بررسی میکروسکوپی مدفوع. تشخیص درون حیاتی هلمینتیازها

روش های مستقیم: تشخیص خود کرم ها، قطعات آنها، تخم ها، لاروها در مدفوع، ادرار، ترشح اثنی عشر، خلط، مخاط بینی و واژن، محتویات فضاهای زیر زبانی، تکه های بافت بیوپسی شده.

هنگام تشخیص، تشخیص تخم‌ها یا لاروهای انواع کرم‌هایی که در آن زندگی می‌کنند، با هر روشی غیرممکن است. دستگاه گوارششخص بنابراین، هنگام استفاده از روش فلوتاسیون، تخم‌های ترماتود و در برخی موارد تخم‌های کرم گرد بارور نشده در لایه سطحی شناور نمی‌شوند (به دلیل وزن مخصوص بالا). در مدفوع، یافتن تخم‌های کرم سوزنی، انکوسفرهای تنیدی، که با روش‌های تحقیقاتی خاص شناسایی می‌شوند، بسیار نادر است: خراشیدن از چین‌های دور مقعدی برای کرم‌های سوزنی و تنید، روش‌های ته‌نشینی برای ترماتودها (تخم‌های اپیستورچ و غیره). بنابراین، برای معاینه هدفمند بیمار از نظر کرمی، پزشک در ارجاع باید مشخص کند که کدام کرم ها باید مورد توجه اصلی قرار گیرند (تشخیص)، که به دستیار آزمایشگاه اجازه می دهد تکنیک مناسب را برای شناسایی این نوع کرم انتخاب کند. مدفوع گرفته شده از جاهای مختلفمدفوع به مقدار حداقل 50 گرم (قاشق چایخوری) در ظرف شیشه ای تمیز باید حداکثر تا یک روز پس از اجابت مزاج به آزمایشگاه فرستاده شود و در روز پذیرش معاینه شود.

در صورت لزوم، مدفوع را ذخیره کنید تا روز بعددر جای سرد (0-4 درجه سانتیگراد) قرار داده می شود یا با یکی از مواد نگهدارنده پر می شود.

قبل از مطالعه، مدفوع با چوب مخلوط می شود تا تخم های کرم به طور مساوی در کل توده توزیع شوند.

اگر هر گونه تخم کرم در آماده سازی یافت شود، مشاهده متوقف نمی شود، زیرا. ممکن است تهاجم دو یا سه گانه باشد.

نظارت بر اثربخشی درمان کرمی با بررسی مدفوع برای تخم های کرم در 2-3 هفته یا 2-3 ماه پس از درمان، بسته به کرم شناسایی شده انجام می شود.

روش های ماکروسکوپی برای تشخیص کامل کرم های بالغ از نظر جنسی یا تکه های آنها در مدفوع با چشم غیرمسلح یا با ذره بین دستی استفاده می شود.

اغلب روی سطح مدفوع پس از اجابت مزاج، می توانید کرم های خزنده فعال را ببینید. دفع با مدفوع کرم گرد؛ گاهی اوقات خود افراد متوجه ترشح کرم ها می شوند. در بیماران مبتلا به دی فیلوبوتریازیس، قطعات استروبیلی کرم نواری (به شکل "نودل") می تواند برجسته شود، و در بیماران آلوده به تنیدها (کرم گاو یا خوک)، بخش هایی از کرم ها اغلب با مدفوع ترک می کنند (به شکل "برش های سفید") یا آنها به طور فعال از آن خارج می شوند مقعد.

روش ماکروسکوپی اصلی ترین روش برای تشخیص افتراقی تنیادوز و تنیارینکوز (در ترکیب با بررسی) است.

از روش های خاص ماکروسکوپی، روش شستشوی متوالی مدفوع استفاده می شود.

مدفوع در آب مخلوط می شود تا یک سوسپانسیون یکنواخت به دست آید، پس از آن، زمانی که نور خوبآنها به دقت در بخش های کوچک جداگانه در کووت های عکاسی سیاه یا روی مورد بررسی قرار می گیرند پس زمینه تیرهدر ظروف پتری با موچین یا سوزن کالبد شکافی، تمام ذرات سفید مشکوک، تشکیلات بزرگ مشکوک به قطعات کرم ها برداشته می شوند و زیر ذره بین بین دو اسلاید شیشه ای بررسی می شوند. کرم های کوچک یا سر سستودها در زیر ذره بین در قطره گلیسیرین یا زیر میکروسکوپ بررسی می شوند.

هنگام استفاده از این روش برای تشخیص قطعات گوشت خوک، کرم گاوی، کرم پهن، قطعات شسته شده بین دو لیوان قرار می گیرند و با مشاهده نور زیر ذره بین یا بزرگنمایی کم میکروسکوپ، گونه ها با ساختار رحم (در یک بخش بالغ کرم نواری خوک، 8 تا 12 شاخه جانبی، و کرم نواری گاو نر 18-32، اغلب 28-32، در یک کرم نواری پهن، بخش ها گسترده تر هستند و رحم در مرکز به شکل "رزت" است). اگر رحم ضعیف دیده شود، ابتدا می توان آن را برای مدتی در محلول گلیسیرین 50٪ نگه داشت، پس از آن حتی تنه های رحم متروک به وضوح قابل مشاهده است.

هنگام تعیین این سستودها با ساختار سرهای جدا شده، آنها را با دقت با یک گردن در یک قطره گلیسرول بین لام های شیشه ای قرار می دهند (یا با یک ورقه پوششی پوشانده می شوند) و بدون فشار دادن زیر میکروسکوپ با بزرگنمایی کم مورد بررسی قرار می گیرند.

روش های میکروسکوپیبه ساده، پیچیده و خاص تقسیم می شود.

روش های ساده شامل اسمیر بومی، اسمیر بومی با محلول لوگول، اسمیر غلیظ زیر سلفون طبق کاتو، پیچش (به گفته شولمان) و خراش دادن پری مقعد می باشد.

روش های پیچیدهموثرتر هستند و بر اساس غلظت تخم مرغ در آماده سازی هستند. آنها شامل پیش درمان مدفوع با معرف های مایع است که در نتیجه تخم کرم ها یا رسوب می کنند یا به سطح مایع شناور می شوند.

روش های پیچیده شامل روش های غنی سازی است:

الف) شناورسازی (زمانی که وزن مخصوصوزن مخصوص تخم مرغ کمتر محلول نمکو تخم مرغ ها به سطح فیلم شناور می شوند).

ب) رسوب گذاری (زمانی که وزن مخصوص تخم ها بیشتر از وزن مخصوص محلول های نمکی باشد و تخم ها در رسوب ته نشین شوند).

روش‌های ویژه برای تشخیص تخم‌ها و لاروهای کرم‌ها، کیست‌ها و اشکال رویشی تک یاخته‌ها، روش‌های خراشیدن، فلوتاسیون، ته‌نشینی، لاروسکوپی، پروتوزوسکوپی، مطالعه صفرا و روش‌های رنگ‌آمیزی اسمیر مدفوع، خلط و غیره است.

روش های سادهمطالعات مدفوع

اسمیر بومی. ذره کوچکی از مدفوع را با یک چوب چوبی از قسمت های مختلف قسمت تحویلی گرفته می شود، به خوبی روی یک لام شیشه ای در قطره محلول گلیسرول 50٪ مالیده و روی 2-3 لام شیشه ای یک اسمیر نازک ایجاد می کند. حداقل 3 آماده سازی زیر میکروسکوپ بررسی می شود. عیب روش: مقدار کمی از مواد مشاهده می شود، بنابراین به عنوان یک روش مستقل استفاده نمی شود.

روش پیچش(شولمان). 2.0-3.0 گرم مدفوع در یک لیوان قرار داده می شود و با یک میله شیشه ای با حجم 5 برابر نمک یا آب مقطر کاملاً هم زده می شود و به مدت 2-3 دقیقه حرکات سریع انجام می دهد و به سرعت چوب را از مخلوط خارج می کند. یک قطره از مخلوط در انتهای چوب به یک اسلاید شیشه ای منتقل می شود و میکروسکوپ می شود. اصل نیروی گریز از مرکز باعث تجمع تخم ها و لاروها روی چوب می شود.

روش اسمیر غلیظ کاتو با سلفون. معرف های شیمیایی: گلیسرول 100٪، محلول فنل 6٪ (100 میلی لیتر آب + 6 گرم فنل)، محلول مالاکیت سبز 3٪ (2.5 میلی لیتر آب مقطر + 75 میلی لیتر مالاشیت سبز).

تهیه محلول کار: 100 میلی لیتر محلول فنل 6 درصد + 100 میلی لیتر گلیسیرین خالص + 1.2 میلی لیتر محلول مالاشیت سبز 3 درصد.

تهیه نوار سلفون: نوارهای سلفون بریده می شوند که اندازه آن مطابق با لام شیشه ای است. سلفون باید آبدوست باشد (سلفونی که بسوزد مناسب است، اگر ذوب شود نامناسب است). حداکثر 5 هزار نوار را می توان در محلول کاری پردازش کرد. زمان قرار گرفتن در معرض نوارهای سلفون تا آماده شدن برای استفاده در محلول کاری حداقل 24 ساعت است.

پیشرفت تحقیق 50 میلی گرم مدفوع (به اندازه یک نخود بزرگ) روی یک لام شیشه ای مالیده می شود، با یک چوب جداگانه (شیشه ای، چوبی) مالش می شود، با نوار سلفون پوشانده می شود و با درپوش لاستیکی روی آن مالیده می شود تا لکه ضخیم یکنواختی به دست آید. . این دارو در دمای اتاق به مدت یک ساعت یا در ترموستات با دمای 40 درجه سانتیگراد به مدت 30-20 دقیقه و میکروسکوپی خشک می شود (زمان قرار گرفتن در معرض در دمای اتاق را می توان تا 5-6 ساعت یا بیشتر افزایش داد).

از نظر کارایی، این روش به روش فلوتاسیون نزدیک می شود، اما تهاجم شدید و متوسط ​​را نشان می دهد.

به عنوان یک روش تشخیصی مستقل استفاده می شود و برای معاینه انبوه جمعیت توصیه می شود.

در آزمایشگاه های تشخیصی بالینی، در صورت عدم وجود تشخیص های خاص در جهت پزشکان، از آن به عنوان یک روش یکپارچه برای تشخیص کرم ها استفاده می شود.

روش های خراش دادن پری مقعد و اسمیر بومی با محلول لوگول در بخش روش های خاص توضیح داده شده است.

روش های پیشرفته غنی سازی مدفوع

روش‌های غنی‌سازی بر اساس تفاوت در وزن مخصوص تخم‌های کرم و محلول نمک مورد استفاده است.

هنگام استفاده از روش فلوتاسیون، می توان از محلول های نمک زیر استفاده کرد:

1. محلولی از نیترات سرب PbNO3 (نیترات سرب) با چگالی 1.5. به میزان 650 گرم از ماده در هر 1 لیتر آب تهیه می شود. نمک در قسمت هایی در آب داغ در یک کاسه لعابی حل می شود، روی اجاق گاز گرم می شود و دائماً هم می شود تا کاملاً حل شود. نیازی به فیلتر کردن محلول نیست. محلول در روز مطالعه تهیه می شود، زیرا به مرور زمان رسوب می دهد و چگالی آن بعد از 24 ساعت شروع به کاهش می کند. هم زدن رسوب تهیه محلول در هود بخار انجام می شود، زیرا نیترات سرب یک نمک فلز سنگین است.

2. محلولی از نیترات آمونیوم NH4NO3 (نیترات آمونیوم دانه ای یا معمولی) با چگالی 1.3 به روش قبلی اما به میزان 1500 گرم از ماده در هر 1 لیتر تهیه می شود. آب گرم.

3. محلولی از نیترات سدیم NaNO3 یا نیترات سدیم با چگالی 1.38-1.4 به میزان 1000 گرم از ماده در هر 1 لیتر آب گرم تهیه می شود.

4. محلولی از تیوسولفات سدیم Na2S2O3×5H2O (هیپوسولفیت سدیم) با چگالی 1.4 به میزان 1750 گرم از ماده در هر 1 لیتر آب گرم تهیه می شود.

5. محلولی از سولفات سدیم Na2SO4 (نمک اپسوم) با چگالی 1.26-1.28 به میزان 920 گرم از ماده در هر 1 لیتر آب گرم تهیه می شود.

6. محلولی از کلرید روی ZnCl2 (کلرید روی) با چگالی 1.82 به میزان 2000 گرم از ماده در هر 1 لیتر آب گرم تهیه می شود. محلول سرد شده کریستال نمی شود.

7. محلول کلرید اشباع سدیم NaCl(نمک خوراکی) با چگالی 1.18-1.2. در l آب، 400-420 گرم نمک را در قسمت هایی به یک سطل آب جوش مینا شده اضافه کنید و مرتباً هم بزنید تا کاملاً حل شود. با سرد شدن محلول، بلورهای کلرید سدیم رسوب می کنند.

وزن مخصوص محلول های فلوتاسیون تنها پس از خنک شدن کامل محلول در دمای اتاق با هواسنج اندازه گیری می شود.

روش‌های شناورسازی برای تشخیص تخم‌های کرم پیگمی، کرم شلاقی، کرم قلاب‌دار، آسکاریس و کرم پهن مؤثرتر هستند.

فیلم سطح را می توان با یک حلقه سیم یا اسلاید شیشه ای جدا کرد.

در محلول اشباع نمک سفرهفیلم را می توان پس از 30-40 دقیقه، در محلول نیترات آمونیوم - پس از 10-20-30 دقیقه پس از ته نشین شدن، بررسی کرد.

هنگام برداشتن فیلم با یک حلقه سیم، حداقل 8 قطره بررسی می شود.

اسلایدها نسبت به حلقه های سیمی، تخم های بیشتری را از فیلم جدا می کنند. شیشه باید با مایع محلول فلوتاسیون که با پیپت به لیوان اضافه می شود در تماس باشد. پس از ته نشین شدن، لیوان را برداشته، سطح خیس شده را روی لیوان قرار دهید اندازه بزرگترو زیر میکروسکوپ بررسی شد. اسلایدها قبل از استفاده باید چربی زدایی شوند.

برای تحقیق باید موارد زیر را داشته باشید: اسلایدهای شیشه ای، فنجان های شیمیایی، حلقه های سیمی، کووت، ظروف پتری، پیپت، گلابی، چوب شیشه ای یا چوبی.

پیشرفت تحقیق 5 گرم مدفوع با 10 برابر محلول فلوتاسیون (ترجیحاً با وزن مخصوص 1.38-1.40) ریخته می شود، ذرات بزرگ غیر حل شونده را کاملاً هم زده و از بالا خارج می کنند و سوسپانسیون را به مدت 10-15 دقیقه می گذارند. سپس فیلم یا با یک حلقه روی یک لام شیشه ای یا با یک اسلاید شیشه ای برداشته می شود. برای رقیق کردن مدفوع بهتر است فنجان هایی با ظرفیت 30-50 میلی لیتر برداشته، محلول را همسطح با لبه ها بریزید (یا 2-3 میلی متر کم پر کنید) و روی مخلوط را با یک لام بپوشانید و سپس محلول فلوتاسیون را با یک لامپ اضافه کنید. پیپت کنید تا با لام تماس پیدا کند. پس از 10-20 دقیقه، شیشه به سرعت برداشته می شود و فیلم باقی مانده روی آن بدون شیشه پوششی به صورت میکروسکوپی اسکن می شود.

روشهای ته نشینی-رسوبی

از روش‌های رسوب‌گذاری برای تشخیص تخم‌های ژئوکرم، بیو کرم‌ها در مدفوع و به‌عنوان روش‌های تحقیقاتی ویژه برای اپیستورکیازیس استفاده می‌شود.

روش گوریاچف-زولوتوخین(روش ساده گوریاچف). حدود 1.5 گرم مدفوع در یک لیوان شیمیایی در 3-4 میلی لیتر آب هم زده می شود. سوسپانسیون به دست آمده از طریق دو لایه گاز در یک لوله سانتریفیوژ فیلتر می شود و به دقت روی 4-5 میلی لیتر محلول کلرید سدیم اشباع موجود در آن قرار می گیرد. لوله های آزمایش به مدت 15-20 ساعت در یک قفسه قرار می گیرند و در این مدت تخم های ترماتود سنگین ته نشین می شوند. دو لایه به وضوح مشخص شده را دریافت کنید. رسوب به صورت میکروسکوپی بررسی می شود.

روش اتر-فرمالیناز این روش برای تشخیص تمامی تهاجمات روده ای و به عنوان روشی ویژه برای تخم های تک یاخته و اپیستورکیا استفاده می شود.

تجهیزات: سانتریفیوژ در 3000 دور در دقیقه. لوله های مدرج سانتریفیوژ، قیف. صافی فلزی (چای) یا باند دو لایه؛ سرسره ها و روکش های شیشه ای؛ چوب های چوبی (یا شیشه ای)؛ پنبه، باند.

معرف های شیمیایی: محلول فرمالین 10% (1 قسمت محلول فرمالین دارویی و 4 قسمت آب مقطر). اتیل اتر (پزشکی).

7 میلی لیتر از محلول فرمالین 10 درصد در لوله های سانتریفیوژ ریخته می شود و 1 گرم مدفوع در آن قرار می گیرد (به اندازه ای مدفوع که محلول در لوله آزمایش به 8 میلی لیتر می رسد). مدفوع با فرمالین مخلوط می شود تا مخلوطی همگن تشکیل شود و سپس از طریق یک صافی فلزی (یا گاز دو لایه، بانداژ) در لوله سانتریفیوژ دیگری ریخته می شود (اگر مدفوع روی صافی باقی می ماند، صافی باید با فرمالین شسته شود). 2 میلی لیتر اتر را به این لوله سانتریفیوژ اضافه کنید، درب بسته کنید و به مدت 30 ثانیه به شدت تکان دهید.

مخلوط با دور 3000 به مدت یک دقیقه سانتریفیوژ می شود (ممکن است به مدت دو دقیقه در 1500 دور در دقیقه). در اثر واکنش اتر-فرمالین، انعقاد پروتئین ها به شکل چوب پنبه در بالای لوله آزمایش اتفاق می افتد و تخم کرم ها رسوب می کنند. لایه منعقد کننده برداشته می شود، مایع رویی تخلیه می شود، رسوب مستقیماً از لوله آزمایش یا با پیپت پاستور روی یک لام شیشه ای اعمال می شود، با یک لام پوششی پوشانده می شود و زیر میکروسکوپ مشاهده می شود.

روش بارش اتر استیک. اصل ته نشینی اتر استیک تخم های کرمی، درمان متوالی نمونه های مدفوع با محلول آبی 10 درصد است. استیک اسیدو اتر. اسید استیک بهتر از سایرین است ترکیبات شیمیایینمونه مدفوع را امولسیون می کند. به ذرات هضم نشده نفوذ می کند که عمدتاً از فیبر تشکیل شده است که وقتی محتوای عالیبا رسوب پس از سانتریفیوژ، در تحقیقات تداخل ایجاد می کند. افزودن بعدی اتر به لوله و هم زدن منجر به استخراج اسید استیک از محتویات لوله به همراه ذرات مدفوع آغشته به آن می شود. از آنجایی که وزن مخصوص مخلوط اتر و اسید استیک کمتر از وزن مخصوص آب است، نمونه‌های مدفوع تیمار شده با این مواد شناور می‌شوند و تخم‌های کرم که وزن مخصوص زیادی دارند، ته نشین می‌شوند.

مقدار رسوب به دست آمده پس از بارش اتر-استیک 3-4 برابر کمتر از پس از بارش اتر-فرمالین است. این امر تشخیص تخم های کرم را در آن بسیار تسهیل می کند و به شما امکان می دهد رسوب را به طور کلی با نمونه 0.5-1 گرم مطالعه کنید. سمیت روش اتر استیک 5 برابر کمتر است.

پیشرفت تحقیق 7 میلی لیتر از محلول 10 درصد اسید استیک در یک لوله سانتریفیوژ مدرج ریخته می شود و نمونه 1 گرمی مدفوع به آن اضافه می شود (یعنی مقداری از مدفوع که در آن محلول اسید استیک به 8 میلی لیتر می رسد). با لیوان یا چوب چوبی کاملا هم بزنید. از طریق یک قیف با دو لایه گاز به داخل لوله سانتریفیوژ دیگری عبور دهید. 2 میلی لیتر به امولسیون اضافه می شود اتیل اتر(یعنی تا 10 میلی لیتر). لوله های آزمایش با درپوش لاستیکی بسته می شوند (از ویال پنی سیلین امکان پذیر است) و به مدت 15 ثانیه تکان داده می شود. پس از برداشتن درپوش، لوله ها به مدت یک دقیقه با سرعت 3000 دور در دقیقه به مدت 2 دقیقه سانتریفیوژ می شوند. مایع رویی از لوله دور ریخته می شود. در برخی موارد، پلاک مدفوع تشکیل شده با تخلیه مایع رویی تداخل می کند. در این حالت چوب پنبه با شیشه یا میله چوبی از دیواره های لوله آزمایش جدا می شود. کل رسوب روی یک اسلاید شیشه ای پیپت می شود و زیر یک پوشش با بزرگنمایی کم میکروسکوپ می شود. رسوب معمولاً کوچک و بی رنگ است. تخم‌های هلمینت، به‌ویژه تخم‌های فلوک کوچک، به خوبی شناسایی می‌شوند.

روش ته نشینی شیمیایی. اصل این مطالعه بر اساس رسوب تخم مرغ از نمونه مدفوع در محلول نمکی با وزن مخصوص 1.15 است. ماهیت روش در سانتریفیوژ مستقیم یک لوله آزمایش است که در آن یک پلاگین مدفوع امولسیون شده در محلول 1٪ اسید استیک روی محلول نیترات سدیم (وزن 1.16) لایه لایه قرار می گیرد. وزن مخصوص بالای محلول نمکی و حباب های آزاد شده در اثر واکنش شیمیایی با نفوذ به لایه مدفوع همگن شده از رسوب آن جلوگیری می کند. تخم هلمینت با مقدار کمی فیبر رسوب می کند. رسوب را می توان با استفاده از 10% اسید استیک و اتر از ریزه های باقی مانده پاک کرد. در این حالت فقط یک تخم کرمی باقی می ماند که شناسایی آنها را بسیار تسهیل می کند.

پیشرفت تحقیق 6 میلی لیتر محلول نیترات سدیم با وزن مخصوص 1.15 در لوله سانتریفیوژ مدرج ریخته می شود. 7 میلی لیتر محلول اسید استیک 1 درصد را در لوله آزمایش دیگری بریزید. نمونه مدفوع معرفی می شود (تا علامت 7.5 میلی لیتر برای نمونه 0.5 گرم و تا 8 میلی لیتر برای نمونه 1.0 گرم). نمونه را با یک میله شیشه ای کاملا مخلوط کنید. از طریق یک قیف با یک لایه گاز صاف کنید و روی محلول نیترات سدیم قرار دهید. لوله با فیلتر لایه ای با سرعت 1500-2000 دور در دقیقه به مدت 5 دقیقه سانتریفیوژ می شود. با معکوس کردن سریع لوله، مایع رویی را دور بریزید. 3-4 میلی لیتر محلول 10 درصد اسید استیک و 0.5 میلی لیتر اتر را به یک لوله آزمایش با یک رسوب اضافه کنید، با یک درپوش لاستیکی ببندید و تکان دهید. سانتریفیوژ را به مدت 1 دقیقه تکرار کنید. مایع رویی را دور بریزید. رسوب به یک اسلاید شیشه ای منتقل می شود، با یک ورقه پوششی پوشانده می شود و زیر میکروسکوپ بررسی می شود.

مطالعات هلمینتولوژیکی صفرا، محتوای اثنی عشر، خلط، خون، ادرار و عضلات

تشخیص تخم ها و لاروهای کرم در محتویات دوازدهه و صفرا. بررسی محتویات صفرا و اثنی عشر با مشکوک به کرم های کبد و کیسه صفرا (اپیستورکیازیس، کلونرکیازیس، دیکروسلیازیس) و دوازدهه(Strongyloidiasis).

پیشرفت تحقیق محتویات اثنی عشر و صفرا (بخش A، B، C) به روش معمول با استفاده از پروب به دست می آیند. برای بخش B، توصیه می شود با وارد کردن یک محلول 33٪ از طریق یک پروب، رفلکس کیسه صفرا به دست آورید. سولفات منیزیم. از مایع مورد بررسی، تکه های شناور در آن انتخاب شده و زیر میکروسکوپ مشاهده می شود و سپس با مقدار مساوی اتر سولفوریک مخلوط می شود. مخلوط کاملاً تکان داده شده و سانتریفیوژ می شود. مایع رویی دور ریخته می شود و کل رسوب زیر میکروسکوپ بررسی می شود.

در غیاب چرک و مخاط، محتویات صفرا و اثنی عشر بدون مخلوط شدن با اتر سانتریفیوژ می شوند.

بررسی خلط. در عمل کرم شناسی، بررسی خلط به منظور تشخیص آزمایشگاهی پاراگونیمیازیس انجام می شود. گاهی اوقات، تخم های شیستوزوم، لارو آسکاریس، عناصر مثانه اکینوکوک تشخیص داده می شوند.

یک اسمیر بومی از خلط روی یک لام شیشه ای تهیه می شود که زیر میکروسکوپ بررسی می شود.

با محتوای فراوان چرک در خلط، آن را با محلول 0.5٪ سود سوزآور یا پتاسیم سوز آور مخلوط کرده، به مدت 5 دقیقه تکان داده و سانتریفیوژ می کنیم. رسوب به صورت میکروسکوپی بررسی می شود.

مطالعه خون اگر بیمار مشکوک به فیلاریازیس باشد، خون بررسی می شود.

با توجه به این واقعیت که با برخی از انواع فیلاریازیس (لوآئوس، وچرریوز ناشی از یک سویه زیر دوره ای)، لاروها (میکروفیلاریا) فقط در طول روز در خون محیطی هستند و با برخی (بروگیازیس، وچرریوز ناشی از یک سویه دوره ای) - فقط در شب، به ترتیب، در این زمان برای تجزیه و تحلیل خون بگیرید.

روش نمونه گیری خون، تهیه فرآورده ها (اسمیر نازک و قطره غلیظ)، رنگ آمیزی آنها (طبق گفته رومانوفسکی) و مطالعه مشابه با روش های تشخیص آزمایشگاهی مالاریا است.

میکروفیلاریا از گونه های مختلف از نظر طول، عرض، انحنای بدن، وجود یا عدم وجود کلاهک، شکل انتهای دمی، محل ماده هسته ای در بدن و ناحیه دمی لاروها متمایز می شوند.

پیشرفت تحقیق سپس حداقل 30 دقیقه از ادرار محافظت می شود لایه بالاییتخلیه کنید و 10-15 میلی لیتر رسوب باقی بماند که در لوله های سانتریفیوژ ریخته شده و به مدت 1-2 دقیقه سانتریفیوژ می شود. پس از تخلیه مایع رویی، رسوب به لام شیشه ای منتقل شده و زیر میکروسکوپ بررسی می شود.

مطالعه بیوپتی عضلانی

روش تریکینوسکوپی. نیاز به مطالعه نمونه های بیوپسی از عضلات بیمار زمانی ایجاد می شود که مشکوک به تریکینوز باشد.

بیوپسی طبق قوانین کلی انجام می شود. عضله دلتوئید معمولاً بیوپسی می شود. با معاینه پاتوآناتومیک می توان بیوپسی از عضلات دیافراگم، مری، زبان، ماهیچه های جونده و بین دنده ای، خم کننده اندام، ماهیچه ها را انجام داد. مردمک چشم، زیرا آنها به شدت تحت تأثیر لارو تریچینلا قرار می گیرند.

در آزمایشگاه، یک قطعه عضله بیوپسی شده به قطعات بسیار کوچک (میکروتوم) بریده می شود که بین دو لیوان قرار می گیرد و رشته های عضلانی را خرد می کند و زیر میکروسکوپ بررسی می شود. در حال حاضر، میکروسکوپ های مخصوص، تری چینلوسکوپ، به طور گسترده ای برای این منظور استفاده می شود.

در مورد تریکینوزیس، تریکینوسکوپی در امتداد فیبرهای عضلانی به شدت برجسته است. بیضی شکل(شبیه به لیمو) کپسول تریچینوزیس. مقدار متوسطکپسول در انسان 0.4 x 0.26 میلی متر است. کپسول، به عنوان یک قاعده، حاوی یک تریچینلا است که به صورت مارپیچی به 2.5 نوبت تا شده است. با شدت تهاجم بالا، یک کپسول ممکن است حاوی 2 یا 3 لارو باشد. رشته های عضلانی مجاور کپسول، خط عرضی خود را از دست می دهند و ظاهری همگن به خود می گیرند.

به همین ترتیب، گوشت یا فرآورده های گوشتی که باعث عفونت شده اند بررسی می شوند.

روش هضم عضلانی. روش کارآمدتر است.

پیشرفت تحقیق عضلات مورد مطالعه ریز خرد شده و با مصنوعی پر می شوند شیره معدهبه نسبت 1:15-20. مخلوط حاصل به مدت 16-12 ساعت در ترموستات با دمای 37 درجه سانتیگراد قرار داده می شود و پس از این مدت رسوب را میکروسکوپ می زنند که در آن لاروهای تریچینلا آزاد در میان انبوه بقایای فیبرهای ماهیچه ای هضم شده یافت می شوند.

شیره معده مصنوعی را می توان در داروخانه خریداری کرد یا در آزمایشگاه تهیه کرد. برای انجام این کار، 10 میلی لیتر اسید هیدروکلریک غلیظ را به 1 لیتر آب مقطر اضافه کنید. قبل از استفاده، 30 گرم پپسین به 1 لیتر اسید رقیق اضافه می شود.

روشهای تحقیق کمی

روشهای کمیمطالعات در تعیین شدت تهاجم، ارزیابی اثربخشی داروهای مختلف ضد کرم، تعیین کیفیت کرم زدایی، نظارت بر اقدامات درمانی و پیشگیرانه انبوه در حال انجام و غیره استفاده می شود.

تعیین کمی تخم کرم کرم با دو روش انجام می شود: روش Stoll و روش Krasilnikov و Volkova (1974).

روش استول. برای انجام مطالعه باید میکروسکوپ، فلاسک شیشه ای با علامت 56 و 60 میلی لیتر، سیلندر اندازه گیری، دانه های شیشه ای، درپوش لاستیکی برای فلاسک، پیپت های مدرج، لام های شیشه ای و محلول هیدروکسید سدیم 0.4% داشته باشید.

پیشرفت تحقیق محلول هیدروکسید سدیم غیر طبیعی (تقریباً غلظت 0.4٪) را با یک استوانه اندازه گیری تا علامت 56 میلی لیتر داخل فلاسک بریزید و مدفوع را اضافه کنید تا سطح مایع به 60 میلی لیتر (یعنی 4 میلی لیتر مدفوع) برسد. مخلوط به مدت 1 دقیقه با دانه های شیشه ای کاملاً تکان داده می شود و ظرف را با یک درپوش لاستیکی می بندید (می توانید با چوب هم مخلوط کنید). بلافاصله پس از تکان دادن، 0.075 میلی لیتر از مخلوط با یک پیپت مدرج (حاوی 0.005 میلی لیتر مدفوع) جمع آوری می شود، به یک اسلاید شیشه ای منتقل می شود و تعداد تخم های موجود در آماده سازی زیر میکروسکوپ شمارش می شود. برای تعیین تعداد تخم در 1 گرم مدفوع، تعداد یافت شده در 200 ضرب می شود.

مقایسه تعداد تخم‌های موجود در آماده‌سازی، که قبل و بعد از درمان در بیمار یافت می‌شود، به ما اجازه می‌دهد تا در مورد تأثیر کرم‌زدایی قضاوت کنیم.

روش استول ساده است، می دهد نتایج قابل مقایسهبا تمام کرم های کرمی که پاتوژن های آنها به طور سیستماتیک تخم ها را در روده های بیمار ترشح می کنند. با این حال، نقطه ضعف این روش نسبتا آن است حساسیت کمبه خصوص در شدت تهاجم کم.

روش Krasilnikov-Volkova. هنگام بررسی این روش، حداقل 1 گرم مدفوع در یک فلاسک شیشه ای یا یک لوله آزمایش بزرگ با محلول 1٪ لوتوس (یا محلول 1.5٪ اضافی) به نسبت 1:10 مخلوط می شود. سوسپانسیون کاملاً تکان داده می شود تا یک سوسپانسیون همگن تشکیل شود، سپس 0.1 میلی لیتر از سوسپانسیون (معادل 0.01 گرم مدفوع) به سرعت با یک پیپت مدرج جمع آوری شده و به یک لام شیشه ای منتقل می شود. آماده سازی با یک شیشه روکش یا صفحه سلفون (20 × 30 میلی متر) پوشانده می شود که حداقل یک روز در 50٪ سن می شود. محلول آبیگلیسرین.

تعداد تخم مرغ ها را در کل آماده سازی بشمارید. برای محاسبه تعداد تخم مرغ در 1 گرم مدفوع باید عدد حاصل را در 100 ضرب کرد.

این روش نسبت به روش استول دارای چندین مزیت است. در مرحله اول، حساس تر است و به شما امکان می دهد کرم ها را در چه زمانی تشخیص دهید درجه پایینتهاجمات ثانیا، برای معاینه انبوه بسیار راحت است، زیرا محلول های شوینده، که نگهدارنده تخم های کرم هستند، امکان انجام مطالعات مواد نه چندان تازه را فراهم می کند. با این حال پيش نيازاین مجموعه مدفوع است که مستقیماً در محلول شوینده قرار می گیرد.

برای تحقیق کمیمی توان از هر یک از روش های کیفی یکپارچه توصیف شده بر اساس اصل تخم مرغ های شناور استفاده کرد. اما در این حالت باید همان مقدار مدفوع، همان حجم محلول فلوتاسیون برای آنالیز گرفته شود. محاسبه درجه تهاجم را می توان با دانستن تعداد تخم در 1 گرم مدفوع مطابق جدول زیر انجام داد.

شدت تهاجم بسته به تعداد تخم های کرم

در 1 گرم مدفوع

تشخیص سرولوژیکی

این روش ها بر اساس تشخیص آنتی بادی های خاص در سرم خون، برای اهداف تشخیصی و غربالگری استفاده می شوند.

روش های سرولوژیکی عبارتند از:

واکنش رسوب حلقه ای (RCP) (تریچینوز، سیستیسرکوز).

واکنش رسوب حلقه در لوله های آزمایش در سرما (تریچینوز، سیستیسرکوز).

واکنش ریز رسوب بر روی لاروهای زنده (تریچینوز، آسکاریازیس).

واکنش هماگلوتیناسیون غیرمستقیم (RIHA) (تریچینوز، اکینوکوکوز، آلووکوکوز، سیستیسرکوز و غیره)؛

واکنش آگلوتیناسیون لاتکس (RAL) (اکینوکوکوز، آلوئوکوکوز، تریچینوز، تنیرینهوز و غیره)؛

واکنش تثبیت کمپلمان (RCC) (تریچینوز، اکینوکوکوز، سیستیسرکوز).

واکنش آنتی بادی های نشاندار شده با آنزیم (REMA) (اکینوکوکوز، انکوسرسیاز، شیستوزومیاز، تریچینوز، توکسوکاریازیس).

سنجش ایمونوسوربنت مرتبط(ELISA) (تریچینوز، اپیستورکیازیس، توکسوکاریازیس، توکسوپلاسموز و غیره).

برای تنظیم واکنش های سرولوژیکی، آنتی ژن های استاندارد تولید می شود یا آنها به طور مستقل تهیه می شوند (به عنوان مثال، از مثانه اکینوکوک گوسفند)، سیستم های آزمایش ویژه برای ELISA تولید می شوند.

روش های خاصتحقیق در مورد انتروبیوز، تنیارینهوز، تنیازیس

خراشیدن از چین های دور مقعدی. برای خراش دادن از چین های دور مقعدی می توانید از کاردک چوبی، نوار سلفون، کاغذ یا نوار سلولزی، چوب چشم با لایه چسب مخصوص استفاده کنید:

الف) خراش دادن با کاردک چوبی (کاردک یک کبریت یا چوب پهن شده است) که با محلول 1٪ گلیسیرین (یا محلول 0.5٪) مرطوب شده است. نوشیدن نوشابه) با خراش دادن سبک از سطح چین های پری مقعد در اطراف کل محیط مقعد انجام می شود. خراش حاصل با لبه ورقه پوششی از انتهای کاردک به یک لام شیشه ای در یک قطره محلول گلیسرول 50 درصد منتقل می شود، با همان ورقه پوششی پوشانده شده و میکروسکوپ می شود. عیب روش تشخیص ناکافی تخم و اثر تحریک کننده;

ب) طبق روش تورگوشین، شستشو با یک سواب پنبه ای روی یک کفگیر چوبی یا دیگر کاردک مرطوب شده با محلول 50٪ گلیسیرین انجام می شود و یک اسمیر روی یک لام شیشه ای در یک قطره گلیسیرین تهیه می شود.

ج) طبق روش کوورکووا، حدود 5 میلی لیتر در لوله سانتریفیوژ ریخته می شود. آب جوش، یک کاردک (چوب) با یک سواب پنبه در آن قرار دهید. قبل از گرفتن مواد، سواب به آرامی روی دیواره داخلی لوله آزمایش فشار داده می شود، چین های دور مقعدی با آن پاک می شوند و کاردک با سواب داخل لوله آزمایش قرار می گیرد. تامپون در لوله آزمایش کاملاً تکان داده می شود، شستشو به مدت 3 دقیقه سانتریفیوژ می شود و رسوب حاصل زیر میکروسکوپ بررسی می شود.

د) سوهان زدن با نوار چسب طبق گراهام. قسمتی از نوار چسب (نوار پلی اتیلن شفاف با لایه چسب برای خلاقیت کودکاناما بهتر است از فیلم عمل LPO-1, LPO-2) به طول 8-10 سانتی متر استفاده شود که با یک لایه چسبناک به چین های پری مقعدی پوست چسبانده شود و انتهای آن را نگه دارد و سپس آن را به لام شیشه ای منتقل کنید. یک لایه چسبنده به سمت پایین (انتهای نوار که از لبه‌های شیشه امتداد می‌یابد بریده می‌شوند)، عینک‌ها شماره‌گذاری می‌شوند و اطلاعات بیمار و شماره شیشه در مجله ثبت می‌شود. در آزمایشگاه، نوار از یک طرف در مسافت طولانی جدا می شود، 1-2 قطره زیر آن می چکد. روغن وازلینیا گلیسیرین (برای از بین بردن عیوب نوری) و میکروسکوپی.

ه) تراشیدن با چوب چشم شیشه ای که سطح آن با چسب مخصوص پوشانده شده است. چوب چشم در سه پایه مخصوص نصب می شود. این ماده با تماس قسمت صاف کاردک با پوست دهانه پری مقعد گرفته می شود. سپس چوب دوباره در یک سه پایه برای حمل و نقل ثابت می شود. میکروسکوپ مستقیماً روی کاردک در دو طرف (بدون اسلاید و لغزش) با چسباندن اولیه در کاست ها با بزرگنمایی کم (چشمی x 10، شی x 8) انجام می شود. در پایان کار چوب ها با جوشاندن در محلول صابونی ضدعفونی می شوند و سه پایه و کاست ها با الکل عمل می کنند و با محلول سودا و صابون شسته می شوند. ترکیب چسب: کلئول - 10 گرم، روغن کرچک- 2.5 گرم، اتیل اتر - 5 گرم، اتانول 96٪ - 2.5 گرم.

کفگیرها در محلول چسب فرو می‌روند، سپس در هوا در دمای اتاق خشک می‌شوند. لایه چسب تشکیل شده روی سطح برای چند روز باقی می ماند.

این روش برای معاینه انبوه جمعیت کودک برای انتروبیوز و جمعیت بزرگسال برای تنیدوز راحت است.

علاوه بر روش خراش دادن برای تنیارینکوزیس و تنیازیس، روش بررسی و روش ماکروسکوپی که در بالا توضیح داده شد (زمانی که قطعات تشخیص داده می شوند) نیز استفاده می شود.

روش های تحقیق ویژه برای استرونژیلوئیدازیس

روش اتر استیک برای تشخیص تخم ها (به بالا مراجعه کنید) و روش برمن برای تشخیص لارو در مدفوع استفاده می شود.

روش برمن. مدفوع تازه را بررسی کنید، بهتر است بعد از مصرف ملین. یک نمونه 5 گرمی از مدفوع بر روی یک الک فلزی (که داخل مش با دو لایه گاز پوشانده شده است) در یک قیف شیشه ای که در یک سه پایه ثابت شده قرار می گیرد. یک لوله لاستیکی با یک گیره در انتهای پایین قیف قرار می گیرد (دستگاه برمن).

توری با مدفوع بلند می شود و آب گرم شده با دمای 50-40 درجه سانتیگراد به گونه ای در قیف ریخته می شود که قسمت پایینمش در آب غوطه ور شد و مدفوع کاملاً با آب پوشانده شد. پس از 2-4 ساعت، گیره روی لوله لاستیکی به سرعت باز می شود و مایع به داخل لوله سانتریفیوژ فرو می رود. پس از سانتریفیوژ (1-2 دقیقه)، قسمت بالایی مایع به سرعت تخلیه می شود و رسوب به مقدار 1 میلی لیتر در یک لایه نازک روی یک لام شیشه ای و میکروسکوپی با بزرگنمایی کم میکروسکوپ استفاده می شود.

روش IMP و TM. قسمتی از مدفوع به اندازه یک مهره در یک فنجان شیمیایی قرار داده می شود و با نمک گرم 40 درجه سانتیگراد ریخته می شود تا مدفوع با محلول پوشانده شود و 20 دقیقه بماند. پس از 20 دقیقه، مایع را در یک ظرف پتری ریخته و زیر میکروسکوپ دوچشمی MBS مشاهده می شود.

برای تشخیص استرونژیلوئیدازیس، به ویژه برای نظارت بر اثربخشی درمان، ترکیب روش برمن با مطالعه محتویات اثنی عشر توصیه می شود.

روشهای تحقیق ویژه نماتدها

نماتوزها

آسکاریازیس

در تاریخچه، توجه به نگرش به باغبانی، باغبانی جلب می شود. خوردن سبزیجات خام، سالادهای تهیه شده از این سبزیجات.

تظاهرات بالینی فاز اولیهآسکاریازیس در اثر تغییرات آلرژیک در بدن ایجاد می شود. مرحله اولیه یا مهاجرت لاروی آسکاریازیس اغلب در حضور تب با دمای بدن تا 38 درجه و بالاتر، با مجموعه علائم آسیب ریه و وجود ائوزینوفیلی شدید خون رخ می دهد. در بیشتر موارد در کودکان اولین نشانه های بیماری کسالت، ضعف، سردردهای مکرر، تعریق و گاهی دردهای عضلانی و مفاصل است. اغلب یک بثورات شدید از نوع کهیر همراه با خارش شدید یا متوسط ​​وجود دارد. تشخیص فاز اولیه توسط مطالعات اشعه ایکس برای وجود ذرات فرار در ریه ها تایید می شود. نفوذ ائوزینوفیلیکلفلر. اسمیر خلط تازه جدا شده اغلب سلول های ائوزینوفیلیک، گلبول های قرمز خون، کریستال های Charcot-Leiden و لارو آسکاریس را نشان می دهد.

در مرحله خیالی روده آسکاریازیس، ترکیبی از تظاهرات از دستگاه گوارش و سندرم های آستنیک، انتروکولیت علائم درد. در کودکان، اغلب کاهش وزن وجود دارد، گاهی اوقات به طور قابل توجهی. تهوع، افزایش ترشح بزاق، تحریک پذیری، تاخیر در رشد روانی حرکتی، کاهش هوش.

برای تشخیص آزمایشگاهی روده st

ساده ترین ها به 4 کلاس تقسیم می شوند:

در طول encystation، میکروارگانیسم کسب می کند شکل گردو با غلاف محافظ پوشانده شده است. به شکل کیست، تک یاخته ها کمتر به آن حساس می شوند عوامل نامطلوبمحیط.

تحقیقات ممکن است شامل موارد زیر باشد:

توجه داشته باشید:انواع مختلفی از تشخیص وجود دارد، ما انواعی را که در عمل آزمایشگاهی بالینی رایج هستند در نظر خواهیم گرفت.

انواع خصوصی تشخیص

در هر مورد خاص، دستیار آزمایشگاه وظیفه یافتن یک پاتوژن خاص را دارد، گاهی اوقات دیگران به همراه عامل اصلی پیدا می شوند.

6 گونه از این میکروارگانیسم قادر به زندگی در روده انسان وجود دارد. فقط آمیب اسهال خونی که به صورت رویشی و به صورت کیست بروز می کند اهمیت بالینی دارد.

علاوه بر این، از روش های ایمونولوژیک استفاده می شود:

• ایمونوفلورسانس غیر مستقیم؛
• آگلوتیناسیون غیر مستقیم (PHA)؛
• ایمونودیفیوژن شعاعی

توجه داشته باشید: روش های سرولوژیکیغیر اطلاعاتی هستند و فقط به عنوان مکمل اصلی در موارد مشکوک استفاده می شوند.

تشخیص مژگانی (سیلیات)

شکل بیماریزای میکروارگانیسم های این جنس بالانتیدیا است. این یک میکروبی است که باعث بالانتیدازیس می شود - بیماری همراه با فرآیند زخم روده بزرگ. عامل ایجاد کننده در اسمیر بومی به شکل رویشی و کیست یافت می شود. مواد اسمیر (مدفوع و مخاط) در طی معاینه سیگموئیدوسکوپی گرفته می شود و روی محیط های مخصوص کاشته می شود.

تشخیص تاژکک ها (لیشمانیا، ژیاردیا، تریپانوزوم ها، تریکومونادها)

لیشمانیا، تریپانوزوما، ژیاردیا، تریکومونادها برای انسان خطرناک هستند.

لیشمانیا- میکروب ها باعث ایجاد لیشمانیوز می شود، در اسمیرهای خونی، مواد مورد بررسی قرار می گیرند مغز استخوانخراش های حاصل از نفوذهای پوستی. در برخی موارد در تشخیص لیشمانیا از کاشت روی بسترهای غذایی استفاده می شود.

تریپانوزوم ها- عوامل بیماری زا بیماری خواب(تریپانوزومیازیس آمریکایی/آفریقایی یا بیماری شاگاس).

نسخه آفریقایی در تعریف شده است دوره اولیهدر مطالعه خون محیطی میکروب های پاتولوژیک در طول پیشرفت بیماری در مواد سوراخ های غدد لنفاوی، در مراحل پیشرفته - در مایع مغزی نخاعی یافت می شوند.

برای تشخیص تریپانوزوم ها در صورت مشکوک به بیماری شاگاس، ماده آزمایشی در زیر میکروسکوپ با بزرگنمایی کم مورد بررسی قرار می گیرد. در این مورد، اسمیر و یک قطره غلیظ از قبل رنگ آمیزی می شود.

تریکوموناس(روده ای، دهانی) با میکروسکوپ مواد گرفته شده از غشاهای مخاطی آسیب دیده شناسایی می شوند.

شناسایی اسپروزوئرها (پلاسمودیوم مالاریا، عامل کوکسیدوز و غیره)

شایع ترین و خطرناک ترین گونه برای انسان، پلاسمودیوم مالاریا است که دارای 4 گونه اصلی پاتوژن است: پاتوژن. مالاریا سه روزهمالاریا چهار روزه مالاریا گرمسیریو مالاریا بیضی شکل.

رشد جنسی پلاسمودیوم (اسپوروگونی) در پشه های آنوفل صورت می گیرد. غیرجنسی (اسکیزوگونی بافت و گلبول قرمز) - در بافت کبد و گلبول های قرمز انسان. این ویژگی های چرخه زندگی باید در هنگام تشخیص پلاسمودیوم مالاریا در نظر گرفته شود.

بنابراین، در خون یک بیمار تازه بیمار، سلول های زایای چرخه اسپوروژنی یافت می شود. اما در اوج حملات مالاریا، شیزونت ها به تعداد زیاد در خون ظاهر می شوند.

علاوه بر این، در فازهای مختلف تب مالاریابه نظر می رسد اشکال گوناگونپلاسمودیوم:

• در طول دوره سرما، خون با merozoites، نوعی شیزونت پر می شود.
• در اوج دما، تروفوزوئیت های حلقه ای شکل در گلبول های قرمز تجمع می یابند.
• کاهش دما با غلبه تروفوزوئیت های آمیبوئید مشخص می شود.
• در طول دوره های شرایط طبیعی، خون حاوی اشکال بالغ شیزونت است.

مطالعه عامل ایجاد کننده مالاریا (پلاسمودیوم مالاریا) به صورت اسمیر و در قطره غلیظ انجام می شود.

توجه داشته باشید:تشخیص مالاریا در مطالعه اسمیر و قطرات غلیظ خون گاهی اشتباه است. پلاکت های خون در برخی موارد ممکن است به اشتباه به عنوان پاتوژن مالاریا طبقه بندی شوند. همچنین، قطعات لکوسیت ها و سایر سلول ها گاهی اوقات پلاسمودیوم را شبیه سازی می کنند.

روشهای تحقیق پایه برای تک یاخته ها

بیایید نگاهی کوتاه به رایج ترین روش های تحقیق برای حضور تک یاخته ها بیندازیم.

تشخیص تک یاخته با استفاده از اسمیر بومی و لام رنگ آمیزی شده با محلول لوگول (در مدفوع)

این دارو از امولسیون مدفوع در محلول ایزوتونیک تهیه می شود. دو قطره کلرید سدیم و محلول لوگول روی یک اسلاید شیشه ای ریخته می شود. مواد مورد آزمایش با یک چوب چوبی به هر دو ترکیب اضافه می شود و پس از پوشاندن با شیشه، با وضوح های مختلف میکروسکوپ مشاهده می شود.

با توجه به علائم خاص، تک یاخته های یافت شده ثبت می شوند. برای دقت، 2-3 آماده سازی از یک ماده تهیه می شود. در موارد مشکوک، تجزیه و تحلیل چندین بار در طول 2-3 هفته تکرار می شود.

این روش می تواند اشکال رویشی و کیستیک را تشخیص دهد:

• لامبلیا;
• بالانتیدیا;
• آمیب اسهال خونی

همراه با اشکال بیماری زا، تک یاخته های غیر بیماری زا نیز تعیین می شوند. ناقلان سالم نیز دارای اشکال مجرای و کیستیک هستند.

مهم:تحقیقات به منظور جلوگیری از اشتباهات و اشتباهات باید به طور مکرر انجام شود.

نتیجه تشخیص تک یاخته با روش اسمیر بومی و رنگ آمیزی شده باید حاوی شرح شکل پاتوژن (نفوذ، کیست، بافت) باشد.

الزامات تحقیق:

• مواد گرفته شده برای تجزیه و تحلیل (مدفوع مایع) حداکثر 30 دقیقه پس از اجابت مزاج بررسی می شود.
• مدفوع تشکیل شده باید در عرض 2 ساعت پس از اجابت مزاج تشخیص داده شود.
• مواد نباید حاوی ناخالصی باشد ( ضد عفونی کننده هاآب، ادرار)؛
• فقط از چوب های چوبی برای کار با مواد استفاده می شود ، شیشه ها به دلیل لغزش مخاط مناسب نیستند.
• چوب ها باید بلافاصله پس از استفاده سوزانده شوند.

روش حفاظتی (بررسی مدفوع) در تشخیص تک یاخته ها

این مطالعه با تثبیت تک یاخته با یک ماده نگهدارنده انجام می شود. تفاوت این روش با روش قبلی در این است که نگهدارنده ها به شما امکان می دهند دارو را برای مدت طولانی ذخیره کنید.

مواد نگهدارنده مورد استفاده:

• بارو. حاوی مواد نگهدارنده: 0.7 میلی لیتر کلرید سدیم، 5 میلی لیتر فرمالین، 12.5 میلی لیتر الکل 96 درصد، 2 گرم فنل و 100 میلی لیتر آب مقطر. ترکیب رنگ: محلول 0.01٪ تیونین (آزور).
• راه حل صفرلیف ترکیب: 1.65 گرم سولفات روی، 10 میلی لیتر فرمالین، 2.5 گرم فنل کریستالی، 5 میلی لیتر اسید استیک، 0.2 گرم متیلن بلو، 100 میلی لیتر آب. این ماده نگهدارنده در مواردی استفاده می شود که مواد باید بیش از یک ماه نگهداری شوند.

بطری های خالی با یک ماده نگهدارنده پر می شوند، مواد به نسبت 3: 1 به آنها منتقل می شود، سپس، در صورت لزوم، یک رنگ اضافه می شود. ارزیابی نتایج در مطالعه 2-3 دارو انجام می شود.

روش غنی‌سازی فرمالین-اتر (تجزیه و تحلیل حضور تک یاخته‌ها در مدفوع)

این روش تشخیصی به شما امکان می دهد کیست های تک یاخته ای را جدا و متمرکز کنید. مواد زیر برای تجزیه و تحلیل مورد نیاز است: فرمالین (10 میلی لیتر)، 0.85 گرم محلول ایزوتونیک، آب مقطر، اتر سولفوریک، محلول لوگول.

مخلوطی از مواد زیستی با مایعات ذکر شده مخلوط و سانتریفیوژ می شود. رسوب به دست آمده در پایین لوله با محلول لوگول رنگ آمیزی شده و از نظر وجود کیست و اشکال رویشی بررسی می شود.

روش تشخیص لیشمانیا (اسمیر مغز استخوان)

برای تشخیص لیشمانیوز، از معرف ها استفاده می شود: مخلوطی از نیکیفوروف (اتر سولفوریک و الکل اتیلیک)، بافر فسفات، آزور-ائوزین به گفته رومانوفسکی.

ماده مغز استخوان پس از آماده سازی خاص با دقت زیادی روی یک لام شیشه ای قرار می گیرد. یک میکروسکوپ با سیستم غوطه وری استفاده می شود.

که در دوره حادبیماری در نقطه نقطه تعداد زیادی لیشمانیا پیدا کرد.

توجه داشته باشید:گاهی سلولهای خونیممکن است شبیه لیشمانیا فرآوری شده باشد، بنابراین برای تکنسین آزمایشگاه بسیار مهم است که مراقب باشد و تجربه کافی برای خودآزمایی داشته باشد.

روش تشخیص لیشمانیا در اسمیر از نفوذ پوست

معرف های مورد نیاز مشابه آزمایش قبلی هستند.

مواد آزمایش از محتویات سل یا زخم موجود بدست می آید. خراش دادن به ظن لیشمانیوز با چاقوی جراحی و بدون خون بسیار با احتیاط انجام می شود. سپس آماده سازی روی شیشه آماده می شود. برای صحت نتایج به دست آمده، چندین آماده سازی به طور همزمان مورد بررسی قرار می گیرند.

در صورت وجود بیماری، از بین ماکروفاژها، فیبروبلاست ها و سلول های لنفوئیدی موجود در ماده آزمایش، لیشمانیا نیز مشخص می شود.

روش جداسازی کشت خالص لیشمانیا حاصل از تراشیدن بافت های پاتولوژیک

با این روش تشخیص، ساده‌ترین خراش‌های بافت در یک محیط غذایی مخصوص قرار می‌گیرد که لیشمانیا به طور فعال در آن تکثیر می‌کند.

قبل از انجام خراش دادن، پوست با دقت با الکل درمان می شود، سپس برشی در غده ایجاد می شود، که محتویات آن برداشته می شود و با محیط در لوله آزمایش قرار می گیرد. این ماده چندین بار گرفته می شود و پس از آن در لوله های آزمایش مختلف قرار می گیرد. سپس در یک ترموستات در دمای 22-24 درجه، کشت صورت می گیرد. نتایج زیر میکروسکوپ ارزیابی می شود. این روش زمانی استفاده می‌شود که سایر روش‌های ارزان‌تر و سریع‌تر برای تشخیص تک یاخته‌ها بی‌اثر باشند.

با تماشای یک بررسی ویدیویی می توانید ببینید که چگونه آزمایش های حضور تک یاخته ها در عمل با یک قطره خون رمزگشایی می شوند:

لوتین الکساندر، ستون نویس پزشکی

مدفوع به دو صورت بررسی می شود:

1. ماکروسکوپی - کرم ها، سر، بخش ها، تکه های استروبیلی را پیدا کنید. بخش‌های کوچکی از مدفوع در یک حمام مسطح یا ظرف پتری با آب مخلوط می‌شود و در صورت لزوم با استفاده از ذره‌بین در نور مناسب در پس زمینه‌ای تاریک مشاهده می‌شود. تمام تشکل های مشکوک با موچین به یک فنجان آب دیگر یا روی یک اسلاید شیشه ای در یک قطره گلیسیرین رقیق منتقل می شوند.

با روش حمایت کردنقسمت مورد بررسی از مدفوع با آب در یک استوانه شیشه ای هم زده می شود، پس از ته نشین شدن، لایه بالایی آب تخلیه می شود. این کار چندین بار تکرار می شود. هنگامی که مایع شفاف شد، تخلیه می شود و رسوب در یک ظرف پتری مشاهده می شود.

2. میکروسکوپی - برای تشخیص تخم ها و لاروهای کرم ها. روش های تحقیق زیادی وجود دارد.

1). اسمیر بومی - رایج ترین و از نظر فنی در دسترس ترین روش تحقیق. شما می توانید تخم ها و لاروهای همه کرم ها را پیدا کنید. با این حال، با تعداد کمی تخم، آنها همیشه پیدا نمی شوند. بنابراین از روش غنی سازی استفاده می شود.

1). روش فولبرگ - این یک روش غنی سازی است که بر اساس ظهور تخم های کرمی در محلول اشباع NaCl (1.2 - چگالی؛ 400 گرم NaCl در هر 1 لیتر آب؛ 40٪ محلول NaCl) است. روش موثرتر از اسمیر بومی است. 2-5 گرم مدفوع را در ظروف شیشه ای قرار داده و با محلول NaCl پر می کنند، هم می زنند و پس از 45 دقیقه فیلم تشکیل شده با یک حلقه فلزی جدا می شود، یک قطره گلیسیرین روی یک لام شیشه ای قرار می گیرد. زیر میکروسکوپ بررسی کنید. عیب روش ظهور تاخیری تخم های کرم های مختلف، کرم نواری کوتوله - بعد از 15-20 دقیقه، کرم گرد - 1.5 ساعت، کرم شلاقی - 2-3 ساعت است.

2) روش کلانتریان - همچنین یک روش غنی‌سازی است، اما از محلول اشباع NaNO 3 (چگالی 1.38) استفاده می‌شود. بیشتر تخمها شناور هستند و نیازی به بررسی رسوب نیست. عیب این است که تخم‌ها برای مدت طولانی در محلول نگه داشته می‌شوند، که منجر به این واقعیت می‌شود که برخی از تخم‌ها شروع به متورم شدن و ته نشین شدن می‌کنند و از لایه سطحی ناپدید می‌شوند.

3. روش گوریاچف - بر اساس اصل رسوب تخم، تشخیص تخم های ترماتود کوچک. محلول اشباع NaCl به عنوان محلول استفاده می شود و 3-4 میلی لیتر محلول مدفوع به دقت روی آن قرار می گیرد. بعد از 15 تا 20 ساعت، تخم های ترماتود به ته می رسند. مایع تخلیه می شود، بر روی یک لام شیشه ای و زیر میکروسکوپ رسوب می شود.

4. روش پیچش شولمان – برای تشخیص لارو کرم در مدفوع. فقط مدفوع تازه جدا شده را بررسی کنید. 2-3 گرم در یک ظرف شیشه ای قرار داده و 5 برابر مقدار آب ریخته می شود، به سرعت با چوب، بدون دست زدن به دیواره های شیشه هم می زنیم - 20-30 دقیقه، سپس چوب را به سرعت جدا می کنیم و یک قطره مایع در انتها به یک اسلاید شیشه ای منتقل شده و میکروسکوپ می شود.

5. روش برمن - بر اساس توانایی لاروهای کرم در مهاجرت به سمت گرما و شناسایی آنها در مدفوع است.

6. روش هارادا و موری (روش رشد لارو) و برای آزمایش آنکیلوستومیازیس توصیه می شود. این روش مبتنی بر این واقعیت است که در گرما و روی کاغذ فیلتر شده مرطوب، تخم‌های کرم قلابدار به لاروهای فیلاری فرم تبدیل می‌شوند که به راحتی قابل تشخیص هستند. 15 گرم مدفوع به وسط یک نوار کاغذ صاف شده اعمال می شود، کاغذ با مدفوع در یک شیشه قرار می گیرد، به طوری که انتهای پایین آن در آب غوطه ور می شود و انتهای بالایی با چوب پنبه ثابت می شود. شیشه به مدت 5-6 روز در ترموستات با دمای 28 درجه سانتیگراد نگهداری می شود. لاروهای فیلاریفرم در این مدت رشد کرده و به داخل آب فرود می آیند. مایع زیر ذره بین بررسی می شود. اگر تشخیص آن مشکل باشد، مایع پس از کشتن لارو با حرارت دادن به 60 سانتریفیوژ می شود. تکنسین آزمایشگاه باید دستکش بپوشد.

7. روش های انتروبیازیس - شناسایی تخم کرم و کرم گاو.

الف) تراشیدن از چین های دور مقعدی - با یک سواب پنبه ای محکم روی یک چوب چوبی پیچیده و با محلول گلیسیرین 50٪ مرطوب شده است. در آزمایشگاه، سواب با 1-2 قطره از محلول آبی 50٪ گلیسیرین شسته می شود.

ب) روش کنه چسبنده (روش گراهام)

نوار چسب روی چین‌های پری مقعدی اعمال می‌شود، سپس با یک لایه چسبنده روی لام شیشه‌ای قرار می‌گیرد و میکروسکوپ می‌شود.

ج) سوهان زدن به کمک چوب چشم (روش رابینوویچ). برای تراشیدن دور مقعدی از چوب چشم شیشه ای استفاده می شود که پهن ترین قسمت آن با چسب مخصوص پوشانده شده است که امکان نگه داشتن تخم کرم سنجاق را فراهم می کند.

معاینه خون، صفرا، خلط و عضلات

میکروسکوپ خون - لاروهای فیلاریا شناسایی می شوند.

بررسی خلط - تخم پاراگانیم، لارو کرم گرد، نکاتور، استرونژیلوئید، عناصر مثانه اکینوکوک.

معاینه ماهیچه ها - در صورت مشکوک بودن به تریکینوز، ماهیچه های بیمار یا جسد و همچنین گوشتی که گفته می شود باعث عفونت فرد شده است، بررسی می شود. برای انجام تریچینوسکوپی، عضله را به قطعات کوچک برش می دهند و در کمپرسورها قرار می دهند، این دو شیشه عریض و ضخیم هستند که ماهیچه ها را خرد می کنند و لاروهای تریکینلا به شکل کپسول یافت می شوند - روش فشرده سازی.

روش هضم - ماهیچه ها با آب معده مصنوعی (محلول اسید کلریدریک و پپسین) ریخته می شوند. ماهیچه ها هضم می شوند و لاروها به راحتی شناسایی می شوند. تعیین شدت تهاجم: تعداد لارو تا 200 عدد در 1 گرم بافت ماهیچه ای- شدت تهاجم متوسط؛ تا 500 - فشرده؛ بیش از 500 - تهاجم شدید.

روش های سرولوژیکی

فصل سوم. تشخیص بیماریهای کرمی و روشهای تحقیقات کرمی

لازم است کلیه بیمارانی که به دنبال کمک پزشکی هستند و به ویژه بیمارانی که با شکایت از پدیده های دستگاه گوارش به متخصص اطفال، متخصص داخلی و نوروپاتولوژیست مراجعه می کنند، از نظر کرمی بررسی شوند. سیستم عصبیو با کم خونی اگر پزشک نتواند همیشه از روش های تحقیق آزمایشگاهی استفاده کند، در این صورت هر کارمند پزشکی که در یک کلینیک یا بیمارستان سرپایی کمک می کند، موظف است با بیمار در مورد رهاسازی کرم ها از او مصاحبه کند.

با حضور کسانی که در فصول مربوطه آورده شده است نشانه های بالینیتشخیص باید با استفاده از تست های آزمایشگاهی برای کرمی مشخص شود.

به دلیل غلبه کرم های روده ایبزرگترین ارزش عملیدر مورد حرکات روده مطالعه کرده است.

روش‌هایی برای مطالعه مدفوع برای هلمینتیازها

مدفوع در ظروف شیشه ای تمیز (حدود یک چهارم فنجان مدفوع از مکان های مختلف در یک قسمت) به آزمایشگاه تحویل داده می شود. در طول معاینه معمول، تحویل مدفوع به آزمایشگاه در جعبه کبریت یا چاپ های رایج مجاز است.

برای کنترل کرم زدایی، کل قسمتی از مدفوع جمع آوری شده پس از مصرف تحویل داده می شود (طبق تجویز پزشک). ضد کرمو ملین (در شیشه های بزرگ شیشه ای در بسته، سطل).

بررسی میکروسکوپی مدفوع اصلی ترین مورد در تشخیص کرم های روده ای است. همیشه باید یک معاینه ماکروسکوپی کلی مدفوع انجام شود تا بخش‌هایی از سستودهای بزرگ، کرم‌های سوزنی، کرم‌های گرد و غیره شناسایی شوند.

مدفوع باید تازه یا کنسرو شده (در محلول فرمالین 5٪) باشد، زیرا خشک شدن به طور چشمگیری ساختار تخم مرغ را تغییر می دهد. علاوه بر این، هنگامی که مدفوع ایستاده رخ می دهد توسعه سریعتخم برخی از کرم ها (به عنوان مثال، کرم قلابدار)، که تشخیص را دشوار می کند.

طبق دستورالعمل وزارت بهداشت اتحاد جماهیر شوروی، لازم است مدفوع به طور همزمان با استفاده از روش Fülleborn و اسمیر بومی بررسی شود.

اسمیر بومی

اسمیر بومی: یک تکه کوچک مدفوع (به اندازه یک نخود) که با یک کبریت، یک لیوان یا چوب چوبی از جاهای مختلف قسمت تحویلی گرفته می شود، به دقت بر روی یک لام شیشه ای در قطره ای از محلول گلیسرول 50 درصد می ریزد. در نمک، یا در آب. با یک ورقه پوششی بپوشانید، دومی را کمی فشار دهید (با یک سوزن کالبد شکافی). اسمیر باید نازک، شفاف و یکنواخت باشد. این فقط به عنوان افزودنی به روش های دیگری که باعث غنی سازی دارو می شود استفاده می شود. حداقل دو آماده سازی باید مشاهده شود.

به منظور شناسایی لارو کرم ها (و همچنین تخم های آنها)، یک اسمیر بومی انجام می شود. به روش زیر(به گفته شولمن): 2-3 گرم مدفوع با "پیچاندن" با میله شیشه ای به امولسیون با پنج برابر آب خالص یا نمک نمک کاملاً هم زده می شود. در حین هم زدن، لاروها روی میله شیشه ای جمع می شوند، بنابراین بلافاصله پس از پایان هم زدن، یک قطره از امولسیون به سرعت با یک میله شیشه ای به یک لام شیشه ای منتقل می شود، با یک لغزش پوشش داده می شود و مورد بررسی قرار می گیرد. S. D. Lyubchenko (1936) ثابت کرد که روش پیچشی مؤثرتر از روش اسمیر است، به خصوص در مورد تخم مرغ آسکاریس. بر اساس کار S. D. Lyubchenko، ما جایگزینی روش اسمیر را با روش پیچشی مناسب می دانیم.

روش فولبورن

روش فولبورن: 10-5 گرم مدفوع گرفته شده از مکان های مختلف را در شیشه ای به ظرفیت 50-100 میلی لیتر قرار داده و با یک شیشه یا میله چوبی در محلول اشباع شده از کلرید سدیم (400 گرم از این نمک حل می شود) کاملاً صاف می کنیم. در 1 لیتر آب گرم شده تا جوش بیاید و از طریق لایه ای از پشم پنبه یا گاز فیلتر شود؛ محلول سرد استفاده می شود: وزن مخصوص 1.2). محلول را به تدریج در داخل می ریزند تا سوسپانسیون یکنواخت به دست آید و مقدار کل محلول ریخته شده باید تقریباً 20 برابر مقدار مدفوع باشد. Fülleborn استفاده از لیوان های چای را برای مخلوط کردن مدفوع توصیه کرد، اما راحت تر است که سوسپانسیون را در شیشه های پماد 50-100 میلی لیتری، با استفاده از دو شیشه برای هر تجزیه و تحلیل (یا در فنجان های 100 میلی لیتر) آماده کنید.

بلافاصله پس از آماده سازی سوسپانسیون، ذرات بزرگی که روی سطح شناور شده اند با یک کاردک، یک قاشق فلزی یا یک تکه کاغذ تمیز از سطح جدا می شوند. تشکیلات گیاهیبقایای غذای هضم نشده و غیره)، پس از آن مخلوط به مدت 1-1.5 ساعت باقی می ماند. پس از این مدت، کل فیلم از سطح مخلوط با لمس یک سیم یا حلقه پلاتین (مسطح) با قطر نه بیشتر از 1 سانتی متر، در زاویه راست خم می شود. فیلم روی یک اسلاید شیشه ای تکان داده می شود و با یک ورقه پوششی پوشانده می شود. زیر هر پوشش (18x18 میلی متر) 3-4 قطره قرار دهید. در مجموع باید حداقل 4 آماده سازی (یک روکش برای هر آماده سازی) تهیه شود. حلقه روی آتش کلسینه می شود و پس از هر تجزیه و تحلیل با آب شسته می شود.

طبق روش فوله‌بورن، تخم‌های همه نماتدها (به استثنای تخم‌های کرم گرد بارور نشده) و تخم‌های کرم نواری کوتوله به سرعت و به راحتی شناسایی می‌شوند.

روش برمن برای مطالعه مدفوع برای لاروهای کرمی (مبتلا به استرونژیلوئیدازیس) استفاده می شود. این روش به شرح زیر است: 5 گرم مدفوع روی یک شبکه فلزی (یک صافی شیر برای این منظور مناسب است) روی یک قیف شیشه ای متصل به سه پایه قرار می گیرد. یک لوله لاستیکی با یک گیره در انتهای پایین قیف قرار می گیرد.

مش با مدفوع بلند می شود و آب گرم شده تا حدود 50 درجه در قیف ریخته می شود تا قسمت پایین توری با مدفوع در آب غوطه ور شود. لاروها به طور فعال به داخل آب حرکت می کنند و در قسمت پایین لوله لاستیکی تجمع می یابند. پس از 2-4 ساعت، گیره باز می شود و مایع در یک یا دو لوله سانتریفیوژ پایین می آید.

پس از سانتریفیوژ به مدت 1-2 دقیقه، قسمت بالایی مایع به سرعت تخلیه می شود و رسوب به صورت قطره ای بر روی لام های شیشه ای ریخته می شود و در زیر لامپ های پوششی بررسی می شود یا در یک لایه نازک روی 2-3 لام بزرگ توزیع می شود و سپس بدون پوشش بررسی می شود.

از روش برمن نیز برای بررسی خاک از نظر وجود لارو کرم قلابدار استفاده می شود.

روش استول

برای تعیین شدت تهاجم از روش استول استفاده می شود. محلول غیر طبیعی هیدروکسید سدیم را در یک بالن شیشه ای مخصوص تا علامت 56 سانتی متر مکعب ریخته و سپس مدفوع اضافه می شود تا سطح مایع به 60 سانتی متر مکعب یعنی 4 سانتی متر مکعب برسد. پس از تکان دادن با دانه های شیشه ای، 0.075 میلی لیتر از مخلوط را برای بررسی گرفته و زیر یک یا دو ورقه معمولی بررسی می کنند. مقدار حاصل در 200 ضرب می شود تا تعداد تخم های موجود در 1 سانتی متر مکعب مدفوع بدست آید.

مطالعه محتویات اثنی عشر

آب دوازدهه و صفرا کیستیک که به روش معمول با کاوش (و صفرا کیستیک و پس از رفلکس از کیسه صفرا) به دست می آیند، کاملاً با حجم مساوی اتیل اتر مخلوط می شوند. مخلوط سانتریفیوژ می شود و پس از آن رسوب در زیر میکروسکوپ بررسی می شود. علاوه بر رسوبات آزمایش میکروسکوپیتکه های شناور در مایع، که ممکن است حاوی تخم های کرم باشد، لزوما در معرض دید قرار می گیرند. هنگام بررسی تخمک های کرم های آب معده و استفراغ، می توانید از همین روش استفاده کنید.

در صورت مشکوک بودن باید آب اثنی عشر و محتویات معده را بررسی کنید بیماری های کرمیکبد، کیسه صفرا (اپیستورکیازیس، فاسیولیازیس، دیکروسلیوز) و دوازدهه (Strongyloidiasis).

بررسی خلط

خلط بر روی یک صفحه شیشه ای مالیده می شود، با یک صفحه شیشه ای دیگر محکم پوشانده می شود و با چشم غیر مسلح روی زمینه ای روشن و سیاه و همچنین زیر ذره بین در نور عبوری بررسی می شود. تکه‌های مجزای خلط (انباشته‌های «زنگ‌زده»، تکه‌های بافت، و غیره) در یک لایه نازک روی یک اسلاید شیشه‌ای اعمال می‌شوند، با یک ورقه‌ی پوششی محکم پوشانده می‌شوند و با میکروسکوپ با بزرگ‌نمایی کم و زیاد بررسی می‌شوند.

الف) برای تشخیص سیستیرکوز پوست، بافت زیر جلدی یا عضلات، ابتدا یک قطعه بریده شده از بافت مربوطه به صورت آسپتیک با چشم غیرمسلح بررسی می شود. بخش‌های بافت با کمک سوزن‌های کالبد شکافی از هم جدا می‌شوند تا یک وزیکول قابل مشاهده با چشم غیر مسلح - سیستیسرکوس (عکس A) را تشخیص دهند. طول آن 6-20 میلی متر، عرض 5-10 میلی متر است. هنگامی که حباب مشکوک به سیستیسرک پیدا می شود، بین دو اسلاید شیشه ای له می شود و زیر میکروسکوپ بررسی می شود. سیستیسرکوس (Cistycercus cellulosae) با وجود یک اسکولکس با چهار مکنده و هاله ای از قلاب تعیین می شود (عکس B).

عکس.الف - سیستیسرک با اسکولکس به سمت بیرون. ب - سر کرم نواری خوک .

ب) برای تشخیص تریکینوزیس، یک قطعه عضله بریده شده بدون عارضه (دوسر بازویی یا گاستروکنمیوس) را با دقت در محلول گلیسرول 50 درصد با استفاده از سوزن های تشریح به نازک ترین الیاف خرد می کنند. ماهیچه های له شده بین دو اسلاید شیشه ای فشرده می شوند و با بزرگنمایی کم میکروسکوپ در یک میدان دید تاریک مورد بررسی قرار می گیرند. معاینه عضلات برای تریکینوز توصیه می شود که زودتر از روز هشتم بیماری انجام شود. لاروهای تریچینلا در ماهیچه ها به صورت پیچ خورده قرار دارند: آنها در کپسول های لیمویی شکل محصور شده اند.

عکس.الف - لاروهای تریچینلا در ماهیچه ها. ب - کپسول کلسیفیه تریچینلا.

فلوروسکوپی

بیشتر اوقات، فلوروسکوپی برای تشخیص اکینوکوکوز و در موارد کمتر سیستیسرکوز استفاده می شود. سیستیسرک ها تنها پس از کلسیفیکاسیون (در موارد) با فلوروسکوپی تشخیص داده می شوند بیماری طولانی مدت). در سال های اخیر، فلوروسکوپی برای تشخیص آسکاریازیس هم در مراحل اولیه لاروی و هم تا حدی در مرحله روده مورد استفاده قرار گرفته است.

در طول دوره مهاجرت لارو آسکاریس (و کرم قلابدار) در ریه ها، کانون های التهابی ناپایدار و گاهی اوقات متعدد شناسایی می شوند. در همان زمان، ائوزینوفیلی قابل توجهی در خون ظاهر می شود.

کرم های گرد بالغ از نظر جنسی در فلوروسکوپی روده افراد مبتلا به وضوح قابل مشاهده هستند. این روش، علیرغم پیچیدگی و دست و پا گیر بودن، باید به عنوان یک روش اضافی برای تشخیص آسکاریازیس در مواردی که آنالیز اسکاتولوژیک منفی دارند، استفاده شود. به گفته E.S. Geselevich، از 180 بیمار مبتلا به آسکاریازیس که با فلوروسکوپی شناسایی شدند، 54 تخم آسکاریس در مدفوع یافت نشد (نگاه کنید به).

7.7. روش های تعیین زنده ماندن تخم ها و لاروهای کرم ها

زنده ماندن تخم های کرمی با ظاهر آنها، رنگ آمیزی با رنگ های حیاتی، با کشت در شرایط بهینهو راه اندازی نمونه بیولوژیکی.

7.7.1. تعیین زنده ماندن تخم ها یا لاروهای کرم ها از طریق ظاهر

تخمهای هلمینت ابتدا با بزرگنمایی کم و سپس با بزرگنمایی زیاد میکروسکوپ می شوند. در تخم های تغییر شکل یافته و مرده کرم ها، پوسته به سمت داخل پاره یا خم شده است، پلاسما کدر، شل شده است. در تخم‌های تقسیم‌بندی شده، گلوله‌های شکاف (بلاستومرها) از نظر اندازه نابرابر، شکل نامنظم و اغلب به یک قطب منتقل می‌شوند. گاهی اوقات تخمک های غیرطبیعی وجود دارد که با داشتن ناهنجاری های خارجی، به طور طبیعی رشد می کنند. در لاروهای زنده کرم های گرد، دانه بندی ریز فقط در قسمت میانی بدن وجود دارد، همانطور که می میرند، در سراسر بدن پخش می شود، واکوئل های براق هیالین بزرگ ظاهر می شود، به اصطلاح "رشته های مروارید".

برای تعیین زنده ماندن تخم های بالغ کرم های گرد، کرم شلاقی، کرم های سوزنی، باید تماس بگیرید حرکات فعاللاروها را با کمی گرم کردن آماده سازی (تا دمایی که بیش از 37 درجه سانتیگراد نباشد) ایجاد کنید. مشاهده زنده ماندن لاروهای آسکاریس و کرم شلاق پس از جداسازی آنها از پوسته تخم مرغ با فشار دادن روی شیشه پوششی آماده سازی با سوزن یا موچین تشریح کننده راحت تر است.

در لاروهای مهاجم آسکاریدها اغلب کلاهکی دیده می‌شود که در انتهای سر کنده شده است و در لارو کرم‌های شلاقی که رشد خود را در تخم کامل کرده‌اند، در این مکان یک استایلت با بزرگ‌نمایی زیاد دیده می‌شود. لاروهای مرده کرم ها، صرف نظر از محل آنها (در تخم یا خارج از آن)، متوجه پوسیدگی بدن می شوند. که در آن ساختار داخلیلارو توده ای یا دانه ای می شود و بدن کدر و کدر می شود. واکوئل ها در بدن یافت می شوند و شکاف هایی روی کوتیکول یافت می شوند.

زنده ماندن انکوسفرهای تنیدی (گاو، کرم نواری خوک و غیره) با حرکت جنین ها زمانی که در معرض آنزیم های گوارشی قرار می گیرند تعیین می شود. تخم مرغ ها روی آن قرار می گیرند شیشه ساعتبا آب معده سگ یا آب دوازدهه مصنوعی. ترکیب دومی: پانکراتین - 0.5 گرم، بی کربنات سدیم - 0.09 گرم، آب مقطر - 5 میلی لیتر. عینک های ساعت با تخم مرغ به مدت 4 ساعت در یک ترموستات در دمای 36 تا 38 درجه سانتیگراد قرار می گیرند. در این حالت جنین های زنده از غشاها آزاد می شوند. پوسته های انکوسفرهای زنده نیز در پپسین اسیدی شده حل می شوند محلول قلیاییتریپسین پس از 6-8 ساعت در ترموستات 38 درجه سانتیگراد.

اگر تخم های تنید در محلول 1% سولفید سدیم یا محلول 20% هیپوکلریت سدیم یا محلول 1% کلر آب در دمای 36 تا 38 درجه سانتیگراد قرار داده شوند، جنین های بالغ و زنده از پوسته خارج می شوند. تغییر در طول 1 روز انکوسفرهای نابالغ و مرده چروکیده یا متورم می شوند و به طور چشمگیری بزرگ می شوند و سپس در عرض 10 دقیقه تا 2 ساعت "حل می شوند". جنین های زنده تنیدها نیز به طور فعال در مخلوطی از محلول کلرید سدیم 1٪، محلول بی کربنات سدیم 0.5٪ و صفرا در دمای 36 - 38 درجه سانتیگراد حرکت می کنند.

زنده ماندن فاسیولیا آدولسکاریه جمع آوری شده از گیاهان و سایر اشیاء آب با بررسی آنها بر روی یک لام شیشه ای در نمک زیر میکروسکوپ با مرحله گرمایش بررسی می شود. با گرم شدن، لاروهای ترماتود در کیست شروع به حرکت می کنند.

برای تعیین زنده ماندن تخم‌های کرم نواری کوتوله، روش Ionina N.S ساده‌ترین روش است: در تخم‌های زنده، جفت قلاب‌های جنینی میانه یا موازی با قلاب‌های جانبی هستند، یا دومی زاویه‌ای در پایه کمتر تشکیل می‌دهند. از 45 درجه با میانه. در تخم‌های مرده، جفت‌های جانبی زاویه‌ای را در پایه با یک جفت متوسط ​​بیش از 45 درجه تشکیل می‌دهند، یا قلاب‌ها به‌طور تصادفی پراکنده می‌شوند (آرایش جفت آنها از بین می‌رود). گاهی اوقات چروک شدن جنین، تشکیل دانه بندی وجود دارد. روش دقیق تر مبتنی بر ظاهر حرکات انکوسفر در هنگام تغییر شدید دما است: از 5 - 10 درجه تا 38 - 40 درجه سانتیگراد.

تعیین زنده ماندن تخم‌های نماتد نابالغ باید در یک محفظه مرطوب (ظروف پتری)، قرار دادن تخم‌های آسکاریس در محلول فرمالین 3 درصد تهیه شده در محلول ایزوتونیک کلرید سدیم در دمای 24 تا 30 درجه سانتی‌گراد، تخم‌های کرم شلاقی در 3 قرار داده شود. محلول اسید هیدروکلریک در دمای 30 - 35 درجه سانتیگراد. تخم کرم در محلول ایزوتونیک کلرید سدیم در دمای 37 درجه سانتیگراد. ظروف پتری باید 1 تا 2 بار در هفته برای هوادهی بهتر باز شوند و کاغذ صافی دوباره مرطوب شود. آب تمیز.

مشاهدات رشد تخم کرم کرم حداقل 2 بار در هفته انجام می شود. عدم وجود علائم توسعه در عرض 2-3 ماه نشان دهنده عدم زنده ماندن آنها است. علائم رشد تخم کرم کرم ابتدا مراحل خرد کردن، تقسیم محتویات تخم به بلاستومرهای جداگانه است. در روزهای اول، تا 16 بلاستومر ایجاد می شود که به مرحله دوم - مورولا و غیره منتقل می شود.

تخم‌های کرم قلاب‌دار در یک استوانه شیشه‌ای (به ارتفاع 50 سانتی‌متر و قطر 7 سانتی‌متر) که با درپوش بسته شده است، کشت می‌شوند. مخلوطی از حجم های مساویشن و ماسه استریل، زغال چوب و مدفوع با تخم کرم قلابدار، رقیق شده با آب تا قوام نیمه مایع، با دقت با استفاده از یک لوله شیشه ای در کف سیلندر ریخته می شود. در طی 1 تا 2 روز نشستن در تاریکی در دمای 25 تا 30 درجه سانتیگراد، لاروهای رابدیتوئید از تخم ها بیرون می آیند و پس از 5 تا 7 روز از قبل فیلاری فرم می شوند: لاروها از دیواره های استوانه می خزند و در آنجا قرار می گیرند. حتی با چشم غیر مسلح نیز قابل مشاهده است.

تخم‌های ترماتود که به طور طبیعی در آب رشد می‌کنند، مانند opisthorchis، diphyllobothriids، fasciols و غیره، روی یک شیشه ساعت، یک ظرف پتری یا در ظرف دیگری قرار داده می‌شوند و لایه کوچکی از آب معمولی ریخته می‌شود. هنگام کشت تخم فاسیولا، باید در نظر داشت که آنها در تاریکی سریعتر رشد می کنند، در حالی که میراسیدیوم در تخم های زنده در دمای 22-24 درجه سانتیگراد پس از 9-12 روز تشکیل می شود. هنگام میکروسکوپ تخمک های ترماتود در حال رشد، حرکات میراسیدیوم به وضوح قابل مشاهده است. Fasciola miracidium فقط در نور از پوسته تخم مرغ بیرون می آید.

روش فولبورن لارو کرم قلابدار و قوی بر روی آگار در ظرف پتری با زغال حیوانی کشت می شود. پس از نگهداری در ترموستات در دمای 25 تا 30 درجه سانتیگراد به مدت 5 تا 6 ساعت، لاروها روی آگار پخش می شوند و مسیری از باکتری را پشت سر می گذارند.

روش هارادا و موری. 7 میلی لیتر آب مقطر به لوله های آزمایش قرار داده شده در یک قفسه اضافه می شود. 0.5 گرم مدفوع را با یک چوب چوبی بردارید و روی کاغذ صافی (15×150 میلی متر) 5 سانتی متر از لبه سمت چپ اسمیر ایجاد کنید (این عمل برای محافظت از سطح میز آزمایشگاه روی یک ورق کاغذ انجام می شود). سپس نوار حاوی اسمیر در لوله قرار داده می شود تا انتهای چپ بدون اسمیر به پایین لوله برسد. قسمت بالایی را با یک تکه سلفون بپوشانید و آن را با یک کش محکم بپیچید. روی لوله آزمایش شماره، نام آزمودنی را بنویسید. در این حالت لوله های آزمایش به مدت 10-8 روز در دمای 28 درجه سانتی گراد نگهداری می شوند. برای مطالعه لاروها، پوشش سلفون را بردارید و بردارید و یک نوار کاغذ صافی را با موچین بردارید. در این مورد باید مراقب بود، زیرا تعداد کمی از لاروهای عفونی می توانند به انتهای بالای کاغذ صافی یا دیواره لوله آزمایش حرکت کرده و به زیر سطح سلفون نفوذ کنند.

لوله ها به مدت 15 دقیقه در حمام آب گرم با دمای 50 درجه سانتیگراد قرار می گیرند و پس از آن محتویات تکان داده می شود و به سرعت در یک لوله 15 میلی لیتری ته نشینی لارو ریخته می شود. پس از سانتریفیوژ، مایع رویی خارج می‌شود و رسوب به یک لام شیشه‌ای منتقل می‌شود که با یک ورقه پوششی پوشانده شده و با بزرگنمایی کم میکروسکوپ می‌شود.

برای تشخیص افتراقی لاروهای فیلاریفرم استفاده از داده های جدول 3 ضروری است.

جدول 3

تشخیص افتراقی لاروهای FILARIATED OF A. DUODENALE، N. AMERICANUS، S. STERCORALIS، TRICHOStrONGYLUS SP.

لارو	ابعاد	ویژگی های مشخصه
A. duodenale	طول بدن حدود 660 میکرون، کلاهک - 720 نانومتر	مخطط کلاهک کمتر مشخص است، بیرون زدگی دهان کمتر قابل توجه است، انتهای قدامی بدن (اما نه کلاهک) صاف است، قطر لوله روده کوچکتر از پیاز مری است، انتهای دمی صاف است.
N. americanus	طول بدن حدود 590 میکرومتر، کلاهک - 660 نانومتر	غلاف به طور قابل توجهی مخطط است، به خصوص در قسمت دمی بدن، دهان تیره به نظر می رسد، انتهای قدامی بدن (اما نه غلاف) مانند یک انتهای باریک گرد است. تخم مرغ، قسمت قدامی لوله روده با قطری مانند پیاز مری ، انتهای دم به شدت نوک تیز است.
S. stercoralis	طول بدن حدود 500 میکرومتر	لارو بدون کلاهک، مری تقریباً نصف طول بدن است، دم آن صاف یا منشعب است.
Trichostrongylus sp.	طول بدن حدود 750 میکرون	مجرای روده مستقیم نیست، بلکه زیگزاگی است، انتهای دمی گرد و به شکل دکمه است.

7.7.2. روش های رنگ آمیزی تخم مرغ و لارو کرم ها

بافت‌های مرده در بیشتر موارد رنگ‌ها را سریع‌تر از بافت‌های زنده درک می‌کنند. این ویژگی ها در کرم شناسی برای تعیین زنده ماندن تخم ها و لاروهای کرم ها استفاده می شود. با این حال، در برخی موارد، برخی از رنگ ها توسط بافت های زنده بهتر از بافت های مرده درک می شوند.

برای تعیین افتراقی تخم‌ها و لاروهای زنده و مرده از رنگ‌ها و روش‌های زیر استفاده می‌شود.

لکوباز متیلن بلو اغلب برای رنگ آمیزی بافت زنده و مرده استفاده می شود. سلول زندهیا بافت متیلن بلو را به لکوباز بی رنگ کاهش می دهد، بافت مرده این توانایی را ندارد و بنابراین رنگ می گیرد.

ملاک وضعیت تخمک، رنگ آمیزی جنین است، نه پوسته. این توانایی مربوط به شرایط مرگ تخم است. در مواردی که پوسته فیبری تخم مرغ مرده خاصیت نیمه تراوا خود را از دست ندهد، از رنگ عبور نمی کند، بنابراین جنین مرده رنگ نمی گیرد. جنین رنگی همیشه نشان دهنده مرگ تخمک است.

برای رنگ آمیزی تخم های آسکاریس، می توانید از متیلن بلو در محلول اسید لاکتیک با قلیایی سوزاننده استفاده کنید (متیلن بلو 0.05 گرم، سود سوزآور 0.5 گرم، اسید لاکتیک - 15 میلی لیتر). تخم های زنده رنگ را درک نمی کنند. رنگ شده اند رنگ ابیجنین تخم های مرده لارو آسکاریس با محلول پایه رنگ آبی برلیانت-کرسیل با غلظت 1:10000 رنگ آمیزی می شود: یک قطره مایع با تخم آسکاریس و یک قطره از محلول رنگ پایه روی یک لام شیشه ای اعمال می شود. این آماده سازی با یک ورقه پوششی پوشانده شده است که با ضربه ملایم با سوزن تشریح، محکم روی لام شیشه ای فشار داده می شود. در زیر میکروسکوپ، تعداد لاروهای هچ شده و درجه رنگ آمیزی آنها مشاهده می شود. پس از آن، همان دارو پس از 2 تا 3 ساعت دوباره بررسی می شود. فقط لاروهای تغییر شکل نیافته که به مدت 2 ساعت رنگ آمیزی نشده باشند زنده در نظر گرفته می شوند. لاروهای مرده یا از تخم ها بیرون نمی آیند، یا در صورت شکستن پوسته (جزئی یا کامل) لکه می شوند.

هنگام تعیین زنده ماندن تخم پرندگان آسکاریدیا، می توان آماده سازی را با 5٪ رنگ آمیزی کرد. محلول الکلید هنگامی که آن را به دارو اعمال می شود، جنین تخم های آسکارید مرده برای 1 - 3 ثانیه. نارنجی رنگ می شوند.

تخم‌های مرده اپیستورچیس و انکوسفرهای کرم گاو با محلول تولویدین آبی (1:1000) و انکوسفرهای مرده کرم گاو با محلول آبی برلیانت کرسیل (1:10000) رنگ‌آمیزی می‌شوند. در همان زمان، جنین و پوسته تخم مرغ مرده و زنده رنگ می گیرند. بنابراین، پس از رنگ‌آمیزی، تخم‌ها و انکوسفرها شسته می‌شوند آب تمیزو همچنین آنها را با سافرانین (در رقت 1:10000 الکل 10 درجه سانتیگراد) رنگ آمیزی کنید. الکل رنگ را از پوسته پاک می کند و سافرانین رنگ قرمز می گیرد. در نتیجه، تخم های زنده قرمز می شوند. تخم مرغ با جنین مرده - به رنگ آبی، و پوسته قرمز باقی می ماند. جنین‌های مرده انکوسفرهای کرم گاو به سرعت، در عرض چند دقیقه، با سافرانین یا آبی با آبی برلیانت-کرسیل در رقت 1:4000 یا با کارمین نیلی با رقت 1:1000 - 1 به رنگ قرمز روشن یا صورتی رنگ می‌شوند. :2000. جنین های زنده تحت تأثیر این رنگ ها حتی پس از 2 تا 7 ساعت تغییر نمی کنند.

برای تعیین میزان زنده ماندن تخم کرم گلوگاه، توصیه می شود از رنگ های زیر استفاده کنید:

1. آبی کریسیل درخشان (1:8000) - پس از 1 ساعت، انکوسفر تخم‌های مرده به‌ویژه رنگ‌آمیزی می‌شود، که به‌شدت در مقابل پس‌زمینه کم‌رنگ یا بی‌رنگ بقیه تخم‌ها خودنمایی می‌کند.

2. سافرانین (1:8000 برای 2 ساعت و 1:5000 برای 3 تا 5 ساعت).

3. محلول 50٪ اسید پیروگالیک در رقت 1:2 - وقتی به مدت 1 ساعت در دمای 29 - 30 درجه سانتیگراد قرار می گیرد (هر چه دما پایین تر باشد، فرآیند رنگ آمیزی طولانی تر است).

7.7.3. روش فلورسنت برای مطالعه تخم‌ها و لاروهای کرم‌ها

میکروسکوپ فلورسنت تشخیص اجسام زنده و مرده را بدون آسیب رساندن به تخمک ممکن می سازد. برای فلورسانس استفاده نمی شود پرتو های فرابنفشو قسمت آبی-بنفش نور مرئی، با میکروسکوپ معمولی و اسلایدهای شیشه ای. مجموعه خاصی از فیلترهای رنگی به روشن کننده OI-18 اضافه شده است.

تخم‌های زنده و مرده کرم‌های گرد، کرم‌های سوزنی، کرم‌های نواری پیگمی، کرم‌های گاوی، کرم‌های نواری و سایر کرم‌ها به‌طور متفاوتی درخشنده هستند. این پدیده هم در هنگام لومینسانس اولیه بدون استفاده از رنگها و هم هنگام رنگ آمیزی با فلوروکرومها (آکریدین نارنجی، کوریفوسفین، پریمولین، اورولین، سولفات برلرین، تری فلاوین، ریوانول، کویناکرین و غیره) مشاهده می شود.

تخم‌های کرم گرد بدون رنگ و بدون تکه‌تکه سبز روشن با رنگ زرد می‌درخشند. در تخم مرغ مرده، پوسته تابش می کند چراغ سبزبسیار روشن تر از قسمت جوانه سبز تیره؛ در تخم کرم گرد با لارو، فقط پوسته ظاهر می شود، در حالی که در مرده، پوسته و لارو هر دو زرد روشن هستند.

تخم‌های زنده بدون رنگدانه و غیرقطعه‌ای کرم‌های سوزنی و کرم‌های نواری کوتوله، نور زرد متمایل به سبزی از خود ساطع می‌کنند؛ در تخم‌های مرده، پوسته به شدت در برابر پس‌زمینه یک توده جنینی سبز تیره می‌تابد.

با لومینسانس ثانویه (هنگام رنگ آمیزی نارنجی آکریدین با رقت 1:10000 و 1:50000 از 30 دقیقه تا 2 ساعت)، پوسته نماتدهای زنده و مرده، ترماتودها و سستودها به طور متفاوتی درخشنده می شود.

پوسته تخم‌های زنده و مرده آسکاریدها، توکسوکار، کرم‌ها، کرم‌های پیگمی، کرم‌های نواری موش صحرایی، کرم‌های گاو نر، کرم‌های نواری نارنجی مایل به قرمز می‌شوند. جنین تخم های زنده آسکاریس، توکساسکاریس، کرم نواری موش صحرایی، کرم پهن و انکوسفر کرم گاوی با رنگ سبز تیره یا مات می درخشد. سبز خاکستری. جنین های مرده تخم های این کرم ها رنگ نارنجی-قرمز "سوزان" را منتشر می کنند. لاروهای کرم زنده و توکسوکارها (پوسته تخم مرغ) نور سبز خاکستری مات از خود ساطع می کنند، زمانی که می میرند، رنگ آنها از انتهای سر به سبز روشن "سوزان"، سپس زرد، نارنجی و در نهایت به نارنجی روشن تغییر می کند.

هنگامی که با فلوروکروم ها رنگ آمیزی می شوند - کوریفوسفیلوم، پریمولین، تخم های مرده آسکاریدها و کرم های شلاقی درخششی از زرد یاسی تا قرمز مسی نشان می دهند. تخم های زنده درخشنده نیستند، اما به رنگ سبز تیره در می آیند.

تخم‌های زنده ترماتود (پاراگونیموس و کلونرکیس) پس از رنگ‌آمیزی با نارنجی آکریدین درخشنده نیستند و رنگ سبز مایل به زرد از تخم‌های مرده به دست می‌آید.

از روش لومینسانس نیز می توان برای تعیین زنده ماندن لاروهای کرمی استفاده کرد. بنابراین، با محلول آکریدین نارنجی (1: 2000) لاروهای استونژیلات، رابدیتا درخشش فلوروکرومی شده: زنده - سبز (با رنگ)، مرده - نور نارنجی روشن.

میراسیدی های زنده ای که از پوسته بیرون آمده اند، نور آبی کم رنگی با تاج گل مژه به رنگ زرد روشن منتشر می کنند، اما 10-15 دقیقه پس از مرگ آنها به صورت یک سبز روشن "سوزان" و سپس نور نارنجی-قرمز ظاهر می شوند.

7.7.4. روش سنجش بیولوژیکی

به عنوان مثال، برای تعیین زنده ماندن تخم های آسکاریس (خوک آسکاریس، انسان، توکسوکارا، توکساسکاریس و غیره) در هر حیوان (خوکچه هندی، موش)، حداقل 100 تا 300 تخم با لارو توسعه یافته مورد نیاز است. تخم آسکاریس در محلول ایزوتونیک کلرید سدیم از طریق دهان موش یا خوکچه هندی پیپت می شود. پس از 7-6 روز حیوان ذبح شده، باز شده و کبد و ریه های آن به طور جداگانه از نظر وجود لارو آسکاریس بررسی می شوند. برای این کار، کبد و ریه ها را با قیچی به قطعات کوچک برش می دهند و طبق روش برمن یا سوپریاگا (بخش 6.1.2) بررسی می شوند.

اگر حیوانات با تخم‌های مهاجم زنده آلوده شده بودند، در کالبد شکافی در کبد و ریه‌ها، لاروهای آسکاریس مهاجر پیدا می‌شوند.

در صورت عفونت، تخم فاسیولا در مدفوع حیوانات آزمایشگاهی پس از 2 ماه در خرگوش قابل تشخیص است. خوک گینه- بعد از 50 روز، در موش - بعد از 35 - 40 روز.

برای پاسخ سریعتر، حیوانات آزمایشگاهی پس از 20-30 روز باز می شوند و کبد از نظر وجود فاسیول های جوان بررسی می شود.

برای تعیین زنده ماندن تخم‌های کرم نواری، توصیه می‌شود که آنها را به موش‌های سفیدی که قبلاً آلوده نشده‌اند، بخورانید، سپس بعد از 92 تا 96 ساعت کالبد شکافی حیوانات و شناسایی سیستیسرکوئیدها در پرزهای روده یا سستودها در مجرای روده انجام شود.

برای تعیین زنده ماندن تخم های اپیستورکیس، روشی توصیه می شود (German S.M., Beer S.A., 1984)، بر اساس فعال سازی فیزیکوشیمیایی غده جوجه کشی میراسیدیوم و تحریک آن. فعالیت حرکتیلارو، که منجر به باز شدن درب تخم و آزادسازی فعال میراسیدیوم در شرایط آزمایشی می شود.

یک سوسپانسیون از تخم های opisthorchis در آب از قبل تا 10 - 12 درجه سانتیگراد خنک می شود (همه عملیات بعدی در دمای اتاق 19 - 20 درجه سانتیگراد انجام می شود). 1 قطره از یک سوسپانسیون حاوی 100-150 تخم مرغ به یک لوله سانتریفیوژ اضافه می شود. لوله آزمایش به مدت 5-10 دقیقه در سه پایه قرار می گیرد. در این مدت، تمام تخم مرغ ها زمان دارند تا به ته فرو بروند. سپس با یک نوار کاغذ صافی، آب اضافی را با دقت مکیده و 2 قطره از یک محیط مخصوص را به لوله آزمایش اضافه می کنند. محیط در بافر 0.005 مولار Tris-HCl تهیه شده است. 12 - محلول اتانول 13 درصد و رنگ ( سرخابی، سافرانین، ائوزین، متیلن بلو و غیره) به بافر اضافه می شود. لوله آزمایش تکان داده می شود، محتویات آن با یک پیپت به یک لام شیشه ای منتقل می شود و به مدت 10 دقیقه باقی می ماند و کمی تکان می خورد. سپس 2 قطره از محیط مشخص شده را اضافه کنید. آماده سازی برای میکروسکوپ در زیر میکروسکوپ نوری معمولی با بزرگنمایی 20 برابر آماده است.

در طی این مدت، درب لاروهای زنده باز می شود و میراسیدیوم به طور فعال وارد محیط مشخص شده می شود. به دلیل وجود اتانول در آن، پس از 2-5 دقیقه بی حرکت می شوند و سپس با رنگ آمیزی رنگ آمیزی می شوند. آنها را می توان به راحتی در زیر میکروسکوپ شناسایی و شمارش کرد.