Structura cristalină a salivei. menținerea sănătății dentare

Capitolul 2. Probleme actuale în diagnosticarea și monitorizarea eficacității tratamentului ulcerului duodenal. Caracteristicile cristalografiei salivei în patologia gastroduodenală (revizuire a literaturii).

2.1 Determinarea instrumentală a unui defect al mucoasei în ulcerul duodenal.

2.2 Diagnosticul morfologic al fazei de inflamație în ulcerul duodenal.

2.3 Starea curenta diagnosticul infecției cu Helicobacter pylori.

2.4 Posibilități de utilizare a cristalografiei salivei în diagnosticul și evaluarea eficacității tratamentului bolii ulceroase peptice.

Capitolul 3. Domeniul de aplicare și metodele de cercetare.

Capitolul 4. Caracteristicile tabloului cristalografic al salivei în ulcerul duodenal.

Capitolul 5. Discutarea rezultatelor cercetării.

Capitolul 6. Concluzii.

Introducerea disertației (parte a rezumatului) pe tema „Cristalografia salivei în diagnosticul și monitorizarea eficacității tratamentului ulcerului duodenal”

Lista de referințe pentru cercetarea disertației Candidat la științe medicale Vorobyov, Alexander Viktorovich, 2004

Vă rugăm să rețineți că textele științifice prezentate mai sus sunt postate în scop informativ și au fost obținute prin recunoaștere texte originale disertații (OCR). Prin urmare, ele pot conține erori asociate cu algoritmii de recunoaștere imperfect. Nu există astfel de erori în fișierele PDF ale disertațiilor și rezumatelor pe care le livrăm.

MUNCĂ DE CALIFICARE DE LICENZIAT
„Utilizarea cristaloscopiei pentru a identifica leucemie acutăîn șoareci AKR"

Introducere................................................. ...................................................... 3
Capitolul I. Revizuirea literaturii............................................. ....... .............. 3
1.1 Cristalografia fluidelor biologice................................................. 6
1.1.1 Concepte de bază ale stării cristaline a materiei.......... 6
1.1.2 Procesele de cristalizare în sistemele vii.................................................. 8
1.1.3 Caracteristicile cristalografice ale fluidelor biologice... 8
1.1.4 Morfologia fluidelor biologice.................................................. 8
1.2 Metode de cercetare cristalografică.................................. 12
1.2.1 Condiții preliminare pentru studierea fenomenului de cristalizare a fluidelor biologice............................................. ............. ............. 12
1.2.2 Starea actuală a ideilor despre metodele de cercetare cristalografică....................................... ............................................. 18
1.2.2.1 Caracteristicile generale ale tehnicii de tesiocristalloscopie a substraturilor biologice............................................. ............................. 25
2. Obiecte, scopuri și metode de cercetare............................................. ........... 26
2.1 Scopuri, obiective și etape ale studiului........................................... ........... 26
2.2 Pregătirea vaselor și a zonei de lucru.................................................. ...... 28
2.3 Metode de cercetare aplicată............................................. ...... 28
2.3.1 Procedura de testare a tesiocristaloscopiei............................................ 28
2.4 Prelucrarea datelor statistice.............................................. ...... 43
3. Rezultatele cercetării.................................................. ........... ........ 44
3.1 Morfologia urinei șoarecilor sănătoși și infectați artificial cu leucemie........................................... ........................................................... 44
3.2 Principalele criterii de apreciere a faciesului tesigrafic al urinei la șoareci în condiții normale și cu patologie (leucemie)............................ ....... .......... 46
3.3 Șoareci de linie AKR............................................. ...... .............. 49
3.4.Dinamica dezvoltării leucemiei........................................... ...... ... 50
3.5 Concluzii.............................................................. ... .................................
Lista literaturii utilizate.................................................. ..... 52

Introducere

Biotehnologiile moderne sunt o sinteză a realizărilor științifice din diverse domenii ale științelor naturale: medicină, biologie, matematică, fizică, chimie și alte științe. Zh. Alferov, laureat al Premiului Nobel pentru fizică, a remarcat că în ultimii ani, studenții săi au obținut rezultate deosebit de semnificative în lucrările desfășurate la intersecția dintre fizică și biologie, fizică și medicină. Un exemplu în acest sens este abordarea rezolvării celei mai presante probleme sociale moderne - diagnosticul și tratamentul eficient al bolilor maligne. În fiecare an, multe milioane de copii și persoane în vârstă, precum și animale de fermă de mare valoare, mor de leucemie. Peste tot în lume, tehnologiile pentru dezvoltarea și tratamentul leucemiei la om sunt studiate pe animale dintr-o linie genetică strict definită. De mai bine de 10 ani, Instituția Federală de Stat „KNIIG și PC FMBA din Rusia” efectuează cercetări privind dezvoltarea leucemiei continue folosind modelul de șoarece ACR. În ciuda progreselor realizate în domeniul leucemiei experimentale și clinice, problema patologiei descrise este foarte departe de a fi rezolvată definitiv.
În ultimii 40 de ani s-a dezvoltat activ o nouă direcție de diagnostic - cristaloscopia, bazată pe determinarea compoziției calitative a fluidelor biologice prin formarea structurilor cristaline în ele.
Prima experiență aplicare clinică cristalografia datează de la începutul anilor 60 ai secolului trecut. Inițial, majoritatea cercetătorilor au folosit metoda tesigrafică. În 1964, Daems a efectuat un studiu al cristalogramelor de sânge ale pacienților cu hipertrofie de prostată și carcinom. J.Leal și B.Finlayson (1977) au stabilit caracteristicile formării cristalelor de urină.

A.A. Kozhinova și L.S. Maslennikova (1968). V.Ya. Neretin și V.I. Kiryakov (1977) a folosit această metodă pentru a studia lichidul cefalorahidian al pacienților cu diferite boli ale creierului și măduvei spinării. În lucrarea lui D.B. Kalikshtein și colab.(1981), a fost studiată imaginea tezigrafică a urinei pacienților cu diferite boli de rinichi. V.V.Usin (1995) a studiat modificările cristalografice în lichidul cefalorahidian și saliva la pacienții cu sindroame dureroase neurogenice cronice ale capului și feței. În plus, tesigrafia a fost folosită în scopuri de diagnostic și prognostic în pediatrie, ginecologie, gastroenterologie și alte domenii ale medicinei.
În prezent, analiza cristaloscopică este folosită pentru a studia aproape toate fluidele biologice (sânge, urină, saliva, lichid cefalorahidian, bilă, secreții nazale etc.). Structurile cristaline ale fluidelor biologice conțin cele mai importante informații despre starea unui anumit organ, a unui sistem separat al corpului și a corpului în ansamblu.
În prezent, interesul oamenilor de știință în utilizarea metodei de cristalografie a fluidelor biologice în medicină rămâne ridicat. Astfel, au fost dezvoltate și puse în practică numeroase tehnici de diagnostic pentru a facilita studiul unei game largi de caracteristici ale biosubstratelor (teste biochimice, imunologice, morfologice, biofizice etc.). Punctul slab al majorității metodelor enumerate este costul lor ridicat datorită implicării de reactivi, echipamente scumpe și pregătirea personalului înalt calificat. Toate cele de mai sus necesită întreținerea și întreținerea unui număr suficient de mare de servicii de asistență.
Cu toate acestea, condițiile economice în schimbare necesită dezvoltarea și implementarea unor metode extrem de eficiente și rentabile pentru diagnosticarea leucemiei.
Metoda cristaloscopică are o sensibilitate diagnostică semnificativă și, prin urmare, și-a găsit o aplicare largă, mai întâi în practica analizei chimice criminalistice, iar apoi în medicină. A făcut posibilă extinderea capacităților de diagnostic diferențial în determinarea naturii procesului patologic (alergic, inflamator etc.), în identificarea prezenței anemiei, edemului, intoxicației și a gradului de severitate a acestuia. Folosind metoda de cristalografie a biopolimerilor, este posibilă determinarea patologiei diverse organe. Deoarece această tehnică implică combinarea particulelor de material cu o soluție de formare a cristalelor, natura procesului malign poate fi judecată din modelul format al cristalelor (Kontorschikova K.N. și colab. (2002-2012).
Scopul acestei teze a fost dezvoltarea unei metode de analiză cristaloscopică a urinei șoarecilor AKR pentru diagnosticarea leucemiei acute.

1 Revizuire a literaturii.
1.1 Cristalografia fluidelor biologice

Termenul „cristal” provine din cuvântul grecesc „krystallos”, care înseamnă „gheață”. Într-un cristal, atomii și moleculele formează o structură ordonată (rețeaua cristalină). Cristalele sunt importante atât în ​​natura neînsuflețită, cât și în cea vie, care a stat la baza identificării unei ramuri independente - cristalografia. Cristalografia este știința structurii și proprietăților fizice ale monocristalelor și agregatelor cristaline, fenomene care au loc într-un mediu cristalin sub influența proprietăților interne sau a influențelor externe.

1.1.1 Concepte de bază ale stării cristaline a materiei

Cristalele se formează din vapori, soluție, topitură, substanță amorfă sau dintr-o substanță aflată în altă stare fizică. Cristalizarea începe în anumite condiții externe, de exemplu, suprarăcirea lichidului, suprasaturarea aburului, deshidratarea soluției, când multe cristale mici apar treptat în jurul centrelor de cristalizare. Un cristal crește prin adăugarea de atomi sau molecule dintr-un lichid sau vapori.
Există echilibru și forme reale de cristale. Forma de echilibru a cristalelor se realizează numai în condiții de echilibru, adică. cu un proces de cristalizare infinit lent.
Din moment ce parametrii Mediul extern eterogene în timp și spațiu, în structura cristalină apar inevitabil diverse defecte. Astfel, formele reale (forțate) ale cristalelor reflectă nu numai simetria cristalului, ci și influența condițiilor externe de creștere (concentrația diferitelor substanțe în mediul de formare a cristalului, temperatura, presiunea etc.) asupra oricăror modificări ale la care cristalele reacţionează foarte sensibil. Unele forme de cristal sunt prezentate în Fig. 1.

A b V

G d e

și h Și

Fig. 1 Forme de cristale în diverse fluide biologice: a, b - filiforme, c, d, e, f, g - formațiuni de sferulită cu ace localizate radial; dendrită z-suprimată; și – dendrite ramificate.
Cel mai natural și tehnic materiale dure sunt policristale, cristalele simple se numesc cristale simple. Când metalele și sărurile cristalizează, se formează adesea cristale asemănătoare copacilor - dendrite. În timpul cristalizării din unul sau mai mulți centri se formează sferulite, formate din ace cristaline localizate radial.

1.1.2 Procese de cristalizare în sistemele vii

Toate mediile biologice ale corpului animal și uman au o structură moleculară ordonată specifică, deoarece sunt cristale lichide liotrope. Un organism viu este un sistem complex, foarte dinamic, în care au loc constant procese de interacțiune a multor componente structurale între ele și mediul. În condiții normale, fluctuațiile parametrilor biofizici ai corpului sunt limitate la limite relativ înguste. Cu toate acestea, în anumite situatii pot merge dincolo limite normale pentru destul o perioadă lungă. În unele cazuri, acest lucru se explică prin adaptarea organismului la noi condiții neobișnuite de existență, în altele printr-o perturbare profundă a homeostaziei cu decompensare persistentă. Aceste procese complexe, foarte dinamice, se reflectă în mod clar în caracteristicile structurilor cristaline ale diferitelor fluide biologice sau biopolimeri.

1.1.3 Caracteristicile cristalografice ale fluidelor biologice

Se știe că tulburările metabolice, ca o componentă a patogenezei diverse boli, duce la o schimbare compoziție chimicăși proprietățile fizico-chimice ale fluidelor biologice (denumite în continuare biofluide). Procesele dinamice complexe care apar în biofluide se reflectă în caracteristicile morfologice ale structurilor formate în timpul cristalizării probelor de biofluide. În prezent, metode originale de diagnostic bazate pe analiza structurală a fluidelor biologice au fost dezvoltate și sunt utilizate în practica clinică. Structurile fazei solide a fluidelor biologice sunt formate din molecule și, în principal, microagregate de substanțe organice și minerale dizolvate în fluidul biologic. Caracteristicile specifice ale structurilor sunt determinate de proprietățile fizico-chimice generale ale biofluidului, de compoziția cantitativă și calitativă a moleculelor acestor substanțe și de capacitatea acestora de a stabili legături chimice intramoleculare și intermoleculare. Ca urmare, structura fluidelor biologice poartă informații integrale despre starea de metabolism a organelor subiectului spălate de biofluid și despre homeostazia corpului în ansamblu.
Morfologia fluidelor biologice este dovedită direcție științificăîn domeniul medicinei, medicinei veterinare și altor științe. Formarea structurii unui biofluid în timpul cristalizării are modele clare.
Poluarea mediului cu diverse toxine, printre care metalele grele (HM) ocupă un loc aparte, duce la o creștere semnificativă a probabilității apariției anumitor boli, inclusiv cancerul. Combinația dintre analiza morfologică a fluidului corporal cu analiza elementară locală poate servi ca un nou instrument analitic pentru cercetarea în domeniul diagnosticului precoce al cancerului.
Progresele în îmbunătățirea analizei microchimice, a opticii cristalului și a tesigrafiei au oferit baza studierii structurilor cristaline ale fluidelor biologice ale oamenilor și animalelor în diferite patologii. Procesele cristalografice din fluidele biologice atrag o atenție tot mai mare din partea oamenilor de știință. Cercetările efectuate în ultimele decenii s-au concentrat pe identificarea relației dintre caracteristicile cristalografice ale biofluidelor și dezvoltarea proceselor patologice în organism; sau își pun sarcina de a studia influența influențelor externe asupra formării structurilor cristaline în biofluide (Skopinov S.A. et al. 1997).
Astfel, într-un fluid biologic se poate observa un complex de rearanjamente structurale de la soluție la cristale. Analiza cristalografică face posibilă detectarea modificărilor patologice ale rețelei cristaline la nivel supramolecular. Aceste modificări pot servi ca un criteriu de diagnostic precoce pentru dezvoltarea unui proces patologic.

1.1.4. Morfologia fluidelor biologice

Studiul tabloului morfologic al diferitelor biofluide este o direcție binecunoscută în știința naturii, căreia oamenii de știință din multe discipline au început să-i acorde o atenție deosebită în ultimii ani. În prezent, a fost dezvoltată o metodă pentru obținerea de informații despre starea corpului, funcțiile organelor și țesuturilor individuale în stadiul de exprimare. manifestari clinice boli și în stadiul pre-simptomatic, adică la nivelul dezvoltării unui proces patologic de o natură sau alta (inflamator, oncologic, litiaza, hipoxic-ischemic, sclerotic etc.). Metoda de cristalografie a diferiților biopolimeri este simplă în tehnica sa și înregistrarea rezultatelor. Cercetat tablou morfologic picătură deshidratată (uscata) de lichid biologic, care este o secțiune subțire standard. De exemplu, la examinarea unei picături de urină, se poate determina activitatea procesului de formare a pietrelor în țesutul renal și compoziția unei pietre la rinichi existente sau în curs de dezvoltare (urat, oxalat de calciu, fosfat de calciu); curs acut sau cronic de candidoză a sistemului genito-urinar, afectarea hipoxic-ischemică a țesutului renal și severitatea procesului (nefropatie hipoxică, nefrită interstițială, insuficiență renală acută, infarct renal); infecție bacteriană (fără a determina tipul de agent patogen).
O picătură de lichid biologic poate spune cu ce este bolnavă o persoană și cu ce e vârsta biologică. O picătură de lichid uscat este plasată pe un pahar de microscop real, iar pe monitor apare o imagine mărită de multe ori. "Într-o picătură de salivă luată pe stomacul gol, sunt vizibile fisuri triradiate fracționate, aceasta este o dovadă de stagnare. Și într-o picătură luată după micul dejun, nu există crăpături, ceea ce înseamnă că canalele glandelor salivare sunt în ordine. Dar aciditatea sucului gastric este ușor redusă”, acum există o picătură pe serul de sânge de pe ecran, arată ca un buton cu o margine și este acoperit cu fisuri radiale, structura fisurilor este supusă unei analize atente: modelul la periferie sugerează că tensiunea arterială a pacientului crește uneori din cauza vasospasmului.
Profesorul S.N. Shatokhina explică că organismul poate fi împărțit în două sisteme: celular și necelular. Întreaga lume studiază celulele în primul rând, cu toate acestea, fluidele biologice care leagă celulele între ele poartă o mulțime de informații despre funcțiile lor vitale. Când o picătură de biofluid se usucă, informațiile codificate în ea devin vizibile. „În timpul tranziției la o stare stabilă, puterea legăturilor crește cu două ordine de mărime”, explică cercetătorii. „După îndepărtarea apei, rămâne o peliculă, pe care un model al aranjamentului spațial al elementelor care erau anterior în se înregistrează o stare dizolvată”, boala este întotdeauna însoțită de acumularea unor substanțe chimice, care modifică structura, se rupe simetria, iar aceleași „limbi”, „frunze” sau „plăci” apar pe care profesorul S.N. Shatokhina a fost găsită la pacient. Și pentru a găsi aceste modele, cercetătorii au dezvoltat o metodă specială de uscare a picăturilor. O picătură de salivă vă poate spune multe. Reflectă cariile și parodontoza. Și, de asemenea, de exemplu, otita purulentă, care duce la apariția unor forme lamelare într-o picătură de salivă. Analizând o picătură de suc gastric, specialiștii identifică gastritele și ulcerele cronice; lichid articular - artroza; în cele din urmă, lacrimi - glaucom, cataractă, procese inflamatorii la nivelul retinei.
Astăzi, oamenii de știință lucrează îndeaproape cu clinicienii, ajutându-i să vadă patologii ascunse și să perfecționeze metodele de tratament. Analizând biofluidele, cercetătorii pot determina, de asemenea, vârsta biologică adevărată a unei persoane. Este produs de structurile lamelare din serul sanguin, care sunt de natură chimică a colesterolului. Din ea se va forma în viitor plăci de ateroscleroză pe vase. Acesta este unul dintre cei mai importanți „markeri ai îmbătrânirii”. Oamenii de știință evaluează, de asemenea, potențialul reciproc al sănătății; pentru aceasta, sângele dintr-o eprubetă este iradiat cu un câmp electromagnetic sau cu laser - după o astfel de expunere, legăturile intermoleculare sunt distruse, prin urmare, atunci când un astfel de sânge se usucă, modelul filmului va fi diferit; în o persoană sănătoasă, este nevoie de patru ore pentru a restabili legăturile după iradiere. Dacă durează o zi sau trei, ar trebui să-ți faci griji. Cercetătorii cred că folosind această metodă este posibil să se determine dacă o persoană este capabilă să lucreze în condiții extreme

1.2 Metode de cercetare cristalografică.
1.2.1 Condiții preliminare pentru studierea fenomenului de cristalizare a fluidelor biologice

În ultimul sfert al secolului trecut, a existat un interes semnificativ din partea comunității științifice pentru metodele de cercetare cristalografică, studiate în ceea ce privește aplicarea lor practică ca abordare alternativă în diagnosticul clinic. Ele permit o evaluare integrală a capacității de cristalizare a diferitelor substraturi biologice. În ultimii ani, a început să se dezvolte activ o nouă direcție de diagnostic - cristalografia clinică, bazată pe determinarea compoziției calitative a unui lichid prin formarea structurilor cristaline.
Metoda determinării calitative a substanțelor chimice prin caracteristicile lor cristalografice a fost propusă pentru prima dată de studentul M.V. Lomonosov - T.E. Lovitz. În 1804, acesta din urmă a descris două metode de analiză calitativă a substanțelor - metoda „depunerilor de sare intemperii” și o metodă bazată pe modificarea formării normale a cristalelor prin introducerea unui alt ingredient în soluția de substanță cristalizantă, punând astfel bazele pentru două domenii moderne de cristalografie:
1) cristalografia lichidelor native - o metodă bazată pe determinarea compoziției calitative a unui lichid din cristalele pe care le formează în timpul evaporării;
2) tezigrafie - o metodă bazată pe adăugarea unei soluții standard de formare a cristalelor la lichidul de testare și analizarea modificărilor cristalelor soluției standard în prezența lichidului de testare.
Prima experiență de aplicare clinică a cristalografiei datează de la începutul anilor 60 ai secolului trecut. Inițial, majoritatea cercetătorilor au folosit metoda tesigrafică. În 1964, Daems a efectuat un studiu al cristalogramelor de sânge ale pacienților cu hipertrofie de prostată și carcinom. Leal J. și Finlayson B. (1977) au stabilit caracteristicile formării cristalelor în urină.
Utilizarea metodelor de cercetare cristalografică (CRI) în medicina casnică a fost raportată pentru prima dată în lucrare
Kozhinova A.A. și Maslennikova L.S. (1968). Neretin V.Ya. și Kiryakov V.I. (1977) această metodă a fost folosită pentru a studia lichidul cefalorahidian al pacienților cu diferite boli ale creierului și măduvei spinării. În lucrarea lui D.B. Kalikshtein și colab.(1981), a fost studiată imaginea tezigrafică a urinei pacienților cu diferite boli de rinichi. Usin V.V. (1995) au studiat modificările cristalografice în lichidul cefalorahidian și saliva la pacienții cu sindroame dureroase cronice neurogenice ale capului și feței. În plus, tesigrafia a fost folosită în scopuri de diagnostic și prognostic în pediatrie, ginecologie, gastroenterologie și alte domenii ale medicinei.
În prezent, analiza cristalografică este folosită pentru a studia aproape toate fluidele biologice (sânge, urină, saliva, lichid cefalorahidian, bilă, secreții nazale etc.). Structurile cristaline ale fluidelor biologice conțin cele mai importante informații despre starea organelor și țesuturilor corespunzătoare.
Analiza cristalografică a lichidului lacrimal (TF) pentru diagnosticul patologiei oftalmologice a fost utilizată pentru prima dată
Chentsova O.B. cu co-autori în 1985. Ei au propus o tehnică de tesigrafie a fluidului lacrimal - cristalografia cu adăugarea unei soluții alcoolice de clorură de cupru. Într-o eprubetă conică se pun 0,02 ml de lacrimi și se adaugă cu agitare constantă 0,1 ml soluție alcoolică de clorură de cupru 2%. Eprubeta este închisă cu un tampon de bumbac și lăsată să se stabilească la temperatura camerei. După 1 oră și 20 de minute, o picătură din soluția rezultată se aplică pe o lamă de sticlă, care este plasată într-un vas Petri într-un termostat la o temperatură de 25°C timp de două ore. După perioada de incubație, se efectuează evaluarea macro și microscopică a rezultatelor.
Caracteristicile imaginii tezigrafice au fost observate la pacienții cu boli inflamatorii, distrofice și tumorale ale ochilor și orbitei. Potrivit lui Chentsova O.B. și colab., modelul cristalografic (CPC) al fluidului lacrimal la adulți și copii este în mod normal cristale cilindrice transparente, lungi, puțin localizate, care sunt asamblate într-un model geometric regulat, cel mai adesea sub formă de triunghi. Chentsova O.B. et al. (1989) au efectuat CGI a SF pentru diagnosticul diferenţial al bolilor orbitale. Autorii au identificat diferențe calitative față de normă în preparatele lacrimale la pacienții cu oftalmopatie endocrină, boli inflamatorii orbitale și neoplasme.
De atunci, examinarea cristalografică a fost folosită de aceștia și de alți autori în diagnosticul diferitelor boli oculare.
Tyurikov Yu.A., Pokoeva V.A. (1992) au folosit tehnica tesigrafiei cu adăugarea unei soluții apoase saturate de glicină și expunere zilnică la temperatura camerei. S-au evidențiat modificări caracteristice în cristalogramele pacienților cu neoplasme intraoculare și orbitale.
O serie de autori au folosit tezigrafia SG nu numai pentru diagnostic, ci și pentru monitorizarea dinamică a GC al SG al ochiului afectat (Kokarev V.Yu. și colab., 1990; Somov E.E., Brzhesky V.V., 1994; E.I. Ustinova și colab., 1990; al. (1996) au recomandat metoda de examinare cristalografică a SF ca test suplimentar de laborator pentru diagnosticul diferenţial şi clarificarea fazei de activitate a procesului tuberculozei.
Chukhman T.P. (1999) au îmbunătățit tehnica tesigrafiei SG, propunând înlocuirea tasării pe termen lung a unui amestec de lacrimi și soluție formatoare de cristal cu centrifugare, ceea ce a redus timpul de cercetare. De asemenea, a fost efectuat un CGI al SG pentru diferite boli inflamatorii oculare și identificat tipuri caracteristice cristale, care au făcut posibilă identificarea în timp util a complicațiilor chiar și în stadiul preclinic. În plus, autorul a studiat influența diverșilor factori externi (temperatura de uscare a preparatelor, umiditatea), precum și metodele de colectare a lacrimilor, asupra cristalogenezei.
Interesul oamenilor de știință pentru utilizarea metodei de tesigrafie a fluidelor biologice în medicină rămâne ridicat până în prezent. Cu toate acestea, tesigrafia s-a dovedit a fi o tehnică destul de intensivă în muncă, necesitând utilizarea de reactivi suplimentari și dificil de interpretat rezultatele (Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 1997). În plus, nu sunt cunoscute modelele procesului de cristalizare pe care se bazează metoda tesigrafiei. Căutarea unor metode mai simple și mai accesibile de cercetare cristalografică a dus la apariția unui număr de lucrări dedicate cristalografiei preparatelor native de biofluide.
Ca urmare, este nevoie de a dezvolta o metodă expresă care ar putea fi utilizată ca test primar în diagnosticul diferitelor boli. Mai mult, cerințele necesare pentru selecția sa sunt un grad suficient de acuratețe și posibilitatea utilizării pe scară largă fără a investi resurse materiale semnificative (Menshikov V.V., 1988; Nazarenko G.I., Kishkun A.A., 2000; Zelenin V.A., Bulychev V. F., Steklova G.P. et al., 2004).
De această problemă s-au interesat specialiști din diverse domenii ale medicinei. Consecința acestui lucru a fost dezvoltarea rapidă a diagnosticului de salivă, care, pe de o parte, a fost non-invazivă, pe de altă parte, a făcut posibilă obținerea rapidă a rezultatelor preliminare (Borovsky E.V., Leontyev V.K., 1991; Sukmansky O.I., 1991; Komarova L. G., Alekseeva O. P., 1994; Antropova I. P., Gabinsky Ya. L., 1997; Butaev M. T., 1998; Grigoriev I. V., Chirkin A. A., 1998; Bulgakova V. A., 1998; Eric, Korv I. G. G., 1999. I.V., 1999; Denisov A.B., 2000, 2001;).
Metodele de determinare calitativă a compușilor chimici prin capacitatea lor de a cristaliza au fost propuse pentru prima dată de T. E. Lovitz, un student al lui M. V. Lomonosov, încă din anii 1804-1805. În lucrările sale, el a descris două teste originale pentru analiza calitativă a structurii substanțelor studiate. Aceasta este „metoda de depunere a sării la intemperii” (depuneri cristaline), precum și reacții microcristaline. Prima dintre cele de mai sus a stat la baza metodei de determinare calitativă a medicamentelor dezvoltată mult mai târziu (Knizhko P. O., 1956; Bubon N. T., Puzyrevsky K. Ya., 1965; Nikolskaya M. N., Gandel V. G. , Popkov V. A., 1965; Lobanov V. I., 1965; 1966). Tehnica reacțiilor microcristaline și-a găsit acum aplicație în medicina legală (Belova A.V., 1960; Semenova T.D., 1972; Taher M.A. Assad, 1995).
În contextul dezvoltării ideilor despre cristalizarea fluidelor biologice umane, problema aplicabilității acesteia în diagnosticul diferitelor stări patologice devine relevantă (Kokueva O.V., Savina L.V., Lee A.M., 2000; Zubeeva G.N., Motyleva I.M. , Potekhina Yu. P., 2001; Shabalin V. N., Shatokhina S. N., 2001; Vorobyov A. V., Vorobyova V. A., Neshtakova N. L., 2002; Alekseeva O. P., Vorobyov A. V., Volobyov A. V., N. G. Muova, 2003. şi colab., 2003; Rapis E. G., 2003; Anaev E. Kh., Shatokhina S. N. ., Chuchalin A.G., 2004).
În acest sens, metodele de cercetare cristaloscopică, care vizează descifrarea informațiilor metabolice ascunse în medii calitative și compoziţia cantitativă medii biologice.
În plus, o schemă de analiză unificată poate contribui la unificarea și simplificarea studiilor cristalografice. Acest lucru va fi util atât în ​​diagnosticul diferențial, cât și la efectuarea unui test de orientare.
Un factor important în standardizarea rezultatelor cristalizării diagnostice a substraturilor biologice ale corpului poate fi o formă unificată de concluzie asupra unui test cristaloscopic, inclusiv informații despre modificări calitative și cantitative în compoziția faciesului pacientului în raport cu faciesul practic sănătos. indivizi (modificări ale numărului și dimensiunii structurilor, apariția celor patologice pentru o anumită formațiune biofluid etc.).

1.2.2 Starea actuală a ideilor despre cristalografie
metode de cercetare

Metode de cercetare cristalografică– un set de abordări metodologice pentru extragerea de informații despre metabolismul și homeostazia organismului și/sau părților acestuia, bazate pe fenomenul de formare cristalină liberă sau inițiată de substanțe de bază de diferite compoziții chimice a materialului biologic lichid uscat sau lichid cu interpretare ulterioară a rezultatelor cristalogenezei.
În ultimii treizeci de ani, s-au format numeroase abordări metodologice pentru realizarea cristaloscopiei diagnostice, cu toate acestea, trebuie remarcat că majoritatea dintre ele sunt în esență doar o modificare a condițiilor de desfășurare a procesului de deshidratare, în timp ce pare posibil să se distingă doar trei variante de principiu: cristalizare liberă, în cazul în care fluidul biologic analizat este direct uscat; cristalogeneza inițiată, când se vizualizează rezultatul deshidratării sistemului „mediu biologic - substanță formatoare de cristal de bază”, în principal pe baza studiului genezei structurii acestuia din urmă; cristalizarea parțială (metoda compozitelor model) este un set de metode pentru recrearea componentelor individuale ale imaginii cristaloscopice a unui anumit substrat biologic și, prin urmare, este semnificativă în primul rând pentru cercetarea științifică.
În general, următoarele metode au fost propuse până în prezent în cristaloscopia modernă:
1) Cristaloscopia clasică (Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. și colab., 1990; Savina L.V., 1992, 1999; Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2001; Alekseeva O.P.0.) este una dintre cele mai comune opțiuni. efectuarea unui test de deshidratare, a cărui esență, așa cum sa indicat deja, este cristalizarea directă a fluidelor biologice. Pregătirea preparatelor poate fi efectuată atât în ​​condiții de cameră, cât și într-un termostat (37-400C), cu toate acestea, conform numeroaselor literaturi, durata de preparare a micropreparatelor din medii biologice este de 1-2 zile, ceea ce în mod evident nu îndeplinește cerințele. pentru teste rapide. În acest sens, sunt necesare ajustări semnificative ale condițiilor de uscare pentru a optimiza timpul alocat pregătirii microspecimenului.
Trebuie remarcat faptul că această abordare cristaloscopică permite evaluarea proprietăților de formare a cristalelor ale unui biofluid și, prin urmare, nu numai obținerea faciesului semnificativ din punct de vedere diagnostic (probe cristalizate), dar și stabilirea prezenței componentelor individuale ale substratului analizat (Savina). L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V. Yu. și colab., 2003). Această problemă nu a fost rezolvată în mod adecvat în literatura de specialitate, dar este importantă pentru identificarea practică a incluziunilor patologice în mediile biologice, biologie și medicină - studiul aspectelor patogenetice ale patologiei umane și animale, precum și selecția și evaluarea rezonabilă a eficacitatea terapiei medicamentoase și non-medicamentale (Buiko A. S. , Tsykalo A. L., Terentyeva L. S. și colab., 1977; Erichev I. V., Korotko G. G., Reshetova I. V., 1999; Zaichik A. Sh., Churilov L. O P., Vorekov L. P. A. V., 2003; Baydaulet I. O., 2003). Acest lucru necesită studiul caracteristicilor cristalogenezei componentelor fluidelor biologice, inclusiv prin modelarea parțială a deshidratării. Anumite moduri de rezolvare a acestei probleme au fost propuse de L.V. Savina et al. (2003). Cu toată semnificația acestei abordări metodologice, trebuie recunoscut că în acest caz unul dintre cei mai importanți factori care determină natura cristalogenezei unui biosubstrat nu este luat în considerare - prezența interacțiunilor intermoleculare între componentele unui biofluid care diferă. în structura chimică, care, la rândul său, joacă un rol semnificativ în formarea imaginilor cristaloscopice definitive, în special determinând numărul și diametrul „zonelor primare” ale faciesului, transformate în timpul procesului de deshidratare în curele de cristalizare (Koledintsev M.N. , 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maychuk N.V., 2002; Koledintsev M.N., Maychuk N.V., 2002).
Încercări similare de a simula formarea cristalelor au fost făcute de G. G. Korotko (2000), despre care vor fi discutate în continuare.
2) Tesigrafie (Nefedova N. B., Tsyvenkova L. A., 1985; Moroz L. A., Kalikshtein D. B., 1986; Gugutishvili T. G., Simonishvili L. M., 1990; Kidalov V. N. ., se referă, de asemenea, la Khadartse, N. 4 Ashin A., Khadartse, N.4). metodele predominante și cele mai comune de efectuarea unui test cristaloscopic si reprezinta o introducere suplimentara a diverselor substante chimice in biofluidul uscat al corpului uman in vederea initierii proceselor de formare a cristalelor. În acest scop, se utilizează o gamă largă de agenți formatori de cristale (NaCl, CaCl2, MgCl2 și alții), majoritatea având proprietăți de formare a complexului și concentrații la diverși autori variază considerabil.
În laboratoarele care utilizează această metodă cristalografică, implementarea ei se realizează folosind tesigrafia clasică, adică. luând în considerare exclusiv rezultatul deshidratării unui sistem format dintr-un biomaterial și o substanță cristalină de bază ca probă independentă, ceea ce complică semnificativ interpretarea informațiilor obținute din cauza dificultăților obiective de a compara probele obținute în diferite condiții și starea funcțională diferită a corpului subiectelor examinate. În acest sens, o tesigramă generată în conformitate cu abordarea descrisă mai sus necesită compararea rezultatului obținut cu „modele” preexistente (abordare „fotografică”) (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2002; Baydaulet I.O., 2003; Beloglazov V. G. , Atkov E. L., Fedorov A. A. și colab., 2003; Volosnikova N. N., Muzlaev G. G., Savina L. V. și colab., 2003; Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004 sau a parametrului G.N. 1994; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V., 2002), cu toate acestea, acest factor reduce definitiv și semnificativ conținutul informațional și fiabilitatea diagnosticului tesigrafic.
Pare important de subliniat că în prezent nu există o schemă-algoritm general acceptată pentru descrierea, analiza și interpretarea faciesului tesigrafic, la fel cum nu există o metodă unificată de obținere a acestuia.
Există rapoarte izolate cu privire la utilizarea unui eșantion de control de substanțe de bază (Tarusinov G. A., 1994), dar din motive necunoscute utilizarea sa este puternic limitată (Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2003; Martusevich A. K., 2004).
3) Deshidratarea profilului (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 1999). Constă în aplicarea fluidelor biologice pe o lamă de sticlă pretratată cu o soluție de lecitină de o anumită concentrație. Cu ajutorul lecitinei pare posibilă, potrivit autorilor, modificarea afinității cristalelor pentru bază și, în consecință, transformarea caracteristicilor termodinamice ale biosubstratului deshidratat.
4) Cristaloscopia în vid (Savina L.V., 1999) presupune prepararea (uscarea) preparatelor în condiţii de vid. Acest lucru asigură izolarea probei deshidratate de mediul extern, creând un sistem relativ închis în care partea lichidă a mediului biologic și procesele de biocristalizare sunt eliminate direct.
5) Cristalizarea fluidelor biologice într-o celulă închisă (Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997). Izolarea probei de formare din mediul extern este asigurată, similară cu cristaloscopia în vid, dar din punct de vedere tehnic această metodă este mai convenabilă pentru utilizare practică, deoarece nu necesită crearea condițiilor de vid, ci doar utilizarea unei celule închise, în care este posibil să se efectueze analize microscopice directe. Autorii modificării au folosit centrifugarea preliminară a biomaterialului.
6) Cristaloscopia cu centură este o metodă de cercetare cristalografică bazată pe studiul benzilor de cristal și al formațiunilor cristaline individuale (Koledintsev M.N., 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V., 2002; Koledintsev M.N.0V., Maychuk N.02). Baza fizico-chimică a metodei este eterogenitatea compoziției componentelor fluidelor biologice în funcție de masele moleculare ale substanțelor care sunt elemente ale unui mediu biologic dat și, în consecință, capacitatea lor diferită de a se deplasa prin facies în procesul de deshidratarea treptată a probei și formarea faciesului. Acest lucru duce la formarea uneia sau (mult mai des) a mai multor curele de cristalizare, a căror înregistrare permite să se judece o anumită caracteristică a unui fluid biologic (M. N. Koledintsev, D. F. Nechaev, N. V. Maichuk, 2002).
7) Metoda deshidratării în formă de pană (V.N. Shabalin, S.N. Shatokhina, 2001-2005). O metodă de deshidratare a unei picături de fluid biologic plasată pe un plan transparent. Picătura are o formă de pană în secțiune transversală, ceea ce creează condiții pentru o rată de deshidratare neuniformă în direcția radială. Aceasta determină mișcarea osmoforetică a substanțelor dizolvate în volumul picăturii deshidratate în conformitate cu parametrii fizico-chimici și formarea unor structuri clare, strict individualizate, corespunzătoare stării organismului din care a fost obținut lichidul studiat.
8) Microscopia de polarizare (Rapis E. G., 1976; Antropova I. P., Gabinsky Ya. L., 1997; Savina L. V., Pavlishchuk S. A., Samsygin V. Yu. et al., 2003) – o metodă de evaluare a rezultatelor testelor libere sau inițiate formarea unui fluid biologic în lumină polarizată, permițând identificarea unora Caracteristici suplimentare atât faciesul în ansamblu, cât și elementele sale structurale individuale, precum și caracterizează textura acestuia. Este o modificare universală a abordării vizualizării rezultatelor cristalogenezei și poate fi utilizată ca o completare la oricare dintre metodele cristalografice pentru studierea mediilor biologice.
9) Congregația substratului (G. G. Korotko, 2000) - o metodă cristalografică auxiliară care vă permite să simulați formarea de cristale a componentelor individuale care sunt componente ale substraturilor biologice (lipide, proteine, polizaharide). În acest caz, în comparație cu metoda „compozitelor model”, se realizează o aproximare mai mare a compoziției reale a mediului biologic în ceea ce privește sortimentul, dar nu în raportul exact al componentelor, totuși, este posibil să se țină cont de modificări. în biofluid în principalele sale elemente biochimice.
10) Termografia cu cristale lichide (Buiko A.S., Tsykalo A.L., Terentyeva L.S. et al., 1977; Shkromida M.I., Pospishin Yu.A., 1977) - o tehnică promițătoare pentru cercetarea cristalografică, un punct fundamental care este utilizarea cristalului lichid colesteric (interval de temperatură de topire 33,5-38,20C sau 36,8-41,20C) acoperiri ale suprafețelor studiate cu sisteme cu pelargoleat de colesteril, oleat de colesteril etc. În acest caz, pielea este folosită ca „substrat”, pe care se aplică compoziția. Interpretarea transformării stării cristalelor lichide este evaluată cu ajutorul unui spectrofotometru specializat.
Capacitățile de diagnosticare destul de largi ale acestei abordări metodologice nu sunt în prezent utilizate practic, în ciuda promisiunii sale evidente, simplității și vitezei de implementare.
11) Metoda de transfer de informații energetice de la fluidele biologice la un purtător (Vorobiev A.V., Vorobyova V.A., Neshtakova N.L. și colab., 2002) constă în transferul de informații din mediul biologic la „mazăre pură de zahăr din lapte”, apoi acestea sunt combinate pe un lamă de sticlă cu 0,1 ml de substanță de bază (soluție apoasă 5% de sulfat de cupru). Pregătirea microlamelor se efectuează într-o cameră întunecată timp de 24 de ore.Evaluarea se realizează prin analiza calitativă a probelor de cristalizat rezultate.
O astfel de varietate de opțiuni metodologice pentru efectuarea unui test bazat pe deshidratarea substraturilor biologice se datorează, posibil, faptului că utilizarea diferitelor abordări contribuie la o mai bună identificare a rezultatelor obținute (tabel). Extragerea informațiilor ascunse în totalitatea metaboliților, a relațiilor lor cantitative și calitative în biomateriale este una dintre cele mai semnificative și importante sarcini ale diagnosticului cristaloscopic. Din punctul de vedere al numeroși autori (Alekseeva V.I., 1965; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. și colab., 1990; Antropova I. P., Gabinsky L.,199; Plaksina G. V., Rimarchuk G. V., Butenko S. V. și colab., 1999; Shabalin V. N., Shatokhina S. N., 2001, 2004; Alekseeva O. P., Vorobyov A. V., 2003; Baydaulet I. O., L., 2000; 1999; 2003; Bystrevskaya A. A., Deev L. A., 2004; Zalessky M. G., Emmanuel V. L., Krasnova M. V., 2004; Kidalov V. N., Khadartsev A. A., Yakushina G. N., 2004; Gromova I. P., dezvăluirea rolului primar al schimbării metabolice în compoziția 2005), medii ale corpului uman și animal se acordă componentei calitative, ținând cont de relațiile deterministe dintre formațiunile individuale (natura cristalină și amorfă). Se acordă mult mai puțină atenție componentei cantitative, deși este un criteriu clar pentru obiectivitatea diferențelor observate.

1.2.2.1. Caracteristici generale ale tehnicii de tesiocristalloscopie a substraturilor biologice

Pe baza analizei informațiilor din literatura de specialitate prezentate mai sus, a fost propusă și o metodă integrativă de tesiocristalloscopie a substraturilor biologice, bazată pe implementarea simultană și paralelă a cristaloscopiei clasice și a tezigrafiei comparative, efectuate pe aceeași sticlă. Acest lucru face posibilă evaluarea atât a capacității unui fluid biologic de a cristaliza direct, cât și a potențialului său inițiator în raport cu substanța de bază formatoare de cristale specificată de cercetător (Tabelul 1).

Tabelul 1. Caracteristici comparative ale unor metode cristalografice

• partea experimentală

• 2.Obiecte, scopuri și metode de cercetare

• 2.1. Scopurile, obiectivele și etapele studiului.

• Scopul acestui studiu studiul morfologiei probelor de urină uscată de la șoareci sănătoși și șoareci cu leucemie limfoidă (LL).
• Pentru atingerea scopului conturat în lucrare s-au formulat următoarele: sarcini:
• 1. Studiați literatura modernă privind problemele cristalografiei biosubstratelor.
• 2. Stăpânește tehnica efectuării tesiocristaloscopiei biosubstratelor.
• 3. Evaluați natura formării cristalelor de urină la șoarecii sănătoși.
• 4. Pentru a stabili caracteristicile cristalogenezei inițiate în urina de șoarece cu LL.
• Lucrarea a fost realizată pe baza laboratorului de conservare a sângelui și a țesuturilor al Institutului de Cercetare Kirov de Hematologie și Transfuzie de Sânge.
• Etape de cercetare:

1. Pregătirea șoarecilor de laborator sănătoși din linia ACR pentru cercetare.
2. Inocularea formei limfoide de leucemie la șoarecii ACR.
3. Colectare de biosubstrat (urină) pentru cercetare la șoareci sănătoși și șoareci cu leucemie.
4. Prepararea de microspecime de urină de la șoareci sănătoși și șoareci cu leucemie.
5. Analiza tesigrafică a microspecimenelor uscate de urină de la șoareci sănătoși și șoareci cu leucemie.

• Subiectul studiului a fost „modelele” tezigrafice ale urinei la șoareci sănătoși și la șoareci cu leucemie.
• Obiectul acestui studiu experimental a fost urina a 10 șoareci sănătoși și a 10 șoareci cu leucemie.
• Ca substanță de bază pentru testul de tezigrafie, am folosit o soluție 10% de clorură de sodiu, care este un formator activ de cristale.
• În total, au fost obținute 20 de microspecime de urină, prelevate din lotul martor (șoareci sănătoși) și de la șoareci cu leucemie (grup experimental).
• Partea experimentală a lucrării a inclus studierea morfologiei mostrelor de urină uscată de la șoareci sănătoși cu leucemie.

2.2 Pregătirea vaselor și a zonei de lucru

Vasele folosite în lucrare (eprubete, pipete de măsurare, lame de sticlă) au fost spălate cu apă fierbinte folosind detergent, clătite mai întâi cu apă de la robinet, apoi cu apă distilată și uscate.
Sterilizarea vaselor învelite anterior în hârtie de ambalaj a fost efectuată într-o autoclavă la o temperatură de 120°C și o presiune de 1 atm timp de 25 de minute.
Lucrările în timpul colectării fluidului biologic au fost efectuate în laboratorul pentru animale (vivarium) al Instituției Federale de Stat „KNIIG și PK” din Roszdrav. Obținerea ulterioară a faciesului tesiocristalscopic de ser sanguin a fost efectuată în laboratorul de conservare a sângelui și a țesuturilor al Instituției Federale de Stat „KNIIG și PK” a Ministerului Sănătății din Rusia. Înainte de muncă, camera a fost iradiată cu o lampă de cuarț timp de 30 de minute. Masa de lucru a fost tratată cu alcool 70% înainte și după muncă.

2.3. Metode de cercetare utilizate

2.3.1 Procedura de testare tesiocristalscopică

Studiul proprietăților cristalo-optice ale biosubstratelor (ser de sânge) la șoareci sănătoși și leucemici a fost efectuat folosind metoda tesiocristaloscopie (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005; Martusevich A.K. și colab., 2000-2006).
Probele de material biologic (ser de sânge, urină, salivă, transpirație, lacrimi etc.) în volum de 0,3 ml se aplică pe o lamă de sticlă degresată, spălată și uscată în prealabil, care, așa cum am stabilit anterior, este optimă atât din punct de vedere al a suprafeței sticlei și din punct de vedere al numărului de structuri cristaline și amorfe care sunt supuse analizei ulterioare. Diferența dintre metoda tesiocristaloscopie este că 3 probe sunt aplicate pe sticla studiată (Fig. 2.1), dintre care prima (1) conține doar biomaterial, a doua (2) - un amestec de biofluid și formator de cristale (de bază). ) substanță, a treia (3 ) - controlul compusului formator de cristale. O soluție de NaCI 10% a fost utilizată ca substanță de bază.

Fig.2.1. Schema unui preparat preparat prin metoda tesiocristaloscopiei

Micropreparatul rezultat este uscat folosind o metodă modificată într-un curent de aer cald. In acest caz, pozitia orizontala a sticlei si directia corespunzatoare de curgere trebuie sa asigure deshidratarea probelor in aceleasi conditii, prevenind reunirea acestora. Apoi modelele cristaloscopice rezultate sunt analizate conform schemei tradiționale, separat pentru componentele cristalografice și tesigrafice.
Uscarea unei picături de substrat pe o suprafață umedă (sticlă) duce la formarea a 3 zone diferite: exterioare (marginale - apă, electroliți, compuși cu greutate moleculară mică); interne (centrale - proteine ​​concentrate cu molecule înalte, electroliți, compuși cu molecule scăzute) și intermediare, caracterizate prin cea mai mică concentrație de substanțe. Zona internă poate avea limite exprimate și neexprimate. Structurile cristaline și amorfe sunt adesea adiacente conturului exterior al limitei interioare.
Uscarea coloidului este însoțită de retragerea acestuia, creșterea concentrației de compuși cu molecule scăzute și formarea de structuri cristaline de diferite tipuri.
Prelucrarea statistică a rezultatelor obținute a fost efectuată în mediu Microsoft Excel XP folosind funcții încorporate.
Pentru a interpreta modelele cristaloscopice, am clasificat toate formațiunile cristaline și amorfe pe care le-am întâlnit (Tabelul 2.1, Fig. 2). În conformitate cu această clasificare, s-a efectuat evaluarea preparatelor pregătite pentru analiză folosind tehnica clasică de cristaloscopie. S-a realizat atât un studiu general al caracteristicilor cristaloscopice ale biofluidului, cât și al caracteristicilor comparative ale acestora.

Tabel 2.1 Structuri cristaline și amorfe întâlnite în analiza cristaloscopică „clasică” a biofluidelor

Notă: * - variază în cantitate (mic - în total ocupă mai puțin de 30% din suprafața câmpului vizual, cantitate moderată - în total ocupă 30-50% din suprafața câmpului vizual, număr mare - în total ocupă mai mult de 50% din zona câmpului vizual) și ca mărime (mic, mediu, mare, agregate).
Pe baza analizei a numeroase micropreparate de fluide biologice uscate, au fost identificate 5 clase de structuri cristaline (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005;), fiecare dintre acestea, la rândul lor, include formațiuni specifice (Tabelul 2.1). Pentru unii dintre ei, compoziția chimică a fost descifrată, ceea ce face posibilă, cu un anumit grad de aproximare, să se judece modificări ale caracteristicilor calitative și cantitative ale raporturilor componentelor din mediile biologice în cazul unui studiu dinamic al cristalului. proprietăţi de formare ale acestora din urmă.
O categorie separată este formată din corpuri de natură necristalină - formațiuni amorfe. Derivați ai carbonatului de calciu, sunt extrem de variabili ca mărime și cantitate, ceea ce poate avea valoare diagnostică.
De asemenea, este de interes tipul de interacțiune dintre cristalele mari și particulele amorfe din faciesul biosubstratului deshidratat (Figura 2). Conținutul informațional al acestui fenomen nu a fost încă stabilit, dar, în opinia noastră, necesită o atenție deosebită, deoarece poate reflecta influența componentelor cristalografic nevizualizate ale unui biofluid (de exemplu, macromolecule de proteine, grăsimi, carbohidrați etc. ) despre cristalogeneză.

Orez. 2.2.Interacțiunile structurilor cristaline și amorfe

Pentru a obține informații suplimentare despre proprietățile fizico-chimice ale fluidului biologic analizat, au fost elaborate criterii suplimentare pentru evaluarea rezultatului cristaloscopiei clasice (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005), inclusiv următorii parametri:
1. Celularitate (I)– reflectă trăsăturile interacțiunilor organic-minerale în facies. Evaluarea se face pe o scară dreaptă în șase puncte (0-5 puncte), cu 0 puncte fiind absența completă a semnelor de apariție a acestui fenomen, iar 5 puncte fiind vizibilitatea celularității fără microscop.
2. Uniformitate distribuții de elemente (R)– un criteriu care indică corectitudinea procesului de cristalogeneză liberă. De asemenea, interpretată conform scalei de șase puncte (0-5 puncte) dată în secțiunea despre componenta tezigrafică.
3. Intensitatea zonei marginale (Kz)– un parametru care indică prezența și cantitatea componentei proteice a mediului biologic (Shatokhina S.N., 1995; Nazarova L.O., Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 2000). Propunem o schemă de evaluare a acestui indicator pe o scară semicantitativă de șase puncte:
- 0 puncte - absenta absoluta zona marginală, se exprimă striuri, semne locale de distrugere în zona marginii faciesului;
- 1 punct – zona de margine este slab distinsă la mărirea scăzută a unui microscop cu lumină, se observă „fracturi” unice, inclusiv cele „volate” exprimate vag;
- 2 puncte – zona de margine este clar vizibilă, este aproape uniformă, se observă un număr mic de „defecțiuni”;
- 3 puncte – zona de margine este clar delimitată de zona intermediară, omogenă, „defecțiuni” se notează pe întregul inel de margine și nu sunt distructive;
- 4 puncte – se vizualizează clar zona marginală, delimitată printr-un „ax” de zona intermediară, prezintă un număr semnificativ de „fracturi”, dar nu se poate distinge fără microscopie.
- 5 puncte – zona marginală se vizualizează fără microscopie, este uniformă, fără semne de distrugere; microscopia indică un număr semnificativ de „fracturi”.
4. Gradul de distrugere a faciesului (SDF)– un indicator integral care reflectă cursul corect al cristalogenezei (principala caracteristică calitativă a faciesului) și însumează ambele exogene (condiții ale procesului de deshidratare - temperatură, umiditate, presiune, viteza fluxului de aer, pătrunderea unor substanțe suplimentare etc.) și factori endogeni (formarea de cristale a componentelor termodinamice, prezența unei cantități adecvate de apă pentru formarea hidraților de cristal și stabilizarea macromoleculelor organice etc.).
* 0 grade– toate elementele faciesului sunt de configurație corectă, nedistruse atât în ​​ansamblu, cât și în zone individuale, nu există semne de distrugere a texturii faciesului;
* I grad– elementele faciesului au semne inițiale de distrugere, nu se observă modificări distructive ale texturii;
* gradul II– sunt vizualizate numeroase structuri distruse sau alterate, există încălcări locale ale integrității texturii;
* gradul III– toate elementele faciesului sunt distruse, este imposibil să se distingă părțile individuale ale faciesului și structurii, proba este o masă informe de material amorf, adesea colorat; există semne clare de distrugere a texturii.
În general, modelarea structurilor formate și utilizarea diferitelor criterii de evaluare vor contribui la o diferențiere mai clară a modificărilor din tabloul cristaloscopic, deși „supraîncărcarea” excesivă cu acestea va duce la o complicare semnificativă a procesului de analiză a faciesului.
Ca o modalitate mai informativă de evaluare a capacității de inițiere a substraturilor biologice decât tesigrafia clasică discutată mai sus (Tarusinov G. A., 1994), am folosit tesigrafia comparativă (Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2002-2005; Martusevich A.K. et al. ), care include utilizarea unui eșantion de control suplimentar dintr-o substanță de bază pură pentru a echilibra diferite condiții externe; face posibilă indicarea direcției de inițiere (activarea sau deprimarea cristalogenezei formatorului de cristal) și severitatea acesteia.
După cum sa menționat deja mai sus, evaluarea faciesului tesigrafic este mai dificilă decât a celor cristaloscopice, ceea ce este asociat cu omogenitatea morfologiei primului și, prin urmare, dacă a fost deja elaborat un tabel de identificare pentru cristaloscopia clasică, iar criteriile suplimentare vor fi joacă doar un rol clarificator, apoi în testul tezigrafic ocupă poziții de conducere (Nefedova N.B., Tsyvenkova L.A., 1985; Moroz L.A., Kalikshtein D.B., 1986; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990 V. Kidalov., Khadalov; A. A., Yakushina G. N., 2004; Kamakin N. F., Martusevich A. K., 2003-2005). În acest sens, se propune o clasificare a criteriilor care pot fi utilizate în considerarea faciesului tesigrafic:
I. Criterii de bază
- Coeficientul tezigrafic de bază Q
- Coeficientul de justificare P
- Coeficientul de inițiere M
- coeficientul relativ N
II. Criterii suplimentare
uniformitatea densității faciesului (R);
gradul de celularitate al imaginii (I);
indicele de haos (CH)
severitatea zonelor de cristalizare individuale (Z)

Identificarea criteriilor de mai sus a făcut posibilă formarea unei abordări matematice unificate pentru evaluarea faciesului tesigrafic (Martusevich A.K. et al., 2004, 2005), care se bazează pe verificarea semnificației fiecărui indicator în determinarea coeficientului derivat necesar.

Explicații pentru coeficienții de calcul utilizați:
I. Criterii principale:
Q = A / B, unde A este numărul de centre de cristalizare din proba de testare, unități; B - numărul de centre de cristalizare din proba martor, unități.
P = d1 / d2, unde d1 este raza zonei minime de cristalizare, mm; d2 - raza centurii maxime de cristalizare, mm.

II. Criterii suplimentare:
R - gradul de uniformitate al densității de distribuție a elementelor faciesului tesigrafic, puncte;
I - gradul de celularitate al faciesului tesigrafic, puncte.

Cercetarea noastră ne-a permis să ne asumăm semnificația informațională a coeficienților evidențiați mai sus în identificarea faciesului tesigrafic:
1. Coeficientul tezigrafic de bază Q– indică gradul de organizare/dezorganizare a cristalogenezei substanței de bază (în majoritatea cazurilor, o soluție de clorură de sodiu de concentrație izosmotică, care în condiții naturale neutre este predispusă la formarea structurilor tipice de deshidratare) sub influența materialului sub studiu.
2. Rațiune coeficient P– demonstrează gradul de eterogenitate al maselor moleculare ale componentelor substratului studiat.
3. Gradul de celularitate al imaginii I- demonstreaza eventual prezenta unor conglomerate proteice de diferite compozitii si proprietati chimice asupra gradului de hidrofilitate/hidrofobicitate, precum si prezenta unor componente liposolubile intr-o solutie apoasa a mediului biologic.
4. Parametrul R - subliniază distribuția uniformă a structurilor de-a lungul faciesului tesigrafic. Poate indica conținutul de componente nevisualizabile din material care pot provoca local inhibarea cristalogenezei. Poate fi legat de metoda de uscare a microspecimenului.
Pe baza indicatorilor de mai sus pentru evaluarea faciesului tesigrafic, a fost formulată o scurtă gradare a caracteristicilor înregistrării compoziției faciesului tesigrafic în funcție de criterii suplimentare de evaluare (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005):
1. Uniformitatea densității de distribuție a structurilor cristaline de-a lungul faciesului (R):
0 puncte - haos complet al faciesului, prezența elementelor eterogene, goluri, locuri de acumulare a structurilor cristaline, orientare diferită a formațiunilor în câmpul vizual.
1 punct - sunt conturate unele grupări de cristale, zone izolate construcție corectă, ocupând mai puțin de 30% din suprafața totală a câmpului vizual, direcția figurilor este încă haotică.
2 puncte - se observă „insule” clare de ordine, ocupând de la 30% până la 50% din spațiul câmpului vizual (în fiecare dintre cel puțin trei studiate), distanțele dintre elementele în grupuri sunt aproximativ egalizate, un anumit model de direcționalitate este înregistrată formațiuni structurale facies.
3 puncte - un număr destul de semnificativ de elemente structurale ale faciesului (mai mult de 50% din total) sunt structurate, „insulele” de uniformitate se transformă în zone de relativ suprafata mare. În aceste zone, se observă locația corectă și uniformitatea distanțelor dintre formațiunile individuale. Modelul de direcție a elementelor și zonarea se disting destul de clar.
4 puncte - majoritatea elementelor facies sunt structurate (mai mult de 75% din total), restul sunt distribuite în „insule” pe câmpul vizual, adesea în zona marginală. Distanțele dintre formațiunile individuale sunt aproape constante. Orientarea elementelor urmează un anumit model pe aproape întreaga suprafață a câmpului vizual.
5 puncte - toate elementele faciesului tezigrafic sunt clar structurate pe întregul câmp vizual, ceea ce se confirmă prin examinarea mai multor câmpuri. Împărțirea în zone centrale, intermediare și marginale este clar vizibilă chiar și cu control vizual fără microscop; limitele acestora din urmă pot fi stabilite. Distantele dintre elementele tabloului sunt constante, orientarea figurilor este corecta, naturala pe toata suprafata faciesului.
2. Gradul de manifestare a celularității faciesului (I):
0 puncte - absența completă a semnelor de celularitate, omogenitatea imaginii, nicio identificare a „insulelor” de cristale. Faciesurile reprezintă un singur „strat” de formațiuni cristaline.
1 punct - prezența primelor semne de eterogenitate, „zdrobirea” imaginii cristaloscopice (sunt evidențiate principiile cele mai semnificative din punct de vedere diagnostic):
începutul separării grupurilor de elemente (mai puțin de 30% din toate formațiunile ocupând mai puțin de 30% din suprafața câmpului vizual);
o anumită eterogenitate a imaginii;
începutul „zdrobirii” unui singur „strat” de figuri cristaline.
2 puncte - există o tendință destul de vizibilă spre „fragmentarea” faciesului, formarea de „insule” de cristale (sunt evidențiate principiile cele mai semnificative din punct de vedere diagnostic):
numărul de elemente izolate în „insule” este de la 30% la 50% din toate structurile, ele ocupă mai mult de 30% din suprafața câmpului vizual de facies;
eterogenitate pronunțată, zonalitate a imaginii;
se vizualizează procesul de „împărțire” faciesului în secțiuni, se înregistrează curelele de cristalizare formate, servind drept limite ale acestora din urmă, în unele cazuri nu pe toată lungimea, cu o grosime de 1 cristal.
3 puncte - se observă modificări pronunțate ale faciesului:
elementele din „insule” alcătuiesc de la 50% la 75% din numărul total, suprafața pe care o ocupă este mai mult de 50% din câmpul vizual (pe mai multe câmpuri);
eterogenitate pronunțată, „granul” a imaginii;
procesul de „dezmembrare” a faciesului este clar vizibil în mai multe câmpuri de vedere;
Centurile de cristalizare sunt destul de distincte, formate din mai mult de un rând de structuri cristaline.
4 puncte - semnele de celularitate sunt vizibile în mod fiabil (sunt evidențiate principiile cele mai semnificative din punct de vedere diagnostic):
numărul de structuri grupate în celule de la 75% la 100% din numărul total al acestora din urmă;
elementele grupate ocupă întreg câmpul vizual (la studierea mai multor, cel puțin trei câmpuri vizuale);
curele de cristalizare sunt formate din mai mult de un rând de cristale și sunt prezente pe întreaga suprafață a câmpului vizual, înconjoară complet „insulele”.
5 puncte - imaginea este caracterizată de următoarele caracteristici morfologice (sunt evidențiate principiile cele mai semnificative din punct de vedere diagnostic):
numărul structurilor grupate în celule este de la 75% la 100% din numărul total al acestora din urmă;
elementele grupate ocupă întreg câmpul vizual (la studierea mai multor, cel puțin trei câmpuri vizuale);
„fragmentarea” și „granularea” imaginii sunt foarte clar exprimate;
centurile de cristalizare sunt formate din mai mult de un rând de cristale, sunt prezente pe întreaga suprafață a câmpului de vedere și înconjoară complet „insulele”;
există „rupturi” în imagine (cu excepția faciesului de ser sanguin, pentru care acest fenomen este independent semn de diagnostic).

În general, utilizarea criteriilor, indicatorilor și coeficienților calculați descriși mai sus ne-a permis să algoritmizăm procedura de extragere a încărcăturii informaționale ascunse în compoziția calitativă și cantitativă a substraturilor analizate.
În conformitate cu această schemă, analiza se efectuează pas cu pas în două direcții principale - studiul cristalogenezei libere și al formării inițiate a cristalelor, ceea ce face posibilă luarea în considerare în mod cuprinzător atât a capacității directe de formare a cristalelor a unui biofluid, cât și a potențialului său de inițiere. .

Orez. 2.3.Algoritm de evaluare a faciesului siocristaloscopic.

Deci, utilizarea pe scară largă a aparaturii matematice face posibilă evaluarea multiparametrică a fluidelor biologice prin cristalogeneza lor, care oferă o cantitate mare de informații despre proprietățile lor fizico-chimice și, indirect, compoziția componentelor calitative și cantitative, care, în opinia noastră, este de importanță deosebită pentru știința clinică, în primul rând diagnostic, practică și fundamentală.

2.4 Prelucrarea datelor statistice

Materialul real obținut în timpul cercetării din toate epurările studiate a fost prelucrat prin metoda statisticilor de variație (Tyurin Yu. N., Makarov A. A., 1998; Nasledov A. D., 2004). Au fost calculate valorile medii (M), eroarea lor standard (m) și abaterea standard (). Indicatorii au fost considerați de încredere la valorile p<0,05 (по t-критерию Стьюдента и U-критерия Манна-Уитни). Зависимость между признаками оценивали при помощи коэффициента парной корреляции (r), его ошибки (mr) и уровня значимости различий (по t-критерию Стьюдента). Зависимость считалась сильной при r  >0,7, medie dacă modulul valorii de corelație a perechii se află în intervalul 0,3-0,7. Când s-a găsit o valoare de corelație mai mică decât valoarea modală de 0,3, aceasta a fost considerată slabă. De asemenea, a fost calculată fiabilitatea corelației perechii găsite (p).
Calculele au fost efectuate în mediul de foi de calcul Microsoft Excel 2003, precum și folosind pachetele software statistice Primer of biostatistics 4.03 și SPSS 11.0.

3. Rezultatele cercetării.

Evaluarea directă a rezultatelor cristalogenezei libere a fost efectuată folosind un singur tabel de identificare, care include 5 clase principale de substanțe cristaline și amorfe (morfometrie), precum și criterii suplimentare (gradul de distrugere a faciesului - SDF, severitatea zonei sale marginale (Kz). ) și celularitatea (I), uniformitatea elementelor de distribuție (R)). Faciesul tesigrafic a fost analizat folosind un sistem de parametri de bază (coeficientul tesigrafic principal Q, coeficientul de zonalitate P) și suplimentari (similari celor utilizați pentru cristaloscopia clasică).
Am studiat dinamica cristalogenezei urinei libere și inițiate la șoareci sănătoși și leucemici.

3.1. Morfologia urinei șoarecilor sănătoși și infectați artificial cu leucemie.

Analiza noastră a micropreparatelor din probele de urină uscată ne-a permis să stabilim „modele” clare pentru condițiile luate în considerare.
S-a făcut o comparație a modelelor cristaloscopice obținute de la animale sănătoase și bolnave.

Tabelul 3.1. Caracteristicile cristaloscopice ale șoarecilor sănătoși și ale pacienților cu leucemie.

Conform datelor prezentate în Tabelul 3.1, este evident că există variații clare în modelul cristaloscopic între loturile de control și cele experimentale.

Pe baza rezultatelor morfometriei vizuale, s-a stabilit că există caracteristici semnificative ale imaginii cristaloscopice a urinei șoarecilor cu leucemie în comparație cu animalele sănătoase, dintre care cele mai semnificative sunt:
o creștere a numărului de dendrite la șoarecii bolnavi, cu excepția absenței complete a structurilor policristaline căptușite, ceea ce confirmă modificările înregistrate în componenta monocristalină;
concentrarea formațiunilor amorfe, constând în mărirea și reducerea cantitativă a acestora, delimitarea lor accentuată de marile figuri cristaline;
o creștere a gradului de distrugere a faciesului (principalul indicator al instabilității faciesului cristaloscopic);
o scădere a uniformității distribuției formațiunilor cristaline și amorfe într-un microspecimen, însoțită de dezagregarea elementelor faciesului, manifestată printr-o creștere semnificativă a gradului de celularitate (p.<0,05).
Pe baza rezultatelor evaluării capacității de formare a cristalelor a serului de sânge de șoarece, s-a format un „model” care a fost caracteristic șoarecilor sănătoși și șoarecilor cu leucemie.

3.2. Principalele criterii de evaluare a faciesului tesigrafic al serului sanguin la șoareci în condiții normale și patologie (leucemie).

Studiul a inclus atât o căutare a markerilor calitativi ai leucemiei, cât și formarea de „modele” cantitative ale tezigrafiei. Un set de parametri calitativi semnificativi din punct de vedere diagnostic a fost compilat pe baza detectării semnelor de modificări patologice în urina șoarecilor bolnavi.
În conformitate cu datele prezentate în fig. 2.4, cei mai semnificativi indicatori de diferențiere ai tesigramelor de urină ale șoarecilor sănătoși și șoarecilor cu leucemie atunci când se utilizează o soluție de clorură de sodiu 10% ca substanță de bază sunt:
- natura inițierii substanței de bază de către mediul biologic (la șoarecii sănătoși - activarea pronunțată a cristalogenezei substanței de bază, la șoarecii bolnavi cu leucemie - inhibarea moderată);
- compoziţia organic-minerală inegală a biofluidului (predominanţa componentelor minerale la şoarecii sănătoşi şi predominanţa compuşilor organici la şoarecii cu leucemie);
- gradul de distrugere a faciesului, care este puțin mai mare în rândul reprezentanților grupului experimental;
- extinderea zonei marginale în faciesul șoarecilor cu leucemie, cu severitatea sa semnificativă la indivizi practic sănătoși, care este un marker presupus al leucemiei.

Tabelul 3.2. Tezigrafia comparativă a urinei șoarecilor sănătoși și a șoarecilor cu leucemie (substanță de bază – soluție de clorură de sodiu 10%)

Notă: „*” – semnificația diferențelor în raport cu grupul de control p<0,05

Orez. 2.4. Modificări ale criteriilor principale și suplimentare pentru tezigrafia urinei la șoarecii cu leucemie comparativ cu cei sănătoși

3.3 șoareci AKR

Linia de șoareci AKR extrem de leucemică a fost obținută prin încrucișarea unor indivizi strâns înrudiți în 1928. Șoarecii de ambele sexe sunt susceptibili la leucemie limfoidă. Aproximativ 91% dintre femei mor de leucemie la 300 de zile.

3.4 Dinamica dezvoltării leucemiei.

Orez. 3.1 Faciesul este omogen, nu există formațiuni pronunțate – mouse-ul sanatos X40

Orez. 3.2 Faciesul este omogen, apar primele semne de fragmentare a zonei marginale - primele semne ale dezvoltării leucemiei, vârsta de 5 luni. X40

Orez. 3.3 Eterogenitatea structurii, expresia slabă a zonei marginale, manifestarea celularității - începutul dezvoltării leucemiei. 7 luni X40

Orez. 3.4 Începutul apariției structurilor dendritice liniare este dezvoltarea leucemiei. 8 luni X40

Orez. 3.5 Structurile dendritice căptușite și dreptunghiulare predomină în structura faciesului - leucemie dezvoltată, 9 luni. X40

Orez. 3.6 Celularitate pronunțată a faciesului, densitate neuniformă de distribuție a elementelor - leucemie foarte dezvoltată. 13 luni X40

3.5 Concluzii

Pe baza detectării mai multor parametri calitativi (cel puțin 3) ai unei bioprobe experimentale pe suprafața unei picături uscate de urină, pare posibil să se identifice prezența modificărilor patologice sau gradul de dezvoltare a leucemiei acute.
Folosind datele prezentate în tabelul 3.2, se poate observa că în raport cu coeficienții Q și P, diferențe semnificative ale valorilor acestuia sunt înregistrate în tesigramele de urină.
În conformitate cu datele prezentate în Tabelul 3.2, fiabilitatea diferențelor dintre principalii indicatori ai tesigrafiei confirmă semnificația trăsăturilor faciesului tesigrafic al urinei detectate prin semne calitative.
Astfel, utilizarea metodei de tesigrafie comparativă a urinei la șoareci sănătoși și șoareci cu leucemie face posibilă identificarea markerilor calitativi și cantitativi ai prezenței leucemiei.
Analiza tesiocristalscopică a biofluidelor permite evaluarea multiparametrică a informațiilor metabolice pe care le conțin, care poate fi utilă în indicarea stărilor fiziologice și patologice la oameni și animale. Fiecare biofluid are propriile sale caracteristici de cristalogeneză, care este asociată cu diferențierea compoziției și funcțiilor lor chimice.
La studierea componentei cristaloscopice, se recomandă utilizarea unui singur tabel de identificare, iar componenta tesigrafică - criteriile de evaluare principale (coeficienții Q și P) și suplimentare (uniformitatea distribuției modelului, celularitatea etc.). Continuarea cercetărilor va servi la dezvoltarea ideilor despre mecanismele sub- și moleculare ale dezvoltării reacțiilor fiziologice și patologice ale corpului uman.

Lista literaturii folosite:

1. Agafonov V. A., Bagrov S. N. Studiul stării corpului vitros prin metoda de uscare // Colectarea articolelor. articole științifice „Chirurgia transciliară a cristalinului și a vitrosului”. - Moscova. – 1982. – P. 158-164.
2. Alekseeva O. P., Vorobyov A. V. Cristalografia salivei - o nouă metodă non-invazivă de diagnosticare a H. pylori // Nizhny Novgorod Medical Journal. – 2003. - Nr. 2. – pp. 73-78.
3. Antropova I.P., Gabinsky Ya.L. Cristalizarea biofluidului într-o celulă închisă folosind exemplul de salivă // Diagnosticare clinică de laborator. - 1997. - Nr. 8. - P. 36-38.
4. Babenko G.A. Creștere malignă, metale și agenți de chelare. Rolul biologic al microelementelor. - M.: Nauka, 1983.
5. Barer G. M., Denisov A. B., Mikhaleva I. N. et al. Cristalizarea lichidului oral. Compoziția și curățenia suprafeței substratului // Buletin de Biologie și Medicină Experimentală. – 1998. – T. 126, nr. 12. – p. 693-696.
6. Siguranța vieții. Siguranța proceselor tehnologice și a producției (Securitatea muncii). Uh. manual pentru universități/P. P. Kukin și colab. - M., 1999.
7. Brown G., Walken J. Cristale lichide și structuri biologice. M.: Mir, 1982. – 198 p.
8. Bubon N. T., Puzyrevsky K. Ya. Reacție microcristaloscopică pentru detectarea papaverinei // Farmacie. – 1965. - Nr. 2. – P. 50-52.
9. Buzoverya M. E., Shishpor I. V., Shatokhina S. N. și colab. Analiza morfometrică a faciesului serului sanguin // Diagnosticare clinică de laborator. - 2003. - Nr. 9. - pp. 22-23.
10. Bystrevskaya A. A., Deev L. A. Dependența structurii fluidului lacrimal de tipul de stimul și de calitatea substratului // Materialele celei de-a III-a Conferințe științifice și practice din Rusia „Morfologia funcțională a fluidelor biologice”. - Moscova. – 2004. – P. 17-19.
11. Wegman E. F., Rufanov Yu. G., Fedorchenko I. N. Cristalografie, mineralogie, petrografie și radiografie. M.: Metalurgie, 1990. – 263 p.
12. Volchetsky A. L., Ruvinova L. G., Spasennikov B. A. et al. Cristalizare și cristalografie: aspecte medicale și biologice. Arhangelsk, 1999. – 374 p.
13. Volchetsky A. L., Spasennikov B. A., Agafonov V. M. și colab. Modificarea metodei și direcției computerizate a analizei tesigrafice // Ecologie umană. – 1999. – Nr. 3. – pp. 38-42.
14. Vorobyov A.V., Vorobyov P.V., Vorobyova V.A. Determinarea componentei energetic-informaționale a unei persoane folosind metoda cristalografiei sensibile // Proc. rapoarte ale Conferinței Internaționale Homeopatice de la Moscova „Dezvoltarea metodei homeopate în medicina modernă”. - Moscova. –2001. – p. 202-207.
15. Vorobyova V. A., Vorobyov A. V., Zamarenov N. A. Modelul de formare a unei imagini cristalografice în timpul interacțiunii fluidului biologic uman și un medicament homeopat cu o soluție formatoare de cristale / Discovery. – Diploma Academiei Ruse de Științe ale Naturii nr. 231. (Prioritate din 8 iunie 2002).
16. Golubev S. N. Cristale vii // Natura. – 1989. - Nr. 3. – P. 13-21.
17. Gordienko A. N., Kurbatova L. A., Filippov A. N. // Fizica cristalizării. - Kalinin. – 1985. – Numărul. 8. – p. 83-86.
18. Gromova I. P. Metodă cristaloscopică de studiere a serului sanguin într-un experiment toxicologic și igienic folosind metoda „picături deschise” // Igienă și Igienă. – 2005. – Nr. 2. – pp. 66-69.
19. Gulyaev V. G., Martusevich A. K., Koshkin A. N. Caracteristici și perspective pentru utilizarea metodelor de cercetare cristalografică în criminalistică // Mat. conferință științifică și practică interuniversitară cu participare pe internet „Probleme de actualitate ale criminologiei și activitatea expertului: probleme și perspective”. - Kirov: KF MSAL. - 2004. – P. 35-39.
20. Gulyaeva S. F., Martusevich A. K., Pomaskina T. V. Modelarea matematică a rezultatului cristalogenezei inițiate a salivei ca criteriu pentru eficacitatea aportului de apă minerală // Ecologie umană. – 2005. – Nr. 7. – pp. 33-35.
21. De Zhe V. Proprietăţile fizice ale substanţelor cristaline lichide. M.: Mir, 1982. – 175 p.
22. Deryabina N. I., Zalessky M. G. Conținutul de componente proteice într-o picătură de ser sanguin când se usucă // Buletinul noilor tehnologii medicale. – 2005. – T. XII, Nr. 1. – pp. 85-87.
23. Dawson R, Elliot D, Elliot W și colab. Manualul Biochimistului. M.: Mir, 1997. - 544 p.
24. Zamkova N. G., Zinenko V. I. Dinamica rețelei a cristalelor ionice în modelul de respirație și ionii polarizabili. // FTT. - 1998. - T. 40, nr. 2. - P. 350-354.
25. Zaitsev V.V., Zaitseva N.B., Usoltseva N.V. Texturi de cristale lichide biologice ale pacienților cu infarct miocardic // Proceedings of the Academy of Sciences. Seria fizică - 1996. - vol. 60, nr. 4 - p. 115-118.
26. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Studiul tranzițiilor de fază și fazei incomensurate în cristale ASVKh 4 prin metoda Monte Carlo. // Cristalografie. - 2000. - T. 45, nr. 3. - P. 513-517.
27. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Calcule microscopice ale tranzițiilor structurale de fază de tip deplasare (cristale cu structură elpazolit) și de tip ordin-dezorder (familia sulfatului de potasiu). // Cristalografie. - 2004. - T. 1, nr. 1. – pp. 38-45.
28. Ivanov O. V., Shport D. A., Maksimov E. G. Calcule microscopice ale instabilității feroelectrice în cristale de perovskit // JETP - 1998. - T. 114, No. 1. - P. 333-358.
29. Kalikshtein D. B., Moroz L. A., Kvitko N. N. și colab. Studiu cristalografic al substraturilor biologice // Medicina clinica. – 1990. - Nr. 4. – P. 28-31.
30. Kalikshtein D. B., Moroz L. A., Chernyakov V. L. Semnificația metodei tezigrafice de cercetare a urinei // Lucrări de laborator. – 1981. - Nr. 2. – P. 79-81.
31. Kalinin A.P. și altele.Informativitatea metodei depunerilor de cristale de ser sanguin în unele boli endocrine // Culegere de lucrări ale Conferinței științifice și practice din întreaga Rusie. „Metode de cercetare cristalografică în medicină”, Moscova - 1997. - P. 131-133
32. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Despre tehnica tesiocristaloscopiei biofluidelor // Diagnosticare clinică de laborator. - 2002. - Nr. 10. - P. 3.
33. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Abordări moderne ale identificării cristaloscopice a compoziției fluidelor biologice // Ecologie umană. - 2003. - Nr. 5. - pp. 23-25.
34. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Caracteristicile portretului tesiocristalscopic al fluidelor biologice ale corpului uman în condiții normale și în patologie // Buletinul noilor tehnologii medicale. - 2003. - T. X, nr. 4. - pp. 57-59.
35. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Kolevatykh E.P. Despre biocristalizarea primară și secundară // Colecție de articole. lucrări științifice „Științe naturale și umanism”. – Tomsk. – 2005. – T. 2, Nr. 1. – pp. 18-19.
36. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Koshkin A.N. Perspective pentru dezvoltarea metodelor de cercetare cristalografică // Buletinul medical Vyatka. - 2003. - Nr. 3. - P. 6-11. Kamakin N.F., Martusevich A.K. Caracteristicile portretului tesiocristalscopic al fluidelor biologice ale corpului uman în condiții normale și patologice // Buletinul noilor tehnologii medicale. 2003. T. X. Nr. 4. P. 57–59.
37. Kamyshnikov V. S. Manual de diagnostic de laborator clinic și biochimic. În 2 volume.Minsk: Belarus, 2000. Vol.1. 495 p.; T.2. 463s.
38. Karkishchenko N. N. Fundamentele biomodelării. M.: Editura VPK, 2004. – 608 p.
39. Karachunsky A.I. Leucemie limfoblastică acută la copii. Prelegeri despre problemele actuale ale pediatriei. Ed. V.F.Demina, S.O.Klyuchnikova., M: RGMU; 2000.
40. Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N. Teste de sânge teziografice și capacitățile lor practice // Buletinul noilor tehnologii medicale. – 2004. – T. XI, Nr. 1-2. - pp. 23-25.
41. Koledintsev M. N., Nechaev D. F., Maichuk N. V. Fundamentele fizice ale analizei cristalografice în oftalmologie // Colecție de articole. abstract rapoarte ale conferinței științifice și practice interregionale a tinerilor oameni de știință și studenți cu participare internațională „Lecturi științifice St. Petersburg-2002”. - St.Petersburg. - 2002. - P. 42-43.
42. Kolotilov N. N., Bakai E. A. Structura cu cristale lichide a obiectelor biologice // Biologie moleculară. – 1980. – Numărul. 27. – p. 87-96.
43. Kononenko E. V., Mironov E. V. Mecanisme de dislocare-disclinare de transformare a texturii unui biofluid în timpul agregării // Proc. lucrările științifice ale celei de-a doua conferințe științifice și practice din întreaga Rusie „Morfologia fluidelor biologice în diagnosticarea și monitorizarea eficacității tratamentului”. - Moscova. – 2001. – P. 21-26.
44. Korago A. A. Introducere în biomineralogie. Sankt Petersburg: Nedra, 1992. – 280 p.
45. Koshkin A. N., Martusevich A. K., Lopatin M. A. Cristaloscopia biofluidelor corpului uman ca metodă de diagnostic // Buletinul Universității de Stat Medicale din Rusia. – 2002. - Nr. 1. – P. 134.
46. ​​​​Metode de cercetare cristalografică în medicină: Sat. științific Proceedings of the 1st All-Russian Science and Practice Conference. - M., 1997.
47. Metoda cristaloscopică de studiere a substraturilor biologice: Metoda. recomandări / L. A. Moroz, I. L. Theodor, V. E. Bryk et al. – M., 1981. – 9 p.
48. Kuznetsov V. D. Cristale și cristalizare. M., 1954. – 65 p.
49. Kuznetsov A.V., Rechkalov A.V., Smelysheva L.N. Tractul gastrointestinal și stresul. Kurgan: Editura Universității de Stat Kurgan, 2004. – 254 p.
50. Kuznetsov N. N., Vershinina G. A., Skopinov S. M. et al. Polarizare optică și metode refractometrice în aprecierea severității sindromului de intoxicație endogenă la copii // Colecție de articole. lucrările științifice ale celei de-a doua conferințe științifice și practice din întreaga Rusie „Morfologia fluidelor biologice în diagnosticarea și monitorizarea eficacității tratamentului”. - Moscova. – 2001. – P. 30-33.
51. Kuznetsov N. N., Skopinov S. A., Vershinina G. A. et al. Metoda cristal-scopică de diagnosticare a intoxicației endogene la copii. Brevet RF Nr. 2158923 din 03/04/1998
52. Kungurov N.V., Kokhan M.M., Kononenko E.V. și colab. Studii cristalografice ale fluidelor biologice la pacienții cu dermatoze cronice. Ekaterinburg, 1997. – 41 p.
53. Kurnysheva N.I., Deev A.I., Gryzunov Yu.A. și colab. O metodă de evaluare a endotoxicozei oftalmice involutive prin examinarea fluorescentă a lichidului lacrimal.Buletin de oftalmologie. – 2000. – Nr. 3. – pp. 16-19.
54. Lobanov V.I. Reacții microcristaloscopice pentru depistarea unor derivați ai acidului barbituric // Journal of Analytical Chemistry. – 1966. - Nr. 1. – P. 110.
55. Loktyushin A. A., Manakov A. V. Minerale și viața într-un model olografic al materiei // Proc. Al II-lea Seminar Internațional „Mineralologie și Viață: Interacțiuni Biominerale”. – Syktyvkar. – 1996. – P. 10-11.
56. Martusevich A.K. Metode de cercetare cristaloscopică în fiziologie // Russian Physiological Journal numit după. I. M. Sechenov. – 2004. – T. 90, nr. 8. – P. 18.
57. Martusevich A.K. Teoria fizică și biochimică informațională a cristalizării ca reflectare a morfologiei fluidelor biologice // Buletinul de Medicină Siberiană. – 2005. – T. 4. – Anexa 1. – P. 185.
58. Martusevich A.K., Koshkin A.N. Probleme ale abordării cercetării în cristalografia biofluidelor // Mat. a treia conferință interdisciplinară cu participare internațională „NBITT-21”. – Petrozavodsk. – 2004. – P. 50.
59. Martusevich A.K., Koshkin A.N. Particularități ale influenței condițiilor de cristalizare a fluidelor biologice ale corpului uman asupra rezultatului testului tesiocristalscopic // Colecție de articole. științific articole ale tinerilor oameni de știință și specialiști ai Federației Ruse dedicate conferinței care poartă numele. acad. B. S. Grakova „Problemele actuale ale medicinei și noilor tehnologii - 2003”. - Krasnoyarsk. - 2003. - P. 154-157.
60. Martusevich A.K., Ponomareva G.L. Metode matematice pentru identificarea faciesului tesigrafic folosind un număr de evaluare la pacienții cu osteocondroză lombară // Diagnosticare clinică de laborator. – 2004. - Nr. 9. – pp. 85-86.
61. Menshikov V.V. Teste de laborator în practica clinică. M.: Medicină, 1988. - 428 p.
62. Micrometodă de determinare a aminoacizilor liberi în serul sanguin folosind cromatografia pe hârtie // Tehnologii de laborator medical. Sankt Petersburg, 1999. – T. 2. – P. 106-108.
63. Moroz L. A., Kalikshtein D. B. Metodă cristalografică pentru studierea substraturilor biologice. Instrucțiuni. M., 1986. – 24 p.
64. Mushkambarov N. N. Chimie fizică și coloidală: Curs de prelegeri. M.: GEOTAR-MED, 2001. – 384 p.
65. Nazarenko G. I., Kishkun A. A. Evaluarea clinică a rezultatelor cercetărilor de laborator. M.: Medicină, 2000. – 544 p.
66. Nikolskaya M.N., Gandel V.G., Popkov V.A. Detectarea medicamentelor sulfonamide prin cristalizare în strat subțire // Afaceri farmaceutice. – 1965. - Nr. 4. – pp. 13-14.
67. PB 10-115-96. Reguli pentru proiectarea și funcționarea în siguranță a recipientelor sub presiune.
68. Pikin S. A. Transformări structurale ale cristalelor lichide. - M. - 1981. - 269 p.
69. Plaksina G.V., Komolova G.S., Mashkov A.E. și colab. Efectul stabilizator al angiogeninei din lapte asupra structurii cristaline a fluidelor biologice // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. – 2003. – T. 136, nr. 10. – p. 406-409.
70. Plaksina G. V., Rimarchuk G. V., Butenko S. V. și colab. Semnificația clinică a metodei cristalografice și cristaloscopice de examinare a urinei // Diagnosticul clinic de laborator. – 1999. - Nr. 10. – P. 34.
71. Prigogine I., Stengers I. Ordinea din haos / Trad. din engleza M.: Progres, 1986. – 429 p.
72. Rapis E. G. Metodă microcristal-optică de utilizare a corpului vitros al omului şi animalelor în condiţii normale şi în hemoftalmie // Buletin de Oftalmologie. – 1976. – Nr. 4. – pp. 62-67.
73. Rapis E. G. Proteine ​​și viață. Autoorganizarea, autoasamblarea și simetria filmelor de proteine ​​supramoleculare nanostructurate. M.: „MILTA - PKP GIT”, 2003. – 368 p.
74. Romanov Yu. A. Teoria sistemelor biologice și problema organizării lor temporale // Probleme de cronobiologie. – 1992. – Nr. 3-4. – p. 105-123.
75. Savina L. V. Structuri cristaloscopice ale serului sanguin în clinica bolilor interne: Rezumat teză. diss... d.m.s. - Perm, 1992. - 40 p.
76. Savina L. V. Structuri cristaloscopice ale serului sanguin al unei persoane sănătoase și bolnave. Krasnodar, 1999. – 238 p.
77. Savina L. V. Formarea structurii serului sanguin în condiţii de vid // Diagnosticare clinică de laborator. – 1999. - Nr. 11. – P. 48.
78. Savina L.V., Konueva O.V., Korotko G.G. și colab. Diagnosticul cristaloscopic al tulburărilor funcției exocrine a pancreasului la pacienții cu pancreatită cronică / IV Congres Internațional „Nutriție parenterală și enterală”. - Moscova, 2000. - P. 98.
79. Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V.Yu. și colab. Microscopia de polarizare în diagnosticul tulburărilor metabolice // Diagnosticul clinic de laborator. - 2003. - Nr. 3. - pp. 11-13.
80. Saltykov A. B. Aspecte morfologice ale procesului de formare a sistemelor funcționale // Progrese în biologia modernă. – 2005. – T. 125, nr. 2. – p. 167-178.
81. Skalny A.V., Yesenin A.V. Monitorizarea și evaluarea riscurilor expunerii la plumb pentru oameni și mediu folosind biosubstrate umane // Buletin toxicologic. Nr. 6, 1996. - p. 16-23.
82. Skopinov S. A. Modelarea computerizată a cristalizării sării din biofluide // Metode de cercetare cristalografică în medicină. sat. științific Proceedings of the 1st All-Russian Science and Practice Conference. . M., 1997. . Cu. 33.36
83. Smotrova S.P., Chesnokova S.M. si altele.Deficienta de seleniu in conditii de poluare a mediului // Materiale ale III-a Conferinta Internationala Stiintifica si Tehnica „Fizica si Radioelectronica in Medicina si Biotehnologie” - Vladimir, 1998. - P. 304-305.
84. Sobur S.V. Securitatea la incendiu a instalatiilor electrice: Referinta/S. V. Sobur. - M., 2003.
85. Sonin A. S. Introducere în fizica cristalelor lichide. M., 1989. – 369 p.
86. Echipament individual de protectie: Ref. indemnizatie/S. L. Kaminsky. – L., 1989.
87. Surovkina M. S., Shatokhina S. N., Surovkin V. A. et al. Modificări ale nivelului de molecule de masă medie și organizarea sistemică a plasmei sanguine la pacienții vârstnici // Sat. lucrările științifice ale celei de-a doua conferințe științifice și practice din întreaga Rusie „Morfologia fluidelor biologice în diagnosticarea și monitorizarea eficacității tratamentului”. - Moscova. – 2001. – P. 18-20.
88. Tarasevich S. Yu. // Jurnalul de fizică tehnică. – 2001. – T. 71, Nr. 5. – p. 123-125.
89. Tarusinov G. A. Examenul cristalografic al urinei în diagnosticul şi diagnosticul diferenţial al bolilor difuze ale ţesutului conjunctiv la copii // Pediatrie. – 1994. - Nr. 1. – pp. 55-57.
90. Tekutskaya E.E., Sofina L.I. si altele.Metode si practica de monitorizare a continutului de metale grele din mediile biologice. // Igienă și salubritate – 1999-Nr.4–P.72-74.
91. Studiu tesiocristalscopic al substraturilor biologice: Recomandări metodologice / Kamakin N. F., Martusevich A. K. - Kirov, 2005. - 34 p.

Pentru a planifica corect sarcina, a identifica diferite tulburări ale sistemului reproducător și pentru a alege metoda optimă de contracepție, este necesar să aveți o înțelegere clară a naturii funcției menstruale a unei femei, una dintre verigile-cheie ale căreia este ovulatie .

Ciclu menstrual femeile, reprezentând perioada de la prima zi a unei menstruații până la prima zi a următoarei menstruații, durează în medie 28-30 de zile. În prima jumătate a ciclului menstrual, unul dintre ovare se maturizează folicul, care este un balon plin cu lichid și care conține un ou în curs de coacere. Pe 14-15 zile ale ciclului Are loc ovulația, ceea ce înseamnă că un ovul matur este eliberat din folicul, gata pentru fertilizare.

Ovul matur după ovulație capabil de fertilizare în 2 zile, iar spermatozoizii au activitate fertilizantă timp de 4 zile după ejaculare. Prin urmare, perioada totală a celor mai probabile posibilitatea de concepție este de 6 zile .

Pentru a determina perioada de concepție probabilă, se folosesc diverse metode pentru a determina momentul ovulației, care includ: evaluarea naturii cristalizării mucusului conținut în canalul cervical sau cristalizarea salivei; măsurarea temperaturii în rect; date cu ultrasunete; studierea nivelului hormonal.

Astfel, în perioada de ovulație, mucusul conținut în canalul cervical, după ce este aplicat pe o lamă de sticlă și uscat, suferă cristalizare pentru a forma un model asemănător unei frunze de ferigă. Acest proces de cristalizare se datorează unui număr de modificări biofizice și biochimice care apar în mucusul cervical.

Activitatea producției de mucus de către glandele, care sunt situate în pereții canalului cervical, este controlată de nivelul hormonilor sexuali feminini - estrogen. Pe măsură ce se apropie momentul ovulației, concentrația și activitatea estrogenului crește. Acest lucru duce la o creștere a cantității de mucus produs și la o creștere a sărurilor de sodiu și potasiu din acesta. În consecință, atunci când mucusul se usucă, sărurile pe care le conține interacționează cu mucina, care formează un model asemănător unei frunze de ferigă.

Când se examinează un frotiu de mucus la microscop, este clar că din a 9-a zi a ciclului apar semne slabe de cristalizare. În plus, severitatea tiparului se intensifică treptat, apare mai clar cu 3-4 zile înainte de ovulație și atinge cele mai clare contururi în ziua ovulației. După ovulație, cristalizarea scade. Desenul devine neclar și capătă un aspect „neclar” în 2-3 zile.

Determinarea timpului de ovulație cu ajutorul unui test de cristalizare a mucusului cervical necesită o vizită zilnică la ginecolog. Într-un număr de cazuri, din cauza modificărilor patologice ale colului uterin sau a unui proces inflamator, studiul poate fi dificil sau fiabilitatea rezultatului poate fi redusă, deoarece imaginea de cristalizare este distorsionată.

Modificări ale tiparelor de cristalizare în timpul ciclului menstrual, similare cu mucusul cervical, apar și în saliva. O creștere a nivelului de estrogen pe măsură ce se apropie ovulația duce la o creștere a cantității de săruri de sodiu și potasiu din salivă, precum și a mucusului cervical. Concentrația lor atinge un maxim în ziua ovulației, ceea ce duce la cristalizarea salivei atunci când este uscată. Fiabilitatea testului de cristalizare a salivei pentru determinarea ovulației este de la 96% la 99%.

Pentru a evalua modelul de cristalizare a salivei și, în consecință, pentru a determina timpul de ovulație, sunt utilizate diverse mini-microscoape, care sunt instrumente optice compacte și ușoare, care sunt convenabile pentru utilizare în condiții de zi cu zi.

În zilele în care conceperea nu este încă posibilă(5-6 zile înainte de ovulație sau mai mult) sau atunci când nu mai este posibil (3-4 zile după ovulație), saliva uscată formează un model neclar în formă de puncte. Cu 3-4 zile înainte de ovulație, se notează o imagine a începutului formării unei structuri asemănătoare cu ferigă a modelului. Pe măsură ce ovulația se apropie, modelul va deveni mai clar, indicând o probabilitate mare de concepție. În 2-3 zile după ovulație, claritatea modelului scade.

Procesele inflamatorii din cavitatea bucală sau laringe pot duce la rezultate distorsionate. Este recomandat să folosiți salivă de dimineață sau să folosiți testul nu mai devreme de 2-3 ore înainte de a mânca, de a vă spăla pe dinți, de a bea alcool sau de a fuma.

Dacă durata existenței fiecărui model microscopic de cristalizare atât a mucusului cervical, cât și a salivei, precum și înlocuirea acestuia cu un alt model, este constantă și consecventă în conformitate cu fazele ciclului menstrual, atunci aceasta indică absența tulburărilor sale, iar ovulația are loc la momentul potrivit și în fiecare ciclu menstrual. Existența pe termen lung a aceluiași model de cristalizare, absența acestuia sau înlocuirea prematură cu un alt model indică o disfuncție a ovarelor. În acest caz, trebuie neapărat să consultați un medic.

Pentru a determina ovulația poti folosi si test de temperatură, care se bazează pe faptul că, în funcție de faza ciclului menstrual, temperatura corpului se modifică într-un anumit fel. Cele mai precise date despre natura modificărilor termice care apar pot fi obținute prin măsurare temperatura în rect imediat după somn, în repaus, fără să te ridici din pat, zilnic pe tot parcursul ciclului menstrual. În prima fază a ciclului menstrual normal, temperatura este de obicei mai scăzută 37°С. Literal, în ajunul ovulației, scade ușor, iar imediat după aceasta, temperatura crește cu 0,4–0,6 ° C față de cea inițială și, de regulă, devine puțin mai mare de 37 ° C. Fluctuațiile de temperatură care apar sunt asociate cu modificări ale nivelului de estrogen în prima și a doua fază a ciclului menstrual și cu o creștere a nivelului. progesteronîn a doua fază. În același timp, progesteronul, care începe să fie produs în ovar în cantități mai mari tocmai după ovulație, afectează centrul de termoreglare, ceea ce duce la o ușoară creștere a temperaturii corpului. Dacă ovulația nu are loc dintr-un motiv oarecare, atunci temperatura pe tot parcursul ciclului va fi aproximativ aceeași.

Ca parte a unui diagnostic cuprinzător, este posibil să se utilizeze metode pentru determinarea nivelului hormonilor sexuali feminini (diverse fracțiuni de estrogeni și progesteron), precum și hormoni foliculo-stimulatori și luteinizanți din sânge. Concentrația acestor hormoni se modifică într-un anumit fel de la o zi la alta în funcție de fazele ciclului menstrual, de prezența sau absența ovulației.

Folosind ultrasunete, este, de asemenea, posibilă monitorizarea formării foliculului, determinarea dimensiunii acestuia și determinarea momentului ovulației. Prezența unui folicul matur în ovar este indicată de o formare de cavitate care crește treptat până la 2-3 cm în diametru în prima jumătate a ciclului menstrual și dispare la mijloc. Modificările în dimensiunea acestei formațiuni, de regulă, sunt în mod clar corelate cu modificările modelului de cristalizare a mucusului, cu temperatura din rect și cu nivelul hormonilor. Un semn al maturității foliculului și a iminentului (1,5 - 2 zile) debutul ovulației conform ecografiei este detectarea unui tubercul purtător de ou, care arată ca o mică formațiune de culoare deschisă adiacentă suprafeței interioare a foliculului. Ovulația este indicată nu numai de dispariția foliculului, ci și de apariția simultană a lichidului posterior uterului.

Se crede că ultrasunetele permit obținerea informații mai fiabile despre maturarea foliculilor comparativ cu testele hormonale, deoarece mai mulți foliculi imaturi din punct de vedere patologic pot oferi colectiv un nivel normal al hormonilor testați, ceea ce va crea o impresie falsă a cursului normal al ciclului menstrual.

În prezent, ultrasunetele este una dintre metodele importante de monitorizare a procesului de stimulare a ovulației și a eficacității acestuia. Astfel, cu o stimulare excesivă, se observă o mărire semnificativă a ovarelor cu formarea de mai multe structuri de cavitate în ele.

Astfel, utilizarea diferitelor metode de determinare a ovulației face posibilă controlul naturii ciclului menstrual și alegerea perioadei cele mai favorabile pentru concepție în timpul unei sarcini planificate. Folosind aceste teste pentru a preveni o sarcină nedorită, puteți alege cele mai raționale schema contraceptiva sau pur și simplu evitați activitatea sexuală în zilele în care concepția este cea mai probabilă. Folosind testele enumerate, este posibilă și monitorizarea eficacității tratamentului care vizează corectarea funcției menstruale.

În plus, cu ajutorul unui număr de teste simple, cum ar fi măsurarea temperaturii în rect sau evaluarea cristalizării salivei, o femeie își poate monitoriza în mod independent funcția menstruală.