената кожа. Това може да доведе до бледа и изтръпване на кожата. В напреднали случаи (при изключително продължителна хипотермия) това може да доведе до гангрена.

Защо да измерваме студените аглутинини?

Тестът за студен аглутинин се извършва за:

• Разберете дали са студови антителапричина за автоимунна хемолитична анемия;
• Диагностицирайте атипична пневмония.

Нашата клиника има експерти по тематапо този въпрос.

(4 специалисти)

2. Как се подготвя и как се извършва анализът?

Как да се подготвим за тест за студен аглутинин?

Не е необходима подготовка преди теста за студени антитела.

Как се извършва анализът на студен аглутинин?

Нивото на студовите антитела се измерва след вземане на кръв от вената. Вземането на кръв се извършва по стандартна процедура.

3. Какви са рисковете и какво може да повлияе на анализа?

Какви са рисковете от теста за студен аглутинин?

Възможните рискове от кръвен тест за студени антитела могат да бъдат свързани само със самото вземане на кръв. По-специално, появата на синини на мястото на пункцията и възпаление на вената (флебит). Топли компресиняколко пъти на ден ще ви избави от флебит. Ако приемате лекарства за разреждане на кръвта, може да кървите на мястото на убождането.

Какво може да попречи на теста за студен аглутинин?

Резултатът от теста за студен аглутинин ще бъде неточен, ако приемате антибиотици, особено пеницилин и цефалоспорин.

Какво си струва да знаете?

Повече от половината хора, страдащи от атипична пневмония, имат високи нива на студови антитела. Въпреки това, други по-надеждни тестове често се използват за диагностициране на атипична пневмония.

Ако се открият свързани червени кръвни клетки по време на общ анализкръв, лекарят може да изисква тест за студен аглутинин.

Кръвната група е по-трудна за определяне, ако нивата на аглутинин са високи.

Ако човек има високо съдържаниестудени аглутинини и не е бил изложен на ниски температури, тогава трябва да се поддържа на топло. Високо нивостудените аглутинини могат да доведат до анемия, измръзване или болест на Рейно.