Bakteriyofajların tıpta kullanımı. Bakteriyofajlar ve pratik uygulamaları
Faj preparatları, bulaşıcı hastalıkların tedavisi ve önlenmesinin yanı sıra teşhiste - mikroorganizmaların tanımlanmasında faj duyarlılığını ve faj tiplemesini belirlemek için kullanılır. Fajların eylemi, katı özgüllüklerine dayanır. Fajların terapötik ve profilaktik etkisi, fajın kendisinin litik aktivitesi ve ayrıca özellikle tekrarlanan kullanım durumunda fagolizatlardaki tahrip olmuş mikrobiyal hücrelerin bileşenlerinin (antijenler) bağışıklık kazandırma özelliği ile belirlenir. Faj preparatları elde edilirken, kanıtlanmış üretim faj suşları ve buna bağlı olarak tipik mikroorganizma kültürleri kullanılır. Üreme logaritmik aşamasında olan sıvı bir besin ortamındaki bir bakteri kültürü, bir faj ana süspansiyonu ile enfekte edilir.
Fajla parçalanan kültür (genellikle ertesi gün) bakteri filtrelerinden süzülür ve faj içeren süzüntüye koruyucu olarak bir kinosol çözeltisi eklenir.
Tamamlanmış ürün faj berrak bir sıvıdır sarımsı renk. Daha uzun depolama için bazı fajlar kuru formda (tabletler halinde) mevcuttur. Tedavi ve korunmada bağırsak enfeksiyonları fajlar, midenin asidik içeriği fajları yok ettiğinden, bir sodyum bikarbonat çözeltisi ile aynı anda kullanılır. Faj vücutta uzun süre (5-7 gün) kalmaz, bu nedenle tekrar uygulanması önerilir.
Sovyetler Birliği'nde üretilen aşağıdaki ilaçlar hastalıkların tedavisi ve önlenmesi için kullanılır: tifo, salmopeloz, dizanteri, kolifaj, stafilokokal faj ve streptokok. Şu anda fajlar, antibiyotiklerle kombinasyon halinde tedavi ve önleme için kullanılmaktadır. Bu uygulama daha fazlasını sağlar etkili eylem antibiyotiğe dirençli bakteriler için.
Teşhis bakteriyofajları, bir hastadan veya enfekte olmuş çevresel nesnelerden izole edilen bakterileri tanımlamak için yaygın olarak kullanılır. Bakteriyofajların yardımıyla, yüksek özgüllükleri nedeniyle, bakteri türlerini ve daha büyük bir doğrulukla bireysel izole edilmiş bakteri türlerini belirlemek mümkündür. Salmonella, Vibrio ve staphylococci cinsi bakterilerin faj teşhisi ve faj tiplemesi geliştirilmiştir. Faj tiplemesi, enfeksiyon kaynağını belirlemeye, epidemiyolojik ilişkileri incelemeye ve sporadik ve salgın hastalık vakalarını ayırt etmeye yardımcı olur.
Faj teşhisi ve faj tiplendirmesi, izole edilmiş bir mikroorganizmanın karşılık gelen türler veya tip fajlarla ortak kültivasyonu ilkesine dayanır. olumlu sonuç incelenen kültürün tür fajıyla ve ardından tipik fajlardan biriyle iyi belirgin bir parçalanmasının varlığı dikkate alınır.
Bakteriyofajlar, tıpta uygulama.
Bakteriyofajlar. Tıbbi uygulamada uygulama.
Bakteriyofajlar, spesifik olarak bakteri hücrelerine nüfuz edebilen, onları çoğaltabilen ve parçalanmaya neden olabilen bakteriyel virüslerdir.
Bakterilerin olduğu her yerde bulunurlar - toprakta, suda, bağırsak kişi. Hepsi fajın doğasında var biyolojik özellikler virüslerin özelliğidir.
faj morfolojisi:
Fajların şekli farklıdır - ipliksi, küresel, kübik, başı ve kuyruğu olan fajlar (bir spermi andırır).
Boyutları küçük, orta ve büyüktür.
Bir baş ve bir kuyruktan oluşan büyük fajlar en karmaşık olanlardır. Kafa bir ikosahedron şeklindedir. Baş, bir yaka ve bir şemsiye yardımıyla işleme bağlanır. İşlemin içinde kafa ile iletişim kuran içi boş silindirik bir çubuk vardır, işlemin dışından büzülme yeteneğine sahip bir protein kılıfı vardır, kaudal işlem, filamentli fibril yapılarının uzandığı kısa sivri uçlu altıgen bir bazal plakada sona erer. Plaka ve sivri uçlar lizozim içerir. Ek, fajın bakteri hücresine sıkı bir şekilde bağlanmasını sağlayan 6 villik içerir. Büzülmeyen kılıflı fajlar, kısa prosesli fajlar, proses analoğu olan fajlar ve prosessiz fajlar olabilir.
Faj direnci: Fajlar 50-60°C sıcaklıkları tolere eder. Donmaya karşı dayanıklıdır, 70 ° C sıcaklıkta yok olur. Siyanür, florür, kloroform ve fenol gibi zehirlerden etkilenmezler. Fajlar kapalı ampullerde iyi korunur, ancak kaynatma, asitlerin etkisi ve UV ışıması ile yok edilebilirler.
Fajların bir mikrobiyal hücre ile etkileşim mekanizması:
Etkileşime göre, virülent ve ılıman fajlar ayırt edilir.
Virülent fajlar - bakteri hücresine girerler, çoğalırlar ve bakterilerin parçalanmasına neden olurlar.
Bir işlem ve büzülen bir kılıfa sahip fajlar için bir dizi özellik vardır:
Bu fajlar, karşılık gelen reseptörlerin varlığında işlemin fibrillerinin yardımıyla bakteri hücresinin yüzeyinde adsorbe edilir. Daha sonra, kaudat işlemin kılıfının kasılmasına ve hücreye içi boş bir çubuğun girmesine yol açan ATP-az enzimi aktive edilir. Hücre duvarlarını delme işleminde bir enzim olan lizozim yer alır.
Faj DNA'sı, büyümenin içi boş gövdesinden geçer ve hücreye enjekte edilir. Kapsid ve işlem hücre yüzeyinde kalır. Daha sonra faj proteini ve nükleik asit hücre içinde çoğaltılır. Sonraki aşama olgun faj parçacıklarının bir araya gelmesi ve oluşumundan oluşur. Son aşama: hücre parçalanması ve ondan olgun faj parçacıklarının salınması. Parçalanma hem içeriden gerçekleşebilir - hücre duvarında bir yırtılma ve olgun fajların salınması vardır. dış ortam ve dışarıdan - fajlar, hücre duvarında hücre içeriğinin dışarı aktığı birçok delik açar, bu tür bir parçalanma ile faj çoğalmaz.
Ilımlı fajlar - popülasyondaki tüm hücreleri parçalamayın, bazı hücrelerle simbiyoz içine girin, bunun sonucunda faj DNA'sı hücre kromozomuna entegre olur. Bu durumda faj genomuna kehanet adı verilir.
Profaj, hücre kromozomunun bir parçası haline gelir ve üremesi sırasında parçalanmasına neden olmadan hücre genomu ile senkronize olarak çoğalır ve yavrulara iletilir.
Bir mikrobiyal hücrenin bir profajla simbiyoz olgusuna lizojeni denir.
Ve profaj içeren bakteri kültürü lizojeniktir, bu isim profajın kendiliğinden veya faktörlerin etkisi altında üreme yeteneğini yansıtır. çevre sitoplazmaya hareket eder ve öldürücü bir faj parçalayıcı bakteri gibi davranır. Bir ılıman faj, öldürücü bir forma geçiş üzerine, bir bakteri hücresinin kromozomunun bir kısmını yakalayabilir ve lizis üzerine bir diğerine aktarılabilir.
Etki spektrumuna göre, fajlar ayrılır:
1. Polivalan - lizise bağlı bakteri (Salmonella faj sadece Salmonella'yı parçalar).
2. Türler (monofajlar) - yalnızca bir türün bakterilerini yok eder.
3. Tipe özgü - bir tür içindeki bakteri varyantlarını seçici olarak parçalayın (patojen Staphylococcus aureus - 33 set).
Pratik kullanım:
Faj preparatları enfeksiyonların tedavisi, önlenmesi ve teşhisi için kullanılır. Fajların eylemi, katı özgüllüklerine dayanır; bir faj preparasyonu elde etmek için üretim suşları ve karşılık gelen bakteri kültürleri kullanılır.
Serbest bırakma formları: sıvı, kuru, tabletler, aerosoller, fitiller şeklinde. Vücuda parenteral, enteral ve lokal olarak verilir. Terapötik ve profilaktik amaçlar için kullanılır çeşitli hastalıklar(dizanteri, kolera, çeşitli iltihaplı iltihaplı hastalıklar).
Faj teşhisi: teşhis ilkesi, test kültürlerinin bilinen ve bilinmeyen fajlarla ortak kültivasyonuna dayanır, bakteriyel hücre lizisinin varlığında pozitif bir sonuç kabul edilir. Lizis sıvı ve katı üzerinde gözlemlenebilir besin ortamı. Sıvı besin ortamlarında, bakteri süspansiyonunun berraklaşması görülür ve yoğun olanlarda büyümenin olmadığı alanlar oluşur.
Faj tipleme: Bir tür faj tipi kullanılarak bir türün tip varyantının belirlenmesi. Tifo fajları, kolera teşhis fajları, salmonella fajları ve dizanteri fajları üretilir. Hastalığın epidemiyolojik analizini yaparken ve bulaşma kaynağını ve yollarını belirlemek için faj tiplemesi gereklidir. Bir fajın saptanmasıyla ilgili mikroorganizmaların içeriği değerlendirilir.
Bakteriler üzerindeki yıkıcı (litik) etkilerinden dolayı fajlar çeşitli hastalıklarda (dizanteri, kolera, çeşitli pyoinflamatuar hastalıklar vb.) terapötik ve profilaktik amaçlarla kullanılabilir. Uluslararası olanlar da dahil olmak üzere standart faj setleri, bir dizi hastalığın (kolera, Tifo, salmonelloz, difteri, stafilokokal ve diğer hastalıklar). Bakteriyofajlar da kullanılır genetik mühendisliği DNA segmentlerini aktaran vektörler olarak, belirli fajlar aracılığıyla bakteriler arasında doğal gen aktarımı (transdüksiyon) da mümkündür. Kural olarak, bu tür hastalara antibiyotik reçete edilir. Ancak sürekli mutasyona uğrayan bakterilerin antibiyotiklere karşı direnç kazanması nedeniyle etkinlikleri son yıllar zayıflamış Bakterileri yok eden virüsler olan bakteriyofajlar araştırmacıların dikkatini çekti. Hem zararlı hem de yok eden antibiyotiklerin aksine sağlıklı mikroflora organizma, bakteriyofajlar seçicidir, sadece patojenik bakteri. Bakteriyofajlar vücutta nasıl çalışır? Yalnızca belirli hücrelere nüfuz ederler ve DNA'larıyla etkileşerek lizojenik veya litik bir etki yaratırlar. Bakteriyofajlar litik tipteki mikroplara etki ederek onları yok eder ve bu da onların hızla çoğalmasını sağlar. Lizojenik tip, faj genomunun bakteri genomuna nüfuz etmesi, bunların sentezi ve bir nesilden diğerine daha fazla geçişidir. Bakteriyofajlar hakkındaki bilgiler, bir asırdan uzun bir süre önce staphylococcus aureus'u tedavi etmek için kullanıldıklarında ortaya çıktı. Şu anda, bağırsak, stafilokok, streptokok, tifo ve diğer birçok enfeksiyonun önlenmesi ve tedavisi için yaygın olarak kullanılmaktadırlar. modern tıp canlı bakteriyofajları değil, parçalayarak patojenik bakteriler üzerinde etkili olan enzimleri kullanan yöntemler arıyor. Uygulamaları burun veya ağız spreyi, diş macunu, gıda, Gıda katkı maddeleri. Bakteriyofaj kullanımının etkinliği, kontrendikasyonların ve komplikasyonların olmaması, diğer ilaçlarla uyumluluk, aktif etki antibiyotiğe dirençli mikroplar için. Bakteriyofajlar bu özelliklerinden dolayı geleceğin ilaçları olarak değerlendirilmektedir. başarılı mücadele enfeksiyonlar ile.
Faj tedavisinin en önemli avantajları şunlardır: yüksek hassasiyet bakteriyofaj için patojenik mikroflora, küçük dozlarda bakteriyofajın ilk kullanım olasılığı, her türlü geleneksel antibiyotik tedavisi ile uyumluluk, faj profilaksisi ve faj tedavisi için kontrendikasyonların olmaması. Doğada bakteriyofajlara mutlak dirençli mikroorganizmaların olmadığı tespit edilmiştir. Bakteriyofaj üremesinin ancak kendisine duyarlı bakterilerin varlığında mümkün olması önemlidir. Enfeksiyöz bir lezyonun odağındaki son mikrobiyal hücrenin ölümünden sonra, şiddetli aktivite ve vücuttan tamamen atılır.
Gözlenen azalma nedeniyle tedavi edici etki bakteriyofajların antibiyotik preparatları kullanılmaktadır. klinik uygulama antibiyotiklere alternatif olarak ve ikincisi ile kombinasyon halinde. Bakteriyofaj preparatları, etkinlik açısından antibakteriyel preparatlardan daha düşük değildir, spesifik ve yerel faktörleri uyarırlar. spesifik olmayan bağışıklık ve yan toksik ve alerjik reaksiyonlara neden olmaz. Bakteriyofajlar ağızdan verilir ve ayrıca yaraların yıkanması, boşaltılmış boşluklara - karın, plevral, sinüs, orta kulak, apseler, yaralar, uterus, mesane - enjeksiyon için kullanılır. Oral ve aerosol uygulamada ve ayrıca mukoza zarının yüzeyine uygulandığında, bakteriyofajlar kana ve lenflere nüfuz eder ve idrar yolunu sterilize ederek böbrekler yoluyla atılır.
Günümüzde cerrahi, üroloji, oftalmoloji ve travmatolojide faj tedavisine olan ilgi yeniden canlanmıştır.
Bakteriyofajların terapötik ve profilaktik preparasyonları, aynı zamanda antibiyotiklere dirençli bakterilere karşı da aktif olan, geniş bir etki yelpazesine sahip poliklonal virülent bakteriyofajlardan oluşur. Sıvı halde, aside dayanıklı kaplamalı tabletlerde fitil, merhem, merhem şeklinde üretilirler.
Bakteriyofaj preparatları, bakteriyel fagolizatların steril bir süzüntüsüdür, yaraların ve mukoza zarlarının irrigasyonu, uterus boşluğuna, mesaneye, kulağa sokulması için ağızdan, topikal olarak uygulanırlar. paranazal sinüsler, ayrıca drene edilmiş boşluklarda - karın, plevral ve ayrıca eksüdanın çıkarılmasından sonra apse boşluğunda.
Bakteriyofajlar hızla kana ve lenflere nüfuz edebilir ve böbrekler yoluyla idrarla atılır. Çalışmalarımızda gösterildiği gibi, 30 ml bakteriyofaj alımından 2 saat sonra idrarda faj partikülleri bulunur ve bunların idrardaki maksimum konsantrasyonu, alımdan 6-8 saat sonra ulaşır.
Pürülan-septik ve enterik hastalıkların patojenlerine karşı terapötik ve profilaktik bakteriyofajların aktivitesi oldukça yüksektir - antibiyotiklere karşı çoklu direnç ile karakterize edilen hastane kökenli suşlar da dahil olmak üzere% 72'den% 90'a. Bakteriyofaj preparatlarının patojenlerin modern atiolojik yapısına uygunluğu, faj ırklarının yenilenmesi ve bakteri damgalarının üretilmesi nedeniyle dolaşımdaki suşlara sürekli adaptasyonları ile sağlanır. Bu özellik fajları diğerlerinden ayırır. antimikrobiyaller- üretim suşlarının veya üretici suşların veya sentezlenen maddenin herhangi bir değişikliğe tabi olmadığı antibiyotikler, eubiyotikler veya aşılar. Bakteriyofaj preparatlarının bu tür plastisitesi, patojenlerin birincil faj direncinin devam etmesini sağlar.
Bakteriyofaj preparatlarının faydaları
Bakteriyofaj preparatlarının avantajları, antibiyotiklerin aksine normal mikrofloranın inhibisyonuna neden olmayan dar bir etki özgüllüğünü içerir. Stafilokokal bakteriyofajın bifidobakteriler üzerindeki uyarıcı etkisi kanıtlanmıştır - temel bileşen bağırsak mikrobiyosenozu. Tedavi için bakteriyofajların kullanımı bulaşıcı hastalıklar kronik tedavisinde özellikle etkili olan spesifik ve spesifik olmayan bağışıklık faktörlerini uyarır. inflamatuar hastalıklar immünosüpresif durumların arka planına karşı, bakteri taşıyıcı.
Deneysel çalışma ve uzun klinik gözlemler virülent bakteriyofajların poliklonal kompleksleri olduklarından, bakteriyofajların terapötik ve profilaktik preparasyonları ile antibiyotiklere ve toksijeniteye dirençli plazmitlerin iletilmesinin imkansızlığı kanıtlanmıştır.
Rusya, BDT ülkeleri, Polonya, Fransa, İspanya'da bakteriyofajlar tıpta ve veterinerlikte yaygın olarak kullanılmaktadır. Birikmiş harika bir deneyim bağırsak enfeksiyonlarının tedavisinde bakteriyofajların kullanımı: faj tedavisinin akut ve kronik dizanteri, taşıyıcıların sanitasyonu ile birlikte salmonelloz. Dizanteri, tifo ve salmonella bakteriyofajlarının profilaktik kullanımının yüksek epidemiyolojik etkinliği, okul öncesi kurumlarda ve okul öncesi kurumlarda yürütülen kontrollü epidemiyolojik deneylerde kanıtlanmıştır. endüstriyel Girişimcilik, insidans oranında 3-6 kat azalma tespit edildi. Bakteriyofajların kullanımı, fırsatçı bakterilerin neden olduğu hastalıkların tedavisinde, dysbacteriosis'te iyi sonuçlar göstermiştir. cerahatli lezyonlar cilt, KBB - organlar, kas-iskelet sistemi, genitoüriner sistem, yenidoğanlarda ve yaşamın ilk yılındaki çocuklarda dahil olmak üzere dolaşım ve solunum organlarının sistemleri.
Faj preparatları ile tedavinin etkinliğini sağlayan önemli bir koşul, patojenin belirli bir faj duyarlılığıdır.
Üroloji Araştırma Enstitüsündeki uzun faj tedavisi deneyimi açıktır; NPO Biofag bünyesindeki üroloji kliniğinde dolaşan hastane suşlarına ticari bakteriyofajların adaptasyonu sonucunda suşların faj duyarlılığı %15 artmış ve en modern yabancı antibiyotiklere duyarlılık düzeyinde veya üzerinde olmuştur. Arka planda uzun süreli kullanım hastanedeki bakteriyofajlar arasında hastane suşları antibiyotik direnci azalırken faj direnci oluşumu gözlenmedi. Faj tedavisinin klinik etkinliği vakaların %92'sinde gözlendi ve sıklıkla antibiyotik tedavisinin sonuçlarını aştı. Bakteriyofaj preparatlarının kullanımında kontrendikasyon ve komplikasyon olmaması, diğerleriyle kombinasyon halinde kullanım olasılığı ilaçlar antibiyotikler, antibiyotiğe dirençli suşlara karşı aktivite ve bakteriyofajların adaptasyonu dahil olmak üzere modern patojenler- tüm bunlar, bakteriyofaj preparatlarını, pürülan-septik ve enterik enfeksiyonların acil tedavisi için oldukça etkili ve umut verici bir araç olarak değerlendirmeyi mümkün kılar. Bununla birlikte, bu "doğal düzenler" olan fajlar, yalnızca tedavi için değil, aynı zamanda bulaşıcı hastalıkların önlenmesi için de kullanılabilir. Hamile kadınlara, emziren annelere ve prematüre bebekler de dahil olmak üzere her yaştaki çocuğa reçete edilebilirler. Başarılı uygulamalarının ana koşulu, izole edilmiş kültürün ilgili faja duyarlılık açısından test edilmesidir. Şaşırtıcı bir model kaydedildi: antibiyotiklerin aksine, mikroorganizmaların klinik suşlarının bakteriyofajlara duyarlılığı stabildir ve zenginleştirme ile açıklanabilecek şekilde artma eğilimindedir. tıbbi müstahzarlar yeni faj ırkları. Tıbbi uygulamaların yanı sıra bakteriyofajlar veteriner hekimlikte de yaygın olarak kullanılmaktadır; ineklerde mastitis tedavisinde özellikle etkili stafilokokal bakteriyofaj. Bakteriyofaj preparatları hastalıklar için ağızdan reçete edilir. iç organlar veya lokal olarak, doğrudan lezyon üzerinde. Fajın etkisi, girişinden 2-4 saat sonra kendini gösterir (bu özellikle yoğun bakımda önemlidir). Bakteriyofajlar kana, lenflere nüfuz eder ve idrar yolunu sterilize ederek böbrekler yoluyla atılır.
Böylece, bakteriyofajlar şunları kullanır:
Veteriner hekimlikte:
önleme ve tedavi bakteriyel hastalıklar kuşlar ve hayvanlar;
gözlerin mukoza zarlarının cerahatli iltihaplı hastalıklarının tedavisi, ağız boşluğu;
yanıklarda, yaralarda, cerrahi müdahalelerde cerahatli iltihaplı komplikasyonların önlenmesi;
Genetik mühendisliğinde:
transdüksiyon için - doğal bulaşma bakteriler arasındaki genler;
DNA bölümlerini aktaran vektörler olarak;
fajları kullanarak konakçı DNA'nın genomunda yönlendirilmiş değişiklikler oluşturmak mümkündür;
Gıda endüstrisinde:
kitlesel ölçekte faj içeren ajanlar halihazırda yemeye hazır et ve kümes hayvanı ürünlerini işliyor;
bakteriyofajlar et, kümes hayvanları, peynir, bitki ürünleri vb. gıda ürünlerinin üretiminde kullanılır;
SANTİMETRE. ZAKHARENKO, Tıp Bilimleri Adayı, Doçent, Askeri tıp akademisi onlara. SANTİMETRE. Kirov, St.Petersburg
Bakteriyofajlar, özellikleri ve özellikleri açısından özel bir terapötik ve profilaktik preparat grubunun oluşturulduğu temelinde benzersiz mikroorganizmalardır. Altta yatan eylemleri doğaldır. fizyolojik mekanizmalar fajlar ve bakteriler arasındaki etkileşimler, hem bakteriyofajların sonsuz çeşitliliğini tahmin etmeyi mümkün kılar hem de olası yollar onların uygulamaları. Bakteriyofaj koleksiyonları genişledikçe, şüphesiz yeni hedef patojenler ortaya çıkacak ve fajların hem monoterapi hem de karmaşık tedavi rejimlerinin bir parçası olarak kullanılabileceği hastalık yelpazesi genişleyecektir.
Evet, kullan çok değerlikli piyobakteriyofaj Enfekte pankreas nekrozunun tedavisinde sekstafaj (Akademisyen E.A. Wagner'in adını taşıyan Perm Devlet Tıp Akademisi), homeostazın ana parametrelerini ve hastalarda organ ve sistemlerin işlevlerini hızlı bir şekilde geri yüklemeyi mümkün kıldı. sayısında da önemli bir azalma olmuştur. ameliyat sonrası komplikasyonlar Ve ölümler: standart tedavi ile tedavi edilen hasta grubunda mortalite %100 iken, BF ile tedavi edilen grupta - %16.6.
BP müstahzarlarının zararsızlığı ve reaktojenitesi nedeniyle, bunları pediatrik uygulama, yenidoğanlarda dahil. Nizhny Novgorod Bölge Çocuklarının deneyimi klinik hastane, epidemiyolojik durumun komplikasyon döneminde, olağan anti-salgın önlemlerin yanı sıra, BP - Intesti-bacteriophage ve BP Pseucfomonas aeruginosa kullanıldı. Pseudomonas aeruginosa etiyolojisinin nozokomiyal enfeksiyon insidansında 11 kat azalma olduğunu göstermiştir. yüksek verim BF uygulamaları. BF preparatları hem disbakteriyoz hem de bozuklukların tedavisi için reçete edilebilir. sindirim sistemi ve fırsatçı bakterilerin gastrointestinal sistemin mukus zarlarında kolonizasyonunu önlemek. BF'nin çok bileşenli preparasyonları, gastrointestinal rahatsızlığın ilk belirtilerinin derhal giderilmesi için idealdir.
Bugüne kadar, şirket planlıyor tüm çizgi terapötik ve profilaktik bakteriyofajların geliştirilmesi ve üretimi için öncelikli alanlar, yeni ortaya çıkan küresel trendlerle ilişkilidir. Yeni preparasyonlar oluşturuluyor ve tanıtılıyor: Tırtıklılara ve enterobakterilere karşı BF geliştirildi, Helicobacter pylori'ye karşı bir faj preparasyonu oluşturmak için çalışmalar devam ediyor.
bilim ve teknoloji bölümü başkan yardımcısının raporuna göre, bu ilaçların yalnızca bir üreticisi NPO Microgen'dir. yenilikçi geliştirme Alla Lobastova, yılda 2 milyondan fazla ambalaj üretiyor. Ne yazık ki birçok doktorun bakteriyofajlar hakkındaki fikirleri objektif olmaktan uzaktır. Aynı patojene karşı aktif olan bakteriyofajların farklı ailelere ait olabileceğini, farklı yaşam döngülerine sahip olabileceğini vb. pek çok kişi bilmez. Örneğin, P. aeruginosa bakteriyofajları Myoviridae, Podoviridae, Siphoviridae, yaşam döngüsü veya ılımlı. Aynı patojenin farklı suşları, bakteriyofajlara karşı farklı duyarlılığa sahip olabilir. Uzmanların çoğu sıvı ve tabletin varlığını biliyor (duymuş, biri kullanmış) dozaj formu bakteriyofajların terapötik ve profilaktik preparatları. Bununla birlikte, aralıkları çok daha geniştir ve bu, özellikle çeşitli uygulama yollarıyla (oral uygulama, lavmanlar, uygulamalar, yaraların ve mukoza zarlarının yıkanması, yara boşluklarına giriş, vb.) kombinasyon halinde koşulsuz avantajlara atfedilebilir. İLE bariz faydalar bakteriyofajlar geleneksel olarak adlandırılır belirli etki oldukça sınırlı bir bakteri popülasyonunda, sınırlı bir süre içinde (mikroorganizmaların hedef popülasyonu yok olana kadar), bu türlerin yokluğunda yan etkiler kadar zehirli ve alerjik reaksiyonlar, disbiyotik reaksiyonlar vb. Bu ilaçlar çeşitli şekillerde kullanılabilir. yaş grupları ve hamilelik sırasında. Bakteriyofajların kendileri önemli alerjenler değildir. Bakteriyofaj preparatlarına karşı intolerans vakaları, çoğunlukla besin ortamının bileşenlerine bir reaksiyon ile ilişkilidir. Bu ilaç grubunun tüm büyük üreticileri, bu tür reaksiyonların olasılığını azaltan, kullanılan bileşenlerin maksimum kalitesi için çaba göstermektedir. Artan antibiyotik direnci bağlamında, bazı yazarlar bakteriyofajların antibiyotiklere en iyi alternatif olarak düşünülmesini önermektedir. Bakteriyofajların terapötik ve profilaktik preparasyonları, özel olarak seçilmiş kombinasyonların bir kokteylidir (bir poliklonal yüksek derecede öldürücü bileşik kompleksi). bakteriyel virüsler, en yaygın patojen gruplarına karşı özel olarak seçilmiştir Bakteriyel enfeksiyonlar) üreticinin faj koleksiyonlarına göre. Federal Devlet Üniter Teşebbüsü NPO Microgen'in Ufa, Perm ve Nijniy Novgorod – modern merkezler bu tür ilaçların üretimi. Özelleştirilmiş oluşturma yeteneği patojenik mikroorganizmalar bakteriyofajların terapötik ve profilaktik preparasyonları, bu preparasyon grubunun diğer bir önemli avantajıdır. Antimikrobiyal ilaçlara karşı bakteriyel direncin artması ve modern bulaşıcı hastalıkların sıklıkla ortaya çıkan polietiyolojisi, kombine antibiyotik tedavisi (iki, üç ve bazen daha fazla antimikrobiyal ilaç) gerektirir. seçim için verimli şema antibiyotiklerle tedavi, bakterilerin ilaca gerçek duyarlılığına ek olarak, yeterince dikkate almak gerekir. Büyük sayı faktörler. Faj tedavisinin bu açıdan da bazı avantajları vardır. Bir yandan, bir bakteriyofaj kombinasyonunun kullanımına, birbirleriyle etkileşimleri eşlik etmez ve uygulama şemalarında bir değişikliğe yol açmaz. Mevcut terapötik bakteriyofaj setinde, kanıtlanmış bir dizi kombinasyon vardır - bakteriyofaj coliproteus, pyobacteriophage polyvalent, intesti-bacteriophage. Öte yandan, bakteriler ortak mekanizmalar antibiyotiklere ve fajlara direnç, bu nedenle hem patojen ilaçlardan birine dirençli olduğunda hem de "antibiyotik + bakteriyofaj" kombinasyonunda kullanılabilirler. Bu kombinasyon özellikle mikrobiyal biyofilmleri yok etmede etkilidir. Deney inandırıcı bir şekilde gösteriyor ki kombine uygulama demir antagonistleri ve bakteriyofaj, biyofilm oluşumunu bozabilir Klebsiella pnömonisi. Aynı zamanda hem mikrobiyal popülasyon sayısında önemli bir azalma hem de "genç" hücre sayısında bir azalma kaydedilmiştir. Bir tane daha önemli özellik bakteriyofajların etkisi, apoptozun indüklenmesi gibi bir olgudur. E. coli'nin bazı suşları, T4 bakteriyofajının içine girmesinden sonra hücre ölümüne neden olan genlere sahiptir. Böylece, T4 fajının geç genlerinin ekspresyonuna yanıt olarak, lit geni (protein sentezi için gerekli olan EF-Tu uzama faktörünü yok eden bir proteazı kodlar) tüm hücresel proteinlerin sentezini bloke eder. prrC geni, lizin tRNA'yı parçalayan bir nükleazı kodlar. Nükleaz, T4 faj stp geninin ürünü tarafından aktive edilir. T4 faj ile enfekte hücrelerde, rex genleri (faj genomuna ait olan ve lizojenik hücrelerde eksprese edilen) iyon kanallarının oluşumuna neden olarak hücreler tarafından hayati iyonların kaybına ve ardından ölüme yol açar. T4 fajının kendisi, rII genlerinin ürünleri olan proteinleri ile kanalları kapatarak hücre ölümünü önleyebilir. Bir antibiyotiğe karşı bakteriyel direnç oluşması durumunda, aktif molekülü veya temelde yeni maddeleri değiştirmek için yeni seçenekler aranmalıdır. Ne yazık ki, son yıllarda yeni antibiyotiklerin piyasaya sürülme hızı önemli ölçüde yavaşladı. Bakteriyofajlarla ilgili durum temelde farklıdır. Büyük üreticilerin koleksiyonları düzinelerce hazır bakteriyofaj suşu içerir ve sürekli olarak yeni aktif fajlarla doldurulur. İzole edilmiş patojenlerin bakteriyofajlara duyarlılığının sürekli izlenmesi sayesinde, üreticiler bölgelere sağlanan faj bileşimlerini ayarlar. Adapte edilmiş bakteriyofajlar sayesinde, antibiyotiğe dirençli suşların neden olduğu nozokomiyal enfeksiyon salgınlarını ortadan kaldırmak mümkündür. 
-de Oral alım bakteriyofajlar hızla enfeksiyon odaklarına ulaşır lokalizasyon: pürülan iltihaplı hastalıkları olan hastalar tarafından ağızdan alındığında, bir saat sonra fajlar kan dolaşımına girer, 1-1.5 saat sonra bronkopulmoner eksüdadan ve yanık yaralarının yüzeyinden, 2 sonra tespit edilir. saat - idrardan ve ayrıca travmatik beyin hasarı olan hastaların beyin omurilik sıvısından.
Bu nedenle, bakteriyofajlar, özellikleri ve özellikleri açısından özel bir terapötik ve profilaktik preparat grubunun oluşturulduğu temelinde benzersiz mikroorganizmalardır. Fajlar ve bakteriler arasındaki etkileşimin altında yatan doğal fizyolojik mekanizmalar, hem bakteriyofajların sonsuz çeşitliliğini hem de onları kullanmanın olası yollarını tahmin etmeyi mümkün kılar. Bakteriyofaj koleksiyonları genişledikçe, şüphesiz yeni hedef patojenler ortaya çıkacak ve fajların hem monoterapi hem de karmaşık tedavi rejimlerinin bir parçası olarak kullanılabileceği hastalık yelpazesi genişleyecektir. Faj tedavisinin gelecekteki kaderine ilişkin modern bir görüş, hem eylemlerinin yüksek özgüllüğüne hem de faj tedavisinin tüm kurallarına sıkı sıkıya uyma ihtiyacına dayanmalıdır. Bakteriyofajları herhangi bir etiyotropik tedavi yöntemiyle karşılaştırmak hatalıdır.
Fajların pratik uygulaması. Bakteriyofajlar, bakterilerin intraspesifik tanımlanması sırasında enfeksiyonların laboratuvar tanısında, yani fagovarın (faj tipi) belirlenmesinde kullanılır. Bunu yapmak için, fajların etkisinin katı özgüllüğüne dayanan faj tiplendirme yöntemi kullanılır: saf bir kültürün "çimi" ile tohumlanmış yoğun bir besin ortamına sahip bir bardağa çeşitli teşhis tipine özgü faj damlaları uygulanır. patojenin. Bir bakterinin faj fajı, parçalanmasına neden olan faj tipine göre belirlenir (steril bir lekenin oluşumu, "plak" veya "negatif koloni", faj). Faj tiplendirme tekniği, enfeksiyonun kaynağını ve yayılma yollarını (epidemiyolojik işaretleme) belirlemek için kullanılır. Farklı hastalardan aynı fagovarın bakterilerinin izolasyonu, enfeksiyonlarının ortak bir kaynağını gösterir.
Fajlar ayrıca bir dizi bakteriyel enfeksiyonu tedavi etmek ve önlemek için kullanılır. Tifo, salmonella, dizanteri, psödomonas, stafilokok, streptokok fajları üretirler ve kombine müstahzarlar(koliproteik, piyobakteriyofajlar, vb.). Bakteriyofajlar, endikasyonlara göre oral, parenteral veya topikal olarak sıvı, tablet formları, fitiller veya aerosoller şeklinde reçete edilir.
Bakteriyofajlar, rekombinant DNA elde etmek için vektörler olarak genetik mühendisliği ve biyoteknolojide yaygın olarak kullanılmaktadır.
Pratikte kullanılan bakteriyofaj preparasyonları, bir faj tarafından parçalanan karşılık gelen mikropların, canlı faj partiküllerini ve ayrıca parçalanmaları sırasında bakteri hücrelerinden salınan çözünmüş bakteriyel antijenleri içeren bir et suyu kültürünün bir süzüntüsüdür. Elde edilen müstahzar - sıvı bir bakteriyofaj, tamamen bir sıvı gibi görünmelidir. temiz sıvı sarı renk daha fazla veya daha az yoğunluk.
Terapötik ve profilaktik amaçlar için fajlar, aside dirençli bir kaplamaya sahip tabletler şeklinde üretilebilir. Tabletlenmiş kuru faj, depolama sırasında daha kararlıdır ve kullanımı uygundur. Bir tablet kuru bakteriyofaj, 20-25 ml sıvı preparasyona karşılık gelir. Kuru ve sıvı müstahzarın raf ömrü 1 yıldır. sıvı bakteriyofaj+ 2 +10 C sıcaklıkta, kuru - +1 ° C'den yüksek olmamalıdır, ancak buzdolabında ve negatif sıcaklıkta saklanabilir.
Ağızdan alınan bakteriyofaj vücutta 5-7 gün kalır. Kural olarak, bakteriyofaj alımına herhangi bir reaksiyon veya komplikasyon eşlik etmez. Kabul için herhangi bir kontrendikasyon yoktur. Sulamalar, durulamalar, losyonlar, tamponlar, enjeksiyonlar şeklinde kullanılırlar ve ayrıca boşluklara enjekte edilirler - karın, plevral, eklem ve mesane, patojenin konumuna bağlı olarak.
Teşhis fajları ampullerde hem sıvı hem de kuru formda üretilir.Çalışmaya başlamadan önce kuru bakteriyofaj seyreltilir. Ampullerde titre, tr, DRT (çalışma titresi dozu) belirtilmişse, faj lizabilite testinde (Otto yöntemi) bakterileri tanımlamak için kullanılır, faj tipi belirtilmişse, o zaman faj tiplemesi için - kaynağı belirlemek için enfeksiyon.
Bir bakteriyofajın sıvı bir ortamda ve yoğun bir ortamda bir mikrobiyal kültür üzerindeki etkisi
Otto'nun Yöntemi (Düşen Damla)
İncelenen mahsulün yoğun bir ekim çimini yapın. Ekimden 5-10 dakika sonra, besiyerinin kurutulmuş yüzeyine sıvı bir tanısal faj uygulanır. Kap, faj damlasının agarın yüzeyine yayılması için hafifçe eğilir. Bardak, 18-24 saat boyunca bir termostata yerleştirilir. Sonuç hesaplandı toplam yokluk faj damlacık uygulama yerinde kültür büyümesi.
Sıvı bir besin ortamı üzerinde deney
İncelenen kültürün ekimini sıvı ortamlı iki test tüpünde yapın. Tanısal bir bakteriyofaj, bir test tüpüne ("O") bir döngü halinde eklenir. Bakteriyofajın eklenmediği ("K") bir test tüpünde 18-20 saat sonra, et suyunda güçlü bir bulanıklık gözlenir - tohumlanmış kültür büyümüştür. Bakteriyofajın eklendiği test tüpündeki sıvı, etkisi altındaki kültürün parçalanması nedeniyle şeffaf kaldı.
Bakterilerin faj tiplemesi
Etki spektrumuna göre, aşağıdaki bakteriyofajlar ayırt edilir: polivalan, parçalayıcı bakteri türleri; tek değerli, parçalayıcı bakteri belirli bir tür; tipik, ayrı ayrı bakteri türlerini (varyantlarını) parçalayan.
Örneğin, bir patojenik stafilokok suşu birkaç tip faj tarafından parçalanabilir, dolayısıyla tüm tipik fajlar (24) ve suşlar patojenik stafilokoklar 4 grup halinde toplanmıştır.
Faj tipleme yöntemi, büyük önem patojenlerin yayılmasının kaynağını ve yollarını belirlemeye izin verdiği için epidemiyolojik araştırmalar için. Bu amaçla patolojik materyalden izole edilen fagovar belirlenir. saf kültür tipik teşhis fajları kullanılarak yoğun besleyici ortam üzerinde.
Mikroorganizma kültürünün fagovarı, parçalanmasına neden olan fag tipine göre belirlenir.Aynı fagovarın bakterilerinin farklı deneklerden izolasyonu, enfeksiyon kaynağını gösterir.
