Cauzele aglutinarii globulelor rosii, tipurile acesteia si testul antiglobulinei. Boala aglutinină rece (hub)

Boli de sânge

Aglutinine reci

Aglutininele reci, sau crioproteinele, sunt anticorpi care interacționează cu antigenele membranei celulelor roșii din sânge. În acest caz, sistemul complementului poate fi activat, provocând o reacție autoimună care duce la agregarea și distrugerea globulelor roșii, dar numai atunci când temperaturi scăzute Oh. Această patologie apare în principal la pacienții cu vârsta peste 50 de ani. Anticorpii pot fi reprezentați prin IgM, IgG sau IgA; în primul caz, aglutinarea este semnificativ exprimată. Există metode de laborator pentru diagnosticarea aglutininelor reci și determinarea temperaturii la care începe aglutinarea. De obicei cauza aglutininelor la rece este o infecție, cel mai adesea virală. Numărul acestora poate scădea treptat, așa că, dacă sunt depistați, intervenția chirurgicală în condiții de hipotermie și utilizarea cardioplegiei la rece este cel mai bine amânată dacă este posibil. De asemenea, puteți determina titrurile de aglutinine reci când temperaturi diferite sânge, iar la perfuzare, evitați răcirea la o temperatură la care poate apărea aglutinarea. Dacă, totuși, este încă necesară o hipotermie mai profundă, este necesară plasmafereza pentru a elimina anticorpii conținuti în ser. Cu titruri mari de aglutinine reci, răcirea poate duce la complicații grave: infarct miocardic perioperator, insuficiență renală, anemie hemolitică, tromboză. Planificarea intervenției chirurgicale la astfel de pacienți trebuie să fie deosebit de atentă, menită să evite răcirea pacientului. Hemodiluția în timpul CPB reduce riscul de aglutinare într-o oarecare măsură, dar acest efect nu este suficient de previzibil, astfel încât pacientul nu trebuie răcit înainte, în timpul sau după CPB. Este recomandabil să folosiți o saltea cu apă încălzită; IR trebuie efectuată la normotermie, preîncălzind soluția care umple sistemul. Dacă celulele roșii din sânge sunt administrate în timpul CPB, acestea trebuie, de asemenea, să fie preîncălzite. Daca este necesara cardioplegia rece, aceasta trebuie sa fie cristaloida, fara sange. În acest caz, ele încep cu introducerea a 200 - 300 ml de soluție caldă, care spăla sângele din arterele coronare, apoi se introduce o soluție rece. Temperatura unei soluții cardioplegice reci este de așa natură încât aproape sigur va duce la aglutinare, astfel încât cardioplegia care conține sânge se administrează doar cald. Imediat înainte de a scoate clema din aortă, este indicat să se injecteze o soluție cardioplegică caldă, astfel încât sângele să intre. artere coronare, nu s-a răcit.

Anemia celulelor secera

În mod normal, eritrocitele umane conțin în principal hemoglobină A, anemia secerată este cauzată de conținutul anormal de hemoglobină S în eritrocite. La pacienții homozigoți pentru această trăsătură, eritrocitele conțin predominant hemoglobină S, clinic aceasta se manifestă ca secera - anemie celulară. La pacienții heterozigoți, hemoglobina S este mai mică de 45% din total; aceștia sunt purtători ai genei bolii. În anemia secerată, globulele roșii au o formă caracteristică de seceră sau semilună, sunt mai puțin mobile, au tendința de a se agrega și sunt distruse mai repede. Când nivelul de oxigen este scăzut, celulele roșii secerate pot precipita. La pacienții cu anemie falciformă, pe lângă anemie în sine, se observă tromboză intravasculară. În timpul unei crize (sau crize - nu sunt sigur, nu-mi amintesc) apare ocluzia vase de sângeînsoțită de durere, dificultăți de respirație și convulsii.

Tacticile de perfuzie ar trebui să vizeze evitarea unei crize cu toate consecințele ei. Este necesar să se mențină un nivel ridicat de saturație în oxigen și să nu se răcească pacientul. La pacienții cu un conținut predominant de hemoglobină S, saturația de oxigen a eritrocitelor trebuie să fie de cel puțin 85%, la pacienții cu un conținut parțial de hemoglobină S - cel puțin 40%. La pacienții cu niveluri parțiale ale hemoglobinei S, în timpul CPB este necesar să se mențină un nivel ridicat de saturație în oxigen și să se evite acidoza, care contribuie la distrugere. globule roșii secera. Urmând aceste reguli, complicațiile pot fi de obicei evitate. Răcirea contribuie și la disfuncția celulelor falciforme, așa că cel mai bine este să evitați răcirea și să utilizați cardioplegia caldă sau cristaloidă în același mod ca și pentru aglutininele reci. Hemodiluția în timpul perfuziei joacă, de asemenea, un rol pozitiv. Pentru a preveni obstrucția vasculară, trebuie utilizate vasodilatatoare.

Un test de laborator care vizează identificarea autoanticorpilor care provoacă aglutinarea și hemoliza globulelor roșii la temperaturi scăzute.

Sinonime rusă

Aglutinine reci, studiul aglutininelor reci totale.

Sinonime în engleză

Test de sânge cu aglutinină la rece, Autoanticorpi la rece, Anticorpi cu reacție la rece.

Metodă de cercetare

Reacția de aglutinare.

Ce biomaterial poate fi folosit pentru cercetare?

Sânge venos.

Cum să vă pregătiți corect pentru cercetare?

• Nu fumați cu 30 de minute înainte de test.

Informații generale despre studiu

Anemia hemolitică autoimună (AIHA) apare ca urmare a unei defecțiuni din cauza unui număr de motive de toleranță imunologică și producerea de anticorpi împotriva propriilor celule roșii din sânge. Există autoanticorpi caldi și reci. Cele calde se leagă cel mai eficient de antigenele eritrocitare la o temperatură de 37 °C, iar cele reci - la 4-18 °C. În funcție de efectul pe care autoanticorpii îl au asupra globulelor roșii dintr-o eprubetă, se eliberează hemolizinele (distrug celulele) și aglutininele (determină lipirea celulelor roșii din sânge).

Autoimună anemie hemolitică cu aglutinine la rece - o formă relativ rară de anemie hemolitică imună (conform unor date, 20% din toate cazurile de AIHA). Poate fi fie idiopatică (cauza este necunoscută), fie simptomatică. Varianta idiopatică este mai frecventă la vârstnici și in varsta(60-80 ani), în timp ce simptomatic poate apărea în copilărie și adolescență, complicând cursul pneumoniei cu micoplasmă, mononucleozei infecțioase, legionelozei, precum și sistemice. boală autoimună(lupus eritematos sistemic, artrita reumatoida). La adulții în vârstă, AIHA cu aglutinine reci este adesea asociată cu boli limfoproliferative, cum ar fi leucemie limfocitară cronicăși macroglobulinemia lui Waldenström.

Aglutininele reci sunt cel mai adesea IgM, mai rar sunt reprezentate de un amestec de imunoglobuline diferite clase. Ele se leagă de membrana celulelor roșii din sânge la temperaturi scăzute și atașează complement, o familie de proteine ​​​​serice care distrug celulele marcate cu anticorpi. După adăugarea complementului, pe membrana eritrocitară se formează un complex care dăunează membranei, a cărui formare duce la formarea cantitate mare porii din membrana celulară, umflarea și distrugerea acesteia.

Ca marker de laborator al hemolizei autoimune cauzate de aglutininele reci, este recomandabil să se utilizeze detectarea anticorpilor în serul sanguin al pacientului care duc la aglutinarea globulelor roșii în timpul incubației la temperaturi scăzute.

Metoda modernă de testare a aglutininelor reci este reacția de aglutinare a gelului. O suspensie de globule roșii donatoare este adăugată la microtuburi care conțin un gel neutru. Apoi serul de testat este adăugat și incubat la o temperatură de 2-8 °C. Dacă în serul de testat există aglutinine reci în timpul incubației la temperaturi scăzute, acestea se leagă de eritrocite și provoacă aglutinarea acestora. Rezultatul testului este evaluat după centrifugare, timp în care globulele roșii aglutinate și neaglutinate sunt separate. Eritrocitele neaglutinate au o dimensiune comparabilă cu dimensiunea particulelor de gel și trec liber prin ele sub influența forței centrifuge, formând un sediment roșu compact la fundul microtubului, iar eritrocitele aglutinate datorită dimensiuni mari persistă pe suprafața gelului sau în grosimea acestuia.

La ce se folosește cercetarea?

• Pentru a detecta anticorpi anti-eritrocitari în serul sanguin al pacientului care provoacă hemoliză la temperaturi scăzute.

Când este programat studiul?

• Dacă se suspectează anemie hemolitică autoimună cu aglutinine reci: trăsătură caracteristică boli - slaba toleranta raceala, cand apar simptomele principale.

Ce înseamnă rezultatele?

Valori de referinta: nu a fost detectat.

• Un rezultat negativ - celulele formează un sediment compact la fundul microtubului - indică absența aglutininelor reci în serul de testat.
• Un rezultat pozitiv - celulele aglutinate formează un strat roșu pe suprafața sau în grosimea gelului - indică prezența anticorpilor reci în serul de testat.

Ce poate influența rezultatul?

• La titruri mici, aglutininele reci pot fi detectate și în oameni sanatosi.



Notite importante

• În anemia hemolitică autoimună cu aglutinine reci, autoaglutinarea globulelor roșii are loc la temperatura camerei, ceea ce creează probleme și duce la rezultate incorecte la determinarea grupei de sânge și la calcularea parametrilor. sânge periferic(număr de eritrocite și indici de eritrocite). Această aglutinare este reversibilă la 37 °C, așa că atunci când sângele este încălzit la temperatura corpului, problemele din timpul cercetării sunt eliminate.

Aglutinarea globulelor roșii este proces biochimic agregarea, aglomerarea și precipitarea globulelor roșii, care au loc in vitro sau in vivo.

Termenul „Aglutinare” este tradus din latinescul „agglutinatio” care înseamnă „lipire”. ÎN sisteme biologice sau analize de laborator Aceasta este lipirea și agregarea particulelor organice (bacterii, spermatozoizi, celule sanguine) care au antigeni aglutinogeni pe suprafața lor atunci când interacționează cu anticorpi specifici de aglutinină. Aglomeratul rezultat se numește aglutinat.

Chiar și în mod normal, anticorpii și antigenii pot fi prezenți în sângele uman care nu provoacă aderență. Acestea sunt componente ale sistemului antigen ABO, care corespund grupei sanguine, anticorpi care apar ca răspuns imun atunci când anumite bacterii sau alți agenți patogeni ai bolilor infecțioase (dizenterie, febră tifoidă) pătrund în organism.

Aglutinarea globulelor roșii

Mecanismul de reacție de aglutinare poate fi direct (activ) sau indirect (pasiv). Efectul aglutinarii directe apare într-un organism sau probă atunci când antigenele membranare structurale ale globulelor roșii încep să interacționeze cu proprii anticorpi ai plasmei sau cu componente ale celulelor bacteriene.

Aglutinarea directă este utilizată când studii clinice, determinând grupa sanguină sau prezența factorului Rh. Efectul adeziunii pasive este utilizat pe scară largă pentru a face un diagnostic al bolilor infecțioase (bacteriene, virale).

De ce are loc aglutinarea globulelor roșii?

Aglutinarea masei eritrocitare devine o consecință a interacțiunii biochimice a moleculelor de antigen localizate în structura membranei celulelor sanguine cu anticorpii găsiți în plasmă. Acest lucru reduce sarcina negativă naturală a globulelor roșii și le apropie. Moleculele de aglutinină care nu corespund grupului de sânge pot forma „punți” între celulele roșii din sânge. Ca urmare, se formează un cheag de sânge, se dezvoltă boala hemolitică și chiar moartea.

Aderența globulelor roșii (reacție de hemaglutinare - HRA) este cauzată de diverși factori, care depind de natura agentului de aglutinare de pe suprafața elementului format sau din plasmă:

• Aglutinine reci. Ele pot fi detectate în sânge în timpul bolilor cauzate de viruși și bacterii, unele neoplasme și hipotermie, provocând simptome de hemoliză intravasculară. Aglutininele reci pot fi găsite în titruri scăzute la persoanele sănătoase, fără a provoca notabil manifestări hemolitice. De natura chimica acestea sunt, de regulă, proteine ​​imunoglobuline (cel mai adesea IgM). Ele sunt activate atunci când temperatura scade sub 37°C, de exemplu, când sângele intră în partea superioară sau membrele inferioare sau alte zone ale corpului predispuse la hipotermie. Aglutininele reci, în funcție de tip, pot prezenta activitate și pot fi localizate diferit: acționează într-un interval de temperatură larg sau îngust, când temperatura este restabilită, rămân fixate pe suprafața eritrocitei sau se află în plasmă.
• Antigene eritrocitare. Astăzi, au fost identificate peste 400 de sisteme antigene, a căror combinație este individuală pentru o persoană. Cele mai multe dintre ele au proprietăți antigenice slabe și nu provoacă o aglutinare vizibilă a globulelor roșii. Cele mai critice în timpul transfuziei de sânge sunt sistemele ABO și Rh, a căror incompatibilitate poate provoca lipire celule de sânge urmată de șoc transfuzional.
• Hemaglutinogenii care determină grupa sanguină. În structura membranelor eritrocitare există markeri-antigeni specifici de natură glicoproteică (aglutinogeni A și B), iar în plasmă există substanțe-anticorpi imunoglobuline specifice (aglutinine alfa și beta). Una dintre cele patru combinații posibile ale acestor antigeni și anticorpi determină grupa de sânge, care este determinată genetic și nu se poate schimba de-a lungul vieții. Aglutinogenii și aglutininele cu același nume nu pot fi prezente în corpul uman în același timp, altfel celulele roșii din sânge se vor lipi împreună, urmate de hemoliză. Aceasta este una dintre reacțiile dezvoltate genetic ale organismului, care vizează păstrarea individualității antigenice și principiu de bază transfuzii de sânge.

• Antigeni Rh . Antigenii Rh (Rh) sunt lipoproteine ​​de natură chimică. Antigenele sistemului Rh sunt reprezentate de mai multe tipuri (C, E, D), cel mai puternic dintre ele este tipul D. Persoanele care au un astfel de antigen se numesc Rh pozitiv, restul se numesc Rh negativ. Plasma normală nu conține anticorpi la antigenele Rh. Ele apar din cauza încălcării regulilor de transfuzie de sânge și în caz de conflict Rh în timpul sarcinii.
• Aglutinarea virală și bacteriană a eritrocitelor. Agregarea globulelor roșii din cauza anumitor virusuri sau boli bacteriene se poate manifesta datorită interacțiunii directe a unui virus sau bacterii cu moleculele structurale de suprafață ale eritrocitelor sau datorită unei reacții cu titrul de ser imunizat al eritrocitelor sensibilizate specific cu antigenul dorit (in vitro). Aglutinarea celulelor sanguine are loc după adsorbția virusului pe suprafața globulelor roșii. În majoritatea virusurilor, hemaglutinina este componentă structurală virion.

Markeri specifici - antigeni de natură glicoproteică (aglutinogeni A și B)

Tehnici de laborator bazate pe reactii de aglutinare

Reacţiile de aglutinare au valoare de diagnostic. Acestea sunt tehnici serologice pentru detectarea și studierea anticorpilor sau antigenilor prezenți în titrul seric al pacienților pe baza reacții imunologice, identificarea markerilor antigenici ai bacteriilor și virusurilor, determinarea structurii antigenice a unui agent patogen microbian.

Reacțiile de hemaglutinare indirectă sau pasivă (IPHA sau RIHA) stau la baza metodelor de identificare a anumitor antigeni sau anticorpi din sângele pacientului. Această metodă este utilizată pentru a identifica agentul patogen boală infecțioasă, determinarea calitativă și cantitativă a hormonului gonadotrop în cazul suspiciunii de sarcină. Echipamentul folosit include lame de sticlă, eprubete sterile și plăci de plastic cu celule de godeu.

Reactivul principal este așa-numitul diagnosticul eritrocitar(ED), care poate fi fabricat după două principii:

• ED antigenic (utilizat mai des);
• anticorp ED.

În funcție de tipul de diagnostic, antigenul sau anticorpul identificat este adsorbit pe suprafața celulei eritrocitare, care, după reacția ulterioară cu anticorpii sau antigenii corespunzători ai serului sanguin al pacientului, provoacă aderența. elemente de formăși formarea unui sediment asemănător unei scoici care acoperă uniform fundul tubului sau al celulei. Dacă proba se dovedește a fi negativă, sedimentul din partea de jos a eprubetei va fi de alt tip.

Pentru RPHA, un kit de diagnostic este realizat din celule sanguine umane sau animale (iepure, oaie, șobolan, cal), care sunt tratate cu formaldehidă sau alți reactivi pentru conservare. Pentru a le crește capacitatea de adsorbție, celulele roșii din sânge sunt sensibilizate medicamente speciale(tanin, clorură de crom, rivanol).

Procesul invers este reacția de inhibare a hemaglutinării

Unele virusuri (gripa, rubeola, rujeola, adenovirusurile, ciuma bovine) poate provoca aglutinarea elementelor formate. Tehnicile de diagnosticare pentru astfel de tipuri se bazează pe reacții care opresc acest proces. boli virale. Anticorpii antivirali din serul pre-imunizat contracarează virușii, făcându-i să-și piardă capacitatea de a determina aglomerarea celulelor roșii din sânge.

Testul antiglobulinei - testul Coombs

Testul Coombs se efectuează pentru a identifica anticorpii incompleti care sunt localizați în structura membranei eritrocitare și provoacă aglutinare atunci când se adaugă un ser special antiglobulinic. Există reacții Coombs directe și indirecte. Se efectuează un test direct de antiglobulină dacă există suspiciunea prezenței unor astfel de anticorpi incompleti pe suprafața globulelor roșii.

Probă indirectă Coombs se efectuează cu sensibilizarea prealabilă a eritrocitei cu un anticorp adecvat și introducerea ulterioară a unei componente antiglobuline. Efectuat în timpul diagnosticului boala hemolitica curs autoimun sau la nou-născuți, pentru a stabili un conflict Rh între mamă (Rh-negativ) și copil (Rh-pozitiv).

Reacția indirectă Coombs este utilizată pe scară largă de către transfuziologi, deoarece face posibil precizie ridicată determina compatibilitatea material donator cu sângele primitorului pe bază de antigene eritrocitare.

Mai mult:

Prescrierea imunoglobulinei pentru conflictul Rhesus, indicatii si contraindicatii

Există două forme ale acestei boli: boala aglutinină rece și hemoglobinuria rece paroxistică. În ambele cazuri, hemoliza imună intravasculară poate fi fie primară, fie secundară. În acest din urmă caz, se dezvoltă pe fondul infecțiilor virale (de exemplu, mononucleoză infecțioasă), malarie, pneumonie cu micoplasmă, hemoblastoză sau colagenoză. Anemia hemolitică autoimună, cauzată de hemoliza intravasculară primară, apare de obicei cronic.

3. Boala aglutinină rece, cauzată de hemoliză intravasculară secundară,apare în multe boli: infecții (pneumonie cu micoplasmă, Mononucleoza infectioasa, rujeola, parotită si altii infecții virale, tripanosomiază și malarie), colagenoză (rar), hemoblastoză (limfom non-Hodgkin, macroglobulinemie Waldenström, leucemie limfocitară cronică), sarcom Kaposi. Trebuie subliniat faptul că în aceste boli aglutininele reci sunt detectate mult mai des decât se observă hemoliza. In toate cazuri enumerateÎn primul rând, boala de bază este tratată. În caz contrar, tratamentul este același ca și pentru boala rece aglutinină cauzată de hemoliza intravasculară primară.

4. Paroxistică hemoglobinurie rece - o formă rară de anemie hemolitică autoimună. Hemoliza în această boală are loc ca urmare a unei reacții în două faze care implică IgG, care se numește anticorpi Donath-Landsteiner. În prima fază, IgG se leagă de celulele roșii din sânge la temperaturi scăzute și fixează complementul. În a doua fază, la o temperatură de 37°C, are loc activarea complementului, ducând la hemoliză. Anticorpii Donath-Landsteiner sunt specifici pentru antigenul P al eritrocitelor.

A. Tabloul clinic.Hemoglobinuria paroxistică rece apare adesea la pacienții cu sifilis, în special congenital, și poate complica infecțiile virale (rujeolă, oreion, varicelă, mononucleoza infectioasa, gripa), uneori este primara. Hemoliza intravasculară se dezvoltă atunci când pacientul se încălzește după hipotermie. Prognosticul este favorabil. Pacienții se recuperează de obicei singuri. Ocazional, boala durează mult timp cu crize hemolitice periodice.

b. Cercetare de laborator. Diagnosticul de laborator Hemoglobinuria paroxistică la rece se bazează pe detectarea anticorpilor Donath-Landsteiner. Pentru a face acest lucru, 1) serul pacientului este amestecat cu globule roșii normale din grupa 0; 2) se incubează 30 de minute la 4°C (pentru a fixa anticorpii și complementul pe eritrocite); 3) se incubează timp de 30 de minute la 37°C (pentru a activa complementul). Ca martor negativ, utilizați: 1) o probă cu ser de pacient inactivat la căldură (pentru a îndepărta complementul); 2) o probă cu serul pacientului incubat cu globule roșii din grupa 0 în ordine inversă (mai întâi la 37°C, apoi la 4°C).

V. Tratament. Pacienții trebuie să evite hipotermia.Corticosteroizii și splenectomia sunt ineficiente. Dacă este necesară transfuzia de globule roșii, aceasta este încălzită. Asigurați-vă că tratați boala de bază.

Un test de aglutinină la rece este un test de sânge care măsoară nivelul acestor anticorpi din organism. Aglutininele reci sunt produse de corpul nostru ca răspuns la infecție. Ele fac ca celulele roșii din sânge să se aglomereze la temperaturi scăzute. La oamenii sănătoși, de regulă, nivel scăzut anticorpi la rece în sânge. Dar limfomul și unele infecții (SARS) cresc nivelul de aglutinine la rece.

Puțin nivel crescut aglutininele reci de obicei nu provoacă probleme serioase. Uneori, aglutininele reci colectează celule roșii din sânge în grupuri, care se blochează în vasele situate aproape de pielea răcită. Acest lucru poate face ca pielea să devină palidă și amorțită. În cazuri avansate (cu hipotermie extrem de prelungită), aceasta poate duce la cangrenă.

De ce se măsoară aglutininele reci?

Testarea aglutininei la rece se face pentru:

• Aflați dacă sunt anticorpi la rece cauza anemiei hemolitice autoimune;
• Diagnosticați pneumonia atipică.

Clinica noastră are experți în materie asupra acestei probleme.

(4 specialisti)

2. Cum se pregătește și cum se efectuează analiza?

Cum să vă pregătiți pentru un test de aglutinină la rece?

Nu este necesară nicio pregătire înainte de testarea anticorpilor la rece.

Cum se efectuează analiza aglutininei la rece?

Nivelul de anticorpi la rece este măsurat după extragerea sângelui dintr-o venă. Prelevarea de sânge se efectuează conform unei proceduri standard.

3. Care sunt riscurile și ce poate afecta analiza?

Care sunt riscurile testării aglutininei la rece?

Riscurile posibile ale unui test de sânge pentru anticorpi la rece pot fi asociate doar cu recoltarea de sânge în sine. În special, apariția vânătăilor la locul puncției și inflamația venei (flebită). Comprese calde de mai multe ori pe zi te vor scuti de flebită. Dacă luați medicamente pentru subțierea sângelui, puteți sângera la locul puncției.

Ce poate interfera cu testarea aglutininei la rece?

Rezultatul testului de aglutinină la rece va fi inexact dacă luați antibiotice, în special penicilină și cefalosporină.

Ce merită să știi?

Mai mult de jumătate dintre oameni suferă de pneumonie atipică, au niveluri ridicate de anticorpi la rece. Cu toate acestea, alte teste mai fiabile sunt adesea folosite pentru a diagnostica pneumonia atipică.

Dacă se găsesc celule roșii din sânge legate în timpul analiza generala sânge, medicul poate solicita un test de aglutinină la rece.

Grupa de sânge este mai dificil de determinat dacă nivelurile de aglutinină sunt mari.

Dacă o persoană are continut ridicat aglutinine reci și nu a fost expus la temperaturi scăzute, atunci trebuie să se încălzească. Nivel inalt aglutininele reci pot duce la anemie, degeraturi sau boala Raynaud.