Struktura kristalore e pështymës. ruajtjen e shëndetit të dhëmbëve

Kapitulli 2. Problemet aktuale në diagnostikimin dhe monitorimin e efektivitetit të trajtimit të ulçerës duodenale. Karakteristikat e kristalografisë së pështymës në patologjinë gastroduodenale (rishikim i literaturës).

2.1 Përcaktimi instrumental i një defekti të mukozës në ulçerën duodenale.

2.2 Diagnoza morfologjike e fazës së inflamacionit në ulçerën duodenale.

2.3 Gjendja e tanishme diagnoza e infeksionit Helicobacter pylori.

2.4 Mundësitë e përdorimit të kristalografisë së pështymës në diagnostikimin dhe vlerësimin e efektivitetit të trajtimit të sëmundjes së ulçerës peptike.

Kapitulli 3. Qëllimi dhe metodat e kërkimit.

Kapitulli 4. Karakteristikat e pamjes kristalografike të pështymës në ulçerën duodenale.

Kapitulli 5. Diskutimi i rezultateve të hulumtimit.

Kapitulli 6. Përfundime.

Prezantimi i disertacionit (pjesë e abstraktit) me temën "Kristalografia e pështymës në diagnostikimin dhe monitorimin e efektivitetit të trajtimit të ulçerës duodenale"

Lista e referencave për kërkimin e disertacionit Kandidati i Shkencave Mjekësore Vorobyov, Alexander Viktorovich, 2004

Ju lutemi vini re se tekstet shkencore të paraqitura më sipër janë postuar për qëllime informative dhe janë marrë përmes njohjes tekste origjinale disertacione (OCR). Prandaj, ato mund të përmbajnë gabime të lidhura me algoritme të papërsosur të njohjes. Nuk ka gabime të tilla në skedarët PDF të disertacioneve dhe abstrakteve që ne ofrojmë.

PUNË KUALIFIKUESE E diplomuar
"Përdorimi i kristaloskopisë për të identifikuar leucemia akute në minjtë e AKR-së"

Prezantimi................................................. ...................................... 3
Kapitulli I. Rishikimi i literaturës.............................................. ....................... 3
1.1 Kristalografia e lëngjeve biologjike................................... 6
1.1.1 Konceptet themelore të gjendjes kristalore të materies.......... 6
1.1.2 Proceset e kristalizimit në sistemet e gjalla................................... 8
1.1.3 Veçoritë kristalografike të lëngjeve biologjike... 8
1.1.4 Morfologjia e lëngjeve biologjike................................... 8
1.2 Metodat e kërkimit kristalografik................................... 12
1.2.1 Parakushtet për studimin e dukurisë së kristalizimit të lëngjeve biologjike................................ .......................... 12
1.2.2 Gjendja aktuale e ideve rreth metodave të kërkimit kristalografik................................. .......................................... 18
1.2.2.1 Karakteristikat e përgjithshme të teknikës për teziokristaloskopinë e nënshtresave biologjike................................ ................................ 25
2. Objektet, qëllimet dhe metodat e kërkimit................................. ........... 26
2.1 Qëllimet, objektivat dhe fazat e studimit................................. ........... 26
2.2 Përgatitja e enëve dhe e zonës së punës................................................ ...... 28
2.3 Metodat e aplikuara të kërkimit................................................ ...... 28
2.3.1 Procedura e testit teziokristaloskopisë................................................. 28
2.4 Përpunimi statistikor i të dhënave................................................ ...... 43
3. Rezultatet e hulumtimit................................................ ........... ........ 44
3.1 Morfologjia e urinës së minjve të shëndetshëm dhe të infektuar artificialisht me leuçemi................................. .......................................... 44
3.2 Kriteret kryesore për vlerësimin e facialeve tesigrafike të urinës tek minjtë në kushte normale dhe me patologji (leuçemia) ............................. ....... .......... 46
3.3 minjtë e linjës AKR................................................ .......................... 49
3.4.Dinamika e zhvillimit të leuçemisë................................................ ....... 50
3.5 Përfundime................................................ ...................................
Lista e literaturës së përdorur................................................ ..... 52

Prezantimi

Bioteknologjitë moderne janë një sintezë e arritjeve shkencore në fusha të ndryshme të shkencës natyrore: mjekësi, biologji, matematikë, fizikë, kimi dhe shkenca të tjera. Zh. Alferov, laureat i çmimit Nobel në fizikë, vuri në dukje se në vitet e fundit, studentët e tij kanë marrë rezultate veçanërisht domethënëse në punën e kryer në kryqëzimin e fizikës dhe biologjisë, fizikës dhe mjekësisë. Një shembull i kësaj është qasja për zgjidhjen e problemit social më urgjent modern - diagnostikimin dhe trajtimin efektiv të sëmundjeve malinje. Çdo vit, miliona fëmijë dhe njerëz të moshuar, si dhe kafshë fermash me vlerë të lartë, vdesin nga leuçemia. Në të gjithë botën, teknologjitë për zhvillimin dhe trajtimin e leucemisë tek njerëzit studiohen në kafshë të një linje gjenetike të përcaktuar rreptësisht. Për më shumë se 10 vjet, Institucioni Federal Shtetëror "KNIIG dhe PC FMBA i Rusisë" ka kryer kërkime mbi zhvillimin e leukemisë së vazhdueshme duke përdorur modelin e miut ACR. Pavarësisht progresit të arritur në fushën e leuçemisë eksperimentale dhe klinike, problemi i patologjisë së përshkruar është shumë larg zgjidhjes përfundimtare.
Në 40 vitet e fundit, është zhvilluar në mënyrë aktive një drejtim i ri diagnostikues - kristaloskopia, bazuar në përcaktimin e përbërjes cilësore të lëngjeve biologjike nga formimi i strukturave kristalore në to.
Përvoja e parë aplikimi klinik kristalografia daton në fillim të viteve 60 të shekullit të kaluar. Fillimisht, shumica e studiuesve përdorën metodën tesigrafike. Në vitin 1964, Daems kreu një studim të kristalogrameve të gjakut të pacientëve me hipertrofi të prostatës dhe karcinomë. J.Leal dhe B.Finlayson (1977) vendosën tiparet e formimit të kristaleve të urinës.

A.A. Kozhinova dhe L.S. Maslennikova (1968). V.Ya. Neretin dhe V.I. Kiryakov (1977) përdori këtë metodë për të studiuar lëngun cerebrospinal të pacientëve me sëmundje të ndryshme të trurit dhe palcës kurrizore. Në veprën e D.B. Kalikshtein et al. (1981), u studiua tabloja tezigrafike e urinës së pacientëve me sëmundje të ndryshme të veshkave. V.V. Usin (1995) studioi ndryshimet kristalografike në lëngun cerebrospinal dhe pështymë në pacientët me sindroma kronike të dhimbjes neurogjenike të kokës dhe fytyrës. Përveç kësaj, tesigrafia është përdorur për qëllime diagnostikuese dhe prognostike në pediatri, gjinekologji, gastroenterologji dhe fusha të tjera të mjekësisë.
Aktualisht, analiza kristaloskopike përdoret për të studiuar pothuajse të gjitha lëngjet biologjike (gjaku, urina, pështyma, lëngu cerebrospinal, biliare, sekrecionet e hundës, etj.). Strukturat kristalore të lëngjeve biologjike përmbajnë informacionin më të rëndësishëm për gjendjen e një organi të caktuar, një sistem të veçantë të trupit dhe të trupit në tërësi.
Aktualisht, interesimi i shkencëtarëve për përdorimin e metodës së kristalografisë së lëngjeve biologjike në mjekësi mbetet i lartë. Kështu, janë zhvilluar dhe vënë në praktikë teknika të shumta diagnostikuese për të lehtësuar studimin e një game të gjerë karakteristikash të biosubstrateve (teste biokimike, imunologjike, morfologjike, biofizike etj.). Pika e dobët e shumicës së metodave të listuara është kostoja e tyre e lartë për shkak të përfshirjes së reagentëve të shtrenjtë, pajisjeve dhe trajnimit të personelit shumë të kualifikuar. Të gjitha sa më sipër kërkojnë mirëmbajtjen dhe mirëmbajtjen e një numri mjaft të madh shërbimesh mbështetëse.
Megjithatë, ndryshimi i kushteve ekonomike kërkon zhvillimin dhe zbatimin e metodave shumë efektive dhe me kosto efektive për diagnostikimin e leuçemisë.
Metoda kristaloskopike ka ndjeshmëri të konsiderueshme diagnostikuese dhe për këtë arsye ka gjetur aplikim të gjerë, fillimisht në praktikën e analizave kimike kriminalistike, e më pas në mjekësi. Ai bëri të mundur zgjerimin e aftësive diagnostikuese diferenciale në përcaktimin e natyrës së procesit patologjik (alergjik, inflamator, etj.), në identifikimin e pranisë së anemisë, edemës, dehjes dhe shkallës së ashpërsisë së saj. Duke përdorur metodën e kristalografisë së biopolimereve, është e mundur të përcaktohet patologjia organe të ndryshme. Meqenëse kjo teknikë përfshin kombinimin e grimcave materiale me një zgjidhje kristal-formuese, natyra e procesit malinj mund të gjykohet nga modeli i formuar i kristaleve (Kontorschikova K.N. et al. (2002-2012).
Qëllimi i kësaj teze ishte zhvillimi i një metode për analizën kristaloskopike të urinës së minjve AKR për diagnostikimin e leuçemisë akute.

1 Përmbledhje e literaturës.
1.1 Kristalografia e lëngjeve biologjike

Termi "kristal" vjen nga fjala greke "krystallos", që do të thotë "akull". Në një kristal, atomet dhe molekulat formojnë një strukturë të renditur (rrjeta kristalore). Kristalët janë të rëndësishëm si në natyrën e pajetë ashtu edhe në atë të gjallë, gjë që ishte baza për identifikimin e një dege të pavarur - kristalografinë. Kristalografia është shkenca e strukturës dhe vetive fizike të kristaleve të vetme dhe agregateve kristalore, dukuri që ndodhin në një mjedis kristalor nën ndikimin e vetive të brendshme ose ndikimeve të jashtme.

1.1.1 Konceptet themelore të gjendjes kristalore të materies

Kristalet formohen nga avulli, tretësira, shkrirja, substanca amorfe ose nga një substancë në një gjendje tjetër fizike. Kristalizimi fillon në kushte të caktuara të jashtme, për shembull, superftohja e lëngut, mbingopja e avullit, dehidratimi i tretësirës, ​​kur shumë kristale të vegjël shfaqen gradualisht rreth qendrave të kristalizimit. Një kristal rritet duke shtuar atome ose molekula nga një lëng ose avull.
Ekzistojnë forma ekuilibri dhe reale të kristaleve. Forma e ekuilibrit të kristaleve arrihet vetëm në kushte ekuilibri, d.m.th. me një proces kristalizimi pafundësisht të ngadaltë.
Që nga parametrat mjedisi i jashtëm heterogjene në kohë dhe hapësirë, në strukturën kristalore lindin në mënyrë të pashmangshme defekte të ndryshme. Kështu, format reale (të detyruara) të kristaleve pasqyrojnë jo vetëm simetrinë e kristalit, por edhe ndikimin e kushteve të jashtme të rritjes (përqendrimi i substancave të ndryshme në mjedisin e formimit të kristalit, temperatura, presioni, etj.) ndaj çdo ndryshimi në të cilat kristalet reagojnë me shumë ndjeshmëri. Disa forma kristal janë paraqitur në Fig. 1.

A b V

G d e

dhe h Dhe

Fig. 1 Format e kristaleve në lëngje të ndryshme biologjike: a, b - si fije, c, d, e, f, g - formacione sferulite me gjilpëra të vendosura në rreze; z-dendriti i shtypur; dhe – dendrit i degëzuar.
Më e natyrshme dhe teknike materiale të forta janë polikristale, njëkristalet quhen njëkristal. Kur kristalizohen metalet dhe kripërat, shpesh formohen kristale të ngjashme me pemët - dendritet. Gjatë kristalizimit nga një ose disa qendra, formohen sferulite, të përbëra nga gjilpëra kristalore të vendosura në mënyrë radiale.

1.1.2 Proceset e kristalizimit në sistemet e gjalla

Të gjitha mediat biologjike të trupit të kafshës dhe njeriut kanë një strukturë të caktuar molekulare, pasi ato janë kristale të lëngshme liotropike. Një organizëm i gjallë është një sistem kompleks, shumë dinamik në të cilin ndodhin vazhdimisht procese të ndërveprimit të shumë përbërësve strukturorë me njëri-tjetrin dhe mjedisin. Në kushte normale, luhatjet në parametrat biofizikë të trupit janë të kufizuara në kufij relativisht të ngushtë. Megjithatë, në situata të caktuara ato mund të shkojnë përtej kufijtë normalë për mjaftueshëm një periudhë të gjatë. Në disa raste, kjo shpjegohet me përshtatjen e trupit ndaj kushteve të reja të pazakonta të ekzistencës, në të tjera me një ndërprerje të thellë të homeostazës me dekompensim të vazhdueshëm. Këto procese komplekse, shumë dinamike pasqyrohen qartë në karakteristikat e strukturave kristalore të lëngjeve ose biopolimerëve të ndryshëm biologjikë.

1.1.3 Veçoritë kristalografike të lëngjeve biologjike

Dihet se çrregullimet metabolike, si komponent i patogjenezës sëmundje të ndryshme, çon në një ndryshim përbërje kimike dhe vetitë fiziko-kimike të lëngjeve biologjike (në tekstin e mëtejmë të referuara si biofluide). Proceset dinamike komplekse që ndodhin në biofluide reflektohen në veçoritë morfologjike të strukturave të formuara gjatë kristalizimit të mostrave të biofluideve. Aktualisht, metodat origjinale diagnostikuese të bazuara në analizën strukturore të lëngjeve biologjike janë zhvilluar dhe përdoren në praktikën klinike. Strukturat e fazës së ngurtë të lëngjeve biologjike formohen nga molekula dhe, kryesisht, mikroagregate të substancave organike dhe minerale të tretura në lëngun biologjik. Karakteristikat specifike të strukturave përcaktohen nga vetitë e përgjithshme fiziko-kimike të biofluidit, përbërja sasiore dhe cilësore e molekulave të këtyre substancave dhe aftësia e tyre për të krijuar lidhje kimike intramolekulare dhe ndërmolekulare. Si rezultat, struktura e lëngjeve biologjike mbart informacion integral për gjendjen e metabolizmit të organeve të subjektit të larë nga biofluidi dhe për homeostazën e trupit në tërësi.
Morfologjia e lëngjeve biologjike është e vërtetuar drejtimi shkencor në fushën e mjekësisë, veterinarisë dhe shkencave të tjera. Formimi i strukturës së një biofluidi gjatë kristalizimit ka modele të qarta.
Ndotja e mjedisit me toksina të ndryshme, ndër të cilat metalet e rënda (HM) zënë një vend të veçantë, çon në një rritje të ndjeshme të gjasave për sëmundje të caktuara, përfshirë kancerin. Kombinimi i analizës morfologjike të lëngut trupor me analizën e tij elementare lokale mund të shërbejë si një mjet i ri analitik për kërkime në fushën e diagnostikimit të hershëm të kancerit.
Përparimet në përmirësimin e analizave mikrokimike, optikës kristalore dhe tesigrafisë siguruan bazën për studimin e strukturave kristalore të lëngjeve biologjike të njerëzve dhe kafshëve në patologji të ndryshme. Proceset kristalografike në lëngjet biologjike po tërheqin vëmendjen në rritje të shkencëtarëve. Hulumtimet e kryera gjatë dekadave të fundit janë përqendruar në identifikimin e marrëdhënieve midis veçorive kristalografike të biofluideve dhe zhvillimit të proceseve patologjike në trup; ose i vendosën vetes detyrën e studimit të ndikimit të ndikimeve të jashtme në formimin e strukturave kristalore në biofluide (Skopinov S.A. et al. 1997).
Kështu, në një lëng biologjik mund të vërehet një kompleks rirregullimesh strukturore nga tretësira te kristalet. Analiza kristalografike bën të mundur zbulimin e ndryshimeve patologjike në rrjetën kristalore në nivel supramolekular. Këto ndryshime mund të shërbejnë si një kriter diagnostik i hershëm për zhvillimin e një procesi patologjik.

1.1.4. Morfologjia e lëngjeve biologjike

Studimi i tablosë morfologjike të biofluideve të ndryshëm është një drejtim i njohur në shkencën e natyrës, të cilit në vitet e fundit kanë filluar t'i kushtojnë vëmendje të veçantë shkencëtarë nga shumë disiplina. Aktualisht, është zhvilluar një metodë për marrjen e informacionit në lidhje me gjendjen e trupit, funksionet e organeve dhe indeve individuale në fazën e të shprehurit. manifestimet klinike sëmundjet dhe në fazën para-simptomatike, domethënë në nivelin e zhvillimit të një procesi patologjik të një natyre ose një tjetër (inflamator, onkologjik, formimi i gurëve, hipoksiko-ishemik, sklerotik, etj.). Metoda e kristalografisë së biopolimerëve të ndryshëm është e thjeshtë në teknikën e saj dhe regjistrimin e rezultateve. Hulumtuar tablo morfologjike pika e dehidratuar (e tharë) e lëngut biologjik, e cila është një seksion i hollë standard. Për shembull, kur ekzaminohet një pikë urine, mund të përcaktohet aktiviteti i procesit të formimit të gurëve në indin e veshkave dhe përbërjen e një guri në veshka ekzistuese ose në zhvillim (urate, oksalat kalciumi, fosfat kalciumi); rrjedha akute ose kronike e kandidiazës së sistemit gjenitourinar, dëmtimi hipoksiko-ishemik i indeve renale dhe ashpërsia e procesit (nefropatia hipoksike, nefriti intersticial, dështimi akut i veshkave, infarkti i veshkave); infeksion bakterial (pa përcaktuar llojin e patogjenit).
Një pikë lëngu biologjik mund të tregojë se me çfarë është i sëmurë një person dhe çfarë është ai mosha biologjike. Një pikë lëngu i tharë vendoset në një gotë të vërtetë mikroskopi dhe një imazh i zmadhuar shumë herë shfaqet në monitor. “Në një pikë pështyme të marrë me stomakun bosh, shfaqen çarje fraksionale triradiate, kjo është dëshmi e stagnimit. Dhe në një pikë të marrë pas mëngjesit, nuk ka të çara, që do të thotë se kanalet e gjëndrave të pështymës janë në rregull. Por aciditeti i lëngut gastrik është pakësuar", tani ka një rënie në serumin e gjakut të ekranit, duket si një buton me buzë dhe është i mbuluar me çarje radiale, struktura e çarjeve i nënshtrohet analizave të kujdesshme: modeli në periferi sugjeron që presioni i gjakut të pacientit rritet herë pas here për shkak të vazospazmës.
Profesor S.N. Shatokhina shpjegon se trupi mund të ndahet në dy sisteme: qelizore dhe joqelizore. E gjithë bota studion qelizat në radhë të parë, megjithatë, lëngjet biologjike që lidhin qelizat me njëra-tjetrën mbartin shumë informacion për funksionet e tyre jetësore. Kur një pikë biofluid thahet, informacioni i koduar në të bëhet i dukshëm. "Gjatë kalimit në një gjendje të qëndrueshme, forca e lidhjeve rritet me dy renditje të madhësisë," shpjegojnë studiuesit. "Pas heqjes së ujit, mbetet një film, mbi të cilin një model i renditjes hapësinore të elementeve që ishin më parë në regjistrohet një gjendje e tretur”, sëmundja shoqërohet gjithmonë me grumbullimin e disa kimikateve, të cilat ndryshojnë strukturën, prishet simetria dhe shfaqen po ato “gjuhë”, “gjethe” apo “pllaka” që profesori S.N. Shatokhina u gjet në pacient. Dhe për të gjetur këto modele, studiuesit zhvilluan një metodë të veçantë të tharjes së pikave. Një pikë pështymë mund t'ju tregojë shumë. Ai pasqyron kariesin dhe periodontitin. Dhe gjithashtu, për shembull, otitis purulent, i cili çon në shfaqjen e formave lamelare në një pikë pështymë. Duke analizuar një pikë lëngu gastrik, specialistët identifikojnë gastrit kronik dhe ulcerat; lëngu i kyçeve - artroza; në fund, lot - glaukoma, katarakte, procese inflamatore në retinë.
Sot, shkencëtarët punojnë ngushtë me klinicistët, duke i ndihmuar ata të shohin patologjitë e fshehura dhe të përmirësojnë metodat e trajtimit. Duke analizuar biofluidet, studiuesit mund të përcaktojnë gjithashtu moshën e vërtetë biologjike të një personi. Prodhohet nga struktura lamelare në serumin e gjakut, të cilat janë kolesterol në natyrë kimike. Prej saj në të ardhmen do të formohet pllaka aterosklerotike në anije. Ky është një nga "shënuesit" më të rëndësishëm të plakjes. Shkencëtarët vlerësojnë gjithashtu potencialin e ndërsjellë të shëndetit; për këtë, gjaku në një tub provë rrezatohet me një fushë elektromagnetike ose lazer - pas një ekspozimi të tillë, lidhjet ndërmolekulare shkatërrohen, prandaj, kur gjaku i tillë thahet, modeli i filmit do të jetë i ndryshëm; një person i shëndetshëm, duhen katër orë për të rivendosur lidhjet pas rrezatimit. Nëse zgjat një ose tre ditë, duhet të shqetësoheni. Studiuesit besojnë se duke përdorur këtë metodë është e mundur të përcaktohet nëse një person është i aftë të punojë në kushte ekstreme

1.2 Metodat e kërkimit kristalografik.
1.2.1 Parakushtet për studimin e dukurisë së kristalizimit të lëngjeve biologjike

Në çerekun e fundit të shekullit të kaluar, ka pasur një interes të madh nga komuniteti shkencor për metodat e kërkimit kristalografik, të studiuara në kuptimin e zbatimit të tyre praktik si një qasje alternative në diagnostikimin klinikë. Ato lejojnë një vlerësim integral të aftësisë së kristalizimit të substrateve të ndryshme biologjike. Vitet e fundit, një drejtim i ri diagnostikues ka filluar të zhvillohet në mënyrë aktive - kristalografia klinike, bazuar në përcaktimin e përbërjes cilësore të një lëngu nga formimi i strukturave kristalore.
Metoda e përcaktimit cilësor të substancave kimike sipas karakteristikave të tyre kristalografike u propozua për herë të parë nga studenti M.V. Lomonosov - T.E. Lovitz. Në 1804, ky i fundit përshkroi dy metoda për analizën cilësore të substancave - metodën e "depozitave të kripës së gërryer" dhe një metodë të bazuar në ndryshimin e formimit normal të kristaleve duke futur një përbërës tjetër në tretësirën e substancës kristalizuese, duke hedhur kështu themelin për dy fusha moderne të kristalografisë:
1) kristalografia e lëngjeve vendase - një metodë e bazuar në përcaktimin e përbërjes cilësore të një lëngu nga kristalet që formon gjatë avullimit;
2) tezigrafia - një metodë e bazuar në shtimin e një zgjidhje standarde kristalformuese në lëngun e provës dhe analizimin e ndryshimeve në kristalet e tretësirës standarde në prani të lëngut testues.
Përvoja e parë e aplikimit klinik të kristalografisë daton në fillim të viteve 60 të shekullit të kaluar. Fillimisht, shumica e studiuesve përdorën metodën tesigrafike. Në vitin 1964, Daems kreu një studim të kristalogrameve të gjakut të pacientëve me hipertrofi të prostatës dhe karcinomë. Leal J. dhe Finlayson B. (1977) vendosën karakteristikat e formimit të kristaleve në urinë.
Përdorimi i metodave të kërkimit kristalografik (CRI) në mjekësinë shtëpiake u raportua për herë të parë në punim
Kozhinova A.A. dhe Maslennikova L.S. (1968). Neretin V.Ya. dhe Kiryakov V.I. (1977) kjo metodë është përdorur për të studiuar lëngun cerebrospinal të pacientëve me sëmundje të ndryshme të trurit dhe palcës kurrizore. Në veprën e D.B. Kalikshtein et al. (1981), u studiua tabloja tezigrafike e urinës së pacientëve me sëmundje të ndryshme të veshkave. Usin V.V. (1995) studioi ndryshimet kristalografike në lëngun cerebrospinal dhe pështymë në pacientët me sindroma kronike të dhimbjes neurogjenike të kokës dhe fytyrës. Përveç kësaj, tesigrafia është përdorur për qëllime diagnostikuese dhe prognostike në pediatri, gjinekologji, gastroenterologji dhe fusha të tjera të mjekësisë.
Aktualisht, analiza kristalografike përdoret për të studiuar pothuajse të gjitha lëngjet biologjike (gjak, urinë, pështymë, lëngun cerebrospinal, biliare, sekrecione nazale, etj.). Strukturat kristalore të lëngjeve biologjike përmbajnë informacionin më të rëndësishëm për gjendjen e organeve dhe indeve përkatëse.
Për herë të parë është përdorur analiza kristalografike e lëngut lotsjellës (TF) për diagnostikimin e patologjisë oftalmologjike.
Chentsova O.B. me bashkautorë në 1985. Ata propozuan një teknikë për tesigrafinë e lëngut lotsjellës - kristalografia me shtimin e një solucioni alkoolik të klorurit të bakrit. Në një provëz konike vendoset 0,02 ml lot dhe me tundje të vazhdueshme shtohet 0,1 ml tretësirë ​​alkoolike 2% e klorurit të bakrit. Provëza mbyllet me një shtupë pambuku dhe lihet të vendoset në temperaturën e dhomës. Pas 1 orë e 20 minuta, një pikë e tretësirës që rezulton aplikohet në një rrëshqitje qelqi, e cila vendoset në një enë Petri në një termostat në temperaturën 25°C për dy orë. Pas periudhës së inkubacionit, bëhet vlerësimi makro dhe mikroskopik i rezultateve.
Karakteristikat e figurës tezigrafike u vunë re te pacientët me sëmundje inflamatore, distrofike dhe tumorale të syve dhe orbitës. Sipas Chentsova O.B. et al., modeli kristalografik (CPC) i lëngut lotsjellës tek të rriturit dhe fëmijët është normalisht kristale cilindrike transparente, të gjata, të vendosura rrallë, të cilat mblidhen në një model të rregullt gjeometrik, më së shpeshti në formën e një trekëndëshi. Chentsova O.B. et al (1989) kryen CGI të SF për diagnozën diferenciale të sëmundjeve orbitale. Autorët identifikuan dallime cilësore nga norma në përgatitjet e lotëve në pacientët me oftalmopati endokrine, sëmundje inflamatore orbitale dhe neoplazi.
Që nga ajo kohë, ekzaminimi kristalografik është përdorur nga këta dhe autorë të tjerë në diagnostikimin e sëmundjeve të ndryshme të syrit.
Tyurikov Yu.A., Pokoeva V.A. (1992) përdori teknikën e tesigrafisë me shtimin e një tretësire ujore të ngopur të glicinës dhe ekspozimin ditor në temperaturën e dhomës. Ndryshime karakteristike u zbuluan në kristalogramet e pacientëve me neoplazi intraokulare dhe orbitale.
Një numër autorësh përdorën tesigrafinë SG jo vetëm për diagnostikim, por edhe për monitorimin dinamik të GC të SG të syrit të prekur (Kokarev V.Yu. et al., 1990; Somov E.E., Brzhesky V.V., 1994; E.I. Ustinova et al. al (1996) rekomandoi metodën e ekzaminimit kristalografik të SF si një test laboratorik shtesë për diagnozën diferenciale dhe sqarimin e fazës së aktivitetit të procesit të tuberkulozit.
Chukhman T.P. (1999) përmirësoi teknikën e tesigrafisë SG, duke propozuar zëvendësimin afatgjatë të vendosjes së një përzierjeje lotësh dhe solucioni që formojnë kristal me centrifugim, gjë që reduktoi kohën e kërkimit. Gjithashtu, është kryer një CGI e SG për sëmundje të ndryshme inflamatore të syrit dhe është identifikuar lloje karakteristike kristalet, të cilat bënë të mundur identifikimin në kohë të komplikimeve edhe në fazën paraklinike. Për më tepër, autori studioi ndikimin e faktorëve të ndryshëm të jashtëm (temperatura e tharjes së preparateve, lagështia), si dhe metodat e grumbullimit të lotëve, në kristalologjinë.
Interesimi i shkencëtarëve për përdorimin e metodës së tesigrafisë së lëngjeve biologjike në mjekësi mbetet i lartë edhe sot e kësaj dite. Sidoqoftë, tesigrafia doli të ishte një teknikë mjaft intensive, që kërkon përdorimin e reagentëve shtesë dhe e vështirë për të interpretuar rezultatet (Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 1997). Përveç kësaj, modelet e procesit të kristalizimit mbi të cilat bazohet metoda e tesigrafisë nuk dihen. Kërkimi i metodave më të thjeshta dhe më të arritshme të kërkimit kristalografik ka çuar në shfaqjen e një numri punimesh kushtuar kristalografisë së përgatitjeve vendase të biofluideve.
Si rezultat, lind nevoja për të zhvilluar një metodë të shprehur që mund të përdoret si një test parësor në diagnostikimin e sëmundjeve të ndryshme. Për më tepër, kërkesat e nevojshme për zgjedhjen e tij janë një shkallë e mjaftueshme e saktësisë dhe mundësia e përdorimit të gjerë pa investuar burime të konsiderueshme materiale (Menshikov V.V., 1988; Nazarenko G.I., Kishkun A.A., 2000; Zelenin V.A., Bulychev V. F., Steklova G.P. et al., 2004).
Për këtë problem u interesuan specialistë nga fusha të ndryshme të mjekësisë. Pasoja e kësaj ishte zhvillimi i shpejtë i diagnostikimit të pështymës, i cili, nga njëra anë, ishte jo-invazive, nga ana tjetër, bëri të mundur marrjen e shpejtë të rezultateve paraprake (Borovsky E.V., Leontyev V.K., 1991; Sukmansky O.I., 1991; Komarova L. G., Alekseeva O. P., 1994; Antropova I. P., Gabinsky Ya. L., 1997; Butaev M. T., 1998; Grigoriev I. V., Chirkin A. A., 1998; Bulgakova V. A., 1999 Korot G. Res., 1999; I.V., 1999; Denisov A.B., 2000, 2001;).
Metodat për përcaktimin cilësor të përbërjeve kimike nga aftësia e tyre për t'u kristalizuar u propozuan për herë të parë nga T. E. Lovitz, një student i M. V. Lomonosov, në 1804-1805. Në veprat e tij, ai përshkroi dy teste origjinale për analizën cilësore të strukturës së substancave në studim. Kjo është "metoda e depozitimit të kripës së gërryer" (depozita kristalore), si dhe reaksionet mikrokristaline. E para nga sa më sipër ishte baza për metodën e përcaktimit cilësor të barnave të zhvilluara shumë më vonë (Knizhko P. O., 1956; Bubon N. T., Puzyrevsky K. Ya., 1965; Nikolskaya M. N., Gandel V. G., Popkov V. A., 1965; I., V. 1966). Teknika e reaksioneve mikrokristaline tani ka gjetur aplikim në mjekësinë ligjore (Belova A.V., 1960; Semenova T.D., 1972; Taher M.A. Assad, 1995).
Në kontekstin e zhvillimit të ideve për kristalizimin e lëngjeve biologjike njerëzore, çështja e zbatueshmërisë së tij në diagnostikimin e kushteve të ndryshme patologjike bëhet e rëndësishme (Kokueva O.V., Savina L.V., Lee A.M., 2000; Zubeeva G.N., Motyleva I. M. , Potekhina Yu. P., 2001; Shabalin V. N., Shatokhina S. N., 2001; Vorobyov A. V., Vorobyova V. A., Neshtakova N. L., 2002; Alekseeva O. P., Vorobyov A. V., Volnikos N., 2003; et al., 2003; Rapis E. G., 2003; Anaev E. Kh., Shatokhina S. N., Chuchalin A.G., 2004).
Në këtë drejtim, metodat e kërkimit kristaloskopik, që synojnë deshifrimin e informacionit metabolik të fshehur në cilësinë dhe përbërjen sasiore mjediset biologjike.
Përveç kësaj, një skemë e unifikuar e analizës mund të kontribuojë në unifikimin dhe thjeshtimin e studimeve kristalografike. Kjo do të jetë e dobishme si në diagnozën diferenciale ashtu edhe gjatë kryerjes së një testi orientimi.
Një faktor i rëndësishëm në standardizimin e rezultateve të kristalizimit diagnostik të substrateve biologjike të trupit mund të jetë një formë e unifikuar e përfundimit në një test kristaloskopik, duke përfshirë informacione rreth ndryshimeve cilësore dhe sasiore në përbërjen e fytyrës së pacientit në lidhje me fytyrën e një personi praktikisht të shëndetshëm. individët (ndryshimet në numrin dhe madhësinë e strukturave, shfaqjen e atyre patologjike për një formacion të caktuar biofluid, etj.).

1.2.2 Gjendja aktuale e ideve rreth kristalografisë
metodat e kërkimit

Metodat e kërkimit kristalografik– një grup qasjesh metodologjike për nxjerrjen e informacionit për metabolizmin dhe homeostazën e trupit dhe/ose pjesëve të tij, bazuar në fenomenin e formimit kristalor të substancave bazë të përbërjeve të ndryshme kimike të lira ose të inicuara nga substancat bazë të përbërjeve të ndryshme kimike të materialit biologjik të tharë ose të lëngshëm, me interpretim të mëvonshëm. e rezultateve të kristalogjenezës.
Gjatë tridhjetë viteve të fundit, janë formuar qasje të shumta metodologjike për kryerjen e kristaloskopisë diagnostike, megjithatë, duhet theksuar se shumica e tyre janë në thelb vetëm një modifikim i kushteve për kryerjen e procesit të dehidrimit, ndërsa duket e mundur të dallohen vetëm tre opsione në parim: kristalizimi i lirë, në rast se lëngu biologjik që analizohet thahet drejtpërdrejt; kristalogjeneza e nisur, kur vizualizohet rezultati i dehidrimit të sistemit “mjedisi biologjik - substanca bazë kristalformuese”, kryesisht bazuar në studimin e gjenezës së strukturës së këtij të fundit; kristalizimi i pjesshëm (metoda e përbërjeve të modelit) është një grup metodash për rikrijimin e përbërësve individualë të figurës kristaloskopike të një substrati të caktuar biologjik, dhe për këtë arsye është i rëndësishëm kryesisht për kërkimin shkencor.
Në përgjithësi, metodat e mëposhtme janë propozuar deri më sot në kristaloskopinë moderne:
1) Kristaloskopia klasike (Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. et al., 1990; Savina L.V., 1992, 1999; Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2001; Alekseeva O.P. 2 është opsioni më i zakonshëm për A. kryerja e një testi dehidrimi, thelbi i të cilit, siç është treguar tashmë, është kristalizimi i drejtpërdrejtë i lëngjeve biologjike. Përgatitja e preparateve mund të kryhet si në kushte dhome ashtu edhe në një termostat (37-400C), megjithatë, sipas literaturës së shumtë, kohëzgjatja e përgatitjes së mikropërgatitjeve të mediave biologjike është 1-2 ditë, gjë që qartësisht nuk i plotëson kërkesat. për teste të shpejta. Në këtë drejtim, nevojiten rregullime të rëndësishme në kushtet e tharjes për të optimizuar kohën e shpenzuar për përgatitjen e mikro-ekzemplarit.
Duhet të theksohet se kjo qasje kristaloskopike ju lejon të vlerësoni vetitë kristalformuese të një biofluidi, dhe për këtë arsye, jo vetëm të merrni facie të rëndësishme diagnostike (mostra të kristalizuara), por gjithashtu të përcaktoni praninë e përbërësve individualë të substratit të analizuar (Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V. Yu. et al., 2003). Kjo çështje nuk është zgjidhur në mënyrë adekuate në literaturën e specializuar, por është e rëndësishme për identifikimin praktik të përfshirjeve patologjike në mjediset biologjike, biologji dhe mjekësi - studimin e aspekteve patogjenetike të patologjisë njerëzore dhe kafshëve, si dhe përzgjedhjen dhe vlerësimin e arsyeshëm të efektiviteti i terapisë medikamentoze dhe jo-drogës (Buiko A. S., Tsykalo A. L., Terentyeva L. S. et al., 1977; Erichev I. V., Korotko G. G., Reshetova I. V., 1999; Zaichik A. Sh., Churilov L. S. et al., 1977; Erichev I. V., Korotko G. G., Reshetova I. V., 1999; Zaichik A. Sh., Churilov 200, O. P. A. V., 2003; Baydaulet I. O., 2003). Kjo kërkon studimin e veçorive të kristalogjenezës së përbërësve të lëngjeve biologjike, duke përfshirë modelimin e pjesshëm të dehidrimit. Disa mënyra për të zgjidhur këtë çështje u propozuan nga L.V. Savina et al. (2003). Me gjithë rëndësinë e kësaj qasjeje metodologjike, duhet pranuar se në këtë rast nuk merret parasysh një nga faktorët më të rëndësishëm që përcakton natyrën e kristalogjenezës së një biosubstrati - prania e ndërveprimeve ndërmolekulare midis përbërësve të një biofluidi që ndryshojnë. në strukturën kimike, e cila, nga ana tjetër, luan një rol të rëndësishëm në formimin e pamjeve përfundimtare kristaloskopike, veçanërisht në përcaktimin e numrit dhe diametrit të "zonave primare" të facialeve, të shndërruara gjatë procesit të dehidrimit në breza kristalizimi (Koledintsev M.N. , 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maychuk N.V., 2002; Koledintsev M.N., Maychuk N.V., 2002).
Përpjekje të ngjashme për të simuluar formimin e kristalit u bënë nga G. G. Korotko (2000), të cilat do të diskutohen më tej.
2) Tesigrafia (Nefedova N. B., Tsyvenkova L. A., 1985; Moroz L. A., Kalikshtein D. B., 1986; Gugutishvili T. G., Simonishvili L. M., 1990; Kidalov V. N. ing dhe metodat më të zakonshme të kryerja e një testi kristaloskopik dhe paraqet një futje shtesë të substancave të ndryshme kimike në biofluidin e tharë të trupit të njeriut për të filluar proceset e formimit të kristaleve. Për këtë qëllim, përdoret një gamë e gjerë agjentësh kristalformues (NaCl, CaCl2, MgCl2 dhe të tjerë), shumica prej tyre kanë veti komplekse dhe përqendrime në autorë të ndryshëm ndryshojnë shumë.
Në laboratorët që përdorin këtë metodë kristalografike, zbatimi i saj kryhet duke përdorur tesigrafinë klasike, d.m.th. duke marrë parasysh ekskluzivisht rezultatin e dehidrimit të një sistemi të përbërë nga një biomaterial dhe një substancë bazë kristalformuese si një kampion i pavarur, gjë që e ndërlikon ndjeshëm interpretimin e informacionit të marrë për shkak të vështirësive objektive në krahasimin e mostrave të marra në kushte të ndryshme dhe statusin e ndryshëm funksional. të trupit të subjekteve që shqyrtohen. Në këtë drejtim, një tesigram i krijuar në përputhje me qasjen e përshkruar më sipër kërkon krahasimin e rezultatit të marrë me "modelet" para-ekzistuese (qasja "fotografike") (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2002; Baydaulet I.O., 2003; Beloglazov V. G. , Atkov E. L., Fedorov A. A. et al., 2003; Volosnikova N. N., Muzlaev G. G., Savina L. V. et al., 2003; Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004 G. 1994; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V., 2002), megjithatë, ky faktor definitivisht dhe në mënyrë të konsiderueshme zvogëlon përmbajtjen e informacionit dhe besueshmërinë e diagnostikimit tesigrafik.
Duket e rëndësishme të theksohet se aktualisht nuk ka një skemë-algoritëm të pranuar përgjithësisht për përshkrimin, analizën dhe interpretimin e facialeve tesigrafike, ashtu siç nuk ekziston një metodë e unifikuar për marrjen e saj.
Ekzistojnë raporte të izoluara për përdorimin e një kampioni kontrolli të substancave bazë (Tarusinov G. A., 1994), por për arsye të panjohura përdorimi i tij është shumë i kufizuar (Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2003; Martusevich A. K., 2004).
3) Dehidratimi i profilit (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 1999). Ai përfshin aplikimin e lëngjeve biologjike në një rrëshqitje qelqi të para-trajtuar me një zgjidhje lecitine me një përqendrim të caktuar. Me ndihmën e lecitinës, sipas autorëve, duket e mundur të ndryshohet afiniteti i kristaleve për bazën dhe, për rrjedhojë, të transformohen karakteristikat termodinamike të biosubstratit të dehidratuar.
4) Kristaloskopia me vakum (Savina L.V., 1999) përfshin përgatitjen (tharjen) e preparateve në kushte vakum. Kjo siguron izolimin e kampionit të dehidratuar nga mjedisi i jashtëm, duke krijuar një sistem relativisht të mbyllur në të cilin pjesa e lëngshme e mjedisit biologjik dhe proceset e biokristalizimit hiqen drejtpërdrejt.
5) Kristalizimi i lëngjeve biologjike në një qelizë të mbyllur (Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997). Sigurohet izolimi i kampionit formues nga mjedisi i jashtëm, i ngjashëm me kristaloskopinë me vakum, por teknikisht kjo metodë është më e përshtatshme për përdorim praktik, pasi nuk kërkon krijimin e kushteve të vakumit, por vetëm përdorimin e një qelize të mbyllur, në të cilën është e mundur të kryhet analiza e drejtpërdrejtë mikroskopike. Autorët e modifikimit përdorën centrifugimin paraprak të biomaterialit.
6) Kristaloskopia e brezit është një metodë kërkimore kristalografike e bazuar në studimin e rripave kristal dhe formacioneve individuale kristalore (Koledintsev M.N., 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V., 2002; Koledintsev N.V., 2002; Koledintsev M.N.0.2). Baza fiziko-kimike e metodës është heterogjeniteti i përbërjes përbërëse të lëngjeve biologjike në varësi të masave molekulare të substancave që janë elemente të një mjedisi të caktuar biologjik dhe, rrjedhimisht, aftësia e tyre e ndryshme për të lëvizur nëpër faciale në procesin e dehidratimi hap pas hapi i kampionit dhe formimi i facialeve. Kjo çon në formimin e një ose (shumë më shpesh) disa rripave të kristalizimit, regjistrimi i të cilave ju lejon të gjykoni një karakteristikë të caktuar të një lëngu biologjik (M. N. Koledintsev, D. F. Nechaev, N. V. Maichuk, 2002).
7) Metoda e dehidrimit në formë pykë (V.N. Shabalin, S.N. Shatokhina, 2001-2005). Një metodë për dehidratimin e një pike lëngu biologjik të vendosur në një plan transparent. Rënia ka një formë pyke në seksion kryq, e cila krijon kushte për një shkallë të pabarabartë dehidrimi në drejtimin radial. Kjo shkakton lëvizjen osmoforetike të substancave të tretura në vëllimin e rënies së dehidratuar në përputhje me parametrat fiziko-kimikë dhe formimin e strukturave të qarta, rreptësisht të individualizuara që i përgjigjen gjendjes së organizmit nga i cili është marrë lëngu në studim.
8) Mikroskopi i polarizimit (Rapis E. G., 1976; Antropova I. P., Gabinsky Ya. L., 1997; Savina L. V., Pavlishchuk S. A., Samsygin V. Yu. et al., 2003) - një metodë për vlerësimin e rezultateve të cstaleve të lira ose të iniciuara formimi i një lëngu biologjik në dritën e polarizuar, duke e lejuar dikë të identifikojë disa Karakteristika shtesë si facialet në tërësi dhe elementet strukturore të tij individuale, si dhe karakterizojnë teksturën e saj. Është një modifikim universal i qasjes për vizualizimin e rezultateve të kristalogjenezës dhe mund të përdoret si një shtesë e cilësdo prej metodave kristalografike për studimin e mediave biologjike.
9) Mbledhja e substratit (G. G. Korotko, 2000) - një metodë kristalografike ndihmëse që ju lejon të simuloni formimin e kristalit të përbërësve individualë që janë përbërës të substrateve biologjike (lipide, proteina, polisaharide). Në këtë rast, krahasuar me metodën e "përbërjeve të modelit", arrihet një përafrim më i madh me përbërjen reale të mjedisit biologjik për sa i përket asortimentit, por jo në raportin e saktë të përbërësve, megjithatë, është e mundur të merren parasysh ndryshimet. në biofluid në elementet kryesore biokimike të tij.
10) Termografia e kristalit të lëngshëm (Buiko A.S., Tsykalo A.L., Terentyeva L.S. et al., 1977; Shkromida M.I., Pospishin Yu.A., 1977) - një teknikë premtuese për kërkimin kristalografik, një pikë themelore e cila është përdorimi i lëngjeve cholesteric c. (vargu i temperaturës së shkrirjes 33.5-38.20C ose 36.8-41.20C) veshjet e sipërfaqeve të studiuara me sisteme me kolesteril pelargoleat, kolesterol oleat etj. Në këtë rast, lëkura përdoret si “substrat”, mbi të cilin aplikohet përbërja. Interpretimi i transformimit të gjendjes së kristaleve të lëngëta vlerësohet duke përdorur një spektrofotometër të specializuar.
Aftësitë mjaft të gjera diagnostikuese të kësaj qasjeje metodologjike aktualisht nuk përdoren praktikisht, megjithë premtimin, thjeshtësinë dhe shpejtësinë e tij të dukshme të zbatimit.
11) Metoda e transferimit të informacionit të energjisë nga lëngjet biologjike në një bartës (Vorobiev A.V., Vorobyova V.A., Neshtakova N.L. et al., 2002) konsiston në transferimin e informacionit nga media biologjike në "bizele të pastra të sheqerit të qumështit" dhe më pas ato kombinohen në një rrëshqitje qelqi me 0,1 ml të substancës bazë (tretësirë ​​ujore 5% e sulfatit të bakrit). Përgatitja e mikrorrëshqitjeve kryhet në një dhomë të errët për 24 orë.Vlerësimi kryhet me analizë cilësore të mostrave të kristalizuara që rezultojnë.
Një shumëllojshmëri e tillë e opsioneve metodologjike për kryerjen e një testi të bazuar në dehidratimin e substrateve biologjike është ndoshta për shkak të faktit se përdorimi i qasjeve të ndryshme kontribuon në identifikimin më të mirë të rezultateve të marra (tabela). Nxjerrja e informacionit të fshehur në tërësinë e metabolitëve, marrëdhëniet e tyre sasiore dhe cilësore në biomaterial është një nga detyrat më domethënëse dhe më të rëndësishme të diagnostikimit kristaloskopik. Nga këndvështrimi i autorëve të shumtë (Alekseeva V.I., 1965; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. et al., 1990; Antropova I. P., 1990; Antropova I. P., Gabinsky. Plaksina G. V., Rimarchuk G. V., Butenko S. V. et al., 1999; Shabalin V. N., Shatokhina S. N., 2001, 2004; Alekseeva O. P., Vorobyov A. V., 2003; Baydaulet 2003; Baydaulet I. O.30; ., 1999; 2003; Bystrevskaya A. A., Deev L. A., 2004; Zalessky M. G., Emmanuel V. L., Krasnova M. V., 2004; Kidalov V. N., Khadartsev A. A., Yakushina G. N., 2004; Gromova I. P., 2005, në zbulimin e rolit kryesor të metabolizmit. mjediset e trupit të njeriut dhe të kafshëve i jepet komponentit cilësor, duke marrë parasysh marrëdhëniet deterministe midis formacioneve individuale (natyra kristalore dhe amorfe). Shumë më pak vëmendje i kushtohet komponentit sasior, megjithëse ai është një kriter i qartë për objektivitetin e dallimeve të vëzhguara.

1.2.2.1. Karakteristikat e përgjithshme të teknikës për teziokristaloskopinë e nënshtresave biologjike

Bazuar në analizën e informacionit të literaturës së paraqitur më sipër, u propozua edhe një metodë integruese e tesiokristaloskopisë së substrateve biologjike, bazuar në zbatimin e njëkohshëm dhe paralel të kristaloskopisë klasike dhe tesigrafisë krahasuese, të realizuar në të njëjtin xham. Kjo bën të mundur vlerësimin e aftësisë së një lëngu biologjik për të kristalizuar drejtpërdrejt dhe potencialin e tij iniciues në lidhje me substancën bazë kristalformuese të specifikuar nga studiuesi (Tabela 1.)

Tabela 1. Karakteristikat krahasuese të disa metodave kristalografike

• pjesë eksperimentale

• 2.Objektet, qëllimet dhe metodat e kërkimit

• 2.1. Qëllimet, objektivat dhe fazat e studimit.

• Qëllimi i këtij studimi studimi i morfologjisë së mostrave të urinës së tharë nga minj të shëndetshëm dhe minj me leuçemi limfoide (LL).
• Për të arritur qëllimin e përshkruar në punë, u formuluan sa vijon: detyrat:
• 1. Studioni literaturën moderne për problemet e kristalografisë së biosubstrateve.
• 2. Të zotërojë teknikën e kryerjes së teziokristaloskopisë së biosubstrateve.
• 3. Vlerësoni natyrën e formimit të kristaleve të urinës në minj të shëndetshëm.
• 4. Të përcaktohen tiparet e kristalogjenezës së inicuar në urinën e miut me LL.
• Puna u krye në bazë të laboratorit të ruajtjes së gjakut dhe indeve të Institutit Kërkimor të Hematologjisë dhe Transfuzionit të Gjakut Kirov.
• Fazat e hulumtimit:

1. Përgatitja e minjve laboratorikë të shëndetshëm të linjës ACR për kërkime.
2. Inokulimi i formës limfoide të leuçemisë në minjtë ACR.
3. Mbledhja e biosubstratit (urinës) për kërkime në minj të shëndetshëm dhe minj me leuçemi.
4. Përgatitja e mikroekzemplarëve të urinës nga minjtë e shëndetshëm dhe minjtë me leuçemi.
5. Analiza tesigrafike e mikro-ekzemplarëve të tharë të urinës nga minj të shëndetshëm dhe minj me leuçemi.

• Subjekti i studimit ishin “modelet” tezigrafike të urinës së minjve të shëndetshëm dhe minjve me leuçemi.
• Objekti i këtij studimi eksperimental ishte urina e 10 minjve të shëndetshëm dhe 10 minjve me leuçemi.
• Si substancë bazë për testin e tezigrafisë, ne përdorëm një zgjidhje 10% të klorurit të natriumit, i cili është një formues kristal aktiv.
• Gjithsej janë marrë 20 mikroekzemplarët e urinës, të marra nga grupi i kontrollit (minj të shëndetshëm) dhe nga minjtë me leuçemi (grupi eksperimental).
• Pjesa eksperimentale e punës përfshinte studimin e morfologjisë së mostrave të urinës së tharë nga minjtë e shëndetshëm me leuçemi.

2.2 Përgatitja e enëve dhe e zonës së punës

Enët e përdorura në punim (epruveta, pipeta matëse, rrëshqitës xhami) laheshin me ujë të nxehtë duke përdorur detergjent, shpëlaheshin fillimisht me ujë rubineti, më pas me ujë të distiluar dhe thaheshin.
Sterilizimi i enëve të mbështjella më parë me letër ambalazhi u krye në një autoklavë në temperaturë 120°C dhe presion 1 atm për 25 minuta.
Puna gjatë mbledhjes së lëngut biologjik u krye në laboratorin e kafshëve (vivarium) të Institucionit Federal Shtetëror "KNIIG dhe PK" të Roszdrav. Marrja e mëtejshme e facialeve thesiokristalskopike të serumit të gjakut u krye në laboratorin e ruajtjes së gjakut dhe indeve të Institucionit Federal Shtetëror "KNIIG dhe PK" të Ministrisë së Shëndetësisë Ruse. Para punës, dhoma u rrezatua me një llambë kuarci për 30 minuta. Tavolina e punës është trajtuar me alkool 70% para dhe pas punës.

2.3. Metodat e përdorura të kërkimit

2.3.1 Procedura e testimit teziokristalskopik

Studimi i vetive kristal-optike të biosubstrateve (serumit të gjakut) të minjve të shëndetshëm dhe leuçemikë u krye duke përdorur metodën e teziokristalloskopisë (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005; Martusevich A.K. et al., 2000-2006).
Mostrat e materialit biologjik (serumi i gjakut, urina, pështyma, djersa, lotët, etj.) në një vëllim prej 0,3 ml aplikohen në një rrëshqitëse qelqi të çyndosur, të larë dhe të tharë më parë, e cila, siç e kemi përcaktuar më parë, është optimale si në aspektin. të sipërfaqes së qelqit dhe për nga numri i strukturave kristalore dhe amorfe që i nënshtrohen analizave të mëvonshme. Dallimi midis metodës së teziokristaloskopisë është se 3 mostra aplikohen në xhamin në studim (Fig. 2.1), i pari (1) i të cilit përmban vetëm biomaterial, i dyti (2) - një përzierje e biofluidit dhe formimit të kristalit (bazë ) substanca, e treta (3 ) - kontrolli i përbërjes kristalformuese. Një zgjidhje 10% NaCl është përdorur si një substancë bazë.

Fig.2.1. Skema e një preparati të përgatitur duke përdorur metodën e teziokristaloskopisë

Mikropërgatitja që rezulton thahet duke përdorur një metodë të modifikuar në një rrjedhë ajri të ngrohtë. Në këtë rast, pozicioni horizontal i xhamit dhe drejtimi përkatës i rrjedhës duhet të sigurojnë dehidratimin e mostrave në të njëjtat kushte, duke parandaluar grumbullimin e tyre. Më pas modelet kristaloskopike që rezultojnë analizohen sipas skemës tradicionale, veçmas për komponentët kristalografikë dhe tesigrafikë.
Tharja e një pike nënshtrese në një sipërfaqe të lagur (xhami) çon në formimin e 3 zonave të ndryshme: të jashtme (margjinale - ujë, elektrolite, komponime me peshë të ulët molekulare); të brendshme (proteina qendrore - të përqendruara me molekulare të lartë, elektrolite, komponime me molekulare të ulët) dhe të ndërmjetme, të karakterizuara nga përqendrimi më i ulët i substancave. Zona e brendshme mund të ketë kufij të shprehur dhe të pashprehur. Strukturat kristalore dhe amorfe janë shpesh ngjitur me konturin e jashtëm të kufirit të brendshëm.
Tharja e koloidit shoqërohet me tërheqjen e tij, një rritje të përqendrimit të përbërjeve me molekulare të ulët dhe formimin e strukturave kristalore të llojeve të ndryshme.
Përpunimi statistikor i rezultateve të marra është kryer në mjedis Microsoft Excel XP duke përdorur funksione të integruara.
Për të interpretuar modelet kristaloskopike, ne klasifikuam të gjitha formacionet kristalore dhe amorfe që hasëm (Tabela 2.1, Fig. 2). Në përputhje me këtë klasifikim, u krye vlerësimi i preparateve të përgatitura për analizë duke përdorur teknikën e kristaloskopisë klasike. U krye një studim i përgjithshëm i veçorive kristaloskopike të biofluidit dhe karakteristikave të tyre krahasuese.

Tabela 2.1 Strukturat kristalore dhe amorfe të hasura në analizën kristaloskopike “klasike” të biofluideve

Shënim: * - ndryshojnë në sasi (të vogla - në total zënë më pak se 30% të zonës së fushës pamore, sasi e moderuar - në total zënë 30-50% të zonës së fushës pamore, numër i madh - në total zënë më shumë se 50% të zona e fushës vizuale) dhe në madhësi (të vogla, të mesme, të mëdha, agregate).
Bazuar në analizën e mikropërgatitjeve të shumta të lëngjeve biologjike të thara, u identifikuan 5 klasa të strukturave kristalore (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005;), secila prej të cilave, nga ana tjetër, përfshin formacione specifike (Tabela 2.1). Për disa prej tyre, përbërja kimike është deshifruar, gjë që bën të mundur, me një shkallë të caktuar përafrimi, të gjykohen ndryshimet në karakteristikat cilësore dhe sasiore të raporteve të përbërësve në mjediset biologjike në rastin e një studimi dinamik të kristalit. duke formuar vetitë e kësaj të fundit.
Një kategori e veçantë formohet nga trupa të një natyre jo kristalore - formacione amorfe. Derivatet e karbonatit të kalciumit, ato janë jashtëzakonisht të ndryshueshme në madhësi dhe sasi, të cilat mund të kenë vlerë diagnostikuese.
Gjithashtu me interes është lloji i ndërveprimit ndërmjet kristaleve të mëdha dhe grimcave amorfe në facialet e biosubstratit të dehidratuar (Figura 2). Përmbajtja e informacionit të këtij fenomeni ende nuk është përcaktuar, por, sipas mendimit tonë, kërkon vëmendje të madhe, pasi mund të pasqyrojë ndikimin e përbërësve kristalografikisht të pavizualizuar të një biofluidi (për shembull, makromolekulat e proteinave, yndyrat, karbohidratet, etj. ) mbi kristalogjenezën. .

Oriz. 2.2.Nderveprimet e strukturave kristalore dhe amorfe

Për të marrë informacion shtesë në lidhje me vetitë fiziko-kimike të lëngut biologjik të analizuar, u zhvilluan kritere shtesë për vlerësimin e rezultatit të kristaloskopisë klasike (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005), duke përfshirë parametrat e mëposhtëm:
1. Celulariteti (I)– pasqyron veçoritë e ndërveprimeve organo-minerale në facie. Vlerësimi bëhet në një shkallë të drejtë me gjashtë pikë (0-5 pikë), ku 0 pikë është mungesa e plotë e shenjave të shfaqjes së këtij fenomeni dhe 5 pikë është dukshmëria e qelizimit pa mikroskop.
2. Uniformiteti shpërndarjet e elementeve (R)– një kriter që tregon korrektësinë e procesit të kristalogjenezës së lirë. Interpretohet edhe sipas shkallës gjashtëpikëshe (0-5 pikë) të dhënë në pjesën për komponentin tesigrafik.
3. Intensiteti i zonës margjinale (Kz)– një parametër që tregon praninë dhe sasinë e përbërësit proteinik të mjedisit biologjik (Shatokhina S.N., 1995; Nazarova L.O., Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 2000). Ne propozojmë një skemë për vlerësimin e këtij treguesi në një shkallë gjysmë sasiore me gjashtë pikë:
- 0 pikë - mungesë absolute zona margjinale, stria janë shprehur, shenja lokale të shkatërrimit në zonën e skajit të facialeve;
- 1 pikë - zona e skajit është dobët e dukshme në zmadhimin e ulët të një mikroskopi të dritës, vërehen "thyerje" të vetme, duke përfshirë ato të shprehura në mënyrë të paqartë, "të mbuluara";
- 2 pikë - zona e skajit është qartë e dukshme, është pothuajse uniforme, vërehen një numër i vogël "defektesh";
- 3 pikë - zona e skajit është e përcaktuar qartë nga zona e ndërmjetme, homogjene, "gabimet" vërehen në të gjithë unazën e skajit dhe nuk janë shkatërruese;
- 4 pikë - zona margjinale është vizualizuar qartë, e kufizuar me një "bosht" nga zona e ndërmjetme, ka një numër të konsiderueshëm "thyerjesh", por është e padallueshme pa mikroskop.
- 5 pikë – zona margjinale vizuale pa mikroskop, është uniforme, pa shenja shkatërrimi; mikroskopi tregon një numër të konsiderueshëm të "thyerjeve".
4. Shkalla e Shkatërrimit të Facies (SDF)– një tregues integral që pasqyron rrjedhën e saktë të kristalogjenezës (karakteristika kryesore cilësore e facialeve) dhe përmbledh të dyja ekzogjenet (kushtet e procesit të dehidrimit - temperatura, lagështia, presioni, shpejtësia e rrjedhës së ajrit, hyrja e substancave shtesë, etj.) dhe faktorët endogjenë (formimi i kristalit të komponentit termodinamik, prania e një sasie adekuate uji për formimin e hidrateve kristalore dhe stabilizimi i makromolekulave organike etj.).
* 0 gradë– të gjithë elementët e facialeve janë të konfigurimit të saktë, të pa shkatërruar si në tërësi ashtu edhe në zona të veçanta, nuk ka shenja të shkatërrimit të teksturës së facialeve;
* I diplomë– elementët e facialeve kanë shenja fillestare të shkatërrimit, nuk vërehen ndryshime shkatërruese në teksturë;
* Shkalla II– vizualizohen struktura të shumta të shkatërruara ose të ndryshuara, ka shkelje lokale të integritetit të teksturës;
* Shkalla III- të gjithë elementët e facialeve janë shkatërruar, është e pamundur të dallohen pjesë të veçanta të facialeve dhe strukturës, mostra është një masë pa formë e materialit amorf, shpesh me ngjyrë; ka shenja të qarta të shkatërrimit të teksturës.
Në përgjithësi, modelimi i strukturave të formuara dhe përdorimi i kritereve të ndryshme të vlerësimit do të kontribuojë në një diferencim më të qartë të ndryshimeve në pamjen kristaloskopike, megjithëse “mbingarkesa” e tepërt me to do të çojë në një ndërlikim të konsiderueshëm të procesit të analizës së facialeve.
Si një mënyrë më informuese për vlerësimin e aftësisë inicuese të substrateve biologjike sesa tesigrafia klasike e diskutuar më sipër (Tarusinov G. A., 1994), ne përdorëm tesigrafinë krahasuese (Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2002-2005; Martusevich A.2000, 200. ), i cili përfshin përdorimin e një kampioni kontrolli shtesë të një substance të pastër bazë për të niveluar kushte të ndryshme të jashtme; bën të mundur që të tregohet drejtimi i fillimit (aktivizimi ose depresioni i kristallogjenezës së ish-kristalit) dhe ashpërsia e tij.
Siç u përmend më lart, vlerësimi i facialeve tesigrafike është më i vështirë se ato kristaloskopike, gjë që shoqërohet me homogjenitetin e morfologjisë së të parit dhe, për rrjedhojë, nëse tashmë është zhvilluar një tabelë identifikimi për kristaloskopinë klasike dhe kritere shtesë do të luajnë vetëm një rol sqarues, pastaj në testin tesigrafik ata marrin pozicione drejtuese (Nefedova N.B., Tsyvenkova L.A., 1985; Moroz L.A., Kalikshtein D.B., 1986; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., Kidalovtsev 1990; A. A., Yakushina G. N., 2004; Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2003-2005). Në këtë drejtim, propozohet një klasifikim i kritereve që mund të përdoren kur merren parasysh facialet tesigrafike:
I. Kriteret bazë
- Koeficienti bazë tezigrafik Q
- Koeficienti i arsyetimit P
- Koeficienti i inicimit M
- Koeficienti relativ N
II. Kriteret shtesë
uniformiteti i densitetit të facies (R);
shkalla e celularitetit të figurës (I);
indeksi i kaosit (CH)
ashpërsia e zonave individuale të kristalizimit (Z)

Identifikimi i kritereve të mësipërme bëri të mundur formimin e një qasje të unifikuar matematikore për vlerësimin e facies tesigrafike (Martusevich A.K. et al., 2004, 2005), e cila bazohet në verifikimin e rëndësisë së secilit tregues në përcaktimin e koeficientit të kërkuar derivativ.

Shpjegime për koeficientët e llogaritjes së përdorur:
I. Kriteret kryesore:
Q = A / B, ku A është numri i qendrave të kristalizimit në mostrën e provës, njësitë; B - numri i qendrave të kristalizimit në kampionin e kontrollit, njësitë.
P = d1 / d2, ku d1 është rrezja e zonës minimale të kristalizimit, mm; d2 - rrezja e rripit maksimal të kristalizimit, mm.

II. Kriteret shtesë:
R - shkalla e uniformitetit të dendësisë së shpërndarjes së elementeve të facialeve tesigrafike, pika;
I - shkalla e celularitetit të facialeve tesigrafike, pika.

Hulumtimi ynë na lejoi të supozojmë rëndësinë informative të koeficientëve të theksuar më sipër në identifikimin e facialeve tesigrafike:
1. Koeficienti bazë tezigrafik Q– tregon shkallën e organizimit/çorganizimit të kristalogjenezës së substancës bazë (në shumicën e rasteve, një tretësirë ​​e klorurit të natriumit me përqendrim izosmotik, i cili në kushte natyrore neutrale është i prirur për formimin e strukturave tipike të dehidrimit) nën ndikimin e materialit nën studim.
2. Koeficienti i arsyetimit P– demonstron shkallën e heterogjenitetit të masave molekulare të përbërësve të substratit që studiohet.
3. Shkalla e celularitetit të figurës I- mundësisht demonstron praninë e konglomerateve proteinike me përbërje dhe veti të ndryshme kimike në shkallën e hidrofilitetit/hidrofobisë, si dhe praninë e përbërësve të tretshëm në yndyrë në një tretësirë ​​ujore të mjedisit biologjik.
4. Parametri R - thekson shpërndarjen uniforme të strukturave nëpër facialet tesigrafike. Mund të tregojë përmbajtjen e përbërësve të pavizualizuar në material që mund të shkaktojnë në nivel lokal frenimin e kristalogjenezës. Mund të lidhet me metodën e tharjes së mikroekzemplarit.
Bazuar në treguesit e mësipërm për vlerësimin e facialeve tesigrafike, u formulua një gradim i shkurtër i veçorive të regjistrimit të përbërjes së facialeve tesigrafike sipas kritereve shtesë të vlerësimit (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005):
1. Uniformiteti i densitetit të shpërndarjes së strukturave kristalore nëpër facialet (R):
0 pikë - kaos i plotë i facialeve, prania e elementeve heterogjene, zbrazëtirat, vendet e grumbullimit të strukturave kristalore, orientimi i ndryshëm i formacioneve në fushën e shikimit.
1 pikë - përshkruhen disa grupime kristalesh, zona të izoluara ndërtimi i saktë, duke zënë më pak se 30% të sipërfaqes totale të fushës së shikimit, drejtimi i figurave është ende kaotik.
2 pikë - vërehen "ishuj" të qartë të rendit, duke zënë nga 30% deri në 50% të hapësirës së fushës pamore (në secilën nga të paktën tre të studiuara), distancat midis elementeve në grupe janë afërsisht të barabarta, një model i drejtimit. është regjistruar formacionet strukturore facialet.
3 pikë - një numër mjaft i konsiderueshëm i elementeve strukturorë të facialeve (më shumë se 50% e totalit) janë të strukturuara, "ishujt" e uniformitetit kthehen në zona relativisht sipërfaqe të madhe. Brenda këtyre zonave vërehet vendndodhja e saktë dhe uniformiteti i distancave ndërmjet formacioneve individuale. Modeli i drejtimit të elementeve dhe zonimi dallohen mjaft qartë.
4 pikë - shumica e elementeve të facialeve janë të strukturuara (më shumë se 75% e totalit), pjesa tjetër shpërndahet në "ishuj" në të gjithë fushën e shikimit, shpesh në zonën margjinale. Distancat midis formacioneve individuale janë pothuajse konstante. Orientimi i elementeve ndjek një model të caktuar pothuajse në të gjithë sipërfaqen e fushës së shikimit.
5 pikë - të gjithë elementët e facialeve tezigrafike janë të strukturuara qartë në të gjithë fushën e shikimit, gjë që vërtetohet nga ekzaminimi i disa fushave. Ndarja në zona qendrore, të ndërmjetme dhe margjinale është qartë e dukshme edhe me kontroll vizual pa mikroskop; kufijtë e këtij të fundit mund të vendosen. Distancat ndërmjet elementeve të figurës janë konstante, orientimi i figurave është i saktë, natyral në të gjithë sipërfaqen e facialeve.
2. Shkalla e manifestimit të celularitetit të facies (I):
0 pikë - mungesë e plotë e shenjave të qelizave, homogjeniteti i figurës, pa identifikim të "ishujve" të kristaleve. Facialet përfaqësojnë një "shtresë" të vetme të formacioneve kristalore.
1 pikë - prania e shenjave të para të heterogjenitetit, "shtypja" e figurës kristaloskopike (theksohen parimet më të rëndësishme diagnostike):
fillimi i ndarjes së grupeve të elementeve (më pak se 30% e të gjitha formacioneve që zënë më pak se 30% të zonës së fushës vizuale);
disa heterogjenitete të figurës;
fillimi i “dërrmimit” të një “shtreseje” të vetme figurash kristalore.
2 pikë - ka një tendencë mjaft të dukshme drejt "fragmentimit" të facialeve, formimit të "ishujve" të kristaleve (theksohen parimet më të rëndësishme diagnostikuese):
numri i elementeve të izoluar në "ishuj" është nga 30% në 50% të të gjitha strukturave, ata zënë më shumë se 30% të sipërfaqes së fushës së shikimit të facialeve;
heterogjeniteti i theksuar, zonaliteti i figurës;
vizualizohet procesi i “ndarjes” së facialeve në seksione, regjistrohen brezat formues të kristalizimit, duke shërbyer si kufij të këtyre të fundit, në disa raste jo në të gjithë gjatësinë, me trashësi 1 kristal.
3 pikë - vërehen ndryshime të theksuara në faciale:
elementët në "ishuj" përbëjnë nga 50% në 75% të numrit të përgjithshëm, sipërfaqja që ata zënë është më shumë se 50% e fushës së shikimit (në disa fusha);
heterogjeniteti i theksuar, "kokrriza" e figurës;
procesi i “shpërbërjes” së facialeve është qartë i dukshëm në disa fusha të shikimit;
Rripat e kristalizimit janë mjaft të dallueshëm, të formuar nga më shumë se një rresht strukturash kristalore.
4 pikë - shenjat e qelizës janë të dukshme (theksohen parimet më të rëndësishme diagnostike):
numri i strukturave të grupuara në qeliza nga 75% në 100% të numrit të përgjithshëm të këtyre të fundit;
elementët e grupuar zënë të gjithë fushën vizuale (kur studiohen disa, të paktën tre fusha vizuale);
rripat e kristalizimit formohen nga më shumë se një rresht kristalesh dhe janë të pranishëm në të gjithë sipërfaqen e fushës së shikimit, rrethojnë plotësisht "ishujt".
5 pikë - fotografia karakterizohet nga tiparet morfologjike të mëposhtme (theksohen parimet më të rëndësishme diagnostikuese):
numri i strukturave të grupuara në qeliza është nga 75% në 100% të numrit të përgjithshëm të këtyre të fundit;
elementët e grupuar zënë të gjithë fushën vizuale (kur studiohen disa, të paktën tre fusha vizuale);
“copëtimi” dhe “kokrriza” e figurës shprehen shumë qartë;
Rripat e kristalizimit formohen nga më shumë se një rresht kristalesh, janë të pranishëm në të gjithë sipërfaqen e fushës së shikimit dhe rrethojnë plotësisht "ishujt";
ka “thyerje” në foto (përveç facialeve të serumit të gjakut, për të cilin është ky fenomen i pavarur shenjë diagnostike).

Në përgjithësi, përdorimi i kritereve, treguesve dhe koeficientëve të llogaritur të përshkruar më sipër na lejoi të algoritmojmë procedurën për nxjerrjen e ngarkesës së informacionit të fshehur në përbërjen cilësore dhe sasiore të substrateve të analizuara.
Në përputhje me këtë skemë, analiza kryhet hap pas hapi në dy drejtime kryesore - studimi i kristallogjenezës së lirë dhe formimit të kristalit të inicuar, gjë që bën të mundur që të merret në konsideratë në mënyrë gjithëpërfshirëse si aftësia e drejtpërdrejtë kristalformuese e një biofluidi dhe potenciali i tij inicues. .

Oriz. 2.3.Algoritmi për vlerësimin e facies teziokristaloskopike.

Pra, përdorimi i gjerë i aparateve matematikore bën të mundur vlerësimin multiparametrik të lëngjeve biologjike nga kristalogeneza e tyre, e cila siguron një sasi të madhe informacioni për vetitë e tyre fiziko-kimike dhe, indirekt, përbërjen cilësore dhe sasiore të përbërësve, e cila, sipas mendimit tonë, është e rëndësi të veçantë për shkencën klinike, para së gjithash diagnostikuese, praktike dhe themelore.

2.4 Përpunimi statistikor i të dhënave

Materiali aktual i marrë gjatë hulumtimit nga të gjitha shpëlarjet e studiuara u përpunua me metodën e statistikave të variacionit (Tyurin Yu. N., Makarov A. A., 1998; Nasledov A. D., 2004). Janë llogaritur vlerat mesatare (M), gabimi standard i tyre (m) dhe devijimi standard (). Treguesit u konsideruan të besueshëm në vlerat p<0,05 (по t-критерию Стьюдента и U-критерия Манна-Уитни). Зависимость между признаками оценивали при помощи коэффициента парной корреляции (r), его ошибки (mr) и уровня значимости различий (по t-критерию Стьюдента). Зависимость считалась сильной при r  >0.7, mesatare nëse moduli i vlerës së korrelacionit të çiftit qëndron në intervalin 0.3-0.7. Kur u gjet një vlerë korrelacioni që ishte më e vogël se vlera modale prej 0.3, ajo u mor si e dobët. Është llogaritur gjithashtu besueshmëria e korrelacionit të çiftit të gjetur (p).
Llogaritjet janë kryer në mjedisin e spreadsheet Microsoft Excel 2003, si dhe duke përdorur paketat statistikore softuerike Primer of biostatistics 4.03 dhe SPSS 11.0.

3. Rezultatet e hulumtimit.

Vlerësimi i drejtpërdrejtë i rezultateve të kristalogjenezës së lirë u krye duke përdorur një tabelë të vetme identifikimi, duke përfshirë 5 klasa kryesore të substancave kristalore dhe amorfe (morfometria), si dhe kritere shtesë (shkalla e shkatërrimit të facies - SDF, ashpërsia e zonës së saj margjinale (Kz ) dhe celulariteti (I), uniformiteti i elementeve të shpërndarjes (R)). Facialet tesigrafike u analizuan duke përdorur një sistem parametrash bazë (koeficienti kryesor tesigrafik Q, koeficienti i zonalitetit P) dhe parametrave shtesë (të ngjashëm me ato të përdorura për kristaloskopinë klasike).
Ne studiuam dinamikën e kristalogjenezës së lirë dhe të nisur të urinës në minj të shëndetshëm dhe leuçemikë.

3.1. Morfologjia e urinës së minjve të shëndetshëm dhe të infektuar artificialisht me leuçemi.

Analiza jonë e mikropërgatitjeve të mostrave të urinës së tharë na lejoi të krijonim "modele" të qarta për kushtet në shqyrtim.
Është bërë një krahasim i modeleve kristaloskopike të marra nga kafshë të shëndetshme dhe të sëmura.

Tabela 3.1. Karakteristikat kristaloskopike të minjve të shëndetshëm dhe pacientëve me leuçemi.

Sipas të dhënave të dhëna në tabelën 3.1, është e qartë se ka ndryshime të qarta në modelin kristaloskopik midis grupit të kontrollit dhe atij eksperimental.

Bazuar në rezultatet e morfometrisë vizuale, u konstatua se ka karakteristika domethënëse të pamjes kristaloskopike të urinës së minjve me leuçemi në krahasim me kafshët e shëndetshme, ndër të cilat më të rëndësishmet janë:
një rritje në numrin e dendriteve te minjtë e sëmurë, me përjashtim të mungesës së plotë të strukturave polikristaline të rreshtuara, gjë që konfirmon ndryshimet e regjistruara në komponentin njëkristalor;
përqendrimi i formacioneve amorfe, që konsiston në zmadhimin dhe zvogëlimin e tyre në sasi, përcaktimin e theksuar të tyre nga figurat e mëdha kristalore;
një rritje në shkallën e shkatërrimit të facialeve (tregues kryesor i paqëndrueshmërisë së facies kristaloskopike);
një rënie në uniformitetin e shpërndarjes së formacioneve kristalore dhe amorfe në një mikrospemë, e shoqëruar nga zbërthimi i elementeve të facialeve, i manifestuar në një rritje të ndjeshme të shkallës së qelizës (p.<0,05).
Bazuar në rezultatet e vlerësimit të aftësisë kristalformuese të serumit të gjakut të miut, u formua një "model" që ishte karakteristik për minjtë e shëndetshëm dhe minjtë me leuçemi.

3.2. Kriteret kryesore për vlerësimin e facies tesigrafike të serumit të gjakut te minjtë në kushte normale dhe patologjinë (leuçemia).

Studimi përfshiu një kërkim për shënuesit cilësorë të leuçemisë dhe formimin e "modeleve" sasiore të tezigrafisë. Një grup parametrash cilësorë të rëndësishëm diagnostikisht u përpiluan bazuar në zbulimin e shenjave të ndryshimeve patologjike në urinën e minjve të sëmurë.
Në përputhje me të dhënat e paraqitura në Fig. 2.4, treguesit më domethënës diferencues të tesigrameve të urinës së minjve të shëndetshëm dhe minjve me leuçemi kur përdorin një zgjidhje 10% të klorurit të natriumit si substancë bazë janë:
- natyra e inicimit të substancës bazë nga mjedisi biologjik (në minj të shëndetshëm - aktivizim i theksuar i kristallogjenezës së substancës bazë, në minj të sëmurë me leuçemi - frenim i moderuar);
- Përbërja organike-minerale e pabarabartë e biofluidit (mbizotërimi i përbërësve minerale te minjtë e shëndetshëm dhe mbizotërimi i përbërjeve organike te minjtë me leuçemi);
- shkalla e shkatërrimit të facialeve, e cila është pak më e lartë në mesin e përfaqësuesve të grupit eksperimental;
- Zgjerimi i zonës margjinale në facialet e minjve me leuçemi, me ashpërsinë e saj të konsiderueshme në individë praktikisht të shëndetshëm, që është një shënues i supozuar i leuçemisë.

Tabela 3.2. Tezigrafia krahasuese e urinës së minjve të shëndetshëm dhe minjve me leuçemi (substanca bazë - 10% zgjidhje klorur natriumi)

Shënim: “*” – rëndësia e dallimeve në raport me grupin e kontrollit p<0,05

Oriz. 2.4. Ndryshimet në kriteret kryesore dhe shtesë për tezigrafinë e urinës tek minjtë me leuçemi në krahasim me ata të shëndetshëm

3.3 minj AKR

Linja e miut AKR shumë leuçemike u mor duke kryqëzuar individë të lidhur ngushtë në vitin 1928. Minjtë e të dy gjinive janë të ndjeshëm ndaj leuçemisë limfoide. Rreth 91% e femrave vdesin nga leuçemia në 300 ditë.

3.4 Dinamika e zhvillimit të leuçemisë.

Oriz. 3.1 Facia është homogjene, nuk ka formacione të theksuara - miu i shëndetshëm X40

Oriz. 3.2 Facia është homogjene, shfaqen shenjat e para të fragmentimit të zonës margjinale - shenjat e para të zhvillimit të leuçemisë, mosha 5 muajshe. X40

Oriz. 3.3 Heterogjeniteti i strukturës, shprehja e dobët e zonës margjinale, manifestimi i celularitetit - fillimi i zhvillimit të leuçemisë. 7 muaj X40

Oriz. 3.4 Fillimi i shfaqjes së strukturave dendritike të linjës është zhvillimi i leucemisë. 8 muaj X40

Oriz. 3.5 Në strukturën e facialeve mbizotërojnë struktura dendritike të rreshtuara dhe drejtkëndëshe - leuçemia e zhvilluar, 9 muaj. X40

Oriz. 3.6 Celulariteti i theksuar i facialeve, dendësia e pabarabartë e shpërndarjes së elementeve - leuçemia shumë e zhvilluar. 13 muaj X40

3.5 Përfundime

Bazuar në zbulimin e disa parametrave cilësorë (të paktën 3) të një biosampli eksperimentale në sipërfaqen e një pike të thatë të urinës, duket e mundur të identifikohet prania e ndryshimeve patologjike ose shkalla e zhvillimit të leukemisë akute.
Duke përdorur të dhënat e dhëna në tabelën 3.2, mund të vërehet se në lidhje me koeficientët Q dhe P, dallime të konsiderueshme në vlerat e tij regjistrohen në tesigramet e urinës.
Në përputhje me të dhënat e paraqitura në tabelën 3.2, besueshmëria e dallimeve midis treguesve kryesorë të tesigrafisë konfirmon rëndësinë e veçorive të facialeve tesigrafike të urinës të zbuluara duke përdorur shenja cilësore.
Kështu, përdorimi i metodës së tesigrafisë krahasuese të urinës në minj të shëndetshëm dhe minj me leuçemi bën të mundur identifikimin e shënuesve cilësorë dhe sasiorë të pranisë së leuçemisë.
Analiza teziokristaleskopike e biofluideve lejon vlerësimin multiparametrik të informacionit metabolik që ato përmbajnë, i cili mund të jetë i dobishëm për të treguar gjendjet fiziologjike dhe patologjike te njerëzit dhe kafshët. Çdo biofluid ka karakteristikat e veta të kristalogjenezës, e cila shoqërohet me diferencimin e përbërjes dhe funksioneve të tyre kimike.
Gjatë studimit të komponentit kristaloskopik, rekomandohet përdorimi i një tabele të vetme identifikimi, dhe komponenti tesigrafik - kriteret kryesore të vlerësimit (koeficientët Q dhe P) dhe shtesë (uniformiteti i shpërndarjes së modelit, celulariteti, etj.). Vazhdimi i kërkimit do të shërbejë për të zhvilluar ide rreth mekanizmave nën- dhe molekularë të zhvillimit të reaksioneve fiziologjike dhe patologjike të trupit të njeriut.

Lista e literaturës së përdorur:

1. Agafonov V. A., Bagrov S. N. Studimi i gjendjes së trupit qelqor duke përdorur metodën e tharjes // Mbledhja e artikujve. artikuj shkencorë "Kirurgjia transciliare e thjerrëzave dhe qelqit". - Moskë. – 1982. – F. 158-164.
2. Alekseeva O. P., Vorobyov A. V. Kristalografia e pështymës - një metodë e re jo invazive për diagnostikimin e H. pylori // Revista Mjekësore e Nizhny Novgorod. – 2003. - Nr.2. – fq 73-78.
3. Antropova I.P., Gabinsky Ya.L. Kristalizimi i biofluidit në një qelizë të mbyllur duke përdorur shembullin e pështymës // Diagnostifikimi klinik laboratorik. - 1997. - Nr. 8. - F. 36-38.
4. Babenko G.A. Rritje malinje, metale dhe agjentë kelatues. Roli biologjik i mikroelementeve. - M.: Nauka, 1983.
5. Barer G. M., Denisov A. B., Mikhaleva I. N. et al. Kristalizimi i lëngut oral. Përbërja dhe pastërtia e sipërfaqes së nënshtresës // Buletini i Biologjisë Eksperimentale dhe Mjekësisë. – 1998. – T. 126, nr.12. – fq 693-696.
6. Siguria e jetës. Siguria e proceseve teknologjike dhe prodhimit (Siguria në punë). Uch. manual për universitetet/P. P. Kukin et al. – M., 1999.
7. Brown G., Walken J. Kristalet e lëngëta dhe strukturat biologjike. M.: Mir, 1982. – 198 f.
8. Bubon N. T., Puzyrevsky K. Ya. Reagimi mikrokristaloskopik për zbulimin e papaverinës // Biznesi i farmacisë. – 1965. - Nr.2. – F. 50-52.
9. Buzoverya M. E., Shishpor I. V., Shatokhina S. N. et al. Analiza morfometrike e facialeve të serumit të gjakut // Diagnostifikimi klinik laboratorik. - 2003. - Nr. 9. - fq 22-23.
10. Bystrevskaya A. A., Deev L. A. Varësia e strukturës së lëngut lotsjellës nga lloji i stimulit dhe cilësia e substratit // Materialet e Konferencës III Shkencore dhe Praktike All-Ruse "Morfologjia Funksionale e Fluideve Biologjike". - Moskë. – 2004. – F. 17-19.
11. Wegman E. F., Rufanov Yu. G., Fedorchenko I. N. Kristalografia, mineralogjia, petrografia dhe radiografia. M.: Metalurgji, 1990. – 263 f.
12. Volchetsky A. L., Ruvinova L. G., Spasennikov B. A. et al. Kristalizimi dhe kristalografia: aspekte mjekësore dhe biologjike. Arkhangelsk, 1999. – 374 f.
13. Volchetsky A. L., Spasennikov B. A., Agafonov V. M. et al. Modifikimi i metodës dhe drejtimit kompjuterik të analizës tesigrafike // Ekologjia njerëzore. – 1999. – Nr.3. – fq 38-42.
14. Vorobyov A.V., Vorobyov P.V., Vorobyova V.A. Përcaktimi i komponentit energjetik-informativ të një personi duke përdorur metodën e kristalografisë së ndjeshme // Proc. Raportet e Konferencës XI Ndërkombëtare të Homeopatisë në Moskë "Zhvillimi i metodës homeopatike në mjekësinë moderne". - Moskë. – 2001. – fq 202-207.
15. Vorobyova V. A., Vorobyov A. V., Zamarenov N. A. Modeli i formimit të një pamje kristalografike gjatë ndërveprimit të lëngut biologjik njerëzor dhe një ilaçi homeopatik me një zgjidhje kristalformuese / Zbulimi. – Diploma e Akademisë Ruse të Shkencave të Natyrës nr.231. (Prioriteti i datës 8 qershor 2002).
16. Golubev S. N. Kristale të gjalla // Natyra. – 1989. - Nr.3. – Fq. 13-21.
17. Gordienko A. N., Kurbatova L. A., Filippov A. N. // Fizika e kristalizimit. - Kalinin. – 1985. – Numri. 8. – fq 83-86.
18. Gromova I. P. Metoda kristaloskopike për studimin e serumit të gjakut në një eksperiment toksikologjik dhe higjienik duke përdorur metodën e "pikës së hapur" // Higjiena dhe higjiena. – 2005. – Nr.2. – fq 66-69.
19. Gulyaev V. G., Martusevich A. K., Koshkin A. N. Karakteristikat dhe perspektivat për përdorimin e metodave të kërkimit kristalografik në mjekësi ligjore // Mat. Konferencë shkencore dhe praktike ndëruniversitare me pjesëmarrje në internet "Çështjet aktuale të kriminalistikës dhe veprimtarisë eksperte: problemet dhe perspektivat". - Kirov: KF MSAL. - 2004. – F. 35-39.
20. Gulyaeva S. F., Martusevich A. K., Pomaskina T. V. Modelimi matematikor i rezultatit të kristallogjenezës së filluar të pështymës si një kriter për efektivitetin e marrjes së ujit mineral // Ekologjia njerëzore. – 2005. – Nr.7. – fq 33-35.
21. De Zhe V. Vetitë fizike të substancave kristalore të lëngëta. M.: Mir, 1982. – 175 f.
22. Deryabina N. I., Zalessky M. G. Përmbajtja e përbërësve të proteinave në një pikë të serumit të gjakut kur thahet // Buletini i teknologjive të reja mjekësore. – 2005. – T. XII, nr.1. – fq 85-87.
23. Dawson R, Elliot D, Elliot W et al. Manuali i Biokimikut. M.: Mir, 1997. - 544 f.
24. Zamkova N. G., Zinenko V. I. Dinamika e rrjetës së kristaleve jonike në modelin e frymëmarrjes dhe joneve të polarizueshme. // FTT. - 1998. - T. 40, nr 2. - F. 350-354.
25. Zaitsev V.V., Zaitseva N.B., Usoltseva N.V. Teksturat e kristaleve të lëngshme biologjike të pacientëve me infarkt miokardi // Procedurat e Akademisë së Shkencave. Seria fizike - 1996. - vëll.60, nr.4 - fq.115-118.
26. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Studimi i tranzicioneve fazore dhe fazës joproporcionale në kristalet ASVKh 4 me metodën Monte Carlo. // Kristalografia. - 2000. - T. 45, nr 3. - F. 513-517.
27. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Llogaritjet mikroskopike të tranzicioneve fazore strukturore të tipit të zhvendosjes (kristalet me strukturë elpasolite) dhe tipit të rendit-çrregullimit (familja e sulfatit të kaliumit). // Kristalografia. - 2004. - T. 1, nr. 1. – fq 38-45.
28. Ivanov O. V., Shport D. A., Maksimov E. G. Llogaritjet mikroskopike të paqëndrueshmërisë ferroelektrike në kristalet e perovskitit // JETP - 1998. - T. 114, Nr. 1. - P. 333-358.
29. Kalikshtein D. B., Moroz L. A., Kvitko N. N. et al. Studimi kristalografik i substrateve biologjike // Mjekësia klinike. – 1990. - Nr.4. – F. 28-31.
30. Kalikshtein D. B., Moroz L. A., Chernyakov V. L. Rëndësia e metodës tesigrafike të hulumtimit të urinës // Puna laboratorike. – 1981. - Nr.2. – Fq. 79-81.
31. Kalinin A.P. dhe të tjerët. Informativiteti i metodës së depozitave kristalore të serumit të gjakut në disa sëmundje endokrine // Mbledhja e punimeve të Konferencës Shkencore dhe Praktike Gjith-Ruse. "Metodat e kërkimit kristalografik në mjekësi", Moskë - 1997. - F. 131-133
32. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Mbi teknikën e teziokristaloskopisë së biofluideve // ​​Diagnostifikimi klinik laboratorik. - 2002. - Nr 10. - P. 3.
33. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Qasje moderne për identifikimin kristaloskopik të përbërjes së lëngjeve biologjike // Ekologjia njerëzore. - 2003. - Nr. 5. - fq 23-25.
34. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Karakteristikat e portretit teziokristalskopik të lëngjeve biologjike të trupit të njeriut në kushte normale dhe në patologji // Buletini i teknologjive të reja mjekësore. - 2003. - T. X, nr.4. - fq 57-59.
35. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Kolevatykh E.P. Mbi biokristalizimin parësor dhe sekondar // Koleksion artikujsh. vepra shkencore “Shkenca natyrore dhe humanizmi”. - Tomsk. – 2005. – T. 2, nr. 1. – fq 18-19.
36. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Koshkin A.N. Perspektivat për zhvillimin e metodave të kërkimit kristalografik // Buletini Mjekësor Vyatka. - 2003. - Nr. 3. - F. 6-11. Kamakin N.F., Martusevich A.K. Karakteristikat e portretit teziokristalskopik të lëngjeve biologjike të trupit të njeriut në kushte normale dhe patologjike // Buletini i teknologjive të reja mjekësore. 2003. T. X. Nr. 4. F. 57–59.
37. Kamyshnikov V. S. Manual i diagnostikimit laboratorik klinik dhe biokimik. Në 2 vëllime Minsk: Bjellorusi, 2000. Vëll.1. 495 fq.; T.2. 463.
38. Karkishchenko N. N. Bazat e biomodeling. M.: Shtëpia botuese VPK, 2004. – 608 f.
39. Karachunsky A.I. Leuçemia akute limfoblastike tek fëmijët. Ligjërata mbi problemet aktuale të pediatrisë. Ed. V.F.Demina, S.O.Klyuchnikova., M: RGMU; 2000.
40. Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N. Testet Tesiografike të gjakut dhe aftësitë e tyre praktike // Buletini i teknologjive të reja mjekësore. – 2004. – T. XI, Nr.1-2. - fq 23-25.
41. Koledintsev M. N., Nechaev D. F., Maichuk N. V. Bazat fizike të analizës kristalografike në oftalmologji // Koleksion artikujsh. abstrakte raporte të konferencës shkencore dhe praktike ndërrajonale të shkencëtarëve dhe studentëve të rinj me pjesëmarrje ndërkombëtare "Lexime shkencore në Shën Petersburg-2002". - Shën Petersburg. - 2002. - F. 42-43.
42. Kolotilov N. N., Bakai E. A. Struktura kristalore e lëngshme e objekteve biologjike // Biologjia molekulare. – 1980. – Numri. 27. – fq 87-96.
43. Kononenko E. V., Mironov E. V. Mekanizmat e dislokimit-disklimit të transformimit të strukturës së një biofluidi gjatë grumbullimit // Proc. punimet shkencore të konferencës së 2-të shkencore dhe praktike All-Ruse "Morfologjia e lëngjeve biologjike në diagnostikimin dhe monitorimin e efektivitetit të trajtimit". - Moskë. – 2001. – F. 21-26.
44. Korago A. A. Hyrje në biomineralogji. Shën Petersburg: Nedra, 1992. – 280 f.
45. Koshkin A. N., Martusevich A. K., Lopatin M. A. Kristaloskopia e biofluideve të trupit të njeriut si një metodë diagnostike // Buletini i Universitetit Shtetëror të Mjekësisë Ruse. – 2002. - Nr. 1. – F. 134.
46. ​​Metodat e kërkimit kristalografik në mjekësi: Sht. shkencore Punimet e Konferencës së Parë Shkencore dhe Praktike All-Ruse. - M., 1997.
47. Metoda kristaloskopike për studimin e substrateve biologjike: Metoda. rekomandime / L. A. Moroz, I. L. Theodor, V. E. Bryk et al. – M., 1981. – 9 f.
48. Kuznetsov V. D. Kristalet dhe kristalizimi. M., 1954. – 65 f.
49. Kuznetsov A.V., Rechkalov A.V., Smelysheva L.N. Trakti gastrointestinal dhe stresi. Kurgan: Shtëpia botuese e Universitetit Shtetëror Kurgan, 2004. – 254 f.
50. Kuznetsov N. N., Vershinina G. A., Skopinov S. M. et al. Polarizimi optik dhe metodat refraktometrike në vlerësimin e ashpërsisë së sindromës së dehjes endogjene tek fëmijët // Koleksion artikujsh. punimet shkencore të konferencës së 2-të shkencore dhe praktike All-Ruse "Morfologjia e lëngjeve biologjike në diagnostikimin dhe monitorimin e efektivitetit të trajtimit". - Moskë. – 2001. – F. 30-33.
51. Kuznetsov N. N., Skopinov S. A., Vershinina G. A. et al. Metoda kristal-skopike për diagnostikimin e intoksikimit endogjen te fëmijët. Patenta RF nr.2158923 datë 04.03.1998
52. Kungurov N.V., Kokhan M.M., Kononenko E.V. et al. Studimet kristalografike të lëngjeve biologjike në pacientët me dermatoza kronike. Ekaterinburg, 1997. – 41 f.
53. Kurnysheva N.I., Deev A.I., Gryzunov Yu.A. et al. Një metodë për vlerësimin e endotoksikozës involucionare oftalmike me ekzaminim fluoreshent të lëngut lotsjellës Buletini i Oftalmologjisë. – 2000. – Nr.3. – fq 16-19.
54. Lobanov V.I. Reaksionet mikrokristaloskopike për zbulimin e disa derivateve të acidit barbiturik // Journal of Anlytical Chemistry. – 1966. - Nr.1. – Fq. 110.
55. Loktyushin A. A., Manakov A. V. Mineralet dhe jeta në një model holografik të materies // Proc. Seminari i 2-të Ndërkombëtar “Mineralologjia dhe Jeta: Ndërveprimet Biominerale”. – Syktyvkar. – 1996. – F. 10-11.
56. Martusevich A.K. Metodat e kërkimit kristaloskopik në fiziologji // Revista Fiziologjike Ruse me emrin. I. M. Sechenov. – 2004. – T. 90, nr.8. - F. 18.
57. Martusevich A.K. Teoria fizike dhe biokimike e informacionit të kristalizimit si pasqyrim i morfologjisë së lëngjeve biologjike // Buletini i Mjekësisë Siberiane. – 2005. – T. 4. – Shtojca 1. – F. 185.
58. Martusevich A.K., Koshkin A.N. Problemet e qasjes kërkimore në kristalografinë e biofluideve // ​​Mat. Konferenca e tretë ndërdisiplinore me pjesëmarrje ndërkombëtare “NBITT-21”. - Petrozavodsk. – 2004. – F. 50.
59. Martusevich A.K., Koshkin A.N. Veçoritë e ndikimit të kushteve për kristalizimin e lëngjeve biologjike të trupit të njeriut në rezultatin e testit teziokristalskopik // Koleksion artikujsh. shkencore artikuj nga shkencëtarë dhe specialistë të rinj të Federatës Ruse kushtuar konferencës me emrin. akad. B. S. Grakova "Çështjet aktuale të mjekësisë dhe teknologjive të reja - 2003." - Krasnoyarsk. - 2003. - F. 154-157.
60. Martusevich A.K., Ponomareva G.L. Metodat matematikore për identifikimin e facialeve tesigrafike duke përdorur një numër vlerësimi në pacientët me osteokondrozë lumbare // Diagnostifikimi laboratorik klinike. – 2004. - Nr.9. – fq 85-86.
61. Menshikov V.V. Testet laboratorike në praktikën klinike. M.: Mjekësi, 1988. - 428 f.
62. Mikrometoda për përcaktimin e aminoacideve të lira në serumin e gjakut duke përdorur kromatografinë e letrës // Teknologjitë laboratorike mjekësore. Shën Petersburg, 1999. – T. 2. – F. 106-108.
63. Moroz L. A., Kalikshtein D. B. Metoda kristalografike për studimin e substrateve biologjike. Udhëzimet. M., 1986. – 24 f.
64. Mushkambarov N. N. Kimi fizike dhe koloidale: Kursi i leksioneve. M.: GEOTAR-MED, 2001. – 384 f.
65. Nazarenko G. I., Kishkun A. A. Vlerësimi klinik i rezultateve të hulumtimit laboratorik. M.: Mjekësi, 2000. – 544 f.
66. Nikolskaya M.N., Gandel V.G., Popkov V.A. Zbulimi i barnave sulfonamide me anë të kristalizimit në një shtresë të hollë // Biznes farmaci. – 1965. - Nr.4. – fq 13-14.
67. PB 10-115-96. Rregullat për projektimin dhe funksionimin e sigurt të enëve nën presion.
68. Pikin S. A. Shndërrimet strukturore të kristaleve të lëngëta. - M. - 1981. - 269 f.
69. Plaksina G.V., Komolova G.S., Mashkov A.E etj. Efekti stabilizues i angiogjeninës nga qumështi në strukturën kristalore të lëngjeve biologjike // Buletini i Biologjisë Eksperimentale dhe Mjekësisë. – 2003. – T. 136, nr.10. – fq 406-409.
70. Plaksina G. V., Rimarchuk G. V., Butenko S. V. et al. Rëndësia klinike e metodës kristalografike dhe kristaloskopike të ekzaminimit të urinës // Diagnostifikimi klinik laboratorik. – 1999. - Nr.10. - F. 34.
71. Prigogine I., Stengers I. Urdhri nga kaosi / Përkth. nga anglishtja M.: Përparimi, 1986. – 429 f.
72. Rapis E. G. Metoda mikrokristal-optike e përdorimit të trupit qelqor të njerëzve dhe kafshëve në kushte normale dhe në hemoftalmi // Buletini i Oftalmologjisë. – 1976. – Nr.4. – fq 62-67.
73. Rapis E. G. Proteina dhe jeta. Vetë-organizimi, vetë-montimi dhe simetria e filmave të proteinave supramolekulare me nanostrukturë. M.: “MILTA - PKP GIT”, 2003. – 368 f.
74. Romanov Yu. A. Teoria e sistemeve biologjike dhe problemi i organizimit të tyre kohor // Problemet e kronobiologjisë. – 1992. – nr 3-4. – fq 105-123.
75. Savina L. V. Strukturat kristaloskopike të serumit të gjakut në klinikën e sëmundjeve të brendshme: Abstrakt i tezës. diss... d.m.s. - Perm, 1992. - 40 f.
76. Savina L. V. Strukturat kristaloskopike të serumit të gjakut të një personi të shëndetshëm dhe të sëmurë. Krasnodar, 1999. – 238 f.
77. Savina L. V. Formimi i strukturës së serumit të gjakut në kushte vakum // Diagnostifikimi laboratorik klinike. – 1999. - Nr.11. - F. 48.
78. Savina L.V., Konueva O.V., Korotko G.G. et al. Diagnoza kristaloskopike e çrregullimeve të funksionit ekzokrin të pankreasit në pacientët me pankreatit kronik / Kongresi IV Ndërkombëtar "Ushqyerja Parenteral dhe Enterale". - Moskë, 2000. - F. 98.
79. Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V.Yu et al. Mikroskopi i polarizimit në diagnostikimin e çrregullimeve metabolike // Diagnostifikimi laboratorik klinike. - 2003. - Nr. 3. - fq 11-13.
80. Saltykov A. B. Aspektet morfologjike të procesit të formimit të sistemeve funksionale // Përparimet në biologjinë moderne. – 2005. – T. 125, nr.2. – fq 167-178.
81. Skalny A.V., Yesenin A.V. Monitorimi dhe vlerësimi i rrezikut të ekspozimit të plumbit ndaj njerëzve dhe mjedisit duke përdorur biosubstrate njerëzore // Buletini Toksikologjik. Nr 6, 1996. - fq 16-23.
82. Skopinov S. A. Modelimi kompjuterik i kristalizimit të kripës nga biofluidet. // Metodat e kërkimit kristalografik në mjekësi. Shtu. shkencore Punimet e Konferencës së Parë Shkencore dhe Praktike All-Ruse. . M., 1997. Me. 33.36
83. Smotrova S.P., Chesnokova S.M. dhe të tjera.Mungesa e selenit në kushtet e ndotjes së mjedisit // Materialet e Konferencës III Ndërkombëtare Shkencore dhe Teknike "Fizika dhe Radioelektronika në Mjekësi dhe Bioteknologji" - Vladimir, 1998. - F. 304-305.
84. Sobur S.V. Siguria nga zjarri i instalimeve elektrike: Referenca/S. V. Sobur. - M., 2003.
85. Sonin A. S. Hyrje në fizikën e kristaleve të lëngëta. M., 1989. – 369 f.
86. Pajisjet mbrojtëse personale: Ref. shtesa/S. L. Kaminsky. - L., 1989.
87. Surovkina M. S., Shatokhina S. N., Surovkin V. A. et al. Ndryshimet në nivelin e molekulave të masës mesatare dhe organizimit sistemik të plazmës së gjakut në pacientët e moshuar // Sht. punimet shkencore të konferencës së 2-të shkencore dhe praktike All-Ruse "Morfologjia e lëngjeve biologjike në diagnostikimin dhe monitorimin e efektivitetit të trajtimit". - Moskë. – 2001. – F. 18-20.
88. Tarasevich S. Yu. // Revista e Fizikës Teknike. – 2001. – T. 71, Numri. 5. – fq 123-125.
89. Tarusinov G. A. Ekzaminimi kristalografik i urinës në diagnostikimin dhe diagnozën diferenciale të sëmundjeve difuze të indit lidhor tek fëmijët // Pediatri. – 1994. - Nr.1. – fq 55-57.
90. Tekutskaya E.E., Sofina L.I. dhe të tjera.Metodat dhe praktika e monitorimit të përmbajtjes së metaleve të rënda në mjediset biologjike. // Higjiena dhe higjiena – 1999-Nr.4–P.72-74.
91. Studimi teziokristalskopik i substrateve biologjike: Rekomandime metodologjike / Kamakin N. F., Martusevich A. K. - Kirov, 2005. - 34 f.

Për të planifikuar siç duhet shtatzëninë, për të identifikuar çrregullime të ndryshme të sistemit riprodhues dhe për të zgjedhur metodën optimale të kontracepsionit, është e nevojshme të keni një kuptim të qartë të natyrës së funksionit menstrual të një gruaje, një nga hallkat kryesore të të cilit është ovulacionit .

Cikli menstrual gratë, që përfaqësojnë periudhën nga dita e parë e një menstruacioni deri në ditën e parë të menstruacioneve të ardhshme, mesatarisht zgjat 28-30 ditë. Gjatë gjysmës së parë të ciklit menstrual, një nga vezoret piqet folikul, e cila është një flluskë e mbushur me lëng dhe që përmban një vezë që piqet. Aktiv Dita 14-15 e ciklit Ndodh ovulacioni, që do të thotë se një vezë e pjekur lirohet nga folikuli, gati për fekondim.

Veza e pjekur pas ovulacionit të aftë për fekondim brenda 2 ditëve, dhe spermatozoidet kanë aktivitet fekondues për 4 ditë pas ejakulimit. Prandaj, periudha totale e më të mundshmeve mundësia e konceptimit është 6 ditë .

Për të përcaktuar periudhën e ngjizjes së mundshme, përdoren metoda të ndryshme për të përcaktuar momentin e ovulacionit, të cilat përfshijnë: vlerësimin e natyrës së kristalizimit të mukusit që përmbahet në kanalin e qafës së mitrës, ose kristalizimin e pështymës; matja e temperaturës në rektum; të dhëna me ultratinguj; duke studiuar nivelet e hormoneve.

Kështu, gjatë periudhës së ovulacionit, mukoza e përmbajtur në kanalin e qafës së mitrës, pasi vendoset në një rrëshqitje xhami dhe thahet, i nënshtrohet kristalizimit për të formuar një model të ngjashëm me gjethen e fierit. Ky proces kristalizimi është për shkak të një sërë ndryshimesh biofizike dhe biokimike që ndodhin në mukusin e qafës së mitrës.

Aktiviteti i prodhimit të mukusit nga gjëndrat, të cilat ndodhen në muret e kanalit të qafës së mitrës, kontrollohet nga niveli i hormoneve seksuale femërore - estrogjenit. Me afrimin e momentit të ovulacionit rritet përqendrimi dhe aktiviteti i estrogjenit. Kjo çon në një rritje të sasisë së mukusit të prodhuar dhe në një rritje të kripërave të natriumit dhe kaliumit në të. Rrjedhimisht, kur mukoza thahet, kripërat që ajo përmban ndërveprojnë me mucinën, e cila formon një model që i ngjan një gjetheje fieri.

Kur ekzaminohet një njollë e mukusit nën mikroskop, është e qartë se nga dita e 9-të e ciklit shfaqen shenja të dobëta kristalizimi. Më tej, ashpërsia e modelit gradualisht intensifikohet, shfaqet më qartë 3-4 ditë para ovulacionit dhe arrin skicat më të qarta në ditën e ovulacionit. Pas ovulacionit, kristalizimi zvogëlohet. Vizatimi bëhet i paqartë dhe merr një pamje "të paqartë" brenda 2-3 ditësh.

Përcaktimi i kohës së ovulacionit duke përdorur një test të kristalizimit të mukusit të qafës së mitrës kërkon një vizitë të përditshme te gjinekologu. Në një numër rastesh, për shkak të ndryshimeve patologjike në qafën e mitrës ose një procesi inflamator, studimi mund të jetë i vështirë ose besueshmëria e rezultatit mund të zvogëlohet, pasi pamja e kristalizimit është e shtrembëruar.

Ndryshimet në modelet e kristalizimit gjatë ciklit menstrual, të ngjashme me mukusin e qafës së mitrës, ndodhin gjithashtu në pështymë. Një rritje e niveleve të estrogjenit me afrimin e ovulacionit çon në një rritje të sasisë së kripërave të natriumit dhe kaliumit në pështymë, si dhe në mukusin e qafës së mitrës. Përqendrimi i tyre arrin maksimumin në ditën e ovulacionit, gjë që çon në kristalizimin e pështymës kur thahet. Besueshmëria e testit të kristalizimit të pështymës për përcaktimin e ovulacionit është nga 96% në 99%.

Për të vlerësuar modelin e kristalizimit të pështymës dhe, në përputhje me rrethanat, për të përcaktuar kohën e ovulacionit, përdoren mini-mikroskopë të ndryshëm, të cilët janë instrumente optike kompakte dhe të lehta që janë të përshtatshme për t'u përdorur në kushtet e përditshme.

Në ditët kur konceptimi nuk është ende i mundur(5-6 ditë para ovulacionit ose më shumë) ose kur nuk është më e mundur (3-4 ditë pas ovulimit), pështyma e tharë formon një model të paqartë si pika. 3-4 ditë para ovulacionit, vërehet një pamje e fillimit të formimit të një strukture të ngjashme me fierin e modelit. Me afrimin e ovulacionit, modeli do të bëhet më i qartë, duke treguar një probabilitet të lartë të konceptimit. Brenda 2-3 ditëve pas ovulacionit, qartësia e modelit zvogëlohet.

Proceset inflamatore në zgavrën me gojë ose laring mund të çojnë në rezultate të shtrembëruara. Rekomandohet përdorimi i pështymës së mëngjesit ose përdorimi i testit jo më herët se 2-3 orë para ngrënies, larja e dhëmbëve, pirja e alkoolit ose pirja e duhanit.

Nëse kohëzgjatja e ekzistencës së çdo modeli mikroskopik të kristalizimit të mukusit të qafës së mitrës dhe pështymës, si dhe zëvendësimi i tij me një model tjetër, është konstante dhe konsistente në përputhje me fazat e ciklit menstrual, atëherë kjo tregon mungesën e çrregullimeve të tij; dhe ovulimi ndodh në kohën e duhur dhe në çdo cikël menstrual. Ekzistenca afatgjatë e të njëjtit model kristalizimi, mungesa e tij ose zëvendësimi i parakohshëm me një model tjetër tregon një mosfunksionim të vezoreve. Në këtë rast, duhet patjetër të konsultoheni me një mjek.

Për të përcaktuar ovulimin mund të përdorni gjithashtu testi i temperaturës, e cila bazohet në faktin se në varësi të fazës së ciklit menstrual, temperatura e trupit ndryshon në një mënyrë të caktuar. Të dhënat më të sakta për natyrën e ndryshimeve termike që ndodhin mund të merren me matje temperatura në rektum menjëherë pas gjumit, në pushim, pa u ngritur nga shtrati, çdo ditë gjatë gjithë ciklit menstrual. Në fazën e parë të ciklit normal menstrual, temperatura është zakonisht më e ulët 37°C. Fjalë për fjalë në prag të ovulacionit, ajo zvogëlohet pak, dhe menjëherë pas saj, temperatura rritet me 0,4-0,6 ° C në krahasim me atë fillestare dhe, si rregull, bëhet pak më e lartë se 37 ° C. Luhatjet e temperaturës që ndodhin shoqërohen me ndryshime në nivelet e estrogjenit në fazën e parë dhe të dytë të ciklit menstrual dhe një rritje të nivelit. progesterone në fazën e dytë. Në të njëjtën kohë, progesteroni, i cili fillon të prodhohet në vezore në sasi më të mëdha pikërisht pas ovulacionit, ndikon në qendrën e termorregullimit, gjë që çon në një rritje të lehtë të temperaturës së trupit. Nëse ovulacioni nuk ndodh për ndonjë arsye, atëherë temperatura gjatë gjithë ciklit do të jetë afërsisht e njëjtë.

Si pjesë e një diagnoze gjithëpërfshirëse, është e mundur të përdoren metoda për përcaktimin e nivelit të hormoneve seksuale femërore (fraksione të ndryshme të estrogjeneve dhe progesteronit), si dhe hormoneve folikul-stimuluese dhe luteinizuese në gjak. Përqendrimi i këtyre hormoneve ndryshon në një mënyrë të caktuar nga dita në ditë në varësi të fazave të ciklit menstrual, pranisë ose mungesës së ovulacionit.

Duke përdorur ultratinguj, është gjithashtu e mundur të monitorohet formimi i folikulit, të përcaktohet madhësia e tij dhe të përcaktohet momenti i ovulacionit. Prania e një folikuli të pjekur në vezore tregohet nga një formim zgavër që gradualisht rritet në 2-3 cm në diametër në gjysmën e parë të ciklit menstrual dhe zhduket në mes. Ndryshimet në madhësinë e këtij formacioni, si rregull, lidhen qartë me ndryshimet në modelin e kristalizimit të mukusit, me temperaturën në rektum dhe me nivelin e hormoneve. Një shenjë e pjekurisë së folikulit dhe fillimit të afërt (1,5 - 2 ditë) të ovulacionit sipas ultrazërit është zbulimi i një tuberkuli që mban vezë, i cili duket si një formacion i vogël me ngjyrë të çelur ngjitur me sipërfaqen e brendshme të folikulit. Ovulacioni tregohet jo vetëm nga zhdukja e folikulit, por edhe nga shfaqja e njëkohshme e lëngut pas mitrës.

Besohet se ultrazërit ju lejon të merrni informacion më të besueshëm për maturimin e folikulave krahasuar me testet hormonale, pasi disa folikula patologjikisht të papjekura mund të sigurojnë kolektivisht një nivel normal të hormoneve që testohen, gjë që do të krijojë një përshtypje të rreme të rrjedhës normale të ciklit menstrual.

Aktualisht, ultratingulli është një nga metodat e rëndësishme për monitorimin e procesit të stimulimit të ovulacionit dhe efektivitetit të tij. Kështu, me stimulim të tepruar, vërehet një zgjerim i konsiderueshëm i vezoreve me formimin e strukturave të shumta të zgavrës në to.

Kështu, përdorimi i metodave të ndryshme për përcaktimin e ovulacionit bën të mundur kontrollin e natyrës së ciklit menstrual dhe zgjedhjen e periudhës më të favorshme për konceptim gjatë një shtatzënie të planifikuar. Duke përdorur këto teste për të parandaluar shtatzëninë e padëshiruar, ju mund të zgjidhni më racionalen skema kontraceptive ose thjesht shmangni aktivitetin seksual në ditët kur ngjizja është më e mundshme. Duke përdorur testet e listuara, është gjithashtu e mundur të monitorohet efektiviteti i trajtimit që synon korrigjimin e funksionit menstrual.

Përveç kësaj, me ndihmën e një numri testesh të thjeshta, si matja e temperaturës në rektum ose vlerësimi i kristalizimit të pështymës, një grua mund të monitorojë në mënyrë të pavarur funksionin e saj menstrual.