A szifilisz kórokozója. Taxonómia

23. sz. A szifilisz kórokozója. Taxonómia. Jellegzetes. Mikrobiológiai diagnosztika. Kezelés.
Treponema palládium; T. entericum
Morfológia: tipikus treponemák 8-12 örvénnyel, mozgásrendszer - 3 periplazmatikus flagella a sejt minden pólusán. Romanovsky-Giemsa szerint a Gram-folt nem érzékelhető - enyhén rózsaszín, ezüsttel való impregnálással észlelhető.
kulturális javak: virulens törzs háziállaton. táptalaj nem növekszik, a tenyészet felhalmozódása a nyúl herében történő megfertőzésével történik. A virulens törzseket agy- és veseszövetet tartalmazó táptalajokon tenyésztik.
Biokémiai tulajdonságok: mikroaerofil
Antigén szerkezet: komplex, specifikus fehérje és lipoid antigénekkel rendelkezik, ez utóbbi összetételében megegyezik a szarvasmarha szívből kivont kardiolipinnel (difoszfadilglicerin)
Patogenitási tényezők: az adhezinek a kötődési folyamatban, a lipoproteinek az immunpatológiai folyamatok kialakulásában.
Ellenállás: érzékeny a száradásra, napfényre, száradásig a tárgyakon marad. Kedvezőtlen körülmények között L-formákba megy át, és cisztákat képez.
Patogenezis: Szifiliszt okoz. A bejárati kapu helyéről a treponemák a regionális nyirokcsomókba jutnak, ahol szaporodnak. Továbbá a T. behatol a véráramba, ahol az endotheliocitákhoz kötődik, endarteritist okozva, ami vasculitishez és szöveti nekrózishoz vezet. A vérrel a T. szétterjed az egész testben, magoló szerveket: májat, vesét, csontot, szív- és érrendszert és idegrendszert.
Immunitás: Nem alakul ki védő immunitás. A kórokozó antigénekre adott válaszként HRT és autoimmun folyamatok alakulnak ki. A humorális immunitás a T. lipoid antigénje ellen képződik, és az IgA és IgM titere.
mikroszkópos vizsgálat. Elsődleges szifiliszben hajtják végre a kemény chancre megjelenése során. Kutatási anyag: chancre kisülés, regionális nyirokcsomók tartalma, amelyből sötét mezőben "zúzott" cseppkészítményt készítenek és vizsgálnak. Pozitív eredménnyel vékony, 6-14 mikron hosszú csavart szálak láthatók, amelyek 10-12 egyenletes, megfelelő alakú kis fürtökkel rendelkeznek. A halvány treponemát ingaszerű és előrehajló mozgások jellemzik. A másodlagos szifiliszben a szájnyálkahártyán kialakuló elváltozások, valamint a szájüregben lévő kemény chancre lokalizációjával meg kell különböztetni a sápadt treponemát a szaprofita treponemáktól, amelyek a normál mikroflóra képviselői. Ebben az esetben a regionális nyirokcsomók pontjában jellemző treponemák kimutatása meghatározó diagnosztikai jelentőséggel bír.
Szerodiagnosztika. A Wasserman-reakciót egyidejűleg 2 antigénnel állítják be: 1) specifikus, a kórokozó antigént tartalmazó - ultrahanggal elpusztított treponema; 2) nem specifikus - kardiolipin. A vizsgált szérumot 1:5 arányban hígítjuk és az általánosan elfogadott módszer szerint helyezzük el az RSK-t. Pozitív reakció esetén a hemolízis késése figyelhető meg, negatív reakció esetén az eritrociták hemolízise következik be; a reakció intenzitását ennek megfelelően (+ + + +) és (-) között becsüljük. A szifilisz első periódusa szeronegatív, és negatív Wasserman-reakció jellemzi. A betegek 50% -ánál a reakció legkorábban 2-3 héttel a kemény chancre megjelenése után válik pozitívvá. A szifilisz második és harmadik periódusában a pozitív reakciók gyakorisága eléri a 75-90% -ot. A kezelés után a Wasserman-reakció negatívvá válik. A Wasserman-reakcióval párhuzamosan mikroprecipitációs reakciót végzünk egy nem specifikus kardiolipin antigénnel és a vizsgált inaktivált vérszérummal vagy plazmával. 3 csepp szérumot csepegtetünk a plexi lemezen (vagy közönséges üvegen) lévő üregbe, és 1 csepp kardiolipin antigént adunk hozzá. A keveréket alaposan összekeverjük, és az eredményeket figyelembe veszik. A szifiliszben szenvedő betegek vérszérumával adott pozitív reakciót különböző méretű pelyhek képződése és elvesztése jellemzi; negatív eredménnyel egyenletes világos opálosodás figyelhető meg.
A RIF - indirekt immunfluoreszcens reakció - specifikus a szifilisz diagnózisában. Antigénként szöveti treponemák szuszpenzióját használják. A RIF_200 reakciót használjuk. A páciens szérumát ugyanúgy inaktiváljuk, mint a Wassermann-reakciónál, és 1:200 arányban hígítjuk. Az antigén cseppjeit üveglemezekre visszük, szárítjuk és 5 percig acetonban rögzítjük. Ezután a beteg szérumát felvisszük a gyógyszerre, 30 perc múlva mossuk és szárítjuk. A következő lépés a készítmény kezelése humán globulinok elleni fluoreszcens szérummal. Vizsgálja meg a készítményt fluoreszcens mikroszkóppal, figyelje meg a treponema lumineszcencia mértékét.
A treponema immobilizálásának RIT reakciója is specifikus. A treponema élő tenyészetét nyúl herében történő tenyésztéssel nyerik. A herét egy speciális közegben összetörik, amelyben a treponemák mozgékonyak maradnak. A reakciót a következőképpen állítjuk be: szöveti (mobil) treponemák szuszpenzióját kémcsőben egyesítjük a tesztszérummal, és friss komplementet adunk hozzá. Egészséges személy szérumát adják az egyik kontrollcsőbe a tesztszérum helyett, a másikba pedig az inaktivált - inaktív komplementet friss komplement helyett. 35 °C-on, anaerob körülmények között (anaerosztát) történő tárolás után minden kémcsőből „zúzott” cseppkészítményt készítünk, és sötét mezőben meghatározzuk a mozgékony és mozdulatlan treponemák számát.
Kezelés: Penicillinek, tetraciklinek, bizmut tartalmú gyógyszerek.

A szifilisz ciklikusan előforduló, nemi úton terjedő betegség, amelyet a spirochete pallidum okoz. Az I. stádium kemény chancre-ban nyilvánul meg (fr. fekély- fekély), II. stádium - az erek falának károsodása és különféle kiütések, III - különböző szervek ínygyulladásai idegrendszeri károsodással. Gumma (lat. . gummi- gumi) - krónikus infiltrátum csomó formájában, amely hajlamos a bomlásra és a fekélyesedésre. Szifilitikus íny ( syn.: syphiliticus granuloma, gummous syphilis, tercier syphilom) egy fájdalommentes félgömb alakú gumi, amely a harmadlagos aktív szifilisz megnyilvánulása. Kórokozó - Treponema pallidum- fedezte fel 1905-ben F. Shaudin és E. Hoffmann.

T. pallidum- spirál alakú mikroorganizmus, 0,09 - 0,18 x 6 - 20 mikron méretű. A spirál fürtjeinek száma 8-12, a fürtök egységesek, egymástól körülbelül 1 μm távolságra helyezkednek el, a magasság a vége felé csökken. Elektronmikroszkópban úgy néz ki, mint egy kígyó vagy egy giliszta. A treponema mindkét végén blefaroplasztok találhatók a hozzájuk kapcsolódó flagellákkal, melyek száma kettőtől többig változik, a spirocheta protoplazmatikus hengere köré csavarodva axiális fonalat alkotnak. Kedvezőtlen körülmények között cisztákat képezhet. Állatoknál mukopoliszacharid jellegű kapszulaszerű burok alakulhat ki.

A treponema rosszul festődik az anilinfestékekkel, ezért a szifilisz kórokozóját halvány spirochetának nevezik. Az ezüst-nitrátot fémes ezüstté redukálja, amely a mikroba felületén lerakódik, és láthatóvá teszi a szövetekben: Morozov szerint festve a treponemák barnának vagy majdnem feketének tűnnek. Romanovsky - Giemsa szerint festve halvány rózsaszín színűvé válnak.

A treponemák általában transzverzális osztódással szaporodnak, míg a kettéosztott sejtek egy ideig csatlakozhatnak egymáshoz. A felosztási idő körülbelül 30 óra.

Az élő treponemák nagyon mozgékonyak, saját hossztengelyük körül végeznek mozgásokat, valamint hajlítást, hullámszerű és transzlációs mozgásokat.

A mai napig nem létezik olyan módszer, amellyel következetesen lehetne treponema tenyészeteket szerezni. Az emberre patogén Treponema pallidumot soha nem termesztették mesterséges tápközegen, csirkeembriókban vagy sejttenyészetekben. Törzseik azon fajtái, amelyek anaerob körülmények között nőnek, valószínűleg szaprofita spirocheták, amelyek közel állnak a szifilisz kórokozójához. Fiziológiájukat még kevéssé tanulmányozták. A treponemák kemoorganotrófok, nem tartalmaznak katalázt és oxidázt, és képesek szénhidrátokat fermentálni. Nagyon gazdag táptalajokon nőnek, amelyek akár 11 aminosavat, vitaminokat, sókat és szérumalbumint tartalmaznak. A kórokozó spirocheták termesztésének legjobb módja a nyúl herében történő megfertőzése (kísérleti orchitis). Felmerült, hogy van T. palliduméletciklus, beleértve a spirális alakon kívül a szemcsés stádiumot és a cisztaszerű gömbtestek állapotát is. Ezeknek a mikroorganizmusoknak a szemcsés formái képesek átjutni a bakteriális szűrőkön.

A treponema antigéneket rosszul ismerik. Megállapítást nyert, hogy a treponema fehérjét, poliszacharidot és lipid komplexeket tartalmaz. A tenyésztett és szöveti treponemák antigén összetétele annyira közel van, hogy a kultúrtreponemákból előállított antigének felhasználhatók CSC-re a szifilisz diagnosztikájában. Az emberi szervezetben a treponemák olyan antitestek termelődését serkentik, amelyek az élő, mozgékony treponemák immobilizálását és halálát okozzák, szuszpenzió jelenlétében komplementet kötnek. T. pallidum vagy rokon spirocheták, és az indirekt RIF-ben is kimutathatók.

A szifilisz kórokozója nem képez exotoxinokat. A sápadt treponemák viszonylag instabilak a külső hatásokkal szemben. Szárításkor és magas hőmérsékleten (55 °C-on 15 percig) gyorsan elpusztulnak. 0,3-0,5%-os HCl-oldatban azonnal elveszítik mobilitásukat; gyorsan elveszítik és elpusztulnak arzén-, bizmut- és higanykészítmények jelenlétében. Teljes vérben vagy szérumban 4 °C-on 24 órán át életképesek maradnak, amit a vérátömlesztésnél figyelembe kell venni.

Járványtan. A szifilisz tipikus szexuális úton terjedő betegség. A fertőzés forrása egy beteg személy, általában 3-5 évig fertőző; a szifilisz késői formáiban szenvedő betegek nem fertőzőek. A fertőzés az esetek túlnyomó többségében különféle szexuális és háztartási kapcsolatokon keresztül történik, ritkán transzplacentálisan beteg anyától gyermekig (veleszületett szifilisz), vagy foglalkozási fertőzésként, egészségügyi személyzettel való érintkezés útján. Természetes körülmények között csak egy ember szenved szifiliszben, a kísérletben majmokat, hörcsögöket és nyulakat lehet megfertőzni. A majmokban a treponem injekció beadásának helyén kemény chancre alakul ki, nyulakban és hörcsögöknél a fertőzés tünetmentes.

Patogenezis és klinika. A szerzett szifilisz lappangási ideje 2-10 hét, általában 20-28 nap. A fertőzés bejárati kapui leggyakrabban a nemi szervek nyálkahártyái, ritkábban - a szájüreg, valamint a sérült bőr. A bejuttatás helyén a kórokozó elszaporodik, primer szifilóma (kemény chancre) képződik - erózió vagy tömörített bázisú fekély. Továbbá a kórokozó bejut a nyirokrendszerbe, lymphangitis és regionális lymphadenitis alakul ki. Ez az elsődleges szifilisz tipikus klinikája, amely 1,5-2 hónapig tart. Aztán ezek a jelek eltűnnek. A szifilisz másodlagos időszaka a folyamat általánossá válásával jár, amikor sok nyirokcsomó megnő, és kiütések jelennek meg a bőrön és a nyálkahártyán; a belső szervek és az idegrendszer károsodása figyelhető meg. Vannak másodlagos friss és másodlagos visszatérő szifilisz. Minden következő visszaeséssel a kiütés intenzitása kevésbé kifejezett lesz, és a relapszusok közötti időszakok nőnek. A kiütés elemei nagyszámú élő treponemát tartalmaznak, ebben az időszakban a beteg a leginkább fertőző. A másodlagos szifilisz időtartama legfeljebb 4 év vagy több. Ezenkívül a betegség hosszú tünetmentes időszakba lép, majd néhány év múlva harmadlagos szifilisz alakul ki. Ugyanakkor a belső szervek, a szív- és érrendszer, a központi idegrendszer, a csontok durva organikus elváltozásai figyelhetők meg, íny képződik, szöveti lebontással és degeneratív elváltozásokkal. A szifilisz jellegzetes klinikai vonása, hogy a beteg szubjektív panaszai (fájdalom, viszketés, égő érzés stb.) hiányoznak.

Immunitás. A szifilisz ellen sem természetes, sem mesterséges immunitás nem keletkezik; csak fertőző immunitás létezik, és amíg létezik, az ember gyakorlatilag nem fogékony egy új fertőzésre. A fertőző immunitás 10-11 nappal a kemény chancre megjelenése után alakul ki (chanker immunitás), ezalatt az újrafertőződés vagy nem figyelhető meg, vagy a kialakult új kancre sikertelenül folytatódik (szuperfertőzés). A jövőben felülfertőződés esetén a keletkező elváltozások jellege megfelel a betegség újbóli fertőzés idején fennálló stádiumának. A felülfertőződést a fertőző immunitás átmeneti gyengülése vagy „lebomlása” magyarázza. A felülfertőződéstől meg kell különböztetni az újrafertőződést, azaz egy olyan személy újbóli újrafertőződését, aki korábban szifiliszben szenvedett (meggyógyult), és ezért elvesztette fertőző immunitását. Leírják a szifilisszel járó betegség háromszoros eseteit is. Az ilyen betegek lappangási ideje rövidebb, gyakrabban alakulnak ki lymphadenitissel járó fekélyes chancreok, a szerológiai reakciók korábban válnak pozitívvá. A másodlagos időszakban a bőrön lévő papulák gyakran erodálódnak. Ez azzal magyarázható, hogy szifilisznél késleltetett típusú túlérzékenységi reakció alakul ki, a kezelést követően az érzékenyített limfociták hosszú ideig a szervezetben maradnak. A fertőző immunitás nem steril természetű, és humorális tényezőknek köszönhető: G, A és M osztályú immunglobulinok találhatók a beteg szérumában.

Laboratóriumi diagnosztika. A szifilisz diagnosztizálására az integrált megközelítés az optimális, amely magában foglalja több módszer egyidejű alkalmazását. Hagyományosan direktekre osztják őket, amelyek lehetővé teszik a kórokozó jelenlétének bizonyítását a vizsgált anyagban (állatok fertőzése, különféle mikroszkópos és molekuláris genetikai módszerek a DNS kimutatására). T. pallidum- PCR és DNS szondázás), valamint közvetett - szerológiai vizsgálatok az antitestek kimutatására. A szerológiai teszteket viszont nem treponemális és treponemális képviseli.

A treponema direkt módszerekkel történő kimutatásának vizsgálati anyaga egy kemény chancre vagy annak pontja, nyirokcsomó pontja, roseola kaparás, agy-gerincvelői folyadék. A kórokozót a natív anyagból legjobban sötétmezős (lásd 111.4. ábra) vagy fáziskontraszt mikroszkóppal lehet kimutatni, ami lehetővé teszi az élő kórokozó különböző mozgástípusainak megfigyelését. Ha már elkezdték az antibiotikus kezelést, a kórokozó nem mutatható ki a kóros anyagban. Szükség esetén direkt (vagy közvetett) RIF-et végzünk, vagy a készítményt Romanovsky-Giemsa szerint festjük. Ezeket a módszereket csak a szifilisz korai diagnosztizálására használják.

A szerológiai tesztek a betegség különböző szakaszaiban alkalmazhatók, kivéve a szeronegatív primer szifilisz esetében. Általában szerológiai reakciók komplexét alkalmazzák. NAK NEK nem treponemális az eredmények vizuális meghatározásával végzett vizsgálatok a következők: komplementkötési reakció (Wassermann-reakció \u003d RSKk \u003d RW) a bika szívizomzatának kardiolipin antigénjével (keresztreagáló antigén), mikroprecipitációs reakció (MR vagy RMP) - mikroreakció plazmával és inaktivált szérummal; RPR - gyors plazma reagin teszt és egyéb reakciók. A szakértők úgy vélik, hogy a tömeges szűréshez a legjobb két tesztet használni: az RPR-t és az RPHA-t vagy az ELISA-t, mivel az RPR érzékenyebb az elsődleges szifiliszben, az RPHA a betegség későbbi szakaszaiban, az ELISA pedig minden szakaszban. A mikroszkóposan leolvasható nem treponemális tesztek közé tartozik a VDRL teszt és az USR teszt. A nem treponemális teszteket szűrővizsgálatként használják, mivel ezek hamis pozitív eredményeket adhatnak. BAN BEN treponemális a tesztek treponemális eredetű antigéneket használnak. A szifilisz klinikai, epidemiológiai és anamnesztikus gyanújával végzett nem-treponemális tesztek eredményeinek megerősítésére (fals pozitív?), látens és késői formák diagnosztizálására, retrospektív diagnózisra szolgálnak. A treponemális tesztek a következők: RSKt (RSK treponemális antigénnel), RIBT (vagy RIT) - a halvány treponema immobilizációs reakciója, RIF (az egyik legjobb reakció), RPHA, ELISA, immunoblot.

A szifilisz mikrobiológiai diagnózisa

Praktikus munka

Orvosi és Állatorvosi

A "sápadt" treponema nevet az alacsony színezőképesség miatt kapta. Vannak más patogén treponemák is: T. pertenue - a tyúkszem kórokozója, T. carateum - a pint kórokozója, T. bejel - a krónikus generalizált spirochetosis (bejel) kórokozója. Meghatározták a kórokozókat és felhívták...

Módszertani utasítások tanulóknak a 36. számú gyakorlati órához.

Az óra témája:

Cél: A szifilisz mikrobiológiai diagnosztikájának, terápiájának és megelőzésének módszereinek tanulmányozása.

2. modul . Speciális, klinikai és ökológiai mikrobiológia.

36. téma: A szifilisz mikrobiológiai diagnózisa.

A téma aktualitása:

A szifilisz kórokozója

A szifilisz a Treponema pallidum által okozott fertőző, nemi úton terjedő betegség, amelyet a bőr, a belső szervek, a csontok és az idegrendszer károsodása jellemez. Vannak szerzett és veleszületett szifilisz.

Taxonómia. A szifilisz kórokozóját - a halvány treponemát (Treponema pallidum) - 1905-ben fedezte fel F. Shaudin és E. Hoffman; a Spirochaetaceae családba, a Gracilicutes osztályba tartozik.

Morfológia és színárnyalati tulajdonságok.A "sápadt" treponema nevet az alacsony színezőképesség miatt kapta. Vannak más patogén treponemák is: T. pertenue - a tyúkszem kórokozója, T. carateum - a pint kórokozója, T. bejel - a krónikus generalizált spirochetosis (bejel) kórokozója. Ezek a kórokozók és az általuk okozott betegségek gyakoribbak a forró és párás éghajlatú régiókban. Halvány treponema - vékony, spirál alakú baktérium, 4-14 mikron hosszú, egyenletes kis fürtök (8-14 fürtök); a spirállal együtt más formái is lehetnek - ciszták, granulátumok, L-formák formájában; Romanovsky-Giemsa szerint festett, jellegzetes halvány rózsaszínre. Mozgások spirálistól hajlításig.

Termesztés.A sápadt treponema egy kötelező anaerob, rendkívül igényes a tápközegre. A táptalajon tenyésztett treponema - tenyészspirocheta - különbözik a patogén alacsonyabb virulenciától, de antigénjeik hasonlóak, amelyet a szifilisz szerodiagnosztikájában használnak.

Antigén szerkezet.A sápadt treponemát antigén asszociáció jellemzi más treponemákkal, valamint állati és emberi szövetek lipoidjaival. A kórokozóban számos antigént azonosítottak, amelyek közül az egyik, a lipoid antigén megegyezik a szarvasmarha szív lipoid kivonatával.

ellenállás. A környezetben a sápadt treponema gyengén ellenálló; 55-nél 0 C 15 percen belül elpusztul, érzékeny a száradásra, fényre, higanysókra, bizmutra, arzénra, penicillinre. A háztartási cikkeken fertőző marad, amíg meg nem szárad; jól megőrződött a holttestszövetben.

állati fogékonyság.Kísérletileg kóros folyamat indukálható a herében és a nyulak bőrén, illetve a majmok bőrén.

Járványtan. A fertőzés forrása egy beteg ember. A fertőzés főként szexuális érintkezés útján, ritkán a beteg váladékával szennyezett háztartási tárgyakon (szemüveg, fogkefe, cigaretta stb.) keresztül történik; fertőzés csókokkal, szoptató anya tejével (háztartási szifilisz) lehetséges, a szifiliszben szenvedő donorok vérátömlesztése során történő fertőzés nem zárható ki.

Patogenezis és klinikai kép.A szifilisz kórokozója a bőrön vagy a nyálkahártyán keresztül jut be a szervezetbe, szerveken és szöveteken keresztül terjed, károsodást okozva. A lappangási idő átlagosan 3-4 hétig tart. Az inkubációs időszak után a szifilisz ciklikusan folytatódik, primer, másodlagos és harmadlagos periódusok formájában. A kórokozó bejutásának helyén (a nemi szerveken, a szájüregben stb.) primer lézió jelenik meg - kemény chancre - élesen elhatárolt pecsét fekéllyel a felületen. A szifilisz másodlagos időszaka 3-4 évig tart, bőrkiütés, a test általános állapotának megsértése jellemzi. A harmadlagos időszakot a bőr, a nyálkahártyák, a belső szervek, a csontok, az idegrendszer károsodása jellemzi: olyan képződmények jelennek meg, amelyek hajlamosak a bomlásra, fekélyesedésre.

Immunitás. Nincs veleszületett immunitás a szifilisz ellen. Szifilisz esetén nem steril immunitás alakul ki; A kezelés után az immunitás nem marad meg, így ismétlődő betegségek lehetségesek.

Sötétmezős mikroszkóppal a sápadt treponema kimutatására szolgál a kemény kankr kisülésében. A primer és a másodlagos periódus végére a Wassermann-féle szergológiai reakciók, a Kahn üledékes reakciói, a citokól és egyéb, a halvány treponema elleni antitesteket kimutató tesztek pozitívak lesznek. A tömeges vizsgálatok során szelekciós reakciót, vagy üvegen mikroreakciót alkalmaznak egy csepp vérrel vagy szérummal és speciális antigénnel. A kutatólaboratóriumok a treponema immobilizációs reakcióját és más modern módszereket is alkalmazzák.

A szifilisz mikrobiológiai kutatásának vázlata

Mikroszkópos vizsgálat Szerodiagnosztika

(szerológiai reakciók komplexe):

Wasserman reakciója

Treponema immobilizációs reakció

A natív RIF készítmény mikroszkópos vizsgálata

A sötét mezőben

VÁLASZ VÁLASZ

Kezelés. A leghatékonyabb antimikrobiális szerek a penicillin sorozat antibiotikumai. Használnak bizmut-, jód-, stb. készítményeket is.

Megelőzés. Nincs specifikus profilaxis. A nem specifikus megelőzés a higiéniai szabályok betartásából, valamint a nyilvános jellegű egészségügyi és higiéniai intézkedések komplexumának végrehajtásából áll: a szifiliszben szenvedő betegek elszámolása, a fertőző formákban szenvedő betegek kórházi kezelése, az összes családtag bevonásával. beteg személy a vizsgálatban, a kockázati csoportok szisztematikus vizsgálatában, a lakosság oktatásában stb.

Konkrét célok:

Ismerkedjen meg a szifilisz kórokozójának morfológiájával.

Határozza meg a szifilisz klinikai lefolyásának jellemzőit.

Határozza meg a "szövet" és a "kulturális" treponema fogalmát.

Értelmezze a mikroszkópos vizsgálat eredményeit!

A szifilisz szerológiai diagnózisának módszereinek tanulmányozása.

Ismerkedjen meg a megelőzés és a specifikus terápia módszereivel.

Képesnek lenni:

  • Gyűjtsön anyagokat a kutatáshoz a betegektől
  • Értelmezze a mikroszkópos vizsgálat eredményeit!
  • Tudja, hogyan kell végrehajtani a Wasserman-reakciót

Elméleti kérdések:

1. Kórokozó.

  • Tulajdonságok. ellenállás.
  • Patogenitás emberekre és állatokra. Patogén tényezők, toxinok.
  • A betegség patogenezise emberben, immunitás.
  • Mikrobiológiai diagnosztika.
  • Specifikus megelőzés és kezelés

2. A Wasserman-reakció felállításának céljai.

3. A Wasserman-reakció és az üledékes reakciók diagnosztikus értéke.

4. A Wasserman-reakció mechanizmusa.

5. Az immunitás jellemzői szifiliszben.

Az osztályteremben végzett gyakorlati feladatok:

  • Demonstrációs preparátumok mikroszkópos vizsgálata.
  • Demonstrációs mikropreparátumok vázlata a jegyzőkönyvben.
  • A laboratóriumi diagnosztika sémájának elemzése.
  • A protokoll megfogalmazása.

Irodalom:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Orvosi mikrobiológia, immunológia és virológia / Tankönyv orvosi egyetemeknek, St. Petersburg: „Special Literature”, 1998.- 592p.

2. Timakov V.D., Levashev V.S., Borisov L.B. Mikrobiológia / Tankönyv.-2. kiadás, átdolgozott. és további - M.: Medicina, 1983, - 512s.

3. Pjatkin K.D. Krivoshein Yu.S. Mikrobiológia virológiával és immunológiával - Kijev: Vishcha iskola, 1992. - 431s.

4. Orvosi mikrobiológia /Szerk.: V.I. Pokrovszkij.- M.: GEOTAR-MED, 2001.- 768s.

5. Útmutató a mikrobiológiai, immunológiai és virológiai gyakorlati gyakorlatokhoz. / Szerk. M.P. Zykova.- M. "Gyógyászat". 1977. 288. sz.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiológia. / Szerk. F.K. Cherkes. M.: Orvostudomány, 1986. 512s.

7. Előadási jegyzetek.

További irodalom:

1. Makijarov K.A. Mikrobiológia, virológia és immunológia - Alma-Ata.: "Kazahstan", 1974. 372p.

2. Titov M.V. Fertőző betegségek - K., 1995. 321s.

3. Shuvalova E.P. Fertőző betegségek.- M.: Orvostudomány, 1990.- 559s.

4. BME, 1., 2., 7. évf.

5. Pavlovich S.A. Orvosi mikrobiológia grafikonokban: Proc. orvosi ellátás in-tov. Mn.: Vysh. iskola, 1986. 255p.

Rövid útmutató a gyakorlati leckében végzett munkához.

Az óra elején ellenőrizzük a tanulók tanórára való felkészültségét.

  • Önálló munkavégzés.
  • a Wasserman-reakció megfogalmazása.
  • A Wasserman-reakció számbavétele és rögzítése a jegyzőkönyvben.
  • Laboratóriumi diagnosztikai sémák elemzése és rögzítése a protokollban.

Az önálló munka összetétele tartalmazza a bemutató preparátumok mikroszkópos vizsgálatát és azok vázlatát az óra jegyzőkönyvében.

Az óra végén minden tanuló önálló munkájának végeredményének tesztellenőrzése és elemzése történik.

A gyakorlati óra technológiai térképe

No. p \ p

Szakasz

Idő percben

A tanulás módjai

Felszerelés

Elhelyezkedés

A tanórára való felkészülés kimeneti szintjének ellenőrzése, javítása

20

Kimeneti szint tesztelemek

Táblázatok.

Tantárgyi tesztek.

tanulószoba

Önálló munkavégzés

35

Grafikon

logikai szerkezet

Bemutató készítmények, biológiai készítmények gyűjteménye.

Önkontroll és a tanult anyag korrekciója

15

Célzott képzési programok

Tesztvezérlés

15

Tesztek

A munka eredményeinek elemzése

A laboratóriumi munka algoritmusa:

A szifilisz laboratóriumi diagnózisának rendszerének tanulmányozása.

Kultúrális és szöveti treponemákból készített kenetek mikroszkópos vizsgálata.

A vizsgálati anyag mikroszkópos vizsgálatához a betegektől származó anyagfelvétel szabályainak megismerése.

Demonstrációs preparátumok mikroszkópos vizsgálata és elemzése.

Rajzelőkészítés a jegyzőkönyvben.

A laboratóriumi diagnosztika rögzítési sémái a protokollban.

A protokoll megfogalmazása.

Minden tanuló önálló munkájának tesztellenőrzése, eredményeinek elemzése.


Célzott tanulási feladatok:

1. Egy "elsődleges szifilisz" diagnózisú beteget felvettek az ATC-be. Az alábbi diagnosztikai módszerek közül melyiket alkalmazzák a betegség ezen szakaszában?

A . sötét mező mikroszkópia;

C. RP gélben

D. RA

E . indirekt immunfluoreszcencia

2. Az arc-állcsont-sebészeti osztály betegénél a Wasserman-reakció stádiumba vételekor negatívnak bizonyult. Az alábbi eredmények közül melyik határozza meg a negatív RSK jelenségét?

A . az eritrociták agglutinációjával;

B . vörösvértest üledék jelenléte miatt;

C . a folyadék színének megváltoztatásával;

D . filmképzéssel

E . hemolízis jelenlétével a kémcsövekben.

3. Egy CVA-s beteg vizsgálata során a törzsön és a végtagokon papuláris-rózsás kiütéseket, valamint megnagyobbodott nyirokcsomókat tártak fel. A szifilisz előzetes diagnózisa. Milyen laboratóriumi diagnosztikai módszerrel lehet megerősíteni ezt a diagnózist?

A. allergiás;

b. biológiai;

C . bakteriológiai;

D . bakterioszkópos;

E. ELISA

4. A fogadás során a fogorvos kemény sáncot talált a páciens szájüregében. Az alábbi laboratóriumi diagnosztikai módszerek közül melyik használható fel a diagnózis felállítására?

A . treponema immobilizációs reakció

B . Wassermann reakciója

C. Kahn reakciója

D. RA

E . bakterioszkópos

5. Egy nő a terhesség 8. hetében érkezett a terhesgondozóba. A vizsgálat során vért vettek tőle, hogy ellenőrizzék a treponema elleni specifikus antitestek jelenlétét. Az alábbi szerológiai tesztek közül melyik használható a treponema elleni antitestek kimutatására?

A. Wright reakciója

B . Wassermann reakciója

C. Vidal reakció

D . Bordet-Gangu reakció

E. RTGA.

6. A szifilisz diagnózisának megerősítésére a laboráns szerológiai vizsgálatot végzett, melyben a beteg vérszérumát, kardiolipid antigénjét, komplementjét és indikátor rendszerét használta fel. Mi a neve az adott reakciónak?

A . treponema immobilizációs reakció;

B . Wasserman reakció;

C. Kahn reakciója

D. RP

E . immunfluoreszcens reakció.

7. A szifilisz kórokozója elleni antitestek kimutatására szolgáló szerológiai vizsgálat során a beteg vérszérumában a treponemákat anaerob körülmények között inkubáltuk a beteg szérumával, ami után a baktériumok elvesztették mobilitásukat. Mi volt a válasz és mit jelent?

A . Wasserman reakció, a beteg szifiliszben szenved;

B .Wasserman reakciója, a betegnek lappangási ideje van;

C . treponema immobilizációs reakció, a beteg szifiliszben szenved;

D . indirekt immunfluoreszcens reakció, a beteg szifiliszben szenved;

E . treponema immobilizációs reakció, a beteg egyszer szifiliszben szenvedett.

8. A szifilisz Wasserman-reakcióval történő szerológiai diagnosztikájához a laboráns a következő reagenseket állította elő: kardiolipid antigén, izotóniás nátrium-klorid oldat, hemolitikus rendszer. Milyen egyéb összetevőre van szükség ennek a reakciónak a végrehajtásához?

A . élő treponemák;

B . birka eritrociták;

C. kiegészítés;

D . antiglobulin szérum;

E . diagnosztikai kicsapó szérum.

9. A páciens nyirokcsomóinak pontjából előállított, Romanovsky-Giemsa szerint festett mikropreparátumban az orvos vékony mikroorganizmusokat tárt fel 12-14 egyenletes halványrózsaszín fürtökkel. Milyen fertőző betegség kórokozójáról beszélhetünk ebben az esetben?

A . visszatérő láz;

b. leptospirózis;

C. leishmaniasis

D. szifilisz

E. trypanosomiasis.

10. Primer szifilisz gyanúja miatt a száj nyálkahártyájáról kaparék le. A Romanovsky-Giemsa módszerrel festett kenet mikroszkópos vizsgálata csavaros lila baktériumokat mutatott ki. Az alábbi következtetések közül melyik a helyes?

A . a beteget diagnosztizálták T. pallidum;

B . A beteg atipikus formája van T. pallidum;

C . a betegnek nem patogén treponemája van;

D . rossz festési módszert választottak;

E. -

11. A klinikus elsődleges szifiliszre gyanakodott egy betegnél. Milyen kutatási anyagot kell venni a diagnózis megerősítéséhez?

A . szövetfolyadék kemény kankrból és nyirokcsomók pontjából;

B . bőrkiütésekből származó kaparás;

C. folyadék;

D. nyálka az orrból

E. nyál.

12. Vért vettek egy másodlagos szifilisz gyanúja miatt. Milyen diagnosztikai módszert kell alkalmazni a diagnózis megerősítéséhez?

A . Vidal reakció;

B . allergiás teszt;

D . Bordet-Gangu reakció

E . bakteriológiai módszer

C . indirekt immunfluoreszcens reakció.


Valamint más művek, amelyek érdekelhetik

68128. Szavak vіrshі - én paradicsom a lélekben 78,5 KB
Meta: megsemmisíti az irodalomelméleti tudományos ismereteket, valamint a költői mű ideológiai és művészi elemzését, hogy könnyebben olvasható legyen a különböző módokon; a költői gondolatok átvitt fejlesztésére; fordítsa a szeretetet a művészi szó és a bennszülött természet felé. El fogom olvasni a költői sorokat, és te bűnös, hogy benyújtottad...
68129. Intellektuális játék "Irodalmi Vesselka" Az emberek szívében élsz, Taras! 43,5 KB
Sevcsenko, hogy különböző olvasatokkal fejlessze logikus gondolatait, tanulja meg megérteni Sevcsenko szavait és fejlessze kreativitását. Tarasz Sevcsenko Tarasz Tse lázadó próféciája szerint a nevet nem csak az ukránok ismerik, hanem az egész világ. Sevcsenko tse krinitsa z zhelelny vízi jak vtamovu spirituális spraga az embereknek.
68130. Ismerkedés az országgal Logika 28,5 KB
Ma elképzelhetetlenül drága áron kezelik a gyerekeket. A gyerekek a legrövidebb úton járhatnak az iskolába, de évekig bolyonghatnak különféle labirintusokon. A gyerekek utánozzák a felszállást és az utazást. A tengely a társaság egy jak Gyermekek Borya Petryk Yurko Vira Stas Ira.
68131. Analógia. Dobrir malyunkiv hasonlattal 263,5 KB
Az óra típusa: tanulságos elme és kezdő Obladáció: geometrikus alakzatok és kis tárgyak Grim Photographernek; іndivіdualnі geometriai figurák készletei graloto malunki z sledovnіstyu. Kezeimmel rendbe teszem a figurákat. Minden különböző színű figura És most hagyd, hogy a szemed csodálkozzon...
68132. Utazás a logikai feladatok óceánján 27,5 KB
Meta: Ismerje meg a különböző felfogású gyerekeket; fejleszteni a gondolatokat, a nyelvet, a memóriát, az óvatosságot; vikhovuvat smilivist, rіshuchіst. Óravezető Tájékoztassa őket, és jelölje meg a leckét. Ma már virushaemo a világ körülhajózás drágább a hajón. Rengeteg finomságot ellenőriznek rajtunk. Ljudina egy gondolkodó idióta. A gondolatok szavakban fejeződnek ki.
68133. Sumіsnі és nezumіsnі megérteni. Ismétlés kérése 84,5 KB
Méta: az összegek megértésére és a megértés következetlenségeire vonatkozó tanulási ismeretek rendszerezése, a logikai gondolatok fejlődésének logikai rendjének ismeretének alapos megértése, az elme emlékezetének tisztelete; felébreszteni a lények iránti szeretetet, felébreszteni minden élőlény iránti tudatos érdeklődést, önmegvilágosodást formálni...
68136. MINDEN MODERNIZÁLÁSA, HOGY UKRAJNA MEGÉRTSE: AZ INTÉZMÉNYI SZABÁLYOZÁS MECHANIZMUSAI 188KB
A XXI. század eleji ukrajnai egészségügyi oktatási rendszer működésének eredményessége és eredményessége csak ősszel lehet biztonságban, ha ez nem úgy hangzik, mint Timcsák céljainak a gazdasági és politikai instabilitás által generált újjáéledése. , demográfia, demográfia.

T. pallidum alfaj pallidum - 6-14x0,2-0,3 mikron méretű spirális baktérium; kultúrákban nagy lehet. A spirál fürtjei azonosak, de magasságuk, akár 14 darab is lehet, L-formát képesek kialakítani.

Alapvető hogyan terjed a szifilisz- keresztirányú felosztás. A szifilisz kórokozója külső környezetben nem stabil, kiszáradáskor elpusztul, de hidegben akár 50 napig is kitart. A 40 ° C-os hőmérsékleten történő melegítés egy órán keresztül a patogén tulajdonságok elvesztéséhez vezet; 48 °C-on a baktériumok 10 percen belül elpusztulnak.

A szifilisz kórokozója anilinfestékekkel rosszul festett (innen ered a "halvány spirocheta" elnevezés). szifilisz baktériumok redukálja az ezüst-nitrátot fémes ezüstre, ami fekete vagy sötétbarna színt ad a szöveteknek.

A hazai gyakorlatban elterjedt a Morozov szerinti ezüstözési módszer. Romanovsky-Giemsa szerint rózsaszínűvé válik, és nem patogén treponema- lila vagy kék színben. Burri negatív festést is alkalmaznak.

A szifilisz kulturális tulajdonságai. A szifilisz kórokozójának kultúrája

Halvány spirocheta a termesztési körülményekre igényes, mesterséges táptalajon rosszul terem; még nem állnak rendelkezésre módszerek a tenyészetek stabil előállítására.

Hazánkban a legnagyobb számban szifilisz törzsei azonosított kazanyi mikrobiológusok V.M. Arisztovszkij és P.P. Geltzer.

Ezek a "Kazan" szifilisz törzsei a Reiter törzzsel együtt szerodiagnózis céljából Ag előállítására használják. Hosszú távú termesztéssel szifilisz baktériumok alkalmazkodnak az egyszerűbb környezetekhez (például Kitta-Tarozzi), és elveszítik patogén tulajdonságaikat.

Szifilisz kolóniák kicsi, a tenyésztés 3-5. napján jelennek meg.

A cikk tartalma

Sápadt treponema

Morfológia és élettan

A T.pallidum spirál alakú, protoplasztikus henger, amely 8-12 örvényre van csavarva. 3 periplazmatikus flagella nyúlik ki a sejt végéből. A halvány treponema nem érzékeli jól az anilinfestékeket, ezért Romanovsky-Giemsa festékkel festik. A leghatékonyabb módszer azonban az, ha sötétmezős vagy fáziskontraszt mikroszkópban vizsgáljuk. Mikroaerofil. Mesterséges táptalajokon nem nő. A T. pallidum-ot nyúl hereszövetben tenyésztik, ahol jól szaporodik, és teljes mértékben megőrzi tulajdonságait, orchitist okozva az állatban. Antigének. A T. pallidum antigén szerkezete összetett. A külső membránfehérjékhez, lipoproteinekhez kapcsolódik. Ez utóbbiak keresztreaktív antigének, amelyek közösek az emberekben és a szarvasmarhákban. Antigénként használják a Wassermann-tesztben a szifilisz szerodiagnózisában.

Patogenitás és patogenezis

A Treponema pallidum virulenciafaktorai közé tartoznak a külső membránfehérjék és az LPS, amelyek a sejtből való kiszabadulás után mutatják toxikus tulajdonságaikat. Ugyanakkor nyilvánvalóan a virulencia-tényezőknek is tulajdonítható az a képesség, hogy a treponema az osztódás során külön fragmentumokat képez, mélyen behatolva a szövetekbe. A szifilisz patogenezisének három szakasza van. Az elsődleges szifiliszben elsődleges fókusz kialakulása figyelhető meg - kemény chancre a fertőzés bejárati kapujának helyén, majd behatol a regionális nyirokcsomókba, ahol a kórokozó szaporodik és felhalmozódik. Az elsődleges szifilisz körülbelül 6 hétig tart. A második szakaszt a fertőzés általánossá válása jellemzi, amelyet a kórokozó behatolása és vérkeringése kísér, amihez bőrkiütések társulnak. A másodlagos szifilisz időtartama a kezeletlen betegeknél 1-2 év. A harmadik szakaszban a belső szervekben és szövetekben lokalizált fertőző granulomák (a fogíny bomlására hajlamosak) találhatók. Ez az időszak a kezeletlen betegeknél több évig tart, és a központi idegrendszer (progresszív bénulás) vagy a gerincvelő (tasca dorsalis) károsodásával végződik.

Immunitás

A szifilisz esetében humorális és sejtes immunválasz lép fel. A keletkező antitestek nem rendelkeznek védő tulajdonságokkal. A sejtes immunválasz a kórokozó rögzítésével és a granulómák képződésével jár együtt. A treponema eltávolítása a szervezetből azonban nem történik meg. Ugyanakkor a kedvezőtlen környezeti feltételek a treponemák által kiváltott ciszták képződését idézik elő, amelyek az erek falában lokalizálódnak. Úgy gondolják, hogy ez a betegség átmenetét jelzi a remisszió szakaszába. A cisztákkal együtt a treponemák L-alakot alkotnak. Szifilisznél hormonpótló kezelés jön létre, mely bőrallergiás teszttel kimutatható elölt treponema szuszpenzióval. Úgy gondolják, hogy a szifilisz harmadlagos időszakának megnyilvánulása a HRT-hez kapcsolódik.

Ökológia és epidemiológia

A szifilisz tipikus antroponotikus fertőzés. Csak azok az emberek betegszenek meg, akik a természetben a fertőzések tározói. A fertőzés szexuális úton terjed, és sokkal ritkábban - fehérneműn és egyéb tárgyakon keresztül. A külső környezetben (levegőben) a treponema gyorsan elhal.

Szifilisz és egyéb treponematosisok

A szifilisz egy krónikus fertőző nemi betegség, amely ciklikusan progresszív lefolyású, a bőrt, a nyálkahártyákat, a belső szerveket és az idegrendszert érinti. A betegség kórokozója a Treponema pallidum A szifilisz kialakulásának három fő periódusa van, melynek laboratóriumi diagnosztikai módszerei megvannak a maga sajátosságai. A betegség korai szakaszában a laboratóriumi diagnózis anyaga a kemény sánctól való izolálás, a nyirokcsomók pontjai, a roseola, a szifilisz és hasonló kaparék. A másodlagos és harmadlagos periódusban vérszérum és agy-gerincvelői folyadék vizsgálata történik.Mivel a treponema tiszta tenyészeteinek izolálása hagyományos bakteriológiai laboratóriumokban lehetetlen, a betegség primer periódusában (ritkán később) bakterioszkópos diagnosztikai módszerrel. előadott. A másodlagos időszaktól kezdve elsősorban szerológiai módszereket alkalmaznak.

Bakterioszkópos kutatás

A kóros anyag felvétele előtt először törölje le a szifilitikus fekélyt egy vattacsomóval, hogy eltávolítsa a zsíros lepedéket és a szennyező mikroflórát. Ezután szikével vagy fém spatulával irritálják a kemény chancre alját, vagy gumikesztyűben ujjakkal erőteljesen kinyomják a fekélyt, hogy sebváladékot eresszen ki. Kis mennyiségű átlátszó folyadékkal egy csepp 0,85%-os nátrium-klorid oldathoz adható. Ha a chancre aljáról nem lehet anyagot venni (phimosis, fekély hegesedése stb.), akkor regionális nyirokcsomókat szúrnak ki.sötét látómező (jobb!), vagy fáziskontraszt vagy anoptrális mikroszkóp segítségével. A sápadt treponema a sötét látómezőben enyhén fényes vékony, finom spirálnak tűnik, meredek, egyenletes, lekerekített elsődleges fürtökkel. A mozdulatok simák, ezért ferdén hajlik. De az ingaszerű kilengések, amelyek különösen jellemzőek rá. A szifilisz kórokozóját meg kell különböztetni a Treponema refringenstől (amely a külső nemi szerveket kolonizálja), amely vastagabb, durvább, szabálytalanul nagy fürtökkel rendelkezik, aktív, szabálytalan mozgású, de nem hajlik. A fusosp-irochetous szimbiózisú treponemákat vékony mintázat, finom fürtök és szabálytalan mozgás jellemzi.A szájszifilisz diagnosztizálása során a halvány treponemát is meg kell különböztetni a fogászati ​​treponemáktól, különösen a T. dentiumtól, valamint a T. buccalistól. Az elsőt általában nehéz megkülönböztetni a szifilitikustól. Igaz, rövidebb, 4-8 éles fürtje van, nincs ingamozgás. A T. buccalis vastagabb, kezdeti durva fürtjei és szabálytalan mozgásai vannak.Bármilyen kétség esetén figyelembe kell venni, hogy a sápadtoktól eltérően minden szaprofita treponéma jól fest az anilinfestékekkel. Nem hatolnak be a nyirokcsomókba, így a szúrások vizsgálata nagy diagnosztikai értékkel bír. A tipikus treponemák kimutatása a nyirokcsomók pontjaiban kétségtelenül megerősíti a szifilisz diagnózisát. Előnye abban rejlik, hogy az anyagot gyorsan megvizsgálják, és a legjellemzőbb az élő állapotban lévő treponemák morfológiája. A Burri-módszer szerinti tintakeneteket már nem alkalmazzák, ha a sötét látómezőben nem lehet vizsgálatot végezni, különféle festési módszereket lehet alkalmazni. A sápadt treponema nem érzékeli jól az anilinfestékeket. A számos javasolt festési módszer közül a legjobb eredményt a Romanovkim-Giemsa festés használatával éri el. Az elkészített keneteket metil-alkohollal vagy Nikiforov keverékében rögzítik. Tiszta eredményeket kapunk, ha a Romanovsky-Giemsa foltot a készítménybe öntik. Ehhez a gyufadarabokat egy Petri-csészébe helyezzük, rájuk egy tárgylemezt kenettel lefelé, és addig öntjük a festéket, amíg az el nem nedvesíti a kenetet. A színezési idő megduplázódik. Mikroszkóp alatt a halvány treponemák halvány rózsaszín színűek, míg más típusú treponemák kékre vagy kékeslilára színeződnek, Morozov-féle ezüstözési módszer is alkalmazható. A treponemák teljesen megőrzik morfológiai jellemzőiket, és mikroszkóp alatt barnának vagy majdnem feketének tűnnek. De az ezüstözött készítményeket nem tárolják sokáig. Az utóbbi időben a treponema festési módszereket ritkán alkalmazzák, ha a szifiliszt kemoterápiás gyógyszerekkel kezelik, a kórokozót sötét látómező segítségével is szinte lehetetlen azonosítani a kóros anyagokban. Negatív elemzés kézhezvételekor meg kell ismételni.

A szifilisz szerológiai diagnózisa

A szerológiai reakciók lefolytatása során ma már az Ukrajnában egységesített kutatási módszereket alkalmazzák: komplementfixációs reakció (RCC), immunfluoreszcencia (RIF), treponema immobilizáció (PIT), precipitációs mikroreakció (MPR) és enzim immunoassay (ELISA). a fő és legáltalánosabb reakciónak a komplementkötési reakciót vagy a Wasserman-reakciót (РВ, RW) tekintették. Beállításához idegrendszeri károsodás esetén szifiliszben szenvedő beteg vérszérumát és agy-gerincvelői folyadékot használnak, A Wasserman-reakció beállításának módja nem tér el az RSC lebonyolítási technikától. A különbség csak annyi, hogy az RO esetében nem csak specifikus treponemális, hanem nem specifikus cardiolipin antigént is használnak.A cubitalis vénából éhgyomorra, vagy étkezés után legkorábban 6 órával 5-10 ml vért veszünk. Nem vehet vért lázas betegektől, alkohol és zsíros ételek fogyasztása után, terhes nőktől 10 nappal szülés előtt és vajúdó nőktől. A vérből kivont szérumot 56 °C-on 30 percig melegítjük, hogy inaktiválja saját komplementjét. Az RO szükségszerűen két antigénnel van beállítva: specifikus és nem specifikus.. Specifikus ultrahangos treponemális antigént kémcsövekben növesztett és ultrahangnak kitett halvány treponema (Reiter törzs) tenyészetéből állítanak elő. Fagyasztva szárított por formájában állítják elő. A nem specifikus kardiolipin antigént szarvasmarha szívből származó lipidek alkoholos extrakciójával és ballasztkeverékekből történő tisztítással állítják elő, 2 ml-es ampullákba csomagolva. Az antigénnek az RO-ba történő bejuttatásához az ezen utasítások szerint titrálják. Közvetlenül az RV beállítása előtt a komplement és a hemolitikus szérum titrálását ugyanazon séma szerint végezzük, mint az RSK-ban. A Wasserman-reakciót minőségileg és mennyiségileg is megfogalmazzák. A kvalitatív reakciót három kémcsőben, két antigénnel a szokásos séma szerint hajtjuk végre A reakció eredményeinek értékelése 4 plusz rendszer szerint történik: pozitív reakció - ha a hemolízis teljes vagy jelentős késése van (4 +, 3 +); gyengén pozitív reakció - a hemolízis részleges késése (2+); kétséges reakció - a hemolízis enyhe késése (1 +). Teljes hemolízis esetén az RO negatívnak minősül.Minden pozitív kvalitatív reakciót adó szérumot kvantitatív módszerrel is meg kell vizsgálni 1:10-től 1:640-ig terjedő szekvenciális hígítással.ami komplett (4+) vagy kitűző. (3+) hemolízis késés. Az RO kvantitatív módszere fontos a szifilisz kezelés hatékonyságának értékeléséhez. A reagin titer gyors csökkenése sikeres terápiát jelez. Ha a szérumtiter hosszabb ideig nem csökken, ez az alkalmazott gyógyszerek hatékonyságának hiányát és a kezelés taktikájának megváltoztatásának szükségességét jelzi.Pylorival szeronegatív primer szifilisz vagy látens, harmadlagos vagy veleszületett szifilisz esetén javasolt feltenni. a Wasserman-reakció hidegben ugyanezen séma szerint. Neuroszifilisz gyanúja esetén az RO-t agy-gerincvelői folyadékkal végezzük, amely inaktiválva van, mivel nem tartalmaz saját komplementet. A reakcióba hígítatlan agy-gerincvelői folyadékot vezetünk 1:2 és 1:5 hígításban.A Wasserman-reakció 2-3 héttel a kemény chancre megjelenése után válik pozitívvá. Másodlagos szifiliszben az esetek 100% -ában pozitív, harmadlagos - 75% -ban. Ezenkívül a szerológiai reakciók komplexumában (CSR) szűrővizsgálatként mikroprecipitációs reakciót alkalmaznak vérplazmával vagy inaktivált szérummal.

Csapadék mikroreakció

Precipitációs mikroreakció kardiolipin antigénnel. A reakció elve az, hogy ha szifiliszben szenvedő beteg vérplazmájához vagy szérumához kardiolipin-antigén emulziót adunk, csapadék (antigén-antitest komplex) képződik, amely fehér pelyhek formájában válik ki. Ezt a technikát alkalmazzák: három csepp plazmát (vagy inaktivált szérumot) pipettáznak a lemez üregébe, majd adnak hozzá egy cseppet a standard kardiolipin antigén emulziójából. A reakciókomponenseket úgy keverjük össze, hogy a lemezt 5 percig rázzuk, majd három csepp 0,9%-os nátrium-klorid-oldatot adunk hozzá, és további 5 percig szobahőmérsékleten hagyjuk. Kötelező kontroll gyengén pozitív vérszérummal. Az eredményeket szabad szemmel, mesterséges fényforrás felett értékelik. Ha nagy pelyhek jelennek meg a kútban, a reakciót pozitívnak (4 +, 3 +), közepesnek és kicsinek - gyengén pozitívnak (2 +, 1 +) tekintik. Negatív eredmény esetén csapadék nem képződik A precipitációs mikroreakció kvantitatív módszerrel is elvégezhető a kicsapódó antitestek titerének megállapítására és ennek alapján a kezelés hatékonyságának értékelésére. Magasabb MRP titereket kapunk plazmával, mint szérummal. Külföldön az MRP analógja a betegszérummal a VDRL (Veneral disease research laboratoiy), a plazmával pedig az RPR (Rapid plasma reagin).

Immunfluoreszcens reakció (RIF)

A szifilisz szerológiai diagnózisában széles körben használt specifikus reakciók csoportjába tartozik a közvetett immunfluoreszcens reakció. Antigénként a Nichols törzs patogén halvány treponema szuszpenzióját használja a nyúl herék parenchimájából a fertőzést követő 7. napon. A reakció kétféle változatban történik: RIF-ABS és RIF-200. Az első változatban antitest-szorbenst (sonicat) használnak - ultrahangos treponemális antigént a CSC számára. A Kaunas cég gyártja bakteriális készítmények előállítására (Litvánia). A RIF-200 opcióval a páciens szérumát 200-szorosra hígítják a csoportos antitreponemális antitestek hatásának megszüntetése érdekében.A RIF-ABS vékony, jól zsírtalanított tárgylemezekre kerül felállításra. A poharak hátoldalán üvegvágóval 10 db 0,7 cm átmérőjű kör van jelölve.A körön belül az üvegre antigént - halvány treponemák szuszpenzióját - visznek fel olyan mennyiségben, hogy 50- Ebből 60 a látómezőben. A keneteket levegőn szárítjuk, lángon és 10 percig acetonban rögzítjük. Adjon 0,2 ml szorbenst (szonikát) és 0,5 ml beteg vérszérumát egy külön csőbe, jól keverje össze. Az elegyet kenetre (antigénre) visszük fel úgy, hogy egyenletesen fedje le, majd 30 percig nedves kamrában 3-7 °C-on inkubáljuk (a reakció II. fázisa). Ezt követően a kenetet foszfátpufferrel mossuk, szárítjuk, és antishobulin fluoreszcens szérumot alkalmazunk 30 percig, majd 37 ° C-os nedves kamrába helyezzük (II. fázis). A gyógyszert ismét foszfát pufferrel mossuk, szárítjuk és fluoreszcens mikroszkóp alatt vizsgáljuk.Pozitív reakció esetén a halvány treponemák aranyzöld fényt bocsátanak ki, negatív esetén nem világítanak.200-szor foszfát pufferrel. Az idegrendszeri szifiliszben szenvedő betegek agy-gerincvelői folyadékával végzett immunfluoreszcens reakció során RIF-c-t és RIF-10-et használnak, azaz. A lúgot nem inaktiválva vezetjük be, és hígítjuk vagy 1:10 arányban hígítjuk.

Treponema pallidum immobilizációs teszt (PIT)

A halvány treponemák (PIT) immobilizációs reakciója a mobilitásuk elvesztésének jelenségén alapul, ha a beteg szérumából és komplementjéből immobilizáló antitreponemális antitestek vannak jelen anaerobiózis körülményei között. A reakcióban antigénként a Nichols laboratóriumi törzzsel fertőzött nyúl hereszövetéből származó halvány treponemák szuszpenzióját használjuk. A szuszpenziót steril 0,85%-os nátrium-klorid-oldattal hígítjuk úgy, hogy a látómezőben 10-15 spirocheta legyen.A reakció végrehajtásához 0,05 ml beteg vérszérumát, 0,35 ml antigént és 0,15 ml komplementet adunk hozzá. steril kémcsőben keverjük össze. Az élményt a szérum, az antigén és a komplement ellenőrzése kíséri. A csöveket anaerosztátba helyezzük, anaerob körülményeket teremtünk, és termosztátban tartjuk 18-20 órán keresztül 35 °C hőmérsékleten. Ezután minden csőből nyomásesést készítünk, legalább 25 treponemát megszámolunk, és hány ezek mozgékonyak és hány mozdulatlan. A halvány treponemák specifikus immobilizációjának százalékos arányát a következő képlettel számítjuk ki: x = (A-B) / B * 100, ahol X az immobilizáció százaléka, A a mozgó treponemák száma a kontrollcsőben, B a mozgékony treponemák száma treponemák a kémcsőben. A reakció akkor tekinthető pozitívnak, ha az immobilizáció százaléka 50 vagy több, gyengén pozitív - 30-50, kétséges - 20-30 és negatív - 0-20. Ovcsinnyikov. A kísérlet anaerob körülményeit úgy hozzuk létre, hogy a reagáló keveréket (szérum, antigén, komplement) melangeurokba helyezzük, amelyek mindkét vége gumigyűrűvel van lezárva. A melangerin technika lehetővé teszi az anaerobiózis létrehozásához szükséges komplex berendezések és berendezések mellőzését, de olyan eredményeket ad, amelyek a klasszikus mikroaneurosztatikus technikával nem elérhetőek.A szifilisz szerológiai diagnosztikájában a treponema immobilizációs és immunfluoreszcens reakciók tekinthetők a legspecifikusabbnak. És mégis, a PIT, sajátossága ellenére, a beállítás bonyolultsága miatt nem javasolt a széles körű gyakorlatban való használatra.

Enzim immunoassay (ELISA)

Az enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatot (ELISA) mind kadriolipin antigénnel (nem specifikus, szelekciós reakció), mind treponemálissal (specifikus reakció) végezzük, amely megerősíti a szifilisz diagnózisát. Ha treponema elleni antitesteket tartalmaz, akkor antigén-antitest komplex képződik (II. fázis). A meg nem kötött, nem specifikus antitestek lemosása után enzimmel (leggyakrabban torma-peroxidázzal) konjugált antiglobulin szérumot adunk a lyukakba. A konjugátum szilárdan kötődik az antigén-antitest komplexhez (II. fázis), majd a meg nem kötött konjugátum lemosása után az OFD festő szubsztrátot - ortofenilén-diamint (III. fázis) adjuk a lyukakba. A peroxidáz reakciót kénsav hozzáadásával leállítjuk. Ellenőrzésre ugyanazokat a mintákat pozitív és nyilvánvalóan negatív szérummal helyezték el, az analízis eredményeinek elszámolása fotométerrel történik, amely kéthullámú módban (492 nm és 620 nm) határozza meg az optikai sűrűséget. Az enzimes antitest reakció felállításához a fotométeren kívül egy- és nyolccsatornás, polipropilén hegyes automata pipetták és megfelelő diagnosztikai tesztrendszerek szükségesek A szifilisz szerológiai diagnosztikájában széles körben alkalmazzák az ELISA módszert. Ugyanilyen hatásos a betegség lappangási periódusban (fertőződés után 1-2 héttel) történő kimutatására, a betegség klinikai megnyilvánulásaival és látens formáival. Nagyon gyakran alkalmazzák az ELISA-t a lakosság szűrővizsgálataiban, különösen a vérátömlesztési állomásokon, a laboratóriumi gyakorlatban esetenként az immunadhéziós reakciót (RIP) és az indirekt hemagglutinációs reakciót (RNHA) is alkalmazzák. Az első azon a tényen alapul, hogy a Nichols törzs patogén heretreponémái, ha komplement és humán eritrociták jelenlétében keverednek a beteg szérumával, megtapadnak a vörösvértestek felületén. Az RNHA-t módszertani egyszerűsége miatt széles körben használják szifilisz diagnosztizálására. Már három héttel a fertőzés után pozitívvá válik. A pozitív reakció eredménye évekig megmarad a gyógyulás után. Ennek a reakciónak külföldön analógja a TRHA (Treponema pallidum haemoagglutination).
KATEGÓRIÁK

NÉPSZERŰ CIKKEK

2023 "kingad.ru" - az emberi szervek ultrahangvizsgálata