Kristalna struktura sline. očuvanje zdravlja zubi

Poglavlje 2. Aktualni problemi u dijagnosticiranju i praćenju učinkovitosti liječenja duodenalnog ulkusa. Značajke kristalografije sline u gastroduodenalnoj patologiji (pregled literature).

2.1 Instrumentalno određivanje defekta sluznice kod duodenalnog ulkusa.

2.2 Morfološka dijagnoza upalne faze u duodenalnom ulkusu.

2.3 Trenutna država dijagnoza infekcije Helicobacter pylori.

2.4 Mogućnosti primjene kristalografije sline u dijagnostici i procjeni učinkovitosti liječenja peptičkog ulkusa.

Poglavlje 3. Opseg i metode istraživanja.

Poglavlje 4. Značajke kristalografske slike sline u duodenalnom ulkusu.

Poglavlje 5. Rasprava o rezultatima istraživanja.

Poglavlje 6. Zaključci.

Uvod u disertaciju (dio sažetka) na temu "Kristalografija sline u dijagnostici i praćenju učinkovitosti liječenja duodenalnog ulkusa"

Popis literature za istraživanje disertacije Kandidat medicinskih znanosti Vorobyov, Alexander Viktorovich, 2004

Napominjemo da su gore navedeni znanstveni tekstovi objavljeni u informativne svrhe i da su dobiveni priznavanjem izvorni tekstovi disertacije (OCR). Stoga mogu sadržavati pogreške povezane s nesavršenim algoritmima prepoznavanja. U PDF datotekama disertacija i sažetaka koje isporučujemo nema takvih pogrešaka.

DIPLOMSKI KVALIFIKACIJSKI RAD
"Korištenje kristaloskopije za identifikaciju akutna leukemija kod AKR miševa"

Uvod................................................. ....... ................................... 3
Poglavlje I. Pregled literature............................................. ....... 3
1.1 Kristalografija bioloških tekućina .................................. 6
1.1.1 Osnovni pojmovi o kristalnom stanju tvari 6
1.1.2 Procesi kristalizacije u živim sustavima.................................. 8
1.1.3 Kristalografske karakteristike bioloških tekućina... 8
1.1.4 Morfologija bioloških tekućina .................................. 8
1.2 Kristalografske metode istraživanja..................................... 12
1.2.1 Preduvjeti za proučavanje fenomena kristalizacije bioloških tekućina..................................... ............. ............. 12
1.2.2 Trenutno stanje ideja o kristalografskim istraživačkim metodama..................................... ............................................. 18
1.2.2.1 Opće karakteristike tehnike za teziokristaloskopiju bioloških supstrata..................................... ............. ............... 25
2. Predmeti, ciljevi i metode istraživanja..................................... ........... 26
2.1 Ciljevi, zadaci i faze studije................................................ ........... 26
2.2 Priprema posuđa i radni prostor ............................................ ...... 28
2.3 Primijenjene metode istraživanja.................................................. ...... 28
2.3.1 Postupak ispitivanja teziokristaloskopijom ................................. 28
2.4 Statistička obrada podataka.................................................. ...... 43
3. Rezultati istraživanja.................................................. .......... 44
3.1 Morfologija urina zdravih i umjetno zaraženih miševa s leukemijom.................................................. ............................................................ 44
3.2 Glavni kriteriji za procjenu tezigrafskog facijesa urina u miševa u normalnim uvjetima i s patologijom (leukemija)................................ ....... .......... 46
3.3 AKR linijski miševi.............................................. ...................... 49
3.4.Dinamika razvoja leukemije............................................ ...... ... 50
3.5 Zaključci..................................................... ... ........................
Popis korištene literature..................................................... ..... 52

Uvod

Suvremene biotehnologije su sinteza znanstvenih dostignuća u različitim područjima prirodnih znanosti: medicini, biologiji, matematici, fizici, kemiji i drugim znanostima. Ž. Alferov, dobitnik Nobelove nagrade za fiziku, istaknuo je da su posljednjih godina posebno značajne rezultate postigli njegovi učenici u radu na raskrižju fizike i biologije, fizike i medicine. Primjer za to je pristup rješavanju najhitnijeg suvremenog društvenog problema - dijagnostike i učinkovitog liječenja malignih bolesti. Svake godine milijuni djece i starijih ljudi, kao i visokovrijedne domaće životinje, umiru od leukemije. Diljem svijeta tehnologije razvoja i liječenja leukemije kod ljudi proučavaju se na životinjama strogo određene genetske linije. Već više od 10 godina Savezna državna ustanova “KNIIG i PC FMBA Rusije” provodi istraživanje o razvoju kontinuirane leukemije koristeći mišji model ACR. Unatoč napretku postignutom u području eksperimentalne i kliničke leukemije, problem opisane patologije je vrlo daleko od konačnog rješenja.
U posljednjih 40 godina aktivno se razvija novi dijagnostički smjer - kristaloskopija, koja se temelji na određivanju kvalitativnog sastava bioloških tekućina stvaranjem kristalnih struktura u njima.
Prvo iskustvo klinička primjena kristalografija seže u rane 60-te godine prošlog stoljeća. U početku je većina istraživača koristila tezigrafsku metodu. Godine 1964. Daems je proveo istraživanje kristalograma krvi pacijenata s hipertrofijom prostate i karcinomom. J.Leal i B.Finlayson (1977) utvrdili su značajke formiranja kristala urina.

A.A. Kozhinova i L.S. Maslennikova (1968). V.Ya. Neretin i V.I. Kiryakov (1977) koristio je ovu metodu za proučavanje cerebrospinalne tekućine pacijenata s različitim bolestima mozga i leđne moždine. U radu D. B. Kalikshteina i suradnika (1981.) proučavana je tezigrafska slika urina bolesnika s različitim bolestima bubrega. V. V. Usin (1995) proučavao je kristalografske promjene u cerebrospinalnoj tekućini i slini u bolesnika s kroničnim neurogenim bolnim sindromima glave i lica. Osim toga, tezigrafija se koristila u dijagnostičke i prognostičke svrhe u pedijatriji, ginekologiji, gastroenterologiji i drugim područjima medicine.
Trenutno se kristaloskopska analiza koristi za proučavanje gotovo svih bioloških tekućina (krv, urin, slina, cerebrospinalna tekućina, žuč, nazalni sekret itd.). Kristalne strukture bioloških tekućina sadrže najvažnije podatke o stanju pojedinog organa, zasebnog tjelesnog sustava i tijela u cjelini.
Trenutno je interes znanstvenika za korištenje metode kristalografije bioloških tekućina u medicini i dalje visok. Stoga su brojne dijagnostičke tehnike razvijene i stavljene u praksu kako bi se olakšalo proučavanje širokog spektra karakteristika biosupstrata (biokemijski, imunološki, morfološki, biofizički testovi itd.). Slaba točka većine navedenih metoda je njihova visoka cijena zbog uključivanja skupih reagensa, opreme i školovanja visokokvalificiranog osoblja. Sve navedeno uvjetuje održavanje i održavanje dovoljno velikog broja servisa podrške.
Međutim, promjenjivi ekonomski uvjeti zahtijevaju razvoj i primjenu vrlo učinkovitih i isplativih metoda za dijagnosticiranje leukemije.
Kristaloskopska metoda ima značajnu dijagnostičku osjetljivost i stoga je našla široku primjenu, prvo u praksi forenzičko-kemijske analize, a potom i u medicini. Omogućilo je proširenje diferencijalne dijagnostičke sposobnosti u određivanju prirode patološkog procesa (alergijski, upalni, itd.), U identificiranju prisutnosti anemije, edema, intoksikacije i stupnja njegove težine. Koristeći metodu kristalografije biopolimera, moguće je odrediti patologiju raznih organa. Budući da ova tehnika uključuje kombinaciju čestica materijala s otopinom koja stvara kristale, priroda malignog procesa može se prosuditi iz formiranog uzorka kristala (Kontorschikova K.N. et al. (2002-2012).
Svrha ovog rada bila je razviti metodu kristaloskopske analize urina AKR miševa za dijagnostiku akutne leukemije.

1 Pregled literature.
1.1 Kristalografija bioloških tekućina

Pojam "kristal" dolazi od grčke riječi "krystallos", što znači "led". U kristalu atomi i molekule tvore uređenu strukturu (kristalnu rešetku). Kristali su važni kako u neživoj tako iu živoj prirodi, što je bila osnova za izdvajanje samostalne grane - kristalografije. Kristalografija je znanost o strukturi i fizikalnim svojstvima monokristala i kristalnih agregata, pojavama koje se događaju u kristalnom mediju pod utjecajem unutarnjih svojstava ili vanjskih utjecaja.

1.1.1 Osnovni pojmovi o kristalnom stanju tvari

Kristali nastaju iz pare, otopine, taline, amorfne tvari ili iz tvari u drugom agregatnom stanju. Kristalizacija počinje pod određenim vanjskim uvjetima, na primjer, prehlađenje tekućine, prezasićenost pare, dehidracija otopine, kada se oko središta kristalizacije postupno pojavljuju mnogi mali kristali. Kristal raste dodavanjem atoma ili molekula iz tekućine ili pare.
Postoje ravnotežni i pravi oblici kristala. Ravnotežni oblik kristala postiže se samo u ravnotežnim uvjetima, tj. s beskonačno sporim procesom kristalizacije.
Budući da parametri vanjsko okruženje heterogena u vremenu i prostoru, u kristalnoj strukturi neizbježno nastaju razni nedostaci. Dakle, stvarni (forsirani) oblici kristala odražavaju ne samo simetriju kristala, već i utjecaj vanjskih uvjeta rasta (koncentracija različitih tvari u okruženju nastanka kristala, temperatura, tlak itd.) na bilo kakve promjene u na što kristali reagiraju vrlo osjetljivo. Neki kristalni oblici prikazani su na slici 1.

A b V

G d e

i h I

Slika 1. Oblici kristala u različitim biološkim tekućinama: a, b - nitasti, c, d, e, f, g - sferulitne tvorevine s radijalno smještenim iglicama; z-potisnuti dendrit; i – razgranati dendrit.
Najprirodnije i tehnički tvrdih materijala su polikristali, monokristali se nazivaju monokristali. Prilikom kristalizacije metala i soli često nastaju stabloliki kristali – dendriti. Tijekom kristalizacije iz jednog ili više centara nastaju sferuliti koji se sastoje od radijalno smještenih kristalnih iglica.

1.1.2 Procesi kristalizacije u živim sustavima

Svi biološki mediji životinjskog i ljudskog tijela imaju specifičnu molekularno uređenu strukturu budući da su liotropni tekući kristali. Živi organizam je složen, vrlo dinamičan sustav u kojemu se neprestano odvijaju procesi interakcije mnogih strukturnih komponenti međusobno i s okolišem. U normalnim uvjetima, fluktuacije u biofizičkim parametrima tijela ograničene su na relativno uske granice. Međutim, u određene situacije oni mogu ići dalje normalne granice za dovoljno dugo razdoblje. U nekim slučajevima to se objašnjava prilagodbom tijela neuobičajenim novim uvjetima postojanja, u drugima dubokim poremećajem homeostaze s trajnom dekompenzacijom. Ovi složeni, vrlo dinamički procesi jasno se odražavaju u karakteristikama kristalnih struktura raznih bioloških tekućina ili biopolimera.

1.1.3 Kristalografske značajke bioloških tekućina

Poznato je da metabolički poremećaji, kao komponenta patogeneze razne bolesti, dovodi do promjene kemijski sastav i fizikalno-kemijska svojstva bioloških tekućina (u daljnjem tekstu biofluidi). Složeni dinamički procesi koji se odvijaju u biofluidima odražavaju se u morfološkim značajkama struktura nastalih tijekom kristalizacije uzoraka biofluida. Trenutno su razvijene i koriste se u kliničkoj praksi originalne dijagnostičke metode temeljene na strukturnoj analizi bioloških tekućina. Strukture krute faze bioloških tekućina tvore molekule i uglavnom mikroagregati organskih i mineralnih tvari otopljenih u biološkoj tekućini. Specifične značajke struktura određene su općim fizikalno-kemijskim svojstvima biofluida, kvantitativnim i kvalitativnim sastavom molekula tih tvari i njihovom sposobnošću uspostavljanja intramolekularnih i intermolekularnih kemijskih veza. Kao rezultat toga, struktura bioloških tekućina nosi cjelovite informacije o stanju metabolizma organa subjekta ispranih biotekućinom i o homeostazi tijela kao cjeline.
Morfologija bioloških tekućina je dokazana znanstveni smjer iz područja medicine, veterine i drugih znanosti. Formiranje strukture biofluida tijekom kristalizacije ima jasne obrasce.
Onečišćenje okoliša različitim toksinima, među kojima posebno mjesto zauzimaju teški metali (HM), dovodi do značajnog povećanja vjerojatnosti pojave određenih bolesti, uključujući i rak. Kombinacija morfološke analize tjelesne tekućine s njenom lokalnom elementarnom analizom može poslužiti kao novi analitički alat za istraživanja u području rane dijagnoze raka.
Napredak u poboljšanju mikrokemijske analize, kristalne optike i tezigrafije pružio je osnovu za proučavanje kristalne strukture bioloških tekućina ljudi i životinja u različitim patologijama. Kristalografski procesi u biološkim tekućinama privlače sve veću pozornost znanstvenika. Istraživanja provedena tijekom proteklih desetljeća bila su usmjerena na utvrđivanje odnosa između kristalografskih značajki biofluida i razvoja patoloških procesa u tijelu; ili su sebi postavili zadatak proučavanja utjecaja vanjskih utjecaja na stvaranje kristalnih struktura u biofluidima (Skopinov S.A. et al. 1997).
Stoga se u biološkoj tekućini može promatrati kompleks strukturnih preustroja od otopine do kristala. Kristalografska analiza omogućuje otkrivanje patoloških promjena u kristalnoj rešetki na supramolekulskoj razini. Ove promjene mogu poslužiti kao rani dijagnostički kriterij za razvoj patološkog procesa.

1.1.4. Morfologija bioloških tekućina

Proučavanje morfološke slike različitih biotekućina poznati je pravac u prirodnim znanostima, kojem su znanstvenici iz mnogih disciplina posljednjih godina počeli posvećivati ​​posebnu pozornost. Trenutno je razvijena metoda za dobivanje informacija o stanju tijela, funkcijama pojedinih organa i tkiva u fazi izraženog kliničke manifestacije bolesti i u predsimptomatskom stadiju, odnosno na razini razvoja patološkog procesa jedne ili druge prirode (upalni, onkološki, formiranje kamena, hipoksično-ishemijski, sklerotični, itd.). Metoda kristalografije raznih biopolimera je jednostavna u tehnici i bilježenju rezultata. Istraživao morfološku sliku dehidrirana (osušena) kap biološke tekućine, koja je standardni tanki presjek. Na primjer, pregledom kapi urina može se utvrditi aktivnost procesa stvaranja kamenca u bubrežnom tkivu i sastav postojećeg ili nastajajućeg bubrežnog kamenca (urati, kalcijev oksalat, kalcijev fosfat); akutni ili kronični tijek kandidijaze genitourinarnog sustava, hipoksično-ishemično oštećenje bubrežnog tkiva i težina procesa (hipoksična nefropatija, intersticijski nefritis, akutno zatajenje bubrega, infarkt bubrega); bakterijska infekcija (bez određivanja vrste patogena).
Jedna kap biološke tekućine može reći od čega je osoba bolesna i od čega on biološku dob. Kap osušene tekućine stavi se na staklo pravog mikroskopa, a na monitoru se pojavi višestruko uvećana slika. "U kapi sline uzete na prazan želudac vidljive su frakcijske trozračne pukotine, to je dokaz stagnacije. A u kapi uzete nakon doručka nema pukotina, što znači da su kanali žlijezda slinovnica u redu. Ali kiselost želučanog soka malo je smanjena,” sada se na ekranu pojavljuje kapljica krvnog seruma, izgleda poput gumba s rubom i prekrivena je radijalnim pukotinama, struktura pukotina je podvrgnuta pažljivoj analizi: uzorak na periferiji sugerira da se pacijentov krvni tlak povremeno povećava zbog vazospazma.
Profesor S.N. Shatokhina objašnjava da se tijelo može podijeliti u dva sustava: stanični i nestanični. Cijeli svijet prije svega proučava stanice, ali biološke tekućine koje međusobno povezuju stanice nose puno informacija o njihovim vitalnim funkcijama. Kada se kap biotekućine osuši, informacija kodirana u njoj postaje vidljiva. "Tijekom prijelaza u stabilno stanje, snaga veza se povećava za dva reda veličine," objašnjavaju istraživači. "Nakon uklanjanja vode, ostaje film na kojem je uzorak prostornog rasporeda elemenata koji su prethodno bili u bilježi se otopljeno stanje”, bolest je uvijek popraćena nakupljanjem nekih kemikalija, što mijenja strukturu, narušava se simetrija, pojavljuju se ti isti “jezici”, “lišće” ili “ploče” koje je profesor S.N. Shatokhina je pronađen u pacijentu. A kako bi pronašli te obrasce, istraživači su razvili posebnu metodu sušenja kapljica. Kap sline vam može puno reći. Odražava karijes i parodontitis. I također, na primjer, gnojni otitis, što dovodi do pojave lamelarnih oblika u kapi sline. Analizom kapi želučanog soka stručnjaci identificiraju kronični gastritis i čir; zglobna tekućina - artroza; konačno, suze - glaukom, katarakta, upalni procesi u mrežnici.
Danas znanstvenici blisko surađuju s kliničarima, pomažući im da vide skrivene patologije i poboljšaju metode liječenja. Analizom biotekućina istraživači također mogu odrediti stvarnu biološku dob osobe. Proizvode ga lamelarne strukture u krvnom serumu, koje su po kemijskoj prirodi kolesterol. Iz njega će se formirati budućnost aterosklerotskih plakova na plovilima. Ovo je jedan od najvažnijih "markera starenja". Znanstvenici također procjenjuju međusobni potencijal zdravlja; za to se krv u epruveti ozračuje elektromagnetskim poljem ili laserom - nakon takvog izlaganja uništavaju se međumolekularne veze, stoga će, kada se takva krv osuši, uzorak filma biti drugačiji; u zdravoj osobi potrebna su četiri sata za obnovu veza nakon zračenja. Ako potraje dan ili tri, trebali biste se zabrinuti. Istraživači vjeruju da je ovom metodom moguće utvrditi je li osoba sposobna raditi u ekstremnim uvjetima

1.2 Kristalografske metode istraživanja.
1.2.1 Preduvjeti za proučavanje fenomena kristalizacije bioloških tekućina

U posljednjoj četvrtini prošlog stoljeća pojavio se značajan interes znanstvene zajednice za kristalografske metode istraživanja, proučavane u smislu njihove praktične primjene kao alternativnog pristupa u kliničkoj dijagnostici. Omogućuju cjelovitu procjenu sposobnosti kristalizacije različitih bioloških supstrata. Posljednjih godina počeo se aktivno razvijati novi dijagnostički smjer - klinička kristalografija, koja se temelji na određivanju kvalitativnog sastava tekućine stvaranjem kristalnih struktura.
Metodu kvalitativnog određivanja kemijskih tvari njihovim kristalografskim karakteristikama prvi je predložio student M.V. Lomonosov - T.E. Lovitz. Potonji je 1804. opisao dvije metode za kvalitativnu analizu tvari - metodu "istrošenih naslaga soli" i metodu koja se temelji na promjeni normalnog formiranja kristala uvođenjem drugog sastojka u otopinu kristalizirajuće tvari, čime je postavljen temelj za dva moderna područja kristalografije:
1) kristalografija nativnih tekućina - metoda koja se temelji na određivanju kvalitativnog sastava tekućine iz kristala koje stvara tijekom isparavanja;
2) tezigrafija - metoda koja se temelji na dodavanju standardne otopine za stvaranje kristala ispitivanoj tekućini i analizi promjena u kristalima standardne otopine u prisutnosti ispitivane tekućine.
Prva iskustva kliničke primjene kristalografije datiraju iz ranih 60-ih godina prošlog stoljeća. U početku je većina istraživača koristila tezigrafsku metodu. Godine 1964. Daems je proveo istraživanje kristalograma krvi pacijenata s hipertrofijom prostate i karcinomom. Leal J. i Finlayson B. (1977) utvrdili su karakteristike stvaranja kristala u mokraći.
U radu je prvi put prikazana uporaba kristalografskih istraživačkih metoda (CRI) u domaćoj medicini
Kozhinova A.A. i Maslennikova L.S. (1968). Neretin V.Ya. i Kiryakov V.I. (1977) ova je metoda korištena za proučavanje cerebrospinalne tekućine pacijenata s različitim bolestima mozga i leđne moždine. U radu D. B. Kalikshteina i suradnika (1981.) proučavana je tezigrafska slika urina bolesnika s različitim bolestima bubrega. Usin V.V. (1995.) proučavali su kristalografske promjene u cerebrospinalnoj tekućini i slini u bolesnika s kroničnim neurogenim bolnim sindromom glave i lica. Osim toga, tezigrafija se koristila u dijagnostičke i prognostičke svrhe u pedijatriji, ginekologiji, gastroenterologiji i drugim područjima medicine.
Trenutno se kristalografska analiza koristi za proučavanje gotovo svih bioloških tekućina (krv, urin, slina, cerebrospinalna tekućina, žuč, nazalni sekret itd.). Kristalne strukture bioloških tekućina sadrže najvažnije podatke o stanju odgovarajućih organa i tkiva.
Prvi put je korištena kristalografska analiza suzne tekućine (TF) za dijagnostiku oftalmološke patologije.
Chentsova O.B. s koautorima 1985. Predložili su tehniku ​​tezigrafije suzne tekućine - kristalografiju s dodatkom alkoholne otopine bakrenog klorida. U stožastu epruvetu stavi se 0,02 ml suza i uz stalno mućkanje doda 0,1 ml 2% alkoholne otopine bakrenog klorida. Epruveta se zatvori vatom i ostavi da se staloži na sobnoj temperaturi. Nakon 1 sat i 20 minuta kap dobivene otopine nanese se na predmetno staklo koje se stavi u Petrijevu zdjelicu u termostat na temperaturu od 25°C dva sata. Nakon razdoblja inkubacije provodi se makro i mikroskopska procjena rezultata.
Značajke tezigrafske slike zabilježene su kod pacijenata s upalnim, distrofičnim i tumorskim bolestima očiju i orbite. Prema Chentsova O.B. i sur., kristalografski uzorak (CPC) suzne tekućine u odraslih i djece obično su prozirni, dugi, rijetko raspoređeni cilindrični kristali, koji su sklopljeni u pravilan geometrijski uzorak, najčešće u obliku trokuta. Chentsova O.B. i dr. (1989.) izveli su CGI SF-a za diferencijalnu dijagnozu bolesti orbite. Autori su identificirali kvalitativne razlike od norme u pripravcima suza u bolesnika s endokrinom oftalmopatijom, upalnim bolestima orbite i neoplazmama.
Od tog vremena kristalografsko ispitivanje koriste ovi i drugi autori u dijagnostici raznih bolesti oka.
Tyurikov Yu.A., Pokoeva V.A. (1992) koristili su tehniku ​​tezigrafije uz dodatak zasićene vodene otopine glicina i dnevno izlaganje sobnoj temperaturi. U kristalogramima bolesnika s intraokularnim i orbitalnim neoplazmama otkrivene su karakteristične promjene.
Brojni autori koristili su SG tezigrafiju ne samo za dijagnozu, već i za dinamičko praćenje GC SG zahvaćenog oka (Kokarev V.Yu. et al., 1990; Somov E.E., Brzhesky V.V., 1994; E.I. Ustinova et al. dr. (1996) preporučuju metodu kristalografskog pregleda SF kao dodatnu laboratorijsku pretragu za diferencijalnu dijagnozu i razjašnjavanje faze aktivnosti tuberkuloznog procesa.
Chukhman T.P. (1999.) unaprijedili su tehniku ​​SG tezigrafije, predlažući da se dugotrajno taloženje mješavine suza i otopine koja stvara kristale zamijeni centrifugiranjem, što je smanjilo vrijeme istraživanja. Također, CGI SG-a je proveden za različite upalne bolesti oka i identificiran karakteristične vrste kristala, što je omogućilo pravovremeno prepoznavanje komplikacija čak iu pretkliničkoj fazi. Osim toga, autor je proučavao utjecaj različitih vanjskih čimbenika (temperatura sušenja preparata, vlažnost), kao i metode prikupljanja suza, na kristalogenezu.
Zanimanje znanstvenika za korištenje metode tezigrafije bioloških tekućina u medicini i danas je veliko. Međutim, pokazalo se da je tezigrafija prilično radno intenzivna tehnika, koja zahtijeva korištenje dodatnih reagensa i teško tumačenje rezultata (Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 1997.). Osim toga, nisu poznati obrasci procesa kristalizacije na kojima se temelji metoda tezigrafije. Potraga za jednostavnijim i pristupačnijim metodama kristalografskog istraživanja dovela je do pojave niza radova posvećenih kristalografiji nativnih pripravaka biofluida.
Zbog toga postoji potreba za razvojem ekspresne metode koja bi se mogla koristiti kao primarni test u dijagnostici raznih bolesti. Štoviše, potrebni zahtjevi za njegov odabir su dovoljan stupanj točnosti i mogućnost široke upotrebe bez ulaganja značajnih materijalnih resursa (Menshikov V.V., 1988; Nazarenko G.I., Kishkun A.A., 2000; Zelenin V.A., Bulychev V.F., Steklova G.P. i sur., 2004).
Za ovaj su se problem zainteresirali stručnjaci iz raznih područja medicine. Posljedica toga bio je brzi razvoj dijagnostike sline, koja je, s jedne strane, bila neinvazivna, as druge je omogućila brzo dobivanje preliminarnih rezultata (Borovsky E.V., Leontyev V.K., 1991; Sukmansky O.I., 1991; Komarova L. G., Alekseeva O. P., 1994; Antropova I. P., Gabinsky Ya. L., 1997; Butaev M. T., 1998; Grigoriev I. V., Chirkin A. A., 1998; Bulgakova V. A., 1999; Erichev I. V., Korotko G. G., Reshetova I.V., 1999; Denisov A.B., 2000, 2001;).
Metode za kvalitativno određivanje kemijskih spojeva prema njihovoj sposobnosti kristalizacije prvi je predložio T. E. Lovitz, učenik M. V. Lomonosova, još 1804.-1805. U svojim je radovima opisao dva izvorna testa za kvalitativnu analizu strukture ispitivanih tvari. Ovo je “metoda taloženja istrošene soli” (kristalne naslage), kao i mikrokristalne reakcije. Prvo od navedenog bilo je osnova za metodu kvalitativnog određivanja lijekova koja se razvila mnogo kasnije (Knizhko P. O., 1956; Bubon N. T., Puzyrevsky K. Ya., 1965; Nikolskaya M. N., Gandel V. G. , Popkov V. A., 1965; Lobanov V. I., 1966). Tehnika mikrokristalnih reakcija sada je pronašla primjenu u sudskoj medicini (Belova A.V., 1960.; Semenova T.D., 1972.; Taher M.A. Assad, 1995.).
U kontekstu razvoja ideja o kristalizaciji ljudskih bioloških tekućina, pitanje njene primjenjivosti u dijagnostici različitih patoloških stanja postaje relevantno (Kokueva O.V., Savina L.V., Lee A.M., 2000; Zubeeva G.N., Motyleva I.M. , Potekhina Yu. P., 2001; Shabalin V. N., Shatokhina S. N., 2001; Vorobyov A. V., Vorobyova V. A., Neshtakova N. L., 2002; Alekseeva O. P. , Vorobyov A. V., 2003; Volosnikova N. N., Muzlaev G. G., Savina L. V. et dr., 2003.; Rapis E. G., 2003; Anaev E. Kh., Shatokhina S. N. ., Chuchalin A. G., 2004).
U tom smislu, kristaloskopske metode istraživanja, usmjerene na dešifriranje metaboličkih informacija skrivenih u kvalitativnim i kvantitativni sastav biološke okoline.
Osim toga, jedinstvena shema analize može pridonijeti unifikaciji i pojednostavljenju kristalografskih istraživanja. To će biti korisno iu diferencijalnoj dijagnozi i pri izvođenju orijentacijskog testa.
Važan čimbenik u standardizaciji rezultata dijagnostičke kristalizacije bioloških supstrata tijela može biti jedinstveni oblik zaključka o kristaloskopskom testu, uključujući podatke o kvalitativnim i kvantitativnim promjenama u sastavu lica pacijenta u odnosu na facijes praktički zdravih. pojedinaca (promjene u broju i veličini struktura, pojava patoloških za određenu biofluidnu formaciju itd.).

1.2.2 Trenutno stanje ideja o kristalografiji
metode istraživanja

Kristalografske metode istraživanja– skup metodoloških pristupa za dobivanje informacija o metabolizmu i homeostazi tijela i/ili njegovih dijelova, temeljenih na fenomenu slobodnog ili potaknutog temeljnim tvarima različitog kemijskog sastava stvaranja kristala osušene tekućine ili tekućeg biološkog materijala s naknadnom interpretacijom rezultata kristalogeneze.
Tijekom proteklih tridesetak godina formirani su brojni metodološki pristupi provođenju dijagnostičke kristaloskopije, no treba napomenuti da je većina njih u biti samo modifikacija uvjeta za provođenje procesa dehidracije, dok se čini da je moguće razlikovati samo tri načelne mogućnosti: slobodna kristalizacija, u slučaju da se biološka tekućina koja se analizira izravno suši; započeta kristalogeneza, kada se vizualizira rezultat dehidracije sustava "biološki okoliš - osnovna tvar koja tvori kristale", uglavnom na temelju proučavanja geneze strukture potonje; parcijalna kristalizacija (metoda modelnih kompozita) je skup metoda za rekreaciju pojedinih komponenti kristaloskopske slike određenog biološkog supstrata, te je stoga značajna prvenstveno za znanstvena istraživanja.
Općenito, do danas su predložene sljedeće metode u modernoj kristaloskopiji:
1) Klasična kristaloskopija (Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. et al., 1990; Savina L.V., 1992, 1999; Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2001; Alekseeva O.P., Vorobyov A.V., 2003) jedna je od najčešćih opcija za izvođenje testa dehidracije, čija je bit, kao što je već naznačeno, izravna kristalizacija bioloških tekućina. Priprema pripravaka može se provoditi iu sobnim uvjetima iu termostatu (37-400C), međutim, prema brojnoj literaturi, trajanje pripreme mikropreparata bioloških podloga je 1-2 dana, što očito ne zadovoljava zahtjeve za brze testove. U tom smislu, potrebne su značajne prilagodbe uvjeta sušenja kako bi se optimiziralo vrijeme utrošeno na pripremu mikrouzorka.
Treba napomenuti da ovaj kristaloskopski pristup omogućuje procjenu svojstava formiranja kristala biofluida, te stoga ne samo dobivanje dijagnostički značajnih facijesa (kristaliziranih uzoraka), već i utvrđivanje prisutnosti pojedinih komponenti analiziranog supstrata (Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V. Yu. et al., 2003). Ovo pitanje nije dovoljno riješeno u stručnoj literaturi, ali je važno za praktičnu identifikaciju patoloških inkluzija u biološkim sredinama, biologiju i medicinu – proučavanje patogenetskih aspekata patologije ljudi i životinja, kao i razuman odabir i procjenu učinkovitost terapije lijekovima i bez lijekova (Buiko A. S. , Tsykalo A. L., Terentyeva L. S. et al., 1977; Erichev I. V., Korotko G. G., Reshetova I. V., 1999; Zaichik A. Sh., Churilov L. P., 2001; Alekseeva O. P., Vorobyov A. V., 2003.; Baydaulet I. O., 2003.). To zahtijeva proučavanje značajki kristalogeneze komponenata bioloških tekućina, uključujući djelomično modeliranje dehidracije. Određene načine rješavanja ovog problema predložili su L.V. Savina i sur. (2003). Uz sav značaj ovog metodološkog pristupa, mora se priznati da se u ovom slučaju ne uzima u obzir jedan od najznačajnijih čimbenika koji određuje prirodu kristalogeneze biosupstrata - prisutnost međumolekularnih interakcija između komponenti biofluida koje se razlikuju u kemijskoj strukturi, koja zauzvrat igra značajnu ulogu u formiranju konačne kristaloskopske slike, posebno određujući broj i promjer "primarnih zona" facijesa, transformiranih tijekom procesa dehidracije u kristalizacijske pojaseve (Koledintsev M.N. , 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maychuk N.V., 2002; Koledintsev M.N., Maychuk N.V., 2002).
Slične pokušaje simulacije stvaranja kristala napravio je G. G. Korotko (2000.), o čemu će biti više riječi.
2) Tezigrafija (Nefedova N. B., Tsyvenkova L. A., 1985; Moroz L. A., Kalikshtein D. B., 1986; Gugutishvili T. G., Simonishvili L. M., 1990; Kidalov V. N. ., Khadartsev A. A., Yakushina G. N., 2004) također se odnosi na pre vailing i najčešće metode izvođenje kristaloskopskog testa i predstavlja dodatno unošenje raznih kemijskih tvari u osušenu biotekućinu ljudskog tijela kako bi se pokrenuli procesi stvaranja kristala. U tu svrhu koristi se širok raspon sredstava za stvaranje kristala (NaCl, CaCl2, MgCl2 i dr.), od kojih većina ima kompleksotvorna svojstva, a koncentracije pri raznih autora vrlo se razlikuju.
U laboratorijima koji koriste ovu kristalografsku metodu, njena implementacija se provodi klasičnom tezigrafijom, tj. uzimajući u obzir isključivo rezultat dehidracije sustava koji se sastoji od biomaterijala i osnovne kristalotvorne tvari kao samostalnog uzorka, što značajno otežava interpretaciju dobivenih informacija zbog objektivnih poteškoća u usporedbi uzoraka dobivenih u različitim uvjetima i različitom funkcionalnom statusu. tijela ispitanika koji se ispituje. U tom smislu, tesigram generiran u skladu s gore opisanim pristupom zahtijeva usporedbu dobivenog rezultata s već postojećim "uzorcima" ("fotografski" pristup) (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2002; Baydaulet I.O., 2003; Beloglazov V.G. , Atkov E. L., Fedorov A. A. et al., 2003; Volosnikova N. N., Muzlaev G. G., Savina L. V. et al., 2003; Kidalov V. N., Khadartsev A. A., Yakushina G. N., 2004) ili vrijednosti empirijski otkrivenih parametara (Tarusinov G. A., 1994; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V. ., 2002), međutim, ovaj faktor definitivno i značajno smanjuje sadržaj informacija i pouzdanost tezigrafske dijagnostike.
Čini se važnim naglasiti da trenutno ne postoji općeprihvaćena shema-algoritam za opis, analizu i interpretaciju tezigrafskog facijesa, kao što ne postoji jedinstvena metoda za njegovo dobivanje.
Postoje izolirani izvještaji o uporabi kontrolnog uzorka osnovnih tvari (Tarusinov G. A., 1994), ali iz nepoznatih razloga njegova je uporaba oštro ograničena (Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2003; Martusevich A. K. , 2004).
3) Dehidracija profila (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 1999.). Uključuje nanošenje bioloških tekućina na predmetno stakalce prethodno tretirano otopinom lecitina određene koncentracije. Uz pomoć lecitina čini se mogućim, prema autorima, promijeniti afinitet kristala prema bazi, a time i transformirati termodinamička svojstva dehidriranog biosupstrata.
4) Vakuumska kristaloskopija (Savina L.V., 1999.) podrazumijeva pripremu (sušenje) preparata u uvjetima vakuuma. Time se osigurava izolacija dehidriranog uzorka od vanjskog okoliša, stvarajući relativno zatvoren sustav u kojem se tekući dio biološkog okoliša i procesi biokristalizacije izravno uklanjaju.
5) Kristalizacija bioloških tekućina u zatvorenoj ćeliji (Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997.). Osigurana je izolacija formirajućeg uzorka od vanjske okoline, slično vakuumskoj kristaloskopiji, ali tehnički je ova metoda prikladnija za praktičnu upotrebu, jer ne zahtijeva stvaranje vakuumskih uvjeta, već samo korištenje zatvorene ćelije, u kojoj moguće je provesti izravnu mikroskopsku analizu. Autori modifikacije koristili su preliminarno centrifugiranje biomaterijala.
6) Pojasna kristaloskopija je kristalografska metoda istraživanja koja se temelji na proučavanju kristalnih pojaseva i pojedinačnih kristalnih formacija (Koledintsev M.N., 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V., 2002; Koledintsev M.N., Maychuk N.V., 2002). Fizikalno-kemijska osnova metode je heterogenost komponentnog sastava bioloških tekućina ovisno o molekulskim masama tvari koje su elementi danog biološkog okoliša, a posljedično i njihovoj različitoj sposobnosti kretanja kroz facijes u procesu postupna dehidracija uzorka i formiranje facijesa. To dovodi do stvaranja jednog ili (mnogo češće) nekoliko kristalizacijskih pojaseva, čija registracija omogućuje prosuđivanje dane karakteristike biološke tekućine (M. N. Koledintsev, D. F. Nechaev, N. V. Maichuk, 2002.).
7) Metoda dehidracije u obliku klina (V.N. Shabalin, S.N. Shatokhina, 2001-2005). Metoda dehidracije kapi biološke tekućine postavljene na prozirnu plohu. Kap ima u presjeku klinasti oblik, što stvara uvjete za neravnomjernu brzinu dehidracije u radijalnom smjeru. To uzrokuje osmoforetsko kretanje otopljenih tvari u volumenu dehidrirane kapi u skladu s fizikalno-kemijskim parametrima i stvaranje jasnih, strogo individualiziranih struktura koje odgovaraju stanju organizma iz kojeg je dobivena ispitivana tekućina.
8) Polarizacijska mikroskopija (Rapis E. G., 1976.; Antropova I. P., Gabinsky Ya. L., 1997.; Savina L. V., Pavlishchuk S. A., Samsygin V. Yu. et al., 2003.) – metoda za procjenu rezultata slobodnih ili iniciranih kristala formiranje biološke tekućine u polariziranom svjetlu, omogućujući identificiranje nekih Dodatne mogućnosti kako facijes u cjelini tako i njegove pojedinačne strukturne elemente, kao i karakteriziraju njegovu teksturu. To je univerzalna modifikacija pristupa vizualizaciji rezultata kristalogeneze i može se koristiti kao dodatak bilo kojoj od kristalografskih metoda za proučavanje bioloških medija.
9) Kongregacija supstrata (G. G. Korotko, 2000.) - pomoćna kristalografska metoda koja vam omogućuje simulaciju stvaranja kristala pojedinačnih komponenti koje su komponente bioloških supstrata (lipidi, proteini, polisaharidi). U ovom slučaju, u usporedbi s metodom „modelnih kompozita“, postiže se veća aproksimacija stvarnog sastava biološke okoline u smislu asortimana, ali ne i u točnom omjeru komponenti, no moguće je uzeti u obzir promjene u biotekućini u svojim glavnim biokemijskim elementima.
10) Termografija tekućih kristala (Buiko A.S., Tsykalo A.L., Terentyeva L.S. et al., 1977; Shkromida M.I., Pospishin Yu.A., 1977) - obećavajuća tehnika za kristalografska istraživanja, temeljna točka koja je uporaba kolesteričnih tekućih kristala (raspon temperature taljenja 33,5-38,20C ili 36,8-41,20C) premazivanje proučavanih površina sustavima s kolesteril pelargoleatom, kolesteril oleatom, itd. U ovom slučaju, koža se koristi kao "podloga" na koju se nanosi sastav. Interpretacija transformacije stanja tekućih kristala procjenjuje se pomoću specijaliziranog spektrofotometra.
Prilično široke dijagnostičke mogućnosti ovog metodološkog pristupa trenutno se praktički ne koriste, unatoč očitom obećanju, jednostavnosti i brzini provedbe.
11) Metoda prijenosa energetskih informacija iz bioloških tekućina u nosač (Vorobiev A.V., Vorobyova V.A., Neshtakova N.L. et al., 2002.) sastoji se od prijenosa informacija iz bioloških medija u "čiste zrnce mliječnog šećera" zatim se kombiniraju na predmetno staklo s 0,1 ml osnovne tvari (5% vodena otopina bakrenog sulfata). Priprema mikrostakalaca provodi se u tamnoj prostoriji 24 sata, a procjena se provodi kvalitativnom analizom dobivenih uzoraka kristalizata.
Ovakva raznolikost metodoloških opcija za provođenje testa temeljenog na dehidraciji bioloških supstrata vjerojatno je posljedica činjenice da korištenje različitih pristupa pridonosi boljoj identifikaciji dobivenih rezultata (tablica). Izdvajanje informacija skrivenih u ukupnosti metabolita, njihovim kvantitativnim i kvalitativnim odnosima u biomaterijalima jedan je od najznačajnijih i najvažnijih zadataka kristaloskopske dijagnostike. Sa stajališta brojnih autora (Alekseeva V.I., 1965; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. et al., 1990; Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997; Plaksina G. V., Rimarchuk G. V., Butenko S. V. et al., 1999; Shabalin V. N., Shatokhina S. N., 2001, 2004; Alekseeva O. P., Vorobyov A. V., 2003; Baydaulet I. O., 2003; Rapis E. G., 2003; Savina L. V., 19 99; 2003; Bystrevskaya A. A., Deev L. A., 2004; Zalessky M. G., Emmanuel V. L., Krasnova M. V., 2004; Kidalov V. N., Khadartsev A. A., Yakushina G. N., 2004; Gromova I. P., 2005), primarnu ulogu u otkrivanju metaboličkih promjena u sastavu okoliša ljudskog i životinjskog tijela daje se kvalitativnoj komponenti, uzimajući u obzir determinističke odnose između pojedinih tvorevina (kristalne i amorfne prirode). Znatno manje pozornosti pridaje se kvantitativnoj komponenti, iako je ona jasan kriterij objektivnosti uočenih razlika.

1.2.2.1. Opće karakteristike tehnike teziokristaloskopije bioloških supstrata

Na temelju analize gore navedenih literaturnih podataka predložena je i integrativna metoda teziokristaloskopije bioloških supstrata, koja se temelji na istovremenoj i paralelnoj provedbi klasične kristaloskopije i komparativne tezigrafije, koje se provode na istom staklu. To omogućuje procjenu i sposobnosti biološke tekućine da izravno kristalizira i njenog potencijala inicijatora u odnosu na osnovnu tvar koja stvara kristale koju je odredio istraživač (Tablica 1.)

Tablica 1. Usporedne karakteristike nekih kristalografskih metoda

• eksperimentalni dio

• 2. Predmeti, ciljevi i metode istraživanja

• 2.1. Ciljevi, zadaci i faze istraživanja.

• Svrha ovog istraživanja proučavanje morfologije osušenih uzoraka urina zdravih miševa i miševa s limfoidnom leukemijom (LL).
• Da bi se postigao cilj zacrtan u radu, formulirano je sljedeće: zadaci:
• 1. Proučiti suvremenu literaturu o problemima kristalografije biosupstrata.
• 2. Ovladati tehnikom izvođenja teziokristaloskopije biosupstrata.
• 3. Procijenite prirodu stvaranja kristala u mokraći u zdravih miševa.
• 4. Utvrditi značajke započete kristalogeneze u urinu miša s LL.
• Rad je proveden na temelju laboratorija za očuvanje krvi i tkiva Kirovskog istraživačkog instituta za hematologiju i transfuziju krvi.
• Faze istraživanja:

1. Priprema zdravih laboratorijskih miševa linije ACR za istraživanje.
2. Inokulacija limfoidnog oblika leukemije u ACR miševa.
3. Prikupljanje biosupstrata (urina) za istraživanje na zdravim miševima i miševima s leukemijom.
4. Priprema mikrouzoraka urina zdravih miševa i miševa s leukemijom.
5. Tezigrafska analiza osušenih mikrouzoraka urina zdravih miševa i miševa s leukemijom.

• Predmet istraživanja bili su tezigrafski "obrasci" urina zdravih miševa i miševa s leukemijom.
• Predmet ovog eksperimentalnog istraživanja bio je urin 10 zdravih miševa i 10 miševa s leukemijom.
• Kao temeljnu tvar za tezigrafski test koristili smo 10% otopinu natrijevog klorida koji je aktivni kristalotvorac.
• Ukupno je dobiveno 20 mikropreparata urina uzetih od kontrolne skupine (zdravi miševi) i miševa s leukemijom (pokusna skupina).
• Eksperimentalni dio rada uključivao je proučavanje morfologije osušenih uzoraka urina zdravih miševa s leukemijom.

2.2 Priprema posuđa i radnog prostora

Posuđe korišteno u radu (epruvete, mjerne pipete, predmetna stakla) oprano je vrućom vodom s deterdžentom, isprano prvo vodom iz slavine, zatim destiliranom vodom i osušeno.
Sterilizacija posuđa prethodno zamotanih u omotni papir provedena je u autoklavu na temperaturi od 120°C i tlaku od 1 atm tijekom 25 minuta.
Rad tijekom prikupljanja biološke tekućine obavljen je u laboratoriju za životinje (vivariju) Savezne državne ustanove "KNIIG i PK" Roszdrava. Daljnje dobivanje teziokristaloskopskih facija krvnog seruma provedeno je u laboratoriju za konzervaciju krvi i tkiva Savezne državne ustanove "KNIIG i PK" Ministarstva zdravstva Rusije. Prije rada, soba je ozračena kvarcnom svjetiljkom 30 minuta. Radni stol je prije i poslije rada tretiran 70% alkoholom.

2.3. Korištene metode istraživanja

2.3.1 Teziokristaloskopski postupak ispitivanja

Proučavanje kristalno-optičkih svojstava biosupstrata (krvni serum) zdravih i leukemijskih miševa provedeno je metodom teziokristaloskopije (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005; Martusevich A.K. et al., 2000-2006).
Uzorci biološkog materijala (krvni serum, urin, slina, znoj, suze i dr.) u volumenu od 0,3 ml nanose se na prethodno odmašćeno, oprano i osušeno predmetno stakalce, što je, kako smo prethodno utvrdili, optimalno kako u pogledu površine stakla te u smislu broja kristalnih i amorfnih struktura koje podliježu naknadnoj analizi. Razlika između metode teziokristaloskopije je u tome što se na staklo koje se proučava (slika 2.1) nanose 3 uzorka, od kojih prvi (1) sadrži samo biomaterijal, drugi (2) - mješavinu biofluida i kristala (osnovni ) tvar, treći (3 ) - kontrola spoja koji stvara kristale. Kao osnovna tvar korištena je 10% otopina NaCl.

sl.2.1. Shema preparata pripremljenog teziokristaloskopskom metodom

Dobiveni mikropreparat suši se modificiranom metodom u struji toplog zraka. U tom slučaju vodoravni položaj stakla i odgovarajući smjer protoka moraju osigurati dehidraciju uzoraka pod istim uvjetima, sprječavajući njihovo skupljanje. Zatim se dobiveni kristaloskopski uzorci analiziraju prema tradicionalnoj shemi, odvojeno za kristalografsku i tezigrafsku komponentu.
Sušenje kapljice supstrata na navlaženoj površini (staklu) dovodi do stvaranja 3 različite zone: vanjske (rubne - voda, elektroliti, niskomolekularni spojevi); unutarnji (centralni - koncentrirani visokomolekularni proteini, elektroliti, niskomolekularni spojevi) i intermedijarni, karakterizirani najnižom koncentracijom tvari. Unutarnja zona može imati izražene i neizražene granice. Kristalne i amorfne strukture često su uz vanjsku konturu unutarnje granice.
Sušenje koloida prati njegovo povlačenje, povećanje koncentracije niskomolekularnih spojeva i stvaranje kristalnih struktura različitih vrsta.
Statistička obrada dobivenih rezultata provedena je u okolišu Microsoft Excel XP pomoću ugrađenih funkcija.
Kako bismo protumačili kristaloskopske uzorke, klasificirali smo sve kristalne i amorfne formacije na koje smo naišli (Tablica 2.1, Slika 2). U skladu s tom klasifikacijom provedeno je vrednovanje preparata pripremljenih za analizu klasičnom kristaloskopskom tehnikom. Provedeno je i opće istraživanje kristaloskopskih značajki biofluida i njihovih usporednih karakteristika.

Tablica 2.1. Kristalne i amorfne strukture koje se susreću u "klasičnoj" kristaloskopskoj analizi biofluida

Napomena: * - razlikuju se u količini (male - ukupno zauzimaju manje od 30% površine vidnog polja, umjerene količine - ukupno zauzimaju 30-50% površine vidnog polja, velike količine - ukupno zauzimaju više od 50% površine vidnog polja područje vidnog polja) i po veličini (mali, srednji, veliki, nakupine).
Na temelju analize brojnih mikropreparata osušenih bioloških tekućina identificirano je 5 klasa kristalnih struktura (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005;), od kojih svaka zauzvrat uključuje specifične formacije (tablica 2.1). Za neke od njih dešifriran je kemijski sastav, što omogućuje, s određenim stupnjem aproksimacije, prosuđivanje promjena u kvalitativnim i kvantitativnim karakteristikama omjera komponenti u biološkim medijima u slučaju dinamičkog proučavanja kristala. formiranje svojstava potonjeg.
Zasebnu kategoriju čine tijela nekristalne prirode - amorfne formacije. Derivati ​​kalcijevog karbonata, izrazito su varijabilni u veličini i količini, što može imati dijagnostičku vrijednost.
Zanimljiv je i tip interakcije između velikih kristala i amorfnih čestica u facijesu dehidriranog biosupstrata (Slika 2). Informativni sadržaj ovog fenomena još nije utvrđen, ali, po našem mišljenju, zahtijeva veliku pozornost, jer može odražavati utjecaj kristalografski nevizualiziranih komponenti biotekućine (na primjer, makromolekula proteina, masti, ugljikohidrata itd.). ) o kristalogenezi.

Riža. 2.2. Interakcije kristalne i amorfne strukture

Kako bi se dobile dodatne informacije o fizikalno-kemijskim svojstvima analizirane biološke tekućine, razvijeni su dodatni kriteriji za procjenu rezultata klasične kristaloskopije (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005.), uključujući sljedeće parametre:
1. Celularnost (I)– odražava značajke organsko-mineralnih interakcija u facijesu. Procjena se vrši na ravnoj ljestvici od šest stupnjeva (0-5 bodova), pri čemu je 0 bodova potpuna odsutnost znakova pojave ove pojave, a 5 bodova vidljivost celularnosti bez mikroskopa.
2. Ujednačenost distribucije elemenata (R)– kriterij koji ukazuje na ispravnost procesa slobodne kristalogeneze. Također se tumači prema ljestvici od šest stupnjeva (0-5 bodova) navedenoj u odjeljku o tezigrafskoj komponenti.
3. Intenzitet rubne zone (Kz)– parametar koji pokazuje prisutnost i količinu proteinske komponente biološke okoline (Shatokhina S.N., 1995; Nazarova L.O., Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 2000). Predlažemo shemu za procjenu ovog pokazatelja na polukvantitativnoj skali od šest točaka:
- 0 bodova – apsolutna odsutnost rubna zona, strije su izražene, lokalni znaci destrukcije u području ruba facijesa;
- 1 bod - rubna zona je slabo vidljiva pri malom povećanju svjetlosnog mikroskopa, uočavaju se pojedinačni "prekidi", uključujući nejasno izražene, "prikrivene";
- 2 boda - rubna zona je jasno vidljiva, gotovo je ujednačena, uočen je mali broj "greški";
- 3 boda – rubna zona je jasno razgraničena od međuzone, homogena, „greške“ se uočavaju u cijelom rubnom prstenu i nisu destruktivne;
- 4 boda – rubna zona je jasno vizualizirana, omeđena „osovinom“ od srednje zone, ima značajan broj „fraktura“, ali se ne razlikuje bez mikroskopa.
- 5 bodova – rubna zona se vizualizira bez mikroskopa, ujednačena je, bez znakova destrukcije; mikroskopija ukazuje na značajan broj "fraktura".
4. Stupanj uništenja facijesa (SDF)– integralni pokazatelj koji odražava ispravan tijek kristalogeneze (glavna kvalitativna karakteristika facijesa) i sažima i egzogene (uvjete procesa dehidracije – temperaturu, vlažnost, tlak, brzinu strujanja zraka, ulazak dodatnih tvari itd.) te endogeni čimbenici (termodinamička komponenta nastajanja kristala, prisutnost odgovarajuće količine vode za nastajanje kristalnih hidrata i stabilizaciju organskih makromolekula itd.).
* 0 stupnjeva– svi elementi facijesa su pravilne konfiguracije, nisu razoreni ni u cjelini ni u pojedinim područjima, nema znakova destrukcije teksture facijesa;
* I stupanj– elementi facijesa imaju početne znakove destrukcije, ne uočavaju se destruktivne promjene teksture;
* II stupanj– vizualiziraju se brojne uništene ili izmijenjene strukture, postoje lokalne povrede cjelovitosti teksture;
* III stupanj– svi elementi facijesa su uništeni, nemoguće je razlikovati pojedine dijelove facijesa i strukturu, uzorak je bezoblična masa amorfnog, često obojenog materijala; postoje jasni znakovi uništenja teksture.
Općenito, modeliranje formiranih struktura i korištenje različitih kriterija vrednovanja pridonijet će jasnijem razlikovanju promjena u kristaloskopskoj slici, iako će pretjerano „preopterećenje“ njima dovesti do značajnog kompliciranja procesa analize facijesa.
Kao informativniji način procjene sposobnosti pokretanja bioloških supstrata od klasične tezigrafije o kojoj je bilo riječi (Tarusinov G. A., 1994), koristili smo komparativnu tezigrafiju (Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2002-2005; Martusevich A. K. et al., 2000-2005 ), što uključuje korištenje dodatnog kontrolnog uzorka čiste bazične tvari kako bi se izjednačili različiti vanjski uvjeti; omogućuje označavanje smjera inicijacije (aktivacija ili depresija kristalogeneze kristalotvorca) i njezine ozbiljnosti.
Kao što je već spomenuto, procjena tezigrafskih facijesa teža je od kristaloskopskih, što je povezano s homogenošću morfologije prvog, pa će stoga, ako je identifikacijska tablica već razvijena za klasičnu kristaloskopiju, dodatni kriteriji igraju samo razjašnjavajuću ulogu, a zatim u tezigrafskom testu zauzimaju vodeće pozicije (Nefedova N.B., Tsyvenkova L.A., 1985; Moroz L.A., Kalikshtein D.B., 1986; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kidalov V.N., Khadartsev A. A., Yakushina G. N., 2004; Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2003-2005). U tom smislu, predlaže se klasifikacija kriterija koji se mogu koristiti pri razmatranju tezigrafskih facijesa:
I. Osnovni kriteriji
- Osnovni tezigrafski koeficijent Q
- Koeficijent obrazloženja P
- Koeficijent inicijacije M
- Relativni koeficijent N
II. Dodatni kriteriji
jednolikost gustoće facijesa (R);
stupanj celularnosti slike (I);
indeks kaosa (CH)
ozbiljnost pojedinih zona kristalizacije (Z)

Identifikacija navedenih kriterija omogućila je formiranje jedinstvenog matematičkog pristupa procjeni tezigrafskog facijesa (Martusevich A.K. et al., 2004, 2005), koji se temelji na provjeri značajnosti svakog pokazatelja u određivanju potrebnog koeficijenta derivacije.

Objašnjenja korištenih koeficijenata izračuna:
I. Glavni kriteriji:
Q = A / B, gdje je A broj centara kristalizacije u ispitnom uzorku, jedinice; B - broj centara kristalizacije u kontrolnom uzorku, jedinica.
P = d1 / d2, gdje je d1 polumjer minimalne zone kristalizacije, mm; d2 - polumjer maksimalne zone kristalizacije, mm.

II. Dodatni kriteriji:
R - stupanj ujednačenosti gustoće rasporeda elemenata tezigrafskog facijesa, bodova;
I - stupanj celularnosti tezigrafskog facijesa, bodova.

Naše istraživanje nam je omogućilo da pretpostavimo informacijski značaj gore istaknutih koeficijenata u identificiranju tezigrafskog facijesa:
1. Osnovni tezigrafski koeficijent Q– označava stupanj organiziranosti/neorganiziranosti kristalogeneze osnovne tvari (u većini slučajeva otopine natrijeva klorida izosmotske koncentracije, koja je u prirodnim neutralnim uvjetima sklona stvaranju tipičnih dehidracijskih struktura) pod utjecajem materijala pod studija.
2. Koeficijent obrazloženja P– pokazuje stupanj heterogenosti molekulskih masa komponenata supstrata koji se proučava.
3. Stupanj celularnosti slike I- eventualno dokazuje prisutnost proteinskih konglomerata različitog kemijskog sastava i svojstava na stupanj hidrofilnosti/hidrofobnosti, kao i prisutnost komponenti topivih u mastima u vodenoj otopini biološkog okoliša.
4. Parametar R - naglašava jednoliku distribuciju struktura po tezigrafskom facijesu. Može ukazivati ​​na sadržaj nevizualizirajućih komponenti u materijalu koje mogu lokalno uzrokovati inhibiciju kristalogeneze. To može biti povezano s metodom sušenja mikrouzorka.
Na temelju navedenih pokazatelja za ocjenu tezigrafskog facijesa formulirana je kratka gradacija značajki snimanja sastava tezigrafskog facijesa prema dodatnim kriterijima ocjenjivanja (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005.):
1. Ujednačenost gustoće distribucije kristalnih struktura po facijesu (R):
0 bodova - potpuni kaos facijesa, prisutnost heterogenih elemenata, praznina, mjesta nakupljanja kristalnih struktura, različita orijentacija formacija u vidnom polju.
1 bod - označene su neke skupine kristala, izolirana područja ispravna konstrukcija, zauzimajući manje od 30% ukupne površine vidnog polja, smjer figura je još uvijek kaotičan.
2 boda - uočeni su jasni "otoci" reda, koji zauzimaju od 30% do 50% prostora vidnog polja (u svakom od najmanje tri proučavana), udaljenosti između elemenata u skupinama približno su izjednačene, neki obrazac usmjerenosti je zabilježeno strukturne formacije facijes.
3 boda - prilično značajan broj strukturnih elemenata facijesa (više od 50% od ukupnog broja) je strukturiran, "otoci" uniformnosti pretvaraju se u područja relativno velika površina. Unutar ovih zona promatra se pravilan položaj i ujednačenost udaljenosti između pojedinih formacija. Uzorak smjera elemenata i zoniranje jasno se razlikuju.
4 boda - većina elemenata facijesa je strukturirana (više od 75% od ukupnog broja), ostali su raspoređeni u "otocima" po vidnom polju, često u rubnoj zoni. Razmaci između pojedinih formacija gotovo su konstantni. Orijentacija elemenata slijedi određeni obrazac gotovo cijelom površinom vidnog polja.
5 bodova - svi elementi tezigrafskog facijesa jasno su strukturirani kroz cijelo vidno polje, što potvrđuje pregled više polja. Podjela na središnju, srednju i rubnu zonu jasno je vidljiva čak i uz vizualnu kontrolu bez mikroskopa, a granice potonjeg mogu se utvrditi. Razmaci između elemenata slike su konstantni, orijentacija likova pravilna, prirodna po cijeloj površini facijesa.
2. Stupanj izraženosti celularnosti facijesa (I):
0 bodova - potpuno odsustvo znakova celularnosti, homogenost slike, nema identifikacije "otoka" kristala. Facijes predstavlja jedan "sloj" kristalnih formacija.
1 bod - prisutnost prvih znakova heterogenosti, "drobljenje" kristaloskopske slike (istaknuti su dijagnostički najznačajniji principi):
početak odvajanja skupina elemenata (manje od 30% svih formacija koje zauzimaju manje od 30% površine vidnog polja);
neka heterogenost slike;
početak “lomljenja” jednog “sloja” kristalnih figura.
2 boda - prilično je vidljiva tendencija "fragmentacije" facijesa, stvaranja "otoka" kristala (istaknuti su dijagnostički najznačajniji principi):
broj izoliranih elemenata u "otocima" je od 30% do 50% svih struktura, oni zauzimaju više od 30% površine vidnog polja facijesa;
izražena heterogenost, zonalnost slike;
vizualizira se proces "dijeljenja" facijesa na dijelove, snimaju se nastali kristalizacijski pojasevi, koji služe kao granice potonjeg, u nekim slučajevima ne duž cijele duljine, s debljinom od 1 kristala.
3 boda - uočene su izražene promjene facijesa:
elementi u "otocima" čine od 50% do 75% ukupnog broja, površina koju zauzimaju je više od 50% vidnog polja (preko nekoliko polja);
izražena heterogenost, "zrnatost" slike;
proces "komparacije" facijesa jasno je vidljiv u nekoliko vidnih polja;
Pojasevi kristalizacije su prilično različiti, formirani od više od jednog reda kristalnih struktura.
4 boda - znakovi celularnosti su pouzdano vidljivi (istaknuti su dijagnostički najznačajniji principi):
broj struktura grupiranih u stanicama od 75% do 100% od ukupnog broja potonjih;
grupirani elementi zauzimaju cijelo vidno polje (pri proučavanju nekoliko, najmanje tri vidna polja);
pojasevi kristalizacije formirani su od više od jednog reda kristala i prisutni su po cijeloj površini vidnog polja, potpuno okružuju "otoke".
5 bodova - sliku karakteriziraju sljedeće morfološke značajke (istaknuti su dijagnostički najznačajniji principi):
broj struktura grupiranih u stanicama je od 75% do 100% ukupnog broja potonjih;
grupirani elementi zauzimaju cijelo vidno polje (pri proučavanju nekoliko, najmanje tri vidna polja);
"fragmentacija" i "zrnatost" slike su vrlo jasno izražene;
kristalizacijski pojasevi formirani su od više od jednog reda kristala, prisutni su na cijeloj površini vidnog polja i potpuno okružuju "otoke";
postoje “prekidi” na slici (osim facijesa krvnog seruma, za koji je ovaj fenomen nezavisna dijagnostički znak).

Općenito, korištenje gore opisanih kriterija, indikatora i izračunatih koeficijenata omogućilo nam je algoritmiziranje postupka za izdvajanje informacijskog opterećenja skrivenog u kvalitativnom i kvantitativnom sastavu analiziranih supstrata.
U skladu s ovom shemom, analiza se provodi korak po korak u dva glavna smjera - proučavanje slobodne kristalogeneze i iniciranog stvaranja kristala, što omogućuje sveobuhvatno razmatranje i izravne sposobnosti biofluida za stvaranje kristala i njegovog pokretačkog potencijala .

Riža. 2.3.Algoritam za procjenu teziokristaloskopskog facijesa.

Dakle, široka uporaba matematičkog aparata omogućuje višeparametarsku procjenu bioloških tekućina putem njihove kristalogeneze, što daje veliki broj informacija o njihovim fizikalnim i kemijskim svojstvima, a posredno i kvalitativnom i kvantitativnom komponentnom sastavu koji, po našem mišljenju , od posebnog je značaja za kliničku, prije svega dijagnostičku, praktičnu i fundamentalnu znanost.

2.4 Statistička obrada podataka

Stvarni materijal dobiven tijekom istraživanja iz svih proučavanih ispiranja obrađen je metodom varijacijske statistike (Tyurin Yu. N., Makarov A. A., 1998.; Nasledov A. D., 2004.). Izračunate su prosječne vrijednosti (M), njihova standardna greška (m) i standardna devijacija (). Pokazatelji su smatrani pouzdanima pri p vrijednostima<0,05 (по t-критерию Стьюдента и U-критерия Манна-Уитни). Зависимость между признаками оценивали при помощи коэффициента парной корреляции (r), его ошибки (mr) и уровня значимости различий (по t-критерию Стьюдента). Зависимость считалась сильной при r  >0,7, prosjek ako je modul vrijednosti parne korelacije u rasponu od 0,3-0,7. Kada je pronađena vrijednost korelacije manja od modalne vrijednosti od 0,3, uzeta je kao slaba. Također je izračunata pouzdanost pronađene parne korelacije (p).
Izračuni su obavljeni u okruženju proračunskih tablica Microsoft Excel 2003, kao i korištenjem statističkih programskih paketa Primer of biostatistics 4.03 i SPSS 11.0.

3. Rezultati istraživanja.

Izravna procjena rezultata slobodne kristalogeneze provedena je pomoću jedinstvene identifikacijske tablice, uključujući 5 glavnih klasa kristalnih i amorfnih tvari (morfometrija), kao i dodatne kriterije (stupanj uništenja facijesa - SDF, ozbiljnost njegove rubne zone (Kz ) i celularnost (I), jednolikost elemenata distribucije (R)). Tezigrafski facijes analiziran je sustavom osnovnih (glavni tezigrafski koeficijent Q, koeficijent zonalnosti P) i dodatnih parametara (sličnih onima koji se koriste u klasičnoj kristaloskopiji).
Proučavali smo dinamiku slobodne i započete kristalogeneze urina kod zdravih i leukemijskih miševa.

3.1. Morfologija urina zdravih i umjetno zaraženih miševa s leukemijom.

Naša analiza mikropreparata osušenih uzoraka urina omogućila nam je da utvrdimo jasne "obrasce" za razmatrana stanja.
Napravljena je usporedba kristaloskopskih uzoraka dobivenih od zdravih i bolesnih životinja.

Tablica 3.1. Kristaloskopske karakteristike zdravih miševa i bolesnika s leukemijom.

Prema podacima danim u tablici 3.1, očito je da postoje jasne varijacije u kristaloskopskom uzorku između kontrolne i eksperimentalne skupine.

Na temelju rezultata vizualne morfometrije utvrđeno je da postoje značajne značajke kristaloskopske slike urina miševa s leukemijom u usporedbi sa zdravim životinjama, među kojima su najznačajnije:
povećanje broja dendrita u bolesnih miševa, s iznimkom potpunog odsustva obloženih polikristalnih struktura, što potvrđuje promjene zabilježene u monokristalnoj komponenti;
koncentracija amorfnih formacija, koja se sastoji u njihovom povećanju i smanjenju količine, njihovom naglašenom razgraničenju od velikih kristalnih figura;
povećanje stupnja razaranja facijesa (glavni pokazatelj nestabilnosti kristaloskopskog facijesa);
smanjenje ujednačenosti raspodjele kristalnih i amorfnih tvorevina u mikropreparatu, praćeno dezagregacijom elemenata facijesa, što se očituje u značajnom porastu stupnja celularnosti (p<0,05).
Na temelju rezultata procjene kristalotvorne sposobnosti mišjeg krvnog seruma formiran je "obrazac" karakterističan za zdrave miševe i miševe s leukemijom.

3.2. Glavni kriteriji za procjenu tezigrafskog facijesa krvnog seruma u miševa u normalnim uvjetima i patologiji (leukemija).

Studija je uključivala i potragu za kvalitativnim markerima leukemije i formiranje kvantitativnih "obrazaca" tezigrafije. Skup dijagnostički značajnih kvalitativnih parametara sastavljen je na temelju detekcije znakova patoloških promjena u urinu bolesnih miševa.
U skladu s podacima prikazanim na Sl. 2.4, najznačajniji razlikovni pokazatelji tezigrama urina zdravih miševa i miševa s leukemijom pri upotrebi 10% otopine natrijevog klorida kao osnovne tvari su:
- prirodu pokretanja osnovne tvari biološkim okolišem (u zdravih miševa - izražena aktivacija kristalogeneze osnovne tvari, u bolesnih miševa s leukemijom - umjerena inhibicija);
- nejednak organsko-mineralni sastav biofluida (prevladavanje mineralnih komponenti u zdravih miševa i prevlast organskih spojeva u miševa s leukemijom);
- stupanj destrukcije facijesa, koji je nešto veći kod predstavnika eksperimentalne skupine;
- proširenje rubne zone u faciji miševa s leukemijom, sa značajnom težinom u praktički zdravih jedinki, što je pretpostavljeni marker leukemije.

Tablica 3.2. Usporedna tezigrafija urina zdravih miševa i miševa s leukemijom (osnovna tvar – 10% otopina natrijevog klorida)

Napomena: “*” – značajnost razlika u odnosu na kontrolnu skupinu str<0,05

Riža. 2.4. Promjene u glavnim i dodatnim kriterijima tezigrafije urina u miševa s leukemijom u usporedbi sa zdravim

3.3 AKR miševi

Visoko leukemijska linija miševa AKR dobivena je križanjem blisko povezanih jedinki 1928. godine. Miševi obaju spolova osjetljivi su na limfoidnu leukemiju. Oko 91% žena umire od leukemije do 300 dana.

3.4 Dinamika razvoja leukemije.

Riža. 3.1 Facijes je homogen, nema izraženih tvorevina – zdravi miš X40

Riža. 3.2 Facijes je homogen, javljaju se prvi znaci fragmentacije rubne zone - prvi znaci razvoja leukemije, dob 5 mjeseci. X40

Riža. 3.3 Heterogenost strukture, slaba izraženost rubne zone, manifestacija celularnosti - početak razvoja leukemije. 7 mjeseci X40

Riža. 3.4 Početak pojave linijskih dendritičnih struktura je razvoj leukemije. 8 mjeseci X40

Riža. 3.5 U građi facijesa prevladavaju obrubljene i pravokutne dendritične strukture - razvijena leukemija, 9 mjeseci. X40

Riža. 3.6 Izražena celularnost facijesa, neravnomjerna gustoća rasporeda elemenata - jako razvijena leukemija. 13 mjeseci X40

3.5 Zaključci

Na temelju detekcije nekoliko kvalitativnih parametara (najmanje 3) eksperimentalnog biouzorka na površini suhe kapi urina, čini se mogućim identificirati prisutnost patoloških promjena ili stupanj razvoja akutne leukemije.
Koristeći podatke dane u tablici 3.2, može se primijetiti da se u odnosu na koeficijente Q i P, značajne razlike u njegovim vrijednostima bilježe u tezigramima urina.
U skladu s podacima prikazanim u tablici 3.2, pouzdanost razlika između glavnih pokazatelja tezigrafije potvrđuje značaj značajki tezigrafskog facijesa urina otkrivenih pomoću kvalitativnih znakova.
Dakle, korištenje metode usporedne tezigrafije urina u zdravih miševa i miševa s leukemijom omogućuje prepoznavanje kvalitativnih i kvantitativnih markera prisutnosti leukemije.
Teziokristaloskopska analiza biofluida omogućuje multiparametrijsku procjenu metaboličkih informacija koje sadrže, što može biti korisno u indikaciji fizioloških i patoloških stanja kod ljudi i životinja. Svaki biofluid ima svoje karakteristike kristalogeneze, što je povezano s razlikovanjem njihovog kemijskog sastava i funkcija.
Pri proučavanju kristaloskopske komponente preporuča se koristiti jednu identifikacijsku tablicu, a tezigrafsku komponentu - glavne (koeficijenti Q i P) i dodatne (ujednačenost distribucije uzoraka, celularnost itd.) Kriteriji ocjenjivanja. Nastavak istraživanja poslužit će razvoju ideja o sub- i molekularnim mehanizmima razvoja fizioloških i patoloških reakcija ljudskog tijela.

Popis korištene literature:

1. Agafonov V. A., Bagrov S. N. Proučavanje stanja staklastog tijela metodom sušenja // Zbirka članaka. znanstveni članci “Transcilijarna kirurgija leće i staklastog tijela.” - Moskva. – 1982. – Str. 158-164.
2. Alekseeva O. P., Vorobyov A. V. Kristalografija sline - nova neinvazivna metoda za dijagnosticiranje H. pylori // Nizhny Novgorod Medical Journal. – 2003. - br.2. – str. 73-78.
3. Antropova I.P., Gabinsky Ya.L. Kristalizacija biofluida u zatvorenoj ćeliji na primjeru sline // Klinička laboratorijska dijagnostika. - 1997. - br. 8. - Str. 36-38.
4. Babenko G.A. Maligni rast, metali i kelirajuća sredstva. Biološka uloga mikroelemenata. - M.: Nauka, 1983.
5. Barer G. M., Denisov A. B., Mikhaleva I. N. i sur. Kristalizacija oralne tekućine. Sastav i čistoća površine supstrata // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. – 1998. – T. 126, br. 12. – str. 693-696.
6. Sigurnost života. Sigurnost tehnoloških procesa i proizvodnje (Zaštita na radu). uč. priručnik za sveučilišta/P. P. Kukin i dr. – M., 1999.
7. Brown G., Walken J. Tekući kristali i biološke strukture. M.: Mir, 1982. – 198 str.
8. Bubon N. T., Puzyrevsky K. Ya. Mikrokristaloskopska reakcija za detekciju papaverina // Farmaceutsko poslovanje. – 1965. - br.2. – Str. 50-52.
9. Buzoverya M. E., Shishpor I. V., Shatokhina S. N. i sur. Morfometrijska analiza facijesa krvnog seruma // Klinička laboratorijska dijagnostika. - 2003. - br. 9. - str. 22-23.
10. Bystrevskaya A. A., Deev L. A. Ovisnost strukture suzne tekućine o vrsti podražaja i kvaliteti supstrata // Materijali III Sveruske znanstvene i praktične konferencije “Funkcionalna morfologija bioloških tekućina”. - Moskva. – 2004. – Str. 17-19.
11. Wegman E. F., Rufanov Yu. G., Fedorchenko I. N. Kristalografija, mineralogija, petrografija i radiografija. M.: Metalurgija, 1990. – 263 str.
12. Volchetsky A. L., Ruvinova L. G., Spasennikov B. A. et al. Kristalizacija i kristalografija: medicinski i biološki aspekti. Arkhangelsk, 1999. – 374 str.
13. Volchetsky A. L., Spasennikov B. A., Agafonov V. M. et al. Modifikacija metode i računalni smjer tezigrafske analize // Human Ecology. – 1999. – br.3. – str. 38-42.
14. Vorobyov A.V., Vorobyov P.V., Vorobyova V.A. Određivanje energetsko-informacijske komponente osobe pomoću metode osjetljive kristalografije // Proc. izvješća XI Moskovske međunarodne homeopatske konferencije “Razvoj homeopatske metode u suvremenoj medicini”. - Moskva. –2001. – 202-207 str.
15. Vorobyova V. A., Vorobyov A. V., Zamarenov N. A. Obrazac formiranja kristalografske slike tijekom interakcije ljudske biološke tekućine i homeopatskog lijeka s otopinom koja stvara kristale / Discovery. – Diploma Ruske akademije prirodnih znanosti br.231. (Prioritet od 8. lipnja 2002.).
16. Golubev S. N. Živi kristali // Priroda. – 1989. - br.3. – Str. 13-21.
17. Gordienko A. N., Kurbatova L. A., Filippov A. N. // Fizika kristalizacije. - Kalinjin. – 1985. – Br. 8. – str. 83-86.
18. Gromova I. P. Kristaloskopska metoda za proučavanje krvnog seruma u toksikološkom i higijenskom eksperimentu metodom "otvorene kapi" // Higijena i sanitacija. – 2005. – br.2. – str. 66-69.
19. Gulyaev V. G., Martusevich A. K., Koshkin A. N. Značajke i izgledi za korištenje kristalografskih istraživačkih metoda u forenzici // Mat. međusveučilišni znanstveno-praktični skup s internetskim sudjelovanjem "Aktualna pitanja kriminalistike i vještačenja: problemi i perspektive." - Kirov: KF MSAL. - 2004. – Str. 35-39.
20. Gulyaeva S. F., Martusevich A. K., Pomaskina T. V. Matematičko modeliranje rezultata započete kristalogeneze sline kao kriterija učinkovitosti unosa mineralne vode // Human Ecology. – 2005. – br.7. – str. 33-35.
21. De Zhe V. Fizikalna svojstva tekućih kristalnih tvari. M.: Mir, 1982. – 175 str.
22. Deryabina N. I., Zalessky M. G. Sadržaj proteinskih komponenti u kapi krvnog seruma kada se osuši // Bilten novih medicinskih tehnologija. – 2005. – T. XII, br. – str. 85-87.
23. Dawson R, Elliot D, Elliot W i sur. Priručnik za biokemičara. M.: Mir, 1997. - 544 str.
24. Zamkova N. G., Zinenko V. I. Dinamika rešetke ionskih kristala u modelu disanja i polarizirajućih iona. // FTT. - 1998. - T. 40, br. 2. - P. 350-354.
25. Zaitsev V.V., Zaitseva N.B., Usoltseva N.V. Teksture bioloških tekućih kristala pacijenata s infarktom miokarda // Proceedings of the Academy of Sciences. Physical series - 1996. - vol. 60, no. 4 - pp. 115-118.
26. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Proučavanje faznih prijelaza i inkomenzurne faze u kristalima ASVKh 4 metodom Monte Carlo. // Kristalografija. - 2000. - T. 45, br. 3. - P. 513-517.
27. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Mikroskopski proračuni strukturnih faznih prijelaza tipa pomaka (kristali sa strukturom elpasolita) i tipa reda-poremećaja (porodica kalijevog sulfata). // Kristalografija. - 2004. - T. 1, br. 1. – str. 38-45.
28. Ivanov O. V., Shport D. A., Maksimov E. G. Mikroskopski proračuni feroelektrične nestabilnosti u kristalima perovskita // JETP - 1998. - T. 114, br. 1. - P. 333-358.
29. Kalikshtein D. B., Moroz L. A., Kvitko N. N. et al. Kristalografsko istraživanje bioloških supstrata // Klinička medicina. – 1990. - br.4. – Str. 28-31.
30. Kalikshtein D. B., Moroz L. A., Chernyakov V. L. Značaj tezigrafske metode istraživanja urina // Laboratorijski rad. – 1981. - br.2. – Str. 79-81.
31. Kalinin A.P. i dr. Informativnost metode kristalnih naslaga krvnog seruma kod nekih endokrinih bolesti // Zbornik radova Sveruske znanstvene i praktične konferencije. "Kristalografske metode istraživanja u medicini", Moskva - 1997. - S. 131-133
32. Kamakin N. F., Martusevich A. K. O tehnici teziokristaloskopije biofluida // Klinička laboratorijska dijagnostika. - 2002. - br. 10. - str. 3.
33. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Moderni pristupi kristaloskopskoj identifikaciji sastava bioloških tekućina // Human Ecology. - 2003. - br. 5. - str. 23-25.
34. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Karakteristike teziokristaloskopskog portreta bioloških tekućina ljudskog tijela u normalnim uvjetima iu patologiji // Bilten novih medicinskih tehnologija. - 2003. - T. X, br. 4. - str. 57-59.
35. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Kolevatykh E.P. O primarnoj i sekundarnoj biokristalizaciji // Zbornik članaka. znanstveni radovi “Prirodoslovlje i humanizam”. – Tomsk. – 2005. – T. 2, br. 1. – str. 18-19.
36. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Koshkin A.N. Izgledi za razvoj kristalografskih istraživačkih metoda // Vyatka Medical Bulletin. - 2003. - br. 3. - Str. 6-11. Kamakin N.F., Martusevich A.K. Obilježja teziokristaloskopskog portreta bioloških tekućina ljudskog tijela u normalnim i patološkim stanjima // Bilten novih medicinskih tehnologija. 2003. T. X. br. 4. str. 57–59.
37. Kamyshnikov V. S. Priručnik kliničke i biokemijske laboratorijske dijagnostike. U 2 sveska Minsk: Bjelorusija, 2000. Vol.1. 495 str.; T.2. 463s.
38. Karkishchenko N. N. Osnove biomodeliranja. M.: Izdavačka kuća VPK, 2004. – 608 str.
39. Karachunsky A.I. Akutna limfoblastna leukemija u djece. Predavanja o aktualnim problemima pedijatrije. ur. V.F.Demina, S.O.Klyuchnikova., M: RGMU; 2000. godine.
40. Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N. Teziografski testovi krvi i njihove praktične mogućnosti // Bilten novih medicinskih tehnologija. – 2004. – T. XI, br. 1-2. - str. 23-25.
41. Koledintsev M. N., Nechaev D. F., Maichuk N. V. Fizičke osnove kristalografske analize u oftalmologiji // Zbornik članaka. sažetak izvješća međuregionalne znanstvene i praktične konferencije mladih znanstvenika i studenata s međunarodnim sudjelovanjem "St. Petersburg Scientific Readings-2002". - St. Petersburg. - 2002. - Str. 42-43.
42. Kolotilov N. N., Bakai E. A. Struktura tekućih kristala bioloških objekata // Molekularna biologija. – 1980. – Br. 27. – str. 87-96.
43. Kononenko E. V., Mironov E. V. Dislokacijsko-disklinacijski mehanizmi transformacije teksture biofluida tijekom agregacije // Proc. znanstveni zbornik 2. Sveruske znanstveno-praktične konferencije „Morfologija bioloških tekućina u dijagnostici i praćenju učinkovitosti liječenja.” - Moskva. – 2001. – S. 21-26.
44. Korago A. A. Uvod u biomineralogiju. St. Petersburg: Nedra, 1992. – 280 str.
45. Koshkin A. N., Martusevich A. K., Lopatin M. A. Kristaloskopija biofluida ljudskog tijela kao dijagnostička metoda // Bilten Ruskog državnog medicinskog sveučilišta. – 2002. - br.1. – Str. 134.
46. ​​​​Kristalografske metode istraživanja u medicini: sub. znanstveni Zbornik radova 1. Sveruske znanstveno-praktične konferencije. - M., 1997.
47. Kristaloskopska metoda za proučavanje bioloških supstrata: Metoda. preporuke / L. A. Moroz, I. L. Theodor, V. E. Bryk i sur. – M., 1981. – 9 str.
48. Kuznetsov V. D. Kristali i kristalizacija. M., 1954. – 65 str.
49. Kuznetsov A.V., Rechkalov A.V., Smelysheva L.N. Gastrointestinalni trakt i stres. Kurgan: Izdavačka kuća Kurganskog državnog sveučilišta, 2004. – 254 str.
50. Kuznetsov N. N., Vershinina G. A., Skopinov S. M. et al. Optičke polarizacijske i refraktometrijske metode u procjeni težine sindroma endogene intoksikacije u djece // Zbornik članaka. znanstveni zbornik 2. Sveruske znanstveno-praktične konferencije „Morfologija bioloških tekućina u dijagnostici i praćenju učinkovitosti liječenja.” - Moskva. – 2001. – Str. 30-33.
51. Kuznetsov N. N., Skopinov S. A., Vershinina G. A. et al. Kristaloskopska metoda za dijagnosticiranje endogene intoksikacije u djece. RF patent br. 2158923 od 04.03.1998
52. Kungurov N.V., Kokhan M.M., Kononenko E.V. et al. Kristalografska istraživanja bioloških tekućina u bolesnika s kroničnim dermatozama. Ekaterinburg, 1997. – 41 str.
53. Kurnysheva N.I., Deev A.I., Gryzunov Yu.A. et al. Metoda za procjenu involucijske oftalmološke endotoksikoze fluorescentnim ispitivanjem suzne tekućine, Oftalmološki bilten. – 2000. – br.3. – str. 16-19.
54. Lobanov V. I. Mikrokristaloskopske reakcije za detekciju nekih derivata barbiturne kiseline // Journal of Analytical Chemistry. – 1966. - 1. br. – Str. 110.
55. Loktyushin A. A., Manakov A. V. Minerali i život u holografskom modelu materije // Proc. 2. međunarodni seminar “Mineralologija i život: Biomineralne interakcije”. – Syktyvkar. – 1996. – S. 10-11.
56. Martusevich A.K. Kristaloskopske metode istraživanja u fiziologiji // Russian Physiological Journal named after. I. M. Sechenov. – 2004. – T. 90, br. 8. – Str. 18.
57. Martusevich A.K. Informacijska fizička i biokemijska teorija kristalizacije kao odraz morfologije bioloških tekućina // Bilten sibirske medicine. – 2005. – T. 4. – Dodatak 1. – S. 185.
58. Martusevich A.K., Koshkin A.N. Problemi istraživačkog pristupa u kristalografiji biofluida // Mat. treća interdisciplinarna konferencija s međunarodnim sudjelovanjem “NBITT-21”. – Petrozavodsk. – 2004. – 50. str.
59. Martusevich A.K., Koshkin A.N. Osobitosti utjecaja uvjeta kristalizacije bioloških tekućina ljudskog tijela na rezultat teziokristaloskopskog testa // Zbornik članaka. znanstveni članci mladih znanstvenika i stručnjaka Ruske Federacije posvećeni konferenciji nazvanoj po. akad. B. S. Grakova "Aktualna pitanja medicine i novih tehnologija - 2003." - Krasnojarsk. - 2003. - Str. 154-157.
60. Martusevich A.K., Ponomareva G.L. Matematičke metode za identifikaciju tezigrafskih facijesa pomoću evaluacijskog broja u bolesnika s lumbalnom osteohondrozom // Klinička laboratorijska dijagnostika. – 2004. - br.9. – str. 85-86.
61. Menshikov V.V. Laboratorijski testovi u kliničkoj praksi. M.: Medicina, 1988. - 428 str.
62. Mikrometoda za određivanje slobodnih aminokiselina u krvnom serumu pomoću papirne kromatografije // Medicinske laboratorijske tehnologije. St. Petersburg, 1999. – T. 2. – P. 106-108.
63. Moroz L. A., Kalikshtein D. B. Kristalografska metoda za proučavanje bioloških supstrata. Smjernice. M., 1986. – 24 str.
64. Mushkambarov N. N. Fizička i koloidna kemija: Tijek predavanja. M.: GEOTAR-MED, 2001. – 384 str.
65. Nazarenko G. I., Kishkun A. A. Klinička procjena rezultata laboratorijskih istraživanja. M.: Medicina, 2000. – 544 str.
66. Nikolskaya M.N., Gandel V.G., Popkov V.A. Detekcija sulfonamidnih lijekova kristalizacijom u tankom sloju // Ljekarničko poslovanje. – 1965. - br.4. – str. 13-14.
67. PB 10-115-96. Pravila za projektiranje i siguran rad tlačnih posuda.
68. Pikin S. A. Strukturne transformacije tekućih kristala. - M. - 1981. - 269 str.
69. Plaksina G.V., Komolova G.S., Mashkov A.E. et al. Stabilizirajući učinak angiogenina iz mlijeka na kristalnu strukturu bioloških tekućina // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. – 2003. – T. 136, br. 10. – str. 406-409.
70. Plaksina G. V., Rimarchuk G. V., Butenko S. V. et al. Klinički značaj kristalografske i kristaloskopske metode ispitivanja urina // Klinička laboratorijska dijagnostika. – 1999. - br.10. – Str. 34.
71. Prigogine I., Stengers I. Red iz kaosa / Prijevod. s engleskog M.: Napredak, 1986. – 429 str.
72. Rapis E. G. Mikrokristalno-optička metoda korištenja staklastog tijela ljudi i životinja u normalnim uvjetima i kod hemoftalmije // Bulletin of Ophthalmology. – 1976. – br.4. – str. 62-67.
73. Rapis E. G. Protein i život. Samoorganizacija, samosastavljanje i simetrija nanostrukturiranih supramolekularnih proteinskih filmova. M.: “MILTA - PKP GIT”, 2003. – 368 str.
74. Romanov Yu. A. Teorija bioloških sustava i problem njihove vremenske organizacije // Problemi kronobiologije. – 1992. – br. 3-4. – str 105-123.
75. Savina L. V. Kristaloskopske strukture krvnog seruma u klinici za interne bolesti: Sažetak disertacije. diss... d.m.s. - Perm, 1992. - 40 str.
76. Savina L. V. Kristaloskopske strukture krvnog seruma zdrave i bolesne osobe. Krasnodar, 1999. – 238 str.
77. Savina L. V. Stvaranje strukture krvnog seruma u uvjetima vakuuma // Klinička laboratorijska dijagnostika. – 1999. - br.11. – Str. 48.
78. Savina L.V., Konueva O.V., Korotko G.G. et al. Kristaloskopska dijagnostika poremećaja egzokrine funkcije gušterače u bolesnika s kroničnim pankreatitisom / IV međunarodni kongres "Parenteralna i enteralna prehrana". - Moskva, 2000. - S. 98.
79. Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V.Yu et al. Polarizacijska mikroskopija u dijagnostici metaboličkih poremećaja // Klinička laboratorijska dijagnostika. - 2003. - br. 3. - str. 11-13.
80. Saltykov A. B. Morfološki aspekti procesa formiranja funkcionalnih sustava // Napredak moderne biologije. – 2005. – T. 125, br. 2. – 167-178 str.
81. Skalny A.V., Jesenjin A.V. Praćenje i procjena rizika izloženosti olovu ljudi i okoliša korištenjem ljudskih biosupstrata // Toksikološki bilten. broj 6, 1996. - str. 16-23.
82. Skopinov S. A. Računalno modeliranje kristalizacije soli iz biofluida // Kristalografske metode istraživanja u medicini. sub. znanstveni Zbornik radova 1. Sveruske znanstveno-praktične konferencije. . M., 1997. . S. 33.36
83. Smotrova S.P., Chesnokova S.M. i dr. Nedostatak selena u uvjetima onečišćenja okoliša // Materijali III Međunarodne znanstveno-tehničke konferencije "Fizika i radioelektronika u medicini i biotehnologiji" - Vladimir, 1998. - P. 304-305.
84. Sobur S.V. Protupožarna sigurnost električnih instalacija: Referenca/S. V. Sobur - M., 2003.
85. Sonin A. S. Uvod u fiziku tekućih kristala. M., 1989. – 369 str.
86. Osobna zaštitna oprema: Ref. dodatak/S. L. Kaminsky. – L., 1989. (monografija).
87. Surovkina M. S., Shatokhina S. N., Surovkin V. A. i sur. Promjene u razini molekula prosječne mase i sustavne organizacije krvne plazme u starijih bolesnika // Sat. znanstveni zbornik 2. Sveruske znanstveno-praktične konferencije „Morfologija bioloških tekućina u dijagnostici i praćenju učinkovitosti liječenja.” - Moskva. – 2001. – S. 18-20.
88. Tarasevich S. Yu. // Journal of Technical Physics. – 2001. – T. 71, br. 5. – 123-125 str.
89. Tarusinov G. A. Kristalografsko ispitivanje urina u dijagnozi i diferencijalnoj dijagnozi difuznih bolesti vezivnog tkiva u djece // Pedijatrija. – 1994. - br.1. – str 55-57.
90. Tekutskaya E.E., Sofina L.I. i dr. Metode i praksa praćenja sadržaja teških metala u biološkim medijima. // Higijena i sanitacija – 1999-br.4–P.72-74.
91. Teziokristaloskopsko istraživanje bioloških supstrata: Metodološke preporuke / Kamakin N. F., Martusevich A. K. - Kirov, 2005. - 34 str.

Za pravilno planiranje trudnoće, prepoznavanje različitih poremećaja reproduktivnog sustava i izbor optimalne metode kontracepcije potrebno je jasno razumijevanje prirode menstrualne funkcije žene, čija je jedna od ključnih karika ovulacija .

Menstrualnog ciklusažene, što predstavlja razdoblje od 1. dana jedne menstruacije do 1. dana sljedeće menstruacije, u prosjeku traje 28-30 dana. Tijekom prve polovice menstrualnog ciklusa jedan od jajnika sazrijeva folikul, koji je mjehurić ispunjen tekućinom i sadrži jaje koje sazrijeva. Na 14-15 dan ciklusa Dolazi do ovulacije, što znači da zrela jajna stanica izlazi iz folikula, spremna za oplodnju.

Zrelo jaje nakon ovulacije sposoban za oplodnju unutar 2 dana, a spermatozoidi imaju oplodnu aktivnost 4 dana nakon ejakulacije. Prema tome, ukupno razdoblje najvjerojatnije mogućnost začeća je 6 dana .

Za određivanje razdoblja vjerojatnog začeća koriste se različite metode za određivanje trenutka ovulacije, koje uključuju: procjenu prirode kristalizacije sluzi sadržane u cervikalnom kanalu ili kristalizacije sline; mjerenje temperature u rektumu; ultrazvučni podaci; proučavanje razine hormona.

Dakle, tijekom razdoblja ovulacije, sluz sadržana u cervikalnom kanalu, nakon što se nanese na predmetno staklo i osuši, prolazi kroz kristalizaciju i oblikuje uzorak sličan listu paprati. Ovaj proces kristalizacije posljedica je niza biofizičkih i biokemijskih promjena koje se događaju u cervikalnoj sluzi.

Aktivnost proizvodnje sluzi od strane žlijezda, koje se nalaze u zidovima cervikalnog kanala, kontrolirana je razinom ženskih spolnih hormona - estrogena. Kako se približava trenutak ovulacije, koncentracija i aktivnost estrogena raste. To dovodi do povećanja količine proizvedene sluzi i do povećanja soli natrija i kalija u njoj. Posljedično, kada se sluz osuši, soli koje sadrži stupaju u interakciju s mucinom, koji oblikuje uzorak nalik listu paprati.

Pregledom razmaza sluzi pod mikroskopom vidljivo je da se od 9. dana ciklusa pojavljuju slabi znaci kristalizacije. Nadalje, ozbiljnost uzorka postupno se pojačava, pojavljuje se jasnije 3-4 dana prije ovulacije i doseže najjasnije obrise na dan ovulacije. Nakon ovulacije, kristalizacija se smanjuje. Crtež postaje nejasan i poprima "mutan" izgled unutar 2-3 dana.

Određivanje vremena ovulacije testom kristalizacije cervikalne sluzi zahtijeva svakodnevnu posjetu ginekologu. U nizu slučajeva, zbog patoloških promjena u cerviksu ili upalnog procesa, studija može biti otežana ili se pouzdanost rezultata može smanjiti, jer je slika kristalizacije iskrivljena.

Promjene u obrascima kristalizacije tijekom menstrualnog ciklusa, slične cervikalnoj sluzi, također se događaju u slini. Povećanje razine estrogena kako se približava ovulacija dovodi do povećanja količine natrijevih i kalijevih soli u slini, kao iu cervikalnoj sluzi. Njihova koncentracija doseže maksimum na dan ovulacije, što dovodi do kristalizacije sline kada se osuši. Pouzdanost testa kristalizacije sline za određivanje ovulacije je od 96% do 99%.

Za procjenu uzorka kristalizacije sline i, sukladno tome, određivanje vremena ovulacije, koriste se različiti mini-mikroskopi, koji su kompaktni i lagani optički instrumenti koji su prikladni za korištenje u svakodnevnim uvjetima.

U dane kada začeće još nije moguće(5-6 dana prije ovulacije ili više) ili kada to više nije moguće (3-4 dana nakon ovulacije), osušena slina oblikuje mutni uzorak poput točkica. 3-4 dana prije ovulacije bilježi se slika početka formiranja strukture uzorka poput paprati. Kako se približava ovulacija, uzorak će postati jasniji, što ukazuje na veliku vjerojatnost začeća. Unutar 2-3 dana nakon ovulacije, jasnoća uzorka se smanjuje.

Upalni procesi u usnoj šupljini ili grkljanu mogu dovesti do iskrivljenih rezultata. Preporuča se koristiti jutarnju slinu ili koristiti test ne ranije od 2-3 sata prije jela, pranja zubi, pijenja alkohola ili pušenja.

Ako je trajanje postojanja svakog mikroskopskog obrasca kristalizacije i cervikalne sluzi i sline, kao i njegove zamjene drugim uzorkom, konstantno i dosljedno u skladu s fazama menstrualnog ciklusa, onda to ukazuje na odsutnost njegovih poremećaja, a ovulacija se događa u pravo vrijeme iu svakom menstrualnom ciklusu. Dugotrajno postojanje istog uzorka kristalizacije, njegovo odsustvo ili nepravodobna zamjena drugim uzorkom ukazuje na disfunkciju jajnika. U tom slučaju svakako se morate posavjetovati s liječnikom.

Za određivanje ovulacije također možete koristiti temperaturni test, koji se temelji na činjenici da se ovisno o fazi menstrualnog ciklusa tjelesna temperatura mijenja na određeni način. Najtočniji podaci o prirodi toplinskih promjena koje se događaju mogu se dobiti mjerenjem temperatura u rektumu odmah nakon spavanja, u mirovanju, bez ustajanja iz kreveta, svakodnevno tijekom cijelog menstrualnog ciklusa. U prvoj fazi normalnog menstrualnog ciklusa temperatura je obično niža 37°C. Doslovno uoči ovulacije lagano se smanjuje, a odmah nakon nje temperatura raste za 0,4–0,6 ° C u usporedbi s početnom i, u pravilu, postaje nešto viša od 37 ° C. Pojavne fluktuacije temperature povezane su s promjenama razine estrogena u prvoj i drugoj fazi menstrualnog ciklusa i povećanjem razine progesteron u drugu fazu. Istodobno, progesteron, koji se počinje pojačano stvarati u jajniku upravo nakon ovulacije, utječe na centar za termoregulaciju, što dovodi do blagog porasta tjelesne temperature. Ako iz nekog razloga ne dođe do ovulacije, tada će temperatura tijekom cijelog ciklusa biti približno ista.

U sklopu sveobuhvatne dijagnoze moguće je koristiti metode za određivanje razine ženskih spolnih hormona (različitih frakcija estrogena i progesterona), kao i folikulostimulirajućih i luteinizirajućih hormona u krvi. Koncentracija ovih hormona mijenja se na određeni način iz dana u dan ovisno o fazama menstrualnog ciklusa, prisutnosti ili odsutnosti ovulacije.

Uz pomoć ultrazvuka također je moguće pratiti nastanak folikula, odrediti njegovu veličinu i odrediti trenutak ovulacije. Prisutnost folikula koji sazrijeva u jajniku označena je stvaranjem šupljine koja se postupno povećava do 2-3 cm u promjeru u prvoj polovici menstrualnog ciklusa i nestaje u sredini. Promjene u veličini ove formacije, u pravilu, jasno su povezane s promjenama u obrascu kristalizacije sluzi, s temperaturom u rektumu i s razinom hormona. Znak zrelosti folikula i skorog (1,5 - 2 dana) početka ovulacije prema ultrazvuku je otkrivanje tuberkuloze koja nosi jaje, koja izgleda kao mala svijetla formacija uz unutarnju površinu folikula. Na ovulaciju ukazuje ne samo nestanak folikula, već i istodobna pojava tekućine iza maternice.

Vjeruje se da ultrazvuk omogućuje dobivanje pouzdanije informacije o sazrijevanju folikula u usporedbi s hormonskim testovima, budući da nekoliko patološki nezrelih folikula zajedno mogu dati normalnu razinu hormona koji se testiraju, što će stvoriti pogrešan dojam normalnog tijeka menstrualnog ciklusa.

Trenutno je ultrazvuk jedna od važnih metoda praćenja procesa stimulacije ovulacije i njegove učinkovitosti. Dakle, s pretjeranom stimulacijom, opaža se značajno povećanje jajnika s formiranjem višestrukih šupljinskih struktura u njima.

Dakle, korištenje različitih metoda za određivanje ovulacije omogućuje kontrolu prirode menstrualnog ciklusa i odabir najpovoljnijeg razdoblja za začeće tijekom planirane trudnoće. Koristeći ove testove za sprječavanje neželjene trudnoće, možete odabrati najracionalniji kontracepcijska shema ili jednostavno izbjegavajte spolnu aktivnost u danima kada je začeće najvjerojatnije. Navedenim pretragama također je moguće pratiti učinkovitost liječenja usmjerenog na korekciju menstrualne funkcije.

Osim toga, uz pomoć niza jednostavnih testova, kao što je mjerenje temperature u rektumu ili procjena kristalizacije sline, žena može samostalno pratiti svoju menstrualnu funkciju.