A T-limfociták-helperek (CD4) növekedésének és csökkenésének okai. Miért csökkennek a limfociták a vérben, mit jelent ez? A Cd3 cd8 növelte a citotoxikus limfociták számát

A T-limfociták fő feladata az idegen vagy megváltozott saját antigének felismerése az MHC-molekulákkal alkotott komplex részeként. Ha idegen vagy megváltozott molekulák jelennek meg sejtjeik felszínén, a T-limfocita megkezdi a pusztulásukat.

A B-limfocitákkal ellentétben a T-limfociták nem termelnek antigénfelismerő molekulák oldható formáit. Ezenkívül a legtöbb T-limfocita nem képes felismerni és megkötni az oldható antigéneket.

Ahhoz, hogy a T-limfocita „figyelmét egy antigénre fordítsa”, más sejteknek valamilyen módon „át kell engedniük” az antigént magukon, és az MHC-I-vel vagy MHC-II-vel kombinálva a membránján kell kitenni. Ez az antigén prezentációja a T-limfocitában. Az ilyen komplexek T-limfociták általi felismerése kettős felismerés, vagy a T-limfociták MHC-korlátozása.

ANTIGÉN FELISMERŐ T-LIMFOCITA RECEPTOR

A T-sejtek antigén-felismerő receptorai - A TCR az immunglobulin szupercsaládba tartozó láncokból áll (lásd 5-1. ábra). A sejtfelszín felett kiálló TCR antigénfelismerő helye egy heterodimer, azaz. két különböző polipeptid láncból áll. A TCR két változata ismert, ezek αβTCR és γδTCR. Ezek a változatok az antigénfelismerő hely polipeptidláncainak összetételében különböznek. Minden T-limfocita a receptornak csak egy változatát fejezi ki. Az αβT sejteket korábban fedezték fel, és részletesebben tanulmányozták, mint a γδT limfocitákat. Ebben a tekintetben a T-limfociták antigén-felismerő receptorának szerkezetét kényelmesebb az αβTCR példájával leírni. A transzmembránon elhelyezkedő TCR komplex 8 polipeptidből áll

Rizs. 6-1. A T-sejt receptor és a rokon molekulák diagramja

láncok (maga a TCR α- és β-láncainak heterodimerje, két ζ segédlánc, valamint a CD3 molekula ε/δ- és ε/γ-láncainak egy heterodimerje) (6-1. ábra).

. Transzmembrán láncokα és β TCR. Ez 2 körülbelül azonos méretű polipeptidlánc -α (molekulatömeg 40-60 kDa, savas glikoprotein) illβ (molekulatömeg 40-50 kDa, semleges vagy bázikus glikoprotein). Ezen láncok mindegyike 2 glikozilált domént tartalmaz a receptor extracelluláris részében, egy hidrofób (lizin és arginin oldalláncok miatt pozitív töltésű) transzmembrán részt és egy rövid (5-12 aminosavból álló) citoplazmatikus régiót. Mindkét lánc extracelluláris részeit egyetlen diszulfidkötés köti össze.

- V-régió. Mindkét lánc külső extracelluláris (distalis) doménje változó aminosav-összetételű. Ezek homológok az immunglobulin molekulák V-régiójával, és a TCR V-régióját alkotják. Az α- és β-láncok V-régiói kötődnek az MHC-peptid komplexhez.

-C-régió. Mindkét lánc proximális doménje homológ az immunglobulinok konstans régióival; ezek a TCR C-régiói.

Egy rövid citoplazmatikus régió (az α- és β-láncok egyaránt) nem képesek önállóan biztosítani a jelátvitelt a sejtbe. Ehhez további 6 polipeptidlánc szolgál: γ, δ, 2ε és 2ζ.

.CD3 komplex. láncokγ, δ, ε heterodimereket képeznek egymással.γε és δε (együttesen CD3 komplexnek nevezik). Ez a komplex szükséges a kifejezéshezα- és β-láncok, ezek stabilizálása és jelátvitele a sejtbe. Ez a komplex egy extracelluláris, transzmembránból áll (negatív töltésű, ezért elektrosztatikusan kapcsolódik a transzmembrán régiókhozα- és β-láncok) és citoplazmatikus részek. Fontos, hogy ne keverjük össze a CD3 komplex láncaitγ A TCR dimer δ-láncai.

.ζ - Láncok diszulfidhíd köti össze egymással. A legtöbb ilyen lánc a citoplazmában található. ζ-láncok vezetik a jelet a sejten belül.

.ITAM szekvenciák. Polipeptidláncok citoplazmatikus régióiγ, δ, ε és ζ 10 ITAM szekvenciát tartalmaz (mindegyik 1 szekvenciátγ-, ε- és δ-láncok és 3 - mindegyik ζ-láncban), kölcsönhatásba lépnek a Fyn - citoszolos tirozin kinázzal, amelynek aktiválása elindítja a biokémiai reakciók megindulását a jel vezetésére (lásd 6-1. ábra).

Az antigénkötés ionos, hidrogén-, van der Waals- és hidrofób erőket foglal magában; a receptor konformációja ebben az esetben jelentősen megváltozik. Elméletileg mindegyik TCR körülbelül 10 5 különböző antigént képes megkötni, amelyek nemcsak szerkezetükben rokonok (keresztreagálnak), de szerkezetükben sem homológok. A valóságban azonban a TCR polispecifitása csak néhány szerkezetileg hasonló antigén peptid felismerésére korlátozódik. Ennek a jelenségnek a szerkezeti alapja az MHC-peptid komplex egyidejű TCR felismerése.

Koreceptor molekulák CD4 és CD8

Magán a TCR-en kívül minden érett T-limfocita expresszálja az úgynevezett ko-receptor molekulák egyikét, a CD4-et vagy CD8-at, amelyek az APC-ken vagy a célsejteken lévő MHC-molekulákkal is kölcsönhatásba lépnek. Mindegyikhez citoplazmatikus régió tartozik

tirozin-kináz Lck-vel, és valószínűleg hozzájárul a jelátvitelhez a sejtbe az antigénfelismerés során.

.CD4(Az MHC-II molekula β2-doménje (az immunglobulin szupercsaládba tartozik, lásd 5-1. ábra, b). A CD4 molekulatömege 55 kDa, és 4 doménje van az extracelluláris részben. Amikor egy T-limfocita aktiválódik, egy TCR-molekulát 2 CD4-molekula „kiszolgál”: valószínűleg a CD4-molekulák dimerizációja megy végbe.

.CD8 az invariáns részhez kapcsolódik(az MHC-I molekula α3-doménje (az immunglobulin szupercsaládba tartozik, lásd 5-1. ábra, a). CD8 - lánc heterodimerα és β, diszulfid kötés köti össze. Egyes esetekben kétláncú α-láncú homodimert találnak, amely kölcsönhatásba léphet az MHC-I-vel is. Az extracelluláris részben mindegyik láncnak van egy immunglobulinszerű doménje.

T sejt receptor gének

Gének Az α-, β-, γ- és δ-láncok (6-2. ábra, lásd még 5-4. ábra) homológok az immunglobulin génekkel, és a T-limfociták differenciálódása során DNS-rekombináción mennek keresztül, ami elméletileg biztosítja kb. Az antigénkötő receptorok 10 16 -10 18 változata (a valóságban ezt a sokféleséget a szervezetben lévő limfociták száma 109-re korlátozza).

.Az α-lánc géneknek ~54 V-szegmens, 61 J-szegmens és 1 C-szegmens van.

.A β-lánc gének ~65 V-szegmenset, 2 D-szegmentumot, 13 J-szegmenst és 2 C-szegmenst tartalmaznak.

.δ-lánc gének. Az α-lánc V- és J-szegmensei között találhatók a δ-lánc D-(3), J-(4) és C-(1) szegmensének génjeiγ δTCR. A δ lánc V szakaszai az α lánc V szegmensei között vannak "átszórva".

.γ-lánc gének γ A δTCR-eknek 2 C szegmense van, 3 J szegmens az első C szegmens előtt és 2 J szegmens a második C szegmens előtt, 15 V szegmens.

Gén átrendeződés

.A DNS-rekombináció akkor következik be, amikor a V-, D- és J-szegmensek egyesülnek, és ugyanaz a rekombináz-komplex katalizálja, mint a B-limfociták differenciálódása során.

.Az α-lánc génekben a VJ és a β-lánc génekben a VDJ átrendeződése, valamint a nem kódolt N- és P-nukleotidok DNS-hez történő hozzáadása után

Rizs. 6-2. A humán T-limfociták antigénfelismerő receptorának α- és β-láncának génjei

Az RNS átíródik. A C-szegmenshez való társítás és a felesleges (fel nem használt) J-szegmensek eltávolítása az elsődleges transzkriptum illesztése során történik.

.Az α-lánc gének ismételten átrendeződnek, amikor a β-lánc gének már megfelelően átrendeződnek és expresszálódnak. Ezért van némi lehetőség arra, hogy egy sejt egynél több TCR-változatot hordozzon.

.A TCR gének nem esnek át szomatikus hipermutagenezisen.

AZ ANTIGÉN FELISMERÉSÉBŐL FELISMERŐ LYMPOCITÁK RECEPTORJÁBÓL

A TCR-nek és a BCR-nek számos közös mintája van az aktiváló jelek regisztrálásának és továbbításának a cellába (lásd 5-11. ábra).

. Receptor klaszterezés. A limfocita aktiválásához antigén-felismerő receptorok és társreceptorok klaszteresítése szükséges, pl. Több receptor „keresztkötése” egy antigénnel.

. Tirozin kinázok. A fehérjék foszforilációs/defoszforilációs folyamatai a tirozin-maradéknál tirozin-kinázok és tirozin-foszfatázok hatására jelentős szerepet játszanak a jelátvitelben,

ezeknek a fehérjéknek az aktiválásához vagy inaktiválásához vezet. Ezek a folyamatok könnyen visszafordíthatóak és "kényelmesek" a külső jelekre adott gyors és rugalmas sejtválaszok érdekében.

. Src kinázok. Az immunreceptorok citoplazmatikus régióinak tirozinban gazdag ITAM szekvenciái az Src családba tartozó nem receptor (citoplazmatikus) tirozin kinázok (B-limfocitákban Fyn, Blk, Lyn, T-limfocitákban Lck és Fyn) hatására foszforilálódnak.

. ZAP-70 kinázok(T-limfocitákban) ill Syk(B-limfocitákban) a foszforilált ITAM szekvenciákhoz kötődve aktiválódnak és elkezdik foszforilálni az adapter fehérjéket: LAT (Linker a T-sejtek aktiválásához)(ZAP-70 kináz), SLP-76 (ZAP-70 kináz) vagy SLP-65 (Syk kináz).

. Az adapter fehérjéket toborozzák foszfoinozitid-3-kináz(PI3K). Ez a kináz viszont aktiválja az Akt szerin/treonin protein kinázt, ami fokozza a fehérje bioszintézist, ami elősegíti a felgyorsult sejtnövekedést.

. Foszfolipáz Cγ (lásd 4-8. ábra). A Tec családba tartozó kinázok (Btk - B-limfocitákban, Itk - T-limfocitákban) adapterfehérjéket kötnek és aktiválják a foszfolipáz Cγ-t (PLCγ) ).

A PLCγ a sejtmembrán foszfatidil-inozitol-difoszfátot (PIP 2) inozit-1,4,5-trifoszfátra (IP 3) és diacil-glicerolra hasítja.

(DAG).

A DAG a membránban marad, és aktiválja a protein kináz C-t (PKC), egy szerin/treonin kinázt, amely aktiválja az evolúciósan „ősi” transzkripciós faktort, az NFκB-t.

Az IP 3 az endoplazmatikus retikulumban lévő receptorához kötődik, és kalciumionokat szabadít fel a depóból a citoszolba.

A szabad kalcium aktiválja a kalciumkötő fehérjéket - a kalmodulint, amely számos más fehérje aktivitását szabályozza, és a kalcineurint, amely defoszforilálja és ezáltal aktiválja az aktivált T-limfociták nukleáris faktorát NFAT (Aktivált T-sejtek nukleáris faktora).

. Ras és más kis G-fehérjék inaktív állapotban a GDP-hez kapcsolódnak, de az adapter fehérjék ez utóbbit GTP-vel helyettesítik, ami a Ras-t aktív állapotba fordítja.

A Ras saját GTPáz aktivitással rendelkezik, és gyorsan lehasítja a harmadik foszfátot, ezáltal visszatér inaktív állapotba (öninaktiváló).

A rövid távú aktiválás állapotában a Ras-nak van ideje aktiválni a következő MAPK-nak nevezett kinázkaszkádot. (MitogenActivated Protein Kinase), amelyek végül aktiválják az AP-1 transzkripciós faktort a sejtmagban. ábrán. A 6-3. ábrák sematikusan szemléltetik a fő jelátviteli útvonalakat a TCR-rel. Az aktiváló jel akkor kapcsol be, amikor a TCR egy ligandumhoz (MHC-peptid komplexhez) kötődik egy koreceptor (CD4 vagy CD8) és egy kostimuláló CD28 molekula részvételével. Ez a Fyn és Lck kinázok aktiválásához vezet. A CD3 polipeptid láncok citoplazmatikus részeiben lévő ITAM régiók pirossal vannak jelölve. Bemutatják a receptorhoz kapcsolódó Src-kinázok szerepét a fehérjék, mind a receptor, mind a szignál foszforilációjában. Fel kell hívni a figyelmet a koreceptorokhoz kapcsolódó Lck-kináz rendkívül széles skálájára; a Fyn kináz szerepét kevésbé bizonyossággal állapították meg (ami a vonalak nem folytonos jellegében tükröződik).

Rizs. 6-3. Az aktiváló jelek forrásai és iránya a T-limfociták stimulálása során. Megnevezések: ZAP-70 (ζ - asszociált protein kináz, azt mondják tömeg 70 kDa) - p70 protein kináz, amely a ζ-lánchoz kapcsolódik; PLCγ (foszfolipáz Cγ ) - foszfolipáz C, γ izoforma; PI3K (foszfatidil-inozitol-3-kináz)- foszfatidil-inozitol-3-kináz; Lck, Fyn-tirozin kinázok; LAT, Grb, SLP, GADD, Vav - adapter fehérjék

A ZAP-70 tirozin-kináz kulcsszerepet játszik a receptorkinázok és az adaptermolekulák és enzimek közötti közvetítésben. Aktiválja (foszforiláción keresztül) az SLP-76 és LAT adaptermolekulákat, ez utóbbi pedig aktiválási jelet továbbít más adapterfehérjékhez, a GADD-hoz, GRB-hez és aktiválja a foszfolipáz C (PLCy) γ-izoformáját. Eddig a szakaszig csak a sejtmembránnal kapcsolatos tényezők vesznek részt a jelátvitelben. A jelátviteli utak aktiválásában fontos szerepet játszik a CD28 kostimuláló molekula, amely a kapcsolódó lipidkinázon, a PI3K-n keresztül fejti ki hatását. (foszfatidil-inozitol-3-kináz). A PI3K kináz fő célpontja a citoszkeletonhoz kapcsolódó Vav faktor.

A jelképződés és a T-sejt receptorról a sejtmagba történő átvitele eredményeként 3 transzkripciós faktor képződik - NFAT, AP-1 és NF-kB, amelyek a T-limfocita aktiválódási folyamatát szabályozó gének expresszióját indukálják. (6-4. ábra). Az NFAT képződése a kostimulációtól független jelátviteli útvonalhoz vezet, amely a foszfolipáz C aktiválódása miatt kapcsol be és ionok részvételével valósul meg.

Rizs. 6-4. Jelátviteli utak sémája T-sejt aktiváció során. NFAT (Az aktivált T-sejtek nukleáris faktora), AP-1 (Aktiváló fehérje-1), NF-κB (A nukleáris tényezőnak nek - B-sejtek génje)- transzkripciós faktorok

Ca 2+. Ez az út a kalcineurin aktiválását idézi elő, amely foszfatáz aktivitással defoszforilálja az NFAT-P citoszol faktort. Ennek köszönhetően az NFAT-P elnyeri azt a képességet, hogy a sejtmagba vándoroljon, és kötődjön az aktivációs gének promótereihez. Az AP-1 faktor c-Fos és c-Jun fehérjék heterodimerjeként jön létre, melynek képződését a megfelelő gének aktiválódása indukálja a MAP kaszkád három komponensének megvalósításából adódó faktorok hatására. . Ezeket az útvonalakat a rövid GTP-kötő fehérjék, a Ras és a Rac kapcsolják be. A MAP kaszkád megvalósításához jelentős mértékben hozzájárulnak azok a jelek, amelyek a CD28 molekulán keresztül történő kostimulációtól függenek. Egy harmadik transzkripciós faktorról, az NF-kB-ről ismert, hogy a veleszületett immunsejtek fő transzkripciós faktora. Aktiválja az IkB blokkoló alegységének az IKK kináz általi hasításával, amely a T-sejtekben a protein kináz C (PKC9) izoformától függő jelátvitel során aktiválódik. Ennek a jelátviteli útvonalnak az aktiválásához a fő hozzájárulást a CD28-ból származó kostimulációs jelek adják. A kialakult transzkripciós faktorok a gének promoterrégióival érintkezve indukálják azok expresszióját. A génexpresszió különösen fontos a T-sejtek stimulációra adott válaszának kezdeti szakaszában. IL2és IL2R, amely a T-sejtek IL-2 növekedési faktorának termelődését és nagy affinitású receptorának expresszióját okozza a T-limfocitákon. Ennek eredményeként az IL-2 autokrin növekedési faktorként működik, amely meghatározza az antigénre adott reakcióban részt vevő T-sejt klónok proliferatív expanzióját.

A T-LYMFOCIták DIFFERENCIÁLÁSA

A T-limfociták fejlődési szakaszainak azonosítása a receptor V-gének állapotán és a TCR expresszióján, valamint a koreceptorokon és más membránmolekulákon alapul. A T-limfociták differenciálódási sémája (6-5. ábra) hasonló a B-limfociták fejlődésének fenti sémájához (lásd 5-13. ábra). Bemutatjuk a fejlődő T-sejtek fenotípusának és növekedési faktorainak legfontosabb jellemzőit. A T-sejtek fejlődési szakaszainak elfogadott megnevezését a koreceptorok expressziója határozza meg: DN (tól kettős negatív, CD4CD8) - kettős negatív, DP (tól kettős pozitív, CD4 + CD8 +) - kettős pozitív, SP (tól egyszeri pozitív, CD4 + CD8 - és CD4CD8 +) - egyetlen pozitív. A DNtimociták DN1, DN2, DN3 és DN4 stádiumokra való felosztása a természeten alapul.

Rizs. 6-5. T-limfociták fejlődése

CD44 és CD25 molekulák expressziója. Egyéb szimbólumok: SCF (tól Őssejtfaktor- őssejtfaktor, lo (alacsony; indexjel) - alacsony expressziós szint. Átrendeződési szakaszok: D-J - előzetes szakasz, D és J szegmensek összekapcsolása (csak a TCR β- és δ-láncok génjeiben, lásd 6-2. ábra), V-DJ - végső szakasz, a csíravonal V-génjének összekapcsolása a kombinált DJ szegmenssel .

.A timociták különböznek egy közös progenitor sejttől, amely a csecsemőmirigyen kívül olyan membránmarkereket expresszál, mint a CD7, CD2, CD34 és a CD3 citoplazmatikus formája.

.A T-limfocitákká való differenciálódásra kötelezett progenitor sejtek a csontvelőből a thymus cortex szubkapszuláris zónájába vándorolnak, ahol lassan, körülbelül egy hétig szaporodnak. Új membránmolekulák, CD44 és CD25 jelennek meg a timocitákon.

.Ezután a sejtek mélyen a csecsemőmirigy kéregébe költöznek, a CD44 és CD25 molekulák eltűnnek a membránjukról. Ebben a szakaszban a β gének átrendeződése-, γ- és a TCR δ-láncai. Ha a génekγ- és a δ-láncok produktívak, azaz. kereteltolódás nélkül hamarabb átrendeződik, mint a β-lánc gének, akkor a limfocita tovább differenciálódikγ δT. Egyébként a β-lánc a membránon pT-vel komplexben expresszálódikα (egy invariáns helyettesítő lánc, amely ebben a szakaszban helyettesíti a valódi α-láncot) és a CD3. Szolgál

jel a γ- és δ-láncok génjeinek átrendeződésének leállítására. A sejtek szaporodni kezdenek, és CD4-et és CD8-at egyaránt expresszálnak. dupla pozitív timociták. Ugyanakkor a már előkészített β-lánccal rendelkező, de még át nem rendezett α-lánc génekkel rendelkező sejttömeg felhalmozódik, ami hozzájárul az αβ-heterodimerek diverzitásához.

.A következő szakaszban a sejtek abbahagyják az osztódást, és 3-4 napon belül elkezdik többször átrendezni a Vα géneket. Az α-lánc gének átrendeződése az α-lánc gének szegmensei között elhelyezkedő δ-lókusz irreverzibilis deléciójához vezet.

.A TCR-t az α-lánc minden új változatával expresszálják, és a timociták szelekcióját (szelekcióját) a thymus epitélsejtek membránján az MHC-peptid komplexhez való kötődés erőssége szerint fejezik ki.

Pozitív szelekció: elpusztulnak azok a timociták, amelyek nem kötődnek a rendelkezésre álló MHC-peptid komplexekhez. A pozitív szelekció eredményeként a timociták körülbelül 90%-a elpusztul a csecsemőmirigyben.

A negatív szelekció kiküszöböli azokat a timocita klónokat, amelyek túl nagy affinitással kötik az MHC-peptid komplexeket. A negatív szelekció a pozitívan kiválasztott sejtek 10-70%-át eliminálja.

Olyan timociták, amelyek megkötötték bármelyik MHC-peptid komplexet a megfelelővel, pl. közepes erősségű, affinitású, jelet kap a túléléshez és folytatja a differenciálódást.

.Rövid időre mindkét koreceptor molekula eltűnik a timocita membránról, majd az egyik expresszálódik: az MHC-I-vel komplexben lévő peptidet felismerő timociták a CD8 koreceptort, az MHC-II-vel pedig a CD4 koreceptort fejezik ki. Ennek megfelelően kétféle T-limfocita kerül a perifériára (körülbelül 2:1 arányban): CD8 + és CD4 +, amelyek funkciói a következő immunválaszokban eltérőek.

-CD8+ T-sejtek a citotoxikus T-limfociták (CTL) szerepét töltik be – felismerik és közvetlenül elpusztítják a vírus által módosított sejteket, daganatokat és más „megváltozott” sejteket (6-6. ábra).

-CD4 + T-sejtek. A CD4 + T-limfociták funkcionális specializációja változatosabb. A CD4 + T-limfociták jelentős része az immunválasz kialakulása során T-helperekké (helperek) válik, amelyek kölcsönhatásba lépnek a B-limfocitákkal, T-limfocitákkal és más sejtekkel.

Rizs. 6-6. A citotoxikus T-limfocita hatásmechanizmusa a célsejtre. A T-killerben a Ca 2+ -koncentráció növekedésére reagálva a perforint tartalmazó szemcsék (lila oválisok) és granzimek (sárga körök) egyesülnek a sejtmembránnal. A felszabaduló perforin beépül a célsejt membránjába, majd granzimek, víz és ionok számára áteresztő pórusok képződnek. Ennek eredményeként a célsejt lizálódik

közvetlen érintkezés vagy oldható faktorok (citokinek) révén. Bizonyos esetekben CD4 + CTL alakulhat ki: különösen a Lyell-szindrómás betegek bőrében találhatók jelentős mennyiségben ilyen T-limfociták.

A T-helperek alpopulációi

A XX. század 80-as éveinek vége óta szokásos volt a T-helperek 2 alpopulációjának izolálása (attól függően, hogy melyik citokinkészletet termelik) - Th1 és Th2. Az elmúlt években a CD4+ T-sejt-alpopulációk spektruma tovább bővült. Olyan alpopulációkat találtak, mint a Th17, T-regulátorok, Tr1, Th3, Tfh stb.

A CD4+ T-sejtek főbb szubpopulációi:

. Th0- A CD4 + T-limfociták az immunválasz kialakulásának korai szakaszában csak IL-2-t termelnek (minden limfocitákra mitogén).

.Th1- a CD4 + T-limfociták differenciált szubpopulációja, amely az IFN termelésére specializálódott y, TNF β és IL-2. Ez a szubpopuláció számos sejtes immunválaszt szabályoz, beleértve a késleltetett típusú túlérzékenységet (DTH) és a CTL aktivációt. Ezenkívül a Th1 stimulálja a B-limfociták opszonizáló IgG antitestek termelését, amelyek beindítják a komplement aktivációs kaszkádot. A túlzott gyulladás kialakulása az ezt követő szövetkárosodással közvetlenül összefügg a Th1 szubpopuláció aktivitásával.

.Th2- a CD4 + T-limfociták differenciált szubpopulációja, amely az IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 és IL-13 termelésére specializálódott. Ez az alpopuláció részt vesz a B-limfociták aktiválásában, és hozzájárul a különböző osztályokba tartozó, nagy mennyiségű antitestek, különösen az IgE szekréciójához. Ezenkívül a Th2 szubpopuláció részt vesz az eozinofilek aktiválásában és az allergiás reakciók kialakulásában.

.Th17- a CD4 + T-limfociták egy alpopulációja, amely az IL-17 képzésére szakosodott. Ezek a sejtek gombaellenes és antimikrobiális védelmet nyújtanak a hám- és nyálkahártya gátak ellen, és kulcsszerepet játszanak az autoimmun betegségek patológiájában is.

.T-szabályozók- CD4 + T-limfociták, amelyek immunszuppresszív citokinek szekréciója révén elnyomják az immunrendszer más sejtjeinek aktivitását - IL-10 (a makrofág és Th1-sejt aktivitás gátlója) és a TGFβ - a limfocita proliferáció gátlója. A gátló hatás közvetlen intercelluláris interakcióval is elérhető, mivel egyes T-szabályozók membránja az aktivált és "kimerült" limfociták apoptózisának induktorait - FasL-t (Fas-ligand) - expresszálja. A CD4 + szabályozó T-limfocitáknak több populációja létezik: természetes (Treg), a csecsemőmirigyben érő (CD4 + CD25 + , amely a Foxp3 transzkripciós faktort expresszálja), és indukált - elsősorban az emésztőrendszer nyálkahártyáján lokalizálódik és áttért a csecsemőmirigyre. a TGFβ képződése (Th3) vagy IL-10 (Tr1). A T-szabályozók normális működése szükséges az immunrendszer homeosztázisának fenntartásához és az autoimmun betegségek kialakulásának megelőzéséhez.

.További segítő populációk. A közelmúltban a CD4 + T-limfociták osztályának egyre új populációiról írtak le

az általuk túlnyomórészt termelt citokin típusa szerint osztályozzák. Tehát, mint kiderült, az egyik legfontosabb populáció a Tfh (angol nyelvből). follikuláris segítő- follikuláris segítő). A CD4+ T-limfocitáknak ez a populációja túlnyomórészt a limfoid tüszőkben található, és a B-limfociták segítőjeként működik az IL-21 termelése révén, ami érését és terminális differenciálódását okozza plazmasejtekké. A Tfh az IL-21 mellett IL-6-ot és IL-10-et is képes termelni, amelyek szükségesek a B-limfociták differenciálódásához. E populáció funkcióinak megsértése autoimmun betegségek vagy immunhiányos betegségek kialakulásához vezet. Egy másik "új" populáció a Th9 - IL-9 termelők. Nyilvánvalóan ezek a Th2 átállt az IL-9 szekréciójára, amely képes a T-helper sejtek proliferációját előidézni antigénstimuláció hiányában, valamint fokozni az IgM, IgG és IgE B általi szekrécióját. - limfociták.

A T-helperek főbb szubpopulációit az 1. ábra mutatja. 6-7. Az ábra a CD4+ T-sejtek adaptív szubpopulációinak jelenlegi megértését foglalja össze, azaz alpopulációk kialakulása-

Rizs. 6-7. CD4+ T-sejtek adaptív szubpopulációi (citokinek, differenciációs faktorok, kemokin receptorok)

az immunválasz során, és nem a sejtek természetes fejlődése során. A T-helperek minden fajtája esetén induktor citokinek vannak feltüntetve (a sejteket szimbolizáló körökhöz vezető nyilak), transzkripciós faktorok (a körök belsejében), kemokin receptorok, amelyek irányítják a migrációt (a "sejtfelületről" kinyúló vonalak közelében), és citokineket termelt (a körökből kiálló nyilak által mutatott téglalapokban).

A CD4 + T-sejtek adaptív szubpopulációinak családjának kibővítése megkövetelte annak a kérdésnek a megoldását, hogy milyen sejtek kölcsönhatásba lépnek ezek az alpopulációk (akiknek segítői funkciójuknak megfelelően „segítséget” nyújtanak). Ezeket az ábrázolásokat a 2. ábra mutatja. 6-8. Kifinomult képet ad ezen alpopulációk funkcióiról (részvétel a kórokozók bizonyos csoportjai elleni védekezésben), valamint e sejtek aktivitásának kiegyensúlyozatlan növekedésének kóros következményeiről.

Rizs. 6-8. A T-sejtek adaptív szubpopulációi (partnersejtek, fiziológiai és patológiai hatások)

γ δT-limfociták

A csecsemőmirigyben limfopoézisben áteső T-limfociták túlnyomó többsége (99%) αβT-sejt; kevesebb, mint 1% - γδT-sejtek. Ez utóbbiak többnyire a csecsemőmirigyen kívül, elsősorban az emésztőrendszer nyálkahártyájában differenciálódnak. A bőrben, a tüdőben, az emésztőrendszerben és a szaporodási szervekben ezek alkotják az intraepiteliális limfociták domináns alpopulációját. A testben lévő összes T-limfocita között a γδT-sejtek 10-50%-ot tesznek ki. Az embriogenezisben a γδT-sejtek az αβT-sejtek előtt jelennek meg.

.γδ A T-sejtek nem expresszálnak CD4-et. A CD8 molekula a γδT sejtek egy részén expresszálódik, de nem ap heterodimerként, mint a CD8+ apT sejteken, hanem két a lánc homodimerjeként.

.Antigénfelismerő tulajdonságok: A γδTCR-ek jobban hasonlítanak az immunglobulinokhoz, mint az αβTCR-ek; képesek megkötni a natív antigéneket a klasszikus MHC molekuláktól függetlenül - γδT sejtek esetében ez nem szükséges, vagy egyáltalán nem igényli az APC antigén előfeldolgozását.

.Sokféleségγδ TCR kevesebb, mint az αβTCR vagy az immunglobulinok, bár általában a γδT sejtek képesek az antigének széles skáláját felismerni (főleg a mikobaktériumok foszfolipid antigénjeit, szénhidrátokat, hősokkfehérjéket).

.Funkciókγδ T-sejtek még nem teljesen ismert, bár az uralkodó vélemény, hogy a veleszületett és szerzett immunitás egyik összekötő elemeként szolgálnak. A γδT-sejtek az egyik első akadály a kórokozókkal szemben. Ezenkívül ezek a sejtek a citokinek szekretálása révén fontos immunszabályozó szerepet töltenek be, és képesek CTL-ekké differenciálódni.

NKT limfociták

A természetes gyilkos T-sejtek (NKT-sejtek) a limfociták egy speciális szubpopulációját képviselik, amelyek köztes helyet foglalnak el a veleszületett és az adaptív immunitás sejtjei között. Ezek a sejtek mind az NK, mind a T-limfociták jellemzőivel rendelkeznek. Az NKT sejtek αβTCR-t és az NK-sejtekre jellemző NK1.1 receptort expresszálják, amely a C-típusú lektin glikoprotein szupercsaládba tartozik. Az NKT sejtek TCR receptora azonban jelentősen eltér a normál sejtek TCR receptorától. Egerekben a legtöbb NKT sejt invariáns α-lánc V domént expresszál, amely a

A Vα14-Jα18 szegmensek, amelyeket néha Jα281-nek is neveznek. Emberben az α-lánc V-domén Vα24-JαQ szegmensekből áll. Egerekben az invariáns TCR α-lánca túlnyomórészt a Vβ8.2-vel, emberben a Vβ11-gyel komplexálódik. A TCR láncok szerkezeti sajátosságai miatt az NKT sejteket invariánsnak nevezik - iTCR. Az NKT sejtek fejlődése a CD1d molekulától függ, amely hasonló az MHC-I molekulákhoz. Ellentétben a klasszikus MHC-I molekulákkal, amelyek peptideket mutatnak be a T-sejteknek, a CD1d csak glikolipideket mutat be a T-sejteknek. Bár úgy gondolják, hogy a máj az NKT-sejtek fejlődésének helye, erős bizonyítékok állnak rendelkezésre a csecsemőmirigy szerepére a fejlődésben. Az NKT sejtek fontos szerepet játszanak az immunitás szabályozásában. Különféle autoimmun folyamatokban szenvedő egerekben és emberekben az NKT sejtek funkcionális aktivitása súlyosan károsodott. Nincs teljes kép az ilyen rendellenességek jelentőségéről az autoimmun folyamatok patogenezisében. Egyes autoimmun folyamatokban az NKT-sejtek szuppresszor szerepet játszhatnak.

Az autoimmun és allergiás reakciók szabályozása mellett az NKT sejtek részt vesznek az immunrendszer felügyeletében, ami a funkcionális aktivitás növekedésével együtt a tumor kilökődését okozza. Szerepük az antimikrobiális védekezésben nagy, különösen a fertőző folyamat kialakulásának korai szakaszában. Az NKT-sejtek különféle gyulladásos fertőző folyamatokban vesznek részt, különösen a vírusos májelváltozásokban. Általánosságban elmondható, hogy az NKT-sejtek limfociták többfunkciós populációja, amelyek még mindig számos tudományos rejtélyt rejtenek magukban.

ábrán. A 6-9. ábrák összefoglalják a T-limfociták funkcionális alpopulációkra való differenciálódását. A bifurkáció több szintje is bemutatásra kerül: γ δT/ αβT, majd αβT sejteknél - NKT/ egyéb T-limfociták, utóbbiaknál - CD4 + /CD8 + , CD4 + T-sejteknél - Th/Treg, CD8 + T- limfociták - CD8αβ/CD8αα. Az összes fejlődési vonalért felelős differenciálódási transzkripciós faktorokat is bemutatjuk.

Rizs. 6-9. A T-limfociták természetes szubpopulációi és differenciálódási tényezőik

A felnőttek vérében a T-limfociták teljes száma normális - 58-76%, az abszolút szám 1,1-1,7-10 "/l.

Az érett T-limfociták "felelősek" a celluláris immunitás reakcióiért, és immunológiai felügyeletet végeznek a szervezetben az antigén homeosztázisban. A csontvelőben képződnek, és a csecsemőmirigyben differenciálódnak, ahol effektor (T-killer limfociták, késleltetett típusú túlérzékenységi T-limfociták) és szabályozó (T-limfociták-helperek, T-limfociták-szuppresszorok) csoportokra oszlanak. ) sejteket. Ennek megfelelően a T-limfociták két fontos funkciót látnak el a szervezetben: effektor és szabályozó. A T-limfociták effektor funkciója az idegen sejtekkel szembeni specifikus citotoxicitás. A szabályozó funkció (rendszer T-helperek - T-szuppresszorok) az immunrendszer specifikus reakciójának kifejlődésének intenzitásának szabályozása az idegen antigénekkel szemben. A vérben a T-limfociták abszolút számának csökkenése a sejtes immunitás hiányát, a növekedés az immunrendszer túlműködését és az immunproliferatív betegségek jelenlétét jelzi.

Bármely gyulladásos folyamat kialakulását a T-limfociták tartalmának csökkenése kíséri szinte teljes hosszában. Ez a legkülönfélébb etiológiájú gyulladásoknál figyelhető meg: különféle fertőzések, nem specifikus gyulladásos folyamatok, sérült szövetek és sejtek elpusztulása műtét után, trauma, égési sérülés, szívroham, rosszindulatú daganatsejtek elpusztulása, trofikus pusztulás stb. A T-limfociták számának csökkenését a gyulladásos folyamat intenzitása határozza meg, de ez a mintázat nem mindig figyelhető meg. A T-limfociták az összes immunkompetens sejt közül a leggyorsabban reagálnak a gyulladásos folyamat kezdetére. Ez a reakció még a betegség klinikai képének kialakulása előtt is megnyilvánul. A T-limfociták számának növekedése a gyulladásos folyamat során kedvező jel, és a T-limfociták magas szintje az ilyen folyamat kifejezett klinikai megnyilvánulásaival, éppen ellenkezőleg, kedvezőtlen jel, amely a gyulladás lassú lefolyását jelzi. krónikussá váló folyamat. A gyulladásos folyamat teljes befejezését a T-limfociták számának normalizálódása kíséri. A T-limfociták relatív számának növekedése nem nagy jelentőséggel bír a klinika számára. A T-limfociták abszolút számának növekedése a vérben azonban nagyon fontos a leukémia diagnózisához. A vérben lévő T-limfociták számának változásához vezető betegségeket és állapotokat a táblázat tartalmazza. 7.19.

7.19. táblázat. Betegségek és állapotok, amelyek a szám változásához vezetnek

T-limfociták (CD3) a vérben

7.19. táblázat folytatása

T-limfociták-segítők (CD4) a vérben

A T-limfociták-segítők száma a vérben felnőtteknél normális - 36-55%, abszolút

Mennyiség - 0,4-1,110"/l-

A T-limfociták az immunválasz segítői (induktorai), olyan sejtek, amelyek szabályozzák a szervezet idegen antigénre adott immunválaszának erősségét, szabályozzák a szervezet belső környezetének állandóságát (antigén homeosztázis) és fokozott antitesttermelést okoznak. A T-limfociták-helperek számának növekedése az immunrendszer túlműködésére, a csökkenés immunhiányra utal.

Az immunrendszer állapotának felmérésében a T-helperek és T-szuppresszorok aránya játszik vezető szerepet a perifériás vérben, hiszen ettől függ az immunválasz intenzitása. Általában annyi citotoxikus sejtet és antitestet kell termelni, amennyi az egyik vagy másik antigén eltávolításához szükséges. A T-szuppresszorok elégtelen aktivitása a T-helperek befolyásának túlsúlyához vezet, ami hozzájárul az erősebb immunválaszhoz (kifejezett antitest-termelés és/vagy a T-effektorok elhúzódó aktiválása). A T-szuppresszorok túlzott aktivitása éppen ellenkezőleg, az immunválasz gyors elnyomásához és abortuszához, sőt az immunológiai tolerancia jelenségéhez vezet (az antigénre adott immunológiai válasz nem alakul ki). Erős immunválasz esetén autoimmun és allergiás folyamatok kialakulása lehetséges. A T-szuppresszorok magas funkcionális aktivitása ilyen válaszreakcióban nem teszi lehetővé a megfelelő immunválasz kialakulását, ezért az immunhiányok klinikai képében a fertőzések és a rosszindulatú növekedésre való hajlam dominálnak. A CD4/CD8 index 1,5-2,5 normális állapotnak felel meg, több mint 2,5 - hiperaktivitás, kevesebb, mint 1,0 - immunhiány. A gyulladásos folyamat súlyos lefolyása esetén a CD4/CD8 arány 1-nél kisebb is lehet. Ez az arány alapvető fontosságú az AIDS-betegek immunrendszerének megítélésében. Ebben a betegségben a humán immundeficiencia vírusa szelektíven megfertőzi és elpusztítja a CO4 limfocitákat, ami a CD4/CD8 arány csökkenését eredményezi. előtt 1-nél jóval kisebb értékek.

A CD4/CD8 arány növekedése (3-ig) gyakran megfigyelhető különféle gyulladásos betegségek akut fázisában a T-helperek szintjének növekedése és a T-szuppresszorok csökkenése miatt. Gyulladásos betegség közepén a T-helperek lassú csökkenése és a T-szuppresszorok növekedése tapasztalható. Amikor a gyulladásos folyamat lecseng, ezek a mutatók és arányuk normalizálódik. A CD4/CD8 arány növekedése szinte minden autoimmun betegségre jellemző: hemolitikus anémia, immunthrombocytopenia, Hashimoto thyreoiditis, vészes vérszegénység, Goodpasture-szindróma, szisztémás lupus erythematosus, rheumatoid arthritis. Ezekben a betegségekben a CD4/CD8 arány növekedése a CD8 szintjének csökkenése miatt általában a folyamat magas aktivitásával járó exacerbáció csúcsán észlelhető. A CD4/CD8 arány csökkenése a CD8 szintjének emelkedése miatt számos daganatra jellemző, különösen a Kaposi-szarkómára. A vér CD4-számának megváltozásához vezető betegségeket és állapotokat a táblázat tartalmazza. 7.20.

7.20. táblázat. Betegségek és állapotok, amelyek a vér CD4 számának megváltozásához vezetnek

A táblázat folytatása. 7.20

A limfociták leukocita vérsejtek, amelyek számos fontos funkciót látnak el. E sejtek szintjének csökkenése vagy növekedése kóros folyamat kialakulását jelezheti a szervezetben.

A limfociták képződésének és működésének folyamata

A limfociták a csontvelőben termelődnek, majd a csecsemőmirigybe (thymus) vándorolnak, ahol a hormonok és a hámsejtek hatására változásokon mennek keresztül, és különböző funkciójú alcsoportokká differenciálódnak. Az emberi szervezetben vannak másodlagos nyirokszervek is, ezek közé tartozik a nyirokcsomók, a lép. A lép a limfociták halálának helye is.

Tegyen különbséget a T- és B-limfociták között. A nyirokcsomókban található limfociták 10-15%-a átalakul B-limfocitákká. Ezeknek a sejteknek köszönhetően az emberi szervezet egész életen át tartó immunitást szerez a múltbeli betegségekkel szemben - az első érintkezéskor egy idegen anyaggal (vírus, baktérium, kémiai vegyület) a B-limfociták antitesteket termelnek ellene, emlékeznek a kórokozó elemre, és ismételt interakció esetén mobilizálja az immunrendszert, hogy elpusztítsa. Ezenkívül a B-limfociták vérplazmában való jelenléte miatt a vakcinázás hatása elérhető.

A csecsemőmirigyben a limfociták körülbelül 80%-a T-limfocitákká alakul (a CD3 gyakori sejtmarker). A T-sejt receptorok detektálják és megkötik az antigéneket. A T-sejtek pedig három alfajra oszlanak: T-gyilkosok, T-segítők, T-szuppresszorok. A T-limfociták mindegyik típusa közvetlenül részt vesz egy idegen ágens eltávolításában.

A T-gyilkosok elpusztítják és lebontják a baktériumok és vírusok által érintett sejteket, rákos sejteket. A T-gyilkosok a vírusellenes immunitás fő elemei. A T-helperek funkciója az adaptív immunválasz fokozása, az ilyen T-sejtek speciális anyagokat választanak ki, amelyek aktiválják a T-gyilkosok válaszát.

A T-killerek és T-helperek effektor T-limfociták, amelyek funkciója az immunválasz biztosítása. Vannak T-szuppresszorok is - szabályozó T-limfociták, amelyek szabályozzák az effektor T-sejtek aktivitását. Az immunválasz intenzitásának szabályozásával a szabályozó T-limfociták megakadályozzák az egészséges testsejtek pusztulását és megakadályozzák az autoimmun folyamatok előfordulását.

Normál limfocitaszám

A limfociták normál értékei minden életkorban eltérőek - ez az immunrendszer fejlődésének sajátosságaiból adódik.

Az életkor előrehaladtával a csecsemőmirigy térfogata csökken, amelyben a limfociták nagy része érik. 6 éves korig a limfociták dominálnak a vérben, ahogy az ember öregszik, a neutrofilek vezető szerepet töltenek be.

• újszülött gyermekek - a leukociták teljes számának 12-36% -a;
• 1 hónapos élet - 40-76%;
• 6 hónapos korban - 42-74%;
• 12 hónapos korban - 38-72%;
• 6 éves korig - 26-60%;
• 12 éves korig - 24-54%;
• 13-15 éves korig - 22-50%;
• felnőtt - 19-37%.

A limfociták számának meghatározásához általános (klinikai) vérvizsgálatot végeznek. Egy ilyen vizsgálat segítségével meghatározhatja a limfociták teljes számát a vérben (ezt a mutatót általában százalékban fejezik ki). Az abszolút értékek megszerzéséhez a számítás során figyelembe kell venni a leukociták teljes tartalmát.

A limfociták koncentrációjának részletes meghatározását immunológiai vizsgálat során végezzük. Az immunogram a B és T limfociták mutatóit tükrözi. A T-limfociták normája 50-70% (50,4 ± 3,14) * 0,6-2,5 ezer A B-limfociták normál aránya 6-20%, 0,1-0,9 ezer.T-helperek és T-szuppresszorok között általában 1,5-2,0.

A T-limfociták szintjének növekedése és csökkenése

A T-limfociták számának növekedése az immunogramon az immunrendszer túlműködését és az immunproliferatív rendellenességek jelenlétét jelzi. A T-limfociták szintjének csökkenése a sejtes immunitás hiányát jelzi.

Bármilyen gyulladásos folyamat esetén a T-limfociták szintje csökken. A T-sejtek koncentrációjának csökkenésének mértékét a gyulladás intenzitása befolyásolja, azonban ez a mintázat nem minden esetben figyelhető meg. Ha a T-limfociták emelkedtek a gyulladásos folyamat dinamikájában, ez kedvező jel. A súlyos klinikai tünetek hátterében megemelkedett T-sejtek azonban éppen ellenkezőleg, kedvezőtlen jel, amely a betegség krónikus formába való átmenetét jelzi. A gyulladás teljes megszüntetése után a T-limfociták szintje eléri a normál értékeket.

A T-limfociták szintjének növekedésének okai lehetnek olyan rendellenességek, mint:

• limfocitás leukémia (akut, krónikus);
• Cesari-szindróma;
• immunhiperaktivitás.

A T-limfociták a következő patológiákban csökkenthetők:

• krónikus fertőző betegségek (HIV, tuberkulózis, gennyes folyamatok);
• csökkent limfociták termelése;
• genetikai rendellenességek, amelyek immunhiányt okoznak;
• limfoid szövet daganatai (lymphosarcoma, lymphogranulomatosis);
• az utolsó szakasz vese- és szívelégtelensége;
• limfociták pusztulása bizonyos gyógyszerek (kortikoszteroidok, citosztatikumok) vagy sugárterápia hatására;
• T-sejtes limfóma.

A T-limfociták szintjét más vérelemekkel kombinálva kell értékelni, figyelembe véve a beteg tüneteit és panaszait. Ezért csak szakképzett szakember értelmezheti a vérvizsgálat eredményeit.

A CD8 antigént expresszáló sejteket két fő alpopuláció képviseli - a citotoxikus T-sejtek és a szuppresszor aktivitással rendelkező T-limfociták.

Idővel ismertté vált, hogy a CD8-at nem csak ezek a limfociták alpopulációi fejezik ki, hanem más sejtek egyedi klónjai is: makrofágok, természetes gyilkosok (NK), hízósejtek, dendritikus sejtek (DC); fő CD8 ligandumok - az I. osztályú antigének a2- és a3-doménjei fő hisztokompatibilitási komplexum (MHC).

Ebből következik, hogy a CD8 egy nem specifikus marker citotoxikus limfociták (CTL)és T-szuppresszor limfociták, de e sejtek egyik fő fenotípusos jellemzőjének tekintik.

Éppen ezért a T-limfociták szuppressziós szintjének objektív értékelése során szükséges a CD8-at expresszáló sejtek szuppresszív aktivitásának vizsgálata az erre a célra kidolgozott módszerrel, hiszen csak a CD8 meghatározása nem ad okot egyikről sem beszélni. a CD8 közös markerrel rendelkező T-limfociták citotoxikus vagy szuppresszív aktivitása.

Általános ötletek a CD8 + CD28-T-limfocitákról

A szuppresszor T-limfociták általános elképzelése már a múlt század 70-es éveiben kezdett kialakulni, és a 80-as évek közepére ismertté vált, hogy ezeket a sejteket különféle klónok képviselik, amelyek különböznek az előfordulási feltételektől, a képződés kinetikájától. , cselekvési jellemzők, különféle tulajdonságok, szekretált közvetítők és mások

Ennek ellenére még akkor is B.D. Brondz megfogalmazta, hogy vannak közös jellemzőik, amelyek abban állnak, hogy képesek blokkolni más limfoid sejtek differenciálódását és aktivitását, és ez alapvetően megkülönbözteti őket a CTL-ektől. A T-szuppresszorok és más T-limfociták közötti különbségek között szerepelnie kell az instabilitásuknak, a különféle hatásokra való nagy érzékenységüknek, a rövid élettartamuknak stb.

Az akkori számos ismert immunológus vizsgálatának köszönhetően (az akkori módszertani lehetőségeket felhasználva) azonosították ezen sejtek egyes felszíni markereit, megállapították a többi sejttől való eltérésüket, valamint a T-szuppresszor aktiválódásának egyes szakaszait és mechanizmusait. azonosították.

Ennek eredményeként arra a következtetésre jutottak, hogy a T-szuppresszorok és különféle klónjaik szabályozó sejtek, amelyek szabályozzák a celluláris és humorális immunitás arányát, és nagymértékben meghatározzák a daganatokra, transzplantátumokra és vírusokra adott válasz intenzitását. Ehhez hozzá kell tenni, hogy a jelzett ábrázolás a mai napig alapvetően nem változott.

Idővel a CD8+T-limfociták vizsgálata lehetővé tette annak megállapítását, hogy a szuppresszor aktivitású CD8+T-limfocitákra jellemző a CD28 molekulák expressziójának hiánya, így fenotípusukat CD8+CD28-ként határoztuk meg.

Amikor ezeket a sejteket különböző rendszerekben vizsgálták (különösen gyakran alkalmaztak vegyes limfocitatenyészetet), kimutatták, hogy számos gátló hatásuk van: az allogén sejtek által stimulált CD4 + T-limfociták proliferációjának gátlása, a főként kapcsolódó receptorok gátlása. sejtaktivációval (IL-2 receptorok és transzferrin), a kostimuláló molekulák expressziójának elnyomása antigénprezentáló sejtek által, ami megakadályozza azok optimális kölcsönhatását CD4 + T-limfocitákkal, a citokinek szekréciójának fenntartására való képtelenség stb.

Megerősítették, hogy gátló hatásuk kifejtése során a CD8 + CD28-T-limfociták MHC I. osztályú antigének - peptidek komplexét ismerik fel ezen sejtek TCR-jének részvételével. Azt is megállapították, hogy a CD8+CD28-T-limfociták heterogén alpopulációt alkotnak.

Az ilyen típusú sejtek általános jellemzésében fontos, hogy az ingerekre adott válaszként csökkenő proliferációval jellemezzék őket, gátolják a citotoxicitást, magas szintű CD11b, CD29, CD57, CD94 expresszióval rendelkezzenek alacsony CD25 szinten. összehasonlítva a CD8 + CD28 + T-limfocitákkal; A perifériás vér CD8+CD28-T-limfocitái szignifikánsan csökkentik a TCR-zéta lánc foszforilációját és magas a ciklin-dependens p16 kináz inhibitor szintje.

A CD8+CD28-T-limfocitákkal szigorúan kölcsönhatásba lépő monoklonális antitestek beszerzése lehetővé tette annak megerősítését, hogy ezek független sejtklónt képviselnek, amely különbözik a citotoxikus limfocitáktól; ezen antitestek alkalmazása megszüntette a CD8+CD28-T-limfociták gátló hatását mind in vivo, mind in vitro, de nem befolyásolta a CTL funkciókat.

Ezekben a sejtekben monoklonális antitestek felhasználásával azonosították a gangliozidok egyik epitópját, a CD75-öt, amely más sejtekben nem volt kimutatható, és ez szolgált alapul a fenotípusos jellemző kiterjesztéséhez, amelyet CD8+CD28-CD75s+-ként határoztunk meg.

A CD8+CD28-T-limfociták általános biológiai jelentőségének megértése szempontjából fontos, hogy képesek kölcsönhatásba lépni a nyálkahártya hámsejtekkel. Az ezzel a képességgel rendelkező CD8+CD28-T sejtek CD101-et és CD103-at expresszálnak, kölcsönhatásba lépnek a hámsejtekkel a p180 fehérjén keresztül, és szabályozó funkciókat látnak el.

A szerzők joggal állapítják meg, hogy a nyálkahártyában CD8+CD28-CD101+CD103+T-limfociták találhatók, amelyek helyi immunológiai kontrollt gyakorolnak. Ezekből az adatokból az következik, hogy a CD8+CB28-T-limfociták szabályozó hatásai nem korlátozódnak a Th1-limfocitákra, és szélesebb hatásspektrummal rendelkeznek.

A CD8+CD28-T-limfociták hámsejtekkel való kölcsönhatását az 1. ábra mutatja. 58.

Rizs. 58. A szupresszor T-limfociták és a hámsejtek kölcsönhatása:
CD101 - a kostimulációban részt vevő glikoprotein; CD103 - nyálkahártya limfocita antigén

Ezeket a CD8+CD28-T-limfocitákról szóló általános elképzeléseket a közelmúltban új adatokkal egészítették ki, amelyek feltárják mind a korábban ismeretlen gátló hatásukat, mind a megvalósításuk módjait és mechanizmusait. Ilyen adatokat kaptunk mind a kísérleti vizsgálatok során, mind az egészséges egyének perifériás vérében lévő szuppresszor T-limfociták, valamint egyes patológiák vizsgálata során.

Jelentős érdeklődésre tart számot az az információ, hogy e sejtklón heterogenitásának fent említett ténye új megvilágításba kerül. A humán perifériás vér CD8 + CD28-T-limfocitáinak vizsgálata során három típust azonosítottak, kombinálva a T-limfociták antigén-specifikus válaszának gátlásával.

Az első típust az jellemzi, hogy képes károsítani a kostimuláló molekulák expresszióját DC-n, amely hatás közvetlen intercelluláris kölcsönhatást igényel. A második kifejezett képességgel rendelkezik az olyan citokinek szekréciójának gátlására, mint az IFNy és az IL-6, ami a kötelező intercelluláris érintkezés nélkül történik. A harmadik IL-10 kiválasztásával közvetíti a hatását.

Fontos adatokhoz jutottak különböző korcsoportok perifériás vérében található CD28-at expresszáló és nem expresszáló T-limfociták vizsgálatával. Először is kimutatták, hogy az életkor előrehaladtával a CD8 + CD28-T-limfociták száma csökken, másodsorban a stimuláció fitohemagglutinin(FGA) minden korcsoportban növeli ezen sejtklónok arányát, és nemcsak a CD8 + CD28 + -, hanem a CD8 + CD28-T sejtek proliferációját is fokozza, utóbbiak magasabb proliferációjával időseknél.

Végül azt találták, hogy a limfociták PHA-val történő kezelése az összes CD8+ T limfocita apoptózisát eredményezte, és az elhalt sejtek száma mindkét klónban azonos volt - bizonyíték arra, hogy az apoptózis képessége független az életkortól. Ehhez hozzá kell tenni azt az adatot, hogy a CD8 + CD28-T-limfociták számának növekedése idős emberekben, azonosított patológia nélkül, magyarázhatja a proliferáció csökkenését, amelyet a ciklin-dependens p16 protein kináz aktivitásának növekedése kísér.

Joggal feltételezhető, hogy ezek az új adatok a T-szuppresszor limfociták életkorral összefüggő változásainak további tanulmányozása során elengedhetetlenek lehetnek az immunológiai homeosztázis szabályozásának életkorral összefüggő sajátosságaiban betöltött szerepük tisztázásában.

Napjainkig ismertté váltak a CD8 + CD28-T-limfociták gátló hatásának főbb szakaszai, amelyek aktiválódása antigénekkel feltöltött allogén, xenogén és heterogén antigénprezentáló sejtek hatására is megtörténhet. A szupresszor T-limfociták gátló hatásának megvalósításában a fő résztvevők: CD8 + CD28 + T-limfociták, antigénprezentáló sejtek és CD4 + T-helperek.

Ugyanakkor az antigénprezentáló sejtek egyfajta hídként működnek a T-szuppresszorok és a CD4 + T-limfociták között. A szupresszor T-limfociták gátló hatásának általános mechanizmusa a következőképpen ábrázolható: a humán CD8 + CD28-T-limfociták aktiválása a fő hisztokompatibilitási komplex - peptid - komplex antigénjeik felismerésének eredményeként (a folyamat a TCR-szuppresszor sejtek részvétele) az antigénprezentáló sejteken, ami megfosztja őket attól, hogy kostimuláló molekulákat expresszáljanak, és ezért miután a T-helper limfociták felismerték a II. osztályú MHC-peptid komplex antigénjeit, nem kapják meg őket. a szükséges együtt-stimuláló jelet, energikussá válnak, aktiválódásra és burjánzásra képtelenek. Ezt a folyamatot vázlatosan mutatja az ábra. 59.

Rizs. 59. A CD8+CD28~T-limfociták gátló hatásának szakaszai CD4+T-limfocitákon (helperek): APC - antigénprezentáló sejt

A szupresszor T-limfociták hatásmechanizmusának megértéséhez az is fontos, hogy gátló hatásuk kifejtéséhez ne legyen szükség sem proliferációra, sem fehérjeszintézisre. Amikor a T-szuppresszor limfociták gátló szignáljai megvalósulnak az antigénprezentáló sejtekben, az NF-kappaB aktivitás gátolt, ami nagy szerepet játszik abban, hogy nem képesek kostimuláló jeleket küldeni a Th-limfocitáknak.

Mint már említettük, jelentős figyelmet fordítanak arra a kérdésre, hogy szükség van-e közvetlen érintkezésük antigénprezentáló sejtekkel a CD8+CD28-T-limfociták gátló hatásának megvalósításához. Jelenleg a legtöbb szerző hajlamos azt hinni, hogy ilyen intercelluláris kapcsolatra van szükség.

A CD8+CD28-T-limfociták szabályozó képességeinek megértését sok olyan tényre jutottak, amelyek a szövettranszplantáció és az autoimmun patológia körülményei között zajlottak. A kapott adatok szerint a CD8+CD28-T-limfociták jelenléte nagymértékben meghatározza a graft sorsát.

Egészséges egyének és átültetett szívű emberek ezen perifériás vérsejtjeinek összehasonlító vizsgálata kimutatta, hogy azok szignifikánsan kifejezettebb aktivációt mutatnak olyan betegekben, mint egészséges egyénekben, akiknek párhuzamosan aktív expressziója CD38, DR leukocita antigén és magasabb perforin-pozitív sejttartalom.

Megállapították, hogy a CD27 expressziója kifejezettebb azon betegek CD8+CD28- sejtjein, akiknél nem volt graftkilökődés, mint azoknál a betegeknél, akiknél a kilökődés jelei voltak. Ezekkel az adatokkal összefüggésben a T-szuppresszor sejtek fontosságának egy másik aspektusa is meghatározásra kerül: létezik a graft védelmében szerepet játszó CD8+CD28-CD27+ szabályozó sejtek klónja.

Azt is megállapították, hogy ezek a transzplantátumokból izolált sejtek nem mutatnak citotoxikus aktivitást a donorsejtekkel szemben, és magasabb a KIR94 expressziójuk - ez arra utal, hogy a transzplantáció során fenotípusos változások következnek be a T-szuppresszor limfocitákban.

Tekintettel arra, hogy a T-szuppresszor limfociták a transzplantáció után megtalálhatók a vérben, valamint hogy képesek elnyomni a kostimuláló molekulák (CD80, CD86) expresszióját az antigénprezentáló donorsejteken, célszerű megfelelő monitorozást végezni a transzplantáció során.

Amint már említettük, a CD8+CD28-T-limfociták autoimmun patológiában történő vizsgálata szintén információkat nyújt ezen sejtek tulajdonságairól. Különösen azt találták, hogy az aktív fázisban lévő szisztémás lupus erythematosusban szenvedő betegeknél a CD8 + CD28-T-limfociták nem mutattak gátló hatást, ami az IL-6 gátló hatása és az IL-6 stimuláló hatása közötti egyensúlyhiánnyal párosult. IL-12.

A T-szuppresszor limfociták azon képessége, hogy elnyomják az antigén-specifikus CD4 + T-limfociták proliferációját, összefüggésbe hozható a remisszió megjelenésével autoimmun patológiás betegeknél. In vitro rendszerek segítségével sikerült jellemezni a CD8+CD28-T limfociták prekurzorait, és kimutatni, hogy a GM-CSF stimuláció után IL-10-et szekretáló monociták kulcsszerepet játszanak a keletkezésükben (ezekben az esetekben a közvetlen intercelluláris kontaktus nem játszik szerepet jelentős szerepet).

A prekurzorok CD8+CD45RA-CD27-CCR-IL10Ra- fenotípusúak. Azt is kimutatták, hogy a T-szuppresszor limfociták elnyomják az antigén-specifikus citotoxikus limfociták aktivitását, csökkentve a fő hisztokompatibilitási komplex I. osztályú antigénjeinek expresszióját.

A bemutatott adatok nem hagynak kétséget afelől, hogy a CD8+CD28-T-limfociták a CD4+-szabályozó T-limfociták mellett fontos szerepet játszanak az immunológiai homeosztázis fenntartásában.

Elegendő okunk van azt hinni, hogy e sejtek egyik fő funkciója egy specifikus T-sejtes válasz szabályozása. A szupresszor T-limfociták aktiválása fiziológiás körülmények között történő specifikus felismeréssel megvédi a Th-limfocitákat a túlzott aktivációtól, és ezért bizonyos körülmények között a túlzott immunológiai választól, különösen a reaktív T-helperek számának növekedése esetén.

A rendelkezésre álló adatok azt mutatják, hogy a T-szuppresszor limfociták gátló hatása a perifériás tolerancia kiváltásának egyik fontos szereplője, és az ezen sejtek által más T-limfociták autoreaktív klónjaival szembeni kontroll diszregulációja lehet az oka a T-limfociták kialakulásának. autoimmun patológia.

Ezzel együtt nem lehet egyet érteni azzal, hogy a CD8+CD28-T-limfociták szerepének fiziológiai jelentőségének megértése további tanulmányokat igényel, amelyek új adatokkal szolgálnak majd a daganatos és autoimmun patológiás hatásmechanizmusokról.

A CD8 + CD28-T-limfocitákra vonatkozó általános ötletek az 1. ábrát mutatják be. 60.

Rizs. 60. A CD8+CD28-T-limfociták fenotípusos és funkcionális jellemzői

A szupresszor T-limfociták szabályozási funkciói

A szuppresszor CD8+CD28-T-limfociták vizsgálatának eredményei nem hagynak kétséget afelől, hogy fontos szabályozó funkciókat látnak el, amelyek normális körülmények között meglehetősen egyértelműen meghatározottak.

Szintén jogos kijelenteni, hogy mind a szupresszor T-limfociták (CD8+CD28-), mind a szabályozó CD4+CD25+T-limfociták (Th3/Trl) együttesen vesznek részt az immunológiai homeosztázis szabályozásában a kialakulásának minden szakaszában.

Ezzel együtt az is nyilvánvaló, hogy ha a szupresszor T-limfociták szerepe normális körülmények között teljesen egyértelmű, akkor ezeknek a sejteknek a rosszindulatú növekedésben betöltött szerepe a jövőben még tisztázásra vár. Ebben a tekintetben különösen érdekes a kérdés: milyen körülmények között tesznek lehetővé a CD8+CD28-T-cipruszok citotoxikus hatást, amely tény csak akkor volt megfigyelhető, amikor tumorsejtekkel tenyésztették őket.

Ennek a kérdésnek a részletezése (minden esetben lehetséges-e a citotoxicitás képessége, mennyiben köszönhető ez a tumorsejtek biológiai jellemzőinek, mekkora részesedéssel bírnak ezek a sejtek a citotoxicitás megvalósításában, és mi a hatásmechanizmusa A CD8 + CD28-T-limfocitákon lévő tumorsejtek) kétségtelenül lehetővé teszi a T-szuppresszor limfociták tumorfolyamatban betöltött szerepének új megértését.

Nem kevésbé fontos a T-szuppresszor limfociták és az endotélsejtek közötti kölcsönhatás jellemzőinek további vizsgálata a tumornövekedés során. A kérdés tisztázása iránti érdeklődés érthető annak a ténynek köszönhetően, hogy a CD8 + CD28-T-limfociták és az endothelsejtek kölcsönhatása az utóbbiak aktivitásának kifejezett megnyilvánulásaihoz vezet, ami befolyásolhatja a rosszindulatú átalakulás folyamatát.

A bemutatott anyagokat összegezve a következő következtetéseket vonhatjuk le:

Első

A T-szuppresszor limfociták - CD8+CD28- a CD8-at expresszáló T-limfociták külön klónját képviselik, kifejezett gátló hatásuk van a CD4+T-limfociták ellen, képesek kölcsönhatásba lépni az endothel sejtekkel; fontos szerepet játszanak az immunológiai homeosztázis fenntartásában normál és patológiás körülmények között.

Második

A szupresszor T-limfociták gátló hatása intercelluláris kölcsönhatásoknak köszönhető, amelyekben a CD8+CD28-T-limfociták mellett dendritikus sejtek és CD4+T-limfociták vesznek részt.

Harmadik

A legtöbb esetben különféle onkológiai betegségek esetén a vérben a CD8 + CD28-T-limfociták száma megnő, ami gyakran rossz prognózissal párosul; a tumorba infiltráló limfociták is jelentős mennyiségben tartalmazzák ezeket a sejteket.

Negyedik

A T-szuppresszor limfociták autológ tumorsejtekkel történő együttes tenyésztése olyan CD8+CD28-T-limfocitákat eredményez, amelyek képesek citotoxikus hatást kifejteni.

Ötödik

A CD8 + CD28-T-limfociták számának meghatározása a hatás kontrolljaként használható.

Az aktiválás megszakításához T-limfociták normál vagy megnövekedett számú T-sejtek jelenléte jellemzi a vérben. Ezek a sejtek megtartják a normális fenotípust, de a receptoroktól a sejtbe irányuló jelátvitel károsodik bennük. Ezért nem szaporodnak és nem termelnek citokineket, ha mitogének, antigének vagy a TCR egyéb jelei stimulálják őket.

A klinikai megnyilvánulások szerint az ilyen hibák hasonlóak más típusú elégtelenségekhez, és bizonyos esetekben megkülönböztethetetlenek a súlyos kombinált immunhiánytól.

CD8 lymphopenia a zéta-asszociált protein 70 gén mutációja miatt

Károsodott betegeknél T-sejt aktiválás súlyos, visszatérő és gyakran végzetes fertőzések csecsemőkorban alakulnak ki. A legtöbb esetet a mennoniták körében találták. A B-limfociták száma a vérben normális vagy megnövekedett; az immunglobulinok koncentrációja a szérumban változó. A CD3 és CD4 felületi antigének expressziója a T-limfocitákon megmarad, de a CD8 sejtek szinte teljesen hiányoznak.

Nem reagálnak mitogénekre vagy allogén sejtekre in vitro, és nem képeznek citotoxikus T-limfocitákat. Az NK-sejtek aktivitása megmarad. Az egyik beteg csecsemőmirigye normál szerkezetű volt, és mindkét felszíni markerrel - CD4 és CD8 - sejteket tartalmazott. A CD8 sejtek azonban hiányoztak. Ezt az állapotot a zéta-asszociált protein 70-et (ZAP-70) kódoló gén mutációi okozzák, egy tirozin-kináz, amely nem tartozik az Src családba, és fontos szerepet játszik a T-limfocitákba történő jelátvitelben.

ZAP-70 gén a 2. kromoszóma hosszú karján található (ql2 régió). A mindkét markerrel (CD4 és CD8) rendelkező T-limfociták normál száma azzal magyarázható, hogy a pozitív szelekcióhoz egy másik tirozin-kináz, a Syk is használható. A Syk szintje a timocitákban 4-szer magasabb, mint a perifériás T-limfocitákban, ami nyilvánvalóan meghatározza a CD4 vérsejtek normális reakciójának hiányát.

p56-Isk hiány. Egy 2 hónapos kisfiúnál, aki bakteriális, vírusos és gombás fertőzésekben szenvedett, limfopéniát és hipogammaglobulinémiát találtak. B- és NK-sejtek voltak jelen a vérben, de a CD4 T-limfociták száma alacsony volt. A mitogénekre adott reakciók következetlenek voltak. A TCR stimuláció nem eredményezett CD69 expressziót. A forbol-mirisztát-acetáttal és a kalcium-ionofor CD69-cel (ami az aktiválás markere) végzett stimulációra azonban megjelent a T-limfocitákon, ami a sejtekbe jutó jelút proximális részeinek hibáját jelzi.

Molekuláris kutatás azonosította a transzkriptum alternatív splicingjét, ami a kináz domén hiányát eredményezi a p56-lck-ben.