Újszülöttek enteropathiái, tünetei, kezelése. Csökkent sejtes immunitás által okozott immunhiányok
Absztrakt
Ezt a betegséget az elsődleges immunhiány kialakulása jellemzi, amely autoimmun multiszisztémás elégtelenségként fejeződik ki, és klinikailag gyakran az első életévben nyilvánul meg; mára csak mintegy 150 esetet írnak le a világon. Az IPEX-szindrómát a FOXP3 génhiba okozza, amely egy transzkripciós faktor, amely befolyásolja a felelős szabályozó T-sejtek aktivitását. a az aitotolerancia fenntartása. Ebben a génben eddig mintegy 70 patogén mutációt írtak le. A legtöbb IPEX-szindrómás betegnél a betegség klinikai megnyilvánulása a korai újszülöttkori időszakban vagy élete első 3-4 hónapjában jelentkezik. Erre a betegségre a következő klinikai megnyilvánulási triád jellemző: Autoimmun enteropátia (100%), diabetes mellitus (70%), bőrelváltozások (65%), mivel a szindróma szerkezetében súlyos fejlődési késés (50%), pajzsmirigybetegség ( 30%), visszatérő fertőzések (20%), ritka autoimmun cytopenia (Coombs-pozitív hemolitikus anémia), tüdőgyulladás, nephritis, hepatitis, ízületi gyulladás, myositis, alopecia. Leírtak azonban néhány későbbi megnyilvánulást (1 évesnél idősebb betegeknél), amikor a betegek nem mutatták a betegség súlyos formáira jellemző összes klinikai és laboratóriumi tünetet. A betegség súlyossága és e betegcsoport magas mortalitása miatt nagyon fontos a korai diagnózis és a kezelés időben történő megkezdése. A cikk leírja a tartós újszülöttkori diabetes mellitus klinikai esetét az IPEX szindróma szerkezetében.
IPEX szindróma (immunhiány, poliendokrinopátia, enteropátia, X-hez kötött szindróma). Szinonimák: XLAAD (X-hez kapcsolódó autoimmunitás-allergiás diszregulációs szindróma) - ritka betegség; A világon körülbelül 150 esetet írtak le. Egyes külföldi források szerint az IPEX-szindróma prevalenciája a tartós újszülöttkori diabetes mellitusban szenvedő betegek körében körülbelül 4%. Ezt a szindrómát az elsődleges immunhiány előfordulása jellemzi, amely autoimmun többszörös szervi károsodásként nyilvánul meg, és klinikailag leggyakrabban az első életévben jelentkezik. 1982-ben Powel et al. először írt le egy családot, amelyben 19 férfi X-hez kötött betegségben szenvedett, amely hasmenéssel és poliendokrinopátiával nyilvánult meg, beleértve az inzulinfüggő cukorbetegséget. Később, 2000-ben Catila et al. mutációt azonosított a C-terminális DNS-kötő domént (FKN) kódoló génben kettőben különféle betegek hasonlóval rendelkező férfi klinikai kép. 2000-2001-ben Bennett és mtsai. és Wildin et al. egymástól függetlenül megerősítette, hogy az IPEX-szindróma a FOXP3 gén mutációin alapul. Jelenleg ennek a génnek körülbelül 70 patogén mutációját írták le. A FOXP3 gén egy transzkripciós faktor, amely befolyásolja az öntolerancia fenntartásáért felelős szabályozó T-sejtek aktivitását. Barzaghi et al. által közzétett adatok szerint. 2012-ben az IPEX-szindróma autoimmun szervkárosodásának fő mechanizmusa a szabályozó T-sejtek működési zavara. Így az IPEX-szindrómát súlyos immunhiány kialakulása jellemzi, amely szeptikus szövődményekhez és gyakran halálhoz vezethet. Jelenleg körülbelül 300 olyan gén ismeretes, amelyek a fejlődéshez vezetnek elsődleges immunhiányok(PID). Korábban azt hitték, hogy ezek a betegségek nagyon ritkák, de a legújabb tanulmányok jelentős előfordulásukat jelzik. Rendkívül fontos, hogy a gyermekorvosok figyeljenek a PID lehetséges jelenlétére, különösen a gyermekek autoimmun betegségeivel kombinált súlyos fertőzések esetén. A legtöbb IPEX-szindrómás betegnél a betegség klinikai megnyilvánulásai a korai újszülöttkori időszakban vagy az élet első 3-4 hónapjában kezdődnek. A megnyilvánulások klinikai hármasa jellemző erre a patológiára: autoimmun enteropathia (100%), diabetes mellitus (70%), bőrelváltozások (65%), a szindróma szerkezete magában foglalja a súlyos fejlődési késést (50%), az agyszövet károsodását is. ritkábban fordul elő pajzsmirigy (30%), visszatérő fertőzések (20%), autoimmun citopénia (Coombs-pozitív hemolitikus anémia), tüdőgyulladás, nephritis, hepatitis, ízületi gyulladás, myositis, alopecia. Mindazonáltal egy év feletti megnyilvánulási eseteket írtak le, amikor a betegek nem rendelkeznek a betegség súlyos formáira jellemző klinikai és laboratóriumi megnyilvánulásokkal. Az IPEX-szindróma egyik fő összetevője a poliendokrinopátia, amely az autoimmun diabetes mellitus kialakulásában nyilvánul meg, autoimmun pajzsmirigygyulladás. Az endokrinopátiák immunológiai markerei közé tartoznak az inzulin elleni antitestek (IAA), a hasnyálmirigy-szigetsejtek (ICA), a glutamát-dehidrogenáz (GAD), a tirozin-foszfatáz (IA-2), a cink transzporter elleni antitestek (ZNT8), a pajzsmirigy-peroxidáz és a tiroglobulin elleni antitestek. Más autoantitestek is kimutathatók - neutrofilek, eritrociták és vérlemezkék, antinukleáris, antimitokondriális, keratin, kollagén elleni antitestek stb. Ezen kívül azért ennek a betegségnek autoimmun enteropathia kialakulása jellemzi, klinikailag bőséges vizes hasmenésben nyilvánul meg felszívódási zavar szindróma kialakulásával, melynek immunológiai markerei az enterociták (villin VAA és harmonin HAA) elleni antitestek. A megnövekedett IgE-szint és az eozinofilek számának növekedése a betegség klasszikus súlyos formájában szenvedő betegekre jellemző. A betegség súlyossága és a betegcsoport magas mortalitása miatt rendkívül fontos korai diagnózisés a terápia időben történő megkezdése. A mai napig a leghatékonyabb kezelési módszer a transzplantáció. csontvelő vagy allogén hematopoietikus őssejt-transzplantáció. Az immunhiány korrekciója érdekében immunszuppresszív monoterápia (ciklosporin A, takrolimusz) vagy kombinált terápia - immunszuppresszív gyógyszerek szteroidokkal kombinációja - alkalmazható. A szirolimusz (rapamycin) hatásosnak bizonyult, számos betegnél a betegség tartós remissziója tapasztalható. Az immunszuppresszív terápia mellett helyettesítő terápia endokrin rendellenességek, megfelelő táplálkozási támogatás, tüneti terápia. Klinikai eset K. 2016. április 19-én született, 2840 g testtömegű, 51 cm testhosszúságú beteg, a szülés sürgősségi császármetszéssel történt a növekvő méhen belüli magzati hipoxia miatt. Apgar 7/7 pont. Az anamnézisből ismert, hogy ez a negyedik terhesség, krónikus nemi fertőzés, placenta elégtelenség hátterében, krónikus gyomorhurut, kis súlygyarapodás, isthmic-cervicalis elégtelenség, megszakítás veszélye a 30. héten. A korábbi terhességek spontán vetéléssel végződtek korai szakaszaiban. A vetélés okai ismeretlenek, a nőt nem vizsgálták meg. A gyermek állapota születésétől fogva súlyos volt a légzési rendellenességek és a központi idegrendszeri (CNS) depresszió jelei miatt. Gépi szellőztetés történt; a spontán légzés helyreállítása után extubálják. Az élet első napjától kezdve a vércukorszint 10,4 mmol/l-re emelkedett, a dinamika pedig 29,0 mmol/l-re emelkedett, a CBS adatai szerint metabolikus acidózis jeleit észlelték. A vércukorszint emelkedését glucosuria (cukorszint a vizeletben 2000 mg/dl-ig) és ketonuria kísérte. A biokémiai vérvizsgálat hiperenzimémia jeleit mutatta (ALT 87,8 U/L, AST 150 U/L). A 2. életnapon a perzisztáló hiperglikémia (maximum vércukorszint 33,6 mmol/l) miatt az egyszerű inzulin intravénás adagolását 0,03-0,1 E/ttkg/h sebességgel kezdtük, a vércukorszinttől függően. Az adaptált keverékekkel ellátott enterális táplálást részlegesen kaptuk egy szondán keresztül. Az inzulinterápia során a vércukorszint napi monitorozása során a glikémia napközbeni szignifikáns variabilitását 1,7 és 22,0 mmol/l között regisztrálták. Az élet 8. napján állapotromlást észleltek (központi idegrendszeri depresszió jelei, fokozódó légzési elégtelenség, a szénhidrát-anyagcsere dekompenzációjával járó anyagcserezavarok, tartós, 37,9 °C-ig terjedő alacsony láz, puffadás, ismételt hányás , hasmenés, trofikus bőrbetegségek kiszáradás és nagylemezes hámlás formájában). Ezeket a tüneteket a necrotizáló enterocolitis (NEC 2a) megnyilvánulásaként tekintették. További kivizsgálás és kezelés céljából a beteget a Petrozsényi Gyermekkórház Állami Költségvetési Egészségügyi Intézményének Orosz Kutatóközpontjába szállították. A Gyermekkórház Állami Költségvetési Egészségügyi Intézményének Orosz Kutatóközpontjában végzett vizsgálat során egy sor klinikai vérvizsgálat során a hemoglobinszint 150-ről 110 g/l-re, a leukocitózis 8,9-ről 22,4 ezerre csökkenést mutatott ki. leukocita képlet az eozinofilek számának 5-ről 31-re való növekedése miatt, a monociták és a vérlemezkék száma miatt. A biokémiai vérvizsgálat eredményei szerint a hypoproteinémiát 36,4 g/l-ig (N 49-69), a hyponatraemiára való hajlamot 135 mmol/l-ig (N 135-155) regisztrálták. normál mutatók kálium 4,7 mmol/l (N 4,5-6,5), hiperenzimémia AlAT-87 U/l (N0-40) és AST 150 U/l (N0-40), a CRP titer 24,7 mg/m-re emelkedett. A vértenyészetben nincs mikroflóra növekedés, a vizelettenyészetben enterococcust találtak. A tartós hiperglikémia miatt meghatároztuk a C-peptid szintjét, amelyről kiderült, hogy csökkent (0,1 nmol/l; N0,1-1,22 nmol/l). Nál nél ultrahang vizsgálat A bélfalak pneumatózisát és a hasnyálmirigy méretének növekedését észlelték (fej - 9,0 mm, test - 9,0 mm, farok - 10,0 mm), és az idő múlásával a méretek növekedését figyelték meg. Parenterális táplálást, elektrolitzavarok megszüntetését célzó infúziós terápiát, antibakteriális kezelést, intravénás inzulint kapott. A kezelés során az elektrolit zavarok megszűntek, de a glükózszint stabilizálását nem sikerült elérni, és a súlyos dyspeptikus zavarok is fennmaradtak. Amikor megpróbálták helyreállítani az enterális táplálkozást, hasi puffadás, hányás és hasmenés jelentkezett. A fiút a 19. életnapon rendkívül súlyos állapotban szállították az intenzív osztályra. perinatális központ A Szentpétervári Állami Gyermekgyógyászati Egyetem klinikái. Felvételkor a gyermeknek lomha, érzelemmentes, spontán sírása van a fizikai aktivitásés az izomtónus csökkent, az újszülöttkori reflexek gyengék. Láz (testhőmérséklet 38,1 °C). Nagy, 1,0 × 1,0 cm-es, süllyedő szökőkút. A bőr sápadt, száraz, a turgor csökkent, nagy-lamelláris hámlás. Az auskultáció során a légzés kemény volt, és a tüdő minden részében egyenletesen zajlott; légzésszám 46 percenként. A szívhangok ritmikusak, enyhén tompítottak; pulzusszám - 156 percenként. A has felfúvódása és a máj mérsékelt megnagyobbodása. A diurézis sebessége 7-8 ml/kg/h (a folyamatban lévő infúziós terápia hátterében). Napi 7-9 alkalommal vizes széklet. A súlygyarapodás dinamikája negatív volt (születési súly - 2840 g, a Szentpétervári Állami Gyermekorvosi Egyetem klinikájára való felvételkor - 2668 g). Az intenzív osztályon az infúziós kezelést folytatták, melynek célja az elektrolitzavarok megszüntetése volt. A hyponatraemiát nehéz volt korrigálni kompenzációs mechanizmus a vér ozmolaritásának egyensúlya hiperglikémiára válaszul, amelyet 7-8 ml/kg/h-ig terjedő polyuria és nátriumveszteség kísér a vizeletben, valamint súlyos enteropathia (napi 6-10-szeres széklet, bőséges, folyékony 350-ig) ml/nap). Az inzulint intravénásan 0,01-0,04 U/kg/óra sebességgel adták be a vércukorszinttől függően. A részleges enterális táplálás pasztőrözött hidrolizált keverékkel történt, a szondás táplálásról a független frakcionált táplálásra fokozatos átállással, az állapot stabilizálódásának hátterében. Életének 28. napján átkerült az újszülöttek és csecsemők patológiai osztályára, ahol folytatták a kivizsgálást és a kezelést. A vizsgálat során a hemogramon vérszegénységet észleltek (hemoglobin - 93 g/l, eritrociták - 2,91 ∙ 1012/l); leukocytosis (28,7 ∙ 109/l-ig), súlyos eosinophilia (legfeljebb 61%); a biokémiai vérvizsgálatban hypoproteinémia volt (összes fehérje - 38,4 g/l). A vér hormonszintjének vizsgálata során újra azonosították alacsony szint C-peptid - 0,5 ng/ml (N 0,1-1,22 nmol/l); pajzsmirigyhormonok normálisak voltak (szabad T4 - 14,8 pmol/l (N 10,0-23,2); TSH - 6,28 µU/ml (N 0,23-10,0). Újszülöttkori diabetes diabetes, enteropathia, specifikus kombináció bőr megnyilvánulásaiés krónikus visszatérő fertőzés jelei (lázas láz, megvonáskor a leukocitózis növekedése antibakteriális terápia) lehetővé tette a páciensben az IPEX-szindróma gyanúját, amelynek szerkezete immunhiányos. A poliendokrinopátia természetének tisztázása érdekében egy vizsgálatot végeztek immunológiai markerek felkutatására. Ennek eredményeként a pajzsmirigy-peroxidáz elleni antitestek magas titere (243,9 NE/ml; N 0-30) és a Langerhans-szigetek elleni antitestek pozitív titerében (GAD elleni antitestek 1,29 U/ml; N 0-1,0), az inzulin elleni antitestek titere 5,5 U/ml volt (N 0,0-10,0). A szteroidtermelő mellékvesesejtek elleni antitesteket nem észleltek. Így a diabetes mellitus autoimmun természete bizonyítást nyert, és autoimmun pajzsmirigygyulladást diagnosztizáltak. Figyelembe véve az immunhiány klinikai és laboratóriumi jeleinek jelenlétét, mélyreható immunológiai vizsgálatot végeztek, és magas IgE szintet mutattak ki (573,6 IU/ml, a norma 0-15). Molekuláris genetikai vizsgálatot (multigén célzott szekvenálást) végeztek, amely a FOXP3 gén mutációját tárta fel, megerősítve az IPEX-szindróma jelenlétét a gyermekben. Két hónapos korban négy napos, a szepszis magas kockázata és a fenyegetettség miatt végzetes kimenetel a fiút áthelyezték a Szövetségi Állami Költségvetési Intézményhez, az „FNKTs DGOI-hoz. Dmitrij Rogacsov" az Oroszországi Egészségügyi Minisztérium munkatársa az immunszuppresszív terápia és a csontvelő-transzplantáció miatt. A bemutatott klinikai esetben a FOXP3 gén c.1190G > T (p.Arg397Leu) korábban nem leírt mutációját azonosították egy újszülöttkori diabetes mellitusban, primer immunhiányban és súlyos enteropathiában szenvedő gyermekben. A páciens anyjának DNS-elemzése heterozigóta állapotban is ugyanezt a károsodást tárta fel. A detektált változat a DNS-kötő C-terminális forkhead doménben lokalizálódik, és a fő prediktív programok (Polyphen2, SIFT, Mutation Taster) patogénnek tartják. Jelentős közvetett érv az azonosított variáns patogenitása mellett, hogy a mutációk c. 1189 C > T és s. Az 1190G>A-t, amely ugyanazt a 397-es kodont érinti, korábban IPEX-szindrómás betegeknél találták meg. Ismeretes, hogy az IPEX-szindrómában szenvedő betegek anyjait a spontán vetélés többszörös epizódja jellemzi, amikor férfi magzatokat hordoznak. A leírt esetben a páciens anyjának (a mutáció hordozójának) anamnézisét is súlyosbította a terhesség korai elvesztése. Ez tovább erősíti, hogy az általunk felfedezett új mutáció komoly hatással van a FOXP3 működésére, növelve az embrionális letalitást. Az újszülöttkori diabetes mellitus genetikai ellenőrzése rendkívül hasznos, mivel lehetővé teszi a betegség természetének tisztázását és az optimális kezelési taktika kiválasztását. Ez különösen igaz a szindrómás formákban szenvedő betegekre, amelyek általában súlyos lefolyású. A beteg gyermeknél a mutáció kimutatása nagyon fontos a család orvosi genetikai tanácsadása szempontjából, mivel ez lehetővé teszi a prenatális DNS diagnosztikát a későbbi terhességek esetén. A klinikai eset azt jelzi, hogy a különböző szakterületű orvosok (neonatológusok, endokrinológusok, gasztroenterológusok, immunológusok, genetikusok) együttműködése hozzájárul a ritka betegségekben szenvedő betegek helyes diagnózisának hatékonyabb felállításához.
Maria E Turkunova
Szentpétervári Állami Gyermekgyógyászati Egyetem, az Orosz Föderáció Egészségügyi MinisztériumaA Harmonin és Villin elleni autoantitestek diagnosztikai markerek az IPEX-szindrómás gyermekeknél
Forrás: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3826762/
Kigondolt és tervezett kísérletek: V.L. Bosi R.B. A kísérleteket végezte: CL E. Bazzigaluppi CB. Elemzett adatok: VL LP FB RB E. Bosi. Felhasznált reagensek/anyagok/elemző eszközök: LP FB. A cikket írta: Bosi E.. Közreműködött a kézirat megírásában/szerkesztésében: VL LP FB RB.
A kötőhártya enterocita antigénjei (75 kDa USH1C fehérje) és boholya (95 kDa aktinkötő fehérje) elleni autoantitestek az immunrendszeri diszreguláció, poliendokrinopátia, enteropathia, X-kapcsolt (IPEX) szindrómához kapcsolódnak. Ebben a vizsgálatban felmértük a harmonikus és boholyos autoantitestek diagnosztikai értékét IPEX és IPEX-szerű szindrómák esetén. A Harmonin és a villin autoantitesteket egy új kvantitatív lumineszcencia immunprecipitációs rendszer (LIPS) vizsgálattal mérték IPEX-ben, IPEX-szerű szindrómában, elsődleges immunhiányban (PID) szenvedő enteropátiában szenvedő betegeknél, akik mindegyikét FOXP3 génszekvenálással diagnosztizálták, és 1-es típusú cukorbetegségben (T1D). cöliákia és egészséges véradók, mint kontrollcsoport. Harmonin és villin autoantitesteket 13 IPEX-es beteg közül 12-ben (92%) és 6-ban (46%) mutattak ki, az IPEX-ben, PID-ben, T1D-ben és cöliákiás betegekben pedig egyikben sem. Minden IPEX-beteg, köztük egy késői és atipikus klinikai megjelenésű eset, vagy harmonikus és/vagy boholyszerű autoantitesteket mutatott, vagy indirekt immunfluoreszcenciával pozitívnak bizonyult az enterocita elleni antitestekre. Immunszuppresszív terápia vagy hematopoetikus őssejt-transzplantáció után remisszióban lévő IPEX-es betegeknél mérve a harmonikus és boholyos autoantitestek minden esetben kimutathatatlanokká váltak, vagy alacsony titeren perzisztáltak, de abban az esetben, amikor a harmonikus autoantitestek tartósan magasak maradtak. Egy betegben a harmonikus antitestek csúcsa párhuzamos volt az enteropathia visszaesési fázisával. Vizsgálatunk bizonyítja, hogy a LIPS-sel mért harmonikus és boholyos autoantitestek az IPEX érzékeny és specifikus markerei, megkülönböztetik az IPEX-et, beleértve az atipikus eseteket is, más koragyermekkori enteropátiával összefüggő rendellenességektől, és hasznosak az érintett gyermekek szűrésében és klinikai monitorozásában.
Immunszabályozási zavar, poliendokrinopátia, enteropathia, X-kapcsolt szindróma (IPEX) egy monogén eredetű autoimmun betegség, amelyet súlyos enteropathia, 1-es típusú cukorbetegség (T1D) és ekcéma jellemez. A szindrómát a FOXP3 gén mutációi okozzák, amelyek felelősek a súlyos jogsértés szabályozó T (Treg) sejtek. Míg a genetikai elemzés a választott módszer a végleges diagnózishoz, nincs egyértelmű genotípus-fenotípus korreláció, és a betegség lefolyása betegenként változó. Ezen túlmenően, annak ellenére, hogy az IPEX-et immunhiányos rendellenességnek minősítették, nincsenek egyértelmű immunológiai paraméterek, amelyek előre jeleznék a betegség súlyosságát vagy a terápiára adott választ. Ezenkívül hasonló klinikai fenotípusú rendellenességek, az úgynevezett IPEX-szerű szindrómák FOXP3 mutációk hiányában is fennállhatnak, ami kihívást jelent klinikai kezelésés a terápiás szerek kiválasztása - . Ezért az IPEX immundiszfunkcióhoz specifikusan kapcsolódó markerek azonosítása rendkívül hasznos lenne diagnosztikai célokra. Az indirekt immunfluoreszcenciával kimutatott keringő enterocita autoantitesteket a múltban különböző enteropathiákkal összefüggésben írtak le, beleértve azokat is, amelyeket végül IFEX-szindrómaként azonosítottak, de molekuláris célpontok Ezek a szerológiai markerek régóta ismeretlenek. Az IPEX-beteg széruma által felismert, különálló enterocita autoantigént ezután a 75 kDa-os AIE-75 fehérjeként azonosították, és Usher Syncrome proteinként (USH1C) jellemezték, más néven harmonikusként, amely fehérje a jelentések szerint a szupramolekuláris fehérjehálózatok része. transzmembrán fehérjék összekötése a fotoreceptor sejtekben és a szőrsejtekben található citoszkeletonnal belső fül. IPEX-ben szenvedő betegeknél és a vastagbélrákos betegek kis hányadánál számoltak be immunblottal és radioliganddal kimutatott harmonin autoantitestekről (HAA). A közelmúltban egy aktin 95 kDa-nak nevezett aktinkötő fehérjét írnak le, amely részt vesz az aktin citoszkeleton szerveződésében az epiteliális sejtek kefe határán, mint az autoantitestek további célpontját az IPEX-ben szenvedő betegek egy részében. Ezzel szemben tudomásunk szerint nem számoltak be sem a HAA-król, sem a bolyhos autoantitestekről (VAA) az IPEX-szerű szindrómákról, az enteropátiával járó primer immundeficienciákról (PID), vagy az IPEX-hez gyakran társuló rendellenességekről, mint például a T1D és az autoimmun enteropathiák. különböző típusú.eredetű.
A tanulmány célja kvantitatív vizsgálatok kidolgozása volt a HAA és VAA mérésére az újonnan kifejlesztett Luminescent Immuno Precipitation System (LIPS) alapján, meghatározza azok diagnosztikai pontosságát IPEX, IPEX-szerű és PID szindrómák esetén, és értékelje azokat a vizsgált enterocita antitestek alapján. immunfluoreszcenciát, és értékelje értéküket az IPEX-betegek klinikai követésében.
Tizenhárom IPEX-ben szenvedő és 14 IPEX-szerű szindrómában szenvedő beteget teszteltek a LIPS-en HAA-k és VAA-k jelenlétére. Kontrollként 5 különböző eredetű PID-ben szenvedő (kettő CD25-hiányos, kettő Wiskott Aldrich-szindrómás (WAS)) és egy adenozin-deamináz-hiány-súlyos kombinált immunhiányos rendellenességben (ADA-SCID) szenvedő beteget vizsgáltunk. Mindegyik állapotot korai megjelenés jellemezte. enteropathia] , 123 T1D-vel, 70 cöliákiával és 123 egészséges véradóval. Az IPEX diagnózisa klinikai és molekuláris leleteken alapult az Olasz Gyermekhematológiai és Onkológiai Szövetség (AIEOP, www.AIEOP.org) kritériumai szerint. Az IPEX és IPEX betegek mutációit és klinikai adatait az S1 és S2 táblázat foglalja össze. A Pt19, Pt21, Pt22 és Pt24 kivételével minden IPEX-beteget leírtak korábbi publikációkban. A PT24 a betegség atipikus formája, amelyet késői kezdés jellemez, enteropathia jelei nélkül, de súlyos gyomorhurut gyulladásos nyálkahártya-infiltrátumok jelenlétében, amelyek boholyatrophiával járnak. Általános szint A vizsgált 13 IPEX-beteg közül 10-ben volt elérhető az IgG: közülük 8 volt normál tartományéletkor szerint (csak egy beteg intravénás (IV) Ig terápiában részesült), míg két esetben kismértékben emelkedtek. Az IPEX-szerű szindrómával diagnosztizált betegeknél az IPEX klinikai megnyilvánulásai voltak, de a FOXP3 gén mutációira negatív a teszt. Az olyan betegek, mint az IPEX, legalább egy főt mutattak be klinikai szolgáltatások IPEX (autoimmun enteropathia és/vagy T1D), amely a következő autoimmun vagy immunmediált betegségek közül egy vagy többhez kapcsolódik: dermatitis, thyreoiditis, hemolitikus anémia, thrombocytopenia, nephropathia, hepatitis, alopecia, hyper IgE eosinophiliával vagy anélkül. A klinikai és laboratóriumi paraméterek kizárták az egyéb monogén betegségeket, például a WAS-t, az Omenn-szindrómát, a hiper-IgE-szindrómát és az autoimmun limfoproliferatív szindrómát. A diagnózis idején legalább egy IPEX- és IPEX-szerű szindrómában szenvedő betegek szérummintája állt rendelkezésre autoantitest-vizsgálathoz. Hat IPEX-betegnél több szérummintát is vettek a klinikai követés során, és további autoantitest mérésekhez használták fel a klinikai eredménnyel való összefüggés vizsgálatára (Pt12:8 minták születéstől 8 éves korig, Pt14:7 minták 6 hónapos kortól 13 éves korig, a Pt17-3 minták 4 hónapostól 3,5 évig, a Pt19:44 minták 4 hónapostól 2 évig, a Pt22:3 minták 0-tól 5 hónapig; a Pt 23:44 minták 4-től 10 évig. Minden PID-ben szenvedő beteget molekuláris tesztek alapján diagnosztizáltak. A T1D-ben szenvedő betegek mindegyike friss eset volt, a diagnózis az American Diabetes Association kritériumai alapján történt; cöliákiás betegeket vizsgáltak a diagnózis idején a jejunális biokémia alapján.
A helsinki nyilatkozat szerint a vizsgálatban részt vevő kiskorúak/gyermekek nevében minden páciens és hozzátartozója, gyámja vagy gyámja írásos beleegyezését adta. A tanulmányt a San Raffaele-i helyi kutatásetikai bizottság hagyta jóvá.
Az összes IPEX- vagy IPEX-szerű szindrómában szenvedő beteget bevitték FOXP3 mutációra. A genomi DNS-t perifériás vérből izoláltuk fenol-kloroform módszerrel vagy a QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen) segítségével, a gyártó utasításait követve. Tizenegy exont, beleértve az összes intron-exon határt, amplifikáltuk a genomiális DNS-ből PCR-rel specifikus intron primer szegélyező párokkal. Az amplifikált génfragmenseket BigDye Terminator cycling kit (Applied Biosystems) segítségével szekvenáltuk egy ABI PRISM 3130xl automata genetikai analizátoron és egy ABIPRISM 3730 genetikai analizátoron (Applied Biosystems).
A Renilla luciferázt kódoló szekvenciát a pTnT plazmidba klónoztuk (Promega, Milánó, Olaszország), hogy létrehozzuk a pTnT-Rluc vektort. A teljes hosszúságú harmonikus és bolyhos DNS-t kódoló szekvenciákat ezután RT-PCR-rel amplifikáltuk, és külön klónoztuk a pTnT-Rluc-ba a Renilla lumiferázzal downstream és keretben. A rekombináns kiméra Rluc-Harmonint és Rluc-Villint in vitro kapcsolt transzkripcióval és transzlációval fejeztük ki a pTnT-quick SPM nyúl retikulocita lizátummentes sejtrendszer (Promega) alkalmazásával. A HAA-k vagy VAA-k jelenlétének tesztelésére az Rluc-Harmonint és az Rluc-Villint használtuk antigénként a LIPS-ben (17) úgy, hogy 4 × 106 fényegység-ekvivalenst 1 μl minden beteg szérumával PBS-ben, pH 7,4-Tween 0,1% (17) inkubáltak. PBST) 2 órán át szobahőmérsékleten, az IgG immunkomplexeket protein A-Sepharose (GE Healthcare, Milánó, Olaszország) hozzáadásával izoláltuk, majd 1 órán át 4 °C-on inkubáltuk, és Costar 96-on szűrve PBST-vel mostuk a kötetlen Ag-t. - 3504-es lyukszűrőlemezek (Corning Life Sciences, Tewksbury, USA). Az immunprecipitált antigéneket ezután számszerűsítettük a visszanyert luciferáz aktivitás mérésével Renilla lumiferáz szubsztrát (Promega) hozzáadása után, és Centro XS3 luminométerben (Berthold Technologies GmbH & Co. KG, Bad Wildbad, Németország) 2 másodpercig mértük a fényemissziót. Az eredményeket tetszőleges egységekben fejeztük ki, amelyeket az antitest indexből (BAA) származtattunk pozitív és negatív szérum felhasználásával a következő képlet szerint (cps kontroll szérum-cps-negatív szérum) / (cps-pozitív szérum-cps-negatív szérum) x100, vagy standard görbe (HAA), amely a pozitív kiindulási szérum sorozathígításaiból áll. A pozitivitás határértékét az egészséges véradóknál megfigyelt értékek 99. percentilisében határozták meg, ahogy az az érzékenységet és specificitást elemző T1D-érzékeny autoantitest műhelyekben bevett gyakorlat.
Az enterocita autoantitesteket IPEX és IPEX-szerű betegcsoportokban indirekt immunfluoreszcenciával határoztuk meg normál humán vagy majom jejunum kriosztát metszetén a korábban leírtak szerint.
A T1D és a cöliákia autoantitestek markereit, köztük a glutaminsav-dekarboxiláz antitesteket (GADA), az inzulinóma-asszociált protein 2-t, az inzulint, a cink transzporter 8-at és a transzglutamináz-C-t minden IPEX-ben, IPEX-szerű, PID-ben, T1D-ben, cöliákiában, és egészséges kontrollok, donor kontroll csoportok immunprecipitációval LIPS vagy radiolencse alkalmazásával, a korábban leírtak szerint. Minden eredményt a pozitív törzsszérumok sorozathígításával kapott standard görbékből származó tetszőleges egységekben fejeztünk ki.
Ez a tanulmány csak leíró statisztikákat használt. A véradók véletlenszerű egységeinek 99. percentilisének kiszámítását a küszöb kiválasztásához a Stata (StataCorp LP, USA) segítségével végeztük. A pozitív (érzékenység) vagy negatív (specifitás) HAA-ra vagy VAA-ra vonatkozó teszt feltételes valószínűsége az IPEX-betegség és a kapcsolódó betegség jelenlététől vagy hiányától függően konfidencia intervallumok A 95%-ot a Vassar Stats statisztikai számítástechnikai weboldala (http://vassarstats.net/clin1.html) segítségével számították ki. A HAA és VAA titerek közötti korrelációt Spearman rangkorrelációs tesztjei alapján számítottuk ki Graphpad Prism 5 szoftverrel.
A 13 IPEX-ben szenvedő beteg közül 12-ben (92%) találtak emelkedett keringő HAA-koncentrációt, míg IPEX-ben, PID-ben, T1D-ben és cöliákiában szenvedő betegeknél negatívak voltak (1A. ábra). A keringő VAA-k emelkedett koncentrációját 6 (46%) IPEX-betegnél találták (Pt19, Pt14, Pt12, Pt17, Pt3, Pt21, az utolsó négy titere 98 VAA AU vagy annál nagyobb), beleértve a HAA-val nem rendelkező beteget is. Pt17), akkor hogyan voltak negatívak a VAA-k az IPEX-szerű és más betegség-kontroll csoportokban (1B. ábra). Minden IPEX-ben szenvedő beteg pozitív volt HAA-ra vagy VAA-ra, így a HAA és VAA kombinációja 100%-os tesztérzékenységet (95%-os CI: 71,6-100%) és 97,6%-os tesztspecifitást (95%-os CI: 92,5-99,4%) eredményezett. ) IPEX-szindróma diagnosztizálására. Az IPEX-ben szenvedő betegekben egyetlen klinikai vagy fenotípusos jellemző sem korrelált az autoantitestek jelenlétével. Nem volt szignifikáns korreláció az IPEX-es betegekben az AAA és VAA autoantitest titánok között (Spearman r = -0,3 p = ns). A GADA, mint a leggyakoribb T1D autoantitest, IPEX-ben (13-ból 9, T1D-vel 5), IPEX típusú szindrómában (14-ből 4, 2 T1D-vel) és PID-ben (5-ből 3, 1 T1D-vel) szenvedő betegeknél találták. 1C. ábra). Más T1D autoantitesteket kisebb arányban mutattak ki, köztük inzulin autoantitesteket 5 IPEX-ben, 4 IPEX-szerű és 2 PID-ben, valamint Zinc Transporter 8 autoantitestet egy IPEX betegben. Nem volt összefüggés a GADA és a HAA vagy VAA titerek között (Spearman r = -0,017 p = ns és r = 0,34 p = ns). Az IPEX-ben, IPEX-szerű szindrómában vagy PID-ben szenvedő betegek egyikének sem volt cöliákiával összefüggő szöveti transzglutamináz-C autoantitestje IgA vagy IgG (az adatokat nem mutatjuk be).
HAA (A panel), VAA (B panel) és GADA (C panel) szérum IgG titerek tetszőleges egységekben kifejezve IPEX (n = 13), IPEX-szerű (n = 14), PID (n = 5), T1D ( VAA és GADA n = 123, VAA n = 46), cöliákiás betegek (HAA n = 70, VAA n = 46, GADA n = 44) és kontrollok (HAA és VAA n = 123, GADA n = 67). A pontozott vonal jelzi a pozitivitás határát.
Az összes IPEX szérumot, kivéve egy (Pt 22), 10 IPEX-szerű és 3 PID szérumot, megvizsgáltunk enterocita antitestekre immunfluoreszcenciával bél kriosztát metszeteken. Minden vizsgált IPEX-beteg pozitív volt enterocita antitestekre. A HAA-pozitív szérumok erős reaktivitást mutattak a bél enterocitáival és a citoszollal szemben, a legnagyobb intenzitással az ecset határán (2A. ábra). Az izolált, magas titerű VAA erős festődést mutatott a határ törléséhez, de a citoszol nem (2B. ábra). Az IPEX-betegcsoporton kívül csak egy szérum egy olyan betegből származó PID fertőzésben, aki CD25 génmutációval és HAA- és VAA-negatív (Pt L1) mutatott pozitív festődést az enterocitákban, amelyek a kéz szélére korlátozódtak (2C. ábra).
Az IPEX Pt 19 HAA köti meg az ecsetszegélyt és az enterocita citoszolt (A panel), míg az IPEX Pt 17 VAA csak az ecsetszegélyt (B panel). A PID Pt L1-ből származó IgG megköti az enterocita kefe határát (C panel). A kötés hiánya az IPEX-szerű Pt L30-ban (D panel).
A HAA és VAA mérésekhez egymást követő minták álltak rendelkezésre 6 IPEX-beteg (Pt12, Pt14, Pt17, Pt19, Pt22 és Pt23) esetében: mindegyikük vérképző őssejt-transzplantáción (HSCT) esett át. terápiás terápia 4 esetben változó periódusú szisztémás immunszuppresszió előzte meg. E jelentés idején (2013. április) két transzplantált beteg kivételével mindegyik életben volt, enteropátiájuk klinikai remissziójában volt, és nem részesültek immunszuppresszív kezelésben (S1. táblázat). A transzplantáció után gyűjtött perifériás vér genetikai elemzése 4 esetben (Pt12, Pt14, Pt19 és Pt22) 100%-os donor kimérizmust, más betegeknél vegyes donor/recipiens kimérizmust mutatott. Az enteropathia kezdetekor három betegnél volt HAA és VAA (Pt12, Pt14 és Pt19), egynél csak VAA (Pt17), kettőnél pedig csak HAA (Pt22 és Pt23) (3. ábra). Öt esetben (Pt12, Pt14, Pt17, Pt22 és Pt23) az immunszuppresszió vagy a HSCT után bekövetkezett klinikai remisszió vagy jelentős javulás a HAA és/vagy VAA titerek csökkenésével járt, ami négy esetben észlelhetetlenné vált, vagy nagyon alacsony titereken is megmaradt. leghosszabb megfigyeléssel rendelkező esetek. Egy esetben (Pt19) a HSCT után a VAA kimutathatatlanná vált, míg a HAA magas titereken fennmaradt a klinikai remisszió ellenére (3D. ábra). Legalább egy esetben (Pt14) a HAA az enteropathia szenzitív markere volt: a HAA magas titereken volt kimutatható súlyos enteropathiával összefüggésben az IPEX diagnózis idején, majd az immunszuppresszív kezelést követően a klinikai és szövettani remisszió során csökkent. a klinikai relapszus alatt tetőzött, majd a sikeres HSCT és a klinikai remisszió után tartósan észlelhetetlenné vált (3B. ábra). Bár kevésbé elterjedt, a VAA a HAA-hoz hasonló mintát mutatott. A HSCT után megfigyelt autoantitest-csökkenést a kondicionálás következtében fellépő B-sejt- és IgG-hiány okozta. Valójában, a Pt22 kivételével, akinek rövid posztoperatív transzplantációja volt, a HSCT után csökkent HAA- vagy VAA-titerrel rendelkező betegek (Pt12, 17 és 23) már immunizáltak, és az IVIg-terápia független volt az első poszt-HSCT időpontjában. .
A függőleges tengely a HAA-t (gyémántokat) és a VAA-t (háromszögeket) jelöli, az autoantitest-titereket tetszőleges egységekben kifejezve, a vízszintes tengely mentén hónapokban. A függőleges pontozott vonal jelzi a HSCT dátumát, a vízszintes pontozott és szaggatott vonal a HAA és VAA pozitivitás határértékét jelzi.
Ebben a tanulmányban bemutatjuk, hogy az új LIPS-vizsgálatokkal könnyen mérhető és kombinált HAA és VAA nagyon érzékeny és specifikus markerei az IPEX-szindrómának, és megjósolhatják annak klinikai kimenetelét. Valójában minden IPEX-betegnél, akinek a diagnózist genetikai vizsgálattal igazolták, megemelkedett a HAA-k vagy VAA-k koncentrációja. Ezzel szemben a FOXP3 mutációval (pl. IPEX-szerű vagy PID) nem szenvedő enteropathiás betegek, T1D-betegek vagy cöliákiás betegek egyike sem volt pozitív sem HAA-ra, sem VAA-ra. A két marker közül a HAA volt a legmagasabb érzékenységgel, 13 IPEX-es beteg közül 12-ben, míg a VAA csak hatban volt kimutatható. Nevezetesen, a HAA és a VAA az IPEX-szindróma értékes markereinek bizonyultak olyan atipikus esetekben is, mint a Pt24, ahol az enteropathia nem volt a klinikai megjelenés része, hanem a súlyos gastritis volt a domináns, amelyben IPEX-re gyanakodtak, majd FOXP3 génszekvenálással igazolták. csak emelkedett HAA kimutatása után. A jövőben az új LIPS vizsgálat lehetővé teszi a HAA és VAA szisztematikusabb szűrését heterogén betegeknél. klinikai szindrómák, észlelési lehetőséggel több klinikailag atípusos IPEX szindrómák esetei.
A GADA volt a második leggyakoribb autoantitest-reakció az IPEX-betegeknél a HAA-k után. Bár a GADA-k a T1D autoantitestek leggyakoribb markerei, a széleskörű titer a klinikai megjelenés során, ezek nem mindig járnak cukorbetegséggel. Valójában más autoimmun betegségekben is megtalálhatók, beleértve a merev személy szindrómát és az autoimmun poliendokrinopátiát (APS). Érdekes módon az AFP-ben szenvedő betegeknél a GADA jobban korrelál a gyomor-bélrendszeri tünetek kialakulásával, nem pedig a cukorbetegséggel. Érdekes módon az IPEX-betegeinknél is a GADA-k nagyrészt gyakoriak voltak anélkül, hogy következetesen társultak volna a T1D-vel.
Amellett, hogy az IPEX-szindróma pontos markerei, a HAA és a VAA potenciális prognosztikai értékkel is bírhat, különösen a kapcsolódó enteropathia tekintetében. Hat, a fertőzés utáni mintákkal rendelkező betegnek magas volt a HAA és VAA titere a diagnózis idején vagy a gyomor-bélrendszeri tünetek megjelenésekor és a kezelés előtt. Ezt követően öt esetben immunszuppresszív kezelést és/vagy HSCT-t (Pt12, Pt14, Pt17, Pt22 és Pt23) követően a HAA és VAA titerek kimutathatatlanokká csökkentek, vagy alacsony titereken maradtak a kimutatási küszöb körül, ami a klinikai és szövettani remissziót tükrözi. kapcsolódó enteropátia. Egyikükben (Pt14) az immunszuppresszív kezelés során fellépő enteropathia átmeneti visszaesését a HAA csúcsértéke kísérte, majd a klinikai remisszió utáni csökkenés. Sajnos ennél a betegnél a sorozatminták hiánya miatt nem tudtuk dokumentálni az enteropathia visszaesését megelőző autoantitest-növekedés időpontját. Egy esetben (Pt19) a klinikai remissziót a VAA csökkenése kísérte, de a HAA nem, ami magas titereken fennmaradt a HSCT után 15 hónapig. A HSCT utáni csökkent HAA és VAA titerek megállapítása a legtöbb, de nem minden betegben rendkívül érdekes, valószínűleg az ezen autoantitestek perzisztens termeléséért felelős maradék gazda limfociták vagy plazmasejtek túlélésével függ össze.
Ezen autoantitest markerek bevezetése a klinikai gyakorlat viszonylag egyszerű lenne, tekintettel a mérésük egyszerűségére a nemrég kifejlesztett LIPS segítségével. A közelmúltban ezt a technológiát új, nem radioaktív eljárásként javasolták a radioaktív antitest helyettesítésére és a fehérje-A immunprecipitálására arany standard in vitro átírt és transzlált, 35S-metioninnal jelölt rekombináns humán antigénekké, amelyeket bevett autoantitest szabványosítási programokon keresztül validáltak mind T1D-ben, mind T1D-ben. coeliakia. A legutóbbi jelentések szerint a LIPS a radiolink assay-hoz hasonló teljesítményt mutatott, és jobb, mint a korábban létező ELISA. Ebben a vizsgálatban a LIPS-t rekombináns kiméra Renilla lumiferáz (Rluc)-Harmonin és Rluc-Villin antigénekkel fejlesztették ki, ami egy alacsony háttérzajjal és lineáris kvantitatív autoantitest mérésekkel végzett vizsgálatot eredményezett. pozitív eredményeket negatív szérummintákból. Összefoglalva, a HAA és VAA mérése LIPS segítségével gyors, egyszerű és reprodukálható tesztnek bizonyult, amely könnyen alkalmazható klinikai használatra.
Érdekes módon a kombinált HAA-k és VAA-k azonos diagnosztikai teljesítményét figyelték meg a hagyományos indirekt immunfluoreszcenciával kimutatott enterocita autoantitestek esetében. Az is tisztázatlan, de érdemes a jövőben tesztelni, hogy a harmonikusok és a bolyhok az egyetlen antigének, amelyeket az IPEX-hez kapcsolódó autoantitestek ismernek fel az enterocitákon, vagy az IPEX-hez kapcsolódó antitestek egyéb enterocita autoantigén célpontjait még nem azonosították.
Eddig az IPEX-et T-sejtnek tekintették, nevezetesen immunbetegség Treg sejt diszfunkció, korlátozott figyelem mellett a humorális immunválasz kapcsolódó hibáira: Eredményeink rávilágítanak a fő FOXP3 génmutációk és egy robusztus és számszerűsíthető antigén-specifikus autoantitest összefüggésére. Mivel azonban a B-sejtek nem expresszálnak FOXP3-at, a FOXP3-mutációk nem valószínű, hogy közvetlen hatással lesznek a B-sejtek fejlődésére és/vagy antitest-termelésre. A legújabb tanulmányok azonban azt mutatják, hogy a B-sejtek közvetlen és közvetett célpontjai is lehetnek a Treg-sejtek által közvetített szuppresszív funkciónak, és a Treg-sejtek megváltozása befolyásolja az autoantitest-titereket mind egérmodellben, mind emberben – Ráadásul a foxp3 mutáns egerekből származó közvetlen bizonyítékok azt mutatják, hogy A Treg sejtek abnormális B-sejtek fejlődésével, az allergiás B-sejtek elvesztésével és a hosszú életű plazmasejtek kialakulásával járnak. Ezenkívül a közelmúltban kimutatták, hogy emberben a FOXP3-hiány autoreaktív klónok felhalmozódását eredményezi az érett, naiv B-sejtek kompartmentjében, ami arra utal, hogy a Treg-sejtek fontos szerepet játszanak az ellenőrzőpont-szabályozásban perifériás B-sejtek szempontjából.
Az IPEX-ben a hormon- és boholy-autoimmunizációért felelős mechanizmusok, valamint ezen autoantigének szerepe az IPEX-szindróma kóros megnyilvánulásaiban továbbra sem ismert. A Harmonin számos szövetben expresszálódik, beleértve vékonybél, vastagbél, vese, szem, belső fül előcsarnok és gyengén hasnyálmirigy. A bélben a harmonizáló expresszió túlnyomórészt a luminalis felszíni hámsejtekben és a bélkripták felső felében található – és valószínűleg a kézi mikrobolyhokra lokalizálódik; hasonló lokalizációt mutattak ki a villi,. Tekintettel arra, hogy az IPEX enteropathia fő kórszövettani jellemzője a bélhámsejtek apoptotikus sejthalálával és közepesen súlyos vagy súlyos gyulladással kombinált bolyhos atrófia, valószínű, hogy ebben az összefüggésben a harmonika és a boholyos szövet a patogén autoimmunitás releváns molekuláris célpontjaként működhet.
Ez a tanulmány kimutatta, hogy a LIPS-sel mért HAA és VAA pontos diagnosztikai markerei az IPEX-szindrómának, a FOXP3 génmutációk 100%-os egyezőségével, amelyek megkülönböztetik az IPEX-et, beleértve az atipikus eseteket is, más gyermekkori enteropátiával összefüggő rendellenességektől. Összességében ezek az adatok azt mutatják, hogy a HAA-t és a VAA-t be kell vonni a diagnosztikai folyamatba és klinikai megfigyelés az IPEX-szindrómás betegek monitorozása, akiknél a HAA- és VAA-titerek visszatérő enteropathiára utaló változásai segíthetik a klinikusokat a gyors terápiás döntések meghozatalában.
Az IPEX-betegek klinikai jellemzői.
Az IPEX-szerű betegek klinikai jellemzői.
Kattintson ide további információért.
A szerzők köszönetet mondanak kollégáiknak, akik szérummintákkal és klinikai információk IPEX és IPEX betegeikről: E. S. Kang és Y. H. Choe, Szöul, Koreai Köztársaság; G. Zuin, Milánó, Olaszország; A. Staiano, R. Troncone és V. Discepolo, Nápoly, Olaszország; J. Schmidtko, Bern, Svájc; A. IkinciogullariZ. SedaUyan, M. Aydogan, E. O. Tzu, Ankara, Türkiye; G.R. Corazza és R. Ciccocioppo, Pavia, Olaszország; S. Vignola, Genova, Olaszország; A. Bilbao és S. Sanchez-Ramon, Madrid, Spanyolország; J. Reichenbachand M. Hoernes, Zürich, Svájc; M. Abinun és M. Slatter, Newcastle upon Tyne, Egyesült Királyság; M. Cipolli, Verona, Olaszország; F. Guracan, Ankara, Türkiye; F. Locatelli és B. Lucarelli, Róma, Olaszország; C. Cancrini és S. Corrente, Róma, Olaszország; A. Tommasini, Trieszt, Olaszország; L. Guidi, Róma, Olaszország; E. Richmond Padilla és O. Porras, San Jose, Costa Rica; S. Martino és D. Montin, Torino, Olaszország; M. Hauschild, Németország; K. Nadeau és M. Butte, Stanford, CA; A. Aiuti, G. Barera, F. Meschi és R. Bonfanti, Milánó, Olaszország. A szerzők köszönetet mondanak: M. Cecconiand D. Coviello a FOXP3 genotipizálásért; valamint az olasz IPEX kutatócsoport tagjai (www.ipexconsortium.org) R. Badolato, M. Cecconi, G. Colarusso, D. Coviello, E. Gambinera és A. Tommasini támogatásukért és bátorításukért. A szerzők köszönik a betegek és családjaik bizalmát és részvételét a vizsgálatainkban.
Az IPEX-szindróma az immunrendszer diszregulációjának, poliendokrinopátiának és enteropátiájának szindróma, X-hez kötött recesszív öröklődéssel (immunodysregiiláció, poliendokrinopátia és enteropathia, X-kapcsolt).
Tünetek: Polyendocrinopathia (az endokrin mirigyek rendellenessége), amely az 1-es típusú diabetes mellitus kialakulásában nyilvánul meg. Az ilyen típusú cukorbetegségben az immunsejtek megtámadják és elpusztítják a hasnyálmirigy sejtjeit, amelyek inzulint termelnek, egy hormon, amely részt vesz a glükóz (cukor) metabolizmusában a szervezetben. Az IPEX-ben szenvedő betegeknél nem termelődik inzulin, és hiperglikémia alakul ki - magas tartalom vércukor. Kialakulhat autoimmun pajzsmirigy-gyulladás is - a pajzsmirigy gyulladása, amelyet a saját immunrendszer támadása okoz, a pajzsmirigy már nem tudja megfelelően ellátni funkcióit (például megszakad a kalcium-anyagcsere a szervezetben). Az enteropátia (a gyomor-bél traktus károsodása) tartós hasmenésben nyilvánul meg, amely étkezés előtt vagy közben kezdődik, lehetséges bélvérzés. Hemolitikus vérszegénység - a vörösvértestek hemolízise (megsemmisítése) és a hemoglobin mennyiségének csökkenése. Bőrkiütések az ekcéma típusától függően (bőrkiütés viszketéssel és hámlóval kísérve). Ízületi gyulladás (ízületi gyulladás), lymphadenopathia (megnagyobbodás és fájdalom nyirokcsomók), vesekárosodás. Cachexia ( szélsőséges fok kimerültség). Fokozott fogékonyság a fertőzésekre az immunrendszer diszregulációja (az immunrendszer sejtjeinek egymással és más sejtekkel való kölcsönhatása) és/vagy neutropénia (a neutrofilek számának csökkenése - az immunrendszer sejtjei, amelyek fő funkciója: fertőzések elleni védelem: tüdőgyulladás (tüdőgyulladás), hashártyagyulladás ( gennyes gyulladás peritoneum), szepszis (vérmérgezés), szeptikus ízületi gyulladás(az ízületek gennyes gyulladása).
Az IPEX-szindróma a FOXP3 gén mutációihoz kapcsolódik
Kutatási módszer: FOXP3 génszekvenálás
szindróma fehérje), amely fontos szerepet játszik a citoszkeleton működésében. Szabályozza az aktin polimerizációját. Ennek a fehérjének a normál működése szükséges a teljes sejtmozgáshoz, polarizációjukhoz, a kemotaxis során kialakuló filopódiákhoz, a sejtadhézióhoz és az immunrendszer sejtjeinek interakciója során az immunszinapszisok kialakulásához.
A mutációk elhelyezkedésétől és az általuk érintett génrégió kiterjedésétől függően a betegség három klinikai változata alakul ki: a teljes kifejlődésű Wiskott-Aldrich-szindróma (deléciók következménye) és a thrombocytopenia vagy a neutropenia izolált megnyilvánulásával járó változatok. A Wiskott-Aldrich-szindróma klasszikus megjelenését kis vérlemezkékkel járó thrombocytopenia, ekcéma és visszatérő fertőzések jellemzik.
A Wiskott–Aldrich-szindrómát az immunrendszer többszörös rendellenességei jellemzik, amelyek túlnyomórészt a veleszületett immunsejtek fagocita és citolitikus aktivitását érintik, pl. olyan funkciókat, amelyek leginkább a sejtmozgástól és a citoszkeleton aktív részvételétől függenek. A T-limfociták és az APC-k közötti immunszinapszis kialakulásának megzavarása az adaptív immunitás minden megnyilvánulását érinti.
Ataxia-telangiectasia (Louis-Bar szindróma)
Az ATM gén hibája által okozott örökletes betegség (Ataxia telangiectasia mutált). A kromoszóma-lebomlás szindrómáján alapuló betegségekre utal. A betegség az ATM gén bármely részében előforduló mutációk eredményeképpen alakul ki. A mutációk eredménye lehet az ATM fehérjeszintézis teljes hiánya vagy gyengülése, valamint egy funkcionálisan hibás fehérje szintézise.
Az ATM fehérje egy szerin-treonin protein kináz. Fő funkciója, hogy fiziológiás körülmények között (meiózis, az antigénfelismerő receptorok V-génjeinek átrendeződése stb.) fellépő, illetve a kétszálú DNS-szakadások helyreállítására szolgáló jeleket indítson el. külső tényezők(például ionizáló sugárzás). Amikor DNS-törések lépnek fel, az ATM-kináz autofoszforilálódik, és dimerből monomer formába változik. Az ATM kináz biztosítja az MRN komplex fehérjéinek foszforilációját és a kapcsolódó faktorokat, amelyek közvetlenül végrehajtják a DNS-javítást. Kis számú szakadás esetén sikeresen ellátják ezt a funkciót. Ha a sikeres helyreállítás lehetetlen, apoptózis alakul ki, amelyet a p53 faktor vált ki. A teljes DNS-javítás hiánya a genom instabilitását okozza, ami a sejtek sugárérzékenységének és a fejlődés gyakoriságának növekedéséhez vezet. rosszindulatú daganatok, különösen limfómák és leukémiák.
Az ataxia-telangiectasia legjellemzőbb klinikai tünete a növekvő ataxia, amely a járás megváltozásával nyilvánul meg. Ezt a neurodegeneráció okozza cerebelláris atrófiával. A neurodegeneratív folyamatok kialakulása összefügg azzal, hogy az agyi neuronok érése során DNS-rekombinációs folyamatok mennek végbe, melyeket kettős törés kísér. Egy másik tünet, amely a betegség nevét, a telangiectasia adja, a szem és az arc vérereinek tartós kitágulása.
A T- és B-limfociták érése során fellépő DNS-törések károsodott helyreállítása szintén az ataxia-telangiectasia esetén megfigyelt immunhiány hátterében áll. Az immunhiány a bronchopulmonalis apparátus krónikus, visszatérő bakteriális és vírusos fertőző betegségeiben nyilvánul meg, amelyek általában a beteg halálát okozzák.
Nijmegen szindróma
Nijmegen az a város Hollandiában, ahol először leírták a szindrómát. Ezt az örökletes betegséget a kromoszóma-lebomlás szindrómájaként osztályozzák, amelyet a genom instabilitása kísér. Ennek a betegségnek a kialakulása az NBS1 gén mutációjával függ össze, amelynek terméke, a nibrin az MRN komplex részeként részt vesz a DNS-javításban, mivel az ATM fehérjekináz általi foszforiláció szubsztrátja. Ebben a tekintetben a Nijmegen-szindróma patogenezise és klinikai megnyilvánulásai gyakorlatilag egybeesnek az ataxia-telangiectasia tüneteivel. Mindkét esetben neurodegeneratív elváltozások alakulnak ki, de Nijmegen-szindrómában a mikrokefáliás jelenségek dominálnak, hiszen az agyi neuronok érése során DNS-rekombinációs folyamatok is végbemennek.
Autoimmun limfoproliferatív szindróma
A betegséget az apoptózis károsodása és az ezzel járó nem rosszindulatú limfoproliferáció, hiperimmunglobulinémia, autoimmun folyamatok, valamint a vér CD3+ CD4-CD8- sejttartalmának növekedése jellemzi. A szindróma hátterében álló mutációk leggyakrabban a TFRRSF6 génben lokalizálódnak, amely a Fas receptort (CD95) kódolja. Csak azok a mutációk, amelyek változást okoznak a CD95 molekula intracelluláris régiójában, vezetnek klinikai megnyilvánulásokhoz. Ritkábban a mutációk a Fas ligandum és a kaszpáz 8 és 10 géneket érintik (lásd a 3.4.1.5. szakaszt). A mutációk a megfelelő gén által kódolt molekulák legyengült expressziójában és gyengülésében, ill. teljes hiánya apoptotikus jelátvitel.
X-hez kötött limfoproliferatív szindróma
Ritka immunhiány, amelyet perverz vírusellenes, daganatellenes és immunválasz jellemez. Az X-hez kötött limfoproliferatív szindróma kórokozója az Epstein-Barr vírus. A vírus a B-sejtekbe a vírusburok gp150 molekulájának és a sejtmembrán CD21 receptorának kölcsönhatása révén jut be. Az X-hez kötött limfoproliferatív szindrómában szenvedő betegeknél a B-sejtek poliklonális aktivációja és akadálytalan vírusreplikáció lép fel.
Az Epstein-Barr vírus fertőzés az X-hez kötött limfoproliferatív szindrómában az SAP adapter fehérjét kódoló SH2D1A gén mutációjának eredménye. Signaling lymphocytic activation molekula (SLAM)-asszociált fehérje]. Az SAP fehérje SH2 doménje felismeri a tirozin motívumot a SLAM citoplazmatikus részében és számos más molekulát. A vírusellenes immunitásban vezető szerepet játszanak azok a folyamatok, amelyek az immunrendszer sejtjeiben a SLAM-receptor által közvetített aktiváció hatására fejlődnek ki. A SLAM receptor timocitákon, T-, B-dendritikus sejteken és makrofágokon expresszálódik. Az expresszió fokozódik, amikor a sejtek aktiválódnak. Az SAP fehérje szabályozó hatása összefügg a tirozin-foszfatázok aktivitásának elnyomásával.
4.7. Immunhiányok | |
a SLAM-mel kapcsolatban. SAP hiányában az SH-2 foszfatáz szabadon kötődik a SLAM receptorhoz, defoszforilálja azt, és gátolja a jelátvitelt. Az antivirális védekezés fő effektorai, a T- és NK-sejtek nem aktiválódnak, ami az Epstein-Barr vírus ellenőrizetlen proliferációjához vezet. Ezenkívül az SAP elősegíti a Fyn tirozin kináz és a SLAM receptor kölcsönhatását, ami elősegíti az aktivációs jel átvitelét.
Az X-hez kötött limfoproliferatív szindróma különböző klinikai megnyilvánulásaiban a legkonzisztensebb a fulmináns Fertőző mononukleózis, jó- és rosszindulatú limfoproliferatív rendellenességek, valamint dysgammaglobulinémia vagy hipogammaglobulinémia. A lokális elváltozások között a májkárosodás dominál, amelyet az Epstein-Barr vírussal fertőzött B-sejtek és az aktivált T-sejtek beszűrődése okoz, ami a májszövet nekrózisához vezet. A májelégtelenség az egyik fő halálok az X-hez kötött limfoproliferatív szindrómában szenvedő betegeknél.
IPEX szindróma
X-hez kötött immunrendszeri diszregulációs szindróma, poliendokrinopátia és enteropathia ( Immunszabályozási zavar, polyendocrinopathia, enteropathia X-kapcsolt szindróma) az X kromoszómán található FOXP3 gén mutációi következtében alakul ki. A FOXP3 egy „mestergén”, amely a CD4+ CD25+ fenotípusú szabályozó T-sejtek kialakulásáért felelős. Ezek a sejtek központi szerepet játszanak az autospecifikus T-limfocita klónok aktivitásának visszafogásában a periférián. A FOXP3 gén hibája e sejtek hiányával vagy hiányával, valamint a különböző autoimmun és allergiás folyamatok gátlásával jár.
Az IPEX-szindróma az endokrin szervek többszörös autoimmun elváltozásainak kialakulásában nyilvánul meg, emésztőrendszerés a reproduktív rendszer. Ez a betegség korai életkorban kezdődik, és számos endokrin szerv károsodása (I-es típusú diabetes mellitus, pajzsmirigygyulladás) jellemzi. magas szint autoantitestek, súlyos enteropathia, cachexia, alacsony termet, allergiás megnyilvánulások(ekcéma, ételallergia, eozinofília, emelkedett IgE-szint), valamint hematológiai elváltozások (hemolitikus anémia, thrombocytopenia). A beteg gyermekek (fiúk) az első életévben halnak meg ismétlődő súlyos fertőző betegségekben.
APECED szindróma
Autoimmun poliendokrinopátia, candidiasis, ektodermális dystrophia ( Autoimmun poliendokrinopátia, candidiasis, ektodermális dystrophia) egy autoimmun szindróma, amelyet a timociták negatív szelekciójának hibája okoz. Ennek oka az AIRE gén mutációi, amelyek a csecsemőmirigy velőjének hám- és dendritikus sejtjeiben a szervspecifikus fehérjék ektopikus expressziójáért felelősek, és felelősek a negatív szelekcióért (lásd 3.2.3.4. fejezet). Az autoimmun folyamat elsősorban a mellékpajzsmirigyeket és a mellékveséket, valamint a hasnyálmirigy szigeteit (I-es típusú cukorbetegség alakul ki), a pajzsmirigyet és a nemi szerveket érinti.
Gyakran a candidiasis kialakulásával jár együtt. Az ektoderma származékok morfogenezisének hibáit is feltárják.
Az elsődleges immundeficienciák spektrumának mérlegelésekor az NK-sejtek patológiájához kapcsolódó nozológiai egységek hiánya vonzza a figyelmet. A mai napig valamivel több mint egy tucat olyan mutációt írtak le, amelyek befolyásolják e sejtek működését egyénekben, ami arra enged következtetni, hogy az NK-sejteket szelektíven befolyásoló immunhiányok rendkívül ritkák.
4.7.2. HIV-fertőzés és szerzett immunhiányos szindróma
Az elsődleges immunhiányos állapotok mellett az egyetlen olyan betegség, amelynél az immunrendszer károsodása a patogenezis alapja és meghatározza a tüneteket, a szerzett immunhiányos szindróma (AIDS); Szerzett immunhiányos szindróma- AIDS). Csak önálló szerzett immunhiányos betegségként ismerhető fel.
Az AIDS felfedezésének története 1981-ig nyúlik vissza, amikor a Center for Disease Control (USA, Atlanta) New York-i és Los Angeles-i orvoscsoportok jelentését tette közzé egy homoszexuális férfiaknál regisztrált szokatlan betegségről. A Pneumocystis carinii opportunista gomba által okozott tüdőgyulladás súlyos formája jellemezte. A későbbi jelentések adatokat szolgáltattak a betegcsoport bővüléséről, és adatokat szolgáltattak náluk immunhiány jelenlétéről, amely a keringés CD4+ T-limfocita-tartalmának meredek csökkenésével jár együtt, és fertőző folyamatok kialakulásával jár. a pneumocystis mellett más fakultatív kórokozók is okozzák. Néhány betegnél Kaposi-szarkóma alakult ki, amelyet a tőle szokatlan agresszív lefolyás jellemez. Mire ezek az anyagok megjelentek, az azonosított betegek 40%-a meghalt. Később kiderült, hogy a járvány már elfogta Afrikát egyenlítői területen, ahol a betegség főleg heteroszexuális szexuális érintkezés útján terjed. A nemzetközi orvosi közösség nemcsak egy új nozológiai forma, a „szerzett immunhiányos szindróma” létezését ismerte fel. Szerzett immunhiányos szindróma), De
És bejelentette e betegség világjárványának kezdetét. Az AIDS ilyen drámai debütálása egyetemes figyelmet vonzott rá, messze túlmutatva a szakmai környezeten. Az orvostudományban, különösen az immunológiában az AIDS-probléma jelentősen befolyásolta a tudományos kutatások fejlesztésében az erőfeszítések és a finanszírozás elosztását. Ez volt az első alkalom, hogy az immunrendszer túlnyomórészt elváltozásával összefüggő betegség tudományos és társadalmi szempontból ennyire jelentősnek bizonyult.
NAK NEK 2007 eleji dátum A HIV-fertőzöttek száma 43 millió volt, ebből 25 millióan meghaltak, éves szinten ez a szám 5 millió, a halálozási ráta pedig 3 millió. A fertőzöttek 60%-a a szubszaharai Afrikában él.
1983-ban, szinte egyidejűleg Franciaországban [L. Montagnier (L. Montagnier)]
És Amerikai Egyesült Államok [R.S. Gallo ( R.C. Gallo)] elhatározta
4.7. Immunhiányok | |
az AIDS vírusos természete és kórokozója - HIV (humán immunhiány vírus, Humán immunhiány vírus - HIV). A retrovírusokhoz tartozik, pl. vírusok, amelyekben az RNS az örökletes információ hordozójaként szolgál, és ezt reverz transzkriptáz segítségével olvassák ki. Ez a vírus a lentivírusok alcsaládjába tartozik - lassan ható vírusok, betegségeket okozva hosszú lappangási időszak. A HIV nemzetségbe tartozik a HIV-1 faj, amely a kórokozó tipikus forma AIDS és HIV-2, amely szerkezetében és patogén hatásában különbözik a HIV-1-től, de általában hasonlít hozzá. A HIV-2 a betegség enyhébb változatát okozza, főleg Afrikában. Az alábbi információk elsősorban a HIV-1-re vonatkoznak (kivéve, ha másként jelezzük). A HIV-nek 3 csoportja van - M, O és N, 34 altípusra osztva.
A jelenleg elfogadott nézet szerint a HIV-1 egy nyugat-afrikai csimpánzvírusból származik (valószínűleg Kamerunból, egy HIV-fertőzött országból) az 1930-as évek környékén. A HIV-2 a SIVsm majomvírusból származik. A HIV-1 változatai egyenlőtlenül oszlanak meg a világon. A fejlett nyugati országokban a B altípus dominál, Közép-Európában és Oroszországban - az A, B altípusok és rekombinánsaik. Más változatok dominálnak Afrikában és Ázsiában, Kamerunban az összes ismert HIV-altípus megtalálható.
A humán immundeficiencia vírus morfológiája, génjei és fehérjéi
A HIV felépítését az ábra mutatja. 4.46. A vírus átmérője körülbelül 100 nm. Kagyló veszi körül, amelyből gomba alakúan nyúlnak ki
Héj
A nukleokapszid fehérjéi és enzimei
Nukleokapszid
Rizs. 4.46. A humán immundeficiencia vírus 1 (HIV-1) szerkezetének vázlata
4. fejezet Immunitás a szervezet védelmében és károsításában... |
||||||||||||||||||||
Rizs. 4.47. A humán immundeficiencia vírus 1 (HIV-1) genom szerkezete. A gének elhelyezkedése a vírus két RNS-molekulán van feltüntetve
tüskék, amelyek külső részét a gp120 burokfehérje, a membránnal szomszédos és transzmembrán részeket pedig a gp41 fehérje alkotja. A tüskék e molekulák trimereit jelentik. Ezek a fehérjék részt vesznek a vírus és a gazdasejt közötti kölcsönhatásban, és az utóbbi immunválasza elsősorban ellenük irányul. Mélyebb a mátrix réteg, amely keretként működik. A vírus középső részét egy kúp alakú kapszid alkotja, amely genomiális RNS-t tartalmaz. A nukleoproteinek és enzimek is itt találhatók: reverz transzkriptáz (p66/p51), integráz (p31–32), proteáz (p10) és RNáz (p15).
A HIV genetikai szerkezetét és a génjei által kódolt fehérjéket az 1. ábra mutatja be. 4.47. Az egyszálú RNS két molekulájában, amelyek teljes hossza 9,2 kb, 9 gén található, amelyek 15 HIV fehérjét kódolnak. A vírusstruktúrákat kódoló szekvenciákat az 5' és 3' végeken hosszú terminális ismétlődések (LTR – Long terminális ismétlődések) korlátozzák, amelyek szabályozó funkciókat látnak el. A strukturális és szabályozó gének részben átfedik egymást. A fő szerkezeti gének a 3-gag, pol és env. A gag gén meghatározza a mag - nukleoid és mátrix - csoportspecifikus antigének képződését. A pol gén a DNS polimerázt (reverz transzkriptáz) és más nukleotid fehérjéket kódol. Az env gén a fent említett burokfehérjék képződését kódolja. Minden esetben az elsődleges génterméket dolgozzák fel, pl. kisebb fehérjékre bomlik. A szabályozó gének a pol és env gének (vif, vpr, vpu, vpx, rev, tat gének) között helyezkednek el, és ezen felül a genom 3'-terminális részét foglalják el (a tat és rev gének töredékei, nef gén ). A szabályozó gének által kódolt fehérjék fontosak a virion kialakulásában és a sejttel való kapcsolatában. Ezek közül a legfontosabb fehérjék a tat, egy transzkripciós transzaktivátor és a nef (27 kDa), ennek negatív szabályozója. Hibás nef fehérjét mutatnak ki HIV-fertőzött „hosszú májúakban”, akik nem tapasztalják a betegség progresszióját.
A HIV-fertőzés immunológiájában, a diagnózisban és az AIDS immunterápiás megközelítéseinek kidolgozásában a legfontosabbak a gp120 és gp41 burokfehérjék. Az env gén rendkívül magas HIV variabilitással jár. A gén 5 állandó (C) és öt variábilis (V) régiót tartalmaz; az utóbbiban az aminosavszekvencia vírusizolátumonként 30-90%-ban változik. A V3 változó hurok különösen fontos az immunogenitás szempontjából. Az env gén mutációinak gyakorisága genomonként ciklusonként 10-4-10-5 esemény, azaz. 2-3 nagyságrenddel magasabb a génmutációk normál gyakoriságánál. A molekula jelentős részét szénhidrát-maradékok foglalják el.
4.7. Immunhiányok | |
A sejtek fertőzése humán immunhiány vírussal
Az emberi sejtek HIV általi fertőzésének és későbbi replikációjának folyamata több szakaszból áll. A korai fázisban életciklus A következő fázisok különböztethetők meg:
– HIV kötődése a sejtfelszínhez (recepció);
– a vírus és a sejt membránjainak összeolvadása és a vírus behatolása a sejtbe (fúzió és „vetkőzés”);
– a fordított transzkripció kezdete; előintegrációs komplexum kialakítása;
– a preintegrációs komplex szállítása a nukleoplazmába;
– a provírus integrációja a sejtgenomba.
NAK NEK A HIV életciklusának késői szakaszai a következők:
– vírus RNS transzkripciója az integrált provirális DNS mátrixán;
– vírus RNS exportálása a citoszolba;
– vírus RNS transzlációja, fehérjefeldolgozás;
– vírusrészecske sejtmembránon való összeszerelése;
– az újonnan képződött virion felszabadulása.
A fertőzés fő belépési pontja a húgyúti és az emésztőrendszer nyálkahártyája. A nyálkahártya károsodása esetén a vírus behatolása a szervezetbe nagymértékben megkönnyíthető, de a fertőzés ezek hiányában is lehetséges. Ebben az esetben a vírust a dendrites sejtek folyamatai fogják el, amelyek behatolnak a szerv lumenébe. Mindenesetre a dendritikus sejtek az elsők, amelyek kölcsönhatásba lépnek a HIV-vel. A vírust a regionális nyirokcsomókba szállítják, ahol az antigének bemutatása során a dendritikus sejtek és a T limfociták kölcsönhatása révén megfertőzik a CD4+ T sejteket.
A HIV befogadása a vírus gp120 fehérje trimerének és a gazdasejt CD4 membránglikoproteinjének kölcsönös felismerésének köszönhető. A kölcsönhatásukért felelős régiók mindkét molekulán lokalizálódnak. A gp120 molekulán a jelzett régió a C-terminális részén található (420-469. aminosavak), ezen kívül van még 3 régió, ami fontos a CD4-gyel való kölcsönhatási hely kialakulásához, és egy régió (254-274) felelős a vírus behatolásáért a sejtbe, miután a CD4 membránhoz kötődik. A CD4 molekulán a gp120 kötőhelye az N-terminális V-doménben (D1) található, és tartalmazza a 31-57. és 81-94. aminosavak szekvenciáit.
Mivel a CD4 molekula a HIV receptoraként szolgál, a vírus célsejtjeinek körét az expressziója határozza meg (4.20. táblázat). Természetesen fő célpontjai a CD4+ T limfociták, valamint a mindkét koreceptort (CD4 és CD8) expresszáló éretlen timociták. A dendrites sejtek és makrofágok, amelyek gyengén expresszálják a CD4-et a membránon, szintén hatékonyan fertőződnek meg a vírussal, és aktív termelőiként szolgálnak (a dendritikus sejtekben a HIV replikációja még magasabb, mint a T-limfocitákban). A HIV-célpontok közé tartoznak más sejtek is, amelyek legalább kis mennyiségű CD4-et tartalmaznak a felszínen - eozinofilek, megakariociták, endoteliális sejtek, egyes hámsejtek (csecsemőmirigy epitélium, intestinalis M-sejtek) és idegsejtek(neuronok, mikroglia sejtek, asztrociták, oligodendrociták), spermiumok, chorioallantois sejtek, harántcsíkolt izmok.
680 4. fejezet Immunitás a szervezet védelmében és károsításában...
4.20. táblázat. Immunológiai paraméterek állapota szerzett immunhiányos szindrómában
Index | Preklinikai | Klinikai stádium |
megnyilvánulásai |
||
A limfociták száma | ||
normál vagy csökkentett | Kevesebb mint 200 sejt per |
|
1 µl vér |
||
Normál vagy fokozott | normál vagy csökkentett |
|
(százalék lehet |
||
CD4+ /CD8+ arány | ||
Th1/Th2 arány | normál vagy csökkentett | |
Citotoxikus aktivitás | Előléptetett | |
iCal T-sejtek | ||
T sejt válasz | normál vagy csökkentett | élesen lehangolt |
a mitogénekre | ||
normál vagy csökkentett | ||
Antigenemia | Ekkor jelenik meg | Hiányzó |
2-8 hét | ||
Antitestek keringésben | Általában azután jelennek meg | Ajándék |
Oldható tényezők a | Az α-lánc oldható formái IL-2R, CD8, TNFR, |
|
keringés | β2-mikroglobulin, neopterin |
|
Funkció csökkentve |
||
Nyirokszövetek, ill. | A tartalom korai csökkenése | Erős elnyomás |
nyálkával idézett | CD4+ T-sejtek elnyomása | T-sejtek, különösen |
ty kagyló | CD4+ populációk |
|
Veleszületett immunitás | normál vagy elnyomott | Nyomott |
A HIV sejtekbe való behatolásához további molekulák a koreceptorok - 2 kemokin receptor: CXCR4 (a CXCL12 kemokin receptora) és CCR5 (a CCL4 és CCL5 kemokin receptora). Kisebb mértékben a koreceptor szerepe több mint egy tucat kemokin receptorban rejlik. A CXCR4 a tenyésztett HIV-1 törzsek koreceptoraként szolgál T-sejtvonalak, a CCR5 pedig a makrofágvonalakon tenyésztett törzsekhez való (makrofágokon, dendritikus sejteken és CD4+ T-sejteken is jelen van). Mindkét receptor rodopszinszerű besorolású, és a hozzájuk kapcsolódó G-fehérjén keresztül jelet továbbít a sejtbe (lásd a 4.1.1.2. pontot). Mindkét kemoreceptor kölcsönhatásba lép
Val vel gp120 fehérje; ezeknek a receptoroknak a kötőhelye megnyílik a gp120 molekulában a CD4-gyel való kölcsönhatás után (4.48. ábra). A különböző HIV-izolátumok szelektivitása különbözik bizonyos koreceptorokkal szemben. Támogató szerep a fogadásban A HIV-2-t adhéziós molekulák, különösen az LFA-1 játsszák. Amikor a dendritikus sejtek kölcsönhatásban fertőződnek meg
Val vel HIV lektin receptor érintett DC-JEL.
4.7. Immunhiányok | |
A gp120 hipervariábilis régiói
Rizs. 4.48. A vírus és a célsejt közötti kölcsönhatás sémája a fertőzés során. Az illusztrált a T-sejt receptormolekulák és a HIV-1 molekulák kölcsönhatásának egyik lehetősége, biztosítva a vírus bejutását a sejtbe.
A koreceptorok fontos szerepet játszanak a vírusburok és a sejtmembrán fúziójában. A vírus oldalon a gp41 fehérje játszik fő szerepet a fúzióban. A fúziós (fúziós) és a vírus „levetkőzésének” fázisai után reverz komplex képződik, amely reverz transzkripciót biztosít kétszálú provirális DNS képződésével.
A vírus integráz enzim segítségével a cDNS beépül a sejt DNS-ébe, provírust hozva létre. A HIV gének sejtgenomba való integrálásának sajátossága, hogy nem igényel sejtosztódást. Az integráció eredményeként látens fertőzés alakul ki, amely általában a memória T-sejteket, „alvó” makrofágokat érinti, amelyek a fertőzés tartalékaként szolgálnak.
A HIV replikációja elsősorban vagy kizárólag az aktivált sejtekben történik. Amikor a CD4+ T-sejtek aktiválódnak, az NF-KB transzkripciós faktor indukálódik, amely mind a sejtes, mind a virális DNS promoteréhez kötődik. A sejtes RNS polimeráz átírja a vírus RNS-ét. A tat és a rev gének korábban íródnak át, mint mások, amelyek termékei részt vesznek a vírus replikációjában A Tat egy olyan fehérje, amely kölcsönhatásba lép hosszú terminális szekvenciákkal (LTR), ami jelentősen megnöveli a vírus transzkripciójának sebességét. A Rev egy olyan fehérje, amely elősegíti a vírus-mRNS-transzkriptumok kijutását a sejtmagból, mind az összeillesztett, mind a nem illesztett módon. A sejtmagból felszabaduló vírus mRNS templátként szolgál a szerkezeti és szabályozó fehérjék szintéziséhez. A gag, env, pol szerkezeti fehérjék vírusrészecskéket alkotnak, amelyek a sejtből bimbózik.
A limfociták mitogénekkel történő stimulálása fokozza a HIV replikációját és citopatogén hatását. Ezt elősegíthetik a sejtaktivációt kísérő endogén tényezők, amelyek aktivált limfocitákban és makrofágokban indukálódnak (az NF-κB-t már említettük). A citokinek, különösen a TNFα és az IL-6 szintén ilyen faktorok lehetnek. Az első aktiválja a HIV gének transzkripcióját, a második serkenti a HIV expresszióját a gazdasejtekben. A GM-CSF és a G-CSF telepstimuláló faktorok hasonló hatást fejtenek ki. Az IL-1, IL-2, IL-3 és az IFNγ kofaktorként működhetnek a HIV aktiválásában. A mellékvesék glükokortikoid hormonjai hozzájárulnak a HIV genetikai programjának megvalósításához. Az IL-4, IL-7 és az IFNa ellentétes hatást fejt ki.
Immunválasz a HIV-antigénekre
Az akut vírusfertőzést az IFNγ-t szintetizáló antigén-specifikus CD4+ és CD8+ T-sejtek viszonylag gyors képződése jellemzi. Ez a vér vírustartalmának gyors csökkenéséhez vezet, de nem tűnik el. A HIV-fertőzésre adott sejtes válasz antigén-specifikus CD4+ T helper sejtek és CD8+ T gyilkos sejtek képződéséből áll. A citotoxikus CD8+ T-sejtek az AIDS teljes lefolyása alatt kimutathatók, a késői stádiumok kivételével, míg a vírusspecifikus CD4+ T-sejtek csak a betegség korai szakaszában mutathatók ki. A CD8+ gyilkos T-sejtek elpusztítják a fertőzött sejteket, mielőtt a vírus elhagyná a sejtet, ezáltal megszakítva a vírus replikációját. Világos fordított összefüggés van a vérplazmában lévő vírus titere és a specifikus CD8+ T ölősejtek száma között. A CD4+ és CD8+ antigén-specifikus T-sejtek fokozott proliferatív aktivitása korrelál a betegség lassabb progressziójával. A nagyszámú CD8+ ölő T-sejtet tartalmazó betegeket a betegség lassú progressziója jellemzi. A CD4+ T-sejtek a vírus clearance-ében is fontos szerepet játszanak: összefüggés van a CD4+ T-sejtek HIV antigénekre adott proliferatív válasza és a plazmavírus szintje között. Megállapították, hogy a virémia súlyossága szorosabban fordítottan korrelál az IL-2 termelődésével, mint az IFNγ-val. A krónikus vírusfertőzés során az effektor T-sejtek mennyiségileg megmaradnak, de funkcionálisan megváltoznak. A CD4+ T-sejtek IL-2-szintetizáló képessége csökken; a CD8+ T-sejtek citotoxikus molekulák képződése gyengül. A CD8+ T-sejtek proliferatív aktivitása csökken, ami feltehetően a CD4+ helper sejtek IL-2-termelésének csökkenése eredménye. Az antivirális védelem gyengülését elősegíti a CD4+ T-sejtek Th2 típusú helperré differenciálódása. Még a CD8+ citotoxikus T-limfociták által szintetizált citokinek spektrumára is jellemző a Th2 citokinek túlsúlya.
Természetes lenne elvárni, hogy az immunfolyamatok, amelyek legyengült formában, de egy behatoló vírus hatására alakulnak ki, legalább kis fok védi a szervezetet a fertőzésektől. Sőt, ha ez megtörténik, akkor csak az lesz kezdeti időszak betegségek. Ezt követően az antigén-specifikus CD4+ és CD8+ T-sejtek jelenléte ellenére a vírus intenzív replikációja megy végbe. Ez azon vírusok szelekciójának következménye, amelyekben az epitópok változásait felismerték
A károsodott celluláris immunitás (T-sejt-hiány) okozta állapotok súlyos kombinált immunhiányos szindrómák. Egyes betegeknél az immunhiány ezen formái rendkívül veszélyes (akár életveszélyes) betegségek kialakulását okozhatják, míg másokban csak kisebb egészségügyi problémákat okozhatnak. Nézzük meg részletesebben a sejtes immunitás károsodása esetén kialakuló betegségeket.
A bőr és a nyálkahártyák krónikus candidiasisa
Candidiasis (rigó) akkor alakul ki, ha a bőrt és a nyálkahártyákat gombás fertőzés károsítja. Ritka esetekben a fertőzés átterjedhet a belső szervekre.A candidiasis kialakulására való hajlam fennáll szelektív T-sejt-hiány esetén. A candidiasis kezelése speciális szerek alkalmazását igényli gombaellenes szerek(egyes betegeknek élethosszig tartó fenntartó terápián kell részt venniük).
Metaphysealis chondrodysplasia
Ez a betegség autoszomális recesszív immunhiányos rendellenesség. Gyakori rokonsági házasságokban. A metaphysealis chondrodysplasiában szenvedő betegek hajszálai finom, törékenyek, és nagyon érzékenyek a vírusfertőzésekre. Egyes esetekben a betegség csontvelő-transzplantációval gyógyítható.X-hez kötött limfoproliferatív szindróma
Az X-hez kötött limfoproliferatív szindrómát az Epstein-Barr vírussal szembeni fokozott sebezhetőség jellemzi. Epstein-Barr vírus veszélyes betegségek kialakulását okozhatja (fertőző mononukleózis, aplasztikus vérszegénység, nyirokcsomórák, bárányhimlő, vasculitis, herpesz).Érdemes megjegyezni, hogy ezt a betegséget csak a férfiak öröklik.
