Cauzele aglutinarii eritrocitelor, tipurile sale și testul antiglobulinei. Boala aglutinină rece (hub)

Boli de sânge

Aglutinine reci

Aglutininele reci sau crioproteinele sunt anticorpi care interacționează cu antigenele anvelopei eritrocitare. Acest lucru poate activa sistemul complement, provocând o reacție autoimună care duce la agregarea și distrugerea globulelor roșii, dar numai la temperaturi scăzute. Această patologie apare în principal la pacienții cu vârsta peste 50 de ani. Anticorpii pot fi prezentați prin IgM, IgG sau IgA, în primul caz aglutinarea este exprimată semnificativ. Există metode de laborator pentru diagnosticarea aglutininelor reci și determinarea temperaturii la care începe aglutinarea. De obicei, cauza aglutininelor la rece este o infecție, cel mai adesea una virală. Numărul lor poate scădea treptat, prin urmare, dacă sunt detectați, este mai bine să amânați operația în condiții de hipotermie și cu utilizarea cardioplegiei la rece dacă este posibil. De asemenea, puteți determina titrurile de aglutinine reci la diferite temperaturi ale sângelui, iar în timpul perfuziei evitați răcirea la o temperatură la care poate apărea aglutinarea. Dacă, totuși, este necesară o hipotermie mai profundă, este necesară plasmafereză, îndepărtând anticorpii conținuti în ser. La titruri mari de aglutinine reci, răcirea poate duce la complicații grave: IM perioperator, insuficiență renală, anemie hemolitică și tromboză. Planificarea operațiunii la astfel de pacienți trebuie să fie deosebit de atentă, menită să evite răcirea pacientului. Hemodiluția cu CPB reduce într-o oarecare măsură riscul de aglutinare, dar acest efect nu este suficient de previzibil, prin urmare, înainte, în timpul și după CPB, pacientul nu trebuie supus răcirii. Este recomandabil să folosiți o saltea cu apă încălzită, IR trebuie efectuată la normotermie, preîncălzind soluția care umple sistemul. Dacă celulele roșii din sânge sunt injectate în timpul CPB, acestea trebuie, de asemenea, preîncălzite. Daca este necesara cardioplegia rece, aceasta trebuie sa fie cristaloida, fara sange. În acest caz, ele încep cu introducerea a 200-300 ml de soluție caldă, care spăla sângele din arterele coronare, apoi se injectează o soluție rece. Temperatura soluției cardioplegice reci este de așa natură încât aglutinarea este aproape sigură, așa că cardioplegia care conține sânge trebuie administrată doar cald. Este recomandabil să se injecteze soluție cardioplegică caldă imediat înainte de a scoate clema din aortă, astfel încât sângele care intră în arterele coronare să nu se răcească.

anemia celulelor secera

În mod normal, la om, eritrocitele conțin în principal hemoglobină A, anemia falciformă se datorează conținutului de hemoglobină anormală S din eritrocite.La pacienții homozigoți pentru această trăsătură, eritrocitele conțin predominant hemoglobină S, clinic aceasta se manifestă prin anemia cu celule secera. La pacienții heterozigoți, hemoglobina S este mai mică de 45% din total, ei sunt purtători ai genei bolii. În anemia secerată, globulele roșii au o formă caracteristică de seceră sau semilună, sunt mai puțin mobile, tind să se agrupeze și se descompun mai repede. Când conținutul de oxigen este scăzut, celulele roșii din sânge pot precipita. La pacienții cu anemie falciformă, pe lângă anemie în sine, se observă tromboză intravasculară. În timpul unei crize (sau crize – nu sunt sigur, nu-mi amintesc) are loc o ocluzie a vaselor de sânge, însoțită de durere, dificultăți de respirație și convulsii.

Tactica perfuziei ar trebui să vizeze evitarea unei crize cu toate consecințele ei. Este necesar să se mențină un nivel ridicat de saturație în oxigen și să nu se răcească pacientul. La pacienții cu un conținut predominant de hemoglobină S, saturația eritrocitelor cu oxigen ar trebui să fie de cel puțin 85%, la pacienții cu un conținut parțial de hemoglobină S - cel puțin 40%. Pacienții cu hemoglobină S parțială în timpul CPB trebuie să mențină un nivel ridicat de saturație în oxigen și să evite acidoza, care contribuie la distrugerea celulelor falciforme. Urmând aceste reguli, complicațiile pot fi de obicei evitate. Răcirea contribuie și la disfuncția celulelor falciforme, așa că cel mai bine este evitată răcirea, folosind cardioplegia caldă sau cristaloidă la fel ca și cu aglutininele reci. Hemodiluția în timpul perfuziei joacă, de asemenea, un rol pozitiv. Vasodilatatoarele trebuie utilizate pentru a preveni permeabilitatea vasculară.

Studiu de laborator a avut ca scop identificarea autoanticorpilor care provoaca aglutinarea si hemoliza eritrocitelor la temperaturi scazute.

Sinonime în rusă

Aglutinine reci, studiul aglutininelor reci complete.

Sinonime în engleză

Test de sânge cu aglutinină la rece, Autoanticorpi la rece, Anticorpi cu reacție la rece.

Metodă de cercetare

Reacția de aglutinare.

Ce biomaterial poate fi folosit pentru cercetare?

Sânge venos.

Cum să vă pregătiți corect pentru cercetare?

• Nu fumați cu 30 de minute înainte de studiu.

Informații generale despre studiu

Anemiile hemolitice autoimune (AIHA) apar ca urmare a unei defecțiuni din cauza unui număr de motive pentru toleranța imunologică și producția de anticorpi împotriva propriilor celule roșii din sânge. Există autoanticorpi caldi și reci. Cele termice se leagă cel mai eficient de antigenele eritrocitare la o temperatură de 37 °C, iar cele reci la 4-18 °C. În funcție de efectul pe care autoanticorpii îl au asupra globulelor roșii dintr-o eprubetă, se eliberează hemolizinele (distrug celulele) și aglutininele (determină lipirea celulelor roșii din sânge).

Anemia hemolitică autoimună cu aglutinine reci este o formă relativ rară de anemie hemolitică imună (conform unor rapoarte, 20% din toate cazurile de AIHA). Poate fi fie idiopatică (cauză necunoscută) fie simptomatică. Varianta idiopatică este mai frecventă la persoanele în vârstă și senile (60-80 de ani), în timp ce varianta simptomatică poate apărea în copilărie și adolescență, complicând cursul pneumoniei micoplasmatice, mononucleozei infecțioase, legionelozei, precum și bolilor autoimune sistemice (lupus sistemic). eritematos, artrita reumatoida). La vârstnici, AIHA cu aglutinine reci este adesea asociată cu boli limfoproliferative precum leucemia limfocitară cronică și macroglobulinemia Waldenström.

Aglutininele reci sunt cel mai adesea IgM, mai rar sunt reprezentate de un amestec de imunoglobuline de diferite clase. Ele se leagă de membrana celulelor roșii din sânge la temperaturi scăzute și atașează complement, o familie de proteine ​​​​serice care distrug celulele marcate cu anticorpi. După adăugarea complementului, pe membrana eritrocitară se formează un complex care dăunează membranei, a cărui formare duce la formarea unui număr mare de pori în membrana celulară, umflarea și distrugerea acesteia.

Ca marker de laborator al hemolizei autoimune cauzate de aglutininele reci, este recomandabil să se utilizeze detectarea anticorpilor în serul sanguin al pacientului, ducând la aglutinarea eritrocitelor în timpul incubației la temperaturi scăzute.

O metodă modernă de testare a aglutininelor la rece este testul de aglutinare cu gel. O suspensie de eritrocite donatoare este adăugată la microtuburi care conțin un gel neutru. Se adaugă apoi serul studiat și se incubează la o temperatură de 2-8 °C. În prezența aglutininelor reci în serul de testat în timpul incubației la temperaturi scăzute, acestea se leagă de eritrocite și provoacă aglutinarea acestora. Rezultatul testului este evaluat după centrifugare, timp în care eritrocitele aglutinate și neaglutinate sunt separate. Eritrocitele neaglutinate au o dimensiune comparabilă cu dimensiunea particulelor de gel și trec liber prin ele sub acțiunea forței centrifuge, formând un sediment roșu compact la fundul microtubului, iar eritrocitele aglutinate, datorită dimensiunii lor mari, sunt reținute. pe suprafata gelului sau in grosimea acestuia.

La ce se folosește cercetarea?

• Pentru a detecta anticorpi antieritrocitari în serul sanguin al pacientului care provoacă hemoliză la temperaturi scăzute.

Când este programat studiul?

• Dacă se suspectează anemie hemolitică autoimună cu aglutinine reci: o trăsătură caracteristică a bolii este toleranța slabă la frig, când apar principalele simptome.

Ce înseamnă rezultatele?

Valori de referinta: nu a fost detectat.

• Un rezultat negativ - celulele formează un sediment compact la fundul microtubului - indică absența aglutininelor reci în serul de testat.
• Un rezultat pozitiv - celulele aglutinate formează un strat roșu pe suprafața sau în grosimea gelului - indică prezența anticorpilor reci în serul de testat.

Ce poate influența rezultatul?

• La titruri mici, aglutininele reci pot fi găsite și la oamenii sănătoși.



Notite importante

• În anemia hemolitică autoimună cu aglutinine reci, autoaglutinarea eritrocitară are loc la temperatura camerei, ceea ce creează probleme și duce la rezultate incorecte la determinarea grupei sanguine și la calcularea parametrilor sângelui periferic (număr de eritrocite și indici de eritrocite). Această aglutinare este reversibilă la 37°C, așa că atunci când sângele este încălzit la temperatura corpului, problemele din timpul cercetării sunt eliminate.

Aglutinarea RBC este un proces biochimic de agregare, aderență și precipitare a globulelor roșii, care are loc in vitro sau in vivo.

Termenul „Aglutinare” conform traducerii din latinescul „agglutinatio” înseamnă „lipire”. În sistemele biologice sau analizele de laborator, aceasta este legarea și agregarea particulelor organice (bacterii, spermatozoizi, celule sanguine) care au antigeni aglutinogeni pe suprafața lor atunci când interacționează cu anticorpi specifici de aglutinină. Aglomeratul rezultat se numește aglutinat.

Chiar și în mod normal, anticorpii și antigenii care nu provoacă lipire pot fi prezenți în sângele uman. Acestea sunt componente ale sistemului antigen ABO care corespund tipului de sânge, anticorpi care apar ca răspuns imun atunci când anumite bacterii sau alți agenți patogeni ai bolilor infecțioase (dizenterie, febră tifoidă) pătrund în organism.

aglutinarea RBC

Reacția de aglutinare după mecanism este directă (activă) și indirectă (pasivă). Efectul aglutinarii directe se manifestă în organism sau probă atunci când antigenele membranare structurale ale eritrocitelor încep să interacționeze cu proprii anticorpi ai plasmei sau cu componente ale celulelor bacteriene.

Aglutinarea directă este utilizată în studiile clinice, determinarea grupei sanguine sau prezența factorului Rh. Efectul legăturii pasive este utilizat pe scară largă pentru a diagnostica boli infecțioase (bacteriene, virale).

De ce are loc aglutinarea eritrocitară?

Aglutinarea masei eritrocitare devine o consecință a interacțiunii biochimice a moleculelor de antigen localizate în structura membranei celulelor sanguine cu anticorpii din plasmă. Acest lucru reduce sarcina negativă naturală a eritrocitelor, are loc convergența lor. Moleculele de aglutinină care nu se potrivesc cu grupa de sânge pot forma „punți” între celulele roșii din sânge. Ca urmare, se formează un tromb, se dezvoltă boala hemolitică, până la un rezultat fatal.

Legarea eritrocitelor (reacția de hemaglutinare - RHA) se datorează diverșilor factori care depind de natura agentului de aglutinare de pe suprafața elementului uniform sau din plasmă:

• Aglutinine reci. Ele pot fi găsite în sânge în boli cauzate de viruși și bacterii, unele neoplasme și hipotermie, provocând simptome de hemoliză intravasculară. La un titru scăzut, aglutininele reci pot fi găsite și la persoanele sănătoase fără a provoca manifestări hemolitice vizibile. Prin natura chimică, acestea sunt, de regulă, proteine ​​imunoglobuline (cel mai adesea IgM). Ele sunt activate atunci când temperatura scade sub 37 ° C, de exemplu, când sângele intră în extremitățile superioare sau inferioare sau în alte părți ale corpului care sunt predispuse la hipotermie. Aglutininele reci, în funcție de tip, pot fi active și localizate în diferite moduri: acționează într-un interval de temperatură larg sau îngust, rămân fixate pe suprafața eritrocitei când temperatura este restabilită sau se află în plasmă.
• antigene eritrocitare. Astăzi, au fost identificate peste 400 de sisteme antigene, a căror combinație este individuală pentru o persoană. Cele mai multe dintre ele au proprietăți antigenice slabe și nu provoacă aglutinarea eritrocitară perceptibilă. Cele mai critice în transfuzia de sânge sunt sistemele ABO și accesoriile Rh, a căror incompatibilitate poate face ca celulele sanguine să se lipească împreună cu șocul hemotransfuzional ulterior.
• Hemaglutinogenii care determină grupa sanguină. În structura membranelor eritrocitare există markeri-antigeni specifici de natură glicoproteică (aglutinogeni A și B), iar în plasmă există substanțe-anticorpi imunoglobuline specifice (aglutinine alfa și beta). Una dintre cele patru combinații posibile ale acestor antigeni și anticorpi determină grupa sanguină, care este determinată genetic și nu se poate schimba de-a lungul vieții. Aglutinogenii și aglutininele cu același nume nu pot fi prezente în corpul uman în același timp, altfel eritrocitele se lipesc împreună cu hemoliza ulterioară. Aceasta este una dintre reacțiile dezvoltate genetic ale organismului, care vizează păstrarea individualității antigenice și a principiului de bază al transfuziei de sânge.

• Antigenele sistemului Rhesus . Antigenele Rh (Rh) prin natura chimică sunt lipoproteine. Antigenii sistemului Rh sunt reprezentați de mai multe tipuri (C, E, D), cel mai puternic dintre ei este de tip D. Persoanele care au un astfel de antigen se numesc Rh pozitiv, restul, respectiv, Rh negativ. Plasma nu conține în mod normal anticorpi la antigenele Rh. Ele apar din cauza unei încălcări a regulilor de transfuzie de sânge și în cazul unui conflict Rhesus în timpul sarcinii.
• Aglutinarea virală și bacteriană a eritrocitelor. Agregarea globulelor roșii în anumite boli virale sau bacteriene se poate datora interacțiunii directe a virusului sau bacteriilor cu moleculele structurale de suprafață ale globulelor roșii sau datorită reacției cu titrul de ser imunizat al globulelor roșii sensibilizate special cu antigenul dorit (in vitro). Aglutinarea celulelor sanguine are loc după adsorbția virusului pe suprafața eritrocitelor. În majoritatea virusurilor, hemaglutinina este o componentă structurală a virionului.

Antigeni markeri specifici de natura glicoproteica (aglutinogeni A si B)

Tehnici de laborator bazate pe reactii de aglutinare

Reacțiile de aglutinare au valoare diagnostică. Acestea sunt metode serologice pentru detectarea și examinarea anticorpilor sau antigenilor prezenți în titrul serului pacientului pe baza reacțiilor imunologice, identificarea markerilor antigenici ai bacteriilor și virusurilor și determinarea structurii antigenice a unui agent patogen microbian.

Reacțiile de hemaglutinare indirectă sau pasivă (IPHA sau RNHA) stau la baza metodelor de identificare a anumitor antigeni sau anticorpi din sângele pacientului. Această metodă este utilizată pentru identificarea agentului cauzal al unei boli infecțioase, determinarea calitativă și cantitativă a hormonului gonadotrop în cazul suspiciunii de sarcină. Dintre echipamente se folosesc lame de sticlă, eprubete sterile, plăci de plastic cu godeuri-celule.

Reactivul principal este așa-numitul erythrocyte diagnosticum (ED), care poate fi realizat după două principii:

• ED antigenic (utilizat mai des);
• anticorp ED.

În funcție de tipul diagnosticului, pe suprafața celulei eritrocitare este adsorbit un antigen sau anticorp identificabil, care, la reacția ulterioară cu anticorpii sau antigenii corespunzători ai serului sanguin al pacientului, provoacă aderența elementelor uniforme și formarea unui precipitat asemănător unei scoici care acoperă uniform fundul tubului sau al celulei. Dacă proba este negativă, atunci sedimentul de la fundul tubului va fi de alt tip.

Pentru RPHA, un diagnostic se face pe baza celulelor sanguine umane sau animale (iepure, berbec, șobolan, cal), care sunt tratate cu formaldehidă sau alți reactivi pentru conservare. Eritrocitele în sine sunt sensibilizate cu preparate speciale (tanin, clorură de crom, rivanol) pentru a le crește capacitatea de adsorbție.

Procesul invers este reacția de inhibare a hemaglutinării

Unele virusuri (gripa, rubeola, rujeola, adenovirusurile, pesta bovină) pot provoca aglutinarea elementelor formate. Metodele de diagnosticare a unor astfel de boli virale se bazează pe reacții care opresc acest proces. Anticorpii antivirali ai serului pre-imunizat contracarează virusurile, făcându-le să-și piardă capacitatea de a determina aglomerarea eritrocitelor.

Testul antiglobulinei - reactia Coombs

Testul Coombs se efectuează pentru a identifica anticorpii incompleti care sunt localizați în structura membranei eritrocitare și provoacă aglutinare atunci când se adaugă un ser special antiglobulinic. Există reacții Coombs directe și indirecte. Se efectuează un test direct de antiglobulină dacă se suspectează prezența unor astfel de anticorpi incompleti pe suprafața globulelor roșii.

Un test Coombs indirect este efectuat prin sensibilizarea mai întâi a eritrocitului cu un anticorp adecvat și apoi injectarea componentei antiglobulină. Efectuat la diagnosticarea unei boli hemolitice cu evoluție autoimună sau la nou-născuți, pentru a stabili un conflict Rh între o mamă (Rh-negativ) și un copil (Rh-pozitiv).

Reacția indirectă Coombs este utilizată pe scară largă de către transfuziologi, deoarece face posibilă determinarea cu mare precizie a compatibilității materialului donator cu sângele primitorului de către antigenele eritrocitare.

Mai mult:

Numirea imunoglobulinei în conflictul Rh, indicații și contraindicații

Există două forme ale acestei boli: boala aglutinină rece și hemoglobinuria rece paroxistică. În ambele cazuri, hemoliza imună intravasculară poate fi fie primară, fie secundară. În acest din urmă caz, se dezvoltă pe fondul infecțiilor virale (de exemplu, mononucleoză infecțioasă), malarie, pneumonie micoplasmatică, hemoblastoze sau colagenoze. Anemia hemolitică autoimună cauzată de hemoliza intravasculară primară este de obicei cronică.

3. Boala aglutinină la rece din cauza hemolizei intravasculare secundareapare în multe boli: infecții (pneumonie micoplasmatică, mononucleoză infecțioasă, rujeolă, oreion și alte infecții virale, tripanosomiază și malarie), colagenoze (rar), hemoblastoze (limfoame non-Hodgkin, macroglobulinemie Waldenström, limfopozoză cronică, sarcoma lemfopozică). Trebuie subliniat faptul că în aceste boli, aglutininele reci sunt detectate mult mai des decât se observă hemoliza. În toate aceste cazuri, boala de bază este tratată mai întâi. În caz contrar, tratamentul este același ca și pentru boala rece aglutinină cauzată de hemoliza intravasculară primară.

4. Hemoglobinurie paroxistica rece- o formă rară de anemie hemolitică autoimună. Hemoliza în această boală apare ca urmare a unei reacții bifazice care implică IgG, care sunt numiți anticorpi Donath-Landsteiner. În prima fază, IgG se leagă de eritrocite la temperatură scăzută și fixează complementul. În a doua fază, la o temperatură de 37°C, are loc activarea complementului, ducând la hemoliză. Anticorpii Donat-Landsteiner sunt specifici pentru antigenul P al eritrocitelor.

A. tablou clinic.Hemoglobinuria paroxistică rece se întâlnește adesea la pacienții cu sifilis, în special congenital, poate complica infecțiile virale (rujeolă, oreion, varicela, mononucleoză infecțioasă, gripă), uneori este primară. Hemoliza intravasculară se dezvoltă atunci când pacientul se încălzește după hipotermie. Prognosticul este favorabil. Pacienții se recuperează de obicei singuri. Ocazional, boala curge mult timp cu crize hemolitice periodice.

b. Cercetare de laborator.Diagnosticul de laborator al hemoglobinuriei paroxistice la rece se bazează pe detectarea anticorpilor Donat-Landsteiner. Pentru a face acest lucru, 1) serul pacientului este amestecat cu eritrocite normale din grupa 0; 2) incubat timp de 30 min la 4°C (pentru a fixa anticorpii și complementul pe eritrocite); 3) incubat timp de 30 min la 37°C (pentru activarea complementului). Ca martor negativ, utilizați: 1) o probă cu ser al pacientului inactivat la căldură (pentru a îndepărta complementul); 2) o probă cu ser de pacient incubat cu eritrocite din grupa 0 în ordine inversă (mai întâi la 37°C, apoi la 4°C).

în. Tratament. Pacienții trebuie să evite hipotermia.Corticosteroizii și splenectomia sunt ineficiente. Dacă este necesară o transfuzie de globule roșii, aceasta este încălzită. Asigurați-vă că tratați boala de bază.

Testul de aglutinină la rece este un test de sânge care măsoară cantitatea acestor anticorpi din organism. Aglutininele reci sunt produse de corpul nostru ca răspuns la infecție. Acestea fac ca celulele roșii din sânge să se aglomereze la temperaturi scăzute. Oamenii sănătoși tind să aibă un nivel scăzut de anticorpi la rece în sânge. Dar limfomul și anumite infecții (SARS) cresc nivelul de aglutinină rece.

Nivelurile ușor crescute de aglutinine reci, de obicei, nu cauzează probleme grave. Uneori, aglutininele reci colectează celule roșii din sânge în grupuri care se blochează în vasele situate aproape de pielea răcită. Acest lucru poate duce la albirea pielii și amorțeală. În cazuri avansate (cu hipotermie extrem de prelungită), aceasta poate duce la cangrenă.

De ce se măsoară aglutininele reci?

Testarea aglutininei la rece se face pentru:

• Aflați dacă anticorpii la rece sunt cauza anemiei hemolitice autoimune;
• Diagnosticați SARS.

Clinica noastra are specialisti in acest domeniu.

(4 specialisti)

2. Cum se pregătește și cum se efectuează analiza?

Cum mă pregătesc pentru un test de aglutinină la rece?

Nu este necesară nicio pregătire înainte de testarea anticorpilor la rece.

Cum se efectuează un test de aglutinină la rece?

Nivelul de anticorpi la rece este măsurat după prelevarea sângelui dintr-o venă. Prelevarea de sânge se efectuează conform procedurii standard.

3. Care sunt riscurile și ce poate afecta analiza?

Care sunt riscurile testării aglutininei la rece?

Riscurile posibile ale unui test de sânge pentru anticorpi la rece pot fi asociate doar cu prelevarea de sânge în sine. În special, vânătăi la locul puncției și inflamație a venei (flebită). Compresele calde de mai multe ori pe zi te vor scuti de flebită. Dacă luați diluanți ai sângelui, este posibil să aveți sângerare la locul puncției.

Ce poate interfera cu un test de aglutinină la rece?

Rezultatul unui test de aglutinină la rece nu va fi exact dacă luați antibiotice, în special peniciline și cefalosporine.

Ce merită să știi?

Mai mult de jumătate dintre persoanele care suferă de SARS au un nivel ridicat de anticorpi la rece. Cu toate acestea, alte teste mai fiabile sunt utilizate mai frecvent pentru a diagnostica SARS.

Dacă se găsesc celule roșii din sânge legate în timpul unei hemoleucograme complete, medicul poate solicita un test de aglutinină la rece.

Grupa sanguină este mai dificil de determinat cu un nivel ridicat de aglutinină.

Dacă o persoană are un conținut ridicat de aglutinine reci, în timp ce nu a fost expusă la temperaturi scăzute, atunci trebuie să se încălzească. Nivelurile ridicate de aglutinine la rece pot duce la anemie, degerături sau boala Raynaud.