A láb mycosisának tünetei. A bőr gombás megbetegedésének laboratóriumi diagnosztikája Nem használható felületes mikózisok diagnosztizálására

A mérleget vagy a hajat egy tárgylemezre helyezzük (az üveget zsírtalanítani kell), és egy, két vagy három csepp 30%-os maró-kálium- vagy nátronlúg-oldattal leöntjük, és fedőüveggel lefedjük. 2-3 percen belül alkoholégő lángján enyhe melegítéssel a készítményt fedőlemezzel enyhén addig nyomjuk, amíg
szürke felhő a pikkelyek vizsgálatakor. A hajat nem szabad tönkretenni, ilyen melegítésnél csak megduzzad. A mikroszkópos vizsgálat (100-200-szoros nagyítás) elsötétített membránnal gombás elemeket - spórákat vagy micéliumfonalakat - tár fel. A mikroszkópos vizsgálat sikerének szükséges feltétele a pikkelyek és szőrzet kinyerésének alapossága, amelyet speciális csipesszel (ciliáris csipesz) kell kivenni az érintett elváltozásokból. Nemcsak a jól látható szőrszálakra, kéregekre, pikkelyekre kell figyelni, hanem a kevéssé észrevehető szőrmaradványokra (ún. csonkokra) és fekete pontokra is, amelyeket szikével vagy szövettani tűvel távolítanak el. Soha nem szabad megelégedni azzal, hogy a beteget az elváltozás felé irányítja, magának az orvosnak kell alaposan megvizsgálnia a teljes fejbőrt.

A trichophytosis által érintett hajban a gomba spórái láncba rendeződnek. A microsporia esetében a spórák sokkal kisebbek, mint az ótvar esetében, nem hajtódnak össze láncokká, és a haj külső részén helyezkednek el. A haj belsejében septate micélium szálak találhatók. A haja mintha fűzfahüvelybe van öltözve. A varasodásnál polimorf spórák, durva különféle szálak és általában légbuborékok figyelhetők meg (48. ábra).

Ugyanakkor a gombák nem érintik teljesen az egész hajat, de az érintetlen területek megmaradnak.
A sima bőrből származó anyag kinyeréséhez a pikkelyeket lekaparják. perifériás elváltozásokat éles kanállal vagy szikével. A körmökről való kaparást kényelmesebb éles orvosi késsel (szikével) végezni, a körömlemez belső felületéről eltávolítani a kis, de mély részeket, vagy lekaparni a pityriasis port a kanos körömlemezekről.
A kiindulási anyagot kémcsőben lúggal felforraljuk, majd ebben a kémcsőben 12-20 órán át állni hagyjuk.
Ezt követően a tartalmat centrifugáljuk, és az üledéket mikroszkóp alatt megvizsgáljuk (N. A. Chernogubov módszere).
A gombák jól szaporodnak szénhidrátot és fehérjét tartalmazó mesterséges táptalajokon. Különösen elterjedt az úgynevezett eredeti Sabouraud táptalaj, a sörlé, az agar és a zöldségfélék.

2. Kóros anyag laboratóriumi vizsgálata

2.1. Mikroszkópos vizsgálatok

A gomba morfológiai elemeinek - élesztősejtek, pszeudomicélium, micélium, konidioforok, konídiumok, mély mycosisok szöveti formái - kimutatására natív és festett készítményekben vizsgálják a patológiás anyagot.

A folyékony patológiás anyagot festetlen állapotban a következő derítőfolyadékokban vizsgáljuk: alkohol és glicerin keveréke (1 rész etil-alkohol, 2 rész glicerin, 2 rész desztillált víz), Lugol-oldat (1 g kristályos jód, 2 g kálium). jodid, 150 ml víz), valamint vízben vagy sóoldatban. A natív preparátumok elkészítéséhez a tárgylemezre hurokkal vagy pipettával egy csepp anyagot, majd 1-2 csepp tisztítófolyadékot fedőlemezzel letakarva kis, 1:80-as nagyítással mikroszkóppal (okulár 10x ill. 8x objektív), amelyen élesztősejtek klaszterei, pszeudomicélium, gomba micélium és egyéb elemei láthatók. Nagy, 1:400-as nagyításnál az egyes sejtek jellemezhetők.

Sűrű kóros anyagot (bőr, körömpikkely) csepp 10-20%-os KOH-oldatba helyezünk, égőláng fölött enyhén melegítjük (a jobb macerálás érdekében), amíg a csepp peremén alkálikristályok jelennek meg. Ezután a cseppet fedőlemezzel fedjük le, enyhén rányomjuk és mikroszkóppal vizsgáljuk, először kis nagyítással, hogy megtaláljuk a pelyhet, majd nagy nagyítással.

A hajanyagban, a hajat körülvevő spórák köpenyében (ectothrix) vagy a haj belsejében (endotrix) általában nagyon jól láthatóak a gombás elemek. A szőrsérülések, akárcsak a spóraméretek, különböző dermatofitafajokra jellemzőek. Differenciáldiagnózis szükséges a gombás struktúrák és műtermékek között. A hamis pozitív eredmények lehetséges forrásai a lipidcseppek, légbuborékok, textilszálak és az úgynevezett „mozaikgomba”. A lipidcseppek élesztősejteknek tűnhetnek, és az ilyen leletek leggyakrabban gyengén tisztázott anyagokban fordulnak elő. A textilszálak általában külön fekszenek az epidermisz, a haj vagy a köröm anyagától. Nagyobbak, mint a gomba hifái, egyenetlen vastagságúak, nem tartalmaznak septumokat. A „mozaikgomba” egy műtermék, amelyet a KOH kristályosítása során nyernek a készítmények túlzott melegítésével. A gombákkal ellentétben az egyértelmű sejtosztódás nincs meghatározva.

A gombás fertőzések diagnosztizálásának fontos lépése a festett készítmények elkészítése. Bármilyen kóros anyagot (keneteket, szervlenyomatokat, centrifugákat és természetesen szövettani metszeteket) három fő feldolgozási módnak kell alávetni: 1) festés PAS módszerrel a valódi gombák - eumycetes - azonosítására; 2) festés Gram-módszerrel vagy módosításokkal Gram-Weigert szerint, Bogolepov szerint Brown-Brenna szerint - a kísérő bakteriális mikrobiota azonosítására, az aktinomyceták és a nocardia kimutatására; 3) Ziehl-Nielson-módszer szerinti festés vagy Kignon-módszer szerinti módosítás - saválló mikroorganizmusok kimutatására, elsősorban Mycobacterium tuberculosis-szal való indikációra és differenciálásra, lepra, nocardia és spóraképző kórokozók kimutatására élesztők.

A PAS-módszer (Schiff-jódsav) magában foglalja a semleges poliszacharidok kimutatását a mikroorganizmusok falában. A legtöbb eumyceta falában változó koncentrációban glükán-mannán komplex található, ami miatt festődés lép fel.

A prokarióták (baktériumok) PAS-negatívnak bizonyulnak, beleértve az aktinomicétákat és a mikológus érdeklődésére számot tartó nocardiát. Az actinomycoticus drusen képződése során azonban kialakul az úgynevezett „cement”, amely a vegetatív aktinomikózis micéliumot granulátummá ragasztja, ami PAS-pozitív színt is ad. Ezzel kapcsolatban ez a módszer az aktinomikózis diagnosztizálására is alkalmazható.

A PAS reakció (és annak módosítása) a legfontosabb módszer a gombás fertőzés szöveti formáinak diagnosztizálására. A módszer a szénhidrátok glikolcsoportjainak jóddal vagy krómsavval történő oxidációján alapul. A jódsav az 1,2- és 1,4-glikolokat aldehidekké oxidálja, és megszakítja a kötéseket a hidroxilcsoportot hordozó szénatomok között. Az aldehidcsoportok az aldehid Schiff-reagens segítségével is kimutathatók. In situ, a gomba falában a heteropoliszacharid komplex intenzíven lilás-vörös színben festődik (módszer - lásd a mellékleteket).

A környező szövetek elszíneződésének elnyomására világoszöld, metanolsárga stb. kezelést („ellenfestést”) alkalmaznak. Ebben az esetben csak gombás sejteket észlelnek, ami nagyon hasznos a szövetekben vagy kenetkészítményekben a kórokozó indikáció szakaszában. Ugyanakkor nem lehet megítélni a szervezet reakcióját és szöveti elváltozásait az ilyen készítményekre. Mindig szükséges a párhuzamos tárgylemezeket PAS módszerrel festeni és hematoxilinnal ellenfesteni.

A gyakorlatban nemcsak a PAS módszer klasszikus változatát alkalmazzák, hanem annak különféle módosításait is: krómsavas oxidáció (jódsav helyett) a Bauer-reakció, Gridley-festés, metenamin ezüstimpregnálás Gomory-Grocott módszerrel. Mindegyiket sikeresen alkalmazzák a gombák szöveti formáinak kimutatására, és ugyanazon az elven alapulnak (technika - lásd a mellékletet). 3. táblázat.

3. táblázat

A gombák szövetformáinak tinctoriális tulajdonságai

(kóros anyagban, szövettani metszetekben)

Opportunista mikózisok	Észlelési módszerek
Candidiasis	PAS vagy Gridley folt
Aspergillosis	Hematoxilin és eozin, Gomory-Grocott impregnálás
Zygomycosis	Hematoxilin és eozin
Cryptococcosis	Alcian kék (Mowry módszer szerint) + PAS reakció + hematoxilin
Pneumocisztózis	Bauer pác, Gomory-Grocott impregnálás, tionin pác
Fusarium	Festés Romanovsky-Giemsa módszerrel, Wright módszerrel
Scedosporium
Trichosporosis	Hematoxilin és eozin, Romanovsky-Giemsa festés
Feohifomikózis és kromomikózis	Hematoxilin és eozin
Elsődleges patogén mikózisok:	Észlelési módszerek
kokcidioidomikózis	PAS-reakció + hematoxilin
Histoplasmosis	Gomory-Grocott impregnálás, Bauer pác, Romanovsky-Giemsa pác
Észak-amerikai blastomikózis
Paracoccidiodiasis	PAS-reakció, Gomory-Grocott impregnálás
Adiaspiromikózis	Hematoxilin és eozin, PAS reakció
Pseudomycosis:	Észlelési módszerek
Actinomycosis	Hematoxilin és eozin, Gram-Weigert festés
Nocardiosis	festés Ziel-Nielsen módszer szerint, Kignon módszer szerint, Gram módszer szerint.

Ha feltételezzük a cryptococcosis diagnózisát, tanácsos módszereket alkalmazni a tokanyag specifikus kimutatására. Cr.neoformans glikozaminoglikánokat (savas poliszacharidokat) tartalmaz. Erre a célra Alcian kék festést (Mowry módszer szerint), bázikus barna (Shubich módszer szerint), mucikarmin festést alkalmazunk. A hármas festés nagyon hasznos: PAS reakció, majd kezelés alcian kékkel, majd hematoxilinnel. Ebben az esetben lehetővé válik a cryptococcusok és más hasonló morfológiájú gombák szöveti formáinak megkülönböztetése.

A kóros anyag (szövettani készítmények) leírása adatokat tartalmaz a gombák szövetformáinak morfológiájáról, méretéről, színárnyalati jellemzőiről, a gazdaszövetekhez való viszonyáról, a fagocitózis jelenlétéről, valamint a kísérő mikrobiota meghatározásáról.

2.2. Kóros anyag vetése és a sejtek mennyiségi elszámolása élesztőgombák által okozott mikózisokban

A gombakultúrák beszerzése szükséges azok azonosításához és a gombaellenes szerekkel szembeni érzékenységük meghatározásához.

A vizsgálat előtt a köpetet steril gyöngyökkel rázva 5-10 percig homogenizáljuk. Ha a köpet sok nyákot tartalmaz és rosszul homogenizált, 1-2 ml steril sóoldatot adhatunk hozzá. A köpet mikroszkópos vizsgálata natív vagy festett készítményekben történik. Ha a köpet nagy nagyítású mikroszkópos vizsgálatakor a gomba elemei láthatók a látómezőben, akkor 1:10, 1:100, 1:1000 hígításban kell elvetni, ha a gomba elemeit nem észlelik, a köpet hígítatlanul vetjük el. A hígításokat folyékony tápközegben (sörlé, Sabouraud, 1% pepton víz) vagy steril sóoldatban készítjük. Mindegyik hígításból 0,1 ml-t oltunk be spatulával 2 csésze sörceagarhoz, Sabouraud agarhoz vagy MPA-hoz antibakteriális antibiotikumok - penicillin és sztreptomicin, biomicin (100-200 egység / ml táptalaj) hozzáadásával. A táptalajt előzetesen termosztátban +37 C-on szárítjuk, mert kondenzátum jelenlétében a telepek növekedése összefolyó jellegű lehet. A terméseket termosztátban +37°C-on 48 órán át inkubáljuk, majd ha azonos típusú élesztőkolóniák szaporodnak, mennyiségileg rögzítjük. A vizsgált anyag 1 ml-ében vagy 1 g-jában lévő élesztősejtek számának (n) kiszámítását az n = abs képlet szerint kell elvégezni, ahol a az egy Petri-csészén lévő telepek átlagos száma, b = 10 beoltással térfogata 0,1 ml, c a kiválasztás hígítási foka (10,100,1000).

Számítási példa: átlagosan 60 telep nőtt fel 1:1000 hígítású lemezeken, míg a tesztkiválasztás 1 ml-e 60 x 10 x 1000 = 600 000 élesztősejtet tartalmaz.

A hörgők, maxilláris üregek BAL, FLUSHING folyadéka, epe (A, B, C adagok), gyomornedv, nyombéltartalom, vizelet centrifugacsövekbe kerülnek, és 10-15 percig centrifugálják, majd a felülúszót egy gyors mozdulattal leeresztik. . Az üledékből natív készítményeket készítenek a mikroszkópos vizsgálathoz. Ha a mikroszkópos vizsgálat során minden látómezőben élesztősejtek találhatók, akkor az oltást 0,1 ml-es 1:100 és 1:1000 hígításokban végezzük szilárd táptalajon, és 37 °C-on 48 órán át inkubáljuk. nem mutatható ki az üledék mikroszkópos vizsgálata során, a tenyésztés nélkül elvetett üledék. Az élesztőflóra mennyiségét 1 ml kóros anyagra számítjuk.

Az ürüléket mérőkanállal 0,2 g mennyiségben veszünk, 1,8 ml folyékony cefrebe helyezzük, és üvegrúddal alaposan összekeverjük. Az így kapott hígítást (1:10) 5-10 percig állni hagyjuk, majd 1:100, 1:1000 hígításokat készítünk, és 2 Petri-csészénként 0,1 ml térfogatú agar táptalajt oltunk be. Az 1 g székletre vetített élesztőflóra mennyiségének elszámolása.

Gerincvelői folyadék. Jellemezze megjelenését (átlátszó vagy zavaros, színtelen vagy színes, vérszennyeződések jelenléte, üledék). Mikroszkopikus kenetek a CSF üledékéből centrifugálás után. Három készítményt készítenek: natív - egy csepp steril sóoldatban: natív - egy csepp tintában és egy kenetben a PAS-módszerrel való festéshez, Gram szerint és alcian blue Mowry szerint.

Mikroszkópia gerincvelői folyadék natív és festett készítményekben lehetővé teszi az élesztőgomba sejtjeinek és a gomba micéliumának töredékeinek, vagy gennyes agyhártyagyulladást okozó baktériumoknak (meningococcus, pneumococcus, Haemophilus influenzae stb.) jelenlétének megállapítását. A tetempreparátumban a kapszulagomba kimutatható Cryptococcus neoformans. Ugyanakkor a kapszula világos glóriájával körülvett bimbózó élesztősejtek láthatók a tetem szürke hátterében. A tintakészítmények élesztőformákat is tartalmazhatnak candida albicans kapszulák, anélkül, hogy a sejt körül világos halo lenne.

cr. neoformánsok alciánkék festéssel is kimutatható (Mowry szerint). A festődés a tokszerű heteropoliszacharidok szelektív kimutatása miatt következik be Cr.neoformans. Ha egy Gram-festett készítményben bakteriális flórát észlelnek, a liquor további vizsgálatát a megfelelő bakteriológiai módszerek szerint végezzük. Az üledék mikroszkópos vizsgálata után a folyadékot 3 csésze frissen készített, szárított cefre-agarra vagy Sabouraud-agarra, valamint folyékony cefre vagy Sabouraud folyékony táptalajra oltjuk. Az 1. és 2. lemez tápagar felületére 2-3 csepp folyékony üledéket csepegtetünk és spatulával óvatosan dörzsöljük, a 3. lemez agar felületére pedig 1 cseppet oltunk a fonalas gombák kimutatására. A maradék folyadékot 5 ml folyékony sörcefre vagy Sabouraud agarra öntjük. A növények inkubálása két hőmérsékleti körülmény között történik: 1. csésze - +37 o C-on, valamint 2. és 3. csésze, valamint folyékony táptalajra vetés - +28 o C - +30 o C. A növényeket +37 o C hőmérsékleten 2. és 5. napon, valamint 28 - 30. C körül nézték - a növekedés 4., 7., 10. napján. Ha az 5. napon +37 °C-os hőmérsékleten és a 10. napon 28-30 °C-os hőmérsékleten nem tapasztalható növekedés, az oltást folyékony táptalajból végezzük sörcefrével vagy Sabouraud-agarral ellátott lemezeken. Élesztőflóra növekedésének hiányában a folyadék tenyésztésének eredményét negatívként rögzítjük.

KIBOCSÁTHATÓ FISTULÁK. A vizsgálat az anyag mikroszkópos vizsgálatával kezdődik natív vagy festett készítményekben. Ezután az anyagot agar táptalajra (sörlé vagy Sabouraud) oltják be, amelyből 2-3 cseppet csepegtetünk a csészére, és spatulával eloszlatjuk az agar felületén. Az oltásokat 48 órán át +37°C-on inkubáljuk.

KIBOCSÁTHATÓ nyálkahártya.

1. A tampont egy kémcsőbe helyezzük 2 ml folyékony táptalajjal (sörlé, Sabouraud-féle táptalaj vagy MPB), és 5-7 percig rázzuk anélkül, hogy a dugót átáztatnánk. 1:10, 1:100 hígításokat készítünk, és mindegyik hígításból 0,1 ml-t beoltunk két sörce-agar-, Sabouraud-agar- vagy MPA-lemezre. A szilárd táptalajra és a folyékony tápközeggel készült kémcsövet tamponnal (dúsítás céljából) +37 C hőmérsékleten inkubáljuk. 48 óra elteltével megszámoljuk a telepek számát és a tamponnal vett élesztősejtek számát. megközelítőleg meghatározott. Ehhez a kifejlett élesztőkolóniák számát megszorozzuk 20-zal, és felhígítjuk. A hígításokból vett lemezeken telepnövekedés hiányában a dúsító táptalajból az egyik lemezen sörcefrét agarral újra beoltjuk.

2. A vetés történhet törlőkendővel, a táptalaj felülete feletti forgatással. Ugyanakkor az élesztőkolóniák számát nem veszik figyelembe, hanem csak a növekedés jelenlétét és intenzitását jegyezzük fel: egyedi telepek, jelentős vagy folyamatos növekedés, a mikrobiota növekedésének hiánya.

VÉR. A vértenyésztéshez szükséges vénás vérmintákat legalább 1:5 arányban dúsító táptalajjal kell hígítani, hogy a vér baktériumölő tulajdonságai ne gátolják a gombák szaporodását. Vessen 5-10 ml friss vért 50-100 ml táptalajba (folyékony Sabouraud 2% glükózzal vagy Kitt-Tarozzi táptalaj regenerálása után). A vetéshez vért vehetünk véralvadásgátlóval (1:10 5%-os nátrium-citrát oldattal). A növényeket 10 napig termesztik +37°C-on, az 5. és 10. napon kontroll vetés mellett. Az üledéket steril pipettával vesszük, amelyből 3 cseppet bakteriológiai hurokkal a cefre-agar felületére Petri-csészékbe csepegtetünk. A magvas poharakat +37 ° C hőmérsékletű termosztátba helyezzük 2-5 napig. Az élesztőflóra növekedése esetén előzetes választ adunk a gomba vérben való jelenlétére, a tenyészetet nemzetségre és fajra határozzuk meg.

A mikoflóra vértenyésztésének egy másik módszerét is leírták (H. Rieth). Ebben az esetben 5-10 ml vér beoltása történik cseppenként. Petri-csészében, steril pipettával 40-50 csepp vért csepegtetünk a sűrű tápközeg felületére, a cseppek között 0,5 cm távolságra. A vetés két Petri-csészén történik, az egyik edényben +37 o C-on, a másikban szobahőmérsékleten 2-5 napig inkubálva.

szervi szövetek DARABAI. Petri-csészében sűrű tápközeg felületén egy vizsgált szövetdarabbal lenyomatot készítenek, majd egy hurkot szitálnak. Ugyanezt a szövetdarabot 50 ml folyékony táptalajba helyezzük (sörlé, Sabouraud táptalaj). A növényeket termosztátban +37 C körüli hőmérsékleten inkubálják 5 napig.

BŐR és köröm pikkelyek. A vetési pikkelyek a mikroszkópos vizsgálat eredményétől függetlenül készülnek. Ehhez a táptalaj kondenzátumában megnedvesített steril mikológiai spatulával a pikkelyeket 2-3 ponton egy ferde sörcefort-agarra helyezett kémcsőbe visszük, a táptalaj felületére szorítva. A vizsgálathoz beérkezett anyag mennyiségétől függően 2-3 kémcsőben történik a vetés. A növényeket termosztátban inkubálják 28-37 C-os hőmérsékleten, legfeljebb 5 napig.

A gyors azonosítási módszereket széles körben alkalmazzák C. albicans. Ez a faj vérszérumon, tojásfehérjén, Eagle táptalajon, 199-es táptalajon, több órán belül (37°C-on 2-4 óra) képes csíratöveket és rövid pseudomycelium szálakat képezni. A gyakorlatban a laboratóriumok humán szérumot használnak (szerológiai reakciók maradványai), ahol 37 °C-on csíracsövek képződnek, majd 24 óra elteltével pszeudomyceliális gubancok. A fajtának C. albicans ez a jelenség az esetek 90%-ában jellemző. Ritkán hajtások képződnek C. tropicalis.

2.3. Patológiás anyag mikroszkópos vizsgálata és vetése penészgombák okozta mikózis gyanúja esetén

A kóros anyag natív és festett készítményekben vizsgálható. A mikrokészítmények készítésére szánt tárgylemezeket és fedőlemezeket alkohol és éter (1:1) keverékében kell tárolni, hogy elkerüljük a levegő mikobiotával való szennyeződését. Használat előtt a tárgylemezeket és fedőlemezeket égő lángja felett sterilizáljuk.

Anyagmikroszkópos vizsgálat

a köpet mikroszkópos vizsgálata. A natív készítmények elkészítéséhez a köpetet steril Petri-csészébe visszük át, és fekete háttér előtt megvizsgáljuk, hogy kis részecskéket (csomókat) észleljünk. A csomók lehetnek gennyesek, gennyes-nyálkás, gennyes-véresek. A csomók mérete 0,3-3 mm átmérőn belül változik, színük lehet szürke, sárgás, zöldes. A natív mikropreparátumok elkészítéséhez az egyes csomókat metszőtűkkel vagy bakteriológiai hurokkal átvisszük egy csepp alkoholba glicerinnel vagy egy csepp 10%-os KOH-oldatba. Fedje le fedőlemezzel, enyhén nyomja meg boncolótűvel és mikroszkóppal alacsony (1:80, 10x okulár és 8x objektív) és magas (1:400, 10x szemlencse és 40x objektív) mikroszkóp nagyításnál.

A lemosásból, váladékból, valamint epéből, vizeletből, gyomornedvből, agy-gerincvelői folyadékból készült készítményeket natív üledékből vagy centrifugálással (1500 fordulat/perc sebességgel 5 percig) nyert üledékből készítik. A csapadékot hurokkal vagy Pasteur-pipettával egy csepp 10%-os KOH-oldatba visszük át egy tárgylemezre, fedjük le fedőlemezzel és vizsgáljuk a mikroszkóp kis és nagy nagyításával.

A festett preparátumok elkészítéséhez a vizsgált csomókat vagy egy csepp üledéket egyenletesen eloszlatjuk egy steril üveglemez felületén boncolótűkkel vagy kisebb tárgylemezzel, amíg vékony kenetet nem kapunk. A kapott kenetet levegőn szárítjuk, metil-alkohollal vagy Nikiforov keverékével (egyenlő arányban 96%-os etil-alkohol és éter) rögzítjük 3-5 percig, vagy háromszori lánggal égő lángon. A rögzített kenetet Gram, PAS módszerrel, fehér kalkofluorral festjük. A megfestett készítményt immerziós mikroszkóp rendszerrel mikroszkóppal vizsgálják (1:900, okulár 10x, objektív 90x).

Vetőanyag

Bármilyen kóros anyag fonalas gombák kimutatására irányuló vizsgálatakor azt sűrű Sabouraud táptalajra vagy sörcefre oltják be penicillin és sztreptomicin (100-200 egység/ml táptalaj) hozzáadásával. A vetés két ismétlésben történik, figyelembe véve a fonalas gombák termesztésének eltérő hőmérsékleti feltételeit (+37 ° C és +28 ° C), mindig az edény közepén 3 ponton. A lappangási idő 4-5 nap.

A köpetet (kiválasztott csomókat) bakteriológiai hurokkal vagy Pasteur-pipettával juttatják a Sabouraud táptalaj vagy sörlé felületére. A Petri-csésze aljának hátoldalán ceruzával jelöljük meg az oltás helyét. A kimagozott Petri-csészéket termosztátba helyezzük fedővel felfelé.

Egy bizonyos inkubációs időszak után megvizsgáljuk a magvas csészéket, és ha spórásodást észlelünk, meghatározzuk a gomba tenyészetét. Sporuláció hiányában a gombát Czapek-féle differenciális táptalajon továbbtenyésztjük további azonosítás céljából.

A hörgők lemosását, a maxilláris üregeket, a váladékot, a vizeletet, a gyomornedvet (natív vagy centrifugálás után) pipettával vesszük és 0,1 ml térfogatban beoltjuk. A székletet 1:10 arányban hígítjuk (1 g széklet és 9 ml folyadék) folyékony Sabouraud tápközegben vagy folyékony, steril izotóniás nátrium-klorid-oldatban, emulgeáljuk, 10 percig ülepítjük, hogy a nagy részecskék kicsapódjanak, és 0,1 ml térfogatú felülúszóval beoltjuk. . A pálcikával vett leszerelhető külső hallójáratot és garatot bevetjük úgy, hogy a tampont mindkét oldalát óvatosan áthúzzuk a táptalaj felületén. Beolthatja a tampont tampont. Ehhez a tampont 10 ml Sabouraud-féle folyékony táptalajba vagy üveggyöngyökkel ellátott folyékony sörlébe helyezik, és 10 percig emulgeálják, majd 0,1 ml tamponmosóanyagot pázsittal (Leshchenko V.M., 1973 szerint) vagy három ponton beoltanak.

A tápközeg felületére bőr- és körömpikkelyeket helyezünk, óvatosan megnyomva.

Az agy-gerincvelői folyadék csapadékát (1500 fordulat/perc sebességgel 5 percig centrifugáljuk) két csésze, egyenként 0,1 ml-es táptalajba oltjuk, majd a maradékot a dúsító táptalajba (folyékony Sabouraud táptalaj vagy folyékony sörlé) oltjuk, majd kémcsövekbe öntjük. 5 ml térfogatú. A beoltott csészéket a szokásos módon inkubáljuk, és a dúsító táptalajra oltott kémcsöveket + 28 C-on 10 napig inkubáljuk.

A micéliumgomba szilárd táptalajon történő szaporodása esetén a tenyészetet ebből az oltásból határozzuk meg, ha nincs szaporodás Sabouraud agaron vagy wort agaron, a gombát a dúsító táptalajból vizsgáljuk. Ennek érdekében a gomba tenyészetét ismét Czapek differenciális sűrű táptalajon szubkultúrázzuk, és tovább azonosítjuk.

A szervszövet darabjából (biopszia, boncolás) sűrű táptalaj felületére lenyomatot készítünk, a vizsgált darab bemetszett oldalával három ponton. Ezzel egyidejűleg a szövetdarabokat 50 ml folyékony tápközegbe (Saburo, sörce) helyezzük.

A vért két-három ismétlésben megvizsgálják gombagyulladás gyanúja miatt. Oltson be 5 vagy 10 ml vért 50 vagy 100 ml Sabouraud-féle folyékony táptalajba, amely 2% glükózt tartalmaz. A növényeket +37 C és +28 C hőmérsékleten termesztik 10 napig. A termények első megtekintésére 5 nap múlva, a másodikra ​​10 nap múlva kerül sor. Az ötödik napon a micélium gomba növekedése figyelhető meg, alul filccsomó és felületi film formájában. A micéliumot a Czapek-féle differenciál táptalajra újra beoltjuk, hogy meghatározzuk a gomba nemzetségét és faját. Ha az 5. napon nem észlelhető a gomba növekedése, a növényeket legfeljebb 10 napig tartják, és növekedés hiányában a vizsgálat eredményeit negatívnak nyilvánítják.

Három ponton történő vetésnél a gomba növekedését két és három ponton diagnosztikailag szignifikánsnak, egy ponton véletlenszerűen határozzuk meg. Szükség esetén lehetőség van újravetésre.

Penészgombák izolált tenyészeteinek azonosítása

A tenyészet izolálása után a fonalas gombákat Czapek-féle differenciáltápközegen tenyésztjük ki az általános és lehetőség szerint a fajok azonosítása céljából.

A diagnosztikai laboratóriumok gyakorlatában általában kulturális és morfológiai azonosítási kritériumokat alkalmaznak: értékelik a gombakultúra agar táptalajon történő növekedésének jellegét (kultúradiagnosztika, makromorfológia), valamint a gomba mikromorfológiáját.

Nehéz esetekben további diagnosztikai módszereket alkalmaznak (enzimatikus aktivitás vizsgálata, egyes penészgombák növekedésének hőmérsékleti jellemzői).

A makromorfológia (kulturális vonások) fogalmába beletartozik a telep szerkezete (bolyhos, filc, bársonyos, pókhálós, gyapjas, rongyos, lisztszerű stb.), felszíne (lapos, hajtogatott, göröngyös, kupola alakú, coremiform, zonális stb.) .), a gombatelep és a szubsztrát pigmentációja (a zöld, kék, lila, fekete, szürke stb. különböző árnyalatai), váladék jelenléte a telep felszínén.

A tenyészetből származó gomba mikromorfológiáját preparátumokkal vizsgáljuk, amelyeket a gomba általános hovatartozásától függően a következőképpen állítunk elő: egy csepp készítmény készítéséhez szükséges folyadékot (alkohol, glicerin és víz egyenlő arányban) csepegtetünk a üvegcsúszda; egy darab micéliumot helyezünk bele, mikológiai spatulával kivágjuk a kolóniából háromszög alakban a központi és a perifériás részek befogásával, a levágott darabot két boncolótűvel kiegyenesítjük, ügyelve arra, hogy elkerüljük a telep kialakulását. légbuborékok. Egyes esetekben (mukor és rhizopus) a készítmény elkészítésekor a micéliumot száraz üveglemezre terítjük, egy csepp folyadékot csepegtetünk rá és fedőlemezzel lefedjük. A preparátumokat mikroszkóp alatt nézzük kis és nagy nagyítással. Tanulmányozzák a szubsztrátot és a légmicéliumot, megjegyzik a válaszfalak (válaszfalak) jelenlétét vagy hiányát, figyelnek a spórák természetére: a konidiofórokra konídiumokkal és a sporangiumokkal a sporangiospórákra.

A konidiofórok szerkezetükben különböznek: az egyszerű, egyspóratartalmú hifáktól az elágazó faszerű képződményekig. A konidioforok egyenként vagy csoportosan helyezkednek el, jelentősen eltérnek a micélium vegetatív hifáitól, színtelenek vagy színesek, felszállóak, felállók, leszállók, kúszóak. Egy cellából és nagyszámú, különböző alakú és méretű cellából állhatnak, amelyek mindegyikének saját neve van. Például az Aspergillus nemzetségben a konidiofor a következő sejtekből áll: szár, hólyagos duzzanat, sterigmák, konídiumok láncai. A Penicillium nemzetségben a konidiofor egyszerű vagy összetett ecsetek formájú, amelyek szintén különféle sejtekből állnak: rami gallyak, metulák, phialides, konídiumláncok.

A Mucor és a Rhizopus penészgombák spórázását endosporangiospórák formájában tartalmazó sporangiumok képezik. A sporangium a sporangiofor végén található. A sporangiumok gömb- vagy körte alakúak, legtöbbször speciális oszloppal, amely a sporangiumban lévő sporangiofor folytatása. A sporangiospórák kerekek, színtelenek vagy színesek.

A penészgombákban lévő konídiumok (spórák) polimorf (hengeres, gömb alakú, ovális, ellipszoid, tojásdad, körte alakú, bot alakú), egysejtűek és többsejtűek, különböző méretűek és színűek, magányosak, láncban vagy fejekben gyűjtve és fürtökbe rendeződnek . A konídiumok felülete lehet sima, érdes, tüskés, szemölcsös, sörtéjű stb.

Dimorf gombák okozta mikózisok kóros anyagának mikroszkópos vizsgálata és vetése

Ezekkel a mikózisokkal kapcsolatban figyelembe kell venni a kórokozók dimorfizmusát.

A primer patogén gombás fertőzések (kokcidioidózis, hisztoplazmózis, paracoccidioidomycosis, észak-amerikai blastomikózis), valamint kromomikózis, sporotrichosis és mycetomák kóros anyaga lehet genny, köpet, fekélyes elváltozások bőrön, nyálkahártyán, vérben, gerincben. biopsziás darabok a gócok vereségéből.

A mikózisok kórokozóinak meghatározásának nehézsége abban rejlik, hogy dimorfizmusuk miatt a kóros anyag mikroszkópos vizsgálata során a gomba szöveti formái, leggyakrabban különböző morfológiájú élesztősejtek vagy endospórákos gömbök tárhatók fel, amelyek teljesen eltérnek a gombáktól. ugyanazon gomba elemei, +28 - +30 °C hőmérsékleten, a szokásos Sabouraud agávén termesztett tenyészetéből extrahálva, a savashoz közelebbi pH-értékkel. Figyelembe kell azonban venni, hogy egyes dimorf gombáknál előfordulhat, hogy a gomba élesztőnövekedési fázisát tenyészetben kapjuk, amely gyakran hasonlít a szöveti formájára, de fehérjében gazdag táptalajon termesztve, gyengén lúgos reakcióval ( pH = 7,6-7,8), 37 o C hőmérsékleten.

A fentiek a gombákra vonatkoznak: Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitisÉs Sporothrix schenckii.

Az itt említett gombák által okozott mikózisok laboratóriumi diagnosztikája a kóros anyagban lévő szöveti formák mikroszkópos vizsgálatán, a kórokozó tenyészetének izolálásán, valamint annak kulturális és morfológiai jellemzők alapján történő azonosításán alapul.

A mikroszkópos vizsgálatot festetlen preparátumokon üveglemezen, csepp 10%-os lúgos lúgoldatban vagy alkohol és glicerin azonos térfogatú keverékében, vagy festett kenetben végezzük (3. táblázat).

A kóros anyag beoltását a fenti táptalajokon Petri-csészékben végezzük bakteriológiai spatulával az általánosan elfogadott módszer szerint.

2.5. Dermatomycosis (keratomycosis és dermatophytosis) patológiás anyag mikroszkópos vizsgálata és vetése.

A vizsgálat tárgya a felszíni mikózisok, amelyek csak az epidermisz keratin rétegét érintik, valamint a bőrt és annak függelékeit (haj, köröm) érintő dermatofiták, amelyek kórokozói nemzetségekhez kapcsolódó gombák. Trichophyton, Microsporum és Epidermophyton.

A laboratóriumi mikológiai vizsgálat ugyanazokat a lépéseket tartalmazza, mint más mikózisok esetében: az anyag mikroszkópos vizsgálata és a vetéskor tiszta tenyészet kinyerése. A megfelelő anyaggyűjtés nagyban befolyásolja a mikroszkópia és a tenyésztés sikerét.

A kóros anyagot a bevétel után a lehető leghamarabb megvizsgálják. Korábban három részre oszlik: mikroszkópiára, tenyésztésre és újravizsgálatra. A kóros anyag mikroszkópos vizsgálata a legegyszerűbb és leggyorsabb módszer a gomba szövetekben való jelenlétének megállapítására. A zúzott anyagot egy tárgylemez közepére helyezzük egy csepp 10-20%-os KOH-oldatba, és alkohollámpa lángja fölött enyhén melegítjük, amíg a csepp széle mentén fedőlemezzel fedő fehéres peremet nem kapunk. és hagyjuk állni 5-10 percig (haj, bőr pikkelyei) és 30-40 percig (köröm) maceráláshoz és megvilágosodáshoz; az anyag melegítés nélkül feldolgozható, ehhez a készítményt 20%-os KOH-oldatban 30-60 percig hagyjuk.

Mikroszkóposan először kis, majd nagy növekedéssel a mikroszkóp alatt.

Kulturális vizsgálat szükséges a kórokozó izolálásához és azonosításához. A beoltott anyagot lehetőleg összetörjük és minimális mennyiségben ferde agarra oltjuk kémcsövekben 2-3 ponton 1-2 cm távolságra.Legalább 2-3 kémcső (haj) és 4-5 kémcső (bőr- és körömpikkelyeket) egy minta anyagával oltjuk be. A dermatofiták elsődleges izolálásához a legjobb, ha standard Sabouraud agar táptalajt használunk, amely 2-4% glükózt vagy sörcefrét tartalmazó agart tartalmaz, amely antibakteriális antibiotikumokat (50 µg/ml penicillin + 50 µg/ml sztreptomicin vagy 200 egység/ml biomicin) és antibakteriális hatású. -penész antibiotikum aktidion (cikloheximid) 0,1-0,5 mg / ml. Az Actidion nem befolyásolja a dermatofiták növekedését, és számos penészgombát, valamint a Candida és Cryptococcus fajokat gátolja.

Az oltásokat 22-30 °C-on (előnyösen 28 °C-on) inkubáljuk. A dermatofita növekedésének megjelenése 4-12 napos inkubáció között figyelhető meg a bevitt anyag szélei mentén lévő vetési pontokon. Ha 30 napon belül nincs növekedés, a tenyésztési eredmények negatívnak minősülnek. Optimális körülmények között számos dermatofita primer tenyészete azonosítható a beoltás után 7-10 nappal, de a tenyészeteket 20-30 napig ellenőrizni kell. Az elsődleges tenyészetek viszonylag lassan nőnek, és ha antibiotikumot nem tartalmazó táptalajt használnak, a dermatofitákat elnyomhatják a gyorsabban növekvő baktériumok vagy penészgombák. Amikor az elsődleges inokulációban növekedés jelenik meg, a telep széléről friss differenciált táptalajra kell szűrni, hogy tiszta tenyészetet kapjunk, amely anyagként szolgál az izolált dermatofiton azonosításához.

2.6. Szerológiai módszerek a mikózisok diagnosztizálására

A szerológiai módszerek értéke főként a következőkben rejlik: a valószínűsíthetően invazív mycosisban szenvedő betegek azonosítása; az allergiás betegségek gombás természetének megerősítése; kockázati csoportok szűrővizsgálata mycosisok kialakulására.

A szerológiai tesztek álpozitív eredménye mycocarria esetén és egészséges gombaantigénekkel érzékeny embereknél lehetséges, immunhiányos tesztek negatívak lehetnek még a folyamatban lévő invazív mycosis hátterében is.

Rutin hagyományos módszerek a mikózisok szerológiai diagnosztizálására
kellő részletességgel leírták /P.N.Kashkin, V.V.Lisin. "Gyakorlati
útmutató az orvosi mikológiához", Medicine, 1983 /. Azonban a közelmúltban
évtizedekben észrevehető elmozdulások történtek a módszertani megközelítésekben / Elinov N.P.,
2001/. Az antigének és antitestek kimutatására javasolt eredeti eljárások
gombasejtek egyes metabolitjai; speciális diagnosztikát hozott létre
készletek („bálnák”), például Pastorex ® Candida, a meghatározáshoz
antigén ismétlődő oligomannóz epitópjainak "latex-agglutinációs" reakciói
szerkezetek / nagyszámú makromolekulán kifejezve
gomba; a Candida mannán antigén meghatározásához, például in
candidaemiás beteg szérumát, a Platelia ® Candida kit használható.
Az első készletet használva az antigén szerkezetek meghatározásának küszöbértéke 2,5 ng / ml, a második, a _____________ módszerrel együtt a meghatározási küszöb. - 0,5 ng/ml.

A mikózisok kórokozói, leggyakrabban különböző klinikai anyagok laboratóriumi vizsgálata során

Vér

• Candida
• Cryptococcus
• A micélium kórokozóit ritkán mutatják ki a vérvizsgálatok, kivéve a Fusarium

gerincvelői folyadék

• Candida
• Cryptococcus

A genny kiürül a tályogokból, fekélyekből stb.

• Candida
• Cryptococcus
• Fusarium
• Aspergillus
• Sporotrix

Légúti váladék (köpet, BAL, hörgőkefe biopszia, transztracheális aspirátum)

• Aspergillus
• Candida
• Cryptococcus
• Mucor
• Scedosporium
• Rhizopus
• Sporotrix

Sebekből levehető, biopsziás anyag

• Aspergillus
• Candida
• Fusarium
• Rhizopus

Egyéb bioszubsztrátok

• Candida
• Cryptococcus

Anyag a mellkasból, a hasüregből; ízületi folyadék

• Aspergillus
• Candida
• Fusarium

üveges test

• Candida
• Aspergillus

IV. A szisztémás mycosisok diagnózisának kritériumai: a végső diagnózis klinikai és laboratóriumi paraméterei

Nyelőcsőgyulladás

• az oesophagoscopia jellegzetes elváltozásainak jelenléte
• a gomba kimutatása a biopsziás anyag termesztése során
• pszeudomicélium jelenléte a festett kenetekben, vagy invazív gombásodás jelei a biopsziás anyagban

Tüdőgyulladás

Tüdőgyulladás miatt Candida spp.

• akut infiltratív változások a tüdő röntgenfelvételén, amelyek egybeesnek a gombás tüdőgyulladás klinikai megnyilvánulásaival
• érzékelés Candida spp. Transthoracalis biopsziából, transzbronchiális biopsziából, tüdőbiopsziás leletekből vagy thoroszkópos irányított biopsziából nyert anyag termesztése során
• pszeudomicélium kimutatása megfelelően festett biopsziás anyagban

Tüdőgyulladás miatt Aspergillus spp., Fusarium spp., Scedosporium apiospermum

• gombás elemek kimutatása szövetekben és pozitív tenyészet
• tartós vagy progresszív tüdőinfiltrátumok, amelyek rezisztensek az antibiotikum-terápiára
• a jelzett kórokozók valamelyikének kimutatása köpet vagy BAL tenyésztése során
• tüdőgyulladás klinikai tünetei (köhögés, légszomj, "pleurális" fájdalom, zihálás, mellhártya dörzsölés)
• jellegzetes változások a tüdő röntgen- vagy CT-vizsgálatán:

Subpleurális infiltratív, göbös, akut szögű vagy barlangos elváltozások

Halo jel a tüdő CT-n

Az infiltratív változások előrehaladása az üregek kialakulásával és a „sarlós” tünet megjelenésével

• más kórokozók hiánya a BAL tenyésztése során, amelyek a tüdőben előforduló elváltozásokat okozhatják

Sinusitis

• Az akut sinusitis klinikai és radiográfiai jellemzői
• a mycosis mikroszkopikus és kulturális jelei az aspirátum vagy biopsziás anyag tanulmányozása során

húgyúti fertőzés

• >1 x 10 cfu/mL a helyesen összegyűjtött vizelet ismételt tenyészetén

gombásodás

• Gombák egyszeri kimutatása vértenyésztés során, amikor a testhőmérséklet 38 ° C-nál magasabb

Akut disszeminált mycosis

• Fungemia a mélyszöveti károsodás kulturális vagy szövettani jeleivel kombinálva (beleértve a bőr alatti szövetet is) vagy a kórokozó azonosítása két normálisan steril bioszubsztrátból

Endophthalmitis

• az endoftalmitis szemészeti tünetei
• a kórokozó azonosítása szemből, vérből vagy más terjedési gócokból

Tályog vagy osteomyelitis

• az osteomyelitis radiográfiás/CT/MRI jelei
• a kórokozó azonosítása az aspirátumban vagy biopsziás anyagban

Agyhártyagyulladás

• CSF-változások meghatározása, gyulladás jelenlétének megerősítése, gombák kimutatása CSF mikroszkóppal
• gombák kimutatása CSF tenyésztéssel vagy antigén kimutatással Cr.neoformans, Candida és Aspergillus a CSF-ben

Krónikus disszeminált (hepatolienalis) candidiasis

Lehetséges

• tartós vagy időszakos láz a neutropeniás periódus lejárta után, amely a máj-, lép- vagy vesekárosodás jellegzetes jeleivel társul

Igazolt

• a fentiek vetéssel kombinálva Candida spp. a vérből a máj-, lép- vagy vesekárosodás jeleinek megjelenése előtt, vagy a candidiasis kulturális, szövettani jeleivel a gócokból származó biopsziás anyagban

V. GOMBÁS FERTŐZÉSEK OKAI

Különféle elvek léteznek a gombás fertőzések és kórokozóik osztályozására. Számunkra gyakorlatilag a legegyszerűbbnek és legcélszerűbbnek tűnik a kórokozó gombák 5 fő csoportra osztani:

1. A felületes mikózisok kórokozói;

2. A dermatomycosis kórokozói;

3. A szubkután mikózisok kórokozói;

4. Mély mikózisok kórokozói (primer patogén mikromicéták, opportunista fertőzések kórokozói).

5. A pszeudomikózisok kórokozói.

* Hangsúlyozandó, hogy az első három csoportba tartozó kórokozók immunszupprimált betegeknél fungemiát és több szervi elváltozást is okozhatnak.

A következő részekben egyetlen séma szerint ismertetjük a mikózisok kórokozóit: az elfogadott nómenklatúra szerinti elnevezését, szinonimák listáját, a táptalajokon található telepek makroszkopikus leírását, valamint a gombás elemek mikroszkópos leírását. mikroszkóp alatt látható natív készítményekben és telepekről. Adatokat közölnek a gombák természetben való elterjedésére és az általuk okozott betegségekre is.

A gombás betegségek laboratóriumi diagnosztikája a gomba kimutatásán, nemzetségének és fajának meghatározásán alapul. Két fő szakaszból áll: mikroszkopikus és kulturális tanulmányokból.

mikroszkópos vizsgálat

A mikroszkópos vizsgálat az első és fontos kapcsolat az előzetes diagnózis megerősítéséhez.

A mikroszkópos vizsgálat sikere nagymértékben függ a kóros anyag helyes gyűjtésétől. Mikroszkópos vizsgálathoz olyan hajat kell kiválasztani, amelyen láthatók a gomba károsodásának jelei (fénytelen, letört, megvastagodott). Megváltozott a megjelenése, a szőrszálakat epiláló csipesszel távolítják el. A mikrospória egyetlen érintett szőrszálának kimutatásához használhat Wood szűrővel ellátott fénycsövet (zöldes-kék fényű).

Az érintett haj kiválasztásakor számos további funkció használható. A mikrospórák által érintett szőrszálak tövénél külsőleg elhelyezkedő spórák szürke burkával rendelkeznek. Krónikus trichophytosisban a pikkelyek vastagságában rövid szürke színű, „vesszők” és „kérdőjelek” formájában ívelt haj, valamint „fekete pontok” (megvastagodott fekete, szájban letört érintett haj) érintettek. a tüsző) találhatók. Infiltratív-gennyes trichophytosis esetén mikroszkópos vizsgálatra az érintett szőrzeten kívül a lézióból származó genny és kéreg is használható.

A bőr mikrospória, trichophytosis és inguinalis redők mycosisos elváltozásairól a pikkelyeket le kell kaparni az elváltozás perifériás zónájából, ahol a gomba nagyobb számban található. A vellusszőrt a bőrpikkelyekkel együtt lekaparják.

A microsporia és a trichophytosis érintett szőrszálak vizsgálatakor fel kell hívni a figyelmet a spórák elhelyezkedésének (a hajon belül vagy kívül) és méretük sajátosságaira. Ezek az adatok bizonyos esetekben lehetővé teszik a diagnózis, a mycosis klinikai formájának és az epidemiológiának a tisztázását.

A láb mycosisának interdigitális formájával a bőr pikkelyeit és a macerált stratum corneum törmelékeit használják a mikroszkópos vizsgálathoz. A mikroszkópos vizsgálathoz szükséges köröm területe az onychomycosis formájától függ. Felületes formában kaparni kell a körömlemez felületéről.

A leggyakrabban előforduló disztális-laterális formánál a körömágyból kaparást alkalmaznak, a lemez alól (subungualis hyperkeratosis) a levágott körömlemez egy részével, megváltozott körömlemezzel. Proximális subungualis formánál speciális módszereket alkalmaznak az anyag felvételére (ablak fúrása fúróval, körömbiopszia).

A láb mycosisának pikkelyes-hiperkeratotikus formájával a pikkelyeket lekaparják a talpfelületről. A láb mycosisának dyshidrotikus formájával a hólyagok fedelét kutatás céljából levágják.

A haj mikroszkópos vizsgálatához szükséges anyag elkészítésének technikája . Egy kis csepp 30%-os KOH-t csepegtetünk egy tárgylemezre, és az érintett hajszálat egy boncolótűvel belehelyezzük. Egy szőrszálas cseppet enyhén hevítünk alkohollámpa lángja fölött, amíg a folyadék felszíne felett gőzök nem jelennek meg, vagy a lúgcsepp széle mentén kristályperem hullik ki. A fedőlemezzel való lefedés után a felesleges lúgot szűrőpapírral távolítjuk el. A gyógyszert először kis, majd nagy (400-as) nagyítással vizsgálják a mikroszkóp alatt.

Bőr és köröm pikkelyek . A mikroszkópos vizsgálathoz vékony köröm pikkelyeket helyezünk egy tárgylemezre csepp 30%-os KOH-ban, és párolgás közben lúg hozzáadásával melegítjük. A lehűtött festetlen készítményt fedőlemezzel lefedjük és mikroszkóppal lefedjük.

A vastag bőr- és körömpikkelyeket centrifugacsőbe helyezzük, és néhány csepp 30%-os KOH-val megtöltjük. A csövet forrásig melegítjük és 20-30 percig állni hagyjuk. A megpuhult anyag egy részét üvegrúddal üveglapra visszük, gyufával addig nyomjuk, amíg „felhő” meg nem jelenik, majd mikroszkóppal.

Genny . Egy csepp gennyet összekeverünk egy csepp glicerinnel kevert alkohollal, és natív készítményben megvizsgáljuk.

Kulturális diagnosztika

Kulturális diagnosztikát végeznek a diagnózis végleges tisztázása és az epidemiológia tisztázása érdekében. Ez magában foglalja a gomba tenyészetének beszerzését, majd mikroszkópos vizsgálatot.

Az érintett hajat, pikkelyeket (bőr és köröm), hólyagokat vagy gennyeket mesterséges táptalajra vetik. A Petri-csészéken óriási telepek megjelenésével képet kaphatunk a kórokozó nemzetségéről (Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton), típusáról (L. canis vagy ferrugineum, T. violaceum, verrucosum vagy gypseum). A gomba nemzetségének és fajának végleges meghatározása csak a kapott tenyészet mikroszkópos vizsgálata alapján lehetséges.

A felületes candidiasis laboratóriumi diagnózisa

Az élesztőszerű gombák laboratóriumi kutatásához friss anyagra van szükség. Mikroszkópos vizsgálatra, a klinikai megnyilvánulásoktól és az elváltozások lokalizációjától függően bőrpelyhek, körmökből származó lehúzódások, a körömhenger alól egy-egy gennycsepp, a szájnyálkahártya és a külső nemi szervek, hüvelyfalak érintett területeiről fehéres plakkok, nyálkahártyáról lehúzható húgyhártya membránok, valamint lemosások az ajkak vörös szegélyéről, a bőr érintett területei nagy és kis redők.

Az elváltozás helyétől és a klinikai megnyilvánulások jellegétől függően a vizsgálathoz szükséges anyagot vattacsomóval, szikével, hurokkal stb. veszik. A bőr- és körömpikkelyeket, a hámtörmeléket és a nyálkahártya-kaparékot előzetesen -30%-os KOH-val kezelve. A kóros anyagot nem festett vagy festett készítményekben vizsgálják.

Az első esetben az anyagot azonos mennyiségű alkohollal és glicerinnel keverjük össze. Gram szerint festve az élesztősejtek és a pszeudomicélium sötétlilának tűnnek, Ziehl-Neelsen szerint kéknek, Romanovsky-Giemsa szerint pedig rózsaszín-lilának tűnnek. Ugyanakkor az élesztősejt jellegzetessége a bimbózás – egy homokóra figura felfedezése. A szájüreg nyálkahártyájából, a nemi szervekből, az ajkak vörös szegélyének bőréből, a száj sarkából, a nagy és kis redők bőréből steril tamponnal történik az anyag felvétele. Az anyag levétele után a tampont egy másik steril csőbe helyezzük folyékony cefrével. Egy tamponnal ellátott kémcsövet küldenek a mikrobiológiai laboratóriumba. A Candida nemzetséghez tartozó élesztőszerű gombák tiszta kultúrájának izolálását az általánosan elfogadott mikrobiológiai módszer szerint végezzük.

A tudósok szerint a világ lakosságának 70%-ának vannak lábgombásodás tünetei. Ezzel a betegséggel az interdigitális redők és a talp bőre szenved. A betegség oka egy gomba, amely eredetileg csak Délkelet-Ázsia és Afrika korlátozott területein fordult elő. Az első világháború, amely a lakosság tömeges vándorlását és az egészségügyi feltételek romlását idézte elő, a betegség elterjedéséhez vezetett az egész világon.

Mi okozza a lábgombát

A betegség fő kórokozója a Trichophyton rubrum. A T. mentagrophytes és az Epidermophyton floccosum károkat okozhat. Sokkal ritkábban a Candida nemzetséghez tartozó gombák és a penészgombák patogén mikrobákká válhatnak.

A betegség legjelentősebb kockázati tényezői:

• cukorbetegség;
• immunhiányos állapot (AIDS);
• lúdtalp;
• a perifériás artériák ateroszklerózisa;
• alsó végtagok varikózisai.

A fertőzés kialakulását elősegítő külső körülmények:

• zárt, nem higroszkópos cipők;
• lábsérülések (tyúkszem, horzsolás);
• sport.

A lábgombásodás tünetei leggyakrabban felnőtt férfiaknál jelentkeznek. A gyerekek ritkán betegek.

A lábgombásodás tünetei

A betegség kialakulásával a bőr hámlása és kiszáradása, viszketés és égés, különösen az interdigitális terekben, fájdalmas repedések jelennek meg az ujjak alatt. Néha a láb mycosisának első tünetei a buborékok, amelyek eróziók kialakulásával törnek fel. A betegség gyakran törölt formában megy végbe, és csak enyhe hámlásként, liszthez hasonlítva nyilvánul meg az ujjak közötti redőkben.

A betegségnek 4 klinikai formája van.

Az interdigitális vagy intertriginális változat a leggyakoribb. Az ujjak közötti bőr kipirosodik, megreped, a felületi réteg nedves lesz, hámlik. Ezek a jelek a talpra is kiterjednek, súlyos viszketéssel és égéssel kísérve. Gyakran bakteriális gyulladással társul.

A laphám-hyperkeratoticus változat a bőr markáns megvastagodásával és repedésével jár. A talp vörös és pelyhes. A sarok területén mély fájdalmas repedések jelennek meg, a viszketés általában nem jellemző. Ez gyakran kétoldali elváltozás, „mokaszin lábnak” is nevezik.

A dyshidrotikus változatot többszörös kis viszkető fájdalmas hólyagok megjelenése kíséri. Összeolvadnak egymással, nagy buborékokat képezve. A hólyagok fedői szétrepednek, fényes, sérülékeny, fájdalmas felületet - eróziót - tárnak fel. A külső megnyilvánulások az ekcémához hasonlítanak.

A mikrobiális gyulladás gyakran társul a lágyéki nyirokcsomók növekedésével, lázzal, lábfájdalmakkal, hányingerrel, fejfájással és a mérgezés egyéb jeleivel. Dyshidrotikus formában gyakran előfordul allergia a gombákkal szemben - gombás ekcéma. Kiütések kísérik a test azon részein, amelyek nem fertőzöttek gombával, például a kézen.

A törölt változat általában észrevétlenül halad előre. A bőr enyhe hámlása kíséri a hüvelykujj és a mutató és/vagy a láb gyűrűs és kisujjai között. A viszketés hiányzik.

Lábgombásodás jelei

A lábak különböző típusú mycosisai lehetnek független betegségek, vagy a test általános gombás fertőzésének részeként fordulhatnak elő. Néha a "két láb - egy kéz" jele van ezen szervek bevonásával. Csatlakozhat az onychomycosishoz - a köröm gombás pusztulása. Néha az inguinalis redők egyidejűleg szenvednek.

A láb mycosisának fő tünetei és kezelése a képen látható:

hámló bőr

A bőr kiszáradása és repedezése

Buborékok és erózió

Diagnosztika

Egy tapasztalt bőrgyógyász már az első vizsgálat során felismeri a lábgombák különféle típusait. A diagnózis megerősítéséhez azonban mikroszkópos vizsgálat szükséges. Ehhez a lézió pikkelyeit használják, spatulával lekaparják és lúgos oldattal kezelik. A kapott anyagot mikroszkóp alatt megvizsgálják, és kimutatják a kórokozókat.

A közvetlen mikroszkópos vizsgálat gyors, olcsó és könnyen elvégezhető, de nem állapítja meg, hogy melyik gomba okozta a betegséget. Ezért az anyagot táptalajra vetik, majd a kapott anyag kultúrtanulmányozása következik. A gomba tenyészetét azonban mikroszkópos kimutatás után csak az esetek 20-6%-ában lehet megszerezni.

A láb mycosisának kezelésének típusai

A gombás betegségek kezelésére szolgáló gyógyszereket bőrgyógyásznak kell felírnia. Általában a láb mycosisának kezelését külső szerek segítségével végzik.

Ennek a betegségnek az egyik hatékony gyógyszere a klotrimazol. Üzletünkben alacsony áron megvásárolhatja. A körömre és bőrre szolgáló krém formájában lévő gyógyszer, a klotrimazol gátolja a gombák szaporodását a hám rétegének vastagságában. Ha az interdigitális ráncok érintettek, a krémet naponta egy hétig, szükség esetén hosszabb ideig a tiszta, száraz lábbőrre kell felvinni.

A bőr súlyos keratinizációja és repedezése esetén először el kell távolítani az elhalt bőrlerakódásokat. Ehhez hámlasztó gyógyszerek alkalmazása szükséges. Például írjon fel szalicilos kenőcsöt, tejsavas vagy karbamidos krémeket. A kérges lerakódások eltávolítása után a krémet naponta 1-2 alkalommal alkalmazzuk.

A dyshidrotikus változatnál az első szakaszban csökkenteni kell a sírást. Ehhez tannint vagy bórsavat tartalmazó krémeket használnak. Súlyos esetekben glükokortikoid hatóanyagokat adnak a kezeléshez. Ezután alkalmazza a Clotrimazole lotiont a szokásos módon.

Törölt formában a lábakat naponta egyszer, 7-10 napon keresztül krémmel kezelik, de a tanfolyam időtartama egyéni, és az orvos határozza meg.

Szisztémás terápia

Hosszan tartó vagy visszatérő lábgomba esetén előfordulhat, hogy szájon át kell szednie a gombaellenes szereket. A gyomor-bél traktusból a véráramba, majd a bőrbe jutnak, ahol elpusztítják a gombákat. Három fő gyógyszert használnak:

• flukonazol;
• itrakonazol;
• terbinafin.

Ezen alapok felvételének időtartama legalább egy hónap. Az ára meglehetősen magas. Ezért a láb mycosisának megelőzése mindig könnyebb és jövedelmezőbb, mint a gyógyítás.

A szisztémás gyógyszereket különösen gyakran írják fel, ha a gomba nemcsak a bőrt, hanem a körmöket is érintette. Ebben az esetben a gyógyszerek felhalmozódnak a körömlemez növekvő részében, és fokozatosan nő az egészséges köröm. A hatás javítása érdekében a köröm műtéti úton teljesen eltávolítható, majd a gomba nélkül helyreállítható.

A körömeltávolítás, a szisztémás és helyi gombaellenes terápia kombinációja különösen gyakran szükséges idős betegeknél. Ebben a betegcsoportban a körmök gyakran lassan nőnek, a láb vérkeringése károsodott, ezért a hatás eléréséhez nagy adag gyógyszer és hosszú kezelés szükséges.

Kezelés népi gyógymódokkal

Csak a hagyományos orvoslás receptjei használata nem segít megszabadulni a gombától. A hagyományos terápia kiegészítése azonban lerövidíti a kezelési folyamatot és felgyorsítja a gyógyulást.

Hasznos minden este 10 percig meleg lábfürdőt végezni, majd törölközővel alaposan áttörölni a lábfejet, különösen a lábujjak között, és bekenni a körmökre és a bőrre Clotrimazole gyógyító krémet. Hasznos fürdő összetevők, amelyek enyhítik a gyulladást és csökkentik a viszketést:

• gyógynövény celandin és orbáncfű;
• bojtorján gyökerek;
• ürömfű;
• eukaliptusz levelek;
• fenyő tűk;
• friss őrlemény főzött őrölt kávéból;
• só;
• reszelt mosószappan, szódabikarbóna, kálium-permanganát és mustárpor keveréke.

Az érintett területeket nyírkátrányral vagy saját készítésű kenőccsel kenjük be 100 gramm vajból, amit összezúzott fej fokhagymával keverünk össze. Hasznos a propolisz is, amivel bekötözhetjük a fájó körmöket.

Hasznos borogatást készíteni természetes gyógymódokból. Először 1-2 órán át állni hagyjuk, és jó toleranciával egy éjszakán át. A következő összetevőket használják:

• sütőtök pép;
• zúzott fekete retek magvak;
• sóval őrölt borsmenta;
• bojtorján- vagy berkenyelevél, sodrófával kissé megpuhítva.

Hatékony az érintett területek kenése egyes növények levével és más természetes gyógymódokkal:

• propolisz alkoholos oldata;
• hagyma vagy fokhagyma lé;
• celandin lé;
• teafa olaj.

Betegségmegelőzés

A mycosis elkerülése vagy kiújulásának megakadályozása érdekében egyszerű, de állandó megelőzésre van szükség:

• nyáron viseljen természetes anyagból készült légáteresztő cipőt;
• úszómedencék, fürdők, nyilvános zuhanyzók látogatásakor viseljen egyedi gumipapucsot;
• ne viseljen valaki más cipőjét, például egy partin;
• csak a saját higiéniai eszközeit használja - olló, habkő, körömreszelő.

Az újbóli fertőzés elkerülése érdekében a talpbetétet és a cipők belső felületét rendszeresen fertőtlenítőszerrel kell kezelni. Egy jól ismert népi recept az ecetesszencia oldata, de éles kellemetlen szaga van.

Az orvosok a Mycospray használatát javasolják, amely nemcsak gombaellenes, hanem antibakteriális hatással is rendelkezik. A Mycospray nemcsak a cipők kezelésére alkalmas, hanem a lábra való felvitelre is, mielőtt nyilvános helyekre látogatna a láb védelme érdekében.

Moszkva és a régiók lakosai webáruházunkban vásárolhatnak gyógyszereket a lábgombásodás kezelésére és megelőzésére. Bizonyítottan hatékonyak és biztonságosak. Használatuk minden olyan ember számára ajánlott, aki nem szeretne lábgombával megfertőződni, vagy gyorsan megszabadulni tőle.

Az invazív mikózisok precíziós diagnosztikája Nem könnyű. Ennek oka nem csak a gombakultúra beszerzésének nehézségei, hanem a vizsgálatok eredményeinek értelmezése is, mivel a gombák, élesztőgombák és micéliumok egyaránt megtelepedhetnek a nyálkahártyán, és szennyezhetik a vizsgált mintákat. Ebben a tekintetben az invazív mycosisok diagnózisa integrált megközelítésen alapul, amely nemcsak a mikológiai (kulturális) és szerológiai (gomba antigén meghatározása) eredményeit tartalmazza, hanem a gombás fertőzés klinikai tüneteit, a segédkutatások adatait is. módszerek (számítógépes vagy mágneses rezonancia képalkotás, ultrahang ).

Európai Amerikai Szövetkezeti Csoport invazív mikózisok tanulmányozására immunhiányos betegeknél az invazív mikózisok diagnózisának kritériumait dolgozták ki. 2001-ben az Antimikrobiális és Kemoterápiás Nemzetközi Konferencián (ICAAC, Chicago) mutatták be, 2002-ben pedig nyomtatásban. Meghatározták a bizonyított, valószínű és lehetséges invazív mycosis kritériumait, melyek alkalmazása javasolt a klinikai és epidemiológiai vizsgálatok során.

Bizonyított invazív mycosis, amelyet fonalas gombák okoznak: gomba micélium kimutatása biopsziás mintákban vagy aspirátumokban szövettani vagy citológiai vizsgálat során, vagy aszeptikus körülmények között, normálisan steril fókuszból vett mintákból tenyészet izolálása, amely a klinikai és radiológiai vizsgálatok eredményei szerint fertőzéssel jár, vizelet és nyálkahártya vizsgálatok kivételével.

Élesztőgombák által okozott bizonyítottan invazív mycosis: élesztősejtek kimutatása (a Candida nemzetséghez tartozó gombák pszeudomyceliumot vagy valódi micéliumot képezhetnek) biopsziás mintákban vagy aspirátumokban, kivéve a nyálkahártyákról vett mintákat, vagy tenyészet izolálása aszeptikus körülmények között, normálisan steril fókuszból vett mintákból, amely a fertőzéssel összefüggő klinikai és radiológiai vizsgálatok eredményei szerint a vizelet-, sinus- és nyálkahártya minták, illetve élesztősejtek vagy pozitív Cryptococcus spp antigén mikroszkópos és specifikus festéssel (tintacseppben, mucikarmin foltban) történő kimutatása kivételével. a cerebrospinális folyadékban.

A fonalas gombák okozta fungemia: gombák hemokultúrájának izolálása, kivéve az Aspergillus spp. és Penicillium spp., beleértve a Penicillium marneffei-t, az izolált kórokozónak megfelelő fertőző folyamat klinikai tüneteivel kombinálva.

Élesztőgombák okozta fungemia: Candida nemzetséghez tartozó gombák vagy más élesztőgombák vértenyészetének izolálása olyan betegeknél, akiknél a kórokozóhoz kapcsolódó fertőzés klinikai tünetei vannak.

Diagnosztikai vizsgálatok sorozata invazív mikózisokra

Vizsgált bioanyag	Jelzések, használt média, érték
Vér	Javallatok: tartós láz (4-5 nap vagy több) a széles spektrumú antibiotikum-terápia hátterében; a láz második "hulláma" az antibiotikum terápia hátterében Vérmintavétel vénából ampullákba aerob baktériumok számára* vagy gombák számára szelektív táptalajban, ismételve (2-3 alkalommal a nap folyamán 1 órás időközzel) Diagnosztikai érték: élesztőgombák izolálása, gondos értelmezés fonalas gombák izolálásakor, kivéve a Fusarium spp.
Vénás katéter	Javallatok: élesztő izolálása a vérből A központi vagy perifériás vénás katétert minden élesztőgomba vérből történő izolálása esetén eltávolítják Mikológiai vizsgálathoz a katéter aszeptikusan eltávolított, 5-6 cm hosszú disztális szegmensét használjuk. Diagnosztikai érték: élesztőgombák izolálása 15 cfu vagy több félkvantitatív vizsgálatban, kvantitatív vizsgálatban - 103 cfu / ml vagy több a katéterrel összefüggő fertőzés vagy a katéter fertőzés diagnózisának megerősítésére
Felső légúti váladék, köpet, légcső- és hörgőtamponok, bronchoalveoláris mosófolyadék	Javallatok: fonalas gombák vagy Cryptococcus neoformans által okozott mikózisok gyanúja; elhúzódó láz széles spektrumú antibiotikum-terápia és neutropenia során Minták mikroszkópos vizsgálata kalkofluor fehérrel (micélium vagy pszeudomicélium kimutatása); beoltás Sabouraud táptalajra; Aspergillus antigén meghatározása bronchoalveoláris mosófolyadékban tüdőgócok jelenlétében, invazív aspergillózisra jellemző Diagnosztikai érték: fonalas gombák vagy Cryptococcus neoformans izolálása
Gerincvelői folyadék	Javallatok: agyhártyagyulladás tünetei; az agyban lévő fókusz (gócok) kimutatása számítógépes vagy mágneses rezonancia képalkotással; "Agyi" tünetek a láz és a neutropenia hátterében Mikroszkópia fehér kalkofluorral, egy csepp tintával; Aspergillus antigén, Cryptococcus meghatározása; beoltás Sabouraud táptalajra Diagnosztikai érték: gombák, élesztőgombák és micéliumok kimutatása; pozitív antigén
Biopsziák, aspirátumok, peritoneális folyadék, pleurális folyadék	Javallatok: az invazív mycosis klinikai és/vagy radiológiai tünetei; láz a széles spektrumú antibiotikumokkal végzett kezelés során. Mikroszkópia fehér kalkofluorral, oltás Sabouraud táptalajon Diagnosztikai érték: gombák kimutatása, élesztő és fonalas

* A gombák vérből történő izolálásának gyakorisága a kezdeti vérmintavétel során mind fiolákban, mind a baktériumtenyésztő tápközeggel, mind a gombák szelekciós tápközegével azonos volt. A vizsgálatot VASTES 9240 bakteriológiai analizátorral végeztük.

Valószínű invazív mycosis a következő kritériumok kombinációjával diagnosztizálják:
egy jel a mikrobiológiai kritériumok kategóriájából;
egy jel a "jelentős" kategóriából vagy kettő a "kevésbé jelentős" fertőző folyamat klinikai tüneteinek csoportjából.

Lehetséges invazív mycosis a következő kritériumok kombinációja alapján diagnosztizálják:
legalább egy invazív mycosis kialakulását kiváltó kockázati tényező jelenléte;
egy jel a mikrobiológiai kritériumok kategóriájából vagy egy jel a "szignifikáns" (kettő a "kevésbé jelentős") klinikai tünetek kategóriájából a fertőző folyamatban.

A " fogalma lehetséges invazív mycosis» nem ajánlott a gombaellenes szerek hatékonyságát vizsgáló klinikai vizsgálatok során használni. Ezt a kifejezést használhatja az empirikus gombaellenes terápia elemzésében, epidemiológiai vizsgálatokban, gyógyszer-ökonómiai tanulmányokban.

Nál nél mikológiai kutatás a steril aspirátumok vagy biopsziás minták nemcsak a gombák tenyészetének izolálását veszik figyelembe, hanem a micélium vagy pszeudomicélium mikroszkópos kimutatását is. Szövettani készítményekben az Aspergillus nehezen különböztethető meg a Fusarium spp., Sceclosporium apiospermum és néhány más fonalas gombától. A differenciáldiagnózishoz immunhisztokémiai vizsgálatot kell végezni aspergillus elleni antitestekkel.

Élesztőgombák izolálása a vérből legalább egy vizsgálatban a „bizonyított” invazív mycosis kategóriájába tartozik, és abszolút indikációja a szisztémás antimikotikumok kinevezésének neutropeniában szenvedő betegeknél. Az élesztőgombák vérből történő kimutatásának gyakorisága még disszeminált candidiasis esetén is alacsony, 35-50%.
Holding ismételt vérkultúrák növeli a pozitív eredmények valószínűségét.

Egyéb értelmezés fonalas gombák vérben történő kimutatása esetén eredményez. A fonalas gombák nagy gyakorisága a Fusarium spp. és 40-60%. Az Aspergillus rendkívül ritkán fordul elő, a legtöbb esetben szennyeződésnek minősül, kivéve az Aspergillus terreust.

Kiválasztás Aspergillus terreus hemoblasztózisos betegek véréből valódi aspergillemiára utalhat, és a fertőzés klinikai tüneteinek jelenlétében ez az antimikotikumok felírásának alapja.

Az invazív mycosis kritériumai

Index	Kritériumok
Az invazív mycosis (makroorganizmus) előfordulását kiváltó tényezők	Neutropénia (< 0,5*109/л в течение 10 дней) Tartós láz több mint 96 órán át széles spektrumú antibiotikumok mellett 38°C feletti vagy 36°C alatti testhőmérséklet és a következő hajlamosító tünetek bármelyike: elhúzódó neutropenia (több mint 10 nap) az elmúlt 60 napban, intenzív immunszuppresszív kezelés az elmúlt 30 napban, bizonyított vagy valószínű invazív mycosis az előző időszakban időszakos neutropenia vagy AIDS A GVHD tüneteinek jelenléte, különösen súlyos lefolyású (II. fokozat) vagy krónikus betegség kiterjedt lefolyása esetén Glükokortikoidok hosszú távú (több mint 3 hét) alkalmazása az elmúlt 60 napban
Mikrobiológiai jelek	Fonalszerű gombák (beleértve az Aspergillus spp., Fusaruim spp., Sceclosporium spp. és Zygomycetes) és Cryptococcus neqformans tenyészetének izolálása köpetből vagy bronchoalveoláris mosófolyadékból Pozitív tenyésztés vagy citológiai vizsgálat (direkt mikroszkópos) eredménye az orrmelléküregek aspirátumaiból származó fonalas gombák kimutatására Fonalszerű gombák vagy Cryptococcus neoformans kimutatása citológiával/direkt mikroszkóppal köpetből vagy bronchoalveoláris mosófolyadékból Pozitív Aspergillus antigén a bronchoalveoláris mosófolyadékban, a cerebrospinális folyadékban és a vérmintákban (legalább kettő) Pozitív cryptococcus antigén a vérmintákban A gombás elemek kimutatása citológiával vagy közvetlen mikroszkóppal normál steril folyadékok mintáiban (pl. Cryptococcus spp. agy-gerincvelői folyadékban) Két pozitív teszteredmény az élesztőtenyészet kimutatására a vizeletben húgyúti katéter hiányában Candida kristályok a vizeletben húgyúti katéter nélkül Candida spp. vértenyészetekből
Klinikai tünetek alsó légutak	Össze kell kapcsolni azzal a hellyel, ahonnan a mikrobiológiai vizsgálathoz mintákat vesznek A következő típusú új tüdőinfiltrátumok bármelyike ​​CT-n: halo jel, félhold jel, üreg konszolidációs területekkel* Alsó légúti fertőzés tünetei (köhögés, mellkasi fájdalom, vérzéscsillapítás, nehézlégzés), pleurális dörzsölés, bármilyen új infiltráció, amely nem szerepel a nagy jelentőségű jellemzők között; mellkasi folyadékgyülem
felső légutak Nagy jelentőségű jelek Kisebb jelentőségű jelek	Invazív fertőzés radiológiai jelei az orrmelléküregekben (a fal eróziója vagy a fertőzés átterjedése a szomszédos struktúrákra, a koponyacsontok kiterjedt pusztulása) Orrfolyás, orrdugulás, orrfekély, orrvérzés, orbitális ödéma, maxilláris fájdalom, fekete nekrotikus fekély vagy kemény szájpad perforáció
központi idegrendszer Nagy jelentőségű jelek Kisebb jelentőségű jelek	A központi idegrendszeri fertőzés gyanúja (mastoiditis vagy más parameningealis fókusz, extraduralis empyema, többszörös elváltozások az agyban vagy a gerincvelőben) Fokális neurológiai tünetek és jelek, beleértve a gócos rohamokat, hemiparézist; tudatzavarok, agyhártya-tünetek, az agy-gerincvelői folyadék biokémiai összetételének és sejtösszetételének megsértése (egyéb kórokozók hiányában tenyésztés és mikroszkópos vizsgálat szerint, tumorsejtek hiányában)

*Hasonló radiológiai képet okozni képes mikroorganizmusok által okozott fertőzés hiányában, beleértve az üregek kialakulását is (Mycobacterium spp., Legionella spp., Nocardia spp.).

Nál nél kimutatás a vérben vagy más élesztőgombák steril bioszubsztrátja esetén szükséges a faj szerinti azonosítás és a gombaellenes szerekkel szembeni érzékenység meghatározása, fonalas (penészes) gombák izolálásakor - csak a fajra történő azonosítás, az érzékenység nincs meghatározva.

A klinikai gyakorlat a fonalas gombák érzékenységét nem vizsgálják az ilyen gombák antimikotikumokkal szembeni érzékenységének meghatározására vonatkozó szabványok tökéletlensége miatt. Ezen túlmenően csak egy tanulmány mutatott ki összefüggést az Aspergillus spp. és az invazív aspergillosis kezelésének eredményei hemoblasztózisban szenvedő betegeknél. A későbbi vizsgálatok egyike sem talált hasonló eredményt.

Az utóbbi időben izolált jelentések kezdtek megjelenni az A. fumigatus gombák itrakonazollal és vorikonazollal szembeni szerzett rezisztenciájáról.

A gombák azonosítása fajokra, különösen steril lókuszokból nyert, elsősorban az antimikotikus és a megfelelő gombaellenes terápia kiválasztásához szükséges. Így a Candida krusei rezisztens a flukonazolra, és kevésbé érzékeny az amfotericin B-re, mint más élesztőfajták; Aspergillus terreus, Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii), Trichosporon beigelii, Scopulariopsis spp. rezisztens az amfotericin B-re; A mucorales rezisztens az itrakonazolra, a vorikonazolra, a Candida glabrata dózisfüggő érzékenységet mutat a flukonazolra, és ha ilyen típusú gombát, akár érzékeny törzseket is izolálnak, a flukonazol adagját emelni kell (felnőtteknek 400 mg helyett 800 mg-ot írnak fel) ; A Candida lusitaniae rezisztens az amfotericin B-re.

A gombák azonosítása fajokra kórházi epidemiológiai elemzéshez is fontos - a fertőzés kitörésének kórokozóinak és lehetőség szerint a fertőzés forrásának meghatározásához. Olyan ritka gombák, mint a C. lusitaniae, C. krusei, C. lipolytica által okozott fertőzések kitöréseit írják le.

Alapján gombák fajmeghatározása invazív mycosis vagy a nyálkahártya gombás kolonizációja feltételezhető. Például az Aspergillus niger lényegesen kisebb valószínűséggel okoz invazív aspergillózist akut leukémiában szenvedő betegeknél, mint az Aspergillus fumigatus. Az Aspergillus niger izolálását a bronchoalveoláris mosófolyadékból leggyakrabban a légutak kolonizációjának, a köpetből pedig a levegőből származó szennyeződésnek tekintik, és további vizsgálatokra van szükség az invazív aspergillózis diagnózisának megerősítéséhez.

Alapján fonalas gombák izolálása köpetből, bronchoalveoláris folyadékból, az orrmelléküregek aspirátumából csak invazív mycosis feltételezhető, nem számítva a „bizonyított” kategóriába. Mindazonáltal allogén csontvelő kezelésben részesülő neutropeniás betegek köpetében az Aspergillus, különösen az Aspergillus fumigatus vagy Aspergillus flavus kimutatását mindig figyelembe kell venni. Ehhez ismételt mikológiai vizsgálatra és a tüdő számítógépes tomográfiájára van szükség. Tehát neutropenia esetén az invazív aspergillózis kimutatásának valószínűsége pozitív Aspergillus spp. tenyészet esetén. a köpetben 80%.

Kiválasztás Cryptococcus neoformans immunhiányos betegeknél a légutakból (kimosások, öblítés) diagnosztikailag jelentős. Ha immunhiányos betegek légúti folyadékaiból (légcső-, hörgőmosás, bronchoalveolaris mosás) nem kötelező az élesztőgombák azonosítása, akkor ezekből a mintákból Cryptococcus neoformans kimutatására szűrés szükséges.

Candida kimutatása a vizeletben neutropeniában és lázban szenvedő betegeknél általában a disszeminált candida fertőzés megnyilvánulásának tekintik.

Időben diagnosztika invazív sikeresen alkalmaznak egy kereskedelmi tesztet az Aspergillus spp. gombák specifikus antigénjének keringésének kimutatására. galaktomann (a gomba sejtfalának vízben oldódó poliszacharid komponense).

Galactomann két módszerrel határozható meg: latex agglutináció (Pastorex Aspergillus, BioRAD) és enzim immunoassay (Platelia Aspergillus, BioRAD).

előny enzim immunoassay egy alacsonyabb érzékenységi küszöb a galaktomann szintjének meghatározásához a vérben - 1 ng / ml vagy kevesebb, és latex agglutináció alkalmazásával - 15 ng / ml. Diagnosztikai érték a galaktomann meghatározása a vérben (legalább 2 minta), a cerebrospinális folyadékban, a bronchoalveoláris mosásban. Az enzim immunoassay módszer szenzitivitása 90% körüli, specificitása 90-99%, allogén csontvelő-recipienseknél ezek a számok alacsonyabbak, 60-70%, illetve 80-90%-kal egyenlők a profilaktikus alkalmazása miatt. gombaellenes szerek (az antimikotikumok csökkentik a galaktomann küszöbszintjét).

Az esetek 40%-ában észlelés galactomann a vérben megelőzve az invazív aspergillózis megnyilvánulásait, a tüdő számítógépes vizsgálata alapján, és 70%-ban megelőzve a fertőzés klinikai tüneteit.

Az antigén kimutatási teszt diagnosztikus értéke Aspergillus van abban az esetben, ha a vizsgálatot ismételten elvégzik. Az Aspergillus antigén meghatározását a vérben lázzal kell elvégezni a széles spektrumú antibiotikumokkal végzett kezelés során a neutropeniában szenvedő betegeknél hetente kétszer; tüdőgyulladás esetén, amely az antibiotikum-terápia hátterében jelentkezik vagy fennáll; gócok észlelésekor a tüdőszövetben (számítógépes tomográfia).