Dodaj do ulubionych
Dom USG układu moczowo-płciowego

Taksonomia, pneumokoki, metody laboratoryjne grypy

MINISTERSTWO ZDROWIA FEDERACJI ROSYJSKIEJ PAŃSTWOWY UNIWERSYTET MEDYCZNY W KAZANIE ZAKŁAD MIKROBIOLOGII

PNEUMOKOKTY

Kazań 1999

UDC 576.851.21(07)

Opublikowane decyzją Centralnej Rady Koordynacyjno-Metodologicznej Kazańskiego Państwowego Uniwersytetu Medycznego.

Opracowany przez:

(Kierownik Katedry Mikrobiologii, doktor nauk medycznych, profesor O.K. Pozdeev, asystent Katedry Mikrobiologii, dr E.R. Fedorova.

Recenzenci:

Kierownik Katedry Epidemiologii, Kazański Państwowy Uniwersytet Medyczny, doktor nauk medycznych, profesor nadzwyczajny M.Sh. Shafeev, kierownik Katedry Epidemiologii Kazańskiej Państwowej Akademii Medycznej, doktor nauk medycznych, profesor V.E. Grigoriew.

Pneumokoki /OK Pozdeev, ER Fiodorow-Kazań: KSMU, 1999. - 14 sek.

Kopiując, rozpowszechniając, publikując tekst lub jego część na swoich zasobach, przyjmujesz na siebie odpowiedzialność zgodnie z obowiązującym prawem.

Wyłącznie do użytku osobistego (art. 18, art. 26 ustawy Federacji Rosyjskiej „O prawie autorskim i prawach pokrewnych”). Komercyjne powielanie jest zabronione.

Kazański Państwowy Uniwersytet Medyczny, 1999

Pneumokoki (Streptococcus pneumoniae) zostały po raz pierwszy zidentyfikowane przez Pasteura (1881) podczas prac nad szczepionką przeciwko wściekliźnie i początkowo uważano je za czynnik sprawczy wścieklizny. Etiologiczną rolę mikroorganizmu w rozwoju zapalenia płuc u ludzi udowodnili Frenkel i Weichselbaum (1884). Bakterie zasiedlają organizmy ludzkie i zwierzęce i zaliczane są do grupy tzw. paciorkowców „ustnych”. Są głównymi czynnikami sprawczymi zapalenia płuc, mogą również powodować zapalenie opłucnej, zapalenie opon mózgowych, pełzające wrzody rogówki, ropne zapalenie ucha środkowego, stany septyczne i inne choroby. W IX wydaniu Burgey Bacteria Key (1994) pneumokoki zaliczane są do 17. grupy „ziarniaki Gram-dodatnie”.

Epidemiologia uszkodzeń. Pneumokoki są jednym z głównych czynników sprawczych bakteryjnego zapalenia płuc rejestrowanych poza szpitalami (2-4 przypadki na 1000 osób); Rocznie na świecie obserwuje się co najmniej 500 000 zachorowań na pneumokokowe zapalenie płuc (rzeczywista wartość jest znacznie wyższa). Najbardziej podatne na zakażenie są dzieci i osoby starsze. Rezerwuarem zakażenia są pacjenci i nosiciele (20-50% dzieci w wieku przedszkolnym i 20-25% dorosłych); główną drogą transmisji jest kontakt; podczas epidemii również drogą powietrzną. Szczyt zachorowań występuje w zimnych porach roku. W zdecydowanej większości przypadków kliniczne formy infekcji rozwijają się, gdy odporność organizmu jest osłabiona (w tym z powodu stresu zimna), a także na tle innych patologii (niedokrwistość sierpowata, choroba Hodgkina, zakażenie wirusem HIV, szpiczak, cukrzyca , stany po splenektomii itp.) lub z alkoholizmem. Warianty 1, 2 i 3 mają największe znaczenie epidemiologiczne w patologii dorosłych; u dzieci - 1, 2, 3 i 14 opcji. Zjadliwość serowarów w kolejności malejącej - 3, 1, 2, 5, 7 i 8 opcji. Białe myszy są wrażliwe na pneumokoki (po zarażeniu umierają z powodu posocznicy w ciągu jednego dnia), cielęta, jagnięta, prosięta, psy i małpy.

Morfologia. Pneumokoki są nieruchome, nie tworzą zarodników, mają lekko wydłużony kształt, przypominający kontury płomienia świecy. W rozmazach z materiału klinicznego są one ułożone parami, z których każda jest otoczona grubą torebką. W rozmazach z pożywek mogą być ułożone w krótkie łańcuchy i być bardziej zaokrąglone. Na prostych nośnikach tworzą cienką kapsułkę; jego rozwój jest stymulowany przez wprowadzenie krwi, surowicy lub płynu puchlinowego. Tworzenie się kapsułek jest najbardziej widoczne w bakteriach typu III. Po ułożeniu w łańcuchy kapsułka może być wspólna.

właściwości kulturowe. Pneumokoki tlenowe lub fakultatywne beztlenowce; podczas uprawy preferowane są warunki kapnofilne (5-10% CO2). Chemoorganography i rosną dobrze na podłożu z krwią lub surowicą, uzupełnionym dodatkiem 0,1% glukozy. Mogą rosnąć w temperaturze 28-42°C, optymalna to 37°C. Optymalne pH -7,6-7,8. Na gęstych podłożach tworzą delikatne, półprzezroczyste, dobrze odgraniczone kolonie o średnicy około 1 mm. Czasami mogą być płaskie z centralnym wcięciem; podobnie jak inne paciorkowce, kolonie nigdy się nie łączą

pomiędzy nimi. Na agarze z krwią tworzą małe, przezroczyste kolonie o zielonkawo-szarym zabarwieniu. Centrum kolonii jest ciemniejsze, obrzeża jaśniejsze. Pod kolonią i na jej obrzeżach widoczna jest strefa a-hemolizy w postaci zielonkawej strefy przebarwionej (w wyniku przejścia hemoglobiny do methemoglobiny). Kolonie pneumokoków typu III często mają konsystencję śluzu, ich wielkość dochodzi do 2 mm. Są niejasne, mogę się ze sobą łączyć. Tworzą kolonie w formie S i R. Podczas przejścia z formy S do formy R tracą zdolność do syntezy kapsułki. Na płynnych podłożach z surowicą i 0,2% glukozą dają jednolite zmętnienie i mały kłaczkowaty osad. Przy dłuższej uprawie osad wzrasta.

Zrównoważony rozwój. Pneumokoki należą do grupy drobnoustrojów niestabilnych. W suchej plwocinie utrzymują się do dwóch miesięcy. Może być przechowywany przez długi czas w niskich temperaturach; w temperaturze 60 ° C umierają w ciągu 3-5 minut. 3% roztwór kwasu karbolowego zabija je w ciągu 1-2 minut. Optochina (w stężeniu 1:100 000) i żółć są szkodliwe dla pneumokoków, które służą do identyfikacji bakterii.

Pneumokoki różnią się od innych mikroorganizmów szeregiem właściwości (tab. 1).

Tabela 1 Właściwości biochemiczne pneumokoków

Podłoże testowe

Wynik

Podłoże testowe

Wynik

Wzrost w 100°C

rafinoza

Średni z 6,5% Nad

a-hemoliza

B-hemoliza

Trehaloza

Fosfataza

hipurowy

β-galaktozydaza

Glicerol

Oznaczenia: „+” - 90% lub więcej szczepów jest pozytywnych;

(+) - 80-89% szczepów jest pozytywnych;

d - 21-79% szczepów jest pozytywnych;

(-) - 11-20% szczepów jest pozytywnych;

„- - 90% lub więcej szczepów jest negatywnych.

Struktura antygenowa. W pneumokokach znaleziono kilka rodzajów antygenów: polisacharyd, antygen 0-somatyczny znajdujący się w ścianie komórkowej; polisacharydowe otoczkowe antygeny K i białko M. Polisacharydowy antygen somatyczny jest podobny do substancji C innych paciorkowców. Zależność ta decyduje o podobieństwie budowy chemicznej kwasów rybutejchojowych związanych z fosforanem choliny. Antygeny otoczkowe mają również charakter polisacharydowy, składający się z powtarzających się w różnych kombinacjach monosacharydów: D-glukozy, D-galaktozy i L-ramnozy. Zgodnie ze strukturą antygenów otoczkowych pneumokoki dzielą się na 84 serowary. Należy pamiętać, że antygeny otoczkowe reagują krzyżowo z antysurowicami na antygeny paciorkowcowe grupy A i B, a także z surowicami na antygeny Klebsiella i Escherichia. Podczas przejścia z formy S do formy R antygeny otoczkowe są tracone. Do serotypowania pneumokoków wytwarza się surowice grupowe, oznaczone literami łacińskimi (A, B, C, D itd.) i serowarianty, oznaczone cyframi rzymskimi. Surowica aglutynująca III nie jest zawarta w mieszaninach surowicy. Jest wypuszczany osobno i nie może być rozmnażany. U ludzi najczęściej izolowane są pneumokoki serotypów I, II i III. Są najbardziej zjadliwe dla ludzi, więc reakcję aglutynacji ustala się początkowo przy użyciu surowic odpornościowych dla tych wariantów. Jeśli wynik jest negatywny, reakcję aglutynacji poddaje się mieszaninie surowic A, B, C itp. (aż do uzyskania pozytywnego wyniku), a następnie oddzielnymi antysurowicami. W celu szybszej identyfikacji serowarów stosuje się reakcję Neufelda (obrzęk immunologiczny torebki). Metoda opiera się na zdolności kapsułek pneumokoków do zwiększania objętości w obecności homologicznej surowicy odpornościowej, co jest rejestrowane za pomocą mikroskopii optycznej. Polisacharydy otoczkowe wykazują właściwości uczulające, objawiające się rozwojem reakcji nadwrażliwości typu późnego, wykrywanej testami skórnymi.

czynniki chorobotwórcze. Głównym czynnikiem jest otoczka, która chroni bakterie przed bakteriobójczym potencjałem fagocytów i odciąga je od działania opsonin. Szczepy nie otoczkowe są praktycznie niezjadliwe i są rzadkie. Większość puli anty-pneumokokowych AT to kapsułki AT do Ag. Ważną funkcją otoczki i białka M jest również zapewnienie adhezji do błony śluzowej. Niezbędna jest substancja C, która oddziałuje specyficznie z białkiem C-reaktywnym. Konsekwencją takiej odpowiedzi jest aktywacja kaskady komplementarnej i uwolnienie mediatorów ostrej fazy zapalenia; ich nagromadzenie w tkance płucnej stymuluje migrację fagocytów polimorfojądrowych. Powstawaniu silnych nacieków zapalnych towarzyszy naruszenie homeostazy tkanki płucnej i jej hepatyzacja. Pneumokoki wytwarzają endotoksyny, a- i b-hemolizyny (pneumolizyny), leukocidynę. a-pneumolizyna jest termolabilnym białkiem zdolnym do neutralizacji 0-streptolizyny,

substancja erytrogenna, neuraminidaza. Pneumokoki syntetyzują również szereg enzymów biorących udział w patogenezie zmian – muramidazę, hialuronidazę (sprzyja rozprzestrzenianiu się mikroorganizmów w tkankach), peptydazę (rozszczepia IgA).

Patogeneza zmian chorobowych. Biotopem pneumokoków są górne drogi oddechowe. Patogeneza większości zapaleń płuc obejmuje aspirację śliny zawierającej S. pneumoniae i przedostanie się bakterii do dolnych dróg oddechowych. Naruszenie ochronnych mechanizmów drenujących – wstrząs kaszlowy i klirens śluzowo-rzęskowy są niezbędne. U dorosłych częściej obserwuje się zmiany płatowe płuc, u dzieci i osób starszych dominują zmiany okołooskrzelowe lub ogniskowe. Powstawaniu silnych nacieków zapalnych towarzyszy naruszenie homeostazy tkanki płucnej i jej hepatyzacja. Zakażeniom najbardziej zjadliwym serowarem 3 może towarzyszyć tworzenie się jam w miąższu płuc. Z ogniska pierwotnego patogen może przenikać do jamy opłucnej i osierdzia lub rozsiewać się krwiopochodnie i powodować zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych, zapalenie wsierdzia i zmiany stawowe.

Objawy kliniczne. Klasyczne pneumokokowe zapalenie płuc rozpoczyna się nagle; zwróć uwagę na wzrost temperatury ciała, kaszel z odkrztuszaniem i ból w klatce piersiowej. U osób osłabionych i starszych choroba rozwija się powoli, z lekką gorączką, zaburzeniami świadomości i objawami płucnej niewydolności serca. Paciorkowcowe zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych odnotowuje się we wszystkich grupach wiekowych; charakteryzują się gwałtownym początkiem ze wzrostem temperatury ciała, sztywnością mięśni karku, bólem głowy, nudnościami i wymiotami. Zmianom naczyniowym opon mózgowo-rdzeniowych często towarzyszy utrata przytomności; wśród dzieci iw starszym wieku śmiertelność może sięgać 80%. Hematogenne zmiany pneumokokowe, jak również zapalenie zatok, zapalenie wyrostka sutkowatego, zapalenie ucha środkowego, zapalenie wsierdzia i zapalenie otrzewnej są dość częste u osób z obniżoną odpornością (np. zakażonych wirusem HIV) lub pacjentów po splenektomii. Po przebyciu choroby rozwija się niestabilna odporność, która ma charakter typowo swoisty i wynika z pojawienia się przeciwciał przeciwko typowemu polisacharydowi otoczkowemu.

Leczenie. Podstawą terapii zakażenia pneumokokowego są antybiotyki – penicylina, tetracyklina, lewomycetyna, wankomycyna, ryfampicyna, ceftriakson.

Zapobieganie. Niespecyficzna profilaktyka zakażeń pneumokokowych ma na celu identyfikację pacjentów i nosicieli oraz ich późniejsze leczenie. W celu swoistej profilaktyki zakażenia, poliwalentną szczepionką polisacharydową Pneumovex 23 szczepiono dzieci powyżej drugiego roku życia, osoby dorosłe z grupy ryzyka oraz osoby zdrowe w czasie wybuchu choroby. Lek zawiera 23 otoczkowe antygeny polisacharydowe pneumokoków (1, 2, 3, 4, 5, 6B 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 1-9F, 19A, 20, 22f, 23f, 33f). antygeny

pneumokoki uzyskano z 90% szczepów wyizolowanych z krwi pacjentów z inwazyjną infekcją pneumokokową w USA i odpowiadających szczepom spotykanym w Rosji. Szczepienie przeprowadza się dwukrotnie w odstępie 5-8 lat.

Po szczepieniu powstaje sztuczna, czynna, specyficzna dla typu odporność.

Diagnostyka laboratoryjna. „Złotym standardem” jest izolacja patogenu. Należy pamiętać, że materiał trzeba szybko zbadać, bo. Bakterie są podatne na szybką autolizę ze względu na aktywność enzymów wewnątrzkomórkowych. Materiałem do badania jest plwocina, wysięk opłucnowy i inne wysięki, płyn mózgowo-rdzeniowy, krew, śluz z nosa i gardła, wydzielina z owrzodzeń oczu, wydzielina z ucha, mocz, fragmenty narządów (w przypadku śmierci pacjenta) . Sygnałową odpowiedź na infekcję pneumokokową można uzyskać, jeśli w rozmazach plwociny zostaną wykryte neutrofile i Gram-dodatnie lancetowate diplokoki (co najmniej 10 w każdym polu widzenia). W przeciwnym razie uciekaj się do izolacji patogenu.

Pierwszy etap badania. Materiał patologiczny poddaje się wstępnej bakterioskopii (z wyjątkiem krwi). Plwocinę umieszcza się na sterylnej szalce Petriego, myje, ropno-śluzową grudkę chwyta się pętlą, wciera na szklanym szkiełku, suszy i barwi według Grama. W rozmazie znajdują się Gram-dodatnie lancetowate lub owalne ziarniaki otoczone kapsułką (tworzenie kapsułek obserwuje się tylko u pneumokoków izolowanych od chorych i zakażonych zwierząt). Identyfikację otoczek pneumokokowych można przeprowadzić metodą Burri-Ginsa. Zaszczepianie materiału patologicznego przeprowadza się na 5-10% agarze z krwią lub surowicą i pożywce wzbogacającej (8-10% bulion z surowicą). Jeśli podejrzewa się posocznicę pneumokokową, 5-10 ml krwi pacjenta inokuluje się do 45-90 ml bulionu z surowicą. Płyn mózgowo-rdzeniowy, jeśli jest klarowny, odwirowuje się i kilkoma kroplami osadu zaszczepia się na pożywkę. Jako pożywkę wzbogacającą stosuje się półpłynny agar z surowicą. Hodowle inkubuje się w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Najlepszą metodą izolowania czystej kultury pneumokoków jest zakażenie białych myszy materiałem patologicznym. Plwocinę przemytą na płytce Petriego sterylną solą fizjologiczną rozciera się w sterylnym moździerzu sterylnym tłuczkiem lub tłuczkiem szklanym z dodatkiem soli fizjologicznej w stosunku 1:2-1:5. Zawiesinę osadza się, supernatant w ilości 0,5-1 ml podaje się białym myszom dootrzewnowo. W obecności pneumokoków w materiale myszy umierają w ciągu 72 godzin. W rozmazach narządów i krwi stwierdza się typowe pneumokoki. Narządy i krew są również hodowane na bulionie z surowicą i na płytkach Petriego z krwią lub agarem z surowicą.

Drugi etap badania. Zbadaj naturę wzrostu na pożywce. Na agarze z krwią kolonie pneumokoków są małe, okrągłe, gładkie

krawędzie, delikatne, otoczone strefą zazielenienia środowiska (co bardzo przypomina wzrost zielonych paciorkowców). Na agarze z surowicą kolonie są delikatne, półprzezroczyste i przezroczyste. Z bakterioskopią rozmazów barwionych metodą Grama. znaleźć Gram-dodatnie diplokoki bez kapsułek. Po bakterioskopii kolonie podejrzane o obecność pneumokoków hoduje się na skośnej surowicy lub agarze z krwią lub bulionie z surowicą. Mikroskopia rozmazów z pożywki wzbogacającej wraz z różnorodną mikroflorą może ujawnić ziarniaki Gram-dodatnie ułożone w pary lub krótkie łańcuchy. Materiał z pożywki wzbogacającej przenosi się do stałych pożywek odżywczych. Uprawy inkubuje się w temperaturze 37°C przez 24 godziny.

Trzeci etap badania. Na skosie agarowym z krwią pneumokoki tworzą delikatną, cienką, półprzezroczystą powłokę. Na bulionie serwatkowym pneumokoki powodują zmętnienie i lekki osad. W rozmazach ze stałych pożywek hodowlanych pneumokoki mogą mieć inny wygląd. Wraz z diplokokami o wydłużonym kształcie z zaostrzonymi zewnętrznymi końcami przypominającymi płomień świecy występują komórki o prawidłowym owalnym i okrągłym kształcie. W hodowli bulionowej pneumokoki są często ułożone w łańcuchy. Na podstawie właściwości morfologicznych i kulturowych pneumokoków trudno je odróżnić od paciorkowców jadowitych, dlatego zaproponowano zestaw specjalnych testów do ich różnicowania:

Rozpuszczalność w żółci (test dezoksycholanowy);

Zdolność do rozkładu inuliny;

Wrażliwość na optochinę;

Reakcja aglutynacji ze swoistymi surowicami przeciw pneumokokom;

Zdolność do rozkładu glukozy, maltozy, sacharozy, laktozy, mannitolu, sorbitolu i salicyny.

Najbardziej przystępnymi metodami odróżniającymi pneumokoki od innych paciorkowców jest test z optochiną (hamuje ich wzrost); od zielonych paciorkowców wyróżniają się zdolnością do fermentacji inuliny, a także wrażliwością na żółć.

Test dezoksycholanowy. Po wstępnej bakterioskopii do probówki dodaje się 10 kropli wyizolowanej czystej kultury (najlepiej bulionu) z 5 kroplami sterylnej żółci bydlęcej. Kontrolę stanowi kultura wprowadzona do probówki z 5 kroplami soli fizjologicznej. Po 30-60 minutach inkubacji w temperaturze 37°C obserwuje się całkowitą lizę hodowli w postaci wyklarowania się w probówce żółcią, w probówce kontrolnej mieszanina pozostaje mętna. Należy pamiętać, że niezjadliwe kultury pneumokoków są odporne na żółć.

Odporność na żółć można również zbadać przez inokulację w 10% bulionie żółciowym. Materiał testowy dodaje się do pożywki, podczas gdy bulion staje się mętny. Po 24-godzinnej inkubacji w temperaturze 37°C obecność pneumokoków zostanie wskazana poprzez oczyszczenie bulionu w wyniku lizy bakterii.

Możesz także użyć krążków nasączonych 20% roztworem żółci. Krążki umieszcza się na wyhodowanej kulturze w naczyniu i inkubuje przez 1-2 godziny w temperaturze 37°C. W obecności pneumokoków kolonie ulegają lizie wokół krążka w odległości 1-2 mm.

Test inuliny. Hodowlę pneumokoków wysiewa się na pożywce z inuliną. W tym celu 200 ml sterylnej wody destylowanej, 18 ml nalewki lakmusowej i 3 g inuliny dodaje się do 100 ml surowicy bydlęcej ogrzewanej w temperaturze 56 ° C przez 30 minut, sterylizowanej przepływającą parą wodną przez 30 minut. Hodowle inkubuje się w temperaturze 37°C przez 24 godziny. Pneumokoki rozkładają inulinę, powodując zaczerwienienie podłoża. Paciorkowiec zielony nie powoduje zaczerwienienia otoczenia.

Test z optochiną. Badaną hodowlę pneumokoków inokuluje się do bulionu z optochiną w rozcieńczeniu 1:100 000 lub 1:200 000. Pneumokoki nie rosną w takim środowisku. Możliwe jest również określenie wrażliwości na optochinę poprzez inokulację na 10% agarze z krwią zawierającym optochinę w rozcieńczeniu 1:50 000. Kontrolą jest kultura na agarze z krwią. Pneumokoki nie rosną na podłożu z Optochinem, na podłożu kontrolnym obserwuje się wzrost pneumokoków. Można użyć krążków nasączonych 6 μg optochiny, które po inokulacji nanosi się na powierzchnię podłoża. U pneumokoków wokół krążka tworzy się strefa zahamowania wzrostu o średnicy co najmniej 18 mm.

Test wirulencji. Dzienną hodowlę pneumokoków hodowanych na bulionie serwatkowym rozcieńcza się 1% sterylną wodą peptonową (pH - 7,6) lub bulionem lekko zasadowym do 1:10. Rozcieńczoną hodowlę podaje się dootrzewnowo białym myszom o wadze 16-20 g w objętości 0,5 ml i obserwuje przez 72 godziny. Z narządów martwej myszy wykonuje się inokulację na pożywkę i bada mikroskopowo rozmazy-odciski. Wysoce zjadliwe kultury obejmują pneumokoki, które powodują śmierć myszy po wprowadzeniu kultury w rozcieńczeniu 1:10. Awirulentne kultury nie powodują śmierci myszy.

Serotypowanie pneumokoków. 18-godzinną hodowlę testuje się w reakcji mikroaglutynacji Sabina. Na szklane szkiełko nanosi się 4 krople hodowli pneumokoków. Do 1 kropli dodać kroplę surowicy przeciwpneumokokowej typu 1, do 2 - surowicy typu II, do 3 - surowicy - 111, do 4 - kropli normalnej surowicy. Mieszaniny na szkle miesza się za pomocą ezy i bada pod lupą lub pod mikroskopem przy małym powiększeniu. W przypadku dodatnim aglutynację obserwuje się w jednej z pierwszych trzech kropli. Typ pneumokoków jest określany w reakcji aglutynacji ze specyficznymi surowicami aglutynującymi pierwszych trzech ustalonych typów. Hodowle, które nie aglutynują z tego typu surowicami są przypisywane do grupy X. Reakcja jest ustawiona w następujący sposób. Wlać 18-godzinną hodowlę bulionową w 0,5 ml do probówek. Następnie dodać równą objętość surowicy rozcieńczonej solą fizjologiczną w stosunku 1:5. Kontrole to 2 probówki, z których jedna zawiera zmieszaną kulturę testową

normalna surowica królicza, a druga - tylko kultura testowa. Zawartość probówek dokładnie wstrząsa się i umieszcza na 2 godziny w termostacie w temperaturze 37 °C, po czym przeprowadza się wstępne obliczenie reakcji. Ostateczne wyniki zapisuje się po dodatkowej inkubacji w temperaturze pokojowej przez 20 godzin. Aglutynację ocenia się na cztery plus, jeśli zawartość probówek jest całkowicie przezroczysta, a kultura aglutynacyjna jest gęstą warstwą, która nie pęka po wstrząśnięciu; o trzy plusy, jeśli przy całkowitym wyjaśnieniu zawartości probówki kultura aglutynująca łatwo rozpada się na kawałki; dwa plusy - jeśli nie następuje oświecenie, w mętnej zawartości probówki wyraźnie widać gołym okiem cząstki zlepionej kultury; z aglutynacją o jeden plus w probówce znajduje się drobnoziarnista mieszanina sklejonych pneumokoków. Przy negatywnej reakcji widocznej dla oka nie obserwuje się aglutynacji;

zawartość probówek po wstrząśnięciu ma jednolite zmętnienie.

Typowanie pneumokoków z grupy X przeprowadza się za pomocą grupy

surowice zawierające mieszaninę typowych surowic aglutynujących

w równych objętościach. Następujące surowice grupowe są przygotowywane przez

zmieszanie równych objętości nierozcieńczonego standardowego materiału diagnostycznego

surowice (Lund, 1960):

serowary A-1, II, IV, V, XVIII;

B - VI, VIII, XIX serowary;

C - VII, XX. serowary XXIV, XXXI, XL;

D - IX, XI, XVI, XXXVI. serowary XXXVII;

E-X, XXI. serowary XXXIII, XXXIX;

F-XII. XVII. serowary XXII, XXXVII, XXXII, XLI;

G - XIII, XXV. serowary XXIX, XXXIV, XXXV, XXXVIII, XLII, XLVII;

J-XLIII. serowary XLIV, XLV, XLVI.

Surowicę aglutynującą typu III stosuje się jako taką (bez mieszania z innymi typowymi surowicami) ze względu na trudność w uzyskaniu jej w odpowiednio wysokim mianie. Typowanie przeprowadza się dwuetapowo: najpierw za pomocą surowic grupowych, a następnie pojedynczych surowic z grupy, z którą uzyskano pozytywną reakcję. Serotypowanie pneumokoków jest wykorzystywane przede wszystkim do badań epidemiologicznych wyników swoistej seroterapii i seroprofilaktyki.

Mikroaglutynację pneumokoków metodą Sabina można uzyskać mieszając surowice przeciw pneumokokom z wysiękiem z jamy brzusznej myszy zakażonej plwociną pacjenta. Już cztery godziny po zakażeniu w wysięku stwierdza się czystą hodowlę pneumokoków, co daje dodatnią aglutynację Sabina.

Przyspieszone metody wykrywania i typowania pneumokoków. 1. Metoda Neufelda, czyli zjawisko pęcznienia torebki pneumokokowej. Jedna bryła świeżo izolowanej plwociny pacjenta jest nakładana na trzy

szkiełek nakrywkowych, do każdego z nich dodać kroplę nierozcieńczonej swoistej surowicy przeciw pneumokokom (typu 1, II, III) oraz kroplę błękitu Loefflera. Krople są dokładnie wymieszane, przykryte szklanym szkiełkiem z otworem posmarowanym wokół krawędzi wazeliną. Po dwóch minutach wiszące krople są badane pod mikroskopem z systemem zanurzeniowym. W przypadku dodatnim obserwuje się gwałtowny wzrost liczby kapsułek pneumokokowych. Z wynikiem negatywnym kapsułki są mało cenione. Reakcja pęcznienia jest specyficzna i nie daje pozytywnego wyniku w przypadku innych bakterii otoczkowych. Nie używam go do badania plwociny od pacjentów leczonych sulfonamidami i antybiotykami, tk. w takim przypadku można wyizolować otoczkowe pneumokoki.

2. Metoda wytrącania. 5-10 ml plwociny gotuje się w łaźni wodnej, aż do uzyskania gęstego skrzepu. Skrzep rozciera się i dodaje niewielką ilość soli fizjologicznej, ponownie gotując przez kilka minut w celu wyekstrahowania określonego polisacharydu z pneumokoków. Zawiesinę odwirowuje się, a uzyskaną klarowną ciecz i specyficzne typowe surowice umieszcza się w probówkach do wytrącania, przeprowadza się reakcję wytrącania pierścieniowego. Pojawienie się pierścienia na styku cieczy wskazuje na wynik dodatni.

3. Oznaczanie kapsułek pneumokokowych metodą Burri. Kroplę badanego materiału i kroplę atramentu nakłada się na koniec szkiełka podstawowego. Mieszaninę miesza się i wykonuje rozmaz, suszy na powietrzu i bez utrwalania mikroskopowo. Tło leku jest ciemno dymne, ciała drobnoustrojów i ich kapsułki nie są poplamione. Preparat sporządzony według Burriego można utrwalić mieszanką Nikiforowa, przemyć wodą, zabarwić fuksyną Tsilya, rozcieńczoną 1:3 przez 3-5 minut. Na ciemnym tle rozmazu wyróżniają się niezabarwione kapsułki, wewnątrz których znajdują się bakterie o jasnym szkarłatnym kolorze (metoda Gina).

szkarlatyna wywołują różne serotypy paciorkowców beta-hemolitycznych z antygenem M i produkujących erytrogeninę (toksygenne paciorkowce grupy serologicznej A) - (Streptococcus pyogenes). W przypadku braku odporności antytoksycznej pojawia się szkarlatyna w obecności dusznicy bolesnej.

Obraz kliniczny

 Zatrucie - gorączka, ogólne złe samopoczucie, bóle głowy.

 Wysypka Scarlatina - drobno punktowana, przy umiarkowanym nacisku szklaną szpatułką, plamki są lepiej widoczne. Przy mocniejszym naciśnięciu wysypka ustępuje miejsca złocistożółtej karnacji. Pojawia się w 1-3 dniu choroby i jest zlokalizowany głównie na policzkach, w pachwinie, po bokach ciała. Skóra trójkąta nosowo-wargowego pozostaje blada i bez wysypki. Wysypka trwa zwykle 3-7 dni, po czym zanika, nie pozostawiając pigmentacji. Charakteryzuje się pogrubieniem wysypki na fałdach kończyn - pachowych, łokciowych, podkolanowych.

 Szkarłatny język – w 2-4 dniu choroby język pacjenta staje się wyraźny ziarnisty, jaskrawoczerwony, tzw. „szkarłatny”.

 Angina jest stałym objawem szkarlatyny. Może być cięższy niż zwykły ból gardła.

 łuszczenie się skóry – pojawia się po ustąpieniu wysypki (14 dni od początku choroby): w okolicy dłoni i stóp jest wielkoblaszkowata, zaczynając od opuszków palców; na tułowiu, szyi, małżowinach usznych łuszczące się łuszczenie.

Pneumokoki, taksonomia. Nieruchomości. Grupy serologiczne. Charakterystyczne cechy od innych paciorkowców. Spowodowane choroby. Zasady i metody diagnostyki laboratoryjnej.

Morfologia i właściwości biologiczne. Pneumokoki (Streptococcus pneumoniae) to parzyste ziarniaki o owalnym, lekko wydłużonym, lancetowatym kształcie, przypominającym płomień świecy. Mogą również znajdować się w krótkich łańcuchach, przypominających paciorkowce. Są nieruchome, nie tworzą zarodników i są Gram-dodatnie.
Hoduje się je na pożywkach z dodatkiem białka: krwi, surowicy, z płynem puchlinowym. Na agarze z krwią kolonie pneumokoków są małe, przypominające krople rosy, przezroczyste w świetle przechodzącym, z zagłębionym środkiem, otoczone strefą niepełnej hemolizy, o zielonkawym zabarwieniu, podobnym do kolonii jadowitych paciorkowców. Na płynnych mediach dają delikatne zmętnienie, czasami tworząc osad. Są dość aktywne biochemicznie: rozkładają glukozę, laktozę, maltozę, inulinę i inne węglowodany z wytworzeniem kwasu, nie upłynniają żelatyny, nie tworzą indolu. Rozszczepienie inuliny jest różnicową cechą diagnostyczną, która pomaga odróżnić pneumokoki od paciorkowców, które nie rozkładają inuliny. Ważną cechą wyróżniającą jest zdolność pneumokoków do rozpuszczania się w żółci, podczas gdy paciorkowce są w niej dobrze zachowane.

Patogeneza i klinika. Pneumokoki są czynnikami wywołującymi płatowe zapalenie płuc u ludzi. Mogą również powodować pełzające wrzody rogówki, nieżyty górnych dróg oddechowych, zapalenie opon mózgowych, zapalenie wsierdzia, uszkodzenia stawów i inne choroby.

Po chorobie odporność jest niskonapięciowa, krótkotrwała, specyficzna dla typu.
Diagnostyka mikrobiologiczna. Materiałem do badania jest plwocina, krew, wymaz z gardła, płyn mózgowo-rdzeniowy. Ze względu na to, że pneumokoki szybko giną, materiał patologiczny należy jak najszybciej dostarczyć do laboratorium do badań.

Meningokoki. Taksonomia, właściwości. Struktura antygenowa meningokoków, klasyfikacja. Patogeneza zakażenia meningokokowego, objawy kliniczne. Zasady i metody diagnostyki mikrobiologicznej. Różnicowanie czynnika wywołującego zakażenie meningokokowe i inne meningokoki. profilaktyka specyficzna.

N. meningitidis (meningokoki).

Meningokoki są czynnikiem wywołującym zakażenie meningokokowe - ciężką antropozę z przenoszeniem patogenu drogą kropelkową. Głównym źródłem są przewoźnicy. Naturalnym rezerwuarem jest nosogardło człowieka. Właściwości morfologiczne, kulturowe i biochemiczne są podobne do gonokoków. Różnice - fermentują nie tylko glukozę, ale także maltozę, wytwarzają hemolizynę. Mają kapsułkę, która jest większa i ma inną strukturę niż gonokoki.

skład antygenowy. Mają cztery główne systemy antygenowe.

1. Antygeny polisacharydowe specyficzne dla grup otoczkowych. Serogrupa A najczęściej powoduje wybuchy epidemii.

2. Antygeny białkowe błony zewnętrznej. Według tych antygenów meningokoki serogrup B i C dzielą się na klasy i serotypy.

3. Antygeny specyficzne dla rodzaju i gatunku.

4. Antygeny lipopolisacharydowe (8 rodzajów). Mają wysoką toksyczność, powodują efekt pirogenny.

czynniki chorobotwórcze. Czynniki adhezyjne i kolonizacja - białka pilusów i błony zewnętrznej. Czynniki inwazyjności - hialuronidaza i inne wytwarzane enzymy (neuraminidaza, proteazy, fibrynolizyna). Duże znaczenie mają otoczkowe antygeny polisacharydowe, które chronią mikroorganizmy przed fagocytozą.

Odporność odporny, antybakteryjny.

Diagnostyka laboratoryjna na podstawie bakterioskopii, izolacji hodowli i jej biochemicznej identyfikacji, serologicznych metod diagnostycznych. Zaszczepianie materiału przeprowadza się na stałych i półpłynnych pożywkach zawierających krew, płyn puchlinowy i surowicę krwi.

Uważa się, że kultury oksydazododatnie należą do rodzaju Neisseria. Meningokoki charakteryzują się fermentacją glukozy i maltozy. Przynależność do serogrupy określa się w teście aglutynacji (RA).

gonokoki. Taksonomia, właściwości. Patogeneza zakażenia gonokokami, cechy odporności. Zasady i metody diagnostyki laboratoryjnej ostrej i przewlekłej rzeżączki, blennorrhea. RSK Borde-Zhangu, cel, mechanizm, rozliczanie odpowiedzi. Zapobieganie blennorrhea u noworodków. Zapobieganie i leczenie rzeżączki. specyficzna terapia.

N. gonorrheae (gonokoki).

Gonococcus jest czynnikiem sprawczym rzeżączki, choroby przenoszonej drogą płciową z objawami zapalnymi w drogach moczowych. Substratem do kolonizacji jest nabłonek cewki moczowej, odbytnicy, spojówki oka, gardła, szyjki macicy, jajowodów i jajnika.

Diplokoki dobrze barwią się błękitem metylenowym i innymi barwnikami anilinowymi, pleomorficznymi (polimorfizm). Bardzo kapryśny do warunków uprawy i pożywek. Spośród węglowodanów fermentowana jest tylko glukoza.

Struktura antygenowa bardzo zmienna – charakteryzująca się zmiennością fazową (zanik determinant antygenowych) i zmiennością antygenową (zmiana determinant antygenowych).

czynniki chorobotwórcze. Główne czynniki to pił, za pomocą których gonokoki dokonują adhezji i kolonizacji komórek nabłonkowych błony śluzowej dróg moczowych oraz lipopolisacharyd(endotoksyna uwalniana podczas niszczenia gonokoków). Gonokoki syntetyzują IgAI, proteazę, która rozszczepia IgA.

Diagnostyka laboratoryjna. Diagnostyka bakterioskopowa obejmuje barwienie metodą Grama i błękit metylenowy. Typowymi objawami gonokoków są barwienie Gram-ujemne, diplokoki w kształcie fasoli, lokalizacja wewnątrzkomórkowa.

Wysiew odbywa się na specjalnych podłożach (KDS-MPA z mięsa króliczego lub serca wołowego z surowicą, agarem z wodobrzuszem, agarem z krwią).

Czynniki wywołujące gazową infekcję beztlenową. Taksonomia. Nieruchomości. charakterystyka toksyn. Patogeneza, postacie kliniczne. Zasady i metody diagnostyki laboratoryjnej, leki stosowane w określonej profilaktyce i leczeniu.

Zgorzel gazowa jest beztlenową, poliklostridia (tj. spowodowaną przez różne rodzaje Clostridia) infekcją rany (urazową). Pierwszorzędne znaczenie ma C.perfringens, rzadziej C.novyi, a także inne rodzaje Clostridium w trwałych ze sobą związkach, tlenowe ziarniaki ropotwórcze i gnilne bakterie beztlenowe.

C.perfringens normalnie zasiedla jelita ludzi i zwierząt, przedostaje się do gleby z kałem. Jest czynnikiem sprawczym infekcji rany - powoduje chorobę, gdy patogen dostanie się do rany w warunkach beztlenowych. Jest wysoce inwazyjny i toksyczny. Inwazyjność związana jest z produkcją hialuronidazy i innych enzymów, które działają destrukcyjnie na tkankę mięśniową i łączną. Główny czynnik chorobotwórczy - egzotoksyna, który ma działanie hemo-, nekro-, neuro-, leukotoksyczne i śmiertelne. Zgodnie ze specyficznością antygenową egzotoksyn są one izolowane serotypy patogen. Wraz z zgorzelą gazową C. perfringens powoduje zatrucia pokarmowe (opierają się na działaniu enterotoksyn i nekrotoksyn).

Cechy patogenezy. W przeciwieństwie do chorób ropnych wywołanych przez tlenowce, w zakażeniu beztlenowym nie dominuje stan zapalny, lecz stan zapalny martwica, obrzęk, tworzenie się gazów w tkankach, zatrucia toksynami i produktami rozpadu tkanek.

Odporność- głównie antytoksyczne.

Diagnostyka laboratoryjna obejmuje bakterioskopię wydzieliny z rany, izolację i identyfikację patogenu, wykrywanie i identyfikację toksyny w testach biologicznych z wykorzystaniem reakcji neutralizacji ze specyficznymi przeciwciałami antytoksycznymi.

Zapobieganie i leczenie. Zapobieganie zgorzeli gazowej opiera się na terminowym i prawidłowym chirurgicznym leczeniu ran. W przypadku ciężkich ran podaje się surowice antytoksyczne przeciwko głównym typom Clostridium, po 10 tys. IU, w celach leczniczych - po 50 tys. IU.

Clostridia tężec. Taksonomia. Właściwości, charakterystyka toksyn. Patogeneza choroby. Zstępujący tężec. Klinika. Zasady i metody diagnostyki laboratoryjnej. Cel badań bakteriologicznych, preparaty do określonej profilaktyki i leczenia.

Tężec to ostra infekcja rany charakteryzująca się zmianami chorobowymi neurotoksyna komórki motoryczne rdzenia kręgowego i mózgu, co objawia się skurczami mięśni poprzecznie prążkowanych. Chorują ludzie i zwierzęta hodowlane. Gleba, szczególnie zanieczyszczona odchodami ludzkimi i zwierzęcymi, jest stałym źródłem zakażenia tężcem.

Patogen - C.tetani - duża gram-dodatnia pałeczka tworząca przetrwalniki. Zarodniki są zlokalizowane terminalnie (rodzaj podudzia), ruchome dzięki wici - peritrichous. Obowiązkowy beztlenowy. Zarodniki są bardzo odporne.

właściwości antygenowe. Czynnik sprawczy ma antygeny O i H.

czynniki chorobotwórcze. Głównym czynnikiem jest najsilniejsza egzotoksyna. Wyróżnia się dwie główne frakcje - tetanospasmin (neurotoksyna) i tetanolizyna (hemolizyna). Neurotoksyna w ośrodkowym układzie nerwowym przenika do obszaru synaps mioneuralnych, jest przekazywana z neuronu do neuronu w obszarze synaps, gromadzi się w obszarach ruchowych kręgosłupa i mózgu, blokuje przekaźnictwo synaptyczne. Śmierć następuje w wyniku porażenia ośrodka oddechowego, uduszenia (uszkodzenie mięśni krtani, przepony, mięśni międzyżebrowych) lub porażenia serca.

Diagnostyka laboratoryjna. Diagnostyka mikrobiologiczna obejmuje bakterioskopię surowców, hodowlę w celu izolacji patogenu i jego identyfikację, wykrywanie toksyny tężcowej.

Izolację patogenu przeprowadza się zgodnie ze standardowym schematem dla beztlenowców, stosując różne pożywki gęste i płynne (pożywka Kitt-Tarozzi), identyfikacja opiera się na właściwościach morfologicznych, kulturowych, biochemicznych i toksygennych.

Najprostszą i najskuteczniejszą metodą diagnostyki mikrobiologicznej jest test biologiczny na białych myszach. Jedna grupa jest zakażona materiałem testowym, druga (kontrolna) - po zmieszaniu próbek z antytoksyczną surowicą tężcową. W obecności toksyny tężcowej eksperymentalna grupa myszy umiera, podczas gdy grupa kontrolna pozostaje żywa.

Leczenie i zapobieganie nagłym wypadkom. Stosuje się immunoglobulinę dawcy tężca (antytoksynę), surowicę antytoksyczną (350 IU/kg), antybiotyki (penicyliny, cefalosporyny). Aby stworzyć odporność na szczepionkę, stosuje się toksoid tężcowy, częściej jako część szczepionki DTP (toksyny tężca, błonicy i zabitego krztuśca).

Clostridia botulinum. Taksonomia. Nieruchomości. Charakterystyka toksyn, różnica w stosunku do egzotoksyn patogenów innych zakażeń pokarmowych. Zasady i metody diagnostyki laboratoryjnej. Leki stosowane w profilaktyce i leczeniu.

Zatrucie jadem kiełbasianym jest ciężkim zatruciem pokarmowym związanym ze stosowaniem produktów skażonych C. botulinum i charakteryzuje się specyficznym uszkodzeniem ośrodkowego układu nerwowego. Swoją nazwę otrzymał od łac. botulus – kiełbasa.

Właściwości wzbudnicy. Duże polimorficzne pałeczki Gram-dodatnie, ruchliwe, mają wici okołoświąteczne. Zarodniki są owalne, umiejscowione subterminalnie (rakieta tenisowa). Powstaje osiem rodzajów toksyn, różniących się specyficznością antygenową, i odpowiednio izolowanych jest 8 rodzajów patogenów. Do najważniejszych cech należy obecność lub brak właściwości proteolitycznych (hydroliza kazeiny, wytwarzanie siarkowodoru).

Toksyna ma działanie neurotoksyczne. Toksyna dostaje się do organizmu wraz z pożywieniem, chociaż prawdopodobnie może się kumulować, gdy patogen namnaża się w tkankach organizmu. Toksyna jest termolabilna, chociaż do całkowitej inaktywacji konieczne jest gotowanie do 20 minut. Toksyna szybko wchłania się w przewodzie pokarmowym, przenika do krwi, działa selektywnie na jądra rdzenia przedłużonego i komórki zwojowe rdzenia kręgowego. Rozwijają się zjawiska neuroparalityczne - zaburzenia połykania, afonia, dysfagia, zespół oftalmoplegiczny (zez, podwójne widzenie, opadanie powiek), porażenie i niedowład mięśni gardła i krtani, zatrzymanie oddechu i krążenia.

Diagnostyka laboratoryjna. Zasady są wspólne dla Clostridia.

Leczenie i profilaktyka. Podstawą jest wczesne stosowanie surowic antytoksycznych (poliwalentnych lub, gdy typ jest ustalony, homologicznych). Profilaktyka opiera się na reżimie sanitarno-higienicznym w przetwórstwie produktów spożywczych. Szczególnie niebezpieczne są domowe pieczarki w puszkach i inne produkty przechowywane w warunkach beztlenowych.

11. Pseudomonas aeruginosa. Taksonomia. Nieruchomości. Spowodowane choroby.
Rola w zakażeniach szpitalnych. Zasady i metody diagnostyki laboratoryjnej.

Pseudomonas z rodzaju P. aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa) jest jednym z głównych czynników sprawczych miejscowych i ogólnoustrojowych procesów ropno-zapalnych w szpitalach.

Patogen jest wszechobecny (woda, gleba, rośliny, zwierzęta), normalnie występuje u ludzi (najczęściej w jelitach, na skórze i błonach śluzowych). Morfologia- Pałeczka Gram-ujemna prosta lub lekko zakrzywiona, ruchoma, umieszczona w rozmazach pojedynczo, parami lub w krótkich łańcuszkach. Syntetyzuje śluz (substancję otoczkową), zwłaszcza bardziej zjadliwe szczepy śluzowe.

właściwości kulturowe. Jest tlenowcem i posiada zestaw enzymów odpowiadający rodzajowi oddychania (cytochromy, oksydaza cytochromowa, dehydrazy).Na podłożach płynnych tworzy szaro-srebrzysty film.Na ośrodkach gęstych często obserwuje się zjawisko opalizującej lizy.Przez koniec dnia dzięki syntezie pigmentu pirocyjanina pojawia się niebiesko-zielony kolor kultury.

właściwości biochemiczne. Pseudomonas aeruginosa charakteryzuje się niską aktywnością sacharolityczną (utlenia tylko glukozę), wysoką aktywnością proteolityczną i tworzeniem strefy beta-hemolizy na agarze z krwią. Syntetyzuje trimetyloaminę, która nadaje uprawom przyjemny zapach jaśminu. Produkuje produkcję bakteriocyn - piocyny.

Właściwości antygenowe i patogenne. Głównymi antygenami Pseudomonas aeruginosa są specyficzny dla grupy somatyczny antygen O i specyficzny dla typu wiciowy antygen H. Kompleks O-antygenowy - agregat LPS z białkami i lipidami ściany komórkowej, ma właściwości endotoksyny, jest jednym z głównych czynników chorobotwórczych. Pseudomonas aeruginosa posiada duży zestaw czynników chorobotwórczych – endotoksyny (LPS, podobnie jak inne bakterie Gram-ujemne), szereg egzotoksyn – cytotoksyny, egzoenzym S, hemolizyny, egzotoksynę A (najważniejsza, przypomina egzotoksynę błonicy), enzymy (kolagenaza , neuraminidaza, proteazy).

Diagnostyka laboratoryjna. P.aeruginisa otrzymała swoją nazwę od niebieskawo-zielonego zabarwienia dających się usunąć ran i opatrunków. Główną metodą diagnostyczną jest bakteriologiczna. Ważne jest wykrycie pigmentu piocyjaniny. Leczenie i profilaktyka specyficzna. Nie ma określonej profilaktyki. Przy zatruciu pokarmowym i dysbakteriozie jelitowej wywołanej przez Pseudomonas aeruginosa skuteczny jest złożony bakteriofag jelitowy, w skład którego wchodzi fag Pseudomonas. Spośród leków przeciwbakteryjnych częściej stosuje się aminoglikozydy, cefalosporyny i chinolony.

Warunkowo chorobotwórcze bakterie Gram-ujemne - czynniki sprawcze procesów ropno-zapalnych (Proteus, Klebsiella, cudowna różdżka itp.), Taksonomia. Ogólna charakterystyka enterobakterii. Zasady i metody diagnostyki laboratoryjnej.

rodzaj Klebsiella.

Rodzaj Klebsiella należy do rodziny Enterobacteriaceae. Cechą przedstawicieli rodzaju jest umiejętność tworzenia kapsułki. Głównym gatunkiem jest K. Pneumoniae. Powodują zmiany oportunistyczne - szpitalne zapalenie płuc, infekcje dróg moczowych, biegunki u noworodków. Klebsiella powodują zapalenie sutka, posocznicę i zapalenie płuc u zwierząt, stale znajdują się na skórze i błonach śluzowych ludzi i zwierząt. Klebsiella - proste, nieruchome pałeczki różnej wielkości. fakultatywne beztlenowce. Oksydaza - ujemna, katalaza - dodatnia.

czynniki chorobotwórcze. Należą do nich otoczka polisacharydowa (antygen K), endotoksyna, fimbrie, system sideroforów (wiąże jony żelazawe i zmniejsza ich zawartość w tkankach), termolabilne i termostabilne egzotoksyny.

Objawy kliniczne. K.pneumoniae (subsp. pneumoniae) charakteryzuje się szpitalnym zapaleniem oskrzeli i odoskrzelowym zapaleniem płuc, płatowym zapaleniem płuc, infekcjami dróg moczowych, uszkodzeniami opon mózgowo-rdzeniowych, stawów, kręgosłupa, oczu, a także bakteriemią i posocznicą. Podgatunek ozaenae powoduje szczególną postać przewlekłego zanikowego nieżytu nosa - jezioro.

Diagnostyka laboratoryjna. Główną metodą jest bakteriologiczna. Leczenie. Jedną z cech Klebsiella jest ich wielolekooporność i rozwój zmian chorobowych na tle spadku odporności organizmu. Antybiotyki stosuje się w przypadku uogólnionych i powolnych przewlekłych postaci Klebsiellesis, zwykle w połączeniu z lekami stymulującymi układ odpornościowy.

Rodzaj Proteus.

Rodzaj Proteus należy do rodziny Enterobacteriaceae. Rodzaj został nazwany na cześć syna Posejdona Proteusa, zdolnego do zmiany swojego wyglądu. Przedstawiciele rodzaju są w stanie zmienić zewnętrzne przejawy wzrostu na gęstych pożywkach, a także wyróżniają się największym pleomorfizmem (zmiennością morfologii) w porównaniu z innymi Enterobakteriami.

Białka rozkładają tyrozynę, przywracają azotany, oksydaza jest ujemna, katalaza jest dodatnia. Żyją w jelitach wielu gatunków kręgowców i bezkręgowców, glebie, ściekach i rozkładających się pozostałościach organicznych. Może powodować infekcje dróg moczowych u ludzi, a także zmiany septyczne u pacjentów z oparzeniami i po operacjach. Dość często powodują również zatrucia pokarmowe. P.vulgaris i P.mirabilis odgrywają najczęstszą rolę w patologii.

właściwości kulturowe. Protea rosną na prostych podłożach w szerokim zakresie temperatur. Optymalne pH wynosi 7,2-7,4, temperatura wynosi od +35 do 37 stopni Celsjusza. Kolonie Proteus w formie O są zaokrąglone, półprzezroczyste i wypukłe, formy H dają ciągły wzrost. Wzrostowi protei towarzyszy zgniły zapach. Charakterystyczne jest zjawisko rojenia, formy H nadają MPA charakterystyczny pełzający narost w postaci niebieskawo-dymnego delikatnego welonu. Podczas siewu metodą Shushkevicha w wilgoci kondensacyjnej świeżo ściętego MPA kultura stopniowo unosi się w postaci welonu na powierzchnię agaru. Na BCH widoczne jest rozproszone zmętnienie podłoża z gęstym białym osadem na dnie.

czynniki chorobotwórcze. Należą do nich LPS ściany komórkowej, zdolność do „rojenia”, fimbrii, proteazy i ureazy, hemolizyny i hemaglutyniny.

Diagnostyka laboratoryjna. Główną metodą jest bakteriologiczna. Różnicowe media diagnostyczne (Ploskirev), media wzbogacające i MPA stosuje się zgodnie z metodą Shushkevicha. Leczenie. W przypadku dysbakteriozy jelitowej związanej z proteasami (colitis) możliwe jest zastosowanie faga proteus i preparatów go zawierających (intestifag, bakteriofag coliproteus).

„Cudowny patyk” (Serratia marcescens), rodzaj bakterii spośród mikroorganizmów barwnikowych. Gram-ujemne ruchliwe (okołootrychowe) nie zawierające zarodników pałeczki. Według rodzaju wymiany - fakultatywne beztlenowce. Na powierzchni agaru tworzą się gładkie lub ziarniste ciemne i jaskrawoczerwone kolonie z metalicznym połyskiem. Żyje w glebie, wodzie, żywności. Rozwijając się na chlebie (przy dużej wilgotności), w mleku, zabarwia je na czerwono; takie produkty nie mogą być sprzedawane. Warunkowo chorobotwórczy dla zwierząt i ludzi; może powodować ropienie.

13. Escherichia. Taksonomia. Choroby wywołane przez Escherichia coli. Patogenne warianty biegunkowej Escherichia. Struktura antygenowa, klasyfikacja. Cechy diagnostyki mikrobiologicznej. Różnicowanie Escherichia powodującej biegunkę od warunkowo patogennej.

Escherichia to najpowszechniejsze tlenowe bakterie jelitowe, które w określonych warunkach mogą powodować szeroką grupę chorób człowieka, zarówno jelitowych (biegunki), jak i pozajelitowych (bakteriemia, infekcje dróg moczowych itp.). Główny gatunek - E. coli (E. coli) - najczęstszy czynnik sprawczy chorób zakaźnych wywołanych przez enterobakterie. Patogen ten jest wskaźnikiem zanieczyszczenia odchodami, zwłaszcza wody.

właściwości kulturowe. Na podłożach płynnych E. coli daje rozproszone zmętnienie, na podłożach gęstych tworzy kolonie w formie S i R. Na podłożu Endo dla Escherichia, fermentujące laktozę Escherichia coli tworzą kolonie intensywnie czerwone z metalicznym połyskiem, niefermentujące kolonie bladoróżowe lub bezbarwne z ciemniejszym środkiem, na podłożu Ploskireva - czerwone z żółtawym odcieniem, na podłożu Levina - ciemne niebieski z metalicznym połyskiem.

właściwości biochemiczne. Escherichia coli w większości przypadków fermentuje węglowodany (glukozę, laktozę, mannitol, arabinozę, galaktozę itp.) Z wytworzeniem kwasu i gazu, tworzy indol, ale nie tworzy siarkowodoru i nie upłynnia żelatyny.

Główne czynniki patogeniczności biegunkowej E. coli.

1. Czynniki adhezji, kolonizacji i inwazji związane z pilusami, strukturami fimbrialnymi, białkami błony zewnętrznej. Są kodowane przez geny plazmidowe i sprzyjają kolonizacji dolnego odcinka jelita cienkiego.

2. Egzotoksyny: cytotoniny (pobudzają nadmierne wydzielanie płynów przez komórki jelitowe, zaburzają gospodarkę wodno-solną i przyczyniają się do rozwoju biegunek) i enterocytotoksyny (działają na komórki ściany jelita i śródbłonka naczyń włosowatych).

3. Endotoksyna (lipopolisacharyd).

W zależności od obecności różnych czynników chorobotwórczych bakterie wywołujące biegunki Escherichia coli dzielą się na pięć głównych typów: enterotoksyczne, enteroinwazyjne, enteropatogenne, enterokrwotoczne, enteroadhezyjne.

4. Patogenna E. coli charakteryzuje się produkcją bakteriocyn (kolicyn).

Enterotoksyczne bakterie E. coli mają termolabilną toksynę o dużej masie cząsteczkowej, podobną w działaniu do cholery, powodują biegunkę choleropodobną (zapalenie żołądka i jelit u małych dzieci, biegunka podróżnych itp.).

Enteroinwazyjna Escherichia coli zdolne do penetracji i namnażania się w komórkach nabłonka jelitowego. Wywołują obfite biegunki z domieszką krwi i dużą liczbą leukocytów (wskaźnik procesu inwazyjnego) w stolcu. Klinicznie przypomina czerwonkę. Szczepy wykazują pewne podobieństwa do Shigelli (nieruchliwe, nie fermentują laktozy, mają wysokie właściwości enteroinwazyjne).

Enteropatogenne E.coli- główne czynniki sprawcze biegunek u dzieci. Sercem zmian jest adhezja bakterii do nabłonka jelitowego z uszkodzeniem mikrokosmków. Charakteryzuje się wodnistą biegunką i ciężkim odwodnieniem.

Enterohemorrhagic Escherichia coli powodować biegunkę zmieszaną z krwią (krwotoczne zapalenie jelita grubego), zespół hemolityczno-mocznicowy (niedokrwistość hemolityczna w połączeniu z niewydolnością nerek). Najczęstszym serotypem enterokrwotocznej Escherichia coli jest O157:H7.

Enteroadhezyjna E. coli nie tworzą cytotoksyn, są słabo zbadane.

Diagnostyka laboratoryjna. Głównym podejściem jest izolacja czystej kultury na różnicowych podłożach diagnostycznych i jej identyfikacja na podstawie właściwości antygenowych. Założyli RZS z zestawem poliwalentnych surowic OK (do antygenów O i K).

Wśród patogennych paciorkowców szczególne miejsce zajmuje S.pneumoniae (pneumococcus). Odgrywa bardzo ważną rolę w patologii zakaźnej człowieka. Gatunek ten jest jednym z głównych czynników sprawczych płatowego zapalenia płuc. Według dalekich od pełnych danych co roku na świecie odnotowuje się ponad 500 000 przypadków zapalenia płuc wywołanego przez pneumokoki, zwłaszcza u dzieci i osób starszych. Oprócz zapalenia płuc ten drobnoustrój powoduje zapalenie opon mózgowych, zapalenie wsierdzia, zapalenie otrzewnej, zapalenie ucha środkowego, nieżyt nosa, zapalenie zatok, posocznicę, pełzający wrzód rogówki i wiele innych chorób. Do diagnostyki laboratoryjnej stosuje się metody bakterioskopowe, bakteriologiczne i biologiczne. Materiał do badania plwociny, ropy, krwi, płynu mózgowo-rdzeniowego, śluzu z części ustnej gardła i nosogardzieli, wydzieliny z zatoki szczękowej, oczu i uszu. Ważne jest, aby natychmiast wysłać materiał do laboratorium i bardzo szybko go przeanalizować, ponieważ pneumokoki są podatne na autolizę.

Badanie bakterioskopowe

Badanie bakterioskopowe materiału (poza krwią) sprowadza się do wykonania dwóch rozmazów. Jedna z nich jest barwiona Gramem, druga Burri-Ginsem, co umożliwia identyfikację kapsułki. Pneumokoki znajdują się w postaci lancetowatych diplokoków, otoczonych wspólną torebką. Jeśli w polu widzenia zostanie wykrytych 10 lub więcej typowych diplokoków, istnieje duże prawdopodobieństwo obecności S.pneumoniae. Jednak mikroskopia pierwotna nie daje prawa do postawienia ostatecznej diagnozy, ponieważ rozmazy mogą zawierać niepatogenne diplokoki otoczkowe - przedstawicieli normalnej mikroflory. Dlatego konieczne jest wykonanie wysiewu materiału klinicznego i wyizolowanie czystej kultury.

Badania bakteriologiczne

W przypadku posocznicy 10 ml krwi inokuluje się przy łóżku pacjenta do fiolki zawierającej 100 ml surowicy lub bulionu cukrowego, inkubuje przez 18-20 godzin w temperaturze 37°C, następnie wysiewa na agarze z krwią, wyodrębnia czystą kulturę i zidentyfikowane. W przypadku zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych płyn mózgowo-rdzeniowy odwirowuje się, a osad hoduje na agarze z krwią. Na nim rosną pneumokoki w postaci małych okrągłych kolonii otoczonych zieloną strefą; w centrum kolonii widoczne jest charakterystyczne zagłębienie. Nie zaleca się wysiewania plwociny lub ropy na pożywkę, ponieważ obecność mikroflory saprofitycznej hamuje wzrost S.pneumoniae. Lepiej jest wprowadzić badany materiał do jamy brzusznej białych myszy. Test biologiczny to szybka, niezawodna i dokładna metoda izolowania czystej kultury pneumokokowej. Białe myszy są bardzo wrażliwe na te bakterie i w ciągu 10-12 godzin po zakażeniu pneumokoki przenikają do krwi i narządów miąższowych, powodując posocznicę. Posiew krwi z serca lub fragmentów narządów wewnętrznych podczas sekcji zwłok zwierząt pozwala na wyizolowanie czystej kultury patogenu. Aby zidentyfikować pneumokoki, wykorzystuje się ich właściwości. W przeciwieństwie do innych rodzajów paciorkowców, S.pneumoniae nie rośnie na podłożu z optochiną, inulina ulega fermentacji i jest bardzo wrażliwa na działanie żółci (test dezoksycholanowy). Gwałtowną lizę pneumokoków pod wpływem żółci można wykryć, dodając 0,5 ml żółci do 1 ml hodowli bulionowej. Po 15-20 minutach przebywania w termostacie następuje całkowita liza komórek bakteryjnych. Do określenia serowarów pneumokoków (obecnie jest ich 85) wykorzystuje się reakcję aglutynacji na szkle z typowymi surowicami lub zjawisko „pęcznienia otoczki”. W obecności homologicznej surowicy otoczka pneumokokowa silnie pęcznieje. Co więcej, serotypowanie przeprowadza się za pomocą komercyjnych odczynników do aglutynacji lateksowej lub koaglutynacji, które prezentują antygeny otoczkowe. Wśród paciorkowców ważny jest również rodzaj Enterococcus, z których najbardziej znaczącymi gatunkami są E.faecalis, E.faecium i E.durans. Są dość rozpowszechnione w przyrodzie. Ich główną niszą ekologiczną są jelita ludzi i zwierząt, ale występują również w normalnej mikroflorze skóry krocza, narządów moczowo-płciowych, jamy ustnej gardła i nosogardzieli. Mogą powodować ropienie ran, bakteriemię, uszkodzenia układu moczowo-płciowego, zwłaszcza u pacjentów z długo działającymi cewnikami, zatrucia pokarmowe, dysbakteriozę jelitową, rzadziej zapalenie wsierdzia. W rozmazach z badanego materiału enterokoki układają się w pary, krótkie łańcuchy lub w postaci skupisk, Gram-dodatnie. Diagnostyka bakteriologiczna zakażeń enterokokowych odbywa się bez trudności, ponieważ bakterie te dobrze rosną na prostych podłożach. Agar dif-3 jest dla nich selektywny (do 600 ml 3% MPA dodać 400 ml 40% żółci). Po 24 godzinach inkubacji kolonie, które wyrosły, mają rozmiar 0,4-1,0 mm i mają szarawy kolor. Na agarze z krwią wokół kolonii występuje niepełna lub całkowita hemoliza. W przeciwieństwie do paciorkowców jadowitych, enterokoki mogą rosnąć na MPA z 6,5% NaCl, redukując mleko błękitem metylenowym w temperaturze 37°C po 4-6 godzinach. Identyfikację wyizolowanych kultur przeprowadza się na podstawie cech morfologicznych, kulturowych i biochemicznych.

Strona 40 z 91

Czynnikiem sprawczym płatowego zapalenia płuc (zapalenie płuc) jest pneumokok - Diplococcus pneumoniae, po raz pierwszy odkryty przez Pasteura w ślinie mężczyzny, który zmarł na wściekliznę (1881).
Morfologia i właściwości barwiące. Pneumokoki (ryc. 67 i 68 na wkładce) to sparowane ziarniaki, które mają wydłużony kształt przypominający lancet. Dlatego są inaczej nazywane diplokokami lancetowatymi. Tworząc krótkie łańcuchy, pneumokoki upodabniają się do paciorkowców, a zatem II. F. Gamaleya nazwał je Streptococcus lanceolatus. Rozmiar komórki waha się od 0,5X0,75 do 1X1,5 mikrona. Nie mają zarodników ani wici. Charakterystyczną cechą pneumokoków jest tworzenie kapsułki, która jest dobrze wyrażona w materiałach patologicznych (plwocina, krew itp.). Podczas uprawy na pożywce kapsułka jest tracona. Pneumokoki łatwo wychwytują barwniki anilinowe i wybarwiają się dodatnio według Grama.
Właściwości kulturowe i biochemiczne.

Ryż. 68. Pneumokoki w rozmazie plwociny.

Pneumokoki to tlenowce i fakultatywne beztlenowce. Optymalna temperatura wynosi około 37°. Hodować na podłożach zawierających białko zwierzęce (agar z krwią lub surowicą, ascitagar).
Na powierzchni agaru po 24 godzinach tworzą się małe kolonie, przypominające paciorkowce, ale mniejsze i bardziej przezroczyste.
Na skośnym agarze, przy obfitym zaszczepieniu, uzyskuje się bardzo delikatną przezroczystą powłokę, składającą się z najmniejszych, niescalających się kolonii, na bulionie - lekkie zmętnienie i niewielki łuszczący się osad.
Świeżo wyizolowane szczepy nie rosną na żelatynie. Stare laboratoryjne szczepy pneumokoków mogą wytwarzać małe, białawe kolonie już w temperaturze 18-22°C. Żelatyna nie jest upłynniona.
Dobrze rosną na mleku, zsiadając je z tworzeniem kwasu.
Na agarze z krwią wokół kolonii tworzy się strefa niepełnej hemolizy z zielonkawo-brązowym zabarwieniem podłoża.

Ryż. 67. Pneumokoki w czystej kulturze z bulionu.

Pneumokoki rozkładają sacharozę, rafinozę i laktozę. Najważniejszą cechą jest rozkład inuliny. Większość paciorkowców nie ma tej właściwości. Zjadliwe pneumokoki są rozpuszczalne w żółci.
Struktura antygenowa i typy serologiczne pneumokoków. Cytoplazma pneumokoków zawiera antygen białkowy wspólny dla wszystkich pneumokoków. Antygen ten determinuje ich specyficzność gatunkową. Kapsułka zawiera specyficzne antygeny polisacharydowe (hapteny), które różnią się składem chemicznym u różnych pneumokoków (antygeny typowe). Na podstawie tych typowych antygenów wszystkie pneumokoki dzieli się na trzy główne grupy (I, II, III) i czwartą połączoną grupę (grupa X), stosując reakcję aglutynacji i wytrącania. Grupa X obejmuje ponad 70 typów.
opór. Na sztucznych pożywkach pneumokoki szybko umierają (4-7 dni). Pod warstwą oleju wazelinowego w płynnych i półpłynnych podłożach zawierających białko zachowują żywotność przez 3-12 miesięcy.
Pneumokoki dobrze znoszą wysychanie: w suchej plwocinie w rozproszonym świetle utrzymują się do 2 miesięcy. Po podgrzaniu do 52-55 ° giną w ciągu 10 minut, w 60 ° - jeszcze szybciej. W roztworze kwasu karbolowego (3%) pneumokoki umierają w ciągu 1-2 minut.
Pneumokoki są szczególnie wrażliwe na optochinę. Pod wpływem tych ostatnich umierają w stężeniu 1: 1 000 000.
Powstawanie toksyn i patogeniczność dla zwierząt. Jad pneumokoków jest endotoksyną. Spośród zwierząt laboratoryjnych białe myszy i króliki są bardziej wrażliwe na pneumokoki. Podanie pozajelitowe zjadliwych pneumokoków po 24-48 godzinach powoduje śmierć zwierząt z sepsą. Podczas sekcji zwłok w miejscu wstrzyknięcia wykrywa się wysięk włóknisty, śledziona jest powiększona i przekrwiona.
Patogeneza i choroby człowieka. Bramą wejściową zakażenia jest zwykle błona śluzowa gardła. Wprowadzenie pneumokoków do organizmu i ich penetracja do tkanki płucnej może najwyraźniej nastąpić zarówno przez układ limfatyczny i krążeniowy, jak i bezpośrednio przez rozgałęzienia oskrzeli. Najczęstszą chorobą jest krupowe zapalenie płuc, które charakteryzuje się nagłym początkiem, wysoką gorączką, czasami z dreszczami, bólem w boku przy oddychaniu, bólem głowy, czasami utratą przytomności, delirium, silnym pobudzeniem. W przyszłości pojawia się kaszel z charakterystyczną rdzawoczerwoną plwociną. W płucach zachodzi proces, który chwyta częściej jeden, rzadziej dwa lub trzy płaty.
Źródłem zakażenia jest osoba chora i bakterionośnik. Zakażenie z zewnątrz następuje zarówno drogą aerogenną – kropelkami z nośnika, jak i poprzez zakażenie pyłem. Pneumokoki mogą utrzymywać się w wysuszonej plwocinie przez długi czas (około 2 miesięcy) i przedostawać się do powietrza wraz z pyłem.
Podczas badania osób zdrowych patogenne pneumokoki często stwierdza się w nosogardzieli, więc nie wyklucza się możliwości autoinfekcji, a istotną rolę odgrywają czynniki osłabiające odporność organizmu, takie jak hipotermia.
Oprócz krupowatego zapalenia płuc pneumokoki powodują zapalenie ucha środkowego, opon mózgowo-rdzeniowych (meningitis), a także błony śluzowej nosa i zatok, ból gardła, pełzający wrzód rogówki i zapalenie woreczka łzowego.
Odporność. Przeniesione zapalenie płuc nie daje odporności. Choroba może nawracać więcej niż jeden raz. Wynika to z obecności wielu rodzajów pneumokoków oraz faktu, że przebyte zapalenie płuc zwiększa wrażliwość organizmu na pneumokoki.
Surowica wyleczonych pacjentów zawiera przeciwciała (aglutyniny itp.).
Do czasu kryzysu w zapaleniu płuc stężenie przeciwciał we krwi osiąga znaczne miano, a fagocytoza dramatycznie wzrasta (I. Ya. Chistovich). Na podstawie tych danych odporność w zapaleniu płuc należy rozpatrywać przede wszystkim jako fagocytarną, w której istotną rolę odgrywają przeciwciała (bakteriotropiny).
Diagnostyka mikrobiologiczna. Materiałem do badań w chorobach pneumokokowych jest plwocina, krew i ropa pobierane z różnych zmian chorobowych, rzadziej płyn mózgowo-rdzeniowy.
Materiał patologiczny (z wyłączeniem krwi) bada się bakterioskopowo, bakteriologicznie oraz zarażając białe myszy. Ta druga metoda musi być zastosowana, ponieważ materiał źródłowy, zwłaszcza plwocina, zawiera zazwyczaj obficie obcą mikroflorę, co przy bezpośrednim wysianiu materiału na pożywkę utrudnia izolację pneumokoków.
Rozmazy z plwociny, ropy itp. są barwione metodą Grama. Pod mikroskopem znajdują się lancetowate diplokoki, wybarwione metodą Grama, otoczone torebką.
Kultury izoluje się na agarze z krwią lub agarze ascig. Po 24-48 godzinach wzrostu w temperaturze 37° pojawiają się charakterystyczne kolonie w przypadku obecności pneumokoków. Kolonie wysiewa się na skośną surowicę lub agar z płynem puchlinowym, a wyizolowaną hodowlę sprawdza się pod kątem rozpuszczalności w żółci i zdolności do degradacji inuliny.
Zakażenie białej myszy jest najpewniejszym sposobem na wyizolowanie kultury pneumokoków. Materiał pobrany od pacjenta lub zwłok (plwocina, ropa, fragment narządu itp.) umieszcza się w sterylnym kubku, następnie rozciera w sterylnym moździerzu z 1-2 ml sterylnego bulionu i 0,5 ml tej zawiesiny wstrzyknięto dootrzewnowo białej myszy. Po śmierci myszy, która następuje w ciągu 12-48 godzin, pobiera się posiewy krwi z serca i prawie we wszystkich przypadkach uzyskuje się czystą kulturę pneumokoków.
Jeśli podejrzewa się posocznicę, 10-20 ml krwi inokuluje się do bulionu puchlinowego lub surowicy. Po wzbogaceniu z bulionu wykonuje się posiewy na agarze z krwią, a wyizolowaną czystą kulturę identyfikuje się na podstawie cech morfologicznych i biochemicznych.
specyficzna terapia i chemioterapia. Obecnie preparaty sulfanilamidowe i antybiotyki (penicylina, biomycyna, tetracyklina itp.) są z dużym powodzeniem stosowane w leczeniu płatowego zapalenia płuc.

Rodzaj Streptococcus obejmuje: Streptococcus pyogenes (hemolityczny) i Streptococcus pneumoniae (pneumococcus). Paciorkowce zostały po raz pierwszy odkryte przez Billrotha (1874), L. Pasteura (1879). Badał je E. Rosenbach (1884).

Streptococcus pyogenes (hemolityczny)

Morfologia. Paciorkowce to ziarniaki o kulistym kształcie. Średnica każdego ziarniaka wynosi średnio 0,6-1 μm, jednak charakteryzują się one polimorfizmem: są małe i duże ziarniaki, ściśle kuliste i owalne. Paciorkowce ułożone są w łańcuch, co jest wynikiem ich podziału w tej samej płaszczyźnie. Długość łańcuszka jest różna. Na gęstej pożywce łańcuchy są zwykle krótkie, na płynnych są długie. Paciorkowce są nieruchome, nie mają zarodników (patrz ryc. 4). Świeżo wyizolowane kultury czasami tworzą kapsułkę. Na ultracienkich skrawkach widoczna jest mikrokapsułka, pod nią trójwarstwowa ściana komórkowa i trójwarstwowa błona cytoplazmatyczna. Gram-dodatnie.

uprawa. Paciorkowce są fakultatywnymi beztlenowcami. Rosną w temperaturze 37°C i pH 7,6-7,8. Optymalnymi podłożami do ich hodowli są podłoża zawierające krew lub surowicę krwi. Na gęstych pożywkach kolonie paciorkowcowe są małe, płaskie, mętne, szarawe. Na agarze z krwią niektóre odmiany paciorkowców tworzą hemolizę. Paciorkowce β-hemolityczne tworzą wyraźną strefę hemolizy, paciorkowce α-hemolityczne tworzą małą zielonkawą strefę (wynik przejścia hemoglobiny do methemoglobiny). Istnieją paciorkowce, które nie powodują hemolizy.

Na bulionie cukrowym paciorkowce rosną wraz z tworzeniem drobnoziarnistego osadu ciemieniowego i bliskodennego, podczas gdy bulion pozostaje przezroczysty.

Właściwości enzymatyczne. Paciorkowce mają właściwości sacharolityczne. Rozkładają glukozę, laktozę, sacharozę, mannitol (nie zawsze) i maltozę, tworząc kwas. Ich właściwości proteolityczne są słabo wyrażone. Koagulują mleko, żelatyna nie upłynnia.

powstawanie toksyn. Paciorkowce tworzą szereg egzotoksyn: 1) streptolizyny - niszczą krwinki czerwone (O-streptolizyna ma działanie kardiotoksyczne); 2) leukocidin - niszczy leukocyty (powstałe przez wysoce zjadliwe szczepy); 3) toksyna erytrogenna (płonica) - powoduje obraz kliniczny szkarlatyny - zatrucie, reakcje naczyniowe, wysypka itp. Syntezę toksyny erytrogennej określa profag; 4) cytotoksyny - mają zdolność wywoływania kłębuszkowego zapalenia nerek.

Paciorkowce mają różne antygeny. Cytoplazma komórki zawiera antygen o specyficznym charakterze nukleoproteiny - taki sam dla wszystkich paciorkowców. Antygeny typu białkowego znajdują się na powierzchni ściany komórkowej. W ścianie komórkowej paciorkowców znaleziono polisacharydowy antygen grupowy.

Zgodnie ze składem frakcji antygenu specyficznego dla grupy polisacharydów, wszystkie paciorkowce są podzielone na grupy, oznaczone dużymi literami łacińskimi A, B, C, D itd. aż do S. Oprócz grup paciorkowce dzielą się na typy serologiczne , które są oznaczone cyframi arabskimi.

Grupa A obejmuje 70 typów. Ta grupa obejmuje większość paciorkowców, które powodują różne choroby u ludzi. Grupa B obejmuje głównie oportunistyczne paciorkowce ludzkie. Grupa C obejmuje paciorkowce patogenne dla ludzi i zwierząt. Grupa D obejmuje paciorkowce, które nie są chorobotwórcze dla człowieka, ale do tej grupy należą enterokoki, które są mieszkańcami przewodu pokarmowego ludzi i zwierząt. Dostając się do innych narządów, powodują procesy zapalne: zapalenie pęcherzyka żółciowego, zapalenie miednicy itp. W ten sposób można je przypisać warunkowo patogennym drobnoustrojom.

Przynależność wyizolowanych kultur do jednej z grup serologicznych określa się za pomocą reakcji wytrącania z surowicami grupowymi. Do określenia typów serologicznych stosuje się reakcję aglutynacji z surowicami specyficznymi dla danego typu.

Paciorkowce są dość stabilne w środowisku. W temperaturze 60 ° C umierają po 30 minutach.

W wysuszonej ropie i plwocinie utrzymują się przez miesiące. Zwykłe stężenia środków dezynfekujących niszczą je w ciągu 15-20 minut. Enterokoki są znacznie bardziej odporne, roztwory dezynfekcyjne zabijają je dopiero po 50-60 minutach.

Podatność zwierząt. Bydło, konie, psy i ptaki są podatne na patogenne paciorkowce. Od zwierząt laboratoryjnych króliki i białe myszy są wrażliwe. Jednak paciorkowce patogenne dla ludzi nie zawsze są chorobotwórcze dla zwierząt doświadczalnych.

Źródła infekcji. Ludzie (chorzy i nosiciele), rzadziej zwierzęta lub zakażone produkty.

Trasy transmisji. Pył unoszący się w powietrzu i unoszący się w powietrzu, czasem żywność, kontakt z gospodarstwem domowym jest możliwy.

Choroby mogą wystąpić w wyniku infekcji egzogennej, jak również endogennej - z aktywacją oportunistycznych paciorkowców żyjących na błonach śluzowych gardła, nosogardzieli i pochwy. Spadek odporności organizmu (wyziębienie, głód, przepracowanie itp.) może prowadzić do autoinfekcji.

Ogromne znaczenie w patogenezie zakażeń paciorkowcowych ma wstępne uczulenie - w wyniku wcześniej przeniesionej choroby o etiologii paciorkowcowej.

Wnikając do krwioobiegu, paciorkowce powodują ciężki proces septyczny.

Choroby u ludzi częściej powodują paciorkowce β-hemolityczne grupy serologicznej A. Wytwarzają enzymy chorobotwórcze: hialuronidazę, fibrynolizynę (streptokinazę), deoksyrybonukleazę itp. Ponadto paciorkowce znajdują się w otoczce, białku M, które ma właściwości antyfagocytujące.

Paciorkowce powodują różne ostre i przewlekłe infekcje u ludzi, zarówno z tworzeniem się ropy, jak i nieropne, różniące się obrazem klinicznym i patogenezą. Ropne – ropowica, ropnie, infekcje ran, nieropne – ostre infekcje górnych dróg oddechowych, róża, szkarlatyna, reumatyzm itp.

Paciorkowce często powodują wtórne infekcje grypy, odry, krztuśca i innych chorób oraz często komplikują infekcje ran.

Odporność. Z natury odporność jest antytoksyczna i antybakteryjna. Poinfekcyjna odporność przeciwdrobnoustrojowa jest słaba. Wynika to ze słabej immunogenności paciorkowców i dużej liczby serowarów, które nie dają odporności krzyżowej. Ponadto w przypadku chorób paciorkowcowych obserwuje się alergię organizmu, co wyjaśnia tendencję do nawrotów.

Zapobieganie. Sprowadza się to do środków sanitarno-higienicznych, wzmacniających ogólną odporność organizmu. Specyficzna profilaktyka nie została opracowana.

Leczenie. Zastosuj antybiotyki. Częściej stosuje się penicylinę, na którą paciorkowce nie nabyły oporności, a także erytromycynę i tetracyklinę.

Wartość paciorkowców w etiologii choroby reumatycznej serca. Patogeneza reumatycznych chorób serca nie jest dobrze poznana. Ale wiele faktów przemawia za rolą paciorkowców w rozwoju tej choroby:

1. U pacjentów z chorobą reumatyczną serca wysiewa się z gardła paciorkowiec B-hemolityczny.

2. Reumatyzm często występuje po przebytych bólach gardła, anginie, zapaleniu gardła, uczuleniu organizmu.

3. Antystreptolizyna, antystreptohialuronidaza - przeciwciała przeciwko enzymom paciorkowcowym, toksyny znajdują się w surowicy krwi pacjentów.

4. Pośrednim potwierdzeniem roli paciorkowców jest skuteczne leczenie penicyliną.

Ostatnio formom L paciorkowców nadano znaczenie w występowaniu przewlekłych postaci choroby reumatycznej serca.

Zapobieganie zaostrzeniom choroby reumatycznej serca ogranicza się do zapobiegania chorobom paciorkowcowym (na przykład wiosną i jesienią przeprowadza się profilaktyczny kurs podawania penicyliny). Leczenie ogranicza się do stosowania leków przeciwbakteryjnych - penicyliny.

Wartość paciorkowców w etiologii szkarlatyny. G. N. Gabrichevsky (1902) jako pierwszy zasugerował, że paciorkowiec hemolityczny jest czynnikiem sprawczym szkarlatyny. Ale ponieważ paciorkowce wyizolowane w innych chorobach nie różniły się od czynników wywołujących szkarlatynę, opinia ta nie była podzielana przez wszystkich. Obecnie ustalono, że szkarlatynę wywołują paciorkowce grupy A, które wytwarzają toksynę erytrogenną.

U tych, którzy byli chorzy, powstaje odporność - trwała, antytoksyczna. Jej napięcie określa się za pomocą reakcji Dicka - śródskórnego wstrzyknięcia toksyny erytrogennej. U zdrowych osób w okolicy miejsca wstrzyknięcia dochodzi do przekrwienia i obrzęku, co charakteryzuje się reakcją dodatnią (brak antytoksyny w surowicy krwi). U tych, którzy byli chorzy, taka reakcja jest nieobecna, ponieważ powstająca w nich antytoksyna neutralizuje toksynę erytrogenną.

Zapobieganie. Izolacja, hospitalizacja. Kontakt, osłabione dzieci otrzymują globulinę gamma. Specyficzna profilaktyka nie została opracowana.

Leczenie. Użyj penicyliny, tetracykliny. W ciężkich przypadkach podaje się surowicę antytoksyczną.

Cel pracy: wykrycie paciorkowca i określenie jego serowaru.

Materiał badawczy

1. Śluz z gardła (zapalenie migdałków, szkarlatyna).

2. Skrobanie z dotkniętego obszaru skóry (różyca, streptoderma).

3. Ropa (ropień).

4. Mocz (zapalenie nerek).

5. Krew (podejrzenie sepsy; zapalenie wsierdzia).

Podstawowe metody badawcze

1. Bakteriologiczne.

2. Mikroskopijne.

Postęp badań

Drugi dzień badań

Wyjmij kubki z termostatu i sprawdź. W przypadku obecności kolonii podejrzanych, z ich części wykonuje się rozmazy, barwiąc metodą Grama i mikroskopowo. W przypadku stwierdzenia w rozmazie paciorkowców część pozostałej kolonii przesiewa się do probówek na agarze z surowicą w celu wyizolowania czystej kultury oraz na bulionie z krwią w probówkach. Pod koniec dnia 5-6-godzinną hodowlę z bulionu lub agaru przesiewa się na bulion Martena z 0,25% glukozą w celu określenia grupy serologicznej w reakcji wytrącania Lensfielda. Probówki i fiolki umieszcza się w termostacie i pozostawia do następnego dnia.

Trzeci dzień badań

Kultury wyjmuje się z pieca, sprawdza się czystość kultury na skosie agarowym, wykonuje się rozmazy, barwi się metodą Grama i bada pod mikroskopem. W obecności czystej kultury paciorkowców wysiewa się je na pożywce Hissa (laktoza, glukoza, maltoza, sacharoza i mannitol), mleko, żelatynę, 40% żółci i umieszcza w termostacie.

Przejrzyj bulion Martina. W przypadku obecności specyficznego wzrostu przeprowadza się test wytrącania Lensfielda w celu określenia grupy serologicznej.

Przygotowanie reakcji wytrącania według Lensfielda. Dzienną kulturę hodowaną na bulionie Martina przelewa się do kilku probówek wirówkowych, wiruje przez 10-15 minut (3000 obr./min).

Supernatant wlewa się do słoika z roztworem dezynfekującym, a osad wlewa się do sterylnego izotonicznego roztworu chlorku sodu i ponownie odwirowuje. Do osadu zebranego ze wszystkich probówek wirówkowych dodać 0,4 ml 0,2% kwasu solnego. Następnie probówkę umieszcza się w łaźni wodnej i gotuje przez 15 minut, od czasu do czasu wstrząsając. Po zagotowaniu otrzymaną zawiesinę ponownie odwirowuje się. Następnie antygen ekstrahuje się do supernatantu, który przelewa się do czystej probówki i neutralizuje 0,2% roztworem wodorotlenku sodu do pH 7,0-7,2. Błękit bromotymolowy (0,01 ml 0,04% roztworu) dodaje się jako wskaźnik. Dzięki tej reakcji kolor zmienia się ze słomkowożółtego na niebieski.

Następnie 0,5 ml surowic przeciw paciorkowcom, przygotowanych przez immunizację królików, wlewa się do 5 probówek do wytrącania (patrz rozdział 19). Surowicę A wprowadza się do pierwszej probówki, surowicę B do drugiej, surowicę C do trzeciej, surowicę D do czwartej, izotoniczny roztwór chlorku sodu (kontrola) do piątej. Następnie za pomocą pipety Pasteura uzyskany ekstrakt (antygen) ostrożnie nanosi się wzdłuż ścianek do wszystkich probówek.

Przy pozytywnej reakcji w probówce z homologiczną surowicą na granicy ekstraktu z surowicą tworzy się cienki mlecznobiały pierścień (ryc. 38).

Czwarty dzień badań

Wyniki są rejestrowane (Tabela 25).

Obecnie oznacza się dezoksyrybonukleazę, a także antystreptohialuronidazę, antystreptolizynę-O.

pytania testowe

1. Jakie znasz główne metody badań laboratoryjnych do wykrywania paciorkowców?

2. Do czego służy reakcja wytrącania Lensfielda?

3. Dlaczego antygen powinien być przezroczysty podczas tej reakcji? Opisz technikę inscenizacji tej reakcji.

Otrzymaj od nauczyciela surowicę przeciw paciorkowcom A, B, C, D oraz izotoniczny roztwór chlorku sodu. Ustaw reakcję wytrącania, pokaż wyniki nauczycielowi i narysuj.

Pożywki

agar z krwią(patrz rozdział 7).

Serum Agarowe(patrz rozdział 7).

Hiszpańskie media(suchy).

Mięsna żelatyna peptonowa (MPG). Do 100 ml MPB dodać 10-15 g drobno posiekanej żelatyny. Żelatyna powinna pęcznieć podczas powolnego podgrzewania w łaźni wodnej (w temperaturze 40-50 ° C). Do stopionej żelatyny dodaje się 10% roztwór węglanu sodu (sody oczyszczonej) i pH doprowadza się do 7,0. Następnie jest natychmiast filtrowany przez filtr harmonijkowy. Filtracja jest powolna. Aby przyspieszyć proces, filtrację można przeprowadzić w gorącym autoklawie. Przefiltrowaną pożywkę przelewa się do probówek o pojemności 6-8 ml i sterylizuje. Sterylizację przeprowadza się frakcyjnie w temperaturze 100 ° C przez 3 dni z rzędu lub jednocześnie w 110 ° C przez 20 minut w autoklawie. Chłodzenie medium odbywa się w probówkach ustawionych pionowo.

Przygotowanie mleka. Świeże mleko doprowadza się do wrzenia, umieszcza w chłodnym miejscu na jeden dzień, uwalnia od śmietany, ponownie gotuje. Pozostaw na jeden dzień i usuń górną warstwę. Odtłuszczone mleko filtruje się przez warstwę waty, a następnie alkalizuje 10% roztworem węglanu sodu do pH 7,2 i przelewa do probówek o pojemności 5-6 ml.

Bouillon Martin. Do wody mięsnej dodaje się równą ilość kuny peptonowej (mięso mielone z żołądków wieprzowych narażonych na działanie kwasu solnego). Otrzymaną mieszaninę gotuje się przez 10 minut, alkalizuje 10% roztworem wodorotlenku sodu do pH 8,0, dodaje 0,5 octanu sodu, ponownie gotuje i przelewa do sterylnych naczyń. Do bulionu Martina dodaje się 0,25% glukozy.

Środa Kitt - Tarozzi(patrz rozdział 34).

Streptococcus pneumoniae (pneumokoki)

Pneumokoki zostały po raz pierwszy opisane przez R. Kocha (1871).

Morfologia. Pneumokoki to diplokoki, w których zwrócone do siebie boki komórek są spłaszczone, a przeciwległe boki wydłużone, dzięki czemu mają lancetowaty kształt przypominający płomień świecy (patrz ryc. 4). Rozmiar pneumokoków wynosi 0,75-0,5 × 0,5-1 μm, są one ułożone parami. W płynnych pożywkach często tworzą krótkie łańcuchy, przypominające paciorkowce. Prevmococci są nieruchome, nie mają zarodników, tworzą w ciele torebkę otaczającą oba ziarniaki. Kapsułka zawiera substancję termoodporną antyfaginę (która chroni pneumokoki przed fagocytozą i działaniem przeciwciał). Podczas wzrostu na sztucznych pożywkach pneumokoki tracą kapsułkę. Pneumokoki są Gram-dodatnie. Bakterie Gram-ujemne znajdują się w starych kulturach.

uprawa. Pneumokoki są fakultatywnymi beztlenowcami. Rosną w temperaturze 36-37°C i pH 7,2-7,4. Są wymagające pod względem pożywek, ponieważ nie są w stanie syntetyzować wielu aminokwasów, dlatego rosną tylko na pożywkach z dodatkiem białka natywnego (krew lub surowica). Na agarze z serum tworzą kolonie małe, delikatne, dość przezroczyste. Na agarze z krwią rosną wilgotne zielonkawo-szare kolonie otoczone zieloną strefą, która jest wynikiem przemiany hemoglobiny w methemoglobinę. Pneumokoki dobrze rosną w bulionie z dodatkiem 0,2% glukozy oraz w bulionie z serwatką. Wzrost w pożywkach płynnych charakteryzuje się rozproszonym zmętnieniem i pylącym osadem na dnie.

Właściwości enzymatyczne. Pneumokoki mają dość wyraźną aktywność sacharolityczną. Rozkładają: laktozę, glukozę, sacharozę, maltozę, inulinę z tworzeniem kwasu. Nie fermentować mannitolu. Ich właściwości proteolityczne są słabo wyrażone: koagulują mleko, nie upłynniają żelatyny i nie tworzą indolu. Pneumokoki rozpuszczają się w żółci. Rozszczepianie inuliny i rozpuszczanie w żółci jest ważną cechą diagnostyczną, która odróżnia Streptococcus pneumoniae od Streptococcus pyogenes.

czynniki chorobotwórcze. Pneumokoki wytwarzają hialuronidazę, fibrynolizynę itp.

powstawanie toksyn. Pneumokoki wytwarzają endotoksyny, hemolizynę, leukocidynę. Zjadliwość pneumokoków jest również związana z obecnością antyfaginy w otoczce.

Struktura antygenowa i klasyfikacja. W cytoplazmie pneumokoków znajduje się antygen białkowy wspólny dla całej grupy, aw otoczce antygen polisacharydowy. Według antygenu polisacharydowego wszystkie pneumokoki dzielą się na 84 serowary. Serowary I, II, III są najczęstszymi patogenami dla ludzi.

Odporność na środowisko. Pneumokoki należą do grupy drobnoustrojów niestabilnych. Temperatura 60°C niszczy je w ciągu 3-5 minut. Są dość odporne na niskie temperatury i suszenie. W wysuszonej plwocinie zachowują żywotność do 2 miesięcy. Na pożywce pozostają nie dłużej niż 5-6 dni. Dlatego przy uprawie konieczne jest dosiewanie co 2-3 dni. Konwencjonalne roztwory środków dezynfekcyjnych: 3% fenol sublimowany w rozcieńczeniu 1:1000 niszczą je w kilka minut.

Pneumokoki są szczególnie wrażliwe na optochinę, która zabija je w rozcieńczeniu 1:100 000.

Podatność zwierząt. Człowiek jest naturalnym żywicielem pneumokoków. Jednak pneumokoki mogą powodować choroby u cieląt, jagniąt, prosiąt, psów i małp. Spośród zwierząt doświadczalnych białe myszy są bardzo wrażliwe na pneumokoki.

Źródła infekcji. Chory człowiek i bakterionośnik.

Trasy transmisji. W powietrzu, może być w powietrzu.

Brama wejściowa. Błona śluzowa górnych dróg oddechowych, oczu i uszu.

Choroby u ludzi. Pneumokoki mogą powodować choroby ropno-zapalne o różnej lokalizacji. Specyficzne dla pneumokoków są:

1) płatowe zapalenie płuc;

2) pełzający wrzód rogówki;

Najczęstszą chorobą jest krupowe zapalenie płuc, które dotyczy jednego, rzadziej dwóch lub trzech płatów płuc. Choroba jest ostra, towarzyszy jej wysoka gorączka, kaszel. Zwykle kończy się krytycznie.

Odporność. Po chorobie pozostaje niestabilna odporność, ponieważ zapalenie płuc charakteryzuje się nawrotami.

Zapobieganie. Sprowadza się to do środków sanitarnych i zapobiegawczych. Specyficzna profilaktyka nie została opracowana.

Leczenie. Stosuje się antybiotyki - penicylinę, tetracyklinę itp.

pytania testowe

1. Morfologia pneumokoków. Uprawa i właściwości enzymatyczne.

2. Jakie czynniki determinują patogeniczność pneumokoków i co chroni pneumokoki przed fagocytozą?

3. Jakie są główne bramy zakażenia pneumokokami. Jakie choroby wywołują pneumokoki?

Badania mikrobiologiczne

Cel badania: wykrycie pneumokoków.

Materiał badawczy

1. Flegma (zapalenie płuc).

2. Śluz z gardła (zapalenie migdałków).

3. Wyładowanie z wrzodu (pełzający wrzód rogówki).

4. Wydzielina z ucha (zapalenie ucha środkowego).

5. Ropa (ropień).

6. Punktowy punkt opłucnej (zapalenie opłucnej).

7. Krew (podejrzenie sepsy).

1 (Lepiej jest wziąć poranną plwocinę (przy specyficznym zapaleniu płuc plwocina ma rdzawy kolor).)

Podstawowe metody badawcze

1. Mikroskopijny.

2. Mikrobiologiczne.

3. Biologiczne.

Postęp badań

próbka biologiczna. Trochę (3-5 ml plwociny) emulguje się w sterylnym bulionie, 0,5 ml tej mieszaniny wstrzykuje się dootrzewnowo białej myszy. Po 6-8 godzinach myszy wykazują oznaki choroby. W tym czasie pneumokoki można już wykryć w wysięku z jamy brzusznej. Wysięk pobiera się sterylną strzykawką. Wykonuje się z niego rozmazy, barwi się metodą Grama i bada pod mikroskopem. Aby wyizolować czystą kulturę, wysięk posiewa się na agar z surowicą. Jeśli mysz umrze lub zachoruje, krew jest hodowana z serca na agarze z surowicą w celu wyizolowania czystej kultury. Uprawy są umieszczane w termostacie.

Przyspieszona metoda oznaczania rodzaju pneumokoków(reakcja mikroaglutynacji). 4 krople wysięku z jamy brzusznej zakażonej myszy nakłada się na szkiełko. Surowicę aglutynującą typu I dodaje się do pierwszej kropli, surowicę typu II do drugiej, typu III do trzeciej, a izotoniczny roztwór chlorku sodu (kontrolny) do czwartej.

Surowice typu I i II są wstępnie rozcieńczane w stosunku 1:10, a surowice typu III - 1:5. Wszystkie krople miesza się, suszy, utrwala i barwi rozcieńczoną magentą. Przy pozytywnym wyniku w jednej z kropli odnotowuje się agregację drobnoustrojów (aglutynację).


Drugi dzień badań

Hodowle są wyjmowane z termostatu, badane, az podejrzanych kolonii wykonuje się rozmazy. W przypadku obecności Gram-dodatnich diplokoków lancetowatych w rozmazach, na skosie agarowym z surowicą izolowano 2-3 kolonie w celu uzyskania czystej hodowli. Uprawy są umieszczane w termostacie. Z bulionu sporządza się rozmazy, barwi się metodą Grama i bada pod mikroskopem.

Trzeci dzień badań

Uprawy są usuwane z termostatu. Sprawdź czystość kultury - wykonaj rozmazy, barwienie metodą Grama i mikroskop. Jeśli w wyizolowanej hodowli obecne są Gram-dodatnie diplokoki lancetowate, wyizolowaną hodowlę identyfikuje się poprzez inokulację:

1) na pożywce Hissa (laktoza, glukoza, sacharoza, maltoza) wysiew odbywa się w zwykły sposób - przez wstrzyknięcie do pożywki;

2) na podłożu z inuliną;

3) na pożywce z optochiną;

4) umieść próbkę z żółcią.

Test inuliny. Badaną kulturę wysiewa się na pożywkę zawierającą inulinę i nalewkę lakmusową i umieszcza w termostacie. Po 18-24 godzinach uprawy są usuwane z termostatu. W obecności pneumokoków podłoże zmienia kolor na czerwony (paciorkowce nie zmieniają konsystencji i koloru podłoża).

Oznaczanie wrażliwości na optochinę. Wyizolowaną hodowlę wysiewa się na 10% agarze z krwią zawierającym optochinę 1:50 000. Pneumokoki, w przeciwieństwie do paciorkowców, nie rosną na podłożach zawierających optochinę.

Test żółciowy. 1 ml badanej hodowli bulionowej wlewa się do probówek aglutynacyjnych. Do jednej z nich dodaje się kroplę żółci króliczej, druga probówka służy jako kontrola. Obie probówki umieszcza się w termostacie. Po 18-24 godzinach dochodzi do lizy pneumokoków, co wyraża się w oczyszczeniu mętnego bulionu. W próbie kontrolnej zawiesina pozostaje mętna.

Próbkę z żółcią można umieścić na gęstej pożywce. W tym celu ziarno suchej żółci nakłada się na kolonię pneumokoków hodowanych na płytkach z agarem i surowicą - kolonia rozpuszcza się - znika.

Czwarty dzień badań

Wyniki są rejestrowane (Tabela 26).

Notatka. do - rozkład węglowodanów z tworzeniem kwasu.

Obecnie serologiczne metody badawcze (RSK i RIGA) są szeroko stosowane do oznaczania przeciwciał paciorkowcowych. Określenie grupy i serowaru wyizolowanej hodowli przeprowadza się za pomocą przeciwciał fluorescencyjnych.

Oznaczanie zjadliwości pneumokoków. Codzienną bulionową hodowlę pneumokoków rozcieńcza się 1% wodą peptonową od 10"2 do 10"8, po 0,5 ml każdego rozcieńczenia podaje się dwóm białym myszom. Hodowlę, która spowodowała śmierć myszy przy rozcieńczeniu 10 -7 ocenia się jako zjadliwą, przy rozcieńczeniu 10 -4 -10 -6 uważa się ją za umiarkowanie zjadliwą. Kultura, która nie spowodowała śmierci myszy, jest azjadliwa.

pytania testowe

1. Jakie znasz metody izolowania czystej kultury pneumokoków?

2. Które zwierzę jest najbardziej podatne na pneumokoki?

3. Jakie reakcje poddaje się wysiękowi zakażonej myszy iw jakim celu?

4. Od jakich przedstawicieli ziarniaków ropotwórczych należy różnicować pneumokoki i jakim testem?

5. Jak określić zjadliwość pneumokoków?

Ćwiczenie

Sporządź schemat badania plwociny, wskazując jego etapy w ciągu dnia.

Pożywki

Serum Agarowe(patrz rozdział 7).

Bulion z serwatki(patrz rozdział 7).

agar z krwią(patrz rozdział 7).

Hiszpańskie media(suchy).

Pożywka testowa inuliny. Do 200 ml wody destylowanej dodać 10 ml inaktywowanej surowicy bydlęcej, 18 ml nalewki z lakmusu i 3 g inuliny. Sterylizować przepływającą parą wodną w temperaturze 100°C przez 3 kolejne dni. Bulion żółciowy (patrz rozdział 7).
KATEGORIE
Ekranizacja
USG kończyn
Rodzaje ultradźwięków
USG jamy brzusznej
USG klatki piersiowej

POPULARNE ARTYKUŁY
Negacja nie z czasownikami (w formie osobowej, w bezokoliczniku, w formie gerunda) jest zapisywana osobno: nie bierz, nie było, nie wiedząc, powoli

Negacja nie z czasownikami (w formie osobowej, w bezokoliczniku, w formie gerunda) jest zapisywana osobno: nie bierz, nie było, nie wiedząc, powoli
Prezentacja, przedstaw główne cechy filozofii renesansu

Prezentacja, przedstaw główne cechy filozofii renesansu
Styl fikcyjny

Styl fikcyjny
Dzieci ziemi Prezentacja Jesteśmy dziećmi ziemi dla ogrodu

Dzieci ziemi Prezentacja Jesteśmy dziećmi ziemi dla ogrodu
Prezentacja na temat barier w komunikacji, praca została wykonana przez uczniów.Bez komunikacji zamykamy się w sobie.

Prezentacja na temat barier w komunikacji, praca została wykonana przez uczniów.Bez komunikacji zamykamy się w sobie.

2022 „kingad.ru” - badanie ultrasonograficzne narządów ludzkich