microbi anaerobi. Bacteriile aerobe și anaerobe

  • 1. Mecanisme genetice și biochimice ale rezistenței la medicamente. O modalitate de a depăși rezistența la medicamente a bacteriilor.
  • 2. Înțelegerea „infecției”, „procesului infecțios”, „boală infecțioasă”. Condiții pentru apariția unei boli infecțioase.
  • 1. Antibioterapie rațională. Efectele secundare ale antibioticelor asupra organismului uman și asupra microorganismelor. Formarea de forme de bacterii rezistente la antibiotice și dependente de antibiotice.
  • 2. Reacția de precipitare și varietățile acesteia. Mecanism și metode de stabilire, aplicare practică.
  • 1. Metode de determinare a sensibilității bacteriilor la antibiotice. Determinarea concentrației de antibiotice în urină, sânge.
  • 2. Principalele celule ale sistemului imunitar: t, limfocite b, macrofage, subpopulații de celule t, caracteristicile și funcțiile acestora.
  • 1. Mecanisme de acţiune a antibioticelor asupra unei celule microbiene. Acțiunea bactericidă și acțiunea bacteriostatică a antibioticelor. Unități de măsură ale activității antimicrobiene a unui antibiotic.
  • 2. Reacția de liză imună ca unul dintre mecanismele de distrugere a microbilor, componente ale reacției, utilizare practică.
  • 3. Agentul cauzal al sifilisului, taxonomia, caracteristicile proprietăților biologice, factorii de patogenitate. Epidemologie și patogeneză. Diagnosticul microbiologic.
  • 1. Metode de cultivare a bacteriofagelor, titrarea acestora (după Grazia și Appelman).
  • 2. Cooperarea celulară între limfocitele t, b și macrofagele în procesul de răspuns imun umoral și celular.
  • 1.Respirația bacteriilor. Tipuri aerobe și anaerobe de oxidare biologică. Aerobi, anaerobi, anaerobi facultativi, microaerofili.
  • 1. Acţiunea asupra microorganismelor a factorilor biologici. Antagonism în biocenoze microbiene, bacteriocine.
  • 3. Bordetella. Taxonomie, caracterizarea proprietăților biologice, factori de patogenitate. Boli cauzate de Bordetella. patogenia tusei convulsive. Diagnosticul de laborator, profilaxia specifica.
  • 1. Conceptul de bacterii. Autotrofe și heterotrofe. Mod holofitic de hrănire a bacteriilor. Mecanisme de transfer al nutrienților într-o celulă bacteriană.
  • 2. Structura antigenică a unei celule bacteriene. Principalele proprietăți ale antigenelor microbiene sunt localizarea, compoziția chimică și specificitatea antigenelor bacteriilor, toxinelor, enzimelor.
  • 1. Antibiotice. Istoria descoperirilor. Clasificarea antibioticelor după metode de preparare, origine, structură chimică, mecanism de acțiune, spectru de acțiune antimicrobiană.
  • 3. Virusuri gripale, taxonomie, caracteristici generale, antigeni, tipuri de variabilitate. Epidemiologia și patogeneza gripei, diagnostic de laborator. Profilaxia și terapia specifică a gripei.
  • 2. Metoda serologică de diagnosticare a bolilor infecțioase, evaluarea acesteia.
  • 3. Escherichia diareogenă, soiurile lor, factori de patogenitate, boli cauzate de ei, diagnostic de laborator.
  • 1. Caracteristicile generale ale ciupercilor, clasificarea lor. rol în patologia umană. Aspecte aplicate ale studiului.
  • 3. Escherichia, rolul lor de locuitor normal al intestinului. Valori sanitar-indicative ale Escherichia pentru apa si sol. Escherichia ca factor etiologic al bolilor purulent-inflamatorii la om.
  • 1. Utilizarea bacteriofagelor în microbiologie și medicină pentru diagnosticul, prevenirea și tratamentul bolilor infecțioase.
  • 2. Toxine Bacteriile: endotoxină și exotoxine. Clasificarea exotoxinelor, compoziția chimică, proprietățile, mecanismul de acțiune. Diferențele dintre endotoxine și exotoxine.
  • 3. Micoplasme, taxonomie, specii patogene pentru om. Caracterizarea proprietăților lor biologice, factori de patogenitate. patogeneza si imunitatea. Diagnosticul de laborator. Prevenire și terapie.
  • 1. Diagnosticul de laborator al disbiozei. Medicamente utilizate pentru prevenirea și tratamentul disbacteriozei.
  • 2. Imunofluorescența în diagnosticul bolilor infecțioase. Metode directe și indirecte. Medicamente necesare.
  • 3. Virusul encefalitei transmise de căpușe, taxonomie, caracteristici generale. Epidemiologie și patogeneză, diagnostic de laborator, prevenire specifică a encefalitei transmise de căpușe.
  • 1. Caracteristici ale structurii rickettsiei, micoplasmelor și chlamidiei. Metode de cultivare a acestora.
  • 2. Produse biologice utilizate pentru prevenirea și tratarea specifică a bolilor infecțioase: vaccinuri.
  • 3. Salmonella, taxonomie. Agentul cauzal al tifoidului și al paratifoidului. Epidemiologia patogenezei febrei tifoide. Diagnosticul de laborator. profilaxie specifică.
  • 2. Structura antigenică a toxinelor, virusurilor, enzimelor: localizarea, compoziția chimică și specificitatea acestora. Anatoxine.
  • 3. Viruși-agenți cauzatori ai bolilor respiratorii acute. Paramixovirusuri, caracteristici generale ale familiei, boli cauzate. Patogeneza rujeolei, prevenirea specifică.
  • 1. Reproducerea virusurilor (reproducere disjunctive). Principalele etape ale interacțiunii virusului cu celula gazdă în tipul productiv de infecție. Caracteristici ale reproducerii virusurilor care conțin ADN și ARN.
  • 2. Conceptul de rană, infecții respiratorii, intestinale, de sânge și urogenitale. Antroponoze și zoonoze. Mecanisme de transmitere a infecției.
  • 3. Clostridium tetanus, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice, factori de patogenitate. Epidemiologia și patogeneza tetanosului. Diagnostic de laborator, terapie specifică și prevenire.
  • 1. Microflora pielii, cavitatea bucală a unei persoane sănătoase. Microflora mucoaselor tractului respirator, tractului genito-urinar și ochilor. Sensul lor în viață.
  • 2. Infecții intrauterine. Etiologie, modalități de transmitere a infecției la făt. Diagnosticare de laborator, masuri preventive.
  • 1. Tipuri de interacțiune a virusurilor cu o celulă: integratoare și autonome.
  • 2. Sistemul de complement, modalitate clasică și alternativă de activare a complementului. Metode de determinare a complementului în serul sanguin.
  • 3. Intoxicație bacteriană alimentară de natură stafilococică. Patogenie, caracteristici ale diagnosticului de laborator.
  • 1. Acţiunea asupra microorganismelor a factorilor chimici. Asepsie și dezinfecție. Mecanismul de acțiune al diferitelor grupe de antiseptice.
  • 2. Vaccinuri ucise vii, chimice, toxoide, sintetice, moderne. Principii de obținere, mecanisme ale imunității create. adjuvanţi în vaccinuri.
  • 3. Klebsiela, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice, factori de patogenitate, rol în patologia umană. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Disbacterioza, cauze, factori de formare a acesteia. stadiile disbacteriozei. Diagnosticul de laborator, prevenirea si terapia specifica.
  • 2. Rolul neutralizării toxinelor de către toxoid. Uz practic.
  • 3. Picornovirusuri, clasificare, caracteristici ale virusurilor poliomielitei. Epidemiologie și patogeneză, imunitate. Diagnosticul de laborator, profilaxia specifica.
  • 1. Tipuri de variabilitate la bacterii: modificare și variabilitate genotipică. Mutații, tipuri de mutații, mecanisme de mutații, mutageni.
  • 2. Imunitatea antiinfecțioasă locală. Rolul anticorpilor secretori.
  • 3. Infecții toxice bacteriene de origine alimentară cauzate de Eschirichia, Proteus, Staphylococcus, bacterii anaerobe. Patogeneza, diagnostic de laborator.
  • 2. Organele centrale și periferice ale sistemului imunitar. Caracteristicile de vârstă ale sistemului imunitar.
  • 1. Membrana citoplasmatică a bacteriilor, structura ei, funcțiile.
  • 2. Factori nespecifici ai imunității antivirale: inhibitori antivirali, interferoni (tipuri, mecanism de acțiune).
  • 1. Protoplaste, sferoplaste, forme l de bacterii.
  • 2. Răspunsul imun celular în apărarea antiinfecțioasă. Interacțiunea dintre limfocitele T și macrofage în timpul răspunsului imun. Modalități de a-l detecta. Metoda de diagnostic al alergiei.
  • 3. Virusul hepatitei a, taxonomie, caracterizarea proprietăților biologice. Epidemiologia și patogeneza bolii Botkin. Diagnosticul de laborator. profilaxie specifică.
  • 2. Anticorpi, principalele clase de imunoglobuline, caracteristicile lor structurale și funcționale. Rolul protector al anticorpilor în imunitatea antiinfecțioasă.
  • 3. Virusurile hepatitei C și E, taxonomie, caracterizarea proprietăților biologice. Epidemiologie și patogeneză, diagnostic de laborator.
  • 1. Spori, capsule, vilozități, flageli. Structura lor, compoziția chimică, funcțiile, metodele de detectare.
  • 2. Anticorpi completi si incompleti, autoanticorpi. Conceptul de anticorpi monoclonali, hibridom.
  • 1. Morfologia bacteriilor. Forme de bază ale bacteriilor. Structura și compoziția chimică a diferitelor structuri ale unei celule bacteriene: nucleotide, mezosomi, ribozomi, incluziuni citoplasmatice, funcțiile acestora.
  • 2. Caracteristicile patogenetice ale infecțiilor virale. Proprietățile infecțioase ale virusurilor. Infecție virală acută și persistentă.
  • 1. Procariote și eucariote, diferențele lor de structură, compoziție chimică și funcție.
  • 3. Togavirusuri, clasificarea lor. Virusul rubeolei, caracteristicile sale, patogeneza bolii la femeile însărcinate. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Plasmide de bacterii, tipuri de plasmide, rolul lor în determinarea caracteristicilor patogene și rezistența la medicamente a bacteriilor.
  • 2. Dinamica formării anticorpilor, răspunsul imun primar și secundar.
  • 3. Ciupercile asemănătoare drojdiei Candida, proprietățile lor, caracteristici diferențiatoare, tipuri de ciuperci Candida. rol în patologia umană. Condiții favorabile apariției candidozei. Diagnosticul de laborator.
  • 1.Principii de bază ale sistematicii microorganismelor. Criterii taxonomice: regn, diviziune, familie, gen specie. Conceptul de tulpină, clonă, populație.
  • 2. Conceptul de imunitate. Clasificarea diferitelor forme de imunitate.
  • 3. Proteus, taxonomie, proprietăți ale proteusului, factori de patogenitate. rol în patologia umană. Diagnosticul de laborator. Imunoterapie specifică, fagoterapie.
  • 1. Microflora nou-născuților, formarea ei în primul an de viață. Influența hrănirii la sân și artificială asupra compoziției microflorei copilului.
  • 2. Interferonii ca factori ai imunității antivirale. Tipuri de interferoni, metode de obținere a interferonilor și aplicare practică.
  • 3. Streptococcus pneumoniae (pneumococ), taxonomie, proprietăți biologice, factori de patogenitate, rol în patologia umană. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Caracteristici ale structurii actinomicetelor, spirochetelor. Metode de depistare a acestora.
  • 2. Caracteristici ale imunității antivirale. Imunitatea congenitală și dobândită. Mecanisme celulare și umorale ale imunității înnăscute și dobândite.
  • 3. Enterobacteriile, clasificarea, caracteristicile generale ale proprietăților biologice. Structura antigenică, ecologie.
  • 1. Metode de cultivare a virusurilor: în culturi celulare, embrioni de pui, la animale. Evaluarea lor.
  • 2. Reacția de aglutinare în diagnosticul infecțiilor. Mecanisme, valoare diagnostică. Seruri aglutinante (complexe și monoreceptoare), diagnostice. Reacții de încărcare ale sistemului imunitar.
  • 3. Campylobacter, taxonomie, caracteristici generale, boli cauzate, patogeneza acestora, epidemiologie, diagnostic de laborator, prevenire.
  • 1. Metodă bacteriologică de diagnosticare a bolilor infecțioase, etape.
  • 3. Virusuri ADN oncogene. Caracteristica generala. Teoria virogenetică a originii tumorii L.A. Zilber. Teoria modernă a carcinogenezei.
  • 1. Principii de bază și metode de cultivare a bacteriilor. Medii nutritive și clasificarea acestora. Colonii în diferite tipuri de bacterii, proprietăți culturale.
  • 2. Imunotestul enzimatic. Componentele reacției, variantele utilizării acesteia în diagnosticul de laborator al bolilor infecțioase.
  • 3. Virușii HIV. Istoria descoperirilor. Caracteristicile generale ale virusurilor. Epidemiologia și patogeneza bolii, clinică. Metode de diagnostic de laborator. Problema este prevenirea specifică.
  • 1. Organizarea materialului genetic al unei celule bacteriene: cromozom bacterian, plasmide, transpozoni. Genotipul și fenotipul bacteriilor.
  • 2. Reacția de neutralizare a virusului. Opțiuni de neutralizare a virusului, domeniul de aplicare.
  • 3. Yersinia, taxonomie. Caracteristicile agentului patogen al ciumei, factori de patogenitate. Epidemiologia și patogeneza ciumei. Metode de diagnostic de laborator, prevenire și terapie specifică.
  • 1. Creșterea și reproducerea bacteriilor. Fazele de reproducere ale populațiilor bacteriene într-un mediu nutritiv lichid în condiții staționare.
  • 2. Seroterapia si seroprofilaxie. Caracterizarea serurilor anatotoxice și antimicrobiene, imunoglobulinelor. Prepararea și titrarea lor.
  • 3. Rotavirusuri, clasificare, caracteristici generale ale familiei. Rolul rotavirusurilor în patologia intestinală a adulților și copiilor. Patogeneza, diagnostic de laborator.
  • 2. Reacția de fixare a complementului în diagnosticul bolilor infecțioase. Componente de reacție, aplicare practică.
  • 3. Virusul hepatitei b și d, virusurile delta, taxonomie. Caracteristicile generale ale virusurilor. Epidemiologia și patogeneza hepatitei B etc. Diagnosticul de laborator, prevenirea specifică.
  • 1. Recombinări genetice: transformare, transducție, conjugare. Dintre tipuri și mecanism.
  • 2. Modalități de pătrundere a microbilor în organism. Doze critice de microbi care provoacă o boală infecțioasă. Poarta de intrare a unei infecții. Modalități de distribuție a microbilor și a toxinelor în organism.
  • 3. Virusul rabiei. Taxonomie, caracteristici generale. Epidemiologia și patogeneza virusului rabiei.
  • 1. Microflora corpului uman. Rolul său în procesele fiziologice și patologie normale. Microflora intestinală.
  • 2. Indicarea antigenelor microbiene în material patologic folosind reacții imunologice.
  • 3. Picornavirusuri, taxonomie, caracteristici generale ale familiei. Boli cauzate de virusurile Coxsackie și Echo. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Microflora aerului atmosferic, spații rezidențiale și spitale. Microorganismele aerului indicativ sanitar. Căi de intrare și supraviețuire a microbilor în aer.
  • 2. Factori celulari de protectie nespecifici: nereactivitatea celulelor si tesuturilor, fagocitoza, natural killers.
  • 3. Yersinia pseudotuberculosis și enterocolită, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice, factori de patogenitate. Epidemiologia și patogeneza pseudotubului
  • 1. Viruși: morfologia și structura virusurilor, compoziția lor chimică. Principii de clasificare a virusurilor, semnificație în patologia umană.
  • 3. Leptospira, taxonomie, caracteristici ale proprietăților biologice, factori de patogenitate. Patogeneza leptospirozei. Diagnosticul de laborator.
  • 1. Bacterofagi moderati, interacțiunea lor cu o celulă bacteriană. Fenomenul de lizogenie, conversia fagilor, semnificația acestor fenomene.

1.Respirația bacteriilor. Tipuri aerobe și anaerobe de oxidare biologică. Aerobi, anaerobi, anaerobi facultativi, microaerofili.

În funcție de tipurile de respirație, sunt împărțite în mai multe grupuri

1) aerobi, pentru care este nevoie de oxigen molecular

2) aerobii obligați nu sunt capabili să crească în absența oxigenului, deoarece îl folosesc ca acceptor de electroni.

3) microaerofile - capabile să crească în prezența unei concentrații mici de O2 (până la 2%) 4) anaerobii nu au nevoie de oxigen liber, necesarul de E sunt obținuți prin scindare în interior, conținând o cantitate mare de latentă E

5) obligați anaerobii - nu tolerați nici măcar o cantitate mică de oxigen (clostridial)

6) anaerobi facultativi - s-au adaptat existenței atât în ​​condiții de oxigen, cât și în condiții anoxice. Procesul de respirație la microbi este fosforilarea sau fermentația substratului: glicoliză, calea fosfogliconatului și calea cetodeoxifosfogliconatului. Tipuri de fermentație: acid lactic (bifidobacterii), acid formic (enterobacterii), acid butiric (clostridii), acid propionic (propionobacterii),

2. Antigeni, definiție, condiții de antigenicitate. Determinanți antigenici, structura lor. Specificitatea imunochimică a antigenelor: specie, grup, tip, organ, heterospecific. Antigene complete, haptene, proprietățile lor.

Antigenele sunt compuși cu greutate moleculară mare.

Când sunt ingerate, ele provoacă o reacție imună și interacționează cu produsele acestei reacții.

Casificarea antigenelor. 1. După origine:

naturale (proteine, carbohidrați, acizi nucleici, exo- și endotoxine bacteriene, antigene de țesut și celule sanguine);

artificiale (proteine ​​dinitrofenilate și carbohidrați);

sintetice (poliaminoacizi sintetizati).

2. După natura chimică:

proteine ​​(hormoni, enzime etc.);

carbohidrați (dextran);

acizi nucleici (ADN, ARN);

antigene conjugate;

polipeptide (polimeri ai a-aminoacizilor);

lipide (colesterol, lecitină).

3. Prin relație genetică:

autoantigene (din țesuturile propriului corp);

izoantigene (de la un donator identic genetic);

aloantigene de la un donator neînrudit din aceeași specie)

4. După natura răspunsului imun:

1) xenoantigene (de la un donator al altei specii). antigene dependente de timus;

2) antigene timus-independente.

Există, de asemenea:

antigeni externi (intra in organism din exterior);

antigeni interni; rezultă din moleculele corpului deteriorate care sunt recunoscute ca străine

antigene ascunse - antigene specifice

(de exemplu, țesut nervos, proteine ​​ale cristalinului și spermatozoizi); separată anatomic de sistemul imunitar prin bariere histohematice în timpul embriogenezei.

Haptenele sunt substanțe cu greutate moleculară mică care nu provoacă un răspuns imun în condiții normale, dar atunci când sunt legate de molecule cu greutate moleculară mare, devin imunogene.

Antigenele infecțioase sunt antigene ale bacteriilor, virușilor, ciupercilor, proteelor.

Soiuri de antigene bacteriene:

specifice grupului;

specifice speciei;

specifice tipului.

În funcție de localizarea într-o celulă bacteriană, ei disting:

O - AG - polizaharid (parte a peretelui celular al bacteriilor);

lipidA - heterodimer; conține glucozamină și acizi grași;

H - AG; face parte din flagelul bacterian;

K - AG - un grup eterogen de antigene de suprafață, capsulare ale bacteriilor;

toxine, nucleoproteine, ribozomi și enzime bacteriene.

3. Streptococi, taxonomie, clasificare după Lanefield. Caracterizarea proprietăților biologice, factorii de patogenitate ai streptococilor. Rolul streptococilor de grup A în patologia umană. Caracteristicile imunității. Diagnosticul de laborator al infecției cu streptococ.

Familia Streptococcacea

Genul Streptococcus

Potrivit lui Lesfield (clasa se bazează pe diferite tipuri de hemoliză): gr. A (Str. Pyogenes) gr. B (Str. Agalactiae-postpartum și infecții urogenitale, mastite, vaginite, sepsis și meningite la nou-născuți.), grupa C (Str. Equisimilis), grupa D (Enterococcus, Str. Fecalis). Gr.A - proces infecțios acut cu o componentă alergică (scarlatină, erizipel, miocardită), grB - principalul agent patogen la animale, provoacă sepsis la copii. GrS-har-n in-hemoliza (determinând patologia tractului reparator) GrD-obv. toate tipurile de hemoliză, fiind un locuitor normal al intestinului uman. Acestea sunt celule sferice dispuse in perechi.gr +, chemoorganotrofe, solicitante la nutritie. Miercuri, razm-Xia pe sânge sau sah. agar, se formează colonii mici pe un mediu solid, cresc aproape de fund pe lichid, lăsând mediul transparent. De creșterea har-ru pe agar-sânge: hemoliză alfa (o zonă mică de hemoliză cu o culoare verde-gri), beta-hem (transparent), non-hemol. Aerobii nu formează catalază.

F-ry pat-tee 1) clasă perete – unele au o capsulă.

2) f-r aderenta-teihoy la-voi

3) proteina M-protectoare, previne fagocitoza

4) un număr de toxine: scarlatina eritrogenă, O-streptolizină = hemolizină, leucocidină 5) citotoxine.

Diag: 1) b/l: puroi, mucus din faringe - semănat pe acoperiș. agar (prezența / absența unei zone de hemoliză), identificare prin Ag sv-you 2)b / s - frotiuri conform Gram 3) s / l - căutați Ab la O-streptolizină în precizia RSK sau r-ii

Tratament:β-lactama a/b. Gr.A provocând inflamație purulentă, inflamație, însoțită de formare purulentă abundentă, sepsis.

Anaerobi(prefix negativ grecesc an- + aē r aer + b viață) - microorganisme care se dezvoltă în absența oxigenului liber în mediul lor. Ele se găsesc în aproape toate probele de material patologic în diferite boli purulent-inflamatorii, sunt condiționat patogene, uneori patogene. Deosebiți A. facultativ și obligatoriu. A. facultativ sunt capabili să existe și să se înmulțească atât în ​​oxigen, cât și într-un mediu lipsit de oxigen. Acestea includ E. coli, Yersinia și Streptococcus, Shigella și altele bacterii.

Obligat A. mor în prezenţa oxigenului liber în mediu. Ele sunt împărțite în două grupe: bacterii care formează spori sau clostridii și bacterii care nu formează spori sau așa-numiții anaerobi non-clostridieni. Dintre clostridii, se disting agenții patogeni ai infecțiilor clostridiene anaerobe - a, infecția plăgii clostridiene, a. A. non-clostridiene includ bacterii gram-negative și gram-pozitive în formă de baston sau sferice: bacterii, fusobacterii, veillonella, peptococi, peptostreptococi, propionibacterii, eubacterii etc. A. non-clostridiene sunt parte integrantă a microflorei normale a oameni și animale, dar în același timp joacă un rol important în dezvoltarea unor astfel de procese purulent-inflamatorii precum peritonita, plămânii și creierul, pleura, flegmonul regiunii maxilo-faciale etc. infectii anaerobe, cauzate de anaerobi non-clostridieni, se referă la endogeni și se dezvoltă în principal cu o scădere a rezistenței organismului ca urmare a traumatismelor, intervențiilor chirurgicale, răcirii, imunității afectate.

Partea principală a A. semnificative clinic sunt bacteriile și fusobacterii, peptostreptococii și bastonașele Gram pozitive cu spori. Bacteroides reprezintă aproximativ jumătate din procesele purulent-inflamatorii cauzate de bacteriile anaerobe.

Bacteroides (Bacteroides) - un gen de bacterii anaerobe obligatorii gram-negative din familia Bacteroidaceae, bastonașe cu colorare bipolară, dimensiunea 0,5-1,5´ 1-15 micron, imobile sau în mișcare cu ajutorul flagelilor peritric, au adesea o capsulă polizaharidă, care este un factor de virulență. Ele produc diverse toxine și enzime care acționează ca factori de virulență. Sunt eterogene ca sensibilitate la antibiotice: bacterii, de exemplu, grupul B. fragilis, sunt rezistenți la benzilpenicilină. Bacteroidele rezistente la antibioticele b-lactamice produc b-lactamaze (penicilinaze si cefalosporinaze) care distrug penicilina si cefalosporinele. Bacteroidii sunt sensibili la unii derivați de imidazol - metronidazol (tricopol,

flagil), tinidazol, ornidazol - medicamente eficiente împotriva diferitelor grupuri de bacterii anaerobe, precum și cloramfenicol și eritromicină. Bacteroidele sunt rezistente la aminoglicozide - gentamicina, kanamicina, streptomicina, polimixina, oleandomicina. O parte semnificativă a bacteriilor este rezistentă la tetracicline.

Fusobacterii (Fusobacterium) - un gen de bacterii anaerobe obligate în formă de baghete gram-negative; trăiesc pe membrana mucoasă a gurii și a intestinelor, sunt imobile sau mobile, conțin o endotoxină puternică. Cel mai adesea, în materialul patologic se găsesc F. nucleatum și F. necrophorum. Cele mai multe fusobacterii sunt sensibile la antibioticele b-lactamice, dar există tulpini rezistente la penicilină. Fusobacterii, cu excepția F. varium, sunt sensibile la clindamicină.

Peptostreptococcus (Peptostreptococcus) este un gen de bacterii sferice Gram-pozitive; dispuse în perechi, tetrade, sub formă de ciorchini sau lanțuri neregulate. Nu au flageli, nu formează spori. Sensibil la penicilină, carbenicilină, cefalosporine, cloramfenicol, rezistent la metronidazol.

Peptococcus (Peptococcus) este un gen de bacterii sferice gram-pozitive, reprezentate de o singură specie P. niger. Ele apar singure, în perechi, uneori în grupuri. Flagelii și sporii nu se formează.

Sensibil la penicilină, carbenicilină, eritromicină, clindamicină, cloramfenicol. Relativ rezistent la metronidazol.

Veillonella - un gen de diplococi anaerobi gram-negativi; dispuse în lanțuri scurte, imobile, nu formează spori. Sensibil la penicilină, cloramfenicol, tetraciclină, polimixină, eritromicină, rezistent la streptomicina, neomicina, vancomicina.

Dintre celelalte bacterii anaerobe non-clostridiene izolate din materialul patologic al pacienților, trebuie menționate bacteriile propionice gram-pozitive, volinella gram-negative și altele, a căror semnificație este mai puțin studiată.

Clostridium este un gen de bacterii anaerobe Gram pozitive, în formă de bastonaș, care formează spori. Clostridiile sunt larg răspândite în natură, în special în sol, trăiesc și în tractul gastrointestinal al oamenilor și animalelor. Aproximativ zece specii de clostridii sunt patogene pentru om și animale: C. perfringens, C. noviii, C. septicum, C. ramosum, C. botulirnim, C. tetani, C. difficile etc. Aceste bacterii formează exotoxine specifice fiecărei specii. de activitate biologică ridicată la care sunt sensibili oamenii și multe specii de animale. C. difficile sunt bacterii mobile cu flageli peritric. Potrivit unui număr de cercetători, aceste bacterii, după terapia antimicrobiană irațională, înmulțindu-se, pot provoca pseudomembranoase. C. difficile sunt sensibile la penicilină, ampicilină, vancomicină, rifampicină,

metronidazol; rezistent la aminoglicozide.

Agentul cauzal al unei infecții anaerobe poate fi orice tip de bacterie, dar cel mai adesea aceste infecții sunt cauzate de diverse asociații de microbi: anaerob-anaerob (bacteroidi și fusobacterii); anaerob-aerob (bacteroidi și

Bacteriile sunt prezente peste tot în lumea noastră. Sunt peste tot și peste tot, iar numărul soiurilor lor este pur și simplu uimitor.

În funcție de necesitatea prezenței oxigenului în mediul nutritiv pentru implementarea activității vitale, microorganismele sunt clasificate în următoarele tipuri.

  • Obligatoriu bacterii aerobe, care sunt colectate în partea superioară a mediului nutritiv, flora conținea cantitatea maximă de oxigen.
  • Obligatoriu bacterii anaerobe, care sunt situate în partea inferioară a mediului, cât mai departe de oxigen.
  • Bacteriile facultative trăiesc în principal în partea superioară, dar pot fi distribuite în întregul mediu, deoarece nu depind de oxigen.
  • Microaerofilii preferă o concentrație scăzută de oxigen, deși se adună în partea superioară a mediului.
  • Anaerobii aerotoleranti sunt distribuiti uniform in mediul nutritiv, insensibili la prezenta sau absenta oxigenului.

Conceptul de bacterii anaerobe și clasificarea lor

Termenul de „anaerobi” a apărut în 1861, datorită lucrării lui Louis Pasteur.

Bacteriile anaerobe sunt microorganisme care se dezvoltă indiferent de prezența oxigenului în mediul nutritiv. Ei primesc energie prin fosforilarea substratului. Există aerobi facultativi și obligatorii, precum și alte tipuri.

Cei mai semnificativi anaerobi sunt bacteroidii

Cei mai importanți aerobi sunt bacterioizii. Despre cincizeci la sută din toate procesele purulent-inflamatorii, ai căror agenți cauzali pot fi bacterii anaerobe, sunt bacterioizi.

Bacteroides sunt un gen de bacterii anaerobe obligatorii Gram-negative. Acestea sunt tije cu colorație bipolară, a căror dimensiune nu depășește 0,5-1,5 pe 15 microni. Ei produc toxine și enzime care pot provoca virulență. Diferiți bacterii au rezistență diferită la antibiotice: există atât rezistenți, cât și sensibili la antibiotice.

Producția de energie în țesuturile umane

Unele țesuturi ale organismelor vii au rezistență crescută la conținutul scăzut de oxigen. În condiții standard, sinteza adenozin trifosfat are loc aerob, dar cu efort fizic crescut și reacții inflamatorii, mecanismul anaerob iese în prim-plan.

Adenozin trifosfat (ATP) Este un acid care joacă un rol important în producerea de energie a organismului. Există mai multe opțiuni pentru sinteza acestei substanțe: una aerobă și până la trei anaerobe.

Mecanismele anaerobe ale sintezei ATP includ:

  • refosforilarea între creatină fosfat și ADP;
  • reacția de transfosforilare a două molecule de ADP;
  • descompunerea anaerobă a glucozei din sânge sau a rezervelor de glicogen.

Cultivarea organismelor anaerobe

Există metode speciale pentru creșterea anaerobilor. Acestea constau in inlocuirea aerului cu amestecuri de gaze in termostate sigilate.

O altă modalitate este de a crește microorganismele într-un mediu nutritiv la care se adaugă substanțe reducătoare.

Medii de cultură pentru organisme anaerobe

Există medii nutritive comune și medii nutritive de diagnostic diferenţial. Cele comune includ mediul Wilson-Blair și mediul Kitt-Tarozzi. Pentru diagnostic diferențial - mediu Hiss, mediu Ressel, mediu Endo, mediu Ploskirev și agar bismut-sulfit.

Baza pentru mediul Wilson-Blair este agar-agar cu adaos de glucoză, sulfit de sodiu și diclorură de fier. Coloniile negre de anaerobi se formează în principal în adâncimea coloanei de agar.

Mediul lui Ressel (Russell) este utilizat în studiul proprietăților biochimice ale bacteriilor precum Shigella și Salmonella. De asemenea, conține agar-agar și glucoză.

Miercuri Ploskirev inhibă creșterea multor microorganisme, deci este utilizat în scopuri de diagnostic diferențial. Într-un astfel de mediu, agenții patogeni ai febrei tifoide, a dizenteriei și a altor bacterii patogene se dezvoltă bine.

Scopul principal al agarului cu sulfit de bismut este izolarea salmonelei în forma sa pură. Acest mediu se bazează pe capacitatea Salmonellei de a produce hidrogen sulfurat. Acest mediu este similar cu mediul Wilson-Blair în tehnica utilizată.

Infecții anaerobe

Majoritatea bacteriilor anaerobe care trăiesc în corpul uman sau animal pot provoca diferite infecții. De regulă, infecția are loc în timpul unei perioade de imunitate slăbită sau o încălcare a microflorei generale a corpului. Există și posibilitatea infecției cu agenți patogeni din mediul extern, mai ales toamna târziu și iarna.

Infecțiile cauzate de bacteriile anaerobe sunt de obicei asociate cu flora mucoaselor umane, adică cu principalele habitate ale anaerobilor. De obicei, aceste infecții declanșatoare multiple simultan(la 10).

Numărul exact de boli cauzate de anaerobi este aproape imposibil de determinat din cauza dificultății în colectarea materialelor pentru analiză, transportul probelor și cultivarea bacteriilor în sine. Cel mai adesea, acest tip de bacterii se găsește în bolile cronice.

Infecțiile anaerobe afectează oamenii de toate vârstele. În același timp, nivelul bolilor infecțioase la copii este mai ridicat.

Bacteriile anaerobe pot provoca diverse boli intracraniene (meningită, abcese și altele). Distribuția, de regulă, are loc cu fluxul sanguin. În bolile cronice, anaerobii pot provoca patologii la nivelul capului și gâtului: otita medie, limfadenita, abcese. Aceste bacterii sunt periculoase atât pentru tractul gastrointestinal, cât și pentru plămâni. Cu diferite boli ale sistemului urogenital feminin, există și riscul de a dezvolta infecții anaerobe. Diverse boli ale articulațiilor și ale pielii pot fi rezultatul dezvoltării bacteriilor anaerobe.

Cauzele infecțiilor anaerobe și simptomele acestora

Infecțiile sunt cauzate de toate procesele în care bacteriile anaerobe active pătrund în țesuturi. De asemenea, dezvoltarea infecțiilor poate provoca tulburări de alimentare cu sânge și necroză tisulară (diverse leziuni, tumori, edem, boli vasculare). Infecțiile bucale, mușcăturile de animale, bolile pulmonare, bolile inflamatorii pelvine și multe alte boli pot fi, de asemenea, cauzate de anaerobi.

În diferite organisme, infecția se dezvoltă în moduri diferite. Acest lucru este influențat de tipul de agent patogen și de starea sănătății umane. Din cauza dificultăților asociate cu diagnosticarea infecțiilor anaerobe, concluzia se bazează adesea pe presupuneri. Diferă în unele caracteristici ale infecției cauzate de anaerobi non-clostridieni.

Primele semne de infectare a țesuturilor cu aerobi sunt supurația, tromboflebita, formarea de gaze. Unele tumori și neoplasme (intestinale, uterine și altele) sunt, de asemenea, însoțite de dezvoltarea microorganismelor anaerobe. În cazul infecțiilor anaerobe, poate apărea un miros neplăcut, cu toate acestea, absența acestuia nu exclude anaerobii ca agent cauzator al infecției.

Caracteristici de obținere și transport de probe

Primul studiu în determinarea infecțiilor cauzate de anaerobi este o inspecție vizuală. Diverse leziuni ale pielii sunt o complicație frecventă. De asemenea, dovada activității vitale a bacteriilor va fi prezența gazului în țesuturile infectate.

Pentru cercetarea de laborator și stabilirea unui diagnostic precis, în primul rând, este necesar să fie competent obțineți o probă de materie din zona afectată. Pentru aceasta, se folosește o tehnică specială, datorită căreia flora normală nu intră în probe. Cea mai bună metodă este aspirația cu un ac drept. Obținerea materialului de laborator prin frotiuri nu este recomandată, dar posibilă.

Probele care nu sunt potrivite pentru analize suplimentare includ:

  • spută obținută prin auto-excreție;
  • probe obținute în timpul bronhoscopiei;
  • pete din boltele vaginale;
  • urină cu urinare liberă;
  • fecale.

Pentru cercetare se pot folosi:

  • sânge;
  • lichid pleural;
  • aspirate transtraheale;
  • puroiul obținut din cavitatea abcesului;
  • fluid cerebrospinal;
  • puncții pulmonare.

Transport probe este necesar cât mai curând posibil într-un recipient special sau o pungă de plastic cu condiții anaerobe, deoarece chiar și o interacțiune pe termen scurt cu oxigenul poate provoca moartea bacteriilor. Probele lichide sunt transportate într-o eprubetă sau în seringi. Tampoanele cu probe sunt transportate în eprubete cu dioxid de carbon sau medii pre-preparate.

Tratamentul infecției anaerobe

În cazul diagnosticării unei infecții anaerobe pentru un tratament adecvat, este necesar să se respecte următoarele principii:

  • toxinele produse de anaerobi trebuie neutralizate;
  • habitatul bacteriilor ar trebui schimbat;
  • răspândirea anaerobilor trebuie să fie localizată.

Pentru a respecta aceste principii antibioticele sunt folosite în tratament, care afectează atât anaerobii, cât și organismele aerobe, deoarece adesea flora în infecțiile anaerobe este mixtă. În același timp, atunci când prescrie medicamente, medicul trebuie să evalueze compoziția calitativă și cantitativă a microflorei. Agenții care sunt activi împotriva agenților patogeni anaerobi includ: peniciline, cefalosporine, șafenicol, fluorochinolo, metranidazol, carbapeneme și altele. Unele medicamente au un efect limitat.

Pentru a controla habitatul bacteriilor, în cele mai multe cazuri, se utilizează intervenția chirurgicală, care se exprimă în tratamentul țesuturilor afectate, drenarea abceselor și asigurarea circulației sanguine normale. Metodele chirurgicale nu trebuie ignorate din cauza riscului de complicații care pun viața în pericol.

Uneori folosit terapii auxiliare, precum și din cauza dificultăților asociate cu determinarea exactă a agentului cauzal al infecției, se utilizează tratamentul empiric.

Odată cu dezvoltarea infecțiilor anaerobe în cavitatea bucală, se recomandă, de asemenea, să adăugați în dietă cât mai multe fructe și legume proaspete. Cele mai utile sunt merele și portocalele. Restricția este supusă alimentelor din carne și fast-food.

infecție anaerobă

Etiologie, patogeneză, antibioticoterapie.

Cuvânt înainte ................................................. ............................................................... .. unu

Introducere ................................................ . ................................................. 2

1.1 Definiție și caracterizare .................................................. ............ .... 2

1.2 Compoziția microflorei principalelor biotopuri umane .......... 5

2. Factorii de patogenitate ai microorganismelor anaerobe .......... 6

2.1. Rolul microflorei endogene anaerobe în patologie

persoana ................................................. .................................................… ……. opt

3. Principalele forme de infecție anaerobă ............................................................. 10

3.1. Infecția pleuropulmonară ............................................................. .............. ......….. zece

3.2. Infecția piciorului diabetic ................................................... ............................... . zece

3.3. Bacteremia și sepsisul .............................................................. ................ ................. unsprezece

3.4. Tetanus.................................................. .................................... unsprezece

3.5. Diaree................................................. ............................................... 12

3.6. Infecția chirurgicală a rănilor și a țesuturilor moi ....................... 12

3.7. Infecția producătoare de gaze a țesuturilor moi ............................................. ... 12

3.8. Mionecroza clostridiană ............................................................. .............. ... 12

3.9. Infecția plăgii necrotice cu dezvoltare lent...13

3.10. Infecția intraperitoneală .................................................................. ………….. 13

3.11. Caracteristicile abceselor anaerobe experimentale ..... 13

3.12. Colita pseudomembranoasă ............................................................. .................... ..........paisprezece

3.13. Infecție obstetrică și ginecologică ............................................. .........14

3.14. Infecția anaerobă la pacienții cu cancer……………..15

4. Diagnosticare de laborator.............................................. ................ ................cincisprezece

4.1. Material de cercetare ................................................. .................. .....................cincisprezece

4.2. Etapele cercetării materialelor în laborator.................................................. ....16

4.3. Studiul direct al materialului ................................................. ............. .......16

4.4. Metode şi sisteme de creare a condiţiilor anaerobe..................................................16

4.5. Medii nutritive și cultivare .................................................. 17

5. Terapia cu antibiotice pentru infecția anaerobă ........................................... ... 21

5.1. Caracteristicile principalelor medicamente antimicrobiene,

utilizat în tratamentul infecţiei anaerobe ................................................21

5.2. Combinație de medicamente beta-lactamice și inhibitori

beta-lactamaze ............................................................. .................................................. ..24

5.3. Semnificația clinică a testelor de susceptibilitate anaerobă

microorganisme la medicamentele antimicrobiene……………...24

6. Corectarea microflorei intestinale ..............................................................26

  1. Concluzie................................................. .........................................27
  2. Autorii……………………………………………………………………….27

cuvânt înainte

Ultimii ani au fost caracterizați de dezvoltarea accelerată a multor domenii ale microbiologiei generale și clinice, ceea ce se datorează probabil atât înțelegerii noastre mai adecvate a rolului microorganismelor în dezvoltarea bolilor, cât și nevoii medicilor de a utiliza în mod constant informații despre etiologie. a bolilor, proprietățile agenților patogeni cu scopul de a gestiona cu succes pacienții și de a obține rezultate satisfăcătoare ale chimioterapiei sau chimioprofilaxiei. Una dintre aceste domenii de dezvoltare rapidă a microbiologiei este bacteriologia anaerobă clinică. În multe țări ale lumii, acestei secțiuni de microbiologie i se acordă o atenție considerabilă. Secțiunile dedicate anaerobilor și infecțiilor anaerobe sunt incluse în programele de formare a medicilor de diferite specialități. Din păcate, la noi, această secție de microbiologie, atât în ​​ceea ce privește pregătirea specialiștilor, cât și în aspectul diagnostic al activității laboratoarelor bacteriologice, a primit o atenție insuficientă. Manualul metodologic „Infecția anaerobă” acoperă principalele secțiuni ale acestei probleme - definiția și clasificarea, caracteristicile microorganismelor anaerobe, principalii biotopi ai anaerobilor din organism, caracteristicile formelor de infecție anaerobă, direcțiile și metodele de laborator. diagnostice, precum și complexul antibacterian -rapia (agenți antimicrobieni, rezistență/susceptibilitate microbiană, metode de determinare și depășire a acesteia). Desigur, manualul nu își propune să ofere răspunsuri detaliate la toate aspectele infecției anaerobe. Este destul de clar că microbiologii care doresc să lucreze în domeniul bacteriologiei anaerobe trebuie să treacă printr-un ciclu de pregătire special, să stăpânească mai pe deplin problemele de microbiologie, echipamente de laborator, metode de indicare, cultivare și identificare a anaerobilor. În plus, o bună experiență este acumulată în timpul participării la seminarii și simpozioane speciale despre infecția anaerobă la nivel național și internațional. Aceste recomandări metodologice se adresează bacteriologilor, medicilor de diferite specialități (chirurgi, terapeuți, endocrinologi, obstetricieni-ginecologi, pediatri), studenților facultăților de medicină și biologică, profesorilor universităților de medicină și școlilor de medicină.

Introducere

Primele idei despre rolul microorganismelor anaerobe în patologia umană au apărut cu multe secole în urmă. În secolul al IV-lea î.Hr., Hipocrate a descris în detaliu clinica tetanosului, iar în secolul al IV-lea d.Hr. Xenofon a descris cazuri de gingivita ulceroasă acută necrozantă la soldații greci. Tabloul clinic al actinomicozei a fost descris de Langenbeck în 1845. Cu toate acestea, la acea vreme nu era clar care microorganisme au cauzat aceste boli, care sunt proprietățile lor, la fel cum conceptul de anaerobioză a lipsit până în 1861, când Louis Pasteur a publicat lucrarea clasică privind studiul Vibrio. butirigă și a numit organismele care trăiesc în absența aerului „anaerobe” (17). Ulterior, Louis Pasteur (1877) a izolat și a cultivat Clostridium septicum , şi Israel în 1878 a descris actinomicetele. Agentul cauzal al tetanosului este Clostridium tetani - identificat în 1883 de N. D. Monastyrsky, iar în 1884 de A. Nikolayer. Primele studii asupra pacienților cu infecție anaerobă clinică au fost efectuate de Levy în 1891. Rolul anaerobilor în dezvoltarea unei varietăți de patologii medicale a fost descris și argumentat pentru prima dată de Veiloon. și Zuber în 1893-1898. Ei au descris diferite tipuri de infecții severe cauzate de microorganisme anaerobe (gangrenă pulmonară, apendicită, abcese pulmonare, creier, pelvis, meningită, mastoidită, otită medie cronică, bacteriemie, parametrită, bartolinită, artrită purulentă). În plus, au dezvoltat multe abordări metodologice pentru izolarea și cultivarea anaerobilor (14). Astfel, la începutul secolului al XX-lea, multe dintre microorganismele anaerobe au devenit cunoscute, s-a format o idee despre semnificația lor clinică și a fost creată o tehnică adecvată pentru cultivarea și izolarea microorganismelor anaerobe. Din anii 60 și până în prezent, urgența problemei infecțiilor anaerobe continuă să crească. Acest lucru se datorează atât rolului etiologic al microorganismelor anaerobe în patogeneza bolilor, cât și dezvoltării rezistenței la medicamentele antibacteriene utilizate pe scară largă, cât și evoluției severe și mortalității ridicate a bolilor pe care le provoacă.

1.1. Definiție și caracterizare

În microbiologia clinică, microorganismele sunt clasificate în mod obișnuit pe baza relației lor cu oxigenul atmosferic și dioxidul de carbon. Acest lucru este ușor de verificat la incubarea microorganismelor pe agar sânge în diferite condiții: a) în aer normal (21% oxigen); b) în condiţii de incubator cu CO 2 (oxigen 15%); c) în condiţii microaerofile (5% oxigen) d) condiţii anaerobe (0% oxigen). Folosind această abordare, bacteriile pot fi împărțite în 6 grupe: aerobi obligați, aerobi microaerofili, anaerobi facultativi, anaerobi aerotoleranți, anaerobi microaerotoleranți, anaerobi obligatorii. Aceste informații sunt utile pentru identificarea primară atât a aerobilor, cât și a anaerobilor.

Aerobi. Pentru creștere și reproducere, aerobii obligați au nevoie de o atmosferă care să conțină oxigen molecular la o concentrație de 15-21% sau CO; incubator. Micobacteriile, Vibrio cholerae și unele ciuperci sunt exemple de aerobi obligatorii. Aceste microorganisme își obțin cea mai mare parte a energiei prin procesul de respirație.

microaerofile(aerobi microaerofili). Au nevoie și de oxigen pentru a se reproduce, dar în concentrații mai mici decât cele prezente în atmosfera camerei. Gonococii și Campylobacter sunt exemple de bacterii microaerofile și preferă o atmosferă cu un conținut de O2 de aproximativ 5%.

anaerobi microaerofili. Bacteriile capabile să crească în condiții anaerobe și microaerofile, dar incapabile să crească într-un incubator cu CO2 sau într-un mediu aerian.

Anaerobi. Anaerobii sunt microorganisme care nu au nevoie de oxigen pentru a trăi și a se reproduce. Anaerobii obligatorii sunt bacterii care cresc numai în condiții anaerobe, adică. într-o atmosferă fără oxigen.

Microorganisme aerotolerante. Capabil să crească într-o atmosferă care conține oxigen molecular (aer, incubator cu CO2), dar cresc cel mai bine în condiții anaerobe.

Anaerobi facultativi(aerobi facultativi). Capabil să supraviețuiască în prezența sau absența oxigenului. Multe bacterii izolate de la pacienți sunt anaerobe facultative (enterobacterii, streptococi, stafilococi).

capnofili. Un număr de bacterii care cresc mai bine în prezența unor concentrații crescute de CO 2 sunt numite capnofile sau organisme capnofile. Bacteroidele, fusobacterii, bacteriile hemoglobinofile sunt capnofile, deoarece cresc mai bine într-o atmosferă care conține 3-5% CO 2 (2,

19,21,26,27,32,36).

Principalele grupe de microorganisme anaerobe sunt prezentate în tabelul 1. (42, 43,44).

Masaeu. Cele mai importante microorganisme anaerobe

Gen

feluri

o scurtă descriere a

Bacteroides

LA. fragilis

LA. vulgatus

LA. distansonis

LA. eggerthii

spori Gram negativi, care nu formează bastonașe

Prevotella

P. melaninogenicus

P. bivia

P. buccalis

P. denticola

P. intermedia

Porphyromonas

P. asaccharolyticum

P. endodontalis

P. gingivalis

spori Gram negativi, care nu formează bastonașe

Ctostridium

C. perfringens

C. ramosum

C. septice

C. novyi

C. sporogenes

C. sordelii

C. tetani

C. botulinum

C. difficile

Bacili sau bacili gram-pozitivi, formatori de spori

Actinomyces

DAR. Israel

A. bovis

Pseudoramibacter *

P. alactolyticum

Baghete gram-pozitive, care nu formează spori

E. lentum

E.rectal

E. limosum

Baghete gram-pozitive, care nu formează spori

Bifidobacterium

B. eriksonii

B. adolescenta

B.breve

Bastoane Gram pozitive

Propionobacteria

P. acnee

P. avidum

P. granulosum

P. propionica**

Gram-pozitiv. tije care nu formează spori

Lactobacillus

L. catenaforme

L. acidophilus

Bastoane Gram pozitive

Peptococul

P. magnus

P. saccharolyticus

P. asaccharolyticus

Peptostreptococul

P. anaerobiu

P. intermedius

P.micros

P. productus

Coci gram-pozitivi, care nu formează spori

Veilonella

V. parvula

Coci gram-negativi, nesporizanți

Fusobacterium

F. nucleatum

F. necrophorum

F. varium

F. mortiferum

Fusiform bastoane

campylobacter

C. făt

C.jejuni

Baghete Gram negative, subțiri, spiralate, care nu formează spori

* Eubacterium alaclolyticum reclasificat ca Pseudoramibacter alactolyticum (43,44)

** anterior Arahnia propionica (44)

*** sinonime F. pseudonecrophorum, F. necrophorum biovar DIN(42,44)

1.2. Compoziția microflorei principalelor biotopuri umane

Etiologia bolilor infecțioase a suferit modificări semnificative în ultimele decenii. După cum se știe, mai devreme, principalul pericol pentru sănătatea umană era infecțiile acute contagioase: febra tifoidă, dizenteria, salmoneloza, tuberculoza și multe altele, care se transmiteau în principal pe căi exogene. Deși aceste infecții rămân încă importante din punct de vedere social și acum semnificația lor medicală este din nou în creștere, în general, rolul lor a scăzut semnificativ. În același timp, se înregistrează o creștere a rolului microorganismelor oportuniste, reprezentanți ai microflorei normale a corpului uman. Compoziția microflorei umane normale include mai mult de 500 de specii de microorganisme. Microflora normală care trăiește în corpul uman este în mare parte reprezentată de anaerobi (Tabelul 2).

Bacteriile anaerobe care populează pielea umană și membranele mucoase, efectuând transformarea microbiană a substraturilor de origine exogenă și endogenă, produc o gamă largă de diverse enzime, toxine, hormoni și alți compuși biologic activi care sunt absorbiți și se leagă de receptori complementari și afectează funcția celulelor și organelor. Cunoașterea compoziției microflorei normale specifice a anumitor regiuni anatomice este utilă pentru înțelegerea etiologiei proceselor infecțioase. Totalitatea speciilor de microorganisme care locuiesc într-o anumită regiune anatomică se numește microfloră indigenă. Mai mult decât atât, detectarea unor microorganisme specifice într-o cantitate semnificativă la distanță sau într-un loc neobișnuit pentru locuire subliniază doar participarea acestora la dezvoltarea procesului infecțios (11, 17, 18, 38).

Tractului respirator. Microflora tractului respirator superior este foarte diversă și include peste 200 de specii de microorganisme care fac parte din 21 de genuri. 90% dintre bacteriile salivare sunt anaerobe (10, 23). Majoritatea acestor microorganisme nu sunt clasificate prin metode moderne de taxonomie și nu sunt semnificative pentru patologie. Tractul respirator al oamenilor sănătoși este cel mai frecvent colonizat de următoarele microorganisme: streptococ pneumoniae- 25-70%; H aemophilus influenzae- 25-85%; streptococ piogenes- 5-10%; Neisseria meningitidis- 5-15%. Microorganisme anaerobe precum Fusobacterium, Bacteroides spiralis, Peptostreptococul, Peptococul, Veilonella si unele tipuri Actinomyces întâlnită la aproape toți oamenii sănătoși. Bacteriile coliforme se găsesc în tractul respirator la 3-10% dintre oamenii sănătoși. Colonizarea crescută a tractului respirator de către aceste microorganisme a fost găsită la alcoolici, persoanele cu o evoluție severă a bolii, la pacienții care au primit terapie antibacteriană care suprimă microflora normală, precum și la persoanele cu funcțiile sistemului imunitar afectate.

Tabelul 2. Conținutul cantitativ al microorganismelor din biotopuri

corpul uman normal

Populațiile de microorganisme din tractul respirator se adaptează la anumite nișe ecologice (nas, faringe, limbă, crăpături gingivale). Adaptarea microorganismelor la acești biotopi este determinată de afinitatea bacteriilor pentru anumite tipuri de celule sau suprafețe, adică este determinată de tropismul celular sau tisular. De exemplu, streptococ salivare bine atașat de epiteliul obrazului și domină în compoziția mucoasei bucale. bacterie de adeziune

riy poate explica, de asemenea, patogeneza anumitor boli. streptococ piogenes aderă bine la epiteliul faringelui și provoacă adesea faringită, E. coli are afinitate față de epiteliul vezicii urinare și, prin urmare, provoacă cistită.

Piele. Microflora indigenă a pielii este reprezentată în principal de bacterii din următoarele genuri: Stafilococ, Micrococ, Corinobacterii, Propionobacteria, Brevibacterium și Acinetobacter. De asemenea, sunt adesea prezente drojdiile din gen Pityrosporium. Anaerobii sunt reprezentați în mare parte de bacterii gram-pozitive ale genului propi- onobacterii (de obicei Propionobacteria acnee). Coci gram-pozitivi (Peptostreptococul spp.) și Bacteriile Gram-pozitive ale genului Eubacterium prezente la unii indivizi.

Uretra. Bacteriile care colonizează uretra distală sunt stafilococii, streptococul nehemolitic, difteroizii și, într-un număr mic de cazuri, diverși membri ai familiei Enterobacteriaceae. Anaerobii sunt reprezentați într-o măsură mai mare de bacterii gram-negative - BacteroidesșiFusobacterium spp..

vagin. Aproximativ 50% dintre bacteriile din secretul colului uterin și al vaginului sunt anaerobe. Majoritatea anaerobilor sunt reprezentați de lactobacili și peptostreptococi. Prevo-tell-urile sunt adesea găsite - P. bivia și P. disiens. În plus, bacteriile Gram-pozitive ale genului Mobiluncus și Clostridium.

Intestinele. Din cele 500 de specii care locuiesc în corpul uman, aproximativ 300 până la 400 de specii trăiesc în intestine. Următoarele bacterii anaerobe se găsesc în cel mai mare număr în intestin - Bacteroides, Bifidobacterium, Clostridium, Eubacterium, LactobacillusșiPeptostrepto- coccus. Bacteroidii sunt microorganismele dominante. S-a stabilit că pentru o celulă de Escherichia coli există o mie de celule de bacterii.

2. Factorii de patogenitate a microorganismelor anaerobe

Patogenitatea microorganismelor înseamnă capacitatea lor potențială de a provoca boli. Apariția patogenității în microbi este asociată cu dobândirea de către aceștia a unui număr de proprietăți care oferă capacitatea de a se atașa, de a pătrunde și de a se răspândi în corpul gazdei, de a rezista mecanismelor sale de apărare și de a provoca leziuni organelor și sistemelor vitale. În același timp, se știe că virulența microorganismelor este o proprietate polideterminată, care se realizează pe deplin numai în organismul unei gazde sensibile la agentul patogen.

În prezent, se disting mai multe grupuri de factori de patogenitate:

a) adezine sau factori de atașare;

b) factori de adaptare;

c) invazive, sau factori de penetrare

d) capsulă;

e) citotoxine;

f) endotoxine;

g) exotoxine;

h) enzime toxine;

i) factori de modulare a sistemului imunitar;

j) superantigene;

k) proteine ​​de șoc termic (2, 8, 15, 26, 30).

Etapele și mecanismele, gama de reacții, interacțiuni și relații la nivel molecular, celular și organismal dintre microorganisme și organismul gazdă sunt foarte complexe și diverse. Cunoașterea factorilor de patogenitate ai microorganismelor anaerobe și utilizarea lor practică pentru prevenirea bolilor nu este încă suficientă. Tabelul 3 prezintă principalele grupe de factori patogeni ai bacteriilor anaerobe.

Tabelul 3. Factorii de patogenitate ai microorganismelor anaerobe

Etapa de interacțiune

Factor

feluri

Adeziune

Polizaharide capsulare fimbrie

Hemaglutininele

Invazie

Fosfolipaza C

Proteaze

Deteriora

tesaturi

Exotoxine

Hemolizinele

Proteaze

colagenaza

fibrinolizină

Neuraminidaza

heparinaza

Condriitin sulfat glucuronidază

N-acetil-glucozaminidaza Citotoxine

Enterotoxine

neurotoxine

P. melaninogenica

P. melaninogenica

Factori care suprimă sistemul imunitar

Produse metabolice Lipopolizaharide

(O-antigen)

Proteaze de imunoglobuline (G, A, M)

C3 și C5 convertaza

Proteaza a 2 -microglobuline Produse metabolice Acizi grași ai anaerobilor

Compuși ai sulfului

Oxidorreductaza

Beta-lactamaze

Majoritatea anaerobilor

Activatori ai factorilor de deteriorare

Lipopolizaharide

(O-antigen)

Structuri de suprafață

S-a stabilit acum că factorii de patogenitate ai microorganismelor anaerobe sunt determinați genetic. Au fost identificate gene cromozomale și plasmide, precum și transpozoni care codifică diferiți factori de patogenitate. Studiul funcțiilor acestor gene, mecanismelor și modelelor de exprimare, transmitere și circulație într-o populație de microorganisme este o problemă foarte importantă.

2.1. Rolul microflorei endogene anaerobe în patologia umană

Microorganismele anaerobe ale microflorei normale devin foarte adesea agenții cauzatori ai proceselor infecțioase localizate în diferite părți anatomice ale corpului. Tabelul 4 arată frecvența microflorei anaerobe în dezvoltarea patologiei. (2, 7, 11, 12, 18, 24, 27).

Se pot formula o serie de generalizări importante cu privire la etiologia şi patogeneza majorităţii tipurilor de infecţii anaerobe: 1) sursa microorganismelor anaerobe este microflora normală a pacienţilor din propriul tract gastrointestinal, respirator sau urogenital; 2) modificările proprietăților tisulare datorate traumatismelor și/sau hipoxiei asigură condiții adecvate pentru dezvoltarea unei infecții anaerobe secundare sau oportuniste; 3) infecțiile anaerobe, de regulă, sunt polimicrobiene și sunt adesea cauzate de un amestec de mai multe tipuri de microorganisme anaerobe și aerobe, care exercită sinergic un efect dăunător; 4) infecția este însoțită de formarea și eliberarea unui miros puternic în aproximativ 50% din cazuri (anaerobii neformatori de spori sintetizează acizi grași volatili care provoacă acest miros); 5) infecția se caracterizează prin formarea de gaze, necroză tisulară, dezvoltarea abceselor și a gangrenei; 6) infecția se dezvoltă în timpul tratamentului cu antibiotice aminoglicozide (bacteroidii sunt rezistenți la acestea); 7) se observă colorarea neagră a exudatului (porphyromonas și prevotella produc un pigment maro închis sau negru); 8) infectia are un curs prelungit, lent, adesea subclinic; 9) există modificări extensive ale țesutului necrotic, o discrepanță între severitatea simptomelor clinice și volumul modificărilor distructive, sângerare scăzută pe incizie.

Deși bacteriile anaerobe pot provoca infecții grave și fatale, inițierea infecției depinde în general de starea factorilor de apărare ai organismului, adică. funcțiile sistemului imunitar (2, 5, 11). Principiile tratamentului unor astfel de infecții includ îndepărtarea țesutului mort, drenajul, restabilirea circulației sanguine adecvate, îndepărtarea substanțelor străine și utilizarea terapiei antimicrobiene active adecvate agentului patogen, într-o doză și durată adecvate.

Tabelul 4. Rolul etiologic al microflorei anaerobe

în dezvoltare boli

Boli

Numărul de examinați

Frecvența izolării anaerobilor

Cap și gât

Abcese ale capului netraumatice

Sinuzita cronica

Infecții ale spațiului perimandibular

Cutia toracică

Pneumonie de aspirație

abces pulmonar

Abdomen

Abcese sau peritonită Apendicită

abces hepatic

tractul genital feminin

tipuri mixte

Abcese pelvine Procese inflamatorii

33 (100%) 22 (88%)

tesuturi moi

infecții ale rănilor

Abcese ale pielii

Ulcere ale membrelor diabetice Celulită non-clostridială

bacteriemie

Toate culturile

Sepsis intraabdominal Avort septic

3. Principalele forme de infecție anaerobă

3.1. Infecție pleuropulmonară

Microorganismele anaerobe semnificative din punct de vedere etiologic din această patologie sunt reprezentanți ai microflorei normale a cavității bucale și a tractului respirator superior. Sunt agenții cauzali ai diferitelor infecții, inclusiv pneumonia de aspirație, pneumonia necrozantă, actinomicoza și abcesul pulmonar. Principalii agenți cauzali ai bolilor pleuropulmonare sunt prezentați în Tabelul 5.

Tabelul 5. Cauzatoare de bacterii anaerobe

pleuropulmonar infecţie

Factorii care contribuie la dezvoltarea unei infecții pleuropulmonare anaerobe la un pacient includ aspirația microflorei normale (ca urmare a pierderii cunoștinței, disfagiei, prezența obiectelor mecanice, obstrucția, igiena orală deficitară, necrotizarea țesutului pulmonar) și răspândirea hematogenă. a microorganismelor. După cum se poate observa din Tabelul 5, pneumonia de aspirație este cauzată cel mai frecvent de organisme denumite anterior specii „bacteroide orale” (în prezent speciile Prevotella și Porphyromonas), Fusobacterium și Peptostreptococcus. Spectrul de bacterii izolate din empiem anaerob și abces pulmonar este aproape același.

3.2. Infecția piciorului diabetic

Dintre cei peste 14 milioane de diabetici din Statele Unite, mirosul neplăcut al picioarelor este cea mai frecventă cauză infecțioasă de spitalizare. Acest tip de infecție este adesea ignorat de pacienți în stadiul inițial și, uneori, tratat inadecvat de către medici. În general, pacienții nu caută să examineze cu atenție și regulat extremitățile inferioare și nu respectă recomandările medicilor pentru îngrijirea și regimul de mers pe jos. Rolul anaerobilor în dezvoltarea infecțiilor piciorului la diabetici a fost stabilit cu mulți ani în urmă. Principalele tipuri de microorganisme care provoacă acest tip de infecție sunt prezentate în Tabelul 6.

Tabelul 6. Microorganisme aerobe şi anaerobe care cauzează

infecția piciorului la diabetici

Aerobi

Anaerobi

Proteus mirabili

Bacteroides fragilis

Pseudomonas aeruginosa

alte specii din grupa B. fragilis

Enterobacter aerogenes

Prevotella melaninogenica

Escherichia coli

alte specii de Prevotella\ Porphyromonas

Pneumonie Klebsiella

Fusobacterium nucleatum

alte fusobacterii

Peptostreptococul

Staphylococcus aureus

alte tipuri de clostridii

S-a stabilit că 18-20% dintre pacienții diabetici au o infecție mixtă aerobă/anaerobă. În medie, la un pacient au fost detectate 3,2 specii de microorganisme aerobe și 2,6 anaerobe, iar dintre bacteriile anaerobe, peptostreptococii au fost dominanti. Au fost adesea detectate bacterii, prevotella și clostridii. Din rănile profunde s-a izolat o asociere de bacterii în 78% din cazuri. Microflora aerobă gram-pozitivă (stafilococi și streptococi) a fost detectată la 25% dintre pacienți, iar microflora aerobă gram-negativă în formă de bastonaș a fost detectată la aproximativ 25% dintre pacienți. Aproximativ 50% dintre infecțiile anaerobe sunt mixte. Aceste infecții sunt mai severe și necesită cel mai adesea amputarea membrului afectat.

3.3. bacteriemie și sepsis

Proporția microorganismelor anaerobe în dezvoltarea bacteriemiei variază de la 10 la 25%. Cele mai multe studii arată asta LA.fragilis și alte specii din acest grup, precum și Bacteroides thetaiotaomicron sunt cea mai frecventă cauză a bacteriemiei. Clostridiile sunt următoarele ca frecvență (în special Clostridium perfringens) și peptostreptococi. Ele sunt adesea izolate în cultură pură sau în asociații. În ultimele decenii, în multe țări ale lumii s-a înregistrat o creștere a frecvenței sepsisului anaerob (de la 0,67 la 1,25 cazuri la 1000 internați în spital). Mortalitatea la pacienții cu sepsis cauzat de microorganisme anaerobe este de 38-50%.

3.4. tetanos

Tetanusul a fost o infecție gravă și adesea fatală bine-cunoscută încă de pe vremea lui Hipocrate. Timp de secole, această boală a fost o problemă urgentă asociată cu împușcături, arsuri și răni traumatice. controversă Clostridium tetani se găsesc în fecalele umane și animale și sunt larg răspândite în mediu. Ramon și colegii în 1927 au propus cu succes imunizarea cu toxoid pentru prevenirea tetanosului. Riscul de a dezvolta tetanos este mai mare la persoanele peste 60 de ani din cauza scaderii eficacitatii/pierderii imunitatii protectoare antitoxice post-vaccinare. Terapia include administrarea de imunoglobuline, debridarea rănilor, terapie antimicrobiană și antitoxică, îngrijire medicală continuă, sedative și analgezice. O atenție deosebită este acum acordată tetanosului neonatal.

3.5. Diaree

Există o serie de bacterii anaerobe care provoacă diaree. Anaerobiospirillum producători succinici- bacterii mobile în formă de spirală cu flageli bipolari. Agentul cauzal este excretat în fecalele câinilor și pisicilor cu infecții asimptomatice, precum și de la persoanele cu diaree. Tulpini enterotoxigenice LA.fragilis. În 1984, Mayer a arătat rolul tulpinilor producătoare de toxine LA.fragilis în patogeneza diareei. Tulpinile toxice ale acestui agent patogen sunt izolate din diaree la oameni și animale. Ele nu pot fi diferențiate de tulpinile comune prin metode biochimice și serologice. În experiment, acestea provoacă diaree și leziuni caracteristice ale intestinului gros și ale intestinului subțire distal cu hiperplazie de criptă. Enterotoxina are o greutate moleculară de 19,5 kD și este termolabilă. Patogenia, spectrul și frecvența incidenței, precum și terapia optimă, nu au fost încă suficient dezvoltate.

3.6. Infecția anaerobă chirurgicală a rănilor și a țesuturilor moi

Agenții infecțioși izolați din rănile chirurgicale depind în mare măsură de tipul de intervenție chirurgicală. Cauza supurației în intervențiile chirurgicale curate care nu sunt însoțite de o deschidere a tractului gastrointestinal, urogenital sau respirator, de regulă, este Sf. aureus. În alte tipuri de supurație a plăgii (curat contaminate, contaminate și murdare), este cel mai adesea izolată o microfloră polimicrobiană mixtă a organelor rezecate chirurgical. În ultimii ani, s-a înregistrat o creștere a rolului microflorei oportuniste în dezvoltarea unor astfel de complicații. Majoritatea rănilor superficiale sunt diagnosticate la o dată ulterioară, între a opta și a noua zi după operație. Dacă infecția se dezvoltă mai devreme - în primele 48 de ore după operație, atunci acest lucru este tipic pentru o infecție gangrenoasă cauzată de anumite specii fie de clostridii, fie de streptococ beta-hemolitic. În aceste cazuri există o creștere dramatică a severității bolii, toxicoză pronunțată, dezvoltarea locală rapidă a infecției cu implicarea tuturor straturilor țesuturilor corpului în proces.

3.7. Generatoare de gaze infecție a țesuturilor moi

Prezența gazului în țesuturile infectate este un semn clinic de rău augur, iar în trecut această infecție a fost asociată cel mai adesea de către medici cu prezența agenților patogeni ai gangrenei gazoase clostridiene. Acum se știe că infecția producătoare de gaze la pacienții operați este cauzată de un amestec de microorganisme anaerobe, cum ar fi Clostridium, Peptostreptococul sau Bacteroides, sau unul dintre tipurile de bacterii coliforme aerobe. Factorii predispozanți pentru dezvoltarea acestei forme de infecție sunt bolile vasculare ale extremităților inferioare, diabetul, traumatismele.

3.8. Mionecroza clostridiană

Gangrena gazoasă este un proces distructiv al țesutului muscular asociat cu crepitus local, intoxicație sistemică severă cauzată de clostridiile anaerobe care formează gaze Clostridiile sunt anaerobi obligatorii gram-pozitivi care sunt larg răspândiți în solul contaminat cu excremente animale. La oameni, ei sunt în mod normal locuitori ai tractului gastrointestinal și genital feminin. Uneori pot fi găsite pe piele și în cavitatea bucală. Cea mai semnificativă specie dintre cele 60 cunoscute este Clostridium perfringens. Acest microorganism este mai tolerant la oxigenul atmosferic și crește rapid. Este o toxină alfa, fosfolipaza C (lecitinaza), care descompune lecitina în fosforilcolină și digliceride, precum și colagenază și proteaze, care provoacă distrugerea țesuturilor. Producția de alfa-toxine este asociată cu o mortalitate ridicată în gangrena gazoasă. Are proprietăți hemolitice, distruge trombocitele, provoacă leziuni intense ale capilarelor și distrugerea secundară a țesuturilor. În 80% din cazuri, este cauzată mionecroză DIN.perfringens. În plus, este implicată etiologia acestei boli DIN.novyi, DIN. septica, DE LA.bifer- mentas. Alte tipuri de Clostridium C. histolitic, DE LA.sporogene, DE LA.fallax, DE LA.tertiu au o semnificație etiologică scăzută.

3.9. Infecție cu creștere lentă a plăgii necrotice

Infecție agresivă a rănilor care pune viața în pericol Poate să apară până la 2 săptămâni după infecție, în special la pacienții diabetici

bolnav. De obicei, acestea sunt fie infecții fasciale mixte, fie monomicrobiene. Infecțiile monomicrobiene sunt relativ rare. în aproximativ 10% din cazuri și se observă de obicei la copii. Agenții cauzali sunt streptococii de grup A, Staphylococcus aureus și streptococii anaerobi (Peptostreptococi). Stafilococii și streptococul hemolitic sunt izolați cu aceeași frecvență la aproximativ 30% dintre pacienți. Cei mai mulți dintre ei sunt infectați în afara spitalului. Majoritatea adulților au fascilita necrozantă a extremităților (în 2/3 din cazuri, extremitățile sunt afectate). La copii, trunchiul și inghina sunt mai frecvent implicate. Infecția polimicrobiană include o serie de procese cauzate de microflora anaerobă. În medie, aproximativ 5 tipuri principale se disting de răni. Mortalitatea în astfel de boli rămâne ridicată (aproximativ 50% în rândul pacienților cu forme severe). Persoanele în vârstă au tendința de a avea un prognostic prost. Mortalitatea la persoanele peste 50 de ani este mai mare de 50%, iar la pacientii cu diabet zaharat - mai mult de 80%.

3.10. infecție intraperitoneală

Infecțiile intra-abdominale sunt cele mai dificile pentru diagnosticarea precoce și tratamentul eficient. Un rezultat de succes depinde în primul rând de diagnosticul precoce, intervenția chirurgicală promptă și adecvată și utilizarea unui regim antimicrobian eficient. Natura polimicrobiană a microflorei bacteriene implicată în dezvoltarea peritonitei ca urmare a perforației în apendicita acută a fost demonstrată pentru prima dată în 1938. Altemeier. Numărul de microorganisme aerobe și anaerobe izolate din locurile de sepsis intraabdominal depinde de natura microflorei sau a organului lezat. Datele generalizate indică faptul că numărul mediu de specii bacteriene izolate din focarul infecției variază de la 2,5 la 5. Pentru microorganismele aerobe, aceste date sunt de 1,4–2,0 specii și 2,4–3,0 specii de microorganisme anaerobe. Cel puțin 1 tip de anaerobi este detectat la 65-94% dintre pacienți. Dintre microorganismele aerobe, cel mai des sunt detectate Escherichia coli, Klebsiella, Streptococcus, Proteus, Enterobacter, iar dintre microorganismele anaerobe - Bacteroides, Peptostreptococci, Clostridia. Bacteroidele reprezintă 30% până la 60% din toate tulpinile izolate de microorganisme anaerobe. Conform rezultatelor a numeroase studii, 15% dintre infecții sunt cauzate de microflora anaerobă și 10% de microfloră aerobă și, în consecință, 75% sunt cauzate de asociații. Cele mai semnificative dintre ele- E.coli și LA.fragilis. Potrivit lui N. S. Bogomolova și L. V. Bolshakov (1996), infecția anaerobă

a fost cauza dezvoltării bolilor odontogenice în 72,2% din cazuri, peritonita apendiculară - în 62,92% din cazuri, peritonita datorată afecțiunilor ginecologice - la 45,45% dintre pacienți, colangita - la 70,2%. Microflora anaerobă a fost cel mai adesea izolată în peritonita severă în stadiile toxice și terminale ale bolii.

3.11. Caracterizarea abceselor anaerobe experimentale

În experiment LA.fragilis inițiază dezvoltarea abcesului subcutanat. Evenimentele inițiale sunt migrarea leucocitelor polimorfonucleare și dezvoltarea edemului tisular. După 6 zile se identifică clar 3 zone: interne - constă din mase necrotice și celule și bacterii inflamatorii alterate degenerativ; cea din mijloc este formată din diafisul leucocitar iar zona exterioară este reprezentată de un strat de colagen și țesut fibros. Concentrația bacteriilor variază de la 108 la 109 la 1 ml de puroi. Un abces se caracterizează printr-un potențial redox scăzut. Este foarte dificil de tratat, deoarece există distrugerea medicamentelor antimicrobiene de către bacterii, precum și evadarea de factorii de apărare a gazdei.

3.12. Colita pseudomembranoasa

Colita pseudomembranoasă (PMC) este o boală gastrointestinală gravă caracterizată prin plăci exsudative pe mucoasa colonului. Această boală a fost descrisă pentru prima dată în 1893, cu mult înainte de apariția antimicrobienelor și de utilizarea lor în scopuri medicinale. S-a stabilit acum că factorul etiologic al acestei boli este Clostridium difficile. Încălcarea microecologiei intestinului din cauza utilizării antibioticelor este cauza dezvoltării MVP și a răspândirii largi a infecțiilor cauzate de DIN.difficile, al cărui spectru clinic de manifestări variază foarte mult - de la transport și pe termen scurt, diaree care trece spontan până la dezvoltarea MVP. Numărul de pacienți cu colită cauzată de C. difficile, în ambulatoriu 1-3 la 100.000, iar în rândul pacienţilor internaţi 1 la 100-1000.

Patogeneza. Colonizarea intestinului uman cu tulpini toxice DIN,difficile este un factor important în dezvoltarea PMC. Cu toate acestea, transportul asimptomatic apare la aproximativ 3-6% dintre adulți și 14-15% dintre copii. Microflora intestinală normală servește ca o barieră de încredere în calea colonizării de către microorganisme patogene. Este ușor deranjat de antibiotice și foarte greu de recuperat. Efectul cel mai pronunțat asupra microflorei anaerobe este cefalosporinele de generația a 3-a, clindamicină (grupul lincomicinei) și ampicilină. De regulă, toți pacienții cu MVP suferă de diaree. În același timp, scaunul este lichid cu impurități de sânge și mucus. Există hiperemie și umflarea mucoasei intestinale. Se remarcă adesea colita ulceroasă sau proctită, caracterizată prin granulații, mucoasă hemoragică. Majoritatea pacienților cu această boală au febră, leucocitoză și tensiune abdominală. Ulterior, pot apărea complicații grave, inclusiv intoxicație generală și locală, hipoalbuminemie. Simptomele diareei asociate antibioticelor încep în zilele 4-5 ale terapiei cu antibiotice. În scaunul unor astfel de pacienți, S. difficile în 94% din cazuri, în timp ce la adulții sănătoși acest microorganism este izolat doar în 0,3% din cazuri.

DIN.difficile produce două tipuri de exotoxine foarte active - A și B. Toxina A este o enterotoxină care provoacă hipersecreție și acumulare de lichid în intestin, precum și o reacție inflamatorie cu sindrom hemoragic. Toxina B este o citotoxină. Este neutralizat de ser antigagrenos polivalent. Această citotoxină se găsește la aproximativ 50% dintre pacienții cu colită asociată cu antibiotice fără formare pseudomembranoasă și la 15% dintre pacienții cu diaree asociată cu antibiotice cu sigmoidoscopie normale. Acțiunea sa citotoxică se bazează pe depolimerizarea actinei microfilamentului și deteriorarea citoscheletului enterocitelor. Recent, au apărut tot mai multe date pe DIN.difficile ca agent infecţios nosocomial. În acest sens, este de dorit izolarea pacienților operați, purtători ai acestui microorganism, pentru a evita răspândirea infecției în spital. DIN.difficile cel mai sensibil la vancomicină, metronidazol și bacitracină. Astfel, aceste observații confirmă faptul că tulpinile producătoare de toxine DIN.difficile provoacă o gamă largă de boli, inclusiv diaree, colită și MVP.

3.13. Infecții obstetrico-ginecologice

Înțelegerea tiparelor de dezvoltare a infecțiilor organelor genitale feminine este posibilă pe baza unui studiu aprofundat al microbiocenozei vaginului. Microflora normală a vaginului trebuie luată în considerare în ceea ce privește o barieră de protecție împotriva celor mai comuni agenți patogeni.

Procesele disbiotice contribuie la formarea vaginozei bacteriene (BV). BV este asociată cu dezvoltarea unor complicații precum infecțiile anaerobe postoperatorii ale țesuturilor moi, endometrita postpartum și post-avort, avortul prematur, infecția intraamniotică (10). Infecția obstetrico-ginecologică este de natură polimicrobiană. În primul rând, aș dori să remarc rolul crescând al anaerobilor în dezvoltarea proceselor inflamatorii acute ale organelor pelvine - inflamația acută a anexelor uterine, endometrita postpartum, în special după nașterea operativă, complicații postoperatorii în ginecologie (pericultită, abcese, infecție a plăgii) (5). Microorganismele cel mai frecvent izolate din infecțiile tractului genital feminin includ Bactemide fragilis, precum și tipuri Peptococul și Peptostreptococul. Streptococii de grup A nu se găsesc frecvent în infecțiile pelvine. Streptococii de grup B provoacă adesea sepsis la pacientele obstetricale a căror poartă de intrare este tractul genital. În ultimii ani, cu infecții obstetricale și ginecologice, se alocă tot mai mult DIN.trachomatis. Printre cele mai frecvente procese infecțioase ale tractului urogenital se numără pelvioperitonita, endometrita după cezariană, infecțiile manșetei vaginale după histerectomie, infecțiile pelvine după avortul septic. Eficacitatea clindamicinei în aceste infecții variază de la 87% la 100% (10).

3.14. Infecția anaerobă la pacienții cu cancer

Riscul de infecție la pacienții cu cancer este incomparabil mai mare decât la alți pacienți operați. Această caracteristică este explicată de o serie de factori - severitatea bolii de bază, imunodeficiența, un număr mare de proceduri invazive de diagnostic și terapeutice, un volum mare și traumatism al intervențiilor chirurgicale, utilizarea unor metode foarte agresive de tratament - radio și chimioterapie. . La pacienții operați de tumori ale tractului gastrointestinal, în perioada postoperatorie se dezvoltă abcese subdiafragmatice, subhepatice și intraperitoneale de etiologie anaerobă. Agentii patogeni dominanti Bacteroides fragi- lis, Prevotella spp.. Fusobacterium spp., coci gram pozitivi. În ultimii ani, au existat din ce în ce mai multe rapoarte despre rolul important al anaerobilor nesporogeni în dezvoltarea afecțiunilor septice și asupra izolării acestora de sânge în timpul bacteriemiei (3).

4. Diagnosticare de laborator

4.1. Material în studiu

Diagnosticul de laborator al infecției anaerobe este o sarcină destul de dificilă. Timpul de studiu din momentul în care materialul patologic este livrat de la clinică la laboratorul microbiologic și până la obținerea unui răspuns complet detaliat este de la 7 la 10 zile, ceea ce nu poate satisface clinicienii. Adesea, rezultatul analizei bacteriologice devine cunoscut în momentul în care pacientul este externat. Inițial, ar trebui să se răspundă la întrebarea: sunt anaerobii prezenți în material. Este important de reținut că anaerobii sunt componenta principală a microflorei locale a pielii și a membranelor mucoase și, în plus, că izolarea și identificarea acestora trebuie efectuate în condiții adecvate. Demararea cu succes a cercetării în microbiologia clinică a infecției anaerobe depinde de colectarea corectă a materialului clinic adecvat.

În practica normală de laborator, se folosesc cel mai des următoarele materiale: 1) leziuni infectate din tractul gastrointestinal sau tractul genital feminin; 2) material din cavitatea abdominală cu peritonită și abcese; 3) sânge de la pacienți septici; 4) scurgeri în bolile inflamatorii cronice ale căilor respiratorii (sinuzite, otite medii, mastoidite); 5) material din părțile inferioare ale căilor respiratorii în caz de pneumonie de aspirație; 6) lichid cefalorahidian în meningită; 7) conținutul abcesului cerebral; 8) material local pentru boli dentare; 9) conţinutul abceselor superficiale: 10) conţinutul plăgilor superficiale; 11) materialul plăgilor infectate (chirurgicale și traumatice); 12) biopsii (19, 21, 29, 31, 32, 36, 38).

4.2. Etapele cercetării materialelor în laborator

Diagnosticul și tratamentul cu succes al infecției anaerobe sunt posibile numai cu cooperarea interesată a microbiologilor și clinicienilor de profil adecvat. Obținerea de probe adecvate pentru testarea microbiologică este critică. Metodele de preluare a materialului depind de locația și tipul procesului patologic. Cercetările de laborator se bazează pe indicarea și identificarea ulterioară a speciilor a microorganismelor anaerobe și aerobe conținute în materialul de testat prin metode tradiționale și exprese, precum și pe determinarea sensibilității microorganismelor izolate la medicamentele chimioterapeutice antimicrobiene (2).

4.3. Examinarea materială directă

Există multe teste directe rapide care indică puternic prezența anaerobilor în număr mare în materialul de testat. Unele dintre ele sunt destul de simple și ieftine și, prin urmare, au avantaje față de multe teste de laborator costisitoare.

1. 3 a p a x. Materialele fetide conțin întotdeauna anaerobi, doar câteva dintre ele sunt inodore.

2. Cromatografia gaz-lichid (GLC). Se referă la numărul de metode de diagnostic expres. GLC vă permite să determinați în puroi acizii grași cu lanț scurt (acetic, propionic, izovaleric, izocaproic, caproic), care provoacă mirosul. Cu ajutorul GLC, conform spectrului de acizi grași volatili, este posibil să se efectueze identificarea speciilor microorganismelor prezente în acesta.

3. Fluorescență. Studiul materialelor (puroi, țesuturi) în lumină ultravioletă la o lungime de undă de 365 nm relevă o fluorescență roșie intensă, care se explică prin prezența bacteriilor pigmentate negre aparținând grupelor Basteroides și Porphyromonas, și care indică prezența anaerobilor.

4. Bacterioscopie. În studiul multor preparate colorate prin metoda Gram, frotiul relevă prezența celulelor focarului inflamator, a microorganismelor, în special bastonașe gram-negative polimorfe, coci gram-pozitivi mici sau bacili gram-pozitivi.

5. Imunofluorescență. Imunofluorescența directă și indirectă sunt metode exprese și fac posibilă detectarea microorganismelor anaerobe în materialul de testat.

6. Metoda ELISA. ELISA permite determinarea prezenței antigenelor structurale sau exotoxinelor microorganismelor anaerobe.

7. Metode biologice moleculare. Cea mai mare distribuție, sensibilitate și specificitate din ultimii ani a fost demonstrată de reacția în lanț a polimerazei (CPR). Este folosit atât pentru detectarea bacteriilor direct în material, cât și pentru identificare.

4.4. Metode și sisteme pentru crearea condițiilor anaerobe

Materialele luate din surse adecvate și în containere sau medii de transport adecvate în acest scop trebuie livrate imediat la laborator. Cu toate acestea, există dovezi că anaerobii semnificativi clinic în volume mari de puroi sau într-un mediu de transport anaerob supraviețuiesc timp de 24 de ore. Este important ca mediul inoculat să fie incubat în condiții anaerobe sau plasat într-un vas umplut cu CO2 și păstrat până când este transferat într-un sistem special de incubare. Există trei tipuri de sisteme anaerobe utilizate în mod obișnuit în laboratoarele clinice. Sistemele mai utilizate sunt microanaerostatele de tipul (GasPark, BBL, Cockeysville), care au fost folosite în laboratoare de mulți ani, în special în laboratoarele mici, și oferă rezultate satisfăcătoare. Cutiile Petri cu inoculare de bacterii anaerobe sunt plasate în interiorul vasului simultan cu o pungă specială generatoare de gaz și un indicator. Se adaugă apă în pungă, vasul este sigilat ermetic, CO2 și H2 sunt eliberate din pungă în prezența unui catalizator (de obicei paladiu). În prezența unui catalizator, H2 reacționează cu O2 pentru a forma apă. CO2 este esențial pentru creșterea anaerobilor, deoarece aceștia sunt capnofili. Albastrul de metilen este adăugat ca indicator al condițiilor anaerobe. Dacă sistemul de generare a gazului și catalizatorul funcționează eficient, atunci indicatorul se va decolora. Majoritatea anaerobilor necesită cel puțin 48 de ore de cultură. După aceea, camera este deschisă și cupele sunt examinate pentru prima dată, ceea ce nu este foarte convenabil, deoarece anaerobii sunt sensibili la oxigen și își pierd rapid viabilitatea.

Recent, au intrat în practică mai multe sisteme anaerobe simple - pungi anaerobi. Una sau două vase însămânțate cu un sac generator de gaze sunt plasate într-o pungă de polietilenă transparentă, închisă ermetic și incubate în condiții termostatice. Transparența pungilor de polietilenă facilitează efectuarea monitorizării periodice a creșterii microorganismelor.

Al treilea sistem de cultivare a microorganismelor anaerobe este o cameră închisă automat cu un perete frontal din sticlă (stație anaerobă) cu mănuși de cauciuc și alimentarea automată cu un amestec de gaze fără oxigen (N2, H2, CO2). Materialele, ceștile, eprubetele, tabletele pentru identificarea biochimică și sensibilitatea la antibiotice vor fi plasate în acest dulap printr-o trapă specială. Toate manipulările sunt efectuate de un bacteriolog în mănuși de cauciuc. Materialul și vasele din acest sistem pot fi vizualizate zilnic, iar culturile pot fi incubate de la 7-10 zile.

Aceste trei sisteme au avantajele și dezavantajele lor, dar sunt eficiente pentru izolarea anaerobilor și ar trebui să fie în fiecare laborator bacteriologic. Adesea sunt utilizate simultan, deși cea mai mare fiabilitate aparține metodei de cultivare într-o stație anaerobă.

4.5. Medii nutritive și cultivare

Studiul microorganismelor anaerobe se realizează în mai multe etape. Schema generală pentru izolarea și identificarea anaerobilor este prezentată în Figura 1.

Un factor important în dezvoltarea bacteriologiei anaerobe este disponibilitatea unei colecții de tulpini bacteriene tipice, inclusiv tulpini de referință din colecțiile ATCC, CDC și VPI. Acest lucru este deosebit de important pentru monitorizarea mediilor nutritive, pentru identificarea biochimică a culturilor pure și pentru evaluarea activității medicamentelor antibacteriene. Există o gamă largă de medii de bază care sunt utilizate pentru a pregăti medii speciale de cultură anaerobe.

Mediile nutritive pentru anaerobi trebuie să îndeplinească următoarele cerințe de bază: 1) să satisfacă nevoile nutriționale; 2) asigură creșterea rapidă a microorganismelor; 3) să fie redus în mod adecvat. Inocularea primară a materialului se efectuează pe plăci de agar cu sânge sau medii elective prezentate în tabelul 7.

Din ce în ce mai mult, izolarea anaerobilor obligatorii din materialul clinic se realizează pe medii care includ agenți selectivi la o anumită concentrație, permițând izolarea anumitor grupuri de anaerobi (20, 23) (Tabelul 8).

Durata incubației și frecvența examinării plăcilor inoculate depind de materialul de testat și de compoziția microflorei (tabelul 9).

Material în studiu

răni detașabile,

continutul abcesului,

Aspirat traheobronhonal etc.

Transport la laborator: în chiparos, într-un mediu special de transport (așezarea imediată a materialului în mediu)

Microscopia materialului

Pata Gram

Cultivare și izolare

cultura pura

Cupe aerobe pt

35±2°C comparativ cu

18-28 ore anaerobi

5-10% С0 2

  1. 1. agar cu sânge microaerostat

Gaz-Pak

(H2 + C02)

35±2°C

de la 48 de ore la 7 zile

2. Agar-sânge Schaedler

35±2°C

de la 48 de ore la 7 zile

  1. 3. Mediu selectiv pentru identificare

anaerobi

de la 48 de ore la 2 săptămâni

4. Mediu lichid (tioglicol)

Identificare. Culturi pure din colonii izolate

1. Se colorează Gram și Orzeszko pentru a detecta sporii

2. Morfologia coloniilor

3. Relația tipului de colonie cu oxigenul

4. Diferențierea preliminară prin sensibilitate la medicamentele antimicrobiene

5. Teste biochimice

Determinarea sensibilității la antibiotice

1. Metoda de diluare în agar sau bulion

2.Metoda discului de hârtie (difuzie)

Orez. 1. Izolarea și identificarea microorganismelor anaerobe

microorganisme anaerobe

miercuri

Scop

Geloză cu sânge Brucella (geloză cu sânge anaerobă CDC, agar cu sânge Shadler) (agar BRU)

Neselectiv, pentru a izola anaerobii prezenți în material

Agar-esculină biliară pentru bacterii(agar WWE)

selectivă și diferențială; pentru izolarea bacteriilor din grupul Bacteroides fragilis

Agar sânge kanamicina-vancomicină(KVLB)

Selectiv pentru majoritatea care nu formează spori

Bacteriile Gram-negative

Agar fenil etil(MAZĂRE)

Inhibă creșterea Proteus și a altor enterobacterii; stimulează creșterea anaerobilor gram-pozitivi și gram-negativi

Bulion de tioglicol(THIO)

Pentru situatii speciale

Agar cu galbenus(EYA)

Pentru a izola clostridiile

Agar cicloserin-cefoxitin-fructoză(CCFA) sau cicloserin manină agar (CMA) sau cicloserin manină agar sânge (CMBA)

Selectiv pentru C. difficile

Agar cristal-violet-eritromicină-nouă(CVEB)

Pentru izolarea Fusobacterium nucleatum și Leptotrichia buccalis

Agar Bacteroid gingivalis(BGA)

Pentru izolarea Porphyromonas gingivalis

Tabelul 8. Agenți selectivi pentru anaerobii obligați

organisme

Agenți selectivi

Obligați anaerobii din materialul clinic

neomicina (70 mg/l)

acid nalidixic (10 mg/l)

Actinomyces spp.

metronidazol (5 mg/l)

Bacteroides spp. Fusobacterium spp.

acid nalidixic (10 mg/l) + vancomicina (2,5 mg/l)

Bacteroides urealytica

acid nalidixic (10 mg/l) teicoplanină (20 mg/l)

Clostridium difficile

cicloserina (250 mg/l) cefoxitin (8 mg/l)

Fusobacterium

rifampicina (50 mg/l)

neomicina (100 mg/l)

vancomicină (5 mg/l)

Contabilitatea rezultatelor se realizează prin descrierea proprietăților culturale ale microorganismelor crescute, pigmentarea coloniilor, fluorescența, hemoliză. Apoi se prepară un frotiu din colonii, colorat cu Gram, și astfel sunt detectate bacterii Gram-negative și Gram-pozitive, sunt descrise microscopic și proprietățile morfologice. Ulterior, microorganismele fiecărui tip de colonii sunt subcultivate și cultivate în bulion de tioglicol cu ​​adaos de hemină și vitamina K. Morfologia coloniilor, prezența pigmentului, proprietățile hemolitice și caracteristicile bacteriilor din colorațiile Gram fac posibilă identifică și diferențiază în prealabil anaerobii. Ca urmare, toate microorganismele anaerobe pot fi împărțite în 4 grupe: 1) Gr + coci; 2) bacili Gr+ sau cocobacili: 3) coci Gr-; 4) Gr-bacili sau cocobacili (20, 22, 32).

Tabelul 9. Durata incubației și frecvența studiului

culturi de bacterii anaerobe

Tipul culturilor

Timp de incubație*

Frecvența studiului

Sânge

Zilnic până pe 7 și după 14

Lichide

Zilnic

Abcese, răni

Zilnic

Căile aeriene

Sputa Aspirat transtraheal Secreţie bronşică

Zilnic

o singura data

Zilnic

Zilnic

Tractul urogenital

Vagin, uter Prostată

Zilnic

Zilnic

Zilnic

o singura data

Fecale

Zilnic

Anaerobi

Brucella

actinomicete

Zilnic

de 3 ori pe saptamana

1 dată pe săptămână

*pana la obtinerea unui rezultat negativ

La a treia etapă a cercetării se realizează o identificare mai lungă. Identificarea finală se bazează pe determinarea proprietăților biochimice, a caracteristicilor fiziologice și genetice, a factorilor de patogenitate în testul de neutralizare a toxinelor. Deși caracterul complet al identificării anaerobilor poate varia foarte mult, unele teste simple cu o mare probabilitate permit identificarea culturilor pure de bacterii anaerobe - colorație Gram, motilitate, sensibilitate la anumite antibiotice folosind discuri de hârtie și proprietăți biochimice.

5. Terapie antibacteriană pentru infecția anaerobă

Tulpini de microorganisme rezistente la antibiotice au apărut și au început să se răspândească imediat după introducerea pe scară largă a antibioticelor în practica clinică. Mecanismele de formare a rezistenței microorganismelor la antibiotice sunt complexe și diverse. Ele sunt clasificate în primare și dobândite. Rezistența dobândită se formează sub influența medicamentelor. Principalele moduri de formare a acestuia sunt următoarele: a) inactivarea și modificarea medicamentului de către sistemele enzimatice ale bacteriilor și transferul acestuia într-o formă inactivă; b) scăderea permeabilității structurilor de suprafață ale celulei bacteriene; c) încălcarea mecanismelor de transport în celulă; d) modificarea semnificației funcționale a țintei pentru medicament. Mecanismele de rezistenţă dobândită a microorganismelor sunt asociate cu modificări la nivel genetic: 1) mutaţii; 2) recombinări genetice. Mecanismele de transmitere intra- și interspecifică a factorilor extracromozomiali ai eredității - plasmidele și transpozonii, care controlează rezistența microorganismelor la antibiotice și alte medicamente chimioterapeutice - joacă un rol extrem de important (13, 20, 23, 33, 39). Informații despre rezistența la antibiotice la microorganismele anaerobe au fost obținute atât din studii epidemiologice, cât și genetice/moleculare. Datele epidemiologice indică faptul că încă din 1977 s-a înregistrat o creștere a rezistenței bacteriilor anaerobe la mai multe antibiotice: tetraciclină, eritromicină, penicilină, ampicilină, amoxicilină, ticarcilină, imipenem, metronidazol, cloramfenicol etc. Aproximativ 50% dintre bacterii sunt rezistenți la toroidii. penicilina G si tetraciclina.

Când se prescrie antibioticoterapie pentru o infecție mixtă aerob-anaerobă, este necesar să se răspundă la o serie de întrebări: a) unde este localizată infecția?; b) ce microorganisme provoacă cel mai adesea infecții în această zonă?; c) care este gravitatea bolii?; d) care sunt indicaţiile clinice de utilizare a antibioticelor?; e) care este siguranța utilizării acestui antibiotic?; e) care este costul acestuia?; g) care este caracteristica sa antibacteriană?; h) care este durata medie de consum de droguri pentru a obține vindecare?; i) traversează bariera hemato-encefalică?; j) cum afectează microflora normală?; k) Sunt necesare antimicrobiene suplimentare pentru a trata acest proces?

5.1. Caracteristicile principalelor antimicrobiene utilizate în tratamentul infecției anaerobe

P e n i c i l l i n s. Din punct de vedere istoric, penicilina G a fost utilizată pe scară largă pentru a trata infecțiile mixte. Cu toate acestea, anaerobii, în special bacteriile din grupul Bacteroides fragilis, au capacitatea de a produce beta-lactamaze și de a distruge penicilina, ceea ce îi reduce eficacitatea terapeutică. Are toxicitate scăzută până la moderată, efect redus asupra microflorei normale, dar are activitate redusă împotriva anaerobilor producători de beta-lactamaze și este limitată împotriva microorganismelor aerobe. Penicilinele semisintetice (naflacină, oxacilină, cloxacilină și dicloxacilină) sunt mai puțin active și sunt inadecvate pentru tratamentul infecțiilor anaerobe. Un studiu randomizat comparativ al eficacității clinice a penicilinei și clindamicinei pentru tratamentul abceselor pulmonare a arătat că utilizarea clindamicinei la pacienți a redus perioada de febră și producția de spută la 4,4 față de 7,6 zile și, respectiv, la 4,2 față de 8 zile. În medie, 8 (53%) din cei 15 pacienți tratați cu penicilină au fost vindecați, în timp ce toți cei 13 pacienți (100%) tratați cu clindamicină au fost vindecați. Clindamicina este mai eficientă decât penicilina în tratamentul pacienților cu abces pulmonar anaerob. În medie, eficacitatea penicilinei a fost de aproximativ 50-55%, iar clindamicinei - 94-95%. În același timp, în material a fost observată prezența microorganismelor rezistente la penicilină, ceea ce a cauzat un motiv frecvent pentru ineficacitatea penicilinei și, în același timp, a arătat că clindamicina este medicamentul de elecție pentru terapie la începutul tratamentului.

T e tra c şi c lin y. Tetraciclinele sunt, de asemenea, caracterizate de scăzut

care toxicitate și efect minim asupra microflorei normale. Tetraciclinele au fost, de asemenea, anterior medicamentele de elecție, deoarece aproape toți anaerobii erau sensibili la acestea, dar din 1955 a avut loc o creștere a rezistenței la acestea. Doxiciclina și monociclina sunt cele mai active dintre acestea, dar un număr semnificativ de anaerobi sunt, de asemenea, rezistenți la ele.

Chl o r a m f e n i c o l. Cloramfenicolul are un efect semnificativ asupra microflorei normale. Acest medicament este extrem de eficient împotriva bacteriilor din grupul B. fragilis, pătrunde bine în fluidele și țesuturile corpului și are o activitate medie împotriva altor anaerobi. În acest sens, a fost folosit ca medicament de elecție pentru tratamentul bolilor care pun viața în pericol, în special a celor care implică sistemul nervos central, deoarece pătrunde cu ușurință în bariera hemato-encefalică. Din păcate, cloramfenicolul are o serie de dezavantaje (inhibarea hematopoiezei dependentă de doză). În plus, poate provoca anemie aplastică idiosencratică, independentă de doză. Unele tulpini de C. perfringens și B. fragilis sunt capabile să reducă grupa p-nitro a cloramfenicolului și să o inactiveze selectiv. Unele tulpini de B. fragilis sunt foarte rezistente la cloramfenicol deoarece produc acetiltransferaza. În prezent, utilizarea cloramfenicolului pentru tratamentul infecțiilor anaerobe a scăzut semnificativ atât din cauza fricii de a dezvolta efecte hematologice secundare, cât și a apariției multor medicamente noi, eficiente.

K l i n d a m i c i n. Clindamicina este un derivat 7(S)-clor-7-deoxi al lincomicinei. Modificarea chimică a moleculei de lincomicină a avut ca rezultat mai multe avantaje: o mai bună absorbție din tractul gastrointestinal, o creștere de opt ori a activității împotriva cocilor aerobi gram-pozitivi, o extindere a spectrului de activitate împotriva multor bacterii anaerobe gram-pozitive și gram-negative, cum ar fi precum și protozoare (Toxoplasma și Plasmodium). Indicațiile terapeutice pentru utilizarea clindamicinei sunt destul de largi (Tabelul 10).

Bacteriile Gram-pozitive. Creșterea a peste 90% din tulpinile de S. aureus este inhibată în prezența clindamicinei la o concentrație de 0,1 pg/ml. La concentrații care pot fi ușor atinse în ser, clindamicina este activă împotriva Str. pyogenes, Str. pneumonie, Str. viridans. Majoritatea tulpinilor de bacil difteric sunt, de asemenea, sensibile la clindamicină. În ceea ce privește bacteriile aerobe gram-negative Klebsiella, Escherichia coli, Proteus, Enterobacter, Shigella, Serratia, Pseudomonas, acest antibiotic este inactiv. Cocii anaerobi gram-pozitivi, inclusiv toate tipurile de peptococi, peptostreptococi, precum și propionobacterii, bifidumbacteria și lactobacili, sunt în general foarte sensibili la clindamicină. Clostridiile semnificative din punct de vedere clinic sunt, de asemenea, sensibile la aceasta - C. perfringens, C. tetani, precum și alte clostridii, adesea întâlnite în infecțiile intraperitoneale și pelvine.

Tabelul 10. Indicații pentru utilizarea clindamicinei

Biotop

Boala

tractului respirator superior

Amigdalita, faringita, sinuzita, otita medie, scarlatina

tractului respirator inferior

Bronșită, pneumonie, empiem, abces pulmonar

Pielea și țesuturile moi

Piodermie, furuncule, celulită, impetigo, abcese, răni

Oasele și articulațiile

Osteomielita, artrita septica

Organe pelvine

Endometrită, celulită, infecții ale manșetei vaginale, abcese tubo-ovariene

Cavitatea bucală

abces parodontal, parodontită

Septicemie, endocardită

Anaerobii Gram negativi - bacterii, fusobacterii și veillonella - sunt foarte sensibili la clindamicină. Este bine distribuit în multe țesuturi și fluide biologice, astfel încât în ​​majoritatea acestora se realizează concentrații terapeutice semnificative, dar nu pătrunde în bariera hemato-encefalică. De interes deosebit sunt concentrațiile medicamentului în amigdale, țesut pulmonar, apendice, trompe uterine, mușchi, piele, oase, lichid sinovial. Clindamicina este concentrată în neutrofile și macrofage. Macrofagele alveolare concentrează clindamicină intracelular (la 30 de minute după administrare, concentrația depășește de 50 de ori concentrația extracelulară). Crește activitatea fagocitară a neutrofilelor și macrofagelor, stimulează chemotaxia, inhibă producția de anumite toxine bacteriene.

M e t r o n i d a z o l. Acest medicament chimioterapeutic se caracterizează printr-o toxicitate foarte scăzută, este bactericid împotriva anaerobilor și nu este inactivat de beta-lactamaze bacteriide. Bacteroidii sunt foarte sensibili la acesta, dar anumiți coci anaerobi și bacili Gram-pozitivi anaerobi pot fi rezistenți. Metronidazolul este inactiv împotriva microflorei aerobe iar în tratamentul sepsisului intraabdominal trebuie combinat cu gentamicina sau unele aminoglicozide. Poate provoca neutropenie tranzitorie. Combinațiile de metronidazol-gentamicină și clindamicină-gentamicină nu diferă ca eficacitate în tratamentul infecțiilor grave intra-abdominale.

C e f o k s i t și n. Acest antibiotic aparține cefalosporinelor, are toxicitate scăzută și moderată și, de regulă, nu este inactivat de beta-lactamaze bacterioide. Deși există raportări de cazuri de izolare a tulpinilor rezistente de bacterii anaerobe din cauza prezenței proteinelor care leagă antibioticele care reduc transportul medicamentului în celula bacteriană. Rezistența bacteriilor B. fragilis la cefoxitină variază de la 2 la 13%. Este recomandat pentru tratamentul infecțiilor abdominale moderate.

C e f o t e t a n. Acest medicament este mai activ împotriva microorganismelor anaerobe gram-negative în comparație cu cefoxitina. Cu toate acestea, aproximativ 8% până la 25% din tulpinile de B. fragilis s-au dovedit a fi rezistente la acesta. Este eficient in tratamentul infectiilor ginecologice si abdominale (abcese, apendicite).

C e f met a z o l. Este similar ca spectru cu cefoxitina și cefotetanul (mai activ decât cefoxitina, dar mai puțin activ decât cefotetanul). Poate fi utilizat pentru tratarea infecțiilor ușoare până la moderate.

C e f a pera z o n. Se caracterizează prin toxicitate scăzută, activitate mai mare în comparație cu cele trei medicamente de mai sus, dar i-au fost identificate de la 15 la 28% din tulpinile rezistente de bacterii anaerobe. Este clar că nu este medicamentul de elecție pentru tratamentul infecției anaerobe.

C e f t i z o k c i m. Este un medicament sigur și eficient în tratamentul infecțiilor picioarelor la pacienții cu diabet zaharat, peritonită traumatică, apendicită.

M e r o p e n e m. Meropenemul, un nou carbapenem metilat la poziția 1, este rezistent la acțiunea dehidrogenazei renale 1, care îl degradează. Este de aproximativ 2-4 ori mai activ decât imipenem împotriva organismelor aerobe gram-negative, inclusiv reprezentanți ai enterobacteriilor, hemophilus, pseudomonas, neisseria, dar are o activitate puțin mai mică împotriva stafilococilor, a unor streptococi și enterococi. Activitatea sa împotriva bacteriilor anaerobe gram-pozitive este similară cu cea a imipenemului.

5.2. Combinații de medicamente beta-lactamice și inhibitori de beta-lactamaze

Dezvoltarea inhibitorilor de beta-lactamaze (clavulanat, sulbactam, tazobactam) este o direcție promițătoare și permite utilizarea de noi agenți beta-lactamici protejați de hidroliză cu administrarea lor simultană: a) amoxicilină - acid clavulanic - are un spectru mai mare de activitate antimicrobiană. decât amoxicilina în monoterapie și este aproape ca eficacitate cu o combinație de antibiotice - penicilină-cloxacilină; b) ticarcilina-acid clavulanic - extinde spectrul de activitate antimicrobiana a antibioticului impotriva bacteriilor producatoare de beta-lacgamaza precum stafilococii, hemophilus, Klebsiella si anaerobii, inclusiv bacterii. Concentrația inhibitorie minimă a acestui amestec a fost de 16 ori mai mică decât cea a ticarcilinei; c) ampicilină-sulbactam - atunci când sunt combinate într-un raport de 1: 2, spectrul lor se extinde semnificativ și include stafilococi, hemophilus, Klebsiella și majoritatea bacteriilor anaerobe. Doar 1% dintre bacterii sunt rezistenți la această combinație; d) cefaperazon-sulbactam - într-un raport de 1:2, de asemenea, extinde semnificativ spectrul activității antibacteriene; e) piperacilină-tazobactam. Tazobactam este un nou inhibitor beta-lactamic care acționează asupra multor beta-lactamaze. Este mai stabil decât acidul clavulanic. Această combinație poate fi considerată ca un medicament pentru monoterapia empirică a infecțiilor polimicrobiene severe, cum ar fi pneumonia, sepsisul intraabdominal, infecția necrozantă a țesuturilor moi, infecțiile ginecologice; f) imipenem-cilastatin - imipenemul este membru al unei noi clase de antibiotice cunoscute sub numele de carbapeneme. Se utilizează în combinație cu cilastatină într-un raport de 1:1. Eficacitatea lor este similară cu clindamicină-aminoglicozide în tratamentul infecțiilor chirurgicale anaerobe mixte.

5.3. Semnificația clinică a determinării sensibilității microorganismelor anaerobe la medicamentele antimicrobiene

Rezistența în creștere a multor bacterii anaerobe la agenții antimicrobieni ridică întrebarea cum și când este justificată determinarea sensibilității la antibiotice. Costul acestei teste și timpul necesar pentru a obține un rezultat final sporesc și mai mult importanța acestei probleme. Este clar că terapia inițială pentru infecțiile anaerobe și mixte ar trebui să fie empirică. Se bazează pe natura specifică a infecțiilor și pe un anumit spectru de microfloră bacteriană într-o anumită infecție. Trebuie luate în considerare starea fiziopatologică și utilizarea anterioară a antimicrobienelor care ar fi putut modifica microbiota normală și leziunii, precum și rezultatele colorației Gram. Următorul pas ar trebui să fie identificarea timpurie a microflorei dominante. Informații despre spectrul de sensibilitate antibacteriană specifică a microflorei dominante. Informațiile despre spectrul de sensibilitate antibacteriană a speciilor a microflorei dominante ne vor permite să evaluăm caracterul adecvat al regimului de tratament ales inițial. În tratament, dacă cursul infecției este nefavorabil, este necesar să se utilizeze determinarea sensibilității unei culturi pure la antibiotice. În 1988, un grup de lucru ad-hoc privind anaerobii a revizuit recomandările și indicațiile pentru testarea sensibilității antimicrobiene la anaerobi.

Determinarea sensibilităţii anaerobilor se recomandă în următoarele cazuri: a) este necesară stabilirea unor modificări ale sensibilităţii anaerobilor la anumite medicamente; b) necesitatea de a determina spectrul de activitate al noilor medicamente; c) în cazurile de asigurare a monitorizării bacteriologice a unui pacient individual. În plus, anumite situații clinice pot dicta și necesitatea implementării acesteia: 1) în cazul unui regim antimicrobian inițial ales fără succes și al persistenței infecției; 2) când alegerea unui medicament antimicrobian eficient joacă un rol cheie în deznodământul bolii; .3) când alegerea medicamentului în acest caz particular este dificilă.

Trebuie avut în vedere că, din punct de vedere clinic, există și alte puncte: a) creșterea rezistenței bacteriilor anaerobe la medicamentele antimicrobiene este o mare problemă clinică; b) există dezacord în rândul medicilor cu privire la eficacitatea clinică a anumitor medicamente împotriva infecțiilor anaerobe; c) există discrepanțe în rezultatele sensibilității microorganismelor la medicamente in vitro și eficacitatea acestora in vivo; r) Este posibil ca interpretarea rezultatelor care este acceptabilă pentru aerobi să nu se aplice întotdeauna anaerobilor. Observarea sensibilității/rezistenței a 1200 de tulpini bacteriene izolate din diferiți biotopi a arătat că o parte semnificativă dintre acestea sunt foarte rezistente la cele mai utilizate medicamente (Tabelul 11).

Tabelul 11. Rezistența bacteriilor anaerobe la

antibiotice utilizate frecvent

bacterii

Antibiotice

Procentul formelor rezistente

Peptostreptococul

Penicilină Eritromicină Clindamicina

Clostridium perfringens

Penicilină Cefoxitin Metronidazol Eritromicină Clindamicină

Bacteroides fragilis

Cefoxitin Metronidazol Eritromicină Clindamicină

Veilonella

Penicilină Metronidazol Eritromicină

În același timp, numeroase studii au stabilit concentrațiile minime inhibitoare ale celor mai comune medicamente care sunt adecvate pentru tratamentul infecțiilor anaerobe (Tabelul 12).

Tabelul 12 Concentrații minime de inhibiție

antibiotice pentru microorganisme anaerobe

Concentrația minimă inhibitorie (MIC) este cea mai mică concentrație a unui antibiotic care inhibă complet creșterea microorganismelor. O problemă foarte importantă este standardizarea și controlul calității determinării sensibilității microorganismelor la antibiotice (testele utilizate, standardizarea acestora, prepararea mediilor, reactivilor, pregătirea personalului care efectuează acest test, utilizarea culturilor de referință: B. fragilis-ATCC 25285; B. thetaiotaomicron - ATCC 29741; C. perfringens-ATCC 13124; E. lentum-ATCC 43055).

În obstetrică și ginecologie, pentru tratarea infecțiilor anaerobe se folosesc penicilina, unele cefalosporine din generația 3-4, lincomicina, cloramfenicolul. Cu toate acestea, cele mai eficiente medicamente antianaerobe sunt reprezentanții grupului 5-nitroimidazol - metronidazol, tinidazol, ornidazol și clindamicină. Eficacitatea tratamentului cu metronidazol în monoterapie este de 76-87%, în funcție de boală, și de 78-91% cu tinidazol. Combinația de imidazoli cu aminoglicozide, cefalosporine de generația 1-2 crește rata de succes a tratamentului cu până la 90-95%. Un rol semnificativ în tratamentul infecțiilor anaerobe îi revine clindamicinei. Combinația de clindamicină cu gentamicina este o metodă de referință pentru tratamentul bolilor purulent-inflamatorii ale organelor genitale feminine, în special în cazurile de infecții mixte.

6. Corectarea microflorei intestinale

Pe parcursul secolului trecut, microflora intestinală umană normală a făcut obiectul unor cercetări active. Numeroase studii au stabilit că microflora indigenă a tractului gastrointestinal joacă un rol semnificativ în asigurarea sănătății organismului gazdă, jucând un rol important în maturizarea și menținerea funcției sistemului imunitar, precum și în asigurarea unui număr de procesele metabolice. Punctul de plecare pentru dezvoltarea manifestărilor disbiotice în intestin este suprimarea microflorei anaerobe indigene - bifidobacterii și lactobacili, precum și stimularea reproducerii microflorei oportuniste - enterobacterii, stafilococi, streptococi, clostridii, candida. I. I. Mechnikov a formulat principalele prevederi științifice privind rolul microflorei indigene a intestinului, ecologia acesteia și a propus ideea înlocuirii microflorei dăunătoare cu una benefică pentru a reduce intoxicația organismului și a prelungi viața umană. Ideea lui I. I. Mechnikov a fost dezvoltată în continuare în dezvoltarea unui număr de preparate bacteriene utilizate pentru a corecta sau „normaliza” microflora umană. Ele sunt numite „eubiotice” sau „probiotice” și conțin sau vii

bacterii uscate din genurile Bifidobacterium și Lactobacillus. S-a demonstrat activitatea imunomodulatoare a unui număr de eubiotice (se remarcă stimularea producției de anticorpi, activitatea macrofagelor peritoneale). De asemenea, este important ca tulpinile de bacterii eubiotice să aibă rezistență cromozomială la antibiotice, iar administrarea lor combinată crește rata de supraviețuire a animalelor. Cele mai răspândite forme de lapte fermentat de lactobacterină și bifidumbacterin (4).

7. Concluzie

Infecția anaerobă este una dintre problemele nerezolvate ale medicinei moderne (în special chirurgie, ginecologie, terapie, stomatologie). Dificultăţile de diagnostic, evaluarea incorectă a datelor clinice, erorile de tratament, terapia cu antibiotice etc. duc la o mortalitate ridicată la pacienţii cu infecţii anaerobe şi mixte. Toate acestea indică necesitatea de a elimina rapid atât lipsa de cunoștințe existente în acest domeniu de bacteriologie, cât și deficiențele semnificative în diagnostic și terapie.

organisme anaerobe

Bacteriile aerobe și anaerobe sunt identificate preliminar într-un mediu nutritiv lichid prin gradientul de concentrație de O2:
1. Aerobic obligatoriu bacterii (care necesită oxigen). Mai ales colectate în partea superioară a tubului pentru a absorbi cantitatea maximă de oxigen. (Excepție: micobacterii - creșterea peliculei la suprafață datorită membranei ceară-lipidice.)
2. Obligatoriu anaerob bacteriile se adună în partea de jos pentru a evita oxigenul (sau să nu crească).
3. Opțional bacteriile se adună în principal în vârf (ceea ce este mai avantajos decât glicoliza), dar pot fi găsite în tot mediul, deoarece nu depind de O 2 .
4. Microaerofili sunt colectate în partea superioară a tubului, dar optimul lor este o concentrație scăzută de oxigen.
5. Aerotolerant anaerobii nu reacţionează la concentraţiile de oxigen şi sunt distribuite uniform în eprubeta.

Anaerobi- organisme care primesc energie în absența accesului la oxigen prin fosforilarea substratului, produșii finali ai oxidării incomplete a substratului pot fi oxidați pentru a produce mai multă energie sub formă de ATP în prezența acceptorului final de protoni de către organismele care efectuează oxidare; fosforilare.

Anaerobii sunt un grup extins de organisme, atât la nivel micro cât și macro:

  • microorganisme anaerobe- un grup extins de procariote și unele protozoare.
  • macroorganisme - ciuperci, alge, plante și unele animale (clasa foraminifere, majoritatea helminților (clasa fluke, tenia, viermi rotunzi (de exemplu, ascaris))).

În plus, oxidarea anaerobă a glucozei joacă un rol important în activitatea mușchilor striați ai animalelor și oamenilor (în special în starea de hipoxie tisulară).

Clasificarea anaerobilor

Conform clasificării stabilite în microbiologie, există:

  • Anaerobi facultativi
  • anaerobii capneisti și microaerofilii
  • Anaerobi aerotoleranti
  • Anaerobi moderat strict
  • anaerobi obligatorii

Dacă un organism este capabil să treacă de la o cale metabolică la alta (de exemplu, de la respirația anaerobă la respirația aerobă și invers), atunci este denumit în mod condiționat ca anaerobi facultativi .

Până în 1991, s-a distins o clasă în microbiologie anaerobii capneisti, care necesită o concentrație scăzută de oxigen și o concentrație crescută de dioxid de carbon (tip Brucella bovină - B. abortus)

Un organism anaerob moderat strict supraviețuiește într-un mediu cu O 2 molecular, dar nu se reproduce. Microaerofilii sunt capabili să supraviețuiască și să se înmulțească într-un mediu cu o presiune parțială scăzută de O 2 .

Dacă organismul nu este capabil să „trece” de la respirația anaerobă la cea aerobă, dar nu moare în prezența oxigenului molecular, atunci aparține grupului anaerobi aerotoleranti. De exemplu, acidul lactic și multe bacterii butirice

obliga anaerobii în prezența oxigenului molecular O 2 mor - de exemplu, reprezentanții genului bacteriilor și arheilor: Bacteroides, Fusobacterium, Butyrivibrio, Metanobacteriile). Astfel de anaerobi trăiesc în mod constant într-un mediu lipsit de oxigen. Anaerobii obligatorii includ unele bacterii, drojdii, flagelați și ciliați.

Toxicitatea oxigenului și a formelor sale pentru organismele anaerobe

Un mediu bogat în oxigen este agresiv față de formele de viață organice. Acest lucru se datorează formării unor specii reactive de oxigen în cursul vieții sau sub influența diferitelor forme de radiații ionizante, care sunt mult mai toxice decât oxigenul molecular O 2 . Factorul care determină viabilitatea unui organism într-un mediu cu oxigen este prezența unui sistem antioxidant funcțional capabil să elimine: anionul superoxid (O 2 -), peroxidul de hidrogen (H 2 O 2), oxigenul singlet (O .) și de asemenea oxigenul molecular ( O 2 ) din mediul intern al organismului. Cel mai adesea, o astfel de protecție este asigurată de una sau mai multe enzime:

  • superoxid dismutază eliminând anionul superoxid (O 2 -) fără beneficii energetice pentru organism
  • catalaza, eliminand peroxidul de hidrogen (H 2 O 2) fara beneficii energetice pentru organism
  • citocrom- o enzimă responsabilă de transferul electronilor de la NAD H la O 2. Acest proces oferă organismului un beneficiu energetic semnificativ.

Organismele aerobe conțin cel mai adesea trei citocromi, anaerobi facultativi - unul sau doi, anaerobii obligați nu conțin citocromi.

Microorganismele anaerobe pot influența activ mediul, creând un potențial redox adecvat al mediului (ex. Cl.perfringens). Unele culturi însămânțate de microorganisme anaerobe, înainte de a începe să se înmulțească, scad pH-ul 2 0 de la o valoare la , protejându-se cu o barieră reductivă, altele - aerotolerante - produc peroxid de hidrogen în timpul activității lor vitale, crescând pH-ul 2 0.

În același timp, glicoliza este caracteristică doar pentru anaerobi, care, în funcție de produșii finali de reacție, se împart în mai multe tipuri de fermentație:

  • fermentarea acidului lactic Lactobacillus ,streptococ , Bifidobacterium, precum și unele țesuturi de animale multicelulare și oameni.
  • fermentație alcoolică - zaharomicete, candida (organisme din regnul fungic)
  • acid formic - o familie de enterobacterii
  • butiric - unele tipuri de clostridii
  • acid propionic - propionobacterii (de exemplu, Propionibacterium acnes)
  • fermentație cu eliberare de hidrogen molecular - unele specii de Clostridium, fermentație Stickland
  • fermentarea metanului - de exemplu, Metanobacteriile

Ca urmare a descompunerii glucozei, se consumă 2 molecule și se sintetizează 4 molecule de ATP. Astfel, randamentul total de ATP este de 2 molecule de ATP și 2 molecule de NAD·H2. Piruvatul obținut în timpul reacției este utilizat de celulă în moduri diferite, în funcție de ce tip de fermentație urmează.

Antagonismul fermentației și al degradarii

În procesul de evoluție s-a format și consolidat antagonismul biologic al microflorei fermentative și putrefactive:

Descompunerea carbohidraților de către microorganisme este însoțită de o scădere semnificativă a mediului, în timp ce descompunerea proteinelor și aminoacizilor este însoțită de o creștere (alcalinizare). Adaptarea fiecăruia dintre organisme la o anumită reacție a mediului joacă un rol important în natură și viața umană, de exemplu, datorită proceselor de fermentație, putrezirea silozului, a legumelor fermentate și a produselor lactate este împiedicată.

Cultivarea organismelor anaerobe

Izolarea schematică a culturii pure de anaerobi

Cultivarea organismelor anaerobe este în principal sarcina microbiologiei.

Pentru cultivarea anaerobilor se folosesc metode speciale, a căror esență este eliminarea aerului sau înlocuirea acestuia cu un amestec de gaze specializate (sau gaze inerte) în termostate sigilate. - anaerostate .

O altă modalitate de a crește anaerobi (cel mai adesea microorganisme) pe medii nutritive este adăugarea de substanțe reducătoare (glucoză, acid formic de sodiu etc.), care reduc potențialul redox.

Medii obișnuite de creștere pentru organismele anaerobe

Pentru mediul general Wilson - Blair baza este agar-agar cu adaos de glucoză, sulfit de sodiu și clorură feroasă. Clostridiile formează colonii negre pe acest mediu prin reducerea sulfitului la anion sulfură, care se combină cu cationii de fier (II) pentru a da o sare neagră. De regulă, formațiunile de colonii negre apar în adâncimea coloanei de agar pe acest mediu.

miercuri Kitta - Tarozzi constă din bulion de carne-peptonă, glucoză 0,5% și bucăți de ficat sau carne tocată pentru a absorbi oxigenul din mediu. Înainte de însămânțare, mediul este încălzit într-o baie de apă clocotită timp de 20-30 de minute pentru a elimina aerul din mediu. După însămânțare, mediul nutritiv este imediat umplut cu un strat de parafină sau ulei de parafină pentru a-l izola de accesul la oxigen.

Metode generale de cultură pentru organisme anaerobe

Ambalaj de benzină- sistemul asigura chimic constanta amestecului gazos acceptabil pentru cresterea majoritatii microorganismelor anaerobe. Într-un recipient sigilat, apa reacționează cu tabletele de borohidrură de sodiu și bicarbonat de sodiu pentru a forma hidrogen și dioxid de carbon. Hidrogenul reacționează apoi cu oxigenul amestecului de gaz pe un catalizator de paladiu pentru a forma apă, care reacționează deja cu hidroliza borohidrurii.

Această metodă a fost propusă de Brewer și Olgaer în 1965. Dezvoltatorii au introdus un plic de unică folosință generator de hidrogen, care a fost ulterior actualizat la pliculețe generatoare de dioxid de carbon care conțin un catalizator intern.

metoda Zeissler folosit pentru a izola culturi pure de anaerobi formatori de spori. Pentru a face acest lucru, inoculați pe mediul Kitt-Tarozzi, încălziți-l timp de 20 de minute la 80 ° C (pentru a distruge forma vegetativă), umpleți mediul cu ulei de vaselină și incubați timp de 24 de ore într-un termostat. Apoi, se efectuează însămânțarea pe agar cu zahăr-sânge pentru a obține culturi pure. După o cultivare de 24 de ore, se studiază coloniile de interes - sunt subcultivate pe mediul Kitt-Tarozzi (cu controlul ulterior al purității culturii izolate).

Metoda Fortner

Metoda Fortner- inoculările se fac pe o cutie Petri cu un strat îngroșat de mediu, împărțit în jumătate printr-un șanț îngust tăiat în agar. O jumătate este însămânțată cu o cultură de bacterii aerobe, cealaltă jumătate este inoculată cu bacterii anaerobe. Marginile cupei sunt umplute cu parafină și incubate într-un termostat. Inițial, se observă creșterea microflorei aerobe, iar apoi (după absorbția oxigenului), creșterea microflorei aerobe se oprește brusc și începe creșterea microflorei anaerobe.

metoda Weinberg folosit pentru a obţine culturi pure de anaerobi obligatorii. Culturile crescute pe mediu Kitta-Tarozzi sunt transferate în bulion de zahăr. Apoi, cu o pipetă Pasteur de unică folosință, materialul este transferat în tuburi înguste (tuburi Vignal) cu agar peptonă cu zahăr, scufundând pipeta pe fundul tubului. Tuburile inoculate sunt răcite rapid, ceea ce face posibilă fixarea materialului bacterian în grosimea agarului întărit. Tuburile sunt incubate într-un termostat, apoi se studiază coloniile crescute. Când se găsește o colonie de interes, în locul ei se face o tăietură, materialul se preia rapid și se inoculează pe mediul Kitta-Tarozzi (cu controlul ulterior al purității culturii izolate).

metoda Peretz

metoda Peretz- se introduce o cultura de bacterii in agar-agar zahar topit si racit si se toarna sub sticla asezata pe batoane de pluta (sau fragmente de chibrituri) intr-o cutie Petri. Metoda este cea mai puțin fiabilă dintre toate, dar este destul de simplu de utilizat.

Diferențial - medii nutritive de diagnostic

  • medii gissa(„rând pestriț”)
  • miercuri Ressel(Russell)
  • miercuri Ploskireva sau baktoagar "Zh"
  • Agar bismut sulfit

Şuierat media: La 1% apă peptonă, se adaugă o soluție de 0,5% dintr-un anumit carbohidrat (glucoză, lactoză, maltoză, manitol, zaharoză etc.) și indicatorul acido-bazic al lui Andrede, se toarnă în eprubete în care se pune un flotor pentru a capta gazele. produse formate în timpul descompunerii hidrocarburilor.

Ressel miercuri(Russell) este folosit pentru a studia proprietățile biochimice ale enterobacteriilor (Shigella, Salmonella). Conține nutrienți agar-agar, lactoză, glucoză și indicator (albastru de bromotimol). Culoarea mediului este verde ierb. Se prepară de obicei în tuburi de 5 ml cu suprafață teșită. Semănatul se realizează printr-o injecție în adâncimea coloanei și o lovitură de-a lungul suprafeței teșite.

Miercuri Ploskirev(Bactoagar Zh) este un mediu de diagnostic diferențial și selectiv, deoarece inhibă creșterea multor microorganisme și promovează creșterea bacteriilor patogene (agenți cauzatori de tifoid, paratifoid, dizenterie). Bacteriile lactoză-negative formează colonii incolore pe acest mediu, în timp ce bacteriile lactoză-pozitive formează colonii roșii. Mediul conține agar, lactoză, verde strălucitor, săruri biliare, săruri minerale, indicator (roșu neutru).

Agar bismut sulfit Este conceput pentru a izola salmonella în forma sa pură de materialul infectat. Conține digestie triptică, glucoză, factori de creștere a salmonelei, verde strălucitor și agar. Proprietățile diferențiale ale mediului se bazează pe capacitatea Salmonellei de a produce hidrogen sulfurat, pe rezistența acestora la prezența sulfurei, verde strălucitor și citrat de bismut. Coloniile sunt marcate cu culoarea neagră a sulfurei de bismut (tehnica este similară cu mediul Wilson - Blair).

Metabolismul organismelor anaerobe

Metabolismul organismelor anaerobe are mai multe subgrupe distincte:

Metabolismul energetic anaerob în țesuturi umanși animalelor

Producția de energie anaerobă și aerobă în țesuturile umane

Unele țesuturi de animale și oameni se caracterizează prin rezistență crescută la hipoxie (în special țesutul muscular). În condiții normale, sinteza ATP are loc aerob, iar în timpul activității musculare intense, când livrarea de oxigen către mușchi este dificilă, în stare de hipoxie, precum și în timpul reacțiilor inflamatorii în țesuturi, domină mecanismele anaerobe de regenerare a ATP. În mușchii scheletici, au fost identificate 3 tipuri de cale anaerobă și doar una aerobă de regenerare a ATP.

3 tipuri de cale anaerobă de sinteză a ATP

Anaerobii includ:

  • Mecanismul creatinfosfatazei (fosfogen sau alactat) - refosforilarea dintre creatina fosfat si ADP
  • Miokinaza - sinteza (altfel resinteza) ATP în reacția de transfosforilare a 2 molecule de ADP (adenilat ciclază)
  • Glicolitic - descompunerea anaerobă a glucozei din sânge sau a depozitelor de glicogen, care se termină cu formarea
CATEGORII

ARTICOLE POPULARE

2022 "kingad.ru" - examinarea cu ultrasunete a organelor umane