Bakteriofágok alkalmazása az orvostudományban. Bakteriofágok és gyakorlati alkalmazásuk bakteriofágok
A fágkészítményeket fertőző betegségek kezelésére, megelőzésére, valamint diagnosztikában - a mikroorganizmusok azonosításában a fágérzékenység és fágtipizálás meghatározására használják. A fágok működése szigorú specifikusságukon alapul. A fágok terápiás és profilaktikus hatását magának a fágnak a lítikus aktivitása, valamint a fagolizátumokban található elpusztult mikrobasejtek komponenseinek (antigének) immunizáló tulajdonsága határozza meg, különösen ismételt felhasználás esetén. A fágkészítmények előállítása során a fágok bevált termelő törzseit és ennek megfelelően tipikus mikroorganizmus-tenyészeteket használnak. A szaporodás logaritmikus fázisában lévő, folyékony tápközegben lévő baktériumtenyészetet megfertőzik a fág méhszuszpenziójával.
A fággal lizált tenyészetet (általában másnap) bakteriális szűrőkön átszűrjük, és a fágot tartalmazó szűrlethez tartósítószerként kinozololdatot adunk.
Kész gyógyszer A fág tiszta folyadék sárgás színű. A hosszabb tárolás érdekében néhány fág száraz formában (tablettában) kapható. A kezelésben és a megelőzésben bélfertőzések A fágokat nátrium-hidrogén-karbonát oldattal egyidejűleg használják, mivel a gyomor savas tartalma elpusztítja a fágot. A fág nem marad meg sokáig a szervezetben (5-7 napig), ezért ajánlott újra felhasználni.
A Szovjetunióban gyártották a következő gyógyszereket, betegségek kezelésére és megelőzésére használják: tífusz, szalmonella, vérhas, coliphage, staphylococcus fág és streptococcus. Jelenleg a fágokat antibiotikumokkal kombinálva kezelésre és megelőzésre használják. Ez az alkalmazás több hatékony fellépés a baktériumok antibiotikum-rezisztens formáihoz.
A diagnosztikai bakteriofágokat széles körben használják a betegekből vagy fertőzött környezeti tárgyakból izolált baktériumok azonosítására. A bakteriofágok segítségével nagy specificitásuk miatt lehetőség nyílik a baktériumok típusainak, illetve nagyobb pontossággal az izolált baktériumok egyedi típusainak meghatározására. Jelenleg a Salmonella, Vibrio és Staphylococcusok nemzetségébe tartozó baktériumok fágdiagnosztikáját és fágtipizálását fejlesztették ki. A fágtipizálás segít meghatározni a fertőzés forrását, tanulmányozni az epidemiológiai összefüggéseket, és megkülönböztetni a szórványos betegségeket a járványostól.
A fágdiagnosztika és a fágtipizálás az izolált mikroorganizmus és a megfelelő faj vagy típusú fág együttes tenyésztésének elvén alapul. Pozitív eredményÚgy véljük, hogy a vizsgált kultúra jól körülhatárolható lízise megy végbe a faj fágjával, majd az egyik tipikus fággal.
Bakteriofágok, alkalmazás az orvostudományban.
Bakteriofágok. Alkalmazása az orvosi gyakorlatban.
A bakteriofágok olyan bakteriális vírusok, amelyek képesek specifikusan behatolni a baktériumsejtekbe, szaporodni és lízist okozni.
Mindenütt megtalálhatók, ahol baktériumok léteznek - talajban, vízben, béltraktus személy. Mindegyik a fág velejárója biológiai jellemzők, amelyek a vírusokra jellemzőek.
A fágok morfológiája:
A fágok alakja változatos – fonalas, gömb alakú, köbös, fejjel és farokkal rendelkező fágok (spermére hasonlítanak).
Méret szerint - kicsi, közepes és nagy.
A legösszetettebb szerkezetek a nagy fágok, amelyek fejből és farokból állnak. A fej ikozaéder alakú. A fej egy gallér és egy esernyő segítségével kapcsolódik a folyamathoz. A folyamat belsejében egy üreges hengeres rúd található, amely a fejjel kommunikál, kívül a folyamat összehúzódásra képes fehérjehüvellyel rendelkezik, a faroknyúlvány egy hatszögletű, rövid tüskékkel rendelkező alaplemezben végződik, amelyből fonalszerű rostszerkezetek nyúlnak ki. . A lemez és a tüskék lizozimot tartalmaznak. A folyamatnak 6 bolyhja van, amelyek biztosítják a fág szoros rögzítését a baktériumsejthez. Lehetnek fágok nem összehúzódó burkolattal, fágok rövid folyamatokkal, fágok analóg eljárással és fágok folyamat nélkül.
Fágrezisztencia: a fágok 50-60°C hőmérsékletet tolerálnak. Kibírják a fagyást és 70°C-os hőmérsékleten elpusztulnak. Nem hatnak rájuk olyan mérgek, mint a cianid, fluor, valamint a kloroform és a fenol. A fágok jól megőrződnek lezárt ampullákban, de forralással, savakkal vagy UV-besugárzással elpusztíthatók.
A fágok és a mikrobiális sejt kölcsönhatásának mechanizmusa:
Kölcsönhatásuk alapján virulens és mérsékelt égövi fágokat különböztetnek meg.
Virulens fágok - behatolnak a baktériumsejtbe, szaporodnak és a baktériumok lízisét okozzák.
A folyamattal és összehúzódó burkolattal rendelkező fágok számos tulajdonsággal rendelkeznek:
Ezek a fágok folyamatfibrillumok segítségével adszorbeálódnak a baktériumsejt felszínén, megfelelő receptorok jelenlétében. Ezután az ATPáz enzim aktiválódik, ami a caudatus folyamat hüvelyének összehúzódásához és egy üreges rúd bejutásához vezet a sejtbe. Egy enzim, a lizozim, részt vesz a sejtfalak átszúrásának folyamatában.
A fág DNS áthalad a függelék üreges tengelyén, és befecskendezik a sejtbe. A kapszid és a folyamat a sejtfelszínen marad. Ezután a fágfehérje és a nukleinsav szaporodik a sejtben. Következő szintérett fágrészecskék összeállításából és képződéséből áll. Az utolsó szakasz: a sejt lízise és az érett fágrészecskék felszabadulása belőle. A lízis belülről is megtörténhet - a sejtfal megreped és az érett fágok kilépnek a sejtbe külső környezetés kívülről - a fágok sok lyukat képeznek a sejtfalon, amelyeken keresztül a sejt tartalma kiáramlik; ilyen lízissel a fág nem szaporodik.
A mérsékelt fágok nem lizálják a populáció összes sejtjét, egyes sejtekkel szimbiózisba lépnek, aminek eredményeként a fág DNS beépül a sejtkromoszómába. Ebben az esetben a fág genomját profágnak nevezik.
A prófág a sejt kromoszómájának részévé válik, és szaporodása során szinkronban replikálódik a sejt genomjával anélkül, hogy lízist okozna, és továbbadódik az utódoknak.
A mikrobiális sejt és a profág szimbiózisának jelenségét lizogénnek nevezzük.
A profágot tartalmazó baktériumok tenyészete pedig lizogén, ez a név tükrözi a profág képességét spontán vagy tényezők hatására környezet bejutnak a citoplazmába, és úgy viselkednek, mint egy virulens fág, amely lizálja a baktériumokat. A mérsékelt égövi fág virulens formába való áttéréskor meg tudja ragadni egy baktériumsejt kromoszómájának egy részét, és líziskor átviheti egy másikba.
A fágokat hatásspektrumuk szerint osztják fel:
1. Polivalens - lízissel rokon baktériumok (a szalmonella fág csak a szalmonellát lizálja).
2.Fajok (monofágok) - csak egy faj lizáló baktériumai.
3. Típusspecifikus - szelektíven lizálja a baktériumok egyedi változatait egy fajon belül (kórokozó Staphylococcus - 33 készlet).
Gyakorlati használat:
A fágkészítmények a fertőzések kezelésére, megelőzésére és diagnosztizálására szolgálnak. A fágok hatása szigorú specifitásukon alapul, a fágkészítmény előállításához ipari törzseket és megfelelő baktériumtenyészeteket használnak.
Felszabadulási formák: folyékony, száraz, tabletták, aeroszolok, kúpok. Parenterálisan, enterálisan és lokálisan kerülnek a szervezetbe. Terápiás és profilaktikus célokra használják különféle betegségek(dizentéria, kolera, különféle gennyes-gyulladásos betegségek).
Fágdiagnosztika: a diagnosztikai elv a teszttenyészetek ismert és ismeretlen fágokkal való együttes tenyésztésén alapul; az eredmény akkor tekinthető pozitívnak, ha a baktériumsejt lízise tapasztalható. A lízis folyékony és szilárd felületen is megfigyelhető tápközeg. A folyékony táptalajokon a baktériumszuszpenzió kiürülése jelenik meg, a sűrű táptalajokon pedig növekedési hiányos területek alakulnak ki.
Fágtipizálás: egy faj típusváltozatának meghatározása típusfágkészlet segítségével. Tífusz fágok, kolera diagnosztizálására szolgáló fágok, szalmonella fágok és vérhas fágok termelődnek. A fág tipizálása szükséges a betegség epidemiológiai elemzése során, valamint a fertőzés forrásának és útvonalának megállapításához. A fág kimutatásával a megfelelő mikroorganizmusok tartalmát ítéljük meg.
A fágok a baktériumokat pusztító (lítikus) hatásuk miatt terápiás és profilaktikus célokra felhasználhatók különféle betegségek (dizentéria, kolera, különféle gennyes-gyulladásos betegségek stb.) kezelésére. A standard fágkészleteket, beleértve a nemzetközieket is, számos betegség (kolera, tífusz szalmonellózis, diftéria, staphylococcus és egyéb betegségek). Bakteriofágokat is használnak génmanipuláció DNS-szakaszokat átvivő vektorokként a baktériumok közötti természetes génátvitel bizonyos fágokon keresztül (transzdukció) is lehetséges. Általában az ilyen betegeknek antibiotikumokat írnak fel. De mivel a folyamatosan mutáló baktériumok rezisztenssé válnak az antibiotikumokkal szemben, hatékonyságuk korlátozott. utóbbi évek legyengült. A kutatók figyelmét a bakteriofágok – a baktériumokat felfaló vírusok – keltették fel. Ellentétben az antibiotikumokkal, amelyek elpusztítják mind a káros ill egészséges mikroflóra szervezet, a bakteriofágok szelektívek, csak hatnak patogén baktériumok. Hogyan hatnak a bakteriofágok a szervezetben? Csak bizonyos sejtekbe hatolnak be, és kölcsönhatásba lépnek a DNS-ükkel, lizogén vagy litikus hatást hozva létre. A lítikus típusú mikrobák befolyásolásával a bakteriofágok elpusztítják őket, ami lehetővé teszi számukra, hogy gyorsan szaporodjanak. A lizogén típus a fággenom behatolását jelenti a bakteriális genomba, szintézisét és további átmenetét egyik generációról a másikra. A bakteriofágokról szóló információk több mint egy évszázaddal ezelőtt jelentek meg, amikor staphylococcus kezelésére használták őket. Jelenleg széles körben használják bél-, staphylococcus-, streptococcus-, tífusz- és sok más fertőzés megelőzésére és kezelésére. Modern orvosság olyan módszereket keres, amelyek nem élő bakteriofágokat, hanem olyan enzimeket használnak, amelyek lízis útján befolyásolják a patogén baktériumokat. Felhasználásuk lehet orrspray vagy szájspray, fogkrém, élelmiszer, élelmiszer-adalékok. A bakteriofágok használatának hatékonysága az ellenjavallatok és szövődmények hiányában, más gyógyszerekkel való kompatibilitásban rejlik, aktív befolyás antibiotikum-rezisztens mikrobák számára. Ezeknek a tulajdonságoknak köszönhetően a bakteriofágokat a jövőbeni gyógyszerként értékelik sikeres küzdelem fertőzésekkel.
A fágterápia legfontosabb előnyei a nagy érzékenység a bakteriofág patogén mikroflórája, a bakteriofág kezdeti kis dózisainak alkalmazásának lehetősége, a hagyományos antibakteriális terápia minden típusával való kompatibilitás, a fágprofilaxis és a fágterápia ellenjavallatának hiánya. Megállapítást nyert, hogy a természetben nincs olyan mikroorganizmus, amely abszolút rezisztens lenne a bakteriofággal szemben. Fontos, hogy a bakteriofág szaporodása csak az arra érzékeny baktériumok jelenlétében lehetséges. A fertőző elváltozás fókuszában lévő utolsó mikrobasejt elpusztulása után leállítja azt aktív munkaés nyom nélkül kiürül a szervezetből.
A megfigyelt csökkenés miatt terápiás hatás antibiotikumokat, bakteriofág készítményeket használnak klinikai gyakorlat az antibiotikumok alternatívájaként és az utóbbiakkal kombinálva. A bakteriofág készítmények hatékonyságukban nem rosszabbak az antibakteriális gyógyszereknél, stimulálják a specifikus és a helyi tényezőket. nem specifikus immunitásés nem okoznak káros toxikus vagy allergiás reakciókat. A bakteriofágokat szájon át írják fel, és sebek öblítésére, kiürített üregekbe - hasi, pleurális, sinus üregekbe, középfül, tályogok, sebek, méh, hólyag - való bejuttatásra is használják. Szájon át és aeroszollal történő beadáskor, valamint a nyálkahártyák felületére alkalmazva a bakteriofágok behatolnak a vérbe és a nyirokba, és a vesén keresztül ürülnek ki, fertőtlenítve a húgyutakat.
Jelenleg a sebészet, az urológia, a szemészet és a traumatológia területén megújult az érdeklődés a fágterápia iránt.
A bakteriofágok terápiás és profilaktikus készítményei poliklonális virulens bakteriofágokból állnak, amelyek széles hatásspektrummal rendelkeznek, és aktívak az antibiotikumokkal szemben rezisztens baktériumok ellen. Folyékony formában, saválló tablettákban, kúpok, kenőcsök és linimentek formájában állítják elő.
A bakteriofág készítmények a bakteriális fagolizátumok steril szűrlete; szájon át, helyileg sebek és nyálkahártyák öblítésére, a méh, hólyag, fül üregeibe való bejuttatásra, orrmelléküregek, valamint a drénezett üregekben - hasi, pleurális, valamint tályogos üregekben a váladék eltávolítása után.
A bakteriofágok gyorsan képesek behatolni a vérbe és a nyirokba, és a vesén keresztül a vizelettel ürülnek ki. Vizsgálataink szerint 30 ml bakteriofág bevétele után a fágrészecskék 2 órán belül kimutathatók a vizeletben, maximális koncentrációjuk a beadás után 6-8 órával érhető el a vizeletben.
A terápiás és profilaktikus bakteriofágok aktivitása a purulens-szeptikus és enterális betegségek kórokozói ellen meglehetősen magas - 72% és 90% között van, beleértve a kórházi eredetű törzseket is, amelyeket többszörös antibiotikum-rezisztencia jellemez. A bakteriofág preparátumoknak a kórokozók modern atiológiai szerkezetének való megfelelését úgy érik el, hogy a fágfajok megújulása és a bakteriális bélyegek termelődése miatt folyamatosan alkalmazkodnak a keringő törzsekhez. Ez a tulajdonság megkülönbözteti a fágokat másoktól antimikrobiális szerek- antibiotikumok, eubiotikumok vagy vakcinák, ahol a termelő törzsek vagy termelő törzsek, illetve a szintetizált anyag semmilyen módosításon nem esnek át. A bakteriofág készítményeknek ez a plaszticitása biztosítja a kórokozók elsődleges fágrezisztenciájának fennmaradását.
A bakteriofág gyógyszerek előnyei
A bakteriofág gyógyszerek előnyei közé tartozik a szűk specifikus hatás, amely az antibiotikumokkal ellentétben nem gátolja a normál mikroflórát. A staphylococcus bakteriofág bifidobaktériumokra kifejtett serkentő hatása bizonyított - lényeges komponens bél mikrobiocenózis. Bakteriofágok alkalmazása kezelésre fertőző betegségek serkenti a specifikus és nem specifikus immunitás tényezőit, ami különösen hatékony a krónikus betegségek kezelésében gyulladásos betegségek immunszuppresszív állapotok, baktériumhordozás hátterében.
Kísérleti munka és hosszú távú klinikai megfigyelések Bebizonyosodott, hogy a bakteriofágok terápiás és profilaktikus gyógyszereivel nem lehet antibiotikum-rezisztencia és toxigenitás plazmidjait átvinni, mivel ezek virulens bakteriofágok poliklonális komplexei.
Oroszországban, a FÁK-országokban, Lengyelországban, Franciaországban és Spanyolországban a bakteriofágokat széles körben használják az orvostudományban és az állatgyógyászatban. Felgyülemlett nagyszerű tapasztalat bakteriofágok alkalmazása bélfertőzések kezelésében: a fágterápia magas klinikai hatékonysága akut és krónikus vérhas, szalmonellózis, a hordozók fertőtlenítésével együtt. A dizentéria, tífusz és szalmonella bakteriofágok profilaktikus alkalmazásának magas járványügyi hatékonysága igazolt Az óvodai intézetekben, ill. ipari vállalkozások, az előfordulási arány 3-6-szoros csökkenését állapították meg. A bakteriofágok alkalmazása jó eredményeket mutatott az opportunista baktériumok által okozott betegségek, a dysbiosis, gennyes elváltozások bőr, fül-orr-gégészet, mozgásszervi rendszer, urogenitális rendszer, keringési és légzőrendszeri betegségek, beleértve az újszülötteket és az első életévben élő gyermekeket is.
A fágkészítményekkel történő kezelés hatékonyságát biztosító fontos feltétel a kórokozó bizonyos fágérzékenysége.
Az Urológiai Kutatóintézet fágterápia terén szerzett hosszú tapasztalata nyilvánvaló; Az NPO „Biophage” urológiai klinikáján keringő kórházi törzsekhez való, kereskedelmi forgalomban kapható bakteriofágok adaptációja eredményeként a törzsek fágérzékenysége 15%-kal nőtt, és a legmodernebb külföldi antibiotikumokkal szembeni érzékenység szintjén vagy magasabb volt. A háttérben hosszú távú használat bakteriofágok a kórházban között kórházi törzsek fág rezisztencia kialakulását nem figyelték meg, míg az antibiotikumokkal szembeni rezisztencia csökkent. A fágterápia klinikai hatékonysága az esetek 92%-ában volt megfigyelhető, gyakran felülmúlva az antibiotikum-terápia eredményeit. Az ellenjavallatok és szövődmények hiánya a bakteriofág készítmények alkalmazásakor, más gyógyszerekkel kombinálva történő alkalmazásuk lehetősége gyógyszerek, beleértve az antibiotikumokat is, az antibiotikum-rezisztens törzsek elleni aktivitás és a bakteriofágok adaptációja modern kórokozók- mindez lehetővé teszi, hogy a bakteriofág készítményeket rendkívül hatékony és ígéretes eszközként értékeljük a gennyes-szeptikus és enterális fertőzések sürgősségi kezelésében. A fágok, ezek a „természetes rendek” azonban nemcsak kezelésre, hanem fertőző betegségek megelőzésére is használhatók. Felírhatók terhes, szoptató anyáknak és bármilyen korú gyermeknek, beleértve a koraszülötteket is. Sikeres alkalmazásuk fő feltétele az izolált tenyészet megfelelő fágra való érzékenységének vizsgálata. Elképesztő mintát figyeltek meg: az antibiotikumokkal ellentétben a mikroorganizmusok klinikai törzseinek bakteriofágokkal szembeni érzékenysége stabil és növekszik, ami a dúsítással magyarázható. gyógyhatású gyógyszerek a fágok új fajai. Az orvosi alkalmazások mellett a bakteriofágokat széles körben használják az állatgyógyászatban is; A Staphylococcus bakteriofág különösen hatékony a tehenek tőgygyulladásának kezelésében. Betegségek esetén a bakteriofág készítményeket szájon át írják fel belső szervek vagy lokálisan, közvetlenül a lézióba. A fág hatása a beadást követő 2-4 órán belül jelentkezik (ami intenzív terápiás körülmények között különösen fontos). A bakteriofágok behatolnak a vérbe, a nyirokba, és a vesén keresztül ürülnek ki, fertőtlenítve a húgyutakat.
Így a bakteriofágok a következőket használják:
Az állatgyógyászatban:
megelőzés és kezelés bakteriális betegségek madarak és állatok;
a szem nyálkahártyájának és a szájüreg gennyes-gyulladásos betegségeinek kezelése;
égési sérülések, sebek, sebészeti beavatkozások gennyes-gyulladásos szövődményeinek megelőzése;
A géntechnológiában:
transzdukcióhoz - természetes átvitel baktériumok közötti gének;
mint DNS-szakaszokat átvivő vektorok;
fágok használatával lehetőség nyílik a gazda DNS genomjában célzott változtatások tervezésére;
Az élelmiszeriparban:
a fogyasztásra kész hús- és baromfitermékeket már tömegesen dolgozzák fel fágtartalmú szerekkel;
a bakteriofágokat élelmiszeripari termékek előállításához használják húsból, baromfihúsból, sajtból, növényi termékekből stb.;
CM. ZAKHARENKO, Ph.D., egyetemi docens, Katonai orvosi akadémiaőket. CM. Kirov, Szentpétervár
A bakteriofágok egyedülálló mikroorganizmusok, amelyek alapján speciális tulajdonságokkal és jellemzőkkel rendelkező terápiás és profilaktikus gyógyszerek csoportja jött létre. Mögöttes tetteik természetesek élettani mechanizmusok A fágok és baktériumok közötti kölcsönhatások lehetővé teszik maguknak a bakteriofágoknak és a baktériumok végtelen sokféleségének előrejelzését. lehetséges módjai alkalmazásaik. A bakteriofágok gyűjteményének bővülésével kétségtelenül új célkórokozók jelennek meg, és bővül azoknak a betegségeknek a köre, amelyeknél a fágok monoterápiaként és komplex kezelési rendek részeként is alkalmazhatók.
Igen, használd polivalens piobakteriofág A fertőzött hasnyálmirigy-elhalás kezelésében alkalmazott szextafág (E. A. Wagner akadémikusról elnevezett Perm Állami Orvostudományi Akadémia) lehetővé tette a betegek homeosztázisának, valamint a szervek és rendszerek működésének alapvető paramétereinek gyorsabb helyreállítását. A számban is jelentős csökkenés következett be posztoperatív szövődményekÉs halálozások: a standard terápiában részesülő betegek csoportjában a mortalitás 100%, míg a BF-ben részesülő csoportban 16,6%.
A BF-gyógyszerek ártalmatlansága és reaktogenitása miatt felhasználásuk a gyermekorvosi gyakorlat, beleértve az újszülötteket is. Érdekesek a Nyizsnyij Novgorod regionális gyermekiskola tapasztalatai klinikai kórház, ahol a járványügyi helyzet szövődményeinek időszakában a szokásos járványellenes intézkedések mellett mind a BF - Intesti-bacteriophage, mind a BF Pseucfomonas aeruginosa alkalmazását alkalmazták. 11-szeres csökkenést mutatott a pseudomonas etiológiájú nozokomiális fertőzések előfordulása magas hatásfok BF alkalmazása. A dysbiosis és rendellenességek kezelésére BF-gyógyszerek írhatók fel emésztőrendszer, valamint a gyomor-bél traktus nyálkahártyájának opportunista baktériumok általi megtelepedésének megakadályozására. A többkomponensű BF készítmények ideálisak a gyomor-bélrendszeri szorongás első jeleinek azonnali enyhítésére.
A mai napig a vállalkozás tervezett egész sor a terápiás és profilaktikus bakteriofágok fejlesztésének és előállításának kiemelt területei, amelyek korrelálnak az újonnan megjelenő globális trendekkel. Új gyógyszereket hoznak létre és vezetnek be: fogazat és enterobaktériumok ellen BF-eket fejlesztettek ki, és folyamatban van a Helicobacter pylori elleni fág gyógyszer létrehozása.
Ezeknek a gyógyszereknek egyetlen gyártója az NPO Microgen – derül ki a tudományos osztályvezető-helyettes beszámolójából. innovatív fejlesztés Alla Lobastova, évente több mint 2 millió csomagot gyárt. Sajnos sok orvosnak a bakteriofágokkal kapcsolatos elképzelése messze nem objektív. Kevesen tudják, hogy egyazon kórokozó ellen aktív bakteriofágok különböző családokba tartozhatnak, eltérő életciklusúak stb. A P. aeruginosa bakteriofágok például a Myoviridae, Podoviridae, Siphoviridae családokba tartoznak, és lítikus hatással rendelkeznek. életciklus vagy mérsékelten. Ugyanazon kórokozó különböző törzsei eltérően érzékenyek a bakteriofágokra. A legtöbb szakember tud (hallott, valaki használt) a folyadék és a tabletta létezéséről dózisforma bakteriofágok terápiás és profilaktikus gyógyszerei. A kínálatuk azonban lényegesen szélesebb, ami abszolút előnynek tekinthető, különösen sokféle beadási móddal kombinálva (szájon át történő beadás, beöntésben történő beadás, alkalmazás, sebek és nyálkahártyák öblítése, sebüregbe történő beadás stb.). ). NAK NEK nyilvánvaló előnyök A bakteriofágokat hagyományosan az alábbiak szerint osztályozzák specifikus hatás meglehetősen korlátozott baktériumpopulációnak, időkorlátos létezés (amíg a mikroorganizmusok célpopulációja el nem tűnik), ilyenek hiánya mellékhatások mint mérgező és allergiás reakciók, dysbiotikus reakciók stb. Ezek a gyógyszerek különféle esetekben alkalmazhatók korcsoportokés terhesség alatt. Maguk a bakteriofágok nem jelentős allergének. A bakteriofág gyógyszerekkel szembeni intolerancia esetei többnyire a tápközeg összetevőire adott reakcióhoz kapcsolódnak. Ennek a gyógyszercsoportnak minden nagyobb gyártója a felhasznált komponensek maximális minőségére törekszik, ami csökkenti az ilyen reakciók valószínűségét. Az antibiotikum-rezisztencia növekedésével összefüggésben egyes szerzők azt javasolják, hogy a bakteriofágokat tekintsék az antibiotikumok legjobb alternatívájának. A bakteriofágok terápiás és profilaktikus gyógyszerei speciálisan kiválasztott kombinációk koktéljai (nagyon virulens poliklonális komplexek). bakteriális vírusok, kifejezetten a leggyakoribb kórokozócsoportok ellen válogatva bakteriális fertőzések) a gyártó fággyűjteményei alapján. Az FSUE NPO Microgen fióktelepei Ufában, Permben és Nyizsnyij Novgorod – modern központok ilyen gyógyszerek előállítása. Személyre szabott készítés lehetősége patogén mikroorganizmusok A bakteriofágok terápiás és profilaktikus gyógyszerei egy másik fontos előnye ennek a gyógyszercsoportnak. A baktériumok növekvő rezisztenciája az antimikrobiális gyógyszerekkel szemben és a modern fertőző betegségek gyakori polietiológiája kombinált antibiotikum terápiát igényel (két, három, esetenként több antimikrobiális gyógyszer). Kiválasztáshoz hatékony rendszer antibiotikum terápia esetén a baktériumok gyógyszerrel szembeni tényleges érzékenysége mellett figyelembe kell venni elegendő nagy szám tényezőket. A fágterápiának ebben a tekintetben is vannak bizonyos előnyei. Egyrészt a bakteriofágok kombinációjának alkalmazása nem jár együtt egymással való kölcsönhatásukkal, és nem vezet változáshoz használatuk mintáiban. A terápiás bakteriofágok meglévő készletén belül számos jól bevált kombináció létezik - coliprotean bakteriofág, polivalens piobakteriofág, intesti-bakteriofág. Másrészt a baktériumoknak nincs közös mechanizmusok antibiotikumokkal és fágokkal szembeni rezisztencia; ezért mind akkor használhatók, ha a kórokozó rezisztens az egyik gyógyszerrel szemben, mind az „antibiotikum + bakteriofág” kombinációjában. Ez a kombináció különösen hatékony a mikrobiális biofilmek elpusztítására. A kísérlet meggyőzően mutatja azt kombinált használat vas-antagonisták és bakteriofágok megzavarhatják a biofilmek képződését Klebsiella pneumoniae. Ugyanakkor jelentős mértékben csökken a mikrobapopuláció mérete és csökken a „fiatal” sejtek száma is. Még egy fontos jellemzője A bakteriofágok hatása olyan jelenség, mint az apoptózis kiváltása. Egyes E. coli törzsek olyan génekkel rendelkeznek, amelyek a T4 bakteriofág bejutása után sejthalált okoznak. Így a T4 fág késői génjeinek expressziójára válaszul a lit gén (olyan proteázt kódol, amely elpusztítja a fehérjeszintézishez szükséges EF-Tu elongációs faktort) blokkolja az összes sejtfehérje szintézisét. A prrC gén egy nukleázt kódol, amely a lizin tRNS-t hasítja. A nukleázt a T4 fág stp génterméke aktiválja. A T4 fággal fertőzött sejtekben a rex gének (amelyek a fág genomjához tartoznak és lizogén sejtekben expresszálódnak) ioncsatornák képződését okozzák, ami a sejtek létfontosságú ionjainak elvesztéséhez, majd halálához vezet. Maga a T4 fág képes megakadályozni a sejthalált, ha fehérjéivel, az rII gének termékeivel lezárja a csatornákat. Ha a baktériumokban rezisztencia alakul ki egy antibiotikummal szemben, új lehetőségeket kell keresni az aktív molekula vagy alapvetően új anyagok módosítására. Sajnos az új antibiotikumok bevezetésének üteme jelentősen lelassult az elmúlt években. A bakteriofágok helyzete alapvetően más. A nagy gyártók gyűjteményei több tucat kész bakteriofág törzset tartalmaznak, és folyamatosan új aktív fágokkal töltik fel őket. Az izolált kórokozók bakteriofágokkal szembeni érzékenységének folyamatos ellenőrzésének köszönhetően a gyártók módosítják a régiókba szállított fágösszetételeket. Az adaptált bakteriofágoknak köszönhetően kiküszöbölhető az antibiotikum-rezisztens törzsek által okozott nozokomiális fertőzések kitörése. 
Nál nél orálisan A bakteriofágok gyorsan eljutnak a fertőzés helyére: gennyes-gyulladásos betegek szájon át történő bevétele esetén a fágok egy órán belül bejutnak a vérbe, 1-1,5 óra múlva a bronchopulmonalis váladékból és az égési sebek felszínéről, 2 óra elteltével kimutathatók. - a vizeletből, valamint a traumás agysérült betegek agy-gerincvelői folyadékából.
Így a bakteriofágok egyedülálló mikroorganizmusok, amelyek alapján speciális tulajdonságokkal és jellemzőkkel rendelkező terápiás és profilaktikus gyógyszerek csoportja jött létre. A fágok és baktériumok közötti kölcsönhatás mögött meghúzódó természetes fiziológiai mechanizmusok lehetővé teszik maguknak a bakteriofágoknak és felhasználásuk lehetséges módjainak végtelen sokféleségének előrejelzését. A bakteriofágok gyűjteményének bővülésével kétségtelenül új célkórokozók jelennek meg, és bővül azoknak a betegségeknek a köre, amelyeknél a fágok monoterápiaként és komplex kezelési rendek részeként is alkalmazhatók. A fágterápia jövőbeli sorsának modern felfogásának mind a hatásuk magas specifikusságán, mind a fágterápia összes szabályának szigorú betartásán kell alapulnia. A bakteriofágok szembeállítása az etiotróp terápia bármely eszközével téves.
Fágok gyakorlati alkalmazása. A bakteriofágokat a fertőzések laboratóriumi diagnosztikájában használják a baktériumok intraspecifikus azonosítására, azaz a fagovár (fagotípus) meghatározására. Erre a célra a fágtipizálási módszert alkalmazzák, amely a fágok hatásának szigorú specifikusságán alapul: a különböző diagnosztikai típusspecifikus fágok cseppjeit egy tiszta tenyészet „gyepével” beoltott sűrű tápközeggel ellátott lemezre csepegtetik. a kórokozótól. A baktérium fágját a lízist okozó fág típusa határozza meg (steril folt, „plakk” vagy „negatív telep”, fág kialakulása). A fágtipizálási technikát a fertőzés forrásának és terjedési útvonalainak azonosítására használják (epidemiológiai jelölés). Ugyanazon fagovár baktériumok különböző betegekből történő izolálása fertőzésük közös forrását jelzi.
A fágokat számos bakteriális fertőzés kezelésére és megelőzésére is használják. Tífusz, szalmonella, vérhas, pseudomonas, staphylococcus, streptococcus fágokat, ill. kombinált gyógyszerek(coliproteus, pyobakteriofágok stb.). A bakteriofágokat a javallatok szerint orálisan, parenterálisan vagy helyileg írják fel folyadék, tabletta, kúp vagy aeroszol formájában.
A bakteriofágokat széles körben használják a géntechnológiában és a biotechnológiában rekombináns DNS előállításának vektoraiként.
A gyakorlatban használt bakteriofág készítmények a fág által lizált megfelelő mikrobák húsleves tenyészetének szűrletei, amelyek élő fágrészecskéket, valamint azok lízise során a baktériumsejtekből felszabaduló, oldott bakteriális antigéneket tartalmaznak. A kapott készítménynek, egy folyékony bakteriofágnak teljesen ki kell néznie tiszta folyadék sárga szín kisebb vagy nagyobb intenzitású.
Terápiás és profilaktikus célokra a fágok saválló bevonattal ellátott tabletták formájában állíthatók elő. A pelletált száraz fág stabilabb a tárolás során és kényelmesebb a használata. Egy tabletta száraz bakteriofág 20-25 ml folyékony készítménynek felel meg. A száraz és folyékony készítmények eltarthatósága 1 év. Folyékony bakteriofág+ 2 +10 C hőmérsékleten, szárazon - +1 ° C-nál nem magasabb hőmérsékleten kell tárolni, de hűtőszekrényben negatív hőmérsékleten is tárolható.
A szájon át bevett bakteriofág 5-7 napig marad a szervezetben. A bakteriofág bevételét általában nem kíséri semmilyen reakció vagy szövődmény. Használatának nincs ellenjavallata. Használják öblítések, öblítések, testápolók, tamponok, injekciók formájában, és beadják az üregekbe is - hasi, pleurális, ízületi és hólyag, a kórokozó helyétől függően.
A diagnosztikai fágokat folyékony és száraz formában is előállítják ampullákban.A munka megkezdése előtt a száraz bakteriofágot felhígítják. Ha az ampullákon a titer (tr) van feltüntetve, a fagolizabilitási reakcióban (Otto-módszer) a DRT-t (working titer dose) alkalmazzuk a baktériumok azonosítására, ha a fág típusát jelzik, akkor a fágtipizáláshoz a forrás meghatározására. fertőzéstől.
A bakteriofág hatása folyékony tápközegben és szilárd táptalajban lévő mikrobatenyészetre
Otto módszer (cseppcsepp)
A vizsgált növény gyepét vastagon vetjük be. A vetés után 5-10 perccel folyékony diagnosztikai fágot juttatunk a táptalaj szárított felületére. Az edényt kissé megdöntjük, hogy egy csepp fág szétterüljön az agar felületén. A csészét termosztátba helyezzük 18-24 órára. Az eredményeket a szerint számítjuk ki teljes hiánya tenyészet növekedése azon a helyen, ahol a fágcseppet alkalmazzák.
Kísérlet folyékony tápközegen
A vizsgált tenyészetet két kémcsőbe oltjuk be folyékony tápközeggel. Egy diagnosztikai bakteriofágot hurokkal adunk egy kémcsőhöz („O”). 18-20 óra elteltével egy kémcsőben, amelybe nem adták hozzá a bakteriofágot ("K"), a leves erős zavarossága figyelhető meg - a beoltott tenyészet nőtt. A kémcsőben lévő leves, amelyhez a bakteriofágot adtuk, átlátszó maradt a hatása alatt lévő tenyészet lízise miatt.
A baktériumok fágtipizálása
A hatásspektrum szerint a következő bakteriofágokat különböztetjük meg: polivalens, lizáló rokon baktériumfajok; monovalens, lizáló baktériumok bizonyos típus; tipikus, lizáló egyes baktériumtípusok (variánsok).
Például a patogén staphylococcus egy törzsét többféle fág lizálhatja, így az összes tipikus fág (24) és törzs patogén staphylococcusok 4 csoportba egyesítve.
A fágtipizálási módszer rendelkezik nagyon fontos járványügyi kutatásra, mivel lehetővé teszi a kórokozók forrásának és terjedési útvonalainak azonosítását. Ebből a célból meghatározzák a kóros anyagból izolált fagovárt. tiszta kultúra szilárd táptalajokon standard diagnosztikai fágok alkalmazásával.
Egy mikroorganizmus tenyészet fagovárát a lízist okozó tipikus fág határozza meg, ugyanazon fagovár baktériumok különböző alanyokból történő izolálása jelzi a fertőzés forrását.
