Metody oznaczania grupy krwi i czynnika Rh. Oznaczanie grupy krwi i czynnika Rh

Każda osoba powinna znać swoją grupę krwi i współczynnik Rh. Może się to nagle przydać, gdy sytuacje awaryjne. Wiadomo, że cały personel wojskowy ma obowiązek umieszczania tych parametrów na swoim mundurze lub odznace. W dużych rozmiarach organizacje medyczne Laboratoria nie wykonują analiz.

Jednak małe wiejskie przychodnie są również wyposażone w standardowy kompleks laboratoryjny do przeprowadzenia badania. NA w tej chwili Istnieje znaczna liczba metod wyznaczania.

Określanie grupy krwi dziecka na podstawie grupy krwi rodziców jest dość powszechną metodą uzyskiwania danych. Na przykład, jeśli matka lub ojciec ma drugą, trzecią lub czwartą grupę krwi, grupa krwi ich dziecka nigdy nie będzie pierwsza. Choć jest to wiedza dość powierzchowna. Oczywiście badanie grupy krwi lepiej powierzyć profesjonalistom.

Definicja domu

Takie wskazówki dają ludzie, którzy żyją w Internecie i zbierają wszelkie informacje, tak naprawdę ich nie rozumiejąc. Czasem rozumiejąc to w bardzo specyficzny sposób.

Rzeczywiście, istnieje koncepcja oparta na grupie krwi, a także różne nauki, które łączą z nią osobowość. Ale teorie te zostały opracowane, aby wybrać najbardziej odpowiednie i zdrowa dieta odżywianie, profilaktyka chorób.

Surowice pobierane są ze stacji transfuzyjnych i mają termin przydatności do spożycia. Wymaganie obowiązkowe to warunki przechowywania materiału laboratoryjnego.

Ampułki muszą być oznaczone numerem seryjnym. Dla dokładności tę metodę Aby uniknąć niedokładnych wyników analizy, potrzebne są surowice z kilku serii.

Algorytm przeprowadzania analizy w celu określenia grup krwi jest następujący:

• Do przeprowadzenia analizy tą metodą wymagane są duże krople czterech rodzajów surowic (wystarczą tylko trzecia i druga, ale dla dokładności wyniku wymagane są również pierwsza i czwarta).
• Krew testową dodaje się do surowicy i miesza (proporcja około 1:10). Przez pięć minut próbki krwi i surowicy dokładnie miesza się.

Dekodowanie analizy metodą standardową

Po pięciu minutach możesz uzyskać . W dużych cząstkach serwatki następuje klarowanie, w niektórych pojawiają się drobne płatki (reakcja koagulacji i wytrącania), w innych tak się nie dzieje.

Opcje i interpretacja testu na wykrywanie grupy krwi mogą być następujące:

• aglutynacji nie ma w obu próbkach surowicy trzeciego i drugiego typu (+ dodatkowo pierwszy i czwarty) - jest to pierwszy rodzaj krwi;
• koagulacja występuje we wszystkich z wyjątkiem drugiego - to mówi;
• jeśli aglutynacja jest nieobecna tylko w przypadku trzeciego rodzaju surowicy - to jest;
• jeśli koagulacja zachodzi we wszystkich próbkach, jest to .

Jeśli dane dotyczące surowicy zostaną przedstawione we właściwej kolejności, a na próbkach wskazane zostaną podpisy, łatwo jest określić wynik badania: jeśli nie ma krzepnięcia, grupa krwi jest określana automatycznie.

Mogą zaistnieć sytuacje, w których widoczność wiązania jest niejasna.

W tym przypadku przeprowadza się go po raz drugi, pod mikroskopem obserwuje się małe reakcje adhezji i wytrącania.

Zoliclony są sztucznymi analogami serum. Zawierają syntetyczne surogaty aglutynin ά i β. w środowisku medycznym uważana jest za metodę, która daje najwięcej dokładne wyniki. Druga nazwa analizy to „erytrotesty”.

Istnieją dwa rodzaje cyklonów do analizy powstawania przynależności grupowej:

• anty-A;
• anty-B;

Ta technika Oznaczanie grupy krwi jest obecnie najwyższą jakością. Rzekoma aglutynacja zachodzi pomiędzy czerwonymi krwinkami pacjenta a aglutyninami tych koleklonów. Wyniki tej metody są również odszyfrowywane, podobnie jak w przypadku analizy metodą surowicy. Ta metoda oznaczenie grupy krwi nie wymaga stosowania dwóch serii próbek do analizy, w przeciwieństwie do metody standardowej.

Ta metoda również ma specyficzna cecha: czwarta grupa krwi obowiązkowy określa się za pomocą specjalnego cyklonu anty-AV.

Dzięki temu możliwe jest określenie grupy krwi i jej współczynnika Rh w niemal każdym środowisku domowym. Zestaw ekspresowy zawiera specjalną kartę z wykonanymi wgnieceniami. Główną zaletą szybkiego testu jest szybkość analizy i łatwość wdrożenia. Wynik badania znany jest po około pięciu minutach.

Test ekspresowy

Oprócz standardowych przeciwciał stosuje się również „anty-D”. Dostarcza informacji o współczynniku Rh pacjenta. Do tej analizy krew nadaje się w prawie każdej postaci. Specyficzne odczynniki są już uwzględnione w metodzie ekspresowej.

Przed transfuzją lub poważnie interwencja chirurgiczna Grupa krwi jest ponownie sprawdzana w celu zapewnienia całkowitej dokładności danych. Jest to również bardzo ważne indywidualna zgodność osobę, oprócz grupy.

Oznaczanie grupy krwi i współczynnika Rh dzieli się na dwa sposoby:

1. definicja pierwotna grupy krwi i czynnik Rh Anty-A, Anty-B i Anty-D)
2. diagnoza wtórna grupa krwi i czynnik Rh ( I, tj. )

Ekspresowa diagnostyka (wstępne oznaczenie grupy krwi i czynnika Rh) nie bierze pod uwagę , nie mówiąc już o innych systemach weryfikacji. Dlatego stosuje się zolikony tylko dla grupa krwi i czynnik Rh oraz składniki krwi.

P więcej szczegółów o sobie rzadka grupa krew można znaleźć na świecie.

Oznaczanie grupy krwi i czynnika Rh przy użyciu cyklonów anty-A, anty-B i anty-D według systemu AB0 i systemu Rhesus

Oznaczanie grupy krwi i czynnika Rh za pomocą superkoloklonów anty-A, anty-B i anty-D jest najnowocześniejszy i stosunkowo prosta metoda. Do określenia grupy krwi stosuje się zolikony, czyli tzw. przeciwciała monoklonalne.

Co jest potrzebne do określenia grupy krwi i współczynnika Rh?

– zolikon anty-A ;

– zolikon anty-B;

– zolikon anty-D;

– roztwór chlorku sodu 0,9%; specjalny tablet; sterylne patyczki.

Algorytm i procedura oznaczania grupy krwi

Na specjalną tabletkę nanieść zolikony anty-A i anty-B jedną dużą kroplą (0,1 ml) pod odpowiednimi etykietami.

Obok nich upuść po jednej małej kropli krew testową (0,01–0,03 ml). Wymieszać i obserwować wystąpienie lub brak reakcji aglutynacji przez 3 minuty. Jeżeli wynik jest wątpliwy, dodać 1 kroplę 0,9% roztworu soli.

Interpretacja wyników oznaczania grupy krwi

• zolikon anty-A, wówczas badana krew należy do grupy A (II);
• jeśli zachodzi reakcja aglutynacji zolikon anty-B, wówczas badana krew należy do grupy B (III);
• jeżeli nie wystąpiła reakcja aglutynacji z kolklonami anty-A i anty-B, wówczas badana krew należy do grupy 0 (I);
• jeżeli wystąpiła reakcja aglutynacji z kolkami anty-A i anty-B, to badana krew należy do grupy AB (IV), jak pokazano na rysunku.

Oznaczanie współczynnika Rh za pomocą zoliclonuD

Na płytce wymieszaj dużą kroplę (0,1 ml) zoliklonu anty-D i małą kroplę (0,01 ml) krwi pacjenta, która ma być badana. Początek reakcji aglutynacji lub jej brak obserwuje się przez 3 minuty.

• jeśli wystąpi reakcja aglutynacji z kolklonem anty-D, to badana krew jest Rh dodatnia (Rh +)
• jeśli nie wystąpi reakcja aglutynacji z zolikonem anty-D, wówczas badana krew jest Rh-ujemna (Rh -)

Innymi słowy, podczas mieszania kolikonu Anty-D z erytrocytami Rh-dodatnimi następuje reakcja aglutynacji, a jeśli krew jest Rh-ujemna, aglutynacja nie następuje (jak pokazano na rysunku - czwarta grupa krwi Rh-ujemna ).

Oznaczanie grup krwi przy użyciu standardowych surowic

Oznaczanie grup krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących- poszukiwanie i wykrywanie antygenów A i B we krwi za pomocą reakcji aglutynacji. Aby osiągnąć cel użyj:

• Standardowe surowice izohemaglutynujące o grupach krwi O (I) - bezbarwne, A (II) - niebieskie, B (III) - czerwone, AB (IV) - żółte.
• Białe tabliczki oznaczone grupami krwi: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
• NaCl 0,9%
• Pręty szklane

Metoda oznaczania grupy krwi przy użyciu surowic wzorcowych

Metoda oznaczania grupy krwi przy użyciu surowic wzorcowych

1. Podpisz tabliczkę (imię i nazwisko pacjenta);
2. Oznacz dwie serie standardowych surowic grup krwi I, II i III o objętości 0,1 ml, tworząc dwa rzędy po trzy krople od lewej do prawej: 0 (I), A (II), B (III);
3. Pobrać krew z żyły. Za pomocą szklanego pręta nanieś sześć kropli badanej krwi pacjenta na płytkę w sześciu punktach obok kropli standardowej surowicy i wymieszaj.

Aglutynacja rozpocznie się za 30 sekund. Do kropli, w których nastąpiła aglutynacja, dodać jedną kroplę 0,9% NaCl i ocenić wynik.

Ocena wyników oznaczania grupy krwi przy użyciu surowic wzorcowych

Dodatnia reakcja aglutynacji może mieć charakter piaszczysty lub płatkowaty. W przypadku negatywnej reakcji kropla pozostaje jednolicie zabarwiona na czerwono. Wyniki reakcji w kroplach z surowicami z tej samej grupy (dwie serie) muszą się zgadzać. Przynależność krwi testowej do odpowiedniej grupy określa się na podstawie obecności lub braku aglutynacji podczas reakcji z odpowiednimi surowicami po obserwacji przez 5 minut. Należy zauważyć, że jeśli serum wszystkich trzy grupy dała reakcję pozytywną, oznacza to, że badana krew zawiera oba aglutynogeny (A i B) i należy do grupy AB (IV). Jednak w takich przypadkach, aby wykluczyć niespecyficzną reakcję aglutynacji, konieczne jest przeprowadzenie dodatkowych badanie kontrolne zbadać krew standardową surowicą izohemaglutynującą grupy AB (IV), która nie zawiera aglutynin. Dopiero brak aglutynacji w tej kropli przy obecności aglutynacji w kroplach zawierających surowice wzorcowe z grup 0 (I), A (II) i B (III) pozwala uznać reakcję za specyficzną i zakwalifikować badaną krew do grupy AB ( IV). wymagane są standardowe krwinki czerwone trzech grup krwi: 0 (I), A (II), B (III).

Procedura reakcji ze standardowymi czerwonymi krwinkami

1. Krew zabrany do badań z żyły do probówki, odwirować lub pozostawić na 30 minut do uzyskania surowicy.
2. Na zaznaczoną płytkę nanosi się trzy duże krople (0,1 ml) surowicy krwi z probówki, a obok nich jedną małą kroplę (0,01 ml) wzorcowych krwinek czerwonych z grup.
3. Odpowiednie krople miesza się ze szklanymi pałeczkami, tabletkę wytrząsa, obserwuje przez 5 minut, do kropli aglutynacyjnych dodaje się 0,9% NaCl i ocenia wynik.

Ocena wyników reakcji ze standardowymi czerwonymi krwinkami

Ocenia się wyniki uzyskane dla standardowych surowic izohemaglutynujących i standardowych erytrocytów. Osobliwością wyników reakcji ze standardowymi erytrocytami jest to, że erytrocyty z grupy 0 (I) są uważane za kontrolę. Wynik metody krzyżowej uważa się za wiarygodny, jeżeli w reakcji ze standardową surowicą izohemaglutynującą i ze standardowymi erytrocytami odpowiedzi dotyczące badanej grupy krwi są zbieżne. Jeśli tak się nie stanie, należy powtórzyć obie reakcje.

W współczesna medycyna Grupa krwi charakteryzuje zestaw antygenów znajdujących się na powierzchni czerwonych krwinek, które decydują o ich specyficzności. Istnieje ogromna ilość

takich antygenów (zwykle stosuje się tabelę grup krwi z różnymi antygenami), ale grupę krwi powszechnie określa się stosując klasyfikację według czynnika Rh i układu AB0. Określenie grupy jest obowiązkową procedurą podczas przygotowań do jakiejkolwiek operacji. Taka analiza jest konieczna także przy wejściu do służby w niektórych kontyngentach, w tym personelu wojskowego, pracowników narządy wewnętrzne i siły bezpieczeństwa. To wydarzenie przeprowadzono z powodu zwiększone ryzyko wystąpienie warunku, zagrażające życiu

osoby, w celu skrócenia czasu potrzebnego na udzielenie pomocy w postaci transfuzji krwi.

Skład krwi różnych grup krwi Istotą układu AB0 jest obecność struktur antygenowych na czerwonych krwinkach. W osoczu nie ma odpowiednich typowych przeciwciał (gamma globulin).

Czerwone krwinki sklejają się, gdy spotykają się antygen i przeciwciało. Reakcja ta nazywana jest hemaglutynacją. Podczas oznaczania reakcja ma postać małych płatków. Badanie polega na uzyskaniu obrazów aglutynacji z surowicami.

Antygeny czerwonych krwinek „A” wiążą się odpowiednio z przeciwciałami „ά”, a także „B” z „β”.

Wyróżniać się następujące grupy skład krwi:

• I (0) – ά, β – powierzchnia erytrocytów w ogóle nie zawiera antygenów;
• II (A) – β – na powierzchni znajduje się antygen A i przeciwciało β;
• III (B) – ά – powierzchnia zawiera B z przeciwciałem typu ά;
• IV (AB) – 00 – powierzchnia zawiera oba antygeny, ale nie posiada przeciwciał.

Płód ma już antygeny w stanie embrionalnym, a aglutyniny (przeciwciała) pojawiają się w pierwszym miesiącu życia.

Metody oznaczania

Metoda standardowa

Technik jest wiele, ale w badaniach laboratoryjnych zwykle wykorzystuje się standardowe surowice.

Do określenia typów antygenów AB0 stosuje się standardową metodę surowiczą. W składzie standardowej surowicy izohemaglutynującej znajduje się zestaw przeciwciał skierowanych przeciwko cząsteczkom czerwonych krwinek. W obecności antygenu podatnego na działanie przeciwciał tworzy się kompleks antygen-przeciwciało, który uruchamia kaskadę reakcji immunologicznych.

Wynikiem tej reakcji jest aglutynacja czerwonych krwinek; na podstawie charakteru zachodzącej aglutynacji można określić, czy próbka należy do dowolnej grupy.

Do przygotowania standardowej surowicy wykorzystuje się krew dawcy i określony układ – poprzez izolację osocza, w tym przeciwciał, i jego późniejsze rozcieńczenie. Rozcieńczanie przeprowadza się za pomocą izotonicznego roztworu chlorku sodu.

Hodowla odbywa się w następujący sposób:

Samo badanie przeprowadza się w następujący sposób:

1. Kroplę każdego serum (o łącznej objętości około 0,1 mililitra) umieszcza się na specjalnej tabletce w miejscu, w którym znajduje się odpowiedni znacznik (używa się 2 próbek, jedna z nich jest kontrolna, druga przeznaczona jest do badań) .
2. Następnie obok każdej kropli surowicy umieszcza się próbkę badawczą o objętości 0,01 mililitra, po czym miesza się ją oddzielnie z każdą diagnostyką.

Zasady dekodowania wyników

Po pięciu minutach możesz ocenić wyniki badania. W dużych kroplach surowicy następuje klarowanie, w niektórych przypadkach obserwuje się reakcję aglutynacji (powstają małe płatki), w innych - nie.

Wideo: Oznaczanie grupy krwi i czynnika Rh

Oto możliwe opcje:

• Jeżeli w obu próbkach nie ma reakcji aglutynacji z surowicami II i III (+ kontrola 1 i IV) - oznaczenie grupy pierwszej;
• Jeżeli koagulację obserwuje się we wszystkich próbkach z wyjątkiem II, określić drugą;
• W przypadku braku reakcji aglutynacji tylko w próbce z Grupa III- definicja III;
• Jeżeli we wszystkich próbkach, łącznie z kontrolą IV, obserwuje się koagulację, należy oznaczyć IV.

Kiedy surowice są ułożone we właściwej kolejności i oznakowane na płytce, nawigacja jest łatwa: grupa odpowiada miejscom bez aglutynacji.

W niektórych przypadkach wiązanie nie jest wyraźnie widoczne. Następnie analizę należy powtórzyć; pod mikroskopem obserwuje się drobną aglutynację.

Metoda reakcji krzyżowych

Istotą tej techniki jest oznaczanie aglutynogenów przy użyciu standardowych surowic lub koleklonów z równoległym oznaczaniem aglutynin przy użyciu standardowych erytrocytów.

Technika analizy przekrojowej praktycznie nie różni się od badania z użyciem surowicy, istnieją jednak pewne dodatki.

Na płytkę pod surowicami należy dodać kroplę standardowych czerwonych krwinek. Następnie z probówki z krwią pacjenta, która przeszła przez wirówkę, za pomocą pipety pobiera się osocze, w którym umieszcza się standardowe czerwone krwinki, które znajdują się na dnie - dodawane do standardowej surowicy.

Podobnie jak w technice standardowej, wyniki badania ocenia się kilka minut po rozpoczęciu reakcji. W przypadku reakcji aglutynacji można mówić o obecności aglutynin AB0, w przypadku reakcji plazmowej można mówić o aglutynogenach.

Wyniki badań krwi przy użyciu standardowych czerwonych krwinek i surowicy:

Aglutynacja;

– nie ma aglutynacji;

- reakcja nie jest przeprowadzana.

Metoda krzyżowa stała się powszechna ze względu na to, że zapobiega błędom diagnostycznym powstającym przy stosowaniu standardowych technik.

Oznaczanie grupy krwi za pomocą zolikonów

Zoliklony to syntetyczne substytuty surowicy zawierające sztuczne substytuty aglutynin typu ά i β. Nazywa się je erytrotestami „Tsoliklon anty-A” (mają różowy ), a także „anty-B” (mają niebieski

Ta technika nie wymaga dwóch serii; jest bardziej niezawodna i dokładna. Przeprowadzenie badania i ocena jego wyników przebiega analogicznie jak w metodzie standardowej.

Grupę IV (AB) koniecznie potwierdza się przez aglutynację z kolokonem anty-AB, a także brak adhezji czerwonych krwinek w izotonicznym roztworze chlorku sodu.

Metoda ekspresowa z wykorzystaniem zestawu „Karta grupy Erythrotest”.

Chociaż ogólnie przyjęte metody określania, czy krew należy do określonej grupy, są powszechne, we współczesnej medycynie wprowadza się metody ekspresowe, z których najczęstszą jest „Erythrotest”.

Przy ustalaniu grupy techniką „Karta grupowa Erythrotest” wymagany jest zestaw narzędzi, w skład którego wchodzą następujące urządzenia:

• Tabliczka z pięcioma otworami do określenia grupy według przynależności Rh i systemu AB0;
• Wertykulator przeznaczony do pobierania próbki potrzebnej do badań;
• Pręty szklane do mieszania próbek;
• Czysta pipeta do zbierania roztworów.

Wszystkie powyższe narzędzia są niezbędne do bezbłędnej diagnostyki.

Zestaw do badania krwi „Erythrotest-Groupcard” pozwala na zbadanie współczynnika Rh i określenie grupy krwi w każdych warunkach, jest to szczególnie skuteczne, gdy nie można zastosować ogólnie przyjętych metod;

W dołkach tabletki znajdują się tsoliklony do antygenów (są to tsoliclony anty-A, -B, -AB) i do głównego antygenu, który określa dziedziczenie czynnika Rh (jest to tsoliclon anty-D). Piąta studzienka zawiera odczynnik kontrolny, który pomaga zapobiegać możliwe błędy i prawidłowo określić grupę krwi.

Wideo: Oznaczanie grup krwi za pomocą zolikonów

W artykule zostaną omówione metody oznaczania grupy krwi za pomocą systemu AB0, a także ekspresowa metoda oznaczania współczynnika Rh.

Najpierw porozmawiajmy o celach określania grupy krwi, a także o historii badania tego zagadnienia. Zainteresowanie transfuzją krwi sięga dawna. Więcej w Starożytny Egipt lekarze próbowali przetaczać go rannym, chorym i umierającym. Jako dawców wykorzystywano głównie młode zwierzęta. Wierzono, że mają coś specjalnego naturalna siła a poza tym nie podlegają wadom, jak ludzie. Transfuzje międzyludzkie najczęściej kończyły się niepowodzeniem. Przyczyny tego odkrył znacznie później austriacki lekarz Karl Landsteiner. Ustalił, że ludzie mają różne antygeny i przeciwciała, które tworzą specjalny układ odpornościowy.