Tükürüğün kristal yapısı. diş sağlığını korumak

Bölüm 2. Duodenal ülserin teşhisinde ve tedavisinin etkinliğinin izlenmesinde güncel sorunlar. Gastroduodenal patolojide tükürük kristalografisinin özellikleri (literatür taraması).

2.1 Duodenum ülserinde mukozal bir defektin enstrümantal olarak belirlenmesi.

2.2 Duodenal ülserde inflamasyon evresinin morfolojik tanısı.

2.3 Mevcut durum Helicobacter pylori enfeksiyonunun tanısı.

2.4 Peptik ülser hastalığının tanısında ve tedavisinin etkinliğinin değerlendirilmesinde tükürük kristalografisinin kullanılma olanakları.

Bölüm 3. Araştırmanın kapsamı ve yöntemleri.

Bölüm 4. Duodenal ülserde tükürüğün kristalografik resminin özellikleri.

Bölüm 5. Araştırma sonuçlarının tartışılması.

Bölüm 6. Sonuçlar.

Tezin tanıtımı (özetin bir kısmı) "Duodenum ülseri tedavisinin etkinliğinin teşhisi ve izlenmesinde tükürüğün kristalografisi" konulu

Tez araştırması için referans listesi Tıp Bilimleri Adayı Vorobyov, Alexander Viktorovich, 2004

Yukarıda sunulan bilimsel metinlerin bilgilendirme amaçlı olarak yayınlandığını ve tanınma yoluyla elde edildiğini lütfen unutmayın. orijinal metinler tezler (OCR). Bu nedenle kusurlu tanıma algoritmalarıyla ilişkili hatalar içerebilirler. Teslim ettiğimiz tez ve özetlerin PDF dosyalarında bu tür hatalar bulunmamaktadır.

LİSANSÜSTÜ YETERLİLİK ÇALIŞMASI
"Tanımlamak için kristaloskopi kullanımı Akut lösemi AKR farelerinde"

Giriiş................................................. ...................... ................................... 3
Bölüm I. Literatür taraması.................................................. ........................ 3
1.1 Biyolojik sıvıların kristalografisi.................................................. 6
1.1.1 Maddenin kristal durumuna ilişkin temel kavramlar.................. 6
1.1.2 Canlı sistemlerde kristalleşme süreçleri................................................ 8
1.1.3 Biyolojik sıvıların kristalografik özellikleri... 8
1.1.4 Biyolojik sıvıların morfolojisi................................................ 8
1.2 Kristalografik araştırma yöntemleri.................................................. 12
1.2.1 Biyolojik sıvıların kristalleşmesi olayını incelemek için önkoşullar.................................................. ................................ 12
1.2.2 Kristalografik araştırma yöntemlerine ilişkin fikirlerin mevcut durumu................................................. .................................... 18
1.2.2.1 Biyolojik substratların tesiyokristaloskopisi tekniğinin genel özellikleri.................................................. .................................. 25
2. Araştırmanın amaçları, amaçları ve yöntemleri.................................................. ........... 26
2.1 Çalışmanın amaçları, hedefleri ve aşamaları................................................. ........... 26
2.2 Bulaşıkların ve çalışma alanının hazırlanması.................................................. ...... 28
2.3 Uygulamalı araştırma yöntemleri.................................................. ...... 28
2.3.1 Teziyokristaloskopi test prosedürü................................................ 28
2.4 İstatistiksel veri işleme.................................................. ...... 43
3. Araştırma sonuçları.................................................. ....... ........ 44
3.1 Sağlıklı ve yapay olarak enfekte lösemili farelerin idrarının morfolojisi.................................................. ..................................................... 44
3.2 Normal koşullar altında ve patoloji (lösemi) bulunan farelerde idrarın tesigrafik görünümünün değerlendirilmesi için ana kriterler................................. ...................... 46
3.3 AKR çizgisi fareleri.................................................. ...................... 49
3.4.Lösemi gelişiminin dinamikleri.................................................. ...... ... 50
3.5 Sonuçlar ................................................................ ....................................
Kullanılan literatür listesi................................................. ..... 52

giriiş

Modern biyoteknolojiler, doğa bilimlerinin çeşitli alanlarındaki bilimsel başarıların bir sentezidir: tıp, biyoloji, matematik, fizik, kimya ve diğer bilimler. Nobel Fizik Ödülü sahibi Zh. Alferov, son yıllarda öğrencileri tarafından fizik ile biyoloji, fizik ve tıbbın kesiştiği noktada yürütülen çalışmalarda özellikle önemli sonuçlar elde edildiğini kaydetti. Bunun bir örneği, en acil modern sosyal sorunun çözümüne yönelik yaklaşımdır - kötü huylu hastalıkların teşhisi ve etkili tedavisi. Her yıl milyonlarca çocuk ve yaşlı insanın yanı sıra yüksek değerli çiftlik hayvanları da lösemiden ölüyor. Tüm dünyada, insanlarda löseminin geliştirilmesi ve tedavisine yönelik teknolojiler, kesin olarak tanımlanmış bir genetik çizgiye sahip hayvanlar üzerinde çalışılmaktadır. Federal Devlet Kurumu “Rusya KNIIG ve PC FMBA” 10 yıldan fazla bir süredir ACR fare modelini kullanarak sürekli löseminin gelişimi üzerine araştırmalar yürütmektedir. Deneysel ve klinik lösemi alanında kaydedilen ilerlemelere rağmen, açıklanan patolojinin sorunu nihai olarak çözülmekten çok uzaktır.
Son 40 yılda, biyolojik sıvıların niteliksel bileşiminin, içlerindeki kristal yapıların oluşumu yoluyla belirlenmesine dayanan yeni bir teşhis yönü aktif olarak geliştirildi - kristaloskopi.
İlk tecrübe klinik Uygulama kristalografinin tarihi geçen yüzyılın 60'lı yıllarına kadar uzanıyor. Başlangıçta çoğu araştırmacı tesigrafi yöntemini kullandı. 1964 yılında Daems, prostat hipertrofisi ve karsinomu olan hastaların kan kristalogramları üzerine bir çalışma yaptı. J.Leal ve B.Finlayson (1977) idrar kristal oluşumunun özelliklerini ortaya koydu.

A.A. Kozhinova ve L.S. Maslennikova (1968). V.Ya. Neretin ve V.I. Kiryakov (1977) bu yöntemi çeşitli beyin ve omurilik hastalıkları olan hastaların beyin omurilik sıvısını incelemek için kullandı. D.B. Kalikshtein ve arkadaşlarının (1981) çalışmasında çeşitli böbrek hastalıkları olan hastaların idrarının tezigrafik resmi incelenmiştir. V.V. Usin (1995), baş ve yüzdeki kronik nörojenik ağrı sendromları olan hastalarda beyin omurilik sıvısı ve tükürükteki kristalografik değişiklikleri inceledi. Ayrıca tesigrafi pediatri, jinekoloji, gastroenteroloji ve tıbbın diğer alanlarında tanı ve prognostik amaçlarla kullanılmıştır.
Şu anda kristaloskopik analiz neredeyse tüm biyolojik sıvıları (kan, idrar, tükürük, beyin omurilik sıvısı, safra, burun salgıları vb.) incelemek için kullanılmaktadır. Biyolojik sıvıların kristal yapıları, belirli bir organın durumu, vücudun ayrı bir sistemi ve bir bütün olarak vücut hakkında en önemli bilgileri içerir.
Şu anda, bilim adamlarının biyolojik sıvıların kristalografisi yöntemini tıpta kullanmaya olan ilgisi yüksek olmaya devam ediyor. Bu nedenle, biyosubstratların çok çeşitli özelliklerinin (biyokimyasal, immünolojik, morfolojik, biyofiziksel testler vb.) incelenmesini kolaylaştırmak için çok sayıda teşhis tekniği geliştirilmiş ve uygulamaya konulmuştur. Listelenen yöntemlerin çoğunun zayıf noktası, pahalı reaktifler, ekipmanlar ve yüksek vasıflı personelin eğitimi nedeniyle yüksek maliyetleridir. Yukarıdakilerin tümü, yeterince fazla sayıda destek hizmetinin bakımını ve sürdürülmesini gerektirir.
Ancak değişen ekonomik koşullar, lösemi tanısına yönelik oldukça etkili ve uygun maliyetli yöntemlerin geliştirilmesini ve uygulanmasını gerektirmektedir.
Kristaloskopik yöntem önemli bir teşhis duyarlılığına sahiptir ve bu nedenle önce adli kimyasal analiz uygulamasında, ardından tıpta geniş uygulama alanı bulmuştur. Anemi, ödem, zehirlenme varlığının ve ciddiyet derecesinin belirlenmesinde patolojik sürecin doğasını (alerjik, inflamatuar vb.) Belirlemede ayırıcı tanı yeteneklerini genişletmeyi mümkün kılmıştır. Biyopolimerlerin kristalografi yöntemini kullanarak patolojiyi belirlemek mümkündür çeşitli organlar. Bu teknik, malzeme parçacıklarının kristal oluşturucu bir çözelti ile kombinasyonunu içerdiğinden, kötü huylu sürecin doğası, kristallerin oluşan modelinden değerlendirilebilir (Kontorschikova K.N. ve diğerleri (2002-2012).
Bu tezin amacı, akut lösemi tanısı için AKR farelerinin idrarının kristaloskopik analizine yönelik bir yöntem geliştirmekti.

1 Literatür taraması.
1.1 Biyolojik sıvıların kristalografisi

"Kristal" terimi Yunanca "buz" anlamına gelen "krystallos" kelimesinden gelir. Bir kristalde atomlar ve moleküller düzenli bir yapı (kristal kafes) oluşturur. Kristaller hem cansız hem de canlı doğada önemlidir; bu, bağımsız bir dal olan kristalografinin tanımlanmasının temelini oluşturdu. Kristalografi, tek kristallerin ve kristal agregatlarının yapısı ve fiziksel özelliklerinin bilimi olup, iç özelliklerin veya dış etkilerin etkisi altında kristalin bir ortamda meydana gelen olaylardır.

1.1.1 Maddenin kristal durumuna ilişkin temel kavramlar

Kristaller buhardan, çözeltiden, eriyikten, amorf maddeden veya başka bir fiziksel haldeki maddeden oluşur. Kristalleşme belirli dış koşullar altında başlar, örneğin sıvının aşırı soğutulması, buharın aşırı doyması, çözeltinin dehidrasyonu, kristalleşme merkezleri çevresinde yavaş yavaş birçok küçük kristal göründüğünde. Bir kristal, bir sıvıdan veya buhardan atomlar veya moleküller eklenerek büyür.
Kristallerin denge ve gerçek formları vardır. Kristallerin denge formuna yalnızca denge koşulları altında ulaşılır; sonsuz derecede yavaş bir kristalizasyon süreci ile.
Parametrelerden beri dış ortam Zaman ve mekan açısından heterojen olan kristal yapıda kaçınılmaz olarak çeşitli kusurlar ortaya çıkar. Böylece, kristallerin gerçek (zorlanmış) şekilleri yalnızca kristalin simetrisini değil aynı zamanda dış büyüme koşullarının (kristal oluşum ortamındaki çeşitli maddelerin konsantrasyonu, sıcaklık, basınç vb.) etkisini de yansıtır. kristaller çok hassas tepki verir. Bazı kristal şekilleri Şekil 1'de gösterilmektedir.

A B V

G D e

Ve H Ve

Şekil 1 Çeşitli biyolojik sıvılardaki kristal formları: a, b - iplik benzeri, c, d, e, f, g - radyal olarak yerleştirilmiş iğnelere sahip küresel oluşumlar; z-bastırılmış dendrit; ve – dallanmış dendrit.
En doğal ve teknik sert malzemeler polikristallerdir, tek kristallere tek kristaller denir. Metaller ve tuzlar kristalleştiğinde genellikle ağaç benzeri kristaller (dendritler) oluşur. Bir veya birkaç merkezden kristalleşme sırasında, radyal olarak yerleştirilmiş kristal iğnelerden oluşan küreselitler oluşur.

1.1.2 Canlı sistemlerde kristalleşme süreçleri

Hayvan ve insan vücudunun tüm biyolojik ortamları, liyotropik sıvı kristaller oldukları için spesifik bir moleküler düzenli yapıya sahiptir. Canlı bir organizma, birçok yapısal bileşenin birbiriyle ve çevreyle etkileşim süreçlerinin sürekli olarak meydana geldiği karmaşık, oldukça dinamik bir sistemdir. Normal şartlarda vücudun biyofiziksel parametrelerindeki dalgalanmalar nispeten dar sınırlarla sınırlıdır. Ancak, belirli durumlarötesine geçebilirler normal sınırlar yeterince uzun bir dönem. Bazı durumlarda bu, vücudun olağandışı yeni varoluş koşullarına uyum sağlamasıyla, diğerlerinde ise kalıcı dekompansasyonla birlikte homeostazın derin bir şekilde bozulmasıyla açıklanır. Bu karmaşık, son derece dinamik süreçler, çeşitli biyolojik sıvıların veya biyopolimerlerin kristal yapılarının özelliklerine açıkça yansır.

1.1.3 Biyolojik sıvıların kristalografik özellikleri

Patogenezin bir bileşeni olarak metabolik bozuklukların olduğu bilinmektedir. çeşitli hastalıklar, bir değişikliğe yol açar kimyasal bileşim ve biyolojik sıvıların (bundan sonra biyoakışkanlar olarak anılacaktır) fizikokimyasal özellikleri. Biyoakışkanlarda meydana gelen karmaşık dinamik süreçler, biyoakışkan örneklerinin kristalizasyonu sırasında oluşan yapıların morfolojik özelliklerine yansır. Günümüzde biyolojik sıvıların yapısal analizine dayanan orijinal teşhis yöntemleri geliştirilmiş ve klinik uygulamada kullanılmaktadır. Biyolojik sıvıların katı fazının yapıları, moleküller ve esas olarak biyolojik sıvı içinde çözünmüş organik ve mineral maddelerin mikroagregatları tarafından oluşturulur. Yapıların spesifik özellikleri, biyoakışkanın genel fizikokimyasal özellikleri, bu maddelerin moleküllerinin niceliksel ve niteliksel bileşimi ve molekül içi ve moleküller arası kimyasal bağlar kurma yetenekleri ile belirlenir. Sonuç olarak biyolojik sıvıların yapısı, kişinin biyosıvı tarafından yıkanan organlarının metabolizma durumu ve bir bütün olarak vücudun homeostazisi hakkında bütünleyici bilgiler taşır.
Biyolojik sıvıların morfolojisi kanıtlanmıştır bilimsel yön tıp, veterinerlik ve diğer bilimler alanında. Kristalizasyon sırasında bir biyosıvının yapı oluşumu net modellere sahiptir.
Ağır metallerin (HM) özel bir yer tuttuğu çeşitli toksinlerle çevre kirliliği, kanser de dahil olmak üzere bazı hastalıkların görülme ihtimalinde önemli bir artışa yol açmaktadır. Vücut sıvısının morfolojik analizinin yerel elementel analizi ile kombinasyonu, kanserin erken teşhisi alanındaki araştırmalar için yeni bir analitik araç olarak hizmet edebilir.
Mikrokimyasal analiz, kristal optik ve tesigrafinin geliştirilmesindeki ilerlemeler, çeşitli patolojilerde insan ve hayvanların biyolojik sıvılarının kristal yapılarının incelenmesi için temel oluşturdu. Biyolojik sıvılardaki kristalografik süreçler bilim adamlarının artan ilgisini çekmektedir. Geçtiğimiz yıllarda yürütülen araştırmalar, biyoakışkanların kristalografik özellikleri ile vücuttaki patolojik süreçlerin gelişimi arasındaki ilişkinin belirlenmesine odaklanmıştır; ya da biyoakışkanlarda kristal yapıların oluşumu üzerindeki dış etkilerin etkisini inceleme görevini üstlendiler (Skopinov S.A. ve diğerleri 1997).
Böylece biyolojik bir sıvıda çözeltiden kristallere kadar yapısal yeniden düzenlemelerin kompleksi gözlemlenebilir. Kristalografik analiz, kristal kafesindeki patolojik değişiklikleri supramoleküler seviyede tespit etmeyi mümkün kılar. Bu değişiklikler patolojik bir sürecin gelişimi için erken tanı kriteri olarak hizmet edebilir.

1.1.4. Biyolojik sıvıların morfolojisi

Çeşitli biyoakışkanların morfolojik resminin incelenmesi, doğa bilimlerinde iyi bilinen bir yön olup, birçok disiplinden bilim adamının son yıllarda özel ilgi göstermeye başladığı bir konudur. Şu anda, vücudun durumu, bireysel organ ve dokuların işlevleri hakkında ifade aşamasında bilgi elde etmek için bir yöntem geliştirilmiştir. klinik bulgular hastalıklar ve semptom öncesi aşamada, yani şu veya bu nitelikteki patolojik bir sürecin (inflamatuar, onkolojik, taş oluşumu, hipoksik-iskemik, sklerotik, vb.) gelişim düzeyinde. Çeşitli biyopolimerlerin kristalografisi yöntemi, tekniği ve sonuçların kaydedilmesi açısından basittir. Araştırıldı morfolojik resim standart bir ince kesit olan susuz (kurutulmuş) biyolojik sıvı damlası. Örneğin, bir damla idrar incelendiğinde, böbrek dokusunda taş oluşum sürecinin aktivitesi ve mevcut veya gelişmekte olan böbrek taşının bileşimi (ürat, kalsiyum oksalat, kalsiyum fosfat) belirlenebilir; genitoüriner sistemin kandidiyazının akut veya kronik seyri, böbrek dokusunda hipoksik-iskemik hasar ve sürecin ciddiyeti (hipoksik nefropati, interstisyel nefrit, akut böbrek yetmezliği, böbrek enfarktüsü); bakteriyel enfeksiyon (patojenin tipini belirlemeden).
Bir damla biyolojik sıvı, bir kişinin neyle hasta olduğunu ve durumunun ne olduğunu söyleyebilir. biyolojik yaş. Gerçek bir mikroskop camının üzerine bir damla kurutulmuş sıvı damlatılır ve monitörde birçok kez büyütülmüş bir görüntü belirir. "Aç karnına alınan bir damla tükürükte fraksiyonel üçlü çatlaklar görülüyor, bu durgunluğun kanıtıdır. Kahvaltıdan sonra alınan bir damlada ise çatlak yok, yani tükürük bezlerinin kanalları düzgün. Ama mide suyunun asitliği biraz azaldı”, şimdi ekranda kan serumu bir damla var, kenarlı bir düğmeye benziyor ve radyal çatlaklarla kaplı, çatlakların yapısı dikkatli bir analize tabi tutuluyor: desen periferde görülmesi hastanın kan basıncının zaman zaman vazospazma bağlı olarak arttığını düşündürmektedir.
Profesör S.N. Shatokhina, vücudun iki sisteme bölünebileceğini açıklıyor: hücresel ve hücresel olmayan. Tüm dünya ilk etapta hücreleri inceliyor ancak hücreleri birbirine bağlayan biyolojik sıvılar, onların hayati fonksiyonları hakkında birçok bilgi taşıyor. Bir damla biyosıvı kuruduğunda, içinde kodlanan bilgiler görünür hale gelir. Araştırmacılar, "Kararlı bir duruma geçiş sırasında, bağların gücü iki kat artar" diye açıklıyor: "Suyu çıkardıktan sonra, üzerinde daha önce bulunan elemanların mekansal düzenlemesinin bir modelinin yer aldığı bir film kalıyor" çözünmüş bir durum kaydedilir," hastalığa her zaman yapıyı değiştiren bazı kimyasalların birikmesi eşlik eder, simetri bozulur ve Profesör S.N. Hastada Shatokhina bulundu. Ve bu desenleri bulmak için araştırmacılar damlacıkları kurutmak için özel bir yöntem geliştirdiler. Bir damla tükürük size çok şey anlatabilir. Çürük ve periodontiti yansıtır. Ve ayrıca, örneğin, bir damla tükürükte lamel formların ortaya çıkmasına yol açan pürülan otitis. Uzmanlar bir damla mide suyunu analiz ederek kronik gastrit ve ülserleri tespit eder; eklem sıvısı - artroz; son olarak gözyaşları - glokom, katarakt, retinadaki iltihaplanma süreçleri.
Günümüzde bilim insanları klinisyenlerle yakın işbirliği içinde çalışarak onların gizli patolojileri görmelerine ve tedavi yöntemlerini geliştirmelerine yardımcı oluyor. Araştırmacılar biyoakışkanları analiz ederek aynı zamanda kişinin gerçek biyolojik yaşını da belirleyebiliyor. Kan serumundaki kimyasal yapıda kolesterol olan katmanlı yapılar tarafından üretilir. Gelecekte ondan oluşacak aterosklerotik plaklar gemilerde. Bu, “yaşlanmanın en önemli işaretlerinden” biridir. Bilim adamları ayrıca karşılıklı sağlık potansiyelini de değerlendiriyorlar; bunun için bir test tüpündeki kan bir elektromanyetik alan veya lazerle ışınlanır - böyle bir maruziyetten sonra moleküller arası bağlar yok edilir, bu nedenle bu tür kan kuruduğunda film deseni farklı olacaktır; Sağlıklı bir insanda ışınlama sonrasında bağların yeniden kurulması dört saat sürer. Bir veya üç gün sürerse endişelenmelisiniz. Araştırmacılar, bu yöntemi kullanarak bir kişinin aşırı koşullarda çalışıp çalışamayacağını belirlemenin mümkün olduğuna inanıyor

1.2 Kristalografik araştırma yöntemleri.
1.2.1 Biyolojik sıvıların kristalleşmesi olayını incelemek için önkoşullar

Geçen yüzyılın son çeyreğinde, klinik teşhiste alternatif bir yaklaşım olarak pratik uygulamaları açısından incelenen kristalografik araştırma yöntemlerine bilim camiasından önemli bir ilgi vardı. Çeşitli biyolojik substratların kristalleşme yeteneğinin bütünsel bir değerlendirmesine izin verirler. Son yıllarda, yeni bir teşhis yönü aktif olarak geliştirilmeye başlandı - kristal yapıların oluşumuyla bir sıvının niteliksel bileşiminin belirlenmesine dayanan klinik kristalografi.
Kimyasal maddelerin kristalografik özelliklerine göre kalitatif olarak belirlenmesi yöntemi ilk olarak öğrenci M.V. Lomonosov - T.E. Lovitz. 1804'te ikincisi, maddelerin niteliksel analizi için iki yöntemi tanımladı - "yıpranmış tuz birikintileri" yöntemi ve kristalleşen maddenin çözeltisine başka bir bileşen ekleyerek kristallerin normal oluşumunu değiştirmeye dayanan ve böylece temel oluşturan bir yöntem. kristalografinin iki modern alanı:
1) doğal sıvıların kristalografisi - bir sıvının buharlaşma sırasında oluşturduğu kristallerden niteliksel bileşiminin belirlenmesine dayanan bir yöntem;
2) tezigrafi - test sıvısına standart kristal oluşturan bir çözeltinin eklenmesine ve test sıvısının varlığında standart çözeltinin kristallerindeki değişikliklerin analiz edilmesine dayanan bir yöntem.
Kristalografinin klinik uygulamasına ilişkin ilk deneyim, geçen yüzyılın 60'lı yıllarının başlarına kadar uzanmaktadır. Başlangıçta çoğu araştırmacı tesigrafi yöntemini kullandı. 1964 yılında Daems, prostat hipertrofisi ve karsinomu olan hastaların kan kristalogramları üzerine bir çalışma yaptı. Leal J. ve Finlayson B. (1977), idrarda kristal oluşumunun özelliklerini belirledi.
Kristalografik araştırma yöntemlerinin (CRI) yerli tıpta kullanımı ilk kez bu çalışmada rapor edilmiştir.
Kozhinova A.A. ve Maslennikova L.S. (1968). Neretin V.Ya. ve Kiryakov V.I. (1977) bu yöntem, çeşitli beyin ve omurilik hastalıkları olan hastaların beyin omurilik sıvısını incelemek için kullanıldı. D.B. Kalikshtein ve arkadaşlarının (1981) çalışmasında çeşitli böbrek hastalıkları olan hastaların idrarının tezigrafik resmi incelenmiştir. Usin V.V. (1995), baş ve yüzdeki kronik nörojenik ağrı sendromu olan hastalarda beyin omurilik sıvısı ve tükürükteki kristalografik değişiklikleri inceledi. Ayrıca tesigrafi pediatri, jinekoloji, gastroenteroloji ve tıbbın diğer alanlarında tanı ve prognostik amaçlarla kullanılmıştır.
Şu anda kristalografik analiz neredeyse tüm biyolojik sıvıları (kan, idrar, tükürük, beyin omurilik sıvısı, safra, burun salgıları vb.) incelemek için kullanılmaktadır. Biyolojik sıvıların kristal yapıları, ilgili organ ve dokuların durumu hakkında en önemli bilgileri içerir.
Oftalmolojik patolojinin tanısı için gözyaşı sıvısının (TF) kristalografik analizi ilk kez kullanıldı
Çentsova O.B. 1985'te ortak yazarlarla. Gözyaşı sıvısının tesigrafisi için bir teknik önerdiler - bakır klorürün alkol çözeltisinin eklenmesiyle kristalografi. Konik bir test tüpüne 0,02 ml gözyaşı konulur ve sürekli çalkalanarak 0,1 ml %2 alkol bakır klorür çözeltisi eklenir. Test tüpü pamuklu çubukla kapatılır ve oda sıcaklığında çökelmeye bırakılır. 1 saat 20 dakika sonra, elde edilen çözeltinin bir damlası bir cam slayta uygulanır ve bu cam, bir Petri kabına, bir termostat içinde 25°C sıcaklıkta iki saat süreyle yerleştirilir. Kuluçka döneminin ardından sonuçların makro ve mikroskobik değerlendirmesi yapılır.
Tezigrafik resmin özellikleri, göz ve yörüngenin inflamatuar, distrofik ve tümör hastalıkları olan hastalarda not edildi. Chentsova O.B.'ye göre. ve diğerleri, yetişkinlerde ve çocuklarda gözyaşı sıvısının kristalografik modeli (CPC), normalde şeffaf, uzun, seyrek olarak yerleştirilmiş silindirik kristallerdir ve bunlar, çoğunlukla üçgen şeklinde düzenli bir geometrik model halinde birleştirilir. Çentsova O.B. ve arkadaşları (1989), yörünge hastalıklarının ayırıcı tanısı için SF'nin CGI'sini gerçekleştirdiler. Yazarlar, endokrin oftalmopatisi, inflamatuar yörünge hastalıkları ve neoplazmaları olan hastalarda gözyaşı preparatlarında normdan niteliksel farklılıklar belirlediler.
O zamandan bu yana, kristalografik inceleme bu yazarlar ve diğer yazarlar tarafından çeşitli göz hastalıklarının tanısında kullanılmaktadır.
Tyurikov Yu.A., Pokoeva V.A. (1992), doymuş sulu glisin çözeltisinin eklenmesi ve oda sıcaklığında günlük maruz kalma ile tesigrafi tekniğini kullandı. Göz içi ve yörünge neoplazmaları olan hastaların kristalogramlarında karakteristik değişiklikler ortaya çıktı.
Bazı yazarlar SG tesigrafisini sadece teşhis için değil aynı zamanda etkilenen gözün SG'sinin GC'sinin dinamik izlenmesi için de kullandı (Kokarev V.Yu. ve diğerleri, 1990; Somov E.E., Brzhesky V.V., 1994; E.I. Ustinova ve diğerleri). arkadaşları (1996), tüberküloz sürecinin aktivite evresinin ayırıcı tanısı ve açıklığa kavuşturulması için ek bir laboratuvar testi olarak SF'nin kristalografik inceleme yöntemini önerdi.
Chukhman T.P. (1999), SG tesigrafi tekniğini geliştirerek, gözyaşı ve kristal oluşturan çözelti karışımının uzun süreli çökelmesinin, araştırma süresini kısaltan santrifüjlemeyle değiştirilmesini önerdi. Ayrıca çeşitli inflamatuar göz hastalıkları için SG'nin CGI'si gerçekleştirilmiş ve tespit edilmiştir. karakteristik türleri Klinik öncesi aşamada bile komplikasyonları zamanında tespit etmeyi mümkün kılan kristaller. Ek olarak yazar, çeşitli dış faktörlerin (preparatların kuruma sıcaklığı, nem) yanı sıra gözyaşı toplama yöntemlerinin kristalojenez üzerindeki etkisini inceledi.
Bilim adamlarının biyolojik sıvıların tesigrafi yönteminin tıpta kullanımına olan ilgisi bugüne kadar yüksek olmaya devam ediyor. Bununla birlikte, tesigrafinin oldukça emek yoğun bir teknik olduğu, ek reaktiflerin kullanılmasını gerektirdiği ve sonuçların yorumlanmasının zor olduğu ortaya çıktı (Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 1997). Ayrıca tesigrafi yönteminin dayandığı kristalizasyon sürecinin desenleri de bilinmemektedir. Daha basit ve daha erişilebilir kristalografik araştırma yöntemlerinin araştırılması, biyoakışkanların doğal preparatlarının kristalografisine adanmış bir dizi çalışmanın ortaya çıkmasına yol açmıştır.
Sonuç olarak çeşitli hastalıkların tanısında birincil test olarak kullanılabilecek ekspres bir yöntemin geliştirilmesine ihtiyaç vardır. Ayrıca, seçimi için gerekli gereksinimler, yeterli derecede doğruluk ve önemli maddi kaynaklara yatırım yapmadan yaygın kullanım olasılığıdır (Menshikov V.V., 1988; Nazarenko G.I., Kishkun A.A., 2000; Zelenin V.A., Bulychev V.F., Steklova G.P. ve diğerleri, 2004).
Tıbbın çeşitli alanlarından uzmanlar bu sorunla ilgilenmeye başladı. Bunun sonucu, bir yandan invazif olmayan, diğer yandan hızlı bir şekilde ön sonuçların elde edilmesini mümkün kılan tükürük teşhisinin hızlı gelişimiydi (Borovsky E.V., Leontyev V.K., 1991; Sukmansky O.I., 1991; Komarova L.G., Alekseeva O.P., 1994; Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997; Butaev M.T., 1998; Grigoriev I.V., Chirkin A.A., 1998; Bulgakova V.A., 1999; Erichev I.V., Korotko G.G., Reshetova I.V., 1999; Denisov A.B., 2000, 2001;).
Kimyasal bileşiklerin kristalleşme yeteneklerine göre kalitatif olarak belirlenmesine yönelik yöntemler ilk olarak 1804-1805'te M. V. Lomonosov'un öğrencisi T. E. Lovitz tarafından önerildi. Eserlerinde, incelenen maddelerin yapısının niteliksel analizi için iki orijinal test tanımladı. Bu, "yıpranmış tuz biriktirme yöntemi" (kristalin birikintiler) ve ayrıca mikrokristalin reaksiyonlardır. Yukarıdakilerden ilki, çok daha sonra geliştirilen ilaçların niteliksel belirleme yönteminin temeliydi (Knizhko P.O., 1956; Bubon N.T., Puzyrevsky K.Ya., 1965; Nikolskaya M.N., Gandel V.G. , Popkov V.A., 1965; Lobanov V.I., 1966). Mikrokristal reaksiyon tekniği artık adli tıpta uygulama alanı bulmuştur (Belova A.V., 1960; Semenova T.D., 1972; Taher M.A. Assad, 1995).
İnsan biyolojik sıvılarının kristalizasyonu ile ilgili fikirlerin geliştirilmesi bağlamında, çeşitli patolojik durumların teşhisinde uygulanabilirliği sorunu önem kazanmaktadır (Kokueva O.V., Savina L.V., Lee A.M., 2000; Zubeeva G.N., Motyleva I.M. , Potekhina Yu.P., 2001; Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2001; Vorobyov A.V., Vorobyova V.A., Neshtakova N.L., 2002; Alekseeva O.P., Vorobyov A.V., 2003; Volosnikova N.N., Muzlaev G.G., Savina L.V. ve diğerleri, 2003; Rapis E.G., 2003; Anaev E. Kh., Shatokhina S.N.., Chuchalin A.G., 2004).
Bu bağlamda, niteliksel ve gizli metabolik bilgilerin şifresini çözmeyi amaçlayan kristaloskopik araştırma yöntemleri, niceliksel bileşim biyolojik ortamlar.
Ek olarak, birleşik bir analiz şeması, kristalografik çalışmaların birleştirilmesine ve basitleştirilmesine katkıda bulunabilir. Bu hem ayırıcı tanıda hem de oryantasyon testi yapılırken faydalı olacaktır.
Vücudun biyolojik substratlarının tanısal kristalizasyonunun sonuçlarının standartlaştırılmasında önemli bir faktör, pratik olarak sağlıklı olanların yüzleriyle ilgili olarak hastanın yüz bileşimindeki niteliksel ve niceliksel değişiklikler hakkında bilgi içeren, kristaloskopik bir teste ilişkin birleşik bir sonuç biçimi olabilir. bireyler (yapıların sayısı ve boyutunda değişiklikler, belirli bir biyosıvı oluşumu için patolojik olanların ortaya çıkışı vb.).

1.2.2 Kristalografiyle ilgili fikirlerin mevcut durumu
Araştırma Yöntemleri

Kristalografik araştırma yöntemleri- Vücudun ve/veya parçalarının metabolizması ve homeostazisi hakkında bilgi elde etmeye yönelik, çeşitli kimyasal bileşimlerdeki temel maddeler tarafından serbest veya başlatılan, kurutulmuş sıvı veya sıvı biyolojik materyalin kristal oluşumu ve daha sonra yorumlanması olgusuna dayanan bir dizi metodolojik yaklaşım. kristalojenezin sonuçları.
Geçtiğimiz otuz yılda, tanısal kristaloskopinin gerçekleştirilmesine yönelik çok sayıda metodolojik yaklaşım oluşturulmuştur, ancak bunların çoğunun esasen dehidrasyon sürecini gerçekleştirme koşullarının yalnızca bir modifikasyonu olduğu, ancak yalnızca ayırt edilmesi mümkün göründüğüne dikkat edilmelidir. prensipte üç seçenek: analiz edilen biyolojik sıvının doğrudan kurutulması durumunda serbest kristalizasyon; “biyolojik çevre - temel kristal oluşturucu madde” sisteminin dehidrasyonunun sonucu görselleştirildiğinde, esas olarak ikincisinin yapı oluşumunun incelenmesine dayanarak başlatılan kristalojenez; kısmi kristalizasyon (model kompozitler yöntemi), belirli bir biyolojik substratın kristaloskopik resminin ayrı ayrı bileşenlerini yeniden oluşturmak için kullanılan bir dizi yöntemdir ve bu nedenle öncelikle bilimsel araştırma için önemlidir.
Modern kristaloskopide bugüne kadar genel olarak aşağıdaki yöntemler önerilmiştir:
1) Klasik kristaloskopi (Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. ve diğerleri, 1990; Savina L.V., 1992, 1999; Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2001; Alekseeva O.P., Vorobyov A.V., 2003) en yaygın seçeneklerden biridir. özü, daha önce de belirtildiği gibi, biyolojik sıvıların doğrudan kristalizasyonu olan bir dehidrasyon testinin gerçekleştirilmesi. Preparasyonların hazırlanması hem oda koşullarında hem de bir termostatta (37-400C) gerçekleştirilebilir, ancak çok sayıda literatüre göre biyolojik ortam mikropreparasyonlarının hazırlanma süresi 1-2 gündür ve bu, gereksinimleri açıkça karşılamamaktadır. hızlı testler için. Bu bağlamda, mikro numunenin hazırlanmasında harcanan sürenin optimize edilmesi amacıyla kurutma koşullarında önemli ayarlamalar yapılması gerekmektedir.
Bu kristaloskopik yaklaşımın, bir biyosıvının kristal oluşturucu özelliklerinin değerlendirilmesine izin verdiği ve bu nedenle yalnızca teşhis açısından önemli fasiyesler (kristalize numuneler) elde etmekle kalmayıp aynı zamanda analiz edilen substratın ayrı ayrı bileşenlerinin varlığını da tespit ettiğine dikkat edilmelidir (Savina). L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V. Yu. ve diğerleri, 2003). Bu konu özel literatürde yeterince çözülmemiştir, ancak biyolojik ortamlar, biyoloji ve tıptaki patolojik kalıntıların pratik olarak tanımlanması (insan ve hayvan patolojisinin patojenik yönlerinin incelenmesi ve ayrıca patojenlerin makul seçimi ve değerlendirilmesi) açısından önemlidir. ilaçlı ve ilaçsız tedavinin etkinliği (Buiko A.S., Tsykalo A.L., Terentyeva L.S. ve diğerleri, 1977; Erichev I.V., Korotko G.G., Reshetova I.V., 1999; Zaichik A.S., Churilov L.P., 2001; Alekseeva O.P., Vorobyov A.V., 2003; Baydaulet I.O., 2003). Bu, dehidrasyonun kısmi modellenmesi de dahil olmak üzere, biyolojik sıvıların bileşenlerinin kristalojenez özelliklerinin incelenmesini gerektirir. Bu sorunu çözmenin belirli yolları L.V. Savina ve diğerleri tarafından önerildi. (2003). Bu metodolojik yaklaşımın tüm önemiyle birlikte, bu durumda, bir biyosubstrat kristalojenezinin doğasını belirleyen en önemli faktörlerden birinin dikkate alınmadığı kabul edilmelidir - biyoakışkanın farklı bileşenleri arasındaki moleküller arası etkileşimlerin varlığı. kimyasal yapıda, bu da kesin kristaloskopik resimlerin oluşumunda, özellikle dehidrasyon işlemi sırasında kristalizasyon kuşaklarına dönüştürülen fasiyeslerin "birincil bölgelerinin" sayısını ve çapını belirlemede önemli bir rol oynar (Koleditsev M.N. , 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maychuk N.V., 2002; Koledintsev M.N., Maychuk N.V., 2002).
Kristal oluşumunu simüle etmek için benzer girişimler G. G. Korotko (2000) tarafından da yapılmıştır; bu daha sonra tartışılacaktır.
2) Tesigrafi (Nefedova N.B., Tsyvenkova L.A., 1985; Moroz L.A., Kalikshtein D.B., 1986; Gugutishvili T.G., Simonishvili L.M., 1990; Kidalov V.N.., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004) aynı zamanda en yaygın ve en çok kullanılan tekniklere de atıfta bulunur. yaygın yöntemler kristaloskopik bir testin gerçekleştirilmesi ve kristal oluşum süreçlerini başlatmak için insan vücudunun kurutulmuş biyosıvısına çeşitli kimyasal maddelerin ek olarak sokulmasını temsil eder. Bu amaçla, çoğu kompleks oluşturucu özelliklere sahip olan çok çeşitli kristal oluşturucu maddeler (NaCl, CaCl2, MgCl2 ve diğerleri) kullanılır ve konsantrasyonları çeşitli yazarlar büyük ölçüde farklılık gösterir.
Bu kristalografik yöntemin kullanıldığı laboratuvarlarda uygulaması klasik tezografi yani Bir biyomateryal ve temel kristal oluşturucu bir maddeden oluşan bir sistemin dehidrasyon sonucunun bağımsız bir numune olarak değerlendirilmesi, farklı koşullar ve farklı fonksiyonel durumlar altında elde edilen numunelerin karşılaştırılmasındaki objektif zorluklar nedeniyle elde edilen bilgilerin yorumlanmasını önemli ölçüde zorlaştırır. incelenen deneklerin vücutları. Bu bağlamda, yukarıda açıklanan yaklaşıma uygun olarak oluşturulan bir tesigram, elde edilen sonucun önceden var olan "örüntülerle" ("fotografik" yaklaşım) karşılaştırılmasını gerektirir (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2002; Baydaulet I.O., 2003; Beloglazov V. G. , Atkov E.L., Fedorov A.A. ve diğerleri, 2003; Volosnikova N.N., Muzlaev G.G., Savina L.V. ve diğerleri, 2003; Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004) veya ampirik olarak keşfedilen parametrelerin değerleri (Tarusinov G.A., 1994; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V. ., 2002), ancak bu faktör, tesigrafik teşhisin bilgi içeriğini ve güvenilirliğini kesinlikle ve önemli ölçüde azaltır.
Şu anda tesigrafik fasiyeslerin tanımlanması, analizi ve yorumlanması için genel kabul görmüş bir şema-algoritmanın bulunmadığını ve bunu elde etmek için birleşik bir yöntem bulunmadığını vurgulamak önemli görünüyor.
Temel maddelerin kontrol numunesinin kullanımına ilişkin izole raporlar mevcuttur (Tarusinov G.A., 1994), ancak bilinmeyen nedenlerden dolayı kullanımı keskin bir şekilde sınırlıdır (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2003; Martusevich A.K., 2004).
3) Profil dehidrasyonu (Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 1999). Belirli bir konsantrasyondaki lesitin çözeltisi ile önceden işlenmiş bir cam slayta biyolojik sıvıların uygulanmasını içerir. Yazarlara göre lesitin yardımıyla kristallerin baza olan afinitesini değiştirmek ve sonuç olarak dehidre biyosubstratların termodinamik özelliklerini dönüştürmek mümkün görünüyor.
4) Vakumlu kristaloskopi (Savina L.V., 1999), preparatların vakum koşulları altında hazırlanmasını (kurutulmasını) içerir. Bu, susuz kalmış numunenin dış ortamdan izolasyonunu sağlayarak biyolojik ortamın sıvı kısmının ve biyokristalizasyon işlemlerinin doğrudan uzaklaştırıldığı nispeten kapalı bir sistem oluşturur.
5) Biyolojik sıvıların kapalı bir hücrede kristalizasyonu (Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997). Oluşturulan numunenin dış ortamdan izolasyonu, vakum kristaloskopisine benzer şekilde sağlanır, ancak teknik olarak bu yöntem, vakum koşullarının oluşturulmasını gerektirmediğinden, yalnızca kapalı bir hücrenin kullanılmasını gerektirdiğinden pratik kullanıma daha uygundur. doğrudan mikroskobik analiz yapmak mümkündür. Değişikliğin yazarları biyomateryalin ön santrifüjünü kullandılar.
6) Kemer kristalloskopisi, kristal kemerlerin ve bireysel kristal oluşumlarının incelenmesine dayanan kristalografik bir araştırma yöntemidir (Koledintsev M.N., 1999; Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V., 2002; Koledintsev M.N., Maychuk N.V., 2002). Yöntemin fiziko-kimyasal temeli, belirli bir biyolojik ortamın unsurları olan maddelerin moleküler kütlelerine bağlı olarak biyolojik sıvıların bileşen bileşiminin heterojenliği ve sonuç olarak bunların süreçteki fasiyeslerde hareket etme konusundaki farklı yetenekleridir. Numunenin kademeli olarak dehidrasyonu ve fasiyeslerin oluşumu. Bu, bir veya (çok daha sık olarak) birkaç kristalizasyon kuşağının oluşumuna yol açar; bunların kaydı, kişinin biyolojik bir sıvının belirli bir özelliğini yargılamasına olanak tanır (M.N. Koledintsev, D.F. Nechaev, N.V. Maichuk, 2002).
7) Kama şeklindeki dehidrasyon yöntemi (V.N. Shabalin, S.N. Shatokhina, 2001-2005). Şeffaf bir düzlem üzerine yerleştirilen bir damla biyolojik sıvının suyunu kurutmaya yönelik bir yöntem. Damlanın enine kesiti kama şeklindedir ve bu da radyal yönde eşit olmayan bir dehidrasyon oranı için koşullar yaratır. Bu, fizikokimyasal parametrelere uygun olarak susuz damla hacmindeki çözünen maddelerin ozmoforetik hareketine ve incelenen sıvının elde edildiği organizmanın durumuna karşılık gelen net, kesinlikle bireyselleştirilmiş yapıların oluşmasına neden olur.
8) Polarizasyon mikroskobu (Rapis E.G., 1976; Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997; Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V. Yu. ve diğerleri, 2003) – serbest veya başlatılan kristalin sonuçlarını değerlendirmek için bir yöntem Polarize ışıkta biyolojik bir sıvının oluşumu, bazılarının tanımlanmasına olanak tanır Ek özellikler hem bir bütün olarak fasiyesler hem de bireysel yapısal elemanların yanı sıra dokusunu da karakterize eder. Kristalojenez sonuçlarının görselleştirilmesine yönelik yaklaşımın evrensel bir modifikasyonudur ve biyolojik ortamın incelenmesine yönelik kristalografik yöntemlerden herhangi birine ek olarak kullanılabilir.
9) Substrat toplanması (G. G. Korotko, 2000) - biyolojik substratların (lipitler, proteinler, polisakkaritler) bileşenleri olan ayrı bileşenlerin kristal oluşumunu simüle etmenize olanak tanıyan yardımcı bir kristalografik yöntem. Bu durumda, "model kompozitler" yöntemiyle karşılaştırıldığında, çeşitlilik açısından biyolojik ortamın gerçek bileşimine daha büyük bir yaklaşım elde edilir, ancak bileşenlerin tam oranı açısından bu mümkün değildir, ancak değişiklikleri hesaba katmak mümkündür. Biyosıvının ana biyokimyasal elementlerinde.
10) Sıvı kristal termografisi (Buiko A.S., Tsykalo A.L., Terentyeva L.S. ve diğerleri, 1977; Shkromida M.I., Pospishin Yu.A., 1977) - kristalografik araştırmalar için umut verici bir teknik, temel nokta kolesterik sıvı kristalin kullanımıdır (erime sıcaklığı aralığı 33.5-38.20C veya 36.8-41.20C) çalışılan yüzeylerin kolesteril pelargoleat, kolesteril oleat vb. sistemlerle kaplanması. Bu durumda, üzerine bileşimin uygulandığı bir "substrat" ​​olarak cilt kullanılır. Sıvı kristallerin durumunun dönüşümünün yorumlanması, özel bir spektrofotometre kullanılarak değerlendirilir.
Bu metodolojik yaklaşımın oldukça geniş teşhis yetenekleri, açık vaatlerine, basitliğine ve uygulama hızına rağmen şu anda pratikte kullanılmamaktadır.
11) Biyolojik sıvılardan bir taşıyıcıya enerji-bilgi aktarımı yöntemi (Vorobiev A.V., Vorobyova V.A., Neshtakova N.L. ve diğerleri, 2002), bilgilerin biyolojik ortamdan "saf bezelye süt şekeri"ne aktarılmasından ve daha sonra bunların birleştirilmesinden oluşur. 0,1 ml baz madde (% 5 sulu bakır sülfat çözeltisi) içeren bir cam slayt. Mikroslaytların hazırlanması 24 saat boyunca karanlık bir odada gerçekleştirilir.Değerlendirme, elde edilen kristalizasyon numunelerinin kalitatif analizi ile gerçekleştirilir.
Biyolojik substratların dehidrasyonuna dayalı bir testin yürütülmesine yönelik bu kadar çeşitli metodolojik seçenekler, muhtemelen farklı yaklaşımların kullanılmasının, elde edilen sonuçların daha iyi tanımlanmasına katkıda bulunmasından kaynaklanmaktadır (tablo). Metabolitlerin bütününde gizli olan bilgilerin ve bunların biyomateryallerdeki niceliksel ve niteliksel ilişkilerinin ortaya çıkarılması, kristaloskopik teşhisin en önemli ve önemli görevlerinden biridir. Çok sayıda yazarın bakış açısından (Alekseeva V.I., 1965; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. ve diğerleri, 1990; Antropova I.P., Gabinsky Ya.L., 1997; Plaksina G.V., Rimarchuk G.V., Butenko S.V. ve diğerleri, 1999; Shabalin V.N., Shatokhina S.N., 2001, 2004; Alekseeva O.P., Vorobyov A.V., 2003; Baydaulet I.O., 2003; Rapis E.G., 2003; Savina L.V., 1999; 2003; Bystrevskaya A.A., Deev L.A., 2004; Zalessky M.G., Emmanuel V.L., Krasnova M.V., 2004; Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N., 2004; Gromova I.P., 2005), bileşimindeki metabolik değişiklikleri ortaya çıkarmada birincil rol insan ve hayvan vücudunun ortamı, bireysel oluşumlar (kristal ve amorf doğa) arasındaki deterministik ilişkiler dikkate alınarak niteliksel bileşene verilir. Gözlemlenen farklılıkların objektifliği açısından açık bir kriter olmasına rağmen niceliksel bileşene çok daha az dikkat edilmektedir.

1.2.2.1. Biyolojik substratların tesiyokristaloskopisi tekniğinin genel özellikleri

Yukarıda sunulan literatür bilgilerinin analizine dayanarak, aynı cam üzerinde gerçekleştirilen klasik kristaloskopi ve karşılaştırmalı tezografinin eşzamanlı ve paralel uygulamasına dayanan biyolojik substratların bütünleştirici bir tesiyokristaloskopi yöntemi de önerildi. Bu, hem biyolojik bir sıvının doğrudan kristalleşme yeteneğini hem de araştırmacı tarafından belirlenen temel kristal oluşturucu maddeye göre başlatıcı potansiyelini değerlendirmeyi mümkün kılar (Tablo 1).

Tablo 1. Bazı kristalografik yöntemlerin karşılaştırmalı özellikleri

• deneysel kısım

• 2.Araştırmanın nesneleri, amaçları ve yöntemleri

• 2.1. Çalışmanın amaçları, hedefleri ve aşamaları.

• Bu çalışmanın amacı Sağlıklı farelerden ve lenfoid lösemili (LL) farelerden alınan kurutulmuş idrar örneklerinin morfolojisinin incelenmesi.
• Çalışmada belirtilen amaca ulaşmak için aşağıdakiler formüle edildi: görevler:
• 1. Biyosubstratların kristalografisi sorunlarına ilişkin modern literatürü inceleyin.
• 2. Biyosubstratların tesiyokristaloskopisini gerçekleştirme tekniğinde ustalaşın.
• 3. Sağlıklı farelerde idrar kristal oluşumunun doğasını değerlendirin.
• 4. LL ile fare idrarında başlatılan kristalojenezin özelliklerinin belirlenmesi.
• Çalışma, Kirov Hematoloji ve Kan Transfüzyonu Araştırma Enstitüsü'nün kan ve doku koruma laboratuvarı temelinde gerçekleştirildi.
• Araştırma aşamaları:

1. ACR hattının sağlıklı laboratuvar farelerinin araştırma için hazırlanması.
2. ACR farelerinde löseminin lenfoid formunun aşılanması.
3. Sağlıklı fareler ve lösemili farelerde araştırma için biyosubstrat (idrar) toplanması.
4. Sağlıklı farelerden ve lösemili farelerden mikro idrar numunelerinin hazırlanması.
5. Sağlıklı farelerden ve lösemili farelerden alınan kurutulmuş mikro idrar numunelerinin tesigrafik analizi.

• Çalışmanın konusu sağlıklı fareler ve lösemili farelerin idrarının tezigrafik “desenleri” idi.
• Bu deneysel çalışmanın amacı 10 sağlıklı farenin ve 10 lösemili farenin idrarıydı.
• Tezigrafi testi için temel madde olarak aktif kristal oluşturucu olan %10'luk sodyum klorür çözeltisi kullandık.
• Toplamda, kontrol grubundan (sağlıklı fareler) ve lösemili farelerden (deney grubu) alınan 20 idrar mikro örneği elde edildi.
• Çalışmanın deneysel kısmı, lösemili sağlıklı farelerden alınan kurutulmuş idrar örneklerinin morfolojisinin incelenmesini içeriyordu.

2.2 Bulaşıkların ve çalışma alanının hazırlanması

Çalışmada kullanılan tabaklar (test tüpleri, ölçüm pipetleri, cam slaytlar) deterjan kullanılarak sıcak su ile yıkandı, önce musluk suyuyla, sonra da distile su ile durulandı ve kurutuldu.
Daha önce ambalaj kağıdına sarılmış kapların sterilizasyonu, 120°C sıcaklıkta ve 1 atm basınçta bir otoklavda 25 dakika süreyle gerçekleştirildi.
Biyolojik sıvının toplanması sırasındaki çalışmalar, Roszdrav Federal Devlet Kurumu "KNIIG ve PK" hayvan laboratuvarında (vivarium) gerçekleştirildi. Kan serumunun tesiyokristalskopik fasiyeslerinin daha ileri düzeyde elde edilmesi, Rusya Sağlık Bakanlığı'na bağlı Federal Devlet Kurumu "KNIIG ve PK" kan ve doku koruma laboratuvarında gerçekleştirildi. Çalışmadan önce oda 30 dakika boyunca kuvars lambayla ışınlandı. Çalışma masası işten önce ve sonra %70 alkolle temizlendi.

2.3. Kullanılan araştırma yöntemleri

2.3.1 Tesiyokristalskopik test prosedürü

Sağlıklı ve lösemik farelerin biyosubstratlarının (kan serumu) kristal optik özelliklerinin incelenmesi, teziyokristaloskopi yöntemi kullanılarak gerçekleştirildi (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005; Martusevich A.K. ve diğerleri, 2000-2006).
0,3 ml'lik bir hacimdeki biyolojik malzeme numuneleri (kan serumu, idrar, tükürük, ter, gözyaşı vb.), önceden yağı alınmış, yıkanmış ve kurutulmuş bir cam slayta uygulanır; bu, daha önce belirlediğimiz gibi, hem açıdan hem de optimaldir. cam alanı ve sonraki analizlere tabi olan kristal ve amorf yapıların sayısı açısından. Teziyokristaloskopi yöntemi arasındaki fark, incelenen cama 3 numunenin uygulanmasıdır (Şekil 2.1), bunlardan ilki (1) yalnızca biyomateryal içerir, ikincisi (2) - biyoakışkan ve kristal oluşturucunun bir karışımı (temel) ) madde, üçüncü (3) - kristal oluşturucu bileşiğin kontrolü. Baz madde olarak %10 NaCl çözeltisi kullanıldı.

Şekil 2.1. Teziyokristaloskopi yöntemi kullanılarak hazırlanan bir preparatın şeması

Elde edilen mikropreparasyon, sıcak hava akımında değiştirilmiş bir yöntem kullanılarak kurutulur. Bu durumda camın yatay konumu ve buna karşılık gelen akış yönü, numunelerin aynı koşullar altında dehidrasyonunu sağlayarak havuzlanmalarını önlemelidir. Daha sonra ortaya çıkan kristaloskopik modeller, kristalografik ve tesigrafik bileşenler için ayrı ayrı geleneksel şemaya göre analiz edilir.
Bir damla substratın ıslak bir yüzey (cam) üzerinde kurutulması 3 farklı bölgenin oluşumuna yol açar: dış (marjinal - su, elektrolitler, düşük moleküler ağırlıklı bileşikler); iç (merkezi - konsantre yüksek moleküler proteinler, elektrolitler, düşük moleküler bileşikler) ve ara madde, en düşük madde konsantrasyonuyla karakterize edilir. İç bölge, ifade edilmiş ve ifade edilmemiş sınırlara sahip olabilir. Kristal ve amorf yapılar genellikle iç sınırın dış çevresine bitişiktir.
Kolloidin kurumasına, geri çekilmesi, düşük moleküler bileşiklerin konsantrasyonunda bir artış ve çeşitli tiplerde kristal yapıların oluşumu eşlik eder.
Elde edilen sonuçların istatistiksel işlenmesi ortamda gerçekleştirildi Microsoft Excel Yerleşik işlevleri kullanan XP.
Kristaloskopik desenleri yorumlamak için karşılaştığımız tüm kristal ve amorf oluşumları sınıflandırdık (Tablo 2.1, Şekil 2). Bu sınıflandırmaya uygun olarak klasik kristaloskopi tekniği kullanılarak analiz için hazırlanan preparatların değerlendirilmesi yapıldı. Hem biyoakışkanın kristaloskopik özelliklerine hem de karşılaştırmalı özelliklerine ilişkin genel bir çalışma yapıldı.

Tablo 2.1 Biyoakışkanların “klasik” kristaloskopik analizinde karşılaşılan kristal ve amorf yapılar

Not: * - miktar olarak değişiklik gösterir (küçük - toplamda görme alanı alanının %30'undan azını kaplar, orta miktar - toplamda görme alanı alanının %30-50'sini kaplar, çok sayıda - toplamda görme alanı alanının %50'sinden fazlasını kaplar) görme alanı alanı) ve boyutta (küçük, orta, büyük, agregalar).
Kurutulmuş biyolojik sıvıların çok sayıda mikro preparatının analizine dayanarak, her biri spesifik oluşumlar içeren 5 sınıf kristal yapı tanımlandı (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005;) (Tablo 2.1). Bazıları için, kimyasal bileşim deşifre edilmiştir; bu, belirli bir yaklaşımla, kristalin dinamik bir çalışması durumunda biyolojik ortamdaki bileşen oranlarının niteliksel ve niceliksel özelliklerindeki değişiklikleri değerlendirmeyi mümkün kılar. ikincisinin özelliklerini oluşturur.
Ayrı bir kategori, kristal olmayan yapıdaki cisimler - amorf oluşumlar tarafından oluşturulur. Kalsiyum karbonat türevleri, boyut ve miktar açısından son derece değişkendir ve teşhis değeri olabilir.
Ayrıca susuz biyosubstrat fasiyesindeki büyük kristaller ve amorf parçacıklar arasındaki etkileşimin türü de ilgi çekicidir (Şekil 2). Bu fenomenin bilgi içeriği henüz belirlenmemiştir, ancak bizim görüşümüze göre, bir biyoakışkanın kristalografik olarak görselleştirilmemiş bileşenlerinin (örneğin, protein makromolekülleri, yağlar, karbonhidratlar vb.) ) kristalojenez üzerine.

Pirinç. 2.2.Kristal ve amorf yapıların etkileşimleri

Analiz edilen biyolojik sıvının fizikokimyasal özellikleri hakkında ek bilgi elde etmek için, klasik kristaloskopinin sonucunu değerlendirmek için aşağıdaki parametreleri içeren ek kriterler geliştirilmiştir (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005):
1. Hücresellik (I)– fasiyeslerdeki organik-mineral etkileşimlerinin özelliklerini yansıtır. Değerlendirme, altı noktalı düz bir ölçekte (0-5 puan) yapılır; 0 puan, bu fenomenin meydana geldiğine dair işaretlerin tamamen yokluğu ve 5 puan, hücreselliğin mikroskop olmadan görünürlüğüdür.
2. Tekdüzelik eleman dağılımları (R)– serbest kristalojenez sürecinin doğruluğunu gösteren bir kriter. Ayrıca tesigrafi bileşeni bölümünde verilen altı puanlık ölçeğe (0-5 puan) göre yorumlanır.
3. Marjinal bölgenin yoğunluğu (Kz)– biyolojik ortamın protein bileşeninin varlığını ve miktarını gösteren bir parametre (Shatokhina S.N., 1995; Nazarova L.O., Shatokhina S.N., Shabalin V.N., 2000). Bu göstergeyi yarı niceliksel altı puanlık bir ölçekte değerlendirmek için bir plan öneriyoruz:
- 0 puan – mutlak yokluk marjinal bölge, çizgiler ifade edilir, fasiyes kenarı bölgesinde yerel yıkım belirtileri;
- 1 puan - ışık mikroskobunun düşük büyütmesinde kenar bölgesi zayıf bir şekilde görülebilir, belirsiz bir şekilde ifade edilen "örtülü" olanlar da dahil olmak üzere tek "kırılmalar" gözlenir;
- 2 puan – kenar bölgesi açıkça görülebiliyor, neredeyse tekdüze, az sayıda “hata” gözleniyor;
- 3 puan – kenar bölgesi ara bölgeden açıkça ayrılmıştır, homojendir, kenar halkası boyunca “hatalar” belirtilmiştir ve yıkıcı değildir;
- 4 puan – marjinal bölge net bir şekilde görselleştirilmiştir, ara bölgeden bir “şaft” ile sınırlandırılmıştır, önemli sayıda “kırık” vardır, ancak mikroskopi olmadan ayırt edilemez.
- 5 puan – marjinal bölge mikroskopi olmadan görüntülenir, tekdüzedir, tahribat belirtisi yoktur; mikroskopi önemli sayıda "kırık" olduğunu gösterir.
4. Fasiyes Tahribatı Derecesi (SDF)– kristalojenezin doğru seyrini (fasiyeslerin ana niteliksel özelliği) yansıtan ve hem dışsal (dehidrasyon sürecinin koşulları - sıcaklık, nem, basınç, hava akış hızı, ek maddelerin girişi vb.) ve endojen faktörler (termodinamik bileşen kristal oluşumu, kristal hidratların oluşumu için yeterli miktarda suyun varlığı ve organik makromoleküllerin stabilizasyonu vb.).
* 0 derece- fasiyeslerin tüm unsurlarının doğru konfigürasyonda olması, hem bir bütün olarak hem de bireysel alanlarda tahrip edilmemiş olması, fasiyes dokusunun tahrip edildiğine dair hiçbir işaretin bulunmaması;
* derecem- fasiyes unsurlarının ilk tahribat belirtileri var, dokuda hiçbir yıkıcı değişiklik gözlenmiyor;
*II derece– çok sayıda tahrip edilmiş veya değiştirilmiş yapı görselleştirildi, doku bütünlüğünün yerel olarak ihlal edilmesi;
* III derece- fasiyesin tüm unsurları tahrip edilmiştir, fasiyesin ve yapının ayrı ayrı kısımlarını ayırt etmek imkansızdır, numune şekilsiz, genellikle renkli, malzemeden oluşan şekilsiz bir kütledir; doku tahribatının açık işaretleri var.
Genel olarak, oluşturulan yapıların modellenmesi ve çeşitli değerlendirme kriterlerinin kullanılması, kristaloskopik resimdeki değişikliklerin daha net bir şekilde ayırt edilmesine katkıda bulunacaktır, ancak bunlarla aşırı "aşırı yüklenme", fasiyes analiz sürecinde önemli bir komplikasyona yol açacaktır.
Biyolojik substratların başlatma yeteneğini değerlendirmenin yukarıda tartışılan klasik tesigrafiden (Tarusinov G.A., 1994) daha bilgilendirici bir yolu olarak, karşılaştırmalı tesigrafiyi kullandık (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2002-2005; Martusevich A.K. ve diğerleri, 2000-2005). ), çeşitli dış koşulları dengelemek amacıyla saf bir bazik maddenin ek bir kontrol numunesinin kullanımını içerir; başlama yönünü (kristal oluşturucunun kristalojenezinin aktivasyonu veya depresyonu) ve ciddiyetini belirtmeyi mümkün kılar.
Yukarıda belirtildiği gibi, tesigrafik fasiyeslerin değerlendirilmesi, ilkinin morfolojisinin homojenliği ile ilişkili olan kristaloskopik fasiyeslerin değerlendirilmesinden daha zordur ve bu nedenle, klasik kristaloskopi için bir tanımlama tablosu zaten geliştirilmişse ve ek kriterler dikkate alınacaktır. sadece açıklayıcı bir rol oynarlar, daha sonra tesigrafik testte lider pozisyonlar alırlar (Nefedova N.B., Tsyvenkova L.A., 1985; Moroz L.A., Kalikshtein D.B., 1986; Gugutishvili Ts.G., Simonishvili L.M., 1990; Kidalov V. N., Khadartsev) A.A., Yakushina G.N., 2004; Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2003-2005). Bu bağlamda, tesigrafik fasiyesler dikkate alınırken kullanılabilecek bir kriter sınıflandırması önerilmektedir:
I. Temel kriterler
- Temel tezigrafik katsayı Q
- Rasyonel katsayısı P
- Başlatma katsayısı M
- Bağıl katsayı N
II. Ek kriterler
fasiyes yoğunluğu tekdüzeliği (R);
resmin hücresellik derecesi (I);
kaos endeksi (CH)
bireysel kristalleşme bölgelerinin ciddiyeti (Z)

Yukarıdaki kriterlerin tanımlanması, gerekli türev katsayısının belirlenmesinde her göstergenin öneminin doğrulanmasına dayanan, tesigrafik özelliklerin değerlendirilmesine yönelik birleşik bir matematiksel yaklaşım oluşturulmasını mümkün kılmıştır (Martusevich A.K. ve diğerleri, 2004, 2005).

Kullanılan hesaplama katsayılarına ilişkin açıklamalar:
I. Ana kriterler:
Q = A / B, burada A, test numunesindeki kristalizasyon merkezlerinin sayısıdır, birimler; B - kontrol numunesindeki kristalizasyon merkezlerinin sayısı, birimler.
P = d1 / d2, burada d1 minimum kristalizasyon bölgesinin yarıçapıdır, mm; d2 - maksimum kristalleşme bölgesinin yarıçapı, mm.

II. Ek kriterler:
R - tesigrafik fasiyeslerin, noktaların elemanlarının dağılım yoğunluğunun tekdüzelik derecesi;
I - tesigrafik fasiyeslerin hücresellik derecesi, noktalar.

Araştırmamız, tesigrafik fasiyeslerin tanımlanmasında yukarıda vurgulanan katsayıların bilgi açısından önemini varsaymamıza olanak sağladı:
1. Temel tezigrafik katsayı Q- malzemenin etkisi altında baz maddenin (çoğu durumda, doğal nötr koşullar altında tipik dehidrasyon yapılarının oluşumuna eğilimli olan izosmotik konsantrasyonda bir sodyum klorür çözeltisi) kristalojenezinin organizasyon / düzensizlik derecesini gösterir. çalışmak.
2. Gerekçe katsayısı P- incelenen substrat bileşenlerinin moleküler kütlelerinin heterojenlik derecesini gösterir.
3. Resmin hücresellik derecesi I- muhtemelen biyolojik ortamın sulu bir çözeltisinde yağda çözünebilen bileşenlerin varlığının yanı sıra, hidrofiliklik/hidrofobiklik derecesine göre farklı kimyasal bileşimlere ve özelliklere sahip protein kümelerinin varlığını gösterir.
4. Parametre R - yapıların tesigrafik fasiyesler boyunca düzgün dağılımını vurgular. Malzemede lokal olarak kristalojenezin inhibisyonuna neden olabilecek görselleştirilemeyen bileşenlerin içeriğini gösterebilir. Mikro örneğin kurutulma yöntemiyle ilgili olabilir.
Tesigrafik fasiyeslerin değerlendirilmesine yönelik yukarıdaki göstergelere dayanarak, tesigrafik fasiyeslerin kompozisyonunu kaydetme özelliklerinin kısa bir derecelendirmesi ek değerlendirme kriterlerine göre formüle edilmiştir (Kamakin N.F., Martusevich A.K., 2005):
1. Fasiyesler boyunca kristal yapıların dağılım yoğunluğunun tekdüzeliği (R):
0 puan - fasiyeslerin tam kaosu, heterojen elementlerin varlığı, boşluklar, kristal yapıların biriktiği yerler, görüş alanındaki oluşumların farklı yönelimi.
1 puan - bazı kristal gruplandırmaları, izole edilmiş alanlar ana hatlarıyla belirtilmiştir doğru inşaat Görüş alanının toplam alanının% 30'undan azını kaplayan figürlerin yönü hala kaotik.
2 nokta - görsel alan alanının% 30 ila% 50'sini kaplayan (çalışılan en az üçünün her birinde) net "adalar" gözlenir, gruplardaki öğeler arasındaki mesafeler yaklaşık olarak eşitlenir, bir miktar yönlülük modeli kaydedildi yapısal oluşumlar yüzler.
3 puan - fasiyeslerin oldukça önemli sayıda yapısal elemanı (toplamın% 50'sinden fazlası) yapılandırılmıştır, tekdüzelik “adaları” nispeten geniş alan. Bu bölgeler içerisinde, bireysel oluşumlar arasındaki mesafelerin doğru konumu ve tekdüzeliği gözlenir. Elemanların yön düzeni ve imar oldukça net bir şekilde ayırt edilir.
4 puan - fasiyes elemanlarının çoğu yapılandırılmıştır (toplamın %75'inden fazlası), geri kalanı görüş alanı boyunca genellikle kenar bölgede "adalar" halinde dağılmıştır. Bireysel oluşumlar arasındaki mesafeler neredeyse sabittir. Elemanların yönelimi, görüş alanının neredeyse tüm yüzeyi üzerinde belirli bir modeli takip eder.
5 puan - tezigrafik fasiyesin tüm unsurları, tüm görüş alanı boyunca açıkça yapılandırılmıştır ve bu, çeşitli alanların incelenmesiyle doğrulanmıştır. Merkezi, orta ve kenar bölgelere bölünme, mikroskop olmadan görsel kontrolle bile açıkça görülebilir; ikincisinin sınırları belirlenebilir. Resmin elemanları arasındaki mesafeler sabittir, figürlerin yönelimi doğrudur, fasiyesin tüm yüzeyi boyunca doğaldır.
2. Fasiyes hücreselliğinin tezahür derecesi (I):
0 puan - hücresellik belirtilerinin tamamen yokluğu, resmin homojenliği, kristal "adalarının" tanımlanmaması. Fasiyesler kristal oluşumların tek bir “katmanını” temsil eder.
1 puan - ilk heterojenlik belirtilerinin varlığı, kristaloskopik resmin "ezilmesi" (teşhis açısından en önemli ilkeler vurgulanmıştır):
element gruplarının ayrılmasının başlangıcı (tüm oluşumların% 30'undan azı, görsel alan alanının% 30'undan daha azını kaplar);
resmin bazı heterojenliği;
kristal figürlerin tek bir "katmanının" "ezilmesinin" başlangıcı.
2 puan - fasiyeslerin "parçalanmasına", kristal "adalarının" oluşumuna yönelik oldukça gözle görülür bir eğilim vardır (teşhis açısından en önemli ilkeler vurgulanmıştır):
“Adalardaki” izole edilmiş elemanların sayısı tüm yapıların% 30 ila% 50'sidir, fasiyes görüş alanı yüzeyinin% 30'undan fazlasını kaplarlar;
belirgin heterojenlik, resmin bölgeselliği;
Fasiyesleri bölümlere "bölme" süreci görselleştirilir, bazı durumlarda tüm uzunluk boyunca değil, 1 kristal kalınlığında ikincisinin sınırları olarak hizmet eden, oluşan kristalizasyon kuşakları kaydedilir.
3 puan - fasiyeslerde belirgin değişiklikler gözlendi:
“Adalar”daki unsurlar toplam sayının %50 ila %75'ini oluşturur, kapladıkları yüzey görüş alanının %50'sinden fazladır (birkaç alanda);
resmin belirgin heterojenliği, "grenliliği";
Fasiyeslerin “parçalanma” süreci çeşitli görüş alanlarında açıkça görülebilmektedir;
Kristalizasyon kuşakları oldukça belirgindir ve birden fazla sıra kristal yapıdan oluşur.
4 puan - hücresellik belirtileri güvenilir bir şekilde görülebilir (teşhis açısından en önemli ilkeler vurgulanmıştır):
hücrelerde gruplanan yapıların sayısı, ikincisinin toplam sayısının% 75'inden% 100'üne kadar;
gruplandırılmış öğeler tüm görsel alanı kaplar (birkaç, en az üç görsel alanı incelerken);
kristalizasyon kuşakları birden fazla kristal sırasından oluşur ve görüş alanının tüm yüzeyi üzerinde bulunur, "adaları" tamamen çevreliyor.
5 puan - resim aşağıdaki morfolojik özelliklerle karakterize edilir (teşhis açısından en önemli ilkeler vurgulanmıştır):
hücrelerde gruplanan yapıların sayısı, ikincisinin toplam sayısının %75 ila %100'ü arasındadır;
gruplandırılmış öğeler tüm görsel alanı kaplar (birkaç, en az üç görsel alanı incelerken);
resmin "parçalanmışlığı" ve "grenliliği" çok açık bir şekilde ifade ediliyor;
kristalleşme kuşakları birden fazla kristal sırasından oluşur, görüş alanının tüm yüzeyinde bulunur ve "adaları" tamamen çevreler;
resimde "kırıklar" var (bu fenomenin geçerli olduğu kan serumu görünümü hariç) bağımsız teşhis işareti).

Genel olarak, yukarıda açıklanan kriterlerin, göstergelerin ve hesaplanan katsayıların kullanılması, analiz edilen substratların niteliksel ve niceliksel bileşiminde gizli olan bilgi yükünün çıkarılması prosedürünü algoritmalaştırmamıza olanak sağladı.
Bu şemaya uygun olarak, analiz iki ana yönde adım adım gerçekleştirilir - serbest kristalojenez ve başlatılan kristal oluşumunun incelenmesi, bu, bir biyoakışkanın hem doğrudan kristal oluşturma yeteneğini hem de başlatma potansiyelini kapsamlı bir şekilde değerlendirmeyi mümkün kılar. .

Pirinç. 2.3.Tesiyokristalloskopik fasiyeslerin değerlendirilmesi için algoritma.

Dolayısıyla, matematiksel aparatların yaygın kullanımı, biyolojik sıvıların, fiziksel ve kimyasal özellikleri ve dolaylı olarak kalitatif ve kantitatif bileşen bileşimi hakkında büyük miktarda bilgi sağlayan kristalojenezleri yoluyla çok parametreli olarak değerlendirilmesini mümkün kılar. , klinik, öncelikle tanısal, pratik ve temel bilimler için özel bir öneme sahiptir.

2.4 İstatistiksel veri işleme

Araştırma sırasında incelenen tüm kayıplardan elde edilen gerçek materyal, varyasyon istatistikleri yöntemiyle işlendi (Tyurin Yu. N., Makarov A. A., 1998; Nasledov A. D., 2004). Ortalama değerler (M), bunların standart hatası (m) ve standart sapması () hesaplandı. Göstergeler p değerlerinde güvenilir kabul edildi<0,05 (по t-критерию Стьюдента и U-критерия Манна-Уитни). Зависимость между признаками оценивали при помощи коэффициента парной корреляции (r), его ошибки (mr) и уровня значимости различий (по t-критерию Стьюдента). Зависимость считалась сильной при r  >0,7, eğer çift korelasyon değerinin modülü 0,3-0,7 aralığındaysa ortalama. Modal değer olan 0,3'ten küçük bir korelasyon değeri bulunduğunda zayıf olarak kabul edildi. Bulunan çift korelasyonunun güvenilirliği (p) de hesaplandı.
Hesaplamalar Microsoft Excel 2003 elektronik tablo ortamında ve ayrıca Primer of biostatistics 4.03 ve SPSS 11.0 istatistiksel yazılım paketleri kullanılarak yapıldı.

3. Araştırma sonuçları.

Serbest kristalojenez sonuçlarının doğrudan değerlendirilmesi, 5 ana kristal ve amorf madde sınıfı (morfometri) ve ayrıca ek kriterler (fasiyes tahribat derecesi - SDF, kenar bölgesinin ciddiyeti (Kz) dahil olmak üzere tek bir tanımlama tablosu kullanılarak gerçekleştirildi. ) ve hücresellik (I), dağıtım elemanlarının tekdüzeliği (R)). Tesigrafik fasiyesler, temel (ana tesigrafik katsayı Q, bölgesellik katsayısı P) ve ek parametrelerden (klasik kristaloskopi için kullanılanlara benzer) oluşan bir sistem kullanılarak analiz edildi.
Sağlıklı ve lösemik farelerde serbest ve başlatılan idrar kristalojenezinin dinamiklerini inceledik.

3.1. Sağlıklı ve yapay olarak enfekte lösemili farelerin idrarının morfolojisi.

Kurutulmuş idrar örneklerinin mikro preparatlarına ilişkin analizimiz, söz konusu koşullar için net "örüntüler" oluşturmamıza olanak sağladı.
Sağlıklı ve hasta hayvanlardan elde edilen kristaloskopik desenler arasında bir karşılaştırma yapıldı.

Tablo 3.1. Sağlıklı farelerin ve lösemili hastaların kristalloskopik özellikleri.

Tablo 3.1'de verilen verilere göre, kontrol ve deney grupları arasında kristaloskopik düzende belirgin farklılıklar olduğu açıktır.

Görsel morfometri sonuçlarına dayanarak, lösemili farelerin idrarının kristaloskopik resminin, sağlıklı hayvanlarla karşılaştırıldığında önemli özelliklerinin olduğu tespit edilmiştir; bunların arasında en önemlileri şunlardır:
tek kristalli bileşende kaydedilen değişiklikleri doğrulayan, çizgili polikristal yapıların tamamen yokluğu haricinde, hasta farelerde dendrit sayısında bir artış;
miktarlarının genişlemesi ve azalmasından oluşan amorf oluşumların konsantrasyonu, büyük kristal figürlerden vurgulanan sınırlamaları;
fasiyeslerin tahribat derecesinde bir artış (kristaloskopik fasiyeslerin istikrarsızlığının ana göstergesi);
fasiyes elemanlarının ayrışmasının eşlik ettiği, bir mikro numunedeki kristalin ve amorf oluşumların dağılımının tekdüzeliğinde bir azalma, hücresellik derecesinde önemli bir artışla kendini gösterir (p)<0,05).
Fare kan serumunun kristal oluşturma yeteneğinin değerlendirilmesinin sonuçlarına dayanarak, sağlıklı farelerin ve lösemili farelerin karakteristiği olan bir "desen" oluşturuldu.

3.2. Normal koşullar ve patoloji (lösemi) altında farelerde kan serumunun tesigrafik özelliklerini değerlendirmek için ana kriterler.

Çalışma hem löseminin niteliksel belirteçlerinin araştırılmasını hem de tezigrafinin niceliksel “örüntülerinin” oluşturulmasını içeriyordu. Hasta farelerin idrarındaki patolojik değişiklik belirtilerinin tespitine dayanarak teşhis açısından önemli bir dizi niteliksel parametre derlendi.
Şekil 2'de sunulan verilere uygun olarak. Şekil 2.4'te, baz madde olarak %10 sodyum klorür çözeltisi kullanıldığında sağlıklı fareler ve lösemili farelerin idrar tesigramlarının en önemli ayırt edici göstergeleri şunlardır:
- temel maddenin biyolojik çevre tarafından başlatılmasının doğası (sağlıklı farelerde - temel maddenin kristalojenezinin belirgin aktivasyonu, lösemili hasta farelerde - orta derecede inhibisyon);
- biyosıvının eşit olmayan organik-mineral bileşimi (sağlıklı farelerde mineral bileşenlerin baskınlığı ve lösemili farelerde organik bileşiklerin baskınlığı);
- deney grubunun temsilcileri arasında biraz daha yüksek olan fasiyes tahribatının derecesi;
- lösemili farelerin yüzlerindeki marjinal bölgenin genişlemesi; pratik olarak sağlıklı bireylerde belirgin şiddette olması ve bu durumun, löseminin varsayılan bir belirteci olması.

Tablo 3.2. Sağlıklı fareler ve lösemili farelerin idrarının karşılaştırmalı tezigrafisi (temel madde - %10 sodyum klorür çözeltisi)

Not: “*” – kontrol grubu p'ye göre farklılıkların önemi<0,05

Pirinç. 2.4. Lösemili farelerde idrar tezigrafisi için ana ve ek kriterlerde sağlıklı farelere göre değişiklikler

3.3 AKR fareleri

Yüksek düzeyde lösemik AKR fare çizgisi, 1928'de yakın akraba bireylerin çaprazlanmasıyla elde edildi. Her iki cinsiyetteki fareler, lenfoid lösemiye karşı duyarlıdır. Kadınların yaklaşık %91'i 300 gün içinde lösemiden ölmektedir.

3.4 Lösemi gelişiminin dinamikleri.

Pirinç. 3.1 Fasiyes homojendir, belirgin oluşumlar yoktur – sağlıklı fare X40

Pirinç. 3.2 Fasiyesler homojendir, marjinal bölgenin ilk parçalanma belirtileri ortaya çıkar - lösemi gelişiminin ilk belirtileri, 5 aylıkken. X40

Pirinç. 3.3 Yapının heterojenliği, marjinal bölgenin zayıf ifadesi, hücreselliğin tezahürü - lösemi gelişiminin başlangıcı. 7 ay X40

Pirinç. 3.4 Çizgi dendritik yapıların ortaya çıkmasının başlangıcı löseminin gelişmesidir. 8 ay X40

Pirinç. 3.5 Fasiyes - löseminin yapısında 9 ay boyunca çizgili ve dikdörtgen dendritik yapılar baskındır. X40

Pirinç. 3.6 Fasiyeslerin belirgin hücreselliği, elementlerin eşit olmayan dağılım yoğunluğu - ileri derecede gelişmiş lösemi. 13 ay X40

3.5 Sonuçlar

Kuru bir idrar damlasının yüzeyinde deneysel bir biyoörnekteki çeşitli niteliksel parametrelerin (en az 3) tespitine dayanarak, patolojik değişikliklerin varlığını veya akut löseminin gelişim derecesini belirlemek mümkün görünmektedir.
Tablo 3.2'de verilen verileri kullanarak, Q ve P katsayılarına göre idrar tesigramlarında değerlerindeki önemli farklılıkların kaydedildiği not edilebilir.
Tablo 3.2'de sunulan verilere uygun olarak, tesigrafinin ana göstergeleri arasındaki farkların güvenilirliği, niteliksel işaretler kullanılarak tespit edilen idrarın tesigrafik fasiyeslerinin özelliklerinin önemini doğrulamaktadır.
Bu nedenle, sağlıklı farelerde ve lösemili farelerde karşılaştırmalı idrar testografisi yönteminin kullanılması, lösemi varlığının niteliksel ve niceliksel belirteçlerinin tanımlanmasını mümkün kılar.
Biyoakışkanların tesiyokristalskopik analizi, içerdikleri metabolik bilgilerin multiparametrik olarak değerlendirilmesine olanak tanır; bu, insanlarda ve hayvanlarda fizyolojik ve patolojik durumların belirlenmesinde yararlı olabilir. Her biyoakışkanın, kimyasal bileşimlerinin ve fonksiyonlarının farklılaşmasıyla ilişkili olan kendi kristalojenez özellikleri vardır.
Kristaloskopik bileşeni incelerken, tek bir tanımlama tablosunun ve tesigrafik bileşenin - ana (Q ve P katsayıları) ve ek (desen dağılımının tekdüzeliği, hücresellik vb.) değerlendirme kriterlerinin kullanılması önerilir. Araştırmanın devamı, insan vücudundaki fizyolojik ve patolojik reaksiyonların gelişiminin alt ve moleküler mekanizmaları hakkında fikirlerin geliştirilmesine hizmet edecektir.

Kullanılan literatürün listesi:

1. Agafonov V. A., Bagrov S. N. Vitreus cismin durumunun kurutma yöntemi kullanılarak incelenmesi // Makalelerin toplanması. bilimsel makaleler “Lens ve vitreusun transsiliyer cerrahisi.” - Moskova. – 1982. – S. 158-164.
2. Alekseeva O. P., Vorobyov A. V. Tükürüğün kristalografisi - H. pylori teşhisi için yeni, invaziv olmayan bir yöntem // Nizhny Novgorod Tıp Dergisi. – 2003. - Sayı 2. – s.73-78.
3. Antropova I.P., Gabinsky Ya.L. Tükürük örneğini kullanarak biyosıvının kapalı bir hücrede kristalleştirilmesi // Klinik laboratuvar teşhisi. - 1997. - Sayı 8. - S.36-38.
4. Babenko G.A. Malign büyüme, metaller ve şelatlayıcı maddeler. Mikro elementlerin biyolojik rolü. - M.: Nauka, 1983.
5. Barer G.M., Denisov A.B., Mikhaleva I.N. ve diğerleri. Ağız sıvısının kristalleşmesi. Substrat yüzeyinin bileşimi ve temizliği // Deneysel Biyoloji ve Tıp Bülteni. – 1998. – T. 126, Sayı 12. – s. 693-696.
6. Can güvenliği. Teknolojik süreçlerin ve üretimin güvenliği (İş güvenliği). Ah. üniversiteler için el kitabı/P. P. Kukin ve diğerleri - M., 1999.
7. Brown G., Walken J. Sıvı kristaller ve biyolojik yapılar. M.: Mir, 1982. – 198 s.
8. Bubon N. T., Puzyrevsky K. Ya.Papaverinin tespiti için mikrokristalloskopik reaksiyon // Eczacılık işi. – 1965. - No.2. – S.50-52.
9. Buzoverya M.E., Shishpor I.V., Shatokhina S.N. ve diğerleri. Kan serumu fasiyesinin morfometrik analizi // Klinik laboratuvar teşhisi. - 2003. - Sayı 9. - sayfa 22-23.
10. Bystrevskaya A. A., Deev L. A. Gözyaşı sıvısının yapısının uyaran tipine ve substratın kalitesine bağımlılığı // III Tüm Rusya Bilimsel ve Pratik Konferansı “Biyolojik Sıvıların Fonksiyonel Morfolojisi” Materyalleri. - Moskova. – 2004. – S.17-19.
11. Wegman E.F., Rufanov Yu.G., Fedorchenko I.N. Kristalografi, mineraloji, petrografi ve radyografi. M.: Metalurji, 1990. – 263 s.
12. Volchetsky A.L., Ruvinova L.G., Spasennikov B.A. ve diğerleri. Kristalleşme ve kristalografi: tıbbi ve biyolojik yönler. Arkhangelsk, 1999. – 374 s.
13. Volchetsky A.L., Spasennikov B.A., Agafonov V.M. ve diğerleri. Tesigrafik analiz yönteminin ve bilgisayar yönünün değiştirilmesi // İnsan Ekolojisi. – 1999. – Sayı 3. – s.38-42.
14. Vorobyov A.V., Vorobyov P.V., Vorobyova V.A. Hassas kristalografi yöntemini kullanarak bir kişinin enerji-bilgi bileşeninin belirlenmesi // Proc. XI Moskova Uluslararası Homeopatik Konferansı'nın raporları “Modern tıpta homeopatik yöntemin geliştirilmesi.” - Moskova. –2001. – s. 202-207.
15. Vorobyova V.A., Vorobyov A.V., Zamarenov N.A. İnsan biyolojik sıvısının ve homeopatik bir ilacın kristal oluşturucu bir çözelti ile etkileşimi sırasında kristalografik bir resmin oluşum modeli / Keşif. – 231 No'lu Rusya Doğa Bilimleri Akademisi Diploması. (Rüçhan 8 Haziran 2002 tarihlidir).
16. Golubev S. N. Yaşayan kristaller // Doğa. – 1989. - No.3. – S.13-21.
17. Gordienko A.N., Kurbatova L.A., Filippov A.N. // Kristalleşme fiziği. - Kalinin. – 1985. – Sayı. 8. – s. 83-86.
18. Gromova I. P. “Açık damla” yöntemini kullanarak toksikolojik ve hijyenik bir deneyde kan serumunu incelemek için kristalloskopik yöntem // Hijyen ve Sanitasyon. – 2005. – No.2. – s.66-69.
19. Gulyaev V.G., Martusevich A.K., Koshkin A.N. Adli tıpta kristalografik araştırma yöntemlerinin kullanımına ilişkin özellikler ve beklentiler // Mat. İnternet katılımıyla üniversiteler arası bilimsel ve pratik konferans "Kriminoloji ve uzman faaliyetinin güncel sorunları: sorunlar ve beklentiler." - Kirov: KF MSAL. - 2004. – S.35-39.
20. Gulyaeva S.F., Martusevich A.K., Pomaskina T.V. Maden suyu alımının etkinliği için bir kriter olarak tükürüğün başlatılan kristalojenezinin sonucunun matematiksel modellenmesi // İnsan Ekolojisi. – 2005. – Sayı 7. – s.33-35.
21. De Zhe V. Sıvı kristalli maddelerin fiziksel özellikleri. M.: Mir, 1982. – 175 s.
22. Deryabina N. I., Zalessky M. G. Kuruduğunda bir damla kan serumundaki protein bileşenlerinin içeriği // Yeni tıbbi teknolojiler bülteni. – 2005. – T. XII, No. 1. – s. 85-87.
23. Dawson R, Elliot D, Elliot W ve diğerleri. Biyokimyacının El Kitabı. M.: Mir, 1997. - 544 s.
24. Zamkova N. G., Zinenko V. I. Solunum ve polarize edilebilir iyon modelinde iyonik kristallerin kafes dinamiği. // FTT. - 1998. - T. 40, No. 2. - S. 350-354.
25. Zaitsev V.V., Zaitseva N.B., Usoltseva N.V. Miyokard enfarktüsü geçiren hastaların biyolojik sıvı kristallerinin dokuları // Bilimler Akademisi Bildirileri. Fiziksel seri - 1996. - cilt 60, sayı 4 - sayfa 115-118.
26. Zinenko V. I., Zamkova N. G. ASVKh 4 kristallerinde faz geçişleri ve orantısız fazın Monte Carlo yöntemiyle incelenmesi. // Kristalografi. - 2000. - T. 45, No. 3. - S. 513-517.
27. Zinenko V. I., Zamkova N. G. Yer değiştirme tipinin (elpasolit yapıya sahip kristaller) ve düzen-düzensizlik tipinin (potasyum sülfat ailesi) yapısal faz geçişlerinin mikroskobik hesaplamaları. // Kristalografi. - 2004. - T.1, No.1. – s. 38-45.
28. Ivanov O. V., Shport D. A., Maksimov E. G. Perovskit kristallerinde ferroelektrik kararsızlığın mikroskobik hesaplamaları // JETP - 1998. - T. 114, No. 1. - P. 333-358.
29. Kalikshtein D.B., Moroz L.A., Kvitko N.N. ve diğerleri. Biyolojik substratların kristalografik çalışması // Klinik tıp. – 1990. - Sayı 4. – S.28-31.
30. Kalikshtein D. B., Moroz L. A., Chernyakov V. L. İdrar araştırmasında tesigrafik yöntemin önemi // Laboratuvar çalışması. – 1981. - No.2. – S.79-81.
31. Kalinin A.P. ve diğerleri Bazı endokrin hastalıklarında kan serumunun kristal biriktirme yönteminin bilgilendiriciliği // Tüm Rusya Bilimsel ve Pratik Konferansı tutanaklarının toplanması. "Tıpta kristalografik araştırma yöntemleri", Moskova - 1997. - S. 131-133
32. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Biyoakışkanların tesiyokristaloskopi tekniği üzerine // Klinik laboratuvar teşhisi. - 2002. - Sayı 10. - S.3.
33. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Biyolojik sıvıların bileşiminin kristaloskopik tanımlanmasına modern yaklaşımlar // İnsan Ekolojisi. - 2003. - Sayı 5. - s. 23-25.
34. Kamakin N. F., Martusevich A. K. Normal koşullarda ve patolojide insan vücudunun biyolojik sıvılarının tesiokristalskopik portresinin özellikleri // Yeni tıbbi teknolojiler bülteni. - 2003. - T.X, No. 4. - s. 57-59.
35. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Kolevatykh E.P. Birincil ve ikincil biyokristalizasyon hakkında // Makalelerin toplanması. bilimsel çalışmalar “Doğa bilimi ve hümanizm”. – Tomsk. – 2005. – T.2, No.1. – s.18-19.
36. Kamakin N.F., Martusevich A.K., Koshkin A.N. Kristalografik araştırma yöntemlerinin geliştirilmesine yönelik beklentiler // Vyatka Medical Bulletin. - 2003. - No.3. - S.6-11. Kamakin N.F., Martusevich A.K. Normal ve patolojik koşullarda insan vücudunun biyolojik sıvılarının tesiyokristalskopik portresinin özellikleri // Yeni tıbbi teknolojiler bülteni. 2003. T. X. No. 4. P. 57–59.
37. Kamyshnikov V. S. Klinik ve biyokimyasal laboratuvar teşhisi el kitabı. 2 cilt halinde Minsk: Belarus, 2000. Cilt 1. 495 s.; T.2. 463'ler.
38. Karkishchenko N. N. Biyomodellemenin temelleri. M.: Yayınevi VPK, 2004. – 608 s.
39. Karachunsky A.I. Çocuklarda akut lenfoblastik lösemi. Pediatrinin güncel sorunları üzerine dersler. Ed. V.F.Demina, S.O.Klyuchnikova., M: RGMU; 2000.
40. Kidalov V.N., Khadartsev A.A., Yakushina G.N. Tesiografik kan testleri ve pratik yetenekleri // Yeni tıbbi teknolojiler bülteni. – 2004. – T. XI, No. 1-2. - s. 23-25.
41. Koledintsev M.N., Nechaev D.F., Maichuk N.V. Oftalmolojide kristalografik analizin fiziksel temelleri // Makale koleksiyonu. soyut Genç bilim adamları ve öğrencilerin uluslararası katılımıyla düzenlenen "St. Petersburg Bilimsel Okumalar-2002" bölgelerarası bilimsel ve pratik konferansının raporları. - St.Petersburg. - 2002. - S.42-43.
42. Kolotilov N. N., Bakai E. A. Biyolojik nesnelerin sıvı kristal yapısı // Moleküler biyoloji. – 1980. – Sayı. 27. – s. 87-96.
43. Kononenko E.V., Mironov E.V. Agregasyon sırasında bir biyosıvı dokusunun dönüşümünün dislokasyon-ayrılma mekanizmaları // Proc. 2. Tüm Rusya bilimsel ve uygulamalı konferansının bilimsel bildirileri “Tedavi etkinliğinin tanı ve izlenmesinde biyolojik sıvıların morfolojisi.” - Moskova. – 2001. – S.21-26.
44. Korago A. A. Biyomineralojiye giriş. St. Petersburg: Nedra, 1992. – 280 s.
45. Koshkin A.N., Martusevich A.K., Lopatin M.A. Bir teşhis yöntemi olarak insan vücudunun biyosıvılarının kristalloskopisi // Rusya Devlet Tıp Üniversitesi Bülteni. – 2002. - No.1. – S.134.
46. ​​​​Tıpta kristalografik araştırma yöntemleri: Sat. ilmi 1. Tüm Rusya Bilimsel ve Pratik Konferansı Bildirileri. - M., 1997.
47. Biyolojik substratların incelenmesi için kristaloskopik yöntem: Yöntem. öneriler / L. A. Moroz, I. L. Theodor, V. E. Bryk ve diğerleri. – M., 1981. – 9 s.
48. Kuznetsov V. D. Kristaller ve kristalleşme. M., 1954. – 65 s.
49. Kuznetsov A.V., Rechkalov A.V., Smelysheva L.N. Gastrointestinal sistem ve stres. Kurgan: Kurgan Devlet Üniversitesi Yayınevi, 2004. – 254 s.
50. Kuznetsov N.N., Vershinina G.A., Skopinov S.M. ve diğerleri. Çocuklarda endojen zehirlenme sendromunun ciddiyetinin değerlendirilmesinde optik polarizasyon ve refraktometrik yöntemler // Makale koleksiyonu. 2. Tüm Rusya bilimsel ve uygulamalı konferansının bilimsel bildirileri “Tedavi etkinliğinin tanı ve izlenmesinde biyolojik sıvıların morfolojisi.” - Moskova. – 2001. – S. 30-33.
51. Kuznetsov N.N., Skopinov S.A., Vershinina G.A. ve diğerleri. Çocuklarda endojen zehirlenmenin teşhisi için kristal-skopik yöntem. 03/04/1998 tarihli RF Patent No. 2158923
52. Kungurov N.V., Kokhan M.M., Kononenko E.V. ve diğerleri. Kronik dermatozlu hastalarda biyolojik sıvıların kristalografik çalışmaları. Ekaterinburg, 1997. – 41 s.
53. Kurnysheva N.I., Deev A.I., Gryzunov Yu.A. ve diğerleri. Gözyaşı sıvısının floresan muayenesi yoluyla involüsyonel oftalmik endotoksikozun değerlendirilmesine yönelik bir yöntem.Oftalmoloji Bülteni. – 2000. – No.3. – s.16-19.
54. Lobanov V.I. Bazı barbitürik asit türevlerinin tespiti için mikrokristalloskopik reaksiyonlar // Analitik Kimya Dergisi. – 1966. - No.1. – S.110.
55. Loktyushin A.A., Manakov A.V. Holografik madde modelinde mineraller ve yaşam // Proc. 2. Uluslararası Seminer “Mineraloloji ve Yaşam: Biyomineral Etkileşimleri”. – Syktyvkar. – 1996. – S.10-11.
56. Martusevich A.K. Fizyolojide kristalloskopik araştırma yöntemleri // Rus Fizyolojik Dergisi. I. M. Sechenov. – 2004. – T. 90, Sayı 8. – S.18.
57. Martusevich A.K. Biyolojik sıvıların morfolojisinin bir yansıması olarak kristalleşmenin fiziksel ve biyokimyasal teorisi hakkında bilgi // Sibirya Tıbbı Bülteni. – 2005. – T. 4. – Ek 1. – S. 185.
58. Martusevich A.K., Koshkin A.N. Biyoakışkanların kristalografisinde araştırma yaklaşımının sorunları // Mat. uluslararası katılımlı üçüncü disiplinlerarası konferans “NBITT-21”. – Petrozavodsk. – 2004. – S. 50.
59. Martusevich A.K., Koshkin A.N. İnsan vücudunun biyolojik sıvılarının kristalleşme koşullarının tesiyokristalskopik testin sonucu üzerindeki etkisinin özellikleri // Makalelerin toplanması. ilmi Rusya Federasyonu'nun genç bilim adamlarının ve uzmanlarının adını taşıyan konferansa adanmış makaleleri. akad. B. S. Grakova "Tıp ve yeni teknolojilerin güncel sorunları - 2003." - Krasnoyarsk. - 2003. - S. 154-157.
60. Martusevich A.K., Ponomareva G.L. Lomber osteokondrozlu hastalarda bir değerlendirme numarası kullanarak tesigrafik fasiyesleri tanımlamak için matematiksel yöntemler // Klinik laboratuvar teşhisi. – 2004. - Sayı 9. – s. 85-86.
61. Menshikov V.V. Klinik pratikte laboratuvar testleri. M.: Tıp, 1988. - 428 s.
62. Kağıt kromatografisi kullanılarak kan serumundaki serbest amino asitlerin belirlenmesi için mikro yöntem // Tıbbi laboratuvar teknolojileri. St. Petersburg, 1999. – T. 2. – S. 106-108.
63. Moroz L.A., Kalikshtein D.B. Biyolojik substratların incelenmesi için kristalografik yöntem. Yönergeler. M., 1986. – 24 s.
64. Mushkambarov N. N. Fiziksel ve kolloidal kimya: Ders anlatımı. M.: GEOTAR-MED, 2001. – 384 s.
65. Nazarenko G. I., Kishkun A. A. Laboratuvar araştırma sonuçlarının klinik değerlendirmesi. M.: Tıp, 2000. – 544 s.
66. Nikolskaya M.N., Gandel V.G., Popkov V.A. İnce bir tabakada kristalleşerek sülfonamid ilaçlarının tespiti // Eczacılık işi. – 1965. - Sayı 4. – s. 13-14.
67. PB 10-115-96. Basınçlı kapların tasarımı ve güvenli çalışması için kurallar.
68. Pikin S.A. Sıvı kristallerin yapısal dönüşümleri. - M. - 1981. - 269 s.
69. Plaksina G.V., Komolova G.S., Mashkov A.E. ve diğerleri. Sütteki anjiyojenin biyolojik sıvıların kristal yapısı üzerindeki stabilize edici etkisi // Deneysel Biyoloji ve Tıp Bülteni. – 2003. – T. 136, Sayı 10. – s. 406-409.
70. Plaksina G.V., Rimarchuk G.V., Butenko S.V. ve diğerleri. İdrar muayenesinde kristalografik ve kristaloskopik yöntemin klinik önemi // Klinik laboratuvar teşhisi. – 1999. - Sayı 10. – S.34.
71. Prigogine I., Stengers I. Kaostan Düzen / Çev. İngilizceden M.: İlerleme, 1986. – 429 s.
72. Rapis E. G. İnsan ve hayvanların vitreus gövdesini normal koşullarda ve hemoftalmide kullanmanın mikrokristal-optik yöntemi // Oftalmoloji Bülteni. – 1976. – Sayı 4. – s.62-67.
73. Rapis E. G. Protein ve yaşam. Nanoyapılı supramoleküler protein filmlerinin kendi kendine organizasyonu, kendi kendine birleşmesi ve simetrisi. M.: “MILTA - PKP GIT”, 2003. – 368 s.
74. Romanov Yu.A. Biyolojik sistemler teorisi ve zamansal organizasyonlarının sorunu // Kronobiyoloji sorunları. – 1992. – Sayı 3-4. – s. 105-123.
75. Savina L. V. İç hastalıkları kliniğinde kan serumunun kristaloskopik yapıları: Tezin özeti. diss...d.m.s. - Perm, 1992. - 40 s.
76. Savina L. V. Sağlıklı ve hasta bir kişinin kan serumunun kristaloskopik yapıları. Krasnodar, 1999. – 238 s.
77. Savina L. V. Vakum koşulları altında kan serumunun yapı oluşumu // Klinik laboratuvar teşhisi. – 1999. - Sayı 11. – S.48.
78. Savina L.V., Konueva O.V., Korotko G.G. ve diğerleri. Kronik pankreatitli hastalarda pankreasın ekzokrin fonksiyon bozukluklarının kristalloskopik tanısı / IV Uluslararası Kongresi "Parenteral ve Enteral Beslenme". - Moskova, 2000. - S. 98.
79. Savina L.V., Pavlishchuk S.A., Samsygin V.Yu. ve diğerleri. Metabolik bozuklukların tanısında polarizasyon mikroskobu // Klinik laboratuvar teşhisi. - 2003. - No.3. - s. 11-13.
80. Saltykov A. B. Fonksiyonel sistemlerin oluşum sürecinin morfolojik yönleri // Modern biyolojideki gelişmeler. – 2005. – T. 125, Sayı 2. – s. 167-178.
81. Skalny A.V., Yesenin A.V. İnsan biyosubstratlarını kullanarak insanlara ve çevreye kurşun maruziyetinin izlenmesi ve risk değerlendirmesi // Toksikolojik Bülten. 6, 1996. - s. 16-23.
82. Skopinov S. A. Biyoakışkanlardan tuz kristalizasyonunun bilgisayar modellemesi. // Tıpta kristalografik araştırma yöntemleri. Doygunluk. ilmi 1. Tüm Rusya Bilimsel ve Pratik Konferansı Bildirileri. . M., 1997. İle. 33.36
83. Smotrova S.P., Chesnokova S.M. ve diğerleri Çevre kirliliği koşullarında selenyum eksikliği // III Uluslararası Bilimsel ve Teknik Konferansı "Tıp ve Biyoteknolojide Fizik ve Radyoelektronik" Materyalleri - Vladimir, 1998. - S. 304-305.
84. Sobur S.V. Elektrik tesisatlarının yangın güvenliği: Referans/S. V. Sobur - M., 2003.
85. Sonin A. S. Sıvı kristallerin fiziğine giriş. M., 1989. – 369 s.
86. Kişisel koruyucu ekipman: Ref. ödenek / S. L. Kaminsky. – L., 1989.
87. Surovkina M.S., Shatokhina S.N., Surovkin V.A. ve diğerleri. Yaşlı hastalarda ortalama kütle molekülleri seviyesindeki değişiklikler ve kan plazmasının sistemik organizasyonu // Sat. 2. Tüm Rusya bilimsel ve uygulamalı konferansının bilimsel bildirileri “Tedavi etkinliğinin tanı ve izlenmesinde biyolojik sıvıların morfolojisi.” - Moskova. – 2001. – S. 18-20.
88. Tarasevich S. Yu. // Teknik Fizik Dergisi. – 2001. – T.71, Sayı. 5. – s. 123-125.
89. Tarusinov G. A. Çocuklarda yaygın bağ dokusu hastalıklarının tanı ve ayırıcı tanısında idrarın kristalografik incelenmesi // Pediatri. – 1994. - No.1. – s. 55-57.
90. Tekutskaya E.E., Sofina L.I. ve diğerleri Biyolojik ortamlardaki ağır metallerin içeriğini izleme yöntemleri ve uygulamaları. // Hijyen ve sanitasyon – 1999-No.4–P.72-74.
91. Biyolojik substratların tesiokristaloskopik çalışması: Metodolojik öneriler / Kamakin N.F., Martusevich A.K. - Kirov, 2005. - 34 s.

Hamileliği doğru bir şekilde planlamak, üreme sistemindeki çeşitli bozuklukları tanımlamak ve en uygun doğum kontrol yöntemini seçmek için, bir kadının adet fonksiyonunun doğası hakkında net bir anlayışa sahip olmak gerekir. yumurtlama .

Adet döngüsü Bir adetin 1. gününden bir sonraki adetin 1. gününe kadar olan süreyi temsil eden kadınlar ortalama olarak 28-30 gün. Adet döngüsünün ilk yarısında yumurtalıklardan biri olgunlaşır. folikül sıvıyla dolu ve içinde olgunlaşan bir yumurta içeren bir kabarcıktır. Açık Döngünün 14-15 günü Yumurtlama meydana gelir; bu, döllenmeye hazır, olgun bir yumurtanın folikülden salındığı anlamına gelir.

Yumurtlamadan sonra olgun yumurta 2 gün içinde döllenebilir ve sperm boşalmadan sonraki 4 gün boyunca gübreleme aktivitesine sahiptir. Bu nedenle en olası dönemin toplam periyodu hamile kalma olasılığı 6 gündür .

Muhtemel kavrama periyodunu belirlemek için, yumurtlama anını belirlemek için çeşitli yöntemler kullanılır; bunlar arasında şunlar bulunur: servikal kanalda bulunan mukus kristalizasyonunun veya tükürüğün kristalleşmesinin doğasının değerlendirilmesi; rektumdaki sıcaklığın ölçülmesi; ultrason verileri; hormon seviyelerini incelemek.

Böylece yumurtlama döneminde rahim ağzı kanalında bulunan mukus, bir cam slayta uygulanıp kurutulduktan sonra kristalleşerek eğrelti otu yaprağına benzer bir desen oluşturur. Bu kristalleşme süreci servikal mukusta meydana gelen bir takım biyofiziksel ve biyokimyasal değişikliklerden kaynaklanmaktadır.

Servikal kanalın duvarlarında bulunan bezlerin mukus üretiminin aktivitesi kadın cinsiyet hormonlarının seviyesi tarafından kontrol edilir - estrojen. Yumurtlama anı yaklaştıkça östrojen konsantrasyonu ve aktivitesi artar. Bu, üretilen mukus miktarının artmasına ve içindeki sodyum ve potasyum tuzlarının artmasına neden olur. Sonuç olarak, mukus kuruduğunda içerdiği tuzlar müsin ile etkileşime girer ve bu da eğrelti otu yaprağına benzeyen bir desen oluşturur.

Mukus lekesini mikroskop altında incelerken, döngünün 9. gününden itibaren zayıf kristalleşme belirtilerinin ortaya çıktığı açıktır. Ayrıca, desenin şiddeti giderek yoğunlaşır, yumurtlamadan 3-4 gün önce daha net bir şekilde ortaya çıkar ve yumurtlama gününde en net hatlarına ulaşır. Yumurtlamadan sonra kristalleşme azalır. 2-3 gün içerisinde çizim bulanıklaşır ve “bulanık” bir görünüme bürünür.

Yumurtlama zamanının servikal mukus kristalizasyon testi kullanılarak belirlenmesi, jinekoloğa günlük ziyareti gerektirir. Bazı durumlarda, rahim ağzındaki patolojik değişikliklere veya iltihaplanma sürecine bağlı olarak, kristalizasyon tablosu bozulduğu için çalışma zor olabilir veya sonucun güvenilirliği azalabilir.

Adet döngüsü sırasında kristalleşme düzenlerinde servikal mukusta benzer değişiklikler de tükürükte meydana gelir. Yumurtlama yaklaştıkça östrojen seviyelerindeki artış, tükürükte ve servikal mukusta sodyum ve potasyum tuzlarının miktarında artışa yol açar. Yumurtlama gününde konsantrasyonları maksimuma ulaşır ve kuruduğunda tükürüğün kristalleşmesine yol açar. Yumurtlamayı belirlemek için tükürük kristalizasyon testinin güvenilirliği% 96 ila% 99 arasındadır.

Tükürüğün kristalleşme modelini değerlendirmek ve buna göre yumurtlama zamanını belirlemek için, günlük koşullarda kullanıma uygun, kompakt ve hafif optik aletler olan çeşitli mini mikroskoplar kullanılır.

O günlerde gebelik henüz mümkün değil(yumurtlamadan 5-6 gün önce veya daha fazla) veya artık mümkün olmadığında (yumurtlamadan 3-4 gün sonra) kurumuş tükürük, nokta benzeri bulanık bir desen oluşturur. Yumurtlamadan 3-4 gün önce, desenin eğrelti otu benzeri yapısının oluşmaya başladığını gösteren bir resim not edilir. Yumurtlama yaklaştıkça desen daha netleşecek ve bu da hamile kalma olasılığının yüksek olduğunu gösterecektir. Yumurtlamadan sonraki 2-3 gün içinde desenin netliği azalır.

Ağız boşluğu veya gırtlaktaki inflamatuar süreçler çarpık sonuçlara yol açabilir. Sabah tükürüğünü kullanmanız veya testi yemekten, dişlerinizi fırçalamadan, alkol veya sigara içmeden en geç 2-3 saat önce kullanmanız önerilir.

Hem servikal mukus hem de tükürüğün her mikroskobik kristalizasyon modelinin var olma süresi ve bunun başka bir modelle değiştirilmesi, adet döngüsünün aşamalarına göre sabit ve tutarlı ise, bu, bozukluklarının yokluğunu gösterir; ve yumurtlama uygun zamanda ve her adet döngüsünde gerçekleşir. Aynı kristalizasyon modelinin uzun süreli varlığı, yokluğu veya başka bir modelle zamansız bir şekilde değiştirilmesi yumurtalıkların işlev bozukluğunu gösterir. Bu durumda mutlaka bir doktora başvurmalısınız.

Yumurtlamayı belirlemek için Ayrıca kullanabilirsin sıcaklık testi adet döngüsünün evresine bağlı olarak vücut sıcaklığının belirli bir şekilde değiştiği gerçeğine dayanmaktadır. Meydana gelen termal değişikliklerin doğasına ilişkin en doğru veriler ölçümlerle elde edilebilir. rektumdaki sıcaklık uykudan hemen sonra, istirahat halinde, yataktan çıkmadan, adet döngüsü boyunca her gün. Normal adet döngüsünün ilk aşamasında sıcaklık genellikle düşüktür. 37°C. Kelimenin tam anlamıyla yumurtlamanın arifesinde biraz azalır ve hemen ardından sıcaklık ilk sıcaklığa göre 0,4-0,6 ° C artar ve kural olarak 37 ° C'nin biraz üzerine çıkar. Ortaya çıkan sıcaklık dalgalanmaları, adet döngüsünün birinci ve ikinci aşamalarında östrojen seviyelerindeki değişiklikler ve seviyedeki artışla ilişkilidir. progesteron ikinci aşamaya geçiyoruz. Aynı zamanda tam olarak yumurtlamanın ardından yumurtalıkta daha yüksek miktarlarda üretilmeye başlayan progesteron, termoregülasyon merkezini etkileyerek vücut ısısında hafif bir artışa yol açar. Yumurtlama herhangi bir nedenden dolayı gerçekleşmezse, tüm döngü boyunca sıcaklık yaklaşık olarak aynı olacaktır.

Kapsamlı bir teşhisin parçası olarak, kandaki kadın cinsiyet hormonlarının (östrojen ve progesteronun çeşitli fraksiyonları) yanı sıra folikül uyarıcı ve luteinize edici hormonların düzeyini belirlemek için yöntemler kullanmak mümkündür. Bu hormonların konsantrasyonu, adet döngüsünün aşamalarına, yumurtlamanın varlığına veya yokluğuna bağlı olarak günden güne belirli bir şekilde değişir.

Ultrason kullanarak folikül oluşumunu izlemek, boyutunu belirlemek ve yumurtlama anını belirlemek de mümkündür. Yumurtalıkta olgunlaşan bir folikülün varlığı, adet döngüsünün ilk yarısında çapı 2-3 cm'ye kadar giderek artan ve ortasında kaybolan bir boşluk oluşumu ile gösterilir. Bu oluşumun boyutundaki değişiklikler, kural olarak, mukus kristalleşme düzenindeki değişikliklerle, rektumdaki sıcaklıkla ve hormon seviyesiyle açıkça ilişkilidir. Ultrasona göre folikül olgunluğunun ve yakın (1,5 - 2 gün) yumurtlama başlangıcının bir işareti, folikülün iç yüzeyine bitişik küçük, açık renkli bir oluşuma benzeyen yumurta taşıyan bir tüberkülün tespitidir. Yumurtlama, yalnızca folikülün kaybolmasıyla değil, aynı zamanda uterusun arkasında sıvının eşzamanlı olarak ortaya çıkmasıyla da gösterilir.

Ultrasonun kişinin elde etmesine izin verdiğine inanılmaktadır. Folikül olgunlaşması hakkında daha güvenilir bilgi Hormonal testlerle karşılaştırıldığında, birkaç patolojik olarak olgunlaşmamış folikül toplu olarak test edilen hormonların normal seviyesini sağlayabilir ve bu da adet döngüsünün normal seyri hakkında yanlış bir izlenim yaratacaktır.

Şu anda ultrason, yumurtlamanın uyarılması sürecini ve etkinliğini izlemek için önemli yöntemlerden biridir. Böylece aşırı uyarılma ile yumurtalıklarda belirgin bir genişleme ve içlerinde çoklu boşluk yapılarının oluşması gözlenir.

Böylece, yumurtlamayı belirlemek için çeşitli yöntemlerin kullanılması, adet döngüsünün doğasını kontrol etmeyi ve planlı bir hamilelik sırasında gebe kalma için en uygun dönemi seçmeyi mümkün kılar. İstenmeyen gebeliklerin önlenmesi için bu testleri kullanarak en akılcı olanı seçebilirsiniz. doğum kontrol planı veya hamile kalma olasılığının en yüksek olduğu günlerde cinsel aktiviteden kaçının. Listelenen testleri kullanarak adet fonksiyonunu düzeltmeye yönelik tedavinin etkinliğini izlemek de mümkündür.

Ek olarak, rektumdaki sıcaklığın ölçülmesi veya tükürüğün kristalleşmesinin değerlendirilmesi gibi bir dizi basit testin yardımıyla bir kadın, adet fonksiyonunu bağımsız olarak izleyebilir.