Grzybicze metody mikrobiologicznej diagnostyki grzybic. Diagnostyka laboratoryjna chorób grzybiczych

Diagnostyka laboratoryjna chorób grzybiczych opiera się na wykryciu grzyba oraz określeniu jego rodzaju i gatunku. Składa się z dwóch głównych etapów: badań mikroskopowych i kulturowych.

badanie mikroskopowe

Badanie mikroskopowe jest pierwszym i ważnym ogniwem potwierdzającym wstępne rozpoznanie.

Powodzenie badania mikroskopowego w dużej mierze zależy od prawidłowego pobrania materiału patologicznego. Do badania mikroskopowego należy wybrać włosy, które mają widoczne oznaki uszkodzenia grzyba (matowe, połamane, pogrubione). Zmienione w wyglądzie włosy są usuwane za pomocą pęsety do depilacji. Aby wykryć pojedynczy włos dotknięty mikrosporią, możesz użyć świetlówki z filtrem Wood (zielonkawo-niebieska poświata).

Wybierając dotknięte włosy, można zastosować szereg dodatkowych funkcji. Włosy dotknięte mikrosporami mają u podstawy szarą otoczkę zarodników znajdujących się na zewnątrz. W przewlekłej rzęsistkowicy, w grubości łusek, krótkie, szare, zakrzywione w postaci „przecinków” i „znaków zapytania” dotknięte włosy, a także „czarne kropki” (pogrubione czarne, dotknięte włosy odłamane przy ustach pęcherzyka) znajdują się. W przypadku rzęsistkowicy naciekowo-ropnej do badania mikroskopowego oprócz dotkniętych włosów można zastosować ropę i skorupy ze zmiany.

Ze zmian skórnych z mikrosporią, rzęsistkowicą i grzybicą fałdów pachwinowych należy zeskrobać łuski ze strefy obwodowej zmiany, gdzie grzyb występuje w większej liczbie. Włosy Vellus są zeskrobywane wraz z łuskami skóry.

Podczas badania włosów dotkniętych mikrosporią i rzęsistkowicą zwraca się uwagę na specyfikę lokalizacji zarodników (wewnątrz lub na zewnątrz włosa) i ich wielkość. Dane te pozwalają w niektórych przypadkach wyjaśnić rozpoznanie, postać kliniczną grzybicy oraz epidemiologię.

Przy międzypalcowej postaci grzybicy stóp do badania mikroskopowego wykorzystuje się łuski skórne i skrawki zmacerowanej warstwy rogowej naskórka. Obszar paznokcia, który należy pobrać do badania mikroskopowego, zależy od postaci grzybicy paznokci. Przy powierzchownej formie konieczne jest zeskrobanie z powierzchni płytki paznokcia.

Przy najczęściej występującej postaci dystalno-bocznej stosuje się zeskrobanie z łożyska paznokcia, spod płytki (hiperkeratoza podpaznokciowa) fragmentem odciętej zmienionej płytki paznokcia. W przypadku proksymalnej formy podpaznokciowej stosuje się specjalne metody pobierania materiału (wiercenie okien wiertłem, biopsja paznokcia).

W płaskonabłonkowo-hiperkeratotycznej postaci grzybicy stóp łuski są zeskrobywane z powierzchni podeszwy. W przypadku dyshidrotycznej postaci grzybicy stóp osłony pęcherzy są odcinane do badań.

Technika przygotowania materiału do badania mikroskopowego włosów . Małą kroplę 30% KOH nakłada się na szkiełko i umieszcza się w nim zaatakowane włosy za pomocą igły preparacyjnej. Kroplę z włoskiem lekko podgrzewa się nad płomieniem lampy alkoholowej, aż nad powierzchnią cieczy pojawią się opary lub brzeg kryształków wypadnie wzdłuż krawędzi kropli alkalicznej. Po przykryciu szkiełkiem nakrywkowym nadmiar zasady usuwa się bibułą filtracyjną. Lek bada się najpierw pod małym, a następnie pod dużym (x 400) powiększeniem mikroskopu.

Łuski skóry i paznokci . Cienkie łuski paznokci do badania mikroskopowego umieszcza się na szkiełku podstawowym w kropli 30% KOH i ogrzewa dodając alkalia podczas odparowywania. Schłodzony, niewybarwiony preparat przykrywa się szkiełkiem nakrywkowym i ogląda pod mikroskopem.

Grube łuski skóry i paznokci umieszcza się w probówce wirówkowej i napełnia kilkoma kroplami 30% KOH. Rurkę ogrzewa się do wrzenia i pozostawia na 20-30 minut. Część zmiękczonego materiału przenosi się pałeczką szklaną na szkiełko, dociskając zapałką, aż pojawi się „chmura”, po czym poddaje się ją mikroskopii.

Ropa . Kroplę ropy miesza się z kroplą alkoholu zmieszaną z gliceryną i bada w natywnym preparacie.

Diagnostyka kulturowa

Diagnostyka kulturowa jest przeprowadzana w celu ostatecznego wyjaśnienia diagnozy i wyjaśnienia epidemiologii. Polega na pobraniu kultury grzyba, a następnie badaniu mikroskopowym.

Dotknięte włosy, łuski (skóra i paznokcie), pęcherze lub ropa wysiewa się na sztuczną pożywkę. Pojawienie się gigantycznych kolonii na płytkach Petriego pozwala zorientować się w rodzaju patogenu (Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton), jego rodzaju (L. canis lub ferrugineum, T. violaceum, verrucosum lub gypseum). Ostateczne określenie rodzaju i gatunku grzyba jest możliwe tylko na podstawie badania mikroskopowego powstałej kultury.

Diagnostyka laboratoryjna kandydozy powierzchownej

Do badań laboratoryjnych grzybów drożdżopodobnych potrzebny jest świeży materiał. Do badania mikroskopowego, w zależności od objawów klinicznych i lokalizacji zmian, płatki skórne, zeskrobiny z paznokci, kropla ropy spod wałka paznokciowego, białawe płytki z dotkniętych obszarów błony śluzowej jamy ustnej i zewnętrznych narządów płciowych, ściany pochwy, można pobrać zeskrobiny z błony śluzowej błony cewki moczowej, a także popłuczyny z czerwonej granicy warg, dotkniętych obszarów skóry dużych i małych fałd.

W zależności od umiejscowienia zmiany i charakteru objawów klinicznych materiał do badania pobiera się wacikiem, skalpelem, pętlą itp. Łuski skóry i paznokci, skrawki naskórka i zeskrobane błony śluzowej są wstępnie -traktowane 30% KOH. Materiał patologiczny bada się w preparatach niebarwionych lub barwionych.

W pierwszym przypadku materiał miesza się z równą ilością alkoholu z gliceryną. Po wybarwieniu metodą Grama komórki drożdży i pseudomycelium wyglądają na ciemnofioletowe, według Ziehla-Neelsena na niebiesko, a według Romanovsky'ego-Giemsy na różowo-fioletowo. W tym samym czasie pączkuje cecha charakterystyczna komórki drożdży - odkrycie figury klepsydry. Pobieranie materiału z błony śluzowej jamy ustnej, narządów płciowych, skóry czerwonej obwódki warg, kącików ust, skóry dużych i małych fałd przeprowadza się sterylnym wacikiem. Wymazówkę po pobraniu materiału umieszcza się w kolejnej sterylnej probówce z płynną brzeczką. Probówka wraz z wymazówką jest wysyłana do laboratorium mikrobiologicznego. Izolację czystej kultury grzybów drożdżopodobnych z rodzaju Candida przeprowadza się zgodnie z ogólnie przyjętą metodą mikrobiologiczną.

Pierwsza recepcja

Na spotkaniu mikolog przeprowadza badanie, a także zaleca kompleksowe badanie.

Diagnostyka laboratoryjna

Najskuteczniejszymi metodami diagnozowania grzybic skóry są różnorodne badania laboratoryjne, które mogą zidentyfikować patogen i pomóc w doborze schematu terapii. Aby zidentyfikować czynnik sprawczy grzybicy, zaleca się następujące testy laboratoryjne:

• analiza histologiczna;
• kultura bakteriologiczna;
• badania immunologiczne;
• diagnostyka PCR;
• badanie kulturowe;
• badania mikrobiologiczne.

Diagnostyka mikrobiologiczna pomaga wykryć grzyba, określić jego rodzaj i gatunek.

Diagnostyka mikrobiologiczna jest najpowszechniejszą i najprostszą metodą wykrywania grzybicy we krwi i na skórze. Aby ustalić trafną diagnozę, należy wiedzieć, jak prawidłowo zebrać materiał, który jest potrzebny w badaniu. Dotknięte włosy należy zebrać pęsetą. Jeśli skóra jest zainfekowana, to do mikroskopii należy zeskrobać skórę z uszkodzonego obszaru. Cały pobrany materiał umieszcza się w 30% roztworze wodorotlenku potasu, a następnie na szkiełku podstawowym. Diagnostyka mikrobiologiczna jest w stanie dokładnie określić miejsce występowania grzyba (wewnątrz lub na zewnątrz włosów, skóry) oraz jego wielkość.

Aby zapobiec błędnemu rozpoznaniu grzybicy, konieczne jest prawidłowe i kompetentne pobranie materiału do badania mikrobiologicznego.

W medycynie istnieją takie metody diagnostyki mikrobiologicznej:

• Mikroskopia przy użyciu preparatów natywnych lub niebarwionych. W tym celu materiał klaruje się 10-30% roztworami wodorotlenku potasu lub sodu. Następnie przetworzony materiał umieszcza się na szkle laboratoryjnym, na który wcześniej wkroplono odrobinę gliceryny. Przykryć górną płytką szklaną i przeprowadzić analizę.
• Mikroskopię wybarwionych preparatów przeprowadza się na kilka sposobów, które identyfikują bakterie, różnicują różne bakterie i identyfikują różne grzyby.

Kultura bakteriologiczna

Posiew bakteriologiczny jest jedną z najskuteczniejszych metod diagnostycznych.

Pobranie posiewu bakteriologicznego na pożywkę jest dokładnym sposobem diagnozowania grzybicy. Biorąc pod uwagę wygląd i cechy wyhodowanej kolonii grzyba, dermatolog określa rodzaj patogenu, który spowodował grzybicę. Jedyną wadą badania jest to, że wyhodowanie kolonii zajmuje dużo czasu. Średnio znalezienie szczepu patogenu zajmuje około 3 tygodni. W niektórych przypadkach metoda nie przynosi oczekiwanych rezultatów.

Diagnostyka PCR

Metoda diagnostyczna PCR polega na identyfikacji czynnika wywołującego grzybicę za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy. W trakcie badania wzrasta czułość hybrydyzacji, co zwiększa zawartość wirusowego DNA w badanym materiale. Ta metoda badania jest nowa i wymaga od pacjenta wykonania kilku testów. Uważa się, że tego typu diagnostyka jest dość droga, ale daje dokładne wyniki.

Badanie kulturowe

Kulturowe środki diagnostyczne są zalecane na końcowym etapie diagnozy. Metoda polega na uzyskaniu kultury grzyba, którą następnie przesyła się do badania pod mikroskopem. Otrzymany materiał umieszcza się na sztucznie stworzonej pożywce i identyfikuje się rodzaj patogenu, wygląd, wielkość. Następnie pokazano specjalne leczenie, którego celem jest zwalczanie określonego rodzaju czynnika wywołującego grzybicę.

Precyzyjna diagnostyka grzybic inwazyjnych niełatwe. Wynika to nie tylko z trudności w uzyskaniu hodowli grzybów, ale również w interpretacji wyników badań, gdyż grzyby, zarówno drożdżowe, jak i grzybniowe, mogą kolonizować błony śluzowe i zanieczyszczać badane próbki. W tym zakresie diagnostyka grzybic inwazyjnych opiera się na podejściu zintegrowanym, obejmującym nie tylko wyniki badań mikologicznych (kulturowych) i serologicznych (oznaczenie antygenu grzybiczego), ale także objawy kliniczne zakażenia grzybiczego, dane z badań pomocniczych metodami (komputerowy lub rezonans magnetyczny, ultrasonografia).

Europejsko-Amerykańska Grupa Spółdzielcza do badania inwazyjnych grzybic u pacjentów z obniżoną odpornością opracowano kryteria rozpoznania grzybic inwazyjnych. Zostały one zaprezentowane w 2001 roku na Międzynarodowej Konferencji na temat Środków Przeciwdrobnoustrojowych i Chemioterapii (ICAAC, Chicago), aw 2002 roku w druku. Określono kryteria potwierdzonej, prawdopodobnej i możliwej inwazyjnej grzybicy, które są zalecane do stosowania w badaniach klinicznych i epidemiologicznych.

Udowodniona inwazyjna grzybica wywołana przez grzyby nitkowate: wykrycie grzybni grzybni w wycinkach biopsyjnych lub aspiratach podczas badania histologicznego lub cytologicznego lub izolacja hodowli z próbek pobranych w warunkach aseptycznych z ogniska normalnie sterylnego, co zgodnie z wynikami badań klinicznych i radiologicznych wiąże się z zakażeniem, z z wyjątkiem badań moczu i błon śluzowych.

Udowodniona inwazyjna grzybica wywołana przez drożdżaki: wykrywanie komórek drożdży (grzyby z rodzaju Candida mogą tworzyć grzybnię pseudomycelium lub grzybnię prawdziwą) w próbkach biopsyjnych lub aspiratach, z wyjątkiem próbek z błon śluzowych, lub izolowanie kultur z próbek pobranych w warunkach aseptycznych z ogniska normalnie sterylnego, które, zgodnie z wynikami badań klinicznych i radiologicznych, związane z infekcją, z wyjątkiem próbek moczu, zatok i błon śluzowych, lub wykrycia za pomocą mikroskopii i specyficznego barwienia (w kropli atramentu, plamie mucykarminowej) komórek drożdży lub pozytywnego antygenu Cryptococcus spp. w płynie mózgowo-rdzeniowym.

Fungemia wywołana przez grzyby nitkowate: izolacja hemokultur grzybów, z wyjątkiem Aspergillus spp. i Penicillium spp., w tym Penicillium marneffei, w połączeniu z objawami klinicznymi procesu zakaźnego zgodnymi z wyizolowanym patogenem.

Fungemia wywołana przez drożdżaki: Izolacja posiewu krwi grzybów z rodzaju Candida lub innych grzybów drożdżakowych u pacjentów z klinicznymi objawami zakażenia tym patogenem.

Zestaw badań diagnostycznych w kierunku grzybic inwazyjnych

Badany biomateriał	Wskazania, użyte media, wartość
Krew	Wskazania: uporczywa gorączka (4-5 dni lub dłużej) na tle antybiotykoterapii o szerokim spektrum działania; druga „fala” gorączki na tle antybiotykoterapii Pobieranie krwi z żyły do ​​fiolek na obecność bakterii tlenowych* lub w pożywce selektywnej dla grzybów, powtarzane (2-3 razy w ciągu dnia w odstępie 1 godziny) Wartość diagnostyczna: izolacja grzybów drożdżowych, ostrożna interpretacja podczas izolacji grzybów nitkowatych z wyjątkiem Fusarium spp.
Cewnik żylny	Wskazania: izolacja drożdży z krwi Centralny lub obwodowy cewnik żylny jest usuwany we wszystkich przypadkach izolacji drożdżaków z krwi Do badania mykologicznego wykorzystuje się aseptycznie usunięty dystalny odcinek cewnika o długości 5–6 cm. Wartość diagnostyczna: izolacja grzybów drożdżakowych w badaniu półilościowym 15 jtk lub więcej, w badaniu ilościowym - 103 jtk/ml lub więcej w celu potwierdzenia rozpoznania zakażenia odcewnikowego lub zakażenia cewnika
Wydzieliny z górnych dróg oddechowych, plwocina, wymazy z tchawicy i oskrzeli, płyn z popłuczyn oskrzelowo-pęcherzykowych	Wskazania: podejrzenie grzybicy wywołanej przez grzyby nitkowate lub Cryptococcus neoformans; przedłużająca się gorączka podczas antybiotykoterapii o szerokim spektrum działania i neutropenia Mikroskopia próbek bielą kalkofluorową (wykrywanie grzybni lub grzybni rzekomej); zaszczepienie na podłożu Sabourauda; oznaczanie antygenu Aspergillus w popłuczynach oskrzelowo-pęcherzykowych w obecności ognisk w płucach charakterystycznych dla inwazyjnej aspergilozy Wartość diagnostyczna: izolacja grzybów nitkowatych lub Cryptococcus neoformans
Płyn mózgowo-rdzeniowy	Wskazania: objawy zapalenia opon mózgowych; wykrycie ogniska (ogniska) w mózgu za pomocą obrazowania komputerowego lub rezonansu magnetycznego; Objawy „mózgowe” na tle gorączki i neutropenii Mikroskopia z białym kalkofluorem w kropli atramentu; oznaczanie antygenu Aspergillus, Cryptococcus; zaszczepienie na podłożu Sabourauda Wartość diagnostyczna: wykrywanie grzybów, zarówno drożdżakowych, jak i grzybni; pozytywny antygen
Biopsje, aspiraty, płyn otrzewnowy, płyn opłucnowy	Wskazania: kliniczne i/lub radiologiczne objawy inwazyjnej grzybicy; gorączka podczas leczenia antybiotykami o szerokim spektrum działania. Mikroskopia z białym kalkofluorem, inokulacja na podłożu Sabourauda Wartość diagnostyczna: wykrywanie grzybów, zarówno drożdżakowych, jak i nitkowatych

* Częstość izolacji grzybów z krwi była identyczna w początkowym pobraniu krwi zarówno w fiolkach z pożywką hodowlaną do hodowli bakterii, jak iz pożywką selekcyjną dla grzybów. Badania przeprowadzono na analizatorze bakteriologicznym VASTES 9240.

Prawdopodobna grzybica inwazyjna zdiagnozowano za pomocą kombinacji następujących kryteriów:
jeden znak z kategorii kryteriów mikrobiologicznych;
jeden objaw z kategorii „istotne” lub dwa z grupy „mniej istotnych” objawów klinicznych procesu zakaźnego.

Możliwa inwazyjna grzybica zdiagnozowana na podstawie kombinacji następujących kryteriów:
obecność co najmniej jednego czynnika ryzyka indukującego rozwój grzybicy inwazyjnej;
jeden objaw z kategorii kryteriów mikrobiologicznych lub jeden objaw z kategorii „istotne” (dwa z grupy „mniej istotne”) objawy kliniczne procesu zakaźnego.

koncepcja „ możliwa inwazyjna grzybica» nie jest zalecany do stosowania w badaniach klinicznych oceniających skuteczność leków przeciwgrzybiczych. Terminu tego można używać w analizie empirycznej terapii przeciwgrzybiczej, badaniach epidemiologicznych, badaniach farmakoekonomicznych.

Na badania mikologiczne sterylne aspiraty lub próbki biopsyjne uwzględniają nie tylko izolację hodowli grzybów, ale także wykrywanie grzybni lub grzybni rzekomej pod mikroskopem. W preparatach histologicznych Aspergillus jest trudny do odróżnienia od Fusarium spp., Sceclosporium apiospermum i niektórych innych grzybów nitkowatych. W diagnostyce różnicowej należy wykonać badanie immunohistochemiczne z użyciem przeciwciał przeciwko aspergillus.

Izolacja grzybów drożdżowych z krwi w co najmniej jednym badaniu należy do kategorii „sprawdzonej” inwazyjnej grzybicy i jest bezwzględnym wskazaniem do powołania ogólnoustrojowych leków przeciwgrzybiczych u pacjentów z neutropenią. Częstotliwość wykrywania grzybów drożdżakowych we krwi jest niska, nawet przy rozsianej kandydozie wynosi 35-50%.
Trzymać powtarzane posiewy krwi zwiększa prawdopodobieństwo uzyskania pozytywnych wyników.

Inny interpretacja wyniki w przypadku wykrycia grzybów strzępkowych we krwi. Wysoka częstość izolacji grzybów nitkowatych jest charakterystyczna dla Fusarium spp. i wynosi 40-60%. Aspergillus występuje niezwykle rzadko, w większości przypadków jest uważany za skażenie, z wyjątkiem Aspergillus terreus.

Wybór Aspergillus terreus z krwi pacjentów z hemoblastozami może świadczyć o prawdziwej aspergilemii, aw obecności klinicznych objawów infekcji jest podstawą do przepisywania leków przeciwgrzybiczych.

Kryteria inwazyjnej grzybicy

Indeks	Kryteria
Czynniki indukujące występowanie inwazyjnej grzybicy (makroorganizm)	neutropenia (< 0,5*109/л в течение 10 дней) Utrzymująca się gorączka przez ponad 96 godzin po antybiotykach o szerokim spektrum działania Temperatura ciała powyżej 38°C lub poniżej 36°C i którykolwiek z następujących objawów predysponujących: przedłużająca się neutropenia (powyżej 10 dni) w ciągu ostatnich 60 dni, intensywna terapia immunosupresyjna w ciągu ostatnich 30 dni, potwierdzona lub prawdopodobna inwazyjna grzybica w ciągu ostatnich 60 dni okresowa neutropenia lub AIDS Obecność objawów GVHD, zwłaszcza przypadków ciężkiego przebiegu (stopień II) lub rozległego przebiegu choroby przewlekłej Długotrwałe (powyżej 3 tygodni) stosowanie glikokortykosteroidów w ciągu ostatnich 60 dni
Objawy mikrobiologiczne	Izolacja kultur grzybów strzępkowych (w tym Aspergillus spp., Fusaruim spp., Sceclosporium spp. i Zygomycetes) oraz Cryptococcus neqformans z plwociny lub popłuczyn oskrzelowo-pęcherzykowych Dodatnie wyniki posiewu lub badania cytologicznego (mikroskopia bezpośrednia) w kierunku wykrycia grzybów nitkowatych z aspiratów zatok przynosowych Wykrywanie grzybów nitkowatych lub Cryptococcus neoformans w cytologii/mikroskopii bezpośredniej z plwociny lub popłuczyn oskrzelowo-pęcherzykowych Dodatni antygen Aspergillus w popłuczynach oskrzelowo-pęcherzykowych, płynie mózgowo-rdzeniowym i próbkach krwi (co najmniej dwie) Pozytywny antygen Cryptococcus w próbkach krwi Wykrywanie za pomocą cytologii lub bezpośredniej mikroskopii elementów grzybów w próbkach normalnie sterylnych płynów (np. Cryptococcus spp. w płynie mózgowo-rdzeniowym) Dwa pozytywne wyniki testu na wykrycie hodowli drożdży w moczu przy braku cewnika moczowego Kryształy Candida w moczu bez cewnika moczowego Izolacja Candida spp. z posiewów krwi
Objawy kliniczne dolne drogi oddechowe	Musi być powiązany z miejscem, z którego pobrano próbki do badań mikrobiologicznych Dowolny z następujących typów nowych nacieków w płucach w TK: objaw halo, znak półksiężyca, jama z obszarami konsolidacji* Objawy zakażenia dolnych dróg oddechowych (kaszel, ból w klatce piersiowej, krwioplucie, duszność), tarcie opłucnej, jakikolwiek nowy naciek nie zaliczany do cech o dużym znaczeniu; wysięk opłucnowy
górne drogi oddechowe Znaki o dużym znaczeniu Znaki o mniejszym znaczeniu	Objawy radiologiczne inwazyjnego zakażenia zatok nosa (erozja ściany lub rozprzestrzenienie się zakażenia na sąsiednie struktury, rozległe zniszczenia kości czaszki) Katar, przekrwienie błony śluzowej nosa, owrzodzenie nosa, krwawienie z nosa, obrzęk okołooczodołowy, ból szczęki, czarne martwicze owrzodzenie lub perforacja podniebienia twardego
ośrodkowy układ nerwowy Znaki o dużym znaczeniu Znaki o mniejszym znaczeniu	Rentgenowskie potwierdzenie podejrzenia zakażenia OUN (zapalenie wyrostka sutkowatego lub inne ognisko okołooponowe, ropniak nadtwardówkowy, mnogie zmiany w istocie mózgu lub rdzenia kręgowego) Ogniskowe objawy i oznaki neurologiczne, w tym napady ogniskowe, niedowład połowiczy; zaburzenia świadomości, objawy oponowe, naruszenia składu biochemicznego płynu mózgowo-rdzeniowego i jego składu komórkowego (przy braku innych patogenów, zgodnie z hodowlą i mikroskopem, przy braku komórek nowotworowych)

*W przypadku braku zakażenia wywołanego przez mikroorganizmy zdolne do wywołania podobnego obrazu radiologicznego, w tym tworzenia się próchnicy (Mycobacterium spp., Legionella spp., Nocardia spp.).

Na wykrycie we krwi lub innych sterylnych biosubstratów grzybów drożdżakowych należy przeprowadzić identyfikację gatunkową i określić wrażliwość na leki przeciwgrzybicze, przy izolacji grzybów nitkowatych (pleśniowych) - tylko identyfikację gatunkową, wrażliwości nie określa się.

W klinice ćwiczyć wrażliwość grzybów strzępkowych nie jest badana ze względu na niedoskonałość standardów oznaczania wrażliwości tych grzybów na środki przeciwgrzybicze. Co więcej, tylko jedno badanie wykazało korelację między Aspergillus spp. oraz wyniki leczenia inwazyjnej aspergilozy u chorych na hemoblastozy. Żadne z późniejszych badań nie przyniosło podobnych wyników.

Ostatnio zaczęły pojawiać się pojedyncze doniesienia o powstawaniu nabytej oporności grzybów A. fumigatus na itrakonazol, worykonazol.

Identyfikacja grzybów do gatunków, szczególnie uzyskany ze sterylnych loci, jest niezbędny przede wszystkim do wyboru leku przeciwgrzybiczego i odpowiedniej terapii przeciwgrzybiczej. Zatem Candida krusei są oporne na flukonazol i mniej wrażliwe niż inne gatunki drożdży na amfoterycynę B; Aspergillus terreus, Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii), Trichosporon beżowy, Scopulariopsis spp. oporny na amfoterycynę B; Mucorales są oporne na itrakonazol, worykonazol, Candida glabrata wykazuje zależną od dawki wrażliwość na flukonazol, a w przypadku wyizolowania tego rodzaju grzybów, nawet szczepów wrażliwych, należy zwiększyć dawkę flukonazolu (dorosłym przepisuje się 800 mg zamiast 400 mg) ; Candida lusitaniae są oporne na amfoterycynę B.

Identyfikacja grzybów do gatunków ma również znaczenie dla analizy epidemiologicznej w szpitalu – określenia czynników wywołujących ogniska zakażenia iw miarę możliwości źródła zakażenia. Opisano ogniska infekcji wywołanych przez tak rzadkie grzyby jak C. lusitaniae, C. krusei, C. lipolytica.

Na podstawie Identyfikacja gatunkowa grzybów można założyć inwazyjną grzybicę lub zasiedlenie błon śluzowych przez grzyby. Na przykład Aspergillus niger znacznie rzadziej niż Aspergillus fumigatus powoduje inwazyjną aspergilozę u pacjentów z ostrą białaczką. Izolacja Aspergillus niger z popłuczyn oskrzelowo-pęcherzykowych najczęściej uważana jest za kolonizację dróg oddechowych, a z plwociny za zanieczyszczenie powietrza i wymaga dodatkowych badań w celu potwierdzenia rozpoznania inwazyjnej aspergilozy.

Na podstawie izolacja grzybów nitkowatych z plwociny, płynu oskrzelowo-pęcherzykowego, aspiratu z zatok przynosowych można jedynie domniemywać grzybicę inwazyjną, nie zaliczając jej do kategorii „sprawdzonych”. Należy jednak zawsze brać pod uwagę wykrycie Aspergillus w plwocinie, zwłaszcza Aspergillus fumigatus lub Aspergillus flavus, u pacjentów z neutropenią otrzymujących allogeniczny szpik kostny. Wymaga to powtórnego badania mikologicznego i tomografii komputerowej płuc. Tak więc, w przypadku neutropenii, prawdopodobieństwo wykrycia inwazyjnej aspergilozy w przypadku dodatniego posiewu Aspergillus spp. w plwocinie wynosi 80%.

Wybór Cryptococcus neoformans u pacjentów z obniżoną odpornością ze strony dróg oddechowych (wymywanie, płukanie) ma znaczenie diagnostyczne. Jeśli identyfikacja grzybów drożdżakowych w płynach pobranych z dróg oddechowych (popłuczyny z tchawicy, oskrzeli, popłuczyn oskrzelowo-pęcherzykowych) pacjentów z obniżoną odpornością nie jest obowiązkowa, konieczne jest wykonanie badań przesiewowych na obecność Cryptococcus neoformans w tych próbkach.

Wykrywanie Candida w moczu u pacjentów z neutropenią i gorączką uważa się ją zwykle za przejaw rozsianej infekcji drożdżakowej.

W odpowiednim czasie diagnostyka inwazyjne z powodzeniem wykorzystują komercyjny test do wykrywania krążącego specyficznego antygenu grzybów Aspergillus spp. galaktomann (polisacharyd rozpuszczalny w wodzie składnik ściany komórkowej grzyba).

Galaktomann można oznaczyć dwiema metodami: aglutynacją lateksową (Pastorex Aspergillus, BioRAD) i immunoenzymatycznym (Platelia Aspergillus, BioRAD).

korzyść test immunoenzymatyczny to dolny próg czułości oznaczania poziomu galaktomannanu we krwi – 1 ng/ml lub mniej, a przy użyciu aglutynacji lateksowej – 15 ng/ml. Wartością diagnostyczną jest oznaczenie galaktomannanu we krwi (co najmniej 2 próbki), płynie mózgowo-rdzeniowym, popłuczynach oskrzelowo-pęcherzykowych. Czułość metody immunoenzymatycznej wynosi około 90%, swoistość 90-99%, u allogenicznych biorców szpiku kostnego wartości te są niższe i wynoszą odpowiednio 60-70% i 80-90%, ze względu na profilaktyczne stosowanie leki przeciwgrzybicze (leki przeciwgrzybicze obniżają progowy poziom galaktomanu).

W 40% przypadków wykrycie galaktomann we krwi przed objawami inwazyjnej aspergilozy, stwierdzonymi komputerowym badaniem płuc, aw 70% przed klinicznymi objawami infekcji.

Wartość diagnostyczna testu wykrywającego antygen kropidlak ma w przypadku, gdy badanie jest przeprowadzane wielokrotnie. Oznaczanie antygenu Aspergillus we krwi należy przeprowadzać z gorączką podczas leczenia antybiotykami o szerokim spektrum działania u pacjentów z neutropenią 2 razy w tygodniu; z zapaleniem płuc, które występuje lub utrzymuje się na tle antybiotykoterapii; po wykryciu ognisk w tkance płucnej (tomografia komputerowa).

Częstym problemem są choroby wywołane przez grzyby lub infekcje grzybicze. Istnieje niesamowita liczba czynników sprawczych grzybic.

Każdego roku naukowcy odkrywają i opisują nowe rodzaje grzybów. Mimo to diagnostyka i leczenie grzybic jest od dawna ugruntowanym i jasnym mechanizmem.

Rodzaje chorób grzybiczych

U ludzi większość grzybów atakuje błony śluzowe i skórę.

Do chorób, w których przyczyną rozwoju choroby są grzyby, należą:

• liszaj obrączkowy
• kandydoza
• grzybica paznokci
• barwny lub pityriasis, versicolor
• czarny porost
• łojotok
• aspergiloza

Metody diagnozowania grzybic

Jedną z najpopularniejszych metod jest diagnostyka mikrobiologiczna grzybic.

Nowoczesne metody diagnostyczne pozwalają dokładnie określić, który grzyb był przyczyną choroby. W przyszłości daje to możliwość wyboru optymalnego przebiegu leczenia. Obecnie istnieją trzy główne metody laboratoryjnej diagnostyki grzybic.

Obejmują one:

• mikroskopijny
• kulturalny
• serologiczny

Każda z metod ma swoje zalety. Diagnostyka kulturowa grzybic pozwala określić rodzaj grzybów. W tym przypadku możliwa jest ocena wrażliwości kolonii na różne leki.

Taka metoda pozwoli dobrać skuteczny lek. Ta metoda wymaga dużo czasu na wysiew i wyhodowanie kolonii.

Mikroskopowe i serologiczne metody diagnozowania grzybic wymagają mniej czasu do przeprowadzenia. Podczas ich stosowania określa się również rodzaj patogenu, ale nie można sprawdzić jego wrażliwości na leki. W niektórych przypadkach możliwe jest zastosowanie luminescencyjnej metody diagnostycznej. Ta metoda jest mniej popularna ze względu na swoją złożoność.

Metodę luminescencyjną można stosować tylko wtedy, gdy włosy są zaatakowane przez grzyby. Metoda jest nieskuteczna we wczesnej diagnostyce. Wynika to z faktu, że efekt glow pojawi się dopiero wtedy, gdy włosy zostaną mocno zniszczone przez grzybicę.

Diagnostyka grzybicy stóp

Grzybica stóp jest jedną z najczęstszych dermatomykoz.

Termin ten jest powszechnie rozumiany jako grzybica skóry stóp i paznokci.

Pamiętać! Choroba ma przebieg nawracający.

Podczas diagnozowania grzybicy stóp konieczne jest różnicowanie z wieloma innymi chorobami. Rozpoznanie grzybicy stóp opiera się na obrazie klinicznym i badaniu mikroskopowym. Możliwe jest zastosowanie metody kulturowej.

Leczenie grzybic

Wiodącą rolę w leczeniu grzybic odgrywają leki przeciwgrzybicze o działaniu miejscowym i ogólnoustrojowym.

Leczenie miejscowymi lekami przeciwgrzybiczymi jest kierowane bezpośrednio na ognisko choroby. Jednocześnie negatywny wpływ na organizm jako całość jest minimalny.

Leki przeciwgrzybicze o działaniu ogólnoustrojowym są przepisywane, jeśli:

• miejscowe leki przeciwgrzybicze są nieskuteczne
• choroba ma charakter ogólnoustrojowy

Leki odczulające i przeciwhistaminowe są przepisywane, gdy grzybicy towarzyszy proces zapalny lub reakcje alergiczne. Jeśli wtórna infekcja łączy się z grzybicą, można przepisać leki przeciwbakteryjne.

Leczenie chorób grzybiczych należy rozpocząć we wczesnych stadiach choroby. Jeśli proces jest stary, gojenie może potrwać dłużej.

Kiedy pojawią się pierwsze objawy, natychmiast zwróć się o pomoc do naszego lekarza.

Według naukowców 70% światowej populacji ma objawy grzybicy stóp. W przypadku tej choroby cierpią fałdy międzypalcowe i skóra na podeszwach. Przyczyną choroby jest grzyb, który pierwotnie występował tylko na ograniczonych obszarach południowo-wschodniej Azji i Afryki. Pierwsza wojna światowa, powodując masowe migracje ludności i pogorszenie warunków sanitarnych, doprowadziła do rozprzestrzenienia się choroby na cały świat.

Co powoduje stopę sportowca

Głównym czynnikiem sprawczym choroby jest Trichophyton rubrum. T. mentagrophytes i Epidermophyton floccosum mogą powodować uszkodzenia. Znacznie rzadziej grzyby z rodzaju Candida i mikroorganizmy pleśniowe mogą stać się drobnoustrojami chorobotwórczymi.

Najważniejsze czynniki ryzyka choroby:

• cukrzyca;
• stan niedoboru odporności (AIDS);
• płaskostopie;
• miażdżyca tętnic obwodowych;
• żylaki kończyn dolnych.

Warunki zewnętrzne sprzyjające rozwojowi infekcji:

• zamknięte niehigroskopijne buty;
• urazy stóp (odciski, otarcia);
• Sporty.

Objawy grzybicy stóp występują najczęściej u dorosłych mężczyzn. Dzieci rzadko chorują.

Objawy stopy sportowca

Wraz z rozwojem choroby pojawia się łuszczenie i suchość skóry, swędzenie i pieczenie, szczególnie w przestrzeniach międzypalcowych, pojawiają się bolesne pęknięcia pod palcami. Czasami pierwszymi objawami grzybicy stóp są pęcherzyki, które pękają wraz z powstawaniem nadżerek. Często choroba przebiega w wymazanej formie, objawiając się jedynie lekkim łuszczeniem, przypominającym mąkę, w fałdach między palcami.

Wyróżnia się 4 postacie kliniczne choroby.

Najczęstszy jest wariant międzypalcowy lub wyprzeniowy. Skóra między palcami staje się czerwona, pęka, warstwa powierzchniowa staje się wilgotna i łuszczy się. Objawy te rozciągają się na podeszwę, czemu towarzyszy silne swędzenie i pieczenie. Często wiąże się z zapaleniem bakteryjnym.

Wariant płaskonabłonkowo-hiperkeratotyczny wiąże się z wyraźnym zgrubieniem i pękaniem skóry. Podeszwa jest czerwona i łuszcząca się. W okolicy pięty pojawiają się głębokie bolesne pęknięcia, swędzenie jest zwykle nietypowe. Często jest to zmiana obustronna, nazywana jest również „stopą mokasynową”.

Wariancie dyshidrotycznemu towarzyszy pojawienie się wielu małych, swędzących, bolesnych pęcherzy. Łączą się ze sobą, tworząc duże bąbelki. Pokrywy pęcherzy pękają, odsłaniając błyszczącą, wrażliwą, bolesną powierzchnię – nadżerki. Objawy zewnętrzne przypominają egzemę.

Często zapalenie bakteryjne łączy się ze wzrostem pachwinowych węzłów chłonnych, gorączką, bólem nóg, nudnościami, bólem głowy i innymi objawami zatrucia. W przypadku postaci dyshidrotycznej często występuje alergia na grzyby - wyprysk grzybiczy. Towarzyszą mu wysypki na obszarach ciała, które nie są zakażone grzybem, na przykład na rękach.

Wymazana wersja zwykle przebiega niepostrzeżenie. Towarzyszy temu lekkie złuszczanie się skóry między kciukiem a palcem wskazującym i/lub serdecznym i małym palcem na nodze. Swędzenie jest nieobecne.

Oznaki stopy sportowca

Różne rodzaje grzybicy stóp mogą być niezależnymi chorobami lub występować w ramach ogólnego zakażenia grzybiczego organizmu. Czasami pojawia się znak "dwie nogi - jedna ręka" z zajęciem tych narządów. Może dołączyć grzybica paznokci - grzybicze zniszczenie paznokcia. Czasami fałdy pachwinowe cierpią w tym samym czasie.

Główne objawy i leczenie grzybicy stóp pokazano na zdjęciu:

łuszczenie się skóry

Suchość i pękanie skóry

Pęcherzyki i erozja

Diagnostyka

Doświadczony dermatolog już podczas pierwszego badania może rozpoznać różne rodzaje grzybicy stóp. Jednak do potwierdzenia diagnozy konieczne jest badanie mikroskopowe. W tym celu stosuje się łuski ze zmiany, zeskrobuje szpachelką i traktuje roztworem alkalicznym. Otrzymany materiał jest badany pod mikroskopem i wykrywane są patogeny.

Mikroskopia bezpośrednia jest szybka, tania i łatwa do wykonania, ale nie określa, który rodzaj grzyba spowodował chorobę. Dlatego materiał wysiewa się na pożywce, po czym następuje badanie kulturowe uzyskanego materiału. Jednak uzyskanie kultury grzyba po jego wykryciu pod mikroskopem jest możliwe tylko w 20–6% przypadków.

Rodzaje leczenia grzybicy stóp

Leki stosowane w leczeniu chorób grzybiczych powinny być przepisywane przez dermatologa. Zwykle leczenie grzybicy stóp odbywa się za pomocą czynników zewnętrznych.

Jednym ze skutecznych leków na tę chorobę jest klotrimazol. W naszym sklepie kupisz go w niskiej cenie. Lek w postaci lotionu Clotrimazol do paznokci i skóry hamuje namnażanie się grzybów w grubości warstwy rogowej nabłonka. W przypadku zmian w fałdach międzypalcowych balsam nakłada się codziennie na czystą, suchą skórę stóp przez tydzień, w razie potrzeby dłużej.

Przy silnym rogowaceniu i pękaniu skóry konieczne jest przede wszystkim wyeliminowanie martwych złogów naskórka. Wymaga to stosowania leków złuszczających. Na przykład przepisać maść salicylową, kremy z kwasem mlekowym lub mocznikiem. Po usunięciu zrogowaciałych złogów balsam stosuje się 1-2 razy dziennie.

W przypadku wariantu dyshidrotycznego na pierwszym etapie konieczne jest ograniczenie płaczu. W tym celu stosuje się płyny z taniną lub kwasem borowym. W ciężkich przypadkach do leczenia dodaje się glikokortykosteroidy. Następnie zastosuj balsam Clotrimazol w zwykły sposób.

W wymazanej postaci stopy są leczone balsamem raz dziennie przez 7 do 10 dni, ale czas trwania kursu jest indywidualny i określany przez lekarza.

Terapia systemowa

W przypadku długotrwałej lub nawracającej grzybicy stóp może być konieczne przyjmowanie leków przeciwgrzybiczych doustnie. Przechodzą z przewodu pokarmowego do krwioobiegu, a następnie do skóry, gdzie niszczą grzyby. Stosowane są trzy główne leki:

• flukonazol;
• itrakonazol;
• terbinafina.

Czas przyjmowania tych środków wynosi co najmniej miesiąc. Ich cena jest dość wysoka. Dlatego zapobieganie grzybicy stóp jest zawsze łatwiejsze i bardziej opłacalne niż jej leczenie.

Leki ogólnoustrojowe są szczególnie często przepisywane, jeśli grzyb wpłynął nie tylko na skórę, ale także na paznokcie. W takim przypadku leki gromadzą się w rosnącej części płytki paznokcia, a zdrowy paznokieć stopniowo rośnie. Aby poprawić efekt, paznokieć można całkowicie usunąć chirurgicznie, po czym zostaje przywrócony bez grzyba.

Szczególnie często konieczne jest połączenie usuwania paznokci, ogólnoustrojowej i miejscowej terapii przeciwgrzybiczej u pacjentów w podeszłym wieku. W tej grupie pacjentów paznokcie często rosną wolno, krążenie krwi w stopach jest zaburzone, dlatego do uzyskania efektu potrzebne są duże dawki leków i długi cykl leczenia.

Leczenie środkami ludowymi

Używanie wyłącznie receptur tradycyjnej medycyny nie pomoże pozbyć się grzyba. Jednak ten dodatek do konwencjonalnej terapii skraca przebieg leczenia i przyspiesza powrót do zdrowia.

Warto codziennie wieczorem zrobić ciepłą kąpiel stóp przez 10 minut, a następnie dokładnie wytrzeć stopy ręcznikiem, szczególnie między palcami, a następnie nałożyć leczniczy balsam Clotrimazol na paznokcie i skórę. Przydatne składniki do kąpieli, które łagodzą stany zapalne i zmniejszają swędzenie:

• ziele glistnika i dziurawca;
• korzenie łopianu;
• trawa piołunowa;
• liście eukaliptusa;
• igły jodłowe;
• świeże fusy z parzonej kawy mielonej;
• Sól;
• mieszanka startego mydła do prania, sody oczyszczonej, nadmanganianu potasu i proszku musztardowego.

Dotknięte obszary można nasmarować dziegciem brzozowym lub samodzielnie przygotowaną maścią ze 100 gramów masła zmieszanego ze zmiażdżoną główką czosnku. Przydatny jest również propolis, który można zabandażować na bolące paznokcie.

Przydatne jest robienie okładów z naturalnych środków. Najpierw pozostawia się je na 1-2 godziny, a przy dobrej tolerancji - na noc. Stosowane są następujące składniki:

• pulpa dyniowa;
• zmiażdżone nasiona czarnej rzodkwi;
• mięta pieprzowa mielona z solą;
• liście łopianu lub jarzębiny, lekko zmiękczone wałkiem do ciasta.

Skuteczne jest smarowanie dotkniętych obszarów sokami niektórych roślin i innymi naturalnymi środkami:

• alkoholowy roztwór propolisu;
• sok z cebuli lub czosnku;
• sok z glistnika;
• olejek z drzewa herbacianego.

Zapobieganie chorobom

Aby uniknąć grzybicy lub zapobiec jej nawrotom, potrzebna jest prosta, ale stała profilaktyka:

• latem noś oddychające buty z naturalnego materiału;
• odwiedzając baseny, łaźnie, prysznice publiczne noś indywidualne gumowe kapcie;
• nie zakładaj cudzych butów, np. na imprezę;
• używaj tylko własnych środków higienicznych - nożyczek, pumeksu, pilnika do paznokci.

Aby uniknąć ponownego zakażenia, wkładki i wewnętrzną powierzchnię butów należy regularnie dezynfekować środkami dezynfekującymi. Znany przepis ludowy to roztwór esencji octu, ale ma ostry nieprzyjemny zapach.

Lekarze zalecają stosowanie Mycospray, który ma nie tylko działanie przeciwgrzybicze, ale także przeciwbakteryjne. Mycospray świetnie nadaje się nie tylko do pielęgnacji obuwia, ale również do aplikacji na stopy przed wizytą w miejscach publicznych w celu ochrony stóp.

Mieszkańcy Moskwy i regionów mogą kupić leki do leczenia grzybicy stóp i jej zapobiegania w naszym sklepie internetowym. Udowodniono, że są skuteczne i bezpieczne. Ich stosowanie polecane jest wszystkim osobom, które nie chcą zarazić się grzybicą stóp lub szybko się jej pozbyć.